DE2522478C3

DE2522478C3 - Aerobe Kultivierung eines Mikroorganismus

Info

Publication number: DE2522478C3
Application number: DE2522478A
Authority: DE
Inventors: Vladimir Lausanne Kalina (Schweiz)
Original assignee: Societe dAssistance Technique pour Produits Nestle SA
Current assignee: Nestec SA
Priority date: 1974-05-28
Filing date: 1975-05-21
Publication date: 1979-10-11
Also published as: US4001090A; FR2273062B1; JPS5749192B2; NO142754C; SE430790B; DE2522478B2; AU8138875A; IN140682B; NL7506280A; DK141534B; NO142754B; JPS5126279A; IT1038544B; MY7800273A; LU72578A1; ES437954A1; BR7503342A; DE2522478A1; CA1042823A; NL186099B

Description

Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur aeroben Kultivierung eines Mikroorganismus in einem v> flüssigen Nährmedium, welches mindestens eine durch den Mikroorganismus assimilierbare Kohlcnstoffquelle enthält, bei welchem eine Kulturbouillon, die aus, dem flüssigen Nährmedium und einer Zellmasse des Mikroorganismus besteht, /wischen einem niedrigeren und to einem höheren Niveau unter der Wirkung von aufsteigenden saiierstoffhaltigen Gasblasen oder Sauerstoffgasblascn im Kreislauf geführt und die Kulturbouillon iHJÜerhalb der Fermentationszone gekühlt wird.

Die Erfindung bezieht sich weiterhin auf eine für ein fi^r> solches Verfahren geeignete Vorrichtung.

Die Kultivierung von aeroben Mikroorganismen bis /Li einer hohen Ausbeute, insbesondere auf Erdölfraktionen oder auf von Erdöl abgeleiteten Substraten, die kaum Sauerstoff enthalten, erfordert eine sehr hohe Sauerstoffübertragung, die im industriellen Maßstab in Fermentatoren, welche aus bekannten Rührbottichen oder bekannten Zirkulationstürmen bestehen, praktisch nicht erreicht werden kann. Mit dem Ausdruck Kultivierung bis zu einer hohen Ausbeute« soll hier eine Kultivierung verstanden werden, die die He-stellung von ca. 10 bis 20 g Bakterien oder Hefen/I Kulturbouillon/st gestattet, was beispielsweise im Falle von Substraten der Formel C_nHi_n +. 2 oder C_nH_{2n r} iOH eine Sauerstoffübertragung von wesentlich mehr als 500 mMol O₂/l/st erfordert Eine große Sauerstoffübertragung erfordert aber auch eine große Kohlendioxid-Übertragung. Darüberhinaus soll die Größe dieser beiden Übertragungen keine Inhibierung aufgrund zu großer Sauerstoff- und Kohlendioxidpartialdrücke im Gas, welches mit der Kulturbouillon kontaktiert wird oder in der Kulturbouillon zirkuliert, verursachen.

Zwar ist es möglich, die Sauerstoffübertragung in einem üblichen aus einem Rührbottich bestehenden Fermentator dadurch zu erhöhen, daß man eine mit Sauerstoff angereicherte Luft verwendet, jedoch kann eine Erhöhung der Evakuierung des während der Fermentation gebildeten Kohlendioxids nur durch eine beträchtliche Verstärkung der Belüftung erreicht werden. Es ist jedoch nicht möglich, die Luftzufuhr in einem üblichen aus einem Rührbottich bestehenden Fermentator unbeschränkt zu steigern, da man bald einen Grenzwert überschreitet, jenseits dessen eine Kontrolle des gebildeten Schaums nicht mehr sichergestellt werden kann. In dieser Hinsicht ist die Situation bei einem aus einem Zirkulationsturm bestehenden Fermentator, der oben mit einer wirksamen Abtrennvorrichtung ausgerüstet ist, günstiger, weil man nämlich die zumindest teilweise entgaste Flüssigkeit zur Unterseite des Turms zurückführen kann. Wenn man jedoch versucht, die Belüftung zu steigern, um die für eine Kultivierung bis zu einer hoh^i Ausbeute nötige Sauerstoffübertragung zu erzielen, so trifft man auch hier bald an eine Grenze, weil sich bevorzugte Wege für die Gasblasen in einer unzureichend gerührten Bouillon ausbilden. Die Erhöhung der Geschwindigkeit des Gases im Verhältnis zur Nährbouillon führt also nicht zur Wirkung einer Verbesserung der Sauerstoffübertragung, sondern zu einer Inhibierung aufgrund der so erzeugten Gradienten und stellt schließlich nur mehr eine Energieverw.ndung dar. Es ist möglich, die Situation dadurch zu verbessern, daß man Hindernisse, wie z. B. Leitbleche, in den Weg des aufsteigenden Gases einbaut, aber nur in dem Maße, wie diese Hindernisse ihrerseits nicht starke Gradienten des Sauerstoffpartialdrucks hervorrufen, welche im unteren Teil des Turms eine inhibierende Druckzone erzeugen.

Die Kultivierung von Mikroorganismen bis zu einer hohen Ausbeute auf Substraten, die arm an Sauerstoff sind, bringt auch beträchtliche Schwierigkeiten hinsichtlich des Wärmeübergangs mit sich. Es soll hier darauf hingewiesen werden, daß beispielsweise bei einem Verfahren, bei welchem die Fcrmentationswärme 8000 kcal/kg gebildeter Zellen überschreitet, bei einer Bildungsgeschwindigkeit von 15 g/l/st die Temperaturerhöhung des Mediums 2°C/min überschreitet, wenn keine Kühlung angewendet wird. Es ist deshalb wesentlich, eine wirksame Kühlung vorzusehen. Eine auf einem Wärmeaustauscher basierende Kühlvorrichtung im Inneren der Fermentationszone ist bei einer Kultivierung bis zu einer hohen Ausbeute nicht

anzuraten, und zwar wegen der unerwünschten Hindernisse, welche die Kühlflächen abgeben, die zur Aufreehterhaltung einer Fermentationstemperatur in der Größenordnung von 30—40°C erforderlich sind. Es ist deshalb nötig, eine Kühlvorrichtung außerhalb der Fermentationszone vorzusehen. Jedoch erfordert die Aufrechterhaltung niedriger Temperaturgradienten mii einer solchen Vorrichtung eine hohe Zirkulationsgeschwindigkeit eier Flüssigkeit Eine solche Geschwindigkeit kann aber in einem aus einem bekannten Zirkulationsturm bestehenden Fermentator nur auf Kosten einer Verringerung der Sauerstoffübertragung erreicht werden, was abc dem gewünschten Tiel eines maximalen Wachstums entgegensteht.

Eine wesentlich raschere Kultivierung eines Mikroorganismus kann bei einem Verfahren der eingangs beschriebenen Art, das aus der älteren jedoch nicht veröffentlichten DE-OS 16 42 517 bekannt ist, erreicht werden. Bei diesem Verfahren erfolgt die Kultivierung in einem geschlossenen, in einer vertikalen Ebene liegenden Kreislauf, wobei eine Zirkulation der Kulturbouillon dadurch erreicht wird, daß an einem aufsteigendem Ast unten sauerstoffhaltiges Gas eingedrückt wird. Die Kühlung erfolgt dabei im Kreislauf außerhalb der Fermentationszone. 2=>

Es hat sich aber gezeigt, daß auch hier durch das Eindrücken von Gas nicht die erwünschte hohe Aufnahmegeschwindigkeit von Sauerstoff und Abgabegeschwindigkeit von Kohlendioxid erreicht werden kann. w

Zur Lösung dieses Problems wird gemäß der Erfindung vorgeschlagen, bei einem Verfahren der eingangs bezeichneten Art so vorzugehen, daß die Bouillon in einer Fermentationszone, welche sich, ausgehend vom niedrigeren Niveau, entlang eines J5 aufsteigenden Astes des Kreislaufs erstreckt, zusätzlich zur Wirkung der Gasblasen einer nach oben gerichteten mechanischen Kraft und einer in horizontaler Ebene wirkenden mechanischen Kraft in Form von Förderund Rühreinrichtungen unterworfen wird und daß an der Oberseite der Fermentationszone unterhalb des höheren Niveaus ein Gegendruck ausgeübt wird.

Das erfindungsgemäße Verfahren kann in vorteilhafter Weise kontinuierlich durchgeführt werden. Es ist möglich im absteigenden Ast die Rouillon zumindest teilweise zu entgasen und abzukühlen und mindestens einen Teil der darin mitgeführten Zellen von der Zellmasse abzutrennen, wobei man gleichzeitig die zur Fermentationszone zurückgeführte Bouillon mit Nährstoffen anreichert.

Von den Vorteilen, die durch das erfindungsgemäße Verfahren erhalten werden, sollen insbesondere die gleichförmige Verteilung des Gases in der Flüssigkeit und die damit verbundene erhöhte Belüftung, die Homogenität der Kulturbouillon entlang der Fermenta- « tionszone und damit das Fehlen von inhibierenden Gradienten, die maximale Ausdehnung der Fermentationszone im verfügbaren Raum und die Wirksamkeit des Wärmeübergangs bei einer großen Zirkulationsgeschwindigkeit der Flüssigkeit erwähnt werden, Das w erfindungsgemäße Verfahren gestattet außerdem eine Verringerung des Energiebedarfs für die Übertragung einer gegebenen Sauerstoffmenge je Volumeneinheit belüfteter Flüssigkeit gegenüber dem Energiebedarf, der bei einem bekannten Verfahren besteht. Hingewie- 6^r> sen werden soll auch auf die Anpassungsfähigkeit des crfindiingsgcmäßen Ver/ahrens, die es ermöglicht, das Verfahren an die Verschiedensten Kulturen anzupassen, beispielsweise an die Wachstumsgeschwindigkeit der Mikroorganismen, die während der Fermentation in Freiheit gesetzte Wärme und das erforderliche Partialdruckniveau des Sauerstoffs oder des Kohlendioxids. Durch den Gegendruck, der an der Oberseite der Fermentationszone ausgeübt wird, wird die Sauerstoffübertragung verstärkt. Der Abschnitt des Kreislaufs zwischen der Oberseite der Fermentationszone und dem höheren Niveau ermöglicht dabei durch Entspannung eine Erleichterung der Freisetzung von Gasen.

Die Erfindung betrifft weiterhin eine Vorrichtung zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens, bestehend aus einer geschlossenen Leitung, die aus einem aufsteigenden und einem absteigenden Ast, die an einem höheren und einem niedrigeren Niveau miteinander in Verbindung stehen, zusammengesetzt ist, wobei der aufsteigende Ast als ein eine am niedrigeren Niveau beginnende Fermentationszone definierender und eine Vorrichtung zum Einführen von Gas in ihren unteren Teil besitzender Behälter ausgeh -iet ist und der absteigende Ast eine die Kuiturboir'ion kuhiende Einrichtung aufweist, worin das Kennzeichen darin liegt, daß der Behälter eine Einrichtung zur mechanischen Rührung und Förderung einer Kulturbouillon besitzt und da^ an der Oberseite des Behälters in der vom oberen Ende der Fermentationszone zum höheren Niveau führenden Entspannungsleitung ein Druckventil vorgesehen ist.

Wie es einem Fachmann beim Lesen der obigen Ausführungen klar geworden sein dürfte, eignet sich diese Vorrichtung besonders für die kontinuierliche Behandlung von großen Mengen Bouillon. So kann das Volumen des Fermentationsbehälttrs mehr als 50 m^J und sogar mehr als 100 m¹ betragen, was bei einer Verweilzeit der Bouillon im Behälter in der Größenordnung von 1 min einen Durchsatz von 50 —100 mVmin bedeutet. Unter diesen Bedingungen ist es zur Beschränkung der Dimensionen der Külileinrirhtung und der nötigen Kühlmittelmengen empfehlenswert, einen Wärmeaustauscher vorzusehen, der zwischen eil.im Kompressor und einem Kondensator für das Kühlmittel liegt, d. h. also, einen Verdampfungsaustauscher. Mit solchen Austauschern, welche mit einem Durchsatz in der Größenordnung von 10—20 t Kühlmittel/st betrieben werden können, ist es möglich, das Ausmaß der Austauschoberflächen und damit Chargenverluste zu verringern, da der Temperaturunterschied auf einem für den Wärmeübeigang günstigen Wert gehalten wird. Als Entgasungseinrichtung, d. h. also als Einrichtung, welche die Evakuierung des Stickstoffs der Luft (für den Fall, daß Luft an der Unterseite des Fermentationsbehälters eingeführt wird), des während der fermentation in Freiheit gesetzten Kohlendioxids und des nicht verbrauchten Sauerstoffs gestattet, kann man an der Obeseile des absteigenden Astes einen Oberflächeneffekte ausnutzenden Separator oder eir Hydrozyklon vorsehen.

Man kann in den absteigenden Ast eine Einrichtung zur Abtrennung von in der Bouillon mitgeführten Zellenmas^e einbauen, und man kann am unteren Teil des Fernientationsbehälters eine Leitung anschließen. mit welcher Nährstoffe eingeführt werden können. Die Abtrenneinrichtung kann aus einer Abzweigleitung bestehen, durch welche ein Teil der entgasten Bouillon zu einer Einrichtung zur Abtrennung der Zellmasse von der Bouillon geführt wird, worauf die von der Zellmasse befreite Bouillon durch eine Rückführleitung zum absteigenden Ast oder zum Fermentationsbehälter

zurückgeführt werden kann. Es ist günstig, wenn während der Durchführung des Verfahrens die pro Stunde zur Abtrennung der Zellmassc behandelte Bouillonmenge in der Größenordnung der Bouillon menge liegt, die je Minute durch den Fcrmentationsbe- ^r> hälter hindurchgeht. Die Nährstoffe, die durch die Zuführleitung in den Fermentationsbehälter eingeführt werden, um die Stoffe zu ersetzen, welche durch den im Behälter kultivierten Mikroorganismus verbraucht werden, können aus einem Kohlenwasserstoff, einem κι Alkohol oder einem Zucker (Kohlenstoffquelle) und aus Ammoniak oder Harnstoff (Stickstoffqiielle) bestehen.

Die Einrichtung zur mechanischen Förderung der Bouillon im Fermentationsbehälter kann aus mindestens einer sich in einer horizontalen Ebene drehenden π Spirale bestehen, welche die Bouillon nach oben drückt, wodurch der aufsteigende Effekt der Reibung der Blasen verstärkt wird, welche aus der am Boden des Behälters eingepreßten Luft oder dem eingepreßten Sauerstoff gebildet werden. Die mechanische Rühreinrichtung für die Bouillon im Behälter kann aus einer Reihe von rotierenden Flügelrädern oder Schaufelrädern bestehen, die im Abstand übereinander angeordnet sind. Diese Räder können auf der gleichen vertikalen Drehachse sitzen, die von einem Motor angetrieben 2i wird. Da die Rührwirkung dieser Flügelräder in der Bouillon weiterhin Wirbel erzeugt, die dem Aufstieg der Bouillon im Behälter einen gewissen Widerstand entgegensetzen, kann man gegebenenfalls den Flügeln oder Schaufeln oder wenigstens einigen derselben eine in Neigung zur horizontalen Ebene oder eine solche Form geben, daß mindestens einige der Räder die Form einer Spirale aufweisen, so daß sie auf die Bouillon einen Schub nach oben ausüben. Es ist klar, daß jede Kombination von Förder- und Rühreinrichtungen » möglich ist.

Der Fermentationsbehälter erstreckt sich nicht unbedingt über die gesamte Höhe zwischen dem höheren und dem niedrigeren Niveau, er kann sich unter dem höheren Niveau verengen und in eine Leitung übergehen, die bis zum höheren Niveau reicht und dort mit der Oberseite des absteigenden Astes in Verbindung steht. Es ist auch möglich, in jedem Niveau eines Behälters, dessen Höhe die Größenordnung von 8— 10 m reichen kann, einen Druck aufrechtzuerhalten, Ji der nahe bei dem Einführungsdruck der Luft oder des Sauerstoffs zur Unterseite des Behälters minus dem hydrostatischen Druck der belüfteten Bouillonsäule zwischen dem Bcien des Behälters und dem in Betracht gezogenen Niveau liegt. Hierzu kann man, da zur so Erzielung einer ziemlich großen Sauerstottübertragung von wesentlich mehr als 500 mMol O2, beispielsweise mehr als 900 mMol 02/l/st ein Druck von mindestens 3 mehr als 900 mMo! Oj/l/st ein Druck von mindestens 3 bis 3,5 atü in einer Bouillon erforderlich sein kann, nung von 40 VoL-⁰Zo enthält, am Ausgang des Behälters die überschüssige Energie des zugeführten Gases so verwenden, daß sie als Luftpumpe in der Leitung zum höheren Niveau wirkt, wo ein Druck in der Nachbarschaft des atmosphärischen Drucks herrschen kann. Diese Trennung des Sauerstoffübertragungsvorgangs und des Vorgangs der Entspannung des zugeführten Gases ergibt die Möglichkeit jeglichen Chargenverlusts, und zwar insbesondere den, der sich aus der Kühleinrichtung ergibt, zu vermeiden und eine Zirkulation der Bouillon sicherzustellen, wobei in der Fermentationszone ein ausreichend hoher und homogener Druck aufrechterhalten wird, um die gewünschte Sauerstoffübertragung zu erzielen. Ls isl möglich, eine /wangspassage in Form einer Einschnürung, eines Diaphragmas oder einer Reihe von sich teilweise überdeckenden Gittern innerhalb eines Durchgangs vorzusehen, der von der Oberseite des Behälters zur Leitung geht, welche zum oberen Niveau führt.

Die Zeichnung zeigt einen schematischen Vcrtikalschnitt einer Ausführungsform der Vorrichtung für die Durchführung des (;rfindungsgemäDen Verfahrens.

Ein vertikal aufgestellter Metallbehälter 1 definiert eine Fermentationszonc 2. Eine Drehwclle 3 durchquert die Fermentationszonc von unten nach oben, anders ausgedrückt vom niedrigeren Niveau 4 der Vorrichtung zur Oberseite 5 des Behälters. Ein Elektromotor 6 ist unterhalb des Behälters angeordnet und treibt die Welle 3 an. Flügelräder oder Schaufelräder 7,8,9 und 10 sitzen in regelmäßigen Abständen auf der Wciic. jedes Rad, beispielsweise das Rad 8, besteht aus 4 glatten Schaufeln 11. Die Ebene jeder Schaufel ist in gleichem Sinn gegenüber der Vertikalen geneigt, die durch ihr freies Ende und die Welle 3 definiert wird, so daß jede Schaufel gleichzeitig als Rührelement für die Kulturbouillon in der Zone 2 als auch als Förderelement für die Bouillon nach oben wirkt. Eine Gaseinführungseinrichtung 12 ist an der Unterseite des Behälters befestigt und besieht jus einem horizontal angeordneten Ringrohr, welches an der Oberseite kleine Löcher aufweist. Eine Gaszuführleitung 13, deren Ausstoß durch ein Gasregelventil 14 geregelt v-ird, ist dazu bestimmt, dem Rohr 12 das Gas zuzuführen, und zwar mil einem Druck, der für die Einführung zur Unterseite des Behälters 1 erforderlich ist. Ein Druckventil 15, das an der Oberseite des Behälters angesetzt ist, verbindet das obere Ende der Fermentationszone 2 mit einer Entspannungsleitung 16, die zum höheren Niveau 17 der Vorrichtung führt. Dieses Ventil 15 beschränkt den Durchgang der belüfteten Bouillon und verhindert einen Druckabfall, welcher nicht aufgrund der Abnahme der Höhe der Säule der belüfteten Bouillon im Behälter eintritt. Die FnKnanniinuslpitiinp 16 «itplll also ripn nhpren Teil rips aufsteigenden Astfs der Vorrichtung dar. Ihre Höhe wird so gewählt, daß sie gleichzeitig eine Kompensation der Chargenverluste im absteigenden Ast, eine Überwindung der Widerstände, die nicht vollständig im Fermentationsbehälter durch den Fördereffekt von spiralförmigen Flügelrädern ausgeglichen worden sind, und eine Sicherstellung der gewünschten Zirkulationsgeschwindigkeit der Bouillon im geschlossenen Kreislauf gestattet, der durch den aufsteigenden Ast umo den absteigenden Ast der Vorrichtung, welche miteinander am höheren Niveau 17 und am niedrigeren Niveau 4 miteinander verbunden sind, gebildet wird. Als erstes Element des absteigenden Astes ist eine Gastrennvorrichtung 18, hier ein Zyklon, vorgesehen. Eine Evakiiieningsleitiing 28 für in Freiheit gesetztes bzw. während der Fermentation nicht verbrauchtes Gas, zweigt am oberen Teil des Zyklons 18 ab und mündet über ein Austrittsventil 19 zur freien Luft, wobei dieses Ventil dazu dient, die Druckgradienten in der Vorrichtung zu beeinflussen. Der untere Teil des Zyklons 18, der dazu dient, die zumindest teilweise vom Gas befreite Bouillon aufzunehmen, ist mit einer Rückführungsleitung 20 verbunden. Die Bouillon besitzt in der Leitung 20 eine ziemlich hohe Dichte und wirkt deshalb als Luftpumpe in der Leitung 16, in welcher die belüftete und fermentierte Bouillon in Form einer Dispersion fließt, welche unter Druck durch das Druckventil 15 abgegeben wird. Eine Abführleitung 21 für Zellmasse,

welche durch die /.uininc'est teilweise entgaste Bouillon mitgeführt wird, zweigt von der Rückführleitung 20 ab. Die Menge der liouillon. welche /ur Abtrennung der /ellmasse behandelt wird, wird durch ein Rückschlagventil 22 bestimmt, welches ir der Leitung 21 -, eingeschaltet ist. Letztere führt zu ener Lmnchtung zur Abtrennung von Zcllmassc. beispicls a-cisc einer Zentrifuge, die nicht dargestellt ist Kinc Kühleinrichtung 23, hier ein Verdampfungskühler, ist in die Leitung 20, durch welche die liouillon zirkuliert, eingeschaltet. Der πι Zirkulationsweg 24 des Kühlmittels geht über einen Kompressor und einen Kondensator, die hier nicht dargestellt sind. Lin letzter Teil der Rückführleitung 20 führt vom Wärmeaustauscher 2.3 zur Unterseite des lcrmentationshehällers I. In diesem ICH M'zt ein ri

Regelventil 2.5 für die Zirkulationsgeschwindigkeit de Bouillon in der Vorrichtung. 26 stellt eine Zuführleituni für Nährstoffe dar, die in den unteren Teil de l'ermentationsbehiiltcrs mündet. Die Leitung 26 geh durch ein Regelventil 27 hindurch, welches die Zufuh von Nalirmedium regelt, das von einem nicht gezeigtei Mischer herfließt, t'ine Rückführleitung für Bouillon, dii in eier Leitung abgezogen und dann vom Zellenmateria befreit wird, führt genau zu dieser Mischeinrichtung fü Nährstoffe. Dieser zweite geschlossene Kreislauf, ir welchem der Teil der Bouillon zirkuliert, aus welchen kontinuierlich die Zellmasse entnommen wird, schließ sich über den geschlossenen Kreislauf, in welchem dii gesamte Bouillon oder nahezu die gesamte Bouilloi fließt.

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zur aeroben Kultivierung eines Mikroorganismus in einem flüssigen Nährmedium, welches mindestens eine durch den Mikroorganismus assimilierbare Kohlenstoffquelle enthält, bei welchem eine Kulturbouillon, die aus dem flüssigen Nährmedium und einer Zellmasse des Mikroorganismus besteht, zwischen einem niedrigeren und einem höheren Niveau unter der Wirkung von aufsteigenden sauerstoffhaltigen Gasblasen oder Sauerstoffgasblasen im Kreislauf geführt und die Kulturbouillon außerhalb der Fermentationszone gekühlt wird, dadurch gekennzeichnet, daß die Bouillon in einer Fermentationszone, welche sich, ausgehend vom niedrigeren Niveau, entlang eines aufsteigenden Astes des Kreislaufs erstreckt, zusätzlich zur Wirkung der Gasblasen einer nach oben gerichteten mechanischen Kraft und einer in horizontaler Ebene wirkenden mechanischen Kraft in Form von Förder- und Rühreinrichtungen unterworfen wird und daß an der Oberseite der Fermentationszone unterhalb des höheren Niveaus ein Gegendruck ausgeübt wird.

2. Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens nach Anspruch 1, bestehend aus einer geschlossenen Leitung, die aus einem aufsteigenden und einem absteigenden Ast, die an einem höheren und einem niedrigeren Niveau miteinander in Verbindung stehen, zusammengesetzt ist, wobei der aufsteigende Ast ais eine am niedrigeren Niveau beginnende Fermentatii. iszone definierender und eine Vorrich tung zum Einführen von Ga^r in ihren unteren Teil besitzender Behälter ausgebildet ist und der absteigende Ast eine die Kul';;rbouillon kühlende Einrichtung aufweist, dadurch gekennzeichnet, daß )5 der Behälter (1) eine Einrichtung (6—11) zur mechanischen Rührung und Förderung einer Kulturbouillon besitzt und daß an der Oberseite des Behälters (1) in der vom oberen Ende der Fermentationszone (2) zum höheren Niveau (17) führenden Entspannungsleitung (16) ein Druckventil (15) vorgesehen ist.

3. Vorrichtung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die mechanische Rühr- und Fördereinrichtung aus einer Reihe von Flügelrädern bzw. Schaufelrädern (7—10) gebildet ist, die drehbar im Abstand übereinander angeordnet sind und von denen mindestens eines eine nach oben gerichtete Förderwirkung erzeugend ausgestaltet ist.

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