DE2338932B2 - 9-Substituierte 3-Aminocarbazol-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie deren Verwendung als Indikator für enzymatisch« Nachweisreaktionen - Google Patents

9-Substituierte 3-Aminocarbazol-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie deren Verwendung als Indikator für enzymatisch« Nachweisreaktionen

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Description

20
X Wasserstoff oder ein Halogenatom,
Y ein Sauerstoffatom oder zwei Wasser-
s „offatome,
Ri und R2 ein Wasserstoffatom, είπε niedere Aikylgruppe, die gegebenenfalls durch eine Hydroxygruppe substituiert sein kann und η die Zahl 1 oder 2 bedeuten, wobei für den Fall, daß π die Zahl 2 bedeutet, X, Y, Ri und R2 nicht gleichzeitig ein Wasserstoffatom bedeuten können,
sowie deren Salze mit organischen und anorganischen Säuren.
2. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen jo nach Ansprutii 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Wr.ise ent· .eder
a) eine Verbindung der aiigem; nen Formel II
J5
40
in welcher X die oben angegebene Bedeutung hat,
mit einer Verbindung der allgemeinen Formel III
Z-(CH2)„-C
Y
R.
R,
(HI)
50
in welcher X, Y, Z und η die oben angegebene Bedeutung haben,
mit einer Verbindung der allgemeinen Formel V Λ
Η—Ν
4
\
10
15 in welcher Ri und R2 die oben angegebene Bedeutung haben, umsetzt,
wobei an einer beliebigen Stelle der Reaktionsfolge in 3-Stellung des Carbazolrings eine Nitrogruppe eingeführt wird, die dann zur Aminogruppe reduziert wird, und die so erhaltenen Verbindungen gegebenenfalls mit organischen oder anorganischen Säuren in Salze überführt
3. Verwendung der Verbindungen nach Anspruch 1 als Indikator für enzymatische Nachweisreaktionen.
Gegenstand der DE-PS 22 05 733 ist das 9-(y-Aminopropyl)-3-amino-carbazoI der Formel
-NH,
in welcher Y, n, Ri und R2 die oben angegebene Bedeutung haben und Z eine reaktive Gruppe darstellt, umsetzt, «
oder
b) eine Verbindung der allgemeinen Formel IV
(IV)
sowie dessen Salze, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie dessen Verwendung ais Indikator für enzymatische Nachweisreaktionen.
Das 9-(y-Aminopropyl)-3-amino-carbazol ist ein geeigneter Indikator für den enzymatischen Glucosenachweis, der zusammen mit anderen Oxidationsindikatoren, insbesondere mit o-ToIidin, in weiten Grenzen temperaturunabhängige und damit reproduzierbare Farbwerte je nach Glucosekonzentration liefert Darüber hinaus wird dieser Indikator durch ständige Bestandteile des Urins wie z. B. Acetessigsäure oder Ascorbinsäure nicht beeinflußt, so daß die Testpapiere mit diesem Indikator ein gutes Harndiagnostikum sind.
Es wurde gefunden, daß auch Substanzen der allgemeinen Formel I
NH,
in welcher
Wasserstoff oder ein Halogenatom,
ein Sauerstoffatom oder zwei Wasserstoffatome,
Ri und R.2 ein Wasserstoffatom, eine niedere Alkylgruppe, die gegebenenfalls durch eine Hydroxygruppe substituiert sein kann und η die Zahlen 1 oder 2 bedeuten, wobei für den Fall, daß π die Zahl 2 bedeutet, X, Y, Ri und R2 nicht gleichzeitig ein Wasserstoffatom bedeuten können,
sowie deren Salze mit organischen und anorganischen Säuren für Teststreifen zur Glucosebestimmung hervorragend geeignet sind.
Es werden mit den erfindungsgemäßen Indikatoren Testpapiere erhalten, die im Test eine wesentlich bessere Farbabstufung zeigen als Teststreifen mit o-Tolidin als Indikator, wap. zur schnellen und exakten Auswertung der Ergebnisse von erheblichem Vorteil ist. Ferner reagieren die mit o-Tolidin getränkten Teststreifen in Reduktionsmittel enthaltendem Urin wesentlich schwächer als in Urin, der keine Reduktionsmittel enthält, während bei Teststreifen mit den erfindungsgemäßen Indikatoren diese Schwächung nicht vesentKch auftritt
Die erfindungsgemäßen Indikatoren können auch zusammen mit o-Tolidin angewendet werden, ohne daß daraus eine größere Störanfälligkeit der Testpapiere resultieren würde. Diese Kombination führt manchmal zu besseren Farbabstufungen. Bei der Bestimmung von Glucose im Blut oder Serum erhält man dann je nach dem verwendeten Indikator Γ gelbe bis rote Färbungen (bei niedrigem Glucosegehalt); bei höheren Glucosegehalten tritt die blaue bis grüne Farbe des o-Tolidin-Radikals auf. Ein weiterer Vorteil der erfindungsgemäßen Indikatoren ist darin zu sehen, daß sie in Teststreifen, in denen sie zusammen mit o-Tolidin verwendet werden, nahezu temperaturunabhängige Farbwerte liefern, was eine exakte Testauswertung gewährleistet (vgl. Fig. 1). Wird anstelle des erfindungsgemäßen Indikators 3-Amino-9-äthylcarbazol verwendet, so erweisen sich die erhaltenen Farbwerte als sehr stark temperaturabhängig-
Außer den bei Teststreifen üblichen Phosphat- und Zitrat-Puffern kommen auch weniger gebräuchliche Puffer, wie z. B. 3,3-Dimethyl-glutarat, Mellithat und Äthylendiamintetraessigsäure sowie die sogenannten Good-Puffcr in Frage, sofern sie h;i pH-Bereich von 4,5 — 7 wirksam sind.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel I sind neu und werden in an sich bekannter Weise dadurch hergestellt, daß man
a) eine Verbindung der allgemeinen Formel II
(H)
in welcher X die oben angegebene Bedeutung hat, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel III
Z-(CH2Jn-C-N
Y R2
in welcher Y, n, R ι und R2 die oben angegebene
(III)
Bedeutung haben und Z eine reaktive Gruppe darstellt, umsetzt,
oder
b) eine Verbindung der allgemeinen Formel IV
(IVl
in welcher X, Y, Z und π die oben angegebene Bedeutung haben,
mit einer Verbindung der allgemp-nen Formel V
H-N
in welcher Ri und Rj die oben angegebene K) Bedeutung haben, umsetzt,
wobei an einer beliebigen Stelle der Reaktionsfolge in 3-Slellung des Carbazolrings eine Nitrogruppe eingeführt wird, die dann zur Arninogruppe reduziert wird, und die so erhaltenen Verbindungen gegebenenfalls mit organischen oder anorganischen Säuren in Salze überführt.
Als Halogenatome kommen Fluor, Chlor, Brom und Jod in Frage, bevorzugt jedoch Chlor.
Die niederen Alkylgruppen enthalten 1—4 Kohlenstoffatome.
Die Umsetzung der Verbindungen der allgemeinen Formel II mit Verbindungen der allgemeinen Formel III erfolgt in einem inerten Lösungsmittel, v. ie z. B. Toluol, in Gegenwart starker Basen (z. B. Natriumamid). Bei der Umsetzung der Verbindungen der allgemeinen Formel V werden letztere zweckmäßig im Überschuß eingesetzt, so daß die Verwendung von Lösungsmitteln überflüssig wird.
Reaktive Gruppen Z sind Halogenide, insbesondere Chloride und Bromide, sowie Alkylsulfonate, Tosylate, Brosylate bzw. niedere Alkoxygruppen mit 1-3 Kohlenstoffatomen.
Die an einer beliebigen Stelle der Rep.ktionsfolge durchzuführende Nitrierung wird mit üblichen Nitrierungsmitteln vorteilhaft in Eisessig und Salpetersäure bewirkt. Die Nitrogruppe kann dann katalytisch, beispielsweise mit Raney-Nickel, zur Aminogruppe reduziert werden.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel I werden im allgemeinen mit Säuren in einfache oder Doppelsalze überführt.
Als Säuren kommen beispielsweise in Frage: Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Bromwasserstoffsäu-
br re, Borsäure, Essigsäure, Oxalsäure, Milchsäure, Zitronensäure, Äpfelsäure, Benzoesäure, Malonsäure, Maleinsäure, Bernsteinsäure, Buttersäure oder Propionsäure.
Die folgenden Beispiele sollen zur weiteren Erläuterung der Erfindung dienen.
Beispiel I
9-(Carbamidomethyl)-3-aminocarbazol
29,83 g (0,1 Mol) 9-(Carbäthoxymethyl)-3-nitrocarbazol werden in 375 ml 6n-methanolischem Ammoniak in Gegenwart von 10 ml Raney-Nickel vier Stunden bei jO°C unter 10 Atm. mit Wasserstoff hydriert. Nach Absaugen vom Katalysator und Einengen im Vakuum erhält man 27,3 g hellbraune Kristalle. Nach dreimaligem Umkristallisieren aus Isopropanol werden 8,23 g (34,3% d. Th.) reines 9-(Carbamidomethyl)-3-aminocarbazol als beigefarbene Kristalle (Schmp. 220-2220C) isoliert; aus den Mutterlaugen können noch weitere Anteile gewonnen werden.
Gesamtausbeule ca. 50% d. Th.
Den als Ausgangsprodukt verwendeten Nitrocarbazolester erhält man wie folgt:
50,6 g (0.2 Mol) 9-(Carbäthoxymethyl)-carbazol (Schmp. 970C) werden in einem mit Rührer, Kühler, Tropftrichter und Thermometer versehenen 500-ml-Dreihalskolben in 200 ml Eisessig gelöst und im Ölbad auf 80° C erwärmt. Danach tropft man unter Rühren bei 800C eine Mischung von 13.2 ml 65%iger Salpetersäure (ca. 0,2 Mol) und 40 ml Eisessig in die essigsaure Lösung des Esters und rührt 30 Minuten nach. Nach Abkühlen auf Zimmertemperatur wird auf 1 Ltr. Wasser gegossen, die gebildeten Kristalle abgesaugt, gut mit Wasser gewaschen und das dunkelgrüne Rohprodukt aus Aceton umkristallisiert. Man erhält 25,8 g(4l,l% d. Th.) 9-(Carbäthoxymethyl)-3-nitrocarbazol als gelbte Kristalle vom Schmp. 1630C. Aus der Mutterlauge kann noch weiteres Produkt isoliert werden.
Beispiel 2
9-(/J-Dimethylaminoäthyl)-3-aminocarbazol
In einer l-Ltr.-Schüttelapparatur werden 25 g (0,0725 Mol) 9-(/J-Dimethylaminoäthyl)-3-nitrocarbazol in 200 mi 4,2n-methanolischem Ammoniak mit ca. 17 g Raney-Nickel drei Stunden 16 Minuten bei 23-250C hydriert. Nach Absaugen vom Katalysator und Waschen mit Methanol erhält man nach Einengen des Filtrats 12.75 g öliges Produkt. Dieses wird in Isopropanol gelöst und tropfenweise unter Eiskühlung mit ätherischer Salzsäure versetzt. Das gebildete Dihydrochlorid wird abgesaugt und bei 60°C im Trockenschrank getrocknet. Man erhält 16,25 g 9-(ß-Dimethylaminoäthyl)-3-aminocarbazol als Dihydrochlorid. Nach Umkristallisieren aus Äthanol isoliert man 12,4 g (503% d. Th.) farblose Kristalle vom Schmp. 248° C (Zers.).
Den als Ausgangsprodukt verwendeten Nitrocarbazolester erhält man wie folgt:
In einem 500-mi-DreihaIskolben mit Rührer, Thermometer, Eisbad und Tropftrichter gibt man 23,7 g (0,1 Mol) 9-(S-Dimethylaminoäthyl)-carbazoI (hergestellt nach O. E i s 1 e b, Ber. dtsch. ehem. Ges. 74, 1433/1941) in 100 ml Eisessig und tropft eine Lösung von 8,28 ml (0,2 Mol) wasserfreier Salpetersäure in 50 ml Eisessig bei 15 - 20° C zu. Es wird noch eine Stunde bei 20 - 25° C nachgerührt, dann auf 500 ml Eiswasser gegossen, die ausgefallenen grünen Kristalle abgesaugt, gut mit Wasser gewaschen und bei 80° C im Trockenschrank getrocknet. Ausbeute 32,4 g (94% d. Th.); Schmp. 190° C (Zers.).
Beispiel 3 9-(0-Diniethylaminoäthyl)-6-chlor-3-aminocarbazol
38 g (0.1 Mol) g-i
trocarbazol werden in I Ltr. Methanol in Gegenwar von 30 ml Raney-Nickel innerhalb drei Stunden be 18-23°C unter Normaldruck hydriert. Nach Aufnahmi der berechneten Menge Wasserstoff wird die Hydrie rung abgebrochen und aufgearbeitet. Das Rohproduk wird in 200 ml Methanol gelöst und unter Kühlung mi 150 ml 6n-ätherischer Salzsäure versetzt, die Fällung des Dihydrochlorids durch Zugabe von Äther vervoll ständigt. Das Salz wird in Wasser gelöst, dreimal untei Erwärmen mit Kohle behandelt und die geklärte Lösung abgesaugt. Nach Einengen des wäßrigen Filtrats wire der Rückstand in Methanol gelöst und das Dihydrochlo rid durch Zugabe von Äther zur Kristallisation gebracht Nach Absaugen und Trocknen erhält man .30.1 ν (80.1 0A d. Th.) 9-(/?-Dimethylaminoäthyl)-6-chlor-3-aminocarba zol als Dihydrochlorid vom Schmp. 280°C (Zers.).
Die als Ausgangssubstanz verwendete Nitroverbin dung wird wie folgt hergestellt:
In einem 500-ml-Dreihalskolben mit Rührer, Kühler Thermometer, Claisenaufsatz, Tropftrichter und Calciumchlorid-Rohr werden 10 g(0,24 Mol) Natriumamid ir 100 ml trockenem Toluol suspendiert, auf 90°C erwärmi und 48 ρ (0.24 Mol) 3-Chlorcarbazol (erhalten durch Umsetzung von 1 Mol Carbazol mit 13 Mol Sulfurylchlorid in Chloroform; Ausbeute: 40% d. Th.] zugegeben und innerhalb 30 Minuten unter Rührer 26,8 g (0,25 Mol) £-Dimethylamin.oäthylchlorid zugetropft und fünf Stunden unter Rückfluß gekocht. Nach dem Erkalten werden vorsichtig 30 ml Wasser zugetropft, die Toluolschicht abgetrennt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Man erhält 65 g braunes öl Nach Destillation im Vakuum erhält man 59,6 g (91,5% d. Th.) 9-(/?-Dimethylaminoäthyl)-6-chlorcarbazol als gelbes öl,Kp.2198-201°C.
54,4 g (0,2 Mol) der erhaltenen Carbazol-Verbindung werden in 250 ml Eisessig gelöst, unter Kühlung bei 5— 10°C innerhalb 50 Minuten eine Lösung von 16,6 ml (0,4 Mol) Salpetersäure (W= 1,51) in 100 ml Eisessig zugetropft. Nach einstündigem Rühren bei 0°C wird die gebildete Nitroverbindung abgesaugt, mit 2 χ 50 ml Äther gewaschen und das Rohprodukt aus einer Mischung Methanol —Wasser (2 :1) oder Aceton— Wasser (1 :0,7) umkristallisiert Man erhält 403 g (53,1% d.Th.) 9-(/?-Dimethylaminoäthyl)-6-chlor-3-nitrocarbazol als gelbe Kristalle vom Schmp. 217° C (Zers.). Aus der Mutterlauge kann noch weil ,res Produkt gewonnen werden.
Beispiel 4
9-(/?-Hydroxyäthylaminocarbonyläthyr)-3-am!nocarbazol
In einen 50-ml-RundkoIben mit Kühler und Heizbad gibt man 2,68 g (0,01 Mol) 9-(ß-CarbomethoxyäthyI)-3-
aminocarbazol und erhitzt mit 20 ml Äthanolamin unter Rückfluß. Danach destilliert man das überschüssige Äthanolamin am Dampfstrahlsauger ab und löst den Rückstand in Methanol. Nach Zugabe von methanolischer Salzsäure werden die gebildeten Kristalle abgesaugt und mit Äther gewaschen. Man erhält 2,44 g (73,2% ATh.) 9-(p-Hydroxyäthylaniinocarbonyiäthyi)-3-aminocarbazol als Hydrochlorid vom Schmp. 217-218°C
Das als Ausgangsprodukt verwendete 3-Aminocarbazol erhält man wie folgt:
In einem I-Ltr.-Dreihalskolben mit Rührer, Kühler, Thermometer und Gaseinleitungsrohr suspendiert man 100 g (0,46 Mol) 9-(/J-Cyanäthyl)-carbazol in 1 Ltr. Methanol und leitet 12 Stunden trockenen Chlorwasserstoff ein, wobei völlige Lösung des Nitrits unter Absc bildung von Ammoniumchlorid eintritt. Dieses wird abgesaugt und das Filtrat mit 500 ml Wasser versetzt. Die ausgefallenen Kristalle werden abgesaugt und mit Wasser chloridfrei gewaschen. Man erhält 105,7 g (92,4% d.Th.) 9-(j9-Carbomethoxyäthyl)-carbazol als farblose Kristalle vom Schmp. 64 — 66°C.
68,25 g (0,27 Mol) des Methylesters werden in einem mit Rührer, Kühler, Thermometer und Tropftrichter versehenen I-Ltr.-Dreihalskolben in 360 ml Eisessig gelöst, worauf man innerhalb 30 Minuten eine Lösung von 22,5 ml 65%iger Salpetersäure in 45 ml Eisessig so
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überschritten wird. Dann wird 30 Minuten bei 20°C nachgerührt und anschließend auf 2 Ltr. Wasser gegossen. Die grünen Kristalle werden abgesaugt, mit Wasser und mit Äther gewaschen. Man erhält 71,65 g (89,2% d. Th.) 9-(JJ-Carbomethoxyäthyl)-3-nitrocarbazol als hellgrüne Kristalle vom Schmp. 125- 126° C.
52 g (0,174 Mol) des erhaltenen Nitroesters werden daraufhin in einer 2-Ltr.-Rührapparatur in 500 ml absolutem Methanol, 1 Ltr. 4n-methanolischem Ammoniak und 30 ml Raney-Nickel vier Stunden 20 Minuten bei 25° C hydriert Man erhält nach Absaugen vom Katalysator, Einengen und Trocknen 45 g Aminoester.
Das Rohprodukt wird aus Isopropanol umkristallisiert. Man erhält 38,6g (82,6% d.Th.) kristallines 9-{J?-Carbomethoxyäthyl)-3-aminocarbazol vom Schmp. 132-134°C.
Beispiel 5
9-(y-Dimethylaminopropyl)-3-aminocarbazoi
Aus Carbazol und y-Dimethylaminopropylchlorid wird analog Beispiel 3 9-{y-Dimethylaminopropyl)-carbazol erhalten. [Ausbeute: 70,5% (d.Th.), gelbliches öl, Kp.n 200-210°C] Die Nitrierung dieser Verbindung ergibt 62,5% d. Th. ockerfarbenes 9-(y-Dimethylaminopropyl)-3nitrocarbazol, Schmp. 196-207°C. Diese Zwischenstufe wird mit Raney-Nickel in Gegenwart von methanolischem Ammoniak bei 25-30° C hydriert und die freie Base in das Dihydrochlorid übergeführt Ausbeute: 76,4% (d. Th.) 9-(y-Dimethylaminopropyl)-3-aminocarbazol als farblose Kristalle vom Schmp. 245° C (Zers.).
Beispiel 6
carbazol
Aus 6-Chlorcarbazol und y-Dimethylaminopropylchlorid wird analog Beispiel 3 9-(y-Dimethylaminopropyl)-6-chlorcarbazol erhalten. [Ausbeute: 74,2% (d-Th.) gelbliches ÖL Kp.5 240-245°C] Die Nitrierung der Verbindung ergibt 67,3% (d-Th.) gelbes 9-(y-DimethyI-aminopropyl)-6-chlor-3-nitrocarbazol vom Schmp. 219°C Die Hydrierung mit Raney-Nickel in Methanol und überführung in das Dihydrochlorid liefert 73,6% (d. Th.) S-ö'-DimethvlanünopropyiJ-e-chlor-S-aminocarbazol als gelbliche Kristalle vom Schmp. 276° C (Zers.).
Beispiel 7 Testpapier zum Nachweis von Glucose im Harn
Filterpapier wird mit einer Lösung folgender Zusammensetzung getränkt und bei 50°C getrocknet.
1,2 m Citratpuffer pH 5 50,0 ml 9-(y-Dimethylaminopropyl)-6-chlor-
3-aminocarbazol-dihydrochlorid 0,75 g
ίο Glucoseoxidase (104 U/mg) 0,25 g
Peroxidase (63 U/mg) 0,05 g
Wasser ad 100,0 ml
Das Testpapier reagiert mit glucosehaltigem Urin mit rotorangen bis schwärzlich roten Farbtönen. Urine verschiedener Herkunft sowie acetessigsäurehaltige Urine der gleichen Glucosekonzentration zeigen im Farbton keine ins Gewicht fallende Abweichung.
Beispiel 8
Verwendet man in der Rezeptur von Beispiel 7 als Indikatoren je 0,02 Mol der folgenden Indikatoren, so erhält man Testpapiere mit praktisch gleichen Eigenschaften und lediglich anderen Reaktionsfarben:
9-(/?-Dimethylaminoäthyl)-6-chlor-3-aminocarbazol-dihydrochlorid (Farbabstufungen von ocker Ober sepia nach schwarz) 9-(/?-Dimethylaminoäthy!)-3-aminocarbazoldihydrochlorid (Farbabstufungen von gelb über sepia nach schwarz)
Beispiel 9
Filterpapier wird mit einer Lösung folgender Zusammensetzung getränkt und bei 50° C getrocknet.
1 m Citratpuffer pH 6 50,0 ml 9-{/?-Dimethylaminoäthyl)-3-amino-
carbazol-di hydrochloric! I1Og
o-Tolidin 0,4 g
Glucoseoxidase (104 U/mg) 0,3 g
Peroxidase (63 U/mg) 0,06 g
Natriumlaurylsulfat 0,1 g
Äthanol 33,0 ml Wasser ad 100,0 ml
Das Testpapier liefert mit glucosehaltigen Urinen Farbabstufungen von gelb über braunoliv nach grün. Urine verschiedener Herkunft sowie acetessigsäurehaltige Urine der gleichen Glucosekonzentration zeigen keine ins Gewicht fallenden Farbabweichungen.
Beispie! 10 Testfilm zum Nachweis von Glucose im Blut
Bestandteile:
Polyvinylacetatpropionatdispersion 45,0 g
l,85%ige Lösung von Natriumalginat 35,0g in 0,5 m Phosphatpuffer vom pH 5,5
Natriumnonylsulfat in 0,5 ml Wasser gelöst 0,75 g
Glucoseoxidase(62,7U/mg)l in 10 ml 0,189g
Peroxidase (68,8 U/mg) j Wasser gelöst 0,235 g
o-Tolidin in 2,5 ml Aceton gelöst 0,600 g
9-i(/8-Hydroxyäthyi)-aminocarbonyiäthyi)j- 0,35 g S-aminocarbazol-hydrochlorid in 2,0 ml Wasser gelöst
Die Bestandteile werden gut gemischt, in einer Schichtdicke von 300 μ auf PVC-Folie ausgestrichen und 35 Minuten bei 60°C getrocknet. Auftropfen von glucosehaltigem Blut und Abwischen desselben nach einer Minute liefert nach weiteren zwei Minuten folgende temperaturunabhängige Reaktionsfarben:
60 mg% Glucose - bräunlich rot 120mg% Glucose - braunrot 18Omg°/o Glucose - dunkeloliv 240 mg% Glucose und mehr — grün mit wachsender Farbtiefe.
Fig. 1 zeigt bei 200C und 35°C mit einem handelsüblichen Remissionsphotometer gemessene Eichkurven.
D π s μ ic ι μ
Testfilme gemäß Beispiel 10, die anstelle von 0,035 g ^(jS-HydroxyäthylJ-arninocarbonyläihylJ-S-arninocarbazol-hydrochlorid 0,025 g 9-(/?-Carbamidomethyl)-3-aminocarbazol (A) oder 0,034 g 9-(/?-Dimethylaminoäthyl)-3-aminocarbazol-dihydrochlorid (B) enthalten, reagieren mit glucosehaltigem Blut in temperaturunabhängiger Reaktion mit folgenden Farben:
mg% Glucose
60
120
180
240 und mehr
bräunlich rot beige
oliv grünlich beige
bräunlich grün gelblich grün
grün mit wachsender Farbtiefe
Beispiel 12
Verwendet man in der Rezeptur von Beispiel 7 als Indikator 0,6 g o-Tolidin, so erhält man Testpapiere, die mit den Urinen verschiedener Herkunft mit grünen Farbtönen verschiedener Stärke reagieren.
In Reduktionsmittel enthaltenden Urinen reagiert dab so erhaltene Testpapier schwächer als in Urinen, in denen keine Reduktionsmittel enthalten sind (z. B. Ascorbinsäure).
Beispiel 13
Testfilme gemäß Beispiel 10, die anstelle von 0,035 g 9-[(ß- Hydroxy ät hy l)-aminocarbonyläthyl]-3-amino-carbazolhydrochlorid 0,022 g 3-Amino-9-äthylcarbazol enthalten, sind stark temperaturabhängig.
Fig. 2 zeigt bei 20"C und 3513C mit einem handelsüblichen Remissionsphotometer gemessene Eichkurven.
Hi uv u 2 Blatt Zeichnungen

Claims (1)

Patentansprüche:
1. 9-Substituierte 3-Aminocarbazol-Derivate der allgemeinen Formel I
NH,
(I)
in welcher
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