DE2237204B2

DE2237204B2 - Verfahren zum nachweis des australien- antigens oder des antikoerpers hierzu in einer blut-testprobe

Info

Publication number: DE2237204B2
Application number: DE19722237204
Authority: DE
Inventors: John Michael Deal Kent Leach (Großbritannien); Ruck, Brian John, Forest Hills, Victoria (Australien)
Original assignee: Pfizer Corp
Current assignee: Pfizer Corp
Priority date: 1971-07-31
Filing date: 1972-07-28
Publication date: 1977-04-07
Also published as: NO135801C; FR2148081B1; BR7205058D0; NL163877B; IE36589L; NO138394B; NO138394C; IL39991A0; FI55408C; DK144988C; AU472607B2; ZA725257B; JPS4829487A; DK144988B; NL7210503A; AU4502072A; NL163877C; FR2148081A1; BE787014A; CH572621A5

Description

Das von BI u m b e r g et al. entdeckte Australien-Antigen (J. Amer. Med. Assoc, 191 [1965] 541; Ann. Int. Med., 66 [1967] 924) ist im Blut eines sehr kleinen Bevölkerungsanteils vorhanden; jedoch ist sein Nachweis durch schnelle und verläßliche Methoden von größter Wichtigkeit, damit die Transfusion von dieses Antigen enthaltenden Blut, die zur sog. Serumhepatitis beim Empfänger führen kann, vermieden wird. Diese Hepatitis, die auch nach langer Inkubationszeit auszubrechen vermag, kann ernsthafte und in einigen Fällen fatale Folgen haben. Es ist weiterhin wichtig, daß man den gegen das Australien-Antigen gerichteten Antikörper bei Menschen oder Tieren nachweisen kann, die sich eventuell mit dem Australien-Anti.gen infiziert oder immunisiert haben.

Es besteht somit ein Bedürfnis für diagnostische Untersuchungsmethoden, die schnell und empfindlich sind, routinemäßig bei einer großen Anzahl von

Blutproben wiederholt werden können, minimale Mengen an diagnostischen Reagenzien verbrauchen und verläßlich sind, d. h, die Untersuchungsmethoden müssen eine Bestimmung des Antigens (oder seines Antikörpers) in jeder Blutprobe (sowohl Vollblut als auch Serum oder Plasma), in der es enthalten ist, gestatten und dürfen gleichzeitig nur eine minimale Anzahl falscher Positivanzeigen erbringen, d. h., Ergebnisse, die fälschlicherweise die Anwesenheit des Antigens (oder des Antikörpers) anzeigen.

Ein diagnostisches Reagenz zum Nachweis agglutinierender Antikörper im Serum von Patienten mit einer Virushepatitis, bestehend aus synthetischen Harzteilchen, die mit dem aus einem Virusisolat bestehenden Antigen überzogen sind, ist aus Medizinische Klinik, Bd. 65, 1970, Heft 27, Seiten 1302-1304 bekannt Der Latex-Agglutinationstest zum Nachweis von Antigenen und Antikörpern ist aus der US-FS 30 88 875 bekannt

Überraschenderweise wurde nun gefunden, daß der Zusatz von normalem Serum die Trefferrate ausgeprägt erhöht

Die Erfindung bezieht sich also auf ein Verfahren zum Nachweis des Australien-Antigens oder des Antikörpers hierzu in einer Blut-Testprobe, bei dem man die Testprobe mi: einem geeigneter, Volumen einer wäßrigen Suspension vermischt, die fein verteilte, synthetische Harzteilchen von im wesentlichen gleichmäßiger Form und Größe, überzogen mit dem gegenüber dem Australien-Antigen spezifischen Antikörper bzw. dem Australien-Antigen selbst enthält, und das Vermischen mindestens 2 Minuten fortsetzt, wobei das Auftreten sichtbarer Agglomerate die Anwesenheit des Antigens bzw. des Antikörpers in der Testprobe anzeigt, und ist dadurch gekennzeichnet, daß man die Testprobe mit normalem Serum in Berührung bringt, das von den gleichen Säugerarten herrührt, von denen auch das zum Überziehen der Harzteilchen verwendete antikörper- oder antigenhaltige Serum stammt

Die Erfindung bezieht sich ferner auf ein Verfahren zum Nachweis des gegen Australien-Antigen gerichteten Antikörpers in einer Blut-Testprobe, bei dem man die Testprobe mit einem Standardvolumen einer gereinigten Lösung oder Suspension des aus Humanblutplasma gewonnenen Australien-Antigens versetzt, anschließend ein geeignetes Volumen einer wäßrigen Suspension aus fein verteilten, synthetischen Harzteilchen von im wesentlichen gleichmäßiger Form und Größe, die mit dem gegenüber dem Australien-Antigen spezifischen Antikörper überzogen sind, hinzufügt und mindestens 2 Minuten mischt, wobei das Nicht-Auftreten von Agglomeraten innerhalb von 10 Minuten die Anwesenheit des Antikörpers in der Testprobe anzeigt, und ist dadurch gekennzeichnet, daß man eine Harzteilchen-Suspcnsion verwendet, welche weiterhin normales Serum enthält, das von den gleichen Säugerarten herrührt, von denen auch das zum Überziehen der Harzteilchen verwendete antikörperhaltige Serum stammt.

Weiterhin bezieht sich die Erfindung auf ein diagnostisches Reagenz zum Nachweis des Australien-Antigens oder des Antikörpers hierzu, im wesentlichen bestehend aus einer wäßrigen Suspension aus fein verteilten, synthetischen Harzteilchen von im wesentlichen gleichmäßiger Form und Größe, die mit dem gegenüber dem Australien-Antigen spezifischen Antikörper bzw. mit dem Australien-Antigen selbst überzogen sind und ist dadurch gekennzeichnet, daß die Suspension auch normales Serum, das von den gleichen Säugerarten herrührt, von denen auch das zum Überziehen der Harzteilchen verwendete antikörper- oder antigenhaltige Serum stammt, enthält

Die Gegenwart von normalem Serum, das von den gleichen Säugerarten gewonnen wird, aus denen auch das den Antikörper oder das Antigen enthaltende Serum erhalten worden ist, verringert betrachtlich die Anzahl der falschen positiven Ergebnisse bei der Bestimmung des Australien-Antigens (oder des Antikörpers) in Blutproben. Vorzugsweise ist in 20 bis 50, z. B. 35, Volumteilen der wäßrigen Suspension der Harzteilchen, die mit dem Antikörper oder dem Antigen überzogen sind, etwa 1 Teil normales Serum enthalten.

Wird z. B. dem diagnostischen Reagenz, das den aus Meerschweinchen-Antiserum erhaltenen Antikörper enthält, kein normales Meerschweinchen-Serum einverleibt, so findet, bei etwa 10 Prozent derjenigen Humanseren, die kein Australien-Antigen enthalten, eine Agglutination der Harzteilchen statt, die den gegen das Australien-Antigen gerichteten Antikörper adsorbiert enthalten. Dies ist vermutlich auf die Anwesenheit von Substanzen in solchen Humanseren zurückzuführen, die mit anderen Verbindungen reagieren, die von dem Meerschweinchcn-Antiserurn herrühren, aus dem der gegen das Australien-Antigen gerichtete Antikörper erhalten worden ist Ist das normale Meerschweinchen-Serum jedoch enthalten, so findet nur bei etwa 1 bis 3 Prozent der Humanseren eine Agglutination der Harzteilchen in Abwesenheit des Australien-Antigens im Serum statt. Dies kann auf Bestandteile im normalen Meerschweinchen-Serum zurückzuführen sein, die mit solchen Substanzen in Humanseren reagieren können und auf diese Weise ihren auslösenden Effekt für die Agglutination der Harzteilchen zu verhindern vermögen.

Das. normale Serum braucht nicht im diagnostischen Reagenz enthalten zu sein, sondern kann auf andere Weise mit der Testprobe in Berührung gebracht werden. Das normale Serum kann z. B. mit der Testprobe vor dem Vermischen mit der Harzteilchen-Suspension vermischt werden. Die Testprobe kann auch unter Verwendung eines Rührers gerührt werden, der mit den Feststoffen aus dem normalen Serum überzogen worden ist, z. B. indem man ihn in das normale Serum eingetaucht und anschließend den Überzug zur Trockne eingedampft hat. Die Testprobe kann auch auf eine Oberfläche aufgebracht werden, die in ähnlicher Weise mit den Feststoffen aus dem normalen Serum überzogen worden ist, 2.. B. auf die Oberfläche einer Glas- oder Kunststoffplatte.

Besteht die Testprobe aus Vollblut, so muß zunächst eine Behandlung zur Auflösung der Zellen und zur Verhinderung der Koagulation erfolgen, bevor die Probe auf die Anwesenheit des Australien-Antigens oder des entsprechenden Antikörpers geprüft werden kann. Für diesen Zweck kann die Probe zunächst mit einer Lösung verdünnt werden, die ein Auflösungsmittel und ein Antikoagulans enthält. Das Auflösungsmittel ist z. B. ein nichtionogenes Netzmittel vom Typ der polyoxyäthylierten Alkylphenole, z. B.

Isooctylphenoxypolyoxyäthyläthanol, das Antikoagulans z. B. Natriumcitrat.

Vorteilhafte Weiterbildungen des diagnostischen Reagens nach der Erfindung sowie ein Verfahren zu dessen Herstellung sind in den Patentansprüchen 11 bis 15 beschrieben.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.

A. Herstellung der diagnostischen Reagenzien

Beispiel 1

Eine 40prozentige (Gewicht/Volumen) wäßrige Suspension aus Polystyrolkügefchen von 0,16 μ Teilchengröße wird auf 5 Prozent (Gewicht/Volumen) mit einer boratgepufferten Salzlösung verdünnt und durch eine Membran mit 1,2 μ Porengröße filtriert Die Suspension wird anschließend sofort zu 9 Volumteilen von gereinigtem Meerschweinchen-Antiserum, das den gegen das Australien-Antigen gerichteten Antikörper enthält (verdünnt auf 0,5% Gewicht/Volumen) hinzugefügt und 30 Minuten gleichmäßig gerührt Nach der Zugabe von 1 Volumteil Rinderserumalbmnin (1% Gewicht/Volumen) wird schließlich mit Natriumazid versetzt, so daß man eine Konzentration von 0,1% (Gewicht/Volumen) in dem Endorodukt erhält Das Produkt wird bei 4° C gelagert, wobei es mindestens 3 Monate stabil ist

Beispiel 2

Eine 40prozentige (Gewicht/Volumen) Suspension der gleichen Polystyrolkügeichen wie in Beispiel 1 wird auf 5% mit glycingepufferter Salzlösung verdünnt und durch Zusatz von 0-Propiolacton unter pH-Kontrolle sterilisiert. Die Suspension wird dann zu 9 Volumteilen eines zweckmäßig verdünnten, gereinigten Meerschweinchen-Serums von mit dem Australien-Antigen immunisierten Tieren hinzugefügt. Die Zugabe der Polystyrolsuspension erfolgt langsam unter Rühren und das Rühren wird 30 Minuten fortgesetzt. Die Polystyrolkügelchen werden zentrifugiert, einmal auf der Zentrifuge mit gepufferter Salzlösung gewaschen und zu dem ursprünglichen Volumen in gepufferter Salzlösung erneut suspendiert. Nach Zugabe von Rinderseruma'bumin (1%, Gewicht/Volumen) zur Stabilisierung der Suspension der Polystyrolkügelchen wird das Rühren 30 Minuten fortgesetzt. Nach Zugabe von '/to Volumteil verdünntem, normalem Serum von nichtimmunisierten Meerschweinchen (verdünnt 1 :3,5 mit glycingepufferter Salzlösung) wird das Gemisch erneut 30 Minuten gerührt Schließlich wird das Gemisch heftig geschüttelt, um jegliche Teilchenagglomerationen zu zerteiien. Alle verwendeten Lösungen werden durch Fiiiraticn sterilisiert und enthalten 0,1% Natriumazid als Konservierungsmittel. Das Produkt wird bei 4° C gelagert, wobei es mindestens 3 Monate stabil ist.

Die Eignung einer Charge des diagnostischen Reagenz wird so überprüft, daß man eine Reihe von mindestens 50 Humanseren, di* verschiedene bekannte Titer an Australien-Antigen aufweisen, testet. Diese Eignung wird verglichen mit der Eignung von Standardtests zum Nachweis des Australien-Antigens (Geldiffusion und Gegenstrom-Immunoelektrophorese), wobei ebenfalls unter Verwendung der 50 Proben getestet wird. Die Prüfung sollte mindestens die gleiche Empfindlichkeit ergeben. Die Selektivität ist gegeben, wenn bei mindestens 100 Huniansera- und -blutproben, die kein Australien-Antigen enthalten, nicht mehr als 3% der Proben eine Reaktion ergeben.

Die in den Beispielen I und 2 verwendeten gereinigten Meerschweinchen-Antiseren werden wie folgt hergestellt:

Meerschweinchen werden mit Australien-Antigen immunisiert, das in gereinigter Form aus Humanplasma durch isopyknisches »banding« in einem Caesiumchlorid- oder Kaliumbromidgnidient in einer »zonal centrifuge« und anschließendes wrate zonal centrifugation« in einem Saccharosegradient erhalten worden ist. Einer primären Immunisierung mit Antigen in Freunds vollständigem Hilfsstoff (»complete adjuvant«) in die Fußballen schließen sich zwei intraperitoneale Impfungen mit Antigen ohne Hilfsstoff an. Nach dem Vereinigen der aus den Meerschweinchen erhaltenen Seren werden restliche, gegen Humanserumproteine gerichtete Antikörper gegebenenfalls dadurch entfernt,

ίο daß man das Antiserum mit unter Verwendung von Äthylchloroformiat polymerisiertem normalem Humanserum in Berührung bringt Das Serum wird anschließend durch Ausfällung mit 14prozentigem wäßrigem Natriumsulfat gereinigt gegen wäßrige, phosphatgepuf-

ferte Salzlösung dialysiert und gegebenenfalls zur Zerstörung von Komplement 30 Minuten auf 56⁰C erhitzt Hierauf wird Natriumazid (0,1%) als Konservierungsmittel zugegeben. Bei der Verwendung zur Herstellung des diagnostischen Reagenzes wird das

Antiserum zweckmäßig verdünnt. Die optimale Verdünnung wird so bestimmt, daß man kleine Ansätze des diagnostischen Reagenzes mit verschiedenen Verdünnungen des Antiserums herstellt und diese gegen eine Reihe von Humansera prüft, die Australien-Antigen enthalten. Diejenige Verdünnung, die nach dem Aufbringen auf Harzteilchen das beste Testergebnis zeigt, wird zur Herstellung des diagnostischen Reagenzes ausgewählt. Normalerweise liegt die optimale Verdünnung zwischen 1 : 20 und 1 :100.

B.Testmethoden
/um Nachweis von Australien-Antigen

Beispiel 3

1 Tropfen (etwa 25 μΐ) einer Testprobe Humanserum wird auf einem Objektträger mit einem ähnlichen Tropfen von verdünntem (1 :20) normalem Meerschweinchenserum versetzt. Dann wird mit einem kleinen Holzstäbchen einige Sekunden vorsichtig gerührt. Nach Zugabe eines Tropfens des gemäß Beispiel 1 hergestellten diagnostischen Reagenzes wird das Gemisch mit dem Holzstäbchen gerührt, bis der Durchmesser des Tropfens etwa 2 cm beträgt. Der Objektträger wird dann auf einer schwarzen Platte 2 Minuten vorsichtig hin- und hergeschüttelt. Zu diesem Zeitpunkt zeigt sich bei einer Australien-Antigen enthaltenden Serumprobe eine bestimmte Agglutination, während eine stark positive Probe innerhalb von 15 bis 30 Sekunden zu einer Agglutination mit den Polystyrolteilchen führt. Negative Seren erzeugen innerhalb von 2 Minuten keine sichtbare Agglutination.

Beispiel 4

1 Tropfen (40 μΙ) einer Testprobe Humanserum wird auf einer schwarzen Glas-(oder Kunststoffplatte mit einem Tropfen des gemäß Beispiel 2 hergestellten diagnostischen Reagenzes versetzt. Das Gemisch wird mit einem kleinen Holzstäbchen gerührt, bis der Durchmesser des Tropfens etwa 2 cm beträgt. Die Platte wird dann 5 Minuten vorsichtig hin- und hergeschüttelt. Zu diesem Zeitpunkt zeigt eine Australien-Antigen enthaltende Serumprobe eine bestimmte Agglutination, während eine stark positive Probe innerhalb von 15 bis 30 Sekunden zu einer Agglutination mit den Polystyrolteilchen führt. Negative Seren erzeugen innerhalb von 5 Minuten keine sichtbare Agglutination.

Beispiel 5

I Tropfen (etwa 40 μΐ) menschliches venöses Blut oder kapillares Blut aus der Fingerspitze wird in ein Röhrchen gegeben, das 200 μΙ eines Verdünnungsmittels folgender Zusammensetzung enthält: 0,1 % Trinatriumcitrat, 0,1% Natriumazid und 0,02% nichtionogenes Netzmittel (Isooctylphenoxypolyäthoxyäthanol) in destilliertem Wasser. Nach dem Vermischen durch vorsichtiges Schütteln und lOminütigem Stehenlassen zur Zerstörung der in dem Blut enthaltenen Zellen werden 2 Tropfen des Gemisches zusammen auf eine schwarze Glas-(oder Kunststoffplatte gegeben. Nach Zugabe eines Tropfens des gemäß Beispiel 2 hergestellten diagnostischen Reagenzes wird der in Beispiel 4 beschriebene Test durchgeführt.

Beispiel 6

Etwa 50 μΐ Verdünnungsmittel (Zusammensetzung wie in Beispiel 5) werden auf einer schwarzen Glas-(oder Kunststoffplatte mit 20 μΐ Blut (venöses oder kapillares Blut) versetzt. Nachdem Blut und Verdünnungsmittel mit einem Holzstäbchen gerührt v/orden sind, läßt man das Gemisch 5 bis 10 Minuten stehen, um eine vollständige Blutzeilenauflösung zu gewährleisten. Nach Zugabe von 1 Tropfen des gemäß Beispiel 2 hergestellten diagnostischen Reagenzes wird der in Beispiel 4 beschriebene Test durchgeführt

Beispiel 7

Blutproben, die beliebige Standard-Antikoagulantia, z. B. Citrat, enthalten, werden zentrifugiert, um die Hauptmenge der Zellen zu entfernen. Die von den abgesetzten Zellen abgetrennten Plasmen werden nach den Methoden der Beispiele 5 oder 6, genau wie für Vollblut, auf Australien-Antigen getestet

Bei der Durchführung einer Testreihe gemäß den Beispielen 3 bis 7 ist es von Vorteil, in jeder Testreihe für Vergleichszwecke ein bekanntes Positivserum bzw. Negativserum zu verwenden.

C. Testmethoden für den Nachweis
des gegen Australien-Antigen gerichteten Antikörpers

Beispiel 8

Eine Anzahl von zweifach-Verdünnungen eines bekannten, Australien-Antigen enthaltenden Humanserums wird unter Verwendung von Nonmalhumansenim (d. h. frei von Australien-Antigen oder Antikörper

ίο hierzu), als Verdünnungsmittel hergestellt 1 Tropfen jeder dieser Verdünnungen wird mit dem diagnostischen Reagenz des Beispiels 4 getestet. Die höchste Verdünnung, bei der noch eine maximale Agglutination stattfindet, wird bestimmt. Diese Verdünnung wird für den Test verwendet. 1 Tropfen (40 μΐ) einer Testprobe Humanserum wird auf einer schwarzen Glas-(oder Kunststoffplatte mit 1 Tropfen (40 μΐ) der ausgewählten Verdünnung des Antigen-enthaltenden Serums versetzt; die Tropfen werden mit einem Holzstäbchen vermischt. Man läßt 5 Minuten stehen, um a^;<t Antigen-Antikörper-Reaktion zu ermöglichen, fügt 1 Tropfen (40 μΙ) des gemäß Beispiel 1 hergestellten diagnostischen Reagenzes hinzu und mischt kurz mit einem Holzstäbchen. Dann wird die Platte vorsichtig 5 Minuten hin- und hergeschütteit Zu dieser Zeit hat eine Agglutination stattgefunden, wenn das Testserum keinen Antikörper enthält. Findet keine Agglutination statt so zeigt dies die Anwesenheit des Antikörpers im restserum an. Für Vergleichszwecke wird vorzugsweise ein Silmultantest unter Verwendung eines Tropfens eines bekannten Serums durchgeführt das frei von Australien-Antigen oder des Antikörpers hierzu ist. Hierbei muß eine starke Agglutinationsreaktion auftreten.

Der Antikörpertiter in jedem Testserum kann so bestimmt werden, daß man den Test wie oben beschrieben, mit einer 2fach-Verdünnung des Testserums in normalem Serum durchführt Der Endpunkt ist gegeben durch die höchste Verdünnung des Testseruims, die keine Agglutination mit dem diagnostischen Reagenz nach dem in Beispiel 8 beschriebenen Test ergibt

709514/343

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Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren» zum Nachweis des Australien-Antigens oder des Antikörpers hierzu in einer Blut-Testprobe, bei dem man die Testprobe mit einem geeigneten Volumen einer wäßrigen Suspension vermischt die fein verteilte, synthetische Harzteilchen von im wesentlichen gleichmäßiger Form und Größe, überzogen mit dem gegenüber dem Australien-Antigen spezifischen Antikörper bzw. dem Australien-Antigen selbst enthält, und das Versnischen mindestens 2 Minuten fortsetzt, wobei das Auftreten sichtbarer Agglomerate die Anwesenheit des Antigens bzw. des Antikörpers in der Testprobe anzeigt, dadurch gekennzeichnet, daß man die Testprobe mit normalem Serum in Berührung bringt, das von den gleichen Säugerarten herrührt, von denen auch das zum Oberziehen der Harzteilchen verwendete antikörper- oder antigenhaltige Serum stammt

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das normale Serum in der Suspension der Harzteilchen enthalten ist.

3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das normale Serum mit der Testprobe vermischt wird, bevor das Vermischen der Testprobe mit der Suspension der Harzteilchen erfolgt.

4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Testprobe mit einem Rührer gerührt wird, der mit den Feststoffen aus dem norma'en Serum überzogen worden ist.

5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sich die Testprobe auf einer Oberfläche befindet, die mit den Feststoffen aus normalem Serum überzogen worden ist.

6. Verfahren zum Nachweis des gegen Australien-Antigen gerichteten Antikörpers in einer Blut-Testprobe, bei dem man die Testprobe mit einem Standardvolumen einer gereinigten Lösung oder Suspension des aus Humanblutplasma gewonnenen Australien-Antigens versetzt anschließend ein geeignetes Volumen einer wäßrigen Suspension <us fein verteilten, synthetischen Harzteilchen von im wesentlichen gleichmäßiger Form und Größe, die mit dem gegenüber dem Australien-Antigen spezifischen Antikörper überzogen sind, hinzufügt und mindestens 2 Minuten mischt, wobei das Nicht-Auftreten von Agglomeraten innerhalb von 10 Minuten die Anwesenheit des Antikörpers in der Testprobe anzeigt, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Harzteilchen-Suspension verwendet, welche weiterhin normales Serum enthält, das von den gleichen Säugerarten herrührt, von denen auch das zum Überziehen der Harzteilchen verwendete antikerperhaltige Serum stammt.

7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Prüfung von Vollblut oder Plasma, dadurch gekennzeichnet, daß die Testprobe zunächst mit einer Lösung verdünnt wird, die ein Auflösungsmittel und ein Antikoagulans enthält.

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Auflösungsmittel ein nichtionogenes polyoxyäthyliertes Alkylphenol-Netzmittel ist.

9. Verfahren nach Anspruch 7 oder 8, dadurch gekennzeichnet, daß das Antikoagulans Natriumeitrat ist.

10. Diagnostisches Reagenz zum Nachweis des

Australien-Antigens oder des Antikörpers hierzu, im wesentlichen bestehend aus einer wäßrigen Suspension aus fein verteilten, synthetischen Harzteilchen von im wesentlichen gleichmäßiger Form und Größe, die mit dem gegenüber dem Australien-Antigen spezifischen Antikörper bzw. mit dem Australien-Antigen selbst überzogen sind, dadurch gexennzeichnet daß die Suspension ruch normales Serum, das von' den gleichen Säugerarten herrührt, von deren auch das zum Überziehen der Harzieilchen verwendete antikörper- oder antigenhaltige Serum stammt enthält.

11. Diagnostisches Reagenz zum Nachweis des Australien-Antigens nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet daß die Harzteilchen mit dem Antikörper überzogen sind, der aus dem Serum von Meerschweinchen, die mit hochgereinigtem Australien-Antigen aus Humanblut immunisiert worden sind, hergestellt worden ist.

12. Diagnostisches Reagenz nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Suspension auch ein inertes Protein als Stabilisator enthält.

13. Diagnostisches Reagenz nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Suspension auch ein Konservierungsmittel enthält

14. Diagnostisches Reagenz nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet da3 die Suspension etwa 1 Volumteil des normalen Serums pro 20 bis 50 Teile der Suspension enthält.

15. Verfahren zur Herstellung eines diagnostischen Reagenz gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Suspension der Harzteilchen zu einer Lösung oder Suspension des gereinigten Antikörpers oder Antigens hinzufügt, das Gemisch bei Raumtemperatur rührt bis die Adsorption des Antikörpers oder Antigens an den Harzteilchen vollständig ist und das erhaltene Gemisch mit normalem Serum und gegebenenfalls dem Stabilisator und dem Konservierungsmittel versetzt.