DE2102988A1

DE2102988A1 - Neues Peptid, seine Herstellung und Zusammensetzungen, die es enthalten

Info

Publication number: DE2102988A1
Application number: DE19712102988
Authority: DE
Inventors: Georges Sceaux Hauts-de-Seine Jolles (Frankreich). C07c 37-00
Original assignee: Rhone Poulenc SA
Current assignee: Rhone Poulenc SA
Priority date: 1970-01-22
Filing date: 1971-01-22
Publication date: 1971-07-29
Also published as: GB1292094A; NL7100524A; BE761870A; CH518907A; FR2077486A1

Description

SC 3670

RHONE-POULENO S.A., Paris / Prankreich

Neues Peptid, seine Herstellung und Zusammensetzungen,

die es enthalten

Die vorliegende Erfindung betrifft Methyl-L-aapartyl-L-iX-phenylglycinat der Formel

-CH- CONH - CJH - COOCH

HOCO - CH,

°6^H5

(D

seine Salze, seine Herstellung und die Zusammensetzungen, die es» gegebenenfalls in Salzform, enthalten.

Erfindungsgemäss kann das Produkt der Formel I durch Kondensation von Methyl-L-iX -phenylglycinat der Formel

C₆H₅-

(II)

COOOH,

oder eines seiner Säureadditionssalze, z. B. des Hydrochloride, mit einem Asparaginsäurederlvat der allgemeinen Formel

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Z - HH - CH - GOOA

I (HD

B - O CO -

in der Z eine Schutzgruppe für den Aminorest, wie beispielsweise einen Trityl-, p-Nitrobenzyloxycarbonyl-, p-Brorabenzyloxycarbonyl-, Benzyloxyearbonyl- oder Alkoxycarbonylrest, bedeutet, B einen Benzyl« oder tert.~Butylrest darstellt und A ein Wasserstoffatom oder einen 2,4,5-Triehlorphenyl-, p-Nitrophenyl- oder Alkoxycarbonylrest bedeutet, und anschliessende Entfernung der Schutzgruppen aus dem Asparaginsäureteil des erhaltenen Zwischenprodukts hergestellt werden. Die Schutzgruppen des Produkts der allgemeinen Formel III sollten so gewählt werden, dass ihre Entfernung ohne Beeinflussung des Rests des Moleküls erfolgt.

Insbesondere führt man, wenn Z einen Benzyloxycarbonylrest bedeutet und B einen Benzylrest darstellt, eine Hydrierung in Anwesenheit eines Katalysators, v/ie beispielsweise Palladiumkohle, durch.

Palls Z einen Benzyloxyoarbonylrest bedeutet und B einen tert.-Butylrest darstellt, so nimmt man insbesondere eine Acidolyse vor.

Falls A ein Wasserstoffatom bedeutet, erfolgt die Kondensation in einem organischen Lösungsmittel, wie beispielsweise Dimethylformamid, Äthylacetat, Acetonitril oder Methylenchlorid, bei einer Temperatur zwischen -1,5° und 30⁰C in Anwesenheit eines Carbodiimide, wie beispielsweise Dicyclohexylcarbodiimid·

Falls A einen 2,4,5-Trichlorphenyl-, p-Nitrophenyl- oder Alkoxycarbonylrest bedeutet, erfolgt die Reaktion in einem organischen Lösungsmittel, wie beispielsweise Dimethylformamid, Äthylacetat oder Methylenchlorid, bei einer Temperatur zwischen -15 und

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25°C, gegebenenfalls in Anwesenheit einer Base, wie beispielsweise Triäthylarain.

Das Produkt der Formel I kann gegebenenfalls durch physikalische Methoden (wie beispielsweise Chromatographie) oder durch chemische Methoden (wie beispielsweise Bildung von in Wasser löslichen Salzen, Filtrieren und Lyophilisation der erhaltenen Lösung und anschliessende Zersetzung des erhaltenen Produkts) gereinigt werden.

Das erfindungsgemässe Produkt kann in Additionssalze mit einer Säure oder in Metallsalze übergeführt werden.

Die Additionssalze können durch Umsetzung des Produkts der Formel I mit Säuren in einem geeigneten Lösungsmittel erhalten werden.

Die Metallsalze können durch Umsetzung des Produkts der Formel I mit einer anorganischen Base oder einem Alkalicarbonat oder -bicarbonat erhalten werden.

Das Produkt der Formel I und seine Salze besitzen die Eigenschaft, süssen Geschmack zu haben. Diese Eigenschaft ist insofern wertvoll, als diese Derivate ihren süssen Geschmack verschiedenen Nahrungsmittelprodukten verleihen können, wie beispielsweise Früchten, Gemüsen, Säften, gesüssten Meiereiprodukten, Produkten auf Eierbasis, Salatwürzen, Eiscremes und Sorbets, Gelatinen, Eis, Sirupen, kohlensäurefreien und kohlensäurehaltigen Getränken und Weinen,

Das Methyl-L-aspartyl-L-fX-phenylglycinat und seine Salze sind in Wasser lösliche, stabile Substanzen, die in verschiedenen physikalischen Formen verwendet werden können, beispielsweise in Form von Pulvern, Tabletten, Sirupen und dergleichen. Man kann auch flüssige oder feste Träger, wie beispielsweise Wasser, Glycerin, Stärke, Sorbit, Zitronensäure und andere geeig*- nete nicht-toxische Substanzen, verwenden.

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Das Produkt der lOrmel I und seine Salze sind besonders für Diabetiker als Zuckerersatz wertvoll. Sie haben ausserdem nicht den unangenehmen Nachgeschmack, den die synthetischen Süßstoffe, wie beispielsweise Saccharin oder Natriumcyclamat, aufweisen.

Die folgenden Beispiele dienen zur weiteren Erläuterung der Erfindung .

Beispiel 1

Man löst 5»025 g Methyl-L-Cx-phenylglycinat-hydrochlorid, das durch Behandlung von I- CX-Pheny!glycin mit wasserfreiem methanolischem Chlorwasserstoff erhalten ist, in einem Gemisch von 25 cnr Dimethylformamid und 3,5 cnr Triäthylamin. Man kühlt auf O⁰C ab und setzt ohne Entfernung des ausgefallenen Triäthylamlnhydrochlorids eine Lösung von 13,4 g N-Benzyloxycarbonyl-L-asparaginsäure-ß-benzyl-cx -2,4,5-trichlorphenylester, hergestellt nach J. DAVEY u. Mitarb., J. Ohem. Soc, Seite 555 (1966), in 10 cnr Dimethylformamid zu. Die erhaltene Suspension wird 3 Tage bei O⁰C gerührt. Man setzt anschliessend zu dem Reaktionsmedium tropfenweise 50 cur Eiswasser und dann 25 cnr Äther zu. Man trennt die organische Phase ab und wäscht die wässrige Phase mit 100 cnr Äther. Man vereinigt die wässrigen Phasen einerseits und die organischen Phasen andererseits. Diese letzteren werden mit 50 cm⁵ Wasser gewaschen.

Die wässrigen Phasen werden auf O⁰C mit Hilfe eines Eisbads abgekühlt. Nach 1 Stunde bei dieser Temperatur wird der gebildete Niederschlag abfiltriert und auf einer Glasfritte mit einer minimalen Menge Eiswasser und 20 cnr Äther gewaschen. Man erhält nach Trocknen 4,6 g Methyl-N-benzyloxycarbonyl-ß-benzyl-L-aspartyl-L-(X-phenylglycinat.

Durch Einengen der organischen Phasen bei 20⁰O während 48 Stunden erhält man einen beträchtlichen kristallisierten Niederschlag, Die Kristalle werden abfiltriert und mit Äther gewaschen. Nach Trocknen erhält man so 5_f87 g Methyl-N-benzyloxy-

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carbonyl-ß-benzyl-L-aspartyl-Ii-cx -phenylglycinat.

Der Arbeitsgang ermöglicht so insgesamt 10,47 g Blethyl-N-benzyl oxycarbonyl-ß-benzyl-L~aspartyl«»L-(X-phenylglycinat vom P= 95 bis 97⁰C mit einer Ausberte von 83 # zu erhalten.

Rf = 0,9 ^T,2-Diehloräthan~MethaiiOl, 65i35 (Volumina)_/. Beispiel 2

Man löst 2,016 g Methyl-Ii-Of-phenylglycinat-hydrochlorid, er-r halten wie in Beispiel 1 angegeben, in einem Gemisch von 10 cnr Dimethylformamid und 1,4 our SriäthyXamin. Man kühlt auf -12⁰O ab und setzt zu dem Reaktionjgemiscli eine Lösung von 3*574 g

tf-Eenzyloxyoarbonyl-ß-benzyl-T-asparaginsäure in Ii cnr _ .

Dimethylformamid und dann unter ständigem Halten der .Temperatur bei -12⁰C 4,127 g Dicyclohexylc&rbodliinid zu.

Man rührt 3 Stunden bei -12⁰C \mä dann 48 Stunden bei 20⁰C. Man filtriert über eine Glasfritte, um den grösseren Teil des gebildeten Dicyclohexylharnstoffs und Triäthylamin-hydrochlorids zu entfernen. Man wäscht den Kiedereohlag zweimal mit 2 enr Dimethylformamid, vereinigt Filtrat und Waschflüssigkeiten und engt unter vermindertem Druck (20 mm Hg) bei 5O⁰C zur Trockne ei».

Der Rückstand wird in 20 om JHhylaeetat aufgenommen. Die Löeung wird 1 Stunde bei O⁰C gehalten. Man filtriert den Dioyolohexylharnstoff ab und engt d&a Piltrat unter vermindertem Druck (20 ram Hg) zur Trockne ein. Das so erhaltene Produkt wird in tO cnr Methylenohlorid gelöst und an einer Säule von 20 mm Durohmeseer, die 60 g Silicagel enthält, Chromatograph!ert. Un- ■fcer Sammeln von Fraktionen von 25 cm eluiert man nacheinander Bit Mettylenohlorid (100 ow?) und dann mit Gemischen von Methylenohlorid und Methanol von 95t5 Volumina (50 cm⁵), 90t10 VoIu- alna (50 om^), 75125 Volumina (75 on') und 50»50 Volumina (90 ob ). Man vereinigt die mit dem Gemisch Methylenchlorid- Methanol (90s 10) eluierten Traktionen und engt eie unter vor-

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mindertem Druck (20 mm Hg) zur Trockne ein. Man nimmt den Rückstand mit Äther auf, filtriert eine geringe Menge an unlöslichem Bestandteil ab und engt zur Trockne ein. Der Rückstand wird unter vermindertem Druck (0,1 mm Hg) getrocknet. Man erhält so 4,13 g (81,5 #) Methyl-N-benzyloxycarbonyl-ßbenzyl-L-aspartyl-L-cx -phenylglycinat vom F = 95 bis 97⁰C. Rf = 0,9 ,/T^-Dichloräthan-Methanol, 65:35 (Volumina)_7.

Beispiel 3

Man löst 3»574 g N-Benzyloxycarbonyl-L-asparaginsäure-ß-monobenzylester in 10 cm Dimethylformamid und setzt 1,4 cm Triäthylamin zu. Man kühlt auf -12⁰C ab und setzt 0,96 cm⁵ Äthylchlorformiat zu. Man rührt 30 Minuten bei -12⁰C und setzt dann zu dem Reaktionsmedium eine auf -12⁰C abgekühlte, durch Auflösung von 2,016 g Methyl-L-(^-phenylglycinat-hydrochlorid in einem Gemisch von 10 cnr Dimethylformamid und 1,4 cnr Triäthylamin erhaltene Suspension zu. Man rührt 3 Stunden bei -12⁰C " und dann 24 Stunden bei 2O⁰C. Man filtriert über eine Glasfritte, wäscht den Niederschlag zweimal mit 2 cm Dimethylformamid und engt unter vermindertem Druck (20 mm Hg) zur Trockne ein. Das erhaltene Produkt wird in 10 cnr Methylenchlorid gelöst. Diese Lösung wird auf eine Säule mit einem Durchmesser von 20 mm, die 60 g Silioagel enthält, gegossen. Die Chromatographie wird wie in Beispiel 2 beschrieben durchgeführt, und das Produkt wird auf die gleiche Weise isoliert.

Man erhält so 1,645 g Methyl— N—benzyloxycarbony1-ß-benzyl-L-aspartyl-L-fX-phenylglyoinat vom P ■ 95 bis 97⁰C Rf » 0,9 /T^-Dichloräthan-Methanol, 65:35 (Volumina)J7.

Beispiel 4

Man löst 2,018 g Methyl-N-benzyloxycarbonyl-ß-benzyl-l-aspartyl-I-Oi-phenylglyoinat in 20 cm Eisessig und setzt 2,018 g PaI-ladiumkohle mit einem Gehalt von 3 £ Metall und dann 1 cm Wasser zu. _{BAD 0R}j_GlNAL

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Man leitet einen Wasserstoffstrom in die Suspension mit einem Durchsatz von einer Blase je Sekunde während 48 Stunden ein. Man filtriert über eine Glasfritte und wäscht den Niederschlag fünfmal mit $e 4· cm Bisessig. Das Piltrat und die Waschflüssigkeiten werden vereinigt und dann unter vermindertem Druck (20 mm Hg) eingeengt.

Man nimmt den Rückstand mit 50 cm Äther auf und verreibt ihn bis zur Erzielung einer pulverförmigen Pestsubstanz. Man filtriert über eine Glasfritte und trocknet unter vermindertem m Druck (0,1 mm Hg). Man erhält so 1,24 g Rohprodukt.

Dieses Rohprodukt wird durch Extraktion mit Äther in einer Soxhlet-Apparatur während 8 Stunden gereinigt. Man trocknet das so behandelte Produkt und erhält 0,864 g Methyl-L-aspartyl-L- <X -phenylglycinat in einer Ausbeute von 78 $.

Elementaranalyse s

G = 51,96 $ (Theorie: 51,71 $), H = 5,66 $ (Theorie: 5,75 $), IT = 9,64 # (Theorie: 9,99 #).

Rf = 0,60 ^n-Butanol-Pyridin-Essigsäure-Y/asser, 50:20:6:24 (Volumina )_J·

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Claims

Patentansprüche

/1.) Methyl-L-aspartyl-L-<.\ -phenylglyeinat und seine Salze.
2. Verfahren zur Herstellung der Produkte nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man Methyl-I-(X-phenylglycinat oder eines seiner Säureadditionssalze mit einem Asparaginsäurederivat der allgemeinen Formel

Z - NH - QH - COOA

BO-CO- CH₂

in der Z einen Trityl-, p-Nitrobenzyloxycarbonyl-, p-Brombenzyloxycarbonyl-, Benzyloxycarbonyl- oder Alkoxycarbonylrest bedeutet, B einen Benzyl- oder tert.-Butylrest darstellt und A ein Wasserstoffatom oder einen 2,4,5-Trichlorphenyl-, p-Nitrophenyl- oder Alkoxycarbonylrest bedeutet, kondensiert und dann die Schutzgruppen des Asparaginsäureteils des erhaltenen Zwischenprodukts entfernt und gegebenenfalls das erhaltene Produkt in ein Additionssals mit einer Säure oder in ein Metallsalz überführt.
3. SüßstoffZusammensetzungen, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einem der Produkte nach Anspruch 1.

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