DE202021004217U1

DE202021004217U1 - Topische Kosmetikzusammensetzungen

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Publication number: DE202021004217U1
Application number: DE202021004217.2U
Authority: DE
Original assignee: Kay Mary Inc
Current assignee: Kay Mary Inc
Priority date: 2020-04-23
Filing date: 2021-04-20
Publication date: 2023-05-30
Anticipated expiration: 2031-04-21
Also published as: CN113546012A; US20210330578A1; EP4138775A1; WO2021217176A1

Abstract

Verwendung einer Zusammensetzung, die eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, zur Steigerung der Hauthydratation bei einer Person, wobei die Verwendung topisches Auftragen der Zusammensetzung auf die Haut der Person umfasst, wobei topische Auftragung der Zusammensetzung Feuchtigkeit in der Luft anzieht und an die Außenschichten der Haut bindet, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut transportiert, den Hautfeuchtigkeitsgehalt erhöht, die Haut aufpolstert und strafft, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung schützt, optimale Hautbarrierefunktion unterstützt und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors stimuliert.

Description

QUERVERWEIS AUF VERWANDTE ANMELDUNGEN
Diese Anmeldung beansprucht den Vorteil der Priorität aus der vorläufigen US-Patentanmeldung mit der Seriennummer 63/014,517 , eingereicht am Donnerstag, 23. April 2020, die hier durch Bezugnahme in vollem Umfang aufgenommen ist.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
A. Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft allgemein Kosmetikzusammensetzungen und Verfahren, die verwendet werden können, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren und/oder die Effizienz von Kosmetikprodukten zu erhöhen, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Die Zusammensetzungen können insbesondere Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertes Natriumhyaluronat und Ceramid einschließen.
B. Beschreibung des Standes der Technik
Verschiedene Faktoren können zu unterschiedlichen Belastungen der Haut führen, einschließlich Alterung, chronischer Exposition gegenüber ungünstigen Umweltfaktoren, Fehlernährung, Ermüdung, Stress, Jahreszeitenwechsel und sonstige extrinsische und intrinsische Faktoren, die die Haut schädigen können, um einige Beispiele zu nennen. Diese Belastungen können das visuelle Erscheinungsbild, physische Eigenschaften oder physiologische Funktionen der Haut und des Gewebes auf Weisen verändern, die visuell als unerwünscht gelten. Wahrnehmbare und offensichtliche Veränderungen schließen trockene Haut, grobe Oberflächentextur, die Entwicklung feiner Linien und Falten, Verlust der Elastizität, herabgesetzte Hautbarrierefunktion, Verlust der Gleichförmigkeit von Farbe oder Hautton und fleckige Pigmentierung ein. Viele dieser Stressfaktoren lassen sich schwer oder gar nicht vermeiden.
Weniger offensichtliche, jedoch messbare Veränderungen, die im Verlauf der Haut- und Gewebealterung oder bei chronischer umweltbedingter Schädigung auftreten, beinhalten eine allgemeine Reduktion der Vitalität von Zellen und Gewebe, Reduktion der Zellreplikationsraten, reduzierten kutanen Blutfluss, reduzierten Feuchtigkeitsgehalt, akkumulierte Fehler in Struktur und Funktion, Veränderungen in der normalen Regulierung üblicher biochemischer Wege und eine Reduktion der Fähigkeit von Haut und Gewebe, sich selbst zu remodellieren und zu reparieren. Viele der Veränderungen an Erscheinungsbild und Funktion der Haut werden durch Änderungen der äußeren epidermalen Schicht der Haut verursacht, während andere durch Veränderungen in der unteren Dermis verursacht werden. Ungeachtet des Stimulus des Hautschadens werden zahlreiche natürliche und komplexe biochemische Mechanismen in Gang gesetzt, um die Reparatur des Schadens zu versuchen, wenn ein Schaden auftritt.
Normale gesunde Haut hat eine glatte epidermale Schicht, die als gute Barriere für Wasser und umweltbedingten Schaden wirkt. Hautfarbe und Hautton sind gleichförmig und makellos. Natürliche straffende und hydratisierende Elemente, wie Kollagen (das Hautstraffheit bereitstellt), Elastin (das Hautelastizität und Rückprallelastizität beiträgt) und Glykosaminoglykane oder GAGs (die die Haut hydratisiert halten) sind alle reichlich vorhanden. Das Alter verlangsamt jedoch die natürliche Produktion von Kollagen, Elastin und GAGs, was zu unerwünschten Änderungen der Haut führt, wie Trockenheit, Jucken, Rötung, Schatten oder dunklen Bereichen, Erschlaffung, dünner werden oder stärker wahrnehmbare feine Linien und Falten. Das Aufrechterhalten der Hautfeuchtigkeit trägt dazu bei, einige dieser Veränderungen zu überwinden. Es kann jedoch schwierig sein, die Feuchtigkeit der Haut aufrechtzuerhalten. Dies trifft insbesondere auf Subjekte zu, deren Haut trockener als der Durchschnitt ist (trockener Hauttyp). Die Exposition gegenüber Sonne, Wind, trockener Luft, Chemikalien, Lösungsmitteln, Waschen, Kosmetika oder Textilien sind einige der vielen Wege, bei denen die Haut Feuchtigkeit verlieren kann. Ein Feuchtigkeitspräparat allein reicht möglicherweise nicht immer aus, wenn so viele Faktoren die Fähigkeit der Haut kompromittieren, hydratisiert zu bleiben.
Andere haben versucht, Zusammensetzungen und Verfahren zu erzeugen, die die Haut hydratisieren und/oder die hauteigene natürliche Hydratation stimulieren. Es haben sich jedoch viele Versuche als ineffektiv erwiesen, die nur eines oder wenige der unerwünschten Ergebnisse angesprochen haben oder selbst zu inakzeptablen Nebenwirkungen führten, wie Hautreizung. Es besteht somit ein Bedarf an neuen Produkten, die zur Hydratation und/oder Stimulierung der hauteigenen natürlichen Hydratation effektiv sind, ohne Hautreizung zu bewirken.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die Erfinder der vorliegenden Erfindung haben eine Lösung der Probleme im Zusammenhang mit aktuellen Kosmetikprodukten identifiziert. Die Lösung liegt in einer Kombination von Bestandteilen, die Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertes Natriumhyaluronat und Ceramid einschließen. Die Kombination kann verwendet werden, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Die Kombination kann auch verwendet werden, um die Wirksamkeit von kosmetischen Produkten zu erhöhen, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Zusätzliche Vorteile können das Reduzieren oder Abschwächen unerwünschter Nebenwirkungen von aktuellen kosmetischen Produkten einschließen. In einigen Aspekten wird eine effektive Menge von einer Kombination aus Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid mit einer effektiven Menge an Glycerin kombiniert, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu boostern und/oder die hauteigene natürliche Hydratation zu stimulieren. Eine effektive Menge einer Kombination von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid wird in einigen Aspekten mit einer effektiven Menge an Natriumhyaluronat kombiniert, um Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden und um die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen. Der Verbena officinalis-Extrakt wird in einigen Aspekten als wässriger Extrakt bereitgestellt.
In einigen Aspekten wird eine topische Hautzusammensetzung offenbart. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen eine effektive Menge von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyalunorat und Ceramid ein, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung den Feuchtigkeitsgehalt der Haut steigert, Feuchtigkeit in der Luft anzieht und an die Außenschichten der Haut bindet, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut transportiert, die Haut aufpolstert und strafft, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung schützt, optimale Hautbarrierefunktion unterstützt und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors stimuliert. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid ein, wobei topische Auftragung der Zusammensetzung den Feuchtigkeitsgehalt der Haut nach einer einzigen Auftragung um mindestens 10, 20, 30, 40 oder 50 % erhöht. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid ein, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors der Haut stimuliert.
Die topische Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,001 % bis 1 % Gew./Gew. Verbena officinalis-Extrakt, 0,01 % bis 10 % Gew./Gew. hydrolysiertes Natriumhyaluronat und 0,001 % bis 1 % Gew./Gew. Ceramid ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,001 bis 1 % Gew./Gew. Verbena officinalis-Extrakt ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,01 bis 0,1 % Gew./Gew. Verbena officinalis-Extrakt ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,01 bis 10 % Gew./Gew. hydrolysiertes Natriumhyaluronat ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,05 bis 5 % Gew./Gew. hydrolysiertes Natriumhyaluronat ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,001 bis 1 % Gew./Gew. Ceramid ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,005 bis 0,5 % Gew./Gew. Ceramid ein.
In einigen Fällen wird vor der Auftragung der Zusammensetzung auf die Haut eine zweite Hautpflegezusammensetzung auf die Haut aufgetragen. In einigen Fällen wird die Zusammensetzung vor der Auftragung auf die Haut mit der zweiten Zusammensetzung kombiniert. Die zweite Hautpflegezusammensetzung hat in einigen Fällen eine Hydratationswirkung auf die Haut. Die zweite Hautpflegezusammensetzung hat in einigen Fällen keine Hydratationswirkung auf die Haut. In einigen Fällen wird vor der Auftragung der Zusammensetzung auf die Haut mehr als eine andere Hautpflegezusammensetzung auf die Haut aufgetragen. In einigen Fällen wird die Zusammensetzung vor der Auftragung auf die Haut mit mehr als einer anderen Zusammensetzung kombiniert. Die mehr als eine andere Hautpflegezusammensetzung hat in einigen Fällen eine Hydratationswirkung auf die Haut. Die mehr als eine andere Zusammensetzung hat in einigen Fällen keine Hydratationswirkung auf die Haut.
Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen ein oder mehrere von einem Feuchthaltemittel, einem Aufweichmittel, einem Hautkonditionierungsmittel und/oder einem pH-Einstellmittel ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen des Weiteren eine effektive Menge von einem oder mehreren von Wasser, Glycerin, Pentylenglykol, Betain und/oder Phenoxyethanol ein, um zu befeuchten und/oder den Hydratationseffekt eines Hautprodukts zu steigern. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen ein oder mehr von 1 bis 95 Gew.% Wasser, 1 bis 30 Gew.% Glycerin, 0,1 bis 15 Gew.% Pentylenglykol, 0,1 bis 15 Gew.% Betain und/oder 0,05 bis 10 Gew.% Phenoxyethanol ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Instanzen 40 bis 85 Gew.% Wasser ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 1 % bis 30 % Gew./Gew. Glycerin ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 5 % bis 20 % Gew./Gew. Glycerin ein.
Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen ein oder mehr von Xanthangummi und/oder Natriumhyaluronat ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen ein oder mehrere von 0,01 bis 5 Gew.% Xanthangummi und/oder 0,01 bis 1 Gew.% Natriumhyaluronat ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen ferner Opuntia tuna (Feigenkaktus)-Extrakt ein. Die Zusammensetzung schließt in einigen Fällen 0,001 bis 2 Gew.% Opuntia tuna-(Feigenkaktus)-Extrakt ein.
Die Zusammensetzung ist in einigen Fällen eine Steigerungszusammensetzung, die die Aktivität einer Hautpflegezusammensetzung steigern kann, indem die Steigerungszusammensetzung und die Hautpflegezusammensetzung kombiniert werden, wobei die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um eine Fähigkeit der Kosmetikzusammensetzung zu erhöhen oder zu begünstigen, den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Die Hautpflegezusammensetzung hat in einigen Fällen eine Hydratationswirkung auf die Haut. Die Hautpflegezusammensetzung hat in einigen Fällen keine Hydratationswirkung auf die Haut.
Die Zusammensetzung wird in einigen Aspekten mehrmals pro Woche auf die Haut aufgetragen. Die Zusammensetzung kann in einigen Aspekten 2-3 Mal pro Woche auf die Haut aufgetragen werden. Die Zusammensetzung kann in einigen Aspekten 2 Mal pro Woche auf die Haut aufgetragen werden. Die Zusammensetzung kann in einigen Aspekten 3 Mal pro Woche auf die Haut aufgetragen werden. Die Zusammensetzung kann in einigen Aspekten mehr als 3 Mal pro Woche auf die Haut aufgetragen werden.
Die Zusammensetzung kann in einigen Aspekten mit einer oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut kombiniert werden. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten einen Befeuchter ein. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten ein Serum ein. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten Retinol ein. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten eine Schälzusammensetzung ein. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten eine Glättungszusammensetzung ein. Die Glättungszusammensetzung schließt in einigen Fällen Glykolsäure und Gluconolacton ein. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten eine Aufhellungszusammensetzung ein. Die Aufhellungszusammensetzung schließt in einigen Fällen Ferulasäure, Niacinamid und Gartenbohnenextrakt ein. Die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen zur Behandlung der Haut schließen in einigen Aspekten eine Anti-Aging-Zusammensetzung ein. Die Anti-Aging-Zusammensetzung schließt in einigen Fällen Vitamin C, Resveratrol und Acetylhexapeptid-8 ein.
In einigen Aspekten wird die Zusammensetzung auf gereinigte Haut aufgetragen. Die Zusammensetzung wird in einigen Fällen auf der Haut belassen, um absorbiert zu werden. Der Auftragung der Zusammensetzung geht in einigen Fällen die Auftragung der einen oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen voraus. Die Zusammensetzung wird in einigen Aspekten aufgetragen, nachdem die eine oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen in der Haut absorbiert worden sind. In einigen Fällen wird ein Gemisch aus der Zusammensetzung und der einen oder den mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen auf die Haut aufgetragen.
Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können in einigen Aspekten des Weiteren ein oberflächenaktives Mittel, silikonhaltige Verbindungen, UV-Mittel, Öl und/oder andere Bestandteile einschließen, die in dieser Beschreibung angegeben sind oder die Fachleuten bekannt sind. Die Zusammensetzung kann eine Lotion, Creme, eine Körperbutter, Maske, ein Peeling, ein Waschpräparat, ein Gel, Serum, eine Emulsion (z. B. Öl-in-Wasser, Wasser-in-Öl, Silikon-in-Wasser, Wasser-in-Silikon, Wasser-in-Öl-in-Wasser, Öl-in-Wasser-in-Öl, Öl-in-Wasser-in-Silikon, usw.), Lösungen (z. B. wässrige oder hydroalkoholische Lösungen), wasserfreie Basismaterialien (z. B. Lippenstift oder ein Puder), Salben, Milch, Paste, ein Aerosol, feste Formen, Augengelees, Gelserumpräparate, Gelemulsionen, usw. sein. Die Zusammensetzung ist in einigen Fällen ein Serum, eine Creme, ein Gel, ein Cremegel, eine Öl-in-Wasser-Emulsion, eine Wasser-in-Öl-Emulsion oder eine Flüssigkeit. Die Zusammensetzung ist in einigen Fällen eine Flüssigkeit. Die Zusammensetzung ist in einigen Fällen in einer Ampulle enthalten. Die Zusammensetzung kann für die topische Auftragung auf die Haut mindestens 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 oder mehr Male pro Tag während der Verwendung formuliert sein. In einigen Aspekten der vorliegenden Erfindung können Zusammensetzungen lagerstabil oder farbstabil oder beides sein. Es ist auch vorgesehen, dass die Viskosität der Zusammensetzung so gewählt werden kann, dass ein bestimmtes Ergebnis erreicht wird, z. B. kann in Abhängigkeit von dem gewünschten Typ der Zusammensetzung die Viskosität etwa 1 cps bis deutlich über 1 Millionen cps betragen, oder ein beliebiger davon ableitbarer Bereich oder eine beliebige davon ableitbare ganze Zahl (z. B. 2 cps, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000, 10000, 20000, 30000, 40000, 50000, 60000, 70000, 80000, 90000, 100000, 200000, 300000, 400000, 500000, 600000, 700000, 800000, 900000, 1000000, 2000000, 3000000, 4000000, 5000000, 10000000 cps usw., gemessen mit einem Brookfield-Viskometer unter Verwendung einer TC-Spindel mit 2,5 UpM bei 25°C).
Die Zusammensetzungen können in nicht-einschränkenden Aspekten einen pH-Wert von etwa 6 bis etwa 9 haben. In einigen Aspekten kann der pH-Wert 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 oder 14 sein. Die Formulierung kann ein Triglycerid einschließen. Nicht-einschränkende Beispiele schließen kurz-, mittel- und langkettige Triglyceride ein. Das Triglycerid ist in bestimmten Aspekten ein mittelkettiges Triglycerid (z. B. Capryl-/Caprintriglycerid). Die Zusammensetzungen können auch Konservierungsmittel einschließen. Nicht-einschränkende Beispiele für Konservierungsmittel schließen Phenoxyethanol, Methylparaben, Propylparaben, Iodpropinylbutylcarbamid, Kaliumsorbat, Natriumbenzoat oder jedwede Mischung davon ein. Die Zusammensetzung ist in einigen Ausführungsformen parabenfrei.
Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können UV A- und UV B-Absorptionseigenschaften aufweisen. Die Zusammensetzungen können einen Lichtschutzfaktor (SPF) von 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 oder mehr aufweisen, oder eine beliebige ganze Zahl oder ein beliebiges Derivat darin. Die Zusammensetzungen können Sonnenschutzlotionen, -sprays oder -cremes sein.
Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können auch ein beliebiges von, eine beliebige Kombination von oder alle der folgenden zusätzlichen Bestandteile einschließen: ein Konditionierungsmittel, ein Befeuchtungsmittel, ein pH-Werteinstellmittel, ein Strukturierungsmittel, anorganische Salze, ein Konservierungsmittel, ein Verdickungsmittel, eine silikonhaltige Verbindung, ein etherisches Öl, einen Duftstoff, ein Vitamin, einen pharmazeutischen Bestandteil oder ein Antioxidans oder eine beliebige Kombination dieser Bestandteile oder Mischungen solcher Bestandteile. Die Zusammensetzung kann in bestimmten Aspekten mindestens zwei, drei, vier, fünf, sechs, sieben, acht, neun, zehn oder mehr, oder alle dieser zusätzlichen Bestandteile einschließen, die im vorhergehenden Satz genannt wurden. In dieser Beschreibung werden nicht-einschränkende Beispiele für diese zusätzlichen Bestandteile angegeben und werden durch Bezugnahme in diesen Abschnitt aufgenommen. Die Mengen dieser Bestandteile können im Bereich von 0,0001 bis 99,9 Gew.% oder Vol.% der Zusammensetzung liegen oder eine beliebige ganze Zahl oder ein beliebiger Bereich dazwischen sein, wie in anderen Abschnitten dieser Beschreibung offenbart ist, die in diesem Absatz durch Bezugnahme eingeschlossen sind.
Es werden hier auch Verfahren zur Verwendung der hier offenbarten Zusammensetzungen offenbart. In einigen Aspekten wird ein Verfahren offenbart, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. In einigen Aspekten wird ein Verfahren offenbart, um die Wirksamkeit von kosmetischen Produkten zu erhöhen, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Das Verfahren umfasst in einigen Fällen topisches Auftragen einer beliebigen der hier offenbarten Zusammensetzungen auf die Haut, die dessen bedarf. In einem Aspekt werden beliebige der hier offenbarten Zusammensetzungen topisch aufgetragen, und die Zusammensetzung wird auf dem Auftragungsbereich belassen, nach einem Zeitraum von dem Auftragungsbereich entfernt und/oder direkt nach der Auftragung entfernt.
Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um die Haut aufzupolstern und zu straffen. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Die hier offenbarten Zusammensetzungen werden in einigen Aspekten verwendet, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut nach einer einzigen Auftragung um mindestens 10, 20, 30, 0 oder 50 % zu erhöhen.
Es ist auch vorgesehen, dass die in dieser Beschreibung offenbarten Zusammensetzungen in Produkten, die auf der Haut verbleiben („Leave-on“), oder Produkten, die von der Haut abgespült werden („Rinse-off“), verwendet werden können. Eine Leave-on-Zusammensetzung kann beispielsweise eine sein, die topisch auf die Haut aufgetragen wird und eine Zeit lang auf der Haut verbleibt (z. B. mindestens 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20 oder 30 Minuten oder mindestens 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 oder 24 Stunden oder über Nacht oder während des Tages). Alternativ kann eine Rinse-off-Zusammensetzung ein Produkt sein, das auf die Haut aufgetragen und dann innerhalb eines Zeitraums, wie weniger als 5, 4, 3, 2 oder 1 Minute, von der Haut entfernt oder abgespült wird (z. B. mit Wasser). Die Zusammensetzung ist in einigen Fällen konzipiert, um nach 30 Sekunden, 1 Minute, 2 Minuten, 3 Minuten, 4 Minuten, 5 Minuten, 6 Minuten, 7 Minuten, 8 Minuten, 9 Minuten, 10 Minuten, 11 Minuten, 12 Minuten, 13 Minuten, 14 Minuten, 15 Minuten, 20 Minuten, 30 Minuten, 40 Minuten, 50 Minuten, 60 Minuten oder jedem Betrag oder Bereich darin abgewaschen zu werden. Ein Beispiel für eine Rinse-off-Zusammensetzung kann ein Hautreiniger, Shampoo, Conditioner oder Seife sein. Ein Beispiel für eine Leave-on-Zusammensetzung kann ein Befeuchtungsprodukt für die Haut, Sonnenschutzmittel, eine Maske, Nachtcreme oder Tagescreme sein.
Kits, die die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen einschließen, sind auch vorgesehen. In bestimmten Ausführungsformen ist die Zusammensetzung in einem Behälter enthalten. Der Behälter kann eine Flasche, ein Spender oder eine Packung sein. Der Behälter kann eine festgelegte Menge der Zusammensetzung enthalten. Die Zusammensetzungen werden in bestimmten Aspekten als Spray, Nebel, Klecks oder Flüssigkeit abgegeben. Der Behälter kann Zeichen auf seiner Oberfläche aufweisen. Die Zeichen können ein Wort, eine Abkürzung, ein Bild oder ein Symbol sein.
Es ist vorgesehen, dass jedwede in dieser Beschreibung erörterte Ausführungsform in Bezug auf jedwedes Verfahren oder jedwede Zusammensetzung der Erfindung implementiert werden kann, und anders herum. Zusammensetzungen der Erfindung können ferner verwendet werden, um Verfahren der Erfindung zu erreichen.
Im Kontext der vorliegenden Erfindung werden mindestens die folgenden 47 Aspekte beschrieben. Aspekt 1 schließt ein Verfahren zur Steigerung der Hauthydratation bei einer Person ein. Das Verfahren umfasst topisches Auftragen einer Zusammensetzung, die eine effektive Menge von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyalunorat und Ceramid umfasst, auf die Haut einer Person, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung Feuchtigkeit in der Luft anzieht und an die Außenschichten der Haut bindet, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut transportiert, den Feuchtigkeitsgehalt der Haut erhöht, die Haut aufpolstert und strafft, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung schützt, optimale Hautbarrierefunktion unterstützt und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors stimuliert. Aspekt 2 hängt von Aspekt 1 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt, 0,01 bis 10 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat und 0,001 bis 1 Gew.% Ceramid umfasst. Aspekt 3 hängt von einem der Aspekte 1 und 2 ab, bei dem ein oder mehrere andere Hautpflegezusammensetzungen auf die Haut aufgetragen werden, bevor die Auftragung der Zusammensetzung auf die Haut erfolgt. Aspekt 4 hängt von einem der Aspekte 1 bis 2 ab, bei dem die Zusammensetzung vor der Auftragung auf die Haut mit einer oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen kombiniert wird. Aspekt 5 hängt von einem der Aspekte 3 bis 4 ab, bei dem der eine oder die mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen eine Hydratationswirkung auf die Haut haben. Aspekt 6 hängt von einem der Aspekte 3 bis 4 ab, bei dem der eine oder die mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen keine Hydratationswirkung auf die Haut haben. Aspekt 7 hängt von einem der Aspekte 1 bis 6 ab, bei dem die Zusammensetzung des Weiteren ein oder mehrere von einem Feuchthaltemittel, einem Aufweichmittel, einem Hautkonditionierungsmittel und/oder einem pH-Einstellmittel umfasst. Aspekt 8 hängt von einem der Aspekte 1 bis 7 ab, bei dem die Zusammensetzung des Weiteren eine effektive Menge von einem oder mehreren von Wasser, Glycerin, Pentylenglykol, Betain und/oder Phenoxyethanol umfasst, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen und/oder den Hydratationseffekt eines Hautprodukts zu steigern. Aspekt 9 hängt von Aspekt 8 ab, bei dem die Zusammensetzung 1 bis 95 Gew.% Wasser, 1 bis 30 Gew.% Glycerin, 0,1 bis 15 Gew.% Pentylenglykol, 0,1 bis 15 Gew.% Betain und/oder 0,05 bis 10 Gew.% Phenoxyethanol umfasst. Aspekt 10 hängt von einem der Aspekte 1 bis 9 ab, bei dem die Zusammensetzung des Weiteren ein oder mehrere von Xanthangummi und Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 11 hängt von Aspekt 10 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,01 bis 5 Gew.% Xanthangummi und 0,01 bis 1 Gew.% Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 12 hängt von Aspekt 11 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt umfasst. Aspekt 13 hängt von Aspekt 12 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,01 bis 0,1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt umfasst. Aspekt 14 hängt von einem der Aspekte 1 bis 13 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,01 bis 10 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 15 hängt von Aspekt 14 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,05 bis 5 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 16 hängt von einem der Aspekte 1 bis 15 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Ceramid einschließt. Aspekt 17 hängt von Aspekt 16 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,005 bis 0,5 Gew.% Ceramid umfasst. Aspekt 18 hängt von einem der Aspekte 1 bis 17 ab, bei dem die Zusammensetzung 1 bis 30 Gew.% Glycerin einschließt. Aspekt 19 hängt von Aspekt 18 ab, bei dem die Zusammensetzung 5 bis 20 Gew.% Glycerin umfasst. Aspekt 20 hängt von einem der Aspekte 1 bis 19 ab, bei dem die Zusammensetzung des Weiteren 40 bis 85 Gew.% Wasser einschließt. Aspekt 21 hängt von einem der Aspekte 1 bis 20 ab, bei dem die Zusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung den Feuchtigkeitsgehalt der Haut nach einer einzigen Auftragung um mindestens 50 % erhöht. Aspekt 22 hängt von einem der Aspekte 1 bis 21 ab, bei dem die Zusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors der Haut stimuliert. Aspekt 23 schließt ein Verfahren zur Steigerung der Hydratationsaktivität einer Hautpflegezusammensetzung ein. Das Verfahren umfasst Kombinieren einer Steigerungszusammensetzung und der Hautpflegezusammensetzung, wobei die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um eine Fähigkeit der Kosmetikzusammensetzung zu erhöhen oder zu begünstigen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, den Hautfeuchtigkeitsgehalt zu erhöhen, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Aspekt 24 hängt von Aspekt 23 ab, bei dem die Hautpflegezusammensetzung eine Hydratationswirkung auf die Haut ausübt. Aspekt 25 hängt von Aspekt 23 ab, bei dem die Hautpflegezusammensetzung keine Hydratationswirkung auf die Haut ausübt. Aspekt 26 hängt von einem der Aspekte 23 bis 25 ab, bei dem die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut nach einer einzigen Auftragung um mindestens 50 % zu erhöhen. Aspekt 27 hängt von einem der Aspekte 23 bis 26 ab, bei dem die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors der Haut zu stimulieren. Aspekt 28 schließt eine Produktsteigerungszusammensetzung ein, die eine effektive Menge einer Kombination von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, den Hautfeuchtigkeitsgehalt zu erhöhen, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Aspekt 29 hängt von Aspekt 28 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt, 0,01 bis 10 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat und 0,001 bis 1 Gew.% Ceramid umfasst. Aspekt 30 hängt von einem der Aspekte 28 bis 29 ab, der des Weiteren ein oder mehrere von einem Feuchthaltemittel, einem Aufweichmittel, einem Hautkonditionierungsmittel und/oder einem pH-Einstellmittel umfasst. Aspekt 31 hängt von einem der Aspekte 28 bis 30 ab, der des Weiteren eine effektive Menge von einem oder mehreren von Wasser, Glycerin, Pentylenglykol, Betain und/oder Phenoxyethanol umfasst, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen und/oder den Hydratationseffekt eines Hautprodukts zu steigern. Aspekt 32 hängt von Aspekt 31 ab, der des Weiteren 1 bis 95 Gew.% Wasser, 1 bis 30 Gew.% Glycerin, 0,1 bis 15 Gew.% Pentylenglykol, 0,1 bis 15 Gew.% Betain und/oder 0,05 bis 10 Gew.% Phenoxyethanol umfasst. Aspekt 33 hängt von einem der Aspekte 28 bis 32 ab, der des Weiteren ein oder mehrere von Xanthangummi und Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 34 hängt von Aspekt 33 ab, der des Weiteren 0,01 bis 5 Gew.% Xanthangummi und 0,01 bis 1 Gew.% Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 35 hängt von einem der Aspekte 28 bis 34 ab, bei denen die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt einschließt. Aspekt 36 hängt von Aspekt 35 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,01 bis 0,1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt umfasst. Aspekt 37 hängt von einem der Aspekte 28 bis 36 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,01 bis 10 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 38 hängt von Aspekt 37 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,05 bis 5 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat umfasst. Aspekt 39 hängt von einem der Aspekte 28 bis 38 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Ceramid einschließt. Aspekt 40 hängt von Aspekt 39 ab, bei dem die Zusammensetzung 0,005 bis 0,5 Gew.% Ceramid umfasst. Aspekt 41 hängt von einem der Aspekte 28 bis 40 ab, bei dem die Zusammensetzung 1 bis 30 Gew.% Glycerin umfasst. Aspekt 42 hängt von Aspekt 41 ab, bei dem die Zusammensetzung 5 bis 20 Gew.% Glycerin umfasst. Aspekt 43 hängt von einem der Aspekte 28 bis 42 ab, bei dem die Zusammensetzung des Weiteren 40 bis 85 Gew.% Wasser umfasst. Aspekt 44 hängt von den Aspekten 28 bis 43 ab, bei dem die Zusammensetzung ein Silikon-in-Wasser-Gel ist. Aspekt 45 hängt von den Aspekten 28 bis 44 ab, bei dem die Zusammensetzung in einer Ampulle enthalten ist. Aspekt 46 hängt von einem der Aspekte 28 bis 45 ab, bei dem die effektive Menge einer Kombination aus Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid den Feuchtigkeitsgehalt der Haut nach einer einzigen Auftragung um mindestens 50 % erhöht. Aspekt 47 hängt von einem der Aspekte 28 bis 46 ab, bei dem die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors der Haut zu stimulieren.
In einigen Ausführungsformen können Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung pharmazeutisch oder kosmetisch hochwertig sein oder angenehme taktile Eigenschaften aufweisen. „Pharmazeutisch hochwertig“, „kosmetisch hochwertig“ und/oder „taktil angenehme Eigenschaften“ beschreibt eine Zusammensetzung mit besonderen taktilen Eigenschaften, die sich auf der Haut angenehm anfühlen (z. B. Zusammensetzungen, die nicht zu wässrig oder schmierig sind, Zusammensetzungen mit seidiger Textur, Zusammensetzungen, die nicht haftend oder klebrig sind, usw.). Pharmazeutisch oder kosmetisch hochwertig kann sich auch auf die Cremigkeit oder Schmierfähigkeitseigenschaften der Zusammensetzung oder die Feuchthalteeigenschaften der Zusammensetzung beziehen.
Es ist auch ein Produkt vorgesehen, das eine Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung umfasst. Das Produkt kann in nicht-einschränkenden Aspekten ein Kosmetikprodukt sein. Das Kosmetikprodukt kann solche sein, die in anderen Abschnitten dieser Beschreibung beschrieben oder Fachleuten bekannt sind. Nicht-einschränkende Beispiele für Produkte beinhalten ein Befeuchtungsprodukt, eine Creme, eine Lotion, ein Produkt, um die Haut geschmeidig zu machen, ein Serum, ein Gel, ein Waschpräparat, eine Körperbutter, ein Peelingpräparat, eine Grundierung, eine Nachtcreme, einen Lippenstift, einen Reiniger, ein Tonisierungsmittel, ein Sonnenschutzmittel, eine Maske, ein gegen Alterung wirkendes Produkt (Anti-Aging-Produkt), ein Deodorant, ein Antiperspirant, ein Parfüm, ein Eau de Cologne, usw.
„Topische Auftragung“ bedeutet, eine Zusammensetzung auf die Oberfläche von Lippen oder keratinösem Gewebe aufzutragen oder auszubreiten. „Topische Hautzusammensetzung“ schließt Zusammensetzungen ein, die für die topische Auftragung auf Haut und/oder keratinöses Gewebe geeignet sind. Derartige Zusammensetzungen sind typischerweise dermatologisch annehmbar, als dass sie keine ungeeignete Toxizität, Unverträglichkeit, Instabilität, allergische Reaktion und dergleichen aufweisen, wenn sie auf die Haut und/oder keratinöses Gewebe aufgetragen werden. Topische Hautpflegezusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können eine ausgewählte Viskosität aufweisen, um signifikantes Tropfen oder Zusammenfließen („Pooling“) nach Auftragung auf die Haut und/oder das keratinöse Gewebe zu vermeiden.
„Keratinöses Gewebe“ schließt Keratin enthaltende Schichten ein, die als die äußerste Schutzschicht von Säugern angeordnet sind, wozu ohne Einschränkungen Lippen, Haut, Haar und Nägel gehören.
Der Begriff „etwa“ oder „ungefähr“ ist als nahe an einer Angabe liegend definiert, wie es ein Fachmann verstehen würde. In einer nicht-einschränkenden Ausführungsform sind die Begriffe als innerhalb von 10 %, vorzugsweise innerhalb von 5 %, bevorzugter innerhalb von 1 % und am meisten bevorzugt innerhalb von 0,5 % liegend definiert.
Der Begriff „im Wesentlichen“ und seine Varianten beziehen sich auf Bereiche innerhalb von 10 %, innerhalb von 5 %, innerhalb von 1 % oder innerhalb von 0,5 %.
Die Begriffe „Inhibieren“ oder „Reduzieren“ oder jegliche Variation dieser Begriffe schließt jede messbare Abnahme oder vollständige Inhibierung ein, um ein gewünschtes Ergebnis zu erreichen. Die Begriffe „Fördern“ oder „Erhöhen“ oder jede Variante dieser Begriffe kann einen beliebigen messbaren Anstieg, wie einen messbaren Anstieg eines Proteins oder Moleküls einschließen (z. B. Matrixproteine, wie Fibronectin, Laminin, Kollagen oder Elastin, oder von Molekülen, wie Hyaluronsäure), um ein gewünschtes Ergebnis zu erreichen.
Der Begriff „wirksam“ oder „effektiv“ bedeutet in dem Sinne, wie der Begriff in der Beschreibung und/oder den Ansprüchen verwendet wird, angemessen, um ein gewünschtes, erwartetes oder geplantes Ergebnis zu erhalten.
Die Verwendung des Worts „ein“ oder „eine/eines/einer“ im Zusammenhang mit den Begriffen „umfassend“, „einschließend“, „aufweisend“ oder „enthaltend“ oder jeglicher Variante dieser Begriffe in den Ansprüchen und/oder der Beschreibung kann „ein (1)“ bedeuten, ist jedoch auch konsistent mit der Bedeutung von „einem oder mehreren“, „mindestens eins“ und „ein oder mehr als ein“.
Die Worte „umfassend“ (und jegliche Formen davon, wie „umfassen“, und „umfasst“), „aufweisend“ (und jegliche Form davon, wie „aufweisen“ oder „aufweist“), „einschließlich“ (und jegliche Form davon, wie „einschließen“ oder „einschließt“) oder „enthaltend“ (und jegliche Form davon, wie „enthalten“ und „enthält“) sind in dieser Beschreibung und den Ansprüchen einschließlich oder offen und schließen zusätzliche, nicht genannte Elemente oder Verfahrensschritte nicht aus.
Die Zusammensetzungen und Verfahren zu deren Verwendung können beliebige der in der Beschreibung offenbarten Bestandteile oder Stufen „umfassen“, „im Wesentlichen daraus bestehen“ oder „daraus bestehen“. In Bezug auf die Formulierung „im Wesentlichen bestehend aus“ ist eine grundlegende und neue Eigenschaft der Zusammensetzungen und Verfahren der vorliegenden Erfindung die Fähigkeit, den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren und/oder die Effizienz von Kosmetikprodukten zu erhöhen, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren.
Andere Aufgaben, Merkmale und Vorteile der vorliegenden Erfindung ergeben sich aus der folgenden detaillierten Beschreibung. Es sei jedoch darauf hingewiesen, dass die detaillierte Beschreibung und die Beispiele, obgleich sie spezielle Ausführungsformen der Erfindung darstellen, nur zur Veranschaulichung gegeben werden. Es ist darüber hinaus vorgesehen, dass sich dem Fachmann aus dieser detaillierten Beschreibung Änderungen und Modifikationen innerhalb der Idee und des Umfangs der Erfindung ergeben.
Figurenliste
Die folgenden Zeichnungen sind Teil der vorliegenden Beschreibung und sind eingeschlossen, um bestimmte Aspekte der vorliegenden Erfindung näher zu demonstrieren. Die Erfindung wird unter Bezugnahme auf eine oder mehrere dieser Zeichnungen in Kombination mit der detaillierten Beschreibung von hier präsentierten speziellen Ausführungsformen möglicherweise besser verständlich.

DIE FIGUR ist ein Western Blot-Assay mit den Ergebnissen der Filaggrin-Expressionstests, die verschiedene Testzusammensetzungen verwenden. Die biotinylierte Leiter in Spalte 1 schließt eine Mischung gereinigter Referenzproteine mit Molekulargewichten im Bereich von 9 bis 200 kDa ein. Die Zusammensetzungen in Spalte 2 bis 8 wurden auf Effekte auf die Expression von Filaggrinprotein getestet, das bei -40 kDa erscheint. Quantifizierung der Testzusammensetzungen der Spalten 2 bis 8 zeigten, dass Verbena officinalis-Extrakt in Spalte 5 den größten Anstieg der Expression von Filaggrinprotein (>66 %) bewirkte.

BESCHREIBUNG BEISPIELHAFTER AUSFÜHRUNGSFORMEN
Die vorliegende Erfindung stellt, wie bereits gesagt, eine Lösung für die Probleme im Zusammenhang mit aktuellen kosmetischen Produkten bereit. In einigen Ausführungsformen wurde gefunden, dass eine effektive Menge einer Zusammensetzung, die beliebige von, eine beliebige Kombination von oder alle von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysierter Hyaluronsäure und/oder Ceramid einschließt, den Feuchtigkeitsgehalt der Haut erhöht. Es wurde auch gezeigt, dass die Kombination der Bestandteile die Hautfeuchtigkeit beibehielt und optimale Barrierefunktion unterstützte. Es wurde auch gezeigt, dass die Kombination der Bestandteile Feuchtigkeit aus der Luft zog, um die Haut von außerhalb zu hydratisieren. Es wurde zudem gezeigt, dass die Kombination der Bestandteile das Stratum corneum durchdrang, um Feuchtigkeit abzugeben und die Haut von innen aufzupolstern und zu straffen. Es wurde darüber hinaus gezeigt, dass die Kombination von Bestandteilen die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors stimulierte, um Hauthydratation und Barrierefunktion weiter zu verbessern. Es wurde darüber hinaus gezeigt, dass die Kombination der Bestandteile nach einer einzigen Auftragung den Feuchtigkeitsgehalt der Haut um mindestens 50 % erhöhte.
Es wurde gezeigt, dass Ceramid die Hautfeuchtigkeit beibehielt und optimale Barrierefunktion unterstützte. Es wurde gezeigt, dass hydrolysierte Hyaluronsäure das Stratum corneum durchdrang, um Feuchtigkeit abzugeben und die Haut von innen aufzupolstern und zu straffen. Es wurde gezeigt, dass Verbena officinalis-Extrakt die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors stimulierte, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut und die Barrierefunktion weiter zu verbessern. Es wurde gezeigt, dass Glycerin die Fähigkeit der obigen Bestandteile steigerte, den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu boostern und/oder die hauteigene natürliche Hydratation zu stimulieren. Es wurde gezeigt, dass Hyaluronsäure die Fähigkeiten der obigen Bestandteile steigerte, Feuchtigkeit aus der Luft zu ziehen, um die Haut zu schützen und von außen her zu hydratisieren.
Eine besondere Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung ist so konzipiert, dass sie als topische Zusammensetzung fungiert. Die Zusammensetzung basiert auf einer einzigartigen Kombination von beliebigen von, einer beliebigen Kombination von oder allen von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysierter Hyaluronsäure und/oder Ceramid. Die Kombination kann verwendet werden, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Die Kombination kann auch verwendet werden, um die Wirksamkeit von kosmetischen Produkten zu erhöhen, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren. Nicht-einschränkende Beispiele für derartige Zusammensetzungen sind in Tabelle 1 des folgenden Beispiels 1 gezeigt.
Einige darin offenbarte Zusammensetzungen können auf die Haut aufgetragen werden und bleiben für einen Zeitraum auf der Haut (z. B. mindestens 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30 oder 60 Minuten oder mehr). Danach kann die Zusammensetzung, falls notwendig, von der Haut abgespült oder von der Haut abgezogen werden. Einige hier offenbarte Zusammensetzungen können auf die Haut aufgetragen und sofort von der Haut abgespült werden. Einige hier offenbarte Zusammensetzungen können auf die Haut aufgetragen und mindestens teilweise durch die Haut absorbiert werden. Solche Zusammensetzungen sind konzipiert, um auf der Haut belassen zu werden.
Diese und andere nicht-einschränkende Aspekte der vorliegenden Erfindung werden in den folgenden Abschnitten beschrieben.
A. Aktive Bestandteile
Verbena officinalis-Extrakt - Verbena Officinalis-Extrakt ist ein Extrakt der Blätter der Pflanze Verbena officinalis. Verbena Officinalis-Extrakt fungiert in Kosmetika als Aufweichmittel und Hautkonditionierungsmittel. Verbena Officinalis-Extrakt enthält Iridoid-, Phenylpropanoid-, Flavonoid-, Luteolin- und Terpenoidverbindungen und zeigt auch Antioxidans- und antibakterielle Aktivität. Es ist auch gezeigt worden, dass Verbena officinalis-Extrakt die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors, einer Gruppe von Aminosäuren und wasserlöslichen Verbindungen, stimuliert. Natürlicher Feuchtigkeitsfaktor (Natural Moisturizing Factor, NMF) wird in der Haut als natürliches Abbauprodukt von Filaggrin im Stratum corneum produziert und wirkt zur Erhaltung der Hauthydratation, lokalen Immunreaktion und der Barrierefunktion. Der Verbena officinalis-Extrakt ist in einigen Ausführungsformen ein wässriger Extrakt.
Hyaluronsäure - Hyaluronsäure ist ein natürlich vorkommendes Glykosaminoglykan, das sich im gesamten Bindegewebe des Körpers findet, einschließlich der Haut, wo es an der Gewebereparatur beteiligt ist. Sowohl natürliche als auch synthetische Hyaluronsäuren werden in Kosmetika als Feuchthaltemittel verwendet und sind in der Lage, bis zu dem 1000-fachen des Eigengewichts an Wasser zu binden. Hyaluronsäure hält die Oberfläche der Haut hydratisiert, indem Wasser aus der Luft absorbiert wird und die Rate verlangsamt wird, mit der Wasser aus der Haut verdunstet. Hydrolysierte Hyaluronsäure ist das Hydrolysat von Hyaluronsäure, das durch saure, enzymatische oder sonstige Hydrolyse gewonnen wird. Hydrolysierte Hyaluronsäure wird auch als Feuchthaltemittel und Hautkonditionierungsmittel klassifiziert. Hydrolysierte Hyaluronsäure ist aufgrund eines niedrigeren Molekulargewichts imstande, das Stratum corneum zu durchdringen, gebundenes Wasser unter die Hautoberfläche zu tragen und die Haut von innen aufzupolstern und zu straffen.
Ceramide - Ceramide sind der Hauptlipidbestandteil des Stratum corneums und werden als Barrierewirkung der Epidermis, der äußersten Hautschicht, angesehen. Da die Ceramidgehalte mit der normalen Alterung absinken, kann die Hautbarriere unterbrochen werden, was zu Röte, Trockenheit und Hautreizung führt. Synthetische Ceramide werden in Hautpflegeprodukten verwendet, um die Hautbarriere aufrechtzuhalten, Feuchtigkeit einzuschließen und die Haut hydratisiert zu halten, Hautreizung durch Exposition gegenüber der Umgebung vorzubeugen und zu behandeln und das Erscheinungsbild feiner Linien und anderer Anzeichen von Alterung zu reduzieren.
Diese Kombination von Bestandteilen kann in unterschiedlichen Produktformen verwendet werden, um verschiedene Hautzustände zu behandeln. Die Kombination von Bestandteilen kann als nicht-einschränkende Beispiele zu einer Ampulle, einer Emulsion (z. B. Öl in Wasser, Wasser in Öl), einem Gel, einem Serum, einer Gelemulsion, einem Gelserum, einer Lotion, einer Maske, einem Peeling, einem Waschpräparat, einer Creme oder einer Körperbutter formuliert werden.
Die hier beschriebenen Komponenten können Extrakte sein, die durch in der Technik bekannte Extraktionsverfahren und Kombinationen davon hergestellt worden sind. Nicht-einschränkende Beispiele für Extraktionsmethoden schließen die Verwendung von Flüssig-Flüssig-Extraktion, Festphasenextraktion, wässriger Extraktion, Ethylacetat, Alkohol, Aceton, Öl, überkritischem Kohlendioxid, Wärme, Druck, Druckabfallextraktion, Ultraschallextraktion, usw. ein. Die Extrakte können eine Flüssigkeit, ein Feststoff, getrocknete Flüssigkeit, resuspendierter Feststoff, usw. sein.
B. Mengen der Bestandteile
Es ist vorgesehen, dass die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen jegliche Menge der in dieser Beschreibung erörterten Bestandteile einschließen können. Die Zusammensetzungen können auch jegliche Anzahl an Kombinationen von zusätzlichen Bestandteilen einschließen, die in dieser Beschreibung beschrieben sind (z. B. Pigmente oder zusätzliche kosmetische oder pharmazeutische Bestandteile). Die Konzentration des beliebigen Bestandteils innerhalb der Zusammensetzungen kann variieren. Die Zusammensetzungen können in nicht-einschränkenden Ausführungsformen beispielsweise in fertiger Form mindestens etwa 0,0001 %, 0,0002 %, 0,0003 %, 0,0004 %, 0,0005 %, 0,0006 %, 0,0007 %, 0,0008 %, 0,0009 %, 0,0010 %, 0,0011 %, 0,0012 %, 0,0013 %, 0,0014 %, 0,0015 %, 0,0016 %, 0,0017 %, 0,0018 %, 0,0019 %, 0,0020 %, 0,0021 %, 0,0022 %, 0,0023 %, 0,0024 %, 0,0025 %, 0,0026 %, 0,0027 %, 0,0028 %, 0,0029 %, 0,0030 %, 0,0031 %, 0,0032 %, 0,0033 %, 0,0034 %, 0,0035 %, 0,0036 %, 0,0037 %, 0,0038 %, 0,0039 %, 0,0040 %, 0,0041 %, 0,0042 %, 0,0043 %, 0,0044 %, 0,0045 %, 0,0046 %, 0,0047 %, 0,0048 %, 0,0049 %, 0,0050 %, 0,0051 %, 0,0052 %, 0,0053 %, 0,0054 %, 0,0055 %, 0,0056 %, 0,0057 %, 0,0058 %, 0,0059 %, 0,0060 %, 0,0061 %, 0,0062 %, 0,0063 %, 0,0064 %, 0,0065 %, 0,0066 %, 0,0067 %, 0,0068 %, 0,0069 %, 0,0070 %, 0,0071 %, 0,0072 %, 0,0073 %, 0,0074 %, 0,0075 %, 0,0076 %, 0,0077 %, 0,0078 %, 0,0079 %, 0,0080 %, 0,0081 %, 0,0082 %, 0,0083 %, 0,0084 %, 0,0085 %, 0,0086 %, 0,0087 %, 0,0088 %, 0,0089 %, 0,0090 %, 0,0091 %, 0,0092 %, 0,0093 %, 0,0094 %, 0,0095 %, 0,0096 %, 0,0097 %, 0,0098 %, 0,0099 %, 0,0100 %, 0,0200 %, 0,0250 %, 0,0275 %, 0,0300 %, 0,0325 %, 0,0350 %, 0,0375 %, 0,0400 %, 0,0425 %, 0,0450 %, 0,0475 %, 0,0500 %, 0,0525 %, 0,0550 %, 0,0575 %, 0,0600 %, 0,0625 %, 0,0650 %, 0,0675 %, 0,0700 %, 0,0725 %, 0,0750 %, 0,0775 %, 0,0800 %, 0,0825 %, 0,0850 %, 0,0875 %, 0,0900 %, 0,0925 %, 0,0950 %, 0,0975 %, 0,1000 %, 0,1250 %, 0,1500 %, 0,1750 %, 0,2000 %, 0,2250 %, 0,2500 %, 0,2750 %, 0,3000 %, 0,3250 %, 0,3500 %, 0,3750 %, 0,4000 %, 0,4250 %, 0,4500 %, 0,4750 %, 0,5000 %, 0,5250 %, 0,0550 %, 0,5750 %, 0,6000 %, 0,6250 %, 0,6500 %, 0,6750 %, 0,7000 %, 0,7250 %, 0,7500 %, 0,7750 %, 0,8000 %, 0,8250 %, 0,8500 %, 0,8750 %, 0,9000 %, 0,9250 %, 0,9500 %, 0,9750 %, 1,0 %, 1,1 %, 1,2 %, 1,3 %, 1,4 %, 1,5 %, 1,6 %, 1,7 %, 1,8 %, 1,9 %, 2,0 %, 2,1 %, 2,2 %, 2,3 %, 2,4 %, 2,5 %, 2,6 %, 2,7 %, 2,8 %, 2,9 %, 3,0 %, 3,1 %, 3,2 %, 3,3 %, 3,4 %, 3,5 %, 3,6 %, 3,7 %, 3,8 %, 3,9 %, 4,0 %, 4,1 %, 4,2 %, 4,3 %, 4,4 %, 4,5 %, 4,6 %, 4,7 %, 4,8 %, 4,9 %, 5,0 %, 5,1 %, 5,2 %, 5,3 %, 5,4 %, 5,5 %, 5,6 %, 5,7 %, 5,8 %, 5,9 %, 6,0 %, 6,1 %, 6,2 %, 6,3 %, 6,4 %, 6,5 %, 6,6 %, 6,7 %, 6,8 %, 6,9 %, 7,0 %, 7,1 %, 7,2 %, 7,3 %, 7,4 %, 7,5 %, 7,6 %, 7,7 %, 7,8 %, 7,9 %, 8,0 %, 8,1 %, 8,2 %, 8,3 %, 8,4 %, 8,5 %, 8,6 %, 8,7 %, 8,8 %, 8,9 %, 9,0 %, 9,1 %, 9,2 %, 9,3 %, 9,4 %, 9,5 %, 9,6 %, 9,7 %, 9,8 %, 9,9 %, 10 %, 11 %, 12 %, 13 %, 14 %, 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 %, 22 %, 23 %, 24 %, 25 %, 26 %, 27 %, 28 %, 29 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % oder 99 % oder jeden davon ableitbaren Bereich von mindestens einem der Bestandteile umfassen, im Wesentlichen daraus bestehen oder daraus bestehen, die in der Beschreibung und den Ansprüchen genannt sind. Der Prozentsatz kann in nicht-einschränkenden Aspekten bezogen auf Gewicht oder Volumen der Gesamtzusammensetzung berechnet werden. Ein Fachmann würde verstehen, dass die Konzentrationen je nach Zugabe, Ersetzung und/oder Subtraktion der Bestandteile in einer gegebenen Zusammensetzungen variieren können.
C. Vehikel
Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können in alle Arten von Vehikeln oder Trägern eingeschlossen oder eingebracht werden. Das Vehikel oder der Träger kann ein pharmazeutisch oder dermatologisch annehmbares Vehikel oder ein pharmazeutisch oder dermatologisch annehmbarer Träger sein. Zu nicht-einschränkenden Beispielen für Vehikel oder Träger gehören Wasser, Glycerin, Alkohol, Öl, eine Silicium enthaltende Verbindung, eine Silikonverbindung und Wachs. Variationen und sonstige geeignete Vehikel sind dem Fachmann offensichtlich und sind für die Verwendungen in der vorliegenden Erfindung geeignet. Die Konzentrationen und Kombinationen der Verbindungen, Bestandteile und Mittel können in bestimmten Aspekten so gewählt werden, dass die Kombinationen chemisch verträglich sind und keine Komplexe bilden, die aus dem fertigen Produkt ausfallen.
D. Struktur
Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können in eine Palette unterschiedlicher Formen strukturiert oder formuliert werden. Nicht-einschränkende Beispiele schließen Emulsionen (z. B. Wasser-in-Öl, Wasser-in-Öl-in-Wasser, Öl-in-Wasser, Silikon-in-Wasser, Wasser-in-Silikon, Öl-in-Wasser-in-Öl, Öl-in-Wasser-in-Silikon-Emulsionen), Cremes, Lotionen, Lösungen (sowohl wässrig als auch hydroalkoholisch), wasserfreie Grundlagen (wie Lippenstifte und Puder), Gele, Masken, Peelings, Körperbutterpräparate, abziehbare Präparate und Salben ein. Variationen und sonstige Strukturen sind dem Fachmann offensichtlich und sind für die Verwendungen in der vorliegenden Erfindung geeignet.
E. Zusätzliche Bestandteile
Zusätzlich zu der von den Erfindern offenbarten Kombination von Bestandteilen können die Zusammensetzungen auch zusätzliche Bestandteile einschließen, wie Kosmetikbestandteile und pharmazeutisch wirksame Bestandteile. Nicht-einschränkende Beispiele für diese zusätzlichen Bestandteile sind in den folgenden Unterabschnitten beschrieben.
1. Kosmetikbestandteile
Das CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook (2004 und 2008) beschreibt eine umfassende Palette nicht-einschränkender Kosmetikbestandteile, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können. Beispiele für diese Bestandteilklassen schließen ein: Duftstoffmittel (synthetisch und natürlich, z. B. Gluconsäure, Phenoxyethanol und Triethanolamin), Farbstoffe und Farbbestandteile (z. B. Blue 1, Blue 1 Lake, Red 40, Titandioxid, D&C Blau Nr. 4, D&C Grün Nr. 5, D&C Orange Nr. 4, D&C Rot Nr. 17, D&C Rot Nr. 33, D&C Violett Nr. 2, D&C Gelb Nr. 10 und D&C Gelb Nr. 11), geschmackgebende Mittel/Aromamittel (z. B. Stevia rebaudiana (Honigkraut)-Extrakt und Menthol), Adsorbentien, Schmiermittel, Lösungsmittel, Befeuchtungsmittel (einschließlich z. B. Aufweichmitteln, Feuchthaltemitteln, Filmbildnern, Okklusionsmitteln und Mitteln, die die natürlichen Befeuchtungsmechanismen der Haut beeinflussen), Wasserabweisemittel, UV-Absorbentien (physikalische und chemische Absorbentien, wie para-Aminobenzoesäure („PABA“) und entsprechende PABA-Derivate, Titandioxid, Zinkoxid, usw.), etherische Öle, Vitamine (z. B. A, B, C, D, E und K), Spurenmetalle (z. B. Zink, Calcium und Selen), Reizlinderungsmittel (z. B. Steroide und nicht-steroidale Entzündungshemmer), botanische Extrakte (z. B. Aloe vera, Kamille, Gurkenextrakt, Ginkgo biloba, Ginseng und Rosmarin), antimikrobielle Mittel, Antioxidantien (z. B. BHT und Tokopherol), Chelatbildner (z. B. Dinatrium-EDTA und Tetranatrium-EDTA), Konservierungsmittel (z. B. Methylparaben und Propylparaben), pH-Werteinstellmittel (z. B. Natriumhydroxid und Citronensäure), Absorbentien (z. B. Aluminiumstärkeoctenylsuccinat, Kaolin, Maisstärke, Haferstärke, Cyclodextrin, Talkum und Zeolith), Hautbleich- und -aufhellungsmittel (z. B. Hydrochinon und Niacinamidlactat), Feuchthaltemittel (z. B. Sorbit, Harnstoff, Methylgluceth-20, Saccharidisomerat und Mannit), Schälmittel, wasserabweisend machende Mittel (z. B. Magnesium/Aluminiumhydroxidstearat), Hautkonditionierungsmittel (z. B. Aloe-Extrakte, Allantoin, Bisabolol, Ceramide, Dimethicon, Hyaluronsäure, Biosaccharidgum-1, Ethylhexylglycerin, Pentylenglykol, hydriertes Polydecen, Octyldodecyloleat, Gluconolacton, Calciumgluconat, Cyclohexasiloxan und Dikaliumglycyrrhizat). Nicht-einschränkende Beispiele für diese Bestandteile sind in den folgenden Unterabschnitten beschrieben.
a. UV-Absorptions- und/oder -Reflexionsmittel
UV-Absorptionsmittel und/oder -Reflexionsmittel, die in Kombination mit den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen verwendet werden können, schließen chemische und physikalische Sonnenblockierungsmittel (Sunblocker) ein. Nicht einschränkende Beispiele für chemische Sunblocker, die verwendet werden können, umfassen para-Aminobenzoesäure (PABA), PABA-Ester (Glyceryl-PABA, Amyldimethyl-PABA und Octyldimethyl-PABA), Butyl-PABA, Ethyl-PABA, Ethyldihydroxypropyl-PABA, Benzophenone (Oxybenzon, Sulisobenzon, Benzophenon und Benzophenon-1 bis 12), Cinnamate (Octylmethoxycinnamat (Octinoxat), Isoamyl-p-methoxycinnamat, Octylmethoxycinnamat, Cinoxat, Diisopropylmethylcinnamat, DEA-Methoxycinnamat, Ethyldiisopropylcinnamat, Glyceryloctanoatdimethoxycinnamat und Ethylmethoxycinnamat), Cinnamatester, Salicylate (Homomethylsalicylat, Benzylsalicylat, Glykolsalicylat, Isopropylbenzylsalicylat, usw.), Anthranilate, Ethylurocanat, Homosalat, Octisalat Dibenzoylmethanderivative (z. B. Avobenzon), Octocrylen, Octyltriazon, Digalloytrioleat, Glycerylaminobenzoat, Lawson mit Dihydroxyaceton, Ethylhexyltriazon, Dioctylbutamidotriazon, Benzylidenmalonatpolysiloxan, Terephthalylidendikamphersulfonsäure, Dinatriumphenyldibenzimidazoltetrasulfonat, Diethylaminohydroxybenzoylhexylbenzoat, Bisdiethylaminohydroxybenzoylbenzoat, Bisbenzoxazoylphenylethylhexyliminotriazin, Drometrizoltrisiloxan, Methylenbisbenzotriazolyltetramethylbutylphenol und Bisethylhexyloxyphenolmethoxyphenyltriazin, 4-Methylbenzylidenkampher und Isopentyl-4-methoxycinnamat. Nicht-einschränkende Beispiele für physikalische Sunblocker schließen Kaolin, Talkum, Petrolatum und Metalloxide (z. B. Titandioxid und Zinkoxid) ein.
b. Befeuchtungsmittel
Nicht-einschränkende Beispiele für Befeuchtungsmittel, die mit den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen verwendet werden können, umfassen Aminosäuren, Chondroitinsulfat, Diglycerin, Erythritol, Fructose, Glucose, Glycerin, Glycerinpolymere, Glykol, 1,2,6-Hexantriol, Honig, Hyaluronsäure, hydrierten Honig, hydriertes Stärkehydrolysat, Inosit, Lactit, Maltit, Maltose, Mannit, natürlichen Befeuchtungsfaktor, PEG-15-Butandiol, Polyglycerylsorbitol, Salze von Pyrrolidoncarbonsäure, Kalium-PCA, Propylenglykol, Saccharidisomerat, Natriumglucuronat, Natrium-PCA, Sorbit, Sucrose, Trehalose, Harnstoff und Xylit.
Zu anderen Beispielen gehören acetyliertes Lanolin, acetylierter Lanolinalkohol, Alanin, Algenextrakt, Aloe barbadensis, Aloe barbadensis-Extrakt, Aloe barbadensis-Gel, Althea officinalis-Extrakt, Aprikosen (Prunus armeniaca)-Kernöl, Arginin, Argininaspartat, Arnica montana-Extrakt, Asparaginsäure, Avocado (Persea gratissima)-Öl, Barrieresphingolipide, Butylalkohol, Bienenwachs, Behenylalkohol, beta-Sitosterol, Birken (Betula alba)-Rindenextrakt, Borretsch (Borago officinalis) -Extrakt, stechender Mäusedorn (Ruscus aculeatus)-Extrakt, Butylenglykol, Calendula officinalis-Extrakt, Calendula officinalis-Öl, Candelilla (Euphorbia cerifera)-Wachs, Canolaöl, Capryl-/Caprintriglycerid, Kardamom (Elettaria cardamomum)-Öl, Carnauba (Copernicia cerifera)-Wachs, Karotten (Daucus carota sativa)-Öl, Castor (Ricinus communis)-Öl, Ceramide, Ceresin, Ceteareth-5, Ceteareth-12, Ceteareth-20, Cetearyloctanoat, Ceteth-20, Ceteth-24, Cetylacetat, Cetyloctanoat, Cetylpalmitat, Kamillen (Anthemis nobilis)-Öl, Cholesterin, Cholesterinester, Cholesterylhydroxystearat, Citronensäure, Muskatellersalbei (Salvia sclarea)-Öl, Kakao (Theobroma cacao)-Butter, Cococaprylat/-caprat, Kokosnuss (Cocos nucifera)-Öl, Kollagen, Kollagenaminosäuren, Mais (Zea mays)-Öl, Fettsäuren, Decyloleat, Dimethiconcopolyol, Dimethiconol, Dioctyladipat, Dioctylsuccinat, Dipentaerythritylhexacaprylat/-hexacaprat, DNA, Erythrit, Ethoxydiglykol, Ethyllinoleat, Eucalyptus globulus-Öl, Nachtkerzen (Oenothera biennis)-Öl, Fettsäuren, Geranium maculatum-Öl, Glucosamin, Glucoseglutamat, Glutaminsäure, Glycereth-26, Glycerin, Glycerol, Glyceryldistearat, Glycerylhydroxystearat, Glyceryllaurat, Glyceryllinoleat, Glycerylmyristat, Glyceryloleat, Glycerylstearat, Glycerylstearat SE, Glycin, Glykolstearat, Glykolstearat SE, Glycosaminoglycane, Trauben (Vitis vinifera) Kernöl, Haselnuss (Corylus americana)-Öl, Haselnuss (Corylus avellana)-Öl, Hexylenglykol, Hyaluronsäure, Hybrid-Färberdistel (Carthamus tinctorius)-Öl, hydriertes Castoröl, hydrierte Kokosglyceride, hydriertes Kokosnussöl, hydriertes Lanolin, hydriertes Lecithin, hydriertes Palmglycerid, hydriertes Palmkernöl, hydriertes Sojabohnen, hydriertes Talgglycerid, hydriertes pflanzliches Öl, hydrolysiertes Kollagen, hydrolysiertes Elastin, hydrolysierte Glycosaminoglycane, hydrolysiertes Keratin, hydrolysiertes Sojaprotein, hydroxyliertes Lanolin, Hydroxyprolin, Isocetylstearat, Isocetylstearoylstearat, Isodecyloleat, Isopropylisostearat, Isopropyllanolat, Isopropylmyristat, Isopropylpalmitat, Isopropylstearat, Isostearamid DEA, Isostearinsäure, Isostearyllactat, Isostearylneopentanoat, Jasmin (Jasminum officinale)-Öl, Jojoba (Buxus chinensis)-Öl, Kelp, Kukui (Aleurites moluccana)-Nussöl, Lactamid MEA, Laneth-16, Laneth-10-acetat, Lanolin, Lanolinsäure, Lanolinalkohol, Lanolinöl, Lanolinwachs, Lavendel (Lavandula angustifolia)-Öl, Lecithin, Zitronen (Citrus medica limonum)-Öl, Linolsäure, Linolensäure, Macadamia ternifolia-Nussöl, Maltit, Matricaria (Chamomilla recutita)-Öl, Methylglucosesesquistearat, Methylsilanol PCA, Mineralöl, Nerzöl, Mortierellaöl, Myristyllactat, Myristylmyristat, Myristylpropionat, Neopentylglykoldicaprylat/-dicaprat, Octyldodecanol, Octyldodecylmyristat, Octyldodecylstearoylstearat, Octylhydroxystearat, Octylpalmitat, Octylsalicylat, Octylstearat, Ölsäure, Olive (Olea europaea)-Öl, Orangen (Citrus aurantium dulcis)-Öl, Palm (Elaeis guineensis)-Öl, Palmitinsäure, Pantethin, Panthenol, Panthenylethylether, Paraffin, PCA, Pfirsich (Prunus persica)-Kernöl, Erdnuss (Arachis hypogaea)-Öl, PEG-8 C_12-18-Ester, PEG-15-Kokosamin, PEG-150-Distearat, PEG-60-Glycerylisostearat, PEG-5-Glycerylstearat, PEG-30-Glycerylstearat, PEG-7-hydriertes Castoröl, PEG-40-hydriertes Castoröl, PEG-60-hydriertes Castoröl, PEG-20-Methylglucosesesquistearat, PEG-40-Sorbitanperoleat, PEG-5-Sojasterol, PEG-10-Sojasterol, PEG-2-Stearat, PEG-8-Stearat, PEG-20-Stearat, PEG-32-Stearat, PEG-40-Stearat, PEG-50-Stearat, PEG-100-Stearat, PEG-150-Stearat, Pentadecalacton, Pfefferminz (Mentha piperita)-Öl, Vaseline, Phospholipide, Planktonextrakt, Polyaminozuckerkondensat, Polyglyceryl-3-diisostearat, Polyquaternium-24, Polysorbat 20, Polysorbat 40, Polysorbat 60, Polysorbat 80, Polysorbat 85, Kaliummyristat, Kaliumpalmitat, Propylenglykol, Propylenglykoldicaprylat/-dicaprat, Propylenglykoldioctanoat, Propylenglykoldipelargonat, Propylenglykollaurat, Propylenglykolstearat, Propylenglykolstearat SE, PVP, Pyridoxindipalmitat, Retinol, Retinylpalmitat, Reis (Oryza sativa)-Kleieöl, RNA, Rosmarin (Rosmarinus officinalis)-Öl, Rosenöl, Färberdistel (Carthamus tinctorius)-Öl, Salbei (Salvia officinalis)-Öl, Sandelholz (Santalum album)-Öl, Serin, Serumprotein, Sesam (Sesamum indicum)-Öl, Shea-Butter (Butyrospermum parkii), Seidenpulver, Natriumchondroitinsulfat, Natriumhyaluronat, Natriumlactat, Natriumpalmitat, Natrium-PCA, Natriumpolyglutamat, lösliches Kollagen, Sorbitanlaurat, Sorbitanoleat, Sorbitanpalmitat, Sorbitansesquioleat, Sorbitanstearat, Sorbit, Sojabohnen (Glycine soja)-Öl, Sphingolipide, Squalan, Squalen, Stearamid MEA-Stearat, Stearinsäure, Stearoxydimethicon, Stearoxytrimethylsilan, Stearylalkohol, Stearylglycyrrhetinat, Stearylheptanoat, Stearylstearat, Sonnenblumen (Helianthus annuus)-Samenöl, Süßmandel (Prunus amygdalus dulcis)-Öl, synthetisches Bienenwachs, Tocopherol, Tocopherylacetat, Tocopheryllinoleat, Tribehenin, Tridecylneopentanoat, Tridecylstearat, Triethanolamin, Tristearin, Harnstoff, pflanzliches Öl, Wasser, Wachse, Weizen (Triticum vulgare)-Keimöl und Ylang (Cananga odorata)-Öl.
c. Antioxidantien
Nicht einschränkende Beispiele für Antioxidantien, die mit den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen verwendet werden können, umfassen Acetylcystein, Ascorbinsäurepolypeptid, Ascorbyldipalmitat, Ascorbylmethylsilanolpectinat, Ascorbylpalmitat, Ascorbylstearat, BHA, BHT, t-Butylhydrochinon, Cystein, CysteinHCl, Diamylhydrochinon, Di-t-butylhydrochinon, Dicetylthiodipropionat, Dioleyltocopherylmethylsilanol, Dinatriumascorbylsulfat, Distearylthiodipropionat, Ditridecylthiodipropionat, Dodecylgallat, Erythorbinsäure, Ester von Ascorbinsäure, Ethylferulat, Ferulasäure, Gallsäureester, Hydrochinon, Isooctylthioglycolat, Kojisäure, Magnesiumascorbat, Magnesiumascorbylphosphat, Methylsilanolascorbat, natürliche botanische Antioxidantien, wie grünen Tee oder Traubenkernextrakte, Nordihydroguaiaretsäure, Octylgallat, Phenylthioglykolsäure, Kaliumascorbyltocopherylphosphat, Kaliumsulfit, Propylgallat, Chinone, Rosmarinsäure, Natriumascorbat, Natriumbisulfit, Natriumerythorbat, Natriummetabisulfit, Natriumsulfit, Superoxiddismutase, Natriumthioglykolat, Sorbitylfurfural, Thiodiglykol, Thiodiglykolamid, Thiodiglykolsäure, Thioglykolsäure, Thiomilchsäure, Thiosalicylsäure, Tocophereth-5, Tocophereth-10, Tocophereth-12, Tocophereth-18, Tocophereth-50, Tocopherol, Tocophersolan, Tocopherylacetat, Tocopheryllinoleat, Tocopherylnicotinat, Tocopherylsuccinat und Tris(nonylphenyl)phosphit.
d. Strukturierungsmittel
Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können in anderen nicht einschränkenden Aspekten ein Strukturierungsmittel einschließen. Strukturierungsmittel helfen in einigen Aspekten, der Zusammensetzung rheologische Charakteristika bereitzustellen, um zur Stabilität der Zusammensetzung beizutragen. Strukturierungsmittel können in anderen Aspekten auch als Emulgator oder Tensid fungieren. Nicht einschränkende Beispiele für Strukturierungsmittel umfassen Natriumcocoylglutamat, Hydroxypropylcyclodextrin, Stearinsäure, Palmitinsäure, Stearylalkohol, Cetylalkohol, Behenylalkohol, Stearinsäure, Palmitinsäure, den Polyethylenglykolether von Stearylalkohol mit durchschnittlich etwa 1 bis etwa 21 Ethylenoxideinheiten, den Polyethylenglykolether von Cetylalkohol mit durchschnittlich etwa 1 bis etwa 5 Ethylenoxideinheiten, sowie Mischungen davon.
e. Emulgatoren
Die Zusammensetzungen schließen in bestimmten Aspekten der vorliegenden Erfindung keinen Emulgator ein. Die Zusammensetzungen können in anderen Aspekten einen oder mehrere Emulgatoren einschließen. Emulgatoren können die Grenzflächenspannung zwischen Phasen reduzieren und die Formulierung und Stabilität einer Emulsion verbessern. Die Emulgatoren können nichtionische, kationische, anionische und zwitterionische Emulgatoren sein (siehe US-Patente Nr. 5,011,681; 4,421,769; 3,755,560). Nicht einschränkende Beispiele schließen Ester von Glycerin, Ester von Propylenglykol, Fettsäureester von Polyethylenglykol, Fettsäureester von Polypropylenglykol, Ester von Sorbit, Ester von Sorbitananhydriden, Carbonsäurecopolymere, Ester und Ether von Glucose, ethoxylierte Ether, ethoxylierte Alkohole, Alkylphosphate, Polyoxyethylenfettetherphosphate, Fettsäureamide, Acyllactylate, Seifen, TEA-Stearat, DEA-Oleth-3-phosphat, Polyethylenglykol 20-Sorbitanmonolaurat (Polysorbat 20), Polyethylenglykol 5-Sojasterol, Steareth-2, Steareth-20, Steareth-21, Ceteareth-20, Cetearylglucosid, Cetearylalkohol, C_12-13-Pareth-3, PPG-2-Methylglucoseetherdistearat, PPG-5-Ceteth-20, Bis-PEG/PPG-20/20-dimethicon, Ceteth-10, Polysorbat 80, Cetylphosphat, Kaliumcetylphosphat, Diethanolamincetylphosphat, Polysorbat 60, Glycerylstearat, PEG-100-Stearat, Arachidylalkohol, Arachidylglucosid und Mischungen davon ein.
f. Silikonhaltige Verbindungen
In nicht einschränkenden Aspekten umfassen silikonhaltige Verbindungen jedes Mitglied einer Familie von polymeren Produkten, dessen molekulares Grundgerüst aus alternierenden Silikon und Sauerstoffatomen zusammengesetzt ist, wobei Seitengruppen an die Siliciumatome gebunden sind. Durch Variieren der -Si-O-Kettenlängen, Seitengruppen und Vernetzung können Silikone in einer weiten Vielfalt von Materialien synthetisiert werden. In der Konsistenz können sie von Flüssigkeit über Gel bis Feststoffen variieren
Die Silikon enthaltenden Verbindungen, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, schließen diejenigen ein, die in dieser Beschreibung beschrieben sind oder einem Fachmann bekannt sind. Nicht-einschränkende Beispiele schließen Silikonöle (z. B. flüchtige und nichtflüchtige Öle), Gele und Feststoffe ein. Die silikonhaltigen Verbindungen umfassen in bestimmten Aspekten Silikonöle, wie ein Polyorganosiloxan. Nicht einschränkende Beispiele für Polyorganosiloxane umfassen Dimethicon, Cyclomethicon, Cyclohexasiloxan, Polysilicon-11, Phenyltrimethicon, Trimethylsilylamodimethicon, Stearoxytrimethylsilan oder Mischungen von diesen und anderen Organosiloxanmaterialien in beliebigem Verhältnis, um die gewünschten Konsistenz und Auftragungseigenschaften je nach vorgesehener Auftragung zu erhalten (z. B. für einen speziellen Bereich, wie Haut, Haar oder Augen). Ein „flüchtiges Silikonöl“ schließt ein Silikonöl mit einer niedrigen Verdampfungswärme ein, d. h. normalerweise weniger als 50 cal pro Gramm Silikonöl. Nicht-einschränkende Beispiele für flüchtige Silikonöle schließen ein: Cyclomethicone wie Dow Corning 344 Fluid, Dow Corning 345 Fluid, Dow Corning 244 Fluid und Dow Corning 245 Fluid, Volatile Silicon 7207 (Union Carbide Corp., Danbury, Conn., USA), niedrigviskose Dimethicone, d. h. Dimethicone mit einer Viskosität von etwa 50 cst oder weniger (z. B. Dimethicone wie Dow Corning 200-0,5 cst Fluid). Die Dow Corning Fluids sind von Dow Corning Corporation, Midland, Michigan, USA, erhältlich. Cyclomethicon und Dimethicon sind in der dritten Auflage des CTFA Cosmetic Ingredient Dictionary (durch Bezugnahme eingeschlossen) als cyclische Dimethylpolysiloxanverbindungen beziehungsweise eine Mischung aus vollständig methylierten linearen Siloxanpolymeren, endverblockt mit Trimethylsiloxyeinheiten, beschrieben. Andere nicht einschränkende flüchtige Silikonöle, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, schließen jene ein, die von General Electric Co., Silicone Products Div., Waterford, N.Y., USA, und SWS Silicones Div. of Stauffer Chemical Co., Adrian, Michigan, USA, erhältlich sind.
g. Schälmittel
Schälmittel schließen Bestandteile ein, die tote Hautzellen von der äußeren Oberfläche der Haut entfernen. Diese Mittel wirken durch mechanische, chemische und/oder sonstige Mittel. Nicht-einschränkende Beispiele für mechanische Schälmittel schließen Abrasiva ein, wie Bimsstein, Siliciumdioxid, Tuch, Papier, Schalen, Perlen, feste Kristalle, feste Polymere, usw. Nicht-einschränkende Beispiele für chemische Schälmittel schließen Säuren und Enzymschälmittel ein. Säuren, die als Schälmittel verwendet werden können, schließen Glykolsäure, Milchsäure, Citronensäure, α-Hydroxysäuren, β-Hydroxysäuren, usw. ein. Andere Schälmittel, die dem Fachmann bekannt sind, werden auch als brauchbar in dem Kontext der vorliegenden Erfindung angesehen.
h. Etherische Öle
Etherische Öle umfassen Öle, die von Kräutern, Blüten, Bäumen und anderen Pflanzen abgeleitet sind. Derartige Öle liegen typischerweise als winzige Tröpfchen zwischen den Zellen der Pflanze vor und können nach mehreren Methoden extrahiert werden, die Fachleuten bekannt sind (z. B. wasserdampfdestilliert, Enfleurage (d. h. Extraktion mittels Fett), Maceration, Lösungsmittelextraktion oder mechanisches Pressen). Wenn diese Öltypen der Luft ausgesetzt werden, neigen sie zum Verdampfen (d. h. ein flüchtiges Öl). Infolgedessen sind viele etherische Öle farblos, können mit zunehmendem Altern jedoch oxidieren und nachdunkeln. Etherische Öle sind in Wasser unlöslich und in Alkohol, Ether, Fettölen (pflanzlich) und anderen organischen Lösungsmitteln löslich. Typische physikalische Charakteristika von etherischen Ölen beinhalten Siedepunkte, die von etwa 160° bis 240°C variieren, und Dichten im Bereich von 0,759 bis etwa 1,096.
Etherische Öle sind typischerweise nach der Pflanze benannt, in der das Öl gefunden wird. Rosenöl und Pfefferminzöl stammen beispielsweise von Rosen beziehungsweise Pfefferminzpflanzen. Nicht-einschränkende Beispiele für etherische Öle, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, umfassen Sesamöl, Macadamianussöl, Teebaumöl, Nachtkerzenöl, Spanisch-Salbeiöl, Spanisch-Rosmarinöl, Korianderöl, Thymianöl, Pimentöl, Rosenöl, Anisöl, Balsamöl, Bergamottenöl, Rosenholzöl, Zedernöl, Kamillenöl, Salbeiöl, Clary-Salbeiöl, Nelkenöl, Zypressenöl, Eukalyptusöl, Fenchelöl, Meeresfenchelöl, Weihrauchöl, Geranienöl, Ingweröl, Grapefruitöl, Jasminöl, Wachholderöl, Lavendelöl, Zitronenöl, Lemongrassöl, Limonenöl, Mandarinenöl, Majoranöl, Myrrhenöl, Neroliöl, Orangeöl, Patchouliöl, Pfefferöl, Schwarzpfefferöl, Petitgrainöl, Pinienöl, Rose-otto-Öl, Rosmarinöl, Sandelholzöl, Spearmintöl, Nardenöl, Vetiveröl, Wintergrünöl oder Ylang ylang. Andere etherische Öle, die Fachleuten bekannt sind, werden auch als brauchbar im Kontext der vorliegenden Erfindung angesehen.
i. Verdickungsmittel
Verdickungsmittel, einschließlich Verdicker oder Geliermittel, schließen Substanzen ein, die die Viskosität einer Zusammensetzung erhöhen können. Verdicker schließen jene ein, die die Viskosität einer Zusammensetzung erhöhen können, ohne die Wirksamkeit des aktiven Bestandteils in der Zusammensetzung wesentlich zu ändern. Verdicker können auch die Stabilität der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen erhöhen. Verdicker schließen in bestimmten Aspekten der vorliegenden Erfindung hydriertes Polyisobuten, Trihydroxystearin, Ammoniumacryloyldimethyltaurat/VP-Copolymer oder eine Mischung von diesen ein.
Nicht-einschränkende Beispiele für zusätzliche Verdickungsmittel, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, umfassen Carbonsäurepolymere, vernetzte Polyacrylatpolymere, Polyacrylamidpolymere, Polysaccharide und Gummis. Beispiele für Carbonsäurepolymere umfassen vernetzte Verbindungen, die ein oder mehrere Monomere abgeleitet von Acrylsäure, substituierten Acrylsäuren und Salzen und Estern dieser Acrylsäuren und den substituierten Acrylsäuren enthalten, wobei das Vernetzungsmittel zwei oder mehr Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindungen enthält und von einem mehrwertigen Alkohol abgeleitet ist (siehe US-Patente Nr.5,087,445; 4,509,949; 2,798,053; CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary, 4. Auflage, 1991, Seiten 12 und 80). Beispiele für im Handel erhältliche Carbonsäurepolymere schließen Carbomere ein, die Homopolymere von Acrylsäure vernetzt mit Allylethern von Sucrose oder Pentaerytritol sind (z. B. CARBOPOL™ 900 Reihen von B. F. Goodrich).
Nicht-einschränkende Beispiele für vernetzte Polyacrylatpolymere umfassen kationische und nichtionische Polymere. Beispiele sind in den US-Patenten Nr. 5,100,660; 4,849,484; 4,835,206; 4,628,078; 4,599,379) beschrieben.
Nicht einschränkende Beispiele für Polyacrylamidpolymere (einschließlich nichtionischer Polyacrylamidpolymere einschließlich substituierter verzweigter oder unverzweigter Polymere) umfassen Polyacrylamid, Isoparaffin und Laureth-7, Multiblockcopolymere von Acrylamiden und substituierten Acrylamiden mit Acrylsäuren und substituierten Acrylsäuren.
Nicht einschränkende Beispiele für Polysaccharide umfassen Cellulose, Carboxymethylhydroxyethylcellulose, Celluloseacetatpropionatcarboxylat, Hydroxyethylcellulose, Hydroxyethylethylcellulose, Hydroxypropylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Methylhydroxyethylcellulose, mikrokristalline Cellulose, Natriumcellulosesulfat und Mischungen davon. Ein weiteres Beispiel ist eine alkylsubstituierte Cellulose, wobei die Hydroxygruppen des Cellulosepolymers hydroxyliert sind (vorzugsweise hydroxyethyliert oder hydroxypropyliert), um eine hydroxyalkylierte Cellulose zu bilden, die dann mit einer geradkettigen C₁₀- bis C₃₀- Kette oder einer verzweigtkettigen Alkylgruppe über eine Etherverknüpfung weiter modifiziert ist. Diese Polymere sind typischerweise Ether von geradkettigen oder verzweigtkettigen C₁₀- bis C₃₀-Alkoholen mit Hydroxyalkylcellulosen. Andere brauchbare Polysaccharide schließen Scleroglucane ein, die eine lineare Kette aus (1-3)-verknüpften Glucoseeinheiten mit einer (1-6)-verknüpften Glucoseeinheit auf jeweils drei Einheiten umfassen.
Nicht einschränkende Beispiele für Gummis/Pflanzenschleime, die mit der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, schließen Akaziengummi, Agar, Algin, Alginsäure, Ammoniumalginat, Amylopectin, Calciumalginat, Calciumkarrageen, Carnitin, Karrageen, Dextrin, Gelatine, Gellangummi, Guargummi, Guarhydroxypropyltrimoniumchlorid, Hectorit, Hyaluronsäure, hydratisiertes Siliciumdioxid, Hydroxypropylchitosan, Hydroxypropylguar, Karayagummi, Kelp, Johannisbrotmehl, Nattogummi, Kaliumalginat, Kaliumkarrageen, Propylenglykolalginat, Sclerotium-Gummi, Natriumcarboxymethyldextran, Natriumkarrageen, Tragakanthgummi, Xanthangummi und Mischungen davon ein.
j. Konservierungsmittel
Nicht-einschränkende Beispiele für Konservierungsmittel, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, schließen quaternäre Ammoniumkonservierungsmittel, wie Polyquaternium-1 und Benzalkoniumhalogenide (z. B. Benzalkoniumchlorid („BAC“) und Benzalkoniumbromid), Parabene (z. B. Methylparabene und Propylparabene), Phenoxyethanol, Benzylalkohol, Chlorbutanol, Phenol, Sorbinsäure, Thimerosal oder Kombinationen davon ein.
2. Pharmazeutische Bestandteile
Pharmazeutische Wirkstoffe auch als brauchbar mit den Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung angesehen. Nicht einschränkende Beispiele für pharmazeutische Wirkstoffe umfassen Antiaknemittel, Mittel, die zur Behandlung von Rosazea eingesetzt werden, Analgetika, Anästhetika, Anorektalmittel, Antihistamine, Entzündungshemmer einschließlich nichtsteroidaler Entzündungshemmer, Antibiotika, Antipilzmittel, antivirale Mittel, antimikrobielle Mittel, Antikrebswirkstoffe, gegen Krätze wirkende Mittel, gegen Läuse wirkende Mittel, Antineoplastika, Antiperspirantien, Antiprurika, Antipsoriasismittel, Antiseborrhoika, biologisch aktive Proteine und Peptide, Verbrennungsbehandlungsmittel, Kauterisierungsmittel, Depigmentierungsmittel, Enthaarungsmittel, Mittel gegen Windelausschlag, Enzyme, Haarwachstumsstimulantien, Haarwachstumsverzögerungsmittel einschließlich DFMO und deren Salzen und Analoga, Hämostatika, Kerotolytika, Krebsgeschwürbehandlungsmittel, Fieberbläschenbehandlungsmittel, Dental und Periodontalbehandlungsmittel, photosensibilisierende Wirkstoffe, Hautschutzmittel/Barrieremittel, Steroide einschließlich Hormonen und Kortikosteroiden, Mittel zur Behandlung von Sonnenbrand, Sonnenschutzmittel, Transdermalwirkstoffe, Nasalwirkstoffe, Vaginalwirkstoffe, Warzenbehandlungsmittel, Wundbehandlungsmittel, Wundheilungsmittel, usw.
F. Kits
Kits können auch in bestimmten Aspekten der vorliegenden Erfindung genutzt werden. Erfindungsgemäße Zusammensetzungen können beispielsweise in ein Kit eingeschlossen werden. Ein Kit kann einen Behälter einschließen. Behälter können ein Fläschchen, eine Metalltube, eine Laminattube, eine Plastiktube, einen Spender, einen Druckbehälter, einen Barrierebehälter, ein Paket, ein Fach, einen Lippenstiftbehälter, einen Kompaktbehälter, Kosmetikpfännchen, die Kosmetikzusammensetzungen enthalten können, oder andere Behältertypen einschließen, wie spritz- oder blasgeformte Plastikbehälter, in denen die Dispersionen oder Zusammensetzungen oder gewünschten Fläschchen, Spender oder Packungen aufbewahrt werden. Das Kit und/oder der Behälter kann Zeichen auf seiner Oberfläche aufweisen. Die Zeichen können beispielsweise ein Wort, ein Satz, eine Abkürzung, ein Bild oder ein Symbol sein.
Die Behälter können eine festgelegte Menge der Zusammensetzung abgeben. In anderen Ausführungsformen lässt sich der Behälter zusammendrücken (z. B. Metall-, Laminat- oder Kunststofftube), um eine gewünschte Menge der Zusammensetzung abzugeben. Die Zusammensetzung kann als Spray, Aerosol, Flüssigkeit, Fluid oder halbfestes Material abgegeben werden. Die Behälter können Spray-, Pump- oder Quetschmechanismen aufweisen. Ein Kit kann auch Anweisungen zur Verwendung der Kitkomponenten sowie der Verwendung jedweder anderen Zusammensetzungen einschließen, die in dem Behälter enthalten sind. Anweisungen können eine Erläuterung der Anwendung und Behandlung der Zusammensetzungen einschließen.
BEISPIELE
Die folgenden Beispiele sind eingeschlossen, um bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung zu demonstrieren. Fachleute sollten erkennen, dass die in den folgenden Beispielen offenbarten Techniken von dem Erfinder gefundene Techniken repräsentieren, die in der Praxis der Erfindung gut funktionieren und somit als bevorzugte Modi für deren Durchführung darstellend angesehen werden können. Fachleute sollten im Lichte der vorliegenden Offenbarung jedoch erkennen können, dass viele Änderungen an den konkreten offenbarten Ausführungsformen vorgenommen werden können und dennoch ein ähnliches oder vergleichbares Ergebnis erhalten werden kann, ohne von der Idee und dem Umfang der Erfindung abzuweichen.
Alle hier offenbarten und beanspruchten Zusammensetzungen und Verfahren können ohne unnötigen experimentellen Aufwand im Lichte der vorliegenden Offenbarung umgesetzt und ausgeführt werden. Obwohl die Zusammensetzungen und Verfahren dieser Erfindung in Bezug auf bevorzugte Ausführungsformen beschrieben wurden, wird dem Fachmann klar sein, dass in Bezug auf Zusammensetzungen und Verfahren sowie in den Stufen oder der Abfolge der Stufen des hier beschriebenen Verfahrens Variationen angewendet werden können, ohne vom Konzept, der Idee und dem Umfang der Erfindung abzuweichen. Es ist spezieller offensichtlich, dass bestimmte Mittel, die sowohl chemisch als auch physiologisch verwandt sind, die hier beschriebenen Mittel ersetzen können, während dieselben oder ähnliche Ergebnisse erhalten werden. Alle derartigen ähnlichen Ersatzstoffe und Modifikationen, die dem Fachmann offensichtlich sind, werden als innerhalb der Idee, des Umfangs und Konzepts der Erfindung wie in den angefügten Ansprüchen definiert angesehen.
BEISPIEL 1
(Beispielhafte Formulierungen)

Formulierungen mit den hier offenbarten Bestandteilen wurden als topische Hautzusammensetzungen zubereitet. Die topischen Hautzusammensetzungen können in einigen Fällen als Ampulle, Serum, Creme, Emulsion, Gel oder Gelemulsion hergestellt werden. Die Formulierung in Tabelle 1 ist ein Beispiel für eine topische Hautzusammensetzung, die als Ampulle hergestellt worden ist. TABELLE 1^

Bestandteil	% Konzentration (nach Gewicht)
Wasser	78,5
Glycerin	14,9
Pentylenglykol	3
Betain	2
Phenoxyethanol	0,8
Xanthangummi	0,4
hydrolysiertes Natriumhyaluronat	0,2
Natriumhyaluronat	0,1
Verbena Officinalis-Extrakt	0,04
Ceramid	0,01
Hilfsstoffe*	q.s.

^ Die Formulierung kann hergestellt werden, indem die Bestandteile in einem Becherglas unter Erwärmen auf 70-75°C gemischt werden, bis sie homogen sind. Die Formulierung kann anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt werden (20-25°C). Ferner und gewünschtenfalls können weitere Bestandteile zugefügt werden, um beispielsweise die rheologischen Eigenschaften der Zusammensetzung zu modifizieren, oder Bestandteile, die der Haut Vorteile bieten.
* Es können beispielsweise zur Modifizierung der rheologischen Eigenschaften der Zusammensetzung Hilfsstoffe zugefügt werden. Alternativ kann die Menge an Wasser variiert werden, solange sie mindestens 40% Gew./Gew. und vorzugsweise zwischen 60 und 90% Gew./Gew. beträgt.

BEISPIEL 2
(Verwendete Materialien)

Die aktiven Bestandteile in Tabelle 2 wurden verwendet, um die Formulierung der obigen Tabelle 1 herzustellen. TABELLE 2

Bestandteil
Verbena officinalis, erhältlich von Silab unter der Handelsbezeichnung Vitalayer®
Hydrolysiertes Natriumhyaluronat, erhältlich von Tri-K unter der Handelsbezeichnung HyaClear® 10K
Ceramid NG, erhältlich von DKSH unter der Handelsbezeichnung DS-HydroCeramide

BEISPIEL 3
Effekt auf die Expression von Filaggrinprotein
Änderungen in der Produktion von Filaggrin in Keratinozyten infolge von jedem der aktiven Bestandteile, einem beliebigen von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können gemessen werden. Filaggrin ist der Vorläufer des natürlichen Befeuchtungsfaktors (Natural Moisturizing Factor, NMF) der Haut. Gesteigerter NMF steigert den Feuchtigkeitsgehalt der Haut.
Filaggrin-Produktion in behandelten und unbehandelten Keratinozyten wurde unter Verwendung des PROTEINSIMPLE® SIMON™ Western Blotting-Bioassays bestimmt, der einen Antikörper verwendet, der spezifisch für Filaggrin ist, um die Filaggrin-Konzentration in Zelllysaten von Keratinozyten quantitiv zu detektieren. Die behandelte Gruppe der Keratinozyten wurde mit 1 % Calcium oder einem Extrakt von Laminaria saccharina, Meeresplankton, Opuntia ficus-indica, Imperata cylindrical oder Verbena officinalis (1 %) behandelt.

Normale humane Epidermalkeratinozyten (NHEK) wurden für jede Probe in EPI-200-Mattek Epilife® Wachstumsmedium mit Calcium von Life Technologies (M-EP-500-CA) gezüchtet. NHEK wurden über Nacht bei 37 °C in 5 % CO₂ vor der Behandlung in Wachstumsmedium inkubiert. NHEK wurden dann in Wachstumsmedium mit 1 % Testverbindung/Extrakt oder ohne Verbindung/Extrakt (Negativkontrolle) 24 bis 36 Stunden lang inkubiert. Die NHEK wurden dann gewaschen, aufgefangen und auf Eis oder kälter verwahrt, bis sie auf Eis unter Verwendung eines Lysepuffers und Schallbehandlung lysiert werden. Die Proteinkonzentrationen der Proben wurden ermittelt und verwendet, um die Proben zu normalisieren. Die Lysate wurden bis zur Verwendung in dem Quantifizierungs-Assay bei -80°C aufbewahrt. Normalisierte Proben und Molekulargewichtstandards wurden dann auf ein denaturiertes Proteintrenngel, das mit Kapillarelektrophorese arbeitet, geladen und laufen gelassen (DIE FIGUR). Die Proteine wurden in dem Gel immobilisiert und immunosondiert, wobei ein für Filaggrin spezifischer primärer Antikörper verwendet wird. Die immobilisierten Proteine wurden dann mit einem enzymverknüpften Detektierungsantikörper immunosondiert, der an den primären Antikörper bindet. Dann sollte den immobilisierten Proteinen eine Chemilumineszenzsubstratlösung zugefügt werden, um die Entwicklung von Chemilumineszenz proportional zu der Menge an Filaggrin zu ermöglichen, die in der Immobilisierung gebunden sind. Die Chemilumineszenzentwicklung wurde zu einer bestimmten Zeit gestoppt, und die Intensität des Chemolumineszenzsignals wurde gemessen (angegeben als Fläche unter der Kurve, AUC, in der folgenden Tabelle 3) und mit Kontrollen verglichen. Wie in der folgenden Tabelle 3 gezeigt ist, lieferte Verbena officinalis-Extrakt den größten Einfluss auf die Expression von Filaggrin (>66%). TABELLE 3

Verabreichte Zusammensetzung	% getestet	AUC	% Ktrl
Kontrolle	1%	70848	-
Calcium	1 %	81899	15,60
Extrakt von Laminaria saccharina	1 %	99298	40,16
Extrakt von Meeresplankton	1 %	90465	27,69
Extrakt von Opuntia ficus-indica	1 %	74952	5,79
Extrakt von Imperata cylindrica	1%	93792	32,38
Extrakt von Verbena officinalis	1 %	118267	66,93

BEISPIEL 4
Analyse der Hautbefeuchtungswirksamkeit
Hautfeuchtigkeits/Hydratationsvorteile können durch Impedanzmessungen mit dem Nova Dermal Phasenmeter gemessen werden. Das Impedanzmeter misst Änderungen des Hautfeuchtegehalts. Die Außenschicht der Haut hat eigene elektrische Eigenschaften. Wenn Haut trocken ist, leitet sie die Elektrizität sehr schlecht. Mit zunehmender Hydratation nehmen die Leitfähigkeitsergebnisse zu. Änderungen der Hautimpedanz (im Zusammenhang mit Leitfähigkeit) können demnach verwendet werden, um Änderungen der Hauthydratation zu bewerten. Das Gerät kann nach den Instrumentenanweisungen für jeden Testtag kalibriert werden. Temperatur und relative Feuchtigkeit können auch aufgezeichnet werden. Jeder der aktiven Bestandteile, eine beliebige von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können im Assay gemäß diesem Verfahren beurteilt werden.
Es wurde eine klinische Studie durchgeführt, um die Oberflächeneffekte einer einzigen Verwendung einer Zusammensetzung wie hier offenbart zu beurteilen. Es wurden dreißig (30) Subjekte im Alter von 21 bis 63 Jahren in die Studie aufgenommen, und einundzwanzig (21) schlossen die Studie ab. Die Subjekte wurden 15 Minuten lang auf einen Raum mit kontrollierter Umgebung (70 ± 3 °F, 21° ± 1,5 °C; 45 % + 15 % relative Feuchtigkeit) akklimatisiert, wobei ihre Gesichter vor jedem Satz von Messungen exponiert wurden.
Die Studiendauer für jedes Subjekt betrug am ersten Tag annähernd 1 Stunde und am zweiten Tag 2 Stunden. Die Visite des ersten Tages beinhaltete Auswaschanweisungen und Vorbereitung auf die Visite des zweiten Tages. Die Visite des zweiten Tages beinhaltete instrumentelle Messungen der Basislinie und unmittelbar (annähernd 15 Minuten) nach Auftragung der Testzusammensetzungen. Messungen vor Behandlung wurden auf der Stirn-, Augen-, Wangen-, Kinn- und Nasenregionen des Subjekts unter Verwendung eines Novameter Technologies DPM 9003 Impedanzmessgeräts durchgeführt. Die Testzusammensetzung wurde dann auf die Gesichter der Subjekte aufgetragen. Es wurden drei Impedanzmessungen nach der Behandlung an jeder von 10 Stellen in der Stirnregion, 4 Stellen in der Augenregion, 7 Stellen in der Wangenregion, 5 Stellen in der Kieferregion und 5 Stellen in verschiedenen Regionen um die Nase durchgeführt.
Die Änderungen gegenüber der Basislinie wurden mittels eines Paardifferenz-t-Tests bewertet, und die Daten wurden mit einer Einstellung des Konfidenzintervalls auf 95 % (p<0,05) ausgewertet. Das Novameter Technologies DPM 9003 maß die Impedanz, den Widerstand bezüglich des Flusses von Wechselstrom. Höhere Werte der Impedanzmessung entsprechen einem höheren Hautfeuchtigkeitswert. Die Testzusammensetzung lieferte einen signifikanten Anstieg der Befeuchtung in allen untersuchten Regionen relativ zu Basislinie an dem unmittelbaren Zeitpunkt. Der aggregierte Wert über alle Messungen, der in der folgenden Tabelle 4 abgebildet ist, gibt an, dass die Testzusammensetzung einen Anstieg der Hautbefeuchtung von mehr als 53 % bewirkt, was eine signifikante Zunahme des Feuchtigkeitsgehalts repräsentiert. TABELLE 4

Beschreibende Statistik Basislinie Unmittelbar (15 min)

Mittelwert 105,34 162,06

Prozent Änderung* -- 53,84 %

P-Wert^ -- p<0,05

* Prozentuale Änderung im Vergleich zur Basislinie
^ Repräsentiert eine signifikante Änderung im Vergleich zur Basislinie (p ≤0,05)
BEISPIEL 5
(Zusätzliche Assays)
Assays, die verwendet werden können, um die Wirksamkeit von beliebigen der Bestandteile oder beliebiger Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit der Kombination von Bestandteilen zu bestimmen, die in der Beschreibung und den Ansprüchen offenbart sind, können nach Verfahren ermittelt werden, die Fachleuten bekannt sind. Anschließend werden nicht-einschränkende Assays beschrieben, die im Kontext der vorliegenden Erfindung verwendet werden können. Es ist zu erkennen, dass andere Testverfahren verwendet werden können, einschließlich beispielsweise objektiver und subjektiver Verfahren.
Antioxidant (AO)-Assay: Ein Antioxidans-Assay kann an Hautzellen (z. B. epidermalen Keratinozyten, Fibroblasten und/oder dermalen endothelialen Zellen) durchgeführt werden, um die Fähigkeit von beliebigen der aktiven Bestandteile, beliebiger Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen zu ermitteln, Antioxidanskapazität (TEAC) bereitzustellen, indem die Oxidation von ABTS^® (2,2'-Azino-di-[3-ethylbenzthiazolinsulfonat]) zu ABTS^® +durch Methmyoglobin inhibiert wird. Das Antioxidanssystem lebender Organismen kann Enzyme, wie Superoxiddismutase, Catalase und Glutathionperoxidase; Makromoleküle wie Albumin, Ceruloplasmin und Ferritin, sowie eine Gruppe kleiner Moleküle, einschließlich Ascorbinsäure, α-Tocopherol, β-Karotin, reduziertem Glutathion, Harnsäure und Bilirubin, einschlie-ßen. Die Summe der endogenen und aus Nahrungsmitteln stammenden Antioxidantien repräsentiert die gesamte Antioxidansaktivität der extrazellulären Flüssigkeit. Das Zusammenwirken aller unterschiedlichen Antioxidantien kann größeren Schutz vor Angriff durch reaktive Sauerstoff oder Stickstoffradikale als jegliche Einzelverbindung allein bereitstellen. Die gesamte Antioxidanskapazität kann somit relevantere biologische Informationen enthalten, verglichen mit denjenigen, die durch die Messung individueller Komponenten erhalten werden, da der kumulative Effekt aller in Plasma und Körperflüssigkeiten vorhandenen Antioxidantien berücksichtigt wird. Die Kapazität der Bestandteile in der Zusammensetzung zur Verhinderung der ABTS-Oxidation kann mit derjenigen von Trolox, einem wasserlöslichen Tocopherolanalogon, verglichen werden, und wurde als molare Troloxäquivalente quantifiziert. Das Anti-Oxidant Capacity Kit Nr. 709001 von Cayman Chemical (Ann Arbor, Michigan USA) kann zum Messen der gesamten Antioxidanskapazität verwendet werden.
Kollagenstimulations-Assay: Ein Kollagen-Stimulationsassay kann verwendet werden, um die Fähigkeit von einem beliebigen der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen zu bestimmen, die Expression von Prokollagen-1, einem Vorläufer des Kollagens, zu erhöhen. Kollagene (Typ I, II, III, IV und V) können als Vorläufermoleküle synthetisiert werden, die als Prokollagene bezeichnet werden. Diese Vorläufermoleküle können sowohl am aminoterminalen als auch am carboxyterminalen Ende zusätzliche Peptidsequenzen enthalten, die üblicherweise als „Propeptide“ bezeichnet werden. Während der zellulären Expression und Sekretion können Prokollagene in der trimeren Form zusammengesetzt und dann an spezifischen N- und C-terminalen Stellen durch spezifische Endopeptidasen gespalten werden, wodurch drei Fragmente erzeugt werden: Prokollagen-1 N-terminales Propeptid (PINP), Type I-Kollagen und Prokollagen-1 carboxy-terminales Propeptid (PICP).
Die Funktion der Propeptide liegt darin, die Windung der Prokollagenmoleküle zu einer Tripelhelixkonformation innerhalb des endoplasmatischen Retikulums zu erleichtern. Die Propeptide können von dem Kollagen-Tripelhelixmolekül während dessen Sekretion abgespalten werden, danach polymerisieren die Tripelhelixkollagene zu extrazellulären Kollagenfibrillen. Die Menge der freien Propeptide spiegelt somit stöchiometrisch die Menge der synthetisierten Kollagenmoleküle wider (eine Beziehung analog zu derjenigen zwischen dem carboxyterminalen Peptid von Proinsulin und dem endogen produzierten Insulin). Kollagen ist ein extrazelluläres Matrixprotein, das für die Hautstruktur entscheidend ist. Erhöhte Kollagensynthese trägt zur Festigkeit und Elastizität der Haut bei.
Die quantitative Detektierung von PICP in Fibroblastzellextrakten und Kulturüberständen kann mit einem Enzym-Immunoassay-Kit (z. B. Takara #MK101) durchgeführt werden, um die Wirkungen der Bestandteile auf die Synthese von PICP in Haut zu bewerten. Dieser Bioassay kann verwendet werden, um Wirkungen auf die Produktion von Prokollagenpeptid (einem Vorläufer des Kollagens) durch humane epidermale Fibroblasten zu untersuchen. Der Endpunkt dieses Assays kann eine spektrophotometrische Messung sein, die die Anwesenheit von Prokollagenpeptid und die zelluläre Lebensfähigkeit widerspiegelt. Der Assay verwendet die quantitative Sandwich-Enzym-Immunoassaytechnik, bei der ein für Prokollagenpeptid spezifischer monoklonaler Antikörper als Vorbeschichtung auf eine Mikroplatte aufgebracht wurde. Standards und Proben können in die Wells pipettiert werden, und jegliches vorhandene Prokollagenpeptid wurde durch den immobilisierten Antikörper gebunden. Nachdem jegliche ungebundenen Substanzen abgewaschen wurden, kann den Wells ein enzymverknüpfter polyklonaler Antikörper zugefügt werden, der für Prokollagenpeptid spezifisch ist. Nach einem Waschvorgang, um jegliches nicht gebundene Antikörper-Enzymreagenz zu entfernen, kann den Wells eine Substratlösung zugefügt werden, und Farbe entwickelte sich proportional zu der Menge an Prokollagenpeptid, die in dem ersten Schritt gebunden wurde. Die Farbentwicklung wurde gestoppt, und die Intensität der Farbe bei 450 nm wurde mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen.
Zur Erzeugung von Proben und Kontrollen können subkonfluierende normale humane adulte Epidermalfibroblasten (Cascade Biologics) in Standard-DMEM-Wachstumsmedium mit 10 % fetalem Kälberserum (Mediatech) bei 37 °C in 10 % CO₂ kultiviert werden. Die Zellen können 3 Tage lang mit jedem der getesteten Bestandteile und Kontrollen behandelt werden. Nach der Inkubierung kann das Zellkulturmedium wie bereits erläutert aufgefangen werden, und die Menge der Sekretion von Prokollagenpeptid Typ I wurde mit einem Sandwich-Enzyme-Linked Immuno-Sorbant Assay (ELISA) von Takara (Nr. MK101) quantifiziert.
Elastinstimulations-Assay: Elastin ist ein Bindegewebeprotein, das dazu beiträgt, dass die Haut nach dem Recken oder Kontrahieren die Form wieder annimmt. Elastin ist auch ein wichtiges lasttragendes Protein, das an Stellen verwendet wird, in denen mechanische Energie gespeichert werden muss. Elastin wird hergestellt, indem viele lösliche Tropoelastinproteinmoleküle in einer Reaktion verknüpft werden, die durch Lysyloxidase katalysiert wird. Elastinsekretion und Elastinfasern können in kultivierten humanen Fibroblasten überwacht werden, indem die kultivierten humanen Fibroblasten mittels einer Direkt-ELISA-Sandwich-Methode mit Immunofluoreszenzantikörpern angefärbt wurden, die gegen Elastin gerichtet sind. Zum Analysieren der Ergebnisse kann ein Meso Scale Discovery System SECTOR 2400 Bildgebungssystem verwendet werden. Änderungen in der Elastinsekretion und den Elastinfasern, die durch einen oder mehrere Bestandteile in der Zusammensetzung bewirkt werden, können ermittelt werden, indem kultivierte menschliche Fibroblasten mit dem aktiven Bestandteil für eine Zeitdauer kultiviert werden, bevor die Zellen oder ein Lysat davon mit Antikörpern sondiert wurden, die gegen Elastin gerichtet sind.
Lamininstimulations-Assay: Laminin ist ein wesentliches Protein in der dermal-epidermalen Übergangszone (DEJ) (die auch als Basalmembran bezeichnet wird). Die DEJ befindet sich zwischen der Dermis und der Epidermis und greift ineinander, wobei fingerartige Vorsprünge gebildet werden, die als Retezapfen bezeichnet werden. Die Zellen der Epidermis erhalten ihre Nährstoffe von den Blutgefäßen in der Dermis. Die Retezapfen vergrößern die Oberfläche der Epidermis, die diesen Blutgefäßen und den benötigten Nährstoffen ausgesetzt wird. Die DEJ sorgt für Adhäsion der beiden Gewebekompartimente und beherrscht die strukturelle Integrität der Haut. Laminin ist ein strukturelles Glykoprotein, das in der DEJ lokalisiert ist. Laminin wird zusammen mit Fibronectin als der Kleber angesehen, der die Zellen zusammenhält, und beide werden von dermalen Fibroblasten sekretiert, um die intra- und interzelluläre Adhäsion der epidermalen Zellen an der DEJ zu unterstützen.
Die Sekretion von Laminin kann überwacht werden, indem Laminin in Zellüberständen von kultivierten humanen Fibroblasten quantifiziert wird, die 3 Tage lang mit Kulturmedium mit oder ohne 1,0 % der Endkonzentration des Testbestandteils/der Testbestandteile behandelt wurden. Der Gehalt an Laminin kann nach der Inkubation unter Verwendung von Immunofluoreszenzantikörpern, die gegen jedes Protein gerichtet sind, in einem Enzyme Linked Immuno-Sorbant Assay (ELISA) gemessen werden.
Matrix-Metalloproteinase-1-Enzymaktivitäts- (MMP-1) Assay: MMPs sind extrazelluläre Proteasen, die infolge ihrer breiten Substratspezifität in vielen normalen und krankhaften Zuständen eine Rolle spielen. MMP1-1-Substrate schließen Kollagen IV ein. Das Molecular Probes Enz/Chek Gelatinase/ Collagenase Assay Kit (#E12055) kann verwendet werden, um die Aktivität von MMP-1-Protease zu detektieren, und nutzt ein fluorogenes Gelatinesubstrat und testet die proteolytische Spaltung des Substrats durch gereinigtes MMP-1-Enzym. Nach proteolytischer Spaltung des Substrats zeigt sich hellgrüne Fluoreszenz und kann mit einem Fluoreszenz-Mikroplattenleser überwacht werden, um die enzymatische Aktivität zu messen. Testmaterialien können in Gegenwart oder Abwesenheit von gereinigtem Enzym und Substrat inkubiert werden, um ihre Proteaseinhibitorkapazität zu ermitteln.
Matrix-Metalloproteinase 3 und 9-Enzymaktivitäts- (MMP-3; MMP-9) Assay: MMPs sind extrazelluläre Proteasen, die infolge ihrer breiten Substratspezifität in vielen normalen und krankhaften Zuständen eine Rolle spielen. Zu den MMP-3-Substraten gehören Kollagene, Fibronectine und Laminin, während MMP-9-Substrate Kollagen VII, Fibronectine und Laminin einschließen. Die Colorimetric Drug Discovery Kits von BioMol International für MMP-3 (AK-400) und MMP-9 (AK-410) können zum Messen der Proteaseaktivität von MMPs unter Verwendung eines Thiopeptids als chromogenes Substrat verwendet werden (Ac-PLG-[2-mercapto-4-methylpentanoyl]-LG-OC₂H₅)5,6. Die Peptidbindung an der MMP-Spaltungsstelle ist in dem Thiopeptid durch eine Thioesterbindung ersetzt. Die Hydrolyse dieser Bindung durch ein MMP produziert eine Sulfhydrylgruppe, die mit DTNB [5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoesäure), Ellmans Reagenz] unter Bildung von 2-Nitro-5-thiobenzoesäure reagiert, die durch ihre Extinktion bei 412 nm (ε=13 600 M^-1cm^-1 bei pH 6,0 und über 7) nachgewiesen werden kann.
Lipoxygenase (LO)-Assay: Ein Lipoxygenase-Assay kann verwendet werden, um die Fähigkeit von einem beliebigen der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen zur Inhibierung der Expression von Lipoxygenase (LO) zu untersuchen. LOs sind kein Häm-Eisen enthaltende Dioxygenasen, die die Addition von molekularem Sauerstoff an Fettsäuren katalysieren. Linoleat und Arachidonat sind in Pflanzen und Tieren die Hauptsubstrate für LOs. Arachidonsäure kann dann in Hydroxyeicosatriensäure (HETE)-Derivate überführt werden, die anschließend in Leukotriene überführt werden, potente Entzündungsmediatoren. Ein genaues und zweckmäßiges Verfahren zum Screening auf Lipoxygenase-Inhibitoren kann durchgeführt werden, indem die Hydroperoxide gemessen werden, die aus der Inkubation einer Lipoxygenase (5, 12 oder 15-LO) mit Arachidonsäure erzeugt werden. Das Colorimetric LO Inhibitor Screening Kit (Nr. 760700, Cayman Chemical) kann verwendet werden, um die Fähigkeit der Bestandteile der Zusammensetzung zu ermitteln, die Enzymaktivität zu inhibieren.
Gereinigte 15-Lipoxygenase und Testbestandteile können in Assay-Puffer gemischt und unter Schütteln 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert werden. Nach der Inkubation kann Arachidonsäure zugegeben werden, um die Reaktion zu initiieren, und die Mischungen wurden weitere 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Kolorimetrisches Substrat kann zugefügt werden, um die Katalyse zu beenden, und die Farbprogression wurde durch Fluoreszenz-Plattenablesung bei 490 nm beurteilt. Die prozentuale Inhibierung der Lipogenaseaktivität kann verglichen mit unbehandelten Kontrollen berechnet werden, um die Fähigkeit der Bestandteile der Zusammensetzung zu ermitteln, die Aktivität von gereinigtem Enzym zu inhibieren.
Tumornekrosefaktor Alpha (TNF-α) Assay: Der Prototypligand der TNF-Superfamilie, TNF-α, ist ein pleiotropes Zytokin, das bei Entzündung eine zentrale Rolle spielt. Der Anstieg seiner Expression steht im Zusammenhang mit einer Aufwärtsregulierung der proentzündlichen Aktivität. Der Bioassay kann verwendet werden, um die Wirkung von Bestandteilen der Zusammensetzung auf die Produktion von TNF-α durch humane epidermale Keratinozyten zu analysieren. Der Endpunkt dieses Assays kann eine spektrophotometrische Messung sein, die die Anwesenheit von TNF-α und die zelluläre Lebensfähigkeit widerspiegelt. Der Assay kann die quantitative Sandwich-Enzym-Immunoassaytechnik verwenden, durch die ein für TNF-α spezifischer monoklonaler Antikörper als Vorbeschichtung auf eine Mikroplatte aufgebracht worden ist.
Standards und Proben können in Wells einer Mikroplatte pipettiert werden, und jegliches vorhandene TNF-α wurde durch den immobilisierten Antikörper gebunden. Nachdem jegliche ungebundenen Substanzen abgewaschen wurden, kann den Wells ein enzymverknüpfter polyklonaler Antikörper zugefügt werden, der für TNF-α spezifisch ist. Nach einem Waschvorgang, um jegliches nicht gebundene Antikörper-Enzymreagenz zu entfernen, kann den Wells eine Substratlösung zugefügt werden, und Farbe entwickelte sich proportional zu der Menge an TNF-α, die in dem ersten Schritt gebunden wurde, wobei ein Mikroplattenleser zur Detektierung bei 450 nm verwendet wird. Die Farbentwicklung kann gestoppt und die Farbintensität gemessen werden. Subkonfluente, normale, humane adulte Keratinozyten (Cascade Biologics), kultiviert in EPILIFE™ Standardwachstumsmedium (Cascade Biologics) bei 37°C in 5 % CO₂, können 6 Stunden lang mit Phorbol-12-myristat-13-acetat (PMA, 10 ng/ml, Sigma Chemical, Nr. P1585-1MG) und Bestandteilen der Zusammensetzung oder ohne Testbestandteil (für Negativkontrollen) behandelt werden. Es kann gezeigt werden, dass PMA einen drastischen Anstieg der TNF-α-Sekretion herbeiführt, der 6 Stunden nach der Behandlung einen Peak erreicht. Nach der Inkubierung kann das Zellkulturmedium aufgefangen und die Menge der TNF-α-Sekretion mit einem Sandwich-Enzyme-Linked Immuno-Sorbant Assay (ELISA) von R&D Systems (Nr. DTA00C) quantifiziert werden.
Elastase-Assay: Der ENZCHEK® Elastase-Assay (Kit Nr. E-12056) von Molecular Probes (Eugene, Oregon USA) kann als in vitro-Enzyminhibierungs-Assay verwendet werden, um die Inhibierung der Elastaseaktivität in Gegenwart von Bestandteilen der Zusammensetzung zu messen. Das EnzChek-Kit kann lösliches Rinderhalsligament-Elastin enthalten, das mit einem Farbstoff markiert wurde, so dass die Fluoreszenz des Konjugats gequencht wird. Das nicht fluoreszierende Substrat kann von Elastase oder anderen Proteasen verdaut werden, um hochfluoreszierende Fragmente zu ergeben. Der resultierende Fluoreszenzanstieg kann mit einem Fluoreszenz-Mikroplattenleser überwacht werden. Verdauungsprodukte aus dem Elastinsubstrat können Absorptionsmaxima bei -505 nm und Fluoreszenzemissionsmaxima bei -515 nm haben. Das Peptid, N-Methoxysuccinyl-Ala-Ala-Pro-Val-Chlormethylketon, kann als selektiver kollektiver Inhibitor der Elastase für eine positive Kontrolle verwendet werden, wenn das EnzChek Elastase-Assay-Kit zum Screening auf Elastaseinhibitoren eingesetzt wird.
Fibronectinstimulations-Assay: Fibronectin ist ein wesentliches Protein in der dermal-epidermalen Übergangszone (DEJ) (die auch als Basalmembran bezeichnet wird). Die DEJ befindet sich zwischen der Dermis und der Epidermis und greift ineinander, wobei fingerartige Vorsprünge gebildet werden, die als Retezapfen bezeichnet werden. Die Zellen der Epidermis erhalten ihre Nährstoffe von den Blutgefäßen in der Dermis. Die Retezapfen vergrößern die Oberfläche der Epidermis, die diesen Blutgefäßen und den benötigten Nährstoffen ausgesetzt wird. Die DEJ sorgt für Adhäsion der beiden Gewebekompartimente und beherrscht die strukturelle Integrität der Haut. Fibronectin ist ein strukturelles Glykoprotein, das in der DEJ lokalisiert ist. Fibronectin wird zusammen mit Laminin als der Kleber angesehen, der die Zellen zusammenhält, und beide werden von dermalen Fibroblasten sekretiert, um die intra- und interzelluläre Adhäsion der epidermalen Zellen an der DEJ zu unterstützen.
Die Sekretion von Fibronectin kann überwacht werden, indem Fibronectin in Zellüberständen von kultivierten humanen Fibroblasten quantifiziert wird, die 3 Tage lang mit Kulturmedium mit oder ohne 1,0 % der Endkonzentration des Testbestandteils/der Testbestandteile behandelt wurden. Der Gehalt an Fibronectin kann nach der Inkubation unter Verwendung von Immunofluoreszenzantikörpern, die gegen jedes Protein gerichtet sind, in einem Enzyme Linked Immuno-Sorbant Assay (ELISA) gemessen werden.
Lysyloxidase-Assay: Ein Lysyloxidase-Assay kann an Hautzellen (z. B. epidermalen Keratinozyten, Fibroblasten und/oder dermalen endothelialen Zellen) durchgeführt werden, um die Fähigkeit von einem beliebigen der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen zu ermitteln, die Expression von Lysyloxidase in Haut zu stimulieren. Lysyloxidase kann das Vernetzen von Elastin und Kollagenen katalysieren, wodurch der Haut eine stärker strukturierte steife Matrix bereitgestellt wird. Durch Erhöhen der Expression von Lysyloxidase kann verstärkte Vernetzung von Elastin und Kollagenen stattfinden, was vorteilhaft sein kann, um das Erscheinungsbild von feinen Linien, Falten, schlaffer Haut und/oder unelastischer Haut zu reduzieren.
B16-Pigmentierungs-Assay: Melanogenese ist der Prozess, nach dem Melanozyten Melanin produzieren, ein natürlich produziertes Pigment, das Haut, Haar und Augen Farbe verleiht. Das Inhibieren der Melanogenese ist vorteilhaft, um das Dunklerwerden der Haut zu verhindern und dunkle Stellen aufzuhellen, die mit dem Alterungsprozess zusammenhängen. Dieser Bioassay kann B16-F1-Melanozyten (ATCC), eine immortalisierte Maus-Melanom-Zelllinie, nutzen, um die Wirkung von Verbindungen auf die Melanogenese zu analysieren. Der Endpunkt dieses Assays kann eine spektrophotometrische Messung der Melaninproduktion und zellulären Lebensfähigkeit sein. B16-F1-Melanozyten können in Standard-DMEM-Wachstumsmedium mit 10 % fötalem Kälberserum (Mediatech) bei 37°C in 10 % CO₂ kultiviert und danach mit einem beliebigen der aktiven Bestandteile, beliebigen Kombinationen von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen 6 Tage lang behandelt werden. Die Melaninsekretion kann nach der Inkubation durch Extinktion bei 405 nm gemessen werden, und die zelluläre Lebensfähigkeit wurde quantifiziert.
ORAC-Assay: Die Sauerstoffradikalabsorptions (oder Extinktions)-Kapazität (Oxygen Radical Absorption (Absorbance) Capacity, ORAC) von einem beliebigen der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination der Bestandteile oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen kann auch beurteilt werden, indem die Antioxidansaktivität dieser Bestandteile oder Zusammensetzungen gemessen wird. Antioxidansaktivität gibt eine Fähigkeit an, Oxidationsmittel (Oxidantien) zu reduzieren. Dieser Assay quantifiziert den Grad und die Zeitdauer, die zur Inhibierung der Wirkung eines Oxidationsmittels, wie Sauerstoffradikalen, nötig sind, die bekanntermaßen Zellschäden verursachen (z. B. an Hautzellen). Der ORAC-Wert von beliebigen der aktiven Bestandteile, beliebiger Kombination der Bestandteile oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen kann nach Methoden ermittelt werden, die Fachleuten bekannt sind (siehe US Veröffentlichungsnummern 2004/0109905 und 2005/0163880, sowie durch im Handel erhältliche Kits, wie Zen-Bio ORAC Anti-oxidant Assay Kit (Nr. AOX-2)). Das Zen-Bio ORAC Anti-oxidant Assay Kit misst den Verlust der Fluoreszenz von Fluoreszein im Zeitverlauf durch die Peroxylradikalbildung infolge des Abbaus von AAPH (2,2'-Azobis-2-methylpropanimidamid-dihydrochlorid). Trolox, ein wasserlösliches Vitamin E-Analogon, dient als positive Kontrolle zur Inhibierung des Zerfalls von Fluoreszein in dosisabhängiger Weise.
Produktion von Hyaluronsäure: Änderungen in der Produktion von Hyaluronsäure (HA) in humanen dermalen Fibroblasten infolge von jedem der Wirkstoffe, einem beliebigen von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können gemessen werden. HA ist ein Polysaccharid, das an der Stabilisierung der Struktur der Matrix beteiligt ist und daran beteiligt ist, Gewebe und Zellen Turgordruck bereitzustellen. Die HA-Produktion in behandelten und unbehandelten adulten humanen dermalen Fibroblasten (HDFa)-Zellen kann als nicht-einschränkendes Beispiel unter Verwendung des Hyaluronan DuoSet ELISA Kits von R&D Systems (DY3614) ermittelt werden. In diesem Assay werden subkonfluierende HDFa-Zellen von Cascade Biologics (C-13-5C) 72 Stunden vor der Behandlung bei 37°C und 10 % CO₂ in Hungermedium (0,15 % fetales Kälberserum und 1 % Penicillin-Streptomycin-Lösung in Dulbeccos Modified Eagle Medium) zur Produktion von Proben inkubiert. Die Zellen werden dann 24 Stunden lang mit frischem Hungermedium mit entweder Testverbindung, Positivkontrolle (Phorbol-12-myristat-13-acetat von Sigma-Aldrich (P1585) und thrombozytenabgeleitetem Wachstumsfaktor (PDGF) von Sigma-Aldrich (P3201)) oder ohne Zusatz inkubiert. Dann werden die Medien aufgefangen und bis zur Verwendung in dem ELISA-Assay bei -80°C eingefroren.
Der ELISA-Assay verwendet kurz gesagt eine quantitative Sandwich-Enzym-Immunoassaytechnik, bei der ein für HA spezifischer Einfangantikörper vorab als Beschichtung auf eine Mikroplatte aufgebracht werden kann. Standards und Medien von behandelten und unbehandelten Zellen werden in die Wells der Mikroplatte pipettiert, um zu ermöglichen, dass jegliches vorhandene HA durch den immobilierten Antikörper gebunden wird. Nachdem jegliche ungebundenen Substanzen abgewaschen wurden, wird den Wells ein enzymverknüpfter Detektierungsantikörper zugefügt, der für HA spezifisch ist. Nach einem Waschvorgang, um jegliches nicht gebundene Antikörper-Enzymreagenz zu entfernen, wird den Wells eine Substratlösung zugefügt, um die Farbentwicklung proportional zu der Menge an HA zu ermöglichen, die in dem anfänglichen Schritt gebunden wurde. Die Farbentwicklung wird zu einer bestimmten Zeit gestoppt, und die Intensität der Farbe bei 450 nm kann mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen werden.
Produktion von Occludin: Änderungen in der Produktion von Occludin in Keratinozyten infolge von jedem der Wirkstoffe, einer beliebigen von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können gemessen werden. Occludin ist ein Protein, das für die Formulierung von Tight Junctions und die Feuchtigkeitsbarrierefunktion der Haut entscheidend ist. Ein nicht-einschränkendes Beispiel dafür, wie die Produktion von Occludin in behandelten und unbehandelten Keratinozyten ermittelt werden kann, ist die Verwendung eines Bioassays, der die Occludinkonzentration in Keratinozytenzelllysaten analysiert. Der Bioassay kann unter Verwendung des PROTEINSIMPLE® SIMON™ Western Blotting-Protokolls durchgeführt werden. Bei den Proben können adulte humane Epidermalkeratinozyten (HEKa) von Life Technologies (C-005-5C) 24 Stunden lang bei 37°C und 5 % CO₂ in EPILIFE™-Wachstumsmedium mit Calcium von Life Technologies (M-EP-500-CA) gezüchtet werden, das mit Keratinozytenwachstumszusatz (Keratinocyte Growth Supplement, HKGS) von Life Technologies (S-101-5) versetzt wurde. HEKa werden dann für 24 bis 48 Stunden in Wachstumsmedium mit Testverbindung/Extrakt, ohne Verbindung/Extrakt für Negativkontrolle, oder mit 1 mM CaCl₂ für Positivkontrollen inkubiert. Die HEKa werden dann gewaschen, aufgefangen und auf Eis oder kälter verwahrt, bis sie auf Eis unter Verwendung eines Lysepuffers und Schallbehandlung lysiert werden. Die Proteinkonzentrationen der Proben können ermittelt und verwendet werden, um die Proben zu normalisieren. Die Lysate werden bis zur Verwendung in dem Bioassay bei -80°C aufbewahrt.
Der PROTEINSIMPLE® SIMON™ Western Blotting-Bioassay verwendet eine quantitative Western Blotting-Immumnoassay-Technik, die einen Antikörper nutzt, der für Occludin spezifisch ist, um Occludin in den Testproben quantitativ zu detektieren. Zellproben werden lysiert und auf Proteinkonzentration normalisiert. Normalisierte Proben und Molekulargewichtstandards werden dann auf ein denaturiertes Proteintrenngel, das mit Kapillarelektrophorese arbeitet, geladen und laufen gelassen. Die Proteine werden dann in dem Gel immobilisiert und immunosondiert, wobei ein für Occludin spezifischer primärer Antikörper verwendet wird. Die immobilisierten Proteine werden dann mit einem enzymverknüpften Detektierungsantikörper immunosondiert, der an den primären Antikörper bindet. Dann wird den immobilisierten Proteinen eine Chemilumineszenzsubstratlösung zugefügt, um die Entwicklung von Chemilumineszenz proportional zu der Menge an Occludin zu ermöglichen, die in der Immobilisierung gebunden sind. Die Chemilumineszenzentwicklung kann zu einer bestimmten Zeit gestoppt werden, und die Intensität des Chemolumineszenzsignals kann gemessen und mit positiven und negativen Kontrollen verglichen werden.
Permeabilität einer Keratinozytenmonoschicht: Änderungen in der Permeabilität einer Keratinozytenmonoschicht infolge von jedem der aktiven Bestandteile, einer beliebigen von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können gemessen werden. Die Permeabilität der Keratinozytenmonoschicht ist ein Maß für die Integrität der Hautbarriere. Die Permeabilität der Keratinozytenmonoschicht in behandelten und unbehandelten Keratinozyten kann dann ermittelt werden, wobei als nicht-einschränkendes Beispiel der In Vitro vaskuläre Permeabilitäts-Assay (Vascular Permeability Assay) von Millipore (ECM642) verwendet wird. Dieser Assay analysiert die endotheliale Zelladsorption, Transport und Permeabilität. Kurz gesagt können adulte humane epidermale Keratinozyten von Life Technologies (C-005-5C) auf eine poröse kollagenbeschichtete Membran in einem Auffang-Well geimpft werden. Die Keratinozyten werden dann 24 Stunden lang bei 37°C und 5 % CO₂ in Epilife Wachstumsmedium mit Calcium von Life Technologies (M-EP-500-CA) inkubiert, das mit Keratinozytenzusatz (Keratinocyte Growth Supplement, HKGS) von Life Technologies (S-101-5) versetzt war. Diese Inkubationszeit ermöglicht, dass die Zellen eine Monoschicht bilden und die Membranporen okkludieren. Das Medium wird dann durch frisches Medium mit (Testprobe) oder ohne (unbehandelte Kontrolle) Testverbindungen/Extrakte ersetzt, und die Keratinozyten werden zusätzliche 48 Stunden lang bei 37°C und 5 % CO₂ inkubiert. Das Medium wird zur Ermittlung der Permeabilität der Keratinozytenmonoschicht nach Inkubation mit/ohne die Testverbindung/den Testextrakt durch frisches Medium ersetzt, das ein Fluoreszeinisothiocyanat (FITC)-Dextran mit hohem Molekulargewicht enthält, und die Keratinozyten werden 4 Stunden lang bei 37°C und 5 % CO₂ inkubiert. FITC können während der Inkubation für 4 Stunden die Keratinozytenmonoschicht und poröse Membran in das Auffang-Well hinein mit einer Rate passieren, die zu der Permeabilität der Monoschicht proportional ist. Die Zelllebensfähigkeit und der Gehalt an FITC in den Auffang-Wells kann nach der Inkubation von 4 Stunden ermittelt werden. Das Medium in dem Auffang-Well wird für den FITC-Gehalt aufgefangen, und die Fluoreszenz des Mediums wird bei 480 nm (Em) ermittelt, wenn mit 520 nm angeregt wird. Die prozentuale Permeabilität und prozentuale Änderung im Vergleich mit den unbehandelten Kontrollen kann mithilfe der folgenden Gleichungen ermittelt werden: Prozentuale Permeabilität = ((Mittlerer Ex/Em der Testprobe)/Mittlerer Ex/Em der unbehandelten Kontrolle)* 100, Prozentuale Änderung = Prozentuale Permeabilität der Testprobe - Prozentuale Permeabilität der unbehandelten Kontrolle.
Pilz-Tyrosinaseaktivitäts-Assay: Bei Säugerzellen katalysiert Tyrosinase zwei Stufen in der mehrstufigen Biosynthese von Melaninpigmenten aus Tyrosin (und aus der Polymerisation von Dopachrom). Tyrosinase befindet sich in Melanozyten und produziert Melanin (aromatische Chinonverbindungen), die Haut, Haar und Augen Farbe verleihen. Gereinigte Pilz-Tyrosinase (Sigma) kann mit ihrem Substrat L-Dopa (Fisher) in Gegenwart oder Abwesenheit von jedem der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen inkubiert werden. Die Pigmentbildung kann durch kolorimetrische Plattenablesung bei 490 nm beurteilt werden. Die prozentuale Inhibierung der Pilz-Tyrosinaseaktivität kann verglichen mit unbehandelten Kontrollen berechnet werden, um die Fähigkeit von Testextrakten zu ermitteln, die Aktivität von gereinigtem Enzym zu inhibieren. Die Inhibierung des Testextrakts wurde mit derjenigen von Kojisäure (Sigma) verglichen.
Cyclooxygenase (COX)-Assay: Ein in vitro-Cyclooxygenase-1 und -2 (COX-1, -2)-Inhibitions-Assay. COX ist ein bifunktionales Enzym, das sowohl Cyclooxygenase als auch Peroxidaseaktivität zeigt. Die Cyclooxygenaseaktivität wandelt Arachidonsäure in ein Hydroperoxyendoperoxid (Prostaglandin G2; PGG2) um, und die Peroxidasekomponente reduziert das Endoperoxid (Prostaglandin H2; PGH2) zu dem entsprechenden Alkohol, dem Vorläufer der Prostaglandine, Thromboxane und Prostacycline. Dieser COX-Inhibitor-Screening-Assay misst die Peroxidasekomponente von Cyclooxygenasen. Die Peroxidaseaktivität wird kolorimetrisch beurteilt, indem das Erscheinen von oxidiertem N,N,N',N'-Tetramethyl-p-phenylendiamin (TMPD) überwacht wird. Dieser Inhibitor-Screening-Assay schließt sowohl COX-1 als auch COX-2-Enzyme ein, um auf isozymspezifische Inhibitoren zu screenen. Der kolorimetrische COX (Ovin) Inhibitor-Screening-Assay (Nr. 760111, Cayman Chemical) kann verwendet werden, um die Wirkungen von jeder/jedem der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen auf die Aktivität von gereinigtem Cyclooxygenase-Enzym (COX-1 oder COX-2) zu analysieren. Gereinigtes Enzym, Häm und Testextrakte können nach Anweisungen des Herstellers in Assay-Puffer gemischt und unter Schütteln 15 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert werden. Nach der Inkubation können Arachidonsäure und kolorimetrisches Substrat zugefügt werden, um die Reaktion zu initiieren. Die Farbprogression kann durch kolorimetrische Plattenablesung bei 590 nm beurteilt werden. Die prozentuale Inhibierung der COX-1- oder COX-2-Aktivität kann verglichen mit unbehandelten Kontrollen berechnet werden, um die Fähigkeit von Testextrakten zu ermitteln, die Aktivität von gereinigtem Enzym zu inhibieren.
Ölkontroll-Assay Ein Assay zur Messung der Reduktion der Talgsekretion aus Talgdrüsen und/oder der Reduktion der Talgproduktion aus Talgdrüsen kann beurteilt werden, indem Standardtechniken verwendet werden, die Fachleuten bekannt sind. In einem Fall kann die Stirn verwendet werden. Jeder der aktiven Bestandteile, eine beliebige Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen kann ein oder zwei Mal pro Tag für einen festgelegten Zeitraum (z. B. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 oder mehr Tage) auf die Stirn aufgetragen werden, während ein weiterer Teil der Stirn nicht mit der Zusammensetzung behandelt wird. Nachdem der festgesetzte Zeitraum von Tagen vergangen ist, kann die Talgsekretion durch Aufbringen von feinem Löschpapier auf die behandelte und unbehandelte Haut der Stirn beurteilt werden. Dies erfolgt, indem zuerst mit feuchten und trockenen Tüchern jeglicher Talg von den behandelten und unbehandelten Bereichen entfernt wird. Dann kann Löschpapier auf die behandelten und unbehandelten Bereiche der Stirn aufgebracht werden, und um die Stirn kann ein Elastikband angeordnet werden, um das Löschpapier sanft auf die Haut zu drücken. Nach 2 Stunden können die Löschpapiere entfernt, trocknen gelassen und dann durchleuchtet werden. Dunkleres Löschpapier korreliert mit mehr Talgsekretion (oder helleres Löschpapier korreliert mit reduzierter Talgsekretion).
Erythem-Assay: Ein Assay zur Messung der Reduktion der Hautröte kann mit einem Minolta-Chromameter beurteilt werden. Das Hauterythem kann induziert werden, indem auf den Unterarm eines Probanden eine 0,2-prozentige Lösung von Natriumdodecylsulfat aufgetragen wird. Der Bereich wird 24 Stunden lang durch ein Okklusivpflaster geschützt. Das Pflaster wird nach 24 Stunden entfernt, und die durch die Reizung induzierte Röte kann mit den a*-Werten des Minolta-Chromameters bewertet werden. Der a*-Wert misst Veränderungen der Hautfarbe im roten Bereich. Unmittelbar nach der Ablesung wird der Bereich mit den aktiven Bestandteilen, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen behandelt. In regelmäßigen Intervallen können Wiederholungsmessungen durchgeführt werden, um die Fähigkeit der Formulierung zu ermitteln, Röte und Reizung zu reduzieren.
Assay zur Hautklarheit und Reduktion von Sommersprossen und Altersflecken: Hautklarheit und Reduktion von Sommersprossen und Altersflecken können mit einem Minolta-Chromameter beurteilt werden. Änderungen der Hautfarbe können mit den a*-Werten des Minolta-Chromameters bewertet werden, um das Reizpotential infolge der Produktbehandlung zu bestimmen. Der a*-Wert misst Veränderungen der Hautfarbe im roten Bereich. Dies wird verwendet, um zu ermitteln, ob jeder der aktiven Bestandteile, eine beliebige von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen Reizung induzieren. Die Messungen können auf jeder Seite des Gesichts erfolgen und als linke und rechte Gesichtswerte gemittelt werden. Die Hautklarheit kann auch mit dem Minolta-Meter gemessen werden. Die Messung ist eine Kombination der a*, b und L-Werte des Minolta-Meters und ist verknüpft mit der Helligkeit der Haut und korreliert gut mit Glattheit und Hydratation der Haut. Die Hautablesung erfolgt wie oben. Die Hautklarheit kann in einem nicht-einschränkenden Aspekt als L/C beschrieben werden, wobei C Chroma ist und definiert ist als (a²+ b² )^1/2.
Assay zu Hauttrockenheit, feinen Oberflächenlinien, Glattheit der Haut und Hautton: Hauttrockenheit, feine Oberflächenlinien, Hautglattheit und Hautton können mit klinischen Einstufungstechniken beurteilt werden. Die klinische Einstufung der Hauttrockenheit kann beispielsweise nach der fünfstufigen Standard-Kligman-Skala erfolgen: (0) Haut ist weich und feucht; (1) Haut sieht normal aus ohne sichtbare Trockenheit; (2) Haut fühlt sich bei Berührung etwas trocken an ohne sichtbare Schuppung; (3) Haut fühlt sich trocken und rau an und hat ein weißliches Aussehen mit etwas Schuppung; und (4) Haut fühlt sich sehr trocken und rau an und hat ein weißliches Aussehen mit Schuppung. Die Beurteilungen können unabhängig durch zwei Kliniker erfolgen und gemittelt werden.
Assay zur klinischen Einstufung des Hauttons: Die klinische Einstufung des Hauttons kann nach einer zehnpunktigen analogen numerischen Skala erfolgen: (10) ebenmäßige Haut mit einheitlicher rosabräunlicher Farbe. Keine dunklen, erythemischen oder schuppigen Stellen bei Untersuchung mit einer handgeführten Lupe. Die Mikrotextur der Haut ist bei Berührung sehr gleichförmig; (7) ebenmäßiger Hautton ohne Vergrößerung beobachtet. Keine schuppigen Stellen, aber leichte Verfärbungen durch Pigmentierung oder Erythem. Keine Verfärbungen von mehr als 1 cm Durchmesser; (4) sowohl Hautverfärbung als auch ungleichförmige Textur leicht wahrnehmbar. Leichte Schuppigkeit. Haut in einigen Bereichen bei Berührung rau; und (1) uneinheitliche Hautfärbung und -textur. Zahlreiche schuppige und verfärbte Bereiche, entweder hypopigmentiert, erythemisch oder dunkle Flekken. Große Bereiche von ungleichförmiger Farbe mit mehr als 1 cm Durchmesser. Die Beurteilungen wurden unabhängig durch zwei Kliniker durchgeführt und gemittelt.
Assay zur klinischen Einstufung der Hautglattheit: Die klinische Einstufung der Hautglattheit kann nach einer zehnpunktigen analogen numerischen Skala erfolgen: (10) glatt, Haut ist feucht und schimmert, kein Widerstand, wenn der Finger über die Oberfläche gezogen wird; (7) ziemlich glatt, leichter Widerstand; (4) rau, sichtbar verändert, Widerstand beim Darüberreiben; und (1) raue, schuppige, uneinheitliche Oberfläche. Die Beurteilungen wurden unabhängig durch zwei Kliniker durchgeführt und gemittelt.
Hautglattheit und Faltenreduktions-Assay nach Verfahren, die in Packman et al. , 1978) offenbart sind: Hautglattheit und Faltenreduktion können auch visuell nach den in Packman et al. (1978) offenbarten Verfahren beurteilt werden. Bei jeder Visite des Probanden werden beispielsweise die Tiefe, Flachheit und Gesamtzahl der oberflächlichen Gesichtslinien (SFL) jedes Probanden sorgfältig beurteilt und aufgezeichnet. Ein Zahlen-Score wurde erhalten, indem ein Zahlenfaktor mit einem Faktor für Tiefe/Breite/Länge multipliziert wurde. Für den Augenbereich und Mundbereich (linke und rechte Seiten) wurden Scores erhalten und als Gesamtfalten-Score zusammengezählt.
Assay zum Erscheinungsbild von Linien und Falten mit Replikas: Das Erscheinungsbild von Linien und Falten auf der Haut kann mit Replikas beurteilt werden, die der Abdruck der Hautoberfläche sind. Es kann silikongummiartiges Material verwendet werden. Die Replika kann durch Bildanalyse analysiert werden. Änderungen der Sichtbarkeit von Linien und Falten lassen sich objektiv quantifizieren, indem Silikonreplikas vom Gesicht des Probanden genommen und die Replikabilder mit einem Computer-Bildanalysesystem analysiert werden. Replikas können vom Augenbereich und dem Halsbereich genommen und mit einer Digitalkamera mit einer Beleuchtung mit flachem Einfallwinkel fotografiert werden. Die Digitalbilder können mit einem Bildverarbeitungsprogramm analysiert werden, und der Bereich der mit Falten oder feinen Linien bedeckten Replikas wird dann ermittelt.
Hautstraffheits-Assay mit einem Hargens-Ballistometer: Die Hautstraffheit kann mit einem Hargens-Ballistometer gemessen werden, einem Gerät, das die Elastizität und Straffheit der Haut beurteilt, indem ein kleiner Körper auf die Haut fallen gelassen und dessen ersten beiden Abprall-Peaks aufgezeichnet werden. Für die Ballistometrie wurde eine kleine leichte Sonde mit einer relativ stumpfen Spitze (4 mm² Kontaktfläche) verwendet. Die Sonde dringt etwas in die Haut ein und führt zu Messungen, die von den Eigenschaften der äußeren Hautschichten abhängen, einschließlich des Stratum corneum und der äußeren Epidermis und einigen der Dermalschichten.
Hautweichheit/Geschmeidigkeits-Assay mit einem Gaslager-Elektrodynamometer: Hautweichheit/Geschmeidigkeit können mit dem Gaslager-Elektrodynamometer beurteilt werden, einem Instrument, welches die Spannungs/Dehnungs-Eigenschaften der Haut misst. Die viskoelastischen Eigenschaften der Haut korrelieren mit der Hautfeuchtigkeit. Messungen können an der festgelegten Stelle des Wangenbereichs erhalten werden, indem die Sonde mit doppelseitigem Klebeband an der Hautoberfläche befestigt wird. Eine Kraft von annähernd 3,5 g kann parallel zu der Hautoberfläche angelegt werden, und die Hautverschiebung wird genau gemessen. Die Geschmeidigkeit der Haut kann dann berechnet werden und wird als DSR angegeben (dynamische Federkonstante in g/mm).
Assay zur Oberflächenkontur der Haut nach einem Profilometer/Griffel-Verfahren: Die Oberflächenkontur der Haut kann nach dem Profilometer/Griffelverfahren gemessen werden. Hierzu wird entweder mit einem Licht über die Replikaoberfläche geleuchtet oder ein Griffel über diese gezogen. Die vertikale Verschiebung des Griffels kann über einen Abstandsmesswertwandler in einen Computer eingespeist werden, und nach dem Scannen einer festen Länge der Replika kann eine Querschnittanalyse des Hautprofils als zweidimensionale Kurve generiert werden. Dieser Scan kann mehrmals entlang einer festen Achse wiederholt werden, um ein simuliertes 3D-Bild der Haut zu generieren. Es lassen sich zehn statistische Schnitte der Replikas nach der Griffeltechnik erhalten und kombinieren, um Durchschnittswerte zu generieren. Die interessierenden Werte beinhalten Ra, das arithmetische Mittel aller Rauheits (Höhen)-Werte, die durch Integrieren der Profilhöhe relativ zu der mittleren Profilhöhe berechnet werden. Rt ist der maximale vertikale Abstand zwischen dem höchsten Peak und dem tiefsten Tal, und Rz ist die mittlere Peak-Amplitude minus der mittleren Peak-Höhe. Die Werte werden als kalibrierter Wert in mm angegeben. Die Geräte sollten vor jeder Verwendung durch Scannen von Metallstandards mit bekannten Werten standardisiert werden. Der Wert für Ra kann nach der folgenden Gleichung berechnet werden: Ra = Standardisierte Rauheit, Im = die (Scan)-Länge in Querrichtung und y = der Absolutwert der Position des Profils relativ zu der mittleren Profilhöhe (x-Achse).
MELANODERM™-Assay: In anderen nicht-einschränkenden Aspekten kann die Wirksamkeit von jedem der aktiven Bestandteile, einer beliebigen Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen unter Verwendung eines Hautanalogons, wie beispielsweise MELANODERM™, beurteilt werden. Melanozyten, eine der Zellen des Hautanalogons, werden positiv gefärbt, wenn sie L-Dihydroxyphenylalanin (L-DOPA), einem Vorläufer von Melanin, ausgesetzt werden. Das Hautanalogon, MELANODERM™, kann mit einer Vielfalt von Basismaterialien behandelt werden, die jeden der aktiven Bestandteile, eine beliebige von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen enthalten, oder mit dem Basismaterial allein als Kontrolle. Alternativ kann eine unbehandelte Probe des Hautanalogons als Kontrolle verwendet werden.
Inhibierung der Aktivität von Hyaluronidase: Änderungen in der Aktivität der Hyaluronidase infolge von jedem der aktiven Bestandteile, einer beliebigen von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können gemessen werden. Hyaluronidase ist ein Enzym, das HA abbaut. HA ist ein Polysaccharid, das an der Stabilisierung der Struktur der Matrix beteiligt ist und daran beteiligt ist, Gewebe und Zellen Turgordruck bereitzustellen. Die Hyaluronidaseaktivität kann als nicht-einschränkendes Beispiel unter Verwendung eines in vitro-Protokolls ermittelt werden, das aus dem Sigma-Aldrich Protokoll Nr. EC 3.2.1.35 modifiziert wurde. Kurz gesagt wird Hyaluronidase Typ 1-S von Sigma-Aldrich (H3506) zu Mikroplattenreaktions-Wells gegeben, die Testverbindung oder Kontrollen enthalten. Tanninsäure kann als Positivkontrollinhibitor verwendet werden, als Kontrollenzym ist die fehlende Zugabe von Testverbindung möglich, und Wells mit Testverbindung oder Positivkontrolle, jedoch ohne Hyaluronidase, können als Hintergrundnegativkontrolle verwendet werden. Vor Zugabe des Substrats (HA) werden die Wells 10 Minuten lang bei 37°C inkubiert. Substrat wird zugegeben, und die Reaktionen werden 45 Minuten lang bei 37°C inkubiert. Ein Teil jeder Reaktionslösung wird dann in eine Lösung von Natriumacetat und Essigsäure mit einem pH-Wert von 3,75 überführt und vorsichtig gemischt, um diesen Teil der Reaktion zu stoppen (gestoppte Wells). Die gestoppten Wells und Reaktions-Wells sollten beide das gleiche Volumen an Lösung enthalten, nachdem der Teil der Reaktionslösung zu den gestoppten Wells gegeben wurde. Sowohl die Reaktions-Wells als auch die gestoppten Wells wurden 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Sowohl für die Reaktions-Wells als auch die gestoppten Wells wurde dann die Extinktion bei 600 nm gemessen. Die Inhibierung kann unter Verwendung der folgenden Formeln berechnet werden. Aktivität von Inhibitor (oder Kontrolle) = (Extinktion der mit Inhibitor gestoppten Wells bei 600 nm - Extinktion der Inhibitorreaktions-Wells bei 600 nm); Anfangsaktivität = Kontrollenzymextinktion bei 600 nm; Prozentuale Inhibierung = [(Anfangsaktivität/ Inhibitoraktivität)* 100]-100.
Aktivität von Peroxisom-Proliferator-aktiviertem Rezeptor Gamma (PPAR-γ): Änderungen in der Aktivität der PPAR-γ infolge von jedem der aktiven Bestandteile, einer beliebigen von der Kombination von Bestandteilen oder Zusammensetzungen mit den in der Beschreibung offenbarten Kombinationen können gemessen werden. PPAR-γ ist ein Rezeptor, der für die Produktion von Hauttalg (Sebum) entscheidend ist. Die Aktivität von PPAR-γ kann als ein nicht-einschränkendes Beispiel unter Verwendung eines Bioassays ermittelt werden, der die Fähigkeit einer Testverbindung oder Zusammensetzung zum Inhibieren der Bindung eines Liganden analysiert. Kurz gesagt kann der fluoreszierende kleinmolekulare pan-PPAR-Ligand, FLUORMONE™ Pan-PPAR Grün, erhältlich von Life Technologies (PV4894), verwendet werden, um zu ermitteln, ob Testverbindungen oder Zusammensetzungen in der Lage sind, die Bindung des Liganden an PPAR-γ zu inhibieren. Die Proben-Wells schließen PPAR-γ und fluoreszierenden Liganden und entweder: Testverbindung oder Zusammensetzung (Test), einen Referenzinhibitor, Rosiglitazon (Positivkontrolle), oder keine Testverbindung (Negativkontrolle) ein. Die Wells werden für einen festgelegten Zeitraum inkubiert, um dem Liganden Gelegenheit zu geben, den PPAR-γ zu binden. Die Fluoreszenzpolarisierung jedes Proben-Wells kann dann gemessen und mit dem Negativkontroll-Well verglichen werden, um den Prozentsatz der Inhibierung durch die Testverbindung oder Zusammensetzung zu ermitteln.
Zytokin-Array: Humane epidermale Keratinozyten wurden bis zu 70 bis 80 % Konfluenz kultiviert. Das Medium in der Platte wurde aspiriert, und es wurde 0,025 % Trypsin/EDTA zugegeben. Als die Zellen abgerundet wurden, wurde die Kulturschale sanft geklopft, um die Zellen zu lösen. Die Trypsin/EDTA enthaltenden Zellen wurden aus der Kulturschale entfernt und neutralisiert. Die Zellen wurden 5 min mit 180 x g zentrifugiert, um ein Pellet aus Zellen zu bilden. Der Überstand wurde aspiriert. Das resultierende Pellet wurde in EPILIFE™ Medium (Cascade Biologics) erneut suspendiert. Die Zellen wurden auf 6-Well-Platten mit ungefähr 10 bis 20 % Konfluenz geimpft. Nachdem die Zellen ungefähr 80 % konfluent geworden waren, wurde das Medium aspiriert, und 1,0 ml EPILIFE™ wurde zusammen mit Phorbol-13-myristat-12-acetat („PMA“) (einem bekannten Induktor von Entzündung) und den Testzusammensetzungsverdünnungen zu zwei Replikat-Wells gegeben (d. h. 1,0 % (100 µl von 100X Vorratsmaterial) und 0,1 % (10 µl 100X Vorratsmaterial) Testzusammensetzungen wurden auf ein Endvolumen von 1 ml EpiLife™ Wachstumsmedium verdünnt). Das Medium wurde sanft verwirbelt, um adäquates Mischen zu gewährleisten. Es wurden zusätzlich 1,0 ml EPILIFE™ zu den Kontroll-Wells gegeben, mit und ohne zusätzliches PMA. Die Platten wurden für ungefähr 5 Stunden nach dem Dosieren dann mit 37 ± 1°C und 5,0 ± 1 % CO₂ inkubiert. Nach dieser 5-stündigen Inkubierung wurden alle Medien in konischen Röhrchen aufgefangen und bei -70°C eingefroren.
Zur Analyse wurde eine 16-Pad-Hybridisierungskammer an 16-Pad-FAST-Objektträgern befestigt, die in Dreierreihen mit 16 Anti-Zytokin-Antikörpern plus experimentellen Kontrollen (Whatman BioSciences) gruppiert wurden, und die Objektträger wurden zur Verarbeitung in einem FASTFrame (4 Objektträger pro Rahmen) platziert. Die Gruppierungen (Arrays) wurden 15 Minuten bei Raumtemperatur unter Verwendung von 70 ml S&S Protein Array Blocking buffer „Blockierpuffer“ (Whatman Schleicher und Scheull) blockiert. Der Blockierpuffer wurde entfernt, und 70 ml jeder Überstandprobe wurde zu jedem Array gegeben. Die Arrays wurden unter leichter Bewegung 3 Stunden lang bei Raumtemperatur inkubiert. Die Arrays wurden 3 Mal mit TBS-T gewaschen. Die Arrays wurden mit 70 ml eines Antikörper-Cocktails behandelt, der einen biotinylierten Antikörper enthielt, entsprechend jedem der gruppierten Einfangantikörper. Die Arrays wurden unter leichter Bewegung 1 Stunden lang bei Raumtemperatur inkubiert. Die Arrays wurden 3 Mal mit TBS-T gewaschen. Die Arrays wurden 1 Stunde lang bei Raumtemperatur unter sanfter Bewegung mit 70 ml Lösung, die Streptavidin-Cy5-Konjugat enthielt, inkubiert. Arrays wurden 3 Mal mit TBS-T gewaschen, rasch mit entionisiertem Wasser abgespült und getrocknet.
Die Objektträger wurden in einem Perkin-Elmer ScanArray 4000 konfokalen Fluoreszenzbildgebungssystem Bildgebung unterzogen. Bilder der Arrays können gespeichert und unter Verwendung der Software Imaging Research Array Vision analysiert werden. Kurz gesagt wurden die Intensitäten der Spots durch Subtraktion von Hintergrundsignalen bestimmt. Replikate der Spots aus jeder Probenbedingung können gemittelt und dann mit den geeigneten Kontrollen verglichen werden.
Bildung von Endothelialrohren: Die Bildung von Endothelialrohren ist an der Angiogenese und der Bildung von Mikrogefäßkapillaren beteiligt. Kapillarbildung und Angiogenese können zu Rötung und Rosazea der Haut beitragen. Die Fähigkeit der Endothelialzellen, in Anwesenheit oder Abwesenheit der Testextrakte und -verbindungen Rohre (Tubuli) zu bilden, kann mit einem Kapillartubuliunterbrechungs-Assay mit vorgebildeten primären humanen Nabelschnurvenenendothelialzellen (HUVEC) in einem Zellkultursystem ermittelt werden.
HUVECs werden kurz gesagt in vitro auf extrazellulärer Matrix kultiviert, die die Anhaftung und tubuläre Morphogenese von Endothelialzellen stimuliert, um kapillarartige Lumenstrukturen zu bilden. Diese in vitro gebildeten Kapillartubuli sind humanen Blutgefäßkapillaren in vielerlei Hinsicht ähnlich. Auf diesem Phänomen basiert der Kapillarrohr-Assay, und er wird zur Bewertung von Mitteln verwendet, die potentiell auf das Gefäßsystem zielen.
HUVEC-Kulturen werden in einem Zellinkubator mit 5 % CO₂ 37°C gezüchtet. Das vollständige Wachstumsmedium für HUVECs ist Endothelialzellen-Basalmedium (Endothelial Cell Basal Medium, EBM) mit Zusatz von 2 % fötalem Kälberserum (FBS), 12 µg/ml Rinderhirnextrakt, 1 µg/ml Hydrocortison und 1 µg/ml GA-1000 (Gentamicin-Amphothericin). HUVEC-Kulturen können zwischen Durchgang 3 und 8 für alle Assay-Experimente verwendet werden.
HUVECs werden mit dem Fluoreszenzmittel Calcein AM vormarkiert und mit ihrem vollständigen Wachstumsmedium in mit extrazellulärer Matrix beschichtete 96 Well-Kulturplatte geimpft. Die Endothelialkapillarrohre sollten nach etwa vier Stunden des Morphogeneseprozesses gebildet werden. Dann wird Testmittel in vorgesehenen Dosen in 50 µl Volumen als Behandlungsbedingungen in die gebildeten Kapillarrohrkulturen appliziert. Den behandlungsfreien Kontrollen kann Vehikel der Testmittel zugefügt werden. Sutent, ein FDA-zugelassenes antiangiogenes Arzneimittel, kann in einer Konzentration als Kontrolle für die Leistung des Assays eingeschlossen werden. Die Endothelialtubulimorphologie wird nach etwa sechs Behandlungsstunden in jedem Well mikroskopisch untersucht, Bildgebung unterzogen, und die Kapillarunterbrechungsaktivitäten unter den Behandlungsbedingungen lassen sich quantitativ analysieren. Alle Testbedingungen können in Zweierreihen-Wells durchgeführt werden, auch die Kontrollen.
Alle hier offenbarten und beanspruchten Zusammensetzungen und/oder Verfahren können ohne unnötigen experimentellen Aufwand im Lichte der vorliegenden Offenbarung umgesetzt und ausgeführt werden. Obwohl die Zusammensetzungen und Verfahren dieser Erfindung in Bezug auf bevorzugte Ausführungsformen beschrieben wurden, wird dem Fachmann klar sein, dass in Bezug auf Zusammensetzungen und/oder Verfahren sowie in den Stufen oder der Abfolge der Stufen des hier beschriebenen Verfahrens Variationen angewendet werden können, ohne vom Konzept, der Idee und dem Umfang der Erfindung abzuweichen. Es ist spezieller offensichtlich, dass bestimmte Mittel, die sowohl chemisch als auch physiologisch verwandt sind, die hier beschriebenen Mittel ersetzen können, während dieselben oder ähnliche Ergebnisse erhalten werden. Alle derartigen ähnlichen Ersatzstoffe und Modifikationen, die dem Fachmann offensichtlich sind, werden als innerhalb der Idee, des Umfangs und Konzepts der Erfindung wie in den angefügten Ansprüchen definiert angesehen.
ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG
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Zitierte Patentliteratur

US 63/014517 [0001]

Claims

Verwendung einer Zusammensetzung, die eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, zur Steigerung der Hauthydratation bei einer Person, wobei die Verwendung topisches Auftragen der Zusammensetzung auf die Haut der Person umfasst, wobei topische Auftragung der Zusammensetzung Feuchtigkeit in der Luft anzieht und an die Außenschichten der Haut bindet, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut transportiert, den Hautfeuchtigkeitsgehalt erhöht, die Haut aufpolstert und strafft, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung schützt, optimale Hautbarrierefunktion unterstützt und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors stimuliert.
Verwendung nach Anspruch 1, bei der die Zusammensetzung 0,001 bis 1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt, 0,01 bis 10 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat und 0,001 bis 1 Gew.% Ceramid umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, bei der die Zusammensetzung vor der Auftragung auf die Haut mit einer oder mehreren anderen Hautpflegezusammensetzungen kombiniert wird.
Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, bei der die Zusammensetzung des Weiteren ein oder mehrere von einem Feuchthaltemittel, einem Aufweichmittel, einem Hautkonditionierungsmittel und/oder einem pH-Einstellmittel umfasst.
Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, bei der die Zusammensetzung des Weiteren eine effektive Menge von einem oder mehreren von Wasser, Glycerin, Pentylenglykol, Betain und/oder Phenoxyethanol umfasst, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen und/oder den Hydratationseffekt eines Hautprodukts zu steigern.
Verwendung nach Anspruch 5, bei der die Zusammensetzung 1 bis 95 Gew.% Wasser, 1 bis 30 Gew.% Glycerin, 0,1 bis 15 Gew.% Pentylenglykol, 0,1 bis 15 Gew.% Betain und/oder 0,05 bis 10 Gew.% Phenoxyethanol umfasst.
Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 6, bei der die Zusammensetzung des Weiteren ein oder mehrere von Xanthangummi und Natriumhyaluronat umfasst.
Verwendung nach Anspruch 7, bei der die Zusammensetzung 0,01 bis 5 Gew.% Xanthangummi, 0,01 bis 1 Gew.% Natriumhyaluronat umfasst.
Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, bei der die Zusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung den Feuchtigkeitsgehalt der Haut nach einer einzigen Auftragung um mindestens 50 % erhöht.
Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, bei der die Zusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, wobei die topische Auftragung der Zusammensetzung die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors der Haut stimuliert.
Verwendung einer Kombination aus einer Steigerungszusammensetzung und der Hautpflegezusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 10 zur Steigerung der Hydratationsaktivität der Hautpflegezusammensetzung, wobei die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um eine Fähigkeit der Kosmetikzusammensetzung zu erhöhen oder zu begünstigen, Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, den Hautfeuchtigkeitsgehalt zu erhöhen, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren.
Verwendung nach Anspruch 11, bei der die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut in einer einzigen Auftragung um mindestens 50 % zu erhöhen.
Verwendung nach Anspruch 11 oder Anspruch 12, bei der die Steigerungszusammensetzung eine effektive Menge an Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren.
Produktsteigerungszusammensetzung, die eine effektive Menge einer Kombination von Verbena officinalis-Extrakt, hydrolysiertem Natriumhyaluronat und Ceramid umfasst, um Feuchtigkeit in der Luft anzuziehen und an die Außenschichten der Haut zu binden, Oberflächenfeuchtigkeit unter das Stratum corneum der Haut zu transportieren, den Hautfeuchtigkeitsgehalt zu erhöhen, die Haut aufzupolstern und zu straffen, die Haut vor Feuchtigkeitsverlust an die Umgebung zu schützen, optimale Hautbarrierefunktion zu unterstützen und/oder die Produktion des hauteigenen natürlichen Feuchtigkeitsfaktors zu stimulieren.
Zusammensetzung nach Anspruch 14, die 0,001 bis 1 Gew.% Verbena officinalis-Extrakt, 0,01 bis 10 Gew.% hydrolysiertes Natriumhyaluronat und 0,001 bis 1 Gew.% Ceramid umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 14 oder Anspruch 15, die des Weiteren ein oder mehrere von einem Feuchthaltemittel, einem Aufweichmittel, einem Hautkonditionierungsmittel und/oder einem pH-Einstellmittel umfasst.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 14 bis 16, die des Weiteren eine effektive Menge von einem oder mehreren von Wasser, Glycerin, Pentylenglykol, Betain und/oder Phenoxyethanol umfasst, um den Feuchtigkeitsgehalt der Haut zu erhöhen und/oder den Hydratationseffekt eines Hautprodukts zu steigern.
Zusammensetzung nach Anspruch 17, die 1 bis 95 Gew.% Wasser, 1 bis 30 Gew.% Glycerin, 0,1 bis 15 Gew.% Pentylenglykol, 0,1 bis 15 Gew.% Betain und/oder 0,05 bis 10 Gew.% Phenoxyethanol umfasst.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 14 bis 18, die des Weiteren ein oder mehrere von Xanthangummi und Natriumhyaluronat umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 19, die 0,01 bis 5 Gew.% Xanthangummi, 0,01 bis 1 Gew.% Natriumhyaluronat umfasst.