DE19805385C1 - Bifidogene Peptide - Google Patents

Bifidogene Peptide

Info

Publication number
DE19805385C1
DE19805385C1 DE19805385A DE19805385A DE19805385C1 DE 19805385 C1 DE19805385 C1 DE 19805385C1 DE 19805385 A DE19805385 A DE 19805385A DE 19805385 A DE19805385 A DE 19805385A DE 19805385 C1 DE19805385 C1 DE 19805385C1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
peptides
milk
peptide
peptides according
fractions
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE19805385A
Other languages
English (en)
Inventor
Hans-Dieter Zucht
Wolf-Georg Prof Dr Forssmann
Cornelia Liepke
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
FORSSMANN WOLF GEORG PROF DR
Original Assignee
FORSSMANN WOLF GEORG PROF DR
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to DE19805385A priority Critical patent/DE19805385C1/de
Application filed by FORSSMANN WOLF GEORG PROF DR filed Critical FORSSMANN WOLF GEORG PROF DR
Priority to US09/508,095 priority patent/US6849593B1/en
Priority to DE59810294T priority patent/DE59810294D1/de
Priority to AT98951420T priority patent/ATE255130T1/de
Priority to ES98951420T priority patent/ES2212357T3/es
Priority to JP2000511780A priority patent/JP2001516570A/ja
Priority to EP98951420A priority patent/EP1028977B1/de
Priority to PCT/EP1998/005899 priority patent/WO1999014231A2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE19805385C1 publication Critical patent/DE19805385C1/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4732—Casein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/76—Albumins
    • C07K14/765—Serum albumin, e.g. HSA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1013—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2462—Lysozyme (3.2.1.17)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft bifidogene Peptide, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie die Verwendung der bifidogenen Pep­ tide.
Von Milch ist bekannt, daß sie fördernd auf den Gesundheitszu­ stand von Säuglingen wirkt. Dies wird vielfach auf den Einfluß der Milch auf die Ausbildung einer säuglingstypischen Darmflora zurückgeführt, die zu mehr als 90% aus Bifidobacterium bifidum besteht.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es Peptide bereitzustel­ len, die einen positiven Einfluß auf die Darmflora haben.
Die erfindungsgemäße Aufgabe wird gelöst durch Peptide mit den Merkmalen des Patentanspruchs 1. Bei den erfindungsgemäßen Peptiden handelt es sich um Peptide, die erhältlich sind durch
  • - Versetzen von Kuhmilch oder Humanmilch mit Proteasen und anschließender Inkubation für zwei Stunden,
  • - Zentrifugation, um Milchfett zu entfernen,
  • - Ansäuern auf einen pH von 2,0 durch starke Säuren,
  • - Abtrennung der ausgefallenen Proteine,
  • - Anwendung mindestens eines Keverse-Phase-HPLC-Schrittes,
  • - Anwendung eines Kationenaustauscher-HPLC-Schrittes,
  • - Sammeln von Fraktionen,
  • - Einstellen der Fraktion auf einen Salzgehalt < 25 mM für die Durchführung von Aktivitätstests durch Dialyse oder Reverse-Phase-HPLC,
  • - Kultivierung von Bifidobakterium Bifidum und E. coli in Gegenwart der Fraktionen und Auswahl von Fraktionen, die der Bedingung
    genügen, worin BW die Keimzahl bezeichnet, die bei 16stündiger Inkubation von Bifidobakterium Bifidum in 50% Elliker Nährmedium (Elliker Broth) in Gegenwart der Peptide in einer Konzentration von 200 µg/ml erhalten wird,
    BO die Keimzahl bezeichnet, die bei der wirkstofffreien Kontrollinkubation erhalten wird,
    EW die Keimzahl bezeichnet, die bei 16stündiger Inkubation von E. coli in 3 g/l tryptischem Soja Nährmedium (Tryptic Soy Broth) in Gegenwart der Peptide in einer Konzentration von 200 µg/l erhalten wird,
    EO die Keimzahl bezeichnet, die bei der wirkstofffreien Kontrollinkubation erhalten wird,
  • - Isolierung des in dieser Fraktion vorhandenen Peptids
  • - sowie die amidierten, acetylierten, sulfatierten, phospho­ rylierten, glycosylierten, oxydierten Derivate oder Frag­ mente mit bifidogenen Eigenschaften.
Die erfindungsgemäßen Peptide wirken antimikrobiell gegen Bakterien, die in der natürlichen Säuglingsdarmflora nicht oder nur in geringen Mengen vorkommen und fördern das Wachstums von erwünschten Bakterien wie Bifidobakterien, indem sie die Bifido­ bakterien im Wachstum stärker als andere Bakterien fördern oder nur die nichterwünschten Bakterien selektiv hemmen. Diese Eigenschaft, Bifidobakterien einen Wachstumsvorteil zu verschaf­ fen, wird als bifidogen bezeichnet.
Bevorzugt werden Peptide eingesetzt, die folgende Aminosäurese­ quenz aufweisen:
worin
R1, R3 unabhängig voneinander NH2, eine Aminosäure oder ein Peptid mit bis 100 Aminosäuren darstellen und
R2, R4 unabhängig voneinander COOH, CONH2, eine Aminosäure oder ein Peptid mit bis zu 100 Aminosäuren darstellen und die ami­ dierten, acetylierten, sulfatierten, phosphorylierten, glycosy­ lierten, oxydierten Derivate oder Fragmente mit bifidogenen Eigenschaften.
Bevorzugt weisen R1, R2, R3, R4 eine Länge von bis zu 50, mehr bevorzugt von bis zu 20 und am meisten bevorzugt eine Länge von bis zu 10 Aminosäuren auf.
Die erfindungsgemäßen Peptide können durch Aufreinigung aus Kuhmilch oder Humanmilch erhalten werden. Alternativ ist jedoch auch die Expression in gentechnisch veränderten Organismen oder die Herstellung durch chemische Peptidsynthese möglich.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung sind die Nukleinsäuren, die für die bifidogenen Bakterien kodieren, sowie Antikörper, die gegen bifidogene Peptide gerichtet sind.
Die erfindungsgemäßen Peptide und/oder Nucleinsäuren können zusammen mit pharmazeutisch üblichen Hilfsstoffen in Arzneimit­ teln enthalten sein. Dazu werden bevorzugt galenische Zuberei­ tungen eingesetzt und Applikationsformen gewählt, bei denen die Peptide undegradiert an den Wirkort gelangen.
Vorzugsweise wurden die erfindungsgemäßen Peptide in Mengen von 0,1 bis 100 mg/kg Körpergewicht eingesetzt. Wirksame Nuclein­ säuremengen sind beispielsweise 0,01 mg bis 100 mg/kg Körper­ gewicht. Bevorzugt liegt die Menge im Bereich von 1 bis 10 mg/kg Körpergewicht für die Peptide und Nucleinsäuren.
Die erfindungsgemäße Peptide können auch zusammen mit Nährstof­ fen in Nahrungsmittel enthalten sein.
Darüber hinaus können die erfindungsgemäßen Peptide und/oder die gegen die Peptide gerichteten Antikörpern zusammen mit weiteren Hilfsstoffen auch in Diagnostikmittel enthalten sein.
Die erfindungsgemäßen Peptide und Nukleinsäuren eignen sich zur Behandlung von durch mikrobielle Fehlbesiedlungen bedingte Erkrankungen wie Infektionen, Entzündungen, mikrobiell induzier­ ten Tumoren, mikrobiell bedingten degenerativen Erkrankungen, Durchfallerkrankungen, Koliken, Abweichung der Mund-, Darm- und Vaginalflora, Karies. Die mikrobielle Fehlbesiedlung kann beispielsweise durch Bakterien, Pilze, Hefen, Protisten, Viren, Mycoplasmen, Filarien und/oder Plasmodien bedingt sein.
Die erfindungsgemäßen Peptide eignen sich auch als Hilfsstoff in der Nahrungsmittelzubereitung im Sinne von Fermentationshil­ fen.
Es wird insbesondere bevorzugt, daß zwei oder mehr Peptide gemeinsam eingesetzt werden oder Peptide eingesetzt werden, die zwei oder mehr der erfindungsgemäßen Peptidsequenzen aufweisen. Das unterschiedliche Wirkungsspektrum der Einzelstoffe bzw. Stoffe, die Einzelsequenzen oder erfindungsgemäße Peptide aufweisen, erlaubt es, beim Vorliegen von Resistenzen von Mikroorganismen durch eine geeignete Kombination von Sequenzen oder durch eine Kombination der Einzelsubstanzen eine optimale Hemmung der unerwünschten Mikroorganismen zu erzielen.
Die folgenden Beispiele sollen die Erfindung weiter erläutern:
Beispiel 1 Behandlung von Milch
Humane Milch wurde mit Pepsin (20 mg/g Protein) versetzt, nachdem sie mit HCl auf einen pH von 3,5 eingestellt wurde. Die enzymatische Reaktion wurde für zwei Stunden bei 37°C inkubiert und durch Kochen für fünf Minuten gestoppt. Anschließend wurde zentrifugiert (20 min, 60 000 g bei 4°C) und das Milchfett abgeschöpft. Die verbliebene Lösung wurde mit 0,1% TFA versetzt und erneut zentrifugiert, um ausgefallene hochmolekulare Pro­ teine abzutrennen.
HPLC Reinigung eines bifidogenen Peptides aus Milch
Für die Reinigung von bifidogenen Peptiden aus Milch müssen verschiedene HPLC Trennverfahren miteinander kombiniert werden, um eine möglichst reine Darstellung über eine optimale Trenn­ leistung zu erzielen und inaktive, unerwünschte Bestandteile abzutrennen. Die jeweiligen Proben, die nach jedem Trennungs­ schritt entstehen, müssen in zwei Testsystemen getestet werden, d. h. ein Wachstumstest mit Bifidobakterien in Kombination mit einem Wachstumstest mit E. coli als Target (siehe Beispiele 3 und 4). Notwendig für die Reinigung ist die Kombination von mindestens einem Reverse-Phase Chromatographieschritt (bevorzugt von zwei Reverse-Phase Chromatographischritten) und der Einsatz einer Kationenaustausch-HPLC-Trennung. In den Biotest muß die jeweilige Probe salzarm eingesetzt werden, um ein möglichst optimales Screeningergebnis zu erhalten.
Der erste Trennschritt wurde mit Hilfe einer Parcosil-C18 Säule (1×12,5 cm, 100 Å, Biotek, Heidelberg, Deutschland) durchge­ führt.
Puffer A: 0,1% TFA
Puffer P: Acetonitril mit 0,1% TFA
Gradient: 0 bis 60% B in 45 Minuten
Fluß 2 ml/min.
Detektion 280 nm (siehe Fig. 1)
Rechromatografie von Fraktion 23 mit der gleichen Säule und einem flacheren Gradient (siehe Bild)
Puffer A: 0,1% TFA
Puffer P : Acetonitril mit 0,1% TFA
Gradient: 0 bis 20% B in 5 Minuten
20 bis 50% B in 45 Minuten.
Detektion: 214 nm (siehe Fig. 2)
Rechromatografie von Fraktion 16 aus dem vorangegangenem Trenn­ schritt mit der gleichen Säule, aber anderem Elutionsmittel, um die Selektivität bei der Trennung zu verändern.
Puffer A: 0,1% TFA
Puffer E: 0,1% TFA in Methanol
Gradient: 0 bis 40% B in 5 Minuten
40 bis 70% B in 45 Minuten.
Detektion: 214 nm (siehe Fig. 3)
Rechromatografie der aktiven Fraktion 21 mit einer Kationenaus­ tausch HPLC:
Säule: Parcosil Pepkat, 4×50 mm, 300 Å, 5 µm, Biotek, Heidel­ berg
Puffer A: 10 mM Phosphatpuffer pH 4,5
Puffer B: Puffer A mit 1 M NaCl
Fluß 0,75 ml/min
Gradient: 0 bis 15% B in 5 Minuten
15 bis 50% B in 35 Minuten.
Detektion: 214 nm (siehe Fig. 4)
Die erhaltenen Fraktionen wurden jede einzeln in einem kurzen Reverse Phase HPLC Lauf entsalzt, bevor sie zum Test auf anti­ mikrobielle und bifidogene Aktivität zugeführt wurde.
Durch Massenspektrometrie und Aminosäuresequenzierung wurden die folgenden Peptide identifiziert:
Fraktion 9 enthielt die reine, bifidogene Komponente
YQRRPAIAINNPYVPRTYYANPAVVRPHAQIPQRQYLPNSHPPTVVRRPNLHPSF.
(caseinK-63-117)
Fraktion 10 enthält die bifidogene Komponente
GRRRRSVQWCAVSQPEATKCFQWQRNMRKVRGPPVSCIKRDSPICCIQA.
(neutrophil-lactoferrin-20-67)
und Fraktion 11 enthält die bifidogene Komponente mit einer Adduktmasse von +16 was darauf hindeutet, daß es sich um ein Oxidationsprodukt handelt (vermutlich ist ein Methionin oxi­ diert).
Beide Peptide und das Oxidationsprodukt haben eine bifidogene Aktivität.
Beispiel 2 Nachweis der wachstumsregulierenden Aktivität auf E. coli
Fraktionen aus der HPLC wurden mit E. coli K12 eingesetzt. Der Test wird in 3 g/l Tryptic Soy broth (Sigma) folgendermaßen durchgeführt:
Pur jeden Assay wurden Kulturen von E. coli K12 frisch in Tryptic Soy broth (Sigma) angeimpft. Die Inkubation dieser Bakterien erfolgte immer unter aeroben Bedingungen bei 37°C für 16 Stunden. Zu testende Peptide wurden zu einer Testlösung, be­ stehend aus 200 µl 3 g/l Tryptic Soy broth, in 96-Loch Zell­ kulturplatten gegeben und mit einem Inokulum von 20 µl einer verdünnten Bakteriensuspension angeimpft. Die photometrische Absorption des Inokulums betrug 0,05, gemessen bei 500 nm. Das Wachstum der Bakterien unter dem Einfluß der Peptide wurde nach 16 Stunden ebenfalls photometrisch im ELISA-Reader bestimmt und manuell mikroskopisch bestimmt.
Beispiel 3 Nachweis der wachstumsregulierenden Aktivität auf Bifidobac­ terium bifidum
Für jeden Assay wurden Kulturen von Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 frisch in Elliker broth (Difco, Detroit, USA) angeimpft. Die Inkubation dieser Bakterien erfolgte immer unter anaeroben Bedingung bei 37°C für 16 bis 18 Stunden. Zu testende Peptide wurden zu einer Testlösung bestehend aus 200 µl 50% Elliker broth in 96-Loch Zellkulturplatten gegeben und mit einem Inoku­ lum von 20 µl einer verdünnten Bakteriensuspension angeimpft. Die photometrische Absorption des Inokulums betrug 0,05 gemessen bei 550 nm. Das Wachstum der Bakterien unter dem Einfluß der Peptide wurde nach 16 Stunden ebenfalls photometrisch im ELISA- Reader bestimmt und manuell mikroskopisch bestimmt. Als Positiv­ kontrolle diente N-acetylglucosamin. Für diesen Test können nur Bifidus-Kulturen eingesetzt werden, die auf N-Acetylglucosamin reagieren. Nach einigen Passagen verlieren Bifidobakterien diese Eigenschaft, diese können dann für diesen Wachstumstest nicht mehr eingesetzt werden.
Beispiel 4
Als bifidogen wurden die Fraktionen identifiziert, bei denen der Wert
ist.
Sequenzprotokoll

Claims (11)

1. Peptide erhältlich durch
  • - Versetzen von Kuhmilch oder Humanmilch mit Protea­ sen und anschließender Inkubation für zwei Stunden,
  • - Zentrifugation, um Milchfett zu entfernen,
  • - Ansäuern auf einen pH von 2,0 durch starke Säuren,
  • - Abtrennung der ausgefallenen Proteine,
  • - Anwendung mindestens eines Reverse-Phase-HPLC- Schrittes,
  • - Anwendung eines Kationenaustauscher-HPLC-Schrittes,
  • - Sammeln von Fraktionen,
  • - Einstellen der Fraktion auf einen Salzgehalt < 25 mM für die Durchführung von Aktivitätstests durch Dialyse oder Reverse-Phase-HPLC,
  • - Kultivierung von Bifidobakterium Bifidum und E. coli in Gegenwart der Fraktionen und Auswahl von Fraktionen, die der Bedingung
    genügen, worin BW die Keimzahl bezeichnet, die bei 16stündiger Inkubation von Bifidobakterium Bifidum in 50% Elliker Nährmedium (Elliker Broth) in Gegen­ wart der Peptide in einer Konzentration von 200 µg/ml erhalten wird,
    BO die Keimzahl bezeichnet, die bei der wirkstoff­ freien Kontrollinkubation erhalten wird,
    EW die Keimzahl bezeichnet, die bei 16stündiger Inkubation von E. coli in 3 g/l tryptischem Soja Nährmedium (Tryptic Soy Broth) in Gegenwart der Peptide in einer Konzentration von 200 µg/l erhal­ ten wird,
    EO die Keimzahl bezeichnet, die bei der Wirkstoff­ freien Kontrollinkubation erhalten wird,
  • - Isolierung des in dieser Fraktion vorhandenen Peptids
sowie die amidierten, acetylierten, sulfatierten, phospho­ rylierten, glycosylierten, oxydierten Derivate oder Frag­ mente mit bifidogenen Eigenschaften und Peptide, die durch Kombination der Peptide, Fragmente oder Derivate mittels chemischer Verknüpfung erhältlich sind.
2. Peptide gemäß Anspruch 1 mit der Aminosäuresequenz
worin
R1, R3 unabhängig voneinander NH2, eine Aminosäure oder ein Peptid mit bis 100 Aminosäuren darstellen und
R2, R4 unabhängig voneinander COOH, CONH2, eine Aminosäure oder ein Peptid mit bis zu 100 Aminosäuren darstellen und die amidierten, acetylierten, sulfatierten, phosphorylier­ ten, glycosylierten, oxydierten Derivate oder Fragmente mit bifidogenen Eigenschaften.
3. Verfahren zur Herstellung der Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2 durch Aufreinigung aus Kuhmilch oder Human­ milch, Expression in gentechnisch veränderten Organismen oder chemische Synthese.
4. Nukleinsäuren kodierend für Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2.
5. Antikörper gerichtet gegen Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2.
6. Arzneimittel enthaltend mindestens eines der Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2 und/oder mindestens eine Nukleinsäure gemäß Anspruch 3 zusammen mit pharmazeu­ tisch üblichen Hilfsstoffen.
7. Nahrungsmittel enthaltend Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2 zusammen mit Nährstoffen.
8. Diagnostikmittel enthaltend Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2 und/oder Antikörper gemäß Anspruch 5 zusammen mit weiteren Hilfsstoffen.
9. Verwendung der Peptide gemäß Anspruch 1 und/oder 2 und/oder der Nucleinsäuren gemäß Anspruch 3 zur Behandlung von durch mikrobielle Fehlbesiedlungen bedingten Erkran­ kungen.
10. Verwendung der Peptide gemäß Anspruch 9, dadurch gekenn­ zeichnet, daß die mikrobiellen Fehlbesiedlungen durch Bakterien, Pilze, Hefen, Protisten, Viren, Mycoplasmen, Filarien und/oder Plasmodien bedingt sind.
11. Verwendung der Peptide gemäß Anspruch 9 und/oder 10, da­ durch gekennzeichnet, daß die durch mikrobielle Fehlbe­ siedlungen bedingten Erkrankungen Infektionen, Entzün­ dungen, mikrobiell induzierte Tumore, mikrobiell beding­ te degenerative Erkrankungen, Durchfallerkrankungen, Ko­ liken, Abweichung der Mund-, Darm- und Vaginalflora und/oder Karies sind.
DE19805385A 1997-09-16 1998-02-11 Bifidogene Peptide Expired - Fee Related DE19805385C1 (de)

Priority Applications (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19805385A DE19805385C1 (de) 1998-02-11 1998-02-11 Bifidogene Peptide
DE59810294T DE59810294D1 (de) 1997-09-16 1998-09-16 Bifidogene peptide und deren verwendung
AT98951420T ATE255130T1 (de) 1997-09-16 1998-09-16 Bifidogene peptide und deren verwendung
ES98951420T ES2212357T3 (es) 1997-09-16 1998-09-16 Peptidos bifidogenos y su uso.
US09/508,095 US6849593B1 (en) 1997-09-16 1998-09-16 Bifidogenic peptides
JP2000511780A JP2001516570A (ja) 1997-09-16 1998-09-16 ビフィドゲニックペプチド類
EP98951420A EP1028977B1 (de) 1997-09-16 1998-09-16 Bifidogene peptide und deren verwendung
PCT/EP1998/005899 WO1999014231A2 (de) 1997-09-16 1998-09-16 Bifidogene peptide und deren verwendung

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19805385A DE19805385C1 (de) 1998-02-11 1998-02-11 Bifidogene Peptide

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE19805385C1 true DE19805385C1 (de) 1999-08-12

Family

ID=7857266

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19805385A Expired - Fee Related DE19805385C1 (de) 1997-09-16 1998-02-11 Bifidogene Peptide

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE19805385C1 (de)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0349666A1 (de) * 1988-07-07 1990-01-10 Milupa Aktiengesellschaft Verfahren zur enzymatischen Herstellung von bifidogener Säuglings- und Diätnahrung

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0349666A1 (de) * 1988-07-07 1990-01-10 Milupa Aktiengesellschaft Verfahren zur enzymatischen Herstellung von bifidogener Säuglings- und Diätnahrung

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69220679T2 (de) Antibakterielles mittel und behandlung von gegenständen mit diesem
DE69732871T2 (de) Basisches Protein Zusammensetzung, basisches Peptid Zusammensetzung und deren Verwendung
DE69129395T2 (de) Antimikrobielle Peptide
DE3853918T2 (de) Biologisch aktive bakterientötende/durchlässigkeitserhöhende proteinfragmente.
DE69326513T2 (de) Inhibitor des Angiotensin-konvertierenden Enzyms und Verfahren zu seiner Herstellung
DE69224524T2 (de) Antimikrobielle breitspektrum-verbindungen und verfahren zu deren verwendung
DE69329923T2 (de) Molkenprotein und molkenproteinhydrolysate, und verfahren zur herstellung
DE69007831T2 (de) Bioaktives Produkt; Zusammensetzungen und Stoffe, die dieses bioaktive Produkt enthalten.
DD204389A5 (de) Tierfuttermittel
EP0151246A2 (de) Neue Polypeptide mit alpha-Amylase-hemmender Wirkung, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und pharmazeutische Präparate
DE60219808T2 (de) Ein löslicher toll-ähnlicher rezeptor
DE102019207859A1 (de) Synthetische und rekombinant hergestellte Kollagenpeptide mit biologischer Wirksamkeit
DE69426465T2 (de) Peptid, das die adipozytendifferenzierung hemmt, und ein hemmer für die adipozytendifferenzierung, der besagtes peptid als aktiven bestandteil enthält
DE69733097T2 (de) Mittel zur Verbesserung der Knochenbildung und zur Inhibierung der Knochenresorption
EP1028977B1 (de) Bifidogene peptide und deren verwendung
DE60034879T2 (de) Lantibiotikum
DE69002024T2 (de) Bioaktive Laktoferrin Derivate.
WO2002007821A1 (de) Verfahren zum auffinden von verbindungen, welche zur behandlung und/oder prophylaxe von obesitas geeignet sind
DE69021716T2 (de) Verfahren zur herstellung von vancomycin.
DE19805385C1 (de) Bifidogene Peptide
DE602004008051T2 (de) Aus einer bifidobakterien-kultur gewonnener immunomodulator und diesen enthaltende zusammensetzungen
DE602004010636T2 (de) Aufreinigung von peptiden aus kolostrum
EP0344786B1 (de) Mittel zur Bekämpfung von Clostridien
EP0184121B2 (de) Nahrungsmittel, Getränke, Genussmittel oder pharmazeutisches zum oralen Verabreichen bestimmtes Präparat, das Saccharose enthält
DE4444753C2 (de) Antibiotisch wirksame Peptide aus der bovinen Milch, deren Gewinnung und Verwendung

Legal Events

Date Code Title Description
8100 Publication of the examined application without publication of unexamined application
D1 Grant (no unexamined application published) patent law 81
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee