DE1960500A1

DE1960500A1 - Stabiles,synthetisches Natriumoestronsulfat enthaltendes Mittel

Info

Publication number: DE1960500A1
Application number: DE19691960500
Authority: DE
Inventors: Holden George Wilfrid
Original assignee: Charles E Frosst and Co
Current assignee: Merck Frosst Canada and Co
Priority date: 1968-10-29
Filing date: 1969-12-02
Publication date: 1971-06-09
Also published as: US3644618A; FR2073252A1; BE742506A; NL6917875A; GB1243308A; FR2073252B1; DE1960500C3; DE1960500B2

Description

OHAHLES S. JR088S & 00. 16717 Trans-Canada Highway, Exit 1ii» Klrkland, Quebec, Canada

Stabiles, synthetisches Katriumöstroneulfat enthaltendes Mittel

Sie hier offenbarte Erfindung betrifft ein synthetisches Natriumöstronsulfat-Präparat, das synthetisches Natriumöstronsulfat im Gemisch mit einem wasser- und alkohollöeliohen Extrakt aus Urin von trächtigen Stuten enthalt.

Ton dem Hatrlumsala des östronsulfata ist bekannt1 date ihm grosso Bedeutung als Hauptbestandteil der waeserlösliohen Ottrö« gene zukommt, die aus dem urin von trächtigen Stuten extrahiert werden. Bekannt ist auch, dass Natriumöstronsulfat_t so wie ee in Präparaten vorliegt, die aus Extrakten au« Urin von träohtigen Stuten hergestellt werden, unter normalen lagemngebedingungen stabil bleibt und seine Waeaerlösliohkeit beibehält«

Andererseits ist es glelohermassen bekannt, dass kristalline*, synthetisches Natriumöstronaulfat sich naoh kurzer Zeit unter Verlust an Vasserlöellohkeit Infolge der Freisetzung von Iatriumhydrogensulfat (sodium acid sulfat·) und wasserunlöeHohem Östron zersetzt.

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Aus diesem Grunde ist es allgemein anerkannt, dass kristallines Hatriumöstronsulfat nicht ale solches verwendet werden kann und dass seine Verfügbarkeit von dem aus natürlichen Quellen, d« h. aus einem Extrakt aus Urin von trächtigen Stuten» stammenden abhängen muss.

Aueft wurden aus diesem Grunde Versuohe angestellt, um diese Instabilität durch die Herstellung von Salzen von organlsohen Basen zu überwinden} bis heute wurden jedoch noch keine Methoden für die Verwendung von kristallinem Natriumsalz offenbart·

Es ist demzufolge ein sehr wünschenswertes und besonderes Ziel der vorliegenden Erfindung, eine Methode zur Vermeidung der spontanen Zersetzung von synthetischem Hatriumöstronsulfat bereitzustellen.

Gemäße der vorliegenden Erfindung wurde nun gefunden, das· man ein stabiles Präparat von synthetischem latriumöstronsulfat dadurch erhalten kann, dass man syathetisoh.es ffatriumöetronsulfat mit einem Extrakt aus Urin von träohtigen Stuten mischt«

Im hier verwendeten Sinne bezieht sich der Ausdruck Extrakt aus Urin von träohtigen Stuten auf ein an wasser- und alkohollöslichen Extrakt aus Urin von trächtigen Stuten, der gewöhnlich etwa 1 bis etwa 20 $ von natürlichen, konjugierten Ostrogenen enthält« Zahlreiche Arbeitsweisen sur Herstellung solcher Extrakte sind in zum bekannten Stand der Technik gehörenden Patentschriften und der Literatur beschrieben! sie können aber in zwei Hauptarten eingeteilt werden· Bei der einen Art wird der Urin von träohtigen Stuten mit einem polaren Lösungsmittel, wobei n-Butanol besonders nützlich ist, extrahiert, und dann wird der Extrakt verschiedenen Reinigungsstufen unterworfen, die den Östrogengehalt erhöhen können* Die andere Art beruht auf der Adsorption der östrogene an eiiem Adsorbens, wie Kohlenstoff, und der nachfolgenden Eluierung unl Reinigung· Bei den Extrak-

«·> 2 —
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ten* mit denen sioh die vorliegende Erfindung befasst« überschreitet die Reinigung gewöhnlioh nicht den Punkt der Steigerung des östrogengehaltes auf oberhalb etwa 20 %_t obgleich Ex» trakte mit einen höheren östrogengehalt von bis zu etwa 30 ?ί» wenn gewünscht* verwendet werden können. Besonders bevorzugt ist die Verwendung eines Extraktes aus urin von .träohtigen Stuten mit einem Gehalt an natürlichem, konjugierten öetrogen im Bereich von etwa 5 bis etwa 12 #. Jedoch ist jede Methode zur Herstellung des Extraktes anwendbar«

Sie folgenden Beispiele veranschaulichen die Herstellung des Extraktes aus Urin von trächtigen Stuten·

Beispiel t

ffliesBChema

Extrakt aus Urin von trächtigen Stuten

22 707 1 (5046 gallons) Urin von trächtigen Stuten

J, .... n-Butanol-Extrakt
13 313 1 n-Butanol-Extrakt

• . · · mit 102,5 kg HaOH als 2,0 H Lösung und

80,1 kg gesättigtes H&HCO3 S^ewaeohen 13 313 1 gewaschenem n-Butanöl-Extrakt

.... man dampft im Vakuum (E0° 0) ein und gibt dabei in dem Hasse, wie «»But&nol entfernt wird, lang* sam Wasser au. Hit Wasser, ergänet aan das Volumen bis auf 1200 Liter. 1200 1 wässriges Konzentrat

.... man wäscht mit 120 1 £thy.\endiohlorid, stellt den pH-Wert mittels 9,1 1 (2 gallons) Chlorwasserstoff säure auf 4,5 ein, wäscht mit Xthylendi« ohlorid 3 x (120 1} 60 If iVO 1) und stellt mittels 25,3 kg HaHCO, einen jH-Wert im alkalischen Bereich ein

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1200 1 gereinigter, wässriger Extrakt

man extrahiert J χ mit n-Butanol (208 1| 400 1$

400 1)
1008 1 Butanolextrakt

1 · « * . saan dampft im Vakuum (50° 0) ein koneentrierter Extrakt (34,95 kg) ι 8 # Öetrogen \, . « . . mam löst in Methanol und filtriert 108 1 einer methanölieehen Löaimg dee konzentrierten Extraktes

kg)

s 2049 B (ale östron ausgedrückt) oder g ( ale fatriumöatrensulfat ausgedrückt)·

22 70? 1 feia rm. trächtigen Stuten wurde mit a-Butaaol extrahiert , nmi il@ 13 313 1 Extrakt wurden mit 102_t5 kg HaOH als 21 Lösung unü 8O₃I kg HaHOO« als gesättigte Lösung gewaschen· Der n-Butanel<*Bxtrakt wurde im Vakuum bei 50° 0 eingedampft _t wobei Waesex· langsam zugegeben wurde«.um das Butane! stu ersetzen und ssine Entfernung au ermöglichen. Sas wässrige Koneen*· trat wuifd© bi@ auf 1200 Liter verdünnt und mit 120 1 Xthylen- gmmQhsn* Mmh einer sorgfältigem Einstellung des i3ltt@l@ konzentrierter HOl ©uf 4,5 wurde das wässrige \ mit 12ΰ₉ 60 und 60 1 It^ylendißhl&rid gew&sohen· Der ]5&*Vert w^a^i© umtüh Eugabe von 2S₁3 kg IaHOO. auf über I₉ ®ingest@13.t nuß. is© wlssrige Konzentrat dreimal mit n-Butanol

1) extrahierte Der Dutanolextrakt wurde im und ergab einen konzentrierten Extrakt (34₉95 kg)g übt im-Methanol g-alöst und filtriert wurfl©· Man er· hielt ©im© ®@ΐΐ!ΐρ©11@βϊι© Msutig I@s &trakt#e_t in welches di# :i>mjugi@2ⁱt€m östrogene etwa 8 ^ d©s Extraktes aus»

tliatioliech Lösung des Extraktes rtm. natürlichem konjunierten östrogenen - 102,5 kg

konäsentrierter Extrakt ~ 34 _f 95 kg konjugierte Östrogene - 2,62 kg

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tu 621 ζ

Beispiel 2

28 350 1 Urin -von trächtigen Stuten wurden naoh praktisch der* selben Arbeitsweise, wie sie in Beispiel 1 beschrieben wurde» aufgearbeitet. Die Analyse der erhaltenen 43 »5 kg an Extrakt ergab 7,8 $, die 3*385 kg natürlicher konjugierter Getrogene, auegedrückt als Vatrlumöstronsulfat und berechnet nach der AOAC-Analyse, darstellen«

Beispiel 3

128 700 1 urin von trächtigen Stuten wurden gemäße den Beispielen 1 und 2 aufgearbeitet· Die natürlichen konjugierten öatre» gene machten 7 $ des Extraktes aus (AQAC-Analyee),

Beispiel 4

92 400 1 Urin von trächtigen Stuten wurden gern&ss den Beiepitlen 1 und 2 aufgearbeitet. Die natürlichen konjugierten Östrogene machten 7,6 # des Extraktes aus. Die Analysenmethode, dlt in diesem falle angewandt wurde, war die AOAO-Analyee.

▼ersohledene Methoden sur Messung der Konzentration τοη konjugierten Getrogenen können für die Abeohäteung des Öetrogeng·- haltes von latriumöetroneulfat herangeeögen werdenι »ie sind in der Literatur beβohrleben. Sine gutbekannte Methode ist. ein kalorimetrisches Verfahren» das darin besteht, dass die Abeerption einer Probe unbekannter Zusammensetzung alt einer LiJeung τοη TT.B.P. Terglelohsstandard-Östron In Benein ("bensint") Im 400 bis 700 Btu-Bereich verglichen wird. Die gesamten öfltrogene, ausgedruckt als Hatriumöstroneulfat in mg/g, ergeben sich naoh dpv Gleiohung (A₉ZS₁) χ (O₁A) < 138 * d/2, in der A_B »Orund-. absorption der Probelöeungi S₁ «■ arundabeorptio«. der StandardlOsungt O₁ β mg östron in einem aliquoten feil der ßtandardlö-

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eungf V s g Probe j und d = Natriumequilin-sulfat in ag/g» kolorimetrisch getrennt bestimmt im Vergleich mit ü.S.JP.-Vergleichsstandard-lüquilln nach der Behandlung eines anderen mit Fe - Kober-Reagens. Diese Methode wird in der vorliegenden Beschreibung als die AGAO-Analyse bezeichnet.

Bin erfindungsgemässes Kittel enthält synthetisches Vatrium-Öetronsulfat im Gemisch mit einem Extrakt, der aus dem urin von trächtigen Stuten hergestellt worden ist und in dem die natürlichen konjugierten Östrogene etwa 1 bie etwa 30 £ des genannten Extraktes ausmachen f das synthetische VatriumBstronsulfat macht etwa 10 bis etwa 90 j£ der gesamten östrogene in der Mischung aus. Gewöhnlioh wird ein Urinextrakt von trächtigen Stuten verwendet, dessen östrogengehalt im Bereich von etwa 1 bis etwa SO. £ und vorzugsweise im Bereich von etwa 5 bis etwa 12 # liegt« Obwohl der Gehalt der Mischung an dem synthetischen Natriumöstronsulfat-Bestandteil von etwa 10 bis etwa 90 £» bezogen auf den Ge samt östrogengehalt, variieren kann, beträgt der bevorzugte Bereich etwa 40 bis etwa 75 #· Bas genannte Mittel kann auch zusätzliche therapeutische Stoffe, z, B. andere Hormonprodukte, Antibiotika, Beruhigungsmittel, Muskelentspannungemittel und dergleichen, wie auch pharmakologiech annehmbare Tröger, wie Trioaloiumphosphat, Oal.oiumoarbonat, Magnesiumcarbonat, Gellte, Silioagel, gepulverte Cellulose, Lactose, Stärke, Hatriumbicarbonat und dergleichen« enthalten«

überraschend ist die Feststellung, dass ein Extrakt von konjugierten ob trogeneu, die aus dem Urin von träohtigen Stuten stammen» die erforderlichen Faktoren aufweistj um nicht nur die Menge des natürlioh vorkommenden östronsulfata, sondern auoh eine viel gröasere Menge von normalerweise Instabilem» synthetischem Natriumöstronsulfat isu stabilisieren.

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Beispiel 5

Bine Methanollösung -von 1,887 g eines Extraktes, der aus den Urin von trächtigen Stuten hergestellt worden war, wurde, sit einer Methanollöeung gemischt, die 0,663 g synthetisches Hatriumöstroneulfat enthielt, Bas Methanol wurde im Vakuum bei 40 bis 50° C entfernt, um ein braunes, freifliessendes, hygroskopisohes Pulver eu erhalten»

Die Stabilität des synthetischen Hatriumöstroasulfata in dem Pulver wird in der labelle im Vergleich mit derjenigen einer Xontrollprobe des kristallinen HatriumSstroneulfate geeeigt, wobei die in dem Pulver vorhandenen, natürlichen östrogene
bei der Analyse gebührend in Eeohnung gestellt werden.

tabelle

Probe	Pulver	Lagerunge» Prozentuale Bfiekgewin· bedingungen nung des konjugierten östrogene	80
Kristallines latrium- östronsulfat, das but Pulverherstellung ver wendet wird	do·	70 Tage bei Baumtemperatur	42
do·	do.	2 Wochen bei 45° C	100
do.	1 Monat bei Raum temperatur	100,6
do«	2 Monate bei Baum temperatur	94,4
3 Monate bei Baum temperatur	103,0*
4 Monate bei Baum temperatur	99,0 *
4 Monate bei Baum temperatur plus 1 Monat bei 45° 0

* Die Probe wurde vor der Analyse im Vakuum wiedergetrooknet

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12 621 g

Beispiel 6

Bine insgesamt 108,72 kg Pulver enthaltende Fabrlkatlons-» oharge wird hergestellt, indem 95*75 kg frioalciumnhosphat mit 26,594 Liter einer methanolisehen Löeung eines 10*3 kg wiegenden Extraktes aus Urin von trächtigen Stuten, die nach den Methoden der Beispiele 1 bis 4 hergestellt worden 1st und als natürliche, konjugierte Östrogene 37,966 mg/ml (9t7 30 enthält, und 48,7 Liter einer methanolisehen Lösung von synthetischem Hatrlumlfetronsulf at, die 39,5 mg/ml (66 iß der gesamten östrogene) enthalt, gemischt werden und das Präparat Im Vakuum bei 40° 0 getrocknet wird, um das Lösungsmittel ku entfernen und ein frelfllessendes Pulver her sue teilen»

Stabllitätsuntersucbungen, die während eines Zeitraums von 30 Monaten bei Raumtemperatur durchgeführt wurden, Bälgten keine Änderung in dem Qetronsulfat-Gehalt dieses Präparates, wenn die Bestimmung durch AOAC-Analyse erfolgte·

Beispiel 7

Zusätzliche Pulverchargen, die wie in Beispiel 6 hergestellt wurden, wurden auf Stabilität geprüft. Me Ergebnisse sind unt«i susammengestellts

	Durch Ana	9	Lager-	1960500
12 621	lyse bestimm	Anfänge-	aeit in
Durch Ana	ter Anfangs	gesamt ge	Monaten	Durch £ des
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Öetron aua	ffatriumöstron-			an kon
Urin von	suifat je g			jugier
trächtigen	16,54		29	tem
Stuten je g	17,55	25,00	27	östron
6,66	17,75	22,19	24	25,10 100,4
4,86	16.75	24,47	25	22,00 99,1
6,72		25,05	24,60 100,5
6,50		25,00 99,7

ί Mi ICH SfI

Claims

62Ϊ β 2· December

P a t e ti ta η a tit Io h e

1. Mittel, enthaltend synthetisches Natriumöatronsulfat im Gemisch mit einem wasser- und alkohoilösliehen fittiakt aus Urin von trächtigen Stuten, der natürliche, konjugierte östrogene enthält.

2. Mittel, enthaltend synthetisches Ifatriumöstronsulfat im Gemisch mit einem wasser- und alkahollöslichen Extrakt aus urin von träohtigen Stuten, der natürliche, konjugierte östrogene in einer Menge -von etwa 1 bis etwa 30 # dee genannten Extrakeθ enthält, weiterhin dadurch gekennzeichnet, dass das synthetische Natriumöstronsulfat etwa 10 bis etwa 90 ?ί des gesamten östrogengehaltes des genannten Kittels ausmacht.

3. Mittel, enthaltend synthetisches ffatriumustronsulfat im Gemisch mit einem Extrakt aus Urin von träohtigen...βtüten, dadurch gekennzeichnet j dass der genannte Extrakt wasser* und älkohollöslich ist und etwa 5 bis etwa 12 # natürliche, konjugierte östrogene enthält; und dass das synthetische Uatriumgetronsulfat etwa 40 bia etwa 75 ^ des gesamten

B des genannten Mittels ausmacht.

4* Itttteil enthaltend synthetisches -Hatriumöstrottstillät. GemiKch mit Mn^m fectrakt aus prlA von trachtigen Stuten § dadurch gekennzeichnet, dass der genannte Extrakt wasβerum aikohöiMslieh ist und etwa 8 ^ natürliche, jt öitrögene enthäit und der Anteil an ^ynthetiöchiÄ öatronsulfat in dem genannten Mittel etwa 65 f> des gesamten östrogengehaltes ausmacht·

%% Mittel, enthaltend synthetisches Natriumöetroneulfat Il

^1Ö " OBiaii4AL INSPECTED

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Gemisch nit einem Extrakt aus Urin von trächtigen Stuten, dadurch gekennzeichnet, dass der genannte Extrakt wasser- und alkohollöslich ist und etwa 10 36 natürliche, konjugierte östrogene enthält und der Anteil an synthetischem latriumöetronsulfat in dem genannten Mittel etwa 60 ?t dee gaaanten Öatrogengehaltes ausmacht.

6. Mittel, enthaltend synthetische a Batriumftstronsulfat im Gemisch mit einem pharmakologieeh annehmbaren Träger und einem wasser- und alkohollöslichen Extrakt aua urin von trächtigen Stuten, ier natürliche, konjugierte östrogene enthält.

7· Mittel, enthaltend synthetiechea latriumöstroneulfat im Gemisch mit einem phanaakologiech annehmbaren Träger und einem wasser- und alkohollBelieben Extrakt aus Urin von trächtigen Stuten, der natürliche, konjugierte östrogene in einer Menge von etwa 1 bis etwa 30 £ des genannten Extraktea enthält, und weiterhin dadurch gekennzeichnet, daaa dae eynthetißche Katriumästronsulfat etwa 10 bis etwa 90 % des gesamten Oatrogengehaltea des genannten Mittels aualoht·

8. Mittal, enthaltend synthetische» latriumöatronsulfat is Gemisch mit einem pharmakologiaoh annehiabaren Trager und einem Extrakt aus Urin vom trächtigen Stuten, dadurch gekennaeichnet, daaa dar genannte Extrakt wasser- und alkohollöelich iet und etwa 5 bis etwa 12 £ natürliche, konjtigiarte uetroeea* enthält, und dass dae eynthetieohe latrlumöetroneulfat etwa 40 bis etwa 75 ί das geeamten öetrogengehaltee des genannten Mittels ausmacht.