DE1643199A1

DE1643199A1 - Verfahren zur Herstellung biologisch aktiver Schwefelverbindungen

Info

Publication number: DE1643199A1
Application number: DE19671643199
Authority: DE
Inventors: Billinghurst John Evlyn Warner
Original assignee: Wellcome Foundation Ltd
Current assignee: Wellcome Foundation Ltd
Priority date: 1966-02-05
Filing date: 1967-02-03
Publication date: 1971-06-16
Also published as: NL6701709A; GB1178242A; CH500177A; BE693560A

Description

DR. EULE DR. BERG DIPL.-ING. STAPF

PATENTANWÄLTE 1643189

8 MÜNCHEN 2. HILBLESTRASSE 2O

Dipl.-Ing. Stapf 8 München 2, HilblestraßeiO

Unser Zeichen Datum

i 3. Feb. 1967

■ : ■ ί

Anwaltsakte: 14 817

THE WiilLICÜMB IiOUNDATIOF LTD. London/England

Verfahren zur Herstellung biologisch aktiver SchwefelverMndungen»

Die vorliegende Erfindung betrifft biologisch aktive bis-iso-Thioharnstoffe und Verfahren zu deren Herstellung,

^ernäß der vorliegenden Erfindung werden Verbindungen der Oases A 296 10802-6/22

Telegramm Adr PATPMTEIJIE MOnriion Bank: Bayeriicho Vereinjbanli MOnchen 453108 Postscheck; Miinrfien 453Ί3

—9— - " : "

allgemeinen iOrmel (I)

R¹U

(ι)

ΪΠΤ R^

oder Säureadditionssalze hiervon mit therapeutisch verträgliehen Säuren geschaffen,

worin A eine (CEL^-Gruppe ist, in welcher η eine gan-

1 2 1' - "

ze Zahl von 2 bis 14 bedeutet, R und R oder bzw. R

Of

und R zwei verschiedene niedere Alkyl- oder alicyclische Gruppen sind, oder beide gleich oder verschieden sind, und jeweils eine Alkyl substituierte aromatische Kohlenwasserstoff-&ruppe mit bis zu 10 Kohlen- . stoffatomen sind, oder einer dieser Reste eine niedere Alkylgruppe und der andere eine aromatische Kohlenwasserstoff-Gruppe der vorgenannten Art ist,

oder A eine -(0H₂) -Gruppe, in welcher ή eine ganze

Zahl von 15 bis 22 bedeutet oder die F₁N¹-bis(1-Garbo-

1 2 1 ^f nyldeoamethylen)piperazin-Gruppe ist, R ,R , R und

R gleich oder verschieden sind und jeweils ein Wasserstoffatom oder eine aliphatische, alicyclische oder eine gegebenenfalls Alkyl substituierte aromatische Kohlenwaeserstoffgruppe mit bis zu 10 Kohlenstoff at omen sind, oder das erste oder zweite Paar der R-Gruppen, als

103025/2237 „^

' 1643193

aliphatisehe Kohlenwasserstoffe, ztisammen einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring mit der benachbarten - Έ = G-If- Gruppe der Formel (i) bilden kann,

. ι

■2 ν. ι .

und H und R gleich oder verschieden und jeweils ein Wasserstoffatom oder'eine niedere Alkylgruppe mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen bedeuten.

Sind als Reste R, außer R- und R-^ , niedere Alkyl-G-ruppen enthalten, so handelt es sich, wenn nichts anderes angegeben, um gerad- oder verzweigtke~fctige Älkyl-Gruppen mit bis zu 7 Kohlenstoffatomen. Die alicyclischen Gruppen enthalten im allgemeinen bis zu 7 Kohlenstoffatomen und beinhalten die Gyclohexyl-Gruppe. Die aromatischen Gruppen umfassen die Benzyl- oder■■.Phenyi-alkylen-Gruppeii» Der Ring, der durch R und R², oder R¹ und Η¹"' mit der - H= G-K- Gruppe gebildet werden kann, umfaßt beispiels \ifeise die Imidazol- oder die Tetrahydro-pyrimidin-Gruppe.

Für den Torliegenden Zweck geeignete therapeutisch verträgliche Säuren umfassen die üblicherweise in pharmazeutischen und veterinär-medizinischen Zubereitungen benutzten Säuren, wie Schwefelsäure, Salzsäure, Sartarsäure usw.

Me erfindurjf:sgemäß hergestellten Verbindungen haben phar- ■

-/eachtliche Wirkungen» Jede dieser Terbindungen

BAD- ^^U

1098 2 5/2237 ^

hat beispielsweise eine oder mehrere der nachfolgenden biologischen Wirksamkeiten: Hilfsmittel-Wirksamkeit (Hi) in Vakzinen, anthelmintische Wirksamkeit (An), diuretische (Di) oder antidiuretische (ADi) Wirksamkeit, hypo- (HoG-) oder hyperglykämische (HrG-) Wirksamkeit und antiinf.laminat arische Wirksamkeit (AIn).

Es wurde gefunden, daß gewisse Verbindungen der lOrmel (i), worin A eine -(GH₂) - Gruppe, wobei η eine ganze Zahl von 15 bis 22 ist, oder die N,N'-bis(1-Carbonyl-decamethylen)-

•2 = ¹Z I

piperazin-Gruppe ist, und R^ und R^ Wasserstoff atome sind, gute Hilfsmittelwirksamkeit aufweisen» wenn sie beispielsweise mit Diphtheria-formol-toxoid geprüft werden.

Vakzin-Hilfsmittel werden benutzt, um die Fähigkeit des antigenen Materials" in. einem Vakzin die gewünschte Immunitätswirkung zu erzielen, zu verbessern. Bei vielen nur schwach antigenen Materialien hangt der Erfolg der Impfung von aer Gegenwart eines geeigneten Hilfsmittls in dem Vakzin ab. Das Hilfsmittel wird üblicherweise dem Vakzin zugesetzt, bevor dieses in Gefäße abgefüllt wird, obwohl es in einem getrennten Gefäß zum Mischen mit dem antigenen Material, wenn das Vakzin zur Immunisierung des Empfängers benötigt wird, zur Verfügung gestellt werden kaniio . . -

Durch die vorliegende Erfindung wird also eine Verbindung 1 098 25 / 2 2 37

der allgemeinen Formel (I) oder eines Säureadditionssalzes hiervon mit einer therapeutisch verträglichen Säure geschaffen, worin A eine -(QHp)_n- Gruppe, wobei η eine ganze Zahl von 15 bis 22 ist," oder die JJ₁F*-bis-. (i-OarbonyldecamethylenOpiperazin-Gruppe ist, worin R ,

1 ' P 2' 3 3'

R ,R und R der vorgenannten Art und R^ und R Wasserstoff atome sind. Insbesondere gelingt es durch die vorliegende Erfindung Vakzine herzustellen, welche eine derartige Verbindung als Hilfsmittel zusammen mit antigenen Stoffen enthalten.

Es wurde weiter gefunden, daß diejenigen Verbindungen der. Formel (I), in welcher A eine -(CHp) - Gruppe ist und das η einen Wert von 3 bis 10 hat, und die R-Gruppen der vorgenannten Art sind, anthelmintisohe Wirksamkeit zeigen, insbesondere.bei Tieren, die mit Hymenolepsis nana (An 1), Aspicularis tetraptera (An 2.), Fematospiroides dubius (An 3)» Fippostrongylus brasiliensis (An 4) oder Strongyloides ratti (An 5) infiziert sind.

Eine anthelmintische Wirksamkeit aufweisende Verbindung kann in Zubereitungen zusammen mit einem geeigneten Träger dargeboten werden. Die Zubereitungen können auf irgend eine bekannte Weise, einschließlich beispielsweise des Zusammenmischens der Bestandteile hergestellt werden.» itir orale Verabfolgung können feine Pulver oder Granulate 'der Verbindung oder des Salzes, die gegebenenfalls ?er-

. ■ -6- ■ - ■ ■ ■

dünnungsmittel und Dispergier- und oberflächenaktive Mittel enthalten, verwendet werden und sie können in Form eines wässrigen Konzentrats oder Tranks oder als Syrup, in Kapseln oder Oblaten in trockenem Zustand oder in nicht-wässrigen Suspensionen, wozu ein Suspendierungsmittel zugeben werden kann, in Form-von Tabletten, worin Binde- und Gleitmittel enthalten sein können, oder in einer Suspension in Wasser, einem Syrup, einem Öl in einer Wasser in Öl Emulsion, wobei geschmacksverbessernde, konservierende, eindickende oder emulgierende Mittel vorhanden sein können, dargeboten werden. Die Tabletten oder Granulate können überzogen sein.

Gemäß der vorliegenden Erfindung werden auch anthelmintische Zubereitungen zugänglich, welche eine Verbindung der allgemeinen Formel (I) oder eines Säureadditionssalzes hiervon mit einer therapeutisch verträgliehen Säure enthalten, worin A eine ""(GHp)₁₁- Gruppe ist und das η einen Wert von 3 bis 10 hat, und

1 1 '

entweder(1) R und R gleich oder verschieden und jeweils eine Alkylgruppe mit bis zu 6 Kohlen-

- stoffatomen, oder eine Benzyl- oder Phenäthyl-

2 2¹
. Gruppe, R und R gleich oder verschieden

und jeweils eine Benzyl- oder Phenäthyl-Gruppe und Έ? und R⁵' Wasserstoffatome sind.

!00825/2237

' ■' ' ' ■■'■ :■■■ ■

—Τ—

oder (2) R¹ und R¹ Benzyl-Gruppen, R und E. gleich , oder verschieden und jeweils eine niedere Alkyl-

gruppe mit von 1 "bis 4 Kohlenstoffatomen, und

•ζ 7i ■.■·:"."■■■

R^ und R^ Methylgruppen sind, in Form von Do- ·

sierungs einlieiten. Insbesondere werden anthelmintis ehe Zubereitungen geschaffen, welche eine solche Verbindung zusammen mit einem Träger enthalten.

Weiter wurde beobachtet, daß Verbindungen der allgemeinen Formel (i), in welchen die Gruppen A und R die nachfolgende Bedeutung haben, deutlich diuretische Wirksamkeit bei Ratten zeigen. Darüber hinaus seheinen diese Verbindungen Diurese mit einem vergrößerten Verhältnis von Natriumzu Kaiium-Ionen im Urin zu schaffen, was wünschenswert ist, weil es die gleichzeitige Verabfolgung von Kaliumchlorid überflüssig macht.

^; ; " ■■.;■"■;■■

Gemäß der vorliegenden Erfindung wird also auch eine diuretische Zubereitung geschaffen, welche eine Verbindung der allgemeinen Formel (I) oder eines Säureadditionssalzes hiervon mit- einer therapeutisch verträgliehen Saure enthält» worin A ■" : ".'.-■""

■ε-nt-viyder ei-ie "(GHg)_n" Gruppe ist, in welcher η eine ganze

1 · 1 ■ · " Z.-.-iii von 4 bis 6 bedeutet, R -"und E gleich oder

v: 'sehieden und jeweils eine niedere. .-Älky!gruppe-

109825/223 J ':

.-β- ■■"■"' ■

2 2'

mit "bis zu 4 Kohlenstoffatomen, R und. R / gleich oder verschieden, jedoch nicht identisch sind mit

1 -Il

dem entsprechenden R und R , wenn beide Methylgruppen sind, und jeweils eine niedere Alkylgruppe mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen oder eine Benzyl- oder Phenäthylgruppe und R^ und R^ Wasserstoffatome sind

oder A eine-(OH^)_n- Gruppe ist, in welcher η eine ganze

'"."."""■■" -j -Ji Zahl von 2 bis 6 bedeutet, und R und R gleich

^: oder verschieden und jeweils eine Isopropyl- oder Benzyl-Gruppe und R , R² , ■ R ■ und Ή/ Methylgruppen sind, in Form von Dosierungseinheiten, zusammen mit einem Träger. .. '

Andere Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können auch diese Wirksamkeiten besitzen oder einige andere Wirksamkeiten aufweisen, zum Beispiel die antiinflammatorisehe Wirksamkeit," die gemäß dem durch Winter et al., Proc. Soc. exp. Biol. (N.Y.), 1962, 111, 544 beschriebenen Verfahren geprüft werden kann«

Bis-iso-Thioharhstoffe können beispielsweise hergestellt werden durch Reaktion eines in entsprechender Weise substituierten Thioharnstoffe mit einem halben Iqivalent einer X-A-X-Verbindung! worin X eine reaktionsfähige,

; Γ 10982S/2237

elektronegative Gruppe, wie eine Halogen- oder Sulphatgruppe ist, in einem polaren Lösungsmittel, zum Beispiel einem niederen Alkohol. Der sich ergebende symmetrische bis-iso-Thioharnstoff kann dann in Form eines Säureadditions-bis-thiouronium-Salzes isoliert werden durch Kristallisation nach Verdampfung des lösungsmittels. ·

Wenn ein nicht-symmetrischer bis-iso-Thioharnstoff, welcher I verschiedene Substituenten an den Resten R und R , oder

2 2* 3 "^t
R und R , oder "Rr und Έτ hat, gewünscht wird, so kann dies erzielt werden durch Umsetzung des Thioharnstoffs mit einem Äquivalent einer X-A-Y-Verbindung, in welcher Y eine weniger reaktionsfähige Gruppe als X ist, und durch nachfolgende weitere Umsetzung des Kondensata-onsProdukts mit. einem in anderer Weise substituierten Thioharnstoff. Gegebenenfalls kann Y eine bezüglich Thioharnstoffen nichtreaktionsfähige Gruppe, /jedoch zu einer reaktionsfähigen { X-Gruppe umwandelbare Gruppe sein. In diesem lall wird das Kondensationsprodukt des Thioharnstoffs mit der X-A-Y-Verbindung zuerst behandelt, um Y in X umzuwandeln, dann weiter umgesetzt mit dein in verschiedener Weise substituierten Thioharnstoff, und der sich ergebende bis-Thioharnstoff wird schließlich, vorzugsweise in Form eines Thiouronium-Salzes isoliert. - ^;

Thioharnstoffe, die zur Herstellung von bis-iso-Thioharn-

stoffen notwendig sind, können nach dem Fachmann bekannter 109825/2237

-10-

Verfahren hergestellt oder im Handel käuflich erworben werden.

Die folgenden. Beispiele veranschaulichen die Erfindung. Temperaturen werden in Grad-Celsius angegeben.

-11-

109825/2237

Bei s ρ i el I

Eine Lösung aus N-Benzyl-lT-methy!thioharnstoff (36 g) und 1,4-äi-Brombu-tan (21,6 g) in Methanol (250 ml) wurde - 16 Stunden lang am Rückfluß behandelt, das Lösungsmittel ■wurde verdampft und der ölige Huckstand wurde mit einem G-emisch aus Aceton und Äther auf ge schlämmt unter Bildung eines w'eißen Feststoffs, Schmelzpunkt 192 bis 194°. Um- ä kristallisation aus einem S-einisch von Methanol, und Äther ergab Tetramethylen^bis-t^^e-a.zyl-lJ¹-methylthiouronium)-dibrpmid, Schmelzpunkt 199 "bis 200°. : .■

B e i sp i e 1 2

Eine Lösung von Thionyl-chlorid (2,0 ml) in Chloroform (2,0 ml) wurde zu. einer warmen Lösung von 11-Bromundecansäure (5,3 g) in Chloroform (5 ml) zugesetzt. Nach Beendigung der aufanglichen Seaktion wurde das. Reaktionsgemisch einige Minuten lang unter Eiickflußbedingungen erhitzt und das Lösungsmittel und der ^hionylchlorid-iiberschuß verdampft. Der Eückstand wurde in Chloroform aufgelöst und die Lösung wurde langsam zu einer Lösung von Piperazin (1,3 g) in Chloroform ( 5 ml) zugesetzt* Nach Vervoll-· ständigung der Eeaktioii^ wurde das Eeaktionsgemisch mit Wasser extrahiert, die ChloiOforfflschiehtgetrocknet und •genügend Äther zur Siöhersteilung einer Kristallisation -

-12-

.zugesetzt. Es wurde ein cremartiger Feststoff, Schmelzpunkt 98 bis 101° erhalten. Dieser wurde durch ITmkri st alii sation aus Äthanol unter Bildung von H,N*-bis-(11-Bromundecanoyl)-piperazin, Schmelzpunkt 104- bis 105°/weiter gereinigt. .·

Eine Lösung von U,H'-bis-(11-Bromundecanoyl)piperazin (2,9 g) in Propanol (10 ml) wurde zu einer heißen lösung von Thioharnstoff (0,8 g) in Propanol (60 ml) zugesetzt und die sieh ergebende Lösung wurde 20 Stunden lang unter Rückflußbedingungen am Sieden gehalten. Zugabe eines Überschusses an Äther bewirkte Ausfällung eines cremartigen Feststoffs, welcher aus einem Gemisch von Äthanol und Aceton unter Bildung von Piperazin-Nj]ür'-bis-(i-cärbonyldecamethylen—10-thiouronium)-dibromid, Schmelzpunkt 149 bis 151° umkristallisiert worden war.

Beispiele 5 bis 79

Die folgenden bis-Thiouronium-Verbindungen wurden hergestellt und untersucht« Die Abkürzungen für die Wirksam-* keiten sind dieselben wie in der vorangehenden Beschreibung; die Bezeichnungen Me, Ät, Pr, Bu, Ph, Bz bedeuten Methyl, Äthyl, Propyl, Butyl, Phenyl bzw. Benzylgruppen.

-13-

10 9 8 2 5/2237

Beisp. Fr.

-13-

2HBr

^z ι S. P · ( O) unkorreg

ι« ρ 2 ?
η R oder E. R oder R R- oder R unkorreg..; -Wirksamkeit

3	2	Bz	Me	Me	181	Di, AIn	AIn'
4	2	Me	Bz	H	190-192
5	2	Me	Ph(0H₂)₂	H *	178-180	AnI, AIn!
6	2	Me'	Cyclohexyl	H.	202-203	AIn'
7	2	At	Ph(0H₂)₂	H	149-150	An1, Di,
8	2	i-Pr	Bz	H	158-160	An2
9	2	Bz	Bz	H	; 182-184	An!
10	2	Bz	Ph( CH₂J₂	■ ■ H	160-162	An1, AIn'
11	2	Ph(CH₂)₂	Ph(GH₂)₂	H	176-178	AIn'	Di,
12	3	Me	Bz	H	95-97	Di
13	3	" Me	Ph(GH₂)₂	H	88-89 Trihydrat	AnI, An2	AIn' ,
14	3	Bz	Bz		161-165 ;.	An-1
15	4	Me	i-Pr _	H	135-136	AnI, HoG, AIn'
16	4	Me	n-Pr	E	153-155	Di, AIn'
17	4	Me	n-Bti	E	136-138	HoG, Di, AnI
18	4	Me	t-Bu	H	115-116	AIn¹
19	4	Me	Cyclohexyl	H	188-190	AInV	AIn'
20	4	i-Pr	i-Pr	; η ·	199-201	HoG, AIn'	AIn'
'21	4	i-Pr	Me	,Me" '	193-194	Di
22	4	Me	Bz	H	.135-136	AnI
23	4	Me		H	174-176	AnI, HoG,
24	4	Me	Ph	H	147-149	AnT.ADi.

109825/2237

-14-

Beisp. ₁ itp pi Fr. η R oder R R oder R

oder

2HBr

S.P. ( G)

unkorreg. Wirksamkeit

25	4	It	Bz	H	111-112	HoG	, AIn'
26	4	n-Pr	Bz	H	120-122	An1	, AIn'
27	4	i-Pr	Bz	H	185-187	An1	•
28	4	n-Bu	Bz	H	148-150	An1
29	4	t-Bu	Bz	H	165-167	AIn	, HoG
30	4	Hexyl	Bz	H	127-129	An1	HrG
31	4	.Bz	Me	Me	151-152	An1	,2,AIn'
32	4	Bz	n-Pr	n-Pr	122-123	Di,
33	4	Bz	Bz	H	204-205	An1	,2
34	4	Ph(CH₂)₂	Bz	H	203-204 diHClde	An1
35	4	Ph(CH₂)₂	Ph(CH₂)₂	H ■	192-194	An1	, AIn'
36	5	Bz	Bz	H	151-154	An1	, AIn'
37	5	Bz	Ph(CH₂)₂	H	164-166	An1	, AIn'
38	6	Me	n-Pr	H	100-102	HoG	, AIn'
39	6	Me	n-Bu	H	143-145	An1	AIn'
40	6	Me	t-Bu	H	172-174	An1
41	6	i-Pr	i-Pr	H	170	Di,
42	6	i-Pr	i-Pr	Me	185-186	An1
43	6	Me	i-Pr	H	96-98	AIn
44	6	Me	Ph	H	188-190	An1	, AIn'
45	6	Me	Bz	H	74-76 dihydrat	An5	, ADi
46	6	Me	Cyclohexyl	H	147-148	An1 .
47	6.	Me	Ph(CH₂)₂	H	123-125	An1,
			109825/	2237

-15-

-15-

Beisp. Nr.	η	1 1 * R oder R¹	ρ P · ' R oder R R	⁵ oder R	2HBr ,, S.P.(⁰C) ? unkorreg.	Wirksamkeit
48	6	At	Bz	H	139-141	An1 , HoG, -Di ,
49	6	At	. Ph(CH₂)2	H	124-125	An1
50 ·	6	n-Pr	Bz	H	135-137	An1, AIn'
51	6	i-Pr	Bz	H	212-214	An1, AIn'
52	6	n-Bu	Bz	H	138-139	An1, AIn'
53	6	t-Bu	Bz	H	203-205	An1, HrG
54	6	Hexyl	Bz	H	99-101	An1,ADi
55	6	Bz	Me	Me	146-147	An1, Di
56	6	Bz	Bz	H	179-180	An1
57	6	Bz	Ph(CH₂)₂	H	204-205	An1
58	6	*"DVi { ΓΐΤ ^ JTXl V ν-'-Π-ο / ο**	Ph(CH₂)2	H	175-176	An1,2
59	6.	Me	n-Pr	H	61-63	An1, AIn'
60	6	Me	i-Pr	H	98-100	An1, ADi
61	6	Me	t-Bu	H	102-104	HrG
62	6	Me	Cyclohexyl	H	92-96	AIn'
63	6	He	Bz	H .	147-149	An1,2, AIn'
64	6	He	Ph(CH₂)2	H	156-158	An1,2
65	6	Me	Ph	H	145-146	HrG
66	6	It	Bz	H	119-120	An1,2,4
67	6	i-Pr	Bz	H	145	An1, ADi
68	6	Hexyl	Bz	H	99-102	An1
69	6	Bz	Bz	H	140-142	An1
70	6	Ph(CH₂) ρ	Bz	H	103-105 dihydrat	An1
71	6	- Ph(CILJ₂	Ph (GII₂) 2	H 78-80 Sesquihydrat	An1,2, AIn'
			1 0 9 R ? 5 /	2237

Beisp« * i' ITrο η R oder R R oder R

20 20 20 20

0 =

H H Me Me Imidazolin Me Bz H H

	(0H₂)₁₀-	Me Me
78	It	Imidazolin
79	It

2HBr ₀

unkorreg. Wirksamkeit

59	An1	, Hi	, Hi
185-187	AIn'	AIn'	Hi
145-146	An1,	ADi,
152-153	An1,
70-73	Hi
149-151	Hi

83-85
106-107

Hi Hi

Beispiel

Eine wässrige Dispersion von S^'-Eicosamethylen-Msthiouronium-diibromid mit einem Gehalt von 1,0 mg/ml wurde hergestellt durch Schütteln und Mahlen derselben in

109825/2237 -17-

isotonischem Borat/Succinat Puffer bei pH 7,5. Dieser Puffer enthielt Natrium-borat Fa₂B-O₇.10H₂O (0,9$ Gewicht/ Volumen), Bernsteinsäure (0,29$ Gewicht/Volumen) und Fatrium-chlorid (0,75$ Gewicht/Volumen).

Diphtherie-formaldehyd-toxoid, welches durch Behandlung gereinigten Diphtherie-Toxins mit wässrigem Formaldehyd hergestellt worden war, wurde in isotonischem Borat/ Succinat Puffer mit einem pH von 7,5 verdünnt, sodaß es einen Gehalt von 10 Hocculations-Äquivalenten (10 lf)/ml enthielt. Zu dieser lösung wurde ein gleiches Volumen der Hilfsmittel-Dispersion zur Bildung eines Diphtherie-Vakzins zugesetzt.

Die Wirksamkeit des Vakzins wurde an 5 Gruppen von Meerschweinchen demonstriert, indam man ihnen das Vakzin verabfolgte und später die verursachte Anti-Körperbildung bestimmte. Jedem Meerschweinchen wurden subkutan zwei Dosen von 0,2 ml des Vakzins im Abstand von 28 Tagen injiziert. 10 Tage nach der zweiten Dosis nahm man den Schweinchen Blut ab und der Antikörper-Titre gegen Diphtherie wurde in normalen Meerschweinchen durch den Meerschweinchen-Intracutan-Test von Romer und Sames (Z« Immun. !Forsch., 3,344, 1909), modifiziert durch Glenny und Llewellyn-Jones (J. Patti. Bact., 34, 143, 1931) bestimmt. Der mittlere Antikörper-Titre betrug 4,0 Einheiten/ml, ver-

109825/2237

-18-

glichen mit einem Titre von weniger als 0,001 Einheiten/ml, welcher mit Diphtherie-Toxoid ohne Hilfsmittel erhalten worden war.

Beispiel 81

Eine wässrige Dispersion von S,S^f-Eicosamethylen-bis-(N,K"¹-dimethylthiouronium)dibromid wurde hergestellt und gemäß dem in Beispiel 80 beschriebenen Verfahren untersucht. Der mittlere Antikörper-Titre betrug 10 Einheiten/ml,

Beispiel 82

Eine wässrige Dispersion von SjS'-Eicosamethylen-bis-(2-thio-imidazolin)dibromid wurde hergestellt und gemäß dem in Beispiel 80 beschriebenen Verfahren untersucht. Der mittlere Antikörper-Titre betrug 4>8 Einheiten/ml.

Beispiel 83

Eine wässrige Dispersion von Piperazin-FjlT'-bis-O-Carbonyl-deeamethylen-10-thiouronium)dibromid wurde hergestellt und gemäß dem in Beispiel 80 beschriebenen Verfahren untersucht. Der mittlere Jüatikörper-Titre betrug 2,9 Einheiten/ml.

109825/2237

-19-

Claims

-19- Patentansprüche:

1. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I)

R¹N .

^O -S-A-S-C (I)

¥i ^ MT R⁵

oder eines Säureadditionssalzes hiervon mit einer therapeutisch verträglichen Säure, worin

A eine (CHp) - Gruppe ist, in welcher η eine ganze

Zahl von 2 bis 14 bedeutet, R und R² oder bzw. ί

1 · 2^f
R und R zwei verschiedene niedere Alkyl- oder alicyclische Gruppen sind, oder beide gleich oder verschieden sind, und jeweils eine Alkyl substituierte aromatische Kohlenwasserstoff-Gruppe mit bis zu 10 Kohlenstoffatomen sind, oder einer dieser Reste eine niedere Alkylgruppe und der andere eine aromatische Kohlenwasserstoff-Gruppe wie oben angegeben ist,

oder A eine -(CH₂)_n-Gruppe, in welcher η eine ganze 109825/2237

-20-

Zahl von 15 bis 22 bedeutet oder die U₁N¹-bis(1-Car-

1 2 1 ' bonyldecamethylen)piperazin-Gruppe ist, R , R , R

p»

und R gleich oder verschieden sind und jeweils ein Wasserstoffatom oder eine aliphatische, alieyclische oder eine gegebenenfalls Alkyl substituierte aromatische Kohlenwasserstoff-Gruppe mit bis zu 10 Kohlenstoffatomen sind, oder das erste oder zweite Paar der R-Gruppen, als aliphatische Kohlenwasserstoffe, zusammen einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring mit der benachbarten -U=O-U- Gruppe der Formel bilden kann,

und R und R gleich oder verschieden und jeweils ein Wasserstoffatom oder eine niedere Alkylgruppe mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen bedeuten,

dadurch gekennzeichnet, daß ein Thioharnstoff der allgemeinen Formel (II)

R¹H

SH (II)

R²R⁵U

mit einer Verbindung der Formel X-A-Y, worin X eine reaktionsfähige elektronegative Gruppe und Y eine

109825/2237 -21-

elektronegative weniger reaktionsfähige Gruppe als X ist, oder eine hinsichtlich Thioharnstoffen nicht reaktionsfähige, jedoch in eine solche reaktionsfähige Gruppe umwandelbare Gruppe ist, umgesetzt wird, und das Kondensationsprodukt anschließend weiter, falls notwendig nach Umwandlung von Y in eine reaktionsfähige Gruppe mit einem Thioharnstoff der allgemeinen Formel (III)

R¹ N

l * I

^ G SH (III)

umgesetzt wird.

2. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I) gemäß Patentanspruch 1 mit identischen

Substituenten für R¹ und R¹', R² und R²' bzw. B? und

R , dadurch gekennzeichnet, daß ein in entsprechender Weise substituierter Thioharnstoff mit einem halben Äquivalent einer Verbindung der Formel X-A-X, worin X eine reaktionsfähige elektronegative Gruppe ist, in einem polaren Lösungsmittel umgesetzt wird.

3. Verfahren gemäß einem der vorangehenden Patentansprüche.

109825/2237

-22-

dadurch gekennzeichnet, daß X ein Halogenatom, eine
Sulphat- und/oder eine Tosylgruppe ist.

4« Verfahren gemäß einem der Patentansprüche 1 bis 3> dadurch gekennzeichnet, daß das Lösungsmittel ein niederer Alkohol mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist.

5. Verfahren gemäß Patentanspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß A eine -(GHp) - Gruppe, wobei η einen Wert von 15 bis 22 hat, oder die !{,IT'-bis-Ci-Carbonyldecamethylen)piperazin-Gruppe ist und Br und R/ Wasserstoffatome sind.

6. Verfahren gemäß Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß A eine "(CH₂)- Gruppe ist, wobei η einen Wert von 3 bis 10 hat, und

1 1 '

entweder (1) R und R gleich oder verschieden und jeweils eine Alkylgruppe mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen, oder eine Benzyl- oder

2 2*
Phenäthyl-Gruppe, R und R gleich oder

verschieden und jeweils eine Benzyl- oder Phenäthyl-Gruppe und R^ und R^ Wasserstoff atome sind,

oder (2) R und R Benzyl-Gruppen, R² und R²' gleich
oder verschieden und jeweils eine niedere Al-

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-23-

kylgruppe mit von 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, und R^ und Ir Methylgruppen sind.

7. Verfahren gemäß Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß A

entweder eine -(CHp) - Gruppe ist, in welcher η eine

ganze Zahl von 4 bis 6 bedeutet, E und R f

gleich oder verschieden und jeweils eine nie* dere Alkylgruppe mit bis zu 4 IKohlenstoff-

2 2'
atomen, R und R gleich oder verschieden, jedoch nicht identisch sind mit dem ent-

1 1 ·
sprechenden R und R , wenn bei Methyl- · gruppen sind, und jeweils eine niedere Alkylgruppe mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen oder eine Benzyl- oder Phenäthylgruppe und R und

3¹

R Wasserstoffatome sind, λ

oder A eine -(^GH ₂^n" ^GruPP^e ^is^» ⁱⁿ welcher η eine ganze Zahl von 2 bis 6 bedeutet, und R und R¹' gleich oder verschieden und jeweils eine Isopropyl- oder Benzyl-Gruppe und R , R , R^ und R Hethylgruppen sind.

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