DE10317528A1 - Verfahren zur Herstellung von Calysteginen - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von Calysteginen Download PDFInfo
- Publication number
- DE10317528A1 DE10317528A1 DE10317528A DE10317528A DE10317528A1 DE 10317528 A1 DE10317528 A1 DE 10317528A1 DE 10317528 A DE10317528 A DE 10317528A DE 10317528 A DE10317528 A DE 10317528A DE 10317528 A1 DE10317528 A1 DE 10317528A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- lycopersicon
- solanum
- water
- calystegin
- chromatography
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/81—Solanaceae (Potato family), e.g. tobacco, nightshade, tomato, belladonna, capsicum or jimsonweed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
Der Erfindung liegt das Problem zugrunde, Calystegine, insbesondere Calystegin B2, aus leicht zugänglichem Pflanzenmaterial nach einem einfachen Verfahren herzustellen. DOLLAR A Dieses Problem wird durch die Extraktion der Calystegine aus den Blättern von Tomatenpflanzen durch polare Lösungsmittel, z. B. Wasser, Einengen der Extrakte, weitere Extraktion mit methanolischem Ammoniak und einer Feinreinigung mittels Chromatographie erhalten. DOLLAR A Calystegine weisen eine hohe Glycosidase-Aktivität auf.
Description
- Die Erfindung betrifft die Herstellung von Calysteginen, insbesondere von Calystegin B2, aus einer anderen Ausgangspflanze als die bisher genutzten und ein Verfahren zu ihrer Herstellung.
- Calystegine sind Naturstoffe mit einem Tropangrundgerüst, die in Abhängigkeit von der Anzahl ihrer Hydroxylgruppen starke Inhibitoren von Enzymen insbesondere von Glycosidasen sind. Calystegin B2 ist als Glycosidase-Inhibitor von potentieller Bedeutung in der Therapie sowohohl von Tumorerkrankungen als auch von viralen Infekten sowie als Immunomodulator. Glycosidase-Inhibitoren besitzen darüber hinaus auch als Antidiabetika großes pharmazeutisches Potential.
- Verfahren zur Gewinnung aus Kartoffelkeimen sind beschrieben. Darüber hinaus kommen Calystegine in zahlreichen Pflanzen vor, z.B. in Vertretern der Familien der Solanaceen, Moraceen und Convolvulaceen. Viele dieser Pflanzen sind jedoch entweder schwierig in hinreichender Menge zu beschaffen oder enthalten nur geringe Mengen an Calysteginen häufig neben einer großen Fülle unterschiedlichster, die Herstellung von Calysteginen äußerst störender Begleitstoffe. Die angewendeten Isolierverfahren sind deshalb aufwendig, weil Calystegine dabei nur im Gemisch mit anderen Stoffen extrahiert werden können und nur in geringen Ausbeuten im Gesamtextrakt enthalten sind. Sie müssen deshalb über mehrere Stufen und mit hohem Aufwand gereinigt werden, z.B. über mehrfache Chromatographie an unterschiedlichen chromatographischen Phasen. Entsprechend teuer ist deshalb die Gewinnung von Calysteginen.
- Der im Patentanspruch 1 angegebenen Erfindung liegt das Problem zugrunde, für die Gewinnung von Calysteginen, insbesondere von Calystegin B2, leicht zugängliches Pflanzenmaterial mit relativ hohem Calystegingehalt zu finden, aus dem sie sich nach einem einfachen Verfahren herstellen lassen.
- Dieses Problem wird gemäß Patentanspruch 1 gelöst, in dem die Calystegine aus den Blättern von ausgewähltem Pflanzenmaterial mit relativ hohem Calystegingehalt mit einem polaren Lösungsmittel, insbesondere Wasser extrahiert werden, der erhaltene Extrakt eingeengt, der verbliebende Rückstand mehrmals mit methanolischer Ammoniaklösung behandelt, die erhaltene Lösung von unlöslichem Rückstand abgetrennt, eingeengt und anschließend chromatographisch gereinigt wird.
- Die Erfindung führt durch das günstige Inhaltsstoffgemisch der Blätter der ausgewählten Pflanzen und durch die Auswahl der Lösungsmittel mit wenigen Schritten zu einem reinen Produkt. Durch die Verwendung von Wasser als primärem Lösungsmittel ist das Verfahren umweltschonend, schnell und preisgünstig. Das Verfahren ist in einfachen Vorrichtungen und in beliebigem Maßstab durchführbar.
- Die Identität der gewonnenen Calystegine wird sichergestellt durch dünnschichtchromatographische und gaschromatographische Analyse sowie durch Massenspektroskopie, 1H-NMR- und 13C-NMR-Spektroskopie.
- Vorzugsweise wird der wässrige Extrakt aus zerkleinertem Blattmaterial von Solanaceen der Gattungen Lycopersicon und Solanum, wie Lycopersicon escullentum Mill., Lycopersicon pimpinellifolium Mill., Lycopersicon peruvianum (L.) Mill., Lycopersicon penelli, Lycopersicon parviflorum, Lycopersicon hirsutum, Lycopersicon chielewskii, Lycopersicon chilense, Lycopersicon cheesmanii, Solanum sitiens, Solanum ochanthum, Solanum lycopersicoides sowie Solanum juglandifolium bei erhöhter Temperatur im Vakuum eingeengt und anschließend wenigstens dreimal mit einer methanolischen Ammoniaklösung, die mindestens fünf Volumen% Ammoniak enthält, bei erhöhter Temperatur behandelt. Das vom unlöslichen Rückstand abgetrennte Eluat wird vorzugsweise im Vakuum und bei erhöhter Temperatur auf ein möglichst geringes Volumen eingeengt. Die Feinreinigung erfolgt durch Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von Methanol/Ammoniakmischungen oder nach einer Vorreinigung durch Chromatographie auf reversed-phase-Kieselgel, bevorzugt unter Verwendung von RP8 oder von RP-18-Gel, unter Verwendung von Methanol/Wasser-Mischungen.
- 100 g zerkleinertes Blattmaterial aus Lycopersicon peruvianum wurden mit 300 ml Wasser aufgekocht und die Lösung wurde filtriert. Der Rückstand wurde noch zwei Mal mit je 300 ml 80°C heißem Wasser extrahiert. Die vereinigten Filtrate wurden bei Temperaturen zwischen 25 und 50 Grad Celsius unter Anlegen von Vakuum zur Trockene eingeengt. Der so erhaltene Feststoff wurde in 400 ml Methanol/25% wässriger Ammoniaklösung (95:5) verrührt und filtriert, das Filtrat bei Temperaturen zwischen 25 und 50 Grad Celsius eingeengt und chromatographisch (Kieselgel 60, Säule ∅ 3,5 cm, Länge 90 cm; Eluent: Methanol/Wasser/25% wässrige Ammoniaklösung 95:5:0,5) aufgetrennt. Die Calystegin B2 enthaltenden Fraktionen (Kontrolle über Dünnschichtchromatographie) wurden vereinigt und zusammen eingeengt. Bei mehrmaliger Durchführung konnten zwischen 10-25 mg Calystegin B2 (Reinheit > 95%) hergestellt werden. Eine Feinreinigung erfolgte über eine Säulenchromatographie (reversed phase, z.B. RP18-Gel, Säule ∅ 3,5 cm, Länge 20 cm, Eluent: Methanol/Wasser/25%wässrige Ammoniaklösung 95:5:0,5) und ergab Calystegin B2 mit einer Reinheit von > 98-99%.
Claims (5)
- Verfahren zur Herstellung von Calysteginen, insbesondere von Calystegin B2, gekennzeichnet durch Extraktion von Blättern von Solanaceen mit Wasser, Eluieren des Rückstandes mit methanolischer Ammoniaklösung, Einengen dieser Eluate gefolgt von einer Feinreinigung durch Chromatographie.
- Verfahren nach Anspruch 1 gekennzeichnet durch die Verwendung von Solanaceen der Gattungen Lycopersicon und Solanum.
- Verfahren nach Anspruch 1 und 2, gekennzeichnet durch die bevorzugte Verwendung der Gattung Lycopersicon escullentum Mill., Lycopersicon pimpinellifolium Mill., Lycopersicon peruvianum (L.) Mill., Lycopersicon penelli, Lycopersicon parviflorum, Lycopersicon hirsutum, Lycopersicon chielewskii, Lycopersicon chilense, Lycopersicon cheesmanii, Solanum sitiens, Solanum ochanthum, Solanum lycopersicoides sowie Solanum juglandifolium.
- Verfahren nach Anspruch 1 bis 3 dadurch gekennzeichnet, daß das zerkleinerte Blattmaterial mit Wasser höherer Temperatur extrahiert wird und der durch Einengen dieser Extrakte erhaltene Rückstand mindestens dreimal in methanolischer Ammoniaklösung bei Raumtemperatur oder bevorzugt bei höherer Temperatur und besonders bevorzugt bei 40 Grad Celsius aufgenommen wird.
- Verfahren nach Anspruch 1 bis 4 dadurch gekennzeichnet, daß die im eingeengten Rückstand der zuvor von unlöslichem Material abgetrennten Eluate angereicherten Calystegine, insbesondere das Calystegin B2, nach einer Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von Methanol/Wasser/Ammoniakmischungen oder nach einer Feinreinigung durch Chromatographie auf reversed-phase-Kieselgel, unter Verwendung von Methanol/Wasser/Ammoniak-Mischungen aus den Calystegin-enthaltenen Fraktionen erhalten werden.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10317528A DE10317528B4 (de) | 2003-04-16 | 2003-04-16 | Verfahren zur Herstellung von Calysteginen |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10317528A DE10317528B4 (de) | 2003-04-16 | 2003-04-16 | Verfahren zur Herstellung von Calysteginen |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE10317528A1 true DE10317528A1 (de) | 2004-11-11 |
DE10317528B4 DE10317528B4 (de) | 2006-12-28 |
Family
ID=33154256
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE10317528A Expired - Fee Related DE10317528B4 (de) | 2003-04-16 | 2003-04-16 | Verfahren zur Herstellung von Calysteginen |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE10317528B4 (de) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2548565A2 (de) * | 2010-02-19 | 2013-01-23 | Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology | Pharmazeutische zusammensetzung zur behandlung von diabetes mit quamoclit-angulata-extrakten |
CN105622459A (zh) * | 2016-01-11 | 2016-06-01 | 中国科学院化学研究所 | 一种制备打碗花精及其中间体的方法 |
-
2003
- 2003-04-16 DE DE10317528A patent/DE10317528B4/de not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
B.Dräger "Identification and Quantification of Ca- lystegines, Polyhydroxyl Nortropane Alkaloids" Phytochemical Analysis, Vol.6. S.31-37(1995) |
B.Dräger "Identification and Quantification of Ca-lystegines, Polyhydroxyl Nortropane Alkaloids" Phytochemical Analysis, Vol.6. S.31-37(1995) * |
D.Guntli et al. "Calystegine degradation capaci- ties of microbial rhizosphere communities of Zea mays (calestygine-negative) and Calystegia sepium (calystegine-positive)" FEMS Microbiology Ecology 28 (1999), 75-84 * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2548565A2 (de) * | 2010-02-19 | 2013-01-23 | Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology | Pharmazeutische zusammensetzung zur behandlung von diabetes mit quamoclit-angulata-extrakten |
JP2013520411A (ja) * | 2010-02-19 | 2013-06-06 | コリア リサーチ インスティテュート オブ バイオサイエンス アンド バイオテクノロジー | 丸葉留紅草抽出物を含有する糖尿病治療用医薬組成物 |
EP2548565A4 (de) * | 2010-02-19 | 2013-10-02 | Korea Res Inst Of Bioscience | Pharmazeutische zusammensetzung zur behandlung von diabetes mit quamoclit-angulata-extrakten |
CN105622459A (zh) * | 2016-01-11 | 2016-06-01 | 中国科学院化学研究所 | 一种制备打碗花精及其中间体的方法 |
CN105622459B (zh) * | 2016-01-11 | 2017-10-13 | 中国科学院化学研究所 | 一种制备打碗花精及其中间体的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE10317528B4 (de) | 2006-12-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE2510866B2 (de) | 4'-epi-Adriamycin a - und ß -Anomer, Verfahren zu deren Herstellung und diese enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen | |
DE3010040A1 (de) | Verfahren zur gewinnung von rosmarinsaeure aus melisse | |
DE19624705A1 (de) | Dendrimere auf Saccharid-Basis | |
DE19713768A1 (de) | Herstellung von Betulinsäure | |
Gmelin et al. | Glucosinolates in the Caricaceae | |
DE2713536A1 (de) | Verfahren zur herstellung von stickstoffhaltigen polysacchariden | |
Alvarez et al. | SC-1, an antimycotic spirostan saponin from Solanum chrysotrichum | |
DE10317528B4 (de) | Verfahren zur Herstellung von Calysteginen | |
US3510472A (en) | Method of producing cardioactive glycosides | |
CH630929A5 (de) | Verfahren zur herstellung von neuen disaccaridderivaten von anthracyclinen. | |
EP0294410B1 (de) | Verfahren zur anreicherung und/oder isolierung von herzglykosiden unter verwendung unpolarer adsorberharze | |
DE60108272T2 (de) | Pharmazeutische zusammensetzung enthaltend (-)-secoisolariciresinol | |
DE2915160C2 (de) | ||
EP0306541B1 (de) | Verfahren zur Gewinnung von Daunorubicinhydrochlorid aus Fermentbrühe | |
DE69813137T2 (de) | Pflanzenextrakt, verfahren zu dessen herstellung und seine verwendungen in der human- und tiermedizin | |
DE2234881A1 (de) | Verfahren zur vorbereitung von 1-beta-d-arabinofuranosylzytosin | |
DE19937019B4 (de) | Verfahren zum Herstellen von 4-Aryl-2-butanolen aus Taxus wallichiana | |
EP2018870B1 (de) | Verfahren zum Gewinnen von Flavonoiden aus Rosskastanien | |
US6884908B2 (en) | Process for isolation of hepatoprotective agent “oleanolic acid” from Lantana camera | |
DE2456889C3 (de) | Verfahren zum Extrahieren des gesamten Ginsengsaponins mit hoher Reinheit aus den Blättern und Blüten von Panax CA. Mayer sowie Gesamtginsengsaponinextrakt | |
Igwe et al. | ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF A NOVEL LUPANE-TYPE TRITERPENOID FROM THE LEAVES OF Piliostigma thonningii | |
CH638538A5 (de) | Verfahren zur auftrennung in hoher reinheit von einzelnen sterolglykosiden. | |
DE1593086C3 (de) | Verfahren zur Isolierung von Peruvosid aus Pflanzenmaterialien | |
Rao | The gymnemic acids | |
DE10310267A1 (de) | Verfahren unter Anwendung von Druck zur intramolekularen Umesterung von cyclischen, mehrfach hydroxylierten Verbindungen |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
OP8 | Request for examination as to paragraph 44 patent law | ||
8364 | No opposition during term of opposition | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |