CZ64599A3 - Farmaceutické sloučeniny - Google Patents

Farmaceutické sloučeniny Download PDF

Info

Publication number
CZ64599A3
CZ64599A3 CZ99645A CZ64599A CZ64599A3 CZ 64599 A3 CZ64599 A3 CZ 64599A3 CZ 99645 A CZ99645 A CZ 99645A CZ 64599 A CZ64599 A CZ 64599A CZ 64599 A3 CZ64599 A3 CZ 64599A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
alkyl
hydrogen
cryptophycin
ring
Prior art date
Application number
CZ99645A
Other languages
English (en)
Inventor
Rima Salim Al-Awar
William Joseph Ehlhardt
Subbaraju Venkata Gottumukkala
Michael John Martinelli
Eric David Moher
Richard Elliott Moore
John Edwin Munroe
Bryan Hurst Norman
Vinod Francis Patel
Chuan Shih
John Eldon Toth
Venkatraghavan Vasudevan
James Edward Ray
Original Assignee
Eli Lilly And Company
Wayne State University
University Of Hawaii
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eli Lilly And Company, Wayne State University, University Of Hawaii filed Critical Eli Lilly And Company
Publication of CZ64599A3 publication Critical patent/CZ64599A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D273/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/12—Esters of phosphoric acids with hydroxyaryl compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6527—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Oblast techniky
Vynález se týká oblasti farmaceutických sloučenin a sloučenin organické chemie, zejména nových kryptofycinových sloučenin použitelných jako antimikrotubulová činidla.
Dosavadní stav techniky
Neoplastická onemocnění, charakterizovaná proliferací buněk, které nejsou podrobeny normální kontrole růstu buněk, jsou jednou z hlavních příčin smrti u člověka a dalších savců. Klinická zkušenost při rakovinové chemoterapii ukazuje, že jsou žádoucí nová a účinnější léčiva pro léčení těchto nemocí.
Mikrotubulový systém eukaryotní buňky je jednou z nějdůležitějších složek cytoskeletu a je v dynamickém skládání a rozkládání; což znamená, že heterodimery tubulinu polymerují a vytvářejí mikrotubulus. Mikrotubuly hrají klíčovou roli v regulaci stavby buňky, jejího metabolismu a dělení. Dynamický stav mikrotubulů je kritický pro normální funkci buňky. Vzhledem k dělení buněk tubulin polymeruje do mikrotubulů, které vytvářejí mitotické vřeténko.
Mikrotubuly potom depolymerují, když byl splněn účel mitotického vřeténka. Z tohoto důvodu činidla, která přerušují polymeraci nebo depolymeraci mikrotubulů a tím způsobují inhibici mitózy, patří mezi nejúčinnější ·· 9 protirakovinná chemoterapeutická činidla v klinické praxi.
Kromě toho nárokované sloučeniny vykazují také fungicidní vlastnosti. Navíc mohou být činidla, která mají schopnost narušovat mikrotubulový systém, užitečná při výzkumu.
Jisté kryptofycinové sloučeniny jsou známy z literatury;
nicméně kryptofycinové sloučeniny, rozpustnost a stabilitu jsou farmaceutických kryptofycinových použití.
které mají ještě větší žádoucí pro většinu širší další toho škála léčebné
Kromě sloučenin může poskytnout možnosti pro pacienty, trpící rakovinou. Přihlašovatelé nyní objevili nové sloučeniny, přinášející zvýšenou rozpustnost ve vodě, stejně tak jako sloučeniny mající schopnost narušovat mikrotubulový systém. Sloučeniny podle předloženého vynálezu je možno použít pro léčení neoplasmů. Takové sloučeniny mohou být připraveny použitím plně syntetických způsobů a proto jsou vhodné pro vytváření farmaceuticky použitelných přípravků.
Podstata vynálezu
Vynález se týká nových kryptofycinových sloučenin obecného vzorce I • · ··· · · · · · · · • · · · · · · · · · · · · • · · * · · · ···· · ··· ··· ··*···· · » • · ·· ·· · · · · ·
ve kterém
Ar je zvolen ze souboru, zahrnujícího fenyl, libovolnou jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, jednoduchou substituovanou aromatickou substituovanou heteroaromatickou nesubstituovanou heteroaromatickou heterocyklickou skupinu, skupiny C1-C12 skupinu, skupinu, skupinu, alkyl, C2-Ci2
51t-)52 alkenyl, C2-C12 alkinyl, NR R Ar' obecného vzorce
COR
OR a skupinu
R51 je zvolen ze souboru, skupiny C1-C3 alkyl; zahrnuj ícího atom vodíku a
r52 je zvolen ze souboru, zahrnuj ícího atom vodíku a
skupiny C1-C3 alkyl;
je zvolen alkyl;
je zvolen skupiny jednoduchou • « · · • » · φ » · φ » · <· ze souboru, zahrnujícího skupiny C1-C12 souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, Ci-C6alkyl (R57'r57r57 '), ze
Ci-C6 nesubstituovanou aromatickou aromatickou skupinu, skupinu, jednoduchou substituovanou heterocyklickou skupinu, fenyl, atom halogenu, skupiny 4-(terč.-butyldimethylsiloxy)-benzyltrifenylfosofonium, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58,
N(R59)R60,
NHOR61,
CH2(O)R62',
NHCHR61 , CN, NO2, atom halogenu, skupiny OR62, -CH2OC(O)R95, CH2N(R96)R96', COR100, (CiC6alkyl)OR a—SR xoo
Rlll ó
L.
je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupinu -R98NH3;
a R96 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, který zahrnuje atom vodíku a skupiny C1-C6 alkyl, -R97NH3 a -R99NR99 R99 ;
97 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny Ci-C6 alkyl;
99'
100
101 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny C1-C6 alkyl; znamená skupinu C1-C6 alkyl;
R jsou nezávisle na sobe zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci-C6 alkyl;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a Si (R101R102R103) .
znamená skupinu Ci-C6 alkyl;
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111 • <· znamená skupinu Οι-Οθ alkyl;
znamená skupinu Ci-Cg alkyl;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny C(O) Ci~C6 alkyl N(R106) (R59)R60, C(O)Ci-C6 alkylN+, kondenzovanou bicyklickou skupinu a NHR105N (R106) (R59) R60; je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny C(O)Ci~C6 alkyl, Ci~C6 alkyl;
je zvolen ze souboru, je zvolen ze souboru, skupiny C1-C6 alkyl, CR108R je zvolen ze souboru, skupiny Ci-Cg alkyl; je zvolen ze souboru, skupiny Ci-Cé alkyl; je zvolen ze souboru, skupiny Ci-C6 alkyl; je zvolen ze souboru, >106\ ,59,
zahrnuj ícího atom vodíku,
IR107;
zahrnuj ícího atom vodíku,
,109^110 .
zahrnuj ícího atom vodíku a
zahrnuj ícího atom vodíku a
zahrnuj ícího atom vodíku a
zahrnuj ícího atom vodíku,
OR107
zahrnuj ícího atom vodíku,
C (R57 R57 R57’ ) , jednoduchou
je zvolen ze souboru, skupiny Ci-Cg alkyl, nesubstituovanou aromatickou skupinu, jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu, skupiny fenyl,
COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', CN,
N02halogen, OR62 a SR63;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny Ci-C6 alkyl, C(R57R57 R57 ), jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu, skupiny fenyl,
COOR po3h, so3h, so2r nr59r60,
NHOR
NHCHR61', (CiΟθ) alkylNR59R60, CN, NO2, atom halogenu, skupiny OR
104
44444 4
CR104, OR62 a SR63;
R57 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny C1-C12 alkyl;
R57 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu a skupiny C1-C12 alkyl;
R57 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu a skupiny C1-C12 alkyl;
R57 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu a skupiny C1-C12 alkyl;
R58 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny C1-C12 alkyl;
R59 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny (Οχ-Οβ) alkyl, terč.-butoxykarbonyl, karboterc.-butoxy (t-BOC) a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) t
R60 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny (Ci~C6) alkyl;
R61 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny OR64, CH2NHR65, NHR65 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) ;
R61 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny OR64, CH2NHR65, NHR65 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) ;
R62 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci-C6 alkyl;
R62 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny OH, OR62 a Cx~C6 alkyl;
R63 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Οι-Οβ alkyl;
R64 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny (Οχ-Οβ) alkyl, CH2NR66R67;
• · • · · · · ·
65' je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Οχ-Οβ alkyl, NH2 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC);
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Οχ-Οβ alkyl, NH2 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC);
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Οχ-Οβ alkyl a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC); je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Οχ-Οβ alkyl;
sobě zvoleny ze souboru, halogenu, monalkylamino, alkylthio,
R jsou nezávisle na zahrnujícího atom dialkylamino, trialkylamonium, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát, OR31, SR31, NR31, OH,
SH, NR92, R93, NR94 a NH2;
R93 a R94 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího skupiny 0χ-06 alkyl;
za předpokladu, že jeden substituent, který je zvolen ze souboru zahrnujícího R1 a R2, je zvolen ze souboru, zahrnujícího OR31, SR31, R31, OH a SH; nebo
R1 a R2 mohou dohromady vytvářet spolu s C-18 a C-19 epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh nebo mono(ΟχΟβ) alkyl-fosfátový kruh; nebo
R1 a R2 mohou spolu vytvářet druhou vazbu mezi C-18 a C-19;
R3 znamená nižší alkylovou skupinu;
R4 znamená atom vodíku nebo skupinu OH;
R5 znamená atom vodíku nebo skupinu OH;
R4 a R5 mohou spolu vytvářet druhou vazbu mezi C13 a 0χ4;
R6 znamená substituent zvolený ze souboru, zahrnujícího skupiny benzyl, hydroxybenzyl, alkoxybenzyl,
- 8 - : • • · · · · · · · · · · ·· · · · ···· ···· · · · · · · · · • · · « · ······ ··· ··« ·····« · · «· ·· · · · · · · ·
halohydroxybenzyl, dihalohydroxybenzyl,
haloalkoxybenzyl, nebo dihaloalkyoxybenzyl,
heteroaromatický B-kruh, substituovanou
heteroaromatickou skupinu, (Ci- C6)alkylový B-kruh,
(C3-C8) cykloalkyl, substituovaný C3-Cs cykloalkyl,
substituovaný (Οχ-Οβ) alkyl, skupinu obecného vzorce III'
R'
a skupinu obecného vzorce III'':
R7 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny NR51R52, R53NR51R52, OR53, atom vodíku a nižší alkylovou skupinu;
R51 a R52 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího skupiny C1-C3 alkyl;
R53 znamená skupinu C1-C3 alkyl;
Rs znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu; nebo R7 a R8 mohou spolu vyvářet cyklopropylový kruh;
R9 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, nenasycený nižší alkyl, nižší
R15,
18'
19'
R90,
91' alkyl-C3-C5 cykloalkyl a benzyl;
znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu; je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, OH, nižší alkylovou skupinu, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a fenyl;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a nižší alkyl;
R16 a R17 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu OR18, atom halogenu, skupiny NR18 R19 , NO2, OPO3H2, OR19fenyl, SCH2fenyl, CONH2, CO2H, PO3H2, SO2R23 a ZZ;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny aryl, C1-C6 alkyl, fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC); je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny (Cx-Cg) alkyl a C(O)R90 ; znamená skupiny Οχ-Οβ alkyl, fluorenylmethoxy-karbonyl (FMOC) ; ze souboru, atom vodíku,
C(O)R atom vodíku,
C(O)R je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny (Οχ-Οβ) alkyl a C (O) R90 ;
Rso a R90 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze zahrnujícího atom vodíku, skupiny (Cx~ Ce) alkyl, OR91 a aryl;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny (Cx~ C(j) alkyl, aryl a atom vodíku;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny (Cx~C3) alkyl;
znamená atom vodíku nebo skupiny Cx-C6 alkyl; nebo může dohromady vytvářet spolu s dusíkovým atomem v poloze C-ll tří- až sedmičlenný cyklický kruh;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího P, S, skupiny atom vodíku,
R90 , souboru,
R'
20'
21'
- 10 (C1-C12) alkyl, B, R32 a Si;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího aminokyseliny, uhlovodíky, aminované cukry, (sacharid) q, C(O)R33 a
je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny R37R38, R38, R37N (R2o')R38, R37N (R20 ) (Ci-C6) alkyle (O) R38, R37N (R20')C(O)R38,
R37O (Cx-Ce) alkylO (Cx-C6) alkylO (Cx-C6) alkylO (Cx-C6) alkyl a R37 (NR18'r20) R38;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny Cx-C6 alkyl a -CO2R21 ;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku— a skupiny (Cx-C6) alkyl;
znamená skupinu (Cx~C4) alkyl;
znamená atom vodíku nebo skupinu (Ci-C3) alkyl;
znamená atom vodíku, OH, atom halogenu, skupiny (Οχ-Ο3) alkyl, OR34, NO2, NH2 a heteroaromatický kruh;
znamená skupinu (Cx-C6)alkyl;
znamená skupinu COOR39, >36 • · ·
• · · · · · · · · ··
skupiny NH2, (NR18 R20 ) , heterocyklickou skupinu, heteroaromatickou skupinu, OH, (Ci~C6) alkyl a aminokyselinu;
R39 znamená atom vodíku nebo skupinu (Ci-C6) alkyl;
R40, R41 a R42 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu OR43, atom halogenu, skupiny NH2, N02, OPO(OR46)2, -OR44fenyl a R45;
R43 znamená skupinu Οχ-Οε alkyl;
R44 znamená skupinu Ci-C6 alkyl;
R45 je zvolen ze souboru, zahrnujícího nesubstituovanou jednoduchou aromatickou skupinu a substituovanou jednoduchou aromatickoímkupinu;
R46 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Na, skupiny (Ci-C6) alkyl a -C(CH3)3;
R50 znamená atom vodíku nebo skupinu
Λ.
t
n se rovná o, 1, nebo 2;
m se rovná o, 1, nebo 2;
P se rovná 0, 1, nebo 2;
q se rovná 2, 3, nebo 4;
je zvolen ze souboru, zahrnujícího 0, C, S, skupiny NH • · · a alkylamino;
Y je zvolen ze souboru, zahrnujícího C, 0, NH, S, SO, S02 a alkylamino;
Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -(CH2)n-, - (CH2) p-O-(CH2) m- a (C3-C5) cykloalkyl;
ZZ je zvolen ze souboru, zahrnujícího jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu a jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu; nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo solvátů;
s podmínkou, že jestliže R1 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, OH, OR31, SH, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát a fosfát a R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny OH, NH2, NR31 a SH nebo R1 a R2 spolu vytvářejí epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh nebo monoalkylfosfátový kruh, nebo R1 a R2 spolu vytvářejí druhou vazbu; R3 znamená nižší alkyl; R4 a R5 znamenají atom vodíku nebo R4 a R5 spolu vytvářejí dvojnou vazbu mezi Ci3 a Ci4; R6 znamená benzyl, hydroxybenzyl, alkoxybenzyl, halohydroxybenzyl, diahalohydroxybenzyl, halohydroxybenzyl, nebo dihalohydroxybenzyl; R7, R8, R9 a R10 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkylová skupina; a x a Y znamenají nezávisle na sobě skupiny 0, NH nebo alkylamino a R50 znamená
A • · · 9 · 0 •00 999 a R11 znamená atom vodíku;
potom Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny Ci~Ci2 alkyl, Ci-Ci2alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu, nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu a substituovanou heteroaromatickou skupinu; nebo jestliže Ar je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny C1-C12 alkyl, Ci-Ci2 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu, nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu a substituovanou heteroaromatickou skupinu; a R50 znamená
a R11 znamená atom vodíku;— potom R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát, OR31 a S31; nebo jestliže R1 je zvolen halogenu, skupiny OH, OR dialkylamino, trialkylamino, ze souboru, zahrnujícího atom SH, amino, monoalkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát a fosfát a R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny OH, NH2, NR31 a SH nebo R1 a R2 spolu kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, cyklopropylový kruh nebo vytvářejí epoxidový kruh, sulfátový monoalkylfosfátový kruh, nebo R1 a R2 spolu vytvářejí druhou • 9 · · · • · ·
9 9
9 9 9 vazbu a R3 znamená nižší alkyl a R4 znamená atom vodíku a R5 znamená atom vodíku a R50 znamená atom vodíku a R11 znamená atom vodíku;
potom Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny Cj-Cn alkyl, C1-C12 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu a heteroaromatickou skupinu; nebo ze jestliže R je zvolen halogenu, skupiny OH, OR dialkylamino, trialkylamino, souboru, zahrnujícího atom SH, amino, monoalkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát a fosfát a R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny OH, NH2, NR31 a SH nebo R1 a R2 spolu vytvářejí epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh nebo monoalkylfosfátový kruh, nebo R1 a R2 spolu vytvářejí druhou vazbu a R3 znamená nižší alkyl a R4 znamená atom vodíku a R5 znamená atom vodíku a R ,50 znamená atom vodíku a Ru znamená atom vodíku; nebo R je zvolen ze souboru, zahrnujícího
a atom vodíku; a R11 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupinu OH, nižší alkylovou skupinu, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a fenyl;
potom Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny C1-C12 alkyl, C1-C12 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu, substituovanou heteroaromatickou skupinu a nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu; nebo • · jestliže R3 znamená nižší alkyl; R4 a R5 znamenají atom vodíku nebo R4 a R5 spolu dohromady vytvářejí dvojitou vazbu mezi C13 a Ci4; R6 skupinu znamená benzyl, hydroxybenzyl, alkoxybenzyl, halohydroxybenzyl, dihalohydroxybenzyl, halohydroxybenzyl, nebo dihalohydroxybenzyl; R7, R8, R9 a R10 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkylová skupina; a x a Y jsou nezávisle na sobě skupiny 0, NH nebo alkylamino; a Ar je skupina obecného vzorce Ar' a jeden z R54, R55, R56 je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl nebo atom halogenu; a R1 a R2 mohou spolu vytvářet epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh nebo monoalkylfosfátový kruh; nebo R1 a R2 mohou spolu vytvářet druhou vazbu mezi Ci8 a Ci9; nebo R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny OH a SH;
potom alespoň dva z R54, R55 a R56 musí být zvoleny ze souboru, zahrnujícího skupiny 0χ-06 alkyl, jednoduchou aromatickou skupinu, skupiny fenyl, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', CN, N02, atom halogenu, OR62 a SR63; nebo jestliže R3 znamená nižší alkyl; R4 a R5 znamenají atom vodíku nebo R4 a R5 spolu dohromady vytvářejí dvojitou vazbu mezi C13 a Ci4; Ré znamená heteroaromatický B-kruh, substituovanou heteroaromatickou skupinu, (Ci-C6) alkylový Bkruh, (C3-C8) cykloalkyl, substituovaný C3-C8 cykloalkyl, substituovaný (C^-Ce) alkyl, skupinu obecného vzorce III' ·· ·
- 16 - ·· ·· ·· · • · · · · · • · · · · · · · · • · · · · · ····«· • · · · · · · ·· · · · · · ·· ·· • · · · • · · · > · · · · · • · • · · ·
R’6
-2—
•R15
R” III·
a skupinu obecného vzorce III' '
5
—z- -O
\_lZ -r15
1 R17
a x a Y jsou nezávisle na sobě 0, NH nebo alkylamino;
potom Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího skupinu fenyl
nebo libovolnou jednoduchou nesubstituovanou nebo
substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu,
C1-C12 alkyl a C1-C12 alkinyl.
Předložený vynález se týká farmaceutických přípravků, způsobu rozrušení mikrotubulového systému použitím účinného množství sloučenin obecného vzorce I, způsobu inhibice proliferace savčích buněk, zahrnujícího podávání účinného množství sloučenin obecného vzorce I a způsobu léčení neoplasie u savce, zahrnující podávání účinného množství sloučeniny obecného vzorce I. Vynález se také týká způsobu zvládání mykotické infekce, zahrnující podávání zvířeti, které je infikováno nebo ohroženo infekcí houbou, •4 ·· 4 44 44 • «4 444 · 4 9 4 „ _ 4 4 444 4 444 4 44 4 — Ί / — «444444 444« 4 444 444
4444444 44 «4 44 4 44 44 antifungálně účinného množství sloučenin obecného vzorce I.
terč.-butyl, pentyl, skupiny
Jak je zde používán, výraz „jednoduchý alkyl znamená C1-C7 alkylovou skupinu, přičemž alkylová skupina může být nasycená, nenasycená a mít rozvětvený nebo přímý řetězec. Příklady zahrnují, aniž by tím byly jakýmkoliv způsobem omezeny, skupiny methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, nbutyl, propenyl, ethenyl, sek.-butyl, n-pentyl, isobutyl, sek.-butyl, methylované butylové skupiny, terč.-pentyl, sek.-pentyl, methylované pentylové a podobně. Výraz „alkenyl znamená alkylovou skupinu, jak byla definována výše, která má od jedné do tří dvojných vazeb. Výraz „alkinyl znamená alkylovou skupinu, jak byla definována výše, která má alespoň jednu trojnou vazbu. Obzvláště výhodné jsou alkinyly, které mají jedinou trojnou vazbu. Výraz Ci-Cn-alkyl; ve kterém n’ je celé číslo v rozmezí od 2 do 12 znamená alkylovou skupinu, která má od jednoho do uvedeného počtu uhlíkových atomů. Ci-Cn-alkyl může mít přímý nebo rozvětvený řetězec
Jak je zde používán, výraz „ (0χ-06) alkylový B-kruh znamená nasycený a nenasycený alkyl s rozvětveným a přímým řetězcem, ve kterém (Ci~C6) alkylový B-kruh může zahrnovat až tři (3) neuhlíkové substituenty. Takové neuhlíkové substituenty jsou nejvýhodněji zvoleny ze souboru, zahrnujícího OH, SCH2fenyl, NH2, CO, CONH2, CO2H, PO3H2, SO2R21, kde R21 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny C1-C3 alkyl.
Tak jak je zde používán, výraz „aminokyselina znamená organickou kyselinu, obsahující aminovou skupinu. Výraz zahrnuje jak přirozeně se vyskytující, tak i syntetické • > · • © • * aminokyseliny, a pronaminová skupina může, ale nemusí, být vázána k atomu uhlíku, sousedícímu s karboxy skupinu. Aminokyselinový substituent je vázán k základní molekule funkční skupinou organické kyseliny.
Jak je zde používán, výraz „uhlovodík znamená třídu substituentu skládajících se z uhlíku, vodíku a kyslíku, ve kterých počty atomů vodíku a atomů kyslíku jsou ve stejném poměru jako ve vodě nebo blízké tomuto poměru. Výraz „uhlovodík dále znamená aldehydový nebo ketonový alkohol nebo sloučeninu, která při hydrolýze dává aldehyd nebo keton. Výraz „uhlovodík je používán tak, jak je běžně chápán odborníkem v oboru. Výraz například znamená, aniž by tím byl jakýmkoli způsobem omezen, C12H22O11 a C6Hio05.
Jak je zde používán, výraz „aminovaný cukr znamená uhlovodíkovou skupinu, obsahující od jednoho do tří aminových substituentů v libovolné možné poloze na molekule uhlovodíku.
Jak je zde používán, výraz „sacharid znamená uhlovodíkovou podjednotku, která vytváří disacharidy nebo polysacharidy. Výraz znamená například, aniž by tím byl jakkoli omezen, laktózu, maltózu, sacharózu, fruktózu, škrob a podobně.
Jak je zde používán, výraz „substituovaný fenyl znamená fenylovou skupinu, obsahující od jednoho do tří nevodíkových substituentů, které mohu být nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího jednoduchou alkylovou skupinu a atomy chlóru, brómu, fluóru a jódu.
« · · >
• · · • · · · · η · · « · · · • · · · • 9 9 9 9
99999 9
Jak je zde používán, výraz „substituovaný benzyl znamená benzyl skupina, obsahující od jednoho do tří nevodíkových substituentů které mohu být nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího jednoduchou alkylovou skupinu a atomy chlóru, brómu, fluóru a jódu, přičemž tyto substituenty mohou být vázány na libovolný možný uhlíkový atom. Některé výhodné substituované benzyly již byly popsány. Jak je zde používán, výraz „alkoxybenzyl znamená benzylovou skupinu, nesoucí alkoxy substituent v libovolné možné poloze na benzylovém kruhu. Alkoxylová skupina je nejvýhodněji -) (C1-C3)alkyl. Obzvláště výhodná je skupina m. Stejně tak výraz „haloalkoxybenzyl znamená benzylovou skupinu, která má ještě halogenový substituent.
kromě alkoxy substituentu Každý atom halogenu nebo alkoxy libovolnému možnému atomu „halohydroxybenzyl znamená benzyl, skupina jsou vázány k uhlíku. Podobně substituovaný hydroxy skupinou, který také nese halogenový substituent, vázaný k libovolnému možnému atomu uhlíku na ---Nakonec výraz „dihaloalkoxybenzyT substituovaný alkoxy skupinou, který halogenové substituenty, které jsou nezávisle vázány k libovolnému možnému atomu uhlíku na benzylovém kruhu.
benzylovém kruhu, znamená benzyl, navíc nese dva
Jak je zde používán, výraz „heteroaromatický B-kruh znamená aromatické neuhlíkových zahrnuj ícího kruhy, které substituentů, atom kyslíku, obsahují jeden nebo více zvolených ze souboru, atom dusíku a atom síry.
Obzvláště výhodné heterocyklické B-kruhy jsou zvoleny, aniž by tím byly jakýmkoli způsobem omezeny, ze souboru, zahrnuj ícího:
• ·
kde R20 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci~C6 alkyl.
Obzvláště výhodné „heteroaromatické B-kruhy jsou substituenty, zvolené ze souboru, zahrnujícího:
• 0 • · «
- 21 • · 0 4 · 0 ♦ • · 0 « · · · 9 • 0 ·····« · · · ···
0 9 · · « · · · · «9 „Substituovaná aromatická skupina znamená skupinu substituovanou od jednoho do tří substituentů, zvolených ze souboru, zahrnujícího jednoduchou alkylovou skupinu a atom halogenu.
Jak je zde užíván, výraz „cykloalkyl znamená nasycenou C3-C8 cykloalkylovou skupinu, kde taková skupina může zahrnovat až tři substituenty, zvolené ze souboru, zahrnujícího C1-C3 alkyl, atom halogenu a OR22, kde substituent R22 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny C1-C3 alkyl. Takové substituenty mohou být vázány na libovolný možný uhlíkový atom. Obzvláště výhodně cykloalkyl znamená substituovaný nebo nesubstituovaný cyklohexyl.
Jak je zde užíván, výraz „nižší alkoxylová skupina znamená libovolnou alkylovou skupinu s jedním až pěti uhlíkovými atomy, vázanou k atomu kyslíku. Jak je zde užíván, výraz „nižší alkylová skupina znamená alkylovou skupinu s jedním až šesti atomy uhlíku a zahrnuje přímé a rozvětvené uhlovodíkové řetězce, zahrnující například, aniž by tím byly omezeny, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, terč.-butyl, sek.-butyl, methylované butylové skupiny, pentyl, terč.-pentyl, sek.-pentyl a methylované pentylové skupiny. Jak je zde používán, výraz „nenasycený nižší alkylová skupina a „nasycená nižší alkylová skupinu mají význam, který odborník obvykle spojuje s termíny nenasycený a nasycený. Výraz „nižší alkyl znamená jak nasycené, tak i nenasycené nižší alkylové skupiny. (Například nasycená skupina nemá žádné dvojné nebo trojné vazby). Jak je zde užíván, výraz „allylově substituovaný alken znamená libovolnou alkenovou skupinu, která má od dvou do sedmi uhlíkové atomy, která na sobě nese alkylový substituent.
Jak je zde užíván, výraz „epoxidový kruh” znamená tříčlenný kruh, jehož základna sestává ze dvou uhlíkových atomů a z atomu kyslíku. Jak je zde užíván, výraz, „aziridinový kruh znamená tříčlenný kruh, jehož základna sestává ze dvou uhlíkových atomů a z atomu dusíku. Jak je zde užíván, výraz „sulfidový kruh” znamená tříčlenný kruh, jehož základna sestává ze dvou uhlíkových atomů a z atomu síry. Jak je zde užíván, výraz „episulfidový kruh” znamená tříčlenný kruh, jehož základna sestává ze dvou uhlíků a z atomu síry. Jak je zde užíván, výraz „sulfátová skupina” znamená pětičlenný kruh, sestávající ze základny tvořené atomy uhlík-uhlíkkyslík-síra-kyslík se dvěma dodatečnými atomy kyslíku, vázanými k atomu síry. Jak je zde užíván, výraz, „monoalkylfosfátový kruh znamená pětičlenný kruh, sestávající ze základny tvořené atomy uhlík-uhlík-kyslíkfosfor-kysiík se dvěma dodatečnými atomy kyslíku, z nichž jeden nese nižší alkylovou skupinu, vázanou k atomu fosforu.
Jak je zde užíván, výraz, „jednoduchá nesubstituované aromatická skupina” znamená obvyklý systém aromatických kruhů, který má 4n+2 elektronů v monocyklickém nebo bicyklickém konjugovaném systému, například, aniž by tím byly omezeny: furyl, pyrrolyl, thienyl, pyridyl a podobně, nebo bicyklický konjugovaný systém, například, aniž by tím byly omezen, indolyl nebo naftyl.
Jak je zde užíván, výraz „jednoduchá substituovaná aromatická skupina znamená jednoduchý aromatický kruh, « v « · 4· · · * *·· · · · · · 4 9
9 9 9 9 4 · 9 9 « · · 4 • · · ··· ······ 999 99 9
9 9 9 9 9 9 9 9 • « 9 9 · 9 9 9 9 9 9 substituovaný jedinou skupinou, zvolenou ze souboru, zahrnujícího atom halogenu a nižší alkylovou skupinu.
Jak je zde užíván, výraz, „heteroaromatický znamená aromatické kruhy, které obsahují jeden nebo více neuhlíkových atomů zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry. Nejvýhodnější heteroaromatické kruhy mají od tří do osmi členů v kruhu. Obzvláště výhodná skupina heteroaromatických kruhů má od tří do šesti členů. Mimořádně výhodně má heteroaromatická skupina od jednoho do tří Pětičlenný kruh obsahující výhodných heteroaromatických neuhlíkových atomů v kruhu, atom kyslíku je jednou z skupin; výraz však není v žádném případě omezen jen na tuto skupinu.
Jak je zde užíván, výraz „heterocyklický znamená cyklické kruhy, které obsahují jeden nebo více neuhlíkových atomů, zvolených ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry. Heterocyklické kruhy mohou být nasycené nebo nenasycené. Heterocyklické kruhy mohou dále být navzájem kondenzovány a vytvářet bieyklický nebo tricyklický systém. Například, aniž by tím byly omezeny, mohou představovat pětičlenný kruh, který má dvě dvojné vazby nebo pětičlenný kruh, který má jednu dvojnou vazbu. Heterocyklické kruhy mohou být nesubstituované nebo mohou nést od jednoho do tří substituentů, zvolených ze souboru, zahrnujícího Ci~C6 alkyl, karbonyl, atom halogenu a OR62. Nejvýhodnější heterocyklické kruhy mají od tří do osmi členů v kruhu. Obzvláště výhodná skupina heterocyklických kruhů má od tří do šesti členů. Heterocyklická skupina má obzvláště výhodně od jednoho do tří neuhlíkových atomů. Jeden výhodný heterocyklický kruh je • 9
pětičlenný kruh, obsahující jeden atom dusíku, jeden atom síry, jeden methylový substituent a dvě dvojné vazby.
Výhodné heterocyklické skupiny zahrnují, aniž by tím byly omezeny:
„Substituovaná heteroaromatická skupina znamená skupinu substituovanou od jednoho do tří substituenty, zvolenými ze souboru zahrnující jednoduchou alkylovou skupinu a atom halogenu.
Jak je zde užíván, výraz, „atom halogenu nebo „halo představuje ty členy skupiny periodické tabulky prvků, které jsou historicky známy jako halogeny. Způsoby halogenace zahrnují, aniž by tím byly omezeny, adici halogenidů vodíku, substituce při vysoké teplotě , fotohalogenaci, a podobně a takové způsoby jsou známy odborníkům v oboru. Obzvláště výhodné halogeny zahrnují, aniž by tím byly jakýmkoliv způsobem omezeny, chlór, fluór a bróm.
Jak je zde používán, výraz „aryl má význam, pod kterým jej běžně chápe odborník. Výraz tedy znamená organický radikál, odvozený od aromatického uhlovodíku odebráním jednoho atomu vodíku. Například, aniž by tím byly omezeny, znamená fenyl, tolyl, salicyl a podobně.
• ·
4 » · • 4 4 · 4 • 4 4 4 « 4 4 4 • ♦ «4
Jak je zde používán, výraz „savec znamená třídu Mammalia vyšších obratlovců. Výraz „zvíře zahrnuje, aniž by tím byl omezen, savce, plazy, obojživelníky a ryby. Výraz „savec zahrnuje, aniž by tím byly omezen, člověka. Výraz „léčení, jak je zde užíván, zahrnuje profylaxi pojmenovaných stavů nebo zlepšení nebo odstranění stavu, pokud již k němu došlo. Kryptofycinové sloučeniny, nárokované v této přihlášce vynálezu, jsou použitelné pro použití ve veterinární medicíně stejně tak jako pro léčení člověka.
Pokud požadovaný substituent R6 v sloučenině obsahuje aminu, pak aminový substituent skupiny R6 musí být chráněn použitím aminové ochranné skupiny. Odborník může snadno zvolit vhodnou aminovou ochrannou skupinu s využitím standardní literatury, která zahrnuje například monografie „Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); a Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis,“Wiley (New York, 1981).
Jak je zde používán, výraz „derivátizace znamená standardní chemické transformace známé odborníkům, které umožní získat požadovanou sloučeninu podle předloženého vynálezu.
Způsoby přípravy, nárokované v této přihlášce vynálezu, podávaní způsoby plně syntetické přípravy kryptofycinových sloučenin. Je vhodné, aby na kryptofycinovou molekulu byly cyklizovány komerčně dostupné aminokyseliny.
Mnoho ze známých kryptofycinových sloučenin má slibný protinádorový účinek; špatná rozpustnost ve vodě však může ► »· • · • · · ·
přinášet problémy při intravenózním podávání léčiva. Takové problémy se vztahují k použití rozpouštěcího povrchově aktivního činidla, jako je Cremofor, které může mít vlastní toxicitu. Předložený vynález se týká nových kryptofycinových sloučenin, které mají protinádorový účinek a současně s tím vyšší rozpustnost ve vodě. Takové sloučeniny mají požadované vlastnosti, týkající se rozpustnosti a současně přijatelnou účinnost.
Způsoby přípravy sloučenin podle předloženého vynálezu jsou nejvýhodněji prováděny v přítomnosti rozpouštědla. Zručný odborník může zvolit vhodná rozpouštědla použitím standardních metodologií. Vhodná inertní organická rozpouštědla zahrnují ta, která jsou známa odborníkům, například, aniž by tím byly omezeny, tetrahydrofuran (THF) a dimethylformamid (DMF). DMF je obzvláště výhodný. Vodná rozpouštědla mohou být vhodná pro některé způsoby, používané podle předloženého vynálezu. pH takových vodných rozpouštědel může být požadovaným způsobem upraveno pro usnadnění přípravy.
Některé typické sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou popsány ve formě tabulky; takovýto seznam sloučenin však nemá za cíl omezit jakýmkoli způsobem rozsah předloženého vynálezu.
• » • · • » • · · • · ·
9 9 999
« · • ·
- 28 • ·
κα γλγ,ΝΗ«·Ι υ
γΑγΝΗ»·Ηα k^CC»« γΧ^ΝΗ»·ί
NHfHCI **CCfcH □
sA-^r1
CCkH
NHfHCI γΧγ NHfHCI
NHfHCI
NHfHO
NIN· HCI
Další výhodně sloučeniny jsou například, aniž by tím byly omezeny, sloučeniny, uvedené v Tabulce I, ve které jsou uvažovány polohy sousedních skupin Cl a OR. Například tytéž R substituenty jako uvedené výše, přičemž základní struktura je následující:
°fe«X • ·
Β Β
Β Β
- 29 • Β Β Β Β
Β ΒΒΒ Β Β Β Β
Β · Β Β Β Β Β Β Β β Β
Β Β · Β ΒΒΒΒΒΒ ΒΒΒ ΒΒΒ Β · · β Β Β Β
Β · · · · *· * ·
Další zajímavé sloučeniny jsou ty, které jsou uvedeny v Tabulce I; avšak Ar představuje Ar' namísto fenylové skupiny a R54 znamená OCH3 v para poloze Ar', zatímco R55 a R56 znamenají každý atom vodíku .
Další zajímavé sloučeniny jsou stejné, jako je uvedeno v Tabulce I; NH skupina však nahrazuje 0 v poloze Y molekuly. Například jedna sloučenina v tomto souboru je:
Další výhodné sloučeniny jsou například, aniž by tím byly omezeny, sloučeniny uvedené výše v Tabulce I stejně tak jako sloučeniny uvedené v sousedních substřtuentech Cl a OR; kde každá uvedená sloučenina má jedinou methylovou skupinu namísto gem dimethylové skupiny v poloze 6 kryptofycinového kruhu. Viz například 23 uvedená níže.
Obzvláště výhodné sloučeniny podle předloženého vynálezu mají dimethylovou skupinu v poloze 6 kryptofycinového kruhu.
Výhodná sloučenina podle předloženého vynálezu je uvedena v Tabulce I, kde Ar představuje Ar'; pouze jeden ze substituentů R54, R55, R56 je OCH3; R9 a R10 znamenají oba methyl.
9 9 9 · · • · · · • ···· » 9 9 9 · 9 9 · • ·· 9 9 9 99999« 9 9 9 9 9 9 • •»«•99 · · •9 99 99 · 99 99
Ve způsobech výroby sloučenin podle předloženého vynálezu jsou používány obecně známá silylační činidla. Viz například Calvin, E.W., „Silicon Reagents in Organic Synthesis, Academie Press, (London, 1988). Obzvláště užitečná silylační činidla zahrnují skupiny „tri(nižší alkyl)silyl, což je výraz, který zahrnuje triisopropylsilyl, trimethylysilyl a triethylsilyl, trimethylsilyl halogenidy, silylované močoviny jako je bis(trimethylsilyl)močovina (BSU) a silylované amidy jako je N,O-bis(trimethylsilyl)acetamid (BSA). Z těchto činidel je preferováno BSA.
Některé výhodné charakteristiky předloženého vynálezu jsou uvedeny v následujícím seznamu, kde možnosti mohou být nezávisle zvoleny pro určení výhodného provedení předloženého vynálezu. Předložený vynález však není jakýmkoli způsobem omezen následujícími příklady:
A) R8 znamená ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl nebo isopentyl;
B) R7 znamená ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl,
pentyl, nebo isopentyl;
C) R7 znamená atom vodíku, R8 znamená methyl, R3 znamená
methyl a x a Y nejsou oba 0;
D) R3 znamená ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl,
pentyl nebo isopentyl;
E) R9 znamená methyl, ethyl, propyl, butyl, isobutyl,
pentyl, nebo isopentyl;
F) R10 znamená methyl, ethyl, propyl, butyl, isobutyl,
pentyl, nebo isopentyl;
G) kryptofycinové sloučenina, ve které alespoň jedna ze
skupin, zvolených ze souboru, zahrnujícího C-3, C- 6, C-7, • · • · • · ··· · · · · · · · • · · · · · · · · · ·· · • · · · · · · ···· · ··· ···
C-10, C-16, C-17 a C-18 má R stereochemickou konfiguraci (přičemž je použito číslování podané v obecném vzorci I uvedeném výše);
H) kryptofycinová sloučenina, ve které alespoň jedna ze skupin, zvolených ze souboru, zahrnujícího C-3, C- 6, C-7,
C-10, C-16, C-17 a C-18 má S stereochemickou konfiguraci (přičemž je použito číslování podané v obecném vzorci I uvedeném výše);
I) Ar' znamená fenyl se substituentem, zvoleným ze souboru, zahrnujícího NR59R60, NHOR61 a NHCHR61 ;
J) sloučenina, ve které Y je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkylamino, NH a 0;
K) sloučenina, ve které Y znamená 0, R7 a R10 znamenají atom vodíku; R9 znamená nižší alkyl; a R1 znamená halo;
L) R7, R8 znamenají každý methyl;
M) R7 znamená atom vodíku;
N) R2 znamená glycinát;
O) R2 znamená acylát;
P) R1 a R2 vytvářejí epoxidový kruh;
Q) R6 je zvolen ze souboru, zahrnujícího benzyl, hydroxybenzyl, alkoxybenzyl, halohydroxybenzyl, dihalohydroxybenzyl, halohydroxybenzyl a dihalohydroxybenzyl;
R) R4 a R5 vytvářejí dvojnou vazbu;
S) n se rovná 0; R6 je substituovaný benzyl, jehož jeden substituent je atom halogenu a ne je skupina OR12, kde R12 je nižší alkyl;
T) sloučenina obecného vzorce I je použita pro rozrušení mikrotubulového systému;
U) sloučenina obecného antineoplastické činidlo;
vzorce
I je použita jako • · • · · · • · · · · · · · · · ·· · < · · · · · · ···· · ··· ··· ······♦ · · ·· ·· ·· · · · · ·
V) sloučenina obecného vzorce I je použita pro léčení rakoviny u savce;
W) sloučenina obecného vzorce I je použita jako antifungální činidlo;
X) R6 má obecný vzorec III' a je hydroxy substituovaný v poloze para;
R6 je zvolen ze souboru, zahrnujícího
Z) Z znamená -(CH2)n - z kde n se rovná 0;
AA) Z znamená -(CH2)n - , kde n se rovná 2;
BB) Z znamená -(CH2)n - t kde n se rovná 1;
CC) alespoň jeden ze substituentů R15, R16 a R17 je zvolen ze souboru, zahrnujícího SCH2fenyl, NH2, CO, CONH2, CO2H, PO3H2 a SO2R21; kde R21 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci-C3 alkyl;
DD) Ar znamená fenyl;
EE) Ar znamená fenyl substituovaný jedním nebo dvěma substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího skupiny OH, OCH3, atom halogenu a methyl;
FF) R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát, OR31R32 a SR31R32
GG) R má Z, ve kterém první uhlíkový atom skupiny Z je • · • · • · · · • · · · · ·
vzhledem k místu vazby ke kryptofycinové molekule;
sloučenina obecného vzorce I je použita pro léčení fungální infekce;
II) R50 znamená
JJ) R11 znamená atom vodíku;
KK) R4 a R5 znamenají každý atom vodíku;
LL) Ar znamená fenyl, substituovaný ethylem v poloze para; MM) Ar znamená fenyl, substituovaný methylem v poloze para; NN) Y znamená NH;
00) R3 znamená methyl;
PP) R6 je zvolen ze souboru, zahrnujícího:
• ·
Předložený vynález se týká způsobu ulehčení patologického stavu, způsobeného hyperproliferací savčí buňky, zahrnující podávání subjektu účinného množství farmaceutické nebo veterinární komposice, popsané v předložené přihlášce vynálezu, pro inhibici proliferace buněk. Ve výhodném provedení předloženého vynálezu tento způsob dále zahrnuje podávání subjektu alespoň jedné další terapie, zaměřené na zmírnění patologického stavu. Ve výhodném provedení předloženého vynálezu je patologický stav charakterizován tvorbou neoplasmů.
V dalším výhodném provedení předloženého vynálezu patří neoplasmus do souboru, zahrnujícího neoplasmus prsní žlázy, plic, trakčníku, leukémii, melanom, pankreatický adenokarcinom, neoplasmus centrálního nervového systému (CNS), vaječníků, prostaty, sarkom měkké tkáně nebo kosti, hlavy a krku, gastrický neoplasmus, zahrnující neoplasmus slinivky břišní a jícnu, žaludku, kostní dřeně, měchýře, neoplasmus renální, neuroendokrinní, který zahrnuje štítnou • · žlázu a ne-Hodgkinsovu nemoc a Hodgkinsovu nemoc.
Jak je zde užíván, výraz „neoplastický znamená neoplasmus, který má abnormální růst, jako je růst, ke kterému dochází v důsledku proliferace buněk, které nejsou vystaveny obvyklým omezením růstu. Jak je zde užíván, výraz, „anti-neoplastické činidlo je jakákoli sloučenina, kompozice, směs, příměs nebo soubor, který inhibuje, odstraňuje, zpomaluje nebo reverzuje neoplastický fenotyp buňky.
Antimitotická činidla mohou být rozdělena do tří skupin na základě jejich molekulárního mechanismu působení. První skupina sestává z činidel, zahrnujících kolchicin a kolcemid, které inhibují vytváření mikrotubulů sekvestrací tubulinu. Druhá skupina sestává z činidel, zahrnujících vinblastin a vinkristin, které indukují vytváření parakrystalických agregátů na tubulinu.
Vinblastin a vinkristin jsou dobře známá protirakovinná léčiva: jimi způsobované rozrušení mitotického vřeténka mikrotubulů především inhibuje hyperproliferativní buňky. Třetí skupina činidel, zahrnující taxol, podporuje polymeraci tubulinu a tím stabilizuje mikrotubuly.
Existence fenotypu lékové resistence a vícenásobné lékové resistence mnoha nádorových buněk a klinicky dokázaný způsob působení antimikrotubulových činidel proti neoplastickým buňkám si vynucuje vyvinutí antimikrotubulových cytotoxických činidel proti neoplastickým buňkám bez lékové resistence stejně tak jako cytotoxických činidel proti neoplastickým buňkám s fenotypem lékové resistence.
» ·· • ·
0 0 0 • 9 9 • 0
- 37 dosažení úplné destrukce kombinace chemoterapie, neoplastické chemoterapie
Chemoterapie, chirurgie, radiační terapie, terapie modifikátory biologické odezvy a imunoterapie jsou v současné době používány pro léčbu rakoviny. Každý způsob terapie má specifické indikace, které jsou známé osobám, seznámeným na obvyklé úrovni s oborem a jedna nebo všechny mohou být používány pro buňky. Navíc používající sloučeniny obecného vzorce I v kombinaci s dalšími neoplastickými činidly, spadá také do rozsahu předmětu předloženého vynálezu, neboť kombinovaná terapie je obecně účinnější než použití jediného antineoplastického činidla. Další předmět předloženého vynálezu se tedy týká kompozic, obsahujících terapeuticky účinného množství alespoň jedné sloučeniny obecného vzorce I, v to počítaje jejich netoxické adiční soli, které slouží k poskytnutí výše uvedeného příznivého účinku. Takové kompozice také mohou být podávány spolu s fyziologicky přijatelnou kapalinou, gelem nebo pevným nosičem, ředidlem, adjuvans a excipientem. Takové nosiče, adjuvans a excipienty mohou být nalezeny v publikaci U.S. Farmacopoeia, Vol. XXII a National Formulary vol. XVII, U.S. Farmacopoeia Convention, lne., Rockville, MD (1989). Další způsoby léčby lze nalézt v AHFS Drug Information, 1993e. v American Hospital Formulary Service, str. 522-660. Každá z těchto referencí je dobře známa a snadno dostupná odborníkovi.
Předložený vynález se dále týká farmaceutické kompozice, používané pro léčení neoplastického onemocnění, obsahující alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I a alespoň jedno dodatečné antineoplastické činidlo. Antineoplastická činidla, která mohou být použita v kombinaci se sloučeninami obecného vzorce I zahrnují ta, která je možno nalézt v Merckově Indexu 11, str. 16-17, Merck & Co., Inc. (1989). Merck Index je obecně uznáván a snadno dostupný odborníkovi v oboru.
V dalším provedení předloženého vynálezu mohou být antineoplastická činidla antimetabolity, které mohou být zvoleny, aniž by tím byly jakkoli omezeny, ze souboru, zahrnujícího methotrexát, 5-fluoruracil, 6-merkaptopurin, cytosin, arabinosid, hydroxymočovinu a 2-chlordeoxyadenosin.
V jiném provedení předloženého vynálezu jsou uvažovaná antineoplastická činidla alkylační činidla, které mohou být zvoleny, aniž by tím byly jakkoli omezeny, ze souboru, zahrnujícího cyklofosfamid, mefalan, busulfan, paraplatin, chlorambucil a bis(2-chloralkyl)aminy. V dalším provedení vynálezu jsou uvažovaná antineoplastická činidla rostlinné alkaloidy, které mohou být zvoleny, aniž by tím byly jakkoli omezeny, ze souboru, zahrnujícího vinkristin, vinblastin, taxol a etoposid. V dalším provedení jsou uvažovaná antineoplastická antibiotika, které mohou být zvoleny, aniž by tím byly jakkoli omezeny, ze souboru, zahrnujícího doxorubicin, daunorubicin, mitomycin C a bleomycin. V dalším provedení jsou uvažovaná antineoplastická činidla hormony, které mohou být zvoleny, aniž by tím byly jakkoli omezeny, ze souboru, zahrnujícího kalusteron, diomostavolon, propionát, epitiostanol, mepitiostan, testolakton, tamoxifen, polyestradiolfosfát, megesterolacetát, flutamid, nilutamid a trilotan.
V dalším provedení uvažovaná antineoplastická činidla
0 0
00000 0 ·· • 0 0
0 00·
0 0
0 0 • · 0 · · 0
0
00 zahrnují enzymy, které mohou být zvoleny, aniž by tím byly jakkoli omezeny, ze souboru, zahrnujícího L-asparginázové a aminoakridinové deriváty jako je, aniž by tím byly omezeny, amsakrin. Další antineoplastická činidla zahrnují ta, která lze nalézt v Skeel, Roland T., „Antineoplastic Drugs and Biologie Response Modifier: Classification, Use and Toxicity of Clinically Useful Agents: Handbook of Cancer Chemoterapie (3rd ed.), Little Brown & Co. (1991).
Tyto sloučeniny a kompozice mohou být podávány savcům pro veterinární použití. Domácí zvířata mohou například být léčena velice podobným způsobem jako lidský klinický pacient. Obecně dávka požadovaná pro terapeutický účinek závisí na druhu použití způsobu podávání stejně tak jako na konkrétních požadavcích individuálních příjemců. Typicky jsou používané dávky v rozmezí od 0,001 do 1000 mg/kg a obvykleji od 0,01 do 10 mg/kg tělesné hmotnosti příjemce. Alternativně mohou být dávky v tomto rozmezí podávány stálou infúzí po delší časový interval, který obvykle přesahuje 24 hodin, dokud není dosaženo požadovaného terapeutického účinku. Dávka léčiva stejně tak jako způsob podávání musí být zvolen na základě relativní účinnosti, relativní toxicity, růstových charakteristik nádoru a účinku sloučeniny obecného vzorce I na buněčný cyklus, farmakokinetiku léčiva, věk, pohlaví, fyzický stav pacienta a předchozí léčení, což vše může být určeno odborníkem.
Sloučenina obecného vzorce I, s nebo bez dodatečných antineoplastic činidla, mohou být vytvářeny jako terapeutické kompozice v základní formě nebo formě soli. Farmaceuticky přijatelné netoxické soli zahrnují zásadité adiční soli, • β ·· e které mohou být odvozeny od anorganických bází, jako jsou například hydroxidy sodné, draselné, amonné, vápenaté nebo železité a takové organické báze, jako je isopropylamin, trimethylamin, 2-ethylaminoethanol, histidin, prokain a podobně. Takové soli mohou být také vytvořeny jako kyselé adiční soli s libovolnými volnými kationickými skupinami a budou obecně vytvářeny s anorganickými kyselinami jako je například kyselina chlorovodíková nebo kyselina fosforečná nebo organické kyseliny, jako je kyselina octová, oxalová, vinná, mandlová a podobně. Dodatečné excipienty může odborník nalézt například v U.S. Pharmacopoeia.
Vhodnost konkrétního nosiče pro použití v dané terapeutické kompozici závisí na výhodném způsobu podávání. Antineoplastické kompozice mohou být například upraveny pro orální podávání. Takové kompozice jsou typicky připravovány jako kapalné roztoky nebo suspenze nebo v pevné formě. Orální přípravky obvykle zahrnují taková aditiva jako jsou vazebná činidla, plnidla, nosiče, konzervační činidla, stabilizační činidla, emulsifikátory, pufry, manitol, laktózu, škrob, stearan hořečnatý, sodný sacharin, celulózu, uhličitan hořečnatý a podobně. Tyto kompozice mohou být připraveny ve formě roztoků, suspenzí, tablet, pilulek, kapslí, přípravků s trvalým uvolňováním nebo prášků a typicky obsahují 1% až 95% účinné složky. Výhodněji kompozice obsahují od asi 2% do asi 70% účinné složky.
Kompozice podle předloženého vynálezu mohou být připraveny jako injektovatelné, buď jako kapalné roztoky, suspenze nebo emulze nebo v pevné formě, vhodné pro vytvoření roztoku nebo suspenze v kapalině před injekcí. Takové injektovatelné
Λ · • · kompozice mohu být podávány subkutánně, intravenózně, intraperitoneálně, intramuskulárně, intratekálně, nebo intrapleurálně. Účinná složka nebo ingredienty jsou často míchány s ředidly, nosiči nebo excipienty, které jsou fyziologicky přijatelné a slučitelné s účinnou složkou nebo složkami. Vhodná ředidla a excipienty jsou například voda, fyziologický roztok, dextróza, glycerol a podobně a jejich kombinace. Kromě toho, jestliže je to požadováno, kompozice mohou obsahovat minoritní množství pomocných látek jako jsou smáčedla nebo emulgátory stabilizační činidla a činidla pufrující pH.
Vynález se dále týká způsobu použití sloučenin obecného vzorce I pro inhibici proliferace savčích buněk kontaktem těchto buněk se sloučeninou obecného vzorce I v množství dostatečném pro inhibici proliferace savčích buněk. Výhodné provedení je způsob inhibice proliferace hyperproliferativních savčích buněk. Pro tyto účely podle předloženého vynálezu výraz „hyperproliferativní savčí buňky znamená savčí buňky které nejsou vystaveny charakteristickým omezením růstu (například programovaná smrt buněk). Další výhodné provedení spočívá v tom, že savčí buňky jsou lidské buňky. Vynález se dále týká uvedení savčích buněk do kontaktu s alespoň jednou sloučeninou obecného vzorce I a alespoň jedním antineoplastickým činidlem. Typy uvažovaných antineoplastických činidel byly diskutovány výše.
Vynález se dále týká způsobů použití sloučenin obecného vzorce I pro inhibici proliferace hyperproliferativní buňky, která má fenotypy resistence proti léčivům, v to počítaje • · · 9 9 9 • 9 999 9 9 9 9 • · · · 9 · 9 9 · · • · · · · 9 9 · * 9 9 · buňky s fenotypy vícenásobné resistence proti léčivům, uvedením uvedené buňky do kontaktu se sloučeninou obecného vzorce I v množství dostatečném pro inhibici proliferace hyperproliferativní savčí buňky. Výhodné provedení spočívá v tom, že savčí buňky jsou lidské buňky. Vynález se dále týká uvedení buňky do kontaktu se sloučeninou obecného vzorce I a alespoň jednoho dalšího antineoplastického činidla, jak byly diskutovány výše.
Vynález se způsobených neoplasií, farmaceutické účinného sloučeninu množství obecného týká způsob úlevy patologických stavů, hyperproliferací savčí buňky, například podáváním subjektu kompozice, obsahující vzorce I pro inhibici proliferace hyperproliferativní buňky. Jak je zde užíván, výraz „patologický stav znamená jakoukoli patologii, která vzniká proliferací savčích buněk, které nejsou vystaveny normálním omezením růstu. Taková proliferace buněk může být způsobena neoplasmy, jak byly diskutovány výše.
V dalším výhodném provedení jsou neoplastické buňky lidské buňky. Předložený vynález se týká způsobů úlevy takových patologických stavů použitím sloučeniny obecného vzorce I v kombinaci s dalšími terapiemi, stejně tak jako s dalšími antineoplastickými činidly.
Účinnost nárokovaných sloučenin může být určena použitím standardních metod známých odborníkům.
Příklady takových metod jsou následující:
• 4
• · 4 · 4 «
4 • 4 4 4 4 • · ·
4 4
4 4 4 ·' • 4
444 444
Bylo zjištěno, že sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou použitelné proti patogenním houbám. Například použitelnost pro léčení Cryptococcus neoformans může být ilustrováno pomocí výsledků testů proti Cryptococcus neoformans, které využívají kvasinkové dusíkaté dextrozověagarové medium. Při provádění tohoto testu se sloučenina podle předloženého vynálezu rozpustí v dimethylsulfoxidu s přídavkem Tween 20. Provede se dvojnásobné zředění sterilní destilovanou vodou/10 procentním DMSO pro získání konečné koncentrace léku na agarových testovacích deskách v rozmezí od 0,008 μg/ ml až 16,0 gg/ ml proti expandovanému panelu 84 kmenů Cryptococcus neoformans. Určí se minimální inhibiční koncentrace proti panelu 84 Cryptococcus neoformans, čímž se ilustruje požadovaný antifungální účinek.
Sloučeniny byly tříděny vzhledem k minimálním inhibičním koncentracím proti KB, lidským nasofaryngeálním nádorovým buněčným liniím, LoVo, lidským kolorektálním adenokarcinomovým buněčným liniím pomocí Corbettova testu, viz Corbett, T.H. a kol. Cytotoxic Anticancer Drugs: Models and Concepts for Drug Discovery and Development, str. 35-87, Kluwer Academie Publishers: Norwell, 1992, viz také, Valeriote, a kol. Discovery and Development of Anticancer Agents; Kluwer Academie Publisher, Norwell, 1993, který byl použit pro hodnocení sloučeniny.
Nejúčinnější sloučeniny byly dále hodnoceny vzhledem k jejich cytotoxicitě proti čtyřem různým druhům buněk, například myší leukémii, myšímu pevnému nádoru, lidskému pevnému nádoru a nízkomalignímu fibroblastu použitím • · • » • · • · · · · · · Β · · • · · · · · ··· Β Β · Β
Λ _ · · Β · β · ··♦··· ······ ·····« Β ··
Β · Β Β ·· Β Β · ··
Corbettova testu.
Sloučeniny byly dále hodnoceny vzhledem k širokému spektru myších a lidských nádorů implantovaných myši, v to počítaje lékově resistentní nádory.
Pro další hodnocení byl používán nádorové zatížení (T/C) (střední nádorové zatížení u ošetřených zvířat versus střední nádorové zatížení u neošetřených zvířat). T/C hodnoty, které byly menší než 42% byly považovány za účinné podle standardů National Cancer Institute; sloučeniny s T/C hodnotami menšími než 10% byly považovány za látky s vynikající účinností a potenciálním klinickým účinkem podle standardů National Cancer Institute.
Materiál
Vinblastin, cytochalasin B, tetramethylrhodamin isothiokyanát (TRITC)-falloidin, sulforhodamin B (SRB) a protilátky proti β-tubulinu a vimentinu jsou komerčně dostupné od uznávaných komerčních obchodních společností. Bazální Eagleovo médium obsahující Earleovy soli (BME) a fetální hovězí sérum (FBS) jsou také komerčně dostupné.
Buněčné linie
Buněčná leukemická linie Jurkat T a A-10 krysí buňky hladkého svalstva aorty byly získány od American Type Culture Collection a kultivovány v BME obsahujícím 10% FBS a 50gg/ ml gentamycinsulfátu. Lidské vaječníkové karcinomové buňky (SKOV3) a sub-linie, která byla selektována na • 9 ·
resistenci na vinblastin (SKVLB1) byly laskavý dar Dr. Victora Linga z Ontario Cancer Institute. Obě buněčné linie byly udržovány v BME obsahujícím 10% FBS a 50 gg/ ml gentamycinsulfát. Vinblastin byl přidán v konečné koncentraci 1 gg/ml k SKVLB1 buňkám 24 hodin po průchodu pro udržování selekčního tlaku na buňky se zvýšenou expresí Pglykoproteinu.
Testy buněčné proliferace a pozastaveni cyklu
Testy buněčné proliferace byly prováděny způsobem, který popsal Skehan a kol. Pro Jurkat buňky byly kultury zpracovány indikovanými léky, jak popsal Skehan a celkový počet buněk byl určován počítáním buněk v hemacytometru. Procento buněk ve stádiu mitózy bylo určeno obarvením 0,4% Giemsa v PBS a následným promýváním PBS. V každém zpracování bylo alespoň 1000 buněk zkoumáno na přítomnost mitotických vzorů a mitotický index byl vypočten jaJco_ poměr buněk s mitotickými vzory k celkovému počtu zkoumaných buněk.
Imunofluorescenční testy
A-10 buňky byly kultivovány až do takřka úplného splynutí na skleněném krycím sklíčku v BME/10% FBS. Do uvedených konečných koncentrací byly přidány sloučeniny v PBS a buňky byly inkubovány po dalších 24 hodin. Pro obarvení mikrotubulů a intermediálních filament byly buňky fixovány studeným methanolem a inkubovány s PBS obsahujícím 10% telecí sérum pro zablokování nespecifických vazebných míst. Buňky byly potom inkubovány při teplotě 37 °C po 60 minut. Buď s monoklonálním anti-p-tubulinem nebo s monoklonálním • ·
- 46 4 ·
4 4 • · 4 · · · · ·
4 4 4 • · 4 · ·« · ·· ·· • · · · * · β
Λ · · · 4 · · · « ······ · · · · · 4 • · · · · • · 4 · · · · antivimentinem ve zředění doporučeném výrobcem. Vázané primární protilátky byly následně vizualizovány 45 minutovou inkubací s králičím protimyším IgG konjugovaným s fluoresceinem. Krycí sklíčka byla připevněna na podložní mikroskopová sklíčka a byly zkoumány fluorescenční vzory, které byly fotografovány za použití Zeissova fotomikroskopu 111, vybaveného epifluorescenční optikou pro fluorescein. Pro označení mikrofilament byly buňky fixovány 3% paraformaldehydem, napouštěny 0,2% Tritonem X-100 a chemicky redukovány borhydridem sodným (1 mg/ ml) . Potom byl přidán lOOnM TRITC-faloidin, obsahující PBS, a směs byla ponechána inkubovat po dobu 45 minut při teplotě 37 °C. Buňky byly rychle promývány PBS před připevněním krycích sklíček a okamžitě fotografovány výše uvedeným způsobem.
Účinky kryptofycinů a vinblastinu na proliferaci a buněčný cyklus Jurkatových buněk
Byly určeny křivky závislosti odezvy na dávce při působení kryptofycinovými sloučeninami a vinblastinem na buněčnou proliferaci a procento buněk v mitóze.
Účinek cytochalasinu B, vinblastinu a kryptofycinů na cytoskeleton
Buňky hladkého svalstva aorty (A-10) byly pěstovány na skleněných krycích sklíčcích cytochalasinem B, lOOnM kryptofycinovými mikrotubuly a a ošetřeny PBS, vinblastinem nebo sloučeninami, vimentinové
Po hodinách intermediální μΜ
ΙΟηΜ byly filamenta vizualizovány nepřímou imunofluorescencí a mikrofilamenta • 0 • *
- 47 • · · · 0 0 · ···· · · · · « 0 0 0 0 0 « ··· · · 0 * « 0 · · •0 » ♦* ♦· byla obarvena použitím TRITC-faloidinu. Byl určen morfologický účinek každého z léků. Neošetřené buňky vykazovaly extenzivní mikrotubulovou síť protkanou perinukleárními mikrotubuly organizujícími centry. Vimentinová intermediální filamenta byla také nepravidelně distribuována v cytoplasmě, zatímco svazky mikrofilament byly koncentrovány podél hlavní osy buňky. Cytochalasin B způsobil kompletní depolymeraci mikrofilament spolu s akumulací parakrystalických zbytků. Tato sloučenina neměla účinek ani na rozdělení mikrotubulů ani intermediálních filament. U kryptofycinem ošetřených mikrotubulů a vimentinových intermediálních filament bylo pozorováno ochuzení mikrotubulů a rozpad vimentinových intermediálních filament.
z V»
Účinek kryptofycinu a vinblastinu na taxolem stabilizované mikrotubuly
Na A-10 buňky bylo po 3 hodiny působeno 0 nebo 10 μΜ taxolu před přidáním PBS, 100 nM vinblastinu nebo 10 nM kryptofycinové sloučeniny. Po 24 hodinách byla organizace mikrotubulů zkoumána imunofluorescencí jak bylo popsáno výše. Ve srovnání s kontrolními buňkami byly mikrotubuly v taxolem ošetřených buňkách extenzivně svázány, obzvláště v polárních oblastech buňky. Stejně jako výše vinblastin způsobil úplnou depolymeraci mikrotubulů v buňkách, které nebyly předem ošetřeny. Na druhé straně předběžné ošetření taxolem zabránilo mikrotubulové depolymeraci jako odezvě na vinblastin. Stejně tak byly mikrotubuly předem ošetřené taxolem pozorovány při ošetření kryptofycinem.
• · · · » · ·
I · · · ·
- 48 Reverzibilita mikrotubulové depolymerace vinblastinem a kryptofycinem
Na A-10 buňky bylo působeno buď 100 nM vinblastinem nebo 10 nM kryptofycinem po 24 hodin, což vedlo k úplné mikrotubulové depolymeraci. Buňky byly potom promývány a inkubovány v médiu bez léků po dobu 1 hodiny nebo 24 hodin. Mikrotubuly rychle repolymerizovaly po odstranění vykazujíce významné množství mikrotubulů po hodiny a úplné morfologické zotavení po 24
Mikrotubulový stav buněk byl zviditelněn po kryptofycinovou sloučeninou podle předloženého buď 1 hodinu nebo 24 hodin po odstranění vinblastinu, uplynutí 1 hodinách. ošetření vynálezu kryptofycinové sloučeniny.
Účinky kombinaci vinblastinu a kryptofycinů na buněčnou proliferaci
Na SKOV3 buňky bylo působeno kombinací kryptofycinů a vinblastinu po dobu 48 hodin. Bylo určeno procento přežívajících buněk a byla vypočtena hodnota IC50 pro každou kombinaci.
Toxicita kryptofycinů, vinblastinu a taxolu vzhledem k buňkám SKOV3 a SKVLBl
SKVLBl buňky jsou resistentní vůči přirozeně produkovaným protirakovinným léčivům v důsledku jejich zvýšené exprese Pglykoproteinů. Byla pozorována schopnost taxolu, vinblastinu a kryptofycinových sloučenin inhibovat růst buněk SKOV3 a SKVLBl. Taxol způsobuje dávkově závislou inhibici ·· ·
4 · · · 4 »44 4 4 4 · • 4 4 4 4 4 444 4 44 4 proliferace obou buněčných linií s IC50 pro SKOV3 a SKVLB1 buňky o hodnotě 1 respektive 8000 nM. Vinblastin také inhibuje růst obou buněčných linií s IC50 o hodnotě 0,35 a 4200 nM pro SKOV3 respektive SKVLB1 buňky. Kryptofycinové sloučeniny podle předloženého vynálezu prokázaly aktivitu s IC5o od asi 1 do asi 1000 μΜ pro SKOV3 a SKVLB1 buňky.
Bylo tedy prokázáno, že předložený vynález přináší nové kryptofycinové sloučeniny, které jsou účinné inhibitory buněčné proliferace, působící rozpad mikrotubulové sítě a inhibici mitózy. Tyto studie ilustrují, že kryptofycinové sloučeniny rozvrací mikrotubulovou organizaci a tudíž normální buněčné funkce, v to počítaje mitózu.
Klasická antimikrotubulová činidla jako jsou alkaloidy kolchicin a Vinca, pozastavují buněčný cykl v mitóze. Zdá se být vhodné porovnat účinek jednoho z těchto činidel na buněčnou proliferaci s kryptofycinovými sloučeninami. S tímto cílem byl zvolen Vinca alkaloid vinblastin jako reprezentant klasických antimikrotubulových látek. Na základě toho byl porovnáván účinek kryptofycinových sloučenin a vinblastinu proliferaci a postup buněčného cyklu u Jurkatovy T-buněčné leukemické linie.
Jelikož antimitotické účinky jsou běžně zprostředkovány rozrušením mikrotubulů v mitotických vřeténcích, účinek kryptofycinových sloučenin na cytoskeletální struktury byl charakterizován fluorescenční mikroskopií. Imunofluorescenční označení buněk ošetřených buď kryptofycinovou sloučeninou nebo vinblastinem prokázalo, že obě sloučeniny způsobují úplnou ztrátu mikrotubulů. Podobné • · • · · · ··· 9 9 9 9
9 999 9 9 9 9 9 ·· · • 9 9 9 9 9 9 9999 9 999 999
9 9 9 9 9 9 © · • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 studie s SKOV3 buňkami mohou ukázat, že antimikrotubulové účinky kryptofycinových sloučenin nejsou vyhrazeny buněčným liniím hladkého svalstva.
Třídění GC3 lidského karcinomu trakčníku
Zvolené jamky na 96 jamkové destičce byly naočkovány GC3 buňkami lidského karcinomu trakčníku (1x10 buněk v 100 μΐ testovacího média/jamku) dvacet čtyři hodin před přidáním testované sloučeniny. Do ostatních zvolených jamek na 96 jamkové destičce bylo přidáno testovací médium prosté buněk. Testovací médium (RPMI-1640 bylo použité médium; nicméně přijatelné by bylo jakékoli médium, které by umožnilo buňkám přežít) bylo doplněno 10% dialyzovaným fetálním hovězím sérem a 25 mM pufru HEPES.
Testovaná sloučenina byla uchovávána před testováním v hnědé lahvi. Čerstvý zásobní roztok dimethylsulfoxidu (200 μο/ ml) byl připraven těsně před přípravou testovacích vzorků ředěním ve fosforečnanem pufrovaném fyziologickém roztoku (PBS) . Zředěný 1:20 dimethylsulfoxidový roztok v PBS byl připraven tak, že konečná koncentrace byla 10 μg/ ml. Byla připravena postupná 1:3 zředění použitím PBS (0,5 ml předchozího vzorku v 1 ml PBS) . Pro test byly používány zkumavky Falcon 2054. 10 μί vzorek každého ředění testované sloučeniny byl přidán trojmo do jamek na GC3 destičkách. Destičky byly inkubovány po 72 hodin při teplotě asi 37 °C. Do každé jamky byl přidán 10 μΐ vzorek zásobní 3-[4,5dimethyl-2-yl]-2,5-difenyltetrazolium bromidové soli („MTT 5 mg/ ml v PBS) . Destičky byly inkubovány po dobu zhruba • · • · · · · · ··· · ·· · • ·· · · · ······ ··· ··· ······· · · • · ·· · · · · · · · jedné hodiny při teplotě 37 °C. Destičky byly centrifugovány, médium bylo dekantováno z jamek a do každé jamky bylo přidáno 100 μΐ kyseliny a isopropanolu (0,04 N HCI v isopropanolu). Destičky byly po jedné hodině snímány při vlnové délce 570 nm (čtečka SpectraMax).
Hodnocení sloučenin obecného vzorce I naznačuje, že sloučeniny mohou být použitelné ve způsobech nárokovanýcn v předložené přihlášce vynálezu. Tyto sloučeniny mohu být dále použitelné pro rozrušení mikrotubulového systému.
Příprava sloučeniny podle předloženého vynálezu může být provedena podle několika protokolů, které zahrnují aktivovaný ester následovaný chromatografií a pokud je to nutné, pak kyselinou indukovaná deblokace.
H47-H 27 R47«Me
Například zpracování sloučeniny 1 (kde tučně vytištěná čísla sloučenin znamenají její očíslování v oddílu příkladů) s • » • · acetanhydridem v přítomnosti triethylaminu a 4dimethylaminopyridinu dá sloučeninu 3 s 89% výtěžkem po mžikové chromatografií. Podobně sloučenina 4 se získá ze sloučeniny 1 přidáním anhydridů kyseliny jantarové následovaného čištěním pomocí HPLC s obrácenými fázemi. Vystavení pyridinového roztoku sloučeniny 1 komerčně dostupnému hydroehloridu nikotinoylchloridu v přítomnosti triethylaminu a 4-dimethylaminopyridinu následované chromatografií a působením chlorovodíkem umožní vytvořit sloučeninu 7 s vysokým výtěžkem. Pyridiniová sůl 8 se připraví s 47% výtěžkem metodou, kterou popsal Nicolaou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1994, 33, kdy se sloučenina 1 zpracovává komerčně dostupným 2-fluor-l-methylpyridinium ptoluensulfonátem a následuje čištění pomocí HPLC s obrácenými fázemi se současnou aniontovou výměnou (acetát za p-toluensulfonát) a lyofilizace. Estery 5, 9, 11, 13, 15,
17, 19 a 21 byly všechny připraveny se středními až vysokými výtěžky ze sloučeniny 1 a komerčně dostnpných (s výjimkou příkladů 5 a 9) N-t-boc chráněných aminokyselin s aktivací působením 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu v přítomnosti 4dimethylaminopyridinu. Hydrochloridové soli 10, 12, 14, 16,
18, 20 a 22 byly připraveny s vysokým výtěžkem z 9, 11, 13, 15, 11, 19 respektive 21 po zpracování 4,0 M roztokem chlorovodíku v dioxanu a odebrání rozpouštědla za sníženého tlaku. Bisodná sůl 6 je odvozena ze sloučeniny 5 terc.butylesterovým štěpením indukovaným kyselinou chlorovodíkovou a zpracováním hydroxidem sodným. Požadovaná kyselina 24 pro přípravu sloučeniny 5 se syntetizuje s 63% výtěžkem posloupností o 5 krocích, vyplývající z metody, kterou popsal Johns, Synthesis, 1988, 142, pro instalaci • ·
fosfátové funkční skupiny.
HO
OP(O)(O ř-Bu)2
Několik nových konjugátů bylo analyzováno na in vitro cytotoxicitu v modelu GC3 nádorových buněk. Z výsledků uvedených v Tabulce 2 je zřejmé, ve srovnání s kryptofycinem 55 (1) má tento typ sloučenin dobrou až výbornou aktivitu.
Příprava libovolného esteru typy 2 (R1 nebo R1 odvozený od karboxylové kyseliny) zahrnuje řadu metod, které využívají chloridy kyselin, anhydridy a obecné aktivační reagenty (například karbodiimidy).2 Může být použito libovolné rozpouštědlo jiné než participující alkoholy. Pro usnadnění ešteřifikace může být použita libovolná středně silná báze a/nebo katalyzátory (aminy, uhličitany).
Přeměna karbamátů 9, 11, 13, 15, 17, 19 a 21 na odpovídající soli může být prováděna libovolnou silnou kyselinou, zejména anorganickými kyselinami, které zahrnují halogenovodíkové kyseliny, hydrogensuifáty, hydrogenfosfáty, hydrogennitráty, hydrogenperchloráty nebo silné organické kyseliny jako je kyselina trifluoroctová, p-toluensulfonová a methansulfonová. Tytéž kyseliny mohou být použity pro přípravu solí typu 7 z odpovídající volné báze. Soubor doplňujících iontů (kationtů) může zahrnovat soli typu 6 zahrnující alkalické kovy a kovy alkalických zemin. Soubor
- 54 doplňujících iontů (aniontů) může zahrnovat soli typu 8, zejména libovolné konjugované báze kyseliny (organické nebo anorganické).
Tabulka 2. Data o in vitro cytotoxicitě kryptofycinových derivátů vyplývající z testů popsaných výše.
Sloučenina GC3 IC50 (nM)
1 0, 065
3 83
4 31
6 3,7
7 116
8 2,2
10 —
12 0,10
14 21
16 230
18 2,6
20 —
22 7,2
26 ___
Další sloučeniny podle předloženého vynálezu a výsledky GC3 analýzy jsou uvedeny dále:
• ·
Vzorec
IC50 (μΜ)
KRYPTOFYCIN-141
0,7950
Vzorec
IC50 (μΜ)
OH
KRYPTOFYCIN-138
0,0308 ··· ··· ···· • · · · · · ··· · ·· · • · · · · · · ···· · ··· ···
Vzorec
IC50 (μΜ)
KRYPTOFYCIN-139
0,0034
Vzorec
IC50 (μΜ)
KRYPTOFYCIN-140
0,863 • · 4 · · · • · · · · ·
4 · 4 · ·· · · · ·
Vzorec
IC50 (μΜ)
KRYPTOFYCIN-143
0,8500
Vzorec
IC50 (μΜ)
OH
KRYPTOFYCIN-142
0,0011 • · • ·
Vzorec
KRYPTOFYCIN-145
0,000015
Vzorec
KRYPTOFYCIN-129 “es1 “7 T;předioženéh° -nálezu byly testov4i cestu a mely hodnoty ic\n kt-orá - · ·, ~ y 50' ^čere se měnily v rozmp7í , mensVZ C70 h°d°^ byl ·· * • 0
Výsledky srovnávacích předběžných studií rozpustnosti sloučenin 27, 1 a 12 jsou shrnuty v Tabulce 3. Tyto výsledky naznačují zvýšenou rozpustnost sloučeniny 12.
Tabulka 3. Porovnání rozpustnosti kryptofycinových sloučenin
1, 12 a b.
Excipient, objem upraven 0,05M acetátovým pufrem % (obj.) 27 (mg/ml) 1 (mg/ml) 12 (mg/ml)
1 Propylenglykol Ethanol 15 10 BQL BQL >2,0
2 Propylenglykol Polyethylele Glykol 3000 15 20 BQL 0,0026 >2,0
3 Polysorbát 80 1 (hm./obj) BQL 0,3113 1-2
4 Emulfor EL719 1 (hm./obj) 0,0272 0,3611 1,5
5 0,05M Acetátový pufr 100 <0,001 <0,001 0,03
(BQL = Below quantitation limit, pod kvantifikačním limitem, přibližně 0,001 mg/ ml)
Porovnávání vlastností, týkajících se stability, pro sloučeniny 1 a 12 ve vodném pH v rozmezí 4-8 bylo provedeno při teplotě okolí po dobu 6 hodin. Výsledky těchto studií jasně demonstrovaly vyšší vodnou rozpustnost a stabilitu sloučeniny 12. Například při pH 8 měl Kryptofycinu 55 hodnotu rozpustnosti 10 mg/ml při teplotě okolí ve srovnání s rozpustností 30 mg/ml pro sloučeninu 12 za v zásadě ·· ·· 44 ·· 4 » 4 · · » 4 4 4·· • 4 ··· · · · · · 4 · ·
Φ 4 4 4 4 4 · 4444 4 4 · 4 ··<
······· · 4
44 44 4 44 4« stejných podmínek. Při ρΗ 4 měl Kryptofycinu 55 hodnotu rozpustnosti ve vodě asi 50 mg/ml; rozpustnost ve vodě pro Kryptofycinu 55 však poklesla, když se pH stalo bázickým, zatímco rozpustnost ve vodě sloučeniny 12 zůstala v podstatě neměnná v celém rozmezí zkoumaných hodnot pH.
Vycházejíce z výsledků, týkajících se rozpustnosti a stability, byla zvolena vhodná parenterální vehikula pro určení absolutních hodnot rozpustnosti/stability sloučeniny 12. Tabulka 4 ukazuje profil rozpustnosti sloučeniny 12 v těchto vehikulech. Předběžné výsledky indikují přijatelnou stabilitu sloučeniny 12 v přípravku 6 po až 3 týdny.
Tabulka 4. Rozpustnost kryptofycinového glycinátu 12 v různých parenterálních vehikulech.
1 Excipient % objemově 1 Ω 12 (mg/ ml) Π -11
ej ιπαποί'··...... U f X JL
Propylenglykol 10
0,05 M Citrátový pufr pH 4,0 qs
2 Ethanol 10 1, 99
Propylenglykol 10
0,05 M Acetátový pufr pH 4,0 qs
3 Ethanol 10 1,29
0,05 M Acetátový pufr pH 4,0 qs
4 Propylenglykol 10 1,58
0,05 M Acetátový pufr pH 4,0 qs
·· ·
4 4 ··
5 Polysorbát 80 0,5 qs (hm./obj.) 2,21
0,05 M Acetátový pufr pH 4,0
6 Ethanol 10 10,27
Propylenglykol 25
0,05 M Acetátový pufr pH 4,0 qs
7 Ethanol 10 4,32
Propylenglykol 15
0,05 M Acetátový pufr pH 4,0 qs
Je tedy možné dosáhnout vysokých koncentrací sloučenin podle předloženého vynálezu ve vehikulu, které neobsahuje žádné povrchově aktivní činidlo nebo emulgátor, což zase umožňuje snadné toxikologické a klinické zhodnocení této sloučeniny. Glycinátový ester (12) také přináší lepší stabilitu ve vodném prostředí za fyziologických hodnot pH po delší časové intervaly, což indikuje delší možnou dobu skladování za normálních podmínek. Zatímco je nutné v případě sloučenin 1 a 27 připravovat pro skladování koncentráty, které jsou potom před podáváním ředěny, v případě sloučenin podle předloženého vynálezu je možné používat roztoky, které jsou připraveny k použití.
Sloučeniny obecného vzorce I mohou být získány vycházejíce ze sloučeniny obecného vzorce II • ·
f. r·. · · · · * · · » » w w
- 52 - ·····♦· ···· · ··· ··
9 9 9 9 9 9 9
9 99 · · · ' · ·»
ve kterém
Ar, R1, R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9, R10 mají stejný význam, jaký byl uveden výše pro substituenty v obecném vzorci
I,
R13 je zvolen ze souboru, zahrnujícího terč.-butylkarbamát (BOC);
R24 je zvolen ze souboru, zahrnujícího
(N-hydroxysukcinimid, označovaný zde jako „NHS), dále N-hydroxysulfosukcinimid a jejich soli, 2-nitrofenyl, 4-nitrofenyl a 2, 4-dichlorfenyl;
X znamená O, NH nebo alkylamino;
Y znamená O, NH, nebo alkylamino.
Sloučeniny obecného vzorce III • · • · · · · · 0 • 00 · · · · • · · · · · · · * · • · · · · 0 ······ • 0 · * · · 0 • · 0 0 · · 0
ve kterém skupiny R a různé další substituenty mají význam definovaný výše v tomto popisu předmětu vynálezu;
mohou být získány kontaktem sloučeniny obecného vzorce IV
ve kterém R25 znamená s kyselinou obecného vzorce nh2 y-Re
COjR27 ve kterém R27 je zvolen ze vodíku, C1-C12 alkyl a aryl;
souboru, zahrnujícího atom
0
0 «
0 0 0
0 0 0 0 a silylačním činidlem. Obzvláště výhodné silylační činidlo je bis-N,O-trimethylsilylacetamid (BSA).
Jak je zde užíván, výraz „aktivní esterový substituent znamená substituent, který je vhodný jako substituent představující odštěpitelnou skupinu. Vhodné substituenty mohou být zvoleny vycházejíce ze standardních referencí, například „Protéctive Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Viz především strany 180 až 184 v monografii Greene. Obzvláště výhodným aktivním esterovým substituentem je skupina Nhydroxy-sukcinimid (NHS). Další výhodné skupiny zahrnují, aniž by tím byly jakkoli omezeny:
(O-N-hydroxysukcinimid), O-N-hydroxysulfosukcinimid a jeho soli, O-2-nitrofenyl, O-4-nitrofenyl a 0-2,4-dichlorfenyl, kde „0 se vztahuje ke kyslíkové skupině, nutné pro vytvoření esterové funkční skupiny.
Tak jak je zde používán, výraz „amid znamená amidovou funkční skupinu, která může být odštěpena za alkalických podmínek. Například se tento výraz vztahuje, aniž by tím byl jakkoli omezen, na -NMe2. Pro další vysvětlení a příklady viz například Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981).
• » 9 t ·
Jak je zde užíván, výraz „aktivní esterový substituent” znamená substituent, který způsobí, že substituent OR24 je vhodná odštěpitelná skupina. Vhodné substituenty mohou být zvoleny vycházejíce ze standardních referencí, například, „Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981) . Obzvláště výhodná skupina R25 je N-hydroxy-sukcinimid (NHS).
Zde popsané způsoby přípravy se nejvýhodněji provádí v přítomnosti rozpouštědla. Odborník může zvolit vhodné rozpouštědlo pro výše uvedený způsob přípravy. Inertní organická rozpouštědla jsou obzvláště výhodná; nicméně za jistých podmínek může být vhodné vodné rozpouštědlo. Například, jestliže R27 znamená atom vodíku a R13 znamená BOC, bude jako rozpouštědlo vhodná vodná báze.
Pokud požadovaný substituent R6 v sloučenině obecného vzorce I obsahuje amin, pak aminový substituent skupiny R6 musí být chráněn použitím aminové ochranné skupiny. Odborník může snadno zvolit vhodnou aminovou ochrannou skupinu využitím reference na standardní monografie, které zahrnují například, „Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenům press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis”, Wiley (New York, 1981) .
R27 by měla být skupina, která umožní odebrání substituentu -CO2R za kyselých, neutrálních nebo mírně bázických podmínek. Výhodné skupiny R27 zahrnují, aniž by tím byly jakkoli omezeny, atom vodíku, Ci-C6 alkyl, trichlormethyl,
9, ·· · * · · · · ·
9 9 9 9 9 · · · · /-/- ····· · · · · ···· — DO“ « · « · · · ······ ······ ······· · · ·· 9 9 99 9 9· 6· trichlorethyl a methylthiomethyl. Je obzvláště výhodné, aby R27 znamenal atom vodíku.
Pro další usnadnění výkladu jsou pro odborníka podány následující schémata:
Sloučeniny obecného vzorce I mohu být připraveny ze sloučeniny obecného vzorce II
ve kterém
Ar, R1, R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9, R10 mají stejný význam, jaký byl uveden výše pro substituenty v obecném vzorci I. Výraz R11 má stejný význam, jako bylo definováno výše pro R11.
R13 znamená zvolenou aminovou ochrannou skupinu;
R24 je zvolen ze souboru, zahrnujícího aktivní esterový substituent, amidový substituent, 0-2-nitrofenyl, 0-4nitrofenyl a 0-2,4-dichlorfenyl;
X znamená 0, NH nebo alkylamino;
Y znamená C, 0, NM, S, SO, S02 nebo alkylamino.
Β · · Β » · Β » ΒΒΒΒ • Β Β ΒΒΒ Β Β
Β Β · Β
Sloučeniny obecného vzorce III
ve kterém skupiny R a různé další substituenty mají význam definovaný výše v tomto popisu předmětu vynálezu;
mohou být získány kontaktem sloučeniny obecného vzorce IV
ve kterém R25 znamená s kyselinou obecného vzorce
0 9 ··· 0 0 0 0 • · · · · · 0 0» 0 ·· · • 0« ··· 90000· 900 009
0000000 0 · 00 90 ·0 9 00 ··
ve kterém R27 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, C1-C12 alkyl a aryl;
a silylačním činidlem. Obzvláště výhodné silylační činidlo je bis-N,O-trimethylsilylacetamid (BSA).
Jak je zde užíván ve smyslu substituentu R25, výraz „aktivní esterový substituent znamená substituent, který ze substituentu OR24 vytvoří dobrou odštěpitelnou skupinu. Vhodné substituenty mohou být zvoleny vycházejíce ze standardních referencí, například „Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Viz především strany 180 až 184 v monografii Greene. Obzvláště výhodnou skupinou R25 je skupina N-hydroxy-sukcinimid (NHS).
Zde popsané způsoby přípravy se nej výhodněji provádí v přítomnosti rozpouštědla. Odborník může zvolit vhodné rozpouštědlo pro výše uvedený způsob přípravy. Inertní organická rozpouštědla jsou obzvláště výhodná; nicméně za jistých podmínek může být vhodné vodné rozpouštědlo. Například, jestliže R27 znamená atom vodíku a R13 znamená BOC, bude jako rozpouštědlo vhodná vodná báze.
Pokud požadovaný substituent R6 v sloučenině obecného vzorce
I obsahuje amin, pak aminový substituent skupiny R6 musí být • · • · · · · » · · · · • · · · · · · · · * · · * • ·· ··· ······ ··· ··· ······· · · • · ·· · · · · · · · chráněn použitím aminové ochranné skupiny. Odborník může snadno zvolit vhodnou aminovou ochrannou skupinu využitím reference na standardní monografie, které zahrnují například, „Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981).
R27 by měla být skupina, která umožní odebrání substituentu -CO2R27 za kyselých, neutrálních nebo mírně bázických podmínek. Výhodné skupiny R27 zahrnují, aniž by tím byly jakkoli omezeny, atom vodíku, 0χ-06 alkyl, trichlormethyl, trichlorethyl a methylthiomethyl. Je obzvláště výhodné, aby R27 znamenal atom vodíku.
Pro další usnadnění následující schémata:
výkladu jsou pro odborníka podány
Schéma I
ch3cn
50% aq HF ch3cn
o.
• »
Schéma I'
Jak je používán ve Schématu 1' a v popisu předmětu vynálezu, R1 znamená atom halogenu, SH, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát nebo chráněnou skupinu OH nebo chráněnou skupinu SH;
R2 znamená OH nebo SH;
R znamená alkoholovou ochrannou skupinu, vloženou v průběhu části procesu syntézy pro ochranu alkoholové skupiny, který by jinak mohla reagovat v průběhu chemického zpracování a je odstraněna v pozdější fázi syntézy. Množství reakcí vytvoření a odebrání takových ochranných skupin je popsáno v řadě standard monografií, které zahrnují například, „Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. „Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Odborník může zvolit vhodnou alkoholovou ochrannou skupinu zejména s využitím poznatků z takových prací. Jednou z obzvláště • · · · • · · · · · • · · · · · výhodných alkoholových ochranných skupin je terc.butyldimethylsilyl (TBS). Produkty takových reakčních Schémat mohou být derivatizovány použitím standardních metod, čímž se získají další kryptofycinové sloučeniny.
Obecně jsou způsoby podle předloženého vynálezu ilustrovány níže:
9
9
9
• · · · · · ··· · · · · • · · · · · · ···· · ··· ··· ······ · · • · ·· · · · · · · ·
R6 a R11 mají stejný význam jako bylo tomto popisu předmětu vynálezu.
definováno výše ·· · • ·
Produkty uvedených reakčních Schémat mohou být derivatizovány použitím standardních metod, čímž se získají další kryptofycinové sloučeniny.
Odborník může používat vhodné výchozí látky a reagenty pro přípravu požadovaných sloučenin, vycházejíce z výše uvedených Schémat a níže podaných příkladů.
Esterové výchozí sloučeniny mohou být připraveny například následujícím způsobem:
Krok 1
HEW
TMG
COjMe
Krok 2 DIBAL
Krok 5 Bu2Sn-0 TsCI, TEA
Krok 6 TBS-OTf EtaN
CN
Krok 10 DIBAL; HEW
kde R6 má výše uvedený význam.
Pro poskytnutí dalšího návodu pro přípravu sloučenin podle vynálezu jsou podána následující Schémata. Některé zkratky, ·· · používané ve Schématech, Přípravách a Příkladech jsou obecně známy odborníkům. V zájmu srozumitelnosti jsou zde podána jejich vysvětlení:
DMAP 4-dimethylaminopyridin
BOC terč.-butoxykarbonyl mcpba m-chlorperbenzoová kyselina
TMSC1 chlortrimethylsilan
HEW Horner-Emmons-Wadsworthova reakce (standardní reakce pro olefinaci aldehydu použitím fosfonátu a báze)
TMG 1,1,3,3-tetramethylguanidin (standardní báze používaná v HEW reakci)
DIBAL diisobutylaluminumhydrid (standardní reagent pro redukci nenasyceného esteru allylový alkohol)
SAB Sharpless Asymmetric Epoxidation (zavedená reakce pro enantioselektivní epoxidaci allylických alkoholů)
TBS terč.-butyldimethylsilyl
TBS-Otf TBS trifluormethansulfonát (standardní reagent pro terč.-butyldimethylsilylaci alkoholů)
AIBN 2,2'-azobis(isobutyronitril) (standardní radikálový iniciátor)
ACN acetonitril
DBU 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (standardní aminová báze)
EDCI l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid
Schéma přípravy esteru je dále vysvětleno v oddíle Příprav uvedeném dále, které pro odborníka uvádí jednu specifickou aplikaci Schématu pro usnadnění pochopení výkladu.
• · · • · · ··· ···· • · · · · · 1 · · · · · · • ·« ··· ······ »·· ··· ······· · · ·· ·· ·· · ·· ··
Schéma I
Báze arV λρ
PPh,
____Schéma I (pokračování) ·· · ·0 *· • · · · · · · • · · · · · · · • ······ ··· ··· • · · · ·
9· · ·· ·· +TFAΚΟΗ
ΗΛΙ
ΎΎΎ'1
THF, 65 *C
OTBS OH ^CCl,
OMe
PhjPOCl, DIEA DMF (65-751)
OTBS HN
C13C
HF, CH3CN (94%) xoc
CKc/AA) ^^OMe
Schéma I (pokračování)
4· ·· ·* • * · • · ·4· • · · · • · · · ·· « · • t · • » · • · · · « · · ···· • » · ·· • · · · • · · · • ··· ··· • · ·· ··
DCC, DMAP CH2C12 (75-85%)
Schéma I (pokračování) • «
kde substituenty Ar mají nárokovaný význam. Ilustrace výkladu Schématy nemá za cíl omezit způsob syntézy pouze na případ, zahrnující fenylový kruh, uvedený ve Schématech, ale odborník může využít ilustrovaného způsobu a aplikovat jej na požadovaný výchozí materiál s cílem získat sloučeniny, které jsou nárokovány v této přihlášce vynálezu.
Nutná reakční doba je závislá na výchozích látkách a operační teplotě. Optimální reakční doba pro daný způsob je, jako vždy, kompromisem, vycházejícím z úvahy zahrnující proti sobě působící požadavky výkonu, který vyžaduje krátké ·♦ ·* o · * · * · · · • · · · · · • · »· *3 reakční doby a maximálního výtěžku, který je dosahován při dlouhých reakčních časech.
Jisté sloučeniny podle předloženého vynálezu připraveny použitím biosyntetického způsobu.
mohou být Například roztok kryptofycinu 3 (asi 0,24 mmolů) v DME-H2O (2:1, 15,0 ml) při teplotě asi 0 °C se zpracovává bromsukcinimidem (asi 65 mg) a ponechá se zahřát na teplotu okolí. Po asi 24 hodinách se odstraní rozpouštědlo a residuum se rozpustí v rozpouštědle jako je CH3CN a podrobí se HPLC chromatografií s obrácenými fázemi (65:35 CH3CN/H2O, 6 ml/min je výhodné) a tím se získá směs kryptofycinů. Směs se znovu chromatografuje pomocí HPLC s normálními fázemi (1:1 hexan/ethylacetát, 3 ml/min je výhodné) a tím se získají požadované kryptofyciny.
Podobně se kryptofycinu 3 (asi 40 mg, 0,063 mmolů) vloží do 2:1 DME/H2O (asi 6 ml) a je přidán N-chlorsukcinimid (0,075 mmolů) a směs se zahřívá na teplotu asi 60-70 °C po dobu asi 24 hodin. Přidá se další dávka NCS (8 mg) a zahřívání pokračuje po dobu dalších 24 hodin. Rozpouštědlo se odstraní a residuum se vystaví HPLC chromatografií (35%H2O/CH3CN 6 ml/min) a tím se získají požadované kryptofycinové sloučeniny. Výsledná směs se dále čistí HPLC použitím směsi methanol/voda (asi 4:1) a tím se získají požadované purifikované kryptofycinové sloučeniny.
Př1k1ady provedení vynálezu
Pro další ilustraci vynálezu jsou podány následující
• B * · B · » ·· ·· • to · · B · ···· * a A A Λ a A A A B fe fe fe
- 83 - • fe fe fe fe fe fefefe w w » B · · Β B · · ···· · ··· BBB «····· · fe «· * · · «· · · · t'»
příklady. Rozsah předmětu vynálezu však není žádným způsobem
omezen na následující příklady a nebo j imi jakkoli
limitován.
Příprava 1
Krok 1. Methyl 5-fenylpent-2(E)-enoát.
Roztok trimethyl-fosfonoacetátu (376 g, 417 ml, 2,07 molů) v THF (750 ml) byl míchán při teplotě 0 °C v 3 1 tříhrdlé baňce s kulatým dnem vybavené mechanickým míchačem a přívodem dusíku. Do ochlazeného roztoku byl přidán po kapkách čistý tetramethylguanidin (239 g, 260 ml, 2,07 molů) prostřednictvím dodatečné nálevky. Ochlazený čirý bledě žlutý roztok byl míchán po dobu 25 minut při teplotě 0 °C. Roztok hydrocinnamaldehydu (90%, 253 g, 248 ml, 1,9 molů) v THF (125 ml) byl pomalu přidán po kapkách do reakčního roztoku. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána po dobu 10 hodin, zvyšujíce teplotu na teplotu okolí. GC indikovala poměr produktu a výchozí látky 95:5. Do reakční nádoby bylo přidáno 500 ml vody a reakční směs byla míchána přes noc s oddělením dvou vrstev. Organická vrstva byla isolována a vodná vrstva byla extrahována t-BuOMe. Organické vrstvy byly sloučeny a sušeny nad MgSO4, potom koncentrovány za sníženého tlaku a tím byl získán oranžový olej. Surový produkt byl destilován při teplotě 129 °C/0,3mm Hg a tím se získalo 360,5 g, 91,7% výtěžek, čirého slabě žlutého oleje. EIMS m/z 190(13; M+) , 159(410, 158(39), 131(90), 130(62),
117(22), 104(12), 95(57), 91(100), 77(21), 65(59);
HREIMS m/z 190,0998 (Ci2H14O2 D -0,4 mmu) ;
UV Imax (e) 210 (8400), 260 (230) nm;
IR nmax 3027, 2949, 1723, 1658, 1454, 1319, 1203, 978, 700 • · « «.
• · ^-1 .
cm r XH NMR d (CDC13) 7,15-7,3 (Ph-H5; bm) , 7,00 (3-H; dt,
15,6/6,6), 5,84 (2-H; dt, 15,6/1,2), 3,10 (OMe; s), 2,76 (5H2; t, 7,2), 2,51 (4-H2; bdt, 6,6/1,2),13C NMR d (CDCI3) 166, 9 (1), 148,3(3), 140, 6 (Ph-1' ) ,
128,4/128,2 (Ph2'/3'/5'6'), 126,1 (Ph 4'), 121,4 (2), 51,3 (OMe), 34,2/33,8 (4/5).
Krok 2. 5-fenyl-pent-2-en-l-ol.
Do 12 1 4-hrdlé baňky s kulatým dnem vybavené tepelným spínačem, mechanickým míchačem a přívodem dusíku, byl vložen roztok enoátového esteru (310,5 g, 1,5 molů) v THF (1,5 1) a ochlazen na teplotu -71 °C v lázni i-PrOH/CO2. Do reakční nádoby byl přidán po kapkách DIBAL (2,5 1, 1,5 M v toluenu, 3,75 molů) takovou rychlostí, aby byla udržována reakční teplota 4-50 °C. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána přes noc s reakční teplotou 4-50 °C. TLC (3:1 Hexany:EtOAc, SiO2) indikovala nepřítomnost výchozího materiálu po 16 hodin. Reakční teplota byla ponechána vystoupit na -15 °C. Reakce byla ukončena pomalu pomocí IN HCI (150 ml). V tomto okamžiku reakční směs vytvořila želatinovou pevná látka. Lopatka byla použita pro rozmělnění polotuhé látky a byl přidán IN HCI (200 ml) , což zvýšilo tekutost směsi. Byl přidán koncentrovaný HCI (625 ml), aby byl vytvořen dvoufázový systém. Vrstvy byly odděleny a produkt extrahován t-BuOMe. Organická vrstva byla sušena nad MgSOí a koncentrována za sníženého tlaku a tím byl získán čirý blědě žlutý olej, 247,8 g. Surový produkt byl destilován při 145 °C/0,25 mm Hg a tím se získalo 209,7 g, 86,2%.
EIMS m/z 162 (1:M+) 144 (16), 129 (7), 117 (9) 108 (6), 92 • · • · • · • · • <
• · • · · · • · « • · · » · ♦ (17), 91 (100), 75 (5), 65 (12),
HREIMS m/z 162, 1049 (CUH14O, D -0,4 mmu) ;
UV Imax (e) 206 (9900), 260 (360);
IR nmax 3356, 2924, 1603, 1496, 1454, 970, 746, 700 cm’1;
XH NMR d 7,15-7,3 (Ph-H5; m) , 5,70 (3-H; dt, 15,6/6,0), 5,61 (2-H; dt, 15,6/4,8), 4,02 (1-H2; d 4,8), 2,68 (5-H2; t, 7,2), 2,40 (OH; bs), 2,36(4-H2; dt, 6,0/7,2);
13C NMR d 141,6 (Ph 1'), 131, 8(3), 129, 5 (2), 128,3/128,2 (Ph 2'/3'/5'/6'), 125,7 (Ph4'), 63,3 (1), 35,4/33,8 (4/5).
Krok 3. (2S,3S)-2,3-Epoxy-5-fenyl-l-pentanol
Do 1 1 3-hrdlé baňky s kulatým dnem vybavené mechanickým míchač, tepelným spínačem a přívodem dusíku byl přidán CH2C12 (350 ml), bezvodá 4 Á molekulární síta (30 g) a L-( + )diethyltartarát (7,62 g, 0,037 molů). Výsledná směs byla ochlazena na teplotu - 20 °C a zpracována Ti(O-i-Pr)4 (9,2 ml, 0,031 molů), následovaným přidáním terc.butylhydroperoxidu (4,0 M in CH2C12, 182 ml, 0,78 molů) takovou rychlostí, aby byla udržována teplota 2 -20 °C. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána po dobu dalších 30 minut a potom zpracován roztokem allylalkoholu (50 g, 0,31 molů) v CH2C12 (30 ml) takovou rychlostí, aby byla udržována teplota 2-20 °C. Reakční směs byla míchána při stejné teplotě po dobu 5 hodin, potom filtrována do roztoku heptahydrátu síranu železitého (132 g) a kyseliny vinné (40 q) ve vodě (400 ml) při teplotě 0 °C. Směs byla míchána po dobu 20 minut, potom přenesena do oddělovací nálevky a extrahována pomocí t-BuOMe (2x200 ml) . Sloučená organická fáze byla míchána s 30% roztokem NaOH obsahujícího NaCl po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C. Vrstvy byly opět odděleny a vodná fáze extrahována pomocí t-BuOMe. Sloučená organická ·
• « · fáze byla promývána solankou, sušena koncentrována a tím byl získán 52,8 g zbarvený olej.
nad MgSO4 a jako jantarově
Krok 4. (2R, 3R)-2-hydroxy-3-methyl-5-fenylpentan-l-ol .
Do 5 1 3-hrdlé baňky s kulatým dnem vybavené mechanickým míchačem, tepelným spínačem a přívodem dusíku byly přidány hexany (11) a byla ochlazena na teplotu 0 °C. Byl přidán 2,0 M roztok Me3Al v hexanech (800 ml, 1,6 molů), následovaný roztokem epoxidu (120 g, 0,677 molů) v hexanech (250 ml)/CH2Cl2 (50 ml) udržujíce teplotu pod 20 °C. Po ukončení přidávání byla šedivá reakční směs míchána při teplotě 5 °C po dobu 35 min a potom byl přidán po kapkách roztok 10% HCI (300 ml) , následovaný přidáním koncentrovaného HCI (350 ml) . Vrstvy byly odděleny a organická fáze byla promývána solankou a sušena nad MgSO4. Po odebrání těkavých látek za sníženého tlaku bylo získáno 122,1 gramů oleje.
Krok 5. (2R, tosylát.
Do 2 1 3-hrdlé baňky s kulatým dnem vybavené mechanickým míchačem a přívodem dusíku byl přidán diol (58 g, 0,30 molů), oxid dibutylcínu (1,5 g, 0,006 mol, 2 % molárních), toluensulfonyl chlorid (57,5 g, 0,30 molů), CH2C12 (580 ml) a triethylamin (42,0 ml, 0,30 molů). Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 2 hodin (ačkoliv reakce byla ukončena v průběhu 1 hodiny),
3R)-2-hydroxy-3-methyl-5-fenylpent-l-yl vodou a sušena nad MgSO4. sníženého tlaku poskytla zbarveného oleje.
filtrována, promývána Koncentrace těkavých látek za 104,1 gramů mírně jantarově • ·
Krok 6. (2R,3R)-2-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-3-methyl5-fenylpent-l-yl tosylát.
Roztok tosylátu (100 g, 0,29 molů) a triethylaminu (81,0 ml, 0,58 molů) v CH2CI2 (1200 ml) byl zpracován čistým TBS-OTf (99 ml, 0,43 molů) po kapkách za pokračujícího míchání po dobu dalších 20 minut. Reakční směs byla promývána dvakrát solankou, sušena nad MgSO4 a koncentrována do sucha. Olej byl rozpuštěn v minimálním množství hexanů a filtrován přes vrstvu oxidu křemičitého, vymývání směsí hexany:EtOAc (9:1) a tím byl získán mírně jantarově zbarvený olej, 134 g.
Krok 7. (2R, 3R, 5RS)-2-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-3methyl-5-brom-5-fenylpent-l-yl tosylát.
Do 5 1 3-hrdlé baňky s kulatým dnem vybavené mechanickým míchačem, refluxním kondenzátorem a přívodem dusíku byl přidán CC14 (1680 ml), TBS Ts (140 g, 0,30 molů), NBS (65 g, 0,365 molů) a AIBN (16,5 g, 0,10 molů) . Směs byla zbavena plynů evakuací za úplného vakua s mícháním a zpětným přiváděním dusík (3x). Reakční směs byla potom zahřívána na teplotu zpětného toku, dokud se barva nestala tmavě hnědou. Po uplynutí 15 minut za usilovného zahřívání na teplotu zpětného toku se reakční směs stala světle žlutou a chromatografická analýza ukázala, že reakce byla ukončena. Po ochlazení na teplotu okolí, reakční směs byla filtrována a filtrát byl koncentrován do sucha. Residuum bylo znovu rozpuštěno v hexanech a filtrováno znovu a koncentrováno do sucha a tím se získalo 170,3 gramů sloučeniny ve formě jantarově zbarveného oleje.
Krok 8. (2R, 3R)-2-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-3-methyl• ·
5- fenylpent-4(E)-en-l-yl tosylát.
Do 2 1 3-hrdlé baňky s kulatým dnem vybavené mechanickým míchačem, refluxním kondenzátorem a přívodem dusíku byl přidán roztok bromidu (100 g, 0,186 molů) v acetonitrilu (700 ml). Byl přidán DBU (83,6 ml, 0,557 molů) a výsledný tmavě hnědý roztok byl míchán při teplotě zpětného toku po dobu 15 minut. Po ochlazení na teplotu okolí, bylo rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku a residuum vyluhováno v CH2CI2 (200 ml) a filtrováno přes vrstvu oxidu křemičitého. Těkavé látky byly znovu odpařeny a residuum bylo rozpuštěno v EtOAc a promýváno vodou, solankou a sušeno nad MgSO4 a koncentrováno do sucha. Preparativní mplc (Prep 500) chromatografie dala požadovanou nenasycenou sloučeninu (50,3 g, 60% výtěžek ve 4 krocích).
Krok 9. (3S, 4R)-3-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-4-methyl6- fenyl hex-5(E)-en-l-nitril.
Tosylát (50 g, 0,11 molů) byl rozpuštěn v DMSO (1 1) a zpracován KCN (14,2 g, 0,22 molů) a voda (25 ml) a výsledná směs byla míchána při teplotě 60 °C pod dusíkovou atmosférou po dobu 18 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs rozdělena mezi EtOAc (1 1) a vodu (1 1) . Vodná fáze byla extrahována EtOAc (500 ml) a sloučená organická fáze byla promývána solankou a sušena nad Na2SO4. Mžiková chromatografie přes oxid křemičitý s CH2C12 poskytla požadovaný nitril s 92% výtěžkem.
Krok 10. Methyl-(5S,6R)-5-[(terc.-butyldimethylsilyl)oxy]-6methyl-8-fenylokta-2(E),7(E)-dienoát.
Nitril (14,67 g, 46,5 mmolů) byl rozpuštěn v toluenu (200 ml) a ochlazen na teplotu -78 °C pod dusíkovou atmosférou.
« · • · • · ·
1,5M roztok DIBAL v toluenu (37,2 ml, 55,8 mmolů) byl přidán po kapkách za intenzivního míchání. Po ukončení přidávání byla chladicí lázeň odstraněna a reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla opatrně vlit do IN HCI a směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 30 minut. Vrstvy byly odděleny a organická fáze byla promývána nasyceným vodným roztokem vínanu sodno-draselného (2x) , solankou a sušena nad Na2SO4. Těkavé látky byly odstraněny za sníženého tlaku a surový bledě žlutý olej byl použit přímo v následující kondenzaci. Surový aldehyd uvedený výše byl rozpuštěn v THF (90 ml) a zpracován trimethylfosfonoacetátem (9,03 ml, 55,8 mmolů) a tetramethylguanidinem (1,0 ml, 55,8 mmolů) při teplotě okolí pod dusíkovou atmosférou. Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin, potom rozdělena mezi EtOAc (200 ml) a vodu (100 ml) . Vodná fáze byla zpětně extrahována EtOAc (100 ml) a sloučená organická fáze byla promývána vodou, solankou a sušena nad Na2SO4. Těkavé látky byly odstraněny za sníženého tlaku a surový žlutý olej (17,0 g) byl chromatografován na silikagelu se směsí CH2C12:cyklohexan (1 : 1 až 2 : 1) a tím se získalo 13,67 gramů požadovaného esteru, 78,5%.
Příprava 2
OH • ·
4 44
4 4 4
4 4 · • 4 4 4 4 4 • ·
Methylester (2,673 mmolů) byl rozpuštěn v acetonu a potom byl přidán IN vodný LiOH (26 ml) při teplotě okolí. Šedavá směs byla dále zředěna acetonem (20 ml) a výsledná žlutá směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 23,5 hodin. Reakční směs byla zředěna diethyletherem (400 ml) a organické složky byly promývány IN HCI (120 ml), solankou (200 ml) a H2O (160 ml) . Organické složky byly sušeny a koncentrovány za sníženého tlaku a tím daly žlutý olej, který byl čištěn sloupcovou chromatografií (gradient: 5% ACOH + 20%-40% EtOAc/hexany ) a tím se získala karboxylová kyselina ve formě žlutého oleje (960 mg, 100%).
NMR (CDC13) δ 7,38-7,19 (m, PhH5) , 7,09 (ddd, J = 15,2,7,6 a 7,9 Hz, 3-H), 6,38 (d, J = 16 Hz,8-H), 6,16 (dd, J = 16 a 8 Hz, 7-H), 5,85 (d, J = 15,8Hz, 2-H) , 3,81-3,75 (m, 5-H), 2,49-2,37 (m, 6-H, 4-CH2) , 1,12 (d, J = 6,7 Hz, 6-Me) , 0,91 (s, SiCMe3) , 0,065 (s, SiMe), 0, 068 (s, SiMe) ppm;
IR u (CHCI3) 2957, 2930, 2858, 1697, 1258, 1098, 838 cm1;
MS ČĚĎ) 360,2 (M+,100);
[a]D 87,6° (c 10, 5, CHC13) ;
Elementární analýza pro C21H32O3.
Vypočteno: C,69,95; H,8,95%.
Nalezeno: C,69,19; H,8,39%.
Příprava 3
Do míchaného roztoku karboxylové kyselina (2 ramolů) v bezvodém dimethylformamidu (5,50 ml) byl přidán 1-ethyl3-(3-dimethyaminopropyl)karbodiimid (2,4 mmolu) a Nhydroxysukcinimid (2,6 mmolů) při teplotě okolí. Směs byla míchána po dobu 28 hodin a potom zředěna EtÓAc (100 ml) a promývána IN vodným HC1 (2x50 ml), H2O (75 ml), sušena a koncentrována za sníženého tlaku a tím dala olej. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (gradient: 530% EtOAc/hexany) a to dalo aktivní ester ve formě blědě žlutého oleje (724 mg, 80%). ___ XH NMR (CDC13) δ 7,36-7,20 (m, PhH5,3-H), 6,38 (d, J = 16Hz,
8-H), 6,14 (dd, J = 16,1 a 8,0 Hz, 7-H). 6,03 (d, J = 16Hz, 2-H) , 3,79 (q, J = 4,3 Hz, 5-H) , 2,94 (brs, CH2CH2) , 2,582,42 (m, 6-H, 4-CH2) , 1,10 (d, J = 6,8 Hz, 6-Me) , 0,90 (s,
SiCMe3) , 0,05 (s, SiMe2) ppm;
IR u (CHCI3) 2957, 2931, 2858, 1772, 1741, 1648, 1364, 1254, 1092, 1069, 838 cm'1;
MS (FD) 457 (M+,100);
[a]D +71,3° (c 10,1, CHCI3) ;
Elementární analýza pro C25H35NO5.
Vypočteno: C,65,61;H,7,71;N,3,06%.
Nalezeno: C,65,51;H,7,56; N, 3,02%.
4 « « • 4
- 92 - • · · 4 4 4 4 4·· • 4 4·· 4 4 4 4 · ·· » • 44 · * 4 4444·· 444 444 4444444 · · • 4 · 4 · 4 4 4· ·4
Příprava 4
ch3
•/V
I = Γ 0A
OH Ά
Do míchaného roztoku silyletheru (2,50 g, 5,47 mmolů) v
CH3CN (130 ml) byl přidán 48% vodný HF (15 ml) při teplotě 0 °C. Roztok byl míchán při teplotě 0 °C po dobu 0,75 hodin a potom při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Reakční směs byla zředěna diethyletherem (300 ml) a promývána H20 dokud promývaná látka neměla pH přibližně 7. Organické složky byly sušeny (MgSO4) a koncentrovány za sníženého tlaku a tím se získalo žluté residuum, které bylo, který byl rekrystalizován z Et2O a tím se získal alkohol ve formě bílých krystalů (1,46 g, 78%).
XH NMR (CDC13) δ 7,41-7,20 (m, PhH5,3-H) , 6,48 (d, J = 16Hz,8H), 6,15-6,07 (m,7-H,2-H), 3,71-3,65 (m,5-H), 2,83 (brs,CH2CH2) , 2,60-2,33 (m, 6-H, 4-CH2) , 1,95 (brs, 5-OH) , 1,14 (d, J = 6,8Hz,6-Me) ppm;
IR u (KBr) 3457, 1804, 1773, 1735, 1724, 1209, 1099, 1067, 1049, 975, 744, 694 cm1.
UV (EtOH) Imax 250 (e =20535) nm;
MS (ED) 343,2 (M+,100);
[a]D -57,8° (c 10,56, CHC13) ;
Elementární analýza pro CigH^NOsS.
Vypočteno: C,66,46;H,6,16;N,4,08%.
Nalezeno: C,66,49; H,6,16; N, 4,07%.
• ·
KRYPTOFYCIN-55
Příklad 1
Příprava acetátu Kryptofycinu 55 (3) .
Do roztoku 1 (93 mg, 0,13 mmolů) v 659 ml methylenchloridu byl při teplotě 0 °C přidán triethylamin (55 ml, 0,40 mmolů), 4-dimethylaminopyridin (1,6 mg, 0,013 mmolů) a acetanhydrid (19 ml, 0,20 mmolů). Po míchání při teplotě 0 °C po dobu 1 hodiny reakce Byla ukončena 19 ml methanolu, reakční směs byla koncentrována na 0,5 objemu a přímo vložena do kolony mžikové chromatografie (19 g silikagelu pro mžikovou chromatografií). Vymývání ethylacetátem a hexany (3:1) poskytlo 88 mg (89%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz ςΗ NMR (CDC13) δ 7,3 8-7,3 1 (m, 5H), 7,24 (d, 1H, J =
2,1 Hz), 7,22-7,18 (m, 1H), 7,10 (dd, 1H, J = 8,5, 2,1 Hz) ,
6, 88 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6, 75 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,6
Hz) , 5,75 (dd, 1H, J = 15, 1,0 Hz) , 5,55 (d, 1H, J = 7,9
Hz) , 5,46 (dd, 1H, J = 9,8, 1,2 Hz) , 4,95 (dd, 1H, J = 11,
2,9 Hz) , 4,89 (ddd, 1H, J = 9,9, 9,9, 1,7 Hz) , 4,81 (d, 1H,
J = 9,8 Hz), 4,79-4,74 (m, 1H) , 3,91 (s, 3H), 3,39 (dd, 1H,
J = 13, 8,1 Hz), 3,22 (dd, 1H, J = 13, 4,1 Hz), 3,16 (dd, 1H, J = 14, 5,1 Hz), 3,07 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz), 2,652,55 (m, 2H), 2,41-2,39 (m, 1H) , 1,95 (ddd, 1H, J = 14, 13,
4,6 Hz), 1,86-1,77 (m, 1H), 1,73-1,66 (m, 1H) ,
1,27 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,09 (d, 3H, J =
(d, 3H, J = 6,7 Hz) , o, 97 (d, 3H, d = 6, 6 Hz) .
Příklad 2
Příprava sukcinátu Kryptofycinu 55 (4)
Do roztoku sloučeniny 1 (21 mg, 0,038 mmolů) a anhydridu kyseliny jantarové (5,7 mg, 0,057 mmolů) v 383 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán triethylamin (16 ml, 0,115 mmolů) a 4-dimethylaminopyridin (4,7 mg, 0,038 mmolů). Po míchání po dobu 19 hodin, bylo přidáno dalších
5.7 mg (0,057 mmolů) anhydridu kyseliny jantarové a 4,7 mg (0,038 mmolů) 4-dimethylaminopyridinu, následovalo míchání po dalších 29 hodin. Reakční směs byla zpracována 0,5 ml 1 N vodné kyseliny chlorovodíkové a promývána methylenehloridem (3 x 0,5 ml). Sloučené organické extrakty byly sušeny (Na2SO4) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na bílou pěnu. Čištění pomocí HPLC7 s obrácenou fází poskytlo 10 mg (32%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,36-7,31 (m, 6H) , 7,22 (br s, 1H) ,
7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,02 (br s, 1H) , 6,87 (d, 1H, J =
8,4 Hz), 6,61 (m, 1H) , 5, 94-5,87 (m, 2H) , 5,51 (d, 1H, J =
9.8 Hz), 4,95 (dd, 1H, J - 10, 2,8 Hz), 4,87-4,76 (m, 3H) ,
3,90 (s, 3H), 3,39 (dd, 1H, J = 16, 5,6 Hz), 3,28 (dd, 1H, J = 16, 8,2 Hz), 3,17 (dd, 1H, J = 16, 5,6 Hz), 3,05 (dd, 1H,
J = 16, 8,2 Hz), 2,68-2,62 (m, 1H), 2,60-2,46 (m, 2H), 2,452,28 (m, 3H), 2,01-1,93 (m, 2H), 1,88-1,70 (m, 2H), 1,26 (s, • ·
3H), 1,18 (s, 3H), 1,12 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,00 (d, 3H, J = 6,5 Hz) .
Příklad 3
Příprava (2'-di-terc.-butylfosfatyl)fenylacetátu
Kryptofycinu 55 (5)
Do roztoku sloučeniny 1 (0,102 mmolů), sloučeniny 24 (46 mg, 0,134 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (12 mg, 0,102 mmolů) v 250 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (21 mg, 0,134 mmolů) v 50 ml methylenchloridu. Po míchání při teplotě okolí po dobu 6 hodin reakční směs byla zředěna 1 ml směsi ethylacetát-hexany (3:1) a filtrován přes vrstvu celitu, promývání ethylacetát-hexany (3:1).
Filtrát a tekutina z promývání byly koncentrovány za sníženého tlaku na purpurovou pěnu. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí ethylacetát-hexany (4:1) poskytlo 86 mg (82%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,35 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 1,30-7,19 (m, 8H), 7,11 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz), 7,02 (t, 1H, J =
7,5 Hz), 6,87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,84 (d, 1H, J = 7,5 Hz),
6,73 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,7 Hz), 5,92 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 5,79 (dd, 1H, J = 15, 1,0 Hz), 5,43 (dd, 1H, J = 9,4,
1,8 Hz), 4,98 (dd, 1H, J = 12, 3,1 Hz), 4,81 (ddd, 1H, J =
9,9, 9,9, 1,8 Hz), 4,75 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,73-4,67 (m,
1H), 3,90 (s, 3H), 3,49 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,44-3,38 (m,
1H), 3,38 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,27-3,17 (m, 2H) , 3,10 (dd,
1H, J = 14, 8,2 Hz), 2,55-2,46 (m, 2H) , 2,37-2,27 (m, 1H) ,
0 0 ··· ··· • 0 0 0 0 · 0 0 0 · ·· φ 00 0 · 0 0 0000 · 000
0000··· *
1,95 (ddd, 1H, J = 14, 12, 4,5 Hz), 1,83-1,70 (m, 2H), 1,49 (s, 18H), 1,27 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,03 (d, 3H, J = 6,5 Hz), 0,97 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,92 (d, 3H, J = 7,0 Hz).
Příklad 4
Příprava disodné soli (2'-fosfatyl)fenylacetátu Kryptofycinu 55 (6)
Do roztoku sloučeniny 5 (84 mg, 0,081 mmolů) v 400 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (81 ml, 0,33 mmolů). Bledě žlutý roztok byl ponechán za míchání při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Po koncentraci za sníženého tlaku na bělavou pěnu byl surový dihydrogenfosforečnan rozpuštěn v 614 ml tetrahydrofuranu a zpracován 5,00 N vodným roztokem hydroxidu sodného (33 ml, 0,163 mmolů). Po míchání po dobu 10 minut byla směs koncentrována za sníženého tlaku na snědou pěnu. Surová sůl byla vyjmuta v 1 ml horkého acetonitrilu a 0,1 ml horké vody. Nerozpustné složky byly odfiltrovány a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získalo 69 mg (87 %) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky:
500 MHz 3H NMR (MeOH-d4) δ 7,58 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,387,32 (m, 2H), 7,32-7,28 (m, 3H) , 7,28 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 8,5, 2,1 Hz), 7,09 (ddd, 1H, J = 7,8, 7,8, 1,7 Hz), 6,98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,79-6,70 (m, 2H), 6,67 (d, 1H, J = 7,4 Hz), 5,91 (dd, 1H, J = 15, 1,7 Hz), 5,45 (dd, 1H, J = 9,4, 1,6 Hz), 5,06 (dd, 1H, J = 10, 2,7 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,89-4,80 (m, 1H), 4,47 (dd, 1H, J = 11, 3,8 Hz), 3,84 (s, 3H) , 3,67 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,45 (d, 1H, J = 14 Hz), 3,42 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,18 (dd, 1H, J • · = 14, 3,8 Hz), 3,12 (d, 1H, J = 14 Hz), 2,77 (dd, 1H, J =
14, 11 Hz), 2,67-2,60 (m, 1H) , 2,56-2,48 (m, 1H), 2,31-2,22 (m, 1H), 1,96-1,88 (m, 1H), 1,85-1,77 (m, 2H), 1,22 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,03 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 0,98 (d, 3H, J - 6,1 Hz), 0,93 (d, 3H, J = 7,1 Hz) .
Příklad 5
Příprava hydrochloridové soli nikotinoátu (7)
Do roztoku sloučeniny 1 (50 mg, 0,071 mmolů) v 354 ml pyridinu byl při teplotě okolí přidán hydrochlorid nikotinoylchloridu (15 mg, 0,085 mmolů) následovaný triethylaminem (23 ml, 0,170 mmolů). Po míchání po dobu 1,5 hodin byl přidán 4-dimethylaminopyridin (8,6 mg, 0,071 mmolů). Po míchání 5 hodin byl přidán další triethylamin (23 ml, 0,170 mmolů), 4-dimethylaminopyridin (8,6 mg, 0,071 mmolů) a hydrochlorid nikotinoylchloridu (15 mg, 0,085
Kryptofycinu 55 mmolů) spolu s 50 ml pyridinové promývací lázně. Po míchání 18 hodin reakční směs byla zpracována 0,5 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a promývána methylenchloridem (4x1 ml). Sloučené organické extrakty byly sušeny (Na2SO4) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na světle hnědý olej. Chromatografie (14 g silikagelu pro mžikovou chromatografií) , vymývání směsí ethylacetáthexany (10:1) poskytlo 49 mg (85%) volné báze ve formě bílé pěny. Nikotinoát byl rozpuštěn v 1 ml methylenchloridu a zpracován 1,0 M roztokem chlorovodíku v diethyletheru (90 ml, 0,090 mmolů). Čirý bezbarvý roztok byl ponechán stát při teplotě okolí po dobu 5 minut. Odebrání rozpouštědla za sníženého tlaku dalo 51 mg sloučeniny z názvu ve formě bílé
• · pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 8,94 (s, ÍH) , 8,78 (br s, ÍH) , 8,29 (d, ÍH, J = 7,0 Hz), 7,57 (br s, ÍH) , 7,38 (d, 2H, J = 7,1
Hz), 7,30-7,16 (m, 5H), 7,10 (dd, ÍH, J = 8,4, 1,7 Hz), 6,88 (d, ÍH, J = 8,4 Hz), 6,71 (m, ÍH), 5,80 (d, ÍH, J = 15 Hz),
5.74 (d, ÍH, J = 9,6 Hz), 5,56 (br s, ÍH), 5,00 (d, ÍH, J =
9,6 Hz), 4,95 (t, ÍH, J = 8,9 Hz), 4,84 (d, ÍH, J = 9,8 Hz), 4,77-4,72 (m, ÍH) , 3,91 (s, 3H) , 3,39 (dd, ÍH, J = 13, 8,2 Hz), 3,23-3,14 (m, 2H), 3,06 (dd, ÍH, J = 14, 7,6 Hz), 2,812.74 (m, ÍH), 2,62-2,45 (m, 2H), 1,93 (ddd, ÍH, J = 14, 12,
4.8 Hz), 1,78-1,70 (m, ÍH), 1,66-1,59 (m, ÍH), 1,25 (s, 3H), 1,20 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,19 (s, 3H) , 0,98 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,84 (d, 3H, J = 6,5 Hz) .
Příklad 6
Příprava acetátu N-methylpyridinium Kryptofycinu 55 (8)
Do roztoku sloučeniny 1 (53 mg, 0,075 mmolů) v 751 ml methylenchloridu při teplotě 0 °C byl přidán triethylamin (13 ml, 0,090 mmolů) následovaný 2-fluor-l-methylpyridiniump-toluensulfonátem (23 mg, 0,083 mmolů). Heterogenní reakční směs byla zahřáta na teplotu okolí a míchána po dobu 3,5 hodin a poté bylo přidáno dalších 11 mg (0, 039 mmolů) 2fluor-l-methylpyridinium-p-toluensulfonátu. Po míchání po dobu 14,5 hodin bylo přidáno dalších 11 mg (0,039 mmolů) 2fluor-l-methylpyridinium-p-toluensulfonátu, následovaných dalšími 11 mg (0,039) 2-fluor-l-methylpyridinium-ptoluensulfonátu a 13 ml (0,090) triethylaminu po 2,5 hodinách. Po míchání dodatečnou 1 hodinu reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku na oranžovou pěnu. Čištění chromatografií HPLC8 s obrácenou fází se současnou • · • · · · · · · • ···· · · · · · ·· · • ·· · · · ·····« ··· · · · ······· · · • · · · ·· · ·· ·· aniontovou výměnou (acetát za p-toluensulfonát) následované lyofilizací dalo 30 mg (47%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky:
500 MHz XH NMR (DMSO-d6) δ 8,65-8,58 (m, 2H) , 8,36 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 7,68 (d, 1H, J = 5,9 Hz), 7,60 (d, 1H, J = 6,6
Hz) , , 7,48 (t, 1H, J = 6,6 1 Hz), 7,35-7,21 (m, 5H), 7,19 (dd,
1H, J = 8,5, 1,9 Hz) , 7,05 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,49 (ddd,
1H, J = 16, 13, 4,0 Hz ), 5 ,91 (d, 1H, J = 16 Hz), 5,72 (d,
1H, J = 8,0 Hz) , 5, 66 (dd, 1H, J = 8,0, 1,9 Hz), 5,32-5,27
(m, 1H), 4,73 (dd, 1H, J = 9,7, 4,3 Hz), 4,24 (ddd, 1H, J =
11, 9,8, 3,7 Hz), 3,93 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,32 (dd, 1H,
J = 13, 9,3 Hz), 3,05-2,97 (m, 2H), 2,77-2,57 (m, 3H), 2,542,47 (m, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,68-1,62 (m, 1H), 1,55-1,46 (m, 1H), 1,37-1,30 (m, 1H) , 1,15 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,13 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,88 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,73 (d, 3H, J = 6,5 Hz) .
Příklad 7
Příprava N-t-Boc-3-(3-chlor-4-methoxyfenyl)-(D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (9)
Do roztoku sloučeniny 1 (23 mg, 0,033 mmolů), N-t-Boc-3-(3chlor-4-methoxyfenyl)-(D)-alaninu4c (16 mg, 0,049 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (několik krystalů) v 143 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3dicyklohexylkarbodiimidu (10 mg, 0,049 mmolů) v 20 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 2 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (2:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát-hexany (2:1). Filtrát a promývací tekutiny byly koncentrovány za sníženého tlaku na • · • 0
- 100 bezbarvý olej. Chromatografie (14 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 ethylacetát-hexany) poskytla 29 mg (88 %) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,42-7,27 (m, 5H), 7,24 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,25-7,18 (m, 1H) , 7,09 (dd, 1H, J = 8,4, 1,9 Hz), 6,91-6,86 (m, 2H) , 6, 84-6, 70 (m, 3H) , 5,75 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,53 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,00 (dd, 1H, J = 10, 2,9 Hz), 4,90-4,80 (m, 2H) , 4,78-4,71 (m, 1H), 4,63 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 4,19-4,12 (m, 1H) , 3,91 (s, 3H), 3.B8 (s, 3H), 3,40 (dd, 1H, J = 13, 8,1 Hz), 3,253,12 (m, 2H), 3,07 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz), 2,67-2,57 (m, 2H), 2,39-2,27 (m, 2H), 2,15 (dd, 1H, J = 14, 8,0 Hz), 2,01 (ddd, 1H, J = 14, 12, 4,2 Hz), 1,87-1,76 (m, 2H) , 1,39 (s,
9H), 1,27 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,09-1,04 (m, 6H), 1,01 (d,
3H, J = 6,3 Hz) .
Příklad 8
Příprava hydrochloridové soli 3-(3-chlor-4-methoxyfenyl)(D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (10)
Do roztoku sloučeniny 9 (27 mg, 0,027 mmolů) v 265 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (33 ml, 0,133 mmolů). Po míchání po dobu 3 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 26 mg (96%, přepočteno pro 5 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,79 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 7,49-
7,45 (m, 2H) , 7,43-7,48 (m, 3H) , 7,31 (d, 1H, J = = 2,0 Hz) ,
7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz) , 7,13 (d, 1H, J = = 2,2 Hz) ,
7,07- 6, 95 (m, 3H), 6,11 (ddd , 1H, 15, 13, 3,8 Hz), 5, 98 (dd,
• ·
- 101 1H, J = 15, 1,8 Hz), 5,69 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,22 (d, 1H, J
= 10 Hz) , 5,18 (dd, 1H, J = 10, 2,5 Hz), 4,89-4,80 (m, 1H) ,
4,53 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 4,16 (dd, 1H, J = = 10, 4,4
Hz) , 3,88 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,51 (dd, 1H, J = 13, 9,9
Hz) , 3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,7 Hz), 3,14 (dd, 1H, , J = 13,
2,3 Hz) , 2,82-2,75 (m, 3H), 2,45 (dd, 1H, J = 15, 4,5 Hz) ,
2,42 -2,34 (m, 1H), 2,08-2,1 30 (m, 1H) , 1,97-1,86 (m, 3H),
1,27 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,16 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,10
(d, 3H, J = 6,1 Hz) , 1,06 (d , 3H, J = 6,0 Hz).
Příklad 9
Příprava N-t-Boc-glycinát Kryptofycinu 55 (11)
Do roztoku sloučeniny 1 ( 118 mg, 0,167 mmolů), N-t-Bocglycinu (44 mg, 0,251 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (2,0 mg, 0,0167 mmolů) v 490 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (52 mg, 0,251 mmolů) v 67 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 50 minut, kalně bílá reakční směs byla zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývána směsí ethylacetáthexany (3:1) koncentrovány promývací tlaku na tekutina bezbarvý
Filtrát a za sníženého
Chromatografie (19 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 3:1/ethylacetát-hexany) poskytla 138 mg (96%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,34 (s, 5H), 7,24 (d, 1H, J - 2,0 Hz), 7,23-7,19 (m, 1H), 7,10 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,79-6,70 (m, 1H), 5,71 (d, 1H, J = 13 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,97 (dd, 1H, J = 11, 2,7 Hz), 4,89 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,83 byly olej .
• « • ·
102 • · · · · · ··· · · · · • · · · · · ··**·· ··· ··· ····«·· · · • · ·· ·· · · · · · (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,79-4,72
3,91 (s, 3H) , 3, 66 (dd, 1H, J =
2H) , 3, 21 (dd , 1H, J = 13, 4,0
5,1 Hz) , 3, OB (dd, 1H, J = 15,
2,47 -2,38 (m, 1H) , 1,95 (ddd, 1H
1,77 (m, 1H) , 1,75- 1, 67 (m, 1H) ,
1,20 (s, 3H) , 1, 08 (d, 3H, J = 7
Hz) , 0, 98 (d, 3H, J = 6,5 Hz) .
(m, 1H) , 4,68 (br s, 1H) , : 18, 5,3 Hz), 3,42-3,35 (m, Hz), 3,17 (dd, 1H, J = 15, 7,6 Hz), 2,66-2,57 (m, 2H), , J = 14, 12, 4,7 Hz), 1,851,43 (s, 9H), 1,27 (s, 3H), ,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 6,7
Příklad 9
Příprava hydrochloridu glycinátu Kryptofycinu 55 (12)
Do roztoku sloučeniny 11 (122 mg, 0.141 mmolů) v 471 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (178 ml, 0,107 mmolů). Po míchání po dobu 1 hodiny 20 minut byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 120 mg (99 %, přepočteno pro 7 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz JH NMR (MeOH-d4) δ 7,81 (dd, 1H, J = 8,5, 2,2 Hz),
7,46-7,41 (m, 2H) , 7,40-7,36 (m, 3H) , 7,31 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,10 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,7 Hz), 5,97 (dd, 1H, J =
15, : 1,7 H: z) , 5,55 (d, 1H, J = 9, 9 Hz) , 5 >, 18 (d, 1H, J = 9 ,9
Hz) , 5,14 (dd, 1H, J = 10, 2,8 Hz) , 4,84 (t, 1H, J = 10 Hz ) ,
4,52 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 3, 87 (s, 3H) , 3,78 (d, 1H, J
= 18 Hz) , 3,50 (dd , 1H, J = 13, 9, 8 Hz) , 3,23 (d, 1H, J = 18
Hz) , 3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz) , 3,13 (dd, 1H, J = 13,2 4
Hz), 2,80-2,69 (m, 3H) , 2,41-2,32 (m, 1H) , 1,99-1,92 (m, 1H), 1,91-1,81 (m, 2H), 1,25 (3, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,12 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,04 (d, 3H, 6,2
Hz)
- 103 Příklad 10
Příprava N-t-Boc-b-alaninátu Kryptofycinu 55 (13)
Do roztoku sloučeniny 1 (102 mg, 0,145 mmolů), N-t-Boc-balaninu (41 mg, 0,217 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (18 mg, 0,145 mmolů) v 400 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (45 mg, 0,217 mmolů) v 82 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 3,5 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3;1, 1 ml), míchán po dobu 10 minut a filtrován přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetáthexany (3:1) koncentrovány
Filtrát a za sníženého přomývací tlaku na tekutina bezbarvý byly olej .
Chromatografie (21 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 potom 4:1/ethylacetát-hexany) poskytla 121 mg (95%)
sloučeniny z názvu ve formě
500 MHz XH NMR (CDC1 3) δ '
3H), 7,32 (d, 1H, J = 2,1
Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 t
Hz), 5,96 (dd, 1H, J = = 15,
5 11-5,06 (m, 1H), 5, 08 (d
1H), 4,50 (dd, 1H, J = 11,
(m, 1H), 3,20 (dd, 1H , J =
14 Hz), 3,05- 2,92 (m, , 2H) ,
1H), 2,24 (dt, 1H, J = = 16,
1,79 (m, 3H), 1,43 (s, r 9H),
(d, 3H, J = 7,0 Hz) , 1,06 1
;), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 , 6,72 (ddd, 1H, J = 15 13 3,7
Hz) , 5,51 (d, 1H, J = 9,8 Hz) 1H, J = 9,8 Hz) , 4,90-4,83 (m,
Hz), 3,86 (s, 3H), 3,52-3,46 , 3,6 Hz), 3,13 (br d, 1H, J = - 2,92 (m, 2H), 2,79-2,63 (m, 3H), 2,45-2,37 (m, t, 1H, J = 16, 7,0 Hz), 2,08-1,99 (m, 1H), 1,96, 1,43 (s, 9H), 1,25 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,12 7,0 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,02 (d, 3H,
J = 6,1 Hz).
104 • 0 00 09 · 00 00 • •0 0 0 0 0 0 0 0 « 000 · 0 0 0 0 0 0 0
00 000 000900 000 000
0000000 0 «
00 00 0 00 00
Příklad 11
Příprava hydrochloridové soli b-alaninátu Kryptofycinu 55 (14)
Do roztoku sloučeniny 13 (119 mg, 0,136 mmolů) v 452 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (170 ml, 0,679 mmolů). Po míchání po dobu 2 hodin 15 minut, kalně bílá reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 110 mg (96 %, přepočteno pro 4 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) Ó 7,80 (dd, 1H, J = 9,7, 2,3 Hz), 7,45-7,40 (m, 2H), 7,39-7,32 (m, 3H), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,68 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,8 Hz), 5,98 (dd, 1H, J = 15, 1,7 Hz), 5,48 (dd, 1H, J
= 9,4 1,0 Hz) , 5,15-5,11 (m, 1H), 5,13 (d, 1H, J = 9,4 Hz),
4,82 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,51 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 3,90
(s, 3H), 3,50 (dd, 1H, J = 14, 9,8 Hz) , 3,20 (dd, 1H, J =
14, 3,7 Hz), 3,14 (dd, 1H, J = 14, 2,4 Hz), 2,85 (t, 2H, J =
7,0 Hz) , 2,80-2,65 (m, 5H) , 2,54 (dt, 1H, J = 17, 7,4 Hz),
2,42 -2,33 (m, 1H), 2,22 (dt, 1H, J = 17, 6,7 Hz), 1,90-1,81
(m, 3H) , 1,25 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,13 (d, 3H, J = 7,1
Hz) , 1,08 (d, 3H, J = 6, 3 Hz) , 1,04 (d , 3H, J = 6,2 Hz) .
Příklad 12
Příprava N-t-Boc-g-aminobutyrátu Kryptofycinu 55 (15)
Do roztoku sloučeniny 1 (48 mg, 0,068 mmolů), N-t-Boc-4aminomáselná kyselina (18 mg, 0,088 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (8 mg, 0,068 mmolů) v 150 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3- 105 • 4 ·· • · · • · · ·Β • · · · · • · · · ·· <··
4· ·
Β · · • · · · • · ···· • · ·
9 ··
9 9 9 i · · ·
9·9 999
9 f
dicyklohexylkarbodiimidu (18 mg, 0,088 mmolů) v 50 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 5 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 5 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát-hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 3:1/ethylacetát-hexany) poskytl 55 mg (90%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,38-7,32 (m, 5H) , 7,24 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 7,22-7,19 (m, 1H), 7,10 (dd, 1H, J = 8,4, 1,9 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,9 Hz), 5,78 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,60-5,55 (m, 1H), 5,49 (dd, 1H, J = 9,8, 1,4 Hz), 4,96 (dd, 1H, J = 11, 3,0 Hz), 4,89 (t, 1H, J = 9,2 Hz), 4,81 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,78-4,70 (m,
1H), 4,44 (br s, 1H) , 3,91 (s, 3H) , 3,40 (dd, 1H, J = 14, 8,1 Hz), 3,22 (dd, 1H, J = 14, 4,1 Hz), 3,22-3,15 (m, 1H) , 3,08 (dd, 1H, J = 14, 7,8 Hz), 2,89-2,82 (m, 2H) , 2,67-2,56 (m, 2H), 2,47-2,38 (m, 1H), 2,11-2,04 (m, 1H), 2,00-1,77 (m,
3H), 1,75-1, 67 (m, 1H) , 1,45 (s, 9H) , 1,50-1,40 (m, 2H) , 1,27 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,09 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,98 (d, 3H, J = 6,6 Hz).
Příklad 13
Příprava hydrochloridové soli g-aminobutyrátu Kryptofycinu 55 (16)
Do roztoku sloučeniny 15 (53 mg, 0,059 mmolů) v 297 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 1,0 M roztok chlorovodíku v diethyletheru (297 ml, 0,297 mmolů). Výchozí materiál precipitoval ve formě bílé pasty, která byla znovu • ·
106 • · · 9 · · ··· « 9 9 9
9 9 9 0 9 9 9999 9 999 999
9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 ·· rozpuštěna s dalšími 150 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 hodin bylo přidáno dalších 59 ml (0,059 mmolů) roztoku chlorovodíku . Míchání pokračovalo po dobu dalších 14 hodin a reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 49 mg (100%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (DMSO-d6) d 8,49 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,72 (br
s, 3H) , 7,44-7,33 (m, 5H), 7,32 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 7,29
(dd, 1H, J = 9,4, 2,6 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = B,5, 1,9 Hz) ,
7,06 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,48 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,9
Hz), 5,87 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,. 37 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 5, 33
(d, 1H, J = 9,7 Hz), 5,04-5,01 (m, 1H), 4,73 (t, 1H, J = 11 Hz), 4,25 (ddd, 1H, d = 12, 9,8, 3,5 Hz), 3,82 (s, 3H) , 3, 40-3,30 (m, 1H), 3,07-3,01 (m, 2H) , 2,72 (dd, 1H, J = 14,
12 Hz) , 2,65-2, 47 (m, 4H) , 2,3B-2,28 (m, 1H) , 2,21 (dt, 1H,
J = = 17, 7,5 Hz ), 1,97 (dt , 1H, J = 17, 7,5 Hz), 1,80-1,70
(m, 3H) , 1,54-1 ,46 (m, 2H) , 1,17 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,01
(d, 3H, J = 7,0 Hz) , 0 ,99 (d, 3H, J = 5,8 Hz) , 0,95 (d, 3H,
J 5,8 Hz) .
Příklad 14
Příprava H-t-Boc-(L)-alaninátu Kryptofycinu 55 (17)
Do roztoku sloučeniny 1 (103 mg, 0,146 mmolů), N-t-Boc-(L)alaninu (41 mg, 0,219 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (18 mg, 0,146 mmolů) v 400 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (45 mg, 0,219 mmolů) v 87 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 5 hodin 50 minut byla kalně bílá reakční směs zpracována dalšími 5,5 mg (0,029 mmolů) N-t-Boc-(L)-alaninu, 6,0 mg (0,029 mmolů) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a několika • ·
- 107 • · » krystaly 4-dimethylaminopyridinu. Po míchání další 1 hodinu byla reakční směs zředěna směsí ethylacetátem-hexany (3:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrován přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (22 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 1,5:1 potom 2:1 potom 4:1/ethylacetáthexany) poskytla 96 mg (75%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,35-7,30 (m, 5H) , 7,26-7,21 (m,
2H) , 7,10 (dd, 1H, J = B,4, 1,9 Hz ), 6,88 (d, 1H, J = 8 ,4
Hz) , 6,76 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,2 Hz) , 5,77 (d, 1H, J = 15
Hz) , 5,52 (d, 1H, 7,6 Hz), 5,44 (d , 1H, J = 9,7 Hz) , 4, 98
(dd, 1H, J = 11, 2,5 Hz ), 4,85-4,81 (m, 2H), 4,75 (q, 1H, J
= 6, 8 Hz), 4,56 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 4,01-3,96 (m, 1H), 3, 91
(s, 3H) , 3,41 (dd, 1H, J = 13, 8,3 Hz), 3,20 (dd, 1H, J =
13, 4,0 Hz), 3,16 (dd, 1H, J = 15, 5,9 Hz), 3,08 (dd, 1H, J = 15, 7,6 Hz), 2,65-2,57 (m, 2H) , 2,40-2,31 (m, 1H), 2,021,96 (m, 1H), 1,87-1,73 (m, 2H), 1,43 (s, 9H) , 1,27 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H), 1,11-1,02 (m, 9H), 0,99 (d, 3H, J = 6,3 Hz).
Příklad 15
Příprava hydrochloridové soli (L)-alaninátu Kryptofycinu 55 (18)
Do roztoku sloučeniny 17 (95 mg, 0,108 mmolů) v 361 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (135 ml, 0,542 mmolů). Po míchání po dobu 2,5 hodin byla kalně bílá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 90 mg (96%, přepočteno pro 6 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé
108 • · ··
• * <k · pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 8,54 (d, 1H, 1,6 Hz), 7,81 (br d,
1H, J = 9,7 Hz), 7,46-7,44 (m, 2H), 7,39-1,37 (m, 3H), 7,32
(d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz), 7,01
(d, 1H, J = 2,0 Hz), 6,69 (ddd, 1H, J = 15, 11, 3,7 Hz) ,
5,9 9 (d, 1H, 15 Hz), 5,55 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 5,20 (d, 1H,
J = 9,8 Hz) , 5,15 (dd, 1H, J = 11, 2,7 Hz), 4,78 (t, 1H, J =
11 Hz) , 4,53 -4,50 (m, 1H), 3,87 (s, 3H) , 3,65 (q, 1H, J =
7,3 Hz) , 3,5 0 (dd, 1H, J = 13, 9,8 Hz), 3,20 (dd, 1H, J =
14, 3, 5 Hz) , 3,14 (br d, 1H, J = 13 Hz), 2,81-2,71 (m, 3H) ,
2,41-2,34 (m, 1H) , 1,98-1,93 (m, 1H) , 1,88-1,82 (m, 2H) ,
1,41 (d, 3H, J = 7,3 Hz), 1,25 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H) , 1,13 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,04 (d, 3H, 6,0 Hz) .
Příklad 16
Příprava N-t-Boc-(D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (19)
Do roztoku sloučeniny 1 (25 mg, 0,035 mmolů), N-t-Boc-(D)alaninu (10 mg, 0,053 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,4 mg, 0,0035 mmolů) v 130 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (11 mg, 0,053 mmolů) v 47 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 5,5 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrován přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacétát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1/ethylacetát-hexany) poskytla 26 mg (83%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
- 109
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,49-7,29 (m, 5H), 7,24 (d, 1H, J =
2,0 Hz) , 7,22-7,18 (m, 1H), 7,09 (dd, 1H, 8,4, 2, 0 Hz), 6,87
(d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,76 (ddd, 1H, J = 15, 13 , 4,4, Hz),
5,77 (d, 1H, 15 Hz ), 5,56 (d, 1H, J = 9, 9 Hz) , 5 48 (d, 1H,
J = 7,7 Hz), 5,01 (dd, 1H, J = 10, 2,6 Hz) , 4,91 ( :t, 1H, J =
9,4 Hz) 4 84 (d, 1H, J = 9,9 Hz) 4,81-4,73 (m, 2H), 3,99-
3, 93 (m, 1H), 3,91 (s, 3H) , 3,39 (dd, 1H, J = 13 , 8 0 Hz),
3,22 (dd, 1H, d = 13, 3,6 ; Hz), 3 5,17 (dd, 1H, J = 14, 5,0
Hz) , 3,08 (dd, 1H, J = 14 Hz), 2, 68-2,58 (m, 2H), 2,42-2,35
(m, 1H) , 2,04-1,94 (m, 1H), 1,87-1 ,50 (m, 2H), 1,4 2 (s, 9H),
1,27 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,09 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,04
(d, 3H, J = 6,4 Hz ), 0,99 (d, 3H, J = 6,3 Hz) , 0, 65 (d, 3H,
J = 6,8 Hz).
Příklad 17
Příprava hydrochloridové soli (D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (20)
Do roztoku sloučeniny 18 (24 mg, 0, 027 mmolů) v 274 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (34 ml, 0,137 mmolů). Po míchání po dobu 3,5 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 24 mg (100%, přepočteno pro 8 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz 1 H NMR (MeOH-d4) δ 1,79 (d, 1H, J = 5 Hz) , 7,47 -7, 40
(m, 2H) , 7,40-7,36 (m, 3H), 7,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz) , 7, 20
(dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz) , 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 6, 71
(ddd , 1H, J = 15, 13, 3,7 Hz), 5,98 (dd, 1H, J = 15, , 1 ,6
Hz) , 5, 65 (d, 1H, J = 10 Hz) , 5,20 (d, 1H, J = 10 Hz) , 5, 17
(dd, 1H, J = 11, 2,5 Hz), 4,88-4,78 (m, 1H), 4,53 (dd, 1H, J
• ·
110 ) 9 9 • · • · · · • 9 * • · I
I • · 9 • · · · · 9 • 9
9 9 9
- 11 , 3,7 Hz) , 3,95 (q, 1H, J =1,2 Hz), 3,8 7 (s, 3H) , 3,51
(dd, 1H, J = 13, 9,8 Hz), 3, 20 (dd, 1H, J = 14, 3, 6 Hz) ,
3,14 (dd, 1H, J = 13, 2,3 Hz) , 2,81-2,74 (m, 3H) , 2,41- -2,34
(m, 1H), 2,07- -1,99 (m, 1H), 1, 96-1,84 (m, 2H) , 1,26 (s, 3H) ,
1,21 (s, 3H), 1,15 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,09 (d, 3H , J = = 6,0
Hz) , 1,05 (d, 3H, J = 6,0 Hz) , 0,80 (d, 3H, J = 7,4 Hz) .
Příklad 18
Příprava Na-Ne-di-t-Boc-(L)-lysinátu Kryptofycinů 55 (21)
Do roztoku sloučeniny 1 (105 mg, 0,149 mmolů), Na-Ne-di-tBoc- (L)-lysinu (67 mg, dimethylaminopyridinu (18 mg, bezvodého methylenchloridu byl
0,193 mmolů) a 40,149 mmolů) v 400 ml při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (40 mg, 0,193 mmolů) v 96 ml methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 hodin byla kalně bílá reakční směs zpracována dalšími 10 mg (0,030 mmolů) Na-Ne-di-t-Boc-(L)-lysinu a 6,1 mg (0,030 mmolů) 1,3dicyklohexylkarbodiimidu jako roztoku v 100 ml methylenchloridu. Po míchání další 1 hodinu byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bílou pěnu, která byla znovu vystavena výše uvedeným podmínkám použitím 34 mg (0,097 mmolů) Na-Ne-di-t-BOC-(L)lysinu, 20 mg (0,097 mmolů) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a 9,1 mg (0,075 mmolů) 4-dimethylaminopyridinu. Po míchání po dobu 1,5 hodiny byla reakční směs zpracována jak bylo uvedeno výše a tím se získala surová bílá pěna. Chromatografie (21 g siiikagelu pro mžikovou chromatografií,
- 111 ··· ♦ · · · · · * 4» 4 4 4 4 · 4 4 4 · 4 4 · » · * * · · ······ · · · · · · •* ·· 44 4 4* ··
1:1 potom 4:1/ethylacetát-hexany) poskytla 112 mg (73%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-cL,) δ 7,42-7,37 (m, 2H) , 7,36-7,29 (m,
3H), 7,27 (br s, 1H), 7,16 (br d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,97 (d,
1H, J = 8,5 Hz), 6,72 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,5 Hz), 5,92 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,50 (d, 1H, d = 11 Hz), 5,11-5,04 (m,
2H), 4,84 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,48 (dd, 1H, J = 11, 3,6 Hz), 3,84 (s, 3H) , 3,75 (br s, 1H) , 3, 50-3,43 (m, 1H) , 3,17 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,11 (d, 1H, J = 14 Hz), 2,97-2,91 (m, 2H), 2,76-2,58 (m, 3H) , 2,36-2,27 (m, 1H) , 1, 98-1,80 (m,
3H), 1,48-1,38 (m, 2H) , 1,43 (s, 9H) , 1,40 (s, 9H) , 1,351,25 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,15-1,09 (m, 2H), 1,07 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 1,01 (d, 3H, J = 6,1Hz).
Příklad 19
Příprava di-hydrochloridové soli (L)-lysinátu Kryptofycinu TíT(22)
Do roztoku sloučeniny 21 (107 mg, 0,103 mmolů) v 345 ml methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (155 ml, 0,621 mmolů). Po míchání po dobu 4 hodin byla kalně bílá reakční směs filtrována. Shromážděná bílá pevná látka byla promývána methylenchloridem (2x1 ml) a sušena za sníženého tlaku při teplotě okolí a tím se získalo 87 mg (93%) sloučeniny z názvu:
500 MHz XH NMR (MeOH-d„) δ 8,61 (d, 1H, J = 7,7 40-7,38 Hz) , (m, 7,81 (d, 3H), 7,31
1H, J = 7,7 Hz) , 1,47-7,44 (m, 2H), 7,
(d, 1H, J = 2,2 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,2 Hz), 7,00
(d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,63 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,0 Hz),
• ·
- 112 • ·
6,00 (dd, 1H, J = 15, 1,6 Hz), 5,55 (d, 1H, J = 9,8 Hz) ,
5,20 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 5,15 (dd, 1H, J = 10, 2,9 Hz) ,
4,68 (t, 1H, J = 11 Hz), 4,55-4,49 (m, 1H), 3,87 (s, 3H) ,
3,79 (t, 1H, J = 5,6 Hz), 3,52 (dd, 1H, J = 14, 9,9 Hz) ,
3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,13 (dd, 1H, J = 13, 2,4
Hz) , 3,06 -2,98 (m , 1H) , 2,94-2,87 (m, 1H), 2,85-2,74 (m,
3H) , 2,45 -2,38 (m , 1H), 1, 98-1, 76 (m, 5H) , 1,71-1,64 (m,
2H) , 1,39- -1,30 (m, 2H), 1,25 (s, 3H) , 1,18 (d , 3H, J = 8,2
Hz) , 1,17 (s, 3H), 1,08 (d, 3H, J = 6,2 Hz) , 1 .,05 (d, 3 H, J
= 6,1 Hz) .
Příklad 20
Příprava kyseliny 2'-(di-terc.-butylfosfatyl)fenyloctové (24)
Do roztoku 2'-hydroxyfenethylalkoholu (1,05 g, 7,60 mmolů) v 15,2 ml Ν,Ν-dimethylformamidu byl při teplotě 0 °C přidán imidazol (621 mg, 9,11 butyldimethylsíTylchlorid (1,26 g, mmolů)
8,34 mmolů) terč.Po míchání při teplotě 0 °C po dobu 40 minut a při teplotě okolí po dobu 45 minut bylo přidáno dalších 155 imidazolu
229 mg :i,52 mg (2,28 mmolů) mmolů) terc.butyldimethylsilylchloridu. Reakční směs byla ponechán za míchání po dobu dalších 15 minut a poté bylo přidáno 150 ml terč.-butyl-methyletheru. Směs byla promýván studenou IN vodnou kyselinou chlorovodíkovou (1 x 15 ml) následovanou vodou (1 x 15 ml). Organická vrstva byla sušena (Na2SO4) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku na žlutý olej. Chromatografie (70 g silikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí hexany-ethylacetát (5:1) poskytlo 1,81 g (94%) 1° silyletheru ve formě bledě bělavého • · « « · « ·
113 « · · · · • · · * • · · ♦ • · · · oleje. Do roztoku silyletheru (506 mg, 2,00 mmolů) a diterc .-butyl-diethylfosforamiditu (600 ml 93%, 2,00 mmolů) v 2 ml tetrahydrofuranu byl při teplotě okolí přidán 1-Htetrazol (421 mg, 6,01 mmolů). Po míchání po dobu 45 minut byla reakční směs ochlazena na teplotu -10 °C a rychle zpracována roztokem kyseliny m-chlorperbenzoové (450 mg, 99%, 2,61 mmolů) v 3,6 ml methylenchloridu. Kalně bílá reakční směs byla ponechán zahřát se na teplotu okolí a míchána po dobu 15 minut. Reakce byla ukončena 4 ml 10% vodného hydrogensulfitu sodného, reakční směs byla intenzívně míchána po dobu 10 minut, zředěna 15 ml terc.butyl-methyletheru a promývána 10% vodným hydrogensulfitem sodným (2 x 10 ml) následovaným 0,5 N vodným hydroxidem sodným (2 x 10 ml). Organická vrstva byla sušena (Na2SO4), filtrována a koncentrována za sníženého tlaku na bezbarvý olej (941 mg), který byl použit přímo v následujícím kroku. Surový fosforečnan byl rozpuštěn v 10 ml tetrahydrofuranu, ochlazen na teplotu 0 °C a zpracován 1 M roztokem tetra-nbutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (2,4 ml, 2,4 mmolů). Po míchání při teplotě 0 °C po dobu 20 minut a při teplotě okolí po dobu 1,5 hodiny byla reakční směs zředěna 60 ml terc.-butyl-methyletheru a promývána vodou (1 x 10 ml), následovanou solankou (1 x 10 ml). Organická vrstva byla sušena (Na2SO4) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku na žlutý olej. Chromatografie (50 g silikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí ethylacetát-hexany (3:1) poskytlo 525 mg (79%) 1° alkoholu ve formě bělavého oleje. Do roztoku alkoholu (123 mg, 0,372 mmolů) ve směsi acetonitril-tetrachlormethan (1:1, 1,49 ml) byla při teplotě okolí přidána voda (1,1 ml) následovaná jodistanem sodným (239 mg, 1,12 mmolů) a hydrátem chloridu ruthenitého (1,8
114
mg, 0,0082 mmolů). Hnědá směs byla ponechána za rychlého míchání při teplotě okolí po dobu 55 minut. Po koncentraci za sníženého tlaku a chromatografíe (8 g mžikovou chromatografií, vymývání směsí ethylacetát) bylo získáno 109 mg (85%) sloučeniny z názvu ve formě purpurového oleje:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,49 (d, 1H, J = 7,53 Hz), 7,30-7,15 (m, 3H), 3,77 (s, 2H), 1,51 (s, 18H).
silikageiu pro 10% methanolPříklad 21
Sloučenina z Příkladů 21-26 byly připraveny způsoby, které jsou v zásadě stejné jako způsoby popsané výše.
Spektrální vlastnosti Kryptofycinu-129
EIMS m/z (relativní intensita) 654/656 (2,1/0,8, M-HBr),
412/414 (9,7/3,6), 280/282 (10,3/3,5), 227 (15,2), 195/197 (SCr/1716, 3), 105 (100), 91 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 654,2687 (C35H43C1N2O8, D 2,1 mmu) .
XH NMR (CDC13) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) 7-brom-5,8dihydroxy-6-methyl-8-fenyl-2-oktenová kyselina (A) 5,76 (2,d; 15,3), 6,68 (3,ddd; 15,3,9,9 a 5,6, 2,29 (4,ddd; 14,2,
10,6 a 10,4), 2,67 (4,dd; 14,2 a 5,4), 4,95 (5,ddd;10,3,
10,3 a 1,8), 2,47 (6,m), 1,15 (6-Me, d; 6,5), 4,29 (l,dd; 9,1 a 2,1), 4,84 (8,d; 9, 0, 7,34-7,39 (10/11/12/13/14,m); 3chlor-4-methoxyfenylalanin (B) 4,80 (2,m), 5,73 (2-NH, d;
8,8), 3,01 (3, dd; 14,6 a 7,6), 3,16 (3, dd; 14,3 a 5,6),
7,23 (5, d; 2,0), 3,87 (7-OMe, s), 6,84 (8, d; 8,4), 7,09 • 0
- 115 (9, dd; 8,4 a 2,0); 3-amino-2-methylpropionová kyselina (C) 2,73 (2, m), 1,23 (2-Me, d; 7,21, 3,25 (3, ddd; 13,5, 6,5 a
6.5) , 3,53 (3, ddd; 13,4, 5,4 a 3,9), 6,93 (3-NH, brt; 6,1);
leucinová kyselina (D) 4,91 (2, dd; 10,5 a 2,8, 1,49 (3,m), 1,80 (3,m), 1,73 (4,m), 0,92 (4-Me, d; 6,5), 0,89 (5, d;
6.5) .
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A. 165,4 (11,
125,2 (2), 141,3 (3), 36,6 (4), 75,7 (5), 37,9 (6), 11,8 (6Me), 60,3 (7), 76, 7 (8), 141, 6 (9), 126, 8 (10/14), 128,7 (11/13), 128,8 (12); B 171,0 (1), 53,6 (2), 35,0 (3), 130,0 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 153, 9 (7), 56, 1 (7-OMe) , 112,3 (8), 128,4 (9); C 175,4 (1), 38,4 (2), 14,0 (2-Me), 41,3 (3), D 170,2 (1), 71,3 (2), 39,6 (3), 24,8 (4), 23,2 (4-Me),
21,4 (5) .
Příklad 22
Spektrální vlastnosti Kryptofycinu-138
EIMS m/z (relativní intensita) 734/736 (0,3/0,1), 654/656 (0,6/0,2), 412/414 (12,6/4,7), 313/315 (20,4/12,5) 280 (7,6), 227 (3,5), 195/197 (44,7/15,6), 155/157 (35,4/13,6),
105 (33,6), 91 (34,2), 80/82 (100/100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 734,1985 (C35H44ClBrN2O8, D-1,6 mmu), 654,2722 (C35H43C1N2O8, D-1,4 mmu) .
TH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) 7-brom-5,8dihydroxy-6-methyl-8-fenyl-2-oktenová kyselina (A) 5,78 (2, d; 15,5), 6,69 (3, ddd; 15,1, 9,8 a 5,3), 2,33 (4,m), 2,71 (4,m), 4,97 (5, ddd; 10,4, 10,4 a 1,61, 2,45 (6, m) , 1,17 (6-Me, d; 6,3), 4,40 (7, dd; 10,1 a 2,2), 5,06 (8, d; 10,1), • ·
116 ·
7,36-7,42 (10/11/12/13/14, m) ; 3-chlor-4-methoxyfenylalanin (B) 4,82 (2, m), 5,69 (2-NH, d; 8,1), 3,02 (3, dd; 14,5 a
7.5) , 3,17 (3, dd; 14,5 a 5,4), 7,23 (5, d; 2,1), 3,88 (7OMe, s), 6,85 (8, d; 8,4), 7,09 (9, dd; 8,4 a 1,9); 3-amino2-methylpropionová kyselina (C) 2,73 (2,m), 1,23 (2-Me, d;
7,3), 3,25 (3, ddd; 13,4, 6,5 a 6,5), 3,54 (3, m) , 6,92 (3NH, brt; 5,1); leucinová kyselina (D) 4,91 (2, dd; 10,6 a
2,7), 1,43 (3, m) , 1,82 (3, m) , 1,75 (4, m) , 0,93 (4-Me, d;
6.6) , 0,90 (5, d; 6,6).
13C NMR (CDC13) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,4 (1),
125,2 (2), 141,2 (3), 36,6 (4), 76,5 (5), 38,2 (6), 11,7 (6Me), 55, 3 (7), 87,4 (8), 137,4 (9), 128,0 (10/14), 128,7 (11/13), 129,3 (12); B 171,0 (1), 53,6 (2), 35,0 (3), 129,9 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 153, 9 (7), 56, 1 (7-OMe), 112,2 (8), 128,4 (9); C 175,5 (1), 38,4 (2), 14,0 (2-Me), 41,2 (3), D 170,2 (1), 71,2 (2), 39,6 (3), 24,8 (4), 23,2 (4-Me),
21,4 (5).
Příklad 23
Spektrální vlastnosti Kryptofycinu-139
EIMS m/z (relativní intensita) 732/734 (0,3/0,3), 652/654 (0,9/0,5), 533 (13,6), 445(5,7), 195/197 (9,2/11,4), 105 (96,2), 80/82 (100/100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 732,1783 (C35H42ClBrN2O8, E 3,0 umu), 652,2573 (C35H41C1N2O8, E -2,1 mmu) .
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) 7-brom-8-oxo-5hydroxy-6-methyl-8-fenyl-2-oktenová kyselina (A) 5,75 (2, d; 15,4), 6,68 (3, ddd; 15,2, 10,1 a 5,0), 2,31 (4, ddd; 14,2, • · • ·
- 117 • ·
10.7 a 10,7), 2,63 (4, dd; 14,4 a 5,1), 5,09 (5, ddd; 9,7,
9.7 a 1,5), 2,46 (6, m) , 1,18 (6-Me, d; 6,6), 5,41 (7, d;
3,5) 7 94 (10/14, brd; 8,6), 7,50 (11/13, t; 7,8), 7,63 (12, brt; 7,5); 3-chlor-4-methoxyfenylalanin (B) 4,80 (2,m), 5,64 (2-NH, d; 8,3), 3,04 (3, dd; 14,6 a 7,2), 3,14 (3, dd; 14,4 a 5,5), 7,22 (5,d; 2,0), 3,87 (7-OMe, s) , 6,84 (8, d; 8,3), 1,08 (9, dd; 8,3 a 2,3); 3-amino-2-methylpropionová kyselina (C) 2,76 (2,m), 1,26 (2-Me, d; 7,1), 3,31 (3, ddd; 13,7, 6,8 a 6,6), 3,53 (3 m), 6,95 (3-NH, brt; 5,9); leucinová kyselina (D) 4,93 (2, dd; 10,6 a 3,0), 1,51 (3, m) , 1,95 (3, m) , 1,80 (4,m), 0,97 (4-Me, d; 6,8), 0,91 (5, d, 6,6), 13C NMR (CD13) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,2 (1),
125,3 (2), 141,0 (3), 36,2 (4), 76,0 (5), 39,3 (6), 13,8 (6Me), 51,8 (7), 192,3 (8), 134,2 (9), 128,7 (10/14), 129,0 (11/13), 134,0 (12); B 170, 9(1), 53.7 (2), 35,0 (3), 129,8 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), * (7, nebylo pozorováno)), 56,2 (7-OMe), 112,3 (8), 128,4 (9); C 175, 6 (1), 38,3 (2), 14,2 (2-Me), 41,1 (3), D 170,2 (1), 71,1 (2), 39,8 (3), 24,7,
23,2 (4-Me), 21,3 (5).
Příklad 24
Spektrální vlastnosti Kryptofycinu-145
EIMS m/z (relativní intensita) 734/736/738 (0,5/0,6/0,2),
654,656 (1,5/1,1), 412/414 (2,2/1,0), 313/315 (19,5/12,9),
227 (4,1), 195/197 (11,5/3,7), 105 (14,6), 91 (25,2), 80/82 (100/100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 736,1980 (C35H44CIBrN2O8, E-3,1 mmu) , 654,2714 (C35H43CIN2O8, E -0,6 mmu) .
XH NMR (CDCI3) amino nebo hydro aminová nebo • · • · • · • ·
- 118 hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) 7-brom-5,8-dihydroxy-6-methyl-8-fenyl-2-oktenová kyselina (A) 5,81 (2, d; 15,7), 6,72 (3, m) , 2,31 (4, m) , 2,77 (4, m) , 5,62 (5, m) , 2,42 (6, m) , 1,22 (6-Me, d; 7,0), 4,23 (7, dd; 8,0 a 3,2), 4,94 (8, d; 7,9), 7,32-7,28 (10/11/12/13/14, m); 3-chlor-4-methoxyfenylalanin (B) 4,82
(2, m), 5,72 (2-NH, brs), 3,05 (3, m) , 3,15 (3, m), 7,23 (5,
brs), 3,88 (7-OMe, s) , 6,84 (8, brd; 7) , 7,09 (9, m) ; 3-
amino-2-methylpropionová kyselina (C) 2,75 (2, m) , 1,25 (2-
Me, d; 7,0), 3,30 (3, m) , 3,53 (3, m) , 6,97 (3-N, brs);
leucinová kyselina (D) 4,90 (2, dd; 9,7 a 3,61, 1,58 (3, m) , 1,82 (3, m), 1,70 (4, m) . 0,95 (4-Me, d; 6,6), 0,89 (5, d;
6,6) .
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A. 165,14 (1),
125,2 (2), 141,3 (3), 35,8 (4), 75,8 (5), 41,2 (6), 13,4 (6Me), 60,7 (7), 76, 5 (8), 141,6 (9), 126, 8 (10/14), 128,5 (11/13), 128,6 (12); B 170,5 (1), 53,7 (2), 35,0 (3), 129,9 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 154,0 (7), 56,2 (7.0Me), 112,3 (8), 128,5 (9); C 175,4 (1), 38,4 (2), 14,1 (2-Me) , 41,2 (3), D 170,5 (1), 71,3 (2), 39,7 (3), 24,6 (4), 22,9 (4-e),
21,5 (5).
Příklad 25
Spektrální vlastnosti Kryptofycinu-140
EIMS m/z (relativní intensita) 690/692 (2,3/1,8), 654/656 (3,8/2,2), 412/414 (5,4/2,1), 280/282 (5,4/2,2), 227 (10,2), 195/197 (27,8/10/4), 155/157 (53,7/16/4), 105 (81,0), 91 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 690,2427 (C35H44C42N2O8, E 4,8 • · • · • ·
- 119 • · ·· · · · · · · · • · · · · ··· · ·· · • · · · · · ···· · ··· ··· ······ · · ·· ·· · ·· · · mmu), 654,2760 (C35H43C1N2O8, E-5,2mmu).
1H NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ
(uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) 7-chlor-5,8-
dihydroxy- -6-methyl-8-fenyl-2-oktenová kyselina (A) 5,71 (2,
d; 15,4), 6,68 (3, ddd; 15,3, 9,8 a 5,6), 2,29 (4, m), 2,67
(4, m), 4 ,98 (5, ddd; 10,3, 10,3 a 1,7), 2,64 (6, m), 1,15
(6-Me, d; 6,6), 4,19 (7, dd; 9,2 a 2,11, 4,72 (8, d; 9,2),
7,33-7,39 (10/11/12/13/14, m) , 3-chlor-4-methoxyfenylalanin (B) 4,81 (2, m), 5,69 (2-NH, d; 8/8), 3,01 (3, dd; 14,5 a
7,5), 3,16 (3, dd; 14,5 a 5,5), 7,23 (5, d; 2,1), 3,87 (7OHe, s), 6,84 (8, d; 8,3), 1,09 (9, dd; 8,4 a 2,0), 3-amino2-methylpropionová kyselina (C) 2,73 (2, m) , 1,22 (2-Me, d; 7,3), 3,24 (3, ddd; 13,5, 6,8 a 6.S), 3,53 (3, m) , 6,91 (3NH, brt; 6,0); leucinová kyselina (D) 4,89 (2, dd; 10,4 a 0,87 (5, d; 6,6).
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A. 165,4 (1), 125,2, 141,4 (3), 36,7 (4), 75,5 (5), 38,1 (6), 10,4 (6-Me), 65,0 (7), 75,8 (8), 141,4 (9), 126,8 (10/14), 128,7 (11/13), 128,8 (12); B 171,0 (1), 53, 6 (2), 35, 0 (3), 129, 9 (4),
131,0 (5), 122,4 (6), 153,9 (7), 56, 1 (7-OMe) , 112,2 (8),
128,4 (9); C 175,5 (1), 38,4 (2), 14, 1 (2-Me), 41,3 (3), D
170,3 (1), 71,3 (2), 39, 5 (c) , 24,7 (4), 23,2 (4-Me) , 21,4 (5) .
Příklad 26
Spektrální vlastnosti Kryptofycinu-141
EIMS m/z (relativní intensita) 654/656 (1,8/0,8, M-HC1),
412/414 (7,6/3,1), 280/282 (3,2/2,0), 227 (8,4), 195/197 (35,6/11,9), 155/157 (100/37,2), 105 (68,1), 91 (88,4);
• ·
- 120 • 4 • ·♦
EIMS s vysokým rozlišením m/z 690,246S (C35H44C12N2O8, E 0,6 mmu), 654,2706 (Ο35Η43Ο1Ν2Ο8, E 0,2 mmu) .
1H NMR (CDC13) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) 7-chlor-5,8dihydroxy-6-methyl-8-fenyl-2-oktenová kyselina (A) 5,69 (2, d; 15,4), 6,62 (3, ddd; 15,1, 9,9 a 5,2), 2,07 (4, m), 2,49 (4, dd, 14,4 a 5,4), 4,96 (5, ddd; 10,5, 10,5 a 1,8), 1,88 (6, m) , 1,07 (6-Me, d; 6,8, 4,24 (7, dd; 8,9 a 1,9), 4,73 (8, d; 8,8), 2,80 (8-OH, široký pík), 7,32 (10/14, dd; 7,6 a 1,9), 7,36-7,42 (11/12/13, m) ; 3-chlor-4-methoxyfenylalanin (B) 4,78 (2, m), 5,65 (2-NH, d; 8,6), 3,00 (3, dd; 14,4 a
7.2) , 3,13 (3, dd; 14,4 a 5,6), 7,20 (5, d; 2,31, 3,86 (7OMe, s), 6,82 (8, d; 8,3), 7,06 (9, dd; 8,3 a 2,2); 3-amino2-methylpropionová kyselina (C) 2,73 (2, ), 1,23 (2-Me, d;
7.2) 3,27 (3, ddd; 13,5, 6,8 a 6,8), 3,51 (3, ddd; 13,5, 5,0 a 3,8), 6,91 (3-NH, brt; 6,0); leucinová kyselina (D) 4,83 (2, dd; 10,4 a 2,9), 1,48 (3, m) , 1,70 (3, m) , 1,76 (4, m) , 0,99 (4-Me, d; 6,5), 0,95 (5, d; 6,5).
NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,3 (1),
125,2 (s), 141,0 (3), 36,2 (4), 75,5 (5), 39,3 (6), 10,8 (6Me), 70, 0 (7), 76,2 (8), 139, 9 (9), 126, 7 (10/14), 129,0 (11/13), 129,0 (12); B170,9 (1), 53, 6 (2), 35,0 (3), 129,8 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 153, 9 (7), 56, 1 (7-)Me), 112,2 (8), 128,4 (9); C 175, 5 (1), 38,2 (2), 14,1 (2-Me), 41,1 (3), D 170,2 (1), 71,2 (2),
- 121 • · · · · · · ·· · · ··· · · · · · · · • · · · · · ··· · ·· · • · · · * · · ···· · ··· ··· ······· · ·
Příklad 27
Experimenty podle Schématu 1
Do roztoku alkenu 1 (1,15 g, 3,52 mmolů) v 50 ml CH2CI2 byl při teplotě -78 °C přidán pyridin (0,3 ml, 3,9 mmolů) a 0,98 ml 0,15 roztoku sudánské červeni 7B in CH2C12. Pomalu byl probubláván ozon, dokud se červená barva nezměnila na žlutou. Postup reakce byl monitorován pomocí TLC. Po ukončení byl přidán zinkový prášek (1,63 g, 24,9 mmolů) a
3,4 ml ledová kyselina octová. Studená lázeň byla odstraněna a směs byla ponechána zahřát se pomalu na teplotu okolí a By-la míchána další 2 hodiny. Reakční směs byla filtrována přes celit a promývána CuSO4 (3 x 30 ml), následovaný vodou (3 x 20 ml) a nakonec nasyceným vodným NaHCO3 (2 x 20 ml) . Organická vrstva byla sušena nad MgSO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 0,937 g (88%) požadovaného aldehydu, který byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění:
NMR (300 MHz, CDC13) 8 9, 74-9,73 (d, 1 H, J = 1,97 Hz),
7,0-6,82 (m, 1 H), 5,91-5,86 (d, 1 H, J = 15,4 Hz), 4,1-4,0 (m, 1 H), 3,73 (s, 3 H), 2,55-2,4 (m, 3 H), 1,09-1,07 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,87 (s, 9 H), 0,08 (s, 3 H), 0,06 (s, 3 H).
I ·· • · • · ·· • ·
- 122 • r ·
Β*
Methyllithium (9,6 ml, 14,4 mmolů), jako 1,5 M roztok v diethyletheru komplexovaný s lithium bromidem, byl přidán po kapkách do roztoku 2,5-dimethylbenzyltrifenylfosfoniumchloridu o teplotě -78 °C v 120 ml THF. Roztok byl ponechán zahřát se pomalu na teplotu 0 °C a byl ochlazen zpět na teplotu -78 °C. Aldehyd 2 v 40 ml THF byl přidán po kapkách do ylidu při teplotě -78 °C. Směs byla míchána při teplotě -78 °C po dobu 15 minut a potom byla pomalu zahřáta na teplotu okolí. Po uplynutí 1 hodiny při teplotě zpětného toku byl přidán nasycený NH4C1 (50 ml) a roztok byl extrahován etherem. Etherová vrstva byla promývána vodou (2 x 50 ml), potom solankou, sušen nad MgSO4, filtrován a koncentrován za sníženého tlaku. Surový styren jako směs E:Z isomerů byl čištěn na silikagelu použitím směsi 2% EtOAc/hexany a tím bylo získáno 2,32 g (58%) čirého oleje.
E:Z směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 8 hodin v 120 ml benzenu v přítomnosti thiofenolu (0,3 ml) a 1,1'-azobis(cyklohexankarbonitrilu) (VÁZO) (0,16 g) . Roztok byl potom ochlazen na teplotu okolí, koncentrován za sníženého tlaku a čištěn sloupcovou chromatografií (silikagel, 2-5% EtOAc/hexany) a tím bylo získáno 2,2 g (95%) čistého E isomeru ve formě čirého oleje:
- 123 • · ·* · · • · · ·* • · · 9 • · · · • · 9 9 • · · • 9
·· »· » » · • · ·
999 999
9 [a]D +34,6° (c 1,0, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3-7,0 (m, 4 H) , 6,62-6,57 (d, 1
H, J = 15,8 Hz), 6,11- -6,03 (dd, 1 H, J = 15,8, 8, 1 Hz),
5,93-5,88 (d, 1 H, J = 15,5 Hz), 3,82-3,78 (m, 1 H) , 3,78
(s, 3 H), 2,6-2,34 (m, 3 H), 2,37 (s, 3 H), 2,34 (s, 3 H),
1,18-1,16 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0 ,96 (s, 9 H), 0,13 (s, 3
H), 0,11 (s, 3 H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 167,2, 146,9, 136,9, 135,7, 133,3,
132,4, 130,5, 128,8, 128,1, 126,5, 123,2, 75,5, 51,8, 43,4,
37,9, 26,2, 21,4, 19,7, 18,5, 16,7, - 4,0, - 4,2;
IR (CHC13) 2955, 2930, 2858, 1718, 1658, 1603, 1496, 1472,
1438, 1362, 1325, 1280, 1258, 1097, 1040 cm'1;
Elementární analýza pro C24H38O3Si:
Vypočteno: C, 71,59; H, 9, 51.
Nalezeno: C, 71,38; H, 9,30.
Do roztoku esteru 3 přidáno 11 ml 2 M (2,2 g, 5,46 mmolů) v 10 ml THF bylo roztoku KOH. Zatímco byla intenzívně míchána, výsledná směs byla zahřívána na teplotu 65 °C po dobu 24 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí bylo přidáno 11 ml 2 M roztoku HCI a výsledná směs byla intenzívně míchána po dobu dalších 30 minut. Do směsi byl přidán ethylacetát (50 ml) a vrstvy byly odděleny.
· • · * ·
- 124 • 4 ··· 9 9 4 4 4 99 · • · · 99« 494494 444 994
4 4 4 4 9 4 4 4 «9 4 4 4 99 94
Vodná vrstva byla dále extrahována ethylaeetátem (2 x 30 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány 50% solankou (3 x 30 ml), sušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku a tím bylo získáno 2,12 g (100%) požadované kyseliny ve formě hustého žlutého oleje:
NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26- 6, 95 (m, 4 H) , 6, 62-6, 57 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 6,1-6,02 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,0 Hz), 5,92-5,87 (d, 1 H, J = 15,7 Hz), 3,9-3,8 (m, 1 H), 2,6-2,2 (m, 3 H), 2,36 (s, 3 H), 2,34 (s, 3 H), 1,18-1,15 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,94 (s, 9 H), 0,12 (s, 3 H), 0,11 (s, 3 H).
Do roztoku kyselina 4 (2,12 g, 5,46 mmolů) diisopropylethylaminu (2,9 ml, 16,4 mmolů) v 1 ml DMF o teplotě 0 °C byl po kapkách přidán difenylfosfinchlorid (1,1 ml, 6,01 mmolů). Po uplynutí 5 minut míchání při teplotě 0 °C a 30 minut při teplotě okolí byla přidána po kapkách TFA sůl 3-(3-chlor-4-methoxyfenyl)-D-alanin-2,2,2-trichlorethyl esteru 5 v 7 ml DMF. Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 2 hodin, vlita do 100 ml vody a promývána diethyletherem (3 x 50 ml). Sloučené organické vrstvy byly promýván solankou, sušeny nad MgSO4, filtrovány přes celit a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištění sloupcovou chromatografií (silikagel, 10-30% EtOAc/hexany) dalo 2,86 g • · · · « 4 4 · • 4 · · •· ··· 4 4 4 • 4 • 4 · · • · 4 » 4 · » · · ·
- 125 • · », · » · · » · · · · v · · » · • · 4 · · · · (72%) amidu 6 ve formě bílé pěny:
[a]20D +44,8° (c 1, 0, MeOH) ;
3H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,25 (s, 1 H) , 7,22 (s, 1 H) , 7,16,83 (m, 5 H), 6,6-6,55 (d, ÍH, J = 15,7 Hz), 6,11-6,03 (dd, 1 H, J = 15,6, 8,1 Hz), 5,9- 5,8 (m, 2 H) , 5,18-5,05 (m, 1
H), 4,83-4,75 (q, 2 H, J = 12,0 Hz), 3,9 (s, 3 H), 3,83-3,68 (m, 1 H), 3,3-3,1 (m, 2 H) , 2,6-2,36 (m, 3 H) , 2,36 (s, 3 H), 2,32 (s, 3 H), 1,16- 1,14 (d, 3 H, J = 6,7 Hz), 0,95 (s, 9 H), 0,11 (s, 3 H), 0,05 (s, 3H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 170,0, 165,1, 154,2, 143,1, 136, 4, 135,3, 133,0, 132,0, 131,0, 130,9, 130,0, 128,4, 128,3,
127,7, 126,1, 124,6, 112,3, 112,1, 94,2, 75,0, 74,7, 56,0,
52,9, 42,8, 37,5, 36,5, 25,8, 20,9, 19,3, 18,0, 16,4, - 4,3, - 4,7;
IR (CHC13) 3428, 2957, 2930, 2857, 1759, 1676, 1645, 1606,
1503, 1464, 1442, 1380, 1349, 1281, 1259, 1173, 1067 cm'1.
Příklad 27
Experimenty podle Schématu 1
Do roztoku alkenu 1 (1,15 g, 3,52 mmolů) v 50 ml CH2C12 byl při teplotě -78 °C přidán pyridin (0,3 ml, 3,9 mmolů) a 0,98 ml 0,15 roztoku sudánské červeni 7B in CH2C12. Pomalu byl probubláván ozon, dokud se červená barva nezměnila na • · c a • ·
- 126 » · · · · » · · · 4 * 4 4 4 • < · * žlutou. Postup reakce byl monitorován ukončení byl přidán zinkový prášek (1,63 pomocí TLC. Po g, 24,9 mmolů) a
3,4 ml ledová kyselina octová. Studená lázeň byla odstraněna a směs byla ponechána zahřát se pomalu na teplotu okolí a byla míchána další 2 hodiny. Reakční směs byla filtrována přes celit a promývána CuSO4 (3 x 30 ml) , následovaný vodou (3 x 20 ml) a nakonec nasyceným vodným NaHCO3 (2 x 20 ml) . Organická vrstva byla sušena nad MgSO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 0,937 g (88%) požadovaného aldehydu, který byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9, 74-9,73 (d, 1 H, J = 1,97 Hz),
7,0-6,82 (m, 1 H), 5,91-5,86 (d, 1 H, J = 15,4 Hz), 4,1-4,0 (m, 1 H), 3,73 (s, 3 H) , 2,55-2,4 (m, 3 H) , 1,09-1,07 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,87 (s, 9 H), 0,08 (s, 3 H), 0,06 (s, 3 H).
Methyllithium (9,6 ml, 14,4 mmolů), jako 1,5 M roztok v diethyletheru komplexovaný s lithium bromidem, byl přidán po kapkách do roztoku 2,5-dimethylbenzyltrifenylfosfoniumchloridu o teplotě -78 °C v 120 ml THF. Roztok byl ponechán zahřát se pomalu na teplotu 0 °C a byl ochlazen zpět na teplotu -78 °C. Aldehyd 2 v 40 ml THF byl přidán po kapkách do ylidu při teplotě -78 °C. Směs byla • · • ·
127 • · · φ · · • · φ « φ · φ φ · · ·· · • φ φ φ « v ······ · » · ΦΦΦ ··<«··· * · • · · · « · Φ 1 · · · míchána při teplotě -78 °C po dobu 15 minut a potom byla pomalu zahřáta na teplotu okolí. Po uplynutí 1 hodiny při teplotě zpětného, toku byl přidán nasycený NH4C1 (50 ml) a roztok byl extrahován etherem. Etherová vrstva byla promývána vodou (2 x 50 ml), potom solankou, sušen nad MgSO4, filtrován a koncentrován za sníženého tlaku. Surový styren jako směs E:Z isomerů byl čištěn na silikagelu použitím směsi 2% EtOAc/hexany a tím bylo získáno 2,32 g (58%) čirého oleje.
E:Z směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 8 hodin v 120 ml benzenu v přítomnosti thiofenolu (0,3 ml) a 1,1'-azobis(cyklohexankarbonitrilu) (VÁZO) (0,16 g) . Roztok byl potom ochlazen na teplotu okolí, koncentrován za sníženého tlaku a čištěn sloupcovou chromatografií (silikagel, 2-5% EtOAc/hexany) a tím bylo získáno 2,2 g (95%) čistého E isomeru ve formě čirého oleje:
[a]D +34,6° (c 1,0, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3-7,0 (m, 4 H), 6,62-6,57 (d, 1
H, J = 15,8 Hz), 6,11- -6,03 (dd, 1 H, J = 15,8, 8, 1 Hz),
5,93-5,88 (d, 1 H, J = 15,5 Hz), 3,82-3,78 (m, 1 H) , 3,78
(s, 3 H), 2,6-2,34 (m, 3 Η), 2,37 (s, 3 H), 2,34 (s, 3 H),
1,18-1,16 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0 ,96 (s, 9 H), 0,13 (s, 3
Η) , 0, 11 (s, 3 H) ;
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 167,2, 146,9, 136,9, 135,7, 133,3,
132,4, 130,5, 128,8, 128,1, 126,5, 123,2, 75,5, 51,8, 43,4,
37,9, 26,2, 21,4, 19,7, 18,5, 16,7, - 4,0, - 4,2;
IR (CHCI3) 2955, 2930, 2858, 1718, 1658, 1603, 1496, 1472,
1438, 1362, 1325, 1280, 1258, 1097, 104 0 cm’1;
Elementární analýza pro C24H38O3Si :
Vypočteno: C, 71,59; H, 9, 51.
- 128 Nalezeno: C, 71,38; H, 9,30.
Do roztoku esteru 3 přidáno 11 ml 2 M (2,2 g, 5,46 mmolů) v 10 ml THF bylo roztoku KOH. Zatímco byla intenzívně míchána, výsledná směs byla zahřívána na teplotu 65 °C po dobu 24 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí bylo přidáno 11 ml 2 M roztoku HCl a výsledná směs byla intenzívně míchána po dobu dalších 30 minut. Do směsi byl přidán ethylacetát (50 ml) a vrstvy byly odděleny.
Vodná vrstva byla dále extrahována ethylacetátem (2 x 30 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány 50% solankou (3 x 30 ml), sušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku a tím bylo získáno 2,12 g (100%) požadované kyseliny ve formě hustého žlutého oleje:
3Η NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26- 6, 95 (m, 4 H) , 6, 62-6, 57 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 6,1-6,02 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,0 Hz), 5,92-5,87 (d, 1 H, J = 15,7 Hz), 3,9-3,8 (m, 1 H), 2,6-2,2 (m, 3 H), 2,36 (s, 3 H), 2,34 (s, 3 H), 1,18-1,15 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,94 (s, 9 H), 0,12 (s, 3 H), 0,11 (s, 3 H).
β ·
Do roztoku kyselina 4 (2,12 g, 5,46 mmolů) diisopropylethylaminu (2,9 ml, 16,4 mmolů) v 1 ml DMF o teplotě 0 °C byl po kapkách přidán difenylfosfinchlorid (1,1 ml, 6,01 mmolů). Po uplynutí 5 minut míchání při teplotě 0 °C a 30 minut při teplotě okolí byla přidána po kapkách TFA sůl 3-(3-chlor-4-methoxyfenyl)-D-alanin-2,2,2-trichlorethyl esteru 5 v 7 ml DMF. Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 2 hodin, vlita do 100 ml vody a promývána diethyletherem (3 x 50 ml). Sloučené organické vrstvy byly promýván solankou, sušeny nad MgSO4, filtrovány přes celit a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištění sloupcovou chromatografií (silikagel, 10-30% EtOAc/hexany) dalo 2,86 g (72%) amidu 6 ve formě bílé pěny:
[a]2% +44,8° (c 1,0, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,25 (s, 1 H) , 7,22 (s, 1 H) , 7,16,83 (m, 5 H), 6,6-6,55 (d, 1H, J = 15,7 Hz), 6,11-6,03 (dd,
1 H, J = 15,6, 8,1 Hz), 5,9- 5,8 (m, 2 H) , 5, 18-5,05 (m, 1
H) , 4,83-4,75 (q, 2 H, J = 12,0 Hz), 3,9 (s, 3 H), 3,8 3-3, 68
(m, 1 H) , 3,3-3,1 (m, 2 H) , 2,6-2,36 (m, 3 H) , 2,36 (s, 3
H) , 2,32 (s, 3 Η), 1,16- 1,14 (d, 3 H, J = 6,7 Hz), 0, 95 ( s,
9 H) , 0,11 (s, 3 H), 0,05 (s, 3H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 170,0, 165,1, 154,2, 143,1, 136, 4,
t> · · 9 9 99
9 9 ··· ····
135,3, 133,0, 132,0, 131,0, 130,9, 130,0, 128,4, 128,3,
127,7, 126,1, 124,6, 112,3, 112,1, 94,2, 75,0, 74,7, 56,0,
52,9, 42,8, 37,5, 36,5, 25,8, 20,9, 19,3, 18,0, 16,4, - 4,3,
- 4,7;
IR (CHC13) 3428, 2957, 2930, 2857, 1759, 1676, 1645, 1606,
1503, 1464, 1442, 1380, 1349, 1281, 1259, 1173, 1067 cm' •1
Příklad 29
Ester (2,1 g) byl připraven z 2,5 g aldehydu 2 a 5,0 g 3methylbenzyl-trifenylfosfoniumchloridu s 65% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]20D +45,55° (c 1,0, MeOH):
ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,22-6, 88 (m, 5 H) , 6,37-6,31 (d, 1 H, J = 16,0 Hz), 6,18-6,10 (dd, 1 H, J = 16,0, 8,0 Hz), 5,86-5,81 (d, 1 H, J = 15,5 Hz), 3,8-3,7 (m, 4 H) , 2,5-2,3 (m, 6 H), 1,11-1,08 (d, 3 H, J = 6,9 Hz), 0,91 (s, 9H) , 0,061 (s, 3 H), 0,052 (s, 3 H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 166, 7, 146,4, 137,5, 135,9, 131,6,
130.4, 128,3, 127,7, 126,7, 123,1, 122,8, 75,0, 51,3, 42,7,
37.4, 33,8, 25,8, 21,9, 21,3, 18,0, 16,0, -4,5, -4,6;
• · · · ·
131
9 9 9 9
9 9 9 « · · « • · · *
IR (CHC13) 2953, 2931, 2859, 1718, 1658,
1438, 1258 cm-1.
1604, 1472, 1454,
Kyselina (1,93 g) byla připravena z 2,0 g esteru v 100% výtěžku použitím způsobu popsaného výše:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,22-7,0 (m, 5 Η) , 6, 38-6, 33 (d, 1 H, J = 16,0 Hz), 6,18-6,10 (dd, 1 H, J = 16,0, 8,0 Hz), 5,87-5,82 (d, 1 H, J = 15,7 Hz), 3,8-3,7 (m, 1 Η), 2,5-2,35 (m, 3 H), 2,34 (s, 3 Η), 1,12-1,09 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,9 (s, 9 H), 0,068 (s, 3 Η), 0,061 (s, 3 H).
Amid (2,9 g) byl připraven z 1,93 g kyseliny s 72% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,22-7,1 (m, 4 Η) , 7,1-7,0 (m, 2
Η) , 6,9-6,8 (m, 2 H) , 6,36-6,30 (d, 1 H, J = 16,0 Hz), 6,19-
6, 11 (dd, 1 H, J = 16,0, 8,0 H: z) , 5, 82-5, 77 (m, 2 Η) , 5,1-
5,0 (m, 1 H) , 4 ,78- 4,71 (q, 2 H, J : = 12,0 Hz), 3,86 (s, 3
Η) , 3,8-3,7 (m, 1 H) , 3,25-3,15 (m, 2 H), 2,5-2,3 (m, 6 H),
1—» i 1 1 1,08 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,88 (s, 9 Η), 0,056 (s, 3
Η) , 0,044 (s. , 3 H) .
Alko hol (2,0 g) byl připraven z 2,4 g výchozího ami du se
100% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
XH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,25-6,8 (m, 8 Η) , 6,46-6,41 (d, 1
H, J = 15,9 Hz), 6,16-6,07 (dd, 1 H, J = 16,0, 8,8 Hz),
5,95- 5,8 (m, 2 Η), 5,1-5,0 (m, 1 Η), 4,81-4,7 (q, 2 H, J = 12,0 Hz), 3,87 (s, 3 Η) , 3,7-3,6 (m, 1 Η) , 3,22-3,05 (m, 2 H), 2,5-2,34 (m, 3 Η) , 2,34 (s, 3 Η) , 1,8-1,7 (bs, 1 Η) ,
I, 15- 1, 13 (d, 3 H, J = 6,8 Hz) .
Substrát (2,3 g) byl připraven z 2,0 g výchozího alkohol s 76% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]20D +31,6° (c 1,08, MeOH) ;
• · • · · ·
132 • · · · · « • · · · · • · · · · · · • · · · · · · XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,2-7,0 (m, 6 H) , 6,84-6,81 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,80-6, 73 (m, 1 H) , 6, 53-6, 50 (bd, 1 H, J = 7,3 Hz), 6,4- 6,35 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 6,03-5,95 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,5 Hz), 5,9-5,85 (d, 1 H, J = 15,7 Hz), 5,42-
5, 35 (bt, 1 H, J = 6,38 Hz), 5,1-4,82 (m, 3 H), 4,8-4,67 (q,
2 H, J = 12,0 Hz), 3,85 (s, 3 H) , 3,28-3,26 (d, 2 H, J =
6,46 Hz) , 3,23- - 3,16 (dd, 1 H, J = 14,3, 5,8 Hz), 3,1-3,03
(dd, 1 H, J = 14,2, 6,7 Hz), 2,7-2,4 (m, 3 H) , 2,33 (s, 3
Η), 1 ,8-1, 5 (m, 3 H), 1,43 (s, 9 H), 1,2 (s, 3 H), 1,15 (s,
3 H), 1,12 -i,i (d, 3 H, J = 6,7 Hz), 0,88-0,86 (d, 3 H, J =
6,2 Hz), 0,84- 0,82 (d, 3 H, J = 6,4 Hz);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 170,6, 170,0, 165,2, 154,0, 139,2, 138,0, 136.7, 135,8, 131,8, 131,1, 129,7, 128,8, 128,4,
128,2, 126,8, 125,3, 123,3, 122,23, 112,1, 94,2, 78,9, 74,5, 71,3, 56, 0, 53, 1, 48,6, 43, 9, 41,0, 39,4, 36, 5, 33,3, 28,3,
24,7, 22,9, 22,7, 22,3, 21,3, 21,2, 16,5;
IR (CHC13) 3426, 3383, 2967, 2935, 2874, 2841, 1727, 1710,
1680, 1646, 1605, 1504, 1368, 1280, 1259, 1169, 1151 cm'1.
Styren (0,86 g) byl připraven z 2,2 g výchozího karbamátu s 54% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]2% +33,1° (c 1,03, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,24-1,0 (m, 7 H) , 6, 85-6, 82 (d, 1
H, J = 8,4 Hz), 6,82-6,70 (m, 1 H), 6,39-6,34 (d, 1 H, J =
15,8 Hz), 6,03-5,95 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,7 Hz), 5,78-5,13 (d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5, 67- 5, 64 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,15,0 (m, 1 H), 4,87-4,83 (dd, 1 H, J = 10,2, 3,5 Hz), 4,8-4,7 (m, 1 H), 3,9 (s, 3 H) , 3,45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6
Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H) , 2,6-2,3 (m, 3 H) , 2,32 (s, 3 H) ,
I, 75-1,25 (m, 3 H), 1,22 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H), 1,13-1,11 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,75-0,72 (t, 6 H, J = 5,7 Hz);
• ·
- 133 13C NMR (15 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,5, 170,3, 165, 1, 154,0,
142,1, 138,0, 136, 6, 135, 6, 131,8, 130,8, 129, 9, 129,6,
128.4, 128,22, 128,17, 126,7, 124,5, 123,3, 122,5, 112,3,
71.4, 56,1, 54,3, 46,4, 42,7, 42,2, 39,4, 36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,6, 22,5, 21,2, 21,1, 17,2;
IR (CHC13) 3424, 3021, 3017, 2965, 1747, 1711, 1680, 1652,
1528, 1503, 1485, 1259, 1151, 1067 cm'1;
Elementární analýza pro C37H47CIN2O7:
Vypočteno: C, 66,60; H, 7,10; N, 4,20.
Nalezeno: C, 66,79; H, 7,03; N, 4,25.
Příklad 30
Sloučenina z názvu, b epoxid, (0,20 g) byla připravena z 0,667 g výchozího styrenu s 29% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
3H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3- 7,0 (m, 7 H) , 6, 90-6,87 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,87-6,75 (m, 1 H), 5,79-5,74 (d, 1 H, J =
14,8 Hz), 5,54-5,51 (d, 1 H, J = 7,8 Hz) , 5,28-5,22 (m, 1
H), 4,89-4,85 (dd, 1 H, J = 10,4, 3,5 Hz) , 4,82-4,75 (m, 1
H), 3,92 (s, 3 H), 3,69 -3, 68 (d, 1 H, J = 1,63), 3,51-3, 44
134 ·**···· · · ·· ·· ·· · ·· ·· (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,2-3,1 (m, 2 H) , 2,98-2,95 (dd, 1 H, J = 7,6, 1,6 Hz), 2,65-2,32 (m, 3 H) , 2,32 (s, 3 H), 1,85-1,6 (m, 3 H) , 1,4-1,25 (m, 1 H) , 1,27 (s, 3 H),
1,21 (s, 3 H), 1,21-1,18 (d, 3 H, J = 7,5 Hz), 0,90-0,86 (t, 6 H, J = 6,13 Hz).
Příklad 31
Do roztoku b epoxidu (0,1 g, 0,147 mmolů) v 5,0 ml CHC13 při teplotě -60 °C byl přidán chlortrimethylsilan (0,093 ml, 0,74 mmolů). Roztok byl míchán při teplotě -60 °C po dobu 30 minut a při teplotě okolí po dobu 1,5 hodin předtím něž byl koncentrován za sníženého tlaku. Výsledný residuum, obsahující 50:50 směs syn a anti chlorhydrinů, byl čištěn pomocí HPLC s obrácenou fází a tím bylo získáno 0,028 g (21%) požadovaného trans isomeru:
3Η NMR (300 MHz, CDC13) δ 1,28-7,2 (m, 5 H) , 7,13-7,1 (dd, 1 H, J = 8,32, 1,95 Hz), 6,91-6,88 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,886,78 (m, 1 H) , 5,86-5,81 (d, 1 H, J = 15,0 Hz), 5,73-5,71 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,24-5,11 (t, 1 H, J = 9,4 Hz), 5,04,96 (dd, 1 H, J = 9,58, 2,93 Hz), 4,81-4,74 (m, 1 H) , 4,674,64 (d, 1 H, J = 9,73 Hz), 4,06-4,03 (dd, 1 H, J = 9,6, 1,1 • · • · • ·
- 135 • · fe·· · · · ···· • ···· · ··· · ·· · • · · · · · · ···· · ··· ··· ······· · · • · · · · · · · · ··
Hz), 3,92 (s, 3 H), 3, 47-3,39 (dd, 1 H, J = 13,2, 8,3 Hz), 3,24-3,0 (m, 3 (s, 3 H), 1,22 (s, 3 H), 1,09-1,07 (d, 3 H, J = 6,95 Hz), 0, 98-0, 96 (d, 6 H, J = 6,4 Hz).
Příklad 32
Ester (2,75 g) byl připraven z 3,39 g aldehydu 2 a 7,7 g 4methoxybenzyl-trifenylfosfoniumchloridu s 54% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše. _______ [a]2% +71,85° (c 1,03, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,25-7,21 (m, 2 H, J 9,0 Hz) ,
7, 0-6,85 (m, 1 H), 6,81-6,78 (d, 2 H, J = 8,5 Hz) z 6, 30 -6,23
(d , 1 H, J = 16,3 Hz), 6,0-5,9 (dd, 1 H, J = 16, 3, 8,2 Hz) ,
5, 81-5,75 (d, 1 H, J = 14,26 Hz), 3,75 (s, 3 H) , 3 ,67 (s, 4
H) , 2,42-2,22 (m, 3 H), 1,05-1,02 (d, 3 H, J = = 6. B Hz) , 0,86
(s , 9 H), 0,005 (s, 3 H), -0,001 (s, 3 H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 166, 7, 158,8, 146, 4, 130,4, 129,7,
129,7, 127,0, 122,7, 113,8, 75,0, 55,2, 51,3, 42,7, 37,4,
25,8, 19,0, 16,1, -4,5, -4,6;
IR (CHC13) 3010, 2955, 2930, 2898, 2857, 1718, 1658, 1607,
1511 cm’1.
- 136 • 9 • 9
9 99 • · 1
9
Kyselina (1,58 g) byla připravena z 1,7 g esteru s 96% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
NMR (300 MHz, CDC13) δ 1,3-7,27 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 7,13-7,03 (m, 1 H) , 6, 86-6, 83 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 6,356,29 (d, 1 H, J = 16,0 Hz), 6,04-5,96 (dd, 1 H, J = 15,9, 8,0 Hz), 5,87-5,81 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 3,8 (s, 3 H) , 3,79-3,7 (m, 1 H), 2,5-2,33 (m, 3 H), 1,1-1,08 (d, 3 H, J =
6,8 Hz), 0,9 (s, 9 H), 0,058 (s, 3H) , 0,055 (s, 3H) .
Amid (2,09 g) byl připraven z 1,58 g kyseliny s 70% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]2% 2,0° (c 1,0, CHC13) ;
3H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,28-7,26 (d, 2H, J = 7,33 Hz), 7,18-7,17 (d, 1 H, J = 1,8 Hz), 7,04-7,0 (dd, 1 H, J = 8,5,
1,8 Hz), 6,90-6,79 (m, 3 H) , 6, 32-6,2 7 (d, 1 H, J = 16 ,0
Hz) , 6,05-5,97 (dd, 1 H, J = 16, 0, 8,1 Hz), 5,83-5,76 (m, 3
H) , 5,09-5,05 (m, 1 H), 4,82-4,7 (q, 2 H, J = 11,9 Hz), 3, 86
(s, 3 H), 3,8 (s, 3 H), 3,77-3,7 (m, 1 H), 3,24-3,17 (dd, 1
H, J = 14,2, 5,7 F lz), 3,13-3,07 (dd, 1 H, J = 14,2, 5, 94
Hz) , 2,5-2,3 (m, 3 H), 1,09-1,06 (d, 3 H, J = 6,8 Hz) , 0, 89
(s, 9 H), 0,048 (s, 3 H), 0,038 (s, 3 H);
13C NMR (75 MHz) 135,5, 131,0, 130,4, 129,6, 128,4, 127,0,
124,6, 122,5, 113,8, 112,1, 94,2, 75,0, 74,7, 56,0, 55,2,
52,9, 42,5, 37,4, 36,4, 25,8, 18,0, 16,4, -4,4, -4,1;
IR (CHC13) 2957, 2931, 2857, 1757, 1676, 1644, 1607, 1511,
1503 cm-1.
Alkohol (1,35 g) byl připraven z 1,63 g výchozího amidu s 98% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]2% +55,7° (c 1,0, MeOH);
• · • · • · • · · · · · • · • · · ·
- 137 ·· ·· • · · • · · · · • · · • · · • * · · ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,31-7,29 (d, 2 H, J = 7.9 Hz),
7,18 (s, 1 H), 7,05-7,02 (d, 1 H, J = 8,3 Hz), 7,0-6,87 (m,
H), 6,86-6,83 (d, 3 H, J = 8,2 Hz) 6,44-6,38 (d, 1 H, J =
15,8 Hz), 6,0- 5,82 (m, 3 H) , 5,10-5,0 (m, 1 H) , 4,81-4.7 (q, 2 H, J = 11,8 Hz), 3,87 (s, 3 H) 3 81 (s, 3 H) , 3,67-3,6 (m, 1 H), 3,24- 3,19 (dd, 1 H, J = 14,1, 6,1 Hz), 3,12-3,07 (dd, 1 H, J = 14,4, 5.9 Hz), 2,5-2,25 (m, 3 H), 1,8-1,6 (bs, 1 H), 1,14- 1,12 (d, 3 H, J = 6,6 Hz) ;
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 170, 1, 165,2, 159, 0, 154,2, 142,5,
131,2, 131,0, 129,8, 128,7, 128,4, 127,2, 125,0, 122,4,
113,9, 112,2, 94,2, 74,7, 73,5, 56,05, 55,2, 53,0, 43,2,
37,1, 36,4, 16,8;
IR (CHCI3) 3428, 2964, 2936, 2912, 2874, 2840, 1758, 1677,
1645, 1607, 1512, 1503, 1258, 1175 cm-1.
Substrát (1,69 g) byl připraven z 1,26 g výchozího alkoholu s 89% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]20D +35,2° (c 1,02, MeOH);____
XH NMR (300 MHz , CDCI3) δ 7,26-7,23 (d, 21 H, J = 8,0 Hz)
7, 18-7,17 (d, 1 H, J = 1, 7 ), 7 07- 7 03 (dd, 1 H, J = 8,4
1, 6), 6,55-6,7 (m, 4H), 6, 53-6,5 (d, 1 H, J = 7,9 Hz), 6,36
6, 31 (d, 1 H, J = 15,8 Hz) , 5,9-5,81 (m, 2 H), 5,42-5,35 (t
1 H), 5,1-4,95 (m, 2 H 1), 4,94-4,90 (dd, 1 H, J = 9,6, 3,
Hz), 4,81-4,67 (q, 2 H, J = 11,9 Hz), 3,85 (s, 3 H) , 3,79 (s, 3 H), 3,28- 3,26 (d, 2 H, J = 6,5 Hz), 3,23-3,16 (dd, 1
H, J = 14,3, 5,8 Hz), 3,09-3,02 (dd, 1 H, J = 14,1, 6,7 Hz), 2,61-2,4 (m, 3 H), 1,8-1,5 (m, 3 H), 1,43 (s, 9 H) , 1,20 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H), 1,11-1,09 (d, 3 H, J = 6,7 Hz), 0,870,85 (d, 3 H, J = 6,4 Hz), 0,84-0,82 (d, 3 H, J = 6,5 Hz);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 174,9, 170,6, 169, 9, 165,3, 159, 0, 154,0, 139,3, 135,4, 131,1, 131,0, 129,6, 128,8, 128,4, • · • · • *
127,8, 127,2, 125,2, 122,2,
56,0, 55,2, 53,1, 48,6, 43, 9
22,9, 22,7, 22,3, 21,4, 16, 6;
IR (CHC13) 3426, 3383, 2965,
1680, 1646, 1607, 1512, 1465,
• 138 - : • · • · 4 · • · · 1 • 4 4 • 4 44 • · · • 4 4 4 1 · 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 • · 4 • 4 4 4 4 4 4 · 4 4 · 4 • • 4 · • •
113,9, 112,2, 94,3, 74,5, 71,3
, 41,0, 39,4, 36,5, 28,3, 24,7
2936, 2874, 2840, 1728, 1711
1367, 1254, 1115, 1067 cm' -1
Styrenový produkt (0,676 g) byl připraven z 1,43 g výchozího karbamátu s 65% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
XH NMR (300 MHz, CDC13) 7,26-7,23 (d, 3 H, J = 8,4 Hz), 7,207,19 (d, 1 H, J = 1,8 Hz), 7, Hz), 6,84-6,81 (d, 3 H, J =
6,36-6,31 (d, 1 H, J = 15,8
15,8, 8,8 Hz), 5,78-5,73 (d, (d, 1 H, J = 7,9 Hz), 5,05-4 1,6 Hz), 4,87-4,82 (dd, 1 H,
H), 3,86 (s, 3 H), 3,79 (s,
13,4, 8,6 Hz), 3,15-3,0 (m, 3 (m, 3 H) , 1,22 (s, 3 Η) , 1, 15 = 6,8 HzTT-0776-0,75 (d, 3 H, H, J = 2,8 Hz).
07-7,03 (dd, 1 H, J = 8,4, 1,9
8,5 Hz), 6,8- 6,7 (m, 1 H),
Hz), 5,59-5,81 (dd, 1 H, J =
1 H, J = 13,7 Hz), 5,68- 5,66
,99 (ddd, 1 H, J = 10,6, 6, 6,
J = 9,7, 3, 1 Hz) , 4, 78-4,7 (m,
H) , 3,45-3,31 (dd, ÍH, J = H), 2,6-2,25 (m, 3 H), 1,7-1,3 (s, 3 H), 1,12-1,1 (d, 3 H, J J = 2,9 Hz), 0,74- 0,73 (d, 3 • 4 4
- 139 • ·· · 4 · 444444 444 444 • 444444 4 4
44 44 4 ·· ··
Příklad 33
Do roztoku terč.-butoxidu draselného (1,17 g, 10,5 mmolů) v 120 ml THF o teplotě 0 °C byl přidán p-nitrobenzyltrifenylfosfoniumbromid (5,0 g, 10,5 mmolů), v malých dávkách v průběhu 30 minut. Směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 1 hodiny. Aldehyd 2 v 20 ml THF byl přidán po kapkách do předem vytvořeného ylidu. Směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu tt5 minut, potom zahřáta pomalu na teplotu okolí a míchán přes noc. Byl přidán nasycený vodný NH4C1 (50 ml) a roztok byl extrahován ethylacetátem. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad MgSO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Surový styren jako směs E:Z isomerů byl čištěn na silikagelu použitím směsi 2% EtOAc/hexany a tím bylo získáno 0,5 g Z isomerů a 1,1 g E isomerů (42%) ve formě žlutého oleje:
[a]20D +63,81° (c 1,05, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,18-8,15 (d, 2 H, J = 8,6 Hz),
7,47-7,44 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 7,0-6,85 (m, 1 H), 6,5-6,3 (m, 2 H), 5,87-5,82 (d, 1 H, J = 15,6 Hz), 3,8-3,73 (m, 1
H), 3,73 (s, 3 H), 2,55-2,35 (m, 3 H), 1,13-1,11 (d, 3 H, J • · • · • ·
- 140 • 9
I · · » · · ·· •
= 6,9Hz), 0,90 (s, 9H), 0,059 (s, 3 H), 0,047 (s, 3 H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) 166, 5, 145, 5, 143, 9, 137,3, 128,7,
126,4, 123,9, 123,1, 74,6, 51,3, 42,8, 37,8, 33,8, 25,7,
24,3, 21,9, 18,0, 16,3, -4,4, -4,7;
IR (CHC13) 2953, 2931, 2859, 1719, 1658, 1596, 1518, 1472,
1438, 1345, 1259, 1110 cm1.
Amid (3,06 g) byl připraven z 2,55 g kyseliny s 65% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]20D +70, 67° (c 1,05, MeOH);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,15-8,12 (d, 2 H, J = 8,7 Hz),
7,45-7,42 (d, 2 H, J = 8,1 Hz), 7,17-7,16 (d, 1 H, J = 2,0
Hz), 7,04-7,01 (dd, 1 H, J = 8,45, 1,9 Hz), 6,88-6,82 (m, 2 H), 6,43-6,3 (m, 2 H), 5,93-5,91 (d, 1 H, J = 7,5 Hz), 5,845,79 (d, 1 H, J = 15,3 Hz), 5,1-5,0 (m, 1 H), 4,82-4,69 (q, 2 H, J = 11,9 Hz), 3,85 (s, 3 H) , 3,8-3,7 (m, 1 H) , 3,243,18 (dd, 1 H, J = 14,3, 5,7 Hz), 3,13-3,06 (dd, 1 H, J =
14.2, 6,05 Hz), 2,52-2,3 (m, 3 H), 1,11-1,09 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 0,88 (s, 9H), 0,041 (s, 3 H), 0,032 (s, 3 H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 170,0, 165, 0, 154,2, 146, 5, 144,0,
142.2, 137,4, 136,0, 131,0, 128,7, 128,4, 126,4, 124,9,
123,9, 122,5, 112 ,1, 94 ,1, 74,72, 74,67. 56, 0, 52,9, 42,7,
37,8, 36,4, 25,7, 18,0, 16,5, -4,7, -4,3;
IR (CHC13) 3429, 2957, 2931, 2858, 1757, 1677, 1645, 1597,
1517, 1503, 1345, 1259, 1180, 1110, 1067, 1026 cm1.
Substrát (3,3 g) byl připraven z 2,54 g výchozího alkoholu s 87% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a] 20d +38,2° (c 1,07, MeOH) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,23-8,2 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 7,52-7,49 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 7,21 (s, 1 H) , 7,12-7,08 • · • Β • · · • · · · ·
-141-: ::
·· ·· • Β · · · Β Β • Β Β · Β · Β • · · · · ·· · • Β Β Β Β Β Β ΒΒΒ ··· • Β Β Β Β • Β Β ·· Β Β (dd, 1 Η, J = 8,2, 1,8 Ηζ), 6,89-6,86 (d, 1 Η, J = 8,4 Ηζ), 6, 86-6, 75 (m, 1 Η), 6,6-6,58 (d, 1 Η, J = 8,0 Ηζ) , 6,55-6,5 (d, 1 Η, J = 15,9 Ηζ), 6,31-6,23 (dd, 1 Η, J = 15,8, 8,5
Ηζ), 5, 97-5, 92 (d, 1 Η, J = 15,5 Ηζ) , 5,4-5,3 (bt, 1 Η),
5,2-5,0 (m, 2 Η), 4,98- 4,94 (dd, 1 Η, J = 9,5, 3,6 Ηζ) ,
4,86-4,72 (q, 2 Η, J = 12 Ηζ), 3,9 (s, 3 Η), 3,33-3,3 (d, 1 Η, J = 6,6 Ηζ), 3,27-3,22 (dd, 1 Η, J = 14,1, 5,7 Ηζ) , 3,143,07 (dd, 2 Η, J = 14,0, 6,7 Ηζ), 2,8-2,5 (m, 3 Η), 2,9-1,47 (m, 3 Η), 1,47 (s, 9 Η), 1,3Η, J = 6,4 Ηζ), 0,57-0,85 (d, 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 176, 154,0, 146,8, 143,2, 138,8,
128,7, 128,4, 126, 7, 126, 6,
94,2, 79,0, 76,2, 74,5, 71,2,
39,4, 36,5, 33,3, 28,3, 24,7, IR (CHCI3) 3426, 3385, 2967,
1646, 1597, 1519, 1500, 1345, 1024 cm-1.
-1,2 (m, 9 Η), 0,91-0,89 (d,
3 H, J = 6,4 Hz) ;
8, 170, 6, 169, 9, 165, 1, 156,2
135,8, 135,4, 131,1, 129,7
125,5, 123,9, 122,2, 112,1
56, 0, 53, 1, 48,5, 43, 9, 41,2
22,9, 22,7, 22,3, 21,4, : 16,3;
2936, 2874, 2841, 1712, 1681
1280, 1259, 1170, 1150, 1067
Styrenový produkt (0,55 g) byl připraven z 1,77 g výchozího karbamátu s 42% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
3H NMR (300 MHz, CDC13) 8,23-8,21 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 7,527,49 (d, 2 H, J = 8,7 Hz), 7,24-7,2 (m, 2 Η), 7,11-7,08 (dd, 1 H, J = 8,5, 1,92 Hz), 6, 89-6, 87 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6, 86-6, 72 (m, 1 Η) , 6,56-6,51 (d, 1 H, J = 15,9 Hz), 6,33-
6,25 (dd, 1 H, J = 15,9, 8,7 Hz), 5,94- •5,91 (d, 1 H, J = 7,8
Hz) , 5,83-5,78 (d, 1 H, j = 15,2 Hz), 5,17- 5,12 (m, 1 H),
4,92 -4,88 (dd, 1 H, J = = 9,7, r 3,6 Hz), 4,8- 4,75 (m, 1 Η) ,
3,92 (s, 3.H), 3,5-3,43 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,73 Hz), 3,2-
3,1 (ra, 3 Η) , 2,7-2,35 (ra, 3 H), 1,8-1 ,6 (m, 2 H) , 1,4-1,19
(m, 1H), 1,2 l :s, 3 h), 1,16- 1,14 (d, 1 δ H), 0,82- 0,81 (d, 3
• · • » · • · · • · ·
- 142 ·* » · ·
I · · · · • · · « ·· ·· ·· ·· • · · · • · · ·
H, J = 3,73 Hz), 0,80-79 (d, 3 H, J = 3,87 Hz)
Příklad 34
XH NMR (300 MHz, CDC13) 8,5 (s, 1 H) , 7,76-7,74 (d, 2 H, J =
7,4 Hz), 7,58-7,56 (d, 2 H, J = 7,4 Hz), 7,5-7,1 (m, 8 H) ,
7,03-7,0 (d, 1 H, J = 8,2 Hz), 6,81-6,78 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6, 78-6, 65 (m, 1 H) , 6, 37-6, 34 (d, 1 H, J = 7,3 Hz), 5,84-5,81 (t, 1 H, J = 5,2 Hz) , “5769-5,64 (d, 1 H, J = 15,0
Hz), 5,18-5,15 (bd, 1 H, J = 9,0 Hz), 4.83-4,6 (m, 2 H) ,
4,45-4,43 (d, 2 H, J = 6,1 Hz), 4,24-4,19 (t, 1 H, J = 6,6 Hz), 3,99 (bs, 2 H), 3,81 (s, 3 H), 3,61 (s, 1 H), 3,46-3,39 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,8 Hz), 3,2-2,8 (m, 5 H), 2,6-2,3 (m, 3 H), 1,8-1,3 (m, 3 H) , 1,2 (s, 3 H) , 1,14 (s, 3 H) , 1,12-1,1 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,86-0,81 (t, 6 H, J = 7,3 Hz).
·· ·« »
- 143 ·« » · · » · « ··
Příklad 35
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,5 (Ml, 2 H) , 7,6-7,57 (d, 2 H, J = 8,1 Hz), 7,24-7,18 (m, 5 H) , 7,05-7,03 (d, 1 H, J = 8,3
Hz), 6, 84-6, 82 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6, 82-6, 65 (m, 1 H) ,
6,02-6,0 (d, 1 H, J = 7,6 Hz), 5,72-5,67 (d, 1 H, J = 15,3 Hz), 5,19-5,16 (bd, 1 H, J = 10,5 Hz), 4,9-4,6 (m, 2 H) , 3,85 (s, 3 H) , 3,64 (s, 1 H) , 3,55-3,4 (m, 3 H) , 3,2-2,95 (m, 3 H), 2,90-2, 88 (d, 1 H, 7,11 Hz), 2,6-2,3 (m, 3 H) ,
2,0-1,3 (nb-^-H), 1,2 (s, 3 H) , 1,15 (5, 3 H) , ±/±5-1,11 (d, 3 H, J = 6,9 Hz), 0,90-0,84 (t, 6 H, J = 7,2 Hz).
« ·
- 144 • « * · 4 · · · ř * ··· · • · · · » · « · · * · • · 9 9 4
Schéma 2
OTBS o
OMe
KOH
THF, 65 *C
i 1
OTBS OH
- 145 t · · i »· · · • · · · • · · · ·· ·· • · · · · « • · · · · · · ····· · ··· «·· • · · ·
Schéma 2 (pokračování)
DCC, DMAP CH2CI2 (75-05%)
1) TFA
2) 2-hydroxypyridi.n Toluen
- 146 • · · • · · · ·
I · ·
Μ · ·
9 ·· > · · • · 9
9 · » · · · ·
Schéma 2 (pokračování)
TMSCl, CHClj -60* potom o*c
147 ř · · · · · · k · · « » * · « • · > · • · · · * ♦ · « • · · 4 • · · · · « • I « · · Φ
Příklad 36
Podle Schématu 2
Do alkenu 17 (0,3 g, 0,50 mmolů) při teplotě -78 °C v 9,0 ml CH2C12/1,O ml MeOH byl přidán 2-pikolin (0,07 ml, 0,074 mmolů). Tento roztok byl vystaven působení 1,2 ekvivalentů ozonu a výsledný ozonid byl zalit dimethylsulfidem (1,1 ml, 2,2 mmolů). Směs byla pomalu zahřáta na teplotu okolí a míchána přes noc. Roztok byl promýván vodou (2 x 20 ml), sušen nad Na2SO4, filtrován a koncentrován za sníženého tlaku a tím bylo získáno 0,251 g (87%) aldehydu 18:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9, 64-9, 63 (d, 1 H, J = 1,05 Hz) ,
7,25-7 , 2 (m, 2 H) , 1,08-7,05 (d, 1 H, J = 8,2 Hz) , 6,86 -6, 83
(d, 1 H, J = = 8,4 Hz) , 6, 83-6,7 (m, 1 Η) , 5,81-5,76 (d, 1 H,
J = 15 ,1 Hz) , 5,7 5-5,65 (bs, 1 Η) , 5,38- 5,3 (m, 1 Η) , 4,85-
4,81 ( dd, 1 H, J = 10,2, 3,2 Hz), 4,80- 4,1 (m, 1 Η) , 3,87
(s, 3 H), 3, 46-3, 39 (dd, 1 H, J = 13,5, 8 ,7 Hz) , 3, 2-3, 0 (m,
3 H), 2,7-2, 4 (m, 3 H), 1,8-1,6 (m, 2 H) ,_1,4-1,3 (m, 1 H),
1,23 (s, 3 Η) , 1,18-1,16 (d, 6 Η) , 0,94-0,92 (d, 3 H, J =
6,5 Hz), 0,88-0,86 (d, 3 H, J = 6,4 Hz).
• «
- 148
Schéma 3
CMs
O
Ό
149 • · • · > · · · ·
I A · · » · · • ····· « * · I • · · I
Schéma 4
O • · • ·
1) TMSCI NHBoc
- 151 • · « · · · » · · r
9 · · a · 9 9 9 9 9 9 9 • ·9 999 999999 999 999
9 9 9 9 9 9 9 9
9 99 99 9 ·9 9 9
Schéma 5
PPh3 • 0 • 0
- 152
0 0 «000
W 0 0
0 0 « 0 0
Schéma 5 (pokračování)
s • 0
- 153 • · · 0 · · • * ·
0 0 0 0
0* · 0 0 •·0 · • · «0 · 0
Schéma 6
• ·
o • ·
• 9
156 • 0000 * 9·· 9 00
09 999 909000 909
0 0 0 0 0 0 · 0 0 1 00 0« 9 *0 00
Příklad 37
Podle Schématu 3
Do roztoku Kryptofycinu 53 (0,15 g, 0,23 mmolů) v 3 ml DME a 2,0 ml H2O bylo přidáno 5 kapek koncentrované H2SO4. Směs byla míchána přes noc a bylo přidáno dalších 5 kapek H2SO4 a míchání pokračovalo po dobu dalších 24 hodin. Nasycený NaHCO3 byl pomalu přidán dokud všechna reaktivita neustala a směs pak byla extrahována CH2C12. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad Na2SO4, filtrována a koncentrována. Výsledné residuum bylo čištěno sloupcovou chromatografií (silikagel, 2% MeOH/CH2Cl2) a tím bylo získáno 0,13 g diolů. Do směsi diolů v 4,0 ml THF a 2,0 ml H2O byl přidán NaIO4 (0,144 g, 0,675 mmolů). Výsledná směs byla míchána přes noc při teplotě okolí. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a bylo přidáno 5 ml H20 a směs byla extrahována CH2C12. Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku a tím se získalo 0,10 g (77%) aldehydu 18.
Do 4-hydroxymethylbenzyl-trifenylfosfoniumchloridu (0,23 g, 0,4 mmolů) chráněného TIPS v 3,0 ml THF při teplotě -18 °C bylo přidáno po kapkách 0,25 ml 1,6 M roztoku n-butyllithia. Směs byla zahřáta pomalu na teplotu 0 °C a míchána po dobu dalších 10 minut. Do aldehydu 18 v 4,0 ml THF a při teplotě -78 °C bylo přidáno po kapkách 2,5 ml 0,13 M oranžového ylidového roztoku. Výsledná směs byla míchána při teplotě 78 °C po dobu 2 hodin a při teplotě okolí po dobu 30 minut. Nasycený NH4C1 (20 ml) byl přidán spolu s ethylacetátem (10 ml), vrstvy odděleny a organická vrstva byla promývána vodou • · • · ·
- 157 • · · · · · • · · · « ·
9 9 9 ·
9 9 * (3 x 10 ml) a solankou. Nakonec, po sušení nad MgSO4, byla organická fáze filtrována, koncentrována za sníženého tlaku a výsledné residuum bylo čištěno použitím sloupcové chromatografíe (silikagel, 70% EtOAc/hexany) a tím se získalo 0,09 g (62%) požadovaného styrenu.
Příklad 38
OKCT
Xvxcc sníženého (silikagel,
Do roztoku Kryptofycinu 53 (2,0 g, 2,99 mmolů) v 30 ml DME, byl přidán 2 M vodný roztok perchlorové kyseliny (15 ml, 30 mmolů) a výsledná směs byla míchána po dobu 6 hodin. Po pečlivé neutralizaci nasyceným NaHCO3 (50 ml) směs byla extrahována CH2CI2 (4 x 100 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za tlaku. Čištění sloupcovou chromatografií 5% MeOH/CH2Cl2) dalo dioly 19 (1,5 g) s 72% výtěžkem ve formě 3:1 anti/syn směsi. Do roztoku diolů (1,0 g, 1,46 mmolů) v 20 ml THF a 15 ml vody byl přidán NaIO4 a směs byla míchána pod dusíkovou Po odstranění hlavní části THF za (1,9 g, 8,9 mmolů) atmosférou přes noc. sníženého tlaku residuum bylo zředěno vodou (100 ml) a extrahováno CH2C12 (4 x 50 ml) byly promývány solankou (1 x filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Residuální benzaldehyd byl odstraněn rozpuštěním pevné látky v 100 ml
Sloučené organické extrakty 25 ml) , sušeny nad Na2SO4,
- 158 toluenu a následným odstraněním toluenu při teplotě 40 °C v rotační odparce. Dvě další odpařování z toluenu daly aldehyd 18 ve formě žluté pěny (0,828 g) s 98% výtěžkem. Výsledný aldehyd byl použit bez dalšího čištění a byl uchováván při teplotě -23 °C z důvodů stability:
[a]2% +23,0° (c 0,565, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9, 64-9, 63 (d, 1 H, J = 1,4 Hz),
7,28-7,26 (m, 1 H) , 7,21-7,20 (d, 1 H, J = 1,9 Hz), 7,087,05 (dd, 1 H, J = 7,1, 1,7 Hz), 6,87-6,84 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6, 82-6, 72 (m, 1 H) , 5,80-5, 75 (d, 1 H, J = 15,0 Hz),
5,54-5,51 (d, 1 H, J = 7,7 Hz), 5, 40-5, 33 (m, 1 H) , 4,854,81 (dd, 1 H, J = 9,7, 3,2 Hz), 4,78-4,71 (m, 1 H) , 3,88 (s, 3 H), 3,46-3,39 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,6 Hz), 3,15-3,03 (m, 3 H), 2,68-2,35 (m, 3 H), 1,82-1,63 (m, 2 H), 1,45-1,37 (m, 1 H), 1,24 (s, 3 H) , 1,19-1,16 (d, 3 H, J = 7,1 Hz),
1,18 (s, 3 H), 0, 94-0, 92 (d, 3 H, J = 6,5 Hz), 0,89-0,87(d, 3 H, J = 6,5 Hz);
X3C NMR (63 MHz, CDC13) δ 200,7, 177,8, 170,6, 170,1, 165,1,
153,9, 141 ,1, 130,7, 129,8, 128,1, 124,9, 122,3, 112,3,
73,4, 71,1, 56,0, 54,6 , 49, 9, 46, 4, 42,7, 39,2, 36.i, 35,2,
24,7, 22,8, 22,7, 21,3, 10,7;
IR (CHC13) 3422, 2964, 2936, 1755, 1730, 1718, 1678, 1529,
1504, 1487, 1474, 1464, 1442, 1320, 1303, 1281, 1259, 1244,
1185, 1151, 1127, 1067 cm'1;
Elementární analýza (C29H39C1N2O6) : C, Η, N.
« · • ·
- 159
Příklad 39
Do 4-(triisopropylsiloxymethyl)benzyltrifenylfosfoniumbromidu (7,6 g, 12,2 mmolů) v 100 ml THF při teplotě -50 °C byl přidán po kapkách 8,0 ml 1,5 M roztok n-butyllithia (8,1 ml, 12,2 mmolů). Směs byla zahřáta pomalu na teplotu okolí a míchána po dobu dalších 30 minut. Do aldehydu 15 (2,95 g, 5,1 mmolů) v 100 ml THF a při teplotě -78 °C byl přidán po kapkách červený ylidový roztok pomocí dvojité jehly. Výsledná směs byla míchána při teplotě -78 °C po 3 hodiny a při teplotě okolí po dobu 45 minut. Nasycený NH4C1 (100 ml) byl přidán spolu s ethylacetátem (100 ml), vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (2 x 50 ml). Sloučené organické vrstvy byly promýván vodou (3 x 40 ml) a solankou, sušeny nad MgSO4 filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Výsledné žluté residuum bylo čištěno použitím sloupcové chromatografie (silikagel, 10-20-50% EtOAc/hexany) a tím se získalo 3,6 g (84%) požadovaného styrenu ve formě bílé pevné látky a jako směs E:Z isomerů.
Směs isomerů (7,3 g, 8,7 mmolů) byla rozpuštěna v 240 ml benzenu a zahřívána na teplotu zpětného toku v přítomnosti 1,1'-azobis(cyklohexanekarbonitrilu) (VÁZO) (0,32 g, 0,87 mmolů) a thiofenolu (3,7 ml, 4,0 mmolů). Po uplynutí 5 hodin
- 160 zahřívání na teplotu zpětného toku byl roztok koncentrován a residuum čištěno sloupcovou chromatografií (silikagel, 5-50% EtOAc/hexany) a tím se získalo 6,7 g (92%) E isomeru 20 ve formě bílé pevné látky:
[a]2% +31,9° (c 1,0, CHC13) ;
1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,3-7,22 (m, 5 H) , 7,20-7,19 (d, 1 H, J = 1,95 Hz), 7,07-7,04 (dd, 1 H, J = 8,4, 2,0 Hz), 6,856,82 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,8-6,7 (m, 1 H) , 6,4-6,38 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 6, 02-5, 94 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,8 Hz), 5,77-5,72 (d, 1 H, J = 14,9 Hz), 5,56-5,54 (d, 1 H, J = 7,9 Hz), 5,1-4,7 (m, 5 H), 3,9 (s, 3 H), 3,45-3,37 (dd, 1 H, J =
13,5, 8,5 Hz), 1,0 (m, 31 H) , 0,75-0,71 (t, 6 H, J = 6,1
Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,5, 170,4, 165,2, 153,9,
142,1, 141,1, 135,2, 131,5, 130,8, 129 ,7, 129, 6, 128,1,
125,9, 124,5, 122,4, 112,2, 77,0, 71,4, 64,7 , 56,0, 54,4,
46,4, 42,7, 42,2, 39,4, 36,5, 35,3. 24,5, 22,8 1, 22,6, 22,5,
21,2, 17,9, 17,2, 11,9;
IR (CHCI3) 3423, 2962, 2945, 2867, 1746, 1712 , 1681, 1652,
1528, 1503, 1485, 1473, 1464, 1303, 1259 cm-1;
Elementární analýza (C46H67ClN2O8Si) : C, Η, N.
Příklad 40
- 161
·· 0 00 00 0 0 0 0 · 0 ·
000 0 ·· 0
00000 · 000 000
3-Chlorperoxybenzoová kyselina (0,27 g, 1,59 mmolů) byla přidána do roztoku styren 20 (1,25 g , 1,49 mmolů) v 20 ml
CH2CI2 o teplotě 0 °C. Roztok byl míchán po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a přes noc při teplotě okolí. Roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a výsledné epoxidy byly odděleny pomocí HPLC s obrácenou fází a tím bylo získáno 0,67 g β epoxidu 22 (57%) ve formě bílé pevné látky:
[a]20D +20,9° (c 0,765, CHC13) ;
1H NMR ( 300 MHz, CDCI3) δ 7,35- 7, 33 (d, 2 H, J = 7,8 Hz) ,
7, 26-7,2 (m, 4 Η) , 7,05-7,02 (bd, 1 H, J ; 8, 2 Hz), 6 ,84-
6, 81 (d, 1 H, J = 8,4 Hz) , 6, 81-6, 65 (m, 1 H), 5,8-5,65 (m,
2 H), 5, 25-5,15 (m, 1 Η), 4,9-4,7 (m, 4H), 3,9 (s, 3H), 3,7
(s , 1H), 3,46-3,42 (dd, 1H, J = 13 ,4, 8,8 Hz), 3,15-3,0 (m,
3 H), 2, 93-2,9 (d, 1 H, J = 7,3 Hz ) , 0,83-0,79 (t, 6 H, J =
5,3 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,7, 170,5, 170,4, 165, 1, 153,9,
142,1, 141,6, ).36,7, 135, 1, 130,7, 129, 8, 128^^125,9,
125, 5, 124,6, 122,3, 112,2, 75, 9, 71,0, 64,6, 63,0, 58,9,
56, 0, 54,6, 46,3, 42,7, 40,5, 39,2, 36,8, 35,2. 24,2, 22,8,
22,7, 22,6, 18,0, 13,4, 11,9;
IR (CHCI3) 3424, 2962, 2945, 2867, 1751, 1712, 1682, 1528,
1503, 1485, 1473, 14 64, cm1;
Elementární analýza (C46H67ClN2O9Si) : C, Η, N.
• ·
- 162
Příklad 41
Tetrabutylamoniumfluorid (0,14 ml, 0,14 mmolů), ve formě 1,0 M roztoku v THF, byl přidán po kapkách do roztoku β epoxidu ( 0,1 g, 0,117 mmolů) v 3,5 ml THF o teplotě 0 °C. Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu okolí a míchání pokračovalo po dobu dalších 20 minut, následované přidáním vody (10 ml) a ethylacetátu (20 ml) . Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována CH2C12 (3 x 20 ml) . Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad bezvodým Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku a tím byl získán volný alkohol. Čištění sloupcovou chromatografií (silikagel, 70100% EtOAc-hexany) poskytlo 0,068 g (84%) čistého alkoholu ve formě bílé pevné látky:
[a]20D +26,2° (c 0, 435, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,39- 7,36 (d, 2 H, J = 7,8 Hz),
7,26-7,23 (d, 3 H, J = 9,1 Hz), 7,18 (s, 1 H), 7,05-7,02 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6, 85-6, 82 (d, 1 H, J = 8,2 Hz), 6,82-6,7 (m, 1 H), 5,72-5,67 (d, 1 H, J = 15,1 Hz), 5,55-5,52 (d, 1
H, J = 7,8 Hz), 5,22-5,17 (m, 1 H), 4,85-4,7 (m, 4 H) , 3,9 (s, 3 H) , 3,7 (s, 1 H), 3,45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 9,3 Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H), 2,92-2,89 (d, 1 H, J = 7,6 Hz), 2,652,4 (m, 2 H) , 1,8-1,6 (m, 4 H) , 1,4- 1,2 (m, 1 H) , 1,22 (s, 3 H), 1,16 (s, 3 H), 1,16-1,13 (d, 3 H, J = 7,2 Hz), 0,860,82 (t, 6 H, J = 6,5 Hz);
·· ·
- 163
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 171,0, 170,4, 165, 5, 153,8
141,5, 141,4, 135,7, 133,5, 130,6, 130,0, 128,0, 127,1
125,6, 124,6, 122,2, 112,3, 77,2, 76,5, 76,0, 71,0, 64,2
63,1, 58,8, 56,0, 54,7, 46, 3, 42,7, 40,5, 39, 3, 36, 9, 35, 1
24,5, 22,7, 22,5, 22,1, 13,4;
IR (CHC13) 3422, 2992, 2963, 2936, 2874, 1751, 1713, 1682
1651, 1504, 1486, 1303, 1259, 1186, 1165, 1151, 1067 cm’1;
FAB HRMS [Μ + H] vypočteno pro (Ο37Η48Ο1Ν2Ο9) 699 , 3048
nalezeno 699,3054.
Příklad 42
Do roztoku alkoholu 23 (0,08 g, 0,114 mmolů), N-(terc.butoxykarbonyl)glycinu (0,034 g, 0,194 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (DMAP) (0,004 g, 0,034 mmolů) v 2,0 ml CH2C12 o teplotě 0 °C byl přidán 1,3-dicyklohexylkarbodiimid (DCC) (0,040 g, 0,194 mmolů). Směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 10 minut a při teplotě okolí po dobu 45 minut, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Výsledné residuum bylo čištěno použitím sloupcové chromatografie (silikagel, 70-80 % EtOAc/hexany) a tím se získalo 0,07 g (72%) esteru ve formě bílé pevné látky:
[a]2% +18,5° (c 0,65, CHC13) ;
ςΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,4-7,2 (m, 6 H) , 7,11-7,08 (dd, 1 • ·
- 164 ·· • * • · · · • · « • · « » · ·
H, J = 8,4, 1,8 Hz), 6,9-6, /87 (d, 1 H, J = 8,4 Hz) , 6,86-6,7
(m, 1 H), 5,78-5,73 (d, 1 H, J - 15,2 Hz) , 5, 64-5, 62 (d, 1
H, J = 7,4 Hz) , 5,3- -5,22 (m, 1 H), 5, 22 (s, 2 H), 5,1-5,0
(bs, 1 H), 4,9-4,7 (m, 2 Η), 4,0-3,99 (d, 2 H, J = 5,4 Hz), 3,9 (s, 3 H), 3,73-3,72 (d, 1 H, J = 1,0 Hz), 3,5-3,43 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H), 2,95-2,92 (d, 1 H, J = 6,4 Hz), 2,65-2,4 (m, 2 H), 1,8-1,6 (m, 3 H), 1,5 (s, 9 H), 1,45-1,3 (m, 1 H), 1,26 (s, 3 H), 1,2 (s, 3 H), 1,2-1,17 (d, 3 H, J = 8,7 Hz), 0,9-0,86 (t, 6 H, J = 6,3 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,7, 170, 6, 170, 3, 170,2, 165, 1, 155,6, 153,8, 141,4, 137,1, 135,6, 130,6, 129,9, 128,6,
128,0, 125,7, 124,7, 122,2, 112,2, 79,9, 75,8, 70,9, 66,4,
63,1, 58,5, 56,0, 54,7, 48,9, 46,3, 42.7, 42,4, 40,5, 39,3, 36,8, 35,2, 28,2, 24,5, 22,8, 22,7, 22,6, 21,2, 13,5; Elementární analýza (C44H58ClN3Oi2) : C, Η, N.
Příklad 43
Trimethylsilylchlorid (0,09 ml, 0,75 mmolů) byl přidán do roztoku b epoxidu 24 (0,16 g, 0,187 mmolů) v 5,0 ml CHC13 o teplotě -60 °C. Po uplynutí 2 hodin míchání při teplotě mezi -60 °C a -40 °C bylo přidáno dalších 0,09 ml TMSC1 a míchání pokračovalo po dobu 3 hodin. Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu okolí, koncentrován a čištěn preparativní HPLC s • · ·
165 obrácenou fází (55:45) CH3CN:H2O pro oddělení dvou výsledných chlorhydrinů. Toto čištění dalo 0,058 g (35%) požadovaného chlorhydrinu 25:
[a]2% +50,5° (c 1,075, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,42-7,2 (m, 6 H), 7,13-7,09 (dd, 1 H, J = 8,4, 1,8 Hz), 6,9-6,87 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,85-6,7 (m, 1 H), 5,9-5,8 (m, 2 H), 5,2 (s, 3 H), 4,71-4,68 (d, 1 H, J = 9,7 Hz), 4,07-4,03 (d, 1 H, J = 9,3 Hz), 3,99-3,97 (d, 2
H, J = 5,5 Hz), 3,9 (s, 3 H), 3,44-3,37 (dd, 1 H, J = 13,6,
8,3 Hz), 3,23-3,14 (m, 2 H) , 3,08-3,0 (dd, 1 H, J = 14,5,
8,0 Hz), 2,75-2,4 (m, 3 H), 2,0-1,7 (m, 3 H) , 1,5 (s, 10 H) ,
I, 26 (s, 3 H) , 1,21 (s, 3 H) , 1,08-1,06 (d, 3 H, J = 7,0
Hz), 0,977-0,963 (d, 3 H, J = 4,0 Hz), 0,956-0,942 (d, 3 H,
J = 4,1 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) 177,5, 170,5, 170,2, 170,1, 165, 3,
153,9, 142,2, 139,0, 138,3, 136,1, 130,8, 129,9, 128,7,
128,2, 128,1, 124,5, 122,3, 112,2, 80,0, 76,1, 73,9, 71,1,
66,2, 61,7, 56,1, 54,6, 46,4, 42,7, 42,3, 39,6, 38,4, 36,3,
35,1, 28,2, 24,8, 23,0, 22,9, 22,7, 21,5, 8,6;
IR (CHCI3) 3428. 3009, 2966, 2935, 1750, 1714, 1683, 1504,
1456, 1369, 1259, 1193, 1162, 1127, 1067;
FAB HRMS [Μ + H] vypočteno pro (C44H6oC1N3012 ) 892 ,3554,
nalezeno 892,3565.
·· ··
- 166 • · · ·· ·· • · · 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
9 9 999 9 99 9 99 9
9 9 9 9
9 99 9 9
Příklad 44
M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (0,08 ml, 0,33 mmolů) byl přidán do roztoku glycinátu 25 (0,058 g, 0,065 mmolů) v 0,2 ml CH2C12. Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 3 hodin, koncentrována za sníženého tlaku a udržována za sníženého tlaku po dobu 3 dnů pro odstranění 1,4-dioxanu, čímž se získala požadovaná hydrochloridová sůl s kvantitativním výtěžkem:
[a]2% + 26,2 (c 0,58, MeOH );
XH NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7,48-7,42 (q, 4 H, J = 11,2 Hz),
7,31-7,3 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 7,21-7,19 (dd, 1 H, J = 8,5, 2,0 Hz), 7,01-7,0 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,8-6,7 (m, 1 H) , 6,0-5,95 (dd, 1 H, J = 15,2, 1,5 Hz), 5,3 (d, 2 H, J = 1,3 Hz), 5,16-5,1 (m, 1 H) , 5,09-5,07 (dd, 1 H, (7 = 10,0, 3,6 Hz), 4,84-4,82 (d, 1 H, J = 9,8 Hz), 4,54-4,51 (dd, 1 Η, T = 11,3, 3,7 Hz), 4,05-4,03 (dd, 1 H, J = 9,5, 1,8 Hz), 3,9 (s, 2 H), 3,86 (s, 3 H) , 3,5-3,47 (d, 1 H, J = 13,5 Hz), 3,223,18 (dd, 1 H, J = 14,5, 3,6 Hz), 3,14-3,11 (d, 1 Η, T = 13,5 Hz), 2,8-2,77 (d, 1 H, J = 14,4 Hz), 2,78- 2,75 (m, 2 H), 2, 55-2,35 (m, 2 H), 1,9-1,55 (m, 4 H) , 1,4- 1,3 (m, 1 H) , 1,24 (s, 3 H), 1,2 (s, 3 H), 1,04-1,03 (d, 3 H, J = 7,0 Hz), 1,02-1,0 (t, 6 H, J = 7,2 Hz) ;
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 178,9, 173,8, 171, 9, 168,3, 155,3,
144.2, 141,8, 136,7, 132,3, 131,5, 129,75, 129,7, 129,4,
125.2, 123,3, 113,5, 77,2, 74,7, 72,6, 68,5, 63,5, 57,6, ·♦ ·· • · · · • · · · • ·»· ··· • · ·· ·· • ·
167 ·· ·· • · · • · ··· • · · • · · · • » 3· ·* · * · e • · · · • · »··· • · · ·· ·
56,7, 47,6, 44,1, 41,1, 40,4, 37,9, 36, 5, 26, 3, 23,6, 23,5,
22,2, 9,0;
IR (KBr) 3412, 2961, 2935, 1752, 1722, 1669, 1504, 1473,
1279, 1259, 1207, 1151, 1126, 1065 cm'1.
Příklad 45
Do chlorhydrinu 25 (0,14 g, 0,16 mmolů), N-(terc.butoxykarbonyl)glycinu (0,041 g, 0,24 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (DMAP) (0,002 g, 0,016 mmolů) v 0,7 ml CH2C12 byl přidán 1,3-dicyklohexylkarbodiimid (DCC) (0,049 g, 0,24 mmolů). Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 1 hodiny, filtrována použitím ethylacetátu a koncentrována za sníženého tlaku. Výsledné residuum bylo čištěno použitím sloupcové chromatografie (silikagel, 50-6070% EtOAc/hexany) a tím se získalo 0,158 g (97%) diglycinátu 27 ve formě bílé pevné látky:
[a]2% +44,0° (c 1,25, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7,4-7,2 (m, 7 H), 7,13-7,10 (bd, 1 H, J = 9,8 Hz), 6,91-6,88 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 5,8-5,77 (d, 1 H, J = 15,3 Hz), 5,6-5,58 (m, 1 H), 5,49-5,46 (d, 1 H, J = 9 6 Hz), 5,19 (s, 2 H), 5,1-4,7 (m, 6 H), 3,98-3,97 (d, 2 H, J = 5,0 Hz), 3,93 (s, 3 H) , 3, 69-3,62 (dd, 1 H, J = 18,2, ·
• · ·
- 168 • · · · • · · * · ♦ · · · · ♦ * · ♦ · · • · · ·
4,0 Hz), 3,5-3,0 (m, 5 H), 2,7-2,35 (m, 3 H), 2,0-1,7 (m, 3
H) , 1,49 (s, 9 H) , 1,44 (s, 9 H) , 1,28 (s, 3 H) , 1,22 (s, 3 H) , 1,1-1,08 (d, 3 H, J = 7,0 Hz), 1,06-1, 04 (d, 3 H, J =
6,4 Hz), 1,0-0,98 (d, 3 H, J = 6,2 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,6, 170,4, 169, 9, 168,5, 165, 0,
155,2, 153,9, 141, 6, 138,6, 137,3, 136,3, 130,8, 129,8,
128,2, 128,1, 124,6, 122,3, 112,2, 79,9, 74,7, 71,1, 66,2,
60,0, 56, 0, 54,5, 46, 5, 42,8, , 42,4, 41,8, 39,5, 38,0, 36,5,
35,2, 28,2, 28,15, 24,8, 23,1 , 22.8, 22,6, 21,4, 9, 9;
IR (CHC13) 3431, 2982, 2966, 2935, 2872, 1756, 1713, 1685,
1504, 1369, 1258, 1193, 1161;
FAB HRMS [M - BOC + H] vypočteno pro (C46H63Cl2N4Oi3) 949, 3769, nalezeno 949,3777.
Příklad 46
M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (0,1 ml, 0,42 mmolů) byl přidán do roztoku diglycinátu 21 (0,044 g, 0,042 mmolů) v 0,2 ml CH2CI2. Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 3 hodin, koncentrována za sníženého tlaku a udržována za sníženého tlaku po dobu 3 dnů pro odstranění residuálního 1,4-dioxanu a tím se získala požadovaná hydrochloridová sůl 28 s kvantitativním výtěžkem:
• · • · • · · · • ·
- 169 [a]2% +33,1 (c 0,865, MeOH);
XH NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7,77-7,74 (d, 1 H), 7,46-7,41 (q, 4 H, ,7 = 20,3, 8,4 Hz), 7,29-7,28 (d, 1 H, J = 2,1 Hz), 7 187,16 (dd, 1 H, J = 8,6, 2,1 Hz), 6, 99-6, 97 (d, 1 H, J = 8,5
Hz), 6,7-6,6 (m, 1 H) , 5,95-5, 92 (d, 1 H, J = 15,3 Hz),
5,54-5,52 (dd, 1 H, J = 9,5, 1,4 Hz), 5,5 (s, 1 H), 5,28 (s,
H), 5,21-5,19 (d, ÍH, J = 9,4 Hz), 5,12-5,09 (dd, 1 H, J =
10.5, 3,1 Hz), 4,87-4,85 (d, 1 H, J = 12,4 Hz), 4,5-4,47 (dd, ÍH, J = 11,3, 3,7 Hz), 3,9 (s, 2 H) , 3,84 (s, 3 H) ,
3,82-3,79 (d, 1 H, J = 17,8 Hz), 3,48-3,45 (d, 1 Η, T = 13,7 Hz), 3,35-3,3 (m, 1 H) , 3,19-3,15 (dd, 1 H, J = 14,5, 3,8
Hz), 3,11-3,09 (d, 1 Η, T = 13,8 Hz), 2,77-2,6 (m, 3 H) ,
2,37-2,3 (m, 1 H) , 1, 95-1,75 (m, 3 H) , 1,22 (s, 3 H) , 1,17 (s, 3 H), 1,08-1,07 (d, 3 H, J = 7,0 Hz), 1,03-1,02 (d, 3 H, J = 6,4 Hz), 1,0-0,99 (d, 3 H, J = 6,2 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 178,8, 173,8, 171,9, 168,5, 168,2,
167.8, 155,4, 143,5, 139,3, 137,6, 132,2, 131,4, 129,7,
129.5, 129,4, 125,3, 123,3, 113,5, 77,9, 76,2, 72,4, 68,2,
60.8, 57,7, 56,7, 47,5, 44,2, 41,2, 40,5, 39,8, 37,9, 36,5,
26,3, 23,7, 23,4, 22,0, 9,9;
IR (KBr) 3417, 3234, 2959, 2873, 2622, 1757, 1724, 1673,
1504, 1473, 1303, 1259, 1221, 1150, 1065 cm'1 .
- 170 {•444 4 · · · · · · • · 4 4 4 · 444« · ··· ·«
4······ 4 ·· · 4 · · 4 94 · «
Příklad 47 >rr
ý+jccc
Směs volné kyseliny fragmentu C' 10,22 g, 1,02 mmolů), DMAP (0,032 g, 0,26 mmolů) a DCC (0,21 g, 1,02 mmolů) byla míchána po dobu 30 minut při teplotě 0 °C v 6,5 ml CH2CI2. Volný alkohol 29 (0,35 g, 0,51 mmolů) v 6,0 ml CH2C12 byl přidán po kapkách. Směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 10 minut a při teplotě okolí po dobu 24 hodin a nakonec byla zahřívána při teplotě zpětného toku po dobu 3 hodin a znovu ochlazena na teplotu okolí. Reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a filtrována přes celit
-použitím EtOAc. Výsledné residuum bylo čištěno použitím sloupcové ehromatografié (silikagel, 60-70% EtOAc/hexany) a tím se získalo 0,38 g (85%) výše uvedeného esteru ve formě bílé pevné látky:
[a]20d +23,2° (c 1,0, CHC13 ) ;
XH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,4-7,2 (m, 6 Η), 7,12-7,08 (dd, 1
H, J = 8,4, 2,0 Hz), 6,9-6,87 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,876.75 (m, 1 H), 6,47-6,42 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 6,11-6,03 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,8 Hz), 5,82-5,77 (d, 1 H, J = 14,9 Hz), 5,61-5,58 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,12 (s, 2 Η) , 5,124.75 (m, 4 Η) , 3,9 (s, 3 Η) , 3,49-3,42 (dd, 1 H, J = 13,4,
8,7 Hz), 3,29-3,27 (d, 1 H, J = 6,5 Hz), 3,2-3,1 (m, 3 Η) , 2,65-2,3 (m, 3 Η), 1,8-1,6 (m, 3 Η), 1,47 (s, 9 Η) , 1,45-1,3 (m, 1 H), 1,3-1,15 (m, 15 Η) , 0,79-0,75 (t, 6 H, J = 6,4
- 171
Hz) ;
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 177,8, 170, 4, 165, 1, 153, 9, 141,9, 136,7, 135,1, 131,1, 130,8, 129,7, 128,3, 128,2, 126,2,
124,6, 122,4, 112,2, 76, 9, 71,3, 66,0, 56,0, 54,4, 48,2,
46,4, 43,7, 42,6, 42,2, 39,4 , 36,4, 35,2, 28,3, 24,5, 22,8,
22,6, 21,2, 17,2;
IR (CHC13) 3426, 2968, 2935, 2874, 2841, 1746, 1713, 1684,
1652, 1504, 1486, 1474, 1368 , 1318, 1304, 1259, 1244, 1165,
1151, 1067 cm'1;
FAB HRMS [M - BOC + H] vypočteno pro (Ο42Η57Ο1Ν3Ο9) 782,3783, nalezeno 782,3788.
Příklad 48
3-Chlorperoxybenzoová kyselina (0,092 g, 0,54 mmolů) byla přidána do roztoku výchozího styrenu (0,45 g , 0,51 mmolů) v 9,0 ml CH2CI2 o teplotě 0 °C. Roztok byl míchán po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a přes noc při teplotě okolí. Pak byl koncentrován za sníženého tlaku a výsledné epoxidy rozpuštěny v 10 ml CHC13 a ochlazeny na teplotu -60 °C.
Čerstvě destilovaný TMSC1 (0,25 ml, 1,95 mmolů) byl přidán do roztoku o teplotě -60 °C a směs byla míchána po dobu 1 hodiny. Byl přidán další TMSC1 (0,5 ml, 3,9 mmolů) a míchání pokračovalo při teplotě mezi -60 °C a -40 °C po dobu dalších
172 φφφ hodin. Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu okolí a byl přidán další TMSC1 (0,25 ml, 1,95 mmolů). Po uplynutí 30 minut míchání při teplotě okolí roztok byl koncentrován a čištěn preparativní HPLC pro oddělení výsledných chlorhydrinů. Toto čištění dalo 0,1 g (22%) požadovaného chlorhydrinu:
[a] 2% + 47,9° (c 0,75, CHC13 ) ;
3Η NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,5-7,2 (m, 6 Η), 7,13-7,10 (dd, 1
H, J = 8,4, 1,9 Hz), 6,91-6,88 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,876,75 (m, 1 H), 5,85-5,8 (d, 1 H, J = 14,9 Hz), 5,75-5,6 (m, 1 H), 5,22-5,1 (m, 3 Η) , 5,0-4,9 (m, 2 Η) , 4,8-4,72 (m, 1
H), 4,71-4,68 (d, l H, J = 9,6 Hz), 4,07-4,03 (d, 1 H, J =
9,5 Hz), 3,9 (s, 3 H), 3, 45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,5 Hz), 3,31-3,26 (d, 1 H, J = 6,4 Hz), 3,25-3,0 (m, 4 Η), 2,82,65 (bd, 1 H), 2,6-2,35 (m, 2H), 1,9-1,7 (m, 3 Η), 1,47 (s, 10 H), 1,27 (s, 3 Η) , 1,25 (s, 6 Η) , 1,22 (s, 3 Η) , 1,09I, 07 (d, 3 H, J = 7,0 Hz), 0,98-0,96 (m, ó H);
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 177,5, 170, 5, 165,2, 153, 9, 142,5,
137,0, 130,8, 129,8, 128,2, 124,5, 122,4, 112,2, 79,1, 76, l,
73,9, 71,1, 65, 6, 61,7, 56, 1, 54,5 , 48,2, 46,4, 43,7, 42,7,
39,6, 38,4, 36,3, 35,2, 28,3, 24,8 , 23,0, 22,9, 22,8, 22,7,
21,5, 8,6;
IR (CHC13) 3426, 2967, 2934, 2873, 2841, 1715, 1684, 1605,
1504, 1485, 1474, 1442, 1368, 1305, 1258, 1151 cm -1. t
FAB HRMS [M - BOC + H] vypočteno pro (C42H58C12N3Oio) 834 , 3499,
nalezeno 834,3487.
- 173 ··· · · · ···· • · · ·· · · · < · ·· · • ·· · « 4 ·····« ··· ··· »···»· π · ·
A · Μ · « «ο ♦»
Příklad 49
CIHjN
M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (0,11 ml, 0,43 mmolů) byl přidán do roztoku chlorhydrinu (0,08 g, 0,086 mmolů) v 0,35 ml CH2CI2. Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 3 hodin, koncentrována za sníženého tlaku a udržována za sníženého tlaku po dobu 3 dnů pro odstranění 1,4-dioxanu a tím se získala požadovaná hydrochloridová sůl (viz výše) (0,075 g) s kvantitativním výtěžkem; [a]2% +28,0° (c 0,5, CH3OH );
XH NMR (300 MHz, CD3OH) δ 8,52-8,49 (d, 1 H,
7,84-7,81 (d, 2 H, J = 9,6 Hz) 7 49-7,39 (q,
Hz) 7,32-7,31 (d, 1 H, J = 1,9 Hz), 7,22- 7,19 8,4, 2,1 Hz), 7,02-7,0 (d, 1 H, J = 8,4 Hz),
H), 6,0-5,9 (dd, 1 H, J = 15,4, 1,0 Hz), 5,22 5,0 (m, 2 H), 4,85-4,81 (d, 1 H, J = 9,6 Hz),
H), 4,06-4,03 (dd, 1 H, J = 9,6, 1,5 Hz), 3,54-3,46 (dd, 1 H, J = 13,5, 9,7 Hz), 3,253,11 (s, 2 H), 2,8-2,7 (m, 2 H), 2,6-2,3 (m, 3 (d, 3 H, J = 6,9 Hz), 1,02-1,01 (d, 3 H, J = 0,99 (d, 3 H, J = 3,4 Hz);
J = 7,5 Hz), 4 H, J = 8,3 (dd, 1 H, J = 6,8-6,7 (m, 1 (s, 2 H), 5,24,6-4,5 (m, 1
3,9 (s, 3 H),
3,11 (m, 2 H),
H) , 1,06-1,03
3,2 Hz), 1,0-
13C NMR (63 MHz, CD3OH) δ 178,9, 176, 5, 173,8, 171,8, 168,3,
155.3, 144,2, 141,6, 137,4, 132,3, 131,5, 129,8, 129,4,
129.3, 125,2, 123,3, 113,5, 77,2, 74,7, 72,6, 67,8, 63,5,
• 0 • 0«
- 174 • 0
Ϊ · * · • 0 0 0 0 0 • 00 • 0 ·
0 •
0 0
57,6, 56,7, 47,7, 47,6, 44,1, 42,3, 41,1, 40,4, 37,9, 36, 5,
26,2, 23,7, 23,4, 22,2, 9,0;
IR (CHCI3) 3421, 2964, 2935, 2873, 2841, 1717, 1676, 1528,
1504, 1477, 1464, 1405, 1282, 1259, 1185, 1152, 1067 cm' -1. r
FAB HRMS [Μ - Cl] vypočteno pro (C42H58CI3N3O10) 834,3499, nalezeno 834,3504.
Příklad 50
Styren (uvedený výše) (0,67 g) byl připraven z aldehydu 18 (1,0 g, 1,73 mmolů) a 3-methylbenzyltrifenylfosfoniumchloridu (0,886 g, 2,2 mmolů) s 58% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20; [a]20D +33,1° (c 1,0, CH3OH) ;
XH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,24-7,0 (m, 7 H) , 6, 85-6, 82 (d, 1
H, J = 8,4 Hz) , 6,82-6,7 (m, 1 H) , 6,39-6, 34 (d, 1 H, J =
15,8 Hz), 6,03-5,95 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,7 Hz), 5,78-5,73
(d, 1 H, J = 15,2 Hz) , 5, 67-5, 64 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,1-
5,0 (m, 1 H), 4,87-4,83 (dd, 1 H, J = 10,2, 3,5 Hz), 4,8-4,7 (m, 1 H), 3,9 (s, 3 H), 3,45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H) , 2,6-2,3 (m, 3 H) , 2,32 (s, 3 H) , 1,75-1,25 (m, 3 H) , 1,22 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H), 1,13-1,11 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,75-0,72 (t, 6 H, J = 5,7 Hz);
175 • · · · • « · 9
9 9 99 9
9
9 · 9 13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170, 5, 170,3, 165,1, 154,0,
142,1, 138,0, 136,6, 135,6, 131,8, 130,8, 129,9, 129,6,
128.4, 128,22, 128,17, 126,7, 124,5, 123,3, 122,5, 112,3,
71.4, 56,1, 54,3, 46,4, 42,7, 42,2, 39,4, 36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,6, 22,56, 21,2, 21,1, 17,2;
IR (CHC13) 3424, 3021, 3017, 2965, 1747, 1711, 1680, 1652,
1528, 1503, 1485, 1259, 1151, 1067 cm'1.
Příklad 51
3-Chlorperoxybenzoová kyselina (0,19 g, 1,1 mmolů) byla přidána do styrenu (uvedený výše) (0,667 g, 1,0 mmolů) v 5,0 ml CH2CI2. Výsledný roztok byl míchán přes noc, koncentrován za sníženého tlaku a tím se získaly β a a epoxidy v poměru 1,8:1 ve prospěch epoxidu β. Separace těchto dvou epoxidů chromatografií HPLC s obrácenou fází (70:30) CH3CN;H:O, dalo 0,20 g hlavního β epoxidu ve formě bílé pevné látky:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3-7,0 (m, 7 H) , 6,9-6,87 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,87-6,75 (m, 1 H), 5,79-5,74 (d, 1 H, J = 14,8 Hz), 5,54- 5,51 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,28-5,22 (m, 1 H) , 4,89-4,55 (dd, 1 H, J = 10,4, 3,5 Hz), 4,82-4,75 (m, 1 H) , 3,9 (s, 3 H), 3,69-3,68 (d, 1 H, J = 1,6 Hz), 3,51-3,44 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,2-3,1 (m, 2 H), 2,98-2,95 (dd, 1 • ·
- 176 « ·
H, J = 7,6, 1,6 Hz), 2, 65-2,32 (m, 3 H) , 2,32 (s, 3 H) ,
I, 85-1,6 (m, 3 H) , 1,4-1,25 (s, 3 H) , 1,27 (s, 3 H) , 1,21 (s, 3 H), 1,21-1,18 (d, 3 H, J = 7,5 Hz), 0,90-0,86 (t, 6 H, J = 6,13 Hz).
Příklad 52 of
Do roztoku β epoxidu (uvedený výše) (0,1 g, 0,147 mmolů) v 5,0 ml CHC13 o teplotě -60 °C byl přidán chlortrimethylsilan (0,093 ml, 0,74 mmolů). Roztok byl míchán při teplotě -60 °C po dobu 30 minut a při teplotě okolí po dobu 1,5 hodiny předtím, než byl koncentrován za sníženého tlaku. Výsledné residuum, obsahující 50:50 směs syn a anti chlorhydrinů, byl čištěn pomocí chromatografie HPLC s obrácenou fází a tím bylo získáno 0,028 g (27%) požadovaného trans isomeru:
XH NMR- (300 MHz, CDC13) δ 7,28-7,2 (m, 5 H) , 7,13-7,1 (dd, 1 H, J = 8,3, 1,9 Hz), 6,91-6,88 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,886,78 (m, 1 H), 5,86-5,81 (d, 1 H, ,7 = 15,0 Hz), 5,73-5,71 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,24-5,17 (t, 1 H, J = 9,4 Hz), 5,04,96 (dd, 1 H, J = 9,6, 2,9 Hz), 4,81-4,74 (m, 1 H), 4,674,64 (d, 1 H, J = 9,7 Hz), 4,06-4,03 (dd, 1 H, J = 9,6, 1,1
Hz), 3,92 (s, 3 H), 3,47-3, 39 (dd, 1 H, J = 13,2, 8,3 Hz),
3,42-3,0 (m, 3 H) , 2,8-2,4 (m, 2 H) , 2,4 (s, 3 H) , 1,9-1,4 (m, 4 H) 1,28 (s, 3 H) , 1,22 (s, 3 H) , 1,09-1,07 (d, 3 H, J
- 177 • · * · · • · · · · · • · · · · · · ♦ ···· · «·· ·· · • · · · • · · · ·
- 7,0 Hz), 0,98-0,96 (d, 6 H, J
6,4 Hz).
Příklad 53
Styren (uvedený výše) (0,095 g) byl připraven z aldehydu 18 (0,2 g, 0,345 mmolů) a 3,4-dimethylbenzyltrifenylfosfoniumchloridu (0,26 g, 0,62 mmolů) s 63% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20: [a]2% +27,8° (c 0,576, CHCI3) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,-2-2-7,18 (d, 1 H, J = 1,6 Hz)
7,12- 7,02 (m, í > H), 6,87- 6, 81 (d, 1 H, J = 8,3 Hz) , 6,80-
6, 71 (m, 1 H), 6,40-6,30 (d, 1 H, J = 15,8 Hz) , 6, 0 0-5,88
(dd, 1 H, J = 15,8, 8,8 Hz) , 5,80-5,70 (d, 1 H, J : = 15,1
Hz) , 5,55-5,45 (d, 1 H, J = 7,7 Hz) , 5,10- 4,97 (m, 1 H) ,
4,90- 4,80 (dd, 1 H, J = 9,4 , 2,8 Hz), 4,80- -4,70 (m, 1 H),
3,88 (s, 3 H) , 3,50-3,35 (dd, , 1 H, J = 13,3, 4,8 Hz) , 3,20-
3,00 (m, 3 H) , 2,60-2,48 (m, 2 H), 2,45-2,30 (m, 1 H) , 2,23
(s, 3 H), 2,24 (s, 3 H), 1,80-1,55 (m, 2 H), 1,40-1,30 (m, 1 H), 1,22 (s, 3 H), 1,16 (s, 3 H), 1,14-1,10 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,80-0,73 (m, 6 H);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,5, 170,3, 165,1, 154,0,
142,2, 136,5, 135,9, 134,3, 131,6, 130,8, 129.v, 129,5,
a * • · fe · · · • · • • · • · · · • · · ·
- 178 - • · • · • · • a • · · · • · · · • · a • · · · • · · a · · a a · • · • • · · · a a · · a a • a a · ♦ λ
128,8, 128,1, 127 ,2, 124 ,4, 123,6, 122,4, 112,2, 71,4, 56, 0,
54,2, 46, 4, 42,6, 42,1, 39, 4, 36,4 , 35,2, 24,5, 22,7, 22,6,
22,5, 21,1, 19,6, 19,3, 17,2;
IR (CHCI3) 3424, 2965, 2935, 1746, 1711, 1681, 1652, 1527,
1503, 1485, 1259, 1187, 1164, 1151, 1064, 970, 727 cm'1 t
Elementární analýza (C38H49CIN2O7) C, Η, N.
Příklad 54
Tento β epoxid výše) (0,3 g, kyseliny (0,081 (0,06 g) byl připraven ze styrenu (uvedený 0,44 mmoTŮj—použitím 3-chlorperoxybenzoové g, 0,47 mmolů) s 20% výtěžkem použitím způsobu popsaného výše:
[a]20D + 20,0° (c 1,43, CHC13 ) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26-6, 96 (m, 6 H) , 6,98 (s, 1 H) , 6,84-6,82 (d, 1 H, J = 8,5 Hz) 6,79-6,65 (m, 1 H), 5,73-5,69 (d, 1 H, J = 11,9 Hz), 5, 68-5, 67 (d, 1 H, J = 4,6 Hz), 5,295,15 (m, 1 H), 4,83-4,76 (dd, 1 H, J = 9,7, 2,8 Hz), 4,75-
4,58 (m, 1 H), 3,86 (s, 3 H) , 3,61-3,60 (d, 1 H, J = 1,
Hz) , 3,46-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,8 Hz) , 3,14-2,97 (m,
H) , 2,92-2,89 (dd, 1 H, J = 7,7, 1,6 Hz) , 2,59-2,35 (m,
H) , 2,25 (s, 6 Η), 1, 78- 1, 58 (m, 3 H), 1, 28-1,09 (m, 1 H)
1,21 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H) , 1,15-1,12 (d, 3 H, J = 7,
• ·
- 179 «9 »» ♦ · 9 ·· »99 *··· • 9 9 9 9 * 9 9 9 · · 9 9 • 9 9 9 9 9 9 9999 9 999 9 9 9 *•99999 9 9 • · · · *9 9 ·· 99
Hz), 0,85-0,77 (m, 6 Η);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,4, 170,3, 164,9, 154,0,
141,7, 137,0, 136,9, 134,0, 130,8, 129,9, 129,5 128,1,
126,7, 124,6, 123,2, 122,4, 122,3, 75,9, 71,04, 62,8, 59,1,
56,1, 54,3, 46,4, 42,7, 40,7, 39,2, 36,8, 35,2, 24,4, 22,8,
22,6, 21,0, 19,7, 19,4, 13,6;
IR (KBr) 3419, 2962, 1752, 1721, 1681, 1654, 1534, 1504,
1473, 1442, 1302, 1282, 1259, 1192, 1126, 1066 cm -1. r
Elementární analýza (C38H49C1N28) C, Η, N.
Příklad 55
Do roztoku styrenu (uvedený výše) (0,492 g, 0,72 mmolů) v 2,4 ml CH2C12 při teplotě 0 °C byla přidána 3chlorperoxybenzoová kyselina (0,137 g, 0,79 mmolů) a toluen (1,2 ml) a míchání pokračovalo při teplotě 0 °C po dobu 30 minut. Ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponecháno při míchání při teplotě okolí po dobu 24 hodin. Po zředění 10 ml CH2C12 byl roztok promýván 10% Na2SO4 (1 x 10 ml), H2O (1 x 10 ml), 10% NaHCO3, (1 x 10 ml) a sušen nad Na2SO4. Koncentrace poskytlo směs b/a surových epoxidů v poměru 2:1.
- 180
Surové epoxidy (0,445 g, 0,638 mmolů) byly rozpuštěny v 10 ml bezvodého CHC13, ochlazeny na teplotu -60 °C a zpracovány trimethylsilylchloridem (0,2 ml, 1,5 mmolů). Míchání pokračovalo po dobu 90 minut a roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Surové chlorhydriny byly čištěn pomocí chromatografie HPLC s obrácenou fází (CH3CN/H2O) a tím se získal produkt (uvedený výše) (0,115 g) s 21% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
[a]2% - 45,9° (c 0,59, CHC13 );
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26-7,01 (m, 5 H) , 6,85-6, 82 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,80-6,71 (m, 1 H) , 5,71- 5,66 (d, 1 H, J = 15,1 Hz), 5,50-5,47 (d, 1 H, J = 7,6 Hz), 5,13-5,08 (t, 1 H, J = 8,8 Hz), 4,89-4,84 (m, 2 H), 4,81- 4,71 (m, 1 H), 4,094,06 (d, 1 H, J = 9,4 Hz), 3,87 (s, 3 H) , 3,44-3, 37 (dd, 1
H, J = 13,4, 8,4 Hz), 3,16-3,06 (m, 3 H) , 2, 60-2,54 (m, 2 H), 2,26 (s, 6 H), 2,26-2,14 (m, 1 H) , 1,89-1,81 (m, 1 H) ,
I, 70-1, 62 (m, 2 H) , 1,58-1,46 (m, 2 H)l,23 (s, 3 H) , 1,17 (s, 3 H), 0,9T^T, 95 (d, 3 H, J = 6,6 Hz), 0,93-0790“ (m, 6 H) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) 5177,7, 170,5, 170, 1, 165,2, 153, 9,
142,3, 137,7, 137,3, 135,1, 130,7, 130,2, 129,8, 128,5,
128,1, 124,6, 124,4, 122,3, 112,2, 75,9, 74,2, 71,2, 68,8,
56,0, 54,4, 46,4, 42,7, 39,6, 38,4, 36,2, 35,2, 24,8, 22,9, 22,8, 22,7, 21,7, 19,8, 19,5, 8,6;
IR (KBr) 3421, 2960, 1756, 1721, 1675, 1504, 1258, 1195,
1151, 1126, 1066 cm'1' ;
Elementární analýza (ΰ37Η^12Ν2Ο8) C, Η, N.
• ·
- 181
0 • 00 0 0 0
0000 0 000 ·0 0*0 0000* · · · · » · • · 0 · · · ·
0* 00 0 0 0
0 0
0 0 0 0 0 » ·
Příklad 56
Styren (uvedený výše) (0,21 g) byl připraven z aldehydu 18 (0,5 g, 0,87 mmolů) a 4-methoxybenzyltrifenylfosfoniumchloridu (0,47 g, 1,12 mmolů) s 36% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20: [a]20D +31,6° (c 1,03, CHC13 ) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26-7,23 (d, 3 H, J = 8,4 Hz), 7,20-7,19 (d, 1 H, J = 1,5 Hz), 7,07-7,03 (dd, 1 H, J = 5,4, 1,9 Hz), 6,54-6,81 (d, 3 H, J = 8,5 Hz), 6,80- 6,7 (m, 1 H) , 6,36-6,31 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 5,89-5,81 (dd, 1 H, J =
15,8, 8,8 Hz), 5,78-5, 73 (d, 1 H, J = 13,7 Hz), 5,65-5,66 (d, 1 H, J = 7,9 Hz), 5,05=4799 (ddd, 1 H, J = 10,6, 6,6, 1,6 Hz), 4,87-4,82 (dd, 1 H, J = 9,7, 3,1 Hz), 4.78-4,7 (m, 1 H), 3,56 (s, 3 H), 3,79 (s, 3 H) , 3, 45-3, 37 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,15-3,0 (m, 3 H) , 2,6-2,25 (m, 3 H) , 1,7-1,3 (m, 3 H), 1,22 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H), 1,12- 1,1 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,76-0,75 (d, 3 H, J = 2,9 Hz), 0,74-0,73 (d, 3 H, J = 2,8 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,5, 170,4, 165, 1, 159,1,
153,9, 142,1, 135,8, 131,0, 130,8, 129, 7, 129,5, 128,2,
127,9, 127,2, 124,5, 122,4, 113,9, 112,3, 77,1, 71,4, 56, 0,
55,2, 54,4, 46,4, 42,7, 42,1, 39,4, 36,4, 35,3, 24,5, 22,8,
22,6, 21,2, 17,3;
IR (CHC13) 3422, 3003, 2964, 2936, 2873, 2840, 1746, 1712,
• ·
- 182
1681, 1651, 1607, 1527, 1512, 1504, 1485, 1465, 1301, 1251 cm-1;
Elementární analýza (C37H47C1N2O8) C, Η, N.
Příklad 57
McXCC ukončena přidáno
Do styrenu (uvedeného výše) (0,3 g, 0,44 mmolů) bylo přidáno 19 ml acetonu, 9 ml H2O, 9 ml CH2C12 a pevný NaHCO3 (1,2 g, 14,5 mmolů) a směs byla ochlazena na teplotu 0 °C. Roztok Oxonu (1,08 g, 1,8 mmolů) v 9 ml H2O byl připraven a přidán (2 ml) do studené styrenové směsi. Po uplynutí 30 minut intenzivního míchání při teplotě 0 °C byly přidány další 2 ml roztoku Oxonu a opět další 2,0 ml byly přidány, po dalších 30 minutách, celkově 6 ml roztoku Oxonu. Postup reakce byl monitorován chromatografií HPLC s obrácenou fází a byl zjištěno, že reakce byla ukončena po 2,5 hodinách míchání. Zatímco teplota byla stále 0 °C, s nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml) dalších 50 ml CH2C12. Vrstvy organická vrstva byl promývána vodným 10% Na2SO3 (50 ml), následovaným nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml), potom solankou a nakonec byla sušena nad Na2SO4, filtrována a koncentrována Směs b a a epoxidů byla oddělena reakce byla a bylo také byly odděleny a za sníženého tlaku.
chromatografií HPLC s obrácenou fází (45:55) CH3CN:H2O a tím se získalo 0,12 g b epoxidů ve formě bílé pevné látky s 39%
- 183 I · · · » · · · • · · · · · • · • · · · výtěžkem:
[a]2% +25,8° (c 0,66, CHC13 );
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26-7,15 (m, 4 Η), 7,05-7,03 (d, 1 H, J = 8,6 Hz), 6,9-6,87 (d, 2 H, J = 8,6 Hz), 6, 85-6, 82 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,82-6,7 (m, 1 Η), 5,74-5,69 (d, 1 H, J = 15,1 Hz), 5,54-5,52 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,22-5,16 (m, 1
H), 4, ,84-4,7 (m, 2 H), 3, 87 (s, 3 H), 3,81 (s, 3 H), : 3, 63
(s, 1 H), 3,46-3,38 (dd, 1 H, J = = 13,5, 8,8 Hz), 3,2-3,0 (m,
3 H), 2,91-2,89 (d, 1 H, J = 7 ,4 Hz) , 2,6-2,38 (m, 2 Η) ,
1,8-1, 6 (m, 3 Η) , 1, .4-1,23 (m, 1 Η), 1, 22 (s, 3 Η), 1,15 (s,
3 H), 1,15-1,12 (d, 3 H, J = 8,9 Hz) , 0 ,84-0,80 (t, 6 H, J =
6,0 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,7, 170,5, 170,4, 165, 1, 159, 8,
153, 9, 141, 6, 136, 8, 130, 7, 129, 7, 128,6, 128,1, 126, 9, 124,6, 122,3, 114,1, 112,2, 75, 9, 71, 0, 62,8, 58,9, 56, 0, 55,2, 54,6, 46,3, 42,7, 40,6, 39,2, 36,8, 35,2, 24,4, 22,8,
22,7, 22,6, 21,1, 13,5;
IR (CHC13) 3423, 3009, ΑΏ.64, 2936, 2874, 2840, 1751, 1713^
1681, 1653, 1614, 1517, 1504, 1486, 1464, 1442, 1303, 1281,
1257, 1183, 1173, 1152 cm'1;
Elementární analýza (C^^vCl^Og) C, Η, N.
Příklad 58
TBOMSI
OMe • ·
- 184
Styren (uvedený výše) (0,649 g) byl připraven z aldehydu 18 (0,911 g, 1,57 mmolů) a 4-(terč.-butyldimethylsiloxy)benzyl trifenylfosfoniumchloridu (1,7 g, 3,27 mmolů) s 53% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20:
[a]2% 30,83° (c 0,52, CHC13 ) ;
3H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,25 (s, 1H), 7,26-7,20 (d, 2H, J = 8,5Hz), 7,12 - 7,06 (dd, 1H, J = 8,3, 1,6 Hz), 6, 92-6, 86 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6, 84-6, 78 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 6,44-6,33 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 5,95-5,85 (dd, 1H, J = 15,8, 8,8 Hz), 5, 85-5, 77 (d, 1H, J = 15,5 Hz), 5, 68-5,55 (bd, 1H, J = 7,9
Hz), 5,15-5,00 (m, 1H) , 4,95-4,80 (dd, 1H, J = 10,0, 3,0
Hz), 4,85-4,75 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,53- 3,43 (dd, 1H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,23-3,08 (m, 3H) , 2,65- 2,50 (m, 2H) ,
2,50-2,35 (m, 3H) , 1,75-1,60 (m, 2H) , 1, 45- 1,36 (m, 1H) , 1,27 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,16-1,13 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,01 (s, 9H), 0,85-0,74 (m, 6H), 0,22 (s, 6H);
13C_NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,5,-A7-0,4, 165,1, 155,2, 153,9, 142,1, 131,1, 130,8, 130,1, 129,7, 128,2, 128,1,
127.1, 124,5, 122,4, 120,2, 112,2, 71,4, 56,0, 54,4, 46,4,
42,7, 42,2, 39,4, 36,5, 35,3, 25,6, 24,5, 22,8, 22,7, 21,2,
18.1, 17,3, -4,5;
IR (CHC13) 3422, 3030, 3008, 2961, 2932, 2899, 2860, 1745,
1712, 1681, 1604, 1527, 1509, 1485, 1442, 1370, 1339, 1303,
1258, 1169, 1151, 1067, 1007, 970, 912, 841, 822, 792 cm-1; Elementární analýza (C42H59CIN2O8SÍ) C, Η, N.
• ·
185 • · ·
Příklad 59
Ηι
Do roztoku silylem chráněného fenolu (0,084 g, 0,107 mmolů), v 4 ml bezvodého THF o teplotě -70 °C byl přidán 1,0 M THF roztok tetrabutylamoniumfluoridu (TBAF) (0,11 ml, 0,11 mmolů). Světle žlutý roztok byl míchán při teplotě -70 °C po dobu 30 minut, potom byla reakce zastavena 2 ml nasyceného NH4C1 a extrahována CH2C12 (3 x 25 ml) . Sloučené organické extrakty byly sušeny nad MgSO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištění surového produktu radiální PLC (silikagel, 50-100% EtOAc/hexany) dalo požadovaný alkohol (0,0679) s 93% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
[a]20D +30,83° (c 0,52, CHC13) ; _____ XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,40-7,32 (m, 1H) , 7,28-7,20 (m,
3H), 7,13-7,05 (dd, 1H, J= 8,3, 1,6 Hz), 6,95-6,75 (m, 5H), 6,57 (s, 1H), 6,42-6,33 (d, 1H, J = 15,9 Hz), 5,93-5,53 (dd, 1H, J = 15,8, 8,8 Hz), 5,83-5,75 (d, 1H, J = 15,5 Hz), 5,755,73(bd, 1H, J = 7,9 Hz), 5,15-5,00 (m, 1H) , 4,93-4,85 (dd, 1H, J = 10,0, 3,0 Hz), 4,85-4,75 (m, 1H) , 3,90 (s, 3H) ,
3,54-3,40 (dd , 1H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,25-3,02 (m, 3H) ,
2,65-2,35 (m, 3H) , 1,80-1,60 (m, 2H) , 1,45-1,36 (m, 1H) ,
1,27 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H), 1, . 17-1 ,12 (d, 3H, J = 6, 8 Hz) ,
0,86-0,74 (d, 6H, J = 5,0 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,7, 170, 6, 156, 0, 154,0, 142,6, 137,1, 131,3, 130,8, 129,5, 128,9, 128,1, 127,4, 124,3, 122,5, 115, 6, 112,3, 77,2, 71,5, 56,1, 54,5, 46, 5,
186
42,7, 42,1, 39,4, 36,5, 35,3, 24,6, 22,8, 22,7, 21,2, 17,3;
IR (CHC13) 3597, 3421,3319. 2964, 2935, 2874, 2841, 1746,
1711, 1680, 1652, 1610, 1513, 1504, 1455, 1464, 1259, 1170,
1152, 1067 cm-1;
Elementární analýza (C36H46ClN20g) C, Η, N.
Příklad 60 χςοχ
Roztok fragmentu C' kyseliny (0,040 g, karbonyldiimidazolu (CDI) (0,040 g, 0,25 toluenu byl zahříván pod dusíkovou—atmosférou při teplotě 45 °C po dobu 45 minut. Po přidání alkoholu (uveden výše) (0,10 g, 0,15 mmolů) v 1 ml toluenu byla reakční směs byla znovu zahřívána při teplotě 45 °C po dobu 4 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs zředěna EtOAc (100 ml),
0,184 mmolů) a mmolu) v 2 ml promývana nasyceným Organická koncentrována za ml), vodou a solankou nad MgSO4, (1 x 10 (1 x 10 filtrována a získal surový ml) , ml) .
0,1 N HCI (1 x 10 NaHCO3 (1 x 10 ml) vrstva byla sušena sníženého tlaku a tím se ester ve formě žluté pěny. Čištění radiální PLC (silikagel, 50% EtOAc/hexany) poskytlo čistý ester (0,097) g s 75% výtěžkem ve formě žluté pevné látky:
[a]2% +17,2° (c 0,58, CHC13) ;
*H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,40-7,34 (d, 2 H, J =
8,5 Hz)
- 187 «· • · · · · • · · · · · · • · · · · · · • · · · · · • · · · · · • · • 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 · • · · • · · · 9
7,29-7,22 (m, 3 Η), 7,13-7,00 (m, 3 Η), 6,92-6,86 (d, 1 H, J = 8,8 Hz), 6,86-6,76 (m, 1 H), 6,50- 6,38 (d, 1 H, J = 15,9
Hz) , 6,10-5,97 (dd, 1 H, J = 15,8 , 8,8 1 Hz) , 5,85-5,75 (d, 1
H, J = 15,1 Hz) , 5, 55-5,45 (d, 1 H, J = = 7,9 Hz), 5,15 -5,06
(m, 1 H), 5,06-4,96 (m, 1 H), 4,95 - 4,85 (m, 1 H) , 4,83 -4,72
(dd , 1 H, J = 10,0, 3,0 Hz), 3,92 (s, 3 H) , 3,53-3,35 (m, 3
H) , 3,22-3,06 (m, 3 H), 2,65-2,50 (m, 2 H) , 2,48-2,35 (m, 1
H) , 1,80-1,65 (m, 2 H), 1,49 (s, 9 H), 1,40 (s, 6 H), 1,27
(s, 3 H), 1,21 (s, 3 H), 1,20-1, 15 (d, 3 H , J = 6,9 Hz) ,
0,86-0,77 (á, 6 H, J = 6,3 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,5, 170,4 165, 1, 156, 0,
153,9, 150,0, 142,0, 134,5, 130,8, 130,6, 130,4, 129,6,
128,2, 126,9, 124,6, 122,4, 121,5, 112,2, 79,2, 71,3, 56,0,
54,4, 48,2, 46,4, 44,0, 42,7, 42,1, 39, 5, 36, 5, 35,2, 28,3,
24,9, 24,5, 22,9, 22,8, 22,7, 21,3, 17,2;
IR (CHC13) 3425, 2970, 2934, 2874, 1746, 1711, 1684, 1604,
1505, 1442, 1394, 1368, 1305, 1258, 1166, 1123, 1067, 1015,
971 cm1;
Elementární analýza (C4iH55C1N3O9) C, Η, Ν.
Příklad 61
Do styrenu (uvedený výše) (0,276 g, 0,32 mmolů) bylo přidáno 12 ml acetonu, 6 ml H2O, 6 ml CH2C12 a pevný NaHCO3 (0,84 g, • ·
- 188 • · · · · · • · · · · · · ····· · · · · · · · • ♦ · · •· · ·· <· mmolů) a směs byla ochlazena na teplotu 0 °C. Roztok
Oxonu (0,78 g, 1,27 mmolů) v 6 ml H20 byl připraven a přidán (2 ml) do studené styrenové směsi. Po uplynutí 30 minut intenzivního míchání při teplotě 0 °C bylo přidáno dalších 2 ml roztoku Oxonu a pak další 2,0 ml po uplynutí dalších 30 minut, celkově 6 ml roztoku Oxonu. Postup reakce byl monitorován chromatografií HPLC s obrácenou fází a bylo zjištěno, že reakce byla ukončena po 2,5 hodinách míchání. Zatímco teplota byla stále 0 °C, reakce byla ukončena s nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml) a bylo také přidáno dalších 50 ml CH2C12. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byl promývána vodným 10% Na2SO4 (50 ml) , následovaným nasyceným vodným NaHCO3, (50 ml), potom solankou a nakonec byla sušena nad Na2SO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 0,272 g surových epoxidů ve formě žluté pěny.
Do roztoku epoxidů v 4 ml CH2C12 při teplotě -60 °C byl přidán trimethylsilylchlorid (0,2 ml, 1,54 mmolů). Po uplynutí 3 hodin při teplotě -60 °C bylo přidáno 5 ml 0,1 N HC1 pro hydrolýzu jakéhokoliv zbytku trimethylsilyletheru a směs byla zahřáta na teplotu okolí. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla sušena nad MgSO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Surové chlorhydriny byly čištěny dvakrát radiální PLC (silikagel, 50-60-70-100% EtOAc/hexany) a nakonec pomocí HPLC s obrácenou fází (CH3CN/H2O) a tím se získal produkt (uvedený výše) (0,090 g, 31%) ve formě bílé pevné látky:
[a]20D + 42,7° (c 3,0, CHC13 );
ςΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,48-7,44 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 7,31-7,26 (m, 4 Η), 7,16-7,10 (m, 3 Η), 6,92-6,89 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,87-6,81 (m, 1 Η) , 5, 84- 5,79 (d, 1H, J =
189
142,3,
121,9,
15,1Hz), 5,58-5,55 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 5,24-5,19 (t, 1 H, J = 8,9 Hz), 5,05-4,95 (m, 2 H), 4,79- 4,75 ( m, 1 H), 4,724,69 (d, 1 H, J = 9,5 Hz), 4,04-4,01 (dd, 1 H, J = 1,3, 9,3
Hz), 3,93 (s, 3 H), 3,47-3,40 (m, 3 H), 3,25-3,06 (m, 3 H), 2,75-2,70 (d, 1 H, J = 13,9 Hz), 2,55-2,41 (m, 2 H) , 1,901,71 (m, 2 H), 1,63 (s, 1 H) , 1,48 (s, 9 H) , 1,39 (s, 6 H) ,
1,28 (s, 3 H), 1,22 (s, 3 H) , 1,09- 1,06 (d, 3 H, J = 6,9
Hz), 1,0-0,96 (m, 6 H);
'C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,6, 170,4, 170,2, 165,2, 153,9,
136.1, 130,8, 129,7, 129,1, 128,2, 124,5, 122,4,
112.2, 76,1, 74,0, 71,1, 61,5, 56,5, 54,4, 46,4,
44,1, 42,7, 39,6, 38,4, 36,3, 35,2, 28,3, 24,8, 22,9, 22,8, 22,7, 21,5, 8,6;
IR (CHC13) 3417, 2974, 2934, 1755, 1720, 1677, 1505, 1473,
1368, 1320, 1258, 1205, 1167, 1153, 1123, 1066 cm’1;
FAB HRMS [M - BOC] vypočteno pro (C4iH56Cl2N3Oio) 820,3343, nalezeno 820,3354.
Příklad 62
Do aminu, chráněného pomocí BOC, (uvedený výše) (0,070 g,
0,067 mmolů) v CH2C12 (0,25 ml) byl přidán 4 M HCI roztok (0,1 ml, 0,4 mmolů) v 1,4-dioxanu. Po uplynutí 2 hodinách míchání při teplotě okolí byla rozpouštědla odstraněna za ··
- 190 ·« ·· · • · · *» · · • · · ·· · · » a • · · » · · ···· • · · · · · · ·· ·· · · · ·· ·· » · · ι » · · « sníženého tlaku a výsledné residuum bylo udržováno ve vysokém vakuu po dobu 2 dnů a tím se získal produkt ve formě bílé pevné látky (0,062 g) s 95% výtěžkem:
[a]20D +27,68° (c 2,5, CHC13 );
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,79-7,76 (d, 1 H, J = 7,9 Hz), 7,48-7,38 (m, 2 Η) , 7,27-7,26 (d, 1 H, J = 1,2 Hz), 7,177,08 (m, 3 H), 6,98-6,95 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,71-6,60 (m, 1 H), 5,95- 5,90 (d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5,14-5,01 (m, 2 Η), 4,50-4,46 (dd, 1 H, J = 3,0, 11,0 Hz), 3,99-3,96 (d, 1 H, J = 9,1 Hz), 3,82 (s, 3 Η), 3,49-3,42 (m, 1 Η), 3,19 (s, 2 Η), 3,2-3,06 (m, 2 Η) , 2,77-2,68 (m, 2 Η), 2,49-2,46 (t, 1 H, J = 6,8 Hz), 2,44-2,31 (q, 1 H, J = 11,4 Hz), 1,85-1,65 (m, 2 H), 1, 60-1,50 (m, 1 Η) , 1,46 (s, 6 Η) , 1,20 (s, 3 Η) , 1,16 (s, 3 Η) , 1,08-0,94 (m, 9 H) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) 5178,9, 175, 6, 173, 8, 171,9, 155,3,
151.8, 144,2, 139,5, 132,2, 131,5, 130,7, 129,4, 125,2,
123,3, 122,6, 113,5, 77,2, 74,8, 72,6, 63,2, 57,6, 56,7,
50,1, 48,3, 48,0, 47,4, 44,1, 42,7, 41,1, 40,4, 37,8, 36,5,
28.8, 26,2, 23,6, 23,4, 22,2, 9,0;
IR (KBr) 3418, 2961, 2934, 1751, 1724, 1671, 1608, 1505,
1474, 1464, 1442, 1303, 1282, 1259, 1203, 1169, 1152, 1126, 1065, 1018;
FAB HRMS [M - Cl] vypočteno pro (C4iH56Cl2N3Oio) 820,3343, nalezeno 820,3354.
191 ·· »9 ·· · ·· ·· β·· · · ♦ · · · · • · ··· · · 9 · · · · · • · · 9 · · · ···· * ··· ··· ····«·· · · ·· ·· ·» · ·· ··
Příklad 63
Tetrabutylamoniumfluorid (TBAF) (4,0 ml, 4,1 mmolů), ve formě 1,0 M roztoku v THF, byl přidán po kapkách do roztok chráněného alkoholu 20 ( 3,1 g, 3,69 mmolů) v 120 ml THF o teplotě -78 °C. Roztok byl míchán při teplotě -78 °C po dobu 10 minut a lázeň suchého ledu byla odstraněna a směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí. Po uplynutí 30 minut při teplotě okolí reakce byla ukončena vodou (80 ml) a ethylacetátem (100 ml) . Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována CH2C12 (3 x 50 ml) . Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad-bezvodým Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku a tím byl získán volný alkohol. Čištění sloupcovou chromatografií (silikagel, 5070- 100% EtOAc/hexany) dalo 2,51 g (99%) čistého alkoholu 29 ve formě bílé pevné látky:
[a]20D + 30,0° (c 1,0, CHC13 );
Y NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,31 (s, 4 H), 7,26-7,21 (m, 1 H),
7,2- 7,19 (d, 1 H, J = 1,8 Hz), 7,07-7,03 (dd, 1 H, J = 8,4,
1,7 Hz), 6,85-6,82 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,82-6.7 (m, 1 H),
6, 43-6, 37 (d, 1 H, J = 15,9 Hz), 6, 05-5,97 (dd, 1 H, J =
15,9, 8,7 Hz), 5.77-5.72 (d, 1 H, J = 15,0 Hz), 5,58-5,55
(d, 1H, J = 7,9 Hz), 5, 08-5,02 (dd, 1 H, J = 9,4, 6,3 Hz),
4,87-4,83 (dd, 1 H, J = 10,2, 3,1 Hz), 4,8-4,67 (m, 1 H) ,
• » > 0
4,67 (s, 2 Η), 3,87 (s, 3 Η), 3,44-3,37 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,5 Hz), 3,2-3,0 (m, 3H) , 2,6-2,3 (m, 3 H) , 1,8-1,6 (m, 3
H) , 1,4-1,25 (m, 1 H) , 1,22 (s, 3 H) , 1,15 (s, 3 H) , 1,141,12 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,76-0,73 (t, 6 H, J = 5,5 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,7, 170,7, 170,5, 165,4, 153,8, 142,0, 140,5, 135,9, 131,3, 130,7, 130,0, 129,9, 128,1,
127,1, 126,1, 124,5, 122,2, 112,2, 77,0, 71,3, 64,6, 56,0,
54,6, 46,4, 42,7, 42,1, 39,4, 36,4, 35,2, 24,5, 22,8, 22,6,
21,2, 17,2;
IR (CHC13) 3423, 3011, 2965, 2935, 2874, 2841, 1747, 1712,
1681, 1652, 1528, 1503, 1485, 1442, 1371, 1303, 1259, 1151 cm-1;
Elementární analýza (Ο37Η47Ο1Ν2Ο8) C, Η, N.
Příklad 64
Do roztoku alkoholu 29 (0,13 g, 0,19 mmolů) v 2,0 ml THF byl přidán trifenylfosfin (0,065 g, 0,25 mmolů), ftalimid (0,037 g, 0,25 mmolů) a nakonec diethylazodikarboxylát (DEAD) (0,04 ml, 0,25 mmolů). Výsledný žlutý roztok byl míchán při teplotě okolí po dobu 2 hodinách reakce byla zastavena H2O (10 ml) a CH2C12 (10 ml) . Vodná vrstva byla extrahována CH2C12 12 x 10 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku.
• · φ
Ο Φ
- 193 ► φ φ φ » · φ φ • φ φ φφφ
Výsledné residuum bylo čištěno radiální PLC (silikagel, 5060-70% EtOAc/hexany) a tím se získal ftalimid 30 (0,14 g) ve formě bílé pevné látky s 90% výtěžkem:
[a]2% +19,2° (c 1,0, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) 6 7,9- 7,8 (m, 2 Η) , 7,72-7,69 (m, 2 Η), 7,39-7,36 (d, 2 Η, J = 8,0 Hz), 7,28-7,26 (d, 2 Η, J =
5.3 Hz), 7,25-7,2 (m, 1 Η), 7,19-7,18 (d, 1 H, J = 1,9 Hz),
7,06-7,03 (dd, 1 H, J = 8,5, 1,9 Hz), 6,85-6,82 (d, 1 H, J =
8.4 Hz), 6,81-6,7 (m, 1 Η), 6,39-6,33 (d, 1 H, J = 15,9 Hz),
6,01-5,93 (dd, 1 H, J = :5,8, 8,8 Hz), 5,75-5.7 (d, 1 H, J =
15.4 Hz), 5,47-5,44 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 5,05-5,0 (dd, 1H, J = 9,4, 6 3Hz), 4,8 (s, 2 Η) , 4,83-4,7 (m, 2 Η) , 3,87 (s, 3
H), 3,4-3,36 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,18-3,02 (m, 3
H), 2,6-2,25 (m, 3 Η) , 1,65-1,5 (m, 2 Η) , 1,35-1,22 (m, 1
Η) , 1,2: (s, 3 H), 1,14 (s, 3 Η), 1,12-1,09 (d, 3 H, J = 6,8
Hz), 0,71-0,69 (d, 3 H, J = 6,4 Hz), 0,65-0,63 (d, 3 H, J =
6.4 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8. 170, 5, 170,4, 167,8, 165,2,
153,9, 142,0, 136, 3, 135, 6, 133, 9, 131, 9, 131, 1, 130, 7,
130, 6, 129, 8, 128,9, 128,6, 128,5, 128,1, 126, 3, 124,6,
123,2, 122,3, 112,2, 76,9, 71,3, 56,0, 54,5, 46,4, 42, 6
42,1, 41,2, 39,4, 36,4, 35,2 . 24,4, 22,8, 22,6, 22,5, 21,1
17,2 ;
IR (CHCI3) 3421, 2967, 2935, 2873, 2840, 1747, 1716, 1682
1527, 1503, 1485, 1433, 1395, 1259, 1151.
• ·
194 • · · · · ·
Příklad 65
Do ftalimidu 30 (0,1 g, 0,123 mmolů) v 1,8 ml EtOH byl přidán n-butylamin (0,04 ml, 0,369 mmolů). Roztok byl zahříván při teplotě 7 5 °C po dobu 2 dnů, koncentrován za sníženého tlaku a čištěn radiální PLC (silikagel, 10-25% MeOH/CH2Cl2) a tím se získal volný amin 31 (0,048 g) s 57% výtěžkem.
Příklad 66
Do N-(terč.-butoxykarbonyl)sarkosinu (0,07 g, 0,37 mmolů) v 1,5 ml DMF byl přidán hydrát 1-hydroxybenzotriazolu (HOBT) (0,05 g, 0,37 mmolů) a hydrochlorid l—(3— dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (EDCI) (0,071 g, 0,37 mmolů). Po uplynutí 45 minut míchání při teplotě okolí byl amin 31 (0,17 g, 0,25 mmolů) v 2,5 ml DMF po kapkách přidán do roztoku dvojitou jehlou. Výsledná směs byla
- 195 ·· • · t • · e míchána po dobu dalších 3 hodin, reakce byla zastavena pomocí H20 (10 ml) a směs byla extrahována CH2C12 (3 x 10 ml). Sloučené organické extrakty byly sušeny nad MgSO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištění výsledného surového produktu radiální PLC (silikagel, 70-80100% EtOAc/hexany) dalo požadovaný amid 32 (0,15 g) s 71% výtěžkem ve formě bílé pevné látky.
[a]20D +22,4° (c 1,0, CHC13) ;
4H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,27-7,1 (m, 6 H) , 7,04-7,0 (dd, 1
H, J = 8,5, 1,9 Hz), 6, 82-6, 79 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,796,65 ( m, 1 H), 6, 38-6, 32 (d, 1 H, J = 15,9 Hz), 6,3-6,2 (bs, 1 H), 6,01-5,93 (dd, 1 H, J = 15,9, 8,7 Hz), 5,75-5,70 (d, 1 H, J = 15,0 Hz), 5,65-5,6 (m, 1 H), 5,0-4,99 (dd, 1 H,
J = 9,3, 6,1 Hz), 4,84-4,79 (dd, 1 H, J = 9,6, 3,6 Hz),
4,74- 4,67 (m, 1 H), 4,42-4,4 (d, 2 H, J = 5,7 Hz), 3,87 (s,
H), 3,84 (s, 3 H), 3,42-3,34 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,6 Hz),
3,15- 3,0 (m, 3 H), 2,9 (s, 3 H), 2,6-2,25 (m, 3 H), 1,8-1,5 (m, 2 H), 1,4 (s, 9 H) , 1,39-1,25 (m, 1 H) , 1,19 (s, 3 H) ,
I, 12 (s, 3 H) , 1,1-1,08 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,73-0,72 (d,
H, J = 4,4 Hz), 0,71-0,69 (d, 3 H, J = 4,3 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,7, 170,5, 170,4, 169,2, 165,2,
153,9, 141,9, 137,3, 136,0, 131,1, 130,7, 130,3, 129,8,
128,6, 71,3, 128,1, 127,7, 126,3, 124,6, 122,3, 112,2, 80,6, 39,4, 76,9, 36,4,
56,0, 54,5, 53,1, 46,4, 42,8, 42,7, 42,0,
35,8, 35,2, 28,2, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,1;
IR (CHC13) 3427, 2967, 2935, 2874, 2841, 1747, 1680, 1526,
1504, 1484, 1464, 1442, 1393, 1369, 1302, 1281, 1259, 1151,
1067 ·· r>
- 196
Amid 32 (0,34 g, 0,398 mmolů) byl epoxidován použitím mCPBA (0,072 g, 0,42 mmolů) v 1,2 ml CH2C12 způsobem, který byl popsán výše a tím se získaly b a a epoxidy v poměru 2:1. Výsledná surová směs epoxidů (0,3 g, 0,345 mmolů) byla rozpuštěna v CHC13 a ochlazena na teplotu -60 °C. Byl přidán TMSC1 (0,22 ml, 1,73 mmolů) a roztok byl míchán při teplotách mezi -50 °C a -20 °C po dobu 2 hodin. Byl přidán další TMSC1 (0,44 ml, 0,173 mmolů) a roztok byl ponechán zahřát se na teplotu okolí. Roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a výsledný produkt byl čištěn dvakrát sloupcovou chromatografií (70—80% EtOAc/hexany) a dvakrát radiální PLC (silikagel, 2-5% MeOH/CH2Cl2) a tím se získal trans chlorhydrin 34 (0,1 g) s 48% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
[a]20D + 46,9° (c 0,85, CHC13) ;
XH N MR (300 MHz, i 3DC13) δ 7,36-7,34 (d, 2 H, J = 7,9 Hz) ,
7,29 -7,26 (d, 2 H, J = 8,3 Hz), 7,21 (s, 2 H) , 7,08-7,05 (d,
1 H, J = 8,3 Hz), 6,86-6, 83 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,8-6,7
(m, 1 H), 6,5-6,2 (bs, 1 H), 5,79-5,74 (d, 1 H, J = 15,2
Hz) , 5,64-5, 62 (d, 1 H, J = 7,7 Hz) , 5,1! 3-5,12 (t, 1 H, J =
9,1 Hz), 4,94-4,9 (dd, 1 H , J = 9,9, 3,5 Hz) , 4 ,8-4,67 (m, 1
H) , 4,66-4,63 (d, 1 H, J = = 9,6 Hz), 4,47 -4,45 (d, 2 H, J =
5,3 Hz), 4,02-3,98 i (d, 1H , J = 9,5Hz), 3,89 (s, 2H), 3,88
197 φ · · · · · · · · ··
00« 000 0000 0 0000 0 000 0 0* 0 t· * 0 0 0 0 0000 0 0*0 000
000000 · 0
0» 00 * 00 *0 (s, 3 Η), 3,41- 3,34 (dd, 1 H, J = 13,6, 8,5 Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H), 2,94 (s, 3 H), 2,69-2,68 (bdd, 1 H, J = 14,3, 2,1 Hz), 2,51-2,3 (m, 2 H) , 1,8-1,6 (m, 3 H) , 1,42 (s, 10 H) ,
1,22 (s, 3 H), 1,17 (s, 3 H) , 1,03-1,01 (d, 3 H, J = 6,9
Hz), 0,94-0,9 (t, 6 H, J = 5,5 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,6, 170,4, 170,2, 165,2, 153, 9,
142.4, 139,1, 130,8, 129,7, 128,3, 128,2, 127,9, 124,4,
122.4, 112,2, 80.7, 76,1, 73,9, 71,2, 61,8, 56,1, 54,4,
53,1, 46,4, 42,7, 39,6, 38,4, 36,3, 35,9, 35,2, 28,2, 24,8, 23, 0, 22,9, 22,7, 21,5, 8,5 ;
IR (KBr) 3419, 3317, 2964, 2932, 1755, 1670, 1538, 1504,
1473, 1392, 1368, 1301, 125B, 1151, 1066;
FAB HRMS [Μ + H] vypočteno pro (C45H62CI2N4O11) 905, 3870, nalezeno 905,3876.
Příklad 68
Hydrochloridová sůl 35 (0,041 g ) BOC chráněného aminu 34 (0,045 g, 0,05 mmolů) byla připravena s kvantitativním výtěžkem způsobem, který byl popsán výše, použitím 4 M HCI v 1,4-dioxanu:
XH NMR (300 MHz, MeOD) δ 8,47-8,45 (d, 1 H, J = 7,7 Hz),
7,79-7,76 (d, 1 H, J = 8,9 Hz), 7,39-7,36 (d, 2 H, J = • · · » · * · ♦ · · • · · · r · · · · » · · · d QQ # ·· ♦·· ····♦# ······ - 1vo ” « « · · ··· · ·
8, 1Hz). 7,3-7,27 (d, 3 H, J = 9,0 Hz ), 7 ,17- 7,14 (d, 1 H, J
= 8,5 Hz), 6,98-6,95 (d, 1 H, J = 8,5 Hz) , 6,75- 6,6 (m, 1
H) , 5,94-5,89 (d, 1 H, J = 15,1 Hz) , 5,2 -5,0 (m, 2 H), 4,78-
4, 75 (d, 1 H, J = 9,4 Hz), 4,5-4,42 (m, 1 H), 4,41 (s, 2 H) ,
4, 01-3,98 (d, 1 H, J = 9,5 Hz), 3,82 (s, 3 H) , 3,8 (s, 2 H),
3, 5-3,4 (m, 1 H) , 3,19 '-3,13 (dd, 1 H, J = 14,4, 3,4 Hz),
3, 11-3,06 (dd, 1 H, J = 13,2, 1,9 Hz) , 2,8- 2,6 (m, 2 H) ,
2.7 (s, 3 H), 2,5-2,2 (m, 2 H) , 1,85-1, 45 (m, 3H) , 1,3-1,2 (m, 1H), 1,2 (s, 3H), 1,15 (s, 3H) , 1,0-0,94 (q, 9H, J =
11,3 6,0 Hz);
13C NMR(63MHz, CDC13) δ 178,9, 173,7, 171,9, 168,3, 166, 3,
155,4, 144,2, 140,5, 139,7, 132,2, 131,5, 129,7, 129,4,
128,8, 125,2, 123,3, 113,5, 77,2, 74,7, 72,6, 63,7, 57,6,
56,6, 50,7, 47,4, 44,1, 43, 9, 41,1, 40,4, 37,8, 36, 5, 33,7,
26,2, 23, 6, 23,4, 22,1, 9, 0 ;
IR (KBr) 3410, 3058, 2961, 2933, 1752, 1721, 1675, 1539,
1504, 1463, 1440, 1282, 1259, 1196, 1154, 1127, 1066.
Příklad 69
Suspense hydridu sodného (60% suspense) (0,041 g, 1,0 mmolů) a 4-karbomethoxybenzyl-trifenylfosfoniumbromidu (0,5 g, 1,0 mmolů) v 10 ml THF byla zahřívána při teplotě 65 °C po dobu hodiny a zpětně ochlazena na teplotu okolí. Tato oranžová • ·
- 199 • · · · • · · · · · · « · · · · · · ♦ · « ·· · · · · 9 9 9 9 9 9 9 9 · · · · · ·
9 9 9 9 9 9 9 ·
9 9 9 <· · · · · · směs byla přidána po kapkách do aldehydu 18 (0,46 q, 0,79 mmolů) v THF (10 ml) při teplotě -78 °C. Výsledný roztok byl zahřát na teplotu okolí, míchán další 2 hodiny a reakce byla zastavena nasyceným NH4C1 (30 ml) a EtOAc (30 ml) . Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla dále extrahována EtOAc (2 x 20 ml) . Sloučené organické extrakty byly promývány solankou (30 ml) , sušeny nad MgSO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surový styren byl čištěn sloupcovou ehromatografií (silikagel, 50-65% EtOAc/hexany) a tím se získal čistý styren (0,129 g) s 23% výtěžkem:
[a]20D - 29,7° (c 1,15, CHC13 );
XH NMR (300 MHz t CDC13) δ 8,03- -8,0 (d, 2 H, J = 8,2 Hz) ,
7,44-7,41 (d, 2 H, J = 8,3 Hz) , 7,3-7,25 (m, 1 H) , 7,24 -7,23
(d, 1 H, J = 1, 6 Hz) 7,11- 7,08 (dd, 1 H , J = 8,3, 1,9 Hz) ,
6, 89-6, 86 (d, 1 H, J = 8,5 Hz) , 6,86-6,8 (m, 1 H) , 6, 52 -6,46
(d, 1 H, J = 15,9 Hz), 6,23-6,15 (dd, 1 H, J = 15,8, 8,8 Hz), 5,83-5,8 (d, 1 H, J = 15,3 Hz), 5,64-5,61 (d, 1 H, J =
7.9 Hz), 5,14-5,09 (dd, 1 H, J = 9,4, 6,5 Hz), 4,91-4,87 (dd, 1 H, J = 10,2, 3,6 Hz), 4,85-4,75 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 3,91 (s, 3 H), 3,5-3,4 (dd, 1 Η, T = 13,5, 8,7 Hz), 3,23,1 (m, 3 H), 2,9-2,3 (m, 3 H) , 1,8-1,6 (m, 3 H) , 1,4-1,3 (m, 1 H), 1,26 (s, 3 H), 1,2 (s, 3 H), 1,2-1,18 (d, 3 H, J =
6.9 Hz), 0,8-0,78 (d, 3 H, J = 5,6 Hz), 0,78-0,76 (d, 3 H, J = 6,0 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,4, 166, 7, 165,1, 153,9,
141.8, 141,1, 133,1, 130,8, 129,9, 129,7, 128,9, 128,2,
125.9, 124,6, 122,4, 112,2, 76,8, 71,3, 56,0, 54,4, 52,0,
46,4, 42,7, 42,2, 39,5, 36,5, 35,2, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,1;
IR (CHC13) 3424, 2964, 2936, 2874, 2841, 1748, 1716, 1681,
1608, 1528, 1503, 1485, 1437, 1283, 1259 cm'1;
9« · · · · · • · · · · · · • · · · · · · ·
QOO «···«· · ···· » »·· ··· — ζυυ ··«·«·· · *
Elementární analýza ( C38H47CIN2O9) C, Η, Ν.
Příklad 70
Do styrenu (uvedený výše) (0,42 g, 0,59 mmolů) bylo přidáno 30 ml acetonu, 15 ml H2O, 15 ml CH2C12 a pevný NaHCO3 (1,7 g, 20,2 mmolů) a směs byla ochlazena na teplotu 0 °C. Roztok Oxonu (1,4 g, 2,3 mmolů) v 12 ml H2O byl připraven a přidán (2 ml) do studené styrenové směsi. Po uplynutí 30 minut intenzivního míchání při teplotě 0 °C byl přidán další 2 ml roztok Oxonu a roztok byl zahřát na teplotu okolí. Dalších 2 ml roztoku Oxone byl přidán po každých 2 hodinách dokud nebylo spotřebováno 12 ml. Reakční směs byla míchána celkově 5 hodin a reakce byla ukončena nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml) a 50 ml CH2C12. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla promývána vodným 10% Na2SO4 (50 ml), následovaným nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml), potom solankou a nakonec byla sušena nad Na2SO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Surová směs byla čištěna čhromatografií HPLC s obrácenou fází (45:55) CH3CN:H2O a tím se získalo 0,14 g (33% výtěžek) b a a epoxidů a 0,14 g bisepoxidační směsi.
Směs b/a epoxidů (0,14 g, 0,19 mmolů) byla rozpuštěna v 3,0 ml CHC13 a ochlazena na teplotu -60 °C. Do roztoku o teplotě • · • ·
- Λ „ · · ·· · · · · ···· - 201 - · ···· » ··· ···
-60 °C byl přidán chlortrimethylsilan (0,1 ml, 0,77 mmolů) a směs byla míchána po dobu 1,5 hodin. Byl přidán další TMSC1 (0,1 ml, 0,77 mmolů) a roztok byl ponechán zahřát se na teplotu okolí. Po uplynutí 1 hodiny míchání při teplotě okolí byl roztok koncentrován a čištěn radiální PLC (1-2% MeOH/CH2Cl2) a tím se získalo 0,044 g (30% výtěžek) požadovaného chlorhydrinu (uvedený výše) ve formě bílé pevné látky;
[a]2% +50,0° (c 0,75, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,1-8,08 (d, 2 H, J = 8,1 Hz), 7,54-7,51 (d, 2 H, J = 8,2 Hz), 7,3-7,25 (m, 1 H), 7,25 (s, 1 H), 7,13-7,09 (dd, 1 H, J = 8,5, 1,5 Hz), 6,91-6,88 (d, 1 H, J = 8,3 Hz), 6,87-6,78 (m, 1 H) , 5,86-5,8 (d, 1 H, J = 15,5 Hz), 5,7-5,6 (m, 1 H), 5,24-5,18 (t, 1 H, J = 9,2 Hz), 4,99-4,95 (dd, 1 H, J = 10,0, 3,6 Hz), 4,8-4,7 (m, 1 H) , 4,76-4,73 (d, 1 H, J = 9,5 Hz), 4,09-4,06 (d, 1 H, J = 9,6 Hz), 3,97 (s, 3 H), 3,93 (s, 3 H) , 3, 45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,6, 8,6 Hz), 3,25- 3,0 (m, 3 H) , 2,75-2, 62 (m, 1 H) , 2,62,4 (m, 2 H), 1,9-1,6 (m, 3 H), 1,5-1,4 (m, 1 H), 1,27 (s, 3 H), 1,22 (s, 3 H), 1,1-1,07 (d, 3H, J = 6,95 Hz), 0 98-0,95 (t, 6H, J = 5,3 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,5, 170, 6, 170,3, 166, 3, 165, 4,
153,9, 143,5, 142,2, 138,7, 130,7, 130,4, 129,9, 128,1,
128,08, 124 ,6, 122,3, 112,2, 76,1, 73,8, 71,1, 61,4, 56,0
54,6, 52,2, 46, 4, 42,7, 39, 6, 38,4, 36,3, 35,1, 24,8, 23, 0
22,9, 22,7, 21,5, 8,7;
IR (CHC13) 3425, 2962, 2935, 2873, 2842, 1750, 1720, 1680
1528, 1504, 1484, 1438, 1284, 1259, 1194, 1152, 1114, 1067 _ -i cm
Elementární analýza ( C38H48 Cl2N2Oi0) C, Η, N.
«· «· · · ·
Příklad 71
«· · · · ·· · · ci
Do roztoku alkoholu 23 (0,32 g, 0,46 mmolů) v 8,5 ml CH2CI2 o teplotě 0 °C byl přidán pevný NaHCO3 (0,19 g, 2,29 mmolů), trifenylfosfín (0,18 g, 0,69 mmolů) a nakonec Nchlorsukcinimid (0,092 g, 0,69 mmolů). Směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 20 minut a reakce byla zastavena nasyceným vodným NaHCO3 (20 ml) . Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována CH2CI2 (3 x 10 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou, sušeny nad Na2SO4, filtrovány^a koncentrovány za sníženého tlákuč Surová žlutá pevná látka byla čištěna radiální PLC (silikagel, 20-50% EtOAC/hexany) a tím se získalo 0,26 g benzylchloridu 36 s 79% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
[a]2% +25,6° (c 0,9, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,4-7,38 (d, 2 H, J = 7,9 Hz),
7,26-7,23 (d, 3 H, J = 8,3 Hz), 7,19-7,18 (d, 1 H, J = 1,9
Hz), 7,06-7,03 (dd, 1 H, J = 5,3, 1,9 Hz), 6,85-6,82 (d, 1
H, J = 8,4 Hz), 6,8-6,7 (m, 1 H) , 5,74-5, 69 (d, 1 H, J =
15,4 Hz), 5,49-5,47 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,22-5,17 (m, 1
H), 4,85-4,8 (dd, 1 H, J = 9,7, 3,0 Hz), 4,75-4,7 (m, 1 H),
4,6 (s, 2 H) , 3,9 (s, 3 H) , 3, 69-3, 65 (d, 1 H, J = 1,3 Hz), 3,45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H) ,
- 203 ·· 0 0 0 0 0 0 0 · · t » · 0 · 0 · · 0 0
0000 0 000 0 00 0
0 0 0 0 0 0 0000 0 000 000 • 0 0 0 0 0 0 · · ·· 0· 0 00 0·
2,92-2,59 (dd, 1 H, J = 7,6, 1,6 Hz), 2,6-2,4 (m, 2 Η), 1,81,6 (m, 3 H), 1,4-1,3 (m, 1 Η) , 1,22 (s, 3 Η) , 1,16 (s, 3 Η), 1,16-1,13 (d, 3 H, J = 8,6 Hz), 0,86-0,82 (t, 6 H, J = 6,5 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,5, 175,1, 170,3, 164,9, 154,0,
141,6, 137,7, 137,1, 130,8, 129,5, 128,9, 125,1, 125, 9
124,6, 122,4, .112,3, 77,2, 75,5, 71,1, 63,1, 55,5, 56,1
54,4, 46,4, 45,7, 42,7, 40,5, 39,3, 36,8, 35,2, 24,5, 22,8
22, 6, 21,2, 13,5;
IR (CHC13) 3416, 3254, 2961, 2933, 2573, 2839, 1752, 1721
1650, 1655, 1536, 1504, 1473, 1442, 1321, 1302, 1251, 1259
1192, 1150, 1126, 1066 cm-1;
Elementární analýza (C37H46 C12N2O8) C, Η, N.
Příklad 72
Diethylamin (0,09 ml, 0,84 mmolů) byl přidán do benzylchloridu 36 (0,03 g, 0,042 mmolů) v 0,3 ml THF. Směs byla míchána přes noc při teplotě okolí a reakce byla zastavena nasyceným vodným NaHCO3 (5 ml) . Vodná vrstva byla extrahována CH2C12 (3x5 ml). Sloučené organické vrstvy byly promýván solankou, sušeny nad Na2O4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surová žlutá pevná látka byla čištěna radiální PLC (silikagel, 50-70-80% • · • · · • · · · · • · · · « • · ft ·
- 204
EtOAC/hexany) a tím se získalo 0,026 gaminu 37 s 82% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
[a]20D +25,9° (c 0,9, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,35-7,32 (d, 2 H, J = 7,9 Hz), 7,25-7,12 (m, 4 H) , 7,06- 7,02 (dd, 1H, J = 8,4, 1,6 Hz), 6,84-6,82 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,82-6,7 (m, 1 H), 5,74-5,69 (d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5,57-5,55 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,225,17 (m, 1 H), 4,85-4,7 (m, 2 H), 3,86 (s, 3 H), 3,66 (s, 1
H) , 3,57 (s, 2 H) , 3, 46- 3, 38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,7 Hz),
3,2-3,0 (m, 3 H) , 2,93- 2,91 (d, 1 H, J = 7,4 Hz), 2,6-2,4 (m, 6 H), 1,8-1,6 (m, 3 H), 1,4-1,3 (m, 1 H), 1,22 (s, 3 H),
1,15 (s, 3 H) , 1,15- 1,12 (d, 3 H, J = 9,2 Hz), 1,07-1,03 (t, 6 H, J = 7,1 Hz), 0,86-0,82 (t, 6 H, J = 6,3 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,4, 170, 3, 164,9, 154,0,
141,7, 140,1, 135,2, 130,8, 129, 6, 129, 1, 128,1, 125,4,
124,6, 122,4, 112,3, 77,2, 75,8, 71, 1, 62, 9, 58,9, 57,1,
56, 0, 54,4, 46, 6, 46,4 , 42,7, . 40,6, 39, 3, 36, 8, 35, 2, 24,5,
22,8, 22,6, 21,2, 13,5, 11,5;
IR (CHC13) 3424, 2969, 2936, 2874, 1752, 1711, 1682, 1605,
1527, 1503, 1485, 1303, 1259, 1190, 1151, 1067 cm'1;
Elementární analýza (C4iH56 C1N3O8) C, Η, N.
Příklad 73
HCl
- 205
Do roztoku epoxidu 37 (0,05 g, 0,066 mmolů) v 0,8 ml CHC13 o teplotě -66 °C byl přidán po kapkách 4 M roztok HCl v 1,4dioxanu (0,04 ml, 0,166 ml). Směs byla míchána při teplotě 66 °C po dobu 10 minut po které byla lázeň suchého ledu odstraněna a roztok byl ponechán zahřát se pomalu na teplotu okolí. Rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a výsledná sůl byla umístěna do vysokého vakua po dobu 3 dnů pro odstranění residuálního dioxanu a tím se získalo 0,054 g požadovaného chlorhydrinu 38 výhradně s kvantitativním výtěžkem: --- -
[a 1 20 J D +29, 3 ° (c 1,0, MeOH );
XH NMR (300 MHz, MeOD) δ 8,5-8,47 (d, 1 H, J = 7,5 Hz), 7, 79-
7, 76 (d, 1 H, J = 8,8 Hz), T,53 (s, 4 H ), 7,26- 7,25 (d , 1
H, J - 1,6 Hz) , 7,17-7,14 (dd, 1 H, J = 8,6, 1,6 Hz) , 6, 97-
6, 94 (d, 1 H, J =8,4 Hz), 6,75- 6, 6 (m, 1 H), 5,96-5, 90 (d,
H, J = 15,3 Hz), 5,2-5,0 (m, 2 H), 4,85-4,82 (d, 1 H, J =
8,9 Hz) , 4, 5-4,4 (m, 1 H), 4,33 (s, 2 H) , 4, 02- 3,95 (d,
H, J = 9, 3 Hz), 3,8 (s, 3 H), 3,49-3,42 (dd, 1 H, J = 13,
9,9 Hz) , 3, 2-3,0 (m, 6 H), 2,8-2,6 (m, 2 H) , 2,5- 2,2 (m,
H) , 1,8-1 ,5 (m, 3 H) , 1 ,34-1,3 (m, 7 H), 1,2 (s, 3 H), 1,
(s, 3 H), 1 ,01-0,99 (d, 3 H, J = 7,2 Hz) , 0,98-0, 94 (t, 6
J = 5, 4 Hz:
206 ·
• 0 0 0 0 0 « a
I 0 0 13C NMR (63 MHz, CDC13) 5178,9, 173,8, 171,8, 168,3, 155,4,
144.1, 143,4, 132,3, 132,2, 131,5, 131,1, 130,4. 129,4,
125.2, 123,3, 113,5, 77,2, 74,8, 72,6, 63,2, 57,6, 56,7,
56, 66, 48,0, 47,5, 44,1, 41,1, 40,4, 37,8, 36, 5, 26,2, 23,6,
23,4, 22,2, 9,07, 9,0;
IR (KBT) 3414, 2960, 2934, 1751, 1721, 1671, 1521, 1504,
1463, 1443, 1259, 1197, 1155, 1127, 1065 cm'1.
Příklad 74
Epoxid (uvedený výše) (0,147 g) byl připraven s 81% výtěžkem, postupem podle způsobu popsaného výše, z benzylchloridu 36 (0,15 g, 0,21 mmolů) a N-(terc.butoxykarbonyl)piperazinu (0,195 g, 1,05 mmolů):
[a]20D +25,4° (c 0,65, CHC13 );
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,37-7,23 (m, S H) , 7,11-7,08 (d, 1
H, J = 8,6 Hz), 6,9-6,87 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,85-5,72 (m, 1 H), 5,75-5,73 (d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5,53-5,5 (d, 1 H, J =
7,7 Hz), 5, 28-5, 23 (m, 1 H) , 4,88-4,70 (m, 2 H) , 3,9 (s, 3 H) , 3,7 (s, 2 H) , 3,54 (s, 2 H) , 3,5-3,4 (m, 5 H) , 3,2-3,05 (m, 3 H), 3,0-2,95 (d, 1 H, J = 7,4 Hz), 2,65-2,4 (m, 6 H),
I, 85-1,6 (m, 3 H) , 1,5 (s, 9 H) , 1,45-1,4 (m, 1H),1,27 (s,
3H),1,2 (s, 3H), 1,2-1,18 (d, 3 H, J = 8,3 Hz), 0,91-0,87 (t, 6 H, J = 6, 1 Hz) ) ;
• ·
9 9
- 207 13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,3, 170,26, 164,9, 154,7, 154,0, 141,7, 138,4, 135,6, 130,8, 129,5, 129,3, 128,1,
125,5, 124,6, 122,4, 112,3, 79,5, 77,2, 75,5, 71,1, 62,9,
62,6, 58,8, 56, 1, 54,4, 52,8, 46, 3, 42,7, 40, 6, 39, 3, 36, 7,
35,2, 28,3, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 13,4;
IR (CHC13) 3425, 3008, 2965, 2937, 2874, 2817, 1752, 1709,
1683, 1527, 1484, 1463, 1459, 1427, 1367, 1259, 1167, 1150
-i. cm f
FAB HRMS [M - BOC] vypočteno pro (C46H64C1N4Oio) 857,4311, nalezeno 867,4300.
Příklad 75
Do roztoku epoxidu (uvedeného výše) (0,135 g, 0,156 mmolů) v 3,0 ml CHC13 o teplotě -66 °C byl přidán po kapkách trimethylsilylchlorid (0,16 ml, 1,2 ml). Směs byla míchána při teplotě -66 °C po dobu 2 hodin a byl přidán další TMSC1 (0,16 ml, 1,2 ml). Po uplynutí další 1 hodiny při teplotě 66 °C ledová lázeň byla odstraněna a roztok byl ponechán pomalu se zahřát na teplotu okolí. Rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a výsledná pevná látka byla čištěna radiální PLC (silikagel, 2-5% MeOH/CH2Cl2) a tím se získalo 0,13 g chlorhydrinu (uvedeného výše) s 92% výtěžkem: [a]2°D +50,0° (c 1,0, CHC13) ;
• ·
208 • · · · · · ··· 9 9 9 9 9 9 9 • ···· · · · · · 99 9
99 999 999999 999 9 9 9
9 9 9 9 9 9 · · ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,34 (s, 4 Η), 7,21-7,2 (d, 2 H, J = 1,4 Hz), 7,08-7,05 (dd, 1 Η, T = 8,6, 1,6 Hz), 6,86-6,83 (d, 1 H, ,7 = 8,4 Hz), 6,82-6,7 (m, 1 Η), 5,8-5,75 (d, 1 H,
T = 15,1 Hz), 5, 65-5, 62 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,2-5,1 (m, 1 H), 5,0-4,7 (m, 2 Η), 4,66-4,63 (d, 1 H, J = 9,7 Hz), 4,024,0 (d, 1 H, J = 9,6 Hz), 3,88 (s, 3 Η) , 3, 49-3, 48 (d, 2 H, T = 4,2 Hz), 3,45-3,3 (m, 5 Η) , 3,2-3,0 (m, 3 Η) , 2,7-2,3 (m, 7 H), 1,8-1,6 (m, 3 Η) , 1,45 (s, 10 Η) , 1,23 (s, 3 Η) , 1,17 (s, 3 H), 1,04-1,02 (d, 3 H, J = 6,9 Hz), 0,93-0,91 (d, 6 H, J = 6,3 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,5, 170, 5, 170,2, 165,2, 154,6, 153,9, 142,3, 139,1, 137,3, 130,8, 129,8, 129,5, 128,1,
127,9, 124,5, 122,3, 112,2, 79,5, 76,0, 73,9, 71,1, 62,4,
61,9, 56,1, 54,5, 52,8, 46,4, 42,7, 39,6, 38,4, 36,4, 35,2,
28,3, 24,7, 23,0, 22,9, 22,7, 21,5, 8,6;
IR (CHC13) 3424, 3007, 2966, 2936, 2872, 2820, 1751, 1712,
1682, 1528, 1504, 1483, 1426, 1367, 1259, 1168, 1150, 1127,
1067, 1006 cm'1;
Elementární analýza (C46H64 Cl2N4O10) C, Η, N.
Příklad 76
Dihydrochloridové soli (0,116 g ) BOC chráněného piperazinu • · • ·
- 209 (0,122 g, 0,13 mmolů) byly připraveny s kvantitativním výtěžkem způsobem, který byl popsán výše, použitím 4 M HCl v 1,4-dioxanu (0,32 ml, 1,3 mmolů):
[a]20D +26,3° (c 0,7, MeOH ) ;
TH NMR (300 MHz, MeOD) δ 8,47- 8,45 (d, 1 H, J = 7,5 Hz),
7,78-7,75 (d, 1 H, J = 9,2 Hz), 7,6-7,52 (q, 4 H, J = 16,9,
7,9 Hz), 7,27-7,26 (d, 1 H, J = 1,15 Hz), 7,18-7,14 (dd, 1
H, J = 8,6, 1,8 Hz), 6, 98-6, 95 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,756,6 (m, 1 H), 5,95-5,9 (d, 1 H, J = 15,4 Hz), 5,2-5,0 (n, 2
H), 4,85-4,82 (d, 1 H, J = 9,9 Hz), 4,5-4,4 (m, 1 H) , 4,4 (s, 2 H), 4,0-3,98 (d, 1 H, J = 9,3 Hz), 3,8 (s, 3 H) , 3,63,4 (m, 9 H), 3,32-3,29 (d, 1 H, J = 11,3 Hz), 3,19-3,13 (dd, 1 H, J = 14,8, 3,5 Hz), 3,1- 3,06 (d, 1 H, J = 13,7
Hz), 2,8-2,6 (m, 2 H), 2,5-2,3 (m, 2 H), 1,85-1,5 (m, 3 H),
I, 3-1,2 (m, 1 H), 1,2 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H), 1,02-0,95 (q, 9 H, J = 13,4, 6,3 Hz);
13C NMR (63 MHz, CDC13) 6175,8, 173, 7, 171, 9, 168,3, 155, 4,
144,2, 143,7, 132,8, 132,2, 131,5, 130,4, 129,9, 129,4,
125,2, ΤΣΤ, 3, 113,5, 77,2, 74,8, 72,6, 63,1, 61,2, 57,6,
56,7, 49,2, 47,5, 44,1, 42,1 , 41,1, 40,3, 37,8 , 36,5, 26,3,
23,7, 23,4, 22,2, 9,0;
IR (KBr) 3415, 2960, 2933, 2455, 1749, 1721, 1671, 1504,
1475, 1442, 1304, 1258, 1197, 1152, 1126, 1065, 1012 cm' -1 . r
FAB HRMS [M - HC12] vypočteno pro (C4iH57C12N4O8) 803,3553, nalezeno 803,3563.
210 » ·· • · • · · ·
Příklad 77
Epoxid (uvedený výše) (0,15 g) byl připraven s 78% výtěžkem postupem podle způsobu popsaného výše, z benzylchloridu 36 (0,16 g, 0,22 mmolů) a terč.-butyl-N-(2-aminoethyl)karbamátu (0,35 g, 2,22 mmolů):
[a]20D +22,3° (c 1,0, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,41-7,38 (d, 2 H, J = 7,8 Hz), 7,31 (s, 1 H), 7,26-7,24 (d, 3 H, J = 8,0 Hz), 7,11-7,08 (dd, 1 H, J = 8,4, 1,7 Hz), 6, 88-6, 86 (d, .1 H, J = 8,4 Hz), 6,86-6,72 (m, 1 Η), 5,88-5,8 (bs, 1 Η), 5,78-5,73 (d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5,28-5,22 (m,_l_H) , 5,2-5,08 (bs, 1 Η), 4,95-4,7 (m, 2 H), 3,91 (s, 3 Η) , 3,87 (s, 2 Η) , 3,7 (s, 1 Η) , 3,453,38 (dd, 1 H, J = 13,4, 8,4 Hz), 3,35-3,0 (m, 5 Η) , 2,962,93 (dd, 1 H, J = 7,5, 1,2 Hz), 2,89-2,78 (m, 2 Η) , 2,652,4 (m, 2 Η) , 1,85-1,65 (m, 3 Η) , 1,49 (s, 9 Η) , 1,48-1,3 (m, 1 H), 1,27 (s, 3 Η) , 1,2 (s, 3 Η) , 1,19-1,17 (d, 3 H,
7,1 Hz), 0,91-0,87 (t, 6 H, J = 6,8 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) 6 177.7, 170,4, 165, 0, 156, 0, 153, 9,
141.5, 139,9, 135,6, 130,7, 129.7, 128,5, 128,1, 125,6,
124,7, 122,3, 112,2, 77,2, 75,7, 71,0, 63,0,
54.5, 52,9, 48,5, 46, 3, 42,7, 40, 5, 39, 3, 36, 8.
24.5, 22,83, 22,8, 22,6, 21,2, 13,5;
IR (CHC13) 3425, 3009, 2967, 2936, 2874, 2841,
71,0, 63, 0, 55,8, 56, 0
39,3, 36,8, 35,2, 28,3
2874, 2841, 1751, 1709
211 • · · · • ·· ··· ······ ··· ··· ······· * · ·· · · ·· · ·· · ·
1685, 1504, 1368, 1280, 1259, 1165, 1153, 1067 cm-1. Elementární analýza (C44H61CIN4O10) C, Η, N.
Příklad 78
CIH3N
Do roztoku epoxidu (uvedeného výše) (0,065 g, 0,076 mmolů) v 0,9 ml CH2CI2 o teplotě -78 °C byl přidán po kapkách 4 M HCI v 1,4-dioxanu (0,09 ml, 0,38 mmolů). Roztok byl míchán při teplotě -7 8 °C po dobu 30 minut a potom byl ponechán to pomalu se zahřát na teplotu okolí. Roztok byl míchán další 2 hodiny při teplotě okolí a byl koncentrován za sníženého tlaku a tím byl získán chlorhydrin (uvedený výše) (0,063 g) s kvantitativním výtěžkem:
[a]2% +16,6° (c 1,0, MeOH );
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,54- 8,52 (d, 1 H, J = 7,7 Hz),
7,84-7,81 (dd, 1 H , J — e, 8, 1,7 Hz) , 7,6 3-7,53 (q, 4 H, J =
20,0, 8,2 Hz), 7,3 1-7,3 (d, 1 H, J = 2,0 Hz), 7,22- -7,18 (dd,
1 H, J = 8,4, 2,0 Hz), 7,02-6,99 (d, 1H, J = 8,5Hz) , 6,8 -6,7
(m, 1H) , 6,0-5,92 (d, 1H, J = 1 .5, 0 Hz) , 5,2-5,0 (m, 2 H) ,
4,9-4,8 ( m, 1 H) , 4,6-4,4 (m, 1 H), 4,3 (s, 2 H), 4,07- 4,03
(dd, 1 H, J = 9,5, 1,4 Hz) , 3,86 (s, 3 H) , 3,6-3,1 (m, 7 H) ,
2,82-2,7 (m, 2 H) , 2,6-2,3 1 1,05 -o, 99 (m , 9 H) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 178,8, 173.8, 171,9, 168,3, 155, 3,
144,2, 143,1, 132,2, 131,5, 131,4, 130,3, 129,4, 125,2, • ·
123,2, 113,5, 77,2, 74,7, 72,6, 63,2, 57,6, 56,7, 52,4,
47,5, 45,5, 44,1, 41, 1, 40,3, 37,8, 36,9, 36,5, 26,3, 23,7,
23,5, 22,2, 9,0;
IR (KBr) 3412, 2961, 2933, 1749, 1721, 1663, 1504, 1462,
1442, 1259, 1199, 1152, 1126, 1065 cm-1;
FAB HRMS [M - HC12] vypočteno pro (C39H55C12N4O8) 777,3397, nalezeno 777,3407.
Příklad 79
Styren (uvedený výše) (1,2 g) jako směs E:Z isomerů byl připraven z aldehydu 18 (1,0 g, 1,73 mmolů) a 4-(ethyl-2terc.-butyldimethylsiloxy)benzyl-trifenylfosfoniumbromidu (1,23 g, 2,08 mmolů) s 86% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20. Směs isomerů byla rozpuštěna v toluenu (50 ml) a zahřívána na teplotu zpětného toku v přítomnosti 1,1'-azobis(cyklohexanekarbonitrilu) (VÁZO) (0,040 g, 0,16 mmolů) a thiofenolu 10,061 ml, 0,59 mmolů) po dobu 3 hodin. Po koncentraci bylo residuum čištěno radiální PLC (20-75% EtOAc/hexany) a tím se získal E isomer (0,813 g, 68%) ve formě bílé pěny:
[a]20D +35,6° (c 0,56, MeOH );
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26-7,12 (m, 6 H) , 7,07-7,04 (d, 1
213
I 0 0 » 0 0··
0·0 000
H, J = 8,5 Hz), 6,85-6,82 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,83-6,70 (m, 1 H), 6, 40- 6, 35 (d, 1 H, J = 15,8 Hz), 6,0-5,92 (dd, 1 H, J = 15,4, 8,7 Hz), 5,77-5,72 (d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5,465,43 (d, 1 H, J = 7,7 Hz), 5,07-5,02 (m, 1 H), 4,56-4,83 (m,
H), 4,82-4,74 (m, 1 H), 3,88 (s, 3 H) , 3,78-3,74 (t, 2 H, J = 7,1 Hz), 3,44-3,37 (dd, 1 H, J = 12,5, 8,6 Hz), 3,153,08 (m, 3 H), 2,81-2,77 (t, 2 H, J = 7,1 Hz), 2,57-2,52 (m,
H), 2,43- 2,35 (m, 1 H), 1,74-1,56 (m, 2 H), 1,38-1,23 (m, 1 H), 1,22 (s, 3 H), 1,16 (s, 3 H) , 1,13-1,11 (d, 3 H, J = 6,8 Hz), 0,88 (s, 9 H), 0,84-0,72 (m, 6 H), 0,0 (s, 6 H);
C NMR (75MHz, CDC13) δ 177,9, 170,5, 170,3, 165, 1, 154,0,
142,2, 138,6, 134,6, 131, 5, 130, 9 , 129, 6, 129,4, 128,2,
126,0, 125,3, 124 ,5, 122,5, 112,3, 92,9, 77,0, 71,4, 64,4,
56,1, 54,3, 46, 5, 42,7, 42,2, 39,4, 39,2, 36,5, 35,3, 25,9,
24,5, 22,8, 22,7, 22,6, 21,2, 17,2, · -5,44;
IR (CHCI3) 3423, 2959, 2931, 2858, 1747, 1712, 1681, 1605,
1527, 1503, 1485, 1442, 1370, 1339, 1303, 1281, 1258, 1194,
1151, 1095, 1067, 1025, 1007, 838 cm' -1 . /
Elementární analýza (C43H63ClN2O8Si) C, Η, N.
Příklad 80 jaíox
Pyridin (0,06 ml, 0,76 mmolů) následovaný Dess-Martinovým reagentem (0,1619, 0,379 mmolů) byl· přidán do roztoku volného alkoholu styrenu (uvedeného výše) (0,135 g, 0,189
- 214 • · · • · ··· • · · · · • · · · • · · · ·· · ·· mmolů) v 4,5 ml CH2CI2 o teplotě 0 °C. Směs byla míchána po dobu 30 minut při teplotě 0 °C, 20 minut při teplotě okolí a potom byla filtrován a použitím EtOAc přes celit a byla nakonec koncentrována za sníženého tlaku. Rychlé čištění surového produktu radiální PEC (silikagel, 80-100% EtOAc/ CH2C12) poskytlo požadovaný aldehyd (0,08 g) , s 59% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
XH NMR (300 MHz, CDC13) 9, 77-9, 76 (t, 1 H, J = 2,0 Hz), 7,37,2 (m, 6 H), 7,06-7,02 (dd, 1H, J = 8,3, 2,0 Hz), 6,85-6,82 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,81-6,7 (m, 1 H), 5,74-5,68 (d, 1 H, J = 15,3 Hz), 5,51- 5,48 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,22-5,17 (m, 1 H), 4,85-4,81 (dd, 1 H, J = 10,3, 3,6 Hz), 4,77-4,71 (m, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 3,72-3,71 (d, 2 H, J = 2,0 Hz), 3,69-3,68 (d, 1 H, J = 1,5 Hz), 3,45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,7 Hz), 3,17-3,0 (m, 3 H) , 2, 92-2,89 (dd, 1 H, J = 7,6, 1,8 Hz), 2,6-2,4 (m, 2 H) , 1,8-1,6 (m, 3 H) , 1,4-1,3 (m, 1 H) , 1,22 (s, 3 H), 1,16 (s, 3 H), 1,16-1,13 (d, 3 H, J = 8,3 Hz), 0,86-0,82 (t, 6 H, J.= 6,3 Hz).
Příklad 81
Tetrahydrofuran (3,2 ml) aldehydu (uvedeného výše) ochlazena na teplotu 0 a H2O (3,2 ml) byly přidány do (0,08 g, 0,112 mmolů) a směs byla °C. 2-Methyl-2-buten (3,2 ml),
215
99
9 9 • · 999
9 9 9
9 9 9
9 99
9 99 99
9 9 9 9 9 ·
9 9 9 « ·· · * · ···· · ··· ··· • 9 9 9 9
9 99 99 následovaný NaC102 (0,081 g, 0,896 mmolů) a NaHPO4.H2O (0,139 g, 1,0 mmolů) byly také postupně přidán. Směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a byla intenzívně míchána po dobu 5 hodin. Roztok byl zředěn 10 ml CH2C12 a vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla extrahována CH2C12 (3 x 10 ml) a sloučené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surový produkt byl čištěn dvakrát radiální PLC (silikagel, 5-10-25% MeOH/CH2Cl2) a tím se získalo 0,03 g karboxylové kyseliny (uvedené výše) s 37% výtěžkem ve formě bílé pevné látky:
[a]2% +24,5° (c 0,33, MeOH );
XH NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7,75-7,71 (dd, 1 H, J = 10,3, 1,9 Hz), 7,31-7,2 (m, 5 H) , 7,16-7,13 (dd, 1 H, J = 8,4, 1,9 Hz), 6,97-6,95 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,8-6,6 (m, 1 H), 5,875,81 (d, 1 H, J = 15,3 Hz), 5,19-5,14 (dd, 1 H, J = 11,0, 5,0 Hz), 4,9-4,8 (m, 2 H), 4,48-4,43 (dd, 1 H, J = 11,5, 3,5 Hz), 3,8 (s, 3 H), 3,77 (s, 1 H), 3,53 (s, 2 H), 3,5-3,4 (m, 1 H), 3,17-3,11 (dd, 1 H, J = 14,3, 3,5 Hz), 3,05-3,0 (d, 1
H, J = 13,6 Hz), 2,95- 2,92 (dd, 1 H, J = 7,7, 1,7 Hz), 2,82,6 (m, 2 H), 2,5-2,3 (m, 1 H) , 1,8-1,6 (m, 3 H) , 1,4-1,2 (m, 1 H), 1,17 (s, 3 H) , 1,13 (s, 3 H) , 1,13-1,1 (d, 3 H, J = 9,2 Hz), 0,83-0,81 (d, 6 H, J = 6,3 Hz);
13C NMR (126 MHz, CDC13) δ 178,8, 173,7, 172,0, 168,2, 155, 4, 143,4, 138,1, 136,8, 132,2, 13,1,2, 130,8, 129,3, 126,8,
125,4, 123,3, 113,5, 77,7, 72,4, 64,4, 60,0, 57,5, 56, 6
47,4, 44,1, 41,7, 40,7, 38,6 , 36,5, 25,9, 23,4, 23, 3, 21,6
14,0;
IR (KBr) 3417, 2961, 2934, 2874, 1750, 1721, 1674, 1561
1504, 1464, 1441, 1300, 1259, 1194, 1151, 1066 cm -1 . r
vypočteno pro (C38H48C1N2O >
727,2997,
FAB HRMS [Μ + H) nalezeno 727,3005.
β • ·
216 • · β · • · · · • 0 0 0 0 · 0 0 0 · · · 0 • 0 0 0 · 0 ······ ··· ··· • 0 0 0 0 0 0 0 0 00 ·* 00 0 00 00
Příklad 82
HN.
Do směsi [(2-methyl-4-thiazolyl)ethyl]trifenylfosfoniumchloridu (0,496 g, 1,2 mmolů) v 10 ml THF při teplotě -78 °C byl přidán po kapkách 1,6 M roztok n-butyllithia (0,8 ml,
1,2 mmolů). Směs byla zahřáta pomalu na teplotu okolí a míchána po dobu dalších 45 minut. Do aldehydu 18 (0,5 g,
0, 865 mmolů) v 15 ml THF byl při teplotě -78 °C přidán po kapkách oranžový ylidový roztok prostřednictvím dvojité jehly. Výsledná směs byla míchána při teplotě -78 °C po dobu 2 hodin a při teplotě okolí po dobu 1,5 hodiny. Nasycený NH4CI (30 ml) byl přidán spolu s ethylacetátem (30 ml), vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (2 x 20 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány vodou (2 x 20 ml) a solankou, sušeny nad MgSO4, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Výsledné žluté residuum bylo čištěno použitím sloupcové chromatografíe (silikagel, 50-70-80% EtOAc/hexany) a tím se získalo 0,4 g požadovaného styrenu spolu s trifenylfosfinoxidem. Trifenylfosfinoxid byl snadno odstraněn chromatografií HPLC s obrácenou fází použitím CH3CN: H2O (50:50) a tím se získalo 0,2 g (34%) čistého thiazolu (uvedeného výše) ve formě bílé pevné látky:
• ·
- 217 • fe fe·· ·· ·· • · fe * · · · · · · • · · ·· · · · · · fe· fe • ·· * «. · ······ ··· ··· • •••••fe « · ·· ·· ·» · ·· ·· [a]2% +16,7° (c 1,0, CHC13);
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3-7,2 (m, 1 H) , 7,18-7,17 (d, 1
H, J = 1,7 Hz), 7,06-7,03 (dd, 1 H, J = 8,5, 1,8 Hz), 6,83 (s, 1 H), 6,83- 6,8 (d, 1 H, J = 9,0 Hz), 6,8-6,67 (m, 1 H) ,
6, 37-6, 35 (m, 2 H) , 5, 85-5, 82 (d, 1 H, J = 7,9 Hz), 5,765,71 (d, 1 H, J = 15,1 Hz), 5,05-5,0 (dd, 1 H, J = 9,0, 6,0
Hz), 4,86-4,82 (dd, 1 H, J = 10,2, 3,6 Hz), 4,77-4,68 (m, 1 H), 3,85 (s, 3 H), 3,44-3,37 (dd, 1 H, J = 13,4, '8,6 Hz), 3,2-3,0 (m, 3 H) , 2,68 (s, 3 H) , 2,6-2,3 (m, 3 H) , 1,8-1,6 (m, 2 H), 1,43-1,3 (m, 1H) , 1,2 (s, 3 H) , 1,14 (s, 3 H) ,
I, 12-1,1 (d, 3 H, J = 6,9 Hz), 0,79-0,78 (d, 3 H, J = 3,1
Hz), 0,77-0,76 (d, 3 H, J = 3,1 Hz).
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170, 5, 166, 0, 165,2, 153, 9, 153,0, 142,1, 136,7, 132,7, 130,8, 129,8, 128,1, 124,6,
124,4, 122,3, 114,1, 112,2, 76,9, 71,4, 56,0, 54,4, 46,4,
42,7, 41,9, 39, 3, 36, 5, 35, 3, 24,5, 22,8, 22,7, 22,6, 21,2,
19,2, 17,1;
IR (CHCI3) 3423, 3027, 3008, 2965, 2935, 2874, 1747, 1712,
1681, 1652, 1604, 1528, 1504, 1485, 1259, 1181, 1152, 1067
Elementární analýza (C34H44 CIN3O7S) C, Η, N.
• * • ·
- 218 » · · · · 4 » · t ·· ·
Příklad 83
Do styrenu (uvedeného výše) (0,25 g, 0,37 mmolů) bylo přidáno 15 ml acetonu, 6 ml H2O, 6 ml CH2C12 a pevný NaHCO3 (1,0 g, 11,9 mmolů) a směs byla ochlazena na teplotu 0 °C. Roztok Oxonu (0,92 g, 1,5 mmolů) v 8 ml H2O byl připraven a přidán (2 ml) do studené styrenové směsi. Po uplynutí 30 minut intenzivního míchání při teplotě 0 °C byly přidány další 2 ml roztoku Oxonu a pak další 2,0 ml po dalších 30 minut, celkově 6 ml roztoku Oxonu. Postup reakce byl monitorován chromatografií HPLC s obrácenou fází a bylo zjištěno, že reakce byla ukončena- po 2,0 hodinách míchání. Zatímco teplota byla stále 0 °C, reakce byla ukončena nasyceným vodným NaHCO3 (40 ml) a 40 ml CH2C12. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla promývána vodným 10% Na2SO4 (40 ml), následovaným nasyceným vodným NaHCO3 (40 ml), potom solankou a nakonec byla sušena nad Na2SO4, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Směs b a a epoxidů (54:46) byla separována chromatografií HPLC s obrácenou fází (50:50) CH3CN;H2O a tím se získalo 0,09 g b epoxidu (uvedeného výše) ve formě bílé pevné látky s 35% výtěžkem:
[a] 2% XH NMR +26,0 (300 ° (c 1,0, CHC13) ; MHz, CDC13) δ 7,19-7 ,18 (d, 2 H, J = 1,8 Hz), 7,1
(s, 1 H) , 7,06-7,03 (dd, 1 H, J = 8,5, 1,9 Hz), 6,85-6,82
(d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,82-6,7 (m, 1 H) , 5,76-5,71 (d, 1 H,
- 219
J = 15,2 Hz), 5,49-5,47 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,23-5,18 (m, 1 H), 4,88-4,84 (dd, 1 H, J = 10,3, 3,6 Hz), 4,8-4,7 (m, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 3,79 (d, 1 H, J = 0,93 Hz), 3,45-3,38
(dd, 1 H, J = 13,4, 8,6 Hz) , 3,35-3,32 (d, 1 H, J = 7,2 Hz),
3,2-3,0 (m, 3 H) , 2,7 (s, 3 H), 2,6-2,4 (m, 2 H), 1,8-1,6
1,14-1,12 (d, 3 H, J = 6, 8 Hz), 0,89-0,87 (d, 3 H, J = 6,5
Hz), 0,86-0,84 (d, 3 H, J = 6, 4 Hz) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,33, 170,3, 166, 9, 165,0, 154,0, 151,9, 141,8, 130,8, 129,5, 128,2, 124,5, 122,4,
116,4, 112,3, 75,8, 71,1, 61,3, 56,1, 55,2, 54,3, 46,4,
42,7, 40,3, 39, 3, 36, 6, 35,2, 24,5, 22,85, 22,8, 22,6, 21,2,
19,1, 13,3;
IR (CHC13) 3425, 3007, 2964, 2936, 2874, 2841, 1751, 1711,
1682, 1604, 1528, 1503, 1485, 1464 , 1303, 1259, 1185, 1152,
1067 cm-1
Elementární analýza (C34H44 C1N3O8S) C. Η, N.
Příklad 84
Styren (uvedený výše) (0,5 g) byl připraven z aldehydu 18 (1,3 g, 2,2 mmolů) a 2-fluorbenzyltrifenylfosfoniumbromidu (1,7 g, 3,8 mmolů) s 33% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20;
[a]2% +17,0° (c 1,16, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,40-1,34 (m, 1 H) , 7,23-6, 96 (m, 6 H), 6, 83-6, 80 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6, 78-6, 70 (m, 1 H) , 6, 57-6,52 (d, 1 H, J = 16,0 Hz), 6,10-6,02 (dd, 1 H, J = 8,8, 16,0 Hz), 5,76- 5,71 (d, 1 H, J = 15,3 Hz) s,50-5,47 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 5,05-4,95 (m, 1 H), 4,85-4,80 (dd, 1
H, J = 9, 6, 3,1 Hz), 4,75-4,69 (m, 1 H), 3,85 (s, 3 H),
3,42-3,34 (dd, 1 H, J = 13.s, 8,7 Hz) , 3,13-3,05 (m, 3 H),
2,56-2,51 (m, 2 H), 2,37- 2,33 (m, 1 H), 1,68-1,58 (m, 2 H) ,
1,34-1,23 (m, 1 H) , 1,20 (5, 3 H) , 1,13 (s, 3 H), 1,13-1,11
(d, 3 H, J = 7,3 Hz), 0.79-0.70 (m, 6 H);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,9, 170,5, 170,4, 165,1, 154,0, 142,0, 131,4, 133,0, 132,9, 130,8, 129,6, 128,8, 128,2,
127,0, 126, 9, 124,6, 124,1, 115, 9, 115, 5, 112,3, 76, 9, 71,4,
56,1, 54,4, 46,4, 42,7, 42,6, 39,4, 36, 5, 35,3, 24,5, 22,8,
22,7, 22,6, 21,1, 17,2;
IR (CHC13) 3423, 2965, 2935, 2874, 1747, 1711, 1681, 1605,
1527, 1503, 1487, 1457, 1441, 1370, 1340, 1321, 1280. 1259,
1151, 1093, 1067, 1009, 970 cm !
Elementární analýza (C36H44 C1FN2O7) C, Η, N.
Příklad 85
221 • · · · · · · · · • · · · · · <· ···· * · · * · · · · • « · 9 9 9 ······ ··· ··· • · · 9 9 · · · · β · ·« ·« · · ♦ · ·
Do roztoku styrenu (uvedeného výše) (0,26 g, 0,387 mmolů) v 1,3 ml CH2C12 při teplotě 0 °C byla přidána 3chlorperoxybenzoová kyselina (0,07 g, 0,41 mmolů) a toluen (0,65 ml) a míchání pokračovalo při teplotě 0 °C po dobu 30 minut. Ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponechána za míchání při teplotě okolí po dobu 24 hodin. Po koncentraci residuum bylo čištěno chromatografií HPLC s obrácenou fází (CH3CN/H2O) a tím se získal b-epoxid (uvedený výše) ve formě bílé pěny (0,058 g, 24% přepočteno pro získaný styren):
[a]20D +18,98°(c 1,41, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,30-7,00 (m, 6 H) , 6, 86-6, 83 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,80-6,75 (m, 1 H), 5,76- 5,71 (d, 1 H, J =
15,1 Hz), 5,47-5,45 (d, 1 H, J = 7,8 Hz) , 5, 23-5,20 (m, 1
H), 4,86-4,82 (dd, 1 H, J = 10,3, 3,5 Hz), 4. 78-4,70 (m, 1
H), 4,01 (s, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 3,45-3,38 (dd, 1 H, J =
13,4, 8,6 Hz), 3,12-3,08 (m, 3 H), 2,91-2,88 (d, 1 H, J =
7,8 Hz), 2,59-2,53 (m, 2 H) , 1,80-1.71 (m, 3 H), 1,46-1, 25
(m, 1 H), 1,23 (s, 3 H), 1,16 (s, 3 H), 1,16- l,14(d, 3 H, J = 7,2 Hz), 0, 87-0,83 (m, 6 H) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 178,1, 170,5, 170,3, 165, 0, 142,0,
131,0, 129,7, 129,6, 128, 3, 126 ,1126,08, 124,65, 124,5,
122,6, 115,5, 115,2, 112,4, 76,0, 71,2, 62,6, 56,2, 54,4,
53, 5, 46, 5, 42,8, 40,6, 39,4 , 36,9, 35,3, 24,7 , 22,9, 22,8,
21,3, 13,8;
IR (CHC13) 3417, 2962, 2948, 1754, 1721, 1681, 1653, 1534,
1504, 1473, 1459, 1441,1303 , 1282, 1258,1191, 1148, 1127,
1066 cm'1;
FAB HRMS [Μ + H] vypočteno pro (C36H45C1FN2O8) 687,2848, nalezeno 687,2857.
• 0
O ·· ·· · tt · 0 *00 0 0 0 0 0 0 0 • 0000 0 000 · ·· 0 _ 222 _ ····♦· «00·· · ··· ··· ZC 0 0 0 0 0 0 0 0 · • 0 ·· 00 0 00 · ·
Příklad 86 Xr /AXcc
Styren (uvedený výše) připraven z aldehydu (0,85 g) , ve formě E/Z směsi, byl 18 (2,0 g, 3,45 mmolů) a 3-
fluorbenzyltrifenylfosfonium bromidu (1,92 g, 4,25 mmolů) s 37% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20. Směs isomerů byla rozpuštěna v benzenu (25 ml) a zahřívána na teplotu zpětného toku v přítomnosti 1,1'azobis(cyklohexanekarbonitrilu) (VÁZO) (0,04 g, 0,16 mmolů) a thiofenolu (0,06 ml, 0,58 mmolů) po dobu 20 hodin. Po koncentraci residuum bylo čištěno radiální PLC (20-100% EtOAc/hexany) a tím se získal E isomer (0, 652 g, 77%) ve formě bílé pěny:
[a]20D +30, 55° (c 0,98, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,30-7,01 (m, 8 Η), 6,95-6,88 (η, 1
Η) , 6, 86-6, 83 (d, 1 H, J = 8,5 Hz) , 6,81-6,72 (m, 1 Η),
6, 40- 6, 35 (d, 1 H, J = 15,9 Hz) , 6, 07-5, 99 (dd, 1 H, J =
8,8, 15,9 Hz), 5,78-5,73 (d, 1 H, J = ; 15,1 Hz), 5,50-5,47
(d, 1 H, J = 7,9 Hz), 5,08-5,02 (dd, 1 H, J = 9,7, 6,7 Hz),
4,87- 4,82 (dd, 1 H, J = 9,7, 3,0 Hz) , 4,78-4,71 (m, 1 Η) ,
3,88 (s, 3 Η), 3,45-3,37 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,6 Hz), 3,15-
3,08 (m, 3 Η), 2,59-2,52 (ra, 2 Η) , 2,43 -2,34 (m, 1 Η), 1,72-
1,63 (m, 2 Η), 1,36-1,26 (ra, 1 H), 1,22 (s, 3 Η), 1,16 (s, 3
• 4 • · • 4 4 4 4 · Λ • 44 · 4 « 4 4 4 4 • 4 ··· 4 444 4 44 4 — 997 — · ·· 444 44444 4 444 ·44
4 · · 4 4 4 4 4
Η), 1,15-1,12 (d, 3 Η, J = 6,9 Ηζ), 0,80-0,73 (m, 6 Η);
13C NMR (63 MHz, CDC13) 6177,8, 170,5, 170,4, 165,1, 165,0,
153, 9, 141, 9, 137,3, 131,7, 130, 8, 130,6, 130,0, 129, 6,
128,1, 124,6, 122,4, 114,4, 114,1, 112,6, 112,2, 76,8, 71,3, 56,0, 54,4, 46,4, 42,7, 42,1, 39,5, 36,5, 35,2, 24,5, 22,8, 22,64, 22,6, 21,2, 17,2;
IR (CHCI3) 3423, 3008, 2965, 2936, 2874, 1747, 1712,
1680,1652,1585, 1528, 1503, 1486, 1464, 1442, 1320, 1303,
1259, 1193, 1147, 1127, 1067, 913 cm'1;
Elementární analýza (C36H44CIFN2O7) C, Η, N.
Příklad 87
Do roztoku výše uvedeného styrenu (0,622 g, 0,927 mmolů) v 3,0 ml CH2CI2 o teplotě 0 °C byla přidána 3chlorperoxybenzoová kyselina (0,170 g, 0,985 mmolů) a toluen (1,5 ml) a míchání pokračovalo při teplotě 0 °C po dobu 30 minut. Ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponechána za míchání při teplotě okolí po dobu 22 hodin. Po koncentraci residuum bylo čištěno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (CH3CN/H2O) a tím se získal b-epoxid (uvedený výše) ve formě žluté pěny (0,067 g, 11 %):
[a]20D +26, 23° (c 1,54, CHC13) ;
- 224 * * · · ··· AAA AAAA • · A A A A AAA · A A A • · · AAA A AAAA A ··· AAA • A · · A » A A A
AA AA AA A · · AA ςΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,37-6, 92 (m, 7 H) , 6,86-6, 83 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 6,82-6,73 (m, 1 H), 5,75- 5,70 (d, 1 H, J =
15,5 Hz), 5,48-5,45 (d, 1 H, J = 7,8 Hz) , 5,22-5,17 (m, 1
H), 4,85-4,81 (dd, 1 H, J = 3,1, 9,8 Hz) , 4,76-4,70 (m, 1
H), 3,88 (s, 3 H), 3, 68 -3,67 (d, 1 H, J = 0,89 Hz), 3,46-
3,38 (dd, 1 H, J = 8,6, 13,5 Hz) , 3,13- -3,07 (m, 3 H) , 2,90-
2,87 (dd, 1 H, J = 1,5, 7,4 Hz), 2,60- 2,37 (m, 2 H), 1,82-
1,64 (m, 3 H) , 1,36- -1,25 (m, 1 H) , 1,22 (s, 3 H), 1,16 (s, 3
H), 1,15-1,12 (d, 3 H, J = 6,9 Hz), 0,88-0,83 (n, 6 H);
13C NMR (63 MHz, CDC13) 5177,9, 170, 4, 165,0, 154,0, 141, 6,
139,5, 130,8, 130,4, 130,2, 129,6, 128,2, 124,7, 122,4,
121,3, 115,6, 115,3, 112,3, 112,2, 75,8, 71,1, 63,2, 58,2,
56,1, 54,5, 46,4, 42,8, 40,4, 39,4, 36,8, 35,3, 24,5, 22,85, 22,82, 22,7, 21,2, 13,4;
IR (KBr) 3416, 3034, 2963, 2934, 2874, 1751, 1721, 1680,
1658, 1539, 1504, 1473, 1442, 1304, 1280, 1258, 1192, 1144,
1066 cm-1
Elementární analýza (C36H44C1FN2O8) C, Η, N.
Příklad 88
Styren (uvedený výše) (1,24 g) , ve formě E:Z směsi, byl připraven z aldehydu 18 (1,5 g, 2,6 mmolů) a 4• · • · ·« · · · • · · · · · 9 9 9 9 • ···· · · 9 9 · · · · _ ??S _ ······ 9 9999 9 999 999
AAC 999^999 9 9 fluorbenzyltrifenylfosfoniumbromidu (1,4 g, 3,1 mmolů) s 71% výtěžkem postupujíce způsobem, popsaným výše pro styren 20. Směs isomerů byla rozpuštěna v benzenu (40 ml) a zahřívána na teplotu zpětného toku v přítomnosti 1,1'azobis(cyklohexanekarbonitrilu) (VÁZO) (0,050 g, 0,20 mmolů) a thiofenolu (0,076 ml, 0,74 mmolů) po dobu 24 hodin. Po koncentraci residuum bylo čištěno radiální PLC (20-100% EtOAc/hexany) a tím se získal E isomer (1,06 g) ve formě bílé pěny obsahující trifenylfosfineoxid podle NMR. 0,150 g vzorek byl čištěn chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (60:40) CH3CN:H2O a tím se získalo 0,092 g čisté pevné látky: [a]2% +27,49° (c 1,05, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,31-6,96 (m, 7 H) , 6, 85-6, 83 (d, 1 H, J = 8,5 Hz), 6,81-6,74 (m, 1 H) , 6, 39-6, 34 (d, 1 H, J =
15,8 Hz) , 5,96-5,88 (dd, 1 H, J = 8,8, 15,8 1 Hz) , 5,77- 5,72
(d, 1 H, J = 15,2 Hz), 5,49-5,47 (d, 1 H 1, J = 7,7 Hz), 5,07-
5,02 (m, 1 H), 4,86-4,83 (dd, 1 H, J = 9,2, 2,5 Hz), 4,82-
4,73 (m, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 3,45-3,38 (dd, 1 H, J = 13,4,
8,5 Hz) , 3,14-3,08 (m, 3 H), 2,57-2,52 (m, 2 H) , 2,43- 2,34
(m, 1 H) , 1,71-1,58 (m, 2 H), 1,36-1,29 (m, 1 H) , 1,22 (s, 3
H) , 1, 16 (s, 3 H), 1,14-1,11 (d, 3 H, J = 6,9 Hz) , 0,78-0,73
(m, 6 H) ;
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,5, 170,3, 165,1, 160,2,
154,0, 142,0, 137,6, 132,9, 132,8, 130,8, 130,4, 130,0,
129, 6, 128,2, 127,6, 127,5, 124,6, 122,4, 115,6, 115,2,
112,2, 71,3, 56,0, 54,4 , 46, 4, 42,7, 42, 1, 39, 5, 36, 4, 35,2,
24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,2;
IR (KBr) 3421, 3289, 2862, 2933, 1751, 1722, 1678, 1604,
1534, 1509, 1259, 1228, 1149, 1066, 1024, 1011, 971, 815 cm-1
Elementární analýza (C36H44C1FN2O7) C, Η, N.
• · • · ·
- 226
Příklad 89
Do roztoku styrenu (uvedeného výše) (0,906 g, 1,35 mmolů) v 4,5 ml CH2C12 při teplotě 0 °C byla přidána 3chlorperoxybenzoová kyselina (0,25 g, 1,45 mmolů) a toluen (2,2 ml) a míchání pokračovalo při teplotě 0 °C po dobu 30 minut. Ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponechána za míchání při teplotě okolí po dobu 23 hodin. Po zředění 20 ml CH2C12 reakční směs byla promývána 10% Na2SO4 (1 x 10 ml), vodou (1 x 10 ml), nasyceným NaHCO3 (1 x 10 ml) a solankou (1 x 10 ml) a nakonec byla sušena nad Na2SO4. Filtrace a koncentrace daly 0,814 g produktu jako směsi b/a epoxidů. 0,23 g část byla čištěna ehromatografií HPLC s obrácenými fázemi (CH3CN/H2O) a tím se získalo 0,073 g bepoxidu (uvedeného výše) ve formě bílé pěny:
[a]20D +25,6 (c 0, 626, CHC13) ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,26-7,03 (m, 7 H) , 6, 85-6, 83 (d, 1
H, J = 8,4 Hz), 6,82-6,72 (m, 1 H), 5,74-5,69 (d, 1 H, J =
15,2 Hz), 5,44-5,42 (d, 1 H, J = 7 g Hz), 5,23-5,18 (m, 1
H) , 4,85-4,81 (dd, 1 H, J = 9,7, 2,9 Hz), 4,77-4,73 (m, 1
H), 3,88 (s, 3 H) , 3,66 (s, 1 H) , 3,46-3,39 (dd, 1 H, J =
13,5, 8,8 Hz), 3,12-3,07 (m, 3 H), 2,89- 2,87 (dd, 1 H, J =
I, 5, 7,7 Hz), 2, 60-2,54 (m, 1 H), 2,49- 2,41 (m, 1 H) , 1,81-
- 227
1,65 (m, 3 Η), 1,34-1,25 (m, 1 Η), 1,22 (s, 3 Η), 1,16 (s, 3 Η), 1,15-1,13 (d, 3 H, J = 7,0 Hz), 0,87-0,82 (m, 6 H);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,8, 170,3, 164,9, 164,7, 154,0, 141,6, 137,8, 132,4, 130,7, 129,6, 128,1, 127,3, 127,2,
124,6, 122,4, 115,8, 115,5, 112,2, 75,8, 71,0, 63,0, 58,2,
56,0, 54,4, 46,3, 42,7, 40,4 , 39,3, 36,7, 35,2, 23,5, 22,8,
22,76, 22, 6, 21, 1, 13,3;
IR (CHC13) 3426, 3030, 3006, 2964, 2936, 1752, 1711, 1683,
1608, 1514, 1485, 1442, 1303 , 1281, 1259, 1188, 1155, 1067,
838 cm 1;
Elementární analýza (C36H44 C1FN2O8) C, Η, N.
Příklad 90
M roztok HCl v dioxanu (0,4 ml, 1,6 mmolů) byl přidán po kapkách během 5 minut do roztoku b-epoxidu (uvedeného výše) (0,44 g, 0,64 mmolů) v 30 ml CH2C12 o teplotě -70 °C. Po uplynutí 2 dalších hodin míchání při teplotě -70 °C byl roztok koncentrován za sníženého tlaku. Surový produkt byl čištěn radiální PLC (silikagel, 30-50-100% EtOAc/ CH2C12 ) následovanou chromatografií HPLC s obrácenou fází (50:50) CH3CN: H2O a tím se získalo 0,152 g (33 %) požadovaného chlorhydrinu (uvedeného výše) ve formě bílé pěny:
• · [a] 200 +60,0° (c 2,62, CHCI3) ;
ςΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,41-7,05 (m, 7H) , 6, 87-6, 84 (d
1H, J = 8,4 Hz), 6, 83-6, 77 (m, 1H) , 5, 80-5, 75 (d, 1H, J 15,4 Hz), 5,52- 5,49 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 5,13-5,21 (m, 1H) 4,94-4,90 (dd, 1H, J= 9,7,3,2 Hz), 4,75-4,72 (m, 1H), 4,67 4,63 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,00-3, 95 (m, 1H) , 3,89 (s, 3H)
3, 42-3, 35 (dd, 1H, J = 8,3, 13,5 Hz), 3,20-3,02 (m, 3H) 2,71-2,65 (m, 1H) , 2,49-2,37 (m, 2H) , 1, 82-1,63 (m, 2H) 1,51-1,38 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,04-1,02 (d 3H, J = 7,0 Hz), 0,97-0,85 (m, 6H);
13C NMR (63 MHz, CDC13) δ 177,6, 170, 5, 170,3, 165,3, 160,7
153,9, 142,2, 137,5, 134,5, , 130,8, 129 ,8, 129,7, 128,2
124,6, 122,2, 76,1, 74,0, 71,1, 61,4, 56,1, 54,5, 46, 4
42,7, 39, 6, 38,4, 36, 3, 35,1 , 24,8, 23,0, 22, 9, 22,7, 21,5
8,6;
IR (CHCI3) 3423, 2965, 2935, 2873, 1751, 1715, 1679, 1607
1528, 1504, 1485, 1464, 1442 , 1302, 1281, 1193, 1159, 1152
1127, 1067 cm-1
Elementární analýza (C36H45 C12N2O8) C, Η, N.
Příklad 91
Kryptofyciny-151, -152, -153, -154, 155, -156, -159, 160, 161, -166, -167, -172, -181, -188, 234, 236, 238, 247, 251 255.
229
Tabulka 1
Kryptofyďn č. Ar nebo alkylová skupina Výtěžek (E +Z) % % trans isomerů (přibližné)
151 72 90
152 O*” 80 70
155 60 <10
156 K.co*''1 51 70
160 rr1 o* 61 67
172 03* 78 90—
255 Or*v 85 60
230
Λ 1 H
PPh_ (1,5ekviv.)
THF/-78 eC
Kryptofycin-108
Kryptofyďn č. Ar Výtěžek (E +Z) % % trans isomerů (přibližně)
153 80 90
154 OCX, 63 90
159 75 90
161 61 80
166 38 90
167 'V' CH, 48 90
181 a? 73 75
188 ’τς/* 85 80
234 neiMtyť^ 81 85
236 χτ* MeeNNHfC 59 90
247 51 >90
251 XT1 MOĎCHA^ 43 >90
Typická procedura, upravená pro kopulaci kryptofycinu-108 ·· ·
- 231 • · množstvím trifenylfosforanů je popsána dále s použitím přípravy kryptofycinu-152 jako ilustrativního příkladu.
Kryptofycin-152:
Cinnamyltrifenylfosforan byl vytvořen působením na cinnamyltrifenylfosfoniumchlorid (0,311 g, 0,750 mmolů) v THF (5,7 ml) butyllithiem (300 μΐ 2,5 M roztoku v hexanu, 0,750 mmolů) při teplotě -78 °C a ponecháním obsahu pomalu se zahřát na teplotu okolí. Cinnamyltrifenylfosforan z této reakční směsi (1,46 ml, 0,182 mmolů) byl pomalu přidán k aldehydu (68,6 mg, 0,122 mmol v THF (3 ml) při teplotě -78 °C a míchání pokračovalo po dobu 2 hodin. Reakční směs byla zahřáta na teplotu okolí, zpracována nasyceným NH4C1 (5 ml) následovaným vodou (15 ml) a extrahována ethylacetátem (40 ml) . Organická vrstva byla promývána vodou, sušena nad MgSO4 a odpařena. Residuum bylo aplikováno do malé ODS kolony a vymýváno směsí 1:1 H2O/CH3CN a 1:3 H2O/CH3CN. Poslední frakce byla odpařena a tím se získala směs kryptofycin-152 a jeho Z ísomeru (E/Z 7:3, 64,3 mg, 80%).
Použitím téže experimentální procedury byl aldehyd (kryptofycin-108) reagován s 1naftylmethyltrifenylfosforaném, 3methoxybenzyltrifenylfosforanem, 3,5dimethoxybenzyltrifenylfosforaném, methoxymethyltrifenylfosforanem, 2,4dimethylbenzyltrifenylfosforaném, 3furanmethyltrifenylfosforaném, ptrifluormethylbenzyltrifenylfosforaném, 2methylbenzyltrifenylfosforanem, 3,5dimethylbenzyltrifenylfosforaném, 2- 232 » ·· • · • · · · • · 4 «· · naftylmethyltrifenylfosforaném, 2fluorbenzyltrifenylfosforanem, 3,5difluorbenzyltrifenylfosforanem, 4hydroxymethylbenzyltrifenylfosforanem, 4-(t-Bocaminomethyl)benzyltrifenylfosforaném, 3-(N-t-Bocamino)benzyltrifenylfosforanem a fenylthiomethyltrifenylfosfoniem a tím se získaly kryptofyciny-151, 154, -156, -159, -160, -161, -166, -167, -172, -181, 234, -236, -247 respektive 255 .
-153,
-188,
Butyllithium bylo použito jako báze při vytváření ylidů z jejich odpovídajících trifenylfosfoniumchloridových nebo bromidových solí, s tou výjimkou, že fenyllithium bylo použito při přípravě methoxymethyltrifenylfosforanu, 3furanmethyltrifenylfosforanu a 4hydroxymethylbenzyltrifenylfosforánu.
Podobná reakce, do hydroxymehyltrříenylfosfomiumbromid, které vstupuje a n-butyllithium kryptofycin-108 dala nečekaný analog kryptofycin-155.
Mírně modifikovaná procedura byl upravena pro přípravu karboxymethylového analogu kryptofycinu-251. THF (5 ml) roztok 4-(karboxymethyl)benzyltrifenylfosfoniumbromidu (0,289 g, 0,59 mmolů) byl zpracován fenyllithiem (1,8 M, 653 μί, 1,18 mmolů) při teplotě -78 °C po dobu 5 minut a baňka byla přenesena do lázně s vodou a ledem. Po uplynutí 30 minut bylo 0,9 ml této reakční směsi přidáno pomalu do baňky obsahující kryptofycin-108 (35 mg) v 3 ml THF při teplotě - 78 C a obsah byl ponechán za míchání po dobu 2 hodin. Reakční směs byla okyselena IN HCI (1 ml), byla
99
233
0« 000000 • 0 «
0 0 • 9 0 0
909 909 přidána voda (30 ml) a směs byla extrahována ethylacetátem (30 ml x 2) . Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a odpařena. Residuum bylo vystaveno mžikové chromatografií na ODS oxidu křemičitém, vymývání směsí 1:1 H2O/CH3CN a 35:65 H2O/CH3CN. Poslední frakce byla odpařena a čištěna v koloně HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 10 μ, 250 x 22 mm, 6 ml/minut, 35:65 H2O/CH3CN) a tím se získal nečistý vzorek kryptofycinu-251, který byl nakonec čištěn další chromatografií s obrácenými fázemi (Econosil C18, 10 μ, 250 x 10 mm, 3 ml/minut, 0,5% roztok kyseliny octové v 2:3 H2O/CH3CN) a tím se získal kryptofycin-251 (10 mg).
Hlavní experimentální data týkající se vytváření styrenových analogů a data o cytotoxicitě jsou přehledně uvedeny v tabulkách 1 a 2.
Trifenylfosfoniové soli:
Cinnamyltrifenylfosfoniumchlorid, 1naftylmethyltrifenylfosfoniumchlorid, methoxymethyltrifenylfosfoniumchlorid a 2methybenzyltrifenylfosfoniumbromid jsou komerčně dostupné, zatímco 3-methoxybenzyltrifenylfosfoniumchlorid, 3,5dimethoxybenzyltrifenylfosfoniumchlorid, 2,4dimethylbenzyltrifenylfosfoniumchlorid byly připraven zahříváním na teplotu zpětného toku trifenylfosfinu s mírným přebytkem odpovídajícího chloridu v toluenu po dobu 4 hodin.
4-Trifluomethylbenzyltrifenylfosfoniumbromid, 3furonmethyltrifenyIfosfoniumbromid, 2naftylmethyltrifenylfosfoniumbromid, 3, 5difluorbenzyltrifenylfosfoniumbromid, 4-(terč.butyldimethylsilyloxymethyl)benzyltrifenylfosfoniumbromid, • · • ·
- 234 • · · · · · • · · · 9 · · · · • ·· ··· ···· • · · · · · · • « · · 9 · 9
4-(N-t-Boc-aminomethyl)benzyltrifenylfosfoniumbromid a 3-(Nt-Boc-amino)benzyltrifenylfosfoniumbromid byly připraven zpracováním odpovídajících bromidů s trifenylfosfinem v toluenu při teplotě okolí po dobu 12 hodin.
4-(Karboxymethyl)benzyltrifenylfosfoniumbromid byl připraven zpracováním bromidu s trifenylfosfinem v roztoku 5:1 toluen/THF při teplotě okolí po dobu 48 hodin. 3furonmethylbromid, 2-naftalenmethylbromid a 3-(N-t-Bocamino)benzylbromid byly vytvořeny z 3-furonmethanolu, 2naftalenmethanolu a 3-(N-t-Boc-amino)benzylalkoholu po zpracování PBr3 v THF při teplotě - 78 °C.ref 3-furonmethanol a 2-naftalenmethanol jsou komerčně dostupné. 3-(N-t-Bocamino)benzylalkohol byl připraven z komerčního vzorku 3aminobenzylalkoholu. 4-(terč.butyldimethylsilyloxymethyl)benzylbromid a 4-(N-t-Bocaminomethyl)benzylbromid byly připraveny z komerčních vzorků methylesteru 4-hydroxymethylbenzoové kyseliny a 4aminomethylbenzoové kyseliny použitím následujících experimentálních procedur.
4-(terč.-butyldimethylsilyloxymethyl)benzylbromid:
Směs methylesteru kyseliny 4-hydroxymethylbenzoové (2 g) a triethylamin (3,36 ml) v dichlormethanu (15 ml) byly zpracovány terč.-butyldimethylsilyltriflátem (4,41 g) při teplotě -78 C. Po 30 minutách byly obsahy ponechány zahřát se na teplotu okolí a míchání pokračovalo po dobu dalších 30 minut. Voda (30 ml) a ethylacetát (60 ml) byly přidány do reakční směsi a organická vrstva byla promývána 0,3 M KHSO4, vodou a solankou, sušena nad MgSO4 a filtrována. Rozpouštědlo bylo odpařeno a residuum bylo vystaveno mžikové chromatografií v koloně oxidu křemičitého vymýváním směsí • 9 • ·
9 · · · ··· ··· « · · 9 • 9··· · · · · · · · ·
10% EtOAc/hexan a tím se získal methylester kyseliny 4-(terč.-butyldimethylsilyloxymethyl)benzoové (3,3 g, 95 % výtěžek).
Lithiumaluminumhydrid (0,21 g) dispergovaný v diethyletheru (20 ml) byl ochlazen na teplotu -18 °C pod argonovou atmosférou a zpracován po kapkách methylesterem kyseliny 4-(terč.-butyldimethylsilyloxymethyl)benzoové (2,05 g) v 10 ml diethyletheru. Po 30 minutách byl přidán ethylacetát (2 ml) pro vypláchnutí přebytku hydridu a potom byl přidán nasycený chlorid amonný (1,5 ml). Precipitát byl oddělen filtrací a promýván etherem. Rozpouštědlo bylo odpařeno a tím se získal 4-(terč.butyldimethylsilyloxymethyl)benzylalkohol (1,71 g, 93% výtěžek) .
4-(terč.-butyldimethylsilyloxymethyl)benzylalkohol (1,7 g) byl rozpuštěn v THF (15 ml) a zpracován bromidem fosforitým (0, 609 g) při teplotě -78 °C. Po uplynutí 30 minut byla reakční směs zředěna diethyletherem (80 ml) a promývána nasyceným hydrogenuhličitanem sodným (30 ml), vodou a solankou, sušena nad MgSO4. Etherová vrstva byla odpařen a residuum (2,0 g) bylo vystaveno mžikové chromatografií na oxidu křemičitém použitím 5% EtOAc/hexane jako vymývacího rozpouštědla, čímž se získal 4-(terč.butyldimethylsilyloxymethyl)benzybromid (1,05 g, 49% výtěžek).
4-(N-t-Boc-aminomethyl)benzylbromid:
Do roztoku di-terc.-butyldikarbonátu (2,18 g, 10 mmolů) v triethylamindimethylforamidu (1:9, 7,5 ml) byla přidána • · β · • · · · · · · • · · ·»· ···« • ···· · ··· · · · · kyselina 4-(aminomethyl)benzoová (0,75 g, 5 mmolů) při teplotě okolí a reakční směs byla zahřáta na teplotu 40-50 °C po dobu 10 minut. Po rozpuštění aminokyseliny míchání pokračovalo při teplotě okolí po dobu další jedné hodiny. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a residuum bylo okyseleno zředěným HCI (pH >2) a okamžitě extrahováno EtOAc a organická vrstva byla sušena nad MgSO4. Residuum získané po odebrání rozpouštědla bylo zpracováváno přebytkem diazomethanu (vytvořeného z diazaidu) v etheru po dobu 30 minut a přebytek diazomethanu byl rozložen kyselinou octovou. Residuum získané po odebrání rozpouštědla bylo chromatografováno v koloně oxidu křemičitého (20 g) použitím směsi hexany/EtOAc (9:1) jako vymývacího rozpouštědla a tím se získal methyl-4-(N-t-Boc-aminomethyl)benzoát (1,07 g, 81% výtěžek).
Do studené suspense LiAlH4 (60 mg, 1,5 mmolů) v etheru (5 ml) byl při teplotě -78 °C přidán po kapkách roztok methyl4-(N-t-Boc-aminomethyl)benzoátu (0,8 g, 3 mmolů) v etheru (5 ml) a obsah byl ponechán zahřát se na teplotu okolí. Po 3 hodinách bylo přidáno další množství LiAlH4 (100 mg) a reakce pokračovala při teplotě okolí po dobu dalších 10 minut. Přebytek LiAlH4 byl eliminován EtOAc následovaným nasyceným chloridem amonným (1,0 ml). Pevná látka, která precipitovala, byla filtrována a promývána etherem. Filtrát byl odpařen a tím se získal 4-(N-t-Bocaminomethyl ) benzylalkohol ( 250 mg, 35 %).
Roztok 4-(N-t-Boc-aminomethyl)benzylalkoholu (250 mg, 1,1 mmol ) v THF (5 ml) byl zpracováván bromidem fosforitým (30 ul, 0,32 mmolů) při teplotě -78 °C po dobu 2 hodin. Po • · • · • 0 • · · ··· « · « « • · · · · · · · * · ·· « • · · · · · · ···· · ··· ·«· uplynutí této doby reakce byla ukončena pevným NaHCO3 (50 mg) a reakční směs byla filtrován pro odstranění pevných látek a filtrát byl odpařen a tím se získal 4-(t-Bocaminomethyl)benzylbromid (300 mg, 95%).
Požadované E isomery byly odděleny z odpovídajících E/Z směsí krystalizací v roztocích ethylacetát/ethylether. V případě cinnamylu a několika málo analogů s nevýraznou E/z selektivitou byla surová směs vystavena isomerizaci použitím následujícího ilustrativního způsobu, popsaného pro cinnamylový analog, kryptofycin-152.
Isomerizace:
Směs kryptof ycinu-152 a jeho cis isomeru (E/Z 7:3, 62 mg,
0,10 mmolů) byla rozpuštěna v benzenu (3 ml) a zahřívána na teplotu zpětného toku s thiofenolem (10 μΐ, 0,10 molů) a 1,1' -azobis(cyklohexanekarbonitrilem) (12 mg, 0,05 mmolů). Po 16 hodinách byla___teplota směsi ponechána přejít na_. teplotu okolí a směs byla aplikována do malé kolony oxidu křemičitého. Kolona byla promývána dichlormethanem a sloučenina byl vymývána směsí 1:1 ethylacetát/dichlormethan. Rozpouštědlo bylo odpařeno a tím byl získán kryptofycin-151 (53 mg, 85%), který byl stále kontaminován přibližně 5% jeho cis isomeru.
Kryptofycin-151:
EIMS m/z (relativní intensita) 688/690 (3,3/1,5), 412/414 (18/6), 211 (100), 233 (18), 195/191 (16/6), 193 (29), 141 (38) ;
EIMS s vysokým rozlišením m/z 688,2900 (vypočteno pro C39H45CIN2O7 δ 1,5 nmu) .
• · • · • · • ·
- 238 XH NMR data, viz tabulka 3; 13C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-152:
EIMS m/z (relativní intensita) (21/7), 253 (100), 91 (85);
EIMS s vysokým rozlišením m/z C37H45CIN2O7, δ — 2,3 mmu) .
XH NMR data, viz tabulka 3;
13C NMR data, viz tabulka 4.
664/666 (24/7), 412/414
664,2939 (vypočteno pro
Kryptofycin-153:
EIMS m/z (relativní intensita) 668/670 (3,7/1,4), 412/414 (32/12), 251 (62), 198 (100), 195/197 (36/11);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 668,2817 (vypočteno pro C36H45C1N2O8, δ 4,7 mmu).
XH NMR data, viz tabulka 3;
X3G NMR data, viz tabulka 4. ---Kryptofycin-154:
EIMS m/z (relativní intensita) 698/700 (2,5/0,8), 412/414 (1B/5), 287 (28), 228 (35), 195/197 (18/6), 139 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 698,2946 (vypočteno pro C37H47C1N2O8, δ 2,5 mmu).
XH NMR data, viz tabulka 3;
X3C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-155:
EIMS m/z (relativní intensita) 604/606 (20/6), 412/414 (24/8), 280/282 (24/8), 195/197 (100/33);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 604,2894 (vypočteno pro • · '· ·
- 239 ··· ··· ···· • · · · · · ··· · · · · • · · · · · ······ ··· ··· ······· · · •· ·· ·· · · · * ·
C32H45CIN2O7, δ 2,1 mmu).
1Η NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,76 (2, d; 15,5), 6,66 (3, ddd; 15,5, 9,5 a 5, 9), 2,32 - 2,44 (4-H2, m) , 4,92 (5, m), 2,66 - 2,76 (6, m), 0,98 (6-Me, d; 6,81, 5,21 (7, t; 10,91, 5,46 (8, dt; 10,9 a 7,41, 2,00 (9-H2, m) , 1,38 (10-H2, m) , 0,91 (10-Me, t; 7,51; B 4,81 (2, m) , 5,70 (2-NH, d;
8,5), 3, 04 (3, dd; -14,5 a 7,21, 3, 14 (3 , dd; -14, 5 a 5,6),
7,22 (5, d; 2, 2), 3,81 (7-OMe, s), 6, 84 (8, d; 8 ,5), 7,08
(9, dd; 8,5 a 2,2) ; C 2,66 - 2,76 (2, m) , 1,22 (2-Me, d;
7,4), 3, 27 (3, dt; 13,5 a 6,8), 3,5 2 (3, m) , 6,93 (3-NH, br
t; 6,4); D 4,86 (2, dd; 9,8 a 3,51, 1,49 (3, m) , 1, 71 - l.aO
(3/4, m) , 0,90 (4-Mi e, d; 6,0), 0,94 (5, d ; 6,5);
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,5 (1),
125,0 (2), 141,6 (3) , 36, 5 (4), 77,9 (5), 36,2 (6), 17,7 (6-
Me), 130,0 (7), 131,6 (8) , 29,6 (9-H2), 22,8 (10-H2), 13,8
(11-H3); S 171,0a (1), 53, 5 (2), 35,1 (3) , 129,9 (4), 131,0
(5), 122,4 (6) , r537R (7) , 56,1 (7-OCH3) , 112,2 (8), 12874
(9); C 175,6 (1) , 38,3 (2), 14,0 (2-Me), 41,2 (3);
D170,9a(1), 71,6 (2) , 39, 5 (3), 24,7 (4), 21,4 (4-Me), 23,1
(5) . a signály jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofylin-156:
EIMS m/z (relativní intensita) 412/414 (23/6), 381 (11),
280/282 (22/6), 195/197 (100/33);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 592,2568 (vypočteno pro C30H4iC1N2O8, δ -1,6 mmu).
XH NMR data, viz tabulka 3;
13C NMR data, viz tabulka 4.
• · • · • ·
- 240 Kryptofycin-159:
EIMS m/z (relativní intensita) 666 (3), 412/414 (16/41, 396 (52), 255 (100), 195/197 (30/8), 91 (54);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 666,3060 (vypočteno pro C37H47CIN2O7, δ 1,1 mmu) .
XH NMR data, viz tabulka 3;
C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-160:
EIMS m/z (relativní intensita) 628/630 (9/41, (63/23), 280 (25), 217 (89), 195/197 (89/30);
412/414
EIMS s vysokým rozlišením m/z C33H41CIN2O8, δ 2,0 mmu).
XH NMR data, viz tabulka 3;
C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-161:
EIMS m/z (relativní intensita)
628,2532 (vypočteno pro
706/708_C6/2), 412/414 (49/18), 295 (15), 280/282 (25/7), 195/197 (100/34);
EIMS s vysokým rozlišením m/z C36H42CIF3N2O7, δ 1,0 mmu) .
1H NMR data, viz tabulka 3;
706,2623 (vypočteno pro
C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-166:
EIMS m/z (relativní intensita) 652/654 (1,1/0,41, 412/414 (18/5), 241 (37), 195/197 (64/20);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 652,2918 (vypočteno pro C36H45CIN2O7, δ - 0,2 mmu) .
XH NMR data, viz tabulka 3;
• ·
- 241 13C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-167:
EIMS m/z (relativní intensita) 666/668 (3,4/1,1), 412/414 (26/91, 280 (11), 255 (67), 195/197 (46/15);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 666,3058 (vypočteno pro C37H47CIN2O7, δ 1,4 mmu) .
3H NMR data, viz tabulka 3;
13C NMR data, Viz tabulka 4.
Kryptofycin-172:
EIMS m/z (relativní intensita) 688/690 (3/2), 412/414 (12/4), 277 (67), 218 (100), 195/197 (29/10), 141 (63);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 688,2916 (vypočteno pro C39H45CIN2O7, δ - 0,1 mmu) .
1H NMR data, viz tabulka 3;
13C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-181:
EIMS m/z (relativní intensita) 656/658 (9,0/3,3), 412/414 (84/34), 245 (71), 195/197 (47/7);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 656,2674 (vypočteno pro C35H42CIFN2O7, δ - 0,9 mmu).
*Η NMR data, viz tabulka 3;
13C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-188:
EIMS m/z (relativní intensita) 674/676 (20/4), 412/414 (57/20), 280/2B2 (20/7), 263 (13), 195/197 (89/27);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 674,2551 (vypočteno pro C35H41CIF2N2O7, δ 1,9 mmu) .
·· • · • ·
- 242 ··· ··· · · · · • · ··· · ··· · ·· · • ·· · · · ······ ·· · ··· ······· · · ·· · · ·· · ·· ·· XH NMR data, viz tabulka 3; 13C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-234:
Směs obsahující kryptofycin- 234 a 15% jeho z isomeru (58,3 mg) byla opakovaně krystalizována v roztocích EtOAc/ethylether pro získání kryptofycinu-234 (47 mg) a jeho z isomeru (11 mg).
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,77 (2, d; 15,2),
6,68 (3, ddd; 15,2, 9,7 a 5,4), 2,37 (4, dt; 14,2 a 10,5),
2,52 (4, m) , 4,99 (5, m) , 2,55 (6, m) , 1,13 (6-Me, d; 6,8), 5,99 (7, dd; 15,8 a 8,8), 6,40 (8, d; 15,8), 7,25a (2'/6', d; 8,2), 7,29a (3'/5', d; 8,2), 4,71 (4'-(CH2OTBDMS, brs),
0,08 (6H) a 0,93 (9H) (4 '-CH2OTBDMS) ; B 4,81 (2, m) , 5,77 (2-NH, zastíněno dalším signálem), 3,03 (3, dd; -14,4 a 7,3), 3,14 (3, dd; - 14,4 a 5,4), 7,22 (5, d; 2,0), 3,86 (7OMe, s), 6.B3 (8, d; 8,4), 7,07 (9, dd; 8 4a 2,0); C 2,71 (2, m) , 1,22 (2-Me, d; 7,2), 3,29 (3, m) , 3,49 (3, m) , 6,98 (3-NH, br t; 5,6); D 4,84 (2, m) , 1,36 (3, m) , 1,59 - 1,71 (3/4, m) , 0,73 (4-Me, d, 6,4), 0,11 (5, d, 6,2). a vzájemně zaměnitelné;
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,5 (1) ,
125,2 (2), 141,4 (3), 36,4 (4), 77,4 (5), 42,2 (6), 17,3 (6Me), 129,6 (7), 131,6 (8), 136,4 (1'), 126,0a (2'/6'), 126,3a (3’/5’), 140,9 (4'), 64,7 (4'-CH2O-), 25,9 a - 5,3 (41 -CH2QTBDMS); B 171,0b (1), 53, 6 (2), 35,1 (3), 129, 9 (4),
131,0 (5), 122,4 (6), 153, 9 (7), 56, 1 (7-OCH3) , 112,2 (8),
128,4 (9); C 175,6 (1), 38,3 (2), 14,0 (2-Me), 41,1 (3); D
170,9b (1), 71,5 (2), 39, 5 (3), 24,5 (4), 22,7 (5). a a b signály jsou vzájemně zaměnitelné.
(4-Me), 21,2 • fe fe • ·
- 243 • fe ··· ···· fe··· · ··· · ·· · •fe ··· ······ ··· ··· fe····· · · •fe ·· ·· · ·· ··
Kryptofycin-236:
3H NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,76 (2, d; 15,2),
6,68 (3, ddd; 15,2, 9,6 a 5,6), 2,37 (4, m) , 2,51 (4, m) , 5,00 (5, m) , 2,54 (6, m) , 1,13 (6-Me, d; 6,9), 6,00 (7, dd; 15,9 a 8,6), 6,39 (8, d; 15,9), 7,20 - 7,30 (2'/3'/5'/6', br m) , 4,28 (4'-CH2NH-t-Boc, d; 4,9), 4,80 (4'-CH2NH-t-Boc, d;
4,9), 1,46 (41-CH2NH-t-Boc; s) ; B 4,80 (2, m) , 5,65 (2-NH, d; 8,5), 3,04 (3, dd; -14,4 a 6,9), 3,13 (3, dd; -14,4 a 5,5), 7,22 (5, d; 2,2), 3,87 (7-OMe, s) , 6,83 (8, d; 8,4), 7,08 (9, dd; 8,4 a 2,2); C 2,71 (2, m), 1,22 (2-Me, d; 7,3), 3,27 (3, m), 3,51 (3, m), 6,93 (3-NH, br t; 5,61; D 4,84 (2, dd; 9,9 a 3,5), 1,36 (3, m), 1,58 - 1,70 (3/4, m), 0,74 (4Me, d, 6,4), 0,78 (5, d, 6,4);
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,4 (1),
125,2 (2), 141,4 (3), 36,5 (4), * (5), 42,2 (6), 17,3 (6Me), 130,1 (7), 131,4 (8), 135,9 (1'), 126,4 (2'/6'), 127,8 (3'/5·), 138,4 (4'), 44,4 (4'-CH2NH-t-Boc) , 28,4 (4'-CH2NH-tBoc); B 170,9 (11, 53,5 (2), 35,1 (3), 129,9 (4), 131,1 (5), (6), 154,0 (7), 56,2 (7-OCH3) , 112,3 (8), 128,4 (9); C 175,6 (1), 38,3 (2), 14.0 (2-Me), 41,2 (3); 1)170,9(1), 71,6 (2), 39,6 (3), 24,5 (4), 22,7 (4-Me), 21,3 (5).
* skryto pod signálem rozpouštědla.
Kryptofycin-238:
Kryptofycin-234 (14 mg) v THS (1,5 ml) byl zpracován roztokem tetrabutylamoniumfluoridu (25 μΐ, 1M in THE) při teplotě 0 °C. Po uplynutí 1 hodiny byl do reakční směsi přidán nasycený NH4C1 (5 ml) , následovaný vodou (15 ml) a směs byla extrahována EtOAc (50 ml) . EtOAc vrstva byla ·· ·
sušena nad MgSO4 a odpařena. Residuum bylo čištěno v malé koloně oxidu křemičitého použitím CH2CI2 a EtOAc jako vymývacích rozpouštědel. Poslední frakce byla odpařena a tím se získal kryptofycin-238 (11,8 mg).
EIMS m/z (relativní intensita) 668/670 (3/0,5), 412/414 (38/14), 257 (291, 195/197 (25/10);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 668,2898 (vypočteno pro C36H45CIN2O8, δ -3,4 mmu).
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,76 (2, d; 15,6),
6,68 (3, ddd; 15,6, 9,8 a 5,5), 2,36 (4, dt; 14,4 a 10,4), 2,51 (4, br dd; 14,4 a 5,1), 5,00 (5, m), 2,55 (6, m), 1,13 (6-Me, d; 6,8), 6,01 (1, dd; 15,9 a 8,8), 6,40 (8, d; 15,9), 7,31 (2 '/3 '/5 '/6 ' , br s) , 4,47 (4'-CH2OH, brs) ; B 4,80 (2,
m), 5,78 (2-NH, d; 8,4), 3,01 (3, dd; -14,4 a 7,4), 3,13 (3, dd; -14,4 a 5,5), 7,21 (5, d;' 2,0), 3,86 (7-OMe, s) , 6,83 (8, d; 8,5), 7,07 (9, dd; 8,5 a 2,0); C 2,71 (2, m) , 1,21 (2-Me, d; 7,1), 3,28 (3, m) , 3,49 (3, m) , 6,98 (3-NH, br t; 6,0); D 4,84 (2, dd; 9,9 a 3,2), 1,35 (3, m) , 1,58 - 1,71 (3/4, m), 0,74 (4-Me, d; 6,4), 0,77 (5, d; 6,3);
13C NMR (CDC13) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,5 (1),
125,2 (2), 141,4 (3), 36,4 (4), 77,4 (5), 42,2 (6), 17,3 (6Me), 130,1 (1), 131,4 (8), 136,1 (1'), 126,3a (2'/6'), 127,2a
(3’/5’), 140,4 (4'), 64,9 (4'-CH2OH); B 171,0b (1), 53,7 (2) ,
35,0 (3) , 129,9 (4), 131,0 (5), 122,3 (6), 153,9 (7) , 56, 1
(7-OCH3) , 112,2 (8), 128,4 (9); C 175, 6 (1), 38,2 (2) , 14,0
(2-Ne), 41,1 (3); 1) 17C,8b(l), 11,5 (2), 39,5 (3) , 24,5
(4), 22,7 (4-Me), 21,3 (5).
a a b signály jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofycin-24 6:
• · ·· k · · k · · ·· k · · 4 k · · « • · · · ·· ·
- 245
Kryptofycin-236 (9 mg, 0,012 mmolů) v CH2C12 (50 μΐ) byl zpracován 4N HCl v dioxanu (20 μΐ, 0,08 mmolů) při teplotě okolí. Po uplynutí 1 hodiny bylo rozpouštědlo odpařeno a residuum bylo vystaveno mžikové chromatografií v malé C18 koloně oxidu křemičitého (Alltech, 500 mg) použitím směsi methanol/voda (1:1) pro vymývání. První frakce (3 ml) po odpaření rozpouštědla dala kryptofycin-246 (7 mg, 85%).
XH NMR (CD3OD) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,92 (2, dd; 15,2 a 1,7), 6,69 (3, ddd; 15,2, 11,1 a 3,8), 2,35 (4, m) , 2,68
(4, m) , 5,06 (5, m), 2,63 (6, m), 1,15 (6-Me, d; 7,4), 6,18
(7, dd; 15,9 a 8,9), 6,50 (8, d; 15,9) , 7,40 (2' /6', br d;
8,2) U 7, 46 (3'/5', br d; 8 ,2), 4,08 (4'· -CH2NH2» Cl, s); B 4,51
(2, dd; 11,1 a 3,4), 2,75 (3, m), 3,17 (3, dd; -14 1,5 a 3,9),
7,27 (5, d; 2,0), 3,83 (7-OMe, s), 6,97 (8, d; 8,5), 7,16 (9, dd. 8,5 a 2,0); C 2,73 (2, m), 1,17 (2-Me, d; 8,01, 3,26 (3, m), 3,56 (3, m); D 4,92 (2, dd; 9,8 a 3,91, 1,35 (3, m) , 1,54 - 1, 65 (3/4, m) , 0,71 (4-Me, d; 6,41, 0,75 (5, d; 6,4);-
13C NMR (CD3OD) jednotka δ (uhlíková poloha) A 168,4 (1) z
125,7 (2), 143, 5 (3), 37, 7 (4), 78 6 (5), 43,5 (6), 17, 5 (6-
Me), 133 ,6 (7), 131,9 (8) , 139,5a (1'), 128,0 (2’/6·), 130,3
(3’/5’), 133, 3a (4'), 44, 0 (4 '-CH2NH2HC1) ; B 174,1 (1), 57,4
(2), 36, 3 (3) , 132,2 (4) , 131,5 (5), 123,3 (6), 155,4 (7) ,
56,6 (7- OCH3) , 113,5 (8), 129,3 (9); C 177,5 (1), 39,0 (2) ,
15,1 (2- Me), 41 ,2 (3); D 172,3 (1), 72,8 (21, 41,0 (3), 25, 7
(4), 21, 7 (4-Me), 23,2 (5).
a signály jsou vzájemně zaměnitelné.
• · ·· • · · • · · ·· • · · · • · · · ·· ··
246 • · ·· ··· ·
Kryptofycin-250:
Roztok kryptofycinu-247 (5,1 mg) v dichlormethanu (80 μΐ) byl zpracován kyselinou chlorovodíkovou (40 μΐ, 4N v dioxanu). Po uplynutí 2 hodin byla reakční směs koncentrována, zředěna vodou a ponechána procházet krátkou ODS kolonou. Kolona byla promývána vodou (5 ml) následovanou CH3CN (3 ml). Poslední frakce byla odpařena pro získání kryptofycinu-250 (5 mg). Tento byl dále čištěn chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 25 cm x 10 mm, 10 μ, 35% H2O/CH3CN, 4 ml/min) pro získání čistého vzorku (4 mg, tR 18 minut).
EIMS m/z (relativní intensita) 653/655 (15/10), 533 (33),
242 (48), 195/197 (36/13);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 653,2865 (vypočteno pro C35H44CIN3O7, δ 0,3 mmu) .
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,78 (2, d; 15,1), 6,68 (3, ddd; 15,1, 9,6 a 5,4)7^2735 (4, dt; 14,4 a 10,7), 2,48 (4, br dd; 14,4 a 5,1), 5,01 (5, m), 2,53 (6, m) , 1,12 (6-Me, d; 6,8), 6,01 (7, dd; 15,9 a 8,7), 6,33 (8, d; 15,9), 6,81 m, 6,89 d, 6,94 s a 6,99 m (2 '/3' -NH3/4 '/6 ' ) , 7,15 (5', t; 7,81; B 4,79 (2, m) , 5,95 (2-NH) , 3,02 (3, dd; -14,4 a
7,3), 3,15 (3, dd; - 14,4 a 5,5), 7,22 (5, d; 2,0), 3,86 (7OMe, s), 6,84 (8, d; 8,4), 7,08 (9, dd; 8,4 a 2,0); C 2,70 (2, m), 1,23 (2-Me, d; 7,1), 3,27 (3, m) , 3,51 (3, m) , 6,99 (3-NH, m) ; D 4,87 (2, dd; 9,8 a 3,2), 1,39 (3, m) , 1,59 1,73 (3/4, m), 0,76 (4-Me, d, 5,4), 0,80 (5, d, 5,6); A
165,8 (11, 125,2 (2), 141,5 (3), 36,4 (4), 77,3 (5), 42,0 (6), 17,1 (6-Me), 131,0 (7), 131,3 (8), 138,3 (1'), 116,0 (2Ί, 121,1 (4'), 130,0 (5'), 118,0 (6'); B 171,2 (1), 54,0 (2), 35, 0 (3), 129, 8 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 153,9 (7),
247
56, 1 (7-OCH3), 112,3 (8), 128,4 (9); C 175,6 (1), 38,2 (2),
14, 2 (2-Me), 41,0 (3); D 170,9 (1), 71,5 (2), 39, 6 (3) , 24,6
(4) r 22,8 (4-Me), 21,4 (5) .
Kryptofycin-251:
EIMS m/z (relativní intensita) 696 (0,7), 652 (M+ - CO2;
0,7), 412/414 (4/2), 285 (6), 241 (5), 195/197 (11/3);
EIMS s vysokým rozlišením m/z (vypočteno pro C37H45CIN2O9, δ mmu) .
3H NMR data, viz tabulka 3;
13C NMR data, viz tabulka 4.
Kryptofycin-255:
3H NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,78 (2, d: 15,1), 6,67 (3, ddd; 15,1, 9,5 a 5,9), 2,37 (4, dt; 14,9 a 10,3), 2,45 (4, m), 4,96 (5, m) , 2,52 (6, m) , 1,09 (6-Me, d; 6,8), 5,14 (7, dd; 15,1 a 8,9), 6,24 (8, d; 15,1), 7,20 -7,33 (2'/3747576',m); B 4,83 (2, m) , 5,64 (2-NH, d; 8,8), 3,05 (3, dd; -14,6 a 7,1), 3,14 (3, dd; -14,6 a 5,4), 7,22 (5, d; 2,0), 3,88 (7-OMe, s), 6,85 (8, d; 8,51, 7,08 (9, dd; 8,5 a 2,0); C 2,72 (2, m), 1,23 (2-Me, d; 7,3), 3,29 (3, m), 3,50 (3, m), 6,95 (3-NH, m); D 4,86 (2, dd; 10,0 a 3,4), 1,49 (3, m) , 1,63 - 1,85 (3/4, m) , 0,89 (4-Me, d, 6,4), 0,94 (5, d,6,4) .
Tabulka 3.
500 MHz 3H NMR data pro Kryptofyciny-3, -151, - 152, -153, 154, -156, -159, -160, -161, -166, -167, -172, - 181, -188 a 251 • ·
- 248
P = poloha
P 3 151 152 153 154 15« 159 160 161 166 167 172 181 188 251
A2 5.77 d 5.78 5.77 5.77 5.77 5.76 5.76 5.77 5.78 5.77 5.77 5.78 5.78 5.78 5.76
3 6.6« ddd 6.71 6.67 6.68 6.68 6.66 6.68 6.68 6.68 6.68 6.6« 6.70 6.68 6.68 6.68
4Λ 2.3? dt 2.45 2.37 2.37 2.37 2.34 2.38 2.35 2.36 2.39 2.37 2.41 2.36 2.35 2.35
45 234 btdd 2.58 2.47 2.52 2.52 2.41 231 2.49 233 2.52 231 235 2.54 2.52 2.51
5 5.01 ddd 5.10 4.97 5.00 5.00 4.88 5.02 4.96 5.02 5.03 4.99 5.04 5.00 5.01 5.00
6 2.56 m 2.71 2.47 2.54 2.54 237 236 2.49 239 2.59 234 2.61 237 238 2.55
6-Me 1.14 d 1.22 1.09 1.13 1.13 1.04 1.13 1.10 1.15 1.15 1.12 1.17 1.15 1.14 1.13
7 6.01 dd 6.09 5.63 dd 6.00 5.99 433 dd s.n 5.70 6.13 592 5.97 6.14 6.09 6.05 6.00
8 6.41 d 7.19 6.23 dd 6.38 6.34 6.31 d 6.59 636 6.45 6.63 6.34 637 638 6.34 6.39
9 6.71 dd
10 649 dd
8/10Ai-I' 7.67 br>
2' 7.2« lo 7.41 to 7.36 brd 6.85 t 6.68 d 2.31 t 7.37 brs 7.42 d 2.33 s 694 br b 6.83 m 7.30 d
3’ 7.34 m 7J8 m 7.30 brl 3.80 B 3.79 B 6.95 bre 735 d 7.11 10 2.29 s 7.54 m 7.09 m 7.23 d
4' 7.23 m 7.77 d 7.22 m 6.7« brd 6.36 d 2.31 s 6.47 br< 7.39 m 687 br s 7.78 m 7.40 m 6.68 m 3.63 s
5' 7.2« k> 7.94 d 7.30 brt 7.21 t 3.79 s 6.95 d 7.35 far s 735 d 2,29 s 778 m 7.02 m 7.23 d
6’ 7.34 m 7.41 to 7.58 d 7.36 brd 6.92 d 6.68 d 7.2« d 7.42 d 6.94 br c 7.44 m 7.44 m 7.19 m 6.83 m 730 d
8' 8.07 d 7.78 m
D2 4.84 dd 4.85 4.87 4.84 4Λ4 437 4.84 4.83 4.84 4.85 4.85 4.86 4.85 4.84 484
3 1.62 1.64 1.72 1.65 1.66 1.75 1.68 1.67 1.65 1.69 1.66 1.67 1.66 1.67 1.36
3· 1.36 m 1.35 1,47 137 1.38 1.48 1.38 1.36 1.31 1.38 1.38 1.38 1.36 1.32 1.58 to
4 1.62 m 1.64 1.72 1.65 1.66 1.75 1.68 1.67 1.65 1.69 1.66 1.64 1.66 1.67 1.70 m
4-Me 0 77 d 7.00. 0.87 0.77 0.79 0.94 0.79 0.80 0.76 0.79 0.78 0.74 0.78 0 79 0.77
5 0.73d 0.64 0.86 0.74 0.77 0.91 0.77 0.79 0.72 0.76 0.75 0.65 0.74 0.77 0.73
Spektra zaznamenávána v CDC13; Chemické posuny jsou pro protony nebo methylovou nebo methoxylovou nebo hydroxymethylovou funkční skupinu s polohou na uhlíku indikovanou v tabulce. Chemické posuny pro protony v • · · ·
249 • · • · · · • · « • · 1
I · · jednotkách B a C jsou v intervalu ± 0,2 ppm a kopulační konstanty jsou v intervalu ± 0,5 Hz okolo odpovídajícího
hc idnot kryptofycinu-3. J (H , H) v Hz pro 1 51: 3',4' =8, 3;
5’ ,6’ = 8,0; 7',8' = 8,1; J (H,H) v Hz pro 152: 6,7 = 8, 7;
7, 8 = 15,3; 8,9 = 10,5; 9,10 = 15,7; 2',3' = 3',4' = 4’,5' -
5' ,6’ = 7,4; J (H,H) v Hz pro 153: 2',4' = 2',6' = 2, 0;
4' ,5' = 5',6' = 7,9; J (H,H) v Hz pro 154: 2 ' , 4 ' = 4 ’ , 6' =
2,2; δ pro 8-OCH3 jednotky A v 156 je 3,51: J (H,H) v Hz pro 156: 6,7 =9,3; 7,8 = 12,6; J (H,H) v Hz pro 159; 5',6' = 8,3; J (H,H) v Hz pro 161: 2',3' = 4',5' = 8,1; J (H,H) v Hz pro 251: 2'3* = 5',5' = 8,2; Pozorovatelné kopulační konstanty pro zbývající protony v tabulce jsou v intervalu ± 0,5 Hz odpovídajících hodnot v 3.
Tabulka 4.
125 MHz 13C NMR data pro Kryptofyciny-3, -151, - 152, -153, 154, -156, -159, -160, -161, -166, -167, -172, - 181, -188 a 251. _____ ___
- 250
P = poloha
• ·
- 251
10 D no 133 .7 171 no 170 no 170 no no 170. no Π1 132 .9 170 170 no 17
1 .1 .0 .e .9 .9 .9 .9 .9 a .9 .0 .9 .6 .9 0.
2 71. 71. 71. 71. 71. 71. 71. 71. 71.5 71. 71. 71. 71. 71. 71
6 5 5 5 6 6 $ £ 5 6 5 5 5 .5
3 39. 39. 39. 39. 39. 39. 39. 39. 39.6 39. 39. 39. 39. 39. 39
5 s € 5 5 6 6 5 £ 5 5 5 £ .6
4 24. 24. 24. 24. 24. 24. 24. 24. 24.5 24. 24. 24. 24. 24. 24
5 s G 5 5 7 5 5 s 5 c 5 & .5
4- 21. 21. 21. 21. 21. 21. 21. 21. 21.2 21. 21. 21. 21. 21. 21
2 1 4 2 2 4 3 3 2 2 2 2 3 .2
5 22. 22. 22. 22. 22. 23. 22. 22. 22.7 22. 22. 22. 22. 22. 22
6 7 9 7 7 0 7 a fl 7 6 Ί a .7
Spektra zaznamenávána v CDCI3; Chemické posuny pro uhlíky v jednotkách B a C jsou v intervalu ± 0,5 ppm hodnot pro kryptofycin-3.
* signál skryt pod CDCI3 signálem;
** signály nemohly být nalezeny.
Y signál pro 8-OCH3 jednotky A;
a signály v sloupci mohou být navzájem zaměnitelné.
3'-OCH3 uhlíkové jednotky A v kryptofycinu-153 byly rezonovány při δ 55,1 a 3' a 5'-OCH3 uhlíky 154 byly rezonovány při δ 55,3. 2' a 4'-CH3 uhlíkové signály 159 byly pozorovány při δ 19,7 respektive 20,9. 2'-CH3 uhlíkový signál
166 byl pozorován při δ 19,8. 3' a 5'-CH3 uhlíkové signály
167 byly pozorovány při δ 21,2. Methylenové a karboxylové uhlíky 4'-CH2COOH byly pozorovány při δ 40,4 respektive 174,5.
Příklad 92
Epoxidové analogy
Kryptofyciny-157, 158, 164, 165, 168, 169, 170, 171, 173,
174, 177, 178, 179, 180, 182, 183, 200, 242 a 269.
• · ·
252 • ···· · · · · · ·· • ·· ··· ······ · · · • ••••·· ·
Tabulka 5.
Styren Kryptofydn č. Ar Epoxid č. Stereochemie RR/SS poměr
151 ír* 157 15B RR SS 2.4 : 1
153 16B 16» RR SS 2.4 : 1
159 170 RR 2.8 : 1
155 oi 177 17B RR SS 2.0 : 1
157 «pA CM. 17» 1BO RR SS 2.7 : 1
172 - 173 17« RR SS 1.5 : 1
181 182 183 RR SS 2.0 : 1
1BB Xr* » 200 RR SS 1.4 : 1
236 XT* 2 «2 RR SS 2 1
23B χ/1 259 RR SS 2 : i*·
* 188 vyžaduje 6 ekvivalentů MCPBA a 36 hodin pro 70% přeměnu na epoxidy.
253 ** Neseparovatelná směs.
Obecný způsob epoxidace styrenových analogů:
Roztok styrenových analogů (0,1 mmolů) a kyseliny mchlorperoxybenzoové (0,3 mmolů) v 3 ml dichlormethanu byl ponechán za míchání při teplotě okolí. Po uplynutí 16 hodin byla reakční směs zředěna dichlormethanem (3 ml) a promývána fosforečnanovým pufrem (O,1M, pH 8, 5 ml) pro odstranění 3chlorbenzoové kyseliny, vytvořené v průběhu reakce.
Organická vrstva byla oddělena, zpracován dimethylsulfidem (20 μΐ) pro odstranění perkyseliny a vystavena druhému promývání pufrem. Dichlormethanová vrstva byla oddělena, sušena nad MgSO4, odpařena a uchovávána za sníženého tlaku po dobu 24 hodin. Residuum bylo vystaveno HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 10 μ, 250 mm x 22 mm, 35% H2O/CH3CN, 6 ml/min) pro získání RR a SS -epoxidů.
Experimentální detaily a data o cytotoxicitě jsou uvedeny v tabulce 3.
Kryptofyciny-157 a -158:
Kryptofycin-151 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím chromatografií HPLC s obrácenými fázemi pro získání kryptofycinů-151 a -15B.
Kryptofycin-157:
EIMS m/z (relativní intensita) 704/706 (1/0,3), 195/191 (14/41, 141 (100), 115 (27);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 704,2865 (vypočteno pro C39H45C1N2O8, - 0,1 nmu chyba);
XH NMR data viz tabulka 6;
13C NMR data viz tabulka 1.
• ·
- 254 • ···· · ··· · ·· • · · ··· ······ ··· ·· ····«·* · ·· ·· ·· · ··
Kryptofycin-158: EIMS m/z (relativní intensita) 704/106 (2,2/1,9), 195/191 (25/9), 141 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 704,2862 (vypočteno pro C39H45CIN2O8, 0,3 mmu chyba);
XH NMR data viz tabulka 6;
13C NMR data viz tabulka 7.
Kryptofyciny-164 a -165:
Roztok kryptofycinu-152 (53 mg, 0,08 mmolů) a kyseliny mchlorperoxybenzoové (15 mg, 0,087 mmolů) v 3 ml dichlormethanu byl ponechán za míchání při teplotě okolí po dobu 16 hodin. Reakční směs byla vystavena stejnému zpracování a čištění pro získání sloučenin 164/165A a 164/165B (5 mg každá), se stejným výchozím materiálem (10 mg) a dalšími dekompozičními produkty. Hrubé struktury byly analýzou určeny jako kryptofyciny-164 a -165, ale stereochemická struktura epoxidové složky sloučeniny nemohla být určena.
Kryptofycin-164/165A:
1H NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,77 (2, d; 15,1), 6,67 (3, ddd; 15,1, 9,7 a 5,4.), 2,37 (4, m) , 2,44 (4, m) , 4,98 (5, m) , 2,48 (6, m), 1,06 (6-Me, d; 6,7), 5,83 (7, dd; 15,6 a 8,5), 5,40 (8, dd; 15,6 a 7,8), 3,32 (9, dd; 7,9 a 2,0), 3,75 (10, d; 2,0), 7,26 (2’/6', m) , 7,31- (3, dd; 14,5 a 7,3), 3,14 (3, dd; -14,5 a 5,5), 7,23 (5, d; 2,2),
3,87 (7-OMe, s), 6,84 (8, d; 8,2), 7,09 (9, dd; 8,2 a 2,2);
C 2,73 (2, m), 1,23 (2-Me, d; 7,2), 3,29 (3, m) , 3,51 (3,
m), 6,97 (3-NH, br t; 6,3); D 4,88 (2, dd; 10,0 a 3,1), 1,52 (3, m), 1,79 (3/4, m) , 0,92 (4-Me, d; 6,51, 0,95 (5, d;
255 ····· · ··· ··· • · · · ·· · ·· ··
6,5) .
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,4 (1),
125.3 (2), 141,2 (3), 36,5 (4), 77,0 (5), 41,3 (6), 17,0 (6Me), 136,2 (7), 129,4 (8), 62,5 (9), 60,1 (10), 136,9 (1'),
125.4 (2'/6'), 128,7 (3'/5'), 128,4 (4'); B 171,0 (1), 53,6 (2), 35,0(3), 129,9 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 154,0 (7),
56.1 (7-OMe), 112,3 (8), 128,3 (9); C 175, 6 (1), 38,3 (2),
14.1 (2-Me), 41,2 (3); D 170,8 (1), 71,5 (2), 39,6 (3), 24,7 (4), 21,4 (4-Me), 22,9 (5).
Kryptofycin-164/165B:
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ
(uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,76 (2, d; 15, 3),
6,66 (3, ddd; 15, 3, 9,6 a 5,7) , 2,36 (4, m), 2,40 (4, m) ,
5,00 (5, m) , 2,47 (6, m), 1,08 (6-Me, d; 6,8), 5,95 (1, dd;
15,5 a 8,5), 5,43 (8, ddd; 15, 5, 7,6 a 0,6), 3,35 (9, dd;
7,6 a 1,9), 3,75 (10, d; 1,9), 7,27 - -7,37 (3, dd; -14, 4 a
7,2), 3,14 (3 , dd; -14,4 a 5,5), 7,22 (5, d; 2,1), 3,87 (7-
OMe, s), 6,84 (8, d; 8,5), 7,08 (9, dd; 8,5 a 2,1); C 2,12
(2, m), 1,22 (2-Me, d; 7,2) , 3,27 (3, m), 3,52 (3, m) , 6, 90
(3-NH, br t; 6,3); D 4,87 (2, dd; 9,8 a 3,8), 1,48 (3, m) ,
1,77 (3, m), 1,73 (4, m) , 0,89 (4-Me, d; 6,4), 0,90 (5 , d;
6,6) .
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,4 (1),
125,2 (2), 141,2 (3), 36,4 (4), 41,3 (6), 16,9 (6-Me), 135,9 (7), 129,1 (8), 62,3 (9), 60,4 (10), 136,8 (I'), 125,5
(2-/6'), 128,6 (3'/5*), 128,4 (4'); B 170,9 (1), 53, 6 (2) ,
35,1 (3) , 129,8 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 154.C (7) , 56,1
(7-OMe), 112,2 (8), 128,4 (9); C 175,5 (1), 38,3 (2), 14,0
(2-Me), 41,2 (3) ; D 170,8 (1), 71,4 (2), 39,7 (3), 24,7 (4) ,
21,5 (4-Me), 22, 9 (5) .
256 • · • · • · · · · · • · ·
Kryptofyciny-168 a 169.
Kryptofycin-153 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím ehromatografié HPLC s obrácenými fázemi pro získání kryptofycinů-168 a -169.
Kryptofycin-168:
EIMS m/z (relativní intensita) 684/686 (17/6), 280/282 (12/6), 257 (20), 212/214 (69/24), 121 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 684,2789 C36H45CIN2O9, 2,6 mmu chyba);
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofycin-169:
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, Viz tabulka 7.
(7/2), 412/414 (14/4), 195/197 (vypočteno pro
Kryptofyciny-170 a 171:
Kryptofycin-159 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím ehromatografié HPLC s obrácenými fázemi pro získání kryptofycinů-170 a -171.
Kryptofycin-170:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (4/3), 412/414 (11/4), 280/282 (15/4), 255 (25), 195/197 (52/17);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3043 (vypočteno pro C37H47CIN2O8, - 2,2 mmu chyba);
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data viz tabulka 7.
Kryptofycin-171:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (2,0/0,7), 412/414 (1/4), 280/282 (14/4), 255 (19), 195/197 (50/17);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3006 (vypočteno pro ·· ··
257 • · • · ·· ·· · • · · • · · ·
C37H47C1N2O8, 1,5 nmu chyba);
1H NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofyciny-173 a 114:
Kryptofycin-171 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím chromatografíe HPLC s obrácenými fázemi pro získání kryptofycinů-173 a -174.
Kryptofycin-173:
EIMS m/z (relativní intensita) 704/706 (1,3/0,4), 412/414
(5,1/1,9), 277 (6,3), 141 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z C39H45C1N2O8, 2,7 mmu chyba); 3H NMR data, viz tabulka 6; 13C NMR data, viz tabulka 7. Kryptofycin-174: XH NMR data, viz tabulka 6; 13C NMR data, viz tabulka 7. 704,2838 (vypočteno pro
Kryptofyciny-177 a 178: Kryptofycin-166 byl zpracován m-CPBA a produkty byly
izolovány použitím chromatografíe HPLC s obrácenými fázemi
pro získání kryptofycinů-177 a -178.
Kryptofycin-177:
EIMS m/z (relativní intensita) 668(2,7), 412/414 (9/3),
280/282 (11/4), 241 (16), 195/197 (45/17), 105 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 668,2835 (vypočteno pro C36H45C1N2O8, 2,9 mmu chyba);
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofycin-178:
·· ·· • · · * • · · « ··· ·»· • · ·· ·· • » · · · • » · · • · · · ·· »♦ ··
- 258 • fc · • · · • » · · • a ··· • · · ♦ · ·
EIMS m/z (relativní intensita) 668/670 (4/1,4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/4), 241 (241, 195/197 (59/18), 105 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 668,2836 (vypočteno pro C36H45CIN2O8, 2,9 mmu chyba);
1H NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofyciny-179 a 180:
Kryptofycin-161 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím stejného postupu jako bylo popsáno výše pro epoxidaci kryptofycinu-151, pro získání kryptofycinů-179 a -180.
Kryptofycin-17 9:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (25/131, 412/414 (100/43), 280/282 (100/50), 255 (100), 211 (100), 195/197 (100/100), 121 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,2992 (vypočteno pro C37H47CIN2O8, 2,9 mmu chyba);
1H NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofycin-180:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (4/31, 412/414 (14/7), 280/282 (16/11), 255 (101, 195/197 (58/21), 119 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3021 (vypočteno pro
C37H47CIN2O8, 0 mmu chyba) ;
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofyciny-182 a 183:
- 259 * ···· · ··· • ·· · · · ···· • · · · · · · • * · 9 9 * ·
Kryptofycin-181 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím chromatografie HPLC s obrácenými fázemi pro získání kryptofycinů-182 a -183.
Kryptofycin-182:
EIMS m/z (relativní intensita) 672 (1), 412/414 (11/4),
280/282 (10/4), 245 (12), 195/197 (40/12), 109 (77);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 672,2590 (vypočteno pro C35H42CIFN2O8, 2,3 mmu chyba);
1H NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofycin-183:
EIMS m/z (relativní intensita) 672/674 (5/2), 412/414 (32/12), 280/282 (13/4), 245 (29), 195/197 (92/30), 109 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 672,2620 (vypočteno pro C35H42CIFN2O8, - 0,7 mmu chyba);
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofyciny-200:
Kryptofycin-188 byl zpracován m-CPBA a produkty izolovány použitím stejného obecného postupu, s tou výjimkou, že další množství perkyseliny (3 ekvivalenty) byly přidány po uplynutí 12 hodin a míchání pokračovalo po dobu 36 hodin pro získání kryptofycinu-200 a SS-epoxidu.
Kryptofycin-200:
EIMS m/z (relativní intensita) 690/692 (42/16), 412/414 (7/1), 263 (19), 195/197 (27);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 690,2494 (vypočteno pro
C35H41CIF2N2O8, 2,6 mmu chyba);
XH NMR data, viz tabulka 6;
13C NMR data, viz tabulka 7.
Kryptofycin-242:
Kryptofycin-236 byl zpracován m-CPBA a produkty byly izolovány použitím stejné obecné procedury pro získání kryptofycinu-242 a jeho SS-epoxidu. Kryptofycin-242 byl čištěn chromatografií HPLC s normálními fázemi (Econosil Si,
250 x 10 mm, 10 μ, EtOAc ; Hexany, 1:1, 3 ml/minutu, tR : 81 minut) .
Kryptofycin-242:
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,73 (2, d; 15,4),
6,64 (3, ddd; 15,4, 10,2 a 5,0), 2,42 (4, m) , 2,57 (4, m) ,
5,14 (5, m), 1,79 (6, m) , 1,12 (6-Me, d; 6,7), 2,93 (7, dd;
8,4 a 1,6), 3,69 (8, d; 1,6), 7,26a (2’/6’, d; 8,2), 7,22a (3'/5’, d; 8,2), 4,28 (4'-CH2NH-t-Boc, d; 5,9), 4,96 (4'-CH2NH-t-Boc, brs ), 1,44 (41 -CH2NH-t-Boc, s) ; B 4,66 (2,___
m), 5,66 (2-NH, d; 7,8), 2,92 (3, dd; -14.5 a 7,2), 3,14 (3, dd; -14,5 a 5,0), 7,21 (5, d; 2,0), 3,85 (7-OMe, s), 6,88 (8, d; 8,5), 7,09 (9, dd; 8,5 a 2,0); C 2,6B (2, m) , 1,17
(2-Me, d; 7,4), 3,33 (3, m) , 3,39 (3, m) , 6,95 (3-NH, br t ;
6,1) ; D 4,85 (2, dd; 10,0 a 3,3) , 1,37 (3, m) , 1, 67 - 1,73
(3/4, m) , 0,84 (4-Me, d; 6,7) , 0,86 (5, d; 6,7);
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,7 (1),
125,4 (2), 141,7 (3), 37,2 (4), 76,6 (5), 40,9 (6), 13,7 (6Me), 63,4 (7), 59,0 (8), 136,4 (1'), 126,2b (2'/6'), 127,9b (3’/5’), 140,2 (4·), 44,5 ( (4 ' -CH2NH-t-Boc), 28,5 ((4'-CH2NHt-Boc) ; B 171,2 (1), 54,6 (2), 35,5 (3), 130,5 (4), 131,2 (5), 122,5 (6), 154,4 (7), 56, 5 (7-OCH3) , 112,7 (8), 128,8 (9); C * (1), 38,6 (2), 14,4 (2-Me), 41,1 (3); D 171,2 (1), ·· ·
- 261 - • • • • · · · • · · • « · • > · · • · · · · « · · 4 · ·····* · · · ··· • · « · · • · · · · · ·
71,6 (2), 39, 9 (3), 24,9 (4), 23,1 (4-Me), 21,4 (5) . a a b
signály s identickými horními indexy j sou vzáj emně
zaměnitelné.
Kryptofycin-269:
Kryptofycin-243 (6 mg) v acetonu (1,2 ml) byl zpracován
pevným K2CO3 za intenzivního míchání v reakční nádobce při teplotě okolí. Po uplynutí 12 hodin byla reakční směs filtrována a rozpouštědlo odpařeno. Residuum bylo čištěno na krátké koloně oxidu křemičitého použitím směsí CH2CI2 a EtOAc pro získání kryptofycinu-269 (5,1 mg).
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,70 (2, d; 15,4), 6,67 (3, m), 2,42 (4, dt; 14,4 a 10,4), 2,53 (4, m) , 5,11 5,19 (5, m) , 1,63 - 1,83 (6, m) , 1,14 (6-Me, d; 6,8), 2,92 (7, d; 7,6), 3,69 (8, br s), 7,37a (2'/6', d; 7,9), 7,24a (3'/5', d; 7,9), 4,71 (4'-CH2OH, s) ; B 4,74 - 4,85 (2, m) , 5,76 (2-NH, d; 8,3), 2,98 (3, dd; -14,5 a 7,7), 3,13 (3, dd; -14,5 a 5,3), 7,20 (5, br s), 3,85 (7-OMe, s), 6,82 (8, d;
8.3) , 1,05 (9, br d; 8,3); C 2,68 (2, m) , 1,14 (2-Me, d;
7.3) , 3,32 (3, m), 3,45 (3, m), 6,98 (3-NH, br m); D 4,14 4,85 (2, m) , 1,35 (3, m) , 1, 63 - 1,83 (3/4, m) , 0,85 (4-Me, d; 6,1), 0,87 (5, d; 6,1).
a signály se stejnými horními indexy jsou vzájemně zaměnitelné.
Tabulka 6.
XH NMR data pro Kryptofyciny-1, -157, -158, -158f -169f 170, -173, -174, -177, -178, -179, -180, -182, -183 a 200.
• ·
- 262
Λ · fe fe • · · · · · • · · fefe · fe · · fe fefe ··· ····· « · · · · · · • · · · · · ·
P = poloha
P 1 157 158 168 169 170 173 174 177 178 179 180 182 183 200
A2 5.74 <1 5.72 5.82 5.73 5.82 5.75 5.73 $.83 5.76 5.82 5.74 5.82 5.76 5.81 5.75
3 6.68 6.70 6.72 6.67 6.70 6.68 6.68 6.72 6.69 6.70 6.66 6.71 6.69 6.70 6.67
ddd
4« 2.45 2.56 2.72 2.45 2.67 2.49 2.46 2.70 2-51 2.58 2.4$ 157 2.55 257 2.42
Ul m m m m m
4.5' 255 2.63 2.62 2.54 2.56 2.54 2.59 2.60 2.54 2.69 254 2.69 2.56 2.68 253
fardd m m m m m
5 5.16 5.24 521 5.15 5.14 5.17 5.18 5.17 5.18 5.15 5.14 5.13 5.17 5.15 5.14
ddd m m m
6 1.80 2.04 1.93 1.78 1.78 U6 1.85 1.83 2.87 1.77 1.76 1.7$ 1.82 1.79 1.81
m m
6-Me 1.14 d 120 120 1.14 I.OS 1.14 1.18 1.08 1.14 1.IO 1.14 vu 1.14 1.08 1.11
7 2.92J 4 2.99 2.92 2.W 2.87 2.86 3.03 3.01 2.87 2.80 2.92 2.89 2.90 2.87 2.85
8 3.69 d 4.41 4.26 3.66 158 3.85 3.85 3.77 3.88 3.74 3.61 3.53 4.01 3.88 Λ.6Α
10
sno- 7.77 7.75
Ατ-Γ brs br s
2' 7.25 7.41 7.42 6.77 6.76 2.38 2.42 2.40 6.85 6.86 6.77
m d br d brs brs s λ k br* br s m
3' 7.34 7.46 7.47 3.81 3.81 6.99 7.29 7.30 7.11 7.15 2.31 2.31 7.05 7.03
1(8 t dd s s br* dd d to to 2! 10 to
4' 7.39 7.82 7.82 6.87 6.85 2.30 7.82 7.83 7.24 7.22 6.96 6.9$ 7.33 7.31 6.77
m d brd bíd d s d lo m m br s br * m rn m
5’ 7.91 7.91 727 7.26 7.00 7.84 7.83 - - 2.31 2.31 - -
d d 1 I 9 d m X «
6' 7A5 753 7.53 6.85 6.85 7.00 7.50 7.46 - 685 6.86 - - 6.77
m td ddd d d » m 10 br s bri m
T 7.57 757 7.50 7.52
Id ddd m m
r 8.08 8Ό7 7.84 7.83
d d d tn
D 2 4.13 4.81 4.91 4.82 4.91 4.83 4.81 4.92 4.84 4.90 4.82 4.92 4.84 4.91 4.84
dd
3 1.36 1.34 1.48 1.36 1.50 1.36 1.31 1 49 1.39 150 1.33 1.51 1.39 1.56 1.36
T 1.70 1.68 1.71 1.70 1.74 1.70 1.66 1.72 1.73 1.68 1.71 1.75 1.72 1.76 1.67
m 10
4 1.70 1.63 1.71 1.70 1.74 1.70 1.64 1.72 1.73 1.68 I 71 1.7.5 1.72 1.76 1.80
m m
4-Me 0.86 d 0.78 0.87 0.87 0.91 0.85 0.79 0.87 0.86 0.91 0.85 0.92 0.87 0.92 0.89
5 0.85 d 0.74 0.85 0.85 ¢.89 0.84 0.7$ 0.87 0.85 0.89 0.84 0.89 0.85 0.90 0.87
Spektra zaznamenávána v CDCI3; Chemické posuny proton nebo methylové nebo methoxylové funkční polohou na uhlíku indikovanou v tabulce. Chemické protony v jednotkách B a C jsou v intervalu ± kopulační konstanty jsou v intervalu ± 0,5 jsou pro skupiny s posuny pro 0,2 ppm a Hz hodnot • ·
263 • · ® · · · · -a ··· · · · · · ·· · • · « · · ···· · ··· ··· # · · * · · · •« · · · · ♦ «· uvedených pro kryptofycin-1. J (H,H) v Hz pro 157: 2',3' = 3',4' = 1,7; (H,H) v Hz pro 168: 4',5' = 5',6' = 8,0; J (H,H) v Hz pro 173: 3',4' = 8,5; l',3' = 1,4; 5',6' = 7',8' = 8,3; Pozorovatelné kopulace protonů arylových segmentů kryptofycinů 158, 169 a 174 jsou v intervalu ± 0,5 Hz hodnot pro 157, 168 respektive 173. Pozorovatelné kopulační konstanty pro zbývající protony v tabulce jsou v intervalu ± 0,5 Hz hodnot kryptofycinu-1.
Tabulka 7 13C NMR data pro Kryptofyciny-157, -158, -168, - 169, -170, 173, -174, -171, -178, -179, -180, -182, -183 a 200.
• ·
- 264
P = poloha
P 157 158 ιββ 16» 170 173 174 177 178 179 íao 182 183 200
A 16S. 165 165 165 165 165 165 165 165 165. 165 165 165. 165
1 3 .5 .3 .5 .3 .3 .4 .4 .5 3 .5 .3 4 .3
2 125. 125 12S 125 125 125 125 125 125 125. 125 125 125. 125
3 .2 .3 .2 .3 .3 .3 .3 .3 2 .2 .2 3 .4
3 141. 141 141 141 141 141 141 141 141 141. 141 141 141. 140
0 .4 .0 .4 .0 .0 .4 .1 .4 2 .5 .2 3 .e
1 36. £ 36. 36. 36. 36. 36. 36. 36. 36. 36.8 36. 36. 36.7 36.
β 7 7 6 8 β 5 8 7 7 7
5 76.1 * 76. • 76. 76. * 76. 8 76.2 » 76. 76.8 75.
1 0 2 0 2 9
6 40.1 41. 40. 41. 40. 40. 41. 40. 41. 40.8 41. 40. 40.9 40.
0 6 0 3 7 0 2 0 0 5 2
6- 13.1 13. 13. 13. 13. 13. 13. 13. 13. 13.7 13. 13. 13.3 13.
H· 8 6 5 3 6 5 1 8 6 7 3
7 62.6 62. 63. 63. 62. 63. 64. 62. 62. 62.9 63. 62. 62.6 63.
7 0 1 4 2 3 4 7 1 5 3
B 56.3 54. 58. 56. 56. 59. 56. 56. 54. 59.2 56. 53. 51.1 57.
7 9 3 3 3 5 2 5 4 4 6
8/ 132. 133 138 138 137 125 124 134 135 136. 137 124 « 8 141
10 6 .0 .4 .8 .8 .3 .9 .9 .3 6 .0 .3 .1
Ac 1' m
2 · 122. 122 110 110 135 133 133 135 135 123. 123 161 8 8 108
4 .4» .9 .5 .8 .5 .3 .9 .6 4 . 1 .2 . 4
d
3' 125. 125 160 160 131 122 122 130 129 138. 138 115 115. 163
5 .5 .0 .0 .0 .6 .7 .2 .9 4 .3 .3 2 .4
dd
4* 126. 128 114 111 131 128 128 128 128 130. 128 129 12». 103
5 .3 .0 4.0 .8 .7 .5 .0 .8 3 .4 .7 5 .9
5' 129. 128 129 129 124 L27 127 124 124 138. 138 124 129. 163
0 .9 .Β .7 .3 .8 .7» .2 .0 4 .3 .5 5 .4
dd
6' 126. 126 118 117 127 126 126 126 126 123. 123 126 124. 1OÍ-
0 .0 .0 .9 .0 .3* • 2b .4 .3 4 .1 .1 4 .4
7· 126. 126 126 126
6 .5 .6* .5b
8* 122. 122 127 127
3 .3» .8 .8*
9' 131. 131 133 133
4 .2 .2 .2
10 133. 133 134 134
• 4 .3 .2 .5
D 170. 170 170 170 170 170 170 170 170 170. 171 170 170. 170
1 7 .8 .7 .9 .7 .8 .9 .7 .9 β .9 .7 β .7
2 71.4 71. 71. 71. 71. 71. 71. 71. 71. 71.3 71. 71.5 71.
5 3 5 3 3 5 4 5 5 3
3 39.4 39. 39. 39. 39. 39. 39. 39. 39. 39.4 39. 39. 39.3 39.
3 4 3 4 4 3 5 3 3 4 5
4 24.5 24. 24. 24. 24. 24. 24. 24. 24. 24.5 24. 24. 24.7 24.
6 5 7 5 5 7 6 7 7 6 6
4- 22.B 23. 21. 21. 21. 21. 21. 21. 21. 21.2 21. 21. 21.4 21.
Ke 0 3 4 3 2 4 4 4 4 3 3
5 21.3 21. 22. 23. 22. 22. 23. 22. 23. 22.9 23. 22. 23.1 22.
3 » 1 8 8 0 9 1 1 9 9
Spektra zaznamenávána v CDC13, Chemické posuny pro uhlíky v • ·00
265 jednotkách B a C jsou v intervalu ± 0,5 ppm hodnot v kryptofycin-1.
*Signál skryt pod CDC13 signálem.
** Signály nemohly být nalezeny.
+, a a b signály se stejnými horními indexy v sloupci jsou vzájemně zaměnitelné.
3'-OCH3 signál jak u 168, tak i u 169 byl pozorován při d 55,3. 2' a 4'-CH3 uhlíkové signály u 170 byly pozorovány při d 18,9 respektive 21,0. 2'-CH3 uhlík 177 a 178 rezonoval při d 19,0 respektive 18,9. 3' a 5'-CH3 signály u 179 byly pozorovány při d 21,3 a u 180 byly pozorován při 21,2.
Příklad 93 Chlorhydrinové analogy
Kryptofyciny-163, 184, 185, 186, 187, 191, 192, 193, 194,
195, 212, 216, 217, 222, 223, 224, 243, 252, 253, 263, 264, 265, 212 a 273.
·· ·
- 266
Tabulka 8.
„CÍTMSCi. 10 ekvivJ 2 hod.
'“OCH, CDCIZ-eOO
RR -epoxid
OH * 04 ΧOM cis Isomer
ΟΗ trans isomer
80-85 % kombinovaný výtěžek
epoxid kryptofydn č. Ar chlorhydrin č. Stereochemie pomér trans/cis
157 191 192 trans ciď X.l : 1
168 •“tr·* 195 trans cis 1 : < 0.1
170 216 217 trans cis 1 : 2.6
179 χτ CH, 222 trans cis < 0.1 : 1
172 CO* 193 194 trans cis 1 ; 2
181 oí 223 trans cis 1 : <
0.1
200 v F 212 trans cis 1 : < 0.1
* * 18« trans
« * □o 224 186 trans cis 1 : 2
* * * 243 trans cis 1 : < 0.1
* Kryptofycin-200 podstoupil za těchto podmínek pouze 30% přeměnu.
** Směs RR epoxidů 3,4 - a 2,3 -dimethylfenylových analogů.
*** Směs RR a SS epoxidů.
• ···
267 • · · · · · · ···· · ··· ··· ······ · · • · ·« ·· · ·· ·· * Kryptofycin-200 podstoupil za těchto podmínek pouze 30% přeměnu.
** Směs RR epoxidů 3,4 - a 2,3 -dimethylfenylových analogů. *** Směs RR a SS epoxidů.
Kryptofycin-163:
Do roztoku kryptofycinu-81 (12 mg, 0,018 mmolů) v CH2CI2 (1,5 ml) při teplotě 0 °C byla přidána m-CPBA (5 mg, 0,029 mmolů) následována HCI v kyselině octové (1,0 M roztok, 25 μΐ) a teplota byla ponechána stoupnou na teplotu zpětného toku a míchání pokračovalo po 6 hodin. Odpaření rozpouštědla následované mžikovou ehromatografií residua na C18 koloně oxidu křemičitého (12 cm x 1 cm) použitím H2O a CH3CN směsí dalo směs chlorhydrinů (12 mg, 93%). Pokus o čištění ehromatografií HPLC s obrácenými fázemi vedl k částečné hydrolýze na dioly. Čištění ehromatografií HPLC s normálními fázemi (Econosil, oxid křemičitý, 250 mm x 10 mm, 1:1 EtOAc/hexan) však dalo kryptofycin-163 (tR 37,2 minut, 3,0 mg). Protonová a uhlíková NMR data byla podána v tabulkách 9 respektive 10.
Kryptofyciny-184, -185, -186, 187 a 224:
Směs 3,4-dimethylbenzyltrifenylfosfoniumchloridu a 2,3dimethylbenzyltrifenylfosfoniumchloridu (1:3) byla konvertována na 3,4- a 2,3-dimethylbenzyltrifenylfosforany a potom zpracována kryptofycinem-108 použitím stejného postupu, jaký byl popsán výše pro přípravu kryptofycinu-152. Neseparovatelná směs čtyř styrenových isomerů byla získána s 68% celkovým výtěžkem. Směs (45 mg) v CH2C12 (3 ml) byla zpracována pomocí m-CPBA (25 mg) při teplotě zpětného toku a udržována za míchání po dobu 15 hodin. Rozpouštědlo bylo
268 • · · · · · • · · · · ·· ·· odstraněno a residuum bylo vystaveno HPLC (Econosil C-18, 250 x 22 mm 7:3 H2O/CH3CN, 6 ml/min) a byly shromážděny dvě frakce I (tR 54,0 minut, 20 mg) a II (tR 61,5 minut, 12 mg). Frakce I (9 mg) v CH2C12 (2,0 ml) byla zpracována TMSC1 (40 μΐ) při teplotě -78 °C a teplota byla ponechána postupně vzrůst na teplotu okolí. Po uplynutí 3 hodin bylo odpařeno rozpouštědlo a následovala chromatografie HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 10 m, 250 x 22 mm, 35:65 H2O/CH3CN, 6 ml/min), která dala kryptofycin-186 (tR 57,8 minut, 4,7 mg), kryptofycin-224 (tR 74,5 minut, 2,3 mg) a kryptofycin-184 (tR 78,2 minut, 2,0 mg). Použitím téže procedury byla frakce II zpracována TMSC1 a sloučeniny byly odděleny pro získání kryptofycinu-185 (tR 65,0 minut, 0,7 mg) a kryptofycinu-187 (tR 69,2 minut, B,0 mg).
Kryptofycin-184:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (1,1/0,4), 236 (10),
195 (9), 135 (100), 119 (83);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,2999 (M+ - HCI, vypočteno pro C37H4-7C1N2O8 2,2 mmu chyba);
Protonová a uhlíková data jsou podána v tabulkách 9 respektive 10.
Kryptofylin-185: EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (6/2), 412/414 (14/5), 280/282 (14/5), 255 (10), 195/197 (50/16), 119 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3015 (M+ - HCI, vypočteno pro Ο3-7Η47Ο1Ν2Ο8, 0,6 mmu chyba);
Protonová a uhlíková data byla podána v tabulkách 9 respektive 10.
Kryptofycin-186: EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (1,3/0,6), 412/414 (2,5/0,8), 254 (7), 195 (11), 119 (100); EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3015 (M+ - HCI, vypočteno
- 269 pro C37H47CIN2O8, 0,6 mmu chyba);
Protonová a uhlíková data byla podána v tabulkách 9 respektive 10.
Kryptofycin-187: EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (0, 9/0,2), 412/414 (3/1), 255 (3), 254 (7), 195 (11), 135 (100), 119 (94);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3044 (M+ - HCI, vypočteno pro C37H47CIN2O8, -2,3 mmu chyba);
Protonová a uhlíková data byla podána v tabulkách 9 respektive 10.
Kryptofycin-224:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (3/1), 412/414 (3/1), 255 (4), 254 (9), 195/197 (28/6), 119 (100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,3064 (M' - HCI, vypočteno pro C37H41CIN2O8, - 4,3 mmu chyba);
Protonová a uhlíková data byla podána v tabulkách 9 respektive 10.
Kryptófyčiňy-191, 192, -193, -194, -195, -212, -216, -217, 222 a -223:
Obecná procedura pro přípravu chlorhydrinů: Roztok RRepoxidu v chlorformu byl ochlazen na teplotu - 60 °C a zpracován přebytkem trimethylsilylchloridu (10 ekvivalentů). Po uplynutí 2 hodin bylo rozpouštědlo odpařeno a residuum bylo čištěno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 10μ, 35% H2O/CH3CN, 3 ml/min) pro získání trans a cis chlorhydrinů.
Experimentální detaily přípravy kryptofycinů-191, 192, -193,
-194, -195, -212, -216, -217, - 222, -223 a 224 a cytotoxicita jsou uvedeny v tabulce 8.
• · ·
270
Kryptofycin-195:
EIMS m/z (relativní intensita) 684/686 (3/2), 412/414 (12/4), 257 (11), 195/197 (46/15);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 684,2784 (M+-HC1, vypočteno pro C36H45CIN2O9, δ 3,0 mmu);
1H NMR data, viz tabulka 9;
13C NMR data, viz tabulka 10 .
Kryptofycin-212:
EIMS m/z (relativní intensita) ;
EIMS s vysokým rozlišením m/z (M+-HC1, vypočteno pro C35H41CIF2N2O8, δ mmu) ;
1H NMR data, viz tabulka 9;
13C NMR data, viz tabulka 10.
Kryptofycin-216:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (6/3), 412/414 (6/2),_
255 (4), 195/197 (21/7);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,2990 (M+-HC1, vypočteno pro C37H47C1N2O8, δ 3,1 mmu);
XH NMR (CDC13) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,79 (2, d; 15,4),
6,70 (3, ddd; 15,4, 9,5 a 5,4), 2,36 (4, m), 2,67 (4, br dd;
14,9 a 4,9), 5,01 (5, m), 2,52 (6, m), 1,07 (6-Me, d; 7,1),
4,07 (7, br d; 9,8), 5,01 (8, d; 9,8), 2,36 (2'-CHJ, s) ,
7,01 (2' , br s), 2,31 (4'-CH3, s) , 7,06 (5', br d; 8,1),
7,32 (6', d; 8,1); Β 4.B1 (2, m) , 5,71 (2-NH, d; 8,5), 3,02 (3, dd; - 14,4 a 7,4), 3,16 13, dd; -14,4 a 5,6), 7,23 (5, d; 2,01, 3,88 (7-OMe, s), 6,85 (8, d; 8,3), 7,09 (9, dd; 8,3 a 2,0); C 2,74 (2, m) , 1,23 (2-Me, d; 7,1), 3,25 (3, m) ,
3.53 (3, m) , 6,93 (3-NH, br m); D 4,93 (2, dd; 10,2 a 3,2), 1,49 (3, m), 1,68 - 1,85 (3/4, m) , 0,95 (4-Me, d; 6,4), 0,96 (5, d; 6,4).
Kryptofycin-217:
EIMS m/z (relativní intensita) 682/684 (3/1), 412/414 (6/1),
255 (5), 195/197 (23/7);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 682,2920 (M+-HC1, vypočteno pro C37H47CIN2O8, δ 10,1 umu);
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,72 (2, d; 15,4),
6,66 (3, ddd; 15,4, 9,7 a 5,4), 2,17 (4, dt; 13,9 a 10,9),
2.53 (4, br dd; 13,9 a 5,0), 5,08 (5, m), 1,61 (6, m) , 0,88 (6-Me, d; 6,8), 4,28 (7, br d; 9,6), 5,13 (8, d; 9,6), 2,3B (2'-CH3, s), 7,03 (2’, br s), 2,32 (4'-CH3, s) , 7,03 (5', brd; 3,03 (3, dd; -14,4 a 7,2), 3,14 (3, dd; -14,4 a 5,6),
7,21 (5, d; 1,6), 3,87 (7-OMe, s) , 6,83 (8, d; B,3), 7,OB (9, dd; 8,3 a 1,7); C 2,74 (2, m) , 1,24 (2-Me, d; 7,1), 3,29 (3, m), 3,50 (3, m), 6,96 (3-NH, br m); D 4,89 (2, dd; 9,8 a 3,4), 1,52 (3, m), 1.B7 (3, m), 1,72 (4, m), 0,94 (4-Me,
Kryptofycin-222:
EIMS m/z (relativní intensita) 718/720 (0,4/0,2), 682/684 (13/7), 412/414 (15/5), 280/282 (16/5), 255 (12), 195/197 (59/19), 119 }100);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 718,2167 (vypočteno pro C37H48CI2N2O8, δ 2,1 mmu).
XH NMR data, viz tabulka 9;
13C NMR data, viz tabulka 10.
Kryptofycin-223:
272 > 00 0 0
0 0 0 • · «
0 1
EIMS m/z (relativní intensita) 672/674 (1/0,8), 412/414 (3/1), 195/197 (15/3), 149 (100), 109 (35);
EIMS s vysokým rozlišením m/z 708,2373 (vypočteno pro C35H43FCI2N2O8, δ 0,7 mmu) .
1H NMR data, viz tabulka 9;
13C NMR data, viz tabulka 10.
Kryptofyciny-243:
Epoxidace kryptofycinu-238:
Kryptofycin-238 (11,8 mg) byl rozpuštěn v dichlormethanu (1,5 ml) a zpracován MCPBA (9,6 mg). Po uplynutí 15 hodin byla reakční směs zředěna dichlormethanem (3 ml) a promývána 0,1 M fosforečnanovým pufrem s pH 8 (3 ml). Organic vrstva byla zpracována dimethylsulfidem (10 μΐ) a bylo opakováno promývání pufrem. Organická vrstva byla odpařena a residuum (12 mg) bylo neúspěšně čištěno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 25 cm x 22 mm, 10 μ, 35%
H2O/CH3CN, 6_ntL/min) a tím se získala směs RR a -SS—epoxidů 16,2 mg).
Zpracování pomocí TMSC1:
Směs byla rozpuštěna v chlorformu (1 ml) a zpracována TMSC1 (15 μΐ) při teplotě -60 °C. Po uplynutí 2 hodin bylo rozpouštědlo odpařeno a residuum (7 mg) bylo vystaveno HPLC s normálními fázemi (Econosil Si, 25 cm x 10 mm, 10 μ, 85% EtOAc/hexan, 4 ml/min). Frakce získané po 30 minutách byla dále čištěna chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 25 cm x 10 mm, 10 μ, 45% H2O/CH3CN, 3 ml/min) pro získání kryptofycinu-243 (2,4 mg).
- 273
9*
9 9 9 9
999 9 999
999 99999
99 99 9
9 9
9 9
999 999
9
99
Kryptofycin-243:
XH NMR (CDC13) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,76 (2, d; 15,0),
6,67 (3, ddd; 15,0, 9,6 a 5,4), 2,35 (4, dt; 14,4 a 10,4), 2,64 (4, br dd; 14,4 a 5,1), 5,07 (5, m), 2,50 (6, m) , 1,04 16-Me, d; 6,8), 4,02 (7, br d; 9,8), 4,68 (8, d; 9,8), 7,39 (2 '/3 '/5 '/6', br s) , 4,70 (4'-CH2OH, brs) ; B 4,74 (2, m) ,
5,72 (2-NH, d; 7,8), 2,99 (3, dd; -14,4 a 7,3), 3,14 (3, dd; -14,4 a 5,61, 7,22 (5, d; 2,01, 3,8B (7-OMe, s) , 6,84 (8, d; 8,41, 7,08 (9, dd; 8,4 a 2,0); C 2,73 (2, m), 1,21 (2-Me, d;
7,1), 3,23 (3, dt; 13,7 a 1,1), 3,50 (3, dt; 13,7 a 4,5), 6,93 (3-NH, br dd; 7,1 a 4,5); D 4,91 (2, dd; 10,0 a 3,4), 1,47 (3, m), 1, 64 - 1, 84 (3/4, m) , 0,94 (4-Me, d; 6,4), 0,95 (5, d; 6,3);
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A, 165,6 (1),
125,0 (2), 141,9 (3), 36,3 (4), 76,4 (5), 38,3 (6), 8,7 (6Me), 74,0 (7), 62,0 (8), 137,7 (I1), 127,4a (2'/6'), 128,2a (3'/5'), 142,2 (4'), 64,6 (4'-CH2OH); B 171, lb (1), 53, 6 (2K35, 1 (3), 129, 9 (4), 131, 0 (5), 122,4 (6), 154,0 (7), 56,2 (7-OCH3), 112,3 (8), 128,4 (9); C 175,4 (1), 38,5 (2), 14,1 (2-Me), 41,2 (3); D 170,5b (1), 71,4 (2), 39,7 (3), 24,8 (4), 23,2 (4-Me), 21,6 (5).
a a b signály se stejnými horními indexy jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofyciny-252 a 253:
Epoxidace kryptofycinu-247:
Kryptofycin-247 (12 mg) byl rozpuštěn v dichlormethanu (1 ml) a zpracován MCPBA (9,8 mg). Po uplynutí 15 hodin byla reakční směs zředěna dichlormethanem (3 ml) a promývána 0,1 M fosforečnanovým pufrem s pH 8 (3 ml). Organická vrstva ·· ·
- 274 byla oddělena a promývání pufrem se opakovalo po přidání dimethylsulfidu (15 ml). Organická vrstva byla odpařena a residuum (11,5 mg) bylo čištěno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 25 cm x 10 mm, 10 μ, 35%
Η2Ο/ΟΗ3ΟΝ, 3 ml/min) a tím se získal majoritní RR-epoxid (5 mg) a minoritní SS-epoxid (3 mg).
RR-epoxid:
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,74 (2, d; 15,6),
6,67 (3, ddd; 15,6, 9,5 a 5,6), 2,44 (4, dt; 14,7 a 10,5),
2,50 - 2,58 (4, m) , 5,15 (5, m) , 1,62 - 1,81 (6, m) , 1,12
(6-Me, d; 6, 8) , 2,91 (7, dd; 7,3 a 1,5), 3,66 (8, d; 1,5),
7,38 (2', br s) , 6,54 (3' -NH, s), 1,51 (3'-NH-t -Boc) , 7 ,21 -
7,30 (4'/5’, m) , 6,91 (6 ', br d; 6,8); B 4,79 (2, m), 5, 69
(2-NH, d; 8, 5) , 3,00 (3, dd; 14,5 a 7,3) , 3,13 (3, dd; 14,5
a 5,51, 7,20 (5, d; 2,0), 3,86 (7-OMe, s), 6,83 (8, d; 8,3) ,
7,06 (9, dd; 8,3 a 2,0); C 2,70 (2, m), 1,22 (2 -Me, d; 7,1),
3,30 (3, m) , 3, 46 (3, mj 1, 6,97 (3-NH, m) ; D 4,83 (2 , dd;
10,0 a 3,4), 1,36 (3, m), 1,62 - 1,81 (3/4, m), 0,85 (4-Me, d; 5,9) , 0,87 (5, d; 5,6) .
Deprotekce amino skupiny a příprava chlorhydrinů:
Roztok RR-epoxidu (8,0 mg) v dichlormethaňu (100 μΐ) byl zpracován kyselinou chlorovodíkovou (50 μΐ, 4N v dioxanu). Po uplynutí 30 minut bylo rozpouštědlo odpařeni a residuum bylo čištěno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 25 cm x 10 mm, 10 μ, 40% H2O/CH3CN, 3,5 ml/min) pro získání kryptofycinu-252 (5 mg, tR minut) a kryptofycinu-253 (2 mg, tR minut).
·· ·*
275
Data o cytotoxicitě Kryptofycinu-252: Buněčné linie (násobek síly kryptofycinu-1)
KB (1,20) a LoVo (1,25)
Kryptofycin-252:
EIMS m/z (relativní intensita) 610/672 (7,2/2,2) , 669/671 (19,2/7,8), 280/282 (6,8/2,4), 242 (4,7), 195/197 (43/12); EIMS s vysokým rozlišením m/z 669,2856 (M+ -2HC1-H) vypočteno pro C35H44lN3O8, -3,9 mmu chyba);
XH NMR (MeOH) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ
(uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5, 93 (2, d; 15,1),
6,61- 6,78 (3, m), 2,33 (4, dt; 14,7 a 9,8) , 2,69 - 2,80 (4,
m), 5,11 (5, m), 2,46 (6, m) , 0,95 - 1,04 (6-Me, m) , 3,99
(7, brd; 9,4), 4,62 (8, d; 9,4), 7,28 (2', br s) , 7,17 (4 ' ,
brd; 8,1), 7,07 (5', t; 8,1), 6,98 (6' , d; 8,1); B 4,50 (2,
dd; 10,5 a 3,2), 2,69 - 2,80 (3, m) , 3,18 (3, brd; 13,7),
6,61 - 6,78 (5, 8 a 9, m) , 3,8 6 (7-OMe, s) ; C 2,69 - 2,80
(2, m), 1,19 (2-Me, d; 7,3), 3,28 (3, brd; 13,4), 3,58 (3,
br d; 13,4); D 5,01 (2, dd; 9.e a 2,7) , 1,53 (3, m), 1,70 -
1,84 (3/4, m), 0,95 - 1, 04 (4/5-Me, m)
Kryptofycin-253:
4H NMR (MeOH) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,84 (2, dd; 15,3 a 1,6), 6, 60 - 6,74 (3, m) , 2,10 (4, dt; 14,9 a 11,2), 2,64 (4, m) , 5,05 (5, m) , 1,50 (6, m) , 0,90 (6-Me, d; 6,8), 4,01 (7, dd; 9,5 a 1,2), 4,75 (8, d; 9,5), 6,60 - 6,74 (2'/4'/6', m) , 7,09 (5', t; 7,8); B 4,48 (2, dd; 11,4 a 3,9), 2,71 (3, dd; 14,4 a 11,4), 3,16 (3, dd; 14,4 a 3.7), 7,26 (5, d;
2,2), 3,86 (7-OMe, 5), 6,96 (8, d; 8,4), 7,15 (9, dd; 8,4 a ·· ·
« · ··· • · ··
- 276
2.2) ; C 2,76 (2, m), 1,18 (2-Me, d; 7,3), 3,26 (3, m), 3,58 (3, dd; 13,5 a 3,1); D 4,94 (2, dd; 9,4 a 3,8), 1,58 (3, m), 1,80 (3, m), 1,70 (4, m) , 0,97 (4-Me, d; 6,1), 0,98 (5, d;
6.3) .
Kryptofyciny-263, 264 a 265:
Směs kryptofycinu-242 a jeho ss-epoxidu (26 mg) byla rozpuštěna v CH2C12 (5 ml) a zpracována TMSC1 (1,0 M roztok v CH2CI2, 120 μΐ) při teplotě -78 °C. Po uplynutí 3 hodin bylo rozpouštědlo odpařeno a residuum (27 mg) bylo vystaveno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (Econosil C18, 250 mm x 22 mm, 10 μ, 65:35 CH3CN/H2O, 6 ml/min) a tím se získal kryptofycin-264 (6,0 mg, tR 43 minut) a směs kryptofycinů263 a 265 (15, 8 mg, tR 59 minut). Kryptofyciny-263 a 265 byly odděleny chromatografií HPLC s normálními fázemi (Econosil, oxid křemičitý, 250 mm x 10 mm, 10 μ, 55 : 45 EtOAc/hexan, 3 ml/min) a tím se získal kryptofycin-265 (7,1 mg, 51 minut) a kryptofycin-263 (1, 8 mg_,_29,0 minut).
Data o cytotoxicitě
Kryptofycin č. cytotoxicita, násobek síly kryptofycinu-
1
KB L0V0
263 1, 67 0,56
264 0, 044 0,023
265 0,0033 0,021
Kryptofycin-263:
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ
277 e · ·· • · ·
9 999
9 9 9 • · · »
9 9 · ·· ·· • 9 · · · 9
9 9 9 9 9 9
9999 « «·* ··· • » · · · «4 9 99 99 (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,79 (2, d; 15,6),
6,68 (3, m) , 2,37 (4, m) , 2,66 (4, br dd; 14,2 a 4,2), 5,10
(5, m) , 2,49 (6, m) , 1,03 (6-Me, d; 6,81, 4,00 (7, br d;
9,41, 4,64 (8, d; 9,4), 7,35 (2'/6’, br d; 7,91, 1,29
(3’/5', brd; 7,9), 4,31 (4'-CH2NH-t-BOC, d; 4,8), 4,92
(4'-CH2NH-t-BOC, brs), 1,45 (4'-CH2NH-t-BOC, s) ; B 4. 79 12,
m), 5,76 (2-NH, d; 8,6), 3,01 (3, dd; -14,4 a 7,3), 3,15 (3, dd; -14,4 a 4,9), 7,23 (5, d; 1,3), 3,87 (7-OMe, s), 6,84 (8, d; 8,4), 7,09 (9, br d; 8,4); C 2,73 (2, m), 1,22 (2-Me, d; 7,2), 3,24 (3, m), 3,53 (3, m), 6,93 (3-NH, br t; 5,5); D 4,92 (2, dd; 9,7 a 3,1), 1,48 (3, m) , 1,78 (3, m) , 1,73 (4, m), 0,93 (4-Me, d; 6,4), 0,94 (5, d; 6,4);
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,6 (1),
125,3 (2), 141,6 (3), 36,4 (4), 76,5 (5), 38,3 (6), 8,7 (6Me), 74,1 (7), 61,8 (8), 137,5a (1'), 128,3 (2'/6'), 128,0 (3'/5'), 140,3a (4'), 44,2 (4'-CH2NH-t-BOC), 28,4 & 155,9 (4' -CH2NH-t-BOC) ; B 171, lb (1), 53, 7 (2), 35, 1 (3), 130,0 (4), 131, 1 (5), 122,4 (6), 154,0 (7), 56,2 (7-OCH3), 112,3 (8), 128,5 (9); C 175,4 (1), 38,4 (2), 14,1 (2-Me), 41,3 (3); D 170,6b (1), 71,4 (2), 39, 8 (3), 24,8 (4), 23, 2 (4Me), 21,6 (5).
a a b signály se stejnými horními indexy jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofycin-264:
*H NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,71 (2, d; 15,4), 6,63 (3, ddd; 15,4, 9,9 a 5,5), 2,12 (4, m), 2,51 (4, br dd; 14,2 a 5,0), 5,05 (5, m) , 1,47 (6, m) , 0,92 (6-Me, d; 6,8), 4,06 (7, dd; 9,6 a 1,5), 4,87 (8, d; 9,6), 7,29 (2'/6', br d; 8,4), 7,27 (3'/5', brd; 8,4), 4,33 (4'-CH2NH-t-BOC, brs) , • 9
278
1,47 (4 '-CHzNH-t-BOC, s) ; B 4,80 (2, m), 5,69 (2-NH, brs) , 3,01 (3, dd; -14,5 a 7,2), 3,13 (3, dd; - 14,5 a 5,4), 7,21 (5, d; 2,0), 3,86 (7-OMe, s), 6,83 (8, d; 8,4), 1,07 (9, dd; 84a 2,0); C 2,73 (2, m), 1,23 (2-Me, d; 7,3), 3,28 (3, m), 3,52 (3, m), 6,93 (3-NH, br t; 5,7); D 4,86 (2, m), 1,50 (3, m), 1,86 (3, m), 1,73 (4, m), 0,95 (4-Me, d; 6,6), 0,98 (5, d; 6,8);
13C NMR (CDC13) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,4 (1),
125,1 (2), 141,4 (3), 36,2 (4), 76,0 (5), 38,3 (6), 8,8 (6Me), 74,3 (7), 68,4 (8), 136, 6a (1'), 128,0 (2’/6'), 127,7 (3'/5'), 140,3a (4'), 44,2 (4'-CH2NH-t-BOC), 28,4 (4'-CH2NH-
t-BOC); B 171,0b (1), 53,6 (2), 35,0 (3), 129,9 (4), 131,0
(5), 122,4 (6), 153,9 (7), 56,1 (I-OCH3), 112,2 (8), 128,4
(9) ; C 175,4 (1), 38,5 (2), 14,1 (2-Me), 41,2 (3); 2) 170,4b
(1) , 71,4 (2), 39,8 (3) , 24,8 (4) , 23,2 (4-Me), 21,7 (5).
a a b signály se stejnými horními indexy jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofycin-265:
XH NMR (CDCI3) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,74 (2, d; 15,5),
6,68 (3, ddd; 15,5, 9,9 a 5,3), 2,36 (4, m) , 2,54 (4, br dd; 14,2 a 4,9), 5,40 (5, m), 1,87 (6, m), 1,05 (6-Me, d; 7,0), 3,71 (7, br t; 5,8), 5,07 (8, d; 5,3), 7,36 (2'/6', br d; 8,2), 7,28 (3’/5*, brd; 8,2), 4,30 (4'-CH2NH-t-BOC, brs),
4,91 (4'-CH2NH-t-BOC, brs), 1,46 (4'-CH2NH-t-BOC, s) ; B 4,78
(2, m) , 5,70 (2-NH, brs), 3,03 (3, dd; -14,5 a 7,1) , 3,12
(3, dd; -14,5 a 5,5), 7,21 (5, d; 1,81, 3,87 (7-OMe, s) ,
6,84 (8, d; 8,4), 7,07 (9, dd; 8,4 a 1,8); C 2 ,72 (2, m) ,
1,23 (2-Me, d; 7,1), 3,33 (3, m) , 3,48 (3, m) , 6,91 (3 -NH,
br t; 5,7); D 4,83 (2, dd; 9,7 a 4,31, 1,43 (3, m), 1,70 (3,
- 279 • · · · · · • ···· · ··· • 0· · · · ······ • » • · • »
m), 1,63 (4, m), 0,93 (4-Me, d; 6,4), 0,88 (5, d; 6,4);
13C NMR (CDCI3) jednotka δ (uhlíková poloha) A 165,5 (1) , 125,0 (2), 142,0 (3), 34,6 (4), 74,4 (51, 39,8 (61, 12,9 (6Me), 77,5 (7), 66, 7 (8), 137,3a ď), 127,9 (2'/6'l, 127,8 (3'/5'), 139,9a (4'), 44,2 (4'-CH2NH-t-BOC), 28,4 (4'-CH2NHt-BOC) ; B 171,0b (1), 53, 6 (2), 35, 1 (3), 129, 9 (4), 131,0 (5), 122,4 (6), 154,0 (7), 56, 1 (7-OCH3) , 112,3 (8), 128,4 (9); C 175,6 (1), 38,4 (2), 14,1 (2-Me), 41,3 (3); D
170,3b(ll, 71,5 (2), 39, 4 (3), 24,7 (4), 22,8 (4-Me), 21.6 (5) .
a a b signály se stejnými horními indexy jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofycin-272:
Kryptofycin-263 (4,9 mg, 0,006 mmolů) v CH2C12 (30 μΐ) byl zpracován 4N HCI v dioxanu (30 μί, 0,012 mmolů) při teplotě okolí. Po uplynutí 3 hodin bylo rozpouštědlo odstraněno a residuum byl uchováváno za sníženého tlaku po dobu 2 dní pro odstranění posledních stop dioxanu a tím se získal kryptofycin-272 (4,4 mg, 98%).
XH NMR (CD30D) aminová nebo hydroxykyselinová jednotka δ (uhlíková poloha, multiplicita; J v Hz) A 5,94 (2, dd; 15,0, 1,81, 6,69 (3, ddd; 15,0, 11,1 a 4,9), 2,36 (4, m), 2,72 (4,
m), 5,13 (5, m) , 2,49 (6, m), 1,01 (6-Me, d; 7 ,D, 4, 02 (7,
dd; 9,4 a 2, 0), 4,84 (8, d; 9,4), 7,45 (2' /6', d; 8,4) t 7,51
(3'/ 5', d; 8 ,4), 4,11 (4 ' -CH2NH2HC1, s) ; B 4,51 (2, dd r 11,2
a 3, 9) , 2,74 (3, m) , 3,18 (3, dd; -14,5 a 3,9) , 7,28 (5 , d;
2,2) , 3, 84 ( 7-Me, s), 6,98 (8, d; 8,4), 7 ,17 (9, dd; 8 4 a
2,3) ; C 2,72 (2, m), 1,19 (2-Me, d; 7,5), 3,29 (3, m) f 3,58
(3, dd; 13,7 a 3,3); D 5,02 (2, dd; 9,5 a 3,8) , 1,56 ( 3, m) ,
1,78 (3, m) , 1,78 (4, m) , 0,97 (4-Me, d; 6,6), , 0,99 (5 , d;
280
6, 6) ;
13C NMR (CD3OD) jednotka δ (uhlíková poloha) A 168,4 (1),
125,4 (2), 144,0 (3), 37,7 (4), 77,3 (5), 40,4 (6), 8,1 (6Me), 74,8 (7), 63,3 (8), 142,5a (1'), 130 0 (2'/6'), 130,3a (3'/5'), 134,6a (4’), 44,0 (4 ’-CH2NH2HC1) ; B 174,1 (1), 57,4 (2), 36, 3 (3), 132,2 (4), 131, 5 (5), 123, 3 (6), 155, 4 (7),
56,6 (7-OCH3), 113,5 (8), 129,3 (9); C 177,5 (1), 39, 1 (2),
15,1 (2-Me), 41,2 (3); D 172,1 (1), 72,8 (2), 41,2 (3), 26,0 (4), 22,1 (4-Me), 23,6 (5).
a signály jsou vzájemně zaměnitelné.
Kryptofyciny-273:
3-Chlorperbenzoová kyselina (128 mg) byla přidána do roztoku kryptofycinu-234 (146 mg) v CH2C12 (8 ml) při teplotě 0 °C. Roztok byl ponechán pomalu se zahřát na teplotu okolí a míchání pokračovalo po dobu 12 hodin. Reakční směs byla zředěna CH2C12 (7 ml) a promývána fosforečnanovým pufrem (2 x ml, 0,1 M, pH 8). Organická vrstva byla oddělena a_ zpracována dimethylsulfidem (50 ml) pro odstranění přebytku perkyseliny a vystavena znovu promývání pufrem. Organická vrstva byla odpařena a residuum bylo vystaveno chromatografií HPLC s obrácenými fázemi (250 mm x 22 mm, 10 μ, 15 % H2O/CH3CN, 6 ml/min) pro získání RR-epoxidu (14 mg,
50%) .
XjO
Cl
OCH, • · · · · · • ·
281 • · • · • · • ·
Roztok epoxidu (74 mg) v THF (3 ml) byl zpracován 115 μΐ 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v CH2CI2. Po uplynutí 1,5 hodin byl do reakční směsi přidán nasycený roztok NH4C1 a směs byla extrahována EtOAc (2 x 30 ml) . Organické extrakty byly sušeny nad MgSO4 a odpařeny. Residuum bylo čištěno v malé koloně oxidu křemičitého použitím 50 - 100% EtOAc/CH2Cl2 pro získání kryptofycinu-269 (62 mg, 98%).
HO.
Kryptofycin-269
Do roztoku Kryptofycinu-269 (62 mg), N-(t-BOC)glycinu (30 mg) a DMAP (8 mg) v CH2C12 (3 ml) byl přidán DCC (160 μΐ, 1M roztok v CH2C12 při teplotě 0 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě 0 C po dobu 15 minut a při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Na konci této doby byla směs filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo vystaveno mžikové ehromatografií na ODS oxidu křemičitém použitím 75 30% H2O/CH3CN pro získání N-t-BOC-glycinátového esteru kryptofycinu-269 (64,4 mg, 85 %).
• ·
282
• ·
OCH) ,Cl
Do roztoku glycinátového esteru (64,4 mg) v chlorformu (3 ml) při teplotě - 60 °C bylo přidáno 200 μί 1M roztoku TMSCI v CH2CI2. Po uplynutí 1 hodiny bylo rozpouštědlo odpařeno a residuum bylo čištěno v malé koloně oxidu křemičitého použitím 40 - 90% směsi EtOAc/hexany pro získání trans chlorhydrinů glycinátu (60 mg, 89%).
Roztok chlorhydrinů (55 mg) v dichlormethanu (0,25 ml) byl zpracován 4M roztokem chlorovodíku v 1/4-dioxanu (0,1 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 2 hodin, koncentrována za sníženého tlaku a sušena on mrazové sušičce po dobu 48 hodin. Kryptofycin-273 byl získán ve formě bílé pevné látky.
• ·
Kryptofycin-273
Tabulka 9.
XH NMR data pro Kryptof yciny-8, 163, 184, 185, 186, 187,
191, 192, 193, 194, 195, 212, 222, 223 a 224.
·· ·
- 284 • ···· · ··· • ·· · · · ····· • · · · · · · ·· · · · · ·
P = poloha
P 8 163 184 185 186 187 191 192 193 194 195 212 222 223 224
A2 5.79 d 5.80 5.79 5.74 5.71 5.75 5.80 5.68 5.80 5.67 5.79 5.80 5.71 5.80 5.79
3 6.69 6.70 6.70 6.68 6.64 6.69 6.70 6.63 6.70 6.62 6.69 6.68 .6.65 6.69 6.69
ddd
4« 2.37 2.35 2.38 2.36 2.15 2.37 2.40 2.10 2.40 2.09 2.37 2.40 2.17 2.39 2.37
m m m m m m
45 2.67 2.75 2.70 2.55 253 2.59 2.70 2.47 2.69 251 2.68 2.64 2.54 2.60 2.68
m ra m π m m
5 5.10 5.00 5.12 5.32 5.06 5.40 5.14 5.07 5.13 5.07 5.11 5.10 5.07 5.11 5.11
ddd m m m brt
6 250 2.85 2.54 1.91 1.50 1.83 2.65 1.64 2.55 1.57 2.49 2.47 151 2.48 2.50
ra m m
6-Me LOS d 1.13 1.09 1.09 0.93 1.06 1.18 0.95 1.09 0.90 1.04 1.03 0.93 1.04 1.04
7 4.00 4.41 4.09 3.84 4.07 3.74 4.35 4.48 4.12 4.20 3.99 3.95 4.07 4.16 3.98
brdt
8 4.65 d 4.80 5.12 5.46 4.83 5.02 5.66 5.72 4.84 5.06 4.61 4.59 4.81 5.03 4.60
9 to
8/10- 7.84 7.76
Ar-1' ra bn
2' 7.36 7.25 2.30 2.28 7.06 7.15 7.72 756 6.97 6.94 6.90 7.15
(0 d s d brs bn brd lit brt brt
3 7.40 6.88 2.31 2.30 2.27 2.24 750 7.49 752 7.42 7.30 2.32 7.06 2.26
m d i d s brm ra dd t in
4· ·· 3.81 7.13 7.13 2.27 2.26 7.88 7.88 7.89 788 6.88 6.80 6.99 7.46 2.26
& to d K d d U dd tl br s ra
5' ·· 6.88 7.17 7.16 7.13 7.11 7.90 792 7.84 7.85 3.KI 2.32 ·· 7.12
d m m d bří d in m <í lo
6’ - 755 - - 7.03 - 7.54 7.52 7.52 7.51 6.93 6.94 6.90 - 7.15
d dd 1 (O m Κ» l ra bs m
7' 7.59 7.63 752 7.56
1 m m m
8' 8.13 8.13 7.84 7.85
bn brs ra m
D 2 4.92 4.93 4.93 4.81 4.86 4.81 4.93 4.86 4.93 4.84 4.92 4 91 4.87 4.92 4.93
dd m dd dd dd dd lil
3 1.45 1.41 1.50 1.43 153 1.42 1.47 151 1 46 1.46 1.45 143 1.54 150 1.46
m m
3' 1.78 1.78 1.79 1.68 1.85 1.69 1.74 I.X6 I.7O 1 84 1.70 1.66 1.85 1.74 1.72
ra !<» Id to in to
4 1.76 1.78 1.79 1.63 1.85 1.59 1.74 1.64 i.Ki 1.58 1.82 1.82 1.70 1.84 1.82
ra ra ni m ra ni
4-Me 0.94 0.95 0.95 0.91 0.97 0.91 0.93 0.93 0.95 0.97 0.93 0.94 0.97 0.95 0.98
d bří
5 0.93 0.92 0.95 0.87 0.94 0.86 0.93 0.90 0.93 (1.96 0.93 0.92 0.94 0.93 0.98
d bn
• · • ·
- 285 Spektra zaznamenávána v CDC13; Chemické posuny jsou pro protony nebo methylové nebo methoxylové funkční skupiny s polohou na uhlících indikovanými v tabulce. Chemické posuny pro protony v jednotkách B a C jsou v intervalu ± 0,2 ppm a kopulační konstanty jsou v intervalu + 0,5 Hz hodnot pro kryptof ycin-8. J (H,H) v Hz pro 163: 2' ,3' = 5',6' = 8,7; J (H,H) v Hz pro 186: 2',6' = 2,0; 5',6' = 7,7; J (H,H) v Hz pro 193 a 194: 3',4' = 8,5; J (H,H) v Hz pro 195: 2',3' = 3',4' = 7,9; 2', 6' = 4'6' ; 2,4; Pozorovatelné kopulační konstanty pro zbývající protony v tabulce jsou v intervalu ± 0,5 Hz hodnot pro kryptofycin-8. J (HH) a J (H,F) v Hz pro 212: 3'-F,4-H = 4-H,5-F =8,7; 2',4' = 4',6'= 2,3.
Tabulka 10. 125 MHz 13C NMR data pro Kryptof yciny-8, -163, 187, 191, 192, 194, 195, 222, 223 a 224.
184, -185, -186,
- 286 ·· ·· • · · • · • · • · ·· · • · · · · · • · ·· ··
P = poloha
• ·
- 287 ·· ·· • · · « I · · · « »·· ··· · · ί » · ’ » · · · ·
Spektra zaznamenávána v CDCI3. Chemické posuny pro uhlíky v jednotkách B a C jsou v intervalu + 0,5 ppm hodnot v kryptofycin-8.
* Signály nemohly být nalezeny vzhledem k malé velikosti vzorku.
+ Přiřazení jsou odhadovaná.
** Sloučené se signály rozpouštědla.
4-OMe uhlík v 163 a také v 195 rezonoval při δ 55,3. 2 '-Me a 3 ’-Me uhlíky v 185 se objevily při δ 15,0 respektive 20,9.
3'-Me a 4 ' -Me uhlíky v 186 byly pozorovány při δ 19,6
respektive 19, 9 . Tytéž uhlíky byly pozorovány při δ 19,5
respektive 19, 8 v 187 a při δ 19,5 a 19,8 v 224 . 3' a 5' -Me
uhlíky v 223 byly pozorovány při 21,3.
Příklad 94
Obecná skupina R v 2' (viz níže) sestává z etherového substituentu a několika acylových substituentů, jak je uvedeno v Tabulce 1 (také viz níže). Nové kryptofycinové analogy byly připraveny se středním až vysokým výtěžkem esterifikačními technikami. Viz Mulzer, J., Trošt B.M. Fleming, I., Ed. Comprehensive Organic Synthesis; 6:323-380, (Pergamon Press: Oxford, 1991); Benz, G. Trošt, B.M., Fleming, I, Ed., Comprehensive Organic Synthesis, 6:381-417, (Pergamon Press: Oxford, 1991). Hydrochloridové soli aminu byly připraveny s vysokým výtěžkem z odpovídajících terc.butylkarbamátů po zpracování kyselinou chlorovodíkovou, zatímco bisodná sůl 7' byla odvozena z 6' po štěpení terc.butylesteru indukovaném adicí kyseliny chlorovodíkové a působením hydroxidem sodným. Pyridiniová sůl 9' byla • · ·
- 288
připravena z 1' způsobem, který popsal Nicolaou. Nicolauo a kol., Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:1583+ (1994).
1' 2' (jak byl použit v popisu způsobu syntézy, popsaném níže)
Tabulka 1. R skupiny obecné struktury 2' (viz výše).
Sloučenina R ··
Υ^^ΟΟμ-θυ
OH
A?
iHCt
OAc
Ur ^X^mcop-βυ
Xf o ^^oy· ιΛ^,Μΐ,νΗα jcx;
ofvw-euj,
OPÍOMONtíj
OMt NHCOjt-Bu
1* «4 *
1T’ '
»· ‘
22'
28* iAyNHOO x°
JL° *Αγ.ΝΗΟΟ,1·ΒΜ
LJ>
^Nco,»-eu γλγΝΜ,βΗΟ ^NH8HCI
Y^yv-ex
Ά- NHCO^-Bu O ^A^nh,»hc>
Λ o
G^NHCO^Sd o
ν’^^ΝΗ,ΜΗα
O ^JkwXX^NHCOyt-eU h ,ΝΗ,ΪΗΟ
289
Sloučenina R
»' o ^A^nhco^bu
28* γΧγΝΗ,»Ησ
28 γΧκ,ΝΗΕΟ^βυ
X' o ^Α^νη,κηο
>1 ' >X.NHCo/eu \χ\/ NHCO^Ďu
22 ' ^ΛγΝ^ΐίΗσ Κ^χ^ΝΜ,ΪΗα
23'
Χχ-^ΝΗΟΟ,Ι-βυ
34*
28 ^A^hHCOfl-Bu Í^co^-Bu
22* o
«7* 0 ^Λγ.ΝΗεομ-βυ
28* lCO,lBu χΑγΝΗ, »HCl
28 * ^A^MHCOjI-Ďu
40 * Νο,Ι-βο γΧχ^ΝΗ,ΪΗα
**CO«H o
41 *
<2* wccy-Bu ΛΗ,ΒΗΟ jJ. WCO^-βυ
42'
^ř^COjt-Bu
44* ^^.104,4 HO ΝΗ,ίΗΟ ^Ás^NřCOp-Bu **0Η
48'
48 * tX^NHjWHCl
47* O Y*vNY^nh,«hci
48*
Příprava konjugátů, popsaných v Tabulce 1 postupuje podle několika protokolů, typicky zahrnujících metodologii aktivovaného esteru, následovanou chromatografií a kyselinou indukovanou deblokací, je-li to nutné. Zpracování 1' acetanhydridem v přítomnosti triethylaminu a 4• · ·
- 290 dimethylaminopyridinu tedy dává 3' s 89% výtěžkem po provedení mžikové chromatografie. Podobně může být 5' připraven z 1' prostřednictvím anhydridu kyseliny jantarové s následným čištěním pomocí HPLC s obrácenými fázemi.7 Alternativně se 5' připraví s vysokým výtěžkem po zpracování mono-terc.-butylesteru 4' kyselinou. Vystavení pyridinového roztoku 1' komerčně dostupnému hydrochloridu nikotinoylchloridu v přítomnosti triethyaminu a 4dimethylaminopyridinu a následnou chromatografií a působením chlorovodíkem dává 8' s vysokým výtěžkem. Pyridiniová sůl 9' se připraví s 47% výtěžkem způsobem, který popsal Nicolaou (viz výše), zatímco 1' se zpracovává komerčně dostupným 2fluor-l-methylpyridinium-p-toluensulfonátem a následuje čištění pomocí HPLC s obrácenými fázemi se současnou aniontovou výměnou (acetát za lyofilizací. Zbývající estery se středními až vysokými výtěžky z 1' a výjimkou případů 4', 6, 10', 43' a 45') N-t-boc chráněných aminokyselin p-toluensulfonát) všechny připraví a
se komerčně dostupných (s aktivací dicyklohexylkarbodiimidu prostřednictvím 1,3v přítomnosti 4dimethylaminopyridinu. Hydrochloridové soli se připraví s vysokým výtěžkem po zpracování 4,0 M roztokem chlorovodíku v dioxanu a odebrání rozpouštědla za sníženého tlaku. Bisodná sůl 7' se získá z 6' následným štěpením terč.-butylesteru indukovaným kyselinou chlorovodíkovou a působením hydroxidem sodným. Požadovaná kyselina 24' pro příprava 5' se syntetizuje s 63% výtěžkem způsobem sestávajícím z posloupnosti pěti kroků podle metody, kterou popsal Johns a je upravena pro fosfátovou funkční skupinu. Peřích, J.W.; Johns R.B. a kol. Synthesis 1985: 142.
- 291
0« 0
0 0
0 0 ·
0 0000 ·
0·
0
00
0 0
0 0
000 000 0 0
0· „Ap
0P(0)(OBu)2 (379402)
Několik nových konjugátů bylo analyzováno na cytotoxicitu v Gc3 nádorovém buněčném modelu, popsáno výše. Tyto výsledky jsou uvedeny v Tabulce in vitro jak bylo 2 níže:
Tabulka 2. In vitro data o cytotoxicitě kryptofycinových derivátů.
Sloučenina Gc3 IC50 (nM) Sloučenina Gc3 IC50 (nM)
1' 0,065 28' 2, 6
3' 83 30' 30
5' 31 32' 7,2
7' 7 Ί 34 ' r c
O r ! O f Ό
8' 116 36' 2,8
9' 2,2 36' 2,8
11' 6,8 40' 2,0
13' 7,0 42' 15
15' 60 44 ' 28
17 ' 3, 6 46' 50
19' 0,10 47' 2,5
21' 21 48 ' 10
25' 230
Studie stability byly prováděny při vodných pH v rozmezí 4-8 a bylo určováno procento produktů, které zůstaly neporušeny.
292
Přeměna terč. -butylkarbamátů na .odpovídající soli může být prováděna libovolnou silnou kyselinou, zejména anorganickými kyselinami zahrnujícími hydrogenhalogenidy, hydrogensírany, hydrogenfosforečnany, hydrogendusičnany, hydrogenperchloráty, nebo silné organické kyseliny jako je kyselina trifluoroctová, kyselina p-toluenesulfonová a kyselina methansulfonová. Tytéž kyseliny mohou být použity pro přípravu solí typu 8' z odpovídající volné báze. Škála protiiontů (kationtů) může obsahovat soli typu 7' v to počítaje soli alkalických kovů a kovů alkalických zemin. Škála protiiontů (aniontů) může obsahovat soli typu 9', zejména libovolnou konjugovanou bázi kyseliny (organické nebo anorganické).
Příprava acetátu Kryptofycinů 55 (3') (LSN 362376).
Do roztoku 1' (93 mg, 0,13 mmolů) v 659 μΐ methylenchloridu při teplotě 0 °C byl přidán triethylamin (55 μΐ 0,40 mmolů), 4-dimethylaminopyridin (1,6 mg, 0,013 mmolů) a acetanhydrid (19 μΐ 0,20 mmolů). Po míchání při teplotě 0 °C po dobu 1 hodiny reakce byla ukončena 19 μΐ methanolu, směs byla koncentrována na 0,5 objemu a přímo vložena do kolony mžikové chromatografie (19 g silikagelu pro mžikovou chromatografií). Vymývání směsí ethylacetát-hexany (3:1) poskytlo 88 mg (89%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDCI3) 61,38-7,31 (m, 5H) , 7,24 (d, 1H, J =
2,1 Hz), 7,22- 7,18 (m, 1H), 7,10 (dd, 1H, J = 8 ,5, 2,1 Hz) ,
6,88 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,75 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,6
Hz), 5,78 (dd, 1H, J = 15, 1,0 Hz) , 5,55 (d, 1H, J = 7,9
Hz) , 5,46 (dd, 1H, J = 9,8, 1,2 Hz) , 4,95 (dd, 1H, J = 11,
2,9 Hz), 4,89 (ddd, 1H, J = 9,9, 9,9, 1,7 Hz) , 4,81 (d, 1H,
«β> ·· • · ·
293
J = 9,8 Hz), 4,79-4,74 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,39 (dd, 1H,
J = 13, 8,1 Hz), 3,22 (dd, 1H, J = 1 3, 4,1 Hz), 3 ,16 (dd,
1H, J = 14, 5,1 Hz), 3,07 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz ), 2 , 65-
2,55 (m, 2H), 2,47-2,39 (m, 1H), 1,95 (ddd, 1H, d = 14, 13,
4,6 Hz) , 1,86-1,77 (m, 1H) , 1,73-1,66 (m, 1H), 1,68 (s, 3H) ,
1,27 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,09 (d, 3H, J = 7,1 H z) , 1,03
(d, 3H, J = 6,1 Hz), 0,97 (d , 3H, J = ( 5,6 Hz) .
Příprava terč.-butyl esteru jantaranu Kr yptofycinu 55 (4')
(LSN 384665).
Do roztoku 1' (133 mg, 0,188 mmolů) mono-terc.-butylesteru jantarové kyseliny (66 mg, 0,377 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (2,3 mg, 0,019 mmolů) v 850 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (78 mg, 0,377 mmolů) v 92 μΐ methylenchloridu. Po míchání při teplotě okolí po dobu 1 hodiny reakční směs byla zpracována 150 mg celitu a zředěna 1 ml směsi ethylacetát-hexany (3:1) a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát-hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromátografie (25 g silikagelu pro mžikovou ehromatografií) , vymývání směsí ethylacetát-hexany (2:1) poskytlo 157 mg (97 %) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,38-7,30 (m, 5H), 7,24 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,22-7,18 (m, 1H), 1,09 (dd, 1H, J = 8,5, 2,0 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,74 (ddd, 1H, J = 15, 10, 4,6 Hz), 5,76 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,51 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,97 (dd, 1H, J = 11, 3,1 Hz), 4,90 (t, 1H, J = 9,3 Hz), 4,83 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,79-4,73 (m,
1H), 3,91 (s, 3H), 3,39 (dd, 1H, J = 13, 8,0 Hz), 3,22 (dd,
- 294 ·· *·
1Η, J = 13, 4,0 Hz), 3,16 (dd, 1H, J = 14, 5,1 Hz), 3,08 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz), 2,63-2,55 (m, 2H), 2,44-2,37 (m, 1H), 2,32-2,21 (m, 2H) , 2,19-2,06 (m, 2H) , 1, 99-1, 92 (m, 1H), 1,85-1,68 (m, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,27 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,08 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,98 (d, 3H, 0 = 6,5 Hz).
Příprava sukcinátu Kryptofycinu 55 (5') (LSN 377092) z terč.-butyl esteru jantaranu kryptofycinu 55.
Do roztoku 4' (127 mg, 0,147 mmolů) v 491 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (184 μΐ 0,737 mmolů). Roztok byl ponechán za míchání při teplotě okolí po dobu 5 hodin. Koncentrace za sníženého tlaku poskytla 119 mg (100%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny.
Příprava jantaranu Kryptofycinu 55 (5') (LSN 377092) anhydridu kyseliny jantarové. _________
Do roztoku sloučeniny 1' (27 mg, 0,038 mmolů) a anhydridu kyseliny jantarové (5,7 mg, 0,057 mmolů) v 383 μί methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán triethylamin (16 μΐ 0,115 mmolů) a 4-dimethylaminopyridin (4,7 mg, 0,038 mmolů). Po míchání po dobu 19 hodin bylo přidáno dalších 5,7 mg (0,057 mmolů) anhydridu kyseliny jantarové a 4,7 mg (0,038 mmolů) 4-dimethylaminopyridin a následovalo míchání po dalších 29 hodin. Reakční směs byla zpracována 0,5 ml 1 N vodnou kyselinou chlorovodíkovou a promývána methylenchloridem (3 x 0,5 ml). Sloučené organické extrakty byly sušeny (Na2SO4) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na bílou pěnu. Čištění chromatografií HPLC s obrácenou fází7 poskytlo 10 mg (32%) sloučeniny z názvu ve formě bílé
- 295 *» · · · a · ·
Φ · · · · · · · · • ·· r · · ···· ··· 9 φ A ·
9 9 99 · pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) 57,36-7,31 (m, 6H) , 7,22 (br s, 1H) ,
7, 08 (d, 1H, J = 8 ,4 Hz), 7,02 (br s, 1H), 6,87 (d, 1H, J =
8, 4 Hz) , 6, 61 (m, 1H), 5,94-5,87 (m, 2H), á,51 (d, 1H, J =
9, 8 Hz) , 4,95 (dd, 1H, J = 10, 2,8 Hz), 4,87-4,76 (m, 3H) ,
3, 90 (s, 3H) , 3, 39 (dd, 1H, J = 16, 5,6 Hz), 3,28 (dd, 1H, J
= 16, 8,2 Hz), 3,17 (dd, 1H, J = 16, 5,6 Hz), 3,05 (dd, 1H, J = 16, 8,2 Hz), 2,68-2,62 (m, 1H), 2,60-2,46 (m, 2H) , 2,452,28 (m, 3H), 2,01-1,93 (m, 2H), 1,88-1,70 (m, 2H), 1,26 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,12 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,00 (d, 3H, J = 6,5 Hz).
Příprava (2'-di-terc.-butylfosfatyl)fenylacetátu
Kryptofycinu 55 (6') (LSN 379407).
Do roztoku sloučeniny 1' (0,102 mmolů), 24' (46 mg, 0,134 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (12 mg, 0,102 mmolů) v 250 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (27 mg, 0,134 mmolů) v 50 μΐ methylenchloridu. Po míchání při teplotě okolí po dobu 6 hodin reakční směs byla zředěna 1 ml směsi ethylacetáthexany (3:1) a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát-hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na purpurovou pěnu. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí ethylacetát-hexany (4:1) poskytlo 86 mg (82%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny: 500 MHz XH NMR (CDCI3) δ 7,35 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,30-7,19
(m, 8H), 7,11 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz) , 7,02 (t, 1H, J =
7,5 Hz), 6,87 (d, 1H, J = 8, 4 Hz), 6, 84 (d, 1H, J = 7,5 Hz) ,
6,73 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,7 Hz), 5, 92 (d, 1H, J = 7,9
Hz), 5,79 (dd, 1H, J = 15, 1,0 Hz) , 5,43 (dd, 1H, J = 9,4,
- 296 • · · 4 • · 4 «444 4 444
44 44· 44444
4 4 · · · · • 4 4 4 »4 4
1,8 Hz), 4,98 (dd, 1H, J = 12, 3,1 Hz), 4,81 (ddd, 1H,
9,9, 9,9, 1,8 Hz), 4 75 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,13-4,67
1H) , 3,90 (s, 3H), 3,49 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,44-3,38
1H) , 3,38 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,27-3,17 (m, 2H), 3,10
1H, J = 14, 8 ,2 Hz), 2,55-2,46 (m, 2H), 2,37-2,27 (m,
1,95 (ddd, 1H, J = 14,12, 4,5 Hz), 1,83-1,70 (m, 2H),
(s, 18H), 1,27 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H), 1,03 (d, 3H, J =
Hz) , 0,97 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,92 (d, 3H, J = 7,0 Hz).
J = (m, (m, (dd, 1H) , 1,49
6,5
Příprava 2'-(di-terc.-butylfosfatyl)fenyloctové kyseliny (24') (LSN 379402).
Do roztoku 2'-hydroxyfenethylalkoholu (1,05 g, 7,60 mmolů) v 15,2 ml N,N-dimethylformamidu při teplotě 0 °C byl přidán imidazol (621 mg, 9,11 mmolů) a terc.butyldimethylsilylchlorid (1,26 g, 8,34 mmolů). Po míchání při teplotě 0 °C po dobu 40 minut a při teplotě okolí po dobu 45 minut bylo přidáno dalších 155 mg (2,28 mmolů) imidazolu a 229 mg (1,52 mmolů) terc.butyldimethylsilylchloridu. Reakční směs byla ponechán za míchání po dobu dalších 15 minut a poté bylo přidáno 150 ml terč.-butyl-methyletheru. Směs byla promýván studenou IN vodnou kyselinou chlorovodíkovou (1 x 15 ml), následovanou vodou (1 x 15 ml). Organická vrstva byla sušena (Na2SO4) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku na žlutý olej. Chromatografie (70 g silikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí hexany-ethylacetát (5:1) poskytlo 1,81 g (94%) primárního silyletheru ve formě bledě bělavého oleje. Do roztoku silyletheru (506 mg, 2,00 mmolů) a di-terc.-butyldiethylfosforamiditu (600 μί, 93%, 2,00 mmolů) v 2 ml tetrahydrofuranu byl při teplotě okolí přidán 1-H-tetrazole (421 mg, 6,01 mmolů). Po míchání po dobu 45
- 297 ·· · ·· ·· • · · 9 · · 1 • · · · · * · ’ « · ·····« ··· ··<
minut reakční směs byla ochlazena na teplotu -10 °C a rychle zpracována roztokem kyseliny m-chlorperbenzoové (450 mg, 99%, 2,61 mmolů) v 3,6 ml methylenchloridu. Kalně bílá reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a míchána po dobu 15 minut. Reakce byla ukončena 4 ml 10% vodným bisulfitem sodným, intenzívně míchána po dobu 10 minut, zředěna 15 ml terč.-butyl-methyletherem a promývána 10% vodný bisulfitem sodným (2 x 10 ml) následovaným 0,5 N vodným hydroxidem sodným (2 x 10 ml) . Organická vrstva byla sušena (Na2SO4) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku na bezbarvý olej (941 mg), který byl použit přímo v následujícím kroku. Surový fosforečnan byl rozpuštěn v 10 ml tetrahydrofuranu, ochlazen na teplotu 0 °C a zpracován 1 M roztokem tetra-n-butylamoniumfluoridem v tetrahydrofuranu (2,4 ml, 2,4 mmolů). Po míchání při teplotě 0 °C po dobu 20 minut a při teplotě okolí po dobu 1,5 hodin byla reakční směs zředěna 60 ml terč.-butyl-methyletheru a promývána vodou (1 x 10 ml), následovanou solankou (1 x 10 ml). Organická vrstva byla sušena (Na2SO4) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku na žlutý olej . Chromatografie (50 g siiikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí ethylacetát-hexany (3:1) poskytlo 525 mg (79%) 1° alkohol ve formě bělavého oleje. Do roztoku alkoholu (123 mg, 0,372 mmolů) ve směsi acetonitriltetrachlormethan (1;1, 1,49 ml) byla při teplotě okolí přidána voda (1,1 ml), následovaná jodistanem sodným (239 mg, 1,12 mmolů) a hydrátem chloridu ruthenitého (1,8 mg, 0,0082 mmolů). Hnědá směs byla ponechána za rychlého míchání při teplotě okolí po dobu 55 minut.
sníženého tlaku a chromatografií (8 mžikovou chromatografií, vymývání směsí
Po koncentraci za g siiikagelu pro 10% methanol• 0
- 298 •0 00 000 ·0 • 0 0 000 0000 0 0000 0 000 0 00 · 0 00 0 0 0 000000 000 000 0000000 0 ·
00 0 0 * 0 · · · ethylacetát) bylo získáno 109 mg (85%) sloučeniny z názvu ve formě purpurového oleje:
500 MHz XH NMR (CDC13) 57,49 (d, 1H, J = 7,53 Hz), 7,30-7,15 (m, 3H), 3,77 (s, 2H), 1,51 (s, 18H).
Příprava bisodné soli (2'-fosfatyl)fenylacetátu Kryptofycinu 55 (7') (LSN 374122).
Do roztoku 6' (84 mg, 0,081 mmolů) v 400 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (81 μΐ 0,33 mmolů). Bledě žlutý roztok byl ponechán za míchání při teplotě okolí po dobu 2 hodin. Po koncentraci za sníženého tlaku na bělavou pěnu byl surový dihydrogenfosforečnan rozpuštěn v 614 μΐ tetrahydrofuranu a zpracován 5,00 N vodným roztokem hydroxidu sodného (33 μΐ 0,163 mmolů). Po míchání po dobu 10 minut směs byla koncentrována za sníženého tlaku na snědou pěnu. Surová sůl byla vyjmuta v 1 ml horkého acetonitrilu a 0,1 ml horké vody. Nerozpustné složky byly odfiltrovány a filtrát byT koncentrován za sníženého tlaku a tím se získalo 69 mg (87%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,58 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,38-
7,32 (m, 2H) , 7,32-7,28 (m, 3H), 7,28 (d, 1H, J = = 2,1 Hz) ,
7,17 (dd , 1H, J = 8,5, 2,1 Hz), 7,09 (ddd, 1H, J = 7,8, 7,8,
1,7 Hz) , 6, 98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,79-6,70 (m, 2H) , 6, 67
(d, 1H, J = 7,4 Hz) , 5, 91 (dd, 1H, J = 15, 1,7 Hz) , 5, 45
(dd, 1H, J = 9,4, 1,6 Hz), 5,06 (dd, 1H, J = 10, 2,7 Hz) ,
5,01 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,89-4,80 (m, 1H), 4,47 (dd, 1H, J = 11, 3,8 Hz), 3,84 (s, 3H) , 3,67 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,45 (d, 1H, J = 14 Hz), 3,42 (d, 1H, J = 16 Hz), 3,18 (dd, 1H, J = 14, 3,8 Hz), 3,12 (d, 1H, J = 14 Hz), 2,77 (dd, 1H, J =
14, 11 Hz), 2,67-2,60 (m, 1H) , 2,56-2,48 (m, 1H), 2,31-2,22
- 299 • 0 0 0 0 0 · · · • · · · e · *····«
0 0 · ·· 0 «0 00 00 6 (m, 1H), 1,96-1,88 (m, 1H), 1,85-1,77 (m, 2H), 1,22 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,03 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 0,98 (d, 3H, J = 6,1 Hz), 0,93 (d, 3H, J = 7,1 Hz).
Příprava hydrochloridové soli nikotinoátu Kryptofycinu 55 (8') (LSN 368265).
Do roztoku 1' (50 mg, 0,071 mmolů) v 354 μΐ pyridinu byl při teplotě okolí přidán hydrochlorid nikotinoylchloridu (15 mg, 0,085 mmolů), následovaný triethylaminem (23 μΐ 0,170 mmolů). Po míchání po dobu 1,5 hodin byl přidán 4dimethylaminopyridin (8,6 mg, 0,071 mmolů). Po míchání 5 hodin byl přidán dodatečný triethylamin (23 μΐ 0,170 mmolů), 4-dimethylaminopyridin (8,6 mg, 0,071 mmolů) a hydrochlorid nikotinoylchloridu (15 mg, 0,085 mmolů) spolu s 50 μΐ pyridinovým proplachem. Po míchání 18 hodin reakční směs byla zpracována 0,5 ml nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným a promývána methylenchloridem (4 x 1 ml) . Sloučené drganické extrakty byly sušený (Na2SO4) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na lehce hnědý olej. Chromatografíe (14 g silikagelu pro mžikovou chromatografií), vymývání směsí ethylacetát-hexany (10:1) poskytlo 49 mg (85%) volné báze ve formě bílé pěny. Nikotinoát byl rozpuštěn v 1 ml methylenchloridu a zpracován 1,0 M roztokem chlorovodíku v diethyletheru (90 μΐ 0,090 mmolů). Čirý bezbarvý roztok byl ponechán stát při teplotě okolí po dobu 5 minut. Odebrání rozpouštědla za sníženého tlaku poskytlo 51 mg sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny: 500 MHz XH NMR (CDC13) 58,94 (s, 1H) , 8,78 (br s, 1H) , 8,29 (d, 1H, 4 = 7,0 Hz), 7,57 (br s, 1H) , 7,38 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,30-7,16 (m, 5H), 7,10 (dd, 1H, 4 = 8,4, 1,7 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (m, 1H) , 5,80 (d, 1H, J = 15 Hz), • · • · • · · · · · ···· • · · · · · · · · · · · · cnn · ·· · · · ♦ ···· * ··· ··· — jUU — ·····«· · ·
5, 74 (d, 1H, 0 ’ = 9,6 Hz) i , 5,56 (br s, 1H), 5,00 (d, 1H, J =
9, 6 Hz) , 4,95 (t, 1H, J = 8,9 Hz) , 4,: 84 (d, 1H, J = 9,8 Hz)
4 77 -4,72 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,39 i (dd, 1H, J = 13, 8,2
Hz) , 3,23 -3,14 (m, 2H), 3,06 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz ), 2 ,81-
2,74 (m, 1H), 2,62-2,45 (m, 2H), 1,93 (ddd, 1H, 4 = 14, 12,
4,8 Hz) , 1,78- 1,70 (m, 1 H), 1,66-1,59 (m, 1H), 1,25 (s, 3H) ,
1,20 (d, 3H, J = 7,0 Hz) , 1,19 (s, 3H) , 0,98 (d, 3H, J = 6,7
Hz) , 0,84 (d, 3H, J = 6, 5 Hz) .
Příprava acetátové soli N-methylpyridinia Kryptofycinu 55 (9') (LSN 366550).
Do roztoku 1' (53 mg, 0,075 mmolů) v 751 μΐ methylenchloridu při teplotě 0 °C byl přidán triethylamin (13 μΐ 0,090 mmolů), následovaný 2-fluor-l-methylpyridinium-ptoluensulfonátem (23 mg, 0,083 mmolů). Heterogenní reakční směs byla zahřáta na teplotu okolí a míchána po dobu 3,5 hodin a poté bylo přidáno dalších 11 mg (0, 039 mmolů) 2fluor-l-methyipyr±dinium-p-toluensulfonátu. Po míchání po dobu 14,5 hodin bylo přidáno dalších 11 mg (0,039 mmolů) 2fluor-l-methylpyridinium-p-toluensulfonátu, následovaných dalšími 11 mg (0,039) 2-fluor-l-methylpyridinium-ptoluensulfonátu a 13 μΐ (0,090) triethylaminu po uplynutí 2,5 hodin. Po míchání další 1 hodinu reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku na oranžový pěna. Čištění chromatografií HPLC s obrácenou fází8 se současnou aniontovou výměnou (acetát za p-toluensulfonát) následovanou lyofilizací dalo 30 mg (47%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky:
500 MHz XH NMR (DMSO-d6) δ 8,65- 8,58 (m, 2H) , 8,36 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 7,68 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 1,60 (d, 1H, J = 6,6
Hz), 7,48 (t, 1H, J = 6,6 Hz), 7,35-7,21 (m, 6H) , 7,19 (dd, • ·
- 301 • 9 9 • 9 9 9 9 • · · · 9
9 · ·
9 9 9
999 999
ÍH, J = 8,5, 1,9 Hz), 7,05 (d, ÍH, J = 8,5 Hz), 6,49 (ddd, ÍH, J = 16, 13, 4,0 Hz), 5,91 (d, ÍH, J = 16 Hz), 5,72 (d,
ÍH, J = 8,0 Hz) , 5,66 (dd, ÍH, J = 8,0, 1,9 Hz), 5,32-5,27
(m, ÍH), 4,73 (dd, ÍH, J = 9,7, 4,3 Hz), 4,24 (ddd, ÍH, J =
11, 9,8, 3,7 Hz) , 3,93 (s, 3H), 3,81 (s, 3H) , 3,32 (dd, ÍH,
d = 13, 9,3 Hz), 3,05-2 ,97 (m, 2H) , 2,77- 2,57 (m, 3H), 2,54-
2,47 (m, ÍH), 1,76 (s, 3H) , 1, 68-1,62 (m, ÍH) , 1,55-1,46 (m,
ÍH), 1,37-1,30 (m, ÍH) , 1,15 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,13 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,88 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,73 (d, 3H, J = 6,5 Hz) .
Příprava N-t-Boc-3-(3-chlor-4-methoxyfenyl)-(D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (10') (LSN 382049).
Do roztoku 1' (23 mg, 0,033 mmolů) N-t-Boc-3-(3-chlor-4methoxyfenyl)-(D)-alaninu4c (16 mg, 0,049 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (několik krystalů) v 143 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3dicyklohexylkarbodiimidu (10 mg, 0,049 mmolů) v 20 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 2 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (2:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (2:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografíe (14 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 ethylacetát-hexany) poskytla 29 mg (88%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,42-7,27 (m, 5H), 7,24 (d, ÍH, J =
2,0 Hz), 7,25-7,18 (m, ÍH), 7,09 (dd, ÍH, J = 8,4, 1,9 Hz), 6,91-6,86 (m, 2H) , 6, 84-6, 70 (m, 3H) , 5,75 (d, ÍH, J = 15
Hz), 5,53 (d, ÍH, J = 9,6 Hz), 5,47 (d, ÍH, J = 7,6 Hz), 5,00 (dd, ÍH, J = 10, 2,9 Hz), 4,90-4,80 (m, 2H), 4,78-4,71
302 ·· · · 00 0 ·· · · • 00 · · 0 · · · · • 0··· 0 000 0 00 0
00 000 000000 000 000 • 000000 0 ·
00 00 · · · · *
(m, 1H), 4,63 (d, 1H, 8,3 Hz), 4,19-4,12 (m, 1H), 3,91 (s,
3H), 3,88 (s, 3H) , 3,40 (dd, 1H, J = 13, 8,1 Hz), 3,25-3,12
(m, 2H), 3,07 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz) , 2,67-2,57 (m, 2H) ,
2,39-2,27 (m, 2H) , 2,15 (dd, 1H, J = 14, 8,0 Hz), 2,01 (ddd,
1H, J = 14, : 12, 4 ,2 Hz) , 1,87-1,76 (m, 2H), 1,39 (s, 9H),
1,27 (s, 3H) , 1, 20 (s, 3H), 1,09-1,04 (m, . 6H) , 1,01 (d, 3H,
J = 6,3 Hz).
Příprava hydrochloridové soli 3-(3-chlor-4methoxyfenyl)-(D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (11') (LSN 382048) .
Do roztoku 10' (27 mg, 0,027 mmolů) v 265 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (33 μΐ 0,133 mmolů). Po míchání po dobu 3 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 26 mg (96%, přepočteno pro 5 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny: _____
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) 67,79 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 7,49-7,45
(m, 2H) , 7,43-7,48 (m, 3H), 7,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz) , 7,20
(dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 7,13 (d, 1H, J = 2,2 Hz) , 7,07-
6, 95 (m, 3H), 6,71 (ddd, 1H , 15, 13, 3,8 Hz), 5,98 (dd, 1H,
J = 15, 1 ,8 Hz), 5 ,69 (d, 1 .H, J = 10 Hz) , 5,22 (d, 1H, J =
10 K lz) , 5 .,18 (dd, 1H, J = 10, 2 ,5 Hz), 4,89-4,80 (m, 1H) ,
4,53 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz) , 4,16 (dd, 1H, J = 10, 4,4
Hz) , 3,88 (s, 3H), 3,87 (s, 3H) , 3,51 (dd, 1H, J = 13, 9,9
Hz) , 3, 20 (dd, 1H, J = 14, 3,7 Hz), 3,14 (dd, 1H, J = 13,
2,3 Hz) , 2,82-2,75 (m, 3H) , 2,45 (dd, 1H, J = 15, 4,5 Hz) ,
2,42- 2,34 (m, 1H) , 2,08-2,00 (m, 1H) , 1, 97-1,86 (m, 3H) ,
1,27 (s, 3H), 1,21 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,10 (d, 3H, J = 6,1 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,0 Hz).
- 303
Příprava N-t-Boc-(L)-fenylalaninátu Kryptofycinu 55 (12') (LSN 382235) .
Do roztoku sloučeniny 1' (29 mg, 0,041 mmolů), N-t-Boc-(L)fenylalaninu (16 mg, 0,062 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,5 mg, 0,0041 mmolů) v 165 μΐ bezvodého methylenchlorid byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3dicyklohexylkarbodiimidu (13 mg, 0,062 mmolů) v 42 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 40 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (2:1, 0,5 ml) , míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (2:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografíe (12 g silikageiu pro mžikovou chromatografií, 2:1/ethylacetát-hexany) poskytla 20 mg (50%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,40-7,47 (m, 2H) , 7,26-7,37 (m, 6H), 7,12-7722 (m, 4H) , 7,00 (d, 1H, J = 8,4 HžTý-6,7 8-6,71 (m, 1H) , 5,94 (d, 1H, d = 15 Hz), 5,48 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 5,15-5,10 (m, 1H) , 5,06 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,68 (t, 1H, J = 9,7 Hz), 4,52 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 4,14-4,10 (m, 1H),
3,87 (s, 3H), 3,49 (d, 1H, d = 13 Hz), 3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,7 Hz), 3,14 (d, 1H, J = 13 Hz), 2,77 (dd, 1H, J = 14, 11 Hz), 2,67 (dd, 1H, J = 14, 6,2 Hz), 2,62-2,57 (m, 2H), 2,51 (dd, 1H, J = 14, 9,1 Hz), 2,31-2,23 (m, 1H), 2,00-1,92 (m,
1H), 1,91-1,82 (m, 2H), 1,38 (s, 9H) , 1,26 (s, 3H) , 1,24 (s,
3H), 1,08 (d, 3H, J = 5,9 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 5,8 Hz),
0,87 (d, 3H, J = 7,0 Hz).
Příprava hydrochloridové soli
Kryptofycinu 55 (13') (LSN 382236).
(L)-fenylalaninátu
- 304
Do roztoku sloučeniny 12' (18 mg, 0,019 mmolů) v 189 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (24 μΐ 0,094 mmolů). Po míchání po dobu 4 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 15 mg (88%, přepočteno pro 2 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny;
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,79 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,48-
7,23 (m , 11H), 7,20 (dd, 1H, J = 8,6, 1,6 Hz) , 6,75-6,68 (m,
1H) , 5, 97 (d, 1H, J = 16 Hz), 5,55 (d, 1H, J = 9,2 Hz) ,
5,15 -5, 11 (m, 2H), 4,11 (t, 1H, J = 10 Hz) , 4,55-4,51 (m,
1H) , 3, 87 (s, 3H), 3,21 (dd, 1H, J = 14, 3,8 Hz), 3,17- 3,10
(m, 2H) , 2,94 (dd, 1H, J = 15, 8,1 Hz), 2,78 (dd, 1H, J =
14, 12 Hz), 2,69-2, 63 (m, 2H) , 2 1,34-2,27 (m, 1H) , 1,98- 1,92
(m, 1H) , 1,89-1,82 (m, 2H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,06
(d, 3H, J = 6,2 Hz) , 1,03 (d, 3H , J = 6,: L Hz) , 0,89 (d, 3H,
J = 7,0 Hz) .
Příprava dihydrochloridové soli (L)-histidinátu Kryptofycinu 55 (15') (LSN 384046).
Do roztoku sloučeniny 1' (19 mg, 0,027 mmolů), N,N'-di-tBoc-(L)-histidin-benzenového komplexu (18 mg, 0,040 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,3 mg, 0,0027 mmolů) v 100 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1, 3-dicyklohexylkarbodiimidu (8,3 mg, 0,040 mmolů) v 35 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 60 minut bylo přidáno dalších 18 mg N,N'-di-t-Boc-(L)-histidin-benzenového komplexu (0,040 mmolů) a 8,3 mg 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu ( 0,040 mmolů). Kalně bílá reakční směs byla míchána další 4 hodiny, zředěn směsí ethylacetát-hexany (3;1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, ·· ·
305 promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (13 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 3:1/ethylacetát-hexany) poskytla 17 mg (61%) N,N'-di-t-Boc sloučeniny (14') ve formě bílé pěny. Do roztoku sloučeniny 14 (17 mg, 0,016 mmolů) v 160 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (24 μΐ 0 ,098 mmolů). Po míchání po dobu 5 hodin byla kalně bílá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 15,7 mg (100%, přepočteno pro 4 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 8,91 (s, 1H) , 7,77 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 7,51- 7,37 (m, 6H), 7,31 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 7,20 (dd, 1H, 8,4, 2,1 Hz), 6, 66-6, 58 (m, 1H) , 5,99 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,57 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 5,20 (d, 1H, J = 9,6 Hz),
5,15 (dd, 1H, J = 10, 3,0 Hz), 4, 58 (t, 1H, J = 11 Hz) , 4,53
(dd, 1H, 11, 3 ,8 Hz), 4, 14--Η^- 1H, J = 6,4 Hz) , 3,87 (s,
3H) , 3,55-3,47 (m, 1H), 3,27-3, 12 (m, 3H) , 2,81 -2,68 (m,
3H) , 2,40-2,31 (m, 1H) , 1,98-1, 81 (m, 3H) , 1,25 (5, 3H) ,
1,21 (s, 3H),1, 10-1,04 (m, 6H), 1 ,04 (d, 3H, J = 6, 1Hz) .
Příprava N-t-Boc-(L)-prolinátu Kryptofycinu 55 (16') (LSN 382926).
Do roztoku sloučeniny 1' (19 mg, 0,027 mmolů), N-t-Boc-(L)prolinu (8,7 mg, 0,040 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,3 mg, 0,0027 mmolů) v 100 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (8,3 mg, 0,040 mmolů) v 35 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 45 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a ·· ·
- 306 filtrována přes vrstvu celitu, promýván! směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 3:1/ethylacetát-hexany) poskytla 11 mg (46%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,39-7,30 (m, 5H) , 7,24 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,21-7,18 (m, 1H) , 7,09 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz),
6,87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6, 80-6, 68 (m, 1H) , 5,77 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,61 (br s, 1H) , 5,56 (t, 1H, J = 9,5 Hz), 5,044,68 (m, 4H), 4,19-4,15 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,41-3,34 (m, 2H), 3,27-3, 02 (m, 4H) , 2,64-2,50 (m, 2H) , 2,35-2,25 (m,
1H), 2,10-2,00 (m, 1H) , 1, 90-1,72 (m, 3H) , 1,70-1, 50 (m,
3H), 1,44 (s, 9H), 1,28 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,08-0,90 (m, 9H) .
Příprava hydrochloridové soli (L)-prolinátu Kryptofycinu 55 (17') (LSN 382927) . _
Do roztoku sloučeniny 16' (11 mg, 0,012 mmolů) v 122 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (15 μΐ 0,061 mmolů). Po míchání po dobu 5 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 10 mg (100%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky:
500 MHz 4H NMR (MeOH-dJ δ 7,77 (dd, 1H, J = 9,4, 2,3 Hz),
7,48-7,42 (m, 2H), 7,39-7,35 (m, 3H) , 7,31 (d, 1H, J = 2,2
Hz) , 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,2 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4
Hz) , 6, 68 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,8 Hz), 5, 98 (dd, 1H, J =
15, 1,4 Hz), 5,52 (d, 1H, J = = 9,8 Hz) , 5,18 (d , 1H, J = 9,8
Hz), 5,18-5,14 (m, 1H), 4,18 (t, 1H, J = 10 Hz) , 4 , 52 (dd,
1H, J = 11, 3,9 Hz), 3,99 (t, 1H, J = 7,3 Hz: I , 3,87 (s, 3H) ,
·
- 307
3,48 (dd, 1H, J = 14, 9,7 Hz), 3,28-3,12 (m, 4H), 2,82- 2,73 (m, 3Hj , 2,42-2,34 (m, 2H) , 2,09-1,79 (m, 6H), 1,24 (s, 3H),
1,88 (s, 3H), 1,16 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,07 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,2 Hz).
Příprava N-t-Boc-glycinátu Kryptofycinů 55 (18') (LSN
379403). Do roztoku sloučeniny 1' ( 118 mg, 3,167 mmolů), Nt-Boc-glycinu (44 mg, 0,251 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (2,0 mg, 0,0167 mmolů) v 490 μΐ bezvodého methylenchlorid byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3dicyklohexylkarbodiimidu (52 mg, 0,251 mmolů) v 67 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 50 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 1 ml) , míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát-hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (19 g siiikagelu pro mžikovou chromatografií, 3:1/ethylacetát-hexany) poskytla 138 mg (96%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) 57,34 (s, 5H) , 7,24 (d, 1H, J = 2,0
Hz), 7,23-7,19 (m, 1H), 7,10 (dd, 1H, J= 8,4, 2,0 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6, 79-6, 70 (m, 1H) , 5,77 (d, 1H, J = 13 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,97 (dd, 1H, J = 11, 2,7 Hz), 4,89 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,83 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,79-4,12 (m, 1H) , 4,68 (br s, 1H) ,
3,91 (s, 3H) , 3, 66 (dd, , 1H, J = 18, 5,3 Hz), 3,42-3,35 (m,
2H) , 3,21 (dd , 1H, J = 13, 4,0 Hz), 3,17 (dd, 1H, J = 15,
5,1 Hz) , 3, 08 (dd, 1H, J = 15, 7,6 Hz), 2,66-2,57 (m, 2H) ,
2,47 -2,38 (m, 1H) , 1, 95 (ddd, 1H, J = 14, 12, 4,7 Hz), 1,85-
1,77 (m, 1H) , 1,75- 1,67 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,27 (s, 3H),
1,20 (S, 3H) , 1, 08 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 6,7
308 • ·
• ·
Hz) , 0,98 (d, 3H, J = 6,5 Hz) .
Příprava hydrochloridové soli glycinátu Kryptofycinů 55 (19') (LSN 365422).
Do roztoku sloučeniny 18' (122 mg, 0,141 mmolů) v 471 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (178 μΐ 0,707 mmolů). Po míchání po dobu 1 hodiny 20 minut byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 120 mg (99%, přepočteno pro 7 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,81 (dd, 1H, J = 8,5, 2,2 Hz), 7,46-7,41 (m, 2H) , 7,40-1,36 (m, 3H), 1,31 (d, 1H, J = 2,1
Hz) , 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4
Hz) , 6,70 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,7 Hz), 5,97 (dd, 1H, J =
15, 1,7 Hz ,), 5,55 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 5,18 (d, 1H, J = 9,9
Hz) , 5,14 (dd, 1H, J = 10, 2,8 Hz), 4,84 (t, 1H, J = to- ftz) ,
4,52 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,78 ( d, 1 H, J
= 18 Hz) , 3,50 (dd, 1H , J = 13, 9,8 Hz), 3,23 (d, 1H , J = 18
Hz) , 3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,13 (dd, 1H, J = 13,
2,4 Hz) , 2 ,80-2,69 (m, 3H), 2,41-2,32 (m, 1H), 1,99- 1,92 (m,
1H) , 1, 91- 1,81 (m, 2H) , 1,25 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,12 (d,
3H, J = 7, 0 Hz) , 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz) , 1,04 (d, 3H, 6,2
Hz) .
Příprava N-t-Boc-p-alaninátu Kryptofycinů 55 (20') (LSN
379404).
Do roztoku 1' (102 mg, 03145 mmolů), N-t-Boc-p-alaninu (41 mg, 0,217 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (18 mg, 0,145
- 309 ·· • · • · · « • · « • · « > ·· • · » · · · • · · · · ► · · ·· · ·« ·· • · <
·· ·· mmolů) v 400 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (45 mg, 0,217 mmolů) v 82 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 3,5 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetáthexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (21 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 potom 4:1/ethylacetát-hexany) poskytla 121 mg (95%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) 57,44-7,39 (m, 2H), 7,37-7,31 (m, 3H),
7,32 (d, 1H, J = 2,1 Hz) , 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz),
7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,72 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,7
Hz) , 5, 96 (dd, 1H, J = 15, 1,6 Hz), 5,51 (d, 1H, J = 9,8 Hz)
5,11 -5,06 (m, 1H) , 5,08 (d, 1H, J = 9,8 Hz) , 4,90-4,83 (m,
1H) , 4,50 (dd, . 1H, J = = 11, 3,6 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,52-3,46
(m, 1H) , 3,20 (dd, 1H, J = 14, 3 6 Hz), 3,13 (br d, 1H, J =
14 Hz), 3 , 05- 2, 92 (m, 2H), 2,79-2,63 (m, 3H), 2,45-2,37 (m,
1H) , 2,24 (dt, 1H, J = 16, 7,0 Hz), 2,08-1,99 (m, 1H), 1,96-
1,79 (m, 3H) , 1,43 (s, 9H), 1,25 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,12
(d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,02 (d, 3H,
J = 6,1 Hz).
Příprava hydrochloridové soli β-alaninátu Kryptofycinu 55 (21') (LSN 377718) .
Do roztoku sloučeniny 20' (119 mg, 0,136 mmolů) v 452 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (170 μΐ 0,679 mmolů). Po míchání po dobu 2 hodin 15 minut byla kalně bílá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 110 mg • · (96%, přepočteno pro 4 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny.
500 MHz *Η NMR (MeOH-d4) δ 7,80 (dd, 1H, J = 9,7, 2,3 Hz), 7,45-7,40 (m, 2H), 7,39-7,32 (m, 3H), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,68 (ddd, 1H, J = 15,
13, 3,8 Hz), 5,98 (dd, 1H, J = 15, 1,7 Hz), 5,48 (dd, 1H, J = 9,4 1,0 Hz), 5,15-5,11 (m, 1H) , 5,13 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4 82 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,51 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 3,90 (s, 3H) , 3,50 (dd, 1H, J = 14, 9,8 Hz), 3,20 (dd, 1H, J =
14, 3,7 Hz), 3,14 (dd, 1H, J = 14, 2,4 Hz), 2,85 (t, 2H, J = 1,0 Hz), 2,80-2,65 (m, 5H) , 2,54 (dt, 1H, J = 17, 7,4 Hz), 2,42- 2,33 (m, 1H), 2,22 (dt, 1H, J = 17, 6,7 Hz), 1,90-1,81 (m, 3H), 1,25 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H) , 1,13 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,08 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,2 Hz).
Příprava N-t-Boc-y-aminobutyrátu Kryptofycinu 55 (22') (LSN
379401).
Do roztoku sloučeniny 1' (48 mg, 0,068 mmolů)., N-t-Bno-4aminomáselné kyseliny (18 mg, 0,088 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (8 mg, 0,068 mmolů) v 150 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3dicyklohexyikarbodiimidu (18 mg, 0,088 mmolů) v 50 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 5 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 5 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát-hexany (3:1). Filtrát a přomývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 3:1/ethylacetát-hexany) poskytla 55 mg (90%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,38-7,32 (m, 5H), 7,24 (d, 1H, J = ··
311 ·· *· • · · · • · · · c · · · · · · • · ·· ··
1,9 Hz), 7,22-7,19 (m, 1H) , 7,10 (dd, 1H, J = 8,4, 1,9 Hz),
6,88 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,15 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,9 Hz), 5,78 (d, 1H, J = 15 Hz), 5, 60-5,55 (m, 1H) , 5,49 (dd, 1H, J = 9,8, 1,4 Hz), 4,96 (dd, 1H, J = 11, 3,0 Hz), 4,89 (t, 1H, J = 9,2 Hz), 4,81 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,78-4,70 (m,
1H) , 4,44 (br s, 1H) , 3,91 (s, 3H) , 3,40 (dd, 1H, J = 14, 8,1 Hz), 3,22 (dd, 1H, J = 14, 4,1 Hz), 3,22-3,15 (m, 1H) , 3,08 (dd, 1H, J = 14, 7,8 Hz), 2,89-2,82 (m, 2H), 2,67-2,56 (m, 2H), 2,47-2,38 (m, 1H) , 2,11-2,04 (m, 1H), 2,00-1,77 (m,
3H), 1,75-1, 67 (m, 1H) , 1,45 (8, 9H) , 1,50-1,40 (m, 2H) , 1,27 (3, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,09 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,98 (d, 3H, J = 6,6 Hz).
Příprava hydrochloridové soli γ-aminobutyrátu Kryptofycinu 55 (25') (LSN 368513).
Do roztoku sloučeniny 22' (53 mg, 0, 059 mmolů) v 297 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 1,0 M roztok chlorovodíku v diethyletheru (297 μΐ 0,297 mmolů). Výchozí materiál precipitoval ve formě bílé pasty, která byla znovu rozpuštěna s dalšími 150 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 hodin bylo přidáno dalších 59 μΐ (0,059 mmolů) roztoku chlorovodíku.
Míchání pokračovalo po dobu dalších 14 hodin a reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 49 mg (100%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (DMSO-d6) δ 8,49 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,72 (br s, 3H), 7,44-7,33 (m, 5H) , 7,32 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 7,29 (dd, 1H, J = 9,4, 2 6 Hz) 7,20 (dd, 1H, J = 8,5, 1,9 Hz),
312 φφ ·· φ · φ φ φφφφ • · · » · • · · · ·· ·· • Φ φ φ * · φ φφφ • · φφφφ φ φ · • φ · ·· 99
Φ Φ · ·
9 9 9
999 999
9
99
7,06 (d, 1Η, J = 8,5 Ηζ), 6,48 (ddd, 1Η, J = 15, 13, 3,9 Hz), 5,87 (d, 1Η, J = 15 Hz), 5,37 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 5,33 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 5,04-5,01 (m, 1H), 4,73 (t, 1H, J = 11 Hz), 4,25 (ddd, 1H, J = 12, 9,8, 3,5 Hz), 3,82 (s, 3H) , 3,40-3,30 (m, 1H), 3,07-3,01 (m, 2H) , 2,72 (dd, 1H, J = 14, 12 Hz), 2,65-2,47 (m, 4H) , 2,38-2,28 (m, 1H), 2,21 (dt, 1H,
J = 17, 7,5 Hz), 1,97 (dt, 1H, J = 17, 1,5 Hz), 1,50-1,70 (m, 3H), 1,54-1,46 (m, 2H), 1,17 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,01 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 0,99 (d, 3H, J = 5,8 Hz), 0,95 (d, 3H, J = 5,8 Hz) .
Příprava N-t-Boc-(L)-alaninátu Kryptofycinu 55 (26') (LSN
379405).
Do roztoku 1' (103 mg, 0,146 mmolů), N-t-Boc-(L)-alaninu (41 mg, 0,219 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (18 mg, 0,146 mmolů) v 400 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (45 mg, 0,219 mmolů) v 87 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 5 hodin 50 minut byla kalně bílá reakční směs zpracována dalšími 5,5 mg (0,029 mmolů) N-t-Boc-(L)-alaninu, 6,0 mg (0,029 mmolů) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a několika krystaly 4-dimethylaminopyridinu. Po míchání další 1 hodinu byla reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (22 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 1,5:1 potom 2:1 potom 4:1/ethylacetáthexany) poskytla 96 mg (75%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) 57,35-7,30 (m, 5H), 7,26-7,21 (m, 2H) , • · e ·
7,10 (dd, 1H, J = 8,4, 1,9 Hz) 6,88 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,76 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,2 Hz), 5,77 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,52 (d, 1H, 7,6 Hz), 5,44 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,98 (dd,
1H, J = 11, 2,5 Hz), 4,85-4,81 (m, 2H), 4,75 (q, 1H, J = 6.8 Hz), 4,56 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 4,01-3,96 (m, 1H) , 3,91 (s, 3H), 3,41 (dd, 1H, J = 13, 8,3 Hz), 3,20 (dd, 1H, J = 13,
4,0 Hz), 3,16 (dd, 1H, J = 15, 5,9 Hz), 3,08 (dd, 1H, J =
15, 7,6 Hz), 2,65-2,57 (m, 2H), 2,40-2,31 (m, 1H), 2,02-1,96 (m, 1H), 1,87-1, 73 (m, 2H), 1,43 (s, 9H) , 1,27 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H), 1,11-1,02 (m, 9H), 0,99 (d, 3H, J= 6,3 Hz).
Příprava hydrochloridové soli (L)-alaninátu Kryptofycinu 55 (28') (LSN 377719).
Do roztoku 26' (95 mg, 0,108 mmolů) v 361 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (135 μΐ 0,542 mmolů). Po míchání po dobu 2,5 hodin byla kalně bílá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 90 mg (96%, přepočteno pro 6 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 8,54 (d, 1H, 7,6 Hz), 7,81 (br d,
1H, J = 9,7 Hz), 7,46-7,44 (m, 2H), 7,39-7,37 (m, 3H) , 7,32
(d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz) , 7,01
(d, 1H, J = 2,3 Hz), 6,69 (ddd, 1H, J = 15, 11, 3, 7 Hz) ,
5,99 (d, 1H, 15 Hz), 5,55 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 5,20 (d, 1H,
J = 9,8 Hz), 5,35 (dd, 1H, 11, 2,7 Hz) , 4,78 (t, 1H, J = 11
Hz), 4,53-4,50 (m, 1H), 3,87 (s, 3H) , 3 ,65 (q, 1H , J = 7,3
Hz), 3,50 (dd, 1H, J = 13, 9,8 Hz) , 3,: 20 (dd, 1H , J = 14,
3,5 Hz), 3,14 (br d, 1H, J = 13 Hz) , 2,81-2,71 (m, 3H) ,
2,41-2,34 (m, 1H) , 1,98-1, 93 (m, 1H) , 1,88-1,82 (m, 2H),
1,41 (d, 3H, J = 7,3 Hz), 1,25 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H), 1,13
• ♦ · · ·
- 314 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,04 (d, 3H, 6, 0 Hz) .
Příprava N-t-Boc-(D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (29') (LSN
382426).
Do roztoku sloučeniny 1' (25 mg, 0,035 mmolů), N-t-Boc-(D)alaninu (10 mg, 0,053 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,4 mg, 0,0035 mmolů) v 130 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (11 mg, 0,053 mmolů) v 47 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 5,5 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografíe (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1/ethylacetát-hexany) poskytla 26 mg (83%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,49-7,29 (m, 5H) , 7,24 (d, 1H, J =
2,0 Hz), 7,22-7,18 (m, 1H) , 7,09 (dd, 1H, 8,4, 2,0 Hz), 6,87
(d, 1H, J = 8,4 Hz ), 6,16 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,4, Hz),
5,77 (d, 1H, 15 Hz) , 5,56 (d, 1H, J = 9, 9 Hz) , 5, 48 (d, 1H,
J = 7,7 Hz) , 5, 01 (, dd, 1H, J = 10, 2,6 Hz) , 4, 91 ( t, 1H, J =
9,4 Hz), 4,84 (d, 1 H, J = 9,9 Hz), 4,81-4 ,73 (m, 2H), 3,99-
3, 93 (m, 1H), 3,91 (s, 3H) , 3,39 (dd, 1H, J -- = 13 , 8,0 Hz),
3,22 (dd, 1H, J = 13, 3,6 Hz), 3,17 (dd, , 1H , J = 14, 5,0
Hz) , 3,08 (dd, 1H, J = 14 Hz), 2,68-2,58 (m, 2H) , 2,42-2,35
(m, 1H), 2,04-1,94 (m, 1H), 1,81-1,50 (m, 2H) , 1,4 2 (s, 9H),
1,27 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) , 1,09 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,04
(d, 3H, J = 6,4 Hz) , 0,99 (d, 3H, J = 6,3 Hz) , 0, 65 (d, 3H,
J = 6,8 Hz) .
• · • · • ·
- 315 Příprava hydrochloridové soli (D)-alaninátu Kryptofycinu 55 (30') (LSN 382425).
Do roztoku 29' (24 mg, 0,027 mmolů) v 274 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (34 μΐ 0,137 mmolů). Po míchání po dobu 3,5 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 24 mg (100%, přepočteno pro 8 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny.
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,79 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 7,47-
7,40 (m, 2H), 7,40-7,36 (m, 3H) , 7,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz) ,
7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz) , 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz) ,
6,71 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,7 Hz), 5,98 (dd, 1H, J = 15,
1,6 Hz), 5,65 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,20 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,17 (dd, 1H, J = 11, 2,5 Hz), 4,88-4,78 (m, 1H), 4,53 (dd, 1H, J = 11, 3,7 Hz), 3,95 (q, 1H, J = 7,2 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,51 (dd, J = 13, 9,8 Hz), 3,20 (dd, 1H, -J—- 14, 3,6
Hz), 3,14 (dd, 1H, J = 13, 2,3 Hz), 2,81-2,74 (m, 3H), 2,412,34 (m, 1H), 2,07-1,99 (m, 1H) , 1,96-1,84 (m 2H), 1,26 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,15 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,09 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 1,05 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 0,80 (d, 3H, J - 7,4
Hz) .
Příprava Να-Νε-di-t-Boc-(L)-lysinátu Kryptofycinu 55 (31') (LSN 379406).
Do roztoku 1' (105 mg, 0,149 mmolů), Να-Νε-di-t-Boc-(L)lysinu (67 mg, 0,193 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (18 mg, 0,149 mmolů) v 400 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (40 • · mg, 0,193 mmolů) v 96 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 hodin byla kalně bílá reakční směs zpracovánu dalšími 10 mg (0,030 mmolů) Να-Νε-di-t-Boc-(L)-lysinu a 6,1 mg (0,030 mmolů) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu v roztoku v 100 μΐ methylenchloridu. Po míchání další 1 hodinu byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 1 ml) , míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bílou pěnu, která byla znovu vystavena výše uvedeným podmínkám použitím 34 mg (0,097 mmolů) Να-Νε-di-t-Boc-(L)lysinu, 20 mg (0,097 mmolů) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a 9,1 mg (0,075 mmolů) 4-dimethylaminopyridinu. Po míchání po dobu 1,5 hodin byla reakční směs zpracovávána výše uvedeným způsobem a tím se získala surová bílá pěna. Chromatografie (21 g siíikagelu pro mžikovou čhromatografií, 1:1 potom 4:1/ethylacetát-hexany) poskytla 112 mg (73%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny: -500 MHz XH NMR (MeOH-d4) 7,42-7,37 (m, 2H) , 7,36-7,29 (m,
3H), 7,27 (br s, 1H) , 7,16 (br d, 1H, J = B, 5 Hz), 6,97 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,72 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,5 Hz), 5,92 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 11 Hz), 5,11-5,04 (m, 2H), 4,84 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,48 (dd, 1H, J = 11, 3,6 Hz), 3,84 (s, 3H), 3-75 (br s, 1H), 3,50-3,43 (m, 1H), 3,17 (dd,
1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,11 (d, 1H, J = 14 Hz), 2,97-2,91 (m, 2H), 2,16-2,58 (m, 3H) , 2,36-2,27 (m, 1H) , 1, 98-1,80 (m,
3H), 1,48-1,38 (m, 2H) , 1,43 (s, 9H) , 1,40 (s, 9H) , 1,351,25 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,15-1,09 (m, 2H),
1,07 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 1,01 (d,
3H, J = 6,1 Hz) .
- 317 • · · • · · · • · · · · • « · o · ·
Příprava dihydrochloridové soli (L)-lysinátu Kryptofycinu 55 (32') (LSN 377562).
Do roztoku sloučeniny 31' (101 mg, 0,103 mmolů) v 345 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (155 μΐ 0,621 mmolů). Po míchání po dobu 4 hodin byla kalně bílá reakční směs filtrována. Shromážděná bílá pevná látka byla promývána methylenchloridem (2x1 ml) a sušena za sníženého tlaku při teplotě okolí a tím se získalo 87 mg (93%) sloučeniny z názvu:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 8,61 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,47- 7,44 (m, 2H), 7,40-7,38 (m, 3H), 7,31
(d, 1H, J = 2,2 Hz) , 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,2 Hz) , 7,00
(d, 1H, J = 8,4 Hz) , 6, 63 (ddd, 1H, J = = 15, 13, 4,0 Hz) ,
6,00 (dd, 1H, J = 15 , 1,6 Hz) , 5,55 (d, 1H, J = 9,8 Hz) ,
5,20 (d, 1H, J = = 9,8 Hz) , 5,15 (dd, 1H, J = 10, 2,9 Hz) ,
4,68 LLr_1H, J = = 11 Hz) , ‘ 1,55-4 ,49 (m, 1H -)-^-3,87 (s, 3H) ,
3,79 (t, 1H, J -- = 5,6 Hz) , 3,52 (dd, 1H, J = 14, 9,9 Hz) ,
3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,13 (dd, 1H, J = 13, 2,4
Hz), 3, 06-2,98 (m, 1H) , 2,94- 2,87 (m, 1H) , 2,85-2,74 (m,
3H), 2,45-2,38 (m, 1H) , 1, 98-1,76 (m, 5H) , 1,71-1,64 (m,
2H), 1,39-1,30 (m, 2H) , 1,25 (s, 3H) , 1,18 (d, 3H, J = 8,2
Hz), 1,17 (s, 3H), l,0B (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,05 (d, 3H, J = 6,1Hz).
Příprava Να-Νε-di-t-Boc-(D)-lysinátu Kryptofycinu 55 (33') (LSN 382504).
Do roztoku sloučeniny 1' (24 mg, 0,035 mmolů), Να-Νε-di-tBoc-(D)-lysinu 247 mg, 0,069 mmolů) a 4• ·
- 318 dimethylaminopyridinu (0,4 mg, 0,0035 mmolů) v 140 μί bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (14 mg, 0,069 mmolů) v 30 μί methylenchloridu. Po míchání po dobu 7 0 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromatografíe (15 g silikageiu pro mžikovou chromatografií, 2:1/ethylacetát-hexany) poskytla 30 mg (87%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) 57,46-7,40 (m, 2H) , 7,39-7,31 (m,
3H), 7,31 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 1,8
Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (ddd, 1H, J = 16, 11,
3,7 Hz), 5,93 (d, 1H, J = 16 Hz), 5,59 (d, 1H, J = 10 Hz),
5,13-5,09 (m, 2H), 4,92 (t, 1H, J = 9,8 Hz), 4,52 (dd, 1H, J = 11, 3,6 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,79-3,15 (m, 1H), 3,48 (d, 1H, J = 13 Hz), 3,21 (dd, 1H, J = 14, 3,7 Hz), 3,12 (d, 1H, ,L= 13 Hz), 2,97-2,91 (m, 2H) , 2,80-2,62 (m, 3H), 2,41-2,32 (m, 1H), 1,98-1,82 (m, 3H) , 1,48-1,38 (m, 2H) , 1,46 (s, 9H) ,
1,42 (s, 9H), 1,35-1,20 (m, 2H), 1,25 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,15-0,09 (m, 2H), 1,14 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,07 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 6,0 Hz).
Příprava dihydrochloridové soli (D)-lysinátu Kryptofycinu 55 (34') (LSN 377503) .
Do roztoku sloučeniny 33' (28 mg, 0,027 mmolů) v 181 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (41 μΐ 0,162 mmolů). Po míchání po dobu 5,5 hodin byla kalně bílá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 25 mg (96%, přepočteno
319 ·« »4 ·· · ·· ·· ··· « · · · ··· « «··· · ··· · ·· A • ·· ··· ······ · · · ··· pro 4,5 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky:
500 MHz *H NMR (MeOH-d4) δ 8,47 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,76 (dd, 1H, J = 9,6, 2,1 Hz), 7,47-7,36 (m, 5H), 7,28 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 6,98 (d, 1H, J =
8,4 Hz), 6, 68 (ddd, 1H, 15, 11, 3,7 Hz), 5,95 (dd, 1H, J =
15, 1,1 Hz), 5,67 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,21 (d, 1H, J = 10
Hz), 5,14 (dd, 1H, J = 10, 2,5 Hz), 4,83-4,77 (m, 1H), 4,52-
4,49 (m, 1H) , 3,92 (t, 1H, J = 6,1 Hz), 3,84 (s, 3H) , 3,47
(dd, 1H, J = 14, 9,8 Hz), 3,18 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz),
3,12 (dd, 1H, J = 14, 2,2 Hz), 2,83 (t, 2H, J = 7,6 Hz),
2,78-2,70 (m, 3H), 2,38-2,30 (m, 1H) , 2,02-1,82 (m, 3H) ,
1,52-1,43 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,22-1,00 (m, 4H), 1,18 (s,
3H), 1,13 (d, 3H, J = 8,2 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,2 Hz),
1,02 (d, 3H, J = 6,1 Hz).
Příprava N-t-Boc-y-terc.-butylester-(L)-glutamátu
Kryptofycinu 55 (35') (LSN 382366Λ_
Do roztoku sloučeniny 1' (27 mg, 0,038 mmolů), y-terc.butylesteru N-t-Boc-(L)-glutamové kyseliny (17 mg, 0,057 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,5 mg, 0,0038 mmolů) v 150 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (12 mg, 0,057 mmolů) v 41 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 60 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetáthexany (2:1, 2 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacétát:hexany (2:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 1:1 ethylacetáthexany) poskytla 28 mg (74%) sloučeniny z názvu ve formě
320 bílé pěny;
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,39-7,29 (m, 5H) , 7,24 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 7,22-7,18 (m, 1H) , 7,10 (dd, 1H, J = 8,5, 1,9 Hz), 6.B7 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,76 (ddd, 1H, J = 15, 13, 4,5 Hz), 5,78 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,65 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,43
(d, 1H, J = 9,7 Hz) , 4,99 (dd, 1H, J = 10, 2,7 Hz), 4 ,90-
4.80 (m, 1H), 4,83 (d , 1H, J = 9,7 Hz), 4,69-4,61 (m, 1H) ,
4,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,01-3,96 (m, 1H), 3,90 (s, 3H) ,
3, 40 (dd, 1H, J = 13, 8,0 Hz), 3,24 (dd, 1H, J = 13, 4,1
Hz) , 3,18 (dd, 1H, J = 15, 5,0 Hz), 3,11 (dd, 1H, J = 15,
7,9 Hz) , 2,65-2,57 (m, 2H), 2,39-2,30 i (m, 1H), 2,14-2,09 (m,
2H) , 2,00-1, 92 (m, 1H) , 1,87-1,73 (m, 3H), 1,60-1,50 (m,
1H) , 1,44 (s, 18H), 1, 27 (s, 3H), 1,2 :i (s, 3H), 1,08 (d, 3H,
J = 7,0 Hz) , 1,05 (d, 3H, J = 6,4 Hz ) , 1,00 (d, 3H, J = 6, 3
Hz) .
Příprava hydrochloridové soli (L)-α-glutamátu Kryptofycinů (36') (LSN 382367). ___
Do roztoku sloučeniny 35' (23 mg, 0, 023 mmolů) v 232 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (29 μΐ, 0,116 mmolů). Po míchání po dobu 8,5 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 20 mg (97%, přepočteno pro 3 % hmot. dioxanu) Sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) 7,79 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,50- 7,36
(m, 5H) , 7 ,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,20 (dd, 1H, J = 8,6,
2,0 Hz) , 7 ,01 (d, 1H, J = 8,6 Hz) , 6,75- 6,65 (m, 1H) , 5, 98
(d, 1H, 15 Hz) , 5,57 (d, 1H, J = 9,7 Hz) , 5,20 (d, 1H, J =
9,7 Hz) , 5 ,15 (dd, 1H, J = 11, 3,0 Hz), 4,90-4,80 (m, 1H) ,
4,52 (dd 1 1H, J = 11, 3,7 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,80-3,66 (m,
321
1H), 3,49 (dd, 1H, J = 13, 10 Hz), 3,21 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,15 (dd, 1H, J = 14, 2,3 Hz), 2,82-2,72 (m, 3H), 2,412,30 (m, 3H), 2,05-1,81 (m, 5H), 1,25 (s, 3H) , 1,20 (s, 3H) , 1,15 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,07 (d, 3H, J = 6,2 Hz), 1,05 (d, 3H, J = 6,1 Hz) .
Příprava N-t-Boc-p-terc.-butylester-(L)-aspartátu
Kryptofycinu 55 (37') (LSN 382501) a N-t-Boc-p-terc.butylester-(D)-aspartátu kryptofycinu 55 (39') (LSN 387040). Do roztoku sloučeniny 1' (176 mg, 0,249 mmolů), β-terc.butylesteru N-t-Boc-(L)-aspartové kyseliny (144 mg, 0,499 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (2,0 mg, 0,066 mmolů) v 1,0 ml bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (103 mg, 0,499 mmolů) v 200 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 45 minut byla kalně bílá reakční směs zpracována 88 mg celitu a zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 2 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes- vrstvu celitu, promývání směsi ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromatografie (30 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 ethylacetát-hexany) poskytla čistou sloučeninu 37' (nižší Rf) spolu se smíšenými frakcemi. Smíšené frakce byly chromatografovány (25 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 1:1 potom 2:1 potom 3:1 ethylacetát-hexany) což dalo čistější 37' spolu s čistou sloučeninou 39' (vyšší Rf) . Všechny frakce obsahující čistou sloučeninu 37' byly sloučeny a tím bylo získáno 149 mg (61%) ve formě bílé pěny, zatímco všechny frakce obsahující čistou sloučeninu 39' byly sloučeny a tím bylo získáno 56 mg (23%) ve formě bílé pěny. 500 MHz XH NMR (CDC13) data pro 37': δ 7,39-7,30 (m, 5H) , • 9 99
9
7,24 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 1,24-7,18 (m, 1H), 7,09 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz), 6,88 (d, 1H, J = B,4 Hz), 6,76 (ddd, 1H, J =
15, 13, 4,3 Hz), 5,75 (d, 1H, 15 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 7,9
Hz) , 5,46 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,01-4,98 (m, 2H), 4,93 (t,
1H, J = 9,9 Hz), 4,85 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,78-4,71 (m,
1H) , 4,17-4,10 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,41 (dd, 1H, J = 13,
8,2 Hz) , 3,22 (dd, 1H, J = 13, 3,9 Hz), 3,17 (dd, 1H, J =
14, 5,1 Hz), 3,09 (dd, 1H, d = 14, 7,7 Hz), 2,61-2,50 (m,
4H) , 2,36-2,28 (m, 1H), 2 ,02-1,97 (m, 1H), 1,83-1,76 (m,
2H) , 1,45 (s, 9H), 1,41 (s, 9H) , 1,28 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) ,
1,06 -1,01 (m, 6H), 0,99 (d, 3H, J = 6,2 Hz).
500 MHz XH NMR (CDC13) data pro 39': δ 7,39- 7,30 (m, 5H) ,
7,24 (d, 1H, J = 2,0 Hz) , 7 ,24-7,18 (m, 1H), 7,09 (dd, 1H, J
= 8, 4, 2,0 Hz), 6,88 (d, 1H , J = 8,4 Hz), 6,73 (ddd, 1H, J =
15, 13, 4,3 Hz), 5,74 (d, 1H, 15 Hz), 5,41 (d, 1H, J = 7,9
Hz) , 5,42 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 5,29 (d, 1H, J = 9,0 Hz) ,
4,98 (dd, 1H, J = 10, 3,0 Hz), 4,92 (t, 1H, J = 9,6 Hz) ,
4,85 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 4,77-4,71 (m, 1H), 4,18-4,12 (m,
1H) , 3,91 (s, 3H), 3,39 (dd, 1H, J = 13, 8,1 Hz), 3,21 (dd,
1H, J = 13, 4,0 Hz), 3,16 (dd, 1H, J = 14, 5,2 Hz), 3,07 (dd, 1H, J = 14, 7,6 Hz), 2,63-2,52 (m, 2H), 2,45 (dd, 1H, J = 17, 5,8 Hz), 2,36-2,26 (m, 1H), 2,22 (dd, 1H, d = 17, 4,5 Hz), 1,99-1, 90 (m, 1H) , 1,86-1,69 (m, 2H) , 1,47 (s, 9H) , 1,43 (s, 9H), 1,25 (s, 3H) , 1,19 (s, 3H) , 1,11 (d, 3H, J =
7,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 6,5 Hz), 0,99 (d, 3H, J = 6,4 Hz).
Příprava hydrochloridové soli (L)-aspartátu Kryptofycinů 55 (38') (LSN 382502).
Do roztoku sloučeniny 37' (146 mg, 0,149 mmolů) v 498 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (374 μΐ 1,49 mmolů). Po míchání
323 • · po dobu 19 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 131 mg (100%, přepočteno pro 2 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz r H NMR (Me< OH-d4) δ 7,79 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7 ,45-
7,36 (m, 5H) , 7,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,20 (dd, 1H, J =
8,6, 2,0 ,, z) , 7,01 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 6,75 (ddd, 1H, J =
15, 13, 3, ,7 Hz; 1 , 5, 96 (dd, 1H, 15, 1,8 Hz), 5,54 (d, 1H, J =
10 H z) , 5 ,17 ( d, 1] H, J = 10 Hz), 5,14 (dd, 1H, J = 11, 2,1
Hz) , 4,89 (t, 1H, J = 11 1Hz), 4,52 (dd, 1H, J = 11, 3,7
Hz) , 3,87 (s, 3H) , 3,55 (t, 1H, J = 4,4 Hz), 3,52-3,47 (m,
1H) , 3,21 (dd, 1H, J = 14, 3,6 Hz), 3,13 (d, 1H, J = 14 Hz) ,
2,99 (dd, 1H, J = 18, 5,0 Hz), 2,83 (dd, 1H, J = 18, 3,9
Hz) , 2,81 -2,68 (m, 3H), 2,35- 2,28 (m, 1H) , 2,02-1,84 (m,
3H) , 1,26 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,08-1,02 (m, 9H).
Příprava hydrochloridové soli (D)-aspartátu Kryptofycinu 55 (40') (LSN 381039).
Do roztoku 39' (53 mg, 0, 054 mmolů) v 271 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (136 μΐ 0,542 mmolů). Po míchání po dobu 14 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 47 mg (94%, přepočteno pro 6 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,79 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,45-
7,36 (m, 5H), 7,31 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,20 (dd, 1H, J =
8,6, 2,0 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,6 Hz) , 6,71 (ddd, 1H, J =
15, 13, 3,7 Hz), 5,96 (dd, 1H, 15, 1,8 Hz), 5,63 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,19 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,15 (dd, 1H, J = 11, 2,1 Hz), 4.B6-4,80 (m, 1H), 4,55- 4,50 (m, 1H) , 4,24 (dd, 1H, J • · = 8,4, 4,0 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,50 (dd, ÍH, J = 13, 9,7 Hz), 3,21 (dd, ÍH, J = 14, 3,6 Hz), 3,14 (dd, ÍH, J = 13, 2,5
Hz), 2,80-2,70 (m, 3H), 2,40- 2,32 (m, ÍH) , 2,21 (dd, ÍH, J = 18, 4,0 Hz), 2,09-1, 97 (m, 2H) , 1, 92-1,84 (m, 2H) , 1,26 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,15 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,08 (d,
3H, J = 6,1 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,0 Hz).
Příprava N-t-Boc-a-terc.-butylester-(L)-glutamátu
Kryptofycinu 55 (41') (LSN 382572).
Do roztoku 1' (23 mg, 0,033 mmolů), α-terc.-butylesteru N-tBoc-(L)-glutamové kyseliny (15 mg, 0,049 mmolů) a 4dimethylaminopyridinu (0,4 mg, 0,0033 mmolů) v 120 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (10 mg, 0,049 mmolů) v 40 μί methylenchloridu. Po míchání po dobu 45 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromatografíe (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 ethylacetát-hexany) poskytla 24 mg (75%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (CDC13) δ 7,39-7,30 (m, 5H), 7,24 (d, ÍH, J =
2,1 Hz), 7,20-7,16 (m, ÍH), 7,09 (dd, ÍH, J = 8,4, 2,1 Hz), 6,87 (d, ÍH, J = 8,4 Hz), 6,74 (ddd, ÍH, J = 15, 13, 4,6 Hz), 5,78 (d, ÍH, J = 15 Hz)’, 5,55 (br d, ÍH, J = 6,4 Hz), 5,46 (dd, ÍH, J = 9,6, 1,0 Hz), 4,96 (dd, ÍH, J = 11, 3,0
Hz), 4,91-4,80 (m, 2H), 4,83 (d, ÍH, J = 9,6 Hz), 4,72 (br s, ÍH), 3,99 (br s, ÍH), 3,91 (s, 3H), 3,39 (dd, ÍH, J = 13, 7,9 Hz), 3,24 (dd, ÍH, J = 13, 3,9 Hz), 3,18 (dd, ÍH, J =
14, 4,5 Hz), 3,09 (dd, ÍH, J = 14, 7,8 Hz), 2,63-2,55 (m, • ·
2H) , 2,44-2,37 (m, 1H), 2,10-1,92 (m, 3H), 1,85-1,78 (m,
1H) , 1,76-1,61 (m, 3H), 1,46 (s, 9H) , 1,45 (s, 9H), 1,27 (s,
3H) , 1,20 (s, 3H) , 1,08 (d, 3H, J = 7,0 Hz) , 1,04 (d, 3H, J
= 6, 6Hz), 0,98 (d, 3H, J = 6,4 Hz).
Příprava hydrochloridové soli (L) -γ-glutamátu Kryptofycinu 55 (42') (LSN 382514).
Do roztoku 41' (21 mg, 0,021 mmolů) v 212 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (53 μΐ 0,212 mmolů). Po míchání po dobu 23,5 hodin byla reakční směs zředěna methanolem a nechána procházet přes vrstvu celitu. Po koncentraci za sníženého tlaku se získalo 20 mg (100 %, přepočteno pro 6 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,79 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,507,29 (m, 6H), 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,66 (ddd, 1H, J= 15, 13, 3,7 Hz), 5,97 (dd, 1H,
Hz), 5,52 (dd, 1H, J = 10, 0,8-feT, 5,14 (dd, 1H, J
= 11, , 3,0 Hz), 5,1 0 (d, 1H , J = 10 Hz) , 4,90-4.80 (m, 1H) ,
4,51 (dd, 1H, J = 11, 3,1 Hz), 3,90-3,80 (m, 1H), 3,87 (s,
3H) , 3,50 (dd, 1H, J = 13, 10 Hz), 3,19 (dd, 1H, J = 14, 3,7
Hz) , 3,13 (dd, 1H, J = 14, 2,3 Hz), 2,81-2,67 (m, 3H), 2 ,41-
2,32 (m, 2 H) , 2,15- -2,06 (m, 1H), 1,97-1,79 (m, 5H), 1,25 (s,
3H) , 1,19 (s, 3H), 1,13 (d, 3H, J = 7,1 Hz), 1,08 (d, 3 H, J
= 5,S ) Hz), 1,04 (d, 3H, J = 5,8 Hz) .
Příprava Ν,N'-di-t-Boc-(S)-2,3-diaminopropionátu Kryptofycinu 55 (43') (LSN 3B2765).
Do roztoku sloučeniny 1' (21 mg, 0,030 mmolů), N,N'-di-tBoc-(S) -2,3-diaminopropionové kyseliny (18 mg, 0,060 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,3 mg, 0,0030 mmolů) v 110 μΐ • ·
- 326 • ··· · ’ • · · · · « • · · · « «· ·· bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (12 mg, 0,060 mmolů) v 39 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 70 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromatografie (15 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 2:1 ethylacetát-hexany) poskytla 24 mg (80%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,49-7,40 (m, 2H) , 7,38-7,30 (m, 4H), 7,19 (dd, 1H, J = 8,5, 1,9 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 8,5
Hz), 6,74 (ddd, 1H, J = 16, 11, 3,5 Hz), 5,95 (d, 1H, d = 16
Hz), 5,49 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,16-5,08 (m, 2H), 4,90-4,80 (m, 1H), 4,51 (dd, 1H, d = 11, 3,7 Hz), 4,06-4,10 (m, 1H) ,
3,81 (s, 3H), 3,48 (d, 1H, J = 13 Hz), 3,19 (dd, 1H, J = 14,
3,7 Hz), 3,14 (d, 1H, J = 13 Hz), 3,03 (dd, 1H, J = 14, 4,2
Hz), 2, 94-2,87 (m, 1H) , 2,80- 2,59 (m, 3H) , 2.39-2.30 (m.
1H), 1,98-1,81 (m, 3H) , 1,43 (s, 18H) , 1,25 (s, 3H) , 1,21 (s, 3H), 1,10 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,07 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 5,8 Hz) .
Příprava dihydrochloridové soli (S)-2,3-diaminopropionátu Kryptofycinu 55 (44') (LSN 382764).
Do roztoku sloučeniny 43' (21 mg, 0,021 mmolů) v 211 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (42 μΐ 0,169 mmolů). Po míchání po dobu 5 hodin byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 18,5 mg (100%, přepočteno pro 3 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky: 500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,50-7,39 (m, 5H), 7,31 (d, 1H, J • ·
327 • · · « ·· ··
= 2, 0 Hz) , 7,20 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz) , 7,01 (d, 1H, J =
8,4 Hz) , 6,68 (ddd, 1H, J = 15, 11, 3,8 Hz), 5,99 (dd, 1H,
15, 1,7 H z), 5,56 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 5, 24 (d, 1H, J = 9,6
Hz) 5,16 (dd, 1H, J = 10, 3,1 Hz), 4,90- 4,80 (m, 1H) , 4,51
(dd, 1H, J = 11, 3,8 Hz), 4,04-4,00 (m, 1H), 3,87 (s, 3H) ,
3,50 -3,45 (m, 1H), 3,26 (dd, 1H, J = 14, 4,0 Hz), 3,22- 3,12
(m, 3H) , 2,81-2,75 (m, 3H), 2,42-2,32 (m, 1H), 1,98-1,78 (m,
3H) , 1,25 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,22-1,16 (m, 3H), 1,07 (d,
3H, J = 6,4 Hz), 1,04 (d, 3H, J = 6,3 Hz).
Příprava N-t-Boc-(L)-serinátu Kryptofycinu 55 (45') (LSN
384340).
Do roztoku sloučeniny 1' (38 mg, 0,053 mmolů), N-t-Boc-Oterc.-butyldimethylsilyl(L)-šeřinu11 (51 mg, 0,160 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,6 mg, 0,0053 mmolů) v 200 μΐ bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (33 mg, 0,160 mmolů) v 69 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 4 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (2:1, 1 ml), míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (2:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej, který byl použit přímo v následujícím kroku. Do roztoku surového silyletheru (54 mg, 0, 054 mmolů) v 268 μΐ tetrahydrofuranu bylo při teplotě okolí přidáno 268 μί zásobního roztoku fluorovodíku-pyridinu (připraven z 0,5 g HF-pyridinu (Aldrich), 4 ml tetrahydrofuranu a 1 ml pyridinu). Po míchání po dobu 4 hodin bylo přidáno dalších 67 μΐ zásobního roztoku HFpyridinu. Po míchání po dobu 30 minut byla reakční směs zpracována 0,6 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu
- 328 ·· • · • ··· • · « • · « ·· ·· • · · • · · • · · · · · • · • · · · sodného a promývána ethylacetátem (1 ml x 3). Sloučené organické složky byly sušeny (Na2SO4) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na bledě žlutou pěnu. Chromatografie (16 g SiO2, vymývání směsí 3:1 a potom 6:1 ethylacetát-hexany) poskytlo 26 mg (44%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,79 (dd, 1H, J = 9,5, 2 4 Hz), 7,45-7,38 (m, 2H) , 7,37-7,29 (m, 3H) , 7,29 (d, 1H, d = 2,0
Hz), 7,18 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0 Hz), 6,99 (d, 1H, J = 8,4
Hz), 6,72 (ddd, 1H, J = 15, 13, 3,7 Hz), 5,95 (dd, 1H, J = 15, 1 6 Hz), 5,53 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 5,12-5,08 (m, 2H) ,
4,94 (t, 1H, J = 10 Hz), 4 52 (dd, 1H, J = 12, 36 Hz), 3,92 (t, 1H, J = 4,6 Hz), 3,85 (s, 3H) , 3, 52-3, 46 (m, 3H) , 3,20 (dd, 1H, J = 14, 3,5 Hz), 3,14 (dd, 1H, J = 13, 3,0 Hz),
2,75 (dd, 1H, d = 14, 11 Hz), 2,73-2,66 (m, 1H), 2,65-2,59 (m, 1H), 2,38-2,29 (m, 1H), 2,00-1,82 (m, 3H) , 1,43 (s, 9H),
1,25 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,10-1,06 (m, 6H), 1,03 (d, 3H,
6, 0 Hz) .
Příprava hydrochloridové soli (L)-serinátu Kryptofycinu 55 (46') (LSN 384339).
Do roztoku 45' (26 mg, 0,029 mmolů) v 291 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4-dioxanu (36 μΐ 0,146 mmolů). Po míchání po dobu 2,5 hodin byla čirá bezbarvá reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 23 mg (94%, přepočteno pro 2 % hmot. dioxanu) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,48-7,40 (m, 2H), 7,39-1,31 (m,
3H), 7,31 (d, 1H, J = 2,2 Hz), 7,20 (dd, 1H, d = 8,5, 2,0
Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,70 (ddd, 1H, J = 15, 13,
ΦΦΦΦ
Φ
- 329 ·· ·· φ φ · • φφφφ φ · · · φ φ φ · * * Λ Φ
ΦΦ
Φ
I Φ ΦΦΦ
3,7 Ηζ), 5,95 (dd, 1Η, 15, 1,8 Ηζ), 5,59 (d, 1Η, J = 10 Ηζ),
5,20 (d, 1Η, J = 10 Ηζ), 5,14 (dd, 1Η, J = 11, 2,1 Ηζ), 4,94 (t, 1Η, J = 10 Ηζ), 4,52 (dd, 1Η, J = 3,5 Ηζ), 3,96 (dd, 1Η,
J = 11, 3,9 Ηζ), 3,83 (dd, 1Η, J = 11, 2,8 Ηζ), 3,66 (t, 1Η,
J = 3,2 Ηζ), 3,50 (d, 1Η, J = 14 Ηζ), 3,20 (dd, 1Η, J = 14,
3,5 Ηζ), 3,13 (d, 1Η, J = 14 Ηζ), 2,80-2,71 (m, 3Η), 2,382,28 (m, 1Η), 2,01-1,82 (m, 3Η), 1,26 (s, 3Η) , 1,21 (s, 3Η) ,
1,13 (d, 3Η, J = 7,0 Ηζ), 1,07 (d, 3Η, J = 6,1 Ηζ) , 1,05 (d,
3Η, J = 6,2 Ηζ) .
Příprava hydrochloridové soli glycidylglycinátu Kryptofycinu 55 (47') (LSN 387750) .
Do roztoku 1' (18 mg, 0,026 mmolů), N-t-Boc-glycidylglycinu (12 mg, 0,051 mmolů) a 4-dimethylaminopyridinu (0,3 mg, 0,0026 mmolů) v 228 μΐ bezvodého methylenchloridu a 28 μΐ
N, N-dimethylformamidu byl při teplotě okolí přidán roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (11 mg, 0,051 mmolů) v 28 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 3 hodin bylo přidáno dalších 24 mg (0,102 mmolů) N-t-Boc-glycidylglycinu a 22 mg (0,102 mmolů) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu v 30 μΐ N,Ndimethylformamidu. Po míchání po dobu 1,5 hodin byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml) , míchána po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bezbarvý olej. Chromatografie (12 g silikagelu pro mžikovou chromatografií, 1% methanol v ethylacetátu) poskytlo 12 mg bílé pěny, který byla použita tak jak byla získána v dalším experimentu. Do roztoku N-Boc glycidylglycinátu (12 mg,
O, 013 mmolů) získaného výše v 130 μΐ methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán 4,0 M roztok chlorovodíku v 1,4• fc ·
- 330 ·· »· <9 · · • · ··· • · » · · • · · * • fe 99 • 9 9 • 9 · · fe fe · ·· · • · ·
9· · • fe 99 9 9 9 · • 9 9 9 ··· 999 ·
99 dioxanu (16 μΐ 0,065 mmolů). Po míchání po dobu 3,5 hodin byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získalo 11 mg (100%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
500 MHz XH NMR (MeOH-d4) δ 7,45-7,29 (m, 5H), 7,31 (d, 1H , J
= 2, 1 Hz) , 7,20 (dd, 1H , J = 8,4, 2,1 Hz) , 7, 01 (d, 1H, J =
8,4 Hz) , 6,72 (ddd, 1H, J = 15, 11, 3,8 Hz) , 5,96 (dd, 1H,
15, 1,4 Hz), 5,49 (dd, 1H, J = 10, 0,8 Hz) , 5,14-5,09 (m,
2H) , 4,90-4,80 (m, 1H), 4,51 (dd, 1H, J = 11, 3,9 Hz), 3, 91-
3,84 (m, 1H) , 3,81 (s, 3H), 3,70-3,65 (m, 2H) , 3,50 (d, 1H,
J = 14Hz), 3,38 (d, 1H, J = 18 Hz), 3,19 (dd, 1H, J = 14 3, 6
Hz) , 3,12 (d, 1H, J = 14 Hz), 2,82-2,63 (m, 3H), 2,40-2 , 30
(m, 1H), 1,97-1,80 (m, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,12 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 1,06 (d, 3H, J = 6,0 Hz), 1,03 (d, 3H, J = 5,9 Hz) .
Příprava 3, 6,9-trioxadekanoátu Kryptofycinu 55 (48') (LSN
387414).
Do roztoku sloučeniny 1' (18 mg, 0,026 mmolů), 3,6,9-
trioxadekanové kyseliny (7,8 μΐ 0,051 mmolů) a 4-
dimethylaminopyridinu (0,3 mg, 0,0026 mmolů) v 100 μΐ
bezvodého methylenchloridu byl při teplotě okolí přidán
roztok 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (11 mg, 0,051 mmolů) v 28 μΐ methylenchloridu. Po míchání po dobu 30 minut byla kalně bílá reakční směs zředěna směsí ethylacetát-hexany (3:1, 0,5 ml), míchán po dobu 10 minut a filtrována přes vrstvu celitu, promývání směsí ethylacetát:hexany (3:1). Filtrát a promývací tekutina byly koncentrovány za sníženého tlaku na bělavý olej. Chromatografie (12 g siíikagelu pro mžikovou čhromatografií, 2% methanol v ethylacetát) poskytla 19 mg (86%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny:
331
500 MHz r H NMR (CDC13) δ 7,49-7,29 (m, 5H), 7, 24 (d, 1H, J =
1,8 Hz) , 7,22-7,19 (m, 1H), 7,10 (dd, 1H, J = : 8,4, 1,8 Hz),
6, 87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,74 (ddd, 1H, J = 15, 10, 4,5
Hz) , 5,32 -5,28 (m, 2H) , 5,56 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,98-4,90
(m, 2H) , 4,83 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,77-4,71 (m, 1H), 3,90
(s, 3H) , 3,83 (d, 1H, J = 17 Hz), 3,65-3,55 (m, 7H), 3,42-
3,33 (m, 6H), 3,24-3,18 (m, 2H) , 3,03 (dd, 1H, J = 15, 8,1
Hz), 2,69-2,61 (m, 1H) , 2,61-2,56 (m, 1H) , 2,54-2,46 (m,
1H), 2,00-1, 93 (m, 1H) , 1,85-1,77 (m, 1H) , 1,72-1,66 (m,
1H), 1,26 (s, 3H), 1,19 (s, 3H) , 1,09 (d, 3H, J = 7,0 Hz),
1,02 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,97 (d, 3H, J = 6,5 Hz).
Zastupuje:
Dr. O. Švorčík
332
JUDr. Otakar Švorčík advokát 120 00 Praha 2, Hálkova 2 h'č</T-9li
PATENTOVÉ

Claims (1)

  1. NÁROKY
    1. Sloučenina obecného vzorce I ve kterém
    Ar je zvolen ze souboru, zahrnujícího fenyl, libovolnou jednoduchou nesubstituovanou jednoduchou substituovanou substituovanou heteroaromatickou nesubstituovanou heteroaromatickou aromatickou aromatickou skupinu, skupinu, skupinu, skupinu, heterocyklickou skupinu, C1-C12 alkyl, C2-Ci2 alkenyl,
    C2-Ci2 alkinyl, obecného vzorce
    NR51R52,
    COR6
    ORS a skupinu Ar'
    333
    R51 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku R52 skupiny C1-C3 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnuj ícího atom vodíku R53 skupiny C1-C3 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnuj ícího skupiny Ci~Ci R54 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnuj ícího atom vodíku
    skupiny C1-C6 alkyl, Ci-Cgalkyl (R57 R57 R57 ), jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu, heterocyklickou skupinu, fenyl, atom halogenu, 4-(terč.-butyldimethylsiloxy)-benzyltrifenylfosfonium, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, N(R59)R60, NHOR61, NHCHR61', CN, N02, atom halogenu, OR62, CH2(O)R62', -CH2OC (O) R95,
    CH2N(R96)R96', COR100, (Ci-C6alkyl) OR100,
    R· a SR63 ;
    R95 je zvolen ze souboru, zahrnujícího -R98NH3;
    R96 a R96 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a Ci-C6 alkyl, -R97NH3 a -R99NR99 R99 ;
    R97 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny Ci~C6 alkyl;
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího Ci-C6 alkyl;
    R99 znamená Ci-Cé alkyl;
    R a R jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a Ci-C6 alkyl;
    R100 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a Si (R101R102R103) ;
    R101 znamená Ci-C6 alkyl;
    R znamena Ci-Cg alkyl;
    R103 znamená Ci-C6 alkyl;
    R104 je zvolen ze souboru, zahrnujícího C(O)Ci-C6 alkyl
    N(R106) (R59)R60, C(0) Cx-Cg alkylN+, kondenzovanou bicyklickou skupinu a NHR105N (R106) (R59) R60;
    R105 je zvolen ze souboru, zahrnujícího C(0)Cx~C6 alkyl, CiC6 alkyl;
    RW6 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny Cx-C6 alkyl, C(O)OR107; atom vodíku, R107 je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny Cx-C6 alkyl, CR108 R109 R110; atom vodíku, rX°8 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a Cx-C6 alkyl; skupiny
    109 ·
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Cx~C6 alkyl;
    R110 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Cx-C6 alkyl;
    R1U je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny Cx-C6 alkyl a C(O)OR107
    R55 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny Cx~C6 alkyl, C(R57 R57 R57 ), jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu, fenyl, COOR57,
    PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61 , CN, NO2, atom halogenu, OR62 a SR63
    R56 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny Cx-C6 alkyl, C(R57 R57 R57 ), jednoduchou
    - 335 nesubstituovanou aromatickou skupinu, jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu, fenyl, COOR57, PO3H, SO3H, SO2R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61', (CiCe) alkylNR59R60, CN, NO2, atom halogenu, OR104, CR104, OR62 a SR63;
    R57 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a
    r57' skupiny 0χ-012 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom R57 halogenu a skupiny Οχ-Οχ2 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom R57 halogenu a skupiny Cx-C12 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom R58 halogenu a skupiny Cx-C12 alkyl; je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a
    skupiny Cx-Cx2 alkyl;
    R59 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, (Cx-C6) alkyl, terč.-butoxykarbonyl, karbo-terc.-butoxy(t-BOC) a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) ;
    r60 je C6) zvolen alkyl; ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a (Cx- R61 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, OR64, CH2NHR65, nhr65' a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) ; R61 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, OR64 CH2NHR65, NHR65' a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) ; R62 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a
    skupiny Cx-C6 alkyl;
    R62 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, OH,
    OR62 a Ci-C6 alkyl;
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci-Cg alkyl;
    R64 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, (Οχ-Οβ)
    - 336 · • · ·· alkyl, CH2NR66R67;
    R65 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci-Cg alkyl, NH2 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC);
    R65 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny C1-C6 alkyl, NH2 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC);
    je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny C1-C6 alkyl a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC); je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a skupiny Ci-C6 alkyl;
    sobě zvoleny ze souboru, halogenu, monalkylamino, alkylthio, a R jsou nezávisle na zahrnujícího atom dialkylamino, trialkylamonium, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát, OR31
    SH, NR92, R93, NR94 a NH2;
    94 · ,
    R a R jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího skupiny Ci-C6 alkyl;
    SR
    NR
    OH, za předpokladu, že jeden substituent, který je zvolen ze souboru zahrnujícího R1 a R2, je zvolen ze souboru, zahrnujícího OR31, SR31, R31, OH a SH; nebo
    R1 a R2 mohou dohromady vytvářet spolu s C-18 a C-19 epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh nebo mono(CiΟβ) alkyl-fosfátový kruh; nebo
    R1 a R2 mohou spolu vytvářet druhou vazbu mezi C-18 a C-19;
    R3 znamená nižší alkylovou skupinu;
    R4 znamená atom vodíku nebo OH;
    R5 znamená atom vodíku nebo OH;
    R4 a R5 mohou spolu vytvářet druhou vazbu mezi C13 a Ci4;
    Re znamená substituent, zvolený ze souboru, zahrnujícího • · · · • © · • · ····»
    - 337 benzyl, hydroxybenzyl, halohydroxybenzyl, haloalkoxybenzyl, heteroaromatický heteroaromatřekou (C3-C8) cykloalkyl, nebo
    B-kruh, alkoxybenzyl, dihalohydroxybenzyl, dihaloalkyoxybenzyl, substituovanou skupinu, (Ci-C6) alkylový B-kruh, substituovaný C3-C8 cykloalkyl, substituovaný III' (Ci-C6) alkyl, skupinu obecného vzorce a skupinu obecného vzorce III'':
    R7 je zvolen ze souboru, zahrnujícího NR51R52, R53NR51R52,
    OR53, atom vodíku a nižší alkylovou skupinu;
    R51 a R52 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího C1-C3 alkyl;
    R53 znamená C1-C3 alkyl;
    Rs znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu; nebo » · · · • · · · • · ··
    338
    R7 a R8 mohou spolu vyvářet cyklopropylový kruh;
    R9 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, nenasycený nižší alkyl, nižší alkyl-Cg-Cs cykloalkyl a benzyl;
    R10 znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu;
    R11 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, OH, nižší alkylovou skupinu, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a fenyl;
    R14 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a nižší alkyl;
    R15, R16 a R17 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, OR18, atom halogenu, NR18 R19 , N02, OPO3H2, OR19fenyl, SCH2fenyl, CONH2, CO2H, PO3H2, SO2R23 a ZZ;
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, aryl, C1-C6 alkyl, C(O)R90 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC);
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, (CxC6) alkyl a C(O)R90';
    R19 znamená Οχ-Οβ alkyl, C(O)R90 a fluorenylmethoxykarbonyl (FMOC) ;
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, (Ci— Cé) alkyl a C (O)R90 ;
    R90, R90 , R90 a R90 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, (Ci-C6) alkyl, OR91 a aryl ;
    R91 je zvolen ze souboru, zahrnujícího (Ci-C6) alkyl, aryl a atom vodíku;
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a (C!-C3) alkyl;
    R30 znamená atom vodíku nebo Ci-C6 alkyl; nebo
    R30 může vytvářet spolu s dusíkovým atomem v poloze C-ll • · • · · • · · · · • · · · ·
    - 339 «I · · • · · · • · · · · · • · · • · « tří- až sedmičlenný cyklický kruh;
    R31 je zvolen ze souboru, zahrnujícího P, S, (Cx-C12) alkyl, B, R32 a Si;
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího aminokyselinu, uhlovodík, aminovaný cukr, (sacharid) q, C(O)R33 a
    R33 je zvolen ze souboru, zahrnujícího R37R38, R38, R37N (R20')R38, R37N(R20') (Ci-C6) alkylC (O)R38, R37N (R20 ) C (O) R38,
    R37O (Cx-Cg) alkylO (Cx-C6) alkylO (Ci-C6) alkylO (Ci~C6) alkyl a R37 (NR18 R20 ) R38;
    R oe zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupiny Cx-C6 alkyl a -CO2R21’;
    R21 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a (CxC6) alkyl;
    R34 znamená (Cx~C4) alkyl;
    R35 znamená atom vodíku nebo (Οχ-Ο3) alkyl;
    R36 znamená atom vodíku, OH, atom halogenu, (Cx-C3) alkyl,
    OR34, NO2, NH2 a heteroaromatickou skupinu;
    R37 znamená (Οχ-Cg) alkyl;
    R38 znamená COOR39,
    - 340 - • · • · · •« *« • * · ··«
    NH2, (NR18'r20'), heteroaromatickou aminokyselinu;
    znamená atom vodíku nebo (0χ-06)alkyl;
    R a R jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, heterocyklickou skupinu, skupinu, OH, (Ci~C6) alkyl a zahrnujícího atom vodíku, OR43, atom halogenu, NH2, N02, OPO(OR46)2, -OR44fenyl a R45 ; znamená Οχ-Ο6 alkyl;
    R44 znamená Ci-C6 alkyl;
    je zvolen ze souboru, zahrnujícího nesubstituovanou jednoduchou aromatickou skupinu a substituovanou jednoduchou aromatickou skupinu;
    je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Na, (Ci-C6) alkyl a -C(CH3)3; znamená atom vodíku nebo
    n se rovná 0, 1, nebo 2; m se rovná 0, 1, nebo 2; P se rovná 0, 1, nebo 2;
    • » q se rovná 2, 3, nebo 4;
    X je zvolen ze souboru, zahrnujícího 0, C, S, NH a alkylamino;
    Y je zvolen ze souboru, zahrnujícího C, 0, NH, S, SO, S02 a alkylamino;
    Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího -(CH2)n-, -(CH2)PO-(CH2)m- a (C3-C5) cykloalkyl;
    ZZ je zvolen ze souboru, zahrnujícího jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu a jednoduchou substituovanou aromatickou skupinu; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát;
    s podmínkou, že jestliže R1 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, OH, OR31, SH, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát a fosfát a R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího OH, NH2, NR31 a SH nebo Ř17 a R2 spolu vytvářejí epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh, nebo monoalkylfosfátový kruh, nebo R1 a R2 spolu vytvářejí druhou vazbu; R3 znamená nižší alkyl; R4 a R5 znamenají atom vodíku nebo R4 a R5 spolu vytvářejí dvojnou vazbu mezi C13 a C14; R6 znamená benzyl, hydroxybenzyl, alkoxybenzyl, halohydroxybenzyl, diahalohydroxybenzyl, halohydroxybenzyl, nebo dihalohydroxybenzyl; R7, R8, R9 a R10 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu; a X a Y jsou každý nezávisle na sobě 0, NH nebo alkylamino a R50 znamená ·« ·
    - 342 a R11 znamená atom vodíku; potom
    Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího Οχ-Οι2 alkyl, C1-C12 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu, nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu a substituovanou heteroaromatickou skupinu; nebo jestliže Ar je zvolen ze souboru, zahrnujícího C1-C12 alkyl, C1-C12 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu, nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu a substituovanou heteroaromatickou skupinu; a R50 znamená a R11 znamená atom vodíku; potom
    R je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát, OR31 a S31; nebo jestliže R1 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, OH, OR31, SH, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát a fosfát a R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího OH, NH2, NR31 a SH nebo R1 a R2 spolu vytvářejí epoxidový kruh, • · aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh, nebo monoalkylfosfátový kruh, nebo R1 a R2 spolu vytvářejí druhou vazbu a R3 znamená nižší alkyl a R4 znamená atom vodíku a R5 znamená atom vodíku a R50 znamená atom vodíku a R11 znamená atom vodíku; potom
    Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího Ci~Ci2 alkyl, Ci~Ci2 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou aromatickou skupinu a heteroaromatickou skupinu; nebo jestliže R1 je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, OH, OR31, SH, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát a fosfát a R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího OH, NH2, NR31 a SH nebo R1 a R2 spolu vytvářejí epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh, nebo monoalkylfosfátový kruh, nebo R1 a R2 spolu vytvářejí druhou vazbu a R3 znamená nižší alkyl a R4 znamená atom vodíku a R5 znamená atom vodíku a R50 znamená atom vodíku a R11 znamená atom vodíku; nebo R50 je zvolen ze souboru, zahrnujícího a atom vodíku; a R11 je zvolen ze souboru, zahrnujícího OH, nižší alkylovou skupinu, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a fenyl; potom
    Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího Ci~C12 alkyl, Ci~Ci2 alkinyl, fenyl, jednoduchou nesubstituovanou aromatickou • ·
    - 344 skupinu, substituovanou aromatickou skupinu, substituovanou heteroaromatickou skupinu a nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu; nebo jestliže R3 znamená nižší alkyl; R4 a R5 znamenají atom vodíku nebo R4 a R5 spolu dohromady vytvářejí dvojnou vazbu mezi C13 a Ci4; R6 znamená benzyl, hydroxybenzyl, alkoxybenzyl, halohydroxybenzyl, dihalohydroxybenzyl, halohydroxybenzyl, nebo dihalohydroxybenzyl; R7, R8, R9 a R10 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkylová skupinu; a X a Y jsou nezávisle na sobě 0, NH nebo alkylamino; a Ar je skupina obecného vzorce Ar' a jeden z R54, R55, R56 je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl nebo atom halogenu; a R1 a R2 mohou spolu vytvářet epoxidový kruh, aziridinový kruh, episulfidový kruh, sulfátový kruh, cyklopropylový kruh nebo monoalkylfosfátový kruh; nebo R1 a R2 mohou spolu vytvářet druhou vazbu mezi Ci8 a Ci9; nebo R2 je zvolen ze souboru, zahrnujícího OH a SH;
    potom alespoň dva z R54, R55 a R56 musí být zvoleny ze souboru, zahrnujícího skupiny 0χ-06 alkyl, jednoduchá aromatická skupina, fenyl, COOR57, PO3H, SO3H, S02R58, NR59R60, NHOR61, NHCHR61 , CN, N02, atom halogenu, OR62 a SR63; nebo jestliže R3 znamená nižší alkyl; R4 a R5 znamenají atom vodíku nebo R4 a R5 spolu dohromady vytvářejí dvojitou vazbu mezi C13 a Ci4; R6 znamená heteroaromatický B-kruh, substituovanou heteroaromatickou skupinu, (Ci~C6) alkylový Bkruh, (C3-C8) cykloalkyl, substituovaný C3-C8 cykloalkyl, substituovaný (Ci-C6) alkyl, skupinu obecného vzorce III' • ·
    - 345 • · a skupinu obecného vzorce III'' a X a Y jsou nezávisle na sobě 0, NH nebo alkylamino; potom Ar není zvolen ze souboru, zahrnujícího skupinu fenyl nebo libovolnou jednoduchou nesubstituovanou nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu, skupinu C1-C12 alkyl a C1-C12 alkinyl.
    2. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I ve kterém Y znamená atom kyslíku.
    3. Sloučenina podle nároku 2 ve kterém X znamená atom kyslíku.
    4. Sloučenina podle nároku 3 ve kterém R6 je zvolen ze souboru, zahrnujícího benzyl, hydroxybenzyl, • · · • ·
    346 halohydroxybenzyl, dihalohydroxybenzyl, haloalkoxybenzyl a dihaloalkoxybenzyl.
    5. Sloučenina podle nároku 4 ve kterém R9 znamená isobutyl a R10 znamená atom vodíku.
    6. Sloučenina podle nároku 5 ve kterém R8 a R7 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkyl.
    7. Sloučenina podle nároku 3 ve kterém R11 znamená atom vodíku.
    8. Sloučenina podle nároku 7 ve kterém R50 znamená o
    A
    9. Způsob rozrušení mikrotubulové vazby u savce vyznačující se tím, že se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I.
    10. Způsob rozrušení mikrotubulové vazby in vitro vyznačující se tím, že se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I.
    11. Způsob léčení neoplasmů u savce vyznačující se tím, že se podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který má jeho potřebu.
    12. Přípravek obsahující sloučeninu podle nároku 1,
    347 • · • · • · • · · vyznačující se tím, že obsahuje jeden nebo více jejích farmaceuticky přijatelných ředidel nebo nosičů.
    13. Způsob léčení živočicha, infikovaného houbou nebo ohroženého takovou infekcí, vyznačující se tím, že se podává antifungálně účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
    14. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že živočich je savec. 15. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že živočich je infikován houbou. 16. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I ve kterém Y
    znamená NH.
    17. Sloučenina podle nároku 16 ve kterém R50 znamená o
    A
    18. Sloučenina podle nároku 17 ve kterém X znamená atom kyslíku.
    19. Sloučenina podle nároku 18 ve kterém R6 je zvolen ze souboru, zahrnujícího benzyl, hydroxybenzyl, halohydroxybenzyl, dihalohydroxybenzyl, haloalkoxybenzyl a dihaloalkoxybenzyl.
    20. Sloučenina podle nároku 19 ve kterém R9 znamená isobutyl
    348 a R10 znamená atom vodíku.
    21. Sloučenina podle nároku 20 ve kterém R8 a R7 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkyl.
    22. Sloučenina podle nároku 18 ve kterém R11 znamená atom vodíku.
    23. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, která je zvolena ze souboru, zahrnujícího acetát Kryptofycinu 55, sukcinát Kryptofycinu 55, (2'-di-terc.-butylfosfatyl) fenylacetát Kryptofycinu 55, (2'-fosfatyl)fenylacetát
    Kryptofycinu 55, nikotinoát Kryptofycinu 55, Nmethylpyridinium Kryptofycinu 55, N-t-Boc-3-(3-chlor-4methoxyfenyl)-(D)-alaninát Kryptofycinu 55, 3-(3-chlor-4methoxyfenyl)-(D)-alaninát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-glycinát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-p-alaninát Kryptofycinu 55, N-tBoc-Y-aminobutyrát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-(L)-alaninát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-(D)-alaninát Kryptofycinu 55, (D)alaninát Kryptofycinu 55 a Να-Νε-di-t-Boc-(L)-lysinát Kryptofycinu 55; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
    24. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, která je zvolena ze souboru, zahrnujícího Kryptofycin 129, kryptofycin 138, kryptofycin 139, kryptofycin 145, kryptofycin 140 a kryptofycin 141; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
    25. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, která je zvolena ze souboru, zahrnujícího kryptofycin 152, kryptofycin 160, kryptofycin 255, kryptofycin 153, • · « • · • ·
    - 349 ► · ·· ·· • · · · · i • · · · · · · • · ··· · ··· ··· • · · ♦
    Λ ·· ·· kryptofycin 154, kryptofycin 236, kryptofycin kryptofycin
    161, kryptofycin 234, 247, kryptofycin 251 a kryptofycin 238; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
    Kryptofycinu kyselinu,
    26. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, která je zvolena ze souboru, zahrnujícího terč.-butylester sukcinátu Kryptofycinu 55, (2'-di-terc.-butylfosfatyl)fenylacetát
    55, 2'-(di-terc.-butylfosfatyl)fenyloctovou (2'-fosfatyl)fenylacetát Kryptofycinu 55, nikotinoát Kryptofycinu 55, N-methylpyridinium Kryptofycinu 55, N-t-Boc-3-(3-chlor-4-methoxyfenyl)-(D) -alaninát
    Kryptofycinu 55, N-t-Boc-(L)-fenylalaninát Kryptofycinu 55, (L)-fenylalaninát Kryptofycinu 55, (L)-histidinát
    Kryptofycinu 55, N-t-Boc-(L)-prolinát Kryptofycinu 55, (L)prolinát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-glycinát Kryptofycinu 55, glycinát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-p-alaninát Kryptofycinu 55, β-alaninát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-y-aminobutyrát Kryptofycinu 55, γ-aminobutyráb Kryptofycinu 55, N-tBoc- (L) -alaninát Kryptofycinu 55, (L)-alaninát Kryptofycinu
    55, N-t-Boc-(D)-alaninát Kryptofycinu 55, (D)-alaninát
    Kryptofycinu 55, Να-Νε-di-t-Boc-(L)-lysinát Kryptofycinu 55, (L)-lysinát Kryptofycinu 55, Να-Νε-di-t-Boc-(D)-lysinát Kryptofycinu 55, (D)-lysinát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-γterc.-butylester-(L)-glutamát Kryptofycinu 55, (L)-aglutamát Kryptofycinu 55, N-t-Boc-p-terc.-butyl esteraspartát kryptofycinu 55, (D)-aspartát Kryptofycinu 55, N-tBoc-a-terc.-butylester-(L)-glutamát Kryptofycinu 55, (L)-yglutamát Kryptofycinu 55, diaminopropionát Kryptofycinu 55,
    N,Ν'-di-t-Boc-(S)-2,3(S)-2,3-diaminopropionát
    Kryptofycinu 55, N-t-Boc-(L)-serinát Kryptofycinu 55, (L) —
    - 350 ·· ·« ·· · • · · · * · • AAAA A AAA « A A A A · A AAA AAAA · · *
    Λ Λ Λ Λ A A ·
    AAA AAA serinát Kryptofycinu 55 a sukcinát Kryptofycinu 55; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
    Zastupuje:
    Dr. O. Švorčík
CZ99645A 1996-08-30 1997-08-29 Farmaceutické sloučeniny CZ64599A3 (cs)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2581696P 1996-08-30 1996-08-30
US3911397P 1997-02-26 1997-02-26
US3953097P 1997-03-03 1997-03-03
US4002997P 1997-03-04 1997-03-04

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ64599A3 true CZ64599A3 (cs) 1999-10-13

Family

ID=27487441

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ99645A CZ64599A3 (cs) 1996-08-30 1997-08-29 Farmaceutické sloučeniny

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0934065B1 (cs)
JP (1) JP4364944B2 (cs)
CN (1) CN100356916C (cs)
AT (1) ATE328592T1 (cs)
AU (1) AU722492B2 (cs)
BR (1) BR9711986A (cs)
CA (1) CA2264063C (cs)
CZ (1) CZ64599A3 (cs)
DE (1) DE69736067T9 (cs)
DK (1) DK0934065T3 (cs)
EA (1) EA001913B1 (cs)
ES (1) ES2267149T3 (cs)
HK (1) HK1025036A1 (cs)
IL (1) IL128610A (cs)
NO (1) NO314454B1 (cs)
PT (1) PT934065E (cs)
SI (1) SI0934065T1 (cs)
TR (1) TR199901104T2 (cs)
WO (1) WO1998008505A1 (cs)
YU (1) YU10899A (cs)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6680311B1 (en) 1996-08-30 2004-01-20 Eli Lilly And Company Cryptophycin compounds
KR20010029474A (ko) * 1996-09-06 2001-04-06 피터 지. 스트링거 제약 화합물의 제조 방법
WO1998009974A1 (en) * 1996-09-06 1998-03-12 Eli Lilly And Company Process and novel intermediates
WO1998038158A1 (en) * 1997-02-26 1998-09-03 Eli Lilly And Company Process for preparing pharmaceutical compounds
CA2281107A1 (en) * 1997-02-26 1998-09-03 Eli Lilly And Company Tripeptide and tetrapeptide pharmaceutical compounds
EP0870510A3 (en) * 1997-04-11 1999-09-15 Eli Lilly And Company Synergistic combination comprising cryptophycin derivatives and microtubule synergizing agents
EP0870506A1 (en) * 1997-04-11 1998-10-14 Eli Lilly And Company Compositions comprising a cryptophycin compound in combination with a synchronizing or activating agent for treating cancer
EP0870501A1 (en) * 1997-04-11 1998-10-14 Eli Lilly And Company Use of specific cryptophycin derivatives for the manufacture of a medicament in the treatment of fungal infections
US6376230B1 (en) 1998-10-16 2002-04-23 Eli Lilly And Company Stereoselective process for producing intermediates of cryptophycins
US6103913A (en) * 1998-10-16 2000-08-15 Eli Lilly And Company Process for preparing enollactone derivatives
US6372936B1 (en) * 1999-06-09 2002-04-16 Eli Lilly And Company Optical resolution of aminoisobobutyric acid
EP2266607A3 (en) 1999-10-01 2011-04-20 Immunogen, Inc. Immunoconjugates for treating cancer
US6747021B2 (en) 2000-10-02 2004-06-08 Eli Lilly And Company Cryptophycin compound
AU2003218110A1 (en) 2002-03-12 2003-09-29 Bristol-Myers Squibb Company C3-cyano epothilone derivatives
TWI426905B (zh) * 2006-02-09 2014-02-21 Enzon Pharmaceuticals Inc 用於乳癌、大腸直腸癌、胰臟癌、卵巢癌及肺癌之治療的７-乙基-１０羥喜樹鹼之多臂聚合性共軛物
FR2947269B1 (fr) * 2009-06-29 2013-01-18 Sanofi Aventis Nouveaux composes anticancereux
AU2011319685B2 (en) * 2010-10-22 2016-02-04 Le Centre National De La Recherche Scientifique Pochoxime conjugates useful for the treatment of HSP90 related pathologies
IT201600108581A1 (it) * 2016-10-27 2018-04-27 Navid Sobhani NUOVE E PIU' POTENTI MOLECOLE PER IL TRATTAMENTO E LA DIAGNOSI DI TUMORI NEUROENDOCRINI (NETs) E DELLE CELLULE STAMINALI DEI NETs
EP3621658A1 (en) * 2017-05-10 2020-03-18 Sanofi Peptidic linkers and cryptophycin conjugates, useful in therapy, and their preparation
JP2022549971A (ja) * 2019-09-30 2022-11-29 ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ミシガン クリプトフィシン抗がん剤の生体触媒合成

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4946835A (en) * 1988-07-15 1990-08-07 Merck & Co., Inc. Antifungal fermentation product and method
US4845086A (en) * 1988-08-09 1989-07-04 Merck & Co., Inc. Antifungal agent
US4845085A (en) * 1988-08-09 1989-07-04 Merck & Co., Inc. Antifungal agent
US5194605A (en) * 1989-12-08 1993-03-16 Merck & Co., Inc. Cyclic renin inhibitors containing 2-substituted (3S,4S)-4-amino-5-cyclohexyl-3-hydroxy pentanoic acid, 2-substituted (3S,4S)-5-cyclohexyl-3,4-di-hydroxy pentanoic acid or 2-substituted (4S,5S)-5-amino-6-cyclohexyl-4-hydroxyhexanoic acid or its analogs
US5952298A (en) * 1993-12-21 1999-09-14 The University Of Hawaii Cryptophycins
CA2179490A1 (en) * 1993-12-21 1995-06-29 Trimurtulu Golakoti New cryptophycins
TJ347B (en) * 1995-03-07 2002-10-06 Univ Hawaii Cryptophicin compounds pharmacentical composition method to inhibit the proliteration of cells and and method to treat neoplasia
CA2246117A1 (en) * 1995-08-30 1997-03-06 University Of Hawai'i Cryptophycins from aberrant biosynthesis
EP0869786B1 (en) * 1995-12-22 2003-03-05 Eli Lilly And Company Pharmaceutical compounds
ATE201018T1 (de) * 1996-02-27 2001-05-15 Lilly Co Eli Cryptophycinderivate und ihre verwendung als antimikrotubuli mittel

Also Published As

Publication number Publication date
DE69736067D1 (en) 2006-07-20
DK0934065T3 (da) 2006-10-09
EP0934065A4 (en) 2000-10-11
NO314454B1 (no) 2003-03-24
NO990833D0 (no) 1999-02-22
JP4364944B2 (ja) 2009-11-18
AU722492B2 (en) 2000-08-03
IL128610A (en) 2004-07-25
YU10899A (sh) 2002-03-18
BR9711986A (pt) 1999-08-24
CA2264063A1 (en) 1998-03-05
DE69736067T2 (de) 2007-05-10
WO1998008505A8 (en) 1999-08-12
CA2264063C (en) 2007-03-13
NO990833L (no) 1999-04-26
EP0934065A1 (en) 1999-08-11
CN1233957A (zh) 1999-11-03
PT934065E (pt) 2006-10-31
TR199901104T2 (xx) 1999-07-21
WO1998008505A1 (en) 1998-03-05
ES2267149T3 (es) 2007-03-01
IL128610A0 (en) 2001-01-28
EP0934065B1 (en) 2006-06-07
DE69736067T9 (de) 2007-10-31
EA001913B1 (ru) 2001-10-22
CN100356916C (zh) 2007-12-26
HK1025036A1 (en) 2000-11-03
ATE328592T1 (de) 2006-06-15
JP2002514175A (ja) 2002-05-14
AU4170197A (en) 1998-03-19
EA199900246A1 (ru) 1999-10-28
SI0934065T1 (sl) 2007-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6680311B1 (en) Cryptophycin compounds
CZ64599A3 (cs) Farmaceutické sloučeniny
ES2247131T3 (es) Procedimiento de compuestos de azol solubles en agua.
AU706511B2 (en) A method of inhibiting tumor growth
EP3793547A1 (en) Magl inhibitors
EA000701B1 (ru) Пентациклическое соединение
LV13120B (en) Delta 12, 13-iso-taxol analogs, antineoplastic use and pharmaceutical compositions containing them
JPH10502077A (ja) ７−エーテル−タキソールアナログ、抗新生生物用途およびそれを含有する医薬組成物
BG63289B1 (bg) Нови криптофицини и метод за получаването им
CA2230540A1 (en) Pharmaceutical compounds
CA2263420A1 (en) Pharmaceutical compounds
CN109180780B (zh) 多肽环氧酮化合物
EP0792875B1 (en) Cryptophycin derivatives and their use as anti-microtubule agents
CA2368733C (en) Phenylalanine derivatives
EP0923564A1 (en) Pharmaceutical compounds
CZ9902998A3 (cs) Způsob přípravy farmaceutických sloučenin
US20020128185A1 (en) Pharmaceutical compounds
TW533206B (en) A novel cryptophycin compound and its pharmaceutical composition
KR100505779B1 (ko) 제약 화합물
MXPA99001825A (en) Pharmaceutical compounds
JPH0912578A (ja) 五環性化合物
AU726730B2 (en) Delta 12,13-iso-taxol analogs, antineoplastic use and pharmaceutical compositions containing them
AU2017377671A1 (en) Novel compounds as anti-mycobacterials
TW200842126A (en) Taxane compound having azetidine ring structure
MXPA98001604A (en) Farmaceuti compounds

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic