EA001913B1 - Фармацевтические соединения - Google Patents

Фармацевтические соединения Download PDF

Info

Publication number
EA001913B1
EA001913B1 EA199900246A EA199900246A EA001913B1 EA 001913 B1 EA001913 B1 EA 001913B1 EA 199900246 A EA199900246 A EA 199900246A EA 199900246 A EA199900246 A EA 199900246A EA 001913 B1 EA001913 B1 EA 001913B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
alkyl
hydrogen
cryptophycin
ring
Prior art date
Application number
EA199900246A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199900246A1 (ru
Inventor
Рима С. Аль-Авар
Вилльям Дж. Элхардт
Саббараджу В. Готтумуккала
Майкл Дж. Мартинелли
Эрик Д. Мохер
Ричард Э. Мур
Джон Э. Манро
Брайан Х. Норман
Винод Ф. Пейтел
Чуан Сих
Джон Э. Тот
Венкатрагхаван Васудеван
Джеймс Э. Рэй
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Юниверсити Оф Гавайи
Уэйн Стейт Юниверсити
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани, Юниверсити Оф Гавайи, Уэйн Стейт Юниверсити filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA199900246A1 publication Critical patent/EA199900246A1/ru
Publication of EA001913B1 publication Critical patent/EA001913B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D273/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/12—Esters of phosphoric acids with hydroxyaryl compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6527—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Изобретение относится к новым криптофицинам, которые могут быть полезны для разрушения системы микротрубочек, в качестве противоопухолевых средств и для лечения рака. Изобретение также относится к композиции для введения новых криптофициновых соединений.

Description

Данное изобретение относится к области фармацевтической и органической химии и к новым криптофицинам, полезным в качестве средств против микротрубочек.
Неопластические болезни, характеризующиеся пролиферацией клеток, не подчиняющейся нормальному регулированию роста клеток, являются одной из основных причин смертности среди людей и млекопитающих. Клинический опыт в области противораковой терапии показывает, что для лечения этих болезней нужны новые и более эффективные лекарственные средства.
Система микротрубочек эукариотных клеток является основным компонентом цитоскелета и представляет динамичное скопление и разобщение; т.е. гетеродимеры тубулина полимеризуются и образуют микротрубочку. Микротрубочки играют ключевую роль в регуляции строения, метаболизма и деления клеток. Динамичное состояние микротрубочек критично для их нормальной функции. Что касается деления клеток, то тубулин полимеризуется в микротрубочки, которые образуют митотическое веретено.
Микротрубочки впоследствии деполимеризуются, когда завершено использование митотического веретена. Соответственно средства, которые нарушают полимеризацию или деполимеризацию микротрубочек и посредством этого ингибируют митоз, относятся к числу наиболее эффективных противораковых химиотерапевтических средств при клиническом применении.
Кроме того, заявляемые здесь соединения обладают также фунгицидными свойствами. Кроме того, такие средства со способностью разрушать систему микротрубочек могут быть полезны для исследовательских целей.
Некоторые криптофицины известны из литературы; однако, для большинства фармацевтических применений нужны криптофицины с более высокой растворимостью и устойчивостью. Кроме того, расширенный ассортимент криптофицинов может обеспечить дополнительную возможность выбора для пациента, страдающего от рака. Заявители описывают новые соединения, которые обладают большей растворимостью в воде, а также обладающие способностью разрушать систему микротрубочек. Соединения данного изобретения могут быть полезны для лечения новообразований. Такие соединения можно получить с использованием общих способов синтеза, и, следовательно, они хорошо подходят для разработки в качестве фармацевтически полезных средств.
Данное изобретение относится к новым криптофицинам формулы I
где
Аг выбирают из группы, состоящей из фенила, любой простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической, замещенной гетероароматической группы, незамещенной гетероароматической группы, гетероцикла, (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкенила, (С2С12)-алкинила, ΝΚ51Κ52, СОК52, ОК53, и Аг' фор мулы
К51 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С3)-алкила;
К52 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С3)-алкила;
К53 выбирают из группы, состоящей из (С1С12)-алкила;
К54 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, (С1-С6)-алкил (К57’К57”К57’), простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической, гетероциклической группы, фенила, галогена, 4(трет-бутилдиметилсилокси)бензилтрифенилфосфония, СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58, Ν(Κ59)Κ60, ННОК, ННСНК', СН, НО* ОК62, СН2(О)К62’, -СН2ОС(О)К95’, ~ ~
ЯИ1
СН2ЩК9б)К96', и 8К63;
состоящей из
СОК100, ((С1-С6)-алкил))ОК100, К95 выбирают из группы, -К98ННз;
каждый из К96 и К96' выбирают независимо из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)алкила, -1<\1 Е и -К99НК99'К99'';
К97 выбирают из группы, состоящей из (Сг С6)-алкила;
К98 выбирают из группы, состоящей из (С1С6)-алкила;
К99 представляет (С1-С6)-алкил; каждый из К99' и К99'' выбирают независимо из группы, состоящей из водорода и (С1-С6) алкила;
К100 выбирают из группы, состоящей из водорода и 81(К101К102К103);
К101 представляет (С1-С6)-алкил;
К102 представляет (С1-С6)-алкил;
К103 представляет (С1-С6)-алкил;
К104 выбирают из группы, состоящей из
С(О)(С1-С6)-алкил-Н(К106)(К59)К60, С(О)(СГС6)алкил-Х+, конденсированного бицикла и
ННК105Н(К106)(К59)К60;
К105 выбирают из группы, состоящей из
С(О)(С1-С6)-алкила, (С1-С6)-алкила;
К106 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, С(О)ОК107;
К107 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-Сб)-алкила, СК108К109К110;
К108 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
К109 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
К110 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
К111 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и С(О)ОК107;
К55 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, С(К57'К57К57'), простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической группы, фенила, СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58, ЧК59К60, ЧНОК61, ЧНСНК61', СЧ, ЧО2, галогена, ОК62 и 8К63;
К56 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, С(К57'К57К57'), простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической группы, фенила,
СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58, ЧК59К60, ЧНОК61, ЧНСНК61', (С1-С6)-алкил-НК59К60, СЧ, ЧО2, га_ _ _ АГ) 104 104 гап 62 с т> 63 логена, ОК , СК , ОК и 8К ;
К57 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С12)-алкила;
К57' выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и (С1-С12)-алкила;
К57 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и (С1-С12)-алкила;
К57' выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и (С1-С12)-алкила;
К58 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С12)-алкила;
К59 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, трет-бутоксикарбонила, карбо-трет-бутокси (1-ВОС) и фторметоксикарбонила (РМОС);
К60 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
К61 выбирают из группы, состоящей из водорода, ОК64, СНЧНК65, ЧНК65' и фторметоксикарбонила (РМОС);
К61' выбирают из группы, состоящей из водорода, ОК64, СНЧНК65, ЧНК65' и фторметоксикарбонила (РМОС);
К62 выбирают среди водорода и (С1-С6)алкила;
К62' выбирают среди водорода, ОН, ОК62 и (С1-С6)-алкила;
К63 выбирают среди водорода и (С1-С6)алкила;
К64 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и СЧЧК66К67;
К65 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, ЧН2 и фторметоксикарбонила (РМОС);
К65' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, N4 и фторметоксикарбонила (РМОС);
К66 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и фторметоксикарбонила (РМОС);
К67 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
каждый из К1 и К2 выбирают независимо из группы, состоящей из галогена, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной группы, группы, ОК31, 8К31, ЧК31, ОН, 8Н, ЧК92, К93, ЧК94 и ЧН2;
каждый из К92, К93 и К94 выбирают независимо из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила;
при условии, что одного из группы, состоящей из К1 и К2, выбирают из группы, состоящей из ОК31, 8К31, ЧК31, ОН и 8Н; или
К1 и К2 можно взять вместе с С-18 и С-19 с образованием эпоксидного кольца, азиридинового кольца, эписульфидного кольца, сульфатного кольца, циклопропильного кольца или моно(С1-С6)-алкилфосфатного кольца; или
К1 и К2 можно взять вместе с образованием второй связи между С-18 и С-19;
К3 представляет низшую алкильную группу;
К4 представляет Н или ОН;
К5 представляет Н или ОН;
К4 и К5 можно взять вместе с образованием второй связи между С13 и С14;
К6 представляет заместитель, выбранный из группы, состоящей из бензила, гидроксибензила, алкоксибензила, галогеногидроксибензила, дигалогеногидроксибензила, галогеналкоксибензила, или дигалогеналкоксибензильную группу, В-кольцевую гетроароматическую группу, замещенную гетероароматическую группу, В-кольцевой (С1-С6)-алкил, (С3-С8)циклоалкил, замещенный (С3-С8)-циклоалкил, замещенный (С1-С6)-алкил, группу формулы III'
и группу формулы III
К7 выбирают из группы, состоящей из ЧК51К52, К53ЧК51К52, ОК53, Н и низшей алкильной группы; К51 и К52 выбирают, независимо, из группы, состоящей из (С1-С3)-алкила; К53 представляет (С1-С3)-алкил;
К8 представляет Н или низшую алкильную группу; или К7 и К8 могут образовывать циклопропильное кольцо;
К9 выбирают из группы, состоящей из Н, низшей алкильной группы, ненасыщенного низшего алкила, низшего алкил-(С3-С5)-циклоалкила и бензила;
Я10 представляет Н или низшую алкильную группу;
Я11 выбирают из группы, состоящей из водорода, ОН, низшей алкильной группы, замещенного фенила, бензила, замещенного бензила и фенила;
Я14 выбирают из группы, состоящей из водорода и низшей алкильной группы;
каждый из Я15, Я16 и Я17 выбирают, независимо, из группы, состоящей из водорода, ОЯ18, галогена, ΝΡ18'Ρ19'. ЫО2, ОРО3Н2, ОЯ19-фенила, 8СН2-фенила, ΟΟΝΗ2, СО2Н, РО3Н2, 8О2Я23 и ΖΖ;
Я18 выбирают из группы, состоящей из водорода, арила, (С1-С6)-алкила, С(О)Я90 и фторметоксикарбонила (РМОС);
Я18' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и С(О)Я90';
Я19 представляет (С1-С6)-алкил, С(О)Я90 и фторметоксикарбонил (РМОС);
Я19' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и С(О)Я90'; каждый из Я90, Я90', Я90 и Я90' выбирают, независимо, из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, ОЯ91 и арила;
Я91' выбирают из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила, арила и водорода;
Я23 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С3)-алкила;
Я30 представляет водород или (С1-С6)алкил; или
Я30 можно взять вместе с N в положении С-11 с образованием трех-семичленного цикла;
Я31 выбирают из группы, состоящей из (С1С12)-алкила, Я32;
Я32 выбирают из группы, состоящей из аминокислоты, углевода, аминосахара, (сахаридд)ч, С(О)Я33 и
Я33 выбирают из группы, состоящей из Я37Я38, Я38'Я37^ (Я20)Я38, Я3^(Я20')(С1-Сб)алкил-С(О)Я38, Я3^(Я20')С(О)Я38, Я37О(С1-С6)алкил-О-(С1 -С6)-алкил-О-(С1 -С6)-алкил-О-(С1 С6)-алкила и Я37(ХЯ18'Я20')Я38;
Я20' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и -СО2Я21';
Я21' выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
Я34 представляет (С1-С4)-алкил;
Я35 представляет водород или (С1-С3)алкил;
Я36 представляет водород, ОН, галоген, (С1-С3)-алкил, ОЯ34, NΟ2, ΝΗ2 и гетероароматическую группу;
Я37 представляет (С1-С6)-алкил;
Я38 представляет СООЯ39,
ΝΗ2, (ΝΡ18' Я20'), гетероциклическую группу, гетероароматическую группу, ОН, (С1-С6)алкил и аминокислоту;
Я39 представляет Н или (С1-С6)-алкил;
каждый из Я40, Я41 и Я42 выбирают, независимо, из группы, состоящей из водорода, ОЯ43, галогена, ΝΗ2, NΟ2, ОРО(ОЯ46)2, -ОЯ44-фенила и Я45;
Я43 представляет (С1-С6)-алкил; Я44 представляет (С1-С6)-алкил;
Я45 выбирают из группы, состоящей из незамещенной простой ароматической группы и замещенной простой ароматической группы;
Я46 выбирают из группы, состоящей из Н, Να, (С1-С6)-алкила и -С(Сн3)3;
О
Я50 представляет водород или ;
η равен 0, 1 или 2; т равен 0, 1 или 2; р равен 0, 1 или 2; с.| равен 2, 3 или 4;
X выбирают из группы, состоящей из О, С, 8, ΝΗ и алкиламино;
Υ выбирают из группы, состоящей из С, О, ΝΗ, 8, 8О, 8О2 и алкиламино;
Ζ выбирают из группы, состоящей из -(СН2)п-, -(СН2)р-О-(СН2)т- и (С3-С5)-циклоалкила;
ΖΖ выбирают из группы, состоящей из простой незамещенной ароматической группы и простой замещенной ароматической группы;
или их фармацевтически приемлемым солям или сольватам;
при условии, что если Я1 выбирают из группы, состоящей из галогена, ОН, ОЯ31, 8Η, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, а Я2 выбирают из группы, состоящей из ОН, ΝΗ2, NЯ31 и 8Η, или Я1 и Я2 вместе образуют эпоксидное кольцо, азиридиновое кольцо, эписульфидное кольцо, сульфатное кольцо, циклопропильное кольцо или моноалкилфосфатное кольцо, или Я1 и Я2 вместе образуют вторую связь; Я3 представляет низший алкил; Я4 и Я5 представляют Н, или Я4 и Я5, взятые вместе, образуют двойную связь между С13 и С14; Я6 представляет бензил, гидроксибензил, алкоксибензил, галогенгидроксибензил, дигалогенгидроксибензил, гелогеналкоксибензил или дигалогеналкоксибензил; каждый из Я7, Я8, Я9 и Я10 представляет, независимо, Н или низшую алкильную группу; и каждый из Х и Υ представляет, независимо, О, ΝΗ или алкиламино, и Я50
представляет * а Я11 представляет водород; тогда
Аг не выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической, незамещенной гетероаромати-
ческой и замещенной гетероароматической группы; или если Аг выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической, незамещенной гетероароматической и замещенной гетероарома50 Л тической группы; и К50 представляет <
а К11 представляет водород; тогда
К2 выбирают из группы, состоящей из га логена, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной, фосфатной группы, ОК31 и 8К31; или если К1 выбирают из группы, состоящей из галогена, ОН, ОК31, 8Н, амино, моноалкилами но, диалкиламино, триалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, и К2 выбирают из группы, состоящей из ОН, ΝΗ2, ЫК31 и 8Н, или К1 и К2 вместе образуют эпоксидное кольцо, азиридиновое кольцо, эписульфидное кольцо, сульфатное кольцо, циклопропильное кольцо или моноалкилфосфатное кольцо, или К1 и К2 вместе образуют вторую связь, и К3 представляет низший алкил, а К4 представляет Н, и К5 представляет Н, и К50 представляет водород, и К11 представляет водород; тогда
Аг не выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической и гетероароматической группы; или если К1 выбирают из группы, состоящей из галогена, ОН, ОК31, 8Н, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, и К2 выбирают из группы, состоящей из ОН, ΝΗ2, ЫК31 и 8Н, или К1 и К2 вместе образуют эпоксидное кольцо, азиридиновое кольцо, эписульфидное кольцо, сульфатное кольцо, циклопропильное кольцо или моноалкилфосфатное кольцо, или К1 и К2 вместе образуют вторую связь, и К3 представляет низший алкил, а К4 представляет Н, и К5 представляет Н, и К50 представляет водород, и К11 представляет водород; или К50 выбирают из в и группы, состоящей из и водорода; и К выбирают из группы, состоящей из ОН, низшей алкильной группы, замещенного фенила, бензила, замещенного бензила и фенила; тогда
Аг не выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической, замещенной гетероароматической и незамещенной гетероароматической группы; или если К3 представляет низший алкил; К4 и К5 представляют Н, или К4 и К5, взятые вместе, образуют двойную связь между С13 и С14; К6 представляет бензил, гидроксибензил, алкокси бензил, галогеногидроксибензил, дигалогеногидроксибензил, галогеноалкоксибензил или дигалогеноалкоксибензил; каждый из К7, К8, К9 и К10 представляет независимо Н или низшую алкильную группу; и каждый из Х и Υ представляет, независимо, О, ЫН или алкиламино;
и Аг представляет группу формулы Аг', и один из К54, К55, К56 выбирают из группы, состоящей из алкила или галогена; и
К1 и К2 могут быть взяты вместе с образованием эпоксидного кольца, азиридинового кольца, эписульфидного кольца, сульфатного кольца, циклопропильного кольца или моноалкилфосфатного кольца; или К1 и К2 могут быть взяты вместе с образованием второй связи между С18 и С19; или К2 выбирают из группы, состоящей из ОН и 8Н;
тогда, по меньшей мере, два из К54, К55 и К56 должны быть выбраны из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила, простой ароматической группы, фенила, СООК57, РО3Н, 8О3Н, §О2К58, ЫК59К60, ЫНОК61, ЫНСНК61', СЫ, ЫО2, галогена, ОК62 и 8К63; или если К3 представляет низший алкил; К4 и К5 представляют Н, или К4 и К5, взятые вместе, образуют двойную связь между С13 и С14; К6 представляет В-кольцевую гетероароматическую, замещенную гетероароматическую группу, В-кольцевой (С1-С6)-алкил, (С3-С8)циклоалкил, замещенный (С3-С8)-циклоалкил, замещенный (С1-С6)-алкил, группу формулы III'
и группу формулы III
и каждый из Х и Υ представляет, независимо, О, ЫН или алкиламино; тогда
Аг не выбирают из группы, состоящей из фенила или любой простой незамещенной или замещенной ароматической или гетероароматической группы, (С1-С12)-алкила и (С2-С12)алкинила.
Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, способу разрушения системы микротрубочек с использованием эффективного количества соединения формулы I, способу ингибирования пролиферации клеток млекопитающего, включающему введение эффективного количества соединения формулы I, и способу лечения неоплазии у млекопитающего, включающему введение эффективного количества соединения формулы I. Кроме того, изобретение относится к способу борьбы с микозом, включающему введение животному, зараженному или чувствительному к микозу, противогрибковго эффективного количества соединения формулы I.
Используемый здесь термин «простой алкил» будет относиться к (С1-С7)-алкилу, при этом алкил может быть насыщенным, ненасыщенным, разветвленным или линейным. Примерами, но никоим образом не ограничением, являются метил, этил, н-пропил, изопропил, нбутил, пропенил, этенил, втор-бутил, н-пентил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, метилированные бутильные группы, пентил, трет-пентил, втор-пентил, метилированные пентильные группы и подобные группы. Термин «алкенил» относится к алкильной группе, определенной выше, с одной-тремя двойными связями. Термин «алкинил» относится к алкильной группе, определение которой дается выше, по меньшей мере, с одной тройной связью. Особенно предпочтительно, когда алкинил имеет только одну тройную связь. Термин «(С1-Сп')-алкил, где п' является целым числом от 2 до 12» обозначает алкильную группу, имеющую от одного до указанного числа атомов углерода. (С1-Сп')-алкил может быть линейным или разветвленным.
Используемый здесь термин «В-кольцевой (С1-С6)-алкил» относится к насыщенному, ненасыщенному, разветвленному и линейному алкилу, при этом В-кольцевая (С1-С6)-алкильная группа может включать до трех (3) «неуглеродных» заместителей. Такие неуглеродные заместители выбираются, наиболее предпочтительно, из группы, состоящей из ОН, 8СН2-фенила, Ν42, СО, (ΌΝΙ12, СО2Н, РО3Н2, 8О2К21, где К21 выбирают среди водорода и (С1-С3)-алкила.
Используемый здесь термин «аминокислота» обозначает органическую кислоту, содержащую аминогруппу. Термин включает как встречающиеся в природе, так и синтетические аминокислоты, поэтому аминогруппа может, но не обязательно, присоединяться к атому углерода, следующему за кислотной группой. Аминокислотный заместитель присоединяется к исходной молекуле через функциональную группу органической кислоты.
Используемый здесь термин «углевод» относится к классу заместителей, состоящих из углерода, водорода и кислорода, при этом водород и кислород находятся в тех же пропорциях, что в воде, или почти в тех же пропорциях, что в воде. Термин «углевод» также относится к альдегиду или кетоспирту, или к соединению, которое при гидролизе образует альдегид или кетон. Термин «углевод» таков, как он обычно понимается специалистами в этой области техники. Например, термин относится, но никоим образом этим не ограничивается, к С12Н22О11 и С6НюО5.
Используемый здесь термин «аминосахар» относится к углеводной группе, содержащей от одного до трех аминозаместителей в молекуле углевода в любом доступном положении.
Используемый здесь термин «сахарид» относится к углеводным подгруппам, образующим дисахариды или полисахариды. Этот термин, например, обозначает, но никоим образом этим не ограничивается, лактозу, мальтозу, сахарозу, фруктозу, крахмал и т.п.
Используемый здесь термин «замещенный фенил» будет относиться к фенильной группе с одним-тремя отличными от водорода заместителями, которые можно выбрать, независимо, из группы, состоящей из простого алкила, С1, Вг, Т и I.
Используемый здесь термин «замещенный бензил» будет относиться к бензильной группе с одним-тремя отличными от водорода заместителями, которые можно выбрать, независимо, из группы, состоящей из простого алкила, С1, Вг, Г и I, при этом такие заместители могут присоединяться к любому доступному атому углерода. Некоторые предпочтительные замещенные бензилы также описаны. Используемый здесь термин «алкоксибензил» относится к бензильной группе с алкоксизаместителем в любом доступном положении бензильного кольца. Наиболее предпочтительной алкокси-группой является -О(С1-С3)-алкил. Особенно предпочтительна метокси. Соответственно, термин «галогеналкоксибензил» относится к бензильной группе, имеющей кроме алкоксизаместителя галогенозаместитель. Каждая галогено- или алкоксигруппа замещается у любого доступного атома углерода. Подобным образом, термин «галогеногидроксибензил» относится к гидроксизамещенной бензильной группе, которая содержит также галогенозаместитель у любого доступного атома углерода в бензильном кольце. Наконец, термин «дигалогеналкоксибензил» относится к алкоксизамещенному бензилу, который, кроме того, содержит два галогенозаместителя, каждый из которых является независимым заместителем у любого доступного атома углерода на бензильном кольце.
Используемый здесь термин «В-кольцевая гетероароматическая группа» относится к ароматическим кольцам, содержащим один или несколько неуглеродных заместителей, выбранных из группы, состоящей из атомов кислорода, азота и серы. Особенно предпочтительные Вкольцевые гетероциклические группы выбирают, но не ограничиваются, из группы, состоящей из
Особенно предпочтительно, когда «Вкольцевая гетероароматическая группа» отноК20 выбирают среди водорода и (С1-С6)алкила.
сится к заместителю, выбранному из группы, состоящей из
Определение «замещенная ароматическая» относится к группе, замещенной одним-тремя заместителями, выбранными из группы, состоящей из простого алкила и галогена.
Используемый здесь термин «циклоалкил» относится к насыщенной (С3-С8)-циклоалкильной группе, при этом такая группа может включать от нуля до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из (С1-С3)-алкила, галогена и ОК22, где ОК22 выбирают среди водорода и (С1-С3)-алкила. Такие заместители могут присоединяться к любому доступному атому углерода. Особенно предпочтительно, когда циклоалкил представляет замещенный или незамещенный циклогексил.
Используемый здесь термин «низшая алкоксильная группа» обозначает алкильную группу с одним-пятью атомами углерода, связанную с атомом кислорода. Используемый здесь термин «низшая алкильная группа» обозначает алкильную группу с одним-шестью атомами углерода и включает линейные и нелинейные углеводородные цепи, в том числе, например, но не в качестве ограничения, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, третбутил, втор-бутил, метилированные бутильные группы, пентил, трет-пентил, втор-пентил и метилированные пентильные группы. Используемые здесь термины «ненасыщенная низшая алкильная группа» и «насыщенная низшая алкильная группа» будут означать то, что обычно у специалиста ассоциируется с терминами «ненасыщенный» и «насыщенный». Термин «низший алкил» будет относиться как к насыщенным, так и к ненасыщенным низшим алкильным группам. (Например, насыщенная группа не содержит двойных или тройных связей). Используемый здесь термин «алкилзамещенный алкен» обозначает любой алкен с двумя-семью атомами углерода, который содержит алкильный заместитель.
Используемый здесь термин «эпоксидное кольцо» обозначает трехчленное кольцо, состоящее из двух атомов углерода и атома кислорода. Используемый здесь термин «азиридиновое кольцо» обозначает трехчленное кольцо, состоящее из двух атомов углерода и атома азота. Используемый здесь термин «сульфидное кольцо» обозначает трехчленное кольцо, состоящее из двух атомов углерода и атома серы. Используемый здесь термин «эписульфидное кольцо» обозначает трехчленное кольцо, состоящее из двух атомов углерода и атома серы. Используемый здесь термин «сульфатное кольцо» обозначает пятичленное кольцо, состоящее из цепи «углерод-углерод-кислород-серакислород» с двумя дополнительными атомами кислорода, присоединенными к атому серы. Используемый здесь термин «моноалкилфосфатное кольцо» обозначает пятичленное кольцо, состоящее из цепи «углерод-углерод-кислородфосфор-кислород» с двумя дополнительными атомами кислорода, один из которых несет низшую алкильную группу, присоединенными к атому фосфора.
Используемый здесь термин «простая незамещенная ароматическая группа» относится к обычным ароматическим кольцам с 4п+2 электронами в моноциклической или в бициклической сопряженной системе, например, но не в порядке ограничения, к фурилу, пирролилу, тиенилу, пиридилу и т.п., или к бициклической сопряженной системе, например, но не в порядке ограничения, к индолилу или нафтилу.
Используемый здесь термин «простая замещенная ароматическая группа» относится к простому ароматическому кольцу, замещенному одной группой, выбранной из группы, состоящей из галогена и низшей алкильной группы.
Используемое здесь определение «гетероароматический» относится к ароматическим кольцам, содержащим один или несколько неуглеродных атомов, выбранных из группы, состоящей из атомов кислорода, азота и серы. Наиболее предпочтительные гетероароматические циклы содержат в кольце от трех до восьми атомов. Особенно предпочтительная группа гетероароматических колец имеет три-шесть атомов. Особенно предпочтительно, когда гетероароматическая группа будет содержать в кольце один-три неуглеродных атома. Одной из предпочтительных гетероароматических групп является пятичленное кольцо, содержащее один атом кислорода; однако, указанный термин никоим образом не ограничивается этой группой.
Используемое здесь определение «гетероциклический» относится к циклам, содержащим один или несколько неуглеродных атомов, выбранных из группы, состоящей из атомов кислорода, азота и серы. Г етероциклические группы могут быть насыщенными или ненасыщенными. Кроме того, гетероциклические группы могут конденсироваться друг с другом с образованием бициклической или трициклической системы, например, но не в порядке ограничения, пятичленного кольца с двумя двойными связями или пятичленного кольца с одной двойной связью. Гетероциклические группы могут быть незамещенными или могут содержать от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила, карбонила, галогена и ОК62. Наиболее предпочтительные гетероциклические группы содержат тривосемь атомов в кольце. Особенно предпочтительная группа гетероциклических групп содержит три-шесть членов. Особенно предпочтительно, если гетероциклическая группа будет содержать от одного до трех неуглеродных атомов. Одной из предпочтительных гетероциклических групп является пятичленное кольцо с одним атомом азота, одним атомом серы, одним метильным заместителем и двумя двойными связями.
Предпочтительная гетероциклическая группа представляет, но не ограничивается этой группой,
Определение «замещенная гетероароматическая» относится к группе, замещенной однимтремя заместителями, выбранными из группы, состоящей из простого алкила и галогена.
Используемый здесь термин «галоген», или «гало», относится к членам группы периодической таблицы, исторически известным как «галогены». Способы галогенирования включают, но ограничиваются перечисленным, присоединение галогенводородов, замещение при высокой температуре, галогенирование на свету, и т.п., и эти способы известны специалистам в этой области техники. Особенно предпочтительными галогенами являются, но не в порядке ограничения, хлор, фтор и бром.
Используемый здесь термин «арил» имеет значения, обычно ассоциирующиеся с этим термином у специалистов. Так, этот термин обозначает органический радикал, образовавшийся от ароматического углеводорода посредством удаления одного атома водорода. Примерами, но не ограничением, являются фенил, толил, салицил и подобные радикалы.
Используемый здесь термин «млекопитающее» относится к классу млекопитающих высших позвоночных. Термин «животное» будет включать, но не ограничиваться, млекопитающих, рептилий, амфибий и рыб. Термин «млекопитающее» включает, но не ограничивается этим, человека. Термин «лечение», используемый здесь, включает профилактику названного состояния или уменьшение симптомов, или ликвидацию состояния, как только оно установлено. Заявляемые здесь криптофицины могут быть полезны для целей оздоровления в ветеринарии, а также для лечения человека.
Когда нужный заместитель К6 в соединении содержит амин, тогда аминозаместитель группы К6 необходимо защитить с использованием аминозащищающей группы. Специалист может легко выбрать подходящую защитную для аминогруппы группу, руководствуясь из вестными работами, в том числе, например, РгоШейуе Сгоирз ΐη Огдаше СЬеннзВу, Р1епит Ргезз (Ьопбоп апб \е\х Уогк, 1973); Сгеепе, Т.^., Рго!ее11уе Сгоирз ΐη Огдаше 8упШез1з, ^11еу (\е\\- Уогк, 1981).
Используемый здесь термин «дериватизация» относится к стандартным химическим превращениям, известным специалистам в этой области техники, которые позволяют получить соединения данного изобретения.
Заявляемый здесь способ относится, в общем, к способу получения синтетических криптофицинов. Удобно, что коммерчески доступные аминокислоты можно циклизовать до молекулы криптофицина.
Многие из известных криптофицинов обладают противоопухолевым действием; однако, плохая растворимость в воде может представлять проблему при внутривенном введении лекарственного средства. Такие проблемы связаны с использованием солюбилизирующих поверхностно-активных веществ, таких как кремофор, которые могут обладать присущей им токсичностью.
Задачей настоящего изобретения является создание криптофицинов, обладающих противоопухолевой активностью, а также более высокой растворимостью в воде. Такие соединения имеют нужные характеристики по растворимости, а также приемлемую эффективность.
Способы получения соединений данного изобретения наиболее предпочтительно осуществлять в присутствии растворителя. Специалист в этой области техники может выбрать подходящие растворители с использованием стандартных подходов. Подходящими инертными органическими растворителями являются растворители, известные специалистам, например, но не как ограничение, тетра-гидрофуран (ТГФ) и диметилформамид (ДМФА). Особенно предпочтителен ДМФА. Для некоторых из используемых здесь способов могут быть подходящими растворители на водной основе. Можно отрегулировать рН такого водного растворителя до нужного значения для облегчения процесса.
В таблице приводятся некоторые типичные соединения данного изобретения; однако, такие названные соединения не предназначены для какого-либо ограничения объема данного изобретения.
Таблица 1
Дополнительными предпочтительными соединениями являются, например, но не ограни чиваются ими, соединения, названные выше в таблице 1, в которых меняются положения соседних ОК и С1-групп, например, с теми же названными выше заместителями К, в которых основной структурой является
Другими представляющими интерес соединениями являются соединения, приведенные в таблице 1, в которых, однако, Аг вместо фенила представляет Аг', и К54 в пара-положении Аг' представляет ОСН3, в то время как каждый из К55 и К56 представляет водород.
Также представляющими интерес соединениями являются соединения, приведенные в таблице 1, в которых, однако, группа ΝΗ заменяет О в положении Υ молекулы. Например, одним из соединений этого ряда является
Также предпочтительными соединениями являются, например, но не ограничиваются перечисленным, соединения, приведенные выше в таблице 1, а также соединения, в которых меняются местами соседние С1 и ОК; при этом каждое из названных соединений содержит одну метильную группу вместо двух диметильных групп в положении 6 криптофицинового кольца. См., например, 23, ниже.
Особенно предпочтительные соединения данного изобретения содержат диметильную группу в положении 6 криптофицинового кольца.
Предпочтительным соединением данного изобретения является представленное в таблице 1 соединение, в котором Аг представляет Аг'; только один из К54, К55 и К56 представляет ОСН3; каждый из К9 и К10 представляет метил.
В способах получения соединений данного изобретения используют общеизвестные силилирующие агенты. См., например, СаМп, Е.Ш., 8Шсоп КеадеЫз т Огдатс 8упШе818, АсайешК Ргезз (Ьопбоп, 1988). Особенно полезными силилирующими агентами являются агенты, содержащие «три-(низший алкил)-силил» - термин, охватывающий триизопропилсилил, триметилсилил и триэтилсилил, триметилсилилгалогениды, силилированные мочевины, такие как бис(триметилсилил) мочевина (В8И), и силилированные амиды, такие как МО-бис(триметилсилил)ацетамид (В8А). Предпочтительным среди них является В8А.
Некоторые предпочтительные признаки данного изобретения указываются ниже в таблице, при этом можно выбрать независимо признаки, обеспечивающие предпочтительные варианты воплощения данного изобретения. Изобретение никоим образом не ограничивается описанными ниже особенностями.
A) К8 представляет этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил или изопентил;
Б) К7 представляет этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил или изопентил;
B) К7 представляет Н, К8 представляет метил, К3 представляет метил, и Х и Υ - оба - не являются 0;
Г) К3 представляет этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил или изопентил;
Д) К9 представляет метил, этил, пропил, бутил, изобутил, пентил или изопентил;
Е) К10 представляет метил, этил, пропил, бутил, изобутил, пентил или изопентил;
Ж) криптофицин, в котором, по меньшей мере, одна из групп, выбранных из группы, состоящей из С-3, С-6, С-7, С-10, С-16, С-17 и С18, имеет К-стереохимическую конфигурацию (нумерация приводится выше в формуле I);
3) криптофицин, в котором, по меньшей мере, одна из групп, выбранных из группы, состоящей из С-3, С-6, С-7, С-10, С-16, С-17 и С18, имеет 8-стереохимическую конфигурацию (нумерация приводится выше в формуле I);
И) Аг' представляет фенил с заместителем, выбранным из группы, состоящей из НК59К60, ΝΗΘΚ61 и ЫНСНК61';
Й) соединение, в котором Υ выбирают из группы, состоящей из алкиламино, ΝΗ и О;
К) соединение, в котором Υ представляет О, каждый из К7 и К10 представляет водород; К9 представляет низший алкил; и К1 представляет галоген;
Л) каждый из К7 и К8 представляет метил;
М) К7 представляет водород;
Н) К2 представляет глицинат;
O) К2 представляет ацилат;
П) К1 и К2 образуют эпоксидное кольцо;
P) К6 выбирают из группы, состоящей из бензила, гидроксибензила, алкоксибензила, галогенгидроксибензила, дигалогенгидроксибензила, галогеналкоксибензила и дигалогеналкоксибензила;
С) К4 и К5 образуют двойную связь;
Т) η равен 0; К6 представляет замещенный бензил, где одним заместителем является галоген, а другой представляет группу ОК12, где К12 представляет низший алкил;
У) соединение формулы I применяют для разрушения системы микротрубочек;
Ф) соединение формулы I применяют в качестве противоопухолевого средства;
X) соединение формулы I применяют для лечения рака у млекопитающего;
Ц) соединение формулы I применяют в качестве противогрибкового средства;
4) К6 имеет формулу III' и является гидро ксизамещенным в пара-положении.
Ш) К6 выбирают из группы, состоящей из
Щ) Ζ представляет -(СН2)п-, где η равен 0;
ΑΑ) Ζ представляет -(СН2)П-, где η равен 2;
ББ) Ζ представляет -(СН2)П-, где η равен 1;
ВВ) по меньшей мере, одного из К15, К16 и К17 выбирают из группы, состоящей из 8СН2фенила, ΝΗ2, СО, СОМЬ, СО2Н, РО3Н2 и 8О2К21; где К21 выбирают среди водорода и (С1С3)-алкила;
ГГ) Аг представляет фенил;
ДД) Аг представляет фенил, замещенный одним или двумя заместителями из группы, состоящей из ОН, ОСН3, галогена и метила;
ЕЕ) К2 выбирают из группы, состоящей из галогена, амино, моноалкиламино, диалкилами но, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной группы, фосфатной группы, ОК31К32 и 8К31К32;
ЖЖ) К6 содержит Ζ, где первый атом углерода Ζ-группы является
по отношению к точке присоединения к молекуле криптофицина;
ЗЗ) соединение формулы I применяют для лечения микоза;
ИИ) К50 представляет
ЙЙ) К11 представляет водород;
КК) каждый из К4 и К5 представляет водород;
ЛЛ) Аг является фенилом, этилзамещенным в пара-положении;
ММ) Аг является фенилом, метилзамещенным в пара-положении;
НН) Υ представляет Ν^
ОО) К3 представляет метил;
ПП) К6 выбирают из группы, состоящей из
Настоящее изобретение относится к способу облегчения патологического состояния, вызванного гиперпролиферирацией клеток млекопитающего, включающему введение субъекту эффективного количества фармацевтической или ветеринарной композиции, описанной здесь, для ингибирования пролиферации клеток. В предпочтительном варианте воплощения дан ного изобретения способ включает также назначение субъекту, по меньшей мере, одного дополнительного лечения, направленного на облегчение патологического состояния. В предпочтительном варианте воплощения данного изобретения патологическое состояние характеризуется образованием неоплазм. В другом предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения неоплазмы выбирают из группы, состоящей из опухолей молочной железы, мелкоклеточных опухолей легкого, немелкоклеточных опухолей легкого, колоректальной опухоли, лейкоза, меланомы, аденокарциномы поджелудочной железы, опухолей в центральной нервной системе (ЦНС), опухолей яичника, предстательной железы, саркомы мягкой ткани или кости, опухолей головы и шеи, опухолей желудочно-кишечного тракта, к которым относятся опухоли поджелудочной железы, пищевода и желудка, миеломы, опухолей мочевого пузыря, почек, опухолей нейроэндокринной системы, к которым относятся опухоли щитовидной железы и опухоли, не относящиеся и относящиеся к болезни Ходжкина.
Используемое здесь определение «неопластическое» относится к новообразованию с аномальным ростом, причем такой рост происходит из-за пролиферации клеток, не подчиняющейся обычным ограничениям роста. Используемый здесь термин «противоопухолевое средство» включает любое соединение, композицию, добавку, совместную композицию или смесь, которая ингибирует, устраняет, замедляет или реверсирует неопластический фенотип клетки.
Антимитотические средства на основании молекулярного механизма их действия можно подразделить на три группы. Первая группа состоит из средств, включающих колхицин и колцемид, которые ингибируют образование микротрубочек путем изоляции тубулина. Вторая группа состоит из средств, включающих винбластин и винкристин, индуцирующих образование паракристаллических скоплений тубулина. Винбластин и винкристин являются хорошо известными противораковыми лекарственными средствами; их воздействие, разрушающее микротрубочки митотического веретена, ингибирует преимущественно гиперпролиферирующие клетки. Третья группа состоит из средств, включающих таксол, которые промотируют полимеризацию тубулина и таким образом стабилизируют микротрубочки.
Проявление фенотипа устойчивости к лекарственным средствам и множественной лекарственной устойчивости клетками многих опухолей и клинически доказанный способ действия антимикротрубочных средств против опухолевых клеток требуют разработки средств против микротрубочек, цитотоксичных для опухолевых клеток, неустойчивых к лекарственным средствам, а также цитотоксичных для опухоле вых клеток с фенотипом устойчивости к лекарственным средствам.
В настоящее время при лечении рака применяют химиотерапию, операции, лучевую терапию, терапию с биомодуляторами и иммунотерапию. Каждый вид терапии имеет специфические показания, известные специалистам в этой области техники, и один из них или все могут использоваться при попытке добиться общего разрушения опухолевых клеток. Кроме того, комбинированная химиотерапия - химиотерапия с использованием соединений формулы I в сочетании с другими противоопухолевыми средствами также составляет предмет изобретения, так как комбинированная терапия обычно более эффективна, чем применение одного противоопухолевого средства. Таким образом, другой задачей настоящего изобретения является создание композиции, содержащей терапевтически эффективное количество, по меньшей мере, одного соединения формулы I, в том числе его нетоксичные соли присоединения, служащих для обеспечения перечисленных выше преимуществ. Такие композиции также могут дополняться физиологически переносимой жидкостью, гелем или твердыми носителями, разбавителями, адъювантами и эксципиентами. Такие носители, адъюванты и эксципиенты можно найти в и. 8. Рйатшасорое1а, νοΙ.ΧΧΙΙ, и в ΝαΙίοηαΐ Еогши1агу, νοί.χνίΐ, и.8. Рйатшасорое1а Соиуеийои, 1пс., КоскуШе, ΜΌ (1989). Дополнительные виды лечения приводятся в АНЕ8 Эгид 1и£огша11ои, 1993, издание Ашейсаи Нозрйа1 Еогши1агу 8етуюе, сс.522-660. Каждое из этих упомянутых изданий хорошо известно и доступно для специалистов.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, применяемой для лечения неопластической болезни, содержащей, по меньшей мере, одно соединение формулы I и, по меньшей мере, одно дополнительное противоопухолевое средство. Противоопухолевыми средствами, которые можно использовать в сочетании с соединениями формулы I, являются средства, указанные в Мегск 1ибех 11, рр. 16-17, Мегск & Со., Шс. (1989). Мегск Шбех широко известен и доступен для специалистов.
В другом варианте воплощения данного изобретения противоопухолевые средства могут представлять антиметаболиты, к которым относятся, но никоим образом ими не ограничиваются, антиметаболиты, выбранные из группы, состоящей из метотрексата, 5-фторурацила, 6меркаптопурина, цитозина, арабинозида, гидроксимочевины и 2-хлордезоксиаденозина. В другом варианте воплощения настоящего изобретения рассматриваемые противоопухолевые средства могут представлять алкилирующие агенты, которые могут включать, но никоим образом ими не ограничиваются, средства, выбранные из группы, состоящей из циклофосфамида, мефа лана, бусульфана, параплатина, хлорамбуцила и азотистого иприта. Еще в одном варианте воплощения изобретения противоопухолевые средства представляют растительные алкалоиды, к которым можно отнести, но не ограничить перечисленным, средства, выбранные из группы, состоящей из винкристина, винбластина, таксола и этопозида. В другом варианте рассматриваемые противоопухолевые средства представляют антибиотики, к которым можно отнести, но никоим образом этим не ограничиваться, средства, выбранные из группы, состоящей из доксорубицина, даунорубицина, митомицина С и блеомицина. Еще в одном варианте воплощения изобретения рассматриваемые противоопухолевые средства представляют гормоны, к которым можно отнести, но никоим образом ими не ограничиваться, средства, выбранные из группы, состоящей из калустерона, диомоставолона, пропионата, эпитиостанола, мепитиостана, тестолактона, тамоксифена, полиэстрадиолфосфата, мегестеролацетата, флутамида, нилутамида и трилотана.
В другом варианте воплощения изобретения рассматриваемые противоопухолевые средства включают ферменты, к которым можно отнести, но не ограничиваться ими, средства, выбранные из группы, состоящей из Ь-аспарагиназы и производных аминоакридина, таких как, но не только, амсакрин. Дополнительные противоопухолевые средства включают средства, указанные в работе 8кее1. Ко1апб Т., Апбпеор1акйс Эгидк апб Вю1одю Кекропке МобШет: С’1аккб1са1юп. Ике апб Тохкбу о! СНшсабу ИкеГи1 АдегИк. НапбЬоок о! Сапсег СйетоШегару (3гб еб.). Ьббе Вгомп & Со. (1991).
Эти соединения и композиции можно вводить млекопитающим при применении в ветеринарии. Например, домашних животных можно лечить теми же способами, что и больных людей. Обычно, дозировка, необходимая для лечебного действия, будет меняться в соответствии с видом применения, способом введения, а также конкретными требованиями отдельных хозяев. Обычно дозировка составляет интервал примерно от 0.001 до 1000 мг/кг, а чаще - 0.0110 мг на кг массы тела хозяина. С другой стороны, дозировки в пределах этих интервалов можно вводить путем непрерывного вливания на протяжении длительного периода времени, обычно превышающем 24 ч, до получения желательного лечебного действия. Действительно, дозировку лекарственного средства, так же, как и способ введения, необходимо выбирать с учетом относительной эффективности, относительной токсичности, особенностей роста опухоли и действия соединения формулы I на клеточный цикл, фармакокинетики лекарственного средства, возраста, пола, физического состояния пациента и предшествующего лечения, что может установить специалист.
Соединение формулы I. с дополнительными противоопухолевыми средствами или без них, можно вводить в состав терапевтических композиций в виде естественной формы или формы соли. Фармацевтически приемлемые нетоксичные соли включают соли присоединения оснований, которые могут образовывать неорганические основания, такие как, например, гидроксиды натрия, калия, аммония, кальция или железа (3), и такие органические основания как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламиноэтанол, гистидин, прокаин и подобные. Такие соли могут также образовываться в виде солей присоединения кислот с любыми свободными катионными группами, и обычно будут образовываться с неорганическими кислотами, такими как, например, хлористоводородная или фосфорная кислоты, или органическими кислотами, такими как уксусная, щавелевая, винная, миндальная и подобные. Дополнительные эксципиенты, также предлагаемые по изобретению специалисту, см., например, в Фармакопеи США.
Пригодность определенных носителей для включения их в данные терапевтические композиции зависит от предпочтительного способа введения. Например, можно составить противоопухолевые композиции для перорального введения. Такие композиции обычно готовят в виде жидких растворов или суспензий или в твердой форме. Пероральная композиция обычно содержит такие добавки, как связующие, наполнители, носители, консерванты, стабилизаторы, эмульгаторы, буферы, маннит, лактозу, крахмал, стеарат магния, натрийсахарин, целлюлозу, карбонат магния и подобные. Эти композиции могут принимать форму растворов, суспензий, таблеток, пилюль, капсул, составов с отсроченным высвобождением или порошков и обычно содержат 1%-95% активного ингредиента. Предпочтительнее, такая композиция содержит примерно от 2% до, примерно, 70% активного ингредиента.
Композиции настоящего изобретения можно получить в виде составов для инъекций или в виде жидких растворов, или суспензий, или эмульсий; или твердых форм, пригодных для приготовления раствора или суспензии в жидкости перед инъекцией. Такие составы для инъекций можно вводить подкожно, внутривенно, интраперитонеально, внутримышечно, внутриоболочечно или интраплеврально. Активный ингредиент или ингредиенты часто смешивают с разбавителями, носителями или эксципиентами, которые физиологически переносимы и совмещаются с активным ингредиентом (ингредиентами). Подходящими разбавителями и эксципиентами являются, например, вода, физиологический раствор, декстроза, глицерин или подобные вещества и их комбинации. Кроме того, если желательно, композиции могут содержать небольшое количество вспомогательных ве ществ, таких как смачиватели или эмульгаторы, стабилизаторы или буферирующие вещества.
Изобретение также относится к использованию соединений формулы I для ингибирования пролиферации клеток млекопитающего посредством приведения в контакт этих клеток с соединением формулы I в количестве, достаточном для ингибирования пролиферации клетки млекопитающего. Предпочтительным вариантом является способ ингибирования пролиферации гиперпролиферирующих клеток млекопитающего. Для данного изобретения «гиперпролиферирующие клетки млекопитающего» являются клетками, не поддающимися характерным ограничениям роста (например, запрограммированной гибели клеток). Другим предпочтительным вариантом является случай, когда клетка млекопитающего является человеческой клеткой. Изобретение также относится к контактированию клетки млекопитающего, по меньшей мере, с одним соединением формулы I и, по меньшей мере, с одним противоопухолевым средством. Типы рассматриваемых противоопухолевых средств описываются выше.
Изобретение также относится к использованию соединения формулы I для ингибирования пролиферации гиперпролиферирующих клеток с фенотипами лекарственной устойчивости, включая клетки с фенотипами множественной лекарственной устойчивости, посредством контакта указанной клетки с соединением формулы I в количестве, достаточном для ингибирования пролиферации гиперпролиферирующей клетки млекопитающего. Предпочтительным вариантом является случай, когда клетка млекопитающего является человеческой клеткой. Изобретение также относится к контактированию соединения формулы I и, по меньшей мере, одного дополнительного противоопухолевого средства из описанных выше.
Изобретение относится к способу облегчения патологических состояний, вызванных гиперпролиферирующими клетками млекопитающего, например, неоплазии, посредством введения субъекту эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I, для ингибирования пролиферации гиперпролиферирующих клеток. Используемый здесь термин «патологическое состояние» относится к любой патологии, появляющейся из-за пролиферации клеток млекопитающего, которая не поддается нормальным ограничениям роста. Такая пролиферация клеток может происходить в связи с описанными выше новообразованиями.
В другом предпочтительном варианте воплощения изобретения опухолевые клетки являются человеческими клетками. Настоящее изобретение относится к способам облегчения таких патологических состояний с использованием соединения формулы I в сочетании с дру гими видами лечения, а также другими противоопухолевыми средствами.
Эффективность заявляемого соединения можно оценить с использованием стандартных способов, известных специалисту в этой области техники.
Примерами таких способов являются способы, описанные ниже.
Обнаружено, что соединения данного изобретения полезны против патогенных грибов. Например, полезность для лечения от С'гурЮсоссик пеоГогтапк можно проиллюстрировать результатами испытаний против Стур1ососси8 пеоГогтапк с использованием среды основного декстрозного агара с азотом дрожжей. При осуществлении анализа соединение данного изобретения растворяют в диметилсульфоксиде с добавлением твина 20. Осуществляют двойное разведение стерильной дистиллированной водой с 10% ДМСО для получения конечной концентрации лекарственного средства на агаровых пластинках с разведением в интервале от 0,008 мкг/мл до 16,0 мкг/мл при анализе против расширенного набора из 84 штаммов Стур1ососси8 пеоГогтапк. Чтобы проиллюстрировать нужную противогрибковую активность, определяют минимальную ингибирующую концентрацию против набора из 84 изоляторов Стур1ососси8 пеоГогтапк.
Соединения отбирают по минимальной ингибирующей концентрации против КВ - клеточной линии носоглоточной карциномы человека, и ЬоУо - клеточной линии колоректальной аденокарциномы человека, используя анализ по Корбетту, см. СотЬей, Т.Н., е! а1., Су1о1охк Апйсапсег Эгидк: Мобе1к апб Сопсер!к Гог Эгид Όίκсоуету апб Эеуе1ортеп1. рр. 35-87, К1итег Асабетк РиЬИкйегк, Иогте11, 1992. См. также Уа1етю1е е! а1., П18соуету апб Эеуе1ортеп1 оГ Апйсапсег Адеп!к; Кбите г Асабетк РиЬИкйет, Иогте11, 1993, что также используют для оценки соединений.
Наиболее активные соединения также оценивают, с использованием анализа по Корбетту, на цитотоксичность в отношении 4 различных типов клеток, например, лейкоза мыши, твердой опухоли мыши, твердой опухоли человека и слабозлокачественного фибробласта.
Соединения также оценивают на действие против широкого спектра опухолей мыши и человека, имплантированных мышам, в том числе, опухолей, устойчивых к лекарственным средствам.
Также в качестве оценки используют опухолевый груз (Т/С) (отношение опухолевого груза у обработанных животных к опухолевому грузу у необработанных животных). Величины Т/С менее 42% считаются активными по стандартам Национального института рака; величины Т/С менее 10% по стандарту Национального института рака считаются присущими отличной активности и возможной клинической активности.
Материал
Винбластин, цитохалазин В, фаллоидин тетраметилродаминизоио цианата (ТРИТЦ), сульфородамин В (8КВ) и антитела против βтубулина и виментина коммерчески доступны от известных продавцов. Минимальная среда Игла, содержащая соли Эрла (ВМЕ), и фетальная бычья сыворотка (ЕВ 8) также доступны коммерчески.
Клеточные линии
Линию Т-клеточного лейкоза Юрката и аортные гладкомышечные клетки крысы А-10 получают от Американской коллекции типовых культур и культивируют, в ВМЕ, содержащей 10% ЕВ8 и 50 мкг/мл сульфата гентамицина. Клетки овариальной карциномы человека (8КОУ3) и сублинии, отобранной на устойчивость к винбластину (8КУЪВ1), любезно предоставлены Ότ. νίοΙοΓ Ыид из Института рака, Онтарио. Обе клеточные линии сохраняются в ВМЕ, содержащей 10% ЕВ8 и 50 мкг/мл сульфата гентамицина. Винбластин добавляют к клеткам 8ΚνΕΒ1 до конечной концентрации 1 мкг/мл через 24 ч после пересева для поддержания селекционного давления на клетки, сверхэкспрессирующие Р-гликопротеин.
Анализы клеточной пролиферации и задержки цикла
Анализы клеточной пролиферации осуществляют так, как описывают 8кебаи с сотр. В случае клеток Юрката культуры обрабатывают указанными лекарственными средствами так, как описывает 8кебаи, и определяют общее число клеток путем подсчета клеток в гемоцитометре. Процент митотических клеток определяют путем окрашивания 0,4% С|еш5а в ЗФР с последующим быстрым промыванием в ЗФР. По меньшей мере 1000 клеток на обработку оценивают на наличие картины митоза, и вычисляют митотический показатель как отношение клеток с картиной митоза к общему числу подсчитанных клеток.
Иммунофлуоресцентные анализы
Клетки А-10 выращивают почти до слияния на покровных стеклах в ВМЕ с 10% ЕВ8. Соединения в ЗФР добавляют до указанной конечной концентрации, и клетки инкубируют еще в течение 24 ч. В случае окрашивания микротрубочек и промежуточных филаментов клетки фиксируют холодным метанолом и инкубируют с ЗФР, содержащим 10% телячьей сыворотки, для блокировки сайтов неспецифического связывания. Затем клетки инкубируют при 37°С в течение 60 мин либо с моноклональным анти-β-тубулином, либо с моноклональным антивиментином при разведениях, рекомендованных изготовителем. Связанные первичные антитела затем визуализируют посредством 45 минутной инкубации с конъюгированным с флуоресцеином козьим антимышиным ЦС. Покровные стекла помещают на предметные стекла микроскопа, и проверяют и фотографируют картины флуоресценции с использованием фотомикроскопа 111, 2еЙ5. снабженного эпифлуоресцентной для флуоресцеина оптикой. В случае окрашивания микрофиламентов клетки фиксируют 3% параформальдегидом, пропитывают 0,2% тритоном Х-100 и химически восстанавливают борогидридом натрия (1 мг/мл). Затем добавляют ЗФР, содержащий 100 нМ ТРИТЦфаллоидина, и смесь инкубируют в течение 45 мин при 37°С. Клетки быстро промывают ЗФР перед установкой покровных стекол на предметные стекла и сразу фотографируют, как описано выше.
Действие криптофицинов и винбластина на пролиферацию клеток Юрката и клеточный цикл
Строят кривые зависимости «доза-ответ» влияния криптофицинов и винбластина на пролиферацию клеток, и определяют процент клеток в состоянии митоза.
Действие цитохалазина В, винбластина и криптофицинов на цитоскелет
Аортные гладкомышечные клетки (А-10) выращивают на покровных стеклах и обрабатывают ЗФР, 2 мкМ цитохалазина В, 100 нМ винбластина или 10 нМ криптофицинов. Через 24 ч визуализуют микротрубочки и промежуточные виментиновые филаменты с помощью непрямой иммунофлуоресценции, и окрашивают микрофиламенты с использованием ТРИТЦ-фаллоидина. Определяют морфологическое действие каждого лекарственного средства. Необработанные клетки демонстрируют обширные сетки из микротрубочек, полные перинуклеарных образующих микротрубочки центров. Виментиновые промежуточные филаменты также равномерно разрушаются в цитоплазме, в то время как пучки микрофиламентов концентрируются вдоль основной оси клетки. Цитохалазин В вызывает полную деполимеризацию микрофиламентов одновременно с накоплением паракристаллических остатков. Это соединение не влияет на разрушение микротрубочек или промежуточных филаментов. В случае обработанных криптофицином микротрубочек и виментиновых промежуточных образований наблюдают очищение от микротрубочек и свертывание виментиновых промежуточных филаментов. Действие криптофицинов и винбластина на стабилизированные таксолом микротрубочки
Клетки А-10 обрабатывают в течение 3 ч 0 или 10 мкМ таксола перед добавлением ЗФР, 100 нМ винбластина или 10 нМ криптофицина. Через 24 ч проверяют образование микротрубочек с помощью иммунофлуоресценции, как описано выше. По сравнению с микротрубочками в контрольных клетках микротрубочки в клетках, обработанных таксолом, группируются повсеместно, в особенности в полярных участках клеток. Как и прежде, винбластин вызывает полную деполимеризацию микротрубочек предварительно необработанных клеток. Однако предварительная обработка таксолом предотвращает деполимеризацию микротрубочек в ответ на винбластин. Подобным образом микротрубочки, предварительно обработанные таксолом, наблюдаются при обработке криптофицином.
Реверсивность деполимеризации микротрубочек под действием винбластина и криптофицина
Клетки А-10 обрабатывают или 100 нМ винбластина, или 10 нМ криптофицина в течение 24 ч, что приводит, в результате, к полной деполимеризации микротрубочек. Затем клетки промывают и инкубируют в среде без лекарственного средства в течение 1 ч или 24 ч. Микротрубочки снова быстро полимеризуются после удаления винбластина, причем высокое содержание микротрубочек демонстрируется через 1 ч, а полное восстановление морфологии - через 24 ч. Клетки визуализуют на состояние микротрубочек после обработки криптофицином данного изобретения или через 1 ч, или через 24 ч после удаления криптофицинов.
Действие сочетаний винбластина и криптофицинов на клеточную пролиферацию Клетки 8КОУ3 обрабатывают комбинациями из криптофицинов и винбластина в течение 48 ч. Затем определяют процент выживающих клеток, и вычисляют 1С50 для каждой комбинации.
Токсичность криптофицинов, винбластина и таксола в отношении клеток 8КОУ3 и 8КУЪВ1 Клетки 8КУЪВ1 устойчивы к противораковым средствам из натуральных продуктов изза их сверхэкспрессии Р-гликопротеина. Наблюдают способность таксола, винбластина и криптофицинов ингибировать рост клеток 8КОУ3 и 8КУЬВ1. Таксол вызывает зависящее от дозы ингибирование пролиферации обеих клеточных линий при значениях 1С50 для 8КОУ3 и 8КУЬВ1 1 и 8000 нМ, соответственно. Винбластин также ингибирует рост обеих клеточных линий при значениях 1С50 для 8КОУ3 и 8КУЬВ1 0,35 и 4200 нМ, соответственно. Криптофицины данного изобретения демонстрируют активность при значениях 1С50 примерно от 1 до, примерно, 1000 нМ для клеток 8КОУ3 и 8КУЬВ1.
Таким образом, можно показать, что настоящее изобретение относится к новым криптофицинам, являющимся сильными ингибиторами клеточной пролиферации, действующими посредством разрушения микротрубочной сети и подавления митоза. Эти исследования могут проиллюстрировать, что криптофицины разрушают структуру микротрубочек и, таким образом, нормальные клеточные функции, в том числе функции митоза.
Классические средства против микротрубочек, такие как колхицин и алкалоиды Ушса, останавливают деление клеток в митозе. Представляется подходящим сравнить действие этих средств на клеточную пролиферацию с действием криптофицинов. Для этой цели в качестве представителя классических средств против микротрубочек выбирают алкалоид Ушса винбластин. Соответственно, сравнивают действие криптофицинов и винбластина на пролиферацию и развитие клеточного цикла клеточной линии лейкоза Т-клеток Юрката.
Так как антимитотическое действие обычно передается через разрушение микротрубочек в митотических веретенах, действие криптофицинов на цитоскелетные структуры характеризуют с помощью флуресцентной микроскопии.
Иммунофлуоресцентное окрашивание клеток, обработанных или криптофицином, или винбластином, показывает, что оба соединения вызывают полное исчезновение микротрубочек. Подобные исследования с клетками 8КОУ3 могут показать, что действие криптофицинов против микротрубочек не является уникальным лишь для гладкомышечной клеточной линии. Исследование ОС3 карциномы ободочной кишки человека
В выбранные лунки 96-луночного микропланшета высевают клетки ОС3 карциномы ободочной кишки человека (1х10 клеток в 100 мкл среды для анализа на лунку). В другие выбранные лунки 96-луночного микропланшета добавляют среду для анализа без клеток. К среде для анализа (используют среду РРМ1-1640; однако, приемлемой будет любая среда, в которой будут выживать клетки) добавляют 10% диализованной фетальной бычьей сыворотки и 25 мМ буфера НЕРЕ8.
Испытываемое соединение до испытаний хранят в янтарном флаконе. Свежий исходный раствор в диметилсульфоксиде (200 мкг/мл) готовят непосредственно перед получением разведений испытываемого образца в забуференном фосфатом физиологическом растворе (ЗФР). Получают разведение раствора в диметилсульфоксиде в ЗФР 1:20, так что конечная концентрация составляет 10 мкг/мл. Получают серийные разведения 1:3 с использованием ЗФР (0,5 мл предыдущего раствора с 1 мл ЗФР). Для анализа используют пробирки Фалькона 2054.
Образец в 10 мкл каждого разведения испытываемого соединения добавляют, при трехкратном повторении, в лунки микропланшетов с ОС3. Микропланшеты инкубируют в течение 72 ч при 37°С. В каждую лунку добавляют 10-мкл образец исходного раствора соли - бромида 3[4,5-диметил-2 -ил] -2,5-дифенилтетразолия («МТТ», 5 мг/мл, в ЗФР). Планшеты инкубируют примерно в течение часа при 37°С. Планшеты центрифугируют, среды из лунок декантируют, и в каждую лунку добавляют 100 мкл «кислого» изопропанола (0,04 N НС1 в изопро29 паноле). Планшет прочитывают в пределах одного часа с использованием длины волны при измерениях 570 нм (аппарат для чтения планшетов 8рес!гаМах).
Оценка соединений формулы I приводит к выводу, что соединения могут быть полезны при заявляемых здесь способах лечения. Кроме того, соединения будут полезны для разрушения системы микротрубочек.
Получение соединений данного изобретения можно осуществить с использованием ряда схем с участием активированного сложного эфира с последующей хроматографией и, при необходимости, с индуцированным кислотой
Например, обработка 1 (здесь выделенные жирным шрифтом цифры относятся к номерам соединений, указанным в разделе примеров) уксусным ангидридом в присутствии триэтиламина и 4-диметиламинопиридина дает 3 с выходом 89% после флэш-хроматографии. Подобным образом получают 4 из 1 при действии янтарного ангидрида с последующей очисткой ВЭЖХ с обращенной фазой. Действие раствора 1 в пиридине на коммерчески доступный гидрохлорид никотиноилхлорида в присутствии триэтиламина и 4-диметиламинопиридина с последующей хроматографией и обработкой хлористым водородом дает 7 с высоким выходом. Пиридиниевую соль 8 получают с выходом 48% по способу, описанному в Х1со1аои, Апдеу. СНет. Ιηΐ. Еб. Еп§1., 1994, 33, в соответствии с которым 1 обрабатывают коммерчески доступным п-толуолсульфонатом 2-фтор-1 -метилпиридиния с последующей очисткой ВЭЖХ с обращенной фазой с сопутствующим анионным обменом (п-толуолсульфанат на ацетат) и лиофилизацией. Сложные эфиры 5, 9, 11, 13, 15, 17, 19 и 21 - все получают с выходом от среднего до высокого из 1 и коммерчески доступных (за исключением случаев 5 и 9) Ν-ΐ-Ьос-защищенных аминокислот с активацией при действии 1,3дициклогексилкарбодиимида в присутствии 4диметиламинопиридина. Хлористоводородные соли 10, 12, 14, 16, 18, 20 и 22 получают с высоким выходом из 9, 11, 13, 15, 17, 19 и 21, соответственно, после обработки 4,0М раствором хлористого водорода в диоксане и удаления растворителя в вакууме. Динатриевую соль 6 получают из 5 после вызванного хлористоводородной кислотой расщепления трет-бутилового эфира и обработки гидроксидом натрия. Требуемую для получения 5 кислоту 24 синтезиру ют с выходом 63% 5-стадийным способом, представляющим способ Джонса (8упШе818, 1988, 142) для введения фосфатной функциональной группы.
ОР(О)(О РВи)г
Некоторые из новых конъюгатов проанализированы на цитотоксичность ΐπ νίΐΓο на модели опухолевых клеток СС3. Из результатов, приведенных в табл. 2, ясно, что для этого ряда соединений присуща активность от хорошей до отличной относительно активности криптофицина 55 (1).
Получение любого сложного эфира типа 2 (К1 или К2 образуются от карбоновой кислоты) включает ряд технологий с использованием хлорангидридов кислот, ангидридов и обычных активирующих реагентов (например, карбодиимидов)2. Можно использовать любой растворитель, иной чем участвующие в реакции спирты. В помощь этерификации можно использовать любые слабые основания и/или катализаторы (амины, карбонаты).
Конверсию карбаматов 9, 11, 13, 15, 17, 19 и 21 в соответствующие соли можно осуществить с помощью любой сильной кислоты, а именно с помощью минеральных кислот, к которым относятся галогениды водорода, серная кислота, фосфорная кислота, азотная кислота, хлорная кислота, или сильных органических кислот, таких как трифторуксусная, п-толуолсульфоновая и метансульфоновая кислоты. Те же кислоты можно использовать для получения солей типа 7 из соответствующего свободного основания. Ряд контрионов (катионов) может входить в соли типа 6, включая любые щелочные и щелочно-земельные металлы. Ряд контрионов (анионов) может входить в соли типа 8, а именно, любое сопряженное с кислотой основание (с органической или минеральной).
Таблица 2. Данные по цитотоксичности ΐπ νίΐΓο для производных криптофицинов, полученные с использованием описанных выше анализов
Соединение
СС3, 1С50 (нМ)
0,065
3,7
116
2,2
0,10
230
2,6
7,2
Приводятся дополнительные соединения данного изобретения и результаты анализов с СС3.
Испытаны другие соединения данного изобретения при анализе с ОС3, и из значения 1С50 находятся в интервале величин от менее единицы примерно до 700 нМ; однако, наиболее типичными значениями являются величины менее 100 нМ.
В табл. 3 приводятся результаты сравнительных предварительных определений растворимости 21, 1 и 12. Эти результаты показывают повышенную растворимость 12.
Таблица 3. Сравнительная растворимость криптофицинов 1, 12 и 27
Эксципиент, объем доведен 0,05М ацетатн. буфером %, о/о 27 (мг/мл) 1 (мг/мл) 12 (мг/мл)
1 Пропиленгликоль Этанол 15 10 НПКО НПКО >2,0
2 Полиэтиленгликоль Пропиленгликоль3000 15 20 НПКО 0,0026 >2,0
3 Полисорбат 80 1 (м/о) НПКО 0,3113 1-2
4 Эмульфор ЕЬ719 1 (м/о) 0,0272 0,3611 1,5
5 0,05М ацетатн. буфер, РН 4,0 100 <0,001 <0,001 0,03
(НПКО - ниже предела количественного определения, приблизительно 0,001 мг/мл)
Проводят сравнение характеристик устойчивости 1 и 12 в водной среде с рН 4-8 в течение 6 ч при комнатной температуре. Результаты этих исследований ясно показывают, что отличные показатели растворимости в воде и устойчивости у 12. Например, при рН 8 криптофицин 55 имеет значение растворимости 10 мг/мл при комнатной температуре против растворимости 30 мг/мл для 12, по существу, при тех же условиях. При рН 4 показатель растворимости криптофицина 55 в воде 50 мг/мл; однако, растворимость криптофицина 55 в воде снижается, когда рН становится щелочным, в то время как растворимость в воде 12 остается по существу постоянной, во всем исследованном интервале рН.
На основании результатов по растворимости и устойчивости выбирают подходящие парентеральные носители для определения абсолютных характеристик растворимости, устойчивости для 12. Табл. 4 иллюстрирует параметры растворимости 12 в этих носителях. Предварительные результаты показывают приемлемую устойчивость 12 в композиции 6 в течение времени до 3 недель.
Таблица 4. Растворимость криптофицинглицината 12 в различных парентеральных носителях
Эксципиент %, о/о 12 (мг/мл)
1. Этанол Пропиленгликоль 0,05 М цитратн. буфер рН 4,0 10 10 0,11
2. Этанол Пропиленгликоль 0,05 М ацетатн. буфер рН 4,0 10 10 Ц8 1,99
3. Этанол 0,05 М ацетатн. буфер рН 4,0 10 Ц8 1,29
4. Пропиленгликоль 0,05 М ацетатн. буфер рН 4,0 10 Ц8 1,58
5. Полисорбат 80 0,05 М ацетатн. буфер рН 4,0 0,5 (м/о) 2,21
6. Этанол Пропиленгликоль 0,05 М ацетатн. буфер рН 4,0 10 25 10,27
7. Этанол 10 4,32
Пропиленгликоль 15
0,05 М ацетатн. буфер рН 4,0 Чз
Таким образом можно достичь высоких концентраций соединения данного изобретения в носителе, не содержащем поверхностноактивного вещества или эмульгатора, что, в свою очередь, должно облегчить токсикологические и клинические оценки этих соединений. Эфир глицинат (12) также позволяет иметь лучшую устойчивость в водной окружающей среде в физиологическом интервале рН на протяжении более длительных периодов времени, что указывает на повышенную устойчивость при хранении при нормальных условиях. В то время как для хранения 1 и 27 необходимо получать концентраты, и затем разводить их перед введением, существует возможность получения готовых к применению растворов соединений данного изобретения.
Соединения формулы I можно получать с использованием соединения формулы II
где Аг, К1, К2, К3, К4, К5, К7, К8, К9, К10 имеют значения, установленные выше для формулы I,
К13 выбирают из группы, состоящей из трет-бутилкарбамата (ВОС);
К24 выбирают из группы, состоящей из
(Ν-гидроксисукцинимид, далее «ΝΗ8»), Νгидроксисульфосукцинимида и их солей; 2нитрофенила, 4-нитрофенила и 2,4-дихлорфенила;
Х представляет О, ΝΗ или алкиламино;
Υ представляет О, ΝΗ или алкиламино. Соединения формулы III
где К-группы и различные заместители имеют значения, установленные выше и по ходу описания, можно, получить посредством приведения в контакт соединения формулы IV
где К25 представляет удаляемую группу, значения которой определены с кислотой формулы
для К27;
где К27 выбирают из группы, состоящей из Н, (С1-С12)-алкила и арила;
и силилирующим агентом. Особенно предпочтительным силилирующим агентом является бис-НО-триметилсилилацетамид (БСА).
Используемое здесь выражение «активный сложно эфирный заместитель» относится к заместителю, который превращает указанный заместитель в удобную отщепляющуюся группу. Подходящие заместители можно выбрать, обратившись к стандартным руководствам, например, к РгоЩсбуе Огоирз ΐπ Огдашс СйешЕЦу, Р1епит Ргезз (Бопбоп апб №\ν ΥογΕ 1973); Огеепе, Т.^., Рго^есбуе Огоирз ΐπ Огдашс 8упШез1з, ^И1еу (№\ν ΥογΕ 1981). См., в особенности, сс. со 180 по 184 в труде Огеепе. Особенно предпочтительной активной сложноэфирной замещающей группой является Ν-гидроксисукцинимидная (КЛС). Другими предпочтительными группами являются, но не ограничивают'15 ся перечисленным, (Ο-Ν-гидроксисукцинимид), Ο-Ν-гидроксисульфосукцинимид и их соли, О-2-нитрофенил, О-4-нитрофенил и О-2,4-дихлорфенил, где О относится к кислородной группе, необходимой для образования сложноэфирной функциональной группы.
Используемый здесь термин «амид» относится к амидной функциональной группе, которую можно отщепить с использованием щелочи. Например, термин относится, но никоим образом не ограничивается этим, к -ЛМе2. В качестве дополнительного руководства см., например, Огеепе, Т.^., Рго^есбуе Огоирз 1п Огдашс 8упШез1з, ^Шеу (№\ν ΥογΕ 1981).
Используемое здесь выражение «активный сложноэфирный заместитель» относится к заместителю, который превращает заместитель ОК24 в удобную отщепляющуюся группу. Подходящие заместители можно выбрать, обратившись к стандартным руководствам, например, к Рго^есбуе Огоирз 1п Огдашс СЬет1з1гу, Р1епит Ргезз (Бопбоп апб Ν'ο\ν ΥοιΓ, 1973); Огеепе, Т/Ψ., Рго^есбуе Огоирз ш Огдашс 8упШез1з, ^И1еу (\е\у ΥογΕ 1981). Особенно предпочтительной активной группой К25 является Νгидроксисукцинимидная (ХГС).
Описанные здесь способы наиболее предпочтительно осуществлять в присутствии растворителя. Специалист может выбрать подходящий растворитель для описанного выше процесса. Особенно предпочтительны инертные органические растворители; однако, при определенных условиях подходящим может быть водный растворитель. Например, если К27 пред35 ставляет водород, а К13 представляет ВОС, в качестве растворителя эффективным будет растворитель на водной основе.
Когда нужный заместитель К6 в соединении формулы I содержит амин, тогда аминозаместитель в группе К6 должен быть защищен с использованием аминозащищающей группы. Специалист может легко выбрать подходящую аминозащищающую группу, руководствуясь известными трудами, например, Рго!есйуе Сгоирз ш Огдашс Сйет1з1гу, Р1епит Ргезз (Ьопбоп апб \е\« Υо^к, 1973); Сгеепе, Т.^., Рго!есйуе Сгоирз т Огдашс 8упШез1з, \\'П1еу (\е\у Υо^к, 1981).
К27 должен представлять группу, допускающую удаление заместителя -СО2К27 с использованием кислой, нейтральной или слабощелочной среды. Предпочтительными группами К27 являются, но не ограничиваются перечисленным, водород, (С1-С6)-алкил, трихлорметил, трихлорэтил и метилтиометил. Особенно предпочтительно, когда К представляет водород.
Также для руководства для специалиста приводятся нижеследующие схемы процессов. Соединение формулы I можно получить с использованием соединения формулы II где Аг, К
К10 имеют значения, установленные выше для формулы I. К11' имеет значения, установленные выше для К11.
К представляет группу, защищающую аминогруппу;
К24 выбирают из группы, состоящей из активного сложноэфирного заместителя, амидного заместителя, Ο-2-нитрофенила, О-4-нитрофенила и О-2,4-дихлорфенила;
Х представляет О, ΝΗ или алкиламино;
Υ представляет С, О, ΝΗ, 8, 8О, 8О2 или алкиламино.
Соединения формулы III
где К-группы и различные заместители имеют значения, установленные выше и по ходу опи сания, можно получить посредством приведения в контакт соединения формулы IV
-г>25 где К представляет удаляемую группу, значения которой определены с кислотой формуу-.
ЛЫ СОгВг7; для К27, где К27 выбирают из группы, состоящей из
Н, (С1-С12)-алкила и арила;
и силилирующим агентом. Особенно предпочтительным силилирующим агентом является бис-№,О-триметилсилилацетамид (БСА).
Используемое здесь в отношении К25 выражение «активный сложно эфирный заместитель» относится к заместителю, который превращает заместитель ОК24 в удобную отщепляющуюся группу. Подходящие заместители можно выбрать, обратившись к стандартным руководствам, например, к Рго!есйуе Сгоирз ш Огдашс Сйет1з1гу, Р1епит Ргезз (Ьопбоп апб \е\« Υо^к, 1973); Сгеепе, Т.^., Рго!есйуе Сгоирз ш Огдашс 8упШез1з, ^Шеу (\е\у Υо^к, 1981). Особенно предпочтительной активной группой К25 является Ν-гидроксисукцинимидная (\ГС).
Описанные здесь способы наиболее пред почтительно осуществлять в присутствии растворителя. Специалист может выбрать подходящий растворитель для описанного выше процесса. Особенно предпочтительны инертные органические растворители; однако, при определенных условиях подходящим может быть водный растворитель. Например, если К представляет водород, а К13 представляет ВОС, в качестве растворителя эффективным будет растворитель на водной основе.
Когда нужный заместитель К6 в соединении формулы I содержит амин, тогда аминозаместитель в группе К6 должен быть защищен с использованием аминозащищающей группы. Специалист может легко выбрать подходящую аминозащищающую группу, руководствуясь известными трудами, например, Рго1есйуе Сгоирз ш Огдашс Сйет1з1гу, Р1епит Ргезз (Ьопбоп апб \е\« Υо^к, 1973); Сгеепе, Т.^., Рго!есйуе Сгоирз т Огдашс 8уп1кез1з, \\'Шеу (\е\у Υо^к, 1981).
К27 должен представлять группу, допускающую удаление заместителя -СО2К27 с использованием кислой, нейтральной или слабощелочной среды. Предпочтительными группами К27 являются, но не ограничиваются перечисленным, водород, (С1-С6)-алкил, трихлорметил, трихлорэтил и метилтиометил. Особенно пред27 почтительно, когда К представляет водород.
Также для руководства для специалиста приводятся нижеследующие схемы процессов.
На схеме I' и далее в описании Я1' представляет галоген, 8Η, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламмоний, алкилтио, диалкилсульфоний, сульфатную группу, фосфатную группу или защищенную ОН- или защищенную 84-группу;
Я2 представляет ОН или 8Η; Я26 представляет спиртозащищающую группу, вводимую во время стадии процесса синтеза для защиты спиртовой группы, которая в противном случае может реагировать по ходу химических превращений, и затем удаляемую на более поздней стадии синтеза. Многие реакции для образования и удаления таких защитных групп описаны в известных работах, в том числе, например, в Рго1есбуе Огоирз т Огдатс Сйет181гу, Р1епит Ргезз (Ьопбоп апб №\ν Уогк, 1973); Огеепе, Т.Ж, Рго1ес11уе Огоирз т Огдатс 8упШе818, ШШеу (№\ν Уогк, 1981). Специалист может легко выбрать подходящую группу, защищающую спиртовую группу, в частности, обратившись к указанным работам. Одной из особенно полезных групп, защитных для спиртовых групп, является трет-бутилдиметилсилильная группа (ТБС). Можно, с использованием стандартных способов, дериватизировать продукты, полученные по указанным схемам, и получить
В общих чертах способы данного изобретения поясняются ниже.
Я6 и Я11' имеют значения, определенные в описании.
Можно, с использованием стандартных способов, получить другие производные продукта, полученного по приведенной схеме, и получить другие криптофицины.
Руководствуясь описанными ранее схемами и следующими далее примерами, специалист может использовать соответствующие исходные вещества и реагенты, и получить нужные соединения.
Исходный сложный эфир можно получить, например, по следующей схеме.
ΤΊ 6
К имеет значения, установленные выше.
Далее приводятся схемы, составляющие дополнительное руководство. На схемах, в препаративных примерах и примерах используются некоторые аббревиатуры, общеизвестные в технике. К числу таких аббревиатур относятся аббревиатуры, приведенные, для удобства, ниже.
ΌΜΑΡ - 4-диметиламинопиридин;
ВОС - трет-бутоксикарбонил; шсрЬа - м-хлорпербензойная кислота;
ТМ8С1 - хлортриметилсилан;
НЕ\ - реакция Хорнера-ЭммонсаУодсворса (стандартная реакция олефинирования альдегида с использованием фосфоната и основания);
ТМО - 1,1,3,3-тетраметилгуанидин (стандартное основание, используемое для реакции НЕ\);
БШАБ - диизобутилалюминийгидрид (стандартный реагент для восстановления ненасыщенного сложного эфира до аллилового спирта);
8АЕ - нерезкое асимметричное эпоксидирование (установленная реакция для энантиоселективного эпоксидирования аллиловых спиртов);
ТВ8 - трет-бутилдиметилсилил;
ТВ 8-ОЛ - ТВ8-трифторметансульфонат (стандартный реагент для трет-бутилдиметилсилилирования спиртов);
ΑΣΒΝ - 2,2'-азобис(изобутиронитрил) (стандартный инициатор радикалов);
ΑСN - ацетонитрил
ΌΒϋ - 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (стандартное аминное основание)
Е1)С1 - 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид.
Схема получения сложного эфира поясняется в дальнейшем с помощью раздела препара тивных примеров, где показываются конкретное применение схемы для удобства специалиста.
Схема I
Схема I (продолжение) +ТГА-
₽Ь2РОС1, ΟΙΕΑ ВИР (65-75»)
НЕ, СНЭСЫ
Схематическое пояснение не предназначается для ограничения схемы синтеза только до показанного фенильного кольца. Напротив, специалист может широко применять этот способ для получения нужных исходных веществ для заявляемых здесь соединений.
Требуемое для реакции время зависит от исходных веществ и рабочей температуры. Оптимальное время реакции для данного способа, как всегда, представляет компромисс, устанавливаемый путем рассмотрения конкурирующих задач производства, для которого благоприятны краткие времена реакций, и максимального выхода, для которого благоприятны длительные по времени реакции.
Некоторые соединения данного изобретения можно получить с использованием биосинтетического способа. Например, раствор криптофицина 3 (примерно 0,24 ммоль) в смеси ДМЭ и воды (2:1, 15,0 мл) примерно при 0°С обрабатывают бромсукцинимидом (примерно 65 мг), и нагревают до комнатной температуры. Примерно через 24 ч растворитель удаляют, а остаток растворяют в таком растворителе, как СН3СХ, и подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (предпочтительно, СН3СХ/Н2О, 65:35, 6 мл/мин), и получают смесь криптофицинов. Смесь повторно хроматографируют ВЭЖХ с нормальной фазой (предпочтительно, гексан с этилацетатом, 1:1, 3 мл/мин), и получают нужные криптофицины.
Подобным образом, криптофицин 3 (примерно 40 мг, 0,063 ммоль) помещают в смесь ДМЭ и воды (2:1, примерно 6 мл), и добавляют Ν-хлорсукцинимид (НС8) (0,075 ммоль), и нагреют примерно при 60-70°С в течение примерно 24 ч. Добавляют еще НС8 (8 мг), и продолжают нагревание примерно еще в течение 24 ч. Удаляют растворитель, а остаток подвергают ВЭЖХ (35% Н2О в С1ЬСХ 6 мл/мин), и получают нужные криптофицины. Получающуюся в результате смесь затем очищают ВЭЖХ с использованием метанола с водой (примерно 4:1), и получают нужные очищенные криптофицины.
Для дальнейшего пояснения изобретения приводятся нижеследующие примеры. Объем изобретения никоим образом не следует считать ограниченным этими примерами.
Препаративный пример 1
Стадия 1. Метил-5-фенилпент-2(Е)-еноат.
Раствор триметилфосфоноацетата (376 г, 417 мл, 2,07 моль) в ТГФ (750 мл) перемешивают при 0°С в 3-л 3-горловой круглодонной колбе, снабженной механической мешалкой и трубкой для подачи Ν2. К охлажденному раствору из капельной воронки по каплям добавляют чистый тетраметилгуанидин (239 г, 260 мл, 2,07 моль). Охлажденный прозрачный бледно-желтый раствор перемешивают в течение 25 мин при 0°С. К реакционному раствору постепенно, по каплям, добавляют раствор гидрокоричного альдегида (90%, 253 г, 248 мл, 1,9 моль) в ТГФ (125 мл). После завершения добавления реакционную смесь перемешивают в течение 10 ч при повышении температуры до комнатной. ГХ показывает отношение продукта к исходному веществу 95:5. К реакционной смеси добавляют 500 мл воды, и реакционную смесь перемешивают в течение ночи, разделяя ее на два слоя. Органический слой отделяют, а водный слой экстрагируют трет-ВиОМе. Органические слои объединяют и сушат над М§8О4, затем концентрируют в вакууме, и получают оранжевое масло. Сырой продукт перегоняют при 129°С и 0,3 мм рт.ст., и получают 360,5 г, с выходом 91,7%, прозрачного светло-желтого масла.
М.-с., ионизация электронным ударом (ΕΙ), т/е, 190(13; М+), 159(410), 158(39), 131(90), 130(62), 117(22), 104(12), 95(57), 91(100), 77(21), 65(59); м.-с. высокого разрешения, ΕΙ (НКЕ1), т/е, 190,0998 (С12Н14О, Δ -0,4 молек.-мас.ед-ц, м.-м.е (тти)); УФ, Хтах (е) 210 (8400), 260 (230) нм; ИК, утах 3027, 2949, 1723, 1658, 1454, 1319, 1203, 978, 700 см-1; 1Н ЯМР δ (СЭС13)
7,15-7,3 (РЙ-Н5; ушм), 7,00 (3-Н; дт, 15,6/6,6),
5,84 (2-Н; дт, 15,6/1,2), 3,70 (ОМе; с), 2,76(5-Н2; т, 7,2), 2,51 (4-Н2; ушдт, 6,6/7,2); 13С ЯМР δ (СЭС13) 166,9(1), 148,3(3), 140,6 (Рй-Г), 128,4/128,2 (Рй2'/3'/5'6'), 126,1 (Рй-4'), 121,4(2), 51,3 (ОМе), 34,2/33,8 (4/5).
Стадия 2. 5-Фенилпент-2-ен-1-ол.
В 12-л 4-горловую круглодонную колбу, снабженную термопарой, механической мешалкой и трубкой для подачи Ν2, загружают раствор еноата (310,5 г, 1,5 моль) в ТГФ (1,5 л) и охлаждают до -71°С на бане изо-РгОН с СО2. В реактор добавляют по каплям О1ВЛБ (2,5 л, 1,5М в толуоле, 3,75 моль) со скоростью, при которой температура реакции поддерживается на уровне < -50°С. По завершении добавления реакционную смесь перемешивают в течение ночи при температуре реакции < -50°С. ТСХ (гексан с ЕЮЛс, 3:1, §1О2) показывает отсутствие исходного вещества через 16 ч. Температуру реакции поднимают до -15°С. Постепенно гасят реакцию с помощью 1Ν НС1 (150 мл). В этот момент реакционная смесь становится гелеобразным твердым веществом. Используют шпатель, чтобы разрушить это полутвердое вещество, и добавляют 1Ν НС1 (200 мл), чтобы сделать смесь более жидкой. Загружают концентрированную НС1 (625 мл) с образованием двухфазной системы. Слои разделяют, и экстрагируют продукт трет-ВиОМе. Органический слой сушат над Мд§О4 и концентрируют в вакууме, и получают 247,8 г прозрачного бледно-желтого масла. Сырой продукт перегоняют при 145°С и 0,25 мм рт.ст., и получают 209,7 г, выход 86,2%.
М.-с., Е1, т/е 162(1 :М+), 144(16), 129 (7), 117(9), 108(6), 92(17), 91(100), 75(5), 65(12); М.с., НКЕ1, т/е 162, 1049 (СПН14О, Δ - 0,4 м.-м.е); УФ, Утах (е) 206(9900), 260(360); ИК утах 3356, 2924, 1603, 1496, 1454, 970, 746, 700 см-1; 'Н ЯМР δ 7,15-7,3 (РЬ-Н5; м), 5,70 (3-Н; дт, 15,6/6,0), 5,61 (2-Н; дт, 15,6/4,8), 4,02 (1-Н2; д,
4,8), 2,68 (5-Н2; т, 7,2), 2,40 (ОН; ушс), 2,36 (4Н2; дт, 6,0/7,2); 13С ЯМР δ 141,6 (Рй-1'), 131,8(3), 129,5(2), 128,3/128,2 (РЬ2'/3'/5'/6'), 125,7 (РЬ-41) , 63,3(1), 35,4/33,8 (4/5) .
Стадия 3. (28,38)-2,3-Эпокси-5-фенил-1пентанол.
В 1 -л 3-горловую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, термопарой и трубкой для подачи азота, загружают СН2С12 (350 мл) высушенные молекулярные сита, 4А (30 г), и Ь-(+)-диэтилтартрат (7,62 г, 0,037 моль). Получающуюся в результате смесь охлаждают до -20°С и обрабатывают Т1(О-1-Рг)4 (9,2 мл, 0,031 моль), а затем добавляют третбутилгидропероксид (4,0М в СН2С12, 182 мл, 0,78 моль) со скоростью, при которой поддерживается температура2 -20°С. По завершении добавления реакционную смесь перемешивают еще в течение 30 мин, а затем обрабатывают раствором аллилового спирта (50 г, 0,31 моль) в СН2С12 (30 мл) со скоростью, при которой поддерживается температура2 -20°С. Реакционную смесь перемешивают при этой температуре в течение 5 ч, затем фильтруют в раствор гептагидрата сульфата железа (2) (132 г) и винной кислоты (40 г) в воде (400 мл) при 0°С. Смесь перемешивают в течение 20 мин, затем переносят в разделительную воронку и экстрагируют трет-ВиОМе (2х200 мл). Объединенную органическую фазу перемешивают с 30% раствором №1ОН. содержащим №С1, в течение 1 ч при 0°С. Слои снова разделяют, и водную фазу экстрагируют трет-ВиОМе. Объединенную органическую фазу промывают рассолом, сушат над Мд§О4 и концентрируют, и получают 52,8 г масла янтарного цвета.
Стадия 4. (2К,3К)-2-Гидрокси-3-метил-5фенилпентан-1 -ол.
В 5-л 3-горловую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, термопарой и трубкой для подачи азота, загружают гексан (1 л) и охлаждают до 0°С. Добавляют 2,0М раствор Ме3А1 в гексане (800 мл, 1,6 моль), а затем раствор эпоксида (120 г, 0,677 моль) в гексане (250 мл) и СН2С12 (50 мл), поддерживая температуру на уровне ниже 20°С. По завершении добавления мутную реакционную смесь перемешивают при 5°С в течение 35 мин, после чего добавляют по каплям раствор 10% НС1 (300 мл), а затем конц. НС1 (350 мл). Слои разделяют, и органическую фазу промывают рассолом и сушат над Мд§О4. После удаления летучих веществ в вакууме получают 122,1 г масла.
Стадия 5. (2К,3К)-2-Гидрокси-3-метил-5фенилпент-1-илтозилат.
В 2-л 3-горловую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой и трубкой для подачи азота, загружают диол (58 г, 0,30 моль), оксид дибутилолова (1,5 г, 0,006 моль, 2 мол.%), толуолсульфонилхлорид (57,5 г, 0,30 моль), СН2С12 (580 мл) и триэтиламин (42,0 мл, 0,30 моль). Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч (хотя реакция завершается за время в пределах 1 ч), фильтруют, промывают водой и сушат над Мд§О4. После удаления летучих веществ в вакууме получают 104,1 г масла светлоянтарного цвета.
Стадия 6. (2К,3К)-2-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]-3 -метил-5 -фенилпент-1 -илтозилат.
Раствор тозилата (100 г, 0,29 моль) и триэтиламина (81,0 мл, 0,58 моль) в СН2С12 (1200 мл) обрабатывают чистым ТВ8-ОТГ (99 мл, 0,43 моль), добавляя его по каплям при непрерывном перемешивании еще в течение 20 мин. Реакционную смесь дважды промывают рассолом, сушат над Мд§О4 и концентрируют до сухого состояния. Масло растворяют в минимальном количестве гексана и фильтруют через слой диоксида кремния, элюируют гексаном с Е1ОЛС (9:1), и получают 134 г масла светло-янтарного цвета.
Стадия 7. (2К,3К,5К8)-2-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]-3-метил-5-бром-6-фенилпент1 -илтозилат.
В 5-л 3-горловую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, обрат45 ным холодильником и трубкой для подачи азота, загружают СС14 (1680 мл), ТВ8-Т§ (140 г, 0,30 моль), ЫВ8 (65 г, 0,365 моль) и ЛИВЫ (16,5 г, 0,10 моль). Смесь обезгаживают посредством откачивания в достижимом вакууме при перемешивании и снова заполняют азотом (3х). Затем реакционную смесь нагревают с обратным холодильником, после чего смесь становится темно-коричневой. После 15-мин энергичного кипячения с обратным холодильником реакционная смесь становится светло-желтой, и хроматографический анализ показывает, что реакция завершилась. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтруют, и фильтрат концентрируют досуха. Остаток снова растворяют в гексане и снова фильтруют и концентрируют досуха, и получают 170,3 г вещества в виде янтарного масла.
Стадия 8. (2К,3К)-2-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси] -3 -метил-5 -фенилпент-4(Е)-ен-1 илтозилат.
В 2-л 3-горловую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, обратным холодильником и трубкой для подачи азота, загружают раствор бромида (100 г, 0,186 моль) в ацетонитриле (700 мл). Добавляют ΌΒϋ (83,6 мл, 0,557 моль), и получающийся в результате темно-коричневый раствор перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляют в вакууме, а остаток размешивают СН2С12 (200 мл) и фильтруют через слой диоксида кремния. Летучие снова испаряют, а остаток растворяют в ЕЮАс и промывают водой, рассолом, сушат над Мд8О4 и концентрируют досуха. Препаративная ГЖХ среднего давления (преп 500) дает нужное ненасыщенное соединение (50,3 г, выход после 4 стадий 60%).
Стадия 9. (38,4К)-3-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]-4-метил-6-фенилгекс-5(Е)-ен-1нитрил.
Тозилат (50 г, 0,11 моль) растворяют в ДМСО (1 л) и обрабатывают КСЫ (14,2 г, 0,22 моль) и водой (25 мл), и получающуюся в результате смесь перемешивают при 60°С в атмосфере азота в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь обрабатывают ЕЮАс (1 л) и водой (1 л). Водную фазу экстрагируют ЕЮАс (500 мл), и объединенную органическую фазу промывают рассолом и сушат над Ыа28О4. Посредством флэшхроматографии на диоксиде кремния с СН2С12 получают нужный нитрил с выходом 92%.
Стадия 10. Метил-(58,6К)-5-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-6-метил-8-фенилокта-2(Е), 7(Е)-диеноат.
Нитрил (14,67 г, 46,5 ммоль) растворяют в толуоле (200 мл) и охлаждают до -78°С в атмосфере азота. Добавляют по каплям при энергичном перемешивании 1,5М раствор БШАБ в толуоле (37,2 мл, 55,8 ммоль). По завершении до бавления охлаждающую баню убирают, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь осторожно выливают в 1Ν НС1, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Слои разделяют, и органическую фазу промывают насыщенным водным раствором виннокислого калий-натрия (2х), рассолом и сушат над Ыа28О4. Летучие вещества удаляют в вакууме, а неочищенное бледно-желтое масло используют непосредственно при последующей конденсации.
Неочищенный альдегид, полученный выше, растворяют в ТГФ (90 мл) и обрабатывают триметилфосфоноацетатом (9,03 мл, 55,8 ммоль) и тетраметилгуанидином (7,0 мл, 55,8 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч, и затем обрабатывают ЕЮАс (200 мл) и водой (100 мл). Водную фазу снова экстрагируют ЕЮАс (100 мл), и объединенную органическую фазу промывают водой, рассолом и сушат над Ыа28О4. Летучие вещества удаляют в вакууме, а сырое желтое масло (17,0 г) хроматографируют на силикагеле с элюированием СН2С12 с циклогексаном (1:1-2:1), и получают 13,67 г нужного сложного эфира (78,5%).
Препаративный пример 2 сн3
ОТВ5 ОН
Сложный метиловый эфир (2,673 ммоль) растворяют в ацетоне, и затем при комнатной температуре добавляют 1Ы водный раствор БЮН (26 мл). Затем мутную смесь разбавляют ацетоном (20 мл), и получающуюся в результате смесь желтого цвета перемешивают при комнатной температуре в течение 23,5 ч. Реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром (400 мл), и органическую фазу промывают 1Ы НС1 (120 мл), рассолом (200 мл) и Н2О (160 мл). Органическую фазу сушат и концентрируют в вакууме, и остается желток масло, которое очищают колоночной хроматографией (с градиентом - 5% АсОН + 20%-40% ЕЮБс в гексане), и получают карбоновую кислоту в виде желтого масла (960 мг, 100%).
1Н ЯМР (СИС13) δ 7,38-7,19 (м, РЩ), 7,09 (ддд, 1=15,2, 7,6 и 7,9 Гц, 3-Н), 6,38 (д, 1=16 Гц, 8-Н), 6,16 (дд, 1=16 и 8 Гц, 7-Н), 5,85 (д, 1=15,8 Гц, 2-Н), 3,81-3,75 (м, 5-Н), 2,49-2,37 (м, 6-Н, 4СН2), 1,12 (д, 1=6,7 Гц, 6-Ме), 0,91 (с, 81СМе3), 0,065 (с, 81Ме), 0,068 (с, 81Ме) м.д.;
ИК ν (СНС13) 2957, 2930, 2858, 1697, 1258, 1098, 838 см-1;
М.-с. (полевая десорбция, БИ) 360,2 (М+, 100);
[α]π + 87,6° (с 10,5, СНС13).
Элементный анализ: для С21Н32О3 требуется по вычислению; С 69,95; Н 8,95%. Найдено:
С 69,19; Н 8,39%.
Препаративный пример 3
К раствору карбоновой кислоты (2 ммоль) в сухом диметилформамиде (5,50 мл) при перемешивании при комнатной температуре добавляют 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (2,4 ммоль) и Ν-гидроксисукцинимид (2,6 ммоль). Смесь перемешивают в течение 28 ч, а затем разбавляют ЕЮАс (100 мл) и промывают 1Ν соляной кислотой (2x50 мл), Н2О (75 мл), сушат и концентрируют в вакууме, остается масло. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией (с градиентом 5-30% ЕЮАс в гексане), и получают активный эфир в виде бледно-желтого масла (724 мг, 80%).
ЯМР (ΟϋΟ13) δ 7,36-7,20 (м, РШ5, 3-Н), 6,38 (д, 1=16 Гц, 8-Н), 6,14 (дд, 1=16,1 и 8,0 Гц, 7-Н), 6, 03 (д, 1=16 Гц, 2-Н), 3,79 (к, 1=4,3 Гц, 5Н), 2,94 (ушс, СН2СН2), 2,58-2,42 (м, 6-Н, 4СН2), 1,10(д, 1=6,8 Гц, 6-Ме), 0,90 (с, 81СМе3), 0,05 (с, 81Ме2) м.д.; ИК ν (СНС13) 2957, 2931, 2858, 1772, 1741, 1648, 1364, 1254, 1092, 1069, 838 см1; М.-с. (Γϋ) 457 (М+, 100);
[ос]0+ 71,3° (с Ю,1,СНС13).
Элементный анализ: для С25Н35ЧО5 требуется по вычислению: С 65,61; Н 7,71%; N 3,06%. Найдено: С 65,51; Н 7,56; N 3,02%.
Препаративный пример 4
К раствору силилового эфира (2,50 г, 5,47 ммоль) в СН3СЧ (130 мл) при перемешивании при 0°С добавляют 48% водный раствор НЕ (15 мл). Раствор перемешивают при 0°С в течение 0,75 ч, а затем при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром (300 мл) и промывают Н2О до тех пор, пока рН промывной воды не станет ~ 7. Органический слой сушат (Мд8О4) и концентрируют в вакууме, и получают желтый остаток, который перекристаллизовывают из Е12О, и получают спирт в виде белых кристаллов (1,46 г, 78%).
ХН ЯМР (ΟϋΟ13) δ 7,41-7,20 (м, РШ5, 3-Н), 6,48 (д, 1=16 Гц, 8-Н), 6,15-6,07 (м, 7-Н, 2-Н), 3,71-3,65 (м, 5-Н), 2,83 (ушс, СН2СН2), 2,60-2,33 (м, 6-Н, 4-СН2), 1,95 (ушс, 5-ОН), 1,14 (д, 1=6,8 Гц, 6-Ме) м.д.; ИК ν (КВг) 3457, 1804, 1773, 1735, 1724, 1209, 1099, 1067, 1049, 975, 744, 694 см'1;
УФ (ЕЮН) Хшах 250 (е = 20535) нм;
М.-с. (Γϋ) 343,2 (М+, 100);
[а]о -57,8° (с 10,56, СНС13).
Элементный анализ: для Οι9Η21ΝΟ58 требуется по вычислению: С 66,46; Н 6,16%; N 4,08%. Найдено: С 66,49; Н 6,16%; N 4,07%.
КРИПТОФИЦИН-55
Пример 1. Получение ацетата криптофицина 55 (3).
К раствору 1 (93 мг, 0,13 ммоль) в 659 мл метиленхлорида при 0°С добавляют триэтиламин (55 мл, 0,40 ммоль), 4-диметиламинопиридин (1,6 мг, 0,013 ммоль) и уксусный ангидрид (19 мл, 0,20 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч реакцию гасят 19 мл метанола, реакционную смесь концентрируют до половины объема и непосредственно вносят в колонку для флэш-хроматографии (19 г силикагеля для флэш-хроматографии - флэш-силикагеля). Элюирование этилацетатом с гексаном (3:1) дает 88 мг (89%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, ХН ЯМР (ΟϋΟ13) δ 7,38-7,31 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,22-7,18 (м, 1Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,1 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,75 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,6 Гц), 5,78 (дд, 1Н, 1=15, 1,0 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,46 (дд, 1Н, 1=9,8, 1,2 Гц), 4,95 (дд, 1Н, 1=11, 2,9 Гц), 4,89 (ддд, 1Н, 1=9,9, 9,9, 1,7 Гц), 4,81 (д,1Н, 1=9, 8 Гц), 4,79-4,74 (м, 1Н), 3,91 (с, ЗН), 3,39 (дд, 1Н, 1=13, 8,1 Гц), 3,22 (дд, 1Н, 1=13, 4,1 Гц), 3,16 (дд, 1Н, 1=14, 5,1 Гц), 3,07 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2,65-2,55 (м, 2Н), 2,47-2,39 (м, 1Н), 1,95 (ддд, 1Н, 1=14, 13, 4,6 Гц), 1,86-1, 77 (м, 1Н), 1,73-1,66 (м, 1Н), 1,68 (с, ЗН), 1,27(с, ЗН), 1,19 (с, ЗН), 1,09 (д, ЗН, 1=7,1 Гц), 1,03 (д, ЗН, 1=6,7 Гц), 0,97 (д, ЗН, 1=6,6 Гц).
Пример 2. Получение сукцината криптофицина 55 (4).
К раствору 1 (27 мг, 0,038 ммоль) и янтарного ангидрида (5,7 мг, 0,057 ммоль) в 383 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют триэтиламин (16 мл, 0,115 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (4,7 мг, 0,038 ммоль). После перемешивания в течение 19ч добавляют еще 5,7 мг (0,057 ммоль) янтарного ангидрида и 4,7 мг (0,038 ммоль) 4-диметиламинопиридина, и перемешивание продолжают еще в течение 29 ч. Реакционную смесь обрабатывают 0,5 мл 1Ν соляной кислоты и промывают метиленхлоридом (3x0,5 мл). Объединенные органические экстракты сушат (Ча28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до белой пены. Очистка методом ВЭЖХ с обращенной фазой7 дает 10 мг (32%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, ХН ЯМР (ΟϋΟ13) δ 7,36-7,31 (м,
6Н), 7,22 (ушс, 1Н), 7,08 (д,1Н, 1=8,4 Гц), 7, 02 (ушс, 1Н), 6, 87 (д, 1Н, 1=8,4, Гц), 6,61 (м,1Н),
5,94-5,87 (м, 2Н), 5,51 (д,1Н, 1-9, 8 Гц), 4,95 (дд,
1Н, 1=10, 2,8 Гц), 4,87-4,76 (м, ЗН), 3,90 (с, ЗН),
3,39 (дд, 1Н, 1=16, 5,6 Гц), 3,28 (дд, 1Н, 1=16, 8,2 Гц), 3,17 (дд, 1Н, 1=16, 5,6 Гц), 3,05 (дд, 1Н, 1=16, 8,2 Гц), 2,68-2,62 (м, 1Н), 2,60-2,46 (м, 2Н),
2,45-2,28 (м, 3Н), 2,01-1,93 (м, 2Н), 1, 88-1,70 (м, 2Н), 1,26 (с, 3Н), 1,18 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,04(д, 3Н, 1=6, 6 Гц), 1,00 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Пример 3. Получение (2'-ди-трет-бутилфосфатил)фенилацетата криптофицина 55 (5).
К раствору 1 (0,102 ммоль), 24 (46 мг, 0,134 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (12 мг, 0,102 ммоль) в 250 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (27 мг, 0,134 ммоль) в 50 мл метиленхлорида. После перемешивания при комнатной температуре в течение 6 ч реакционную смесь разбавляют 1 мл смеси этилацетата и гексана (3:1), и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата и гексана (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до фиолетовой пены. Хроматография (15 г флэш-силикагеля) с элюированием смесью этилацетата и гексана (4:1) дает 86 мг (82%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СОС13) δ 7,35 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 7,30-7,19 (м, 8Н), 7,11 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,02 (т, 1Н, 1=7,5 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,84 (д, 1Н, 1=7,5 Гц), 6,73 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,7 Гц), 5,92 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,79 (дд, 1Н, 1=15, 1,0 Гц), 5,43 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,8 Гц), 4,98 (дд, 1Н, 1=12, 3,1 Гц), 4,81 (ддд, 1Н, 1=9,9, 9,9,
1,8 Гц), 4,75 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 4,73-4,67 (м, 1Н),
3,90 (с, 3Н), 3,49 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,44-3,38 (м, 1Н), 3,38 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,27-3,17 (м, 2Н), 3,10 (дд, 1Н, 1=14, 8,2 Гц), 2,55-2,46 (м, 2Н), 2,37-
2,27 (м, 1Н), 1,95 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,5 Гц), 1,83-1,70 (м, 2Н), 1,49 (с, 18Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,03 (д, 3Н, 1=6,5 Гц), 0,97 (д, 3Н, 1=6, 4 Гц), 0,92 (д, 3Н, 1=7,0 Гц).
Пример 4. Получение динатриевой соли (2'-фосфатил)фенилацетата криптофицина 55 (6).
К раствору 5 (84 мг, 0,081 ммоль) в 400 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (81 мл, 0,33 ммоль). Слабожелтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. После концентрирования в вакууме до не совсем белой пены сырой дигидрофосфат растворяют в 614 мл тетрагидрофурана и обрабатывают 5,00 N водным раствором гидроксида натрия (33 мл, 0,163 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин смесь концентрируют в вакууме до желтовато-коричневой пены. Сырую соль растворяют в 1 мл горячего ацетонитрила и 0,1 мл горячей воды. Нерастворившиеся вещества отфильтровывают, а фильтрат концентрируют в вакууме, и получают 69 мг (87%) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, '11 ЯМР (МеОН-б4) δ 7,58 (д,1Н, 1=8,2 Гц), 7,38-7,32 (м, 2Н), 7,32-7,28 (м, 3Н),
7,28 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,17 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,1 Гц), 7,09 (ддд, 1Н, 1=7,8, 7,8, 1,7 Гц), 6,98 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,79-6,70 (м, 2Н), 6,67 (д, 1Н, 1=7,4 Гц), 5,91 (дд, 1Н, 1=15, 1,7 Гц), 5,45 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,6 Гц), 5,06 (дд, 1Н, 1=10, 2,7 Гц), 5,01 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 4,89-4,80 (м, 1Н), 4,47 (дд,1Н, 1=11, 3,8 Гц), 3,84 (с, 3Н), 3,67 (д,1Н, 1=16 Гц), 3,45(д, 1Н, 1=14 Гц), 3,42 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,18 (дд, 1Н, 1=14, 3,8 Гц), 3,12 (д, 1Н, 1=14 Гц), 2,77 (дд, 1Н, 1=14, 11 Гц), 2,67-2,60 (м, 1Н), 2,56-2,48 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,96-1,88 (м, 1Н), 1,85-
1,77 (м, 2Н), 1,22 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,03 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 0,93 (д, 3Н, 1=7,1 Гц).
Пример 5. Получение гидрохлорида никотиноата криптофицина 55 (7).
К раствору 1 (50 мг, 0,071 ммоль) в 354 мл пиридина при комнатной температуре добавляют гидрохлорид никотиноилхлорида (15 мг, 0,085 ммоль), а затем триэтиламин (23 мл, 0,170 ммоль). После перемешивания в течение 1,5 ч добавляют 4-диметиламинопиридин (8,6 мг, 0,071 ммоль). После перемешивания в течение 5 ч добавляют еще триэтиламин (23 мл, 0,170 ммоль), 4-диметиламинопиридин (8,6 мг, 0,071 ммоль) и гидрохлорид никотиноилхлорида (15 мг, 0,085 ммоль) вместе с ополаскиванием 50 мл пиридина. После перемешивания в течение 18 ч реакционную смесь обрабатывают 0,5 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и промывают метиленхлоридом (4х1 мл). Объединенные органические экстракты сушат Ща28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до светло-коричневого масла. Хроматография (14 г флэш-силикателя) с элюированием смесью этилацетата с гексаном (10:1) дает 49 мг (85%) свободного основания в виде белой пены. Никотиноат растворяют в 1 мл метиленхлорида и обрабатывают 1,0 М раствором хлористого водорода в диэтиловом эфире (90 мл, 0,090 ммоль). Прозрачный бесцветный раствор оставляют при комнатной температуре на 5 мин. Удаляют растворитель в вакууме, и получают 51 мг названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (СОС13) δ 8,94 (с, 1Н),
8,78 (ушс, 1Н), 8,29 (д, 1Н, 1=7,0 Гц), 7,57 (ушс, 1Н), 7,38 (д, 2Н, 1=7,1 Гц), 7,30-7,16 (м, 5Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,7 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4, Гц),
6,71 (м, 1Н), 5,80 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,74 (д, 1Н, 1=9, 6 Гц), 5,56 (ушс, 1Н), 5,00 (д, 1Н, 1=9,6 Гц),
4,95 (т, 1Н, 1=8, 9 Гц), 4,84 (д, 1Н, 1=9,8 Гц),
4,77-4,72 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1=13,
8,2 Гц), 3,23-3,14 (м, 2Н), 3,06 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2,81-2,74 (м, 1Н), 2,62-2,45 (м, 2Н), 1,93 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,8 Гц), 1,78-1,70 (м, 1Н),
1,66-1,59 (м, 1Н), 1,25 (с, 3Н), 1,20 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,19 (с, 3Н), 0,98 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,84 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Пример 6. Получение Ν-метилпиридинийацетата криптофицина 55 (8).
К раствору 1 (53 мг, 0,075 ммоль) в 751 мл метиленхлорида при 0°С добавляют триэтиламин (13 мл, 0,090 ммоль), а затем 2-фтор-1метилпиридиний-п-толуолсульфонат (23 мг, 0,083 ммоль). Неоднородную реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 3,5 ч, после чего добавляют еще 11 мг (0,039 ммоль) 2-фтор-1метилпиридиний-л-толуолсульфоната. После перемешивания еще в течение 14,5 ч добавляют еще 11 мг (0,039 ммоль) 2-фтор-1-метилпиридиний-п-толуолсульфоната, затем через 2,5 ч еще добавляют 11 мг (0,039 ммоль) 2-фтор-1метилпиридиний-п-толуолсульфоната и 13 мл (0,090 ммоль) триэтиламина. После перемешивания еще в течение 1 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме до оранжевой пены. Очистка методом ВЭЖХ с обращенной фазой8 с сопутствующим анионным обменом (птолуолсульфонат на ацетат) с последующей лиофилизацией позволяет получить 30 мг (47%) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, '11 ЯМР (ДМСО-бе) δ 8,65-8,58 (м, 2Н), 8, 36 (т, 1Н, 1=7,8 Гц), 7,68 (д, 1Н, 1-8,9, Гц), 7,60 (д, 1Н, 1=6, 6, Гц), 7,48 (т, 1Н, 1=6,6 Гц), 7,35-7,21 (м, 6Н), 7,19 (дд, 1Н, 1=8,5, 1,9 Гц), 7,05 (д, 1Н, 1=8,5, Гц), 6,49 (ддд, 1Н, 1=16, 13, 4,0 Гц), 5,91 (д, 1Н, 1=16 Гц), 5,72 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 5,66 (дд, 1Н, 1=8,0, 1,9 Гц), 5,32-5,27 (м, 1Н), 4,73 (дд, 1Н, 1=9,7, 4,3 Гц), 4,24 (ддд, 1Н, 1=11, 9,8, 3,7 Гц), 3,93 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,32 (дд, 1Н, 1=13, 9,3 Гц), 3,05-2,97 (м, 2Н),
2,77-2,57 (м, 3Н), 2,54-2,47 (м, 1Н), 1,76 (с, 3Н), 1,68-1,62 (м,1Н), 1,55-1, 46 (м,1Н), 1, 37-1,30 (м, 1Н), 1,15 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,13(с, 3Н), 1,00(с, 3Н), 0,88 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,73 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Пример 7. Получение №трет-Вос-3-(3хлор-4-метоксифенил)-(О)-аланината криптофицина 55 (9).
К раствору 1 (23 мг, 0,033 ммоль), Ν-третВос-3 -(3 -хлор-4-метоксифенил)-(И)-аланина4с (16 мг, 0,049 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (несколько кристаллов) в 143 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (10 мг, 0,049 ммоль) в 20 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 2 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (2:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин, и фильтруют через слой целита, промывая этилацетатом с гексаном (2:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (14 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 29 мг (88%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (СПС13) δ 7,42-7,27 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,25-7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,91-6,86 (м, 2Н), 6,84-
6,70 (м, 3Н), 5,75 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,53 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 5,47 (д, 1Н, 1=7, 6 Гц), 5,00 (дд, 1Н, 1=10, 2,9 Гц), 4,90-4,80 (м, 2Н), 4,78-4,71 (м, 1Н),
4,63 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 4,19-4,12 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,88 (с, 3Н), 3,40 (дд, 1Н, 1=13, 8,1 Гц),
3,25-3,12 (м, 2Н), 3,07 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц),
2,67-2,57 (м, 2Н), 2,39-2,27 (м, 2Н), 2,15 (дд, 1Н, 1=14, 8,0 Гц), 2,01 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,2 Гц),
1,87-1,76 (м, 2Н), 1,39 (с, 9Н),1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,09-1,04 (м, 6Н), 1,01 (д, 3Н, 1=6,3 Гц).
Пример 8. Получение гидрохлорида 3-(3хлор-4-метоксифенил)-(И)-аланината криптофицина 55 (10).
К раствору 9 (27 мг, 0,027 ммоль) в 265 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (33 мл, 0,133 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме, и получают 26 мг (96%, исправлено на 5 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7,3 Гц), 7,49-7,45 (м, 2Н), 7,43-7,48 (м, 3Н),
7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,13 (д, 1Н, 1=2,2 Гц), 7,07-6,95 (м, 3Н), 6,71 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,8 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15, 1,8 Гц), 5,69 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,22 (д, 1Н, 1=10 Гц),
5,18 (дд, 1Н, 1=10, 2,5 Гц),4,89-4,80 (м, 1Н), 4,53 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 4,16 (дд, 1Н, 1=10, 4,4 Гц),
3,88 (с, 3Н), 3,87 (с, 3Н), 3,51 (дд,1Н, 1=13, 9,9 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,7 Гц), 3,14 (дд, 1Н,
1=13, 2,3 Гц), 2,82-2,75 (м, 3Н), 2,45 (дд, 1Н,
1=15, 4,5 Гц), 2,42-2,34 (м, 1Н), 2,08-2,00 (м, 1Н),
1,97-1,86 (м, 3Н),1,27 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,16 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,10 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 1,06(д, 3Н, 1=6, 0 Гц).
Пример 9. Получение Ν-трет-Вос-глицината криптофицина 55 (11).
К раствору 1 (118 мг, 0,167 ммоль), Ν-третВос-глицина (44 мг, 0,251 ммоль) и 4диметиламинопиридина (2,0 мг, 0,0167 ммоль) в 490 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (52 мг, 0,251 ммоль) в 67 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 50 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин, и фильтруют через слой целита, промывая этилацетатом с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (19 г флэшсиликагеля, этилацетат с гексаном, 3:1) дает 138 мг (96%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (СПС13) δ 7,34 (с, 5Н),
7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,23-7,19 (м, 1Н), 7,10 (дд,
1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,796,70 (м, 1Н), 5,77 (д, 1Н, 1=13 Гц), 5,50 (д, 1Н,
1=8,0 Гц), 5,47 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,97 (дд, 1Н, 1=11, 2,7 Гц), 4,89 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,83 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4, 79-4,72 (м, 1Н), 4, 68 (ушс, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,66 (дд, 1Η, 1=18, 5,3 Гц), 3,42-3,35 (м, 2Н), 3,21 (дд, 1Н, 1=13, 4,0 Гц), 3,17 (дд, 1Η, 1=15, 5,1 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=15, 7,6 Гц), 2,66-
2,57 (м, 2Н), 2,47-2,38 (м, 1Η), 1,95 (ддд, 1Η, 1=14, 12, 4,7 Гц), 1,85-1,77 (м, 1Н), 1,75-1,67 (м, 1Н), 1,43 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Пример 9. Получение гидрохлорида глицината криптофицина 55 (12).
К раствору 11 (122 мг, 0,141 ммоль) в 471 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (178 мл, 0,707 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч 20 мин прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме, и получают 120 мг (99%, исправлено на 7 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОИ-б4) δ 7,81 (дд, 1Η, 1=8,5, 2,2 Гц), 7,46-7,41 (м,2Н), 7,40-7,36 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,20 (дд, 1Η, 1=8,4,
2,1 Гц), 7,01 (д, 1Η, 1=8,4 Гц), 6,70 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,97 (дд, 1Η, 1=15, 1,7 Гц), 5,55 (д, 1Η, 1=9,9 Гц), 5,18 (д, 1Η, 1=9,9 Гц), 5,14 (дд, 1Н, 1=10, 2,8 Гц), 4,84 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,78 (д, 1Н, 1=18 Гц), 3,50 (дд, 1Н, 1=13, 9,8 Гц), 3,23 (д, 1Н, 1=18 Гц), 3,20 (дд, 1Η, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (дд, 1Н, 1=13, 2,4 Гц), 2,80-2,69 (м, 3Н), 2,41-2,32 (м, 1Н), 1,99-1,92 (м, 1Н), 1,91-1,81 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н),
1,20 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,2 Гц).
Пример 10. Получение Ы-трет-Вос-βаланината криптофицина 55 (13).
К раствору 1 (102 мг, 0,145 ммоль), Ν-третВос-в-аланина (41 мг, 0,217 ммоль) и 4диметиламинопиридина (18 мг, 0,145 ммоль) в 400 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (45 мг, 0,217 ммоль) в 82 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 3,5 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин, и фильтруют через слой целита, промывая этилацетатом с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (21 г флэшсиликагеля, этилацетат с гексаном, 2:1, затем 4:1) дает 121 мг (95%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, !Н ЯМР (СПС13) δ 7,44-7,39 (м, 2Н), 7,37-7,31 (м, 3Н), 7,32 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,72 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,96 (дд, 1Η, 1=15, 1,6 Гц), 5,51 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,11-5,06 (м,1И), 5,08 (д, 1Н, 1=9, 8 Гц), 4,90-4,83 (м, 1Н),
4,50 (дд,1И, 1=11, 3,6 Гц), 3,86 (с, 3Н), 3,52-3,46 (м, 1Н), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (ушд, 1Н, 1=14 Гц), 3,05-2,92 (м, 2Н), 2,79-2,63 (м, 3Н),
2,45-2,37 (м, 1Η), 2,24 (дт, 1Н, 1=16, 7,0 Гц), 2,08-1,99 (м, 1Η), 1,96-1,79 (м, 3Н), 1,43 (с, 9Н),
1,25 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,02 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Пример 11. Получение гидрохлорида βаланината криптофицина 55 (14).
К раствору 13 (119 мг, 0,136 ммоль) в 452 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (170 мл, 0,679 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч 15 мин мутную белую реакционную смесь концентрируют в вакууме, и получают 110 мг (96%, исправлено на 4 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, !Н ЯМР (МеОИ-б4) δ 7,80 (дд, 1Η, 1=9,7, 2,3 Гц), 7,45-7,40 (м, 2Н), 7, 39-7,32 (м, 3н), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,68 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,8 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15, 1,7 Гц), 5,48 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,0 Гц), 5,15-5,11 (м, 1Н), 5,13 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 4,82 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,51 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,90 (с, 3Н), 3,50 (дд, 1Н, 1=14, 9,8 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,7 Гц), 3,14 (дд, 1Н, 1=14, 2,4 Гц), 2,85 (т, 2Н, 1=7,0 Гц), 2,80-2,65 (м, 5Н), 2,54 (дт, 1Н,
1=17, 7,4 Гц), 2,42-2,33 (м, 1Н), 2,22 (дт, 1Н,
1=17, 6,7 Гц), 1,90-1,81 (м, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,13 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,08 (д, 3Н, 1=6,3 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,2 Гц).
Пример 12. Получение Ν-трет-Вос-уаминобутирата криптофицина 55 (15).
К раствору 1 (48 мг, 0,068 ммоль), Ν-третВос-4-аминомасляной кислоты (18 мг, 0,088 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (8 мг, 0,068 ммоль) в 150 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (18 мг, 0,088 ммоль) в 50 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 45 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 5 мин, и фильтруют через слой целлита, промывая этилацетатом с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (15 г флэшсиликагеля, этилацетат с гексаном, 3:1) дает 55 мг (90%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, !Н ЯМР (СБС1з) δ 7,38-7,32 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=1,9 Гц), 7,22-7,19 (м, 1Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,98 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,75 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,9 Гц), 5,78 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,60-5,55 (м, 1Н), 5,49 (дд, 1Н, 1=9,8, 1,4 Гц), 4,96 (дд, 1Н, 1=11, 3,0 Гц), 4,89 (т, 1Н, 1=9,2 Гц), 4,81 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,78-4,70 (м, 1Н),
4,44 (ушс, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,40 (дд, 1Н, 1=14,
8,1 Гц), 3,22 (дд, 1Н, 1=14, 4,1 Гц), 3,22-3,15 (м, 1Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=14, 7,8 Гц), 2,89-2,82 (м, 2Н),
2,67-2,56 (м, 2Н), 2,47-2,38 (м, 1Н), 2,11-2,04 (м, 1Н), 2,00-1,77 (м, 3Н), 1, 75-1, 67 (м, 1Н), 1,45 (с, 9Н), 1,50-1,40 (м, 2Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,09 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6, 6 Гц).
Пример 13 Получение гидрохлорида γаминобутирата криптофицина 55 (16).
К раствору 15 (53 мг, 0,059 ммоль) в 297 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 1,0 М раствор хлористого водорода в диэтиловом эфире (297 мл, 0,297 ммоль). Исходное вещество осаждается в виде белой пасты, которую снова растворяют путем добавления 150 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 4 ч добавляют еще 59 мл (0,059 ммоль) раствора хлористого водорода. Перемешивание продолжают еще в течение 14 ч и реакционную смесь концентрируют в вакууме, и получают 49 мг (100%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (ДМСО-бе) δ 8,49 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,72 (ушс, 3Н), 7,44-7,33 (м, 5Н), 7,32 (д, 1Н, 1=1, 9 Гц), 7,29 (дд, 1Н, 1-9,4, 2,6 Гц),
7,20 (дд,1Н, 1=8,5, 1,9 Гц), 7,06 (д,1Н, 1=8,5 Гц),
6,48 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,9 Гц), 5,87 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,37 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 5,33 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 5, 04-5,01 (м, 1Н), 4,73 (т, 1Н, 1=11 Гц), 4,25 (ддд,1Н, 1=12, 9,8, 3,5 Гц), 3,82 (с, 3Н), 3,40-3,30 (м, 1Н), 3,07-3,01 (м, 2Н), 2,72 (дд, 1Н, 1=14, 12 Гц), 2,65-2,47 (м, 4Н), 2,38-2,28 (м, 1Н), 2,21 (дт, 1Н, 1=17, 7,5 Гц), 1,97 (дт, 1Н, 1=17, 7,5 Гц),
1,80-1,70 (м, 3Н), 1,54-1,46 (м, 2Н), 1,17 (с, 3Н), 1,03 (с, 3Н), 1,01 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,99 (д, 3Н, 1=5,8 Гц), 0,95 (д, 3Н, 1=5,8 Гц).
Пример 14. Получение Ы-трет-Вос-Щ)аланината криптофицина 55 (17).
К раствору 1 (103 мг, 0,146 ммоль), Ν-третВос-(Ь)-аланина (41 мг, 0,219 ммоль) и 4диметиламинопиридина (18 мг, 0,146 ммоль) в 400 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (45 мг, 219 ммоль) в 87 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 5 ч 50 мин мутную белую реакционную смесь обрабатывают еще 5,5 мг (0,029 ммоль) Ы-трет-Вое-Щ-аланина. 6,0 мг (0,029 ммоль) 1,3-дициклогексилкарбодиимида и несколькими кристаллами 4-диметиламинопиридина. После перемешивания еще в течение 1 ч реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая этилацетатом с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (22 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 1,5:1, затем 2:1 затем 4:1) дает 96 мг (75%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (СОС13) δ 7, 35-7, 30 (м, 5Н), 1, 26-7,21 (м, 2Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,76 (ддд, 1Н, 1=15,
13, 4,2 Гц), 5,77 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,52 (д, 1Н, 1=
7,6 Гц), 5,44 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,98 (дд, 1Н, 1=11,
2,5 Гц), 4,85-4,81 (м, 2Н), 4,75 (к, 1Н, 1=6,8 Гц),
4,56 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 4,01-3,96 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,41 (дд, 1Н, 1=13, 8,3 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=13, 4,0 Гц), 3,16 (дд, 1Н, 1=15, 5,9 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=15, 7,6 Гц), 2,65-2,57 (м, 2Н), 2,40-
2,31 (м, 1Н), 2,02-1,96 (м, 1Н), 1,87-1,73 (м, 2Н), 1,43 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,11-1,02 (м, 9Н), 0,99 (д, 3Н, 1=6,3 Гц).
Пример 15. Получение гидрохлорида (Ь)аланината криптофицина 55 (18).
К раствору 17 (95 мг, 0,108 ммоль) в 361 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (135 мл, 0,542 ммоль). После перемешивания в течение 2,5 ч мутную белую реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 90 мг (96%, исправлено на 6 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (МеОН-б4) δ 8,54 (д, 1Н, 1=7, 6 Гц), 7,81 (ушд, 1Н, 1=9,7 Гц), 7,46-7,44 (м, 2Н), 7,39-7,37 (м, 3Н), 7,32 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=2,0 Гц),
6,69 (ддд, 1Н, 1=15, 11, 3,7 Гц), 5,99 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=9,8 Гц),
5,15 (дд, 1Н, 1=11, 2,7 Гц), 4,78 (т, 1Н, 1=11 Гц),
4,53-4,50 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,65 (к, 1Н, 1=7,3 Гц), 3,50 (дд, 1Н, 1=13, 9,8 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,5 Гц), 3,14 (ушд, 1Н, 1=13 Гц), 2,81-2,71 (м, 3Н), 2,41-2,34 (м, 1Н), 1,98-1,93 (м, 1Н), 1,88-
1,82 (м, 2Н), 1,41 (д, 3Н, 1=7,3 Гц), 1,25 (с, 3Н),
1,20 (с, 3Н), 1,13 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,0 Гц).
Пример 16. Получение ^трет-Вое-(О)аланината криптофицина 55 (19).
К раствору 1 (25 мг, 0,035 ммоль), Ν-третВос-(Э)-аланина (10 мг, 0,053 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0,4 мг, 0,0035 ммоль) в 130 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (11 мг, 0,053 ммоль) в 47 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 5,5 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая этилацетатом с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (15 г флэшсиликагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 26 мг (83%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, Ή ЯМР (СВС13) δ 7,49-7,29 (м,
5Н), 7,24 (д, 1Н, 1= 2,0 Гц), 7,22-7,18 (м, 1Н),
7,09 (дд, 1Н, 1=8,4 2,0 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,76 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,4 Гц), 5,77 (д, 1Н, 1=15
Гц), 5,56 (д,1Н, 1=9,9 Гц), 5,48 (д, 1Н, 1=7,7 Гц),
5,01 (дд, 1Н, 1=10, 2,6 Гц), 4,91 (т,1Н, 1=9,4 Гц),
4,84 (д, 1Н, 1=9,9 Гц), 4,81-4,7 (м, 2Н), 3,99-3,93 (м, 1Н), 3, 91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1=13, 8,0 Гц),
3,22 (дд, 1Н, 1=13, 3,6 Гц), 3,17 (дд, 1Н, 1=14, 5,0 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=14 Гц), 2,68-2,58 (м, 2Н), 2,42-2,35 (м, 1Н), 2,04-1,94 (м,1Н), 1,87-1,50 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,09 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,4 Гц), 0,99 (д, 3Н, 1=6,3 Гц), 0,65 (д, 3Н, 1=6,8 Гц).
Пример 17. Получение гидрохлорида (Ό)аланмната криптофицина 55 (20).
К раствору 18 (24 мг, 0,027 ммоль) в 274 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (34 мл, 0,137 ммоль). После перемешивания в течение 3,5 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 24 мг (100%, исправлено на 8 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, ' Н ЯМР (МеОН-й4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=9, 5 Гц), 7,47-7,40 (м, 2Н), 7,40-7,36 (м, 3Н),
7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,71 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15, 1,6 Гц), 5,65 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,17 (дд, 1Н, 1=11, 2,5 Гц), 4,88-4,78 (м, 1Н), 4,53 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,95 (к, 1Н, 1=7,2 Гц), 3,87 (с, 3Н),
3,51 (дд, 1Н, 1=13, 9,8 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,14 (дд, 1Н, 1=13, 2,3 Гц), 2,81-2,74 (м, 3Н),
2,41-2,34 (м, 1Н), 2,07-1,99 (м, 1Н), 1,96-1,84 (м,2Н), 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,15 (д, 3Н, 1=
7,1 Гц), 1,09 (д, 3Н, 1=6,0 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6,0 Гц), 0,80 (д, 3Н, 1=7,4 Гц).
Пример 18. Получение Н;-К.-ди-трет-Вос(Ь)-лизината криптофицина 55 (21).
К раствору 1 (105 мг, 0,149 ммоль), Να-Νεди-трет-Вос-(Ь)-лизина (67 мг, 0,193 ммоль) и 4диметиламинопиридина (18 мг, 0,149 ммоль) в 400 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (40 мг, 0,193 ммоль) в 96 мл метиленхлорида. После перемешивания в течение 4 ч мутную белую реакционную смесь обрабатывают еще 10 мг (0,030 ммоль) М;-К.-ди-трет-Вос-(Е)-лизина и 6,1 мг (0,030 ммоль) 1,3-дициклогексилкарбодиимида в виде раствора в 100 мл метиленхлорида. После перемешивания еще в течение 1 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют этилацетатом с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин, и фильтруют через слой целита, промывая этилацетатом с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до белой пены, которую снова обрабатывают в описанных выше условиях с использованием 34 мг (0,097 ммоль) Ν^-Νε-дитрет-Вос-(Ь)-лизина, 20 мг (0,097 ммоль) 1,3дициклогексилкарбодиимида и 9,1 мг (0,075 ммоль) 4-диметиламинопиридина. После перемешивания в течение 1,5 ч реакционную смесь обрабатывают, как описано выше, и получают сырой продукт в виде белой пены. Хроматогра фия (21 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 1:1, затем 4:1) дает 112 мг (73%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (МеОН-й4) δ 7,42-7,37 (м, 2Н), 7,36-7,29 (м, 3Н), 7,27 (ушс, 1Н) , 7,16 (ушд, 1Н, 1=8,5 Гц), 6, 97 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,72 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,5 Гц), 5, 92 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,50 (д, 1Н, 1=11 Гц), 5,11-5,04 (м, 2Н), 4,84 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,48 (дд, 1Н, 1=11, 3,6 Гц), 3,84 (с, 3Н), 3,75 (ушс, 1Н), 3,50-3,43 (м, 1Н), 3,17 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,11 (д, 1Н, 1=14 Гц), 2,97-2,91 (м, 2Н), 2,76-2,58 (м, 3Н), 2,36-2,27 (м, 1Н), 1,98-
1,80 (м, 3Н), 1,48-1,38 (м, 2Н), 1,43 (с, 9Н), 1,40 (с, 9Н), 1,35-1,25 (м, 2Н), 1,23 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,15-1,09 (м, 2Н), 1,07 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,0 Гц), 1,01 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Пример 19. Получение дигидрохлорида (Ь)-лизината криптофицина 55 (22).
К раствору 21 (107 мг, 0,103 ммоль) в 345 мл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0 М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (155 мл, 0,621 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч мутную белую реакционную смесь фильтруют. Собранное белое твердое вещество промывают метиленхлоридом (2х1 мл) и сушат в вакууме при комнатной температуре и получают 87 мг (93%) названного в заголовке соединения.
500 МГц, Ή ЯМР (МеОН-й4) δ 8,61 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 7,81 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 7,47-7,44 (м, 2Н), 7,40-7,38 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,2 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,2 Гц), 7,00 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,63 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,0 Гц), 6,00 (дд, 1Н, 1=15, 1,6 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,15 (дд, 1Н, 1=10, 2,9 Гц), 4,68 (т, 1Н, 1=11 Гц), 4,55-4,49 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,79 (т, 1Н, 1=5,6 Гц), 3,52 (дд, 1Н, 1=14, 9,9 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (дд, 1Н, 1=13, 2,4 Гц), 3,06-2,98 (м, 1Н), 2,94-2,87 (м, 1Н), 2,85-2,74 (м, 3Н), 2,45-2,38 (м, 1Н), 1,98-1,76 (м, 5Н), 1,71-
1,64 (м, 2Н), 1,39-1,30 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н), 1,18 (д, 3Н, 1=8,2 Гц), 1,17 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6,1 Гц),
Пример 20. Получение 2'-(ди-трет-бутилфосфатил)фенилуксусной кислоты (24).
К раствору 2'-гидроксифенетилового спирта (1,05 г, 7,60 ммоль) в 15,2 мл Ν,Ν-диметилформамида при 0°С добавляют имидазол (621 мг, 9,11 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (1,26 мг, 8,34 ммол). После перемешивания при 0°С в течение 40 мин и в течение 45 мин при комнатной температуре добавляют еще 155 г (2,28 ммоль) имидазола и 229 мг (1,52 ммоль) трет-бутилдиметилсилилхлорида. Реакционную смесь перемешивают еще в течение 15 мин, после чего добавляют еще 150 мл третбутилметилового эфира. Смесь промывают холодной 1 Ν соляной кислотой (1х15 мл), а затем водой (1х15 мл). Органический слой сушат (№ь8О4). фильтруют и концентрируют в вакууме до желтого масла. Хроматография (70 г флэш-силикагеля) с элюированием гексаном с этилацетатом (5:1) дает 1,81 мг (94%) 1° силилового эфира в виде бледного, не совсем белого масла. К раствору силилэфира (506 мг, 2,00 ммоль) и ди-трет-бутилдиэтилфосфорамидита (600 мл, 93%, 2,00 ммоль) в 2 мл тетрагидрофурана при комнатной температуре добавляют 1Н-тетразол (421 мг, 6,01 ммоль). После перемешивания в течение 45 мин реакционную смесь охлаждают до -10°С и быстро обрабатывают раствором м-хлорпербензойной кислоты (450 мг, 99%, 2,61 ммоль) в 3,6 мл метиленхлорида. Мутную белую реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 15 мин. Реакцию гасят 4 мл 10% водного раствора бисульфита натрия, энергично перемешивают смесь в течение 10 мин, разбавляют 15 мл трет-бутилметилового эфира и промывают 10% водным раствором бисульфита натрия (2х10 мл), а затем 0,5 N водным раствором гидроксида натрия (2х10 мл).
Органический слой сушат (№28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до бесцветного масла (941 мг), которое используют непосредственно на последующей стадии. Неочищенный фосфат растворяют в 10 мл тетрагидрофурана, охлаждают до 0°С и обрабатывают 1 М раствором тетра-н-бутиламмонийфторида в тетра-гидрофуране (2,4 мл, 2,4 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 20 мин и при комнатной температуре в течение 1,5 ч реакционную смесь разбавляют 60 мл третбутилметилового эфира и промывают водой (1х10 мл) и затем рассолом (1х10 мл). Органический слой сушат (№ь8О4). фильтруют и концентрируют в вакууме до желтого масла. Хроматография (50 г флэш-силикагеля) с элюированием этилацетатом с гексаном (3:1) дает 525 мг (79%) 1° спирта в виде не совсем белого масла. К раствору спирта (123 мг, 0,372 ммоль) в смеси ацетонитрила с четыреххлористым углеродом (1:1, 1,49 мл) при комнатной температуре добавляют воду (1,1 мл), а затем периодат натрия (239 мг, 1,12 ммоль) и гидрат хлорида рутения (III) (1,8 мг, 0,0082 ммоль). Коричневую смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 55 мин. После концентрирования в вакууме и хроматографии (8 г флэшсиликагеля, элюирование 10% метанола в этилацетате) получают 109 мг (85%) названного в заголовке соединения в виде фиолетового масла.
500 МГц, '11 ЯМР (СОС13) δ 7,49 (д, 1Н, 1=7,53 Гц), 7,30-7,15 (м, 3Н), 3,77 (с, 2Н), 1,51 (с, 18Н).
Пример 21.
Соединение примеров 21-26 получают с использованием способов, по существу таких же, какие описаны выше. Спектральные характеристики криптофицина-129.
М.-с., Е1 т/е (относ.интенс.) 654/656 (2,1/0,8, М-НВг), 412/414 (9,7/3,6), 280/282 (10,3/3,5), 227 (15,2), 195/197 (50,1/16,3), 105 (100), 91 (100); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е 654,2687 (С35Н43С1Х2О8, Δ 2,1 м.-м.е). Ή ЯМР (Οποί,). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц) 7-бром-5,8-дигидрокси-6-метил-8фенил-2-октеновая кислота (А): 5,76 (2д; 15,3),
6.68 (3, ддд; 15,3, 9,9 и 5,6), 2,29 (4, ддд; 14,2,
10,6 и 10,4), 2,67 (4, дд; 14,2 и 5,4), 4,95 (5, ддд;
10,3, 10,3 и 1,8), 2,47 (6,м), 1,15 (6-Ме, д; 6,5),
4,29 (7, дд; 9,1 и 2,1), 4,84 (8, д; 9,0), 7,34-7,39 (10/11/12/13/14,м); 3-хлор-4-метоксифенилала- нин (В): 4,80 (2, м), 5,73 (2-ЫН, д; 8,8), 3,01 (3, дд; 14,6 и 7,6), 3,16 (3, дд; 14,3 и 5,6), 7,23 (5, д; 2,0), 3,87 (7-ОМе, с), 6,84 (8, д; 8,4), 7,09 (9, дд; 8,4 и 20); 3-амино-2-метилпропионовая кислота (С): 2,73 (2, м), 1,23 (2-Ме, д; 7,2:), 3,25 (3, ддд;
13,5, 6,5 и 6,5), 3,53 (3, ддд; 13,4, 5,4 и 3,9), 6,93 (3-ΝΗ, ушт; 6,1); лейциновая кислота (Ό): 4,91 (2, дд; 10,5 и 2,8), 1,49 (3, м), 1,80 (3, м), 1,73 (4, м), 0,92 (4-Ме, д; 6,5), 0,89 (5, д; 6,5).
13С ЯМР (СОС13), остаток, δ (положение углерода), А: 165/4 (1), 125,2(2), 141,3(3), 36,6(4), 75,7(5), 37,9(6), 11,8(6-Ме), 60,3(7), 76,7(8), 141,6(9), 126,8(10/14), 128,7(11/13),
128,8(12); В: 171,0(1), 53,6(2), 35,0(3), 130,4(4), 131,0(5), 122,4(6), 153,9(7), 56,1 (7-ОМе), 112,3(8), 128,4(9); С: 175,4 (1), 38,4(2), 14,0(2Ме), 41,3(3); Ό: 170,2(1), 71,3(2), 39,6 (3), 24,8(4), 23,2(4-Ме), 21,4(5).
Пример 22. Спектральные характеристики криптофицина-138.
М.-с, Е1, т/ζ (относ.интенс.) 734/736 (0,3/0,1), 654/656 (0,6/0,2), 412/414 (12,6/4,7), 313/315 (20,4/12,5), 280 (7,6), 227 (3,5), 195/197 (44,7/15,6), 155/157 (35,4/13,6), 105 (33,6), 91 (34,2), 80/82 (100/100); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/ζ 734,1985 (С35Н44С1ВгЫ2О8, Δ -1,6 м.м.е), 654,2722 (С35Н43СШ2О8, Δ -1,4 м.-м.е). Ή ЯМР (ΟΌΟΊ3). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц) 7-бром-5,8-дигидрокси-6-метил-8фенил-2-октеновая кислота (А): 5,78 (2д; 15,5),
6.69 (3, ддд; 15,1, 9,8 и 5,3), 2,33 (4,м), 2,71 (4,м), 4,97 (5, ддд; 10,4 10,4 и 1,6), 2,45 (6, м), 1,17 (6Ме, д; 6,3), 4,40 (7, дд; 10,1 и 2,2), 5,06 (8, д;
10,1), 7,36-7,42 (10/11/12/13/14,м); 3-хлор-4метоксифенилаланин (В): 4,82 (2, м), 5,69 (2ΝΉ, д; 8,7), 3,02 (3, дд; 14,5 и 7,5), 3,17 (3, дд;
14,5 и 5,4), 7,23 (5, д; 2,1), 3,88 (7-ОМе, с), 6,85 (8, д; 8,4), 7,09 (9, дд; 8,4 и 1,9); 3-амино-2метилпропионовая кислота (С): 2,73 (2, м), 1,23 (2-Ме, д; 7,3), 3,25 (3, ддд; 13,4, 6,5 и 6,5), 3,54 (3, м), 6,92 (3-ΝΠ, ушт; 5,7); лейциновая кислота (Ό): 4,91 (2, дд; 10,6 и 2,7), 1,43 (3, м), 1,82 (3, м), 1,75 (4, м), 0,93 (4-Ме, д; 6,6), 0,90 (5, д; 6,6).
13С ЯМР (ΟΠΟΊΟ. остаток, δ (положение углерода) А: 165,4 (1), 125,2(2), 141,2(3), 36,6(4),
76,5(5), 38,2(6), 11,7(6-Ме), 55,3(7), 87,4(8),
137,4(9), 128,0(10/14), 128,7(11/13), 129,3(12); В:
171,0(1), 53,6(2), 35,0(3), 129,9(4), 131,0(5),
122.4(6). 153.9(7). 56,1(7-ОМе), 112.2(8). 128.4(9); С: 175.5 (1). 38.4(2). 14,0(2-Ме),
41.2(3); Ό: 170.2(1). 71.2(2). 39.6 (3). 24.8(4). 23,2(4-Ме), 21.4(5).
Пример 23. Спектральные характеристики криптофицина-139.
М.-с.. ΕΙ. т/е. (относ.интенс.). 732/734 (0.3/0.3). 652/654 (0.9/0.5). 533 (13.6). 445 (5.7). 195/197 (9.2/11.4). 105 (96.2). 80/82(100/100); М.с. высокого разрешения. ΕΙ. т/е. 732.1783 (С35Н42С1ВгЫ2О8, Е 3.0 м.-м.е), 652.2573 (С35Н41СШ2О8. Е -2.1 м.-м.е). 1Н ЯМР (СПС13). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), 7бром-8-оксо-5-гидрокси-6-метил-8-фенил-2октеновая кислота (А): 5,75 (2, д; 15.4). 6.68 (3. ддд; 15.2. 10.1 и 5.0). 2,31 (4, ддд; 14.2. 10.7 и
10.7). 2,63 (4, дд; 14.4 и 5.1). 5,09 (5, дцд; 9.7 9.7 и 1.5). 2.46 (6. м), 1,18 (6-Ме, д; 6.6). 5.41 (7. д;
3.5). 7.94 (10/14. ушд; 8.6). 7.50 (11/13. т; 7.8). 7,63 (12, ушт; 7.5); 3-хлор-4-метоксифениаланин (В); 4.80 (2, м), 5,64 (2-ИН, д; 8.3). 3,04 (3, дд;
14.6 и 7.2). 3,14 (3, дд; 14.4 и 5.5). 7,22 (5, д; 2.0).
3.87 (7-ОМе, с). 6.84 (8. д; 8.3). 7,08 (9, дд; 8.3 и 2.3); 3-амино-2-метилпропионовая кислота (С):
2.76 (2. м), 1,26 (2-Ме, д; 7.1). 3,31 (3, ддд; 13.7.
6.8 и 6.6). 3,53 (3, м), 6.95 (3-ΝΗ, ушт; 5.9); лейциновая кислота (Ό): 4.93 (2, дд; 10.6 и 3.0). 1.51 (3, м), 1,95 (3, м), 1.80 (4. м), 0.97 (4-Ме, д; 6.8). 0. 91 (5. д; 6.6).
13С ЯМР (СОС13). остаток, δ. (положение углерода). А: 165.2(1). 125.3(2). 141.0(3). 36.2(4). 76.0(5). 39.3(6). 13.8 (6-Ме), 51.8(7). 192.3(8). 134.2(9). 128.7(10/14). 129.0 (11/13). 134.0(12); В: 170.9(1). 53.7(2). 35.0(3). 129.8(4). 131.0(5). 122.4(6). * (7. не наблюд.), 56,2 (7-ОМе), 112.3(8). 128.4(9); С: 175.6(1). 38.3(2). 14.2(2Ме), 41.1(3); Ό: 170.2 (1). 71.1(2). 39.8(3). 24.7(4). 23,2(4-Ме), 21.3(5).
Пример 24.
Спектральные характеристики криптофицина-145 М.-с.. ΕΙ. т/ζ, (относ.интенс.). 734/736/738 (0.5/0.6/0.2). 654.656 (1.5/1.1).
412/414 (2.2/1.0). 313/315 (19.5/12.9). 227 (4.1). 195/197 (11.5/3.7). 105 (14.6). 91 (25.2). 80/82 (100/100);
М.-с. высокого разрешения, ΕΙ. т/ζ. 736.1980 (С35Н44С1ВгЫ2О8, Е -3.1 м.-м.е).
654.2714 (С35Н43С1Ы2О8, Е -0.6 м.-м.е). 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроамино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), 7-бром-5,8дигидрокси-6-метил-8-фенил-2-октеновая кислота (А): 5.81 (2. д; 15.7). 6.72 (3. м), 2.31 (4. м),
2.77 (4. м), 5.62 (5. м), 2.42 (6. м), 1,22 (6-Ме, д; 7.0). 4.23 (7. дд; 8.0 и 3.2). 4.94 (8, д; 7.9). 7.32-
7.28 (10/11/12/13/14. м); 3-хлор-4-метоксифенилаланин (В): 4,82 (2, м), 5.72 (2-ΝΗ. ушс). 3.05 (3, м), 3.15 (3, м), 7,23 (5, ушс), 3.88 (7-ОМе, с) .
6,84 (8, ушд; 7). 7,09 (9, м); 3-амино-2метилпропионовая кислота (С): 2.75 (2. м), 1,25 (2-Ме, д; 7.0). 3,30 (3, м), 3,53 (3, м), 6.97 (3-Ν. ушс); лейциновая кислота (Ό): 4,90 (2, дд; 9.7 и
3.6) . 1,58 (3, м), 1,82 (3, м), 1,70 (4, м), 0,95 (4Ме, д; 6.6). 0.89 (5. д; 6.6).
13С ЯМР (СОС13). остаток, δ. (положение углерода). А: 165.14(1). 125.2(2). 141.3(3). 35.8(4). 75.8(5). 41.2(6). 13.4 (6-Ме), 60.7(7). 76.5(8). 141.6(9). 126.8(10/14). 128.5(11/13).
128.6(12); В: 170.5(1). 53.7(2). 35.0(3). 129.9(4). 131.0(5). 122.4(6). 154.0(7). 56,2(7-ОМе), 112.3(8). 128.5(9); С: 175.4 (1). 38.4(2). 14.1(2Ме), 41.2(3); Ό: 170.5(1). 71.3(2). 39.7 (3). 24.6(4). 22.9(4-№). 21.5(5).
Пример 25. Спектральные характеристики криптофицина-1 40.
М.-с.. ΕΙ. т/ζ. (относ.интенс.). 690/692 (2.3/1.8). 654/656 (3.8/2.2). 412/414(5.4/2.1).
280/282(5.4/2.2). 227(10.2). 195/197 (27.8/10.4). 155/157 (53.7/16.4). 105 (81.0). 91(100); М.-с. высокого разрешения. ΕΙ. т/ζ. 690.2427 (С35Н44а^2О8. Ε 4.8 м.-м.е), 654.2760 (С35Н43С1Ы2О8. Ε -5.2 м.-м.е). 1Н ЯМР (СПС13). амино-или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), 7хлор-5,8-дигидрокси-6-метил-8-фенил-2-октеновая кислота (А): 5,77 (2, д; 15.4). 6.68 (3, ддд;
15.3. 9.8 и 5.6). 2.29 (4. м), 2.67 (4. м), 4,98 (5, ддд; 10.3. 10.3 и 1.7). 2.64 (6. м), 1,15 (6-Ме, д;
6.6) . 4,19 (7, дд; 9.2 и 2.1). 4.72 (8. д; 9.2). 7. 33-
7.39 (10/11/12/13/14. м); 3-хлор-4-метоксифенилаланин (В): 4.81 (2. м), 5,69 (2-Ν4, д; 8.8). 3,01 (3, дд; 14.5 и 7.5). 3,16 (3, дд; 14.5 и 5.5).
7.23 (5. д; 2.1). 3.87 (7-ОМе, с), 6.84 (8, д; 8.3). 7,09 (9, дд; 8.4 и 2.0); 3-амино-2-метилпропионовая кислота (С): 2.73 (2. м), 1,22 (2-Ме, д; 7.3).
3.24 (3, ддд; 13.5. 6.8 и 6.8). 5,53 (3, м), 6.91 (3N4 ушт; 6.0); лейциновая кислота (Ό): 4.89 (2. дд; 10.4 и 2.9). 1.39 (3, м). 1.69-1.80 (3/4. м), 0,90 (4-Ме, д; 6.4). 0,87 (5, д; 6.6).
13С ЯМР (СОС13). остаток, δ. (положение углерода). А: 165.4(1). 125.2(2). 141.4(3). 36.7(4). 75.5(5). 38.1(6). 10.4 (6-Ме), 65.0(7). 75.8(8). 141.4(9). 126.8(10/14). 128.7(11/13). 128.8 (12); В: 171.0(1). 53.6(2). 35.0(3). 129.9(4). 131.0(5). 122.4(6). 153.9 (7). 56,1(7-ОМе), 112.2(8). 128.4 (9); С: 175.5 (1). 38.4(2). 14,1(2-Ме), 41.3(3); Ό: 170.3(1). 71.3(2). 39.5 (3). 24.7(4). 23,2(4-Ме), 21.4(5).
Пример 26. Спектральные характеристики криптофицина-1 41 .
М.-с.. ΕΙ. т/ζ. (относ.интенс.), 654/656 (1.8/0.8. М-НС1). 412/414 (7.6/3.1). 280/282 (3.2/2.0). 227 (8.4). 195/197 (35.6/11.9). 155/157 (100/37.2). 105 (68.1). 91(88.4); М.-с. высокого разрешения. ΕΙ. т/ζ. 690.2468 (С35Н44С1^4О8. Ε -0.6 м.-м.е), 654.2706 (С35Н43С1Ы2О8. Ε 0.2 м.м.е). 'Н ЯМР (СЭСГ). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), 7-хлор-5,8дигидрокси-6-метил-8-фенил-2-октеновая кислота. (А): 5.69 (2. д; 15.4). 6,62 (3, ддд; 15.1. 9.9 и 5,2), 2,07 (4, м), 2,49 (4, дд; 14,4 и 5,4), 4,96 (5, ддд; 10,5, 10,5 и 1,8), 1,88 (6, м), 1,07 (6-Ме, д;
6.8) , 4,24 (7, дд; 8,9 и 1,9), 4,73 (8, д; 8,8), 2,80 (8-ОН, уширенный пик), 7,32 (10/14, дд; 7,6 и
1.9) , 7,36-7,42 (11/12/13,м); 3-хлор-4-метоксифенилаланин. (В) 4,78 (2, м), 5,65 (2-ΝΠ д; 8,6), 3,00 (3, дд; 14,4 и 7,2), 3,13 (3, дд; 14,4 и 5,6),
7,20 (5, д; 2,3), 3,86 (7-ОМе, с), 6,82 (8, д; 8,3), 7,06 (9, дд; 8,3 и 2,2); 3-амино-2-метилпропионовая кислота (С): 2,73 (2, м), 1 ,23 (2-Ме, д; 7,2), 3,27 (3, ддд; 13,5, 6,8 и 6,8), 3,51 (3, ддд; 13,5, 5,0 и 3,8), 6,91 (3-ΝΗ, ушт; 6,0); лейциновая кислота (В): 4,83 (2, дд; 10,4 и 2,9), 1,48 (3, м), 1,70 (3, м), 1,76 (4, м), 0,99 (4-Ме, д; 6,5), 0,95 (5, д; 6,5).
13С ЯМР (СБС13), остаток, δ, (положение углерода), А: 165,3(1), 125,2(2), 141,0(3), 36,2(4), 75,5(5), 39,3(6), 10,8 (6-Ме), 70,0(7), 76,2(8), 138,9(9), 126,7(10/14), 129,0(11/13), 129,0(12); В: 170,9(1), 53,6(2), 35,0(3), 129,8(4), 131,0(5), 122,4 (6), 153,9(7), 56,1(7-ОМе), 112,2(8), 128,4(9); С:
175,5 (1), 38,2(2), 14,1(2-Ме), 41,1(3); Ό: 170,2(1), 71,2(2), 39,6(3), 24,8(4), 23,2(4-Ме), 21, (5).
Пример 27. Схема 1 эксперимента.
К раствору алкена 1 (1,15 г, 3,52 ммоль) в 50 мл СН2С12 при -78°С добавляют пиридин (0,3 мл, 3,9 ммоль) и 0,98 мл 0,1% раствора судана красного 7В в СН2С12. В смесь медленно пробулькивают озон до тех пор, пока красный цвет не изменится на желтый. Развитие реакции контролируют с помощью ТСХ. По завершении реакции добавляют цинковую пыль (1,63 г, 24,9 ммоль) и 3,4 мл ледяной уксусной кислоты. Охлаждающую баню удаляют и смесь постепенно нагревают до комнатной температуры и перемешивают смесь еще в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтруют через целит и промывают раствором Си8О4 (3х30 мл), затем водой (3х20 мл) и, в завершение, насыщенным водным раствором №НСО3 (2х20 мл). Органический слой сушат над М§8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают 0,937 г (88%) нужного альдегида, который используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13,) 6 9,74-9,73 (д, 1Н, 1=1,97 Гц), 7,0-6,82 (м, 1Н), 5,91-5,86 (д, 1Н, 1=15,4 Гц), 4, 1-4,0 (м, 1Н), 3,73 (с, 3Н), 2,55-2,4 (м, 3Н), 1,09-1,07 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0, 87 (с, 9Н), 0,08 (с, 3Н), 0,06 (с, 3Н).
Метиллитий (9,6 мл, 14,4 ммоль), в виде 1,5М раствора в диэтиловом эфире в комплексе с бромидом лития, добавляют по каплям к охлажденному до -78°С раствору 2,5-диметилбензилтрифенилфосфонийхлорида в 120 мл ТГФ. Раствор постепенно нагревают до 0°С и снова охлаждают до -78°С. Добавляют к илиду при 78°С по каплям альдегид 2 в 40 мл ТГФ. Смесь перемешивают при -78°С в течение 15 мин и затем постепенно нагревают ее до комнатной температуры. После выдержки при комнатной температуре в течение 1 ч добавляют насыщенный раствор ΝΗ4Ο (50 мл) и раствор экстрагируют эфиром. Эфирный слой промывают водой (2х50 мл), затем рассолом, сушат над М§8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой стирол в виде смеси изомеров Е и Ζ очищают на силикагеле с использованием 2% ЕЮАс в гексане и получают 2,32 г (58%) прозрачного масла.
Смесь Ε:Ζ кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч в 120 мл бензола в присутствии тиофенола (0,3 мл) и 1,1'-азобис (циклогексанкарбонитрила) (νΑΖΟ) (0,16 г). Затем раствор охлаждают до температуры окружающей среды, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией (силикагель, 25% ЕЮАс в гексане) и получают 2,2 г (95%) чистого Е-изомера в виде прозрачного масла.
[α]20 ο+34,6° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,3-7,0 (м, 4Н),
6,62-6,57 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,11-6,03 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,1 Гц), 5,93-5,88 (д, 1Н, 1=15,5 Гц), 3,82-
3,78 (м, 1Н), 3,78 (с, 3Н), 2,6-2,34 (м, 3Н), 2,37 (с, 3Н), 2,34 (с, 3Н), 1,18-1,16 (д, 3Н, 3=6,8 Гц), 0,96 (с, 9Н), 0,13 (с, 3Н), 0,11 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СБС13) δ 167,2, 146,9,
136,9, 135,7, 133,3, 132,4, 130,5, 128,8, 128,1,
126,5, 123,2, 75,5, 51,8, 43,4, 37,9, 26,2, 21,4,
19,7, 18,5, 16,7, -4,0, -4,2;
ИК (СНС13) 2955, 2930, 2858, 1718, 1658, 1603, 1496, 1472, 1438, 1362, 1325, 1280, 1258, 1097, 1040 см-1.
Элементн. анализ: для С24Н38О381; вычислено: С 71,59; Н 9,51; найдено: С 71,38; Н 9,30.
К раствору сложного эфира 3 (2,2 г, 5,46 ммоль) в 10 мл ТГФ добавляют 11 мл 2М раствора КОН. При энергичном перемешивании получающуюся в результате смесь греют при 65°С в течение 24 ч. После охлаждения до температуры окружающей среды добавляют 11 мл 2М раствора НС1 и получающуюся в результате смесь энергично перемешивают еще в течение 30 мин. К смеси добавляют этилацетат (50 мл) и разделяют слои. Затем водный слой снова экстрагируют этилацетатом (2х30 мл). Объединенные органические слои промывают 50% солевым раствором (3х30 мл), сушат над №28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают 2,12 г (100%) нужной кислоты в виде вязкого желтого масла.
ХН ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,26-6, 95 (м,
4Н), 6,62-6,57 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,1-6,02 (дд,
1Н, 1=15,8, 8,0 Гц), 5,92-5,87 (д, 1Н, 15,7 Гц),
3,9-3,8 (м, 1Н), 2, 6-2, 2 (м, 3Н), 2,36 (с, 3Н), 2,34 (с, 3Н), 1,18-1,15 (д, 3Н, 6=6,8 Гц), 0,94 (с, 9Н), 0,12 (с, 3Н), 0,11 (с, 3Н).
К раствору кислоты 4 (2,12 г, 5,46 ммоль) и диизопропилэтиламина (2,9 мл, 16,4 ммоль) в 7 мл ДМФА, охлажденному до 0°С, добавляют по каплям дифенилфосфинхлорид (1,1 мл, 6,01 ммоль). После 5 мин перемешивания при 0°С и 30 мин при комнатной температуре добавляют по каплям соль ТГА 3-(3-хлор-4-метоксифенил)Б-аланин-2,2,2-трихлорэтилового эфира 5 в 7 мл ДМФА. Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, выливают в 100 мл воды и промывают диэтиловым эфиром (3х50 мл). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над М§804, фильтруют через целит и концентрируют в вакууме. Очистка колоночной хроматографией (силикагель, 10-30% Е!0Ас в гексане) дает 2,86 г (72%) амида 6 в виде белой пены.
[α]20 ο +44,8° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СБСк) δ 7,25 (с, 1Н),
7,22 (с, 1Н), 7,1-6,83 (м, 5Н), 6,6-6,55 (д, 1Н, 1=15,7 Гц), 6,11-6,03 (дд, 1Н, 1=15,6, 8,1 Гц), 5,9-
5,8 (м, 2Н), 5,18-5,05 (м, 1Н), 4,83-4,75 (к, 2Н, > 12,0 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,83-3,68 (м, 1Н), 3,3-3,1 (м, 2Н), 2,6-2,36 (м, 3Н), 2,36 (с, 3Н), 2,32 (с, 3Н),
1,16-1,14 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,95 (с, 9Н), 0,11 (с, 3Н), 0,05 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СВС13) δ 170,0, 165,1,
154.2, 143,1, 136,4, 135,3, 133,0, 132,0, 131,0,
130,9, 130,0, 128,4, 128,3, 127,7, 126,1, 124,6,
112.3, 112,1, 94,2, 75,0, 74,7, 56,0, 52,9, 42,8,
37,5, 36,5, 25,8, 20,9, 19,3, 18,0, 16,4, -4,3, -4,7; ИК (СНС13) 3428, 2957, 2930, 2857, 1759, 1676, 1645, 1606, 1503, 1464, 1442, 1380, 1349, 1281, 1259, 1173, 1067 см-1
Пример 27. Схема 1 эксперимента.
К раствору алкена 1 (1,15 г, 3,52 ммоль) в 50 мл СН2С12 при -78°С добавляют пиридин (0,3 мл, 3,9 ммоль) и 0,98 мл 0,1% раствора Судана красного 7В в СН2С12. В смесь медленно пробулькивают озон до тех пор, пока красный цвет не изменится на желтый. Развитие реакции контролируют с помощью ТСХ. По завершении реакции добавляют цинковую пыль (1,63 г, 24,9 ммоль) и 3,4 мл ледяной уксусной кислоты. Охлаждающую баню удаляют и смесь постепенно нагревают до комнатной температуры и перемешивают смесь еще в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтруют через целит и промывают раствором Си804 (3х30 мл), затем водой (3х20 мл) и, в завершение, насыщенным водным рас твором ЫаНСО3 (2х20 мл). Органический слой сушат над М§804, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают 0,937 г (88%) нужного альдегида, который используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
1Н ЯМР (300 МГц, СБСк) δ 9,74-9,73 (д, 1Н, 1=1,97 Гц), 7,0-6,82 (м, 1Н), 5,91-5,86 (д, 1Н, 1=15,4 Гц), 4,1-4,0 (м, 1Н), 3,73 (с, 3Н), 2,55-2,4 (м, 3Н), 1,09-1,07 (д, 3Н, 1=6, 8 Гц), 0, 87 (с, 9Н), 0,08 (с, 3Н), 0,06 (с, 3Н).
Метиллитий (9,6 мл, 14,4 ммоль), в виде 1 ,5М раствора в диэтиловом эфире в комплексе с бромидом лития, добавляют по каплям к охлажденному до -78°С раствору 2,5-диметилбензилтрифенилсульфонийхлорида в 120 мл ТГФ. Раствор постепенно нагревают до 0°С и снова охлаждают до -78°С. Добавляют к илиду при -78°С по каплям альдегид 2 в 40 мл ТГФ. Смесь перемешивают при -78°С в течение 15 мин и затем постепенно нагревают ее до комнатной температуры. После выдержки при комнатной температуре в течение 1 ч добавляют насыщенный раствор ИН4С1 (50 мл) и раствор экстрагируют эфиром. Эфирный слой промывают водой (2х50 мл), затем рассолом, сушат над М§804, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой стирол в виде смеси изомеров Е и Ζ очищают на силикагеле с использованием 2% Е!0Ас в гексане и получают 2,32 г (58%) прозрачного масла.
Смесь Ε:Ζ кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч в 120 мл бензола в присутствии тиофенола (0,3 мл) и 1,1'-азобис (циклогексанкарбонитрила) (VАΖ0) (0,16 г). Затем раствор охлаждают до температуры окружающей среды, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией (силикагель, 25% Е!0Ас в гексане) и получают 2,2 г (95%) чистого Е-изомера в виде прозрачного масла.
[α]20 ο +34,6° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,3-7,0 (м, 4Н),
6,62-6,57 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,11-6,03 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,1 Гц), 5,93-5,88 (д, 1Н, 1=15,5 Гц), 3,823, 78 (м,1Н), 3,78 (с, 3Н), 2,6-2,34 (м, 3Н), 2,37 (с, 3Н), 2,34 (с, 3Н), 1,18-1,16 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,96 (с, 9Н), 0,13 (с, 3Н), 0,11 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СПС13) δ 167,2, 146,9,
136,9, 135,7, 133,3, 132,4, 130,5, 128,8, 128,1,
126,5, 123,2, 75,5, 51,8, 43,4, 37,9, 26,2, 21,4,
19,7, 18,5, 16,7, -4,0, -4,2;
ИК (СНС13) 2955, 2930, 2858, 1718, 1658, 1603, 1496, 1472, 1438, 1362, 1325, 1280, 1258, 1097, 1040 см-1.
Элементн. анализ: для С24Н380381; вычислено: С 71,59; Н 9,51; найдено: С 71,38; Н 9,30.
К раствору сложного эфира 3 (2,2 г, 5,46 ммоль) в 10 мл ТГФ добавляют 11 мл 2М раствора КОН. При энергичном перемешивании получающуюся в результате смесь греют при 65°С в течение 24 ч. После охлаждения до температуры окружающей среды добавляют 11 мл 2М раствора НС1 и получающуюся в результате смесь энергично перемешивают еще в течение 30 мин. К смеси добавляют этилацетат (50 мл) и разделяют слои. Затем водный слой снова экстрагируют этилацетатом (2х30 мл). Объединенные органические слои промывают 50% солевым раствором (3х30 мл), сушат над На28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме, и получают 2,12 г (100%) нужной кислоты в виде вязкого желтого масла.
Ή ЯМР (300 МГц, СЛС13) δ 7,26-6,95 (м, 4Н), 6,62-6,57 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,1-6,02 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,0 Гц), 5,92-5,87 (д, 1Н, 1=15,7 Гц),
3,9-3,8 (м, 1Н), 2,6-2,2 (м, 3Н), 2,36 (с, 3Н), 2,34 (с, 3Н), 1,18-1,15 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,94 (с, 9Н), 0,12 (с, 3Н), 0,11 (с, 3Н).
К раствору кислоты 4 (2,12 г, 5,46 ммоль) и диизопропилэтиламина (2,9 мл, 16,4 ммоль) в 7 мл ДМФА, охлажденному до 0°С, добавляют по каплям хлорангидрид дифенилфосфиновой кислоты (1,1 мл, 6,01 ммоль). После 5 мин перемешивания при 0°С и 30 мин при комнатной температуре добавляют по каплям соль ТЕЛ 3(3-хлор-4-метоксифенил)-О-аланин-2,2,2-трихлорэтилового эфира 5 в 7 мл ДМФА. Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, выливают в 100 мл воды и промывают диэтиловым эфиром (3х50 мл). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют через целит и концентрируют в вакууме. Очистка колоночной хроматографией (силикагель, 10-30% ЕЮАс в гексане) дает 2,86 г (72%) амида 6 в виде белой пены.
[α]20ο +44,8° (с 1,0, МеОН);
Ή ЯМР (300 МГц, СЛС13) δ 7,25 (с, 1Н),
7,22 (с, 1Н), 7,1-6,83 (м, 5Н), 6,6-6,55 (д, 1Н, 1=15,7 Гц), 6,11-6, 03 (дд, 1Н, 1=15,6, 8,1 Гц),
5,9-5,8 (м, 2Н), 5,18-5,05 (м, 1Н), 4, 83-4,75 (к, 2Н, 1=12,0 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,83-3,68 (м, 1Н), 3,3-
3,1 (м, 2Н), 2,6-2,36 (м, 3Н), 2,36 (с, 3Н), 2,32 (с, 3Н), 1,16-1,14 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,95 (с, 9Н), 0,11 (с, 3Н), 0,05 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СЛС13) δ 170,0, 165,1,
154.2, 143,1, 136,4, 135,3, 133,0, 132,0, 131,0,
130,9, 130,0, 128,4, 128,3, 127,7, 126,1, 124,6,
112.3, 112,1, 94,2, 75,0, 74,7, 56,0, 52,9, 42,8,
37,5, 36,5, 25,8, 20,9, 19,3, 18,0, 16,4, -4,3, -4,7;
ИК (СНС13) 3428, 2957, 2930, 2857, 1759,
1676, 1645, 1606, 1503, 1464, 1442, 1380, 1349,
1281, 1259, 1173, 1067 см-1
С использованием описанной выше процедуры из 2,5 г альдегида 2 и 5,0 г 3-метилбензилтрифенилфосфонийхлорида получают сложный эфир (2,1 г) с выходом 65%.
[α]20 ο +45,55° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СЛС13) δ 7,22-6,88 (м, 5Н), 6,37-6,31 (д, 1Н, 1=16,0 Гц), 6,18-6,10 (дд, 1Н, 1=16,0, 8,0 Гц), 5,86-5,81 (д, 1Н, 1=15,5 Гц),
3,8-3,7 (м, 4Н) , 2,5-2,3 (м, 6Н), 1,11-1, 08 (д, 3Н, 1= 6,9Гц), 0,91 (с, 9Н), 0,061 (с, 3Н), 0,052 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СЛС13) δ 166,7, 146,4,
137,5, 135,9, 131,6, 130,4, 128,3, 127,7, 126,7,
123,1, 122,8, 75,0, 51,3, 42,7, 37,4, 33,8, 25,8,
21,9, 21,3, 18,0, 16,0, -4,5, -4,6;
ИК (СНС13) 2953, 2931, 2859, 1718, 1658, 1604, 1472, 1454, 1438, 1258 см’1.
С использованием описанной выше процедуры из 2,0 г сложного эфира получают кислоту (1,93 г) с выходом 100%.
1Н ЯМР (300 МГц, СЛС13) δ 7,22-7,0 (м, 5Н), 6,38-6,33 (д, 1Н, 1=16,0 Гц), 6,18-6,10 (дд, 1Н, 1=16,0, 8,0 Гц), 5,87-5,82 (д, 1Н, 1=15,7 Гц),
3,8-3,7 (м, 1Н), 2,5-2,35 (м, 3Н), 2,34 (с, 3Н),
1,12-1,09 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,9 (с, 9Н), 0,068 (с, 3Н), 0,061 (с, 3Н).
С использованием описанной выше процедуры из 1,93 г кислоты получают амид (2,9 г) с выходом 72%.
1Н ЯМР (300 МГц, СЛС13) δ 7,22-7,1 (м, 4Н), 7,1-7,0 (м, 2Н), 6,9-6,8 (м, 2Н), 6,36-6,30 (д, 1Н, 1=16,0 Гц), 6,19-6,11 (дд, 1Н, 1=16,0, 8,0 Гц), 5,82-5,77 (м, 2Н), 5,1-5,0 (м, 1Н), 4,78-4,71 (к, 2Н, 1=12,0 Гц), 3,86 (с, 3Н), 3,8-3,7 (м, 1Н), 3,25-
3,15 (м, 2Н), 2,5-2,3 (м, 6Н), 1,1-1,08 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,88 (с, 9Н), 0,056 (с, 3Н), 0,044 (с, 3Н).
С использованием описанной выше процедуры из 2,4 г исходного амида получают спирт (2,0 г) с выходом 100%.
1Н ЯМР (300 МГц, СЛСЬ) δ 7,25-6,8 (м, 8Н), 6,46-6,41 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,16-6,07 (дд, 1Н, 1=16,0, 8,8 Гц), 5,95-5,8 (м, 2Н), 5,1-5,0 (м, 1Н), 4,81-4,7 (к, 2Н, 1=12,0 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,7-
3,6 (м, 1Н), 3,22-3,05 (м, 2Н), 2,5-2,34 (м, 3Н),
2,34 (с, 3Н), 1,8-1,7 (ушс, 1Н), 1,15-1,13 (д, 3Н, 1=6,8 Гц).
С использованием описанной выше процедуры из 2,0 г исходного спирта получают основное вещество (2,3 г) с выходом 76%.
[α]20 ο +31,6° (с 1,08, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,2-7,0 (м, 6Н), 6, 84-6, 81 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,80-6,73 (м, 1Н),
6,53-6,50 (ушд, 1Н, 1=7,3 Гц), 6,4-6,35 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,03-5,95 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,5 Гц), 5,9-
5,85 (д, 1Н, 1=15,7 Гц), 5,42-5,35 (ушт, 1Н, 1=6,38 Гц), 5,1-4,82 (м, 3Н), 4,8-4,67 (к, 2Н, 1=12,0 Гц), 3,85 (с, 3Н), 3,28-3,26 (д, 2Н, 1=6,46 Гц), 3,23-3,16 (дд, 1Н, 1=14,3, 5,8 Гц), 3,1-3,03 (дд, 1Н, 1=14,2, 6,7 Гц), 2,7-2,4 (м, 3Н), 2,33 (с, 3Н), 1,8-1,5 (м, 3Н), 1,43(с, 9Н), 1,2 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,12-1,1 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,88-0, 86 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 0,84-0,82 (д, 3Н, 1=6, 4 Гц);
13С ЯМР (75 МГц, С1)С1;) δ 170,6, 170,0,
165.2, 154,0, 139,2, 138,0, 136,7, 135,8, 131,8,
131.1, 129,7, 128,8, 128,4, 128,2, 126,8, 125,3,
123.3, 122,23, 112,1, 94,2, 78,9, 74,5, 71,3, 56,0,
53.1, 48,6, 43,9, 41,0, 39,4, 36,5, 33,3, 28,3, 24,7,
22,9, 22,7, 22,3, 21,3, 21,2, 16,5;
ИК (СНС13) 3426, 3383, 2967, 2935, 2874, 2841, 1727, 1710, 1680, 1646, 1605, 1504, 1368, 1280, 1259, 1169, 1151 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 2,2 г исходного карбамата получают стирол (0,86 г) с выходом 54%.
[α]20ο +33,1° (с 1,03, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СБСУ δ 7,24-7,0 (м, 7Н), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-6,70 (м, 1Н), 6,39-6,34 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,03-5,95 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,7 Гц), 5,78-5,73 (д, 1Н, 1=15,2 Гц),
5,67-5,64 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,1-5,0 (м, 1Н), 4,87-
4,83 (дд, 1Н, 1=10,2, 3,5 Гц), 4,8-4,7 (м, 1Н), 3,9 (с, 3Н), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,6-2,3 (м, 3Н), 2,32 (с, 3Н), 1,75-1,25 (м, 3Н), 1,22(с, 3Н), 1,15(с, 3Н), 1,13-1,11 (д, 3Н, 1=6, 8 Гц), 0,75-0,72 (т, 6Н, 1=5,7 Гц);
13С ЯМР (75 МГц, С1)С1;) δ 177,9, 170,5,
170.3, 165,1, 154,0, 142,1, 138,0, 136,6, 135,6, 131,8, 130,8, 129,9, 129,6, 128,4, 128,22, 128,17,
126,7, 124,5, 123,3, 122,5, 112,3, 71,4, 56,1, 54,3,
46.4, 42,7, 42,2, 39,4, 36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,6,
22.5, 21,2, 21,1, 17,2;
ИК (СНС13) 3424, 3021, 3017, 2965, 1747, 1711, 1680, 1652, 1528, 1503, 1485, 1259, 1151, 1067 см'1.
Элемент. анализ: для С37Н47СШ2О7; вычислено: С 66,60; Н 7,10; N 4,20; найдено: С 66,79; Н 7,03; N 4,25.
С использованием описанной выше процедуры из 0,667 г исходного стирола получают целевой β-эпоксид (0,20 г) с выходом 29%.
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,3-7,0 (м, 7Н), 6,90-6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,87-6,75 (м, 1Н),
5,79-5,74 (д, 1Н, 1=14,8 Гц), 5,54-5,51 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,28-5,22 (м, 1Н), 4,89-4,85 (дд, 1Н, 1=
10,4, 3,5 Гц), 4,82-4,75 (м, 1Н), 3,92 (с, 3Н), 3,69-
3,68 (д, 1Н, 1= 1,63 Гц), 3,51-3,44 (дд, 1Н, 1=13,4,
8.6 Гц), 3,2-3,1 (м, 2Н), 2,98-2,95 (дд, 1Н, 1=7,6,
1.6 Гц), 2,65-2,32 (м, 3Н), 2,32 (с, 3Н), 1,85-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,25 (м, 1Н), 1,27 (с, 3Н), 1,21 (с,
3Н), 1,21-1,18 (д, 3Н, 1=7,5 Гц), 0,90-0,86 (т, 6Н, 1=6,13 Гц).
К раствору β-эпоксида (0,1 г, 0,147 ммоль) в 5,0 мл СНС13 при -60°С добавляют хлортриметилсилан (0,093 мл, 0,74 ммоль). Раствор перемешивают при -60°С в течение 30 мин, а затем в течение 1,5 ч при комнатной температуре, прежде чем концентрировать его в вакууме. Получающийся в результате остаток, содержащий смесь (50:50) син- и антихлоргидринов, очищают посредством ВЭЖХ с обращенной фазой и получают 0,028 г (27%) нужного транс-изомера.
1Н ЯМР (300 МГц, С1)СЬ) δ 7,28-7,2 (м, 5Н), 7,13-7,1 (дд, 1Н, 1=8,32, 1,95 Гц), 6,91-6,88 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,88-6,78 (м, 1Н), 5,86-5,81 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,73-5,71 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,24-
5,17 (т, 1Н, 1=9,4 Гц), 5,0-4,96 (дд, 1Н, 1=9,58,
2,93 Гц), 4,81-4,74 (м, 1Н), 4,67-4,64 (д, 1Н, 1=9,73 Гц), 4,06-4,03 (дд, 1Н, 1= 9,6, 1,1 Гц), 3,92 (с, 3Н), 3,47-3,39 (дл, 1Н, 1=13,2, 8,3 Гц), 3,243,0 (м, 3Н), 2,8-2,4 (м, 2Н), 2,4 (с, 3Н), 1,9-1,4 (м, 4Н), 1,28 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,09-1,07 (д, 3Н, 1=6,95 Гц), 0,98-0,96 (д, 6Н, 1=6,4 Гц).
С использованием описанной выше процедуры из 3,39 г альдегида 2 и 7,7 г 4метоксибензилтрифенилфосфонийхлорида получают сложный эфир (2,75 г) с выходом 54%.
[α]20 ο +71,85° (с 1,03, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, С1)СЬ) δ 7,25-7,21 (м, 2Н, 1=9,0 Гц), 7,0-6,85 (м, 1Н), 6,81-6,78 (д, 2Н, 1=8,5 Гц), 6,30-6,23 (д, 1Н, 1=16,3 Гц), 6,0-5,9 (дд, 1Н, 1=16,3, 8,2 Гц), 5,81-5,75 (д, 1Н, 1=14,26 Гц), 3,75 (с, 3Н), 3,67 (с, 4Н), 2,42-2,22 (м, 3Н), 1,05-1,02 (д, 3Н, 1= 6,8 Гц), 0,86 (с, 9Н), 0,005 (с, 3Н), -0, 001 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СОСР) δ 166,7, 158,8,
146,4, 130,4, 129,7, 127,0, 122,7, 113,8, 75,0, 55,2,
51,3, 42,7, 37,4, 25,8, 18,0, 16,1, -4,5, -4,6;
ИК (СНС13) 3010, 2955, 2930, 2398, 2857,
1718, 1658, 1607, 1511 см’1.
С использованием описанной выше процедуры из 1,7 г сложного эфира получают кислоту (1,58 г) с выходом 96%.
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,3-7,27 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,13-7,03 (м, 1Н), 6,86-6,83 (д, 2Н, 1=8,6 Гц), 6,35-6,29 (д, 1Н, 1=16,0 Гц), 6,04-5,96 (дд, 1Н, 1=15,9, 8,0 Гц), 5,87-5,81 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 3,8 (с, 3Н), 3,79-3,7 (м, 1Н), 2,5-2,33 (м, 3Н), 1,1-1,08 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,9 (с, 9Н), 0,058 (с, 3Н), 0,055 (с, 3Н).
С использованием описанной выше процедуры из 1,58 г кислоты получают амид (2,09 г) с выходом 70%.
[α]20 ο +2,0° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СЭСЙ) δ 7,28-7,26 (д, 2Н, 1=7,33 Гц), 7,18-7,17 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,047,0 (дд,1Н, 1=8,5, 1,8 Гц), 6,90-6,79 (м, 3Н), 6,326,27 (д, 1Н, 1=16,0 Гц), 6,05-5,97 (дд, 1Н, 1=16,0,
8,1 Гц), 5,83-5,76 (м, 3Н), 5,09-5,05 (м, 1Н), 4,82-
4,7 (к, 2Н, 1=11,9 Гц), 3,86 (с, 3Н), 3,8 (с, 3Н),
3,77-3,7 (м, 1Н), 3,24-3,17 (дд, 1Н, 1=14,2, 5,7 Гц), 3,13-3,07 (дд, 1Н, 1=14,2, 5,94 Гц), 2,5-2,3 (м, 3Н), 1,09-1,06 (д, 3Н, 1=6, 8 Гц), 0,89 (с, 9Н), 0,048 (с, 3Н), 0,038 (с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СПС13) δ 169,9, 165,1,
158.7, 154,2, 143,0, 135,5, 131,0, 130,4, 129,6,
128.4, 127,0, 124,6, 122,5, 113,8, 112,1, 94,2, 75,0,
74.7, 56,0, 55,2, 52,9, 42,5, 37,4, 36,4, 25,8, 18,0,
16.4, -4,4, -4,7;
ИК (СНС13) 2957, 2931, 2857, 1757, 1676, 1644, 1607, 1511, 1503 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 1,63 г исходного амида получают спирт (1,35 г) с выходом 98%.
[α]20 ο +55,7° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СИСЙ) δ 7,31-7,29 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,18 (с, 1Н), 7,05-7,02 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 7,0-6,87 (м, 1Н), 6,86-6,83 (д, 3Н, 1=8,2 Гц),
6,44-6,38 (д, 1Н, 1=15, 8 Гц), 6,0-5,82 (м, 3н),
5,10-5,0 (м, 1Н), 4,81-4,7 (к, 2Н, 1=11,8 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,67-3,6 (м, 1Н), 3,24-3,19 (дд, 1Н, 3=14,1, 6,1 Гц), 3,12-3,07 (дд, 1Н, 3=14,4,
5,9 Гц), 2,5-2,25 (м, 3Н), 1,8-1,6 (ушс, 1Н), 1,14-
1,12 (д, 3Н, 3=6,6 Гц).
13С ЯМР (75 МГц, СИСЬ) δ 170,1, 165,2, 159,0, 154,2, 142,5, 131,2, 131,0, 129,8, 128,7,
128.4, 127,2, 125,0, 122,4, 113,9, 112,2, 94,2, 74,7,
73.8, 56,05, 55,2, 53,0, 43,2, 37,1, 36,4, 16,8.
ИК (СНС13) 3428, 2964, 2936, 2912, 2874, 2840, 1758, 1677, 1645, 1607, 1512, 1503, 1258, 1175 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 1,26 г исходного спирта получают основное вещество (1,69 г) с выходом 89%.
[α]20 ο +35,2° (с 1,02, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,26-7,23 (д, 21Н, 3=8,0 Гц), 7,18-7,17 (д, 1Н, 3=1,7), 7,07-7,03 (дд, 1Н, 3=8,4, 1,6 Гц), 6,85-6,7 (м, 4Н), 6,53-6,5 (д, 1Н, 3=7,9 Гц), 6,36-6,31 (д, 1Н, 3=15,8 Гц),
5,9-5,81 (м, 2Н), 5,42-5,35 (т, 1Н), 5,1-4,95 (м, 2Н), 4,94-4,90 (дд, 1Н, 3=9,6, 3,4 Гц), 4,81-4,67 (к, 2Н, 3=11,9 Гц), 3,85 (с, 3Н), 3,79 (с, 3Н), 3,28-
3,26 (д, 2Н, 3=6,5 Гц), 3,23-3,16 (дд, 1Н, 3=14,3,
5,8 Гц), 3,09-3,02 (дд, 1Н, 3=14,1, 6,7 Гц), 2,61-
2,4 (м, 3Н), 1,8-1,5 (м, 3Н), 1,43 (с, 9Н), 1,20 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,11-1,09 (д, 3Н, 3=6,7 Гц), 0,87-0,85 (д, 3Н, 3=6,4 Гц), 0,84-0,82 (д, 3Н, 3=6,6 Гц);
13С ЯМР (75 МГц, СИС13) δ 174,9, 170,6,
169,9, 165,3, 159,0 154,0, 139,3, 135,4, 131,1, 131,0, 129,6, 128,8, 128,4, 127,8 127,2, 125,2,
122,2, 113,9, 112,2, 94,3, 74,5, 71,3, 56,0, 55,2,
53,1, 48,6, 43,9, 41,0, 39,4, 36,5, 28,3, 24,7, 22,9,
22,7, 22,3, 21,4, 16,6;
ИК (СНС13) 3426, 3383, 2965, 2936, 2874, 2840, 1728, 1711, 1680, 1646, 1607, 1512, 1465, 1367, 1254, 1175, 1067 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 1,43 г исходного карбамата получают стирол (0,676 г) с выходом 65%.
1Н ЯМР (300 МГц, СИСЙ) δ 7,26-7,23 (д, 3Н, 3=8,4 Гц), 7,20-7,19 (д, 1Н, 3=1,8 Гц), 7,077,03 (дд, 1Н, 3=8,4, 1,9 Гц), 6,84-6,81 (д, 3Н, 3=8,5 Гц), 6,8-6,7 (м, 1Н), 6,36-6,31 (д, 1Н, 3=15,8 Гц), 5,89-5,81 (дд, 1Н, 3=15,8, 8,8 Гц), 5,78-5,73 (д, 1Н, 3=13,7 Гц), 5,68-5,66 (д, 1Н, 3=7,9 Гц), 5,05-4,99 (ддд, 1Н, 3=10,6, 6,6, 1,6 Гц), 4,87-4,82 (дд, 1Н, 3=9,7, 3,1 Гц), 4,78-4,7 (м, 1Н) , 3,86 (с, 3Н), 3,79 (с, 3Н), 3,45-3,37 (дд, 1Н, 3=13,4, 8,6 Гц), 3,15-3,0 (м, 3Н), 2,6-2,25 (м, 3Н), 1,7-1,3 (м, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,12-1,1 (д, 3Н, 3=6,8 Гц), 0,76-0,75 (д, 3Н, 3=2,9 Гц), 0,74-0,73 (д, 3Н, 3=2,8 Гц).
К охлажденному до 0°С раствору третбутилата калия (1,17 г, 10,5 ммоль) в 120 мл ТГФ небольшими порциями в течение 30 мин добавляют п-нитробензилтрифенилфосфонийбромид (5,0 г, 10,5 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч. К предварительно полученному илиду добавляют по каплям альдегид 2 в 20 мл ТГФ. Смесь перемешивают при 0°С в течение 15 мин, затем постепенно нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Добавляют насыщенный водный раствор \11,(С1 (50 мл) и раствор экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой стирол в виде смеси изомеров Ε:Ζ очищают на силикагеле с использованием 2% ЕЮАс в гексане и получают 0,5 г Ζ-изомера и 1,1 г Е-изомера (42%) в виде желтого масла.
[α]20 ο +63,81° (с 1,05, МеОН);
Ή ЯМР (300 МГц, СИСЙ) δ 8,18-8,15 (д,
2Н, 3=8,6 Гц), 7,47-7,44 (м, 2Н, 3=8,7 Гц), 7,06,85 (м, 1Н), 6,5-6,3 (м, 2Н), 5,87-5,82 (д, 1Н,
3=15,6 Гц), 3,8-3,73 (м, 1Н), 3,73 (с, 3Н), 2,5573
2,35 (м, 3Н), 1,13-1,11 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,90 (с, 9Н), 0,059 (с, 3Н), 0,047 (с, 3Н);
13С ЯМР (75 МГц, СВС13) δ 166,5, 145,5,
143.9, 137,3, 128,7, 126,4, 123,9, 123,1, 74,6, 51,3,
42,8, 37,8, 33,8, 25,7, 24,3, 21,9, 18,0, 16,3, -4,4, -4,7;
ИК (СНС13) 2953, 2931, 2859, 1719, 1658, 1596, 1518, 1472, 1438, 1345, 1259, 1110 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 2,55 г кислоты получают амид (3,06 г) с выходом 65%.
[α]20 ο +70,67° (с 1,05, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 8,15-8,12 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,45-7,42 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,17-
7,16 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,04-7,01 (дд, 1Н, 1=8,45,
1,9 Гц), 6,88-6,82 (м, 2Н), 6,43-6,3 (м, 2Н), 5,93-
5,91 (д, 1Н, 1=7,5 Гц), 5,84-5,79 (д, 1Н, 1=15,3 Гц), 5,1-5,0 (м, 1Н), 4,82-4,69 (к, 2Н, 1=11, 9 Гц),
3,85 (с, 3Н), 3,8-3,7 (м, 1Н), 3,24-3,18 (дд, 1Н, 1=14,3, 5,7 Гц), 3,13-3,06 (дд, 1Н, 1=14,2, 6,05 Гц), 2,52-2,3 (м, 3Н), 1,11-1,09 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,88 (с, 9Н), 0,041 (с, 3Н), 0,032 (с, 3Н).
13Н ЯМР (75 МГц, СБС13) δ 170,0, 165,0,
154,2, 146,5, 144,0, 142,2, 137,4, 136,0, 131,0,
128.7, 128,4, 126,4, 124,9, 123,9, 122,5, 112,1,
94,1, 74,72, 74,67, 56,0, 52,9, 42,7, 37,8, 36,4,
25.7, 18,0, 16,5, -4,7, -4,3;
ИК (СНС1э) 3429, 2957, 2931, 2858, 1757, 1677, 1645, 1597, 1517, 1503, 1345, 1259, 1180, 1110, 1067, 1026 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 2,54 г исходного спирта получают основное вещество (3,3 г) с выходом 87%.
[α]20 ο +38,2° (с 1,07, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС^) δ 8,23-8,2 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,52-7,49 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,21 (с, 1Н), 7,12-7,08 (дд, 1Н, 1=8,2, 1,8 Гц), 6,89-6,86 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,86-6,75 (м, 1Н), 6,6-6,58 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 6,55-6,5 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,31-
6,23 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,5 Гц), 5,97-5,92 (д, 1Н, 1=15, 5 Гц), 5,4-5,3 (ушт, 1Н), 5,2-5,0 (м, 2Н),
4,98-4,94 (дд, 1Н, 1=9,5, 3,6 Гц), 4,86-4,72 (к, 2Н, 1=12 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,33-3,3 (д, 1Н, 1=6,6 Гц), 3,27-3,22 (дд,1Н, 1=14,1, 5,7 Гц), 3,14-3,07 (дд,1Н, 1=14,0, 6,7 Гц), 2,8-2,5 (м, 3Н), 2,9-1,47 (м, 3Н), 1,47 (с, 9Н), 1,3-1,2 (м, 9Н), 0,91-0,89 (д, 3Н, 1=6,4 Гц), 0,87-0,85 (д, 3Н, 1=6,4 Гц);
13С ЯМР (75 МГц, СБСУ δ 176,8, 170,6,
169.9, 165,1, 156,2, 154,0, 146,8, 143,2, 138,8,
135,8, 135,4, 131,1, 129,7, 128,7, 128,4, 126,7
126,6, 125,5, 123,9, 122,2, 112,1, 94,2, 79,0, 76,2,
74,5, 71,2, 56,0, 53,1, 48,5, 43,9, 41,2, 39,4, 36,5,
33,3, 28,3, 24,7, 22,9, 22,7, 22,3, 21,4, 16,3;
ИК (СНС1э) 3426, 3385, 2967, 2936, 2874, 2841, 1712, 1681, 1646, 1597, 1519, 1500, 1345, 1280, 1259, 1170, 1150, 1067, 1024 см-1.
С использованием описанной выше процедуры из 1,77 г исходного карбамата получают стирол (0,55 г) с выходом 42%.
1Н ЯМР (300 МГц, СБС^) δ 8,23-8,21 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,52-7,49 (д, 2Н, 1=8,7 Гц), 7,24-
7,2 (м, 2Н), 7,11-7,08 (дд, 1Н, 1=8,5, 1,92 Гц),
6,89-6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,86-6,72 (м, 1Н),
6,56-6,51 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,33-6,25 (дд, 1Н, 1=15,9, 8,7 Гц), 5,94-5,91 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,83-
5,78 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,17-5,12 (м, 1н), 4,92-
4,88 (дд, 1Н, 1=9,7, 3,6 Гц), 4,8-4,75 (м,1Н), 3,92 (с, 3Н), 3,5-3,43 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,73 Гц), 3,2-3,1 (м, 3Н), 2,7-2,35 (м, 3Н), 1,8-1,6 (м, 2Н), 1,4-1,9 (м, 1Н), 1,2 (с, 3Н), 1,16-1,14 (д, 6Н), 0,82-0,81 (д, 3Н, 1=3,73 Гц), 0,80-0,79 (д, 3Н, 1=3,87 Гц).
Пример 34.
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 8,5 (с, 1Н),
7,76-7,74 (д, 2Н, 1=7,4 Гц), 7,58-7,56 (д, 2Н, 1=7,4 Гц), 7,5-7,1 (м, 8Н), 7,03-7,0 (д, 1Н, 1=8,2 Гц),
6,81-6,78 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,78-6,65 (м, 1н),
6,37-6,34 (д, 1Н, 1=7,3 Гц), 5,84-5,81 (т, 1Н, 1=5,2 Гц), 5,69-5,64 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,18-5,15 (ушд, 1Н, 1=9,0 Гц), 4,83-4,6 (м, 2Н), 4,46-4,43 (д, 2Н, 1=6,7 Гц), 4,24-4,19 (т, 1Н, 1=6,6 Гц), 3,99 (ушс, 2Н), 3,81 (с, 3Н), 3,61 (с, 1Н), 3,46-3,39 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,8 Гц), 3,2-2,8 (м, 5Н), 2,6-2,3 (м, 3Н),
1,8-1,3 (м, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н), 1,12-1,1 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,86-0,81 (т, 6Н, 1= 7,3 Гц).
1Н ЯМР (300 МГц, С'ОСЦ) δ 9,5 (ушс, 2Н),
7,6-7,57 (д, 2Н, 1= 8,1 Гц), 7,24-7,18 (м, 5н), 7,05-7,03 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 6,84-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-6,65 (м,1Н), 6,02-6,0 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 5,72-5,67 (д,1Н, 1=15,3 Гц), 5,19-5,16 (ушд, 1Н, 1=10, 5 Гц), 4,9-4,6 (м, 2Н), 3,85 (с, 3Н), 3,64 (с, 1Н), 3,55-3,4 (м, 3Н), 3,2-2,95 (м, 3Н), 2,90-2,88 (д, 1Н, 1=7,11 Гц), 2,6-2,3 (м, 3Н), 2,0-1,3 (м, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,13-1,11 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,90-0,84 (т, 6Н, 1=7,2 Гц).
Схема 2
Пример 36. По схеме 2.
К алкену 17 (0,3 г, 0,50 ммоль) в 9,0 мл СН2С12 с 1,0 мл МеОН при -78°С добавляют 2пиколин (0,07 мл, 0,074 ммоль). Этот раствор подвергают действию 1,2 эквивалента озона и получающийся в результате озонид заливают диметилсульфидом (1,1 мл, 2,2 ммоль). Смесь постепенно нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Раствор промывают водой (2х20 мл), сушат над \а28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают 0,251 г (87%) альдегида 18.
1Н ЯМР (300 МГц, С'ОСк) δ 9,64-9,63 (д, 1Н, 1=1,05 Гц), 7,25-7,2 (м, 2Н), 7,08-7,05 (д, 1Н, 1=8,2 Гц), 6,86-6,83 (д, 1Н, 1= 8,4 Гц), 6,83-6,7 (м, 1Н), 5,81-5,76 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,75-5,65 (ушс, 1Н), 5,38-5,3 (м, 1Н), 4,85-4,81 (дд, 1Н, 1=10,2, 3,2 Гц), 4,80-4,7 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н),
3,46-3,39 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,7 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н),
2,7-2,4 (м, 3Н), 1,8-1,6 (м, 2Н), 1,4-1,3 (м, 1Н),
1,23 (с, 3Н), 1,18-1,16 (д, 6Н), 0,94-0,92 (д, 3Н, 1=6,5 Гц), 0,88-0,86 (д, 33Н, 1=6,4 Гц).
Схема 3
Схема 4
Схема 4 (продолжение)
Схема 5 (продолжение)
Схема 5
Схема 6
Схема 7
1) Оз, Судан красный
Τ^ΗΡΗΦΙΗ,ΟΗ^ онс' (88%)
С1,СЛ
Схема 7 (продолжение)
—
Пример 37. По схеме 3.
К раствору криптофицина 53 (0,15 г, 0,23 ммоль) в 3 мл БМЕ и 2,0 мл Н2О добавляют 5 капель концентрированной Н28О4. Смесь перемешивают в течение ночи и добавляют еще 5 капель Н28О4 и продолжают перемешивание еще в течение 24 ч. Добавляют постепенно насыщенный раствор №НСО3 до тех пор, пока реакция не прекратится совсем, и смесь экстрагируют СН2С12. Органический слой промывают рассолом, сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют. Получающийся в результате остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, 2% МеОН в СН2С12) и получают 0,13 г диолов. К смеси диолов в 4,0 мл ТГФ и 2,0 мл Н2О добавляют ЫаЮ4 (0,144 г, 0,675 ммоль). Получающуюся в результате смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь концентрируют в вакууме, добавляют 5 мл Н2О и экстрагируют СН2С12. Объединенные органические слои сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают 0,10 г (77%) альдегида 18.
К 4-гидроксиметилбензилтрифенилфосфонийхлориду с защитной Т1Р8-группой (0,23 г, 0,4 ммоль) в 3,0 мл ТГФ при -78°С добавляют по каплям 0,25 мл 1,6М раствора н-бутиллития.
Смесь постепенно нагревают до 0°С и перемешивают еще в течение 10 мин. К альдегиду 18 в 4,0 мл ТГФ при -78°С добавляют по каплям 2,5 мл 0,13М оранжевого раствора илида. Получающуюся в результате смесь перемешивают при -78°С в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют насыщенный раствор ЫН4С1 (20 мл) вместе с этилацетатом (10 мл), слои разделяют и органический слой промывают водой (3х10 мл) и рассолом. В завершение, после сутки над Мд8О4, органическую фазу фильтруют, концентрируют в вакууме и получающийся в результате остаток очищают с использованием колоночной хроматографии (силикагель, 70% ЕЮАс в гексане) и получают 0,09 г (62%) нужного стирола.
Пример 38.
К раствору криптофицина 53 (2,0 г, 2,99 ммоль) в 30 мл БМЕ добавляют 2М водный раствор перхлорной кислоты (15 мл, 30 ммоль) и получающуюся в результате смесь перемешивают в течение 6 ч. После осторожной нейтрализации насыщенным раствором №НСО3 (50 мл) смесь экстрагируют СН2С12 (4х1 00 мл) и объединенные органические слои сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка колоночной хроматографией (силикагель, 5% МеОН в СН2С12) дает диолы 19 (1,5 г) с выходом 72% в виде смеси анти- и син- 3:1.
К раствору диолов (1,0 г, 1,46 ммоль) в 20 мл ТГФ и 15 мл воды добавляют ЫаЮ4 (1,9 г, 8,9 ммоль) и смесь перемешивают в атмосфере азота в течение ночи. После удаления основной массы ТГФ при пониженном давлении остаток разбавляют водой (100 мл) и экстрагируют СН2С12 (4х50 мл). Объединенные органические экстракты промывают рассолом (1х25 мл), сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Оставшийся бензальдегид извлекают посредством растворения твердого вещества в 100 мл толуола и последующего удаления толуола при 40°С на роторном испарителе. Две дополнительные процедуры удаления толуола испарением дают альдегид 18 в виде желтой пены (0,828 г) с выходом 98%. Получающийся в результате альдегид используют без дополнительной очистки и хранят при -23°С из соображений устойчивости.
[α]20 ο +23,0° (с 0,565, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 9,64-9,63 (д, 1Н, 1=1, 4 Гц), 7,28-7,26 (м, 1Н), 7,21-7,20 (д, 2Н, 1=1,9 Гц), 7,08-7,05 (дд, 1Н, 1=7,1, 1,7 Гц), 6,876,84 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,82-6,72 (м, 1Н), 5,805,75 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,54-5,51 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 5,40-5,33 (м, 1Н), 4,85-4,81 (дд, 1Н, 1=9,7,
3,2 Гц), 4,78-4,71 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 3,46-3,39 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,6 Гц), 3,15-3,03 (м, 3Н), 2,6879
2,35 (м, 3Н), 1,82-1,63 (м, 2Н), 1,45-1,37 (м, 1Н),
1,24 (с, 3Н), 1,19-1,16 (д, 3Н, 1=7,1, Гц), 1,18 (с, 3Н), 0,94-0,92 (д, 3Н, 1=6, 5 Гц), 0,89-0,87 (д, 3Н, 1=6,5 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СВС13) δ 200,7, 177,8, 1 70,6, 1 70,1 , 1 65,1, 153,9, 1 41 ,1, 130,7, 129,8,
128,1, 124,9 122,3, 112,3, 73,4, 71,1, 56,0, 54,6,
49,9, 46,4, 42,7, 39,2, 36,1, 35,2, 24,7, 22,8, 22,7,
21,3, 10,7;
ИК (СНС13) 3422, 2964, 2936, 1755, 1730, 1718, 1678, 1529, 1504, 1487, 1474, 1464, 1442, 1320, 1303, 1281, 1259, 1244, 1185, 1151, 1127, 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С29Н39СШ2О6) С, Н, Ч.
Пример 39.
К 4-(триизопропилсилоксиметил)бензилтрифенилфосфонийбромиду (7,6 г, 12,2 ммоль) в 100 мл ТГФ при -50°С добавляют по каплям 8,0 мл 1,5М раствора н-бутиллития (8,1 мл, 12,2 ммоль) . Смесь постепенно нагревают до комнатной температуры и перемешивают еще 30 мин. К альдегиду 18 (2,95 г, 5,1 ммоль) в 100 мл ТГФ при -78°С добавляют по каплям красный раствор илида с помощью двойной иглы. Получающуюся в результате смесь перемешивают при -78°С в течение 3 ч и при комнатной температуре в течение 45 мин. Добавляют насыщенный раствор ЧН4С1 (100 мл) одновременно с этилацетатом (100 мл), слои разделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом (2х50 мл). Объединенные органические слои промывают водой (3х40 мл) и рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Получающийся в результате желтый остаток очищают с использованием колоночной хроматографии (силикагель, 10-20-50% ЕЮАс в гексане) и получают 3,6 г (84%) нужного стирола в виде белого твердого вещества как смесь изомеров Е и Ζ.
Смесь изомеров (7,3 г, 8,7 ммоль) растворяют в 240 мл бензола и кипятят с обратным холодильником в присутствии 1,1'-азобис(циклогексанкарбонитрила) (УА^О) (0,32 г, 0,87 ммоль) и тиофенола (3,7 мл, 4,0 ммоль). После 5 ч кипячения с обратным холодильником раствор концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией (силикагель, 5-50%
ЕЮАс в гексане) и получают 6,7 г (92%) Еизомера 20 в виде белого твердого вещества.
[α]20 ο +31,9° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,3-7,22 (м, 5Н), 7,20-7,19 (д, 1Н, 1=1,95 Гц), 7,07-7,04 (дд,1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,5 Гц),
6,8-6,7 (м, 1Н), 6,4-6,38 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,02-
5,94 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц), 5,77-5,72 (д, 1Н, 1=14,9 Гц), 5,56-5,54 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,1-4,7 (м, 5Н), 3,9 (с, 3Н), 3,45-3,37 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,5
Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,6-2,3 (м, 3Н), 1,7-1,5 (м, 2Н), 1,4-1,0 (м, 31Н), 0,75-0,71 (т, 6Н, 1=6,1 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИС13) δ 177,8, 170,5,
170.4, 165,2, 153,9, 142,1, 141,1, 135,2, 131,5,
130,8, 129,7, 129,6, 128,1, 125,9, 124,5, 122,4,
112.2, 77,0, 71,4, 64,7, 56,0, 54,4, 46,4, 42,7, 42,2,
39.4, 36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,6, 22,5, 21,2, 17,9,
17.2, 11,9;
ИК (СНС13) 3423, 2962, 2945, 2867, 1746, 1712, 1681, 1652, 1528, 1503, 1485, 1473, 1464, 1303, 1259 см-1.
Элементн. анализ: (С46Н67СШ2О881) С, Н, Ч.
Пример 40.
К охлажденному до 0°С раствору стирола 20 (1,25 г, 1,49 ммоль) в 20 мл СН2С12 добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,27 г, 1,59 ммоль). Раствор перемешивают в течение 1 ч при 0°С и в течение ночи при комнатной температуре. Раствор концентрируют в вакууме и получающиеся в результате эпоксиды разделяют с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой. Получают 0,67 β-эпоксида 22 (57%) в виде белого твердого вещества.
[α]20 ο +20,9° (с 0,765, СНСЩ;
1Н ЯМР (300 МГц, СИС13) δ 7,35-7,33 (д, 2Н, 1=7,8 Гц), 7,26-7,2 (м, 4Н), 7,05-7,02 (ушд, 1Н, 1=8,2 Гц), 6,84-6,81 (д, 1Н, 1=8, 4 Гц), 6,81-
6,65 (м, 1Н), 5,8-5,65 (м, 2Н), 5,25-5,15 (м, 1Н),
4,9-4,7 (м, 4Н), 3,9 (с, 3Н), 3,7 (с, 1Н), 3,46-3,42 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,8 Гц), 3,15-3,0 (м, 3Н), 2,93-2,9 (л, 2Н, 1=7,3 Гц), 2,6-2,4 (м, 2Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,0 (м, 31Н), 0,83-0,79 (т, 6Н, 1=5, 3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИСЕ) δ 177,7, 170,5,
170.4, 165,1, 153,9, 142,1, 141,6, 136,7, 135,1,
130.7, 129,8, 128,1, 125,9, 125,5, 124,6 122,3,
112.2, 75,9, 71,0, 64,6, 63,0, 58,9, 56,0, 54,6, 46,3,
42.7, 40,5, 39,2, 36,8, 35,2, 24,2, 22,8, 22,7, 22,6, 18,0, 13,4, 11,9;
ИК (СНС13) 3424, 2962, 2945, 2867, 1751, 1712, 1682, 1528, 1503, 1485, 1473, 1464 см-1.
Элементн. анализ: (С46Н67С1Ч2О981) С, Н, Ч.
Пример 41.
К охлажденному до 0°С раствору βэпоксида 22 (0,1 г, 0,117 ммоль) в 3,5 мл ТГФ добавляют по каплям тетрабутиламмонийфторид в виде 1 ,0М раствора в ТГФ (0,14 мл, 0,14 ммоль). Раствор нагревают до комнатной температуры и продолжают перемешивание еще в течение 20 мин, после чего добавляют воду (10 мл) и этилацетат (20 мл). Слои разделяют и водный слой экстрагируют СН2С12 (3х20 мл).
Объединенные органические слои сушат над безводным Ыа28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают свободный спирт. Очистка колоночной хроматографией (силикагель, 70-100% ЕЮАс в гексане) дает 0,068 г (84%) чистого спирта 23 в виде белого твердого вещества.
[α]20π +26,2° (с: 0,435, СНС13);
2Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,39-7,36 (д, 2Н, 1=7,8 Гц), 7,26-7,23 (д, 3Н, 1=9,1 Гц), 7,18 (с, 1Н), 7,05-7,02 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,2 Гц), 6,82-6,7 (м, 1Н), 5,72-5,67 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,55-5,52 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5, 22-5,17 (м, 1Н), 4,85-4,7 (м, 4Н), 3,9 (с, 3Н), 3,7 (с, 1Н),
3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 9,3 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,92-2,89 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 2,65-2,4 (м, 2Н), 1,8-
1,6 (м, 4Н), 1,4-1,2 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,16-1,13 (д, 3Н, 1=7,2 Гц), 0,86-0,82 (т, 6Н, 1=6,5 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,8, 171,0,
170,4, 165,5, 153,8, 141,5, 141,4, 135,7, 133,5,
130,6, 130,0, 128,0, 127,1, 125,6, 124,6, 122,2,
112,3, 77,2, 76,5, 76,0, 71,0, 64,2, 63,1, 58,8, 56,0,
54,7, 46,3, 42,7, 40,5, 39,3, 36,9, 35,1, 24,5, 22,7,
22,5, 22,1, 13,4;
ИК (СНС13) 3422, 2992, 2963, 2936, 2874, 1751, 1713, 1682, 1651, 1504, 1486, 1303, 1259, 1186, 1165, 1151, 1067 см’1.
М.-с. высшего разрешения, ЕАВ, [М+Н], вычислено для (С37Н48СШ2О9) 699,3048, найдено 699,3054.
К охлажденному до 0°С раствору спирта 23 (0,08 г, 0,114 Ммоль), Ы-(третбутоксикарбонил)глицина (0,034 г, 0,194 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (ΏΜΑΡ) (0,004 г, 0,034 ммоль) в 2,0 мл СН2С12 добавляют 1,3дициклогексилкарбодиимид (ОСС) (0,040 г, 0,194 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 10 мин и при комнатной температуре в течение 45 мин, фильтруют и концентрируют в вакууме. Получающийся в результате остаток очищают с использованием колоночной хроматографии (силикагель, 70-80% ЕЮАс в гексане) и получают 0,07 г (72%) сложного эфира в виде белого твердого вещества.
[α]20 ο +18,5° (с 0,65, СНС13);
2Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,4-7,2 (м, 6Н),
7,11-7,08 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,8 Гц), 6,9-6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,86-6,7 (м, 1Н), 5,78-5,73 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,64-5,62 (д, 1Н, 1=7,4 Гц), 5,3-5,22 (м, 1Н), 5,22 (с, 2Н), 5,1-5,0 (ушс, 1Н), 4,9-4,7 (м, 2Н), 4,0-3,99 (д, 2Н, 1=5,4 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,73-
3,72 (д, 1Н, 1=1,0 Гц), 3,5-3,43 (дд,1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,95-2,92 (д, 1Н, 1=6,4 Гц),
2,65-2,4 (м, 2Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,5 (с, 9Н), 1,45-
1,3 (м, 1Н), 1,26 (с, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,2-1,17 (д, 3Н, 1=8,7 Гц), 0,9-0,86 (т, 6Н, >6,ЗГц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,7, 170,6,
170,3, 170,2, 165,1, 155,6, 153,8, 141,4, 137,1,
135,6, 130,6, 129,9, 128,6, 128,0, 125,7, 124,7,
122.2, 112,2, 79,9, 75,8, 70,9, 66,4, 63,1, 58,5, 56,0, 54,7, 48,9, 46,3, 42,7, 42,4, 40,5, 39,3, 36,8,
35.2, 28,2, 24,5, 22,8, 22,7, 22,6, 21,2, 13,5;
Элементн. анализ: (С44Н58СШ3О12) С, Н, N. Пример 43.
К охлажденному до -60°С раствору βэпоксида 24 (0,16 г, 0,187 ммоль) в 5,0 мл СНС13 добавляют триметилсилилхлорид (0,09 мл, 0,75 ммоль). После 2 ч перемешивания при температуре от -60°С до -40°С добавляют еще 0,09 мл ТМ8С1 и перемешивание продолжают еще в течение 3 ч. Раствор нагревают до комнатной температуры, концентрируют и очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (55:45, СН3СЫ:Н2О), чтобы разделить два получающихся в результате хлоргидрина. Такая очистка дает 0,058 г (38%) нужного хлоргидрина 25.
[α]20 ο +50,5° (с 1,075, СНС13);
2Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,42-7,2 (м, 6Н), 7,13-7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,8 Гц), 6,9-6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,85-6,7 (м, 1Н), 5,9-5,8 (м, 2Н),
5,2 (с, 3Н), 5,15-5,05 (м, 1Н), 5,0-4,9 (м, 1Н), 4,8-
4,72 (м, 1Н), 4,71-4,68 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,074,03 (д, 1Н, 1=9, 3 Гц), 3,99-3,97 (д, 2Н, 1=5,5 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,44-3,37 (дд, 1Н, 1=13,6, 8,3 Гц), 3,23-3,14 (м, 2Н), 3,8-3,0 (дд, 1Н, 1=14,5, 8,0 Гц), 2,75-2,4 (м, 3Н), 2,0-1,7 (м, 3Н), 1,5 (с, 10Н), 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,08-1,06 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,977-0,963 (д, 3Н, 1=4,0 Гц), 0,956-0,942 (д, 3Н, 1=4,1 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,5, 170,5,
170.2, 170,1, 165,3, 153,9, 142,2, 139,0, 138,3,
136.1, 130,8, 129,9, 128,7, 128,2, 128,1, 124,5,
122.3, 112,2, 80,0, 76,1, 73,9, 71,1, 66,2, 61,7,
56.1, 54,6, 46,4, 42,7, 42,3, 39,6, 38,4, 36,3, 35,1,
28.2, 24,8, 23,0, 22,9, 22,7, 21,5, 8,6;
ИК (СНС13) 3428, 3009, 2966, 2935, 1750, 1714, 1683, 1504, 1486, 1369, 1259, 1193, 1162, 1127, 1067 см-1.
М.-с. высшего разрешения, ЕАВ, [М+Н], вычислено для (С44Н60СШ3О12) 892,3554, найдено 892,3565.
К раствору глицината 25 (0,058 г, 0,065 ммоль) в 0,2 мл СН2С12 добавляют 4М раствор хлористого водорода в 1 ,4-диоксане (0,08 мл,
0,33 ммоль). Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, концентрируют в вакууме и оставляют в вакууме на 3 суток для удаления 1,4диоксана, причем таким образом получают нужный гидрохлорид 26 с количественным выходом.
[α]20π +26,2° (с 0,58, МеОН);
'Н ЯМР (500 МГц, СВ3ОВ) δ 7,48-7,42 (к, 4Н, 1=11,2 Гц), 7,31-7,3 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,21-
7,19 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,0 Гц), 7,01-7,0 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,8-6,7 (м, 1Н), 6,0-5,95 (дд, 1Н, 1= 15,2, 1,5 Гц), 5,3 (д, 2Н, 1=1,3 Гц), 5,16-5,1 (м, 1Н), 5,095,07 (дд,1Н, 1=10,0, 3,6 Гц), 4,84-4,82 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,54-4,51 (дд, 1Н, 1=11,3, 3,7 Гц), 4,054,03 (дд, 1Н, 1=9,5, 1,8 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,86 (с, 3Н), 3,5-3,47 (д, 1Н, 1=13,5 Гц), 3,22-3,18 (дд, 1Н, 1=14,5, 3,6 Гц), 3,14-3,11 (д, 1Н) 1=13,5 Гц),
2,8-2,77 (д, 1Н, 1=14,4 Гц), 2,78-2,75 (м, 2н), 2,55-2,35 (м, 2Н), 1,9-1,55 (м, 4Н), 1,4-1,3 (м, 1Н), 1,24 (с, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,04-1,03 (д, 3Н, 1= 7,0 Гц), 1,02-1,0 (т, 6Н, 1=7,2 Гц);
13С ЯМР (75 МГц, СБС13) δ 178,9, 173,8,
171,9, 168,3, 155,3, 144,2, 141,8, 136,7, 132,3,
131,5, 129,75, 129,7, 129,4, 125,2, 123,3, 113,5,
77,2, 74,7, 72,6, 68,5, 63,5, 57,6, 56,7, 47,6, 44,1,
41,1, 40,4, 37,9, 36,5, 26,3, 23,6, 23,5, 22,2, 9,0;
ИК (КВг) 3412, 2961, 2935, 1752, 1722, 1669, 1504, 1473, 1279, 1259, 1207, 1151, 1126, 1065 см-1.
Пример 45.
К хлоргидрину 25 (0,14 г, 0,16 ммоль), Ν(трет-бутокси-карбонил) глицину (0,041 г, 0,24 ммоль) и 4-диметиламинопиридину (ΌΜΑΡ) (0,002 г, 0,016 ммоль) в 0,7 мл СН2С12 добавляют 1,3-дициклогексилкарбодиимид (БСС) (0,049 г, 0,24 ммоль). Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, фильтруют с использованием этилацетата и концентрируют в вакууме. Получающийся в результате остаток очищают с использованием колоночной хроматографией (силикагель, 50-60-70% ЕЮАс в гексане) и получают 0,158 г (97%) диглицината 27 в виде белого твердого вещества.
[α]2% +44,0° (с 1,25, СНСЕ);
' Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,4-7,2 (м, 7Н),
7,13-7,10 (ушд, 1Н, 1=9,8 Гц), 6,91-6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 5,8-5,77 (д, 1Н, 1= 15,3 Гц), 5,6-5,58 (м, 1Н), 5,49-5,46 (д, 1Н, 1=9, 6 Гц), 5,19 (с, 2Н), 5,1-4,7 (м, 6Н), 3,98-3,97 (д, 2Н, 1=5,0 Гц), 3,93 (с, 3Н), 3,69-3,62 (дд, 1Н, 1=18,2, 4,0 Гц), 3,5-3,0 (м, 5Н), 2,7-2,35 (м, 3Н), 2,0-1,7 (м, 3Н), 1,49 (с, 9Н), 1,44 (с, 9Н), 1,28 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,11,08 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06-1,04 (д, 3Н, 1=6,4 Гц), 1,0-0,98 (д, 3Н, 1=6,2 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СВС13) δ 177,6, 170,4,
169,9, 168,5, 165,0, 155,2, 153,9, 141,6, 138,6,
137.3, 136,3, 130,8, 129,8, 128,2, 128,1, 124,6,
122.3, 112,2, 79,9, 74,7, 71,1, 66,2, 60,0, 56,0,
54,5, 46,5, 42,8, 42,4, 41,8, 39,5, 38,0, 36,5, 35,2,
28,2, 28,15, 24,8, 23,1, 22,8, 22,6, 21,4, 9,9;
ИК (СНС13) 3431, 2982, 2966, 2935, 2872, 1756, 1713, 1685, 1504, 1369, 1258, 1193, 1161 см -1 .
М.-с. выс.разр., ΡΑΒ, [М - ВОС + Н], вычислено для (С46Н63С12^О13) 949,3769, найдено 949,3777.
К раствору диглицината 27 (0,044 г, 0,042 ммоль) в 0,2 мл СН2С12 добавляют 4М раствор хлористого водорода в 1 ,4-диоксане (0,1 мл, 0,42 млоль). Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, концентрируют в вакууме и оставляют в вакууме на 3 суток для удаления оставшегося 1,4-диоксана, причем таким образом получают нужные гидрохлориды 28 с количественным выходом.
[α]20 ο +33,1° (с 0,865, МеОН);
2Н ЯМР (500 МГц, СВ3ОВ) δ 7,77-7,74 (д, 1Н), 7,46-7,41 (к, 4Н, 1=20,3, 8,4 Гц), 7,29-7,28 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,18-7,16 (дд, 1Н, 1=8,6, 2,1 Гц), 6,99-6,97 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,7-6,6 (м, 1Н),
5,95-5,92 (д, 1Н, 1=15,3 Гц), 5,54-5,52 (дд, 1Н, 1=9,5, 1,4 Гц), 5,5 (с, 1Н), 5,28 (с, 2Н), 5,21-5,19 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 5,12-5,09 (дд, 1Н, 1=10,5 , 3,1 Гц), 4,87-4,85 (д, 1Н, 1=12,4 Гц), 4,5-4,47 (дд,1Н, 1=11,3, 3,7 Гц), 3,9 (с, 2Н), 3,84 (с, 3н), 3,82-3,79 (д, 1Н, 1=17,8 Гц), 3,48-3,45 (д, 1Н, 1=13,7 Гц),
3,53-3,3 (м,1Н), 3,19-3,15 (дд, 1Н, 1=14,5, 3,8 Гц), 3,11-3,09 (д, 1Н, 1=13,8 Гц), 2,77-2,6 (м, 3Н),
2,37-2,3 (м, 1Н), 1,95-1,75 (м, 3Н), 1,22 (с, 3Н),
1,17 (с, 3Н), 1,08-1,07 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,03-1,02 (д, 3Н, 1=6,4 Гц), 1,0-0,99 (д, 3Н, 1=6,2 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СЭСЬ) δ 178,8, 173,8,
171,9, 168,5, 168,2, 167,8, 155,4, 143,5, 139,3,
137,6, 132,2, 131,4, 129,7, 129,5, 129,4, 125,3,
123,3, 113,5, 77,9, 76,2-72,4, 68,2, 60,8, 57,7, 56,7,
47,5, 44,2, 41,2, 40,5, 39,8, 37,9, 36,5, 26,3, 23,7,
23,4, 22,2, 9,9;
ИК (КВг) 3417, 3234, 2959, 2873, 2622, 1757, 1724, 1673, 1504, 1473, 1303, 1259, 1221, 1150, 1065 см-1.
Смесь свободной кислоты фрагмента С' (0,22 г, 1,02 ммоль), ΌΜΑΡ (0,032 г, 0,26 ммоль) и ОСС (0,21 г, 1,02 ммоль) перемешивают в течение 30 мин при 0°С в 6,5 мл СН2С12.
Добавляют по каплям свободный спирт 29 (0,35 г, 0,51 ммоль) в 6,0 мл СН2С12. Смесь перемешивают при 0°С в течение 10 мин и при комнатной температуре в течение 24 ч и, в завершение, кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч и снова охлаждают до комнатной температуры. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и фильтруют через целит с использованием ЕЮАс. Получающийся в результате остаток очищают с использованием колоночной хроматографии (силикагель, 60-70%
ЕЮАс в гексане) и получают 0,38 г (85%) указанного выше сложного эфира в виде белого твердого вещества.
[α]2% +23,2° (с 1,0, СНС^);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,4-7,2 (м, 6Н),
7,12-7,08 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,9-6,87 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,87-6,75 (м, 1Н), 6,47-6,42 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,11-6,03 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц),
5,82-5,77 (д, 1Н, 1=14,9 Гц), 5,61-5,58 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,12 (с, 2Н), 5,12-4,75 (м, 4Н), 3,9 (с, 3Н), 3,49-3,42 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,7 Гц), 3,29-3,27 (д,1Н, 1=6,5 Гц), 3,2-3,1 (м, 3Н), 2,65-2,3 (м, 3Н),
1,8-1,6 (м, 3Н), 1,47 (с, 9Н), 1,45-1,3 (м,1Н), 1,31,15 (м, 15Н), 0,79-0,75 (т, 6Н, 1=6,4 Гц);
13С ЯМР (75 МГц, СБС13) δ 177,8, 170,4,
165,1, 153,9, 141,9 136,7, 135,1, 131,1, 130,8,
129,7, 128,3, 128,2, 126,2, 124,6, 122,4, 112,2,
76,9, 71,3, 66,0, 56,0, 54,4, 48,2, 46,4, 43,7, 42,6,
42,2, 39,4, 36,4, 35,2, 28,3, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,2;
ИК (СНС13) 3426, 2968, 2935, 2874, 2841, 1746, 1713, 1684, 1652, 1504, 1486, 1474, 1368, 1318, 1304, 1259, 1244, 1165, 1151, 1067 см-1.
М.-с., выс.разр., ГАВ, [М - Вос + Н], вычислено для (С42Н57СШ3О9) 782,3783, найдено 782,3788.
Пример 48.
К охлажденному до 0°С раствору исходного стирола (0,45 г, 0,51 ммоль) в 9,0 мл СН2С12 добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,092 г, 0,54 ммоль). Раствор перемешивают в течение 1 ч при 0°С и в течение ночи при комнатной температуре. Раствор концентрируют в вакууме и получающиеся в результате эпоксиды растворяют в 10 мл СНС13 и охлаждают до -60°С.
К охлажденному до -60°С раствору добавляют свежеперегнанный ТМ8С1 (0,25 мл, 1,95 ммоль) и смесь перемешивают в течение 1 ч. Добавляют еще ТМ8С1 (0,5 мл, 3,9 ммоль) и продолжают перемешивание при температуре между -60°С и -40°С еще в течение 2 ч. Раствор нагревают до комнатной температуры и добавляют еще ТМ8С1 (0,25 мл, 1,95 ммоль). После 30 мин перемешивания при комнатной температуре раствор концентрируют и очищают препа ративной ВЭЖХ для разделения получающихся в результате хлоргидринов. Очистка дает 0,1 г (22%) нужного хлоргидрина.
[α]20π +47,9° (с 0,75, СНС^);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,5-7,2 (м, 6Н),
7,13-7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,91-6,88 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,87-6,75 (м, 1Н), 5,85-5,8 (д, 1Н, 1=14,9 Гц), 5,75-5,6 (м, 1Н), 5,22-5,1 (м, 3Н), 5,0-
4,9 (м, 2Н), 4,8-4,72 (м, 1Н), 4,71-4,68 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 4,07-4,03 (д,1Н, 1=9,5 Гц), 3,9 (с, 3Н),
3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,5 Гц), 3,31-3,26 (д,1Н, 1=6,4 Гц), 3,25-3,0 (м, 4Н), 2,8-2,65 (ушд, 1Н), 2,6-2,35 (м, 2Н), 1,9-1,7 (м, 3Н), 1,47 (с, 10Н), 1,27 (с, 3Н), 1,25 (с, 6Н), 1,22 (с, 3Н), 1,091,07 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,98-0,96 (м, 6Н);
13С ЯМР (75 МГц, СБС^) δ 177,5, 170,5,
165,2, 153,9, 142,5, 137,0, 130,8, 129,8, 128,2,
124,5, 122,4, 112,2, 79,1, 76,1, 73,9, 71,1, 65,6,
61,7, 56,1, 54,5, 48,2, 46,4, 43,7, 42,7, 39,6, 38,4,
36,3, 35,2, 28,3, 24,8, 23,0, 22,9, 22,8, 22,7, 21,5, 8,6;
ИК (СНС13) 3426, 2967, 2934, 2873, 2841, 1715, 1684, 1605, 1504, 1485, 1474, 1442, 1368, 1305, 1258, 1151 см-1.
М.-с. выс.разр., ГАВ, [М - Вос + Н], вычислено для (С42Н58С12^О10) 834,3499, найдено 834,3487.
Пример 49.
К раствору хлоргидрина (0,08 г, 0,086 ммоль) в 0,35 мл СН2С12 добавляют 4М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (0,11 мл, 0,43 ммоль). Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, концентрируют в вакууме и оставляют в вакууме на 3 суток для удаления 1,4диоксана, причем таким образом получают нужный гидрохлорид (представленный выше) (0,075 г) с количественным выходом.
[α]20 ο +28,0° (с 0,5, СН3ОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СБ3ОН) δ 8,52-8,49 (д, 1Н, 1=7,5 Гц), 7,84-7,31 (д, 2Н, 1=9,6 Гц), 7,49-
7,39 (к, 4Н, 1=8,3 Гц), 7,32-7,31 (д, 1Н, 1=1,9 Гц),
7,22-7,19 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,02-7,0 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,8-6,7 (м, 1Н), 6,0-5,9 (дд, 1Н, 1=15,4, 1,0 Гц), 5,22 (с, 2Н), 5,2-5,0 (м, 2Н), 4,85-4,81 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 4,6-4,5 (м, 1Н), 4,06-4,03 (дд, 1Н, 1=9,6, 1,5 Гц), 3,9 (с, 3Н), 3,54-3,46 (дд, 1Н, 1=13,5, 9,7 Гц), 3,25-3,11 (м, 2Н), 3,11 (с, 2Н),
2,8-2,7 (м, 3Н), 2,6-2,3 (м, 2Н), 1,9-1,5 (м, 3н),
1,3 (с,7Н), 1,25 (с, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,06-1,03 (д, 3Н, 1=6, 9 Гц), 1,02-1,01 (д, 3Н, 1=3,2 Гц), 1,00,99 (д, 3Н, 1=3,4 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СВ3ОН) δ 178,9, 176,5,
173,8, 171,8, 168,3, 155,3, 144,2, 141,6, 137,4,
132,3, 131,5, 129,8, 129,4, 129,3, 125,2, 123,3,
113,5, 77,2, 74,7, 72,6, 67,8, 63,5, 57,6, 56,7, 47,7,
47,6, 44,1, 42,3, 41,1, 40,4, 37,9, 36,5, 26,2, 23,7,
23,4, 22,2, 9,0;
ИК (СНС13) 3421, 2964, 2935, 2873, 2841, 1717, 1676, 1528,1504, 1477, 1464-1405, 1282, 1259, 1185, 1152, 1067 см-1.
М.-с. выс.разр., ГАВ, [М - С1], вычислено для (С42Н58С13\3О10) 834,3499, найдено 834,3504.
Стирол (показанный выше) (0,67 г) получают из альдегида 18 (1,0 г, 1,73 ммоль) и 3метилбензилтрифенилфосфонийхлорида (0,886 мл, 2,2 ммоль) с выходом 58% по описанной выше процедуре для получения стирола 20.
[α]20π +33,1° (с 1,0, СН3ОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,24-7,0 (м, 7Н), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-6,7 (м, 1Н),
6,39-6,34 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,03-5,95 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,7 Гц), 5,78-5,73 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,67-
5,64 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,1-5,0 (м, 1Н), 4,87-4,83 (дд, 1Н, 1=10,2, 3,5 Гц), 4,8-4,7 (м, 1Н), 3,9 (с, 3Н), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,6-2,3 (м, 3Н), 2,32 (с, 3Н), 1,75-1,25 (м, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,13-1,11 (д, 3Н, 1=6, 8 Гц), 0,75-0,72 (т, 6Н, 1=5,7 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,9, 170,5,
170,3, 165,1, 154,0, 142,1, 138,0, 136,6, 135,6,
131,8, 130,8, 129,9, 129,6, 128,4, 128,22, 128,17,
126,7, 124,5, 123,3, 122,5, 112,3, 71,4, 56,1, 54,3,
46,4, 42,7, 42,2, 39,4, 36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,6, 22,56, 21,2, 17,2;
ИК (СНС13) 3424, 3021, 3017, 2965, 1747, 1711, 1680, 1652, 1528, 1503, 1485, 1259, 1151, 1067 см-1.
Пример 51.
К раствору стирола (показанного выше) (0,667 г, 1,0 ммоль) в 5,0 мл СН2С12 добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,19 г, 1,1 ммоль). Получающийся в результате раствор перемешивают в течение ночи, концентрируют в вакууме и получают β- и α-эпоксиды в соотношении 1,8:1, с преимуществом β-формы. Разделение двух эпоксидов посредством ВЭЖХ с обращенной фазой (70:30, СН3С№Н2О) дает 0,20 г основного β-эпоксида в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,3-7,0 (м, 7Н),
6,9-6,87 (д, 1Н, 1= 8,4 Гц), 6,87-6,75 (м, 1Н),
5,79-5,74 (д, 1Н, 1=14,8 Гц), 5,54-5,51 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,28-5,22 (м, 1Н), 4,89-4,85 (дд, 1Н, 1=
10,4, 3,5 Гц), 4,82-4,75 (м, 1Н), 3,9 (с, 3Н), 3,69-
3,68 (д, 1Н, 1=1,6 Гц), 3,51-3,44 (дд, 1Н, 1=13,4,
8.6 Гц), 3,2-3,1 (м, 2Н), 2,98-2,95 (дд, 1Н, 1=7,6,
1.6 Гц), 2,65-2,32 (м, 3Н), 2,32 (с, 3Н), 1,85-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,25 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н),
1,21-1,18 (д, 3Н, 1=7,5 Гц), 0,90-0,86 (т, 6Н, 1=6,13 Гц).
К раствору β-эпоксида (показанного выше) (0,1 г, 0,147 ммоль) в 5,0 мл СНС13 при -60°С добавляют хлортриметилсилан (0,093 мл, 0,74 ммоль). Раствор перед концентрированием в вакууме перемешивают при -60°С в течение 30 мин и при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Получающийся в результате остаток, содержащий смесь (50:50) син- и антихлоргидринов, очищают посредством ВЭЖХ с обращенной фазой и получают 0,028 г (27%) нужного трансизомера.
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,28-7,2 (м, 5Н), 7,13-7,1 (дд, 1Н, 1=8,3, 1,9 Гц), 6,91-6,88 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,88-6,78 (м, 1Н), 5,86-5,81 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,73-5,71 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,24-5,17 (т, 1Н, 1=9,4 Гц), 5,0-4,96 (дд, 1Н, 1=9,6, 2,9 Гц), 4,81-4,74 (м, 1Н), 4,67-4,64 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,06-4,03 (дд, 1Н, 1=9,6, 1,1 Гц), 3,92 (с, 3Н),
3,47-3,39 (дд, 1Н, 1=13,2, 8,3 Гц), 3,42-3,0 (м, 3Н), 2,8-2,4 (м, 2Н), 2,4 (с, 3Н), 1,9-1,4 (м, 4Н), 1,28(с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,09-1,07 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,98-0,96 (д, 6Н, 1= 6,4 Гц).
Пример 53.
Стирол (показанный выше) (0,095 г) получают из альдегида 18 (0,2 г, 0,345 ммоль) и 3,4диметилбензилтрифенилфосфонийхлорида (0,26 г, 0,62 ммоль) с выходом 63% по описанной выше процедуре для получения стирола 20.
[α]20 ο +27,8° (с 0,576, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СЭС13,) δ 7,22-7,18 (д, 1Н, 1=1,6 Гц), 7,12-7,02 (м, 5Н), 6,87-6,81 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 6,80-6,71 (м, 1Н), 6,40-6,30 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,00-5,88 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц),
5,80-5,70 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,55-5,45 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 5,10-4,97 (м, 1Н), 4,90-4,80 (дд, 1Н, 1=9,4, 2,8 Гц), 4,80-4,70 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 3,50-3,35 (дд, 1Н, 1=13,3, 4,8 Гц), 3,20-3,00 (м, 3Н), 2,60-2,48 (м, 2Н), 2,45-2,30 (м, 1Н), 2,23 (с, 3Н), 2,24 (с, 3Н), 1,80-1,55 (м, 2Н), 1,40-1,30 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,14-1,10 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,80-0,73 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,9, 170,5,
170.3, 165,1, 154,0, 142,2, 136,5, 135,9, 134,3,
131.6, 130,8, 129,7, 129,5, 128,8, 128,1, 127,2,
124.4, 123,6, 122,4, 112,2, 71,4, 56,0, 54,2, 46,4,
42.6, 42,1, 39,4, 36,4, 35,2, 24,5, 22,7, 22,6, 22,5,
21,1, 19,6, 19,3, 17,2;
ИК (СНС13) 3424, 2965, 2935, 1746, 1711, 1681, 1652, 1527, 1503, 1485, 1259, 1187, 1164, 1151, 1067, 970, 727 см-1.
Элементн. анализ: (С38Н49СШ2О7) С, Н, Ν. Пример 54.
По описанной выше процедуре из стирола (показанного выше) (0,3 г, 0,44 ммоль), с использованием 3-хлорпероксибензойной кислоты (0,081 г, 0,47 ммоль), получают этот β -эпоксид (0,06 г) с выходом 20%.
[α]2°π +20,0° (с 1,43, СНСБ);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,26-6,96 (м, 6Н), 6,98 (с, 1Н), 6,84-6,82 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,79-6,65 (м, 1Н), 5,73-5,69 (д, 1Н, 1=11,9 Гц),
5,68-5,67 (д, 1Н, 1=4, 6 Гц), 5, 29-5,15 (м, 1Н),
4,83-4,76 (дд, 1Н, 1=9,7, 2,8 Гц), 4,75-4,58 (м, 1Н), 3,86 (с, 3Н), 3,61-3,60 (д, 1Н, 1=1,6 Гц),
3,46-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,8 Гц), 3,14-2,97 (м, 3Н), 2,92-2,89 (дд, 1Н, 1=1,1, 1,6 Гц), 2,59-2,35 (м, 2Н), 2,25 (с, 6Н), 1,78-1,58 (м, 3Н), 1,28-1,09 (м, 1Н), 1,21 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,15-1,12 (д, 3Н, 1=7,8 Гц), 0,85-0,77 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СРСЬ) δ 177,8, 170,4,
170.3, 164,9, 154,0, 141,7, 137,0, 136,9, 134,0,
130,8, 129,9, 129,5, 128,1, 126,7, 124,6, 123,2,
122.4, 122,3, 75,9, 71,04, 62,8, 59,1, 56,1, 54,3,
46.4, 42,7, 40,7, 39,2, 36,8, 35,2, 24,4, 22,8, 22,6, 21,0, 19,7, 19,4, 13,6;
ИК (КВг) 3419, 2962, 1752, 1721, 1681, 1654, 1534, 1504, 1473, 1442, 1302, 1282, 1259, 1192, 1126, 1066 см-1.
Элемент. анализ: (С38Н49СШ2О8) С, Н, Ν.
К раствору стирола (показанного выше) (0,492 г, 0,72 ммоль) в 2,4 мл СН2С12 при 0°С добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,137 г, 0,79 ммоль) и толуол (1,2 мл) и продолжают перемешивание при 0°С в течение 30 мин. Ледяную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. После разбавления 10 мл СН2С12 раствор промывают 10% раствором №25О4 (1х10 мл), Н2О (1х10 мл), 10% раствором №1Ю()3 (1х10 мл) и сушат над Να28Θ4. Концентрирование дает смесь неочищенных βи α-эпоксидов в соотношении 2:1.
Неочищенные эпоксиды (0,445 г, 0,638 ммоль) растворяют в 10 мл сухого СНС13, охлаждают до -60°С и обрабатывают триметилсилилхлоридом (0,2 мл, 1,5 ммоль). Перемешивание продолжают в течение 90 мин и концентрируют раствор в вакууме. Сырые хлоргидри ны очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (ΟН3ΟN с Н2О) и получают продукт (показанный выше) (0,115 г) с выходом 21% в виде белого твердого вещества, [а]20п +45,9° (с 0,59, СНСБ);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,26-7,01 (м, 5Н), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,80-6,71 (м,
1Н), 5,71-5,66 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,50-5,47 (д,
1Н, 1=7,6 Гц), 5,13-5,08 (т, 1Н, 1=8,8 Гц), 4,89-
4,84 (м, 2Н), 4,81-4,71 (м, 1Н), 4,09-4,06 (д, 1Н, 1=9,4), 3,87 (с, 3Н), 3,44-3,37 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,4 Гц), 3,16-3,06 (м, 3Н), 2,60-2,54 (м, 2Н), 2,26 (с, 6Н), 2,26-2,14 (м, 1Н), 1,89-1,81 (м, 1Н), 1,70-
1,62 (м, 2Н), 1,58-1,46 (м, 2Н), 1,23 (с, 3Н), 1,17 (с, 3Н), 0,97-0,95 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 0,93-0,90 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СРСМ δ 177,7, 170,5,
170,1, 165,2, 153,9, 142,3, 137,7, 137,3, 135,1,
130.7, 130,2, 129,8, 128,5, 128,1, 124,6, 124,4,
122,3, 112,2, 75,9, 74,2, 71,2, 68,8, 56,0, 54,4,
46,4, 42,7, 39,6, 38,4, 36,2, 35,2, 24,8, 22,9, 22,8,
22.7, 21,7, 19,8, 19,5, 8,6;
ИК (КВг) 3421, 2960, 1756, 1721, 1675, 1504, 1258, 1195, 1151, 1126, 1066 см-1.
Элемент. анализ: (С38Н50С12^О8) С, Н, Ν.
Пример 56.
Стирол (показанный выше) (0,21 г) получают из альдегида 18 (0,5 г, 0,87 ммоль) и 4метоксибензилтрифенилфосфонийхлорида (0,47 г, 1,12 ммоль) с выходом 36% по описанной выше процедуре для получения стирола 20.
[α]2% +31,6° (с 1,03, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СРСМ δ 7,26-7,23 (д, 3Н, 1=8,4 Гц), 7,20-7,19 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,077,03 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,84-6,81 (д, 3Н, 1=8,5 Гц), 6,80-6,7 (м, 1Н), 6,36-6,31 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 5,89-5,81 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц),
5,78-5,73 (д, 1Н, 1=13,7 Гц), 5,68-5,66 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,04-4,99 (ддд, 1Н, 1=10,6, 6,6, 1,6 Гц),
4,87-4,82 (дд, 1Н, 1=9,7, 3,1 Гц), 4,78-4,7 (м, 1Н),
3,86 (с, 3Н), 3,79 (с, 3Н), 3,45-3,37 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,15-3,0 (м, 3Н), 2,6-2,25 (м, 3Н),
1,7-1,3 (м, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,12-1,1 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,76-0,75 (д, 3Н, 1=2,9 Гц), 0,74-0,73 (д, 3Н, 1=2,8 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СРСМ δ 177,8, 170,5,
170.4, 165,1, 159,1, 153,9, 142,1, 135,8, 131,0,
130,8, 129,7, 129,5, 128,2, 127,9, 127,2, 124,5,
122.4, 113,9, 112,3, 77,1, 71,4, 56,0, 55,2, 54,4,
46.4, 42,7, 42,1, 39,4, 36,4, 35,3, 24,5 22,8, 22,6, 21,2, 17,3;
ИК (СНС13) 3422, 3003, 2964, 2936, 2873,
2840, 1746, 1712, 1681, 1651, 1607, 1527, 1512,
1504, 1485, 1465, 1301, 1251 см-1.
Элементн. анализ: (С37Н47СШ2О8) С, Н, Ν.
К стиролу (показан выше) (0,3 г, 0,44 ммоль) добавляют 19 мл ацетона, 9 мл Н2О, 9 мл СН2С12 и твердый №НСХ)3 (1,2 г, 14,5 ммоль) и смесь охлаждают до 0°С. Готовят раствор оксона (1,08 г, 1,8 ммоль) в 9 мл 112О и добавляют (2 мл) к охлажденной смеси со стиролом. После энергичного перемешивания в течение 30 мин при 0°С добавляют еще 2 мл раствора оксона и снова добавляют 2,0 мл после еще 30 мин перемешивания, и т.д., всего 6 мл раствора оксона. Развитие реакции контролируют с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой и находят, что реакция завершается после перемешивания в течение 2,5 ч. Все еще при 0°С реакцию гасят насыщенным водным раствором NаНСО3 (50 мл) и добавляют также еще 50 мл СН2С12. Слои разделяют и органический слой промывают водн. 10% раствором №28О3 (50 мл), затем насыщенным водным раствором NаΗСΟ3 (50 мл), затем рассолом и, в завершение, сушат над №28О2, фильтруют и концентрируют в вакууме. Смесь β- и α-эпоксидов разделяют посредством ВЭЖХ с обращенной фазой (45:55, СН3СКН2О) и получают 0,12 г β-эпоксида в виде белого твердого вещества, с выходом 39%.
[α]20ο +25,8° (с 0,66, СНС13);
2Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,26-7,15 (м, 4Н), 7,05-7,03 (д, 1Н, 1=8,6 Гц), 6,9-6,87 (д, 2Н, 1=8,6 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,82-6,7 (м, 1Н), 5,74-5,69 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,54-5,52 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,22-5,16 (м, 1Н), 4,84-4,7 (м, 2Н),
3,87 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,63 (с, 1Н), 3,46-3,38 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,8 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,91-2,89 (д, 1Н, 1=7,4 Гц), 2,6-2,38 (м, 2Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,23 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,15-1,12 (д, 3Н, 1=8,9 Гц), 0,84-0,80 (т, 6Н, 1=6,0 Ж- 13С ЯМР (63 МГц, СВС13) δ 177,7, 170,5,
170,4, 165,1, 159,8, 153,9, 141,6, 136,8, 130,7,
129.7, 128,6, 128,1, 126,9, 124,6, 122,3, 114,1,
112,2, 75,9, 71,0, 62,8, 58,9, 56,0, 55,2, 54,6, 46,3,
42.7, 40,6, 39,2, 36,8, 35,2, 24,4, 22,8, 22,7, 22,6,
21,1, 13,5;
ИК (С№13) 3423, 3009, 2964, 2936, 2874, 2840, 1751, 1713, 1681, 1653, 1614, 1517, 1504, 1486, 1464, 1442, 1303, 1281, 1257, 1183, 1173, 1152 см-1.
Элементн. анализ: (С37Н47СШ2О9) С, Н, Ν. Пример 58.
Стирол (показанный выше) (0,649 г) получают из альдегида 18 (0,911 г, 1,57 ммоль) и 4(трет-бутилдиметилсилокси)бензилтрифенилфосфонийхлорида (1,7 г, 3,27 ммоль) с выходом 53% по описанной выше процедуре для получения стирола 20.
[α]20π +30,83° (с 0,52, СНС13);
2Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,25 (с, 1Н),
7,26-7,20 (д, 2Н, 1= 8,5 Гц), 7,12-7,06 (дд, 1Н, 1=8,3, 1,6 Гц), 6,92-6,86 (д, 1Н, 1= 8,5 Гц), 6,84-
6,78 (д, 2Н, 1=8,5 Гц), 6,44-6,33 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 5,95-5,85 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц), 5,85-5,77 (д, 1Н, 1=15,5 Гц), 5,68-5,55 (ушд, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,15-5,00 (м, 1Н), 4,95-4,80 (дд, 1Н, 1=10,0, 3,0 Гц), 4,85-4,75 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,53-3,43 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,23-3,08 (м, 3Н), 2,65-2,50 (м, 2Н), 2,50-2,35 (м, 3Н), 1,75-1,60 (м, 2Н), 1,45-
1,36 (м, 1Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,16-1,13 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 1,01 (с, 9Н), 0,85-0,74 (м, 6Н), 0,22 (с, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СВС13) δ 177,8, 170,5,
170.4, 165,1, 155,2, 153,9, 142,1, 131,1, 130,8,
130.1, 129,7, 128,2, 128,1, 127,1, 124,5, 122,4,
120.2, 112,2, 71,4, 56,0, 54,4, 46,4, 42,7, 42,2,
39.4, 36,5, 35,3, 25,6, 24,5, 22,8, 22,7, 21,2, 18,1,
17,3, -4,5;
ИК (СГС13) 3422, 3030, 3008, 2961, 2932, 2899, 2860, 1745, 1712, 1681, 1604, 1527, 1509, 1485, 1442, 1370, 1339, 1303, 1258, 1169, 1151, 1067, 1007, 970, 912, 841, 822, 792 см-1.
Элементн. анализ: (С^ЩсСШЮ^) С, Н, Ν.
Пример 59.
К охлажденному до -70°С раствору фенола с защитной силильной группой (0,084 г, 0,107 ммоль) в 4 мл сухого ТГФ добавляют 1,0М раствор тетрабутиламмонийфторида (ТВАР) в ТГФ (0,11 мл, 0,11 ммоль). Светло-желтый раствор перемешивают при -70°С в течение 30 мин, затем гасят 2 мл насыщенного раствора ΝΙ12С1 и экстрагируют СИ2С12 (3х25 мл). Объединенные органические экстракты сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка сырого продукта радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 50-100% ЕЮ Ас в гексане) дает нужный спирт (0,067 г) с выходом 93% в виде белого твердого вещества.
[α]20 ο +30,83° (с 0,52, СНС13);
2Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,40-7,32 (м, 1Н), 7,28-7,20 (м, 3Н), 7,13-7,05 (дд, 1Н, 1=8,3,
1,6 Гц), 6,95-6,75 (м, 5Н), 6,57 (с, 1Н), 6,42-6,33 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 5,93-5,83 (дл, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц), 5,83-5,78 (д, 1Н, 1=15,5 Гц), 5,75-5,73 (ушд, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,15-5,00 (м, 1Н), 4,93-4,85 (дд, 1Н, 1=10,0, 3,0 Гц), 4,85-4,75 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 3,54-3,40 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,25-3,02 (м, 3Н), 2,65-2,35 (м, 3Н), 1,80-1,60 (м, 2Н), 1,4593
1,36 (м, 1Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,17-1,12 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,86-0,74 (д, 6Н, 1=5,0 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 177,9, 170,7,
170,6, 156,0, 154,0, 142,6, 137,1, 131,3, 130,8,
129.5, 128,9, 128,1, 127,4, 124,3, 122,5, 115,6,
112,3, 77,2, 71,5, 56,1, 54,5, 46,5, 42,7, 42,1, 39,4,
36.5, 35,3, 24,6, 22,8, 22,7, 21,2, 17,3;
ИК (СНС13) 3597, 3421, 3319, 2964, 2935, 2874, 2841, 1746, 1711, 1680, 1652, 1610, 1513, 1504, 1485, 1464, 1259, 1170, 1152, 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С36Н46СШ2О8) С, Н, N. Пример 60.
Раствор кислоты фрагмента С' (0,040 г, 0,184 ммоль) и карбонилдиимидазола (СЭ1) (0,040 г, 0,25 ммоль) в 2 мл толуола греют в атмосфере азота при 45°С в течение 45 мин. После добавления спирта (представленного выше) (0,10 г, 0,15 ммоль) в 1 мл толуола реакционную смесь снова греют при 45°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляют ЕЮ Ас (100 мл), промывают 0,Ш НС1 (1х10 мл), водой (1х10 мл), насыщенным раствором №11СО3 (1х10 мл) и рассолом (1х1 0 мл). Органический слой сушат над М§8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают сырой сложный эфир в виде желтой пены. Очистка радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 50% ЕЮ Ас в гексане) дает чистый эфир (0,097 г) с выходом 75% в виде желтого твердого вещества.
[α]20 ο +17,2° (с 0,58, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,40-7,34 (д, 2Н, 1=8,5 Гц), 7,29-7,22 (м, 3Н), 7,13-7,00 (м, 3Н), 6,92-6,86 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 6,86-6,76 (м, 1Н), 6,50-6,38 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,10-5,97 (дд, 1Н, 1= 15,8, 8,8 Гц), 5,85-5,75 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,55-5,45 (д, 1Н, 1= 7,9 Гц), 5,15-5,06 (м, 1Н), 5,06-4,96 (м, 1Н), 4,95-4,85 (м, 1Н), 4,83-4,72 (дд, 1Н, 1=10,0, 3,0 Гц), 3,92 (с, 3Н), 3,53-3,35 (м, 3Н), 3,22-3,06 (м, 3Н), 2,65-2,50 (м, 2Н), 2,482,35 (м, 1Н), 1,80-1,65 (м, 2Н), 1,49 (с, 9Н), 1,40 (с, 6Н), 1,27 (с, 3), 1,21 (с, 3Н), 1,20-1,15 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,86-0,77 (д, 6Н, 1=6,3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 177,8, 170,5,
170.4, 165,1, 156,0, 153,9, 150,0, 142,0, 134,5,
130,8, 130,6, 130,4, 129,6, 128,2, 126,9, 124,6,
122.4, 121,5, 112,2, 79,2, 71,3, 56,0, 54,4, 48,2,
46.4, 44,0, 42,7, 42,1, 39,5, 36,5, 35,2, 28,3, 24,9,
24.5, 22,9, 22,8, 22,7, 21,3, 17,2;
ИК (СНС13) 3425, 2970, 2934, 2874, 1746, 1711, 1684, 1604, 1505, 1442, 1394, 1368, 1305, 1258, 1166, 1123, 1067, 1015, 971 см-1.
Элементн. анализ: (С41Н55СШ3О9) С, Н, N.
Пример 61.
К стиролу (показан выше) (0,276 г, 0,32 ммоль) добавляют 12 мл ацетона, 6 мл Н2О, 6 мл СН2С12 и твердый №11СО3 (0,84 г, 10 ммоль) и смесь охлаждают до 0°С. Готовят раствор оксона (0,78 г, 1,27 ммоль) в 6 мл Н2О и добавляют (2 мл) к охлажденной смеси со стиролом. После энергичного перемешивания в течение 30 мин при 0°С добавляют еще 2 мл раствора оксона и снова добавляют 2,0 мл после еще 30 мин перемешивания, и т.д., всего 6 мл раствора оксона. Развитие реакции контролируют с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой и находят, что реакция завершается после перемешивания в течение 2,5 ч. Все еще при 0°С реакцию гасят насыщенным водным раствором №11СО3 (50 мл) и добавляют также еще 50 мл СН2С12. Слои разделяют и органический слой промывают водным 10% раствором №:8О3 (50 мл), затем насыщенным водным раствором №11СО3 (50 мл), затем рассолом и, в завершение, сушат над №:8О.|, фильтруют и концентрируют в вакууме. Получают 0,272 г сырых эпоксидов в виде желтой пены.
К раствору эпоксидов в 4 мл СН2С12 при -60°С добавляют триметилсилилхлорид (0,2 мл, 1,54 ммоль). После 3 часовой выдержки при -60°С добавляют 5 мл 0,Ш НС1 для гидролиза какого-либо имеющегося триметилсилилового эфира и смесь нагревают до комнатной температуры. Слои разделяют и органический слой сушат над М§8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырые хлоргидрины дважды очищают радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 50-60-70-100% ЕЮ Ас в гексане) и, в завершение, с обращенной фазой (Ο^ΟΝ с Н2О) и получают нужный продукт (показанный выше) (0,090 г, 31%) в виде белого твердого вещества.
[α]20 ο +42,7° (с 3,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,48-7,44 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,31-7,26 (м, 4Н), 7,16-7,10 (м, 3Н), 6,92-6,89 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,87-6,81 (м,
1Н), 5,84-5,79 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,58-5,55 (д,
1Н, 1=7,8 Гц), 5,24-5,19 (т, 1Н, 1=8,9 Гц), 5,05-
4,95 (м, 2Н), 4,79-4,75 (м, 1Н), 4,72-4,69 (д, 1Н, 1=9,5 Гц), 4,04-4,01 (дд, 1Н, 1=1,3, 9,3 Гц), 3,93 (с, 3Н), 3,47-3,40 (м, 3Н), 3,25-3,06 (м, 3Н), 2,75-
2,70 (д, 1Н, 1=13,9 Гц), 2,55-2,41 (м, 2Н), 1,90-
1,71 (м, 2Н), 1,63 (с, 1Н), 1,48 (с, 9Н), 1,39 (с, 6Н), 1,28 (с,3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,09-1,06 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 1,0-0,96 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 177,6, 170,4,
170,2, 165,2, 153,9 142,3, 136,1, 130,8, 129,7,
129.1, 128,2, 124,5, 122,4, 121,9, 112,2, 76,1, 74,0,
71.1, 61,5, 56,5, 54,4, 46,4, 44,1, 42,7, 39,6, 38,4,
36,3, 35,2, 28,3, 24,8, 22,9, 22,8, 22,7, 21,5, 8,6;
ИК (СНС13) 3417, 2974, 2934, 1755, 1720, 1677, 1505, 1473, 1368, 1320, 1258, 1205, 1167, 1153, 1123, 1066 см-1.
М.-с. выс.разреш., РАВ [М - ВОС], вычислено для (С41Н56С12И3010) 820,3343, найдено
820,3354.
К амину с защитной ВОС-группой (показанному выше) (0,070 г, 0,067 ммоль) в СН2С12 (0,25 мл) добавляют 4М раствор НС1 (0,1 мл, 0,4 ммоль) в 1,4-диоксане. После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре растворители удаляют в вакууме, а получающийся в результате остаток выдерживают в высоком вакууме в течение 2 суток и получают продукт в виде белого твердого вещества с выходом 95% (0,062 г).
[α]20π +27,68° (с 2,5, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,79-7,76 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 7,48-7,38 (м, 2Н), 7,27-7,26 (д, 1Н, 1=1,2 Гц), 7,17-7,08 (м, 3Н), 6,98-6,95 (д, 1Н,
1=8,5 Гц), 6,71-6,60 (м, 1н), 5,95-5,90 (д, 1Н,
1=15,2 Гц), 5,14-5,01 (м, 2Н), 4,50-4,46 (дд, 1Н, 1=3,0, 11,0 Гц), 3,99-3,96 (д, 1Н, 1=9,1 Гц), 3,82 (с, 3Н), 3,49-3,42 (м, 1Н), 3,19 (с, 2Н), 3,2-3,06 (м, 2Н), 2,77-2,68 (м, 2Н), 2,49-2,46 (т, 1Н, 1=6,8 Гц), 2,44-2,31 (к, 1Н, 1=11,4 Гц), 1,85-1,65 (м, 2Н), 1,60-1,50 (м, 1Н), 1,46 (с, 6Н), 1,20 (с, 3Н),
1,16 (с, 3Н), 1,08-0,94 (м, 9Н);
13С ЯМР (63 МГц, СБС13) δ 178,9, 175,6,
173,8, 171,9, 155,3, 151,8, 144,2, 139,5, 132,2,
131,5, 130,7, 129,4, 125,2, 123,3, 122,6, 113,5,
77,2, 74,8, 72,6, 63,2, 57,6, 56,7, 50,1, 48,3, 48,0,
47,4, 44,1, 42,7, 41,1, 40,4, 37,8, 36,5, 28,8, 26,2,
23,6, 23,4, 22,2, 9,0;
ИК (КВг) 3418, 2961, 2934, 1751, 1724, 1671, 1608, 1505, 1474, 1464, 1442, 1303, 1282, 1259, 1203, 1169, 1152, 1126, 1065, 1018 см-1.
М.-с. выс.разреш., РАВ [М - С1], вычислено для (С41Н56С12И3О10) 820,3343, найдено
820,3354.
Пример 63.
К раствору спирта с защитной группой 20 (3,1 г, 3,69 ммоль) в 120 мл ТГФ, охлажденному до -78°С, добавляют по каплям тетрабутиламмонийфторид (ТВАР) в виде 1,0М раствора в ТГФ (4,0 мл, 4,1 ммоль). Раствор перемешивают при -78°С в течение 10 мин и удаляют баню с сухим льдом, позволяя раствору нагреваться до комнатной температуры. После 30 мин выдержки при комнатной температуре в реакционную смесь добавляют воду (80 мл) и этилацетат (100 мл). Слои разделяют и водный слой экстрагируют СН2С12 (3х50 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным Иа2804, фильтруют и концентрируют в вакууме и получают свободный спирт. Очистка колоночной хроматографией (силикагель, 50-70-100% Е!0Ас в гексане) дает 2,51 г (99%) чистого спирта 29 в виде белого твердого вещества.
[α]20π +30,0° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,31 (с, 4Н),
7,26-7,21 (м, 1Н), 7,2-7,19 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,077,03 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,7 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-6,7 (м, 1Н), 6,43-6,37 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,05-5,97 (дд, 1Н, 1=15,9, 8,7 Гц),
5,77-5,72 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,58-5,55 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,08-5,02 (дл, 1Н, 1=9,4, 6,3 Гц), 4,87-
4,83 (дд, 1Н, 1=10,2, 3,1 Гц), 4,8-4,67 (м, 1Н), 4,67 (с, 2Н), 3,87 (с, 3Н), 3,44-3,37 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,5 Гц), 3,2-3,0 (м, 3н), 2,6-2,3 (м, 3Н),
1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,25 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,14-1,12 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,76-0,73 (т, 6Н, 1=5,5 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СЭС1) δ 177,7, 170,7,
170,5, 165,4, 153,8, 142,0, 140,5, 135,9, 131,3,
130.7, 130,0, 129,9, 128,1, 127,1, 126,1, 124,5,
122,2, 112,2, 77,0, 71,3, 64,6, 56,0, 54,6, 46,4,
42.7, 42,1, 39,4, 36,4, 35,2, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,2;
ИК (СНС13) 3423, 3011, 2965, 2935, 2874, 2841, 1747, 1712, 1681, 1652, 1528, 1503, 1485, 1442, 1371, 1303, 1259, 1151 см-1.
Элементн. анализ: (С37Н47С1И208) С, Н, N.
Пример 64.
К раствору спирта 29 (0,13 г, 0,19 ммоль) в 2,0 мл ТГФ добавляют по каплям трифенилфосфин (0,065 г, 0,25 ммоль), фталимид (0,037 г, 0,25 ммоль) и, наконец, диэтилазодикарбоксилат (БЕАБ) (0,04 мл, 0,25 ммоль). Получающийся в результате желтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч и добавляют Н20 (10 мл) и СН2С12 (10 мл). Водный слой экстрагируют СН2С12 (2х1 0 мл) и объединенные органические слои сушат над М§804, фильтруют и концентрируют в вакууме. Получающийся в результате остаток очищают посредством радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 50-60-70% Е!0Ас в гексане) и получают фталимид 30 (0,14 г) в виде белого твердого вещества с выходом 90%.
[α]20 ο +19,2° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,9-7,8 (м, 2Н),
7,72-7,69 (м, 2Н), 7,39-7,36 (д, 2Н, 1=8,0 Гц),
7,28-7,26 (д, 2Н, 1=5,3 Гц), 7,25-7,2 (м, 1Н), 7,197,18 (д, 1Н, 1=1,9 Гц), 7,06-7,03 (дд, 1Н, 1=8,5,
1,9 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,81-6,7 (м,
1Н), 6,39-6,33 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,01-5,93 (дд,
1Н, 1=15,8, 8,8 Гц), 5,75-5,7 (д, 1Н, 1=15,4 Гц),
5,47-5,44 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,05-5,0 (дд, 1Н, 1=
9.4, 6,3 Гц), 4,8 (с, 2Н), 4,83-4,7 (м, 2Н), 3,87 (с, 3Н), 3,4-3,36 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,18-3,02 (м, 3Н), 2,6-2,25 (м, 3Н), 1,65-1,5 (м, 2Н), 1,35-
1,22 (м, 1Н), 1,21 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н), 1,12-1,09 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,71-0,69 (д, 3Н, 1=6,4 Гц), 0,65-0,63 (д, 3Н, 1=6,4 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,8, 170,5,
170.4, 167,8, 165,2, 153,9, 142,0, 136,3, 135,6,
133,9, 131,9, 131,1, 130,7, 130,6, 129,8, 128,9,
128,6, 128,5, 128,1, 126,3, 124,6, 123,2, 122,3,
112,2, 76,9, 71,3, 56,0, 54,5, 46,4, 42,6, 42,1, 41,2,
39.4, 36,4, 35,2, 24,4, 22,8, 22,6, 22,5, 21,1, 17,2;
ИК (СНС13) 3421, 2967, 2935, 2873, 2840, 1747, 1716, 1682, 1527, 1503, 1485, 1433, 1395, 1259, 1151 см1.
Пример 65.
К фталимиду 30 (0,1 г, 0,123 ммоль) в 1,8 мл ЕЮН добавляют н-бутиламин (0,04 мл, 0,369 ммоль). Раствор греют при 75°С в течение 2 суток, концентрируют в вакууме и очищают посредством радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 10-25% МеОН в СН2С12) и получают свободный амин 31 (0,048 г) с выходом 57%.
Пример 66.
К Н-(трет-бутоксикарбонил)саркозинату (0,07 г, 0,37 ммоль) в 1,5 мл ДМФА добавляют гидрат 1-гидроксибензотриазола (НОВТ) (0,05 г, 0,37 ммоль) и гидрохлорид 1 -(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (ЕЭС1) (0,071 г, 0,37 ммоль). После перемешивания в течение 45 мин при комнатной температуре к раствору по каплям через двойную иглу добавляют амин 31 (0,17 г, 0,25 ммоль) в 2,5 мл ДМФА. Получающуюся в результате смесь перемешивают еще в течение 3 ч, добавляют Н2О (10 мл) и экстрагируют СН2С12 (3х10 мл). Объединенные органические экстракты сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка получающегося сырого продукта посредством радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 70-80100% ЕЮАс в гексане) дает нужный амид 32 (0,15 г) в виде белого твердого вещества с выходом 71%.
[α]20 ο +22,4° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,27-7,1 (м, 6Н), 7,04-7,0 (дд, 1Н, 1= 8,5, 1,9 Гц), 6,82-6,79 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,79-6,65 (м, 1Н), 6,38-6,32 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,3-6,2 (ушс, 1Н), 6,01-5,93 (дд, 1Н, 1=15,9, 8,7 Гц), 5,75-5,70 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,65-
5,6 (м, 1Н), 5,0-4,99 (дд, 1Н, 1=9,3, 6,1 Гц), 4,84-
4,79 (дд, 1Н, 1=9,6, 3,6 Гц), 4,74-4,67 (м, 1Н),
4,42-4,4 (д, 2Н, 1=5,7 Гц), 3,87 (с, 2Н), 3,84 (с,
3Н), 3,42-3,34 (дд, 1Н, 1=13, 5, 8,6 Гц), 3,15-3,0 (м, 3Н), 2,9 (с, 3Н), 2,6-2,25 (м, 3Н), 1,8-1,5 (м, 2Н), 1,4 (с, 9Н), 1,39-1,25 (м, 1Н), 1,19 (с, 3Н),
1,12 (с, 3Н), 1,1-1,08 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,73-0,72 (д, 3Н, 1=4,4 Гц), 0,71-0,69 (д, 3Н, 1=4,3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,7, 170,5,
170,4, 169,2, 165,2, 153,9, 141,9, 137,3, 136,0,
131,1, 130,7, 130,3, 129,8, 128,6, 128,1, 127,7,
126,3, 124,6, 122,3, 112,2, 80,6, 76,9, 71,3, 56,0,
54,5, 53,1, 46,4, 42,8, 42,7, 42,0, 39,4, 36,4, 35,8,
35,2, 28,2, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,1;
ИК (СНС13) 3427, 2967, 2935, 2874, 2841, 1747, 1680, 1526, 1504, 1484, 1464, 1442, 1393, 1369, 1302, 1281, 1259, 1151, 1067;
Пример 67.
Амид 32 (0,34 г, 0,398 ммоль) эпоксидируют с использованием тСРВА (0,072 г, 0,42 ммоль) в 1,2 мл СН2С12 в соответствии с описанной ранее процедурой для получения β- и αэпоксидов в соотношении 2:1. Получающуюся в результате смесь сырых эпоксидов (0,3 г, 0,345 ммоль) растворяют в СНС13 и охлаждают до -60°С. Добавляют ТМ8С1 (0,22 мл, 1,73 ммоль) и раствор перемешивают при температуре от -50 до -20°С в течение 2 ч. Добавляют еще ТМ8С1 (0,44 мл, 0,173 ммоль) и раствор нагревают до комнатной температуры. Раствор концентрируют в вакууме и получающийся в результате продукт дважды очищают колоночной хроматографией (70-80% ЕЮАс в гексане) и дважды радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 2-5% МеОН в СН2С12) и получают трансхлоргидрин 34 (0,1 г) в виде белого твердого вещества с выходом 48%.
[α]20 ο +46,9° (с 0,85, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ 7,36-7,34 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,29-7,26 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,21 (с, 2Н), 7,08-7,05 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 6,86-6,83 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,8-6,7 (м, 1Н), 6,5-6,2 (ушс, 1Н), 5,79-
5,74 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,64-5,62 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 5,18-5,12 (т, 1Н, 1=9,1 Гц), 4,94-4,9 (дд, 1Н, 1=9,9, 3,5 Гц), 4,8-4,67 (м, 1Н), 4,66-4,63 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 4,47-4,45 (д, 2Н, 1=5,3 Гц), 4,02-3,9,8 (д, 1Н, 1=9,5 Гц), 3,89 (с, 2Н), 3,88 (с, 3Н), 3,41-
3,34 (дд, 1Н, 1=13,6, 8,5 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,94 (с, 3Н), 2,69-2,68 (ушдд, 1Н, 1=14,3, 2,1 Гц),
2,51-2,3 (м, 2Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,42 (с, 10Н),
1,22 (с, 3Н), 1,17 (с, 3Н), 1,03-1,01 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,94-0,9 (т, 6Н, 1=5,5Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,6, 170,4,
170.2, 165,2, 153,9, 142,4, 139,1, 130,8, 129,7,
128.3, 128,2, 127,9, 124,4, 122,4, 112,2, 80,7, 76,1,
73,9, 71,2, 61,8, 56,1, 54,4, 53,1, 46,4, 42,7, 39,6,
38.4, 36,3, 35,9, 35,2, 28,2, 24,8, 23,0, 22,9, 22,7,
21.5, 8,5;
100
ИК (КВг) 3419, 3317, 2964, 2932, 1755, 1670, 1538, 1504, 1473, 1392, 1368, 1301, 1258, 1151, 1066.
М.-с. выс.разреш., РАВ [М + Н], вычисл. для (С45Нб2С1^4Оп) 905,3870, найдено 905,3876.
Пример 68.
Гидрохлорид 35 (0,041 г) амина с ВОСзащитной группой 34 (0,045 г, 0,05 ммоль) получают с количественным выходом по ранее описанной процедуре с использованием 4М раствора НС1 в 1,4-диоксане.
1Н ЯМР (300 МГц, МеОЭ) δ 8,47-8,45 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 7,79-7,76 (д, 1Н, 1=8,9 Гц), 7,39-
7,36 (д, 2Н, 1=8,1 Гц), 7,3-7,27(д, 3Н, 1=9,0 Гц),
7,17-7,14 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,98-6,95 (д, 1Н, 1=
8,5 Гц), 6,75-6,6 (м, 1Н), 5,94-5,89 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,2-5,0 (м, 2Н), 4,78-4,75 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 4,5-4,42 (м, 1Н), 4,41 (с, 2Н), 4,01-3,98 (д, 1Н, 1=9,5 Гц), 3,82 (с, 3Н), 3,8 (с, 2Н), 3,5-3,4 (м, 1Н), 3,19-3,13 (дд, 1Н, 1=14,4, 3,4 Гц), 3,11-3,06 (дд, 1Н, 1=13,2, 1,9 Гц), 2,8-2,6 (м, 2Н), 2,7 (с, 3Н), 2,5-2,2 (м,2Н), 1,85-1,45 (м, 3Н), 1,3-1,2 (м, 1Н), 1,2 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,0-0,94 (к, 9Н, 1=11,3, 6,0 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 178,9, 173,7,
171,9, 168,3, 166,3, 155,4, 144,2, 140,5, 139,7,
132,2, 131,5, 129,7, 129,4, 128,8, 125,2, 123,3,
113,5, 77,2, 74,7, 72,6, 63,7, 57,6, 56,6, 50,7, 47,4,
44,1, 43,9, 41,1, 40,4, 37,8, 36,5, 33,7, 26,2, 23,6,
23,4, 22,1, 9,0;
ИК (КВг) 3410, 3058, 2961, 2933, 1752, 1721, 1675, 1539, 1504, 1463, 1440, 1282, 1259, 1196, 1154, 1127, 1066.
Суспензию гидрида натрия (60% суспензия) (0,041 г, 1,0 ммоль) и 4-карбометоксибензилтрифенилфосфонийбромид (0,5 г, 1,0 ммоль) в 10 мл ТГФ греют при 65°С в течение 1 ч и охлаждают снова до комнатной температуры. Эту оранжевую смесь по каплям добавляют к альдегиду 18 (0,46 г, 0,79 ммоль) в ТГФ (10 мл) при -78°С. Получающийся в результате раствор нагревают до комнатной температуры, перемешивают еще в течение 2 ч и заливают насыщенным раствором Ν^Ο (30 мл) и ЕЮАс (30 мл). Слои разделяют и водный слой также экстрагируют ЕЮЛс (2х20 мл). Объединенные органические экстракты промывают рассолом (30 мл), сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой стирол очищают колоночной хроматографией (силикагель, 50-65%
ЕЮАс в гексане) и получают чистый стирол (0,129 г) с выходом 23%.
[α]20 ο +29,7° (с 1,15, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 8,03-8,0 (д, 2Н, 1=8,2 Гц), 7,44-7,41 (д, 2Н, 1=8,3 Гц), 7,3-7,25 (м, 1Н), 7,24-7,23 (д, 1Н, 1=1, 6 Гц), 7,11-7,08 (дд, 1Н, 1=8,3, 1,9 Гц), 6,89-6,86 (д, 1Н, 1=8,5 Гц),
6,86-6,8 (м, 1Н), 6,52-6,46 (д, 1Н, 1=15, 9 Гц),
6,23-6,15 (дд, 1Н, 1=15,8, 8,8 Гц), 5,83-5,8 (д, 1Н, 1=15,3 Гц), 5,64-5,61 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,14-5,09 (дд, 1Н, 1=9,4, 6,5 Гц), 4,91-4,87 (дд, 1Н, 1=10,2,
3,6 Гц), 4,85-4,75 (м, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 3,91 (с, 3Н) , 3,5-3,4 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,7 Гц), 3,2-3,1 (м, 3Н), 2,9-2,3 (м, 3Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,3 (м, 1Н), 1,26 (с, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,2-1,18 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,8-0,78 (д, 3Н, 1=5,6 Гц), 0,78-0,76 (д, 3Н, 1=6,0 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 177,8, 170,4,
166,7, 165,1, 153,9, 141,8, 141,1, 133,1, 130,8,
129,9, 129,7, 128,9, 128,2, 125,9, 124,6, 122,4,
112,2, 76,8, 71,3, 56,0, 54,4, 52,0, 46,4, 42,7, 42,2,
39,5, 36,5, 35,2, 24,5, 22,8, 22,6, 21,2, 17,1;
ИК (СНС13) 3424, 2964, 2936, 2874, 2841, 1748, 1716, 1681, 1608, 1528, 1503, 1485, 1437, 1283, 1259 см-1.
Элементн. анализ: (С38Н47СШ2О9) С, Н, Ν.
К стиролу (показан выше) (0,42 г, 0,59 ммоль) добавляют 30 мл ацетона, 15 мл Н2О, 1,5 мл СН2С12 и твердый №11СО3 (1,7 г, 20,2 ммоль) и смесь охлаждают до 0°С. Готовят раствор оксона (1,4 г, 2,3 ммоль) в 12 мл Н2О и добавляют (2 мл) к охлажденной смеси со стиролом. После энергичного перемешивания в течение 30 мин при 0°С добавляют еще 2 мл раствора оксона и раствор нагревают до комнатной температуры. Добавляют по 2 мл раствора оксона каждые 2 ч до тех пор, пока не израсходуют 12 мл. Всю реакционную смесь перемешивают 5 ч и заливают насыщенным водным раствором №11СО3 (50 мл) и 50 мл СН2С12. Слои разделяют и органический слой промывают водным 10% раствором №:8О3 (50 мл), затем насыщенным водным раствором №11СО3 (50 мл), затем рассолом и, в завершение, сушат над №:8О.|, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырую смесь очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (45:55, СН3С№Н2О) и получают 0,14 г (выход 33%) βи α-эпоксидов и 0,14 г смеси бисэпоксидирования. Смесь β/α-эпоксидов (0,14 г, 0,19 ммоль) растворяют в 3,0 мл СН2С12 и охлаждают до -60°С. К охлажденному до -60°С раствору добавляют хлортриметилсилан (0,1 мл, 0,77 ммоль) и смесь перемешивают в течение 1,5 ч.
Добавляют к раствору еще ТМ8С1 (0,1 мл, 0,77 ммоль) и раствор нагревают до комнатной тем101
102 пературы. После 1 часового перемешивания при комнатной температуре раствор концентрируют и очищают радиальной препаративной ТСХ (12% МеОН в СН2С12) и получают 0.044 г (выход 30%) нужного хлоргидрина (показанного выше) в виде белого твердого вещества.
[α]20η +50.0° (с 0.75. СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СИС13) δ 8,1-8,08 (д, 2Н, 1=8.1 Гц), 7.54-7,51 (д, 2Н, 1=8.2 Гц), 7.3-7.25 (м, 1Н). 7,25 (с, 1Н), 7.13-7.09 (дд, 1Н, 1=8.5. 1.5 Гц), 6,91-6,88 (д, 1Н, 1=8. 3 Гц), 6.87-6.78 (м, 1Н), 5,86-5,8 (д, 1Н, 1=15.5 Гц), 5.7-5.6 (м, 1Н).
5.24-5.18 (т, 1Н, 1=9.2 Гц), 4,99-4,95 (дд, 1Н, 1=10.0. 3.6 Гц), 4.8-4.7 (м, 1Н). 4,76-4,73 (д, 1Н, 1=9.5 Гц), 4.09-4.06 (д, 1Н, 1=9.6 Гц), 3,97 (с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 3.45-3.38 (дд, 1Н. 1=13.6. 8.6 Гц), 3.25-3,0 (м, 3Н), 2,75-2,62 (м, 1Н), 2.6-2.4 (м, 2Н). 1.9-1.6 (м, 3Н). 1.5-1,4 (м, 1Н), 1,27 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1.1-1.07 (д, 3Н, 1=6.95 Гц), 0.98-0.95 (т, 6Н, 1=5,3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИС13) δ 177.5. 170.6.
170.3. 166.3. 165.4. 153.9. 143.8. 142.2. 138.7.
130.7. 130.4. 129.9 128.1. 128.08. 124.6. 122.3.
112.2. 76.1. 73.8. 71.1. 61.4. 56.0. 54.6. 52.2. 46.4.
42.7. 39.6. 38.4. 36.3. 35.1. 24.8. 23.0. 22.9. 22.7.
21.5. 8.7;
ИК (СНС13) 3425. 2962. 2935. 2873. 2842. 1750. 1720. 1680. 1528. 1504. 1484. 1438. 1284. 1259. 1194. 1152. 1114. 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С38Н48С1^2О10) С, Н, Ν.
Пример 71.
К охлажденному до 0°С раствору спирта 23 (0.32 г, 0.46 ммоль) в 8.5 мл СН2С12 добавляют твердый ИаНСО3 (0.19 г, 2.29 ммоль), трифенилфосфин (0.18 г, 0.69 ммоль) и, в завершение, Ν-хлорсукцинимид (0.092 г, 0.69 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 20 мин и заливают водн. насыщ. раствором ИаНСО3 (20 мл). Слои разделяют и водный слой экстрагируют СН2С12 (3х10 мл). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над \а25О|. фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырое твердое желтое вещество очищают посредством радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 20-50% Б1ОАс в гексане) и получают 0.26 г бензилхлорида 36 с выходом 79% в виде белого твердого вещества.
[α]20η +25.6° (с 0.9. СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СИС13) δ 7,4-7,38 (д, 2Н, 1=7. 9 Гц), 7.26-7,23 (д, 3Н, 1=8.3 Гц), 7.19-7.18 (д, 1Н, 1=1. 9 Гц), 7,06-7,03 (дд. 1Н. 1=8.3. 1.9 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8.4 Гц), 6.8-6.7 (м, 1Н). 5,74-5,69 (д, 1Н, 1=15.4 Гц), 5.49-5.47 (д, 1Н, 1=7.8 Гц), 5,22-5,17 (м, 1н), 4,85-4,8 (дд, 1Н, 1=9.7. 3.0 Гц), 4,78-4,7 (м, 1Н). 4,6 (с, 2Н), 3,9 (с,
3Н), 3.69-3.68 (д, 1Н. 1=1.3 Гц), 3.45-3,38 (дд, 1Н, 1=13.4. 8.6 Гц), 3.2-3.0 (м, 3Н). 2.92-2.89 (дд, 1Н. 1=7.6. 1.6 Гц), 2,6-2,4 (м, 2Н), 1.8-1.6 (м, 3Н). 1.4-1.3 (м, 1Н). 1,22 (с, 3н), 1,16 (с, 3Н), 1.16-
1.13 (д, 3Н, 1=8.6 Гц), 0.86-0.82 (т, 6Н, 1=6.8 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИС13) δ 177.8. 175.1.
170.3. 164.9. 154.0. 141.6. 137.7. 137.1. 130.8.
129.5. 128.9. 128.1. 125.9. 124.6. 122.4. 112.3.
77.2. 75.8. 71.1. 63.1. 58.5. 56.1. 54.4. 46.4. 45.7.
42.7. 40.5. 39.3. 36.8. 35.2. 24.5. 22.8. 22.6. 21.2. 13.5;
ИК (СНС13) 3416. 3284. 2961. 2933. 2873. 2839. 1752. 1721. 1680. 1658. 1536. 1504. 1473. 1442. 1321. 1302. 1281. 1259. 1192. 1150. 1126. 1066 см-1.
Элементн. анализ: (С37Н46С1^2О8) С, Н, Ν.
Пример 72.
К бензилхлориду 36 (0.03 г, 0.42 ммоль) в 0.3 мл ТГФ добавляют диэтиламин (0.09 г, 0.84 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и заливают насыщ. водным раствором ИаНСО3 (5 мл). Водный слой экстрагируют СН2С12 (3х5 мл). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над Ж28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырое желтое твердое вещество очищают посредством радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 50-70-80% Б1ОАс в гексане) и получают 0.026 г амина 37 с выходом 82% в виде белого твердого вещества.
[ос]20в +25.9° (с 0.9. СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СИС13) δ 7,35-7,32 (д, 2Н, 1=7.9 Гц), 7.25-7,12 (м, 4Н), 7,06-7,02 (дд, 1Н, 1=8.4. 1.6 Гц), 6.84-6.82 (д, 1Н, 1=8.5 Гц), 6,82-6,7 (м, 1Н), 5.74-5.69 (д, 1Н, 1=15.2 Гц),
5.57-5,55 (д, 1Н, 1=-7.8 Гц), 5. 22-5.17 (м, 1н). 4.85-4.7 (м, 2Н). 3.86 (с, 3Н), 3,66 (с, 1Н), 3,57 (с, 2Н), 3.46-3.38 (дд, 1Н, 1=13.4. 8.7 Гц), 3.2-3.0 (м, 3Н). 2,93-2,91 (д, 1Н, 1=7.4 Гц), 2.6-2.4 (м, 6Н).
1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,3 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1.15-1,12 (д, 3Н, 1=9.2 Гц), 1.07-1.03 (т, 6Н, 1=7.1 Гц), 0.86-0.82 (т, 6Н, 1=6.3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИС13) δ 177.9. 170.4.
170.3. 164.9. 154.0. 141.7. 140.1. 135.2. 130.8.
129.6. 129.1. 128.1. 125.4. 124.6. 122.4. 112.3.
77.2. 75.8. 71.1. 62.9. 58.9. 57.1. 56.0. 54.4. 46.6.
46.4. 42.7. 40.6. 39.3. 36.8. 35.2. 24.5. 22.8. 22.6.
21.2. 13.5. 11.5;
ИК (СНС13) 3424. 2969. 2936. 2874. 1752. 1711. 1682. 1605. 1527. 1503. 1485. 1303. 1259. 1190. 1151. 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С41Н56С1И3О8) С, Н, Ν.
103
104
К охлажденному до -66°С раствору эпоксида 37 (0,05 г, 0,066 ммоль) в 0,8 мл СНС13 добавляют по каплям 4М раствор НС1 в 1,4диоксане (0,04 мл, 0,16 ммоль). Смесь перемешивают при -66°С в течение 10 мин, после чего баню с сухим льдом удаляют, позволяя раствору постепенно нагреваться до комнатной температуры. Растворители удаляют в вакууме, а получающуюся в результате соль помещают в высокий вакуум на 3 суток для удаления оставшегося диоксана и получают, в итоге, 0,054 г нужного хлоргидрина 38 только с количественным выходом.
[α]20 ο +29,3° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, МеОИ) δ 8,5-8,47 (д, 1Н, 1=7,5 Гц), 7,79-7,76 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 7,53 (с, 4Н), 7,26-7,25 (д, 1Н, 1=1,6 Гц), 7,17-7,14 (дд, 1Н, 1=8,6, 1,6Гц), 6,97-6,94 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,75-6,6 (м, 1Н), 5,96-5,90 (д, 1Н, 1=15,3 Гц), 5,25,0 (м, 2Н), 4,85-4,82 (д, 1Н, 1=8,9 Гц), 4,5-4,4 (м, 1Н), 4,33 (с, 2Н), 4,02-3,98 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 3,8 (с, 3Н), 3,49-3,42 (дд, 1Н, 1=13,3, 9,9 Гц), 3,2-3,0 (м, 6Н), 2,8-2,6 (м, 2Н), 2,5-2,2 (м, 2Н), 1,8-1,5 (м, 3Н), 1,34-1,3 (м, 7Н), 1,2 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,01-0,99 (д, 3Н, 1=7,2 Гц), 0,98-0,94 (т, 6Н, 1=5,4 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СБС13) δ 178,9, 173,8,
171,8, 168,3, 155,4, 144,1, 143,4, 132,3, 132,2,
131,5, 131,1, 130,4, 129,4, 125,2, 123,3, 113,5,
77,2, 74,8, 72,6, 63,2, 57,6, 56,7, 56,66, 48,0, 47,5,
44,1, 41,1, 40,4, 37,8, 36,5, 26,2, 23,6, 23,4, 22,2, 9,07, 9,0;
ИК (КВг) 3414, 2960, 2934, 1751, 1721, 1671, 1521, 1504, 1463, 1443, 1259, 1197, 1155, 1127, 1065 см-1.
Эпоксид (показанный выше) (0,147 г) получают с выходом 81% по вышеописанной процедуре из бензилхлорида 36 (0,15 г, 0,21 ммоль) и ^(трет-бутоксикарбонил^иперазина (0,195 г, 1,05 ммоль).
[α]20 ο +25,4° (с 0,65, СНСБ);
1Н ЯМР (300 МГц, СИСЬ) δ 7,37-7,23 (м, 5Н), 7,11-7,08 (д, 1Η, 1=8,6 Гц), 6,9-6,87 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,86-6,72 (м, 1Н), 5,78-5,73 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,53-5,5 (д, 1Η, 1=7,7 Гц), 5,28-5,23 (м, 1Н), 4,88-4,70 (м, 2Н), 3,9 (с, 3Н), 3,7 (с, 2Н),
3,54 (с, 2Н), 3,5-3,4 (м, 5Н), 3,2-3,05 (м, 3Н), 3,0-
2,95 (д, 1Η, 1=7,4 Гц), 2,65-2,4 (м, 6Н), 1,85-1,6 (м, 3Н), 1,5 (с, 9Н), 1,45-1,4 (м, 1Η), 1,27 (с, 3Н),
1,2 (с, 3Н), 1,2-1,18 (д, 3Н, 1=8,3 Гц), 0,91-0,87 (т, 6Н, 1= 6,1 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИСЬ) δ 177,9, 170,3, 170,26, 164,9, 154,7, 154,0, 141,7, 138,4, 135,6,
130,8, 129,5, 129,3, 128,1, 125,5, 124,6, 122,4,
112,3, 79,5, 77,2, 75,8, 71,1, 62,9, 62,6, 58,8, 56,1,
54.4, 52,8, 46,3, 42,7, 40,6, 39,3, 36,7, 35,2, 28,3,
24.5, 22,8, 22,6, 21,2, 13,4;
ИК (СНС13) 3425, 3008, 2965, 2937, 2874, 2817, 1752, 1709, 1683, 1527, 1484, 1463, 1459, 1427, 1367, 1259, 1167, 1150 см-1.
М.-с. выс.разреш., ГАВ [М - ВОС], для (С46Н64СШ4О10) вычислено 867,4311, найдено 867,4300.
Пример 75.
К охлажденному до -66°С раствору эпоксида (показанного выше) (0,135 г, 0,156 ммоль) в 3,0 мл СНС13 добавляют по каплям триметилсилилхлорид (0,16 мл, 1,2 ммоль). Смесь перемешивают при -66°С в течение 2 ч и добавляют еще ТМ8С1 (0,16 мл, 1,2 мл). После выдержки при -66°С еще в течение 1 ч баню со льдом удаляют и раствор постепенно нагревают до комнатной температуры. Растворители удаляют в вакууме, а получающееся в результате твердое вещество очищают радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 2-5% МеОН с СИ2С12) и получают 0,13 г хлоргидрина (показанного выше) с выходом 92%.
[α]20 ο +50,0° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СИС13) δ 7,34 (с, 4Н),
7,21-7,2 (д, 1Н, 1=1,4 Гц), 7,08-7,05 (дд, 1Н, 1=8,6, 1,6 Гц), 6,86-6,83 (д, 1Н, 1= 8,4 Гц), 6,82-
6,7 (м, 1Н), 5,8-5,75 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,65-5,62 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,2-5,1 (м, 1Н), 5,0-4,7 (м, 2Н),
4,66-4,63 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,02-4,0 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 3,88 (с, 3Н), 3,49-3,48 (д, 2Н, 1=4,2 Гц),
3,45-3,3 (м, 5Н), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,7-2,3 (м, 7Н),
1,8-1,6 (м, 3Н), 1,45 (с, 10Н), 1,23 (с, 3Н), 1,17 (с, 3Н), 1,04-1,02 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,93-0,91 (д, 6Н, 1=6,3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СИСЬ) δ 177,5, 170,5,
170,2, 165,2, 154,6, 153,9, 142,3, 139,1, 137,3,
130.8, 129,8, 129,5, 128,1, 127,9, 124,5, 122,3,
112,5, 79,5, 76,0, 73,9, 71,1, 62,4, 61,9, 56,1, 54,5,
52.8, 46,4, 42,7, 39,6, 38,4, 36.4, 35,2, 28,3, 24,7, 23,0, 22,9, 22,7, 21,5, 8,6;
ИК (СНС13) 3424, 3007, 2966, 2936, 2872, 2820, 1751, 1712, 1682, 1528, 1504, 1483, 1426, 1367, 1259, 1168, 1150, 1127, 1067, 1006 см-1.
Элементн. анализ: (С^Н^СЦ^О^) С, Н, Ν.
Пример 76.
105
106
Дигидрохлориды (0,116 г) пиперазина с защитной ВОС-группой (0,122 г, 0,13 ммоль) получают с количественным выходом по описанной ранее процедуре с использованием 4М НС1 в 1,4-диоксане (0,32 мл, 1,3 ммоль).
[α]20η +26,3° (с 0,7, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, МеОО) δ 8,47-8,45 (д, 1Н, 1=7,5 Гц), 7,78-7,75 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 7,6-
7,52 (к, 4Н, 1=16,9, 7,9 Гц), 7,27-7,26 (д, 1Н, 1=1,15 Гц), 7,18-7,14 (дд, 1Н, 1=8,6, 1,8 Гц), 6,98-
6,95 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,75-6,6 (м, 1Н), 5,95-5,9 (д, 1Н, 1=15,4 Гц), 5,2-5,0 (м, 2Н), 4,85-4,82 (д, 1Н, 1=9,9 Гц), 4,5-4,4 (м, 1Н), 4,4 (с, 2Н), 4,0-3,98 (д, 1Н, 1=9,3 Гц), 3,8 (с, 3Н), 3,6-3,4 (м, 9Н), 3,32-3,29 (д, 1Н, 1=11,3 Гц), 3,19-3,13 (дд, 1Н, 1=14,8, 3,5 Гц), 3,1-3,06 (д, 1Н, 1=13,7 Гц), 2,8-
2,6 (м, 2Н), 2,5-2,3 (м,2н), 1,85-1,5 (м, 3Н), 1,3-
1,2 (м, 1Н), 1,2 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н), 1,02-0,95 (к, 9Н, 1=13,4, 6,3 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СОС1э) δ 178,8, 173,7,
171,9, 168,3, 155,4, 144,2, 143,7, 132,8, 132,2,
131,5, 130,4, 129,9, 129,4, 125,2, 123,3, 113,5,
77,2, 74,8, 72,6, 63,1, 61,2, 57,6, 56,7, 49,2, 47,5,
44.1, 42,1, 41,1, 40,3, 37,8, 36,5, 26,3, 23,7, 23,4,
22.2, 9,0;
ИК (КВг) 3415, 2960, 2933, 2455, 1749, 1721, 1671, 1504, 1475, 1442, 1304, 1258, 1197, 1152, 1126, 1065, 1012 см-1.
М.-с. выс. разреш., ЕАВ [М - НС12], для (С41Н57С12Ы4О8) вычислено 803,3553, найдено 803,3563.
Эпоксид (показанный выше) (0,15 г) получают с выходом 78% по описанной ранее процедуре из бензилхлорида 36 (0,16 г, 0,22 ммоль) и трет-бутил-Ы-(2-аминоэтил)карбамата (0,35 г, 2,22 ммоль).
[α]20η +22,3° (с 1,0, СНС13);
1Н-ЯМР (300 МГц, СОС1э) δ 7,41-7,38 (д, 2Н, 1=7,8 Гц), 7,31 (с, 1Н), 7,26-7,24 (д, 3Н, 1=8,0 Гц), 7,11-7,08 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,7 Гц), 6,88-6,86 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,86-6,72 (м, 1н), 5,88-5,8 (ушс, 1Н), 5,78-5,73 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,28-5,22 (м, 1Н), 5,2-5,08 (ушс, 1Н), 4,95-4,7 (м, 2Н), 3,91 (с, 3Н), 3,87 (с, 2Н), 3,7 (с, 1Н), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,4 Гц), 3,35-3,0 (м, 5Н), 2,96-2,93 (дд, 1Н, 1=7,5, 1,2 Гц), 2,89-2,78 (м, 2Н), 2,65-2,4 (м, 2Н), 1,85-1,65 (м, 3Н), 1,49 (с, 9Н), 1,48-1,3 (м, 1Н), 1,27 (с, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,19-1,17 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 0, 91-0,87 (т, 6Н, 1=6,8 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СОС1э) δ 177,7, 170,4, 165,06, 156,0, 153,9, 141,5, 139,9, 135,6, 130,7,
129,7, 128,5, 128,1, 125,6, 124,7, 122,3, 112,2,
77.2, 75,7, 71,0, 63,0, 58,8, 56,0, 54,5, 52,9, 48,5,
46.3, 42,7, 40,5, 39,3, 36,8, 35,2, 28,3, 24,5, 22,83,
22,8, 22,6, 21,2, 13,5;
ИК (СНС13) 3425, 3009, 2967, 2936, 2874, 2841, 1751, 1709, 1685, 1504, 1368, 1280, 1259, 1165, 1153, 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С44Н61С1Ы4О10) С, Н, Ы.
сида (показанного выше) (0,065 г, 0,076 ммоль) в 0,9 мл СН2С12 добавляют по каплям 4М раствор НС1 в 1,4-диоксане (0,09 мл, 0,38 ммоль). Раствор перемешивают при -78°С в течение 30 мин и затем постепенно нагревают до комнатной температуры. Перемешивают его еще в течение 2 ч при комнатной температуре и концентрируют в вакууме и получают хлоргидрин (показанный выше) (0,063 г) с количественным выходом.
[α]20η +16,6° (с 1,0, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СОС1э) δ 8,54-8,52 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 7,84-7,81 (дд, 1Н, 1=8,8, 1,7 Гц),
7,63-7,53 (к, 4Н, 1=20,0, 8,2 Гц), 7,31-7,3 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,22-7,18 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,02-
6,99 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,8-6,7 (м, 1Н), 6, 0-5,92 (д, 1Н, 1=15,0 Гц), 5,2-5,0 (м, 2Н), 4,9-4,8 (м, 1Н), 4,6-4,4 (м, 1Н), 4,3 (с, 2Н), 4,07-4,03 (дд, 1Н, 1=9,5, 1,4 Гц), 3,86 (с, 3Н), 3,6-3,1 (м, 7Н), 2,82-
2,7 (м, 2Н), 2,6-2,3 (м, 2Н), 1,9-1,6 (м, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,2 (с, 3Н), 1,05-0,99 (м, 9Н);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 178,8, 173,8,
171,9, 168,3, 155,3, 144,2, 143,1, 132,2, 131,5,
131,4, 130,3, 129,4, 125,2, 123,2, 113,5, 77,2, 74,7,
72,6, 63,2, 57,6, 56,7, 52,4, 47,5, 45,5, 44,1, 41,1,
40,3, 37,8, 36,9, 36,5, 26,3, 23,7, 23,5, 22,2, 9,0;
ИК (КВг) 3412, 2961, 2933, 1749, 1721, 1663, 1504, 1462, 1442, 1259, 1199, 1152, 1126, 1065 см-1.
М.-с. выс. разреш., ЕАВ [М - НС12], для (С39Н55С12Ы4О8) вычислено 777,3397, найдено 777,3407.
Пример 79.
Из альдегида 18 (1,0 г, 1,73 ммоль) и 4(этил-2-трет-бутилдиметилсилокси)бензилтрифенилфосфонийбромида (1,23 г, 2,08 ммоль) по процедуре, описанной выше для получения стирола 20, получают стирол (показанный выше) (1,2 г) в виде смеси изомеров Е и Ζ с выходом 86%.
Смесь изомеров растворяют в толуоле (50 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч в присутствии 1,1'-азобис(циклогексанкарбонитрила) (VАΖО) (0,040 г, 0,1 ммоль) и тиофенола (0,061 мл, 0,59 ммоль). После концентрирования остаток очищают радиальной
107
108 препаративной ТСХ (20-75% ЕЮАс в гексане) и получают Е-изомер (0,813 г, 68%) в виде белой пены.
|(/.|;> +35,6° (с 0,56, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,26-7,12 (м, 6Н), 7,07-7,04 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,83-6,70 (м, 1Н), 6,40-6,35 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 6,0-5,92 (дд, 1Н, 1=15,4, 8,7 Гц), 5,77-
5,72 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,46-5,43 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 5,07-5,02 (м, 1Н), 4,86-4,83 (м, 1Н), 4, 82-
4,74 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 3,78-3,74 (т, 2Н, 1=7,1 Гц), 3,44-3,37 (дд, 1Н, 1=12,5, 8,6 Гц), 3,15-3,08 (м, 3Н), 2,81-2,77 (т, 2Н, 1=7,1 Гц), 2,57-2,52 (м, 2Н), 2,43-2,35 (м, 2Н), 1,74-1,56 (м, 2Н), 1,38-
1,23 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,13-1,11 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,88 (с, 9Н), 0,84-0,72 (м, 6Н), 0,0 (с, 6Н);
13С ЯМР (75 МГц, СВС13) δ 177,9, 170,5,
170,3, 165,1, 154,0, 142,2, 138,6, 134,6, 131,5,
130,9, 129,6, 129,4, 128,2, 126,0, 125,3, 124,5,
122.5, 112,3, 92,9, 77,0, 71,4, 64,4, 56,1, 54,3,
46.5, 42,7, 42,2, 39,4, 39,2, 36,5, 35,3, 25,9, 24,5,
22,8, 22,7, 22,6, 21,2, 17,2, -5,44;
ИК (СНС13) 3423, 2959, 2931, 2858, 1747, 1712, 1681, 1605, 1527, 1503, 1485, 1442, 1370, 1339, 1303, 1281, 1258, 1194, 1151, 1095, 1067, 1025, 1007, 838 см-1.
Элементн. анализ: (С44Н63СШ2О881) С, Н, Ч.
Пиридин (0,06 мл, 0,76 ммоль), а затем реактив Десс-Мартина (0,161 г, 0,379 ммоль) добавляют при 0°С к свободному спирту стирола (показан выше) (0,135 г, 0,189 ммоль) в 4,5 мл СН2С12. Смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С, 20 мин при комнатной температуре, затем фильтруют через целит с использованием ЕЮАс и, в завершение, концентрируют в вакууме. Быстрая очистка сырого продукта посредством радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 80-100% ЕЮАс в СН2С12) дает нужный альдегид (0,08 г) с выходом 59% в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 9,77-9,76 (т, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,3-7,2 (м, 6Н), 7,06-7,02 (дд, 1Н, 1=8,3, 2,0 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,81-
6,7 (м, 1Н), 5,74-5,68 (д, 1Н, 1=15,3 Гц), 5,51-
5,48 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,22-5,17 (м, 1н), 4,85-
4,81 (дд, 1Н, 1= 10,3, 3,6 Гц), 4,77-4,71 (м, 1Н),
3,87 (с, 3Н), 3,72-3,71 (д, 2Н, 1=2,0 Гц), 3,69-3,68 (д, 1Н, 1=1,5 Гц), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,7 Гц), 3,17-3,0 (м,3Н), 2,92-2,89 (дд, 1Н, 1=7,6, 1,8 Гц), 2,6-2,4(м,2Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,3 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,16-1,13 (д, 3Н, 1=8,3 Гц), 0,86-0,82 (т, 6Н, 1=6,3 Гц).
К альдегиду (показанному выше) (0,08 г, 0,112 ммоль) добавляют тетрагидрофуран (3,2 мл) и Н2О (3,2 мл) и смесь охлаждают до 0°С. Добавляют последовательно также 2-метил-2бутен (3,2 мл), затем ЧаС1О2 (0,081 г, 0,896 ммоль) и №Н2РО4-Н2О (0,139 г, 1,0 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и энергично перемешивают в течение 5 ч. Раствор разбавляют 10 мл СН2С12 и слои разделяют. Водный слой экстрагируют СН2С12 (3х10 мл) и объединенные органические экстракты сушат над Ча28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают дважды радиальный препаративной ТСХ (силикагель, 5-1025% МеОН в СН2С12) и получают 0,03 г карбоновой кислоты (показанной выше) с выходом 37% в виде белого твердого вещества.
[α]20 ο +24,5° (с 0,33, МеОН);
1Н ЯМР (300 МГц, СВ3ОВ) δ 7,75-7,71 (дд, 1Н, 1=10,3, 1,9 Гц), 7,31-7,2 (м, 5Н), 7,16-7,13 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,97-6,95 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,8-6,6 (м, 1Н), 5,87-5,81 (д, 1Н, 1=15,3 Гц),
5,10-5,14 (дд, 1Н, 1=11,0, 5,0 Гц), 4,9-4,8 (м, 2Н),
4,48-4,43 (дд, 1Н, 1=11,5, 3,5 Гц), 3,8 (с, 3Н), 3,77 (с, 1Н), 3,53 (с, 2Н), 3,5-3,4 (м, 1Н), 3,17-3,11 (дд, 1Н, 1=14,3, 3,5 Гц), 3,05-3,0 (д, 1Н, 1=13,6 Гц), 2,55-2,92 (дд, 1Н, 1=7,7, 1,7 Гц), 2,8-2,6 (м, 2Н), 2,5-2,3 (м, 1Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,2 (м, 1Н), 1,17 (с, 3Н), 1,13 (с, 3Н), 1,13-1,1 (д, 3Н, 1=9,2 Гц), 0,83-0,81 (д, 6Н, 1=6,3 Гц);
13С ЯМР (126 МГц, СВС13) δ 178,8, 173,7, 172,0, 168,2, 155,4, 143,4, 138,1, 136,8, 132,2,
131,2, 130,8, 129,3, 126,8, 125,4, 123,3, 113,5,
77.7, 72,4, 64,4, 60,0, 57,5, 56,6, 47,4, 44,1, 41,7,
40.7, 38,6, 36,5, 25,9, 23,4, 23,3, 21,6, 14,0;
ИК (КВг) 3417, 2961, 2934, 2874, 1750, 1721, 1674, 1561, 1504, 1464, 1441, 1300, 1259, 1194, 1151, 1066 см-1.
М.-с. выс. разреш., РАВ [М + Н], для (С38Н|8С1\’2О|0) вычислено 727,2997, найдено 727,3005.
Пример 82.
К смеси [(2-метил-4-тиазолил)метил]трифенилфосфонийхлорида (0,496 г, 1,2 ммоль) в 10 мл ТГФ при -78°С добавляют по каплям 1,6М раствор н-бутиллития (0,8 мл, 1,2 ммоль). Смесь постепенно нагревают до комнатной температуры и перемешивают еще в течение 45 мин. К альдегиду 18 (0,5 г, 0,865 ммоль) в 15 мл ТГФ при -78°С добавляют по каплям оранжевый раствор илида через двойную иглу. Получающуюся
109
110 в результате смесь перемешивают в течение 2 ч при -78°С и в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Добавляют насыщенный раствор ЫН4С1 (30 мл) вместе с этилацетатом (30 мл), слои разделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом (2х20 мл). Объединенные органические слои промывают водой (2х20 мл) и рассолом, сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Получающийся в результате желтый остаток очищают с использованием колоночной хроматографии (силикагель, 50-7080% ЕЮАс в гексане) и получают 0,4 г нужного стирола вместе с трифенилфосфиноксидом. Трифенилфосфиноксид легко удаляется с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой с использованием смеси ΟΗ^Ν с Н2О (50:50), после чего получают 0,2 г (34%) чистого тиазола (показанного выше) в виде белого твердого вещества.
[α]20η +16,7° (с 1,0, СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,3-7,2 (м, 1Н), 7,18-7,17 (д, 1Н, 1=1,7 Гц), 7,06-7,03 (дд, 1Н, 1=8,5, 1,8 Гц), 6,83 (с, 1Н), 6,83-6,8 (д, 1Н, 1=9,0 Гц), 6,8-6,67 (м, 1Н), 6,37-6,35 (м, 2Н), 5,85-5,82 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,76-5,71 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,05-5,0 (дд, 1Н, 1=9,0, 6,0 Гц), 4,86-4,82 (дд, 1Н, 1=10,2, 3,6 Гц), 4,77-4,68 (м, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,44-3,37 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,2-3,0 (м, н),
2,68 (с, 3Н), 2,6-2,3 (м, 3Н), 1,8-1,6 (м, 2Н), 1,43-
1,3 (м, 1Н), 1,2 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н), 1,12-1,1 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,79-0,78 (д, 3Н, 1=3,1 Гц), 0,770,76 (д, 3Н, 1=3,1 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СВС13) δ 177,8, 170,5, 166,0, 165,2, 153,9, 153,0, 142,1, 136,7, 132,7,
130,8, 129,8, 128,1, 124,6, 124,4, 122,3, 114,1,
112,2, 76,9, 71,4, 56,0, 54,4, 46,4, 42,7, 41,9, 39,3,
36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,7, 22,6, 21,2, 19,2, 17,1;
ИК (СНС13) 3423, 3027, 3008, 2965, 2935, 2874, 1747, 1712, 1681, 1652, 1604, 1528, 1504, 1485, 1259, 1181, 1152, 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С^Н^СШЮуЗ) С, Н, N. Пример 83.
К стиролу (показанному выше) (0,25 г, 0,37 ммоль) добавляют 15 мл ацетона, 6 мл Н2О, 6 мл СН2С12 и твердый NаНСО3 (1,0 г, 11,9 ммоль) и смесь охлаждают до 0°С. Готовят раствор оксона (0,92 г, 1,5 ммоль) в 8 мл Н2О и добавляют (2 мл) к охлажденной смеси со стиролом. После 30 мин энергичного перемешивания снова добавляют еще 2 мл, после следующих 30 мин еще 2 мл, всего 6 мл раствора оксона. Развитие реакции контролируют посредством ВЭЖХ с обращенной фазой и находят, что реакция завершается после 2,5 ч перемешивания. Все еще при 0°С реакционную смесь заливают насыщенным водным раствором NаНСО3 (40 мл) и 40 мл СН2С12. Слои разделяют и органический слой промывают водным 10% раствором №28О3 (40 мл), затем насыщенным водным раствором NаНСО3 (40 мл), затем рассолом и, в завершение, сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Смесь β- и α-эпоксидов (54:46) разделяют посредством ВЭЖХ с обращенной фазой (СН3СКН2О, 50:50) и получают 0,09 г β-эпоксида (показанного выше) в виде белого твердого вещества с выходом 35%.
[α]20η +26,0° (с 1,0 СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,19-7,18 (д, 2Н, 1=1,8 Гц), 7,1 (с, 1Н), 7,06-7,03 (дд, 1Н, 1=8,5, 1, 9 Гц), 6,85-6,82 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-
6,7 (м, 1Н), 5,76-5,71 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,49-
5,47 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,23-5,18 (м, 1Н), 4,88-
4,84 (дд, 1Н, 1=10,3, 3,6 Гц), 4,8-4,7 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 3,79 (д, 1Н, 1=0,93 Гц), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц), 3,35-3,32 (д,1Н, 1=7,2 Гц), 3,2-3,0 (м, 3Н), 2,7 (с, 3Н), 2,6-2,4 (м, 2Н), 1,8-1,6 (м, 3Н), 1,4-1,3 (м, 1Н), 1,23 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н),
1,14-1,12 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 0,89-0,87 (д, 3Н, 1=6,5 Гц), 0,86-0,84 (д, 3Н, 1=6,4 Гц);
13С ЯМР (63 МГц, СБСБ) δ 177,9, 170,33,
170.3, 166,9, 165,0, 154,0, 151,9, 141,8, 130,8,
129,5, 128,2, 124,5, 122,4, 116,4, 112,3, 75,8, 71,1,
61.3, 56,1, 55,2, 54,3, 46,4, 42,7, 40,3, 39,3, 36,6,
35,2, 24,5, 22,85, 22,8, 22,6, 21,2, 19,1, 13,3;
ИК (СНС13) 3425, 3007, 2964, 2936, 2874, 2841, 1751, 1711, 1682, 1604, 1528, 1503, 1485, 1464, 1303, 1259, 1185, 1152, 1067 см-1.
Элемент. анализ: (С^НдС^О^) С, Н, N.
Пример 84.
Стирол (показанный выше) (0,5 г) получают из альдегида 18 (1,3 г, 2,2 ммоль) и 2фторбензилтрифенилфосфонийбромида (1,7 г, 3,8 ммоль) с выходом 33% по процедуре, описанной выше для получения стирола 20.
[а]20в +17,0° (с 1,16 СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ 7,40-7,34 (м, 1Н), 7,23-6,96 (м, 6Н), 6,83-6,80 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,78-6,70 (м, 1Н), 6,57-6,52 (д, 1Н, 1=16,0 Гц), 6,10-6,02 (дд, 1Н, 1=8,8, 16,0 Гц), 5,76-5,71 (д, 1Н, 1=15,3 Гц), 5,50-5,47 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 5,05-4,95 (м, 1Н), 4,85-4,80 (дд, 1Н, 1=9,6, 3,1 Гц), 4,75-4,69 (м, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,42-3,34 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,7 Гц), 3,13-3,05 (м, 3Н), 2,56-2,51 (м, 2Н), 2,37-2,33 (м,1Н), 1,68-1,58 (м, 2Н), 1,34-
1,23 (м, 1Н), 1,20 (с, 3Н), 1,13 (с, 3н), 1,13-1,11 (д, 3Н, 1=7,3 Гц), 0,79-0,70 (м, 6н);
13С ЯМР (63 МГц, СБСБ) δ 177,9, 170,5,
170.4, 165,1, 154,0, 142,0, 137,4, 133,0, 132,9,
130,8, 129,6, 128,8, 128,2, 127,0, 126,9, 124,6,
124,1, 115,9, 115,5, 112,3, 76,9, 71,4, 56,1, 54,4,
46.4, 42,7, 42,6, 39,4, 36,5, 35,3, 24,5, 22,8, 22,7,
22,6, 21,1, 17,2;
ИК (СНС13) 3423, 2965, 2935, 2874, 1747,
1711, 1681, 1605, 1527, 1503, 1487, 1457, 1441,
111
112
1370, 1340, 1321, 1280, 1259, 1151, 1093, 1067, 1009, 970 см-1.
Элементы. анализ: (С36Н44С1РК2О7) С, Н, Ν.
К раствору стирола (показанного выше) (0,26 г, 0,387 ммоль) в 1,3 мл СН2С12 при 0°С добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,07 г, 0,41 ммоль) и толуол (0,65 мл) и продолжают перемешивание при 0°С в течение 30 мин. Ледяную баню убирают и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. После концентрирования остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (СН3СЫ с Н2О) и получают β-эпоксид (показанный выше) в виде белой пены (0,058 г, 24% с исправлением на извлеченный стирол).
[α]20π +18,98° (с 1,41 СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,30-7,00 (м, 6Н), 6,86-6,83 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,80-6,75 (м,
1Н), 5,76-5,71 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,47-5,45 (д,
1Н, 1=7,8 Гц), 5,23-5,20 (м, 1Н), 4,86-4,82 (дд, 1Н, 1=10,3, 3,5 Гц), 4,78-4,70 (м,1Н), 4,01 (с, 1Н),
3,88 (с, 3Н), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,6 Гц),
3,12-3,08 (м, 3Н), 2,91-2,88 (д, 1Н, 1=7,8 Гц), 2,59-2,53 (м, 2Н), 1,80-1,71 (м, 3Н), 1,46-1,25 (м, 1Н), 1,23 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,16-1,14 (д, 3Н, 1=7,2 Гц), 0,87-0,83 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СБС13) δ 178,1, 170,5,
170.3, 165,0, 142,0, 131,0, 129,7, 129,6, 128,3,
126,1, 126,08, 124,65, 124,5, 122,6, 115,5, 115,2,
112.4, 76,0, 71,2, 62,6, 56,2, 54,4, 53,5, 46,5, 42,8,
40,6, 39,4, 36,9, 35,3, 24,7, 22,9, 22,8, 21,3, 13,8;
ИК (СНС13) 3417, 2962, 2948, 1754, 1721, 1681, 1653, 1534, 1504, 1473, 1459, 1441, 1303, 1282, 1258, 1191, 1148, 1127, 1066 см-1.
М.-с. выс. разреш., РАВ [М + Н], для (С36Н45С1РК2О8) вычислено 687,2848, найдено 687,2857.
Из альдегида 18 (2,0 г, 3,45 ммоль) и 3фторбензилтри-фенилфосфонийбромида (1,92 г, 4,25 ммоль) получают стирол (показанный выше) (0,85 г) как смесь изомеров Е и Ζ с выходом 37% по процедуре, описанной выше для получения стирола 20. Смесь изомеров растворяют в бензоле (25 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 20 ч в присутствии 1,1'азобис(циклогексанкарбонитрила) (VАΖО) (0,04 г, 0,16 ммоль) и тиофенола (0,06 мл, 0,58 ммоль). После концентрирования остаток очищают радиальной препаративной ТСХ (20-100%
ЕЮАс в гексане), и получают Е-изомер (0,652 г, 77%) в виде белой пены.
[α]20π +30,55° (с 0,98 СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,30-7,01 (м, 8Н), 6,95-6,88 (м, 1Н), 6,86-6,83 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,81-6,72 (м, 1Н), 6,40-6,35 (д, 1Н, 1=15,9 Гц), 6,07-5,99 (дд, 1Н, 1=8,8, 15,9 Гц), 5,78-5,73 (д, 1Н, 1=15,1 Гц), 5,50-5,47 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,08-5,02 (дд, 1Н, 1=9,7, 6,7 Гц), 4,87-4,82 (дд, 1Н, 1=9,7, 3,0 Гц), 4,78-4,71 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н),
3,45-3,37 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,6 Гц), 3,15-3,08 (м, 3Н), 2,59-2,52 (м, 2Н), 2,43-2,34 (м, 1Н), 1,72-
1,63 (м, 2н), 1,36-1,26 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,15-1,12 (д, 3Н, 1=6, 9 Гц), 0,80-0,73 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СБС13) δ 177,8, 170,5,
170.4, 165,1, 165,0, 153,9, 141,9, 137,3, 131,7,
130,8, 130,6, 130,0, 129,6, 128,1, 124,6, 122,4,
114.4, 114,1, 112,6, 112,2, 76,8, 71,3, 56,0, 54,4,
46.4, 42,7, 42,1, 39,5, 36,5, 35,2, 24,5, 22,8, 22,64,
22,6, 21,2, 17,2;
ИК (СНС13) 3423, 3008, 2965, 2936, 2874, 1747, 1712, 1680, 1652, 1585, 1528, 1503, 1486, 1464, 1442, 1320, 1303, 1259, 1193, 1147, 1127, 1067, 973 см-1.
Элементн. анализ: (С36Н44С1РК2О7) С, Н, Ν. Пример 87.
К раствору полученного выше стирола (0,622 г, 0,927 ммоль) в 3,0 мл СН2С12 при 0°С добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,170 г, 0,985 ммоль) и толуол (1,5 мл) и продолжают перемешивание при 0°С в течение 30 мин. Ледяную баню убирают и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 22 ч. После концентрирования остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (СН3СЫ с Н2О) и получают β-эпоксид (показанный выше) в виде желтой пены (0,067 г, 11%).
[α]20π +26,23° (с 1,54 СНС13);
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ 7,37-6,92 (м, 7Н), 6,86-6,83 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-6,73 (м,
1Н), 5,75-5,70 (д, 1Н, 1=15,5 Гц), 5,48-5,45 (д,
1Н, 1=7,8 Гц), 5, 22-5,17 (м, 1Н), 4,85-4,81 (дд, 1Н, 1=3,1, 9,8 Гц), 4,76-4,70 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н),
3,68-3,67 (д, 1Н, 1=0,89 Гц), 3,46-3,38 (дд, 1Н, 1=8,6, 13,5 Гц), 3,13-3,07 (м, 3Н), 2,90-2,87 (дд, 1Н, 1=1,5, 7,4 Гц), 2,60-2,37 (м, 2Н), 1,82-1,64 (м, 3Н), 1,36-1,25 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н),
1,15-1,12 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,88-0,83 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СБС13) δ 177,9, 170,4,
165,0, 154,0, 141,6, 139,5, 130,8, 130,4, 130,2,
129,6, 128,2, 124,7, 122,4, 121,3, 115,6, 115,3,
112,3, 112,2, 75,8, 71,1, 63,2, 58,2, 56,1, 54,5,
46,4, 42,8, 40,4, 39,4, 36,8, 35,3, 24,5, 22,85,
22,82, 22,7, 21,2, 13,4;
113
114
ИК (КВг) 3416, 3034, 2963, 2934, 2874, 1751, 1721, 1680, 1658, 1539, 1504, 1473, 1442, 1304, 1280, 1258, 1192, 1144, 1066 см-1.
Элементн. анализ: (С36Н44С1Р^О8) С, Н, Ν. Пример 88.
Из альдегида 18 (1,5 г, 2,6 ммоль) и 4фторбензилтрифенил-фосфинийбромида (1,4 г, 3,1 ммоль) по процедуре, описанной выше для получения стирола 20, получают стирол (показанный выше) (1,24 г) в виде смеси Е с Ζ. Смесь изомеров растворяют в бензоле (40 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч в присутствии 1,1 '-азобис(циклогексанкарбонитрила) (νΑΤΌ) (0,050 г, 0,20 ммоль) и тиофенола (0,076 мл, 0,74 ммоль). После концентрирования остаток очищают радиальной препаративной ТСХ (20-100% ЕΐОΑс в гексане) и получают Е-изомер (1,06 г) в виде белой пены, содержащей, по данным ЯМР, трифенилфосфиноксид. Образец в 0,150 г очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (СН3С№Н2О, 60:40) и получают 0,092 г чистого твердого вещества.
[α]20π +27,49° (с 1,05 СНС13);
'Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,31-6,96 (м, 1Н), 6,85-6,83 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,81-6,74 (м, 1Н), 6,39-6,34 (д, 1Н, 1=15,8 Гц), 5,96-5,88 (дд, 1Н, 1=8,8, 15,8 Гц), 5,77-5,72 (д, 1Н, 1=15,2 Гц),
5,49-5,47 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 5,07-5,02 (м, 1Н),
4,86-4,83 (дд, 1Н, 1=9,2, 2,5 Гц), 4,82-4,73 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,45-3,38 (дд, 1Н, 1=13,4, 8,5 Гц), 3,14-3,08 (м, 3Н), 2,57-2,52 (м, 2Н), 2,43-
2,34 (м, 1Н), 1,71-1,58 (м, 2Н), 1,36-1,29 (м, 1Н),
1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,14-1,11 (д, 3Н, 1=6,9 Гц), 0,78-0,73 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 177,8, 170,5,
170,3, 165,1, 160,2, 154,0, 142,0, 137,6, 132,9,
132,8, 130,8, 130,4, 130,0, 129,6, 128,2, 127,6,
127,5, 124,6, 122,4, 115,6, 115,2, 112,2, 71,3, 56,0,
54,4, 46,4, 42,7, 42,1, 39,5, 36,4, 35,2, 24,5, 22,8,
22,6, 21,2, 17,2;
ИК (КВг) 3421, 3289, 2862, 2933, 1751, 1722, 1678, 1604, 1534, 1509, 1259, 1228, 1149, 1066, 1024, 1011, 971, 815 см-1.
Элементн. анализ: (С36Н44С1Р^О7) О, Н, Ν.
К раствору стирола (показанного выше) (0,906 г, 1,35 ммоль) и 4,5 мл СН2С12 при 0°С добавляют 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,25 г, 1,45 ммоль) и толуол (2,2 мл) и продолжают перемешивание при 0°С в течение 30 мин. Ледяную баню убирают и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 23 ч. После разбавления 20 мл СН2С12 реакционную смесь промывают 10% раствором №:8:О5 (1х10 мл), водой (1х10 мл), насыщенным раствором №11СО3 (1х10 мл) и рассолом (1х10 мл) и, в завершение, сушат над №:8О.|. После фильтрации и концентрирования получают 0,814 г продукта в виде смеси β- и αэпоксидов. Очищают порцию в 0,23 г ВЭЖХ с обращенной фазой (ΟΗ3ΟΝ с Н2О) и получают 0,073 г β-эпоксида (показанного выше) в виде белой пены.
[α]20ο +25,6° (с 0,626 СНС13);
'Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,26-7,03 (м, 7Н), 6,85-6,83 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,82-6,72 (м,
1Н), 5,74-5,69 (д, 1Н, 1=15,2 Гц), 5,44-5,42 (д,
1Н, 1=7,9 Гц), 5,23-5,18 (м, 1Н), 4,85-4,81 (дд, 1Н, 1=9,7, 2,9 Гц), 4,77-4,73 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н),
3,66 (с, 1Н), 3,46-3,39 (дд, 1Н, 1=13,5, 8,8 Гц),
3,12-3,07 (м, 3Н), 2,89-2,87 (дд, 1Н, 1=1,5, 7,7 Гц), 2,60-2,54 (м, 1Н), 2,49-2,41 (м, 1Н), 1,81-
1,65 (м, 3Н), 1,34-1,25 (м, 1Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н), 1,15-1,13 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,87-0,82 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СОС13) δ 177,8, 170,3,
164,9, 164,7, 154,0, 141,6, 137,8 132,4, 130,7,
129.6, 128,1, 127,3, 127,2, 124,6, 122,4, 115,8,
115,5, 112,2, 75,8, 71,0, 63,0, 58,2, 56,0, 54,4,
46,3, 42,7, 40,4, 39,3, 36,7, 35,2, 23,5, 22,8, 22,76,
22.6, 21,1, 13,3;
ИК (СНС13) 3426, 3030, 3006, 2964, 2936, 1752, 1711, 1683, 1608, 1514, 1485, 1442, 1303, 1281, 1259, 1188, 1155, 1067, 838 см-1.
Элементн. анализ: (С36Н44С1Р^О8) С, Н, Ν.
К охлажденному до -70°С раствору βэпоксида (показанного выше) (0,44 г, 0,64 ммоль) в 30 мл СН2С12 добавляют по каплям в течение 5 мин 4М раствор НС1 в диоксане (0,4 мл, 1,6 ммоль). После еще 2 ч перемешивания при -70°С раствор концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают радиальной препаративной ТСХ (силикагель, 30-50-100% ЕΐОΑс в СН2С12), а затем ВЭЖХ с обращенной фазой (СН3С№Н2О, 50:50) и получают 0,152 г (33%) нужного хлоргидрина (показанного выше) в виде белой пены.
[α]20π +60,0° (с 2,62 СНС13);
'Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ 7,41-7,05 (м, 7Н), 6,87-6,84 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,83-6,77 (м,
1Н), 5,80-5,75 (д, 1Н, 1=15,4 Гц), 5,52-5,49 (д,
1Н, 1=7,8 Гц), 5,13-5,21 (м, 1Н), 4,94-4,90 (дд,
1Н, 1=9,7, 3,2 Гц), 4,75-4,72 (м, 1Н), 4,67-4,63 (д,
1Н, 1=9,5 Гц), 4,00-3,95 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н),
3,42-3,35 (дд, 1Н, 1=8,3, 13,5 Гц), 3,20-3,02 (м,
3Н), 2,71-2,65 (м, 1Н), 2,49-2,37 (м, 2Н), 1,821,63 (м, 2Н), 1,51-1,38 (м, 2Н), 1,23 (с, 3Н), 1,17
115
116 (с, 3Н), 1,04-1,02 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,97-0,85 (м, 6Н);
13С ЯМР (63 МГц, СПС13) δ 177,6, 170,5,
170,3, 165,3, 160,7, 153,9, 142,2, 137,5, 134,5,
130,8, 129,8, 129,7, 128,2, 124,6, 122,2, 76,1, 74,0,
71.1, 61,4, 56,1, 54,5, 46,4, 42,7, 39,6, 38,4, 36,3,
35.1, 24,8, 23,0, 22,9, 22,7, 21,5, 8,6;
ИК (СНС13) 3423, 2965, 2935, 2873, 1751, 1715, 1679, 1607, 1528, 1504, 1485, 1464, 1442, 1302, 1281, 1193, 1159, 1152, 1127, 1067 см-1.
Элементн. анализ: (С36Н45С12\2О8) С, Н, Ν.
Пример 91.
Криптофицины 151, 152, 153, 154, 155, 156, 159, 160, 161, 166, 167, 172, 181, 188, 234, 236, 238, 247, 251 и 255.
Таблица 1
КриптофиЦИН; № Ах Выход (Ε+Ζ), % % Е- изонера (приблизительно)
153 80 90
154 “ν'* оси» 63 90
159 ж. 75 90
151 .V1 61 80
166 о£. 38 90
167 'V СИ. 48 90
151 а: 73 75
188 ν г 85 80
234 81 85
236 О* ««ни/'' 59 90
247 51 >90
251 ду* ноося.с''*·' 43 >90
Типичная процедура, приспособленная для сочетания криптофицина-108 с различными трифенилфосфоранами, описывается ниже на примере использования ее для получения криптофицина-152.
Криптофицин 152. Получают циннамилтрифенилфосфоран посредством обработки при -78°С циннамилтрифенилфосфонийхлорида (0,311 г, 0,750 ммоль) в ТГФ (5,7 мл) бутиллитием (300 мкл 2,5М раствора в гексане, 0,750 ммоль) и оставляя содержимое постепенно нагреваться до комнатной температуры. Циннамилтрифенилфосфоран из этой реакционной смеси (1,46 мл, 0,182 ммоль) при -78°С постепенно добавляют к альдегиду (68,6 г, 0,122 ммоль) в ТГФ (3 мл) и продолжают перемешивание в течение 2 ч. Реакционную смесь приводят к температуре окружающей среды, обрабатывают насыщенным раствором \НдС1 (5 мл), затем водой (15 мл) и экстрагируют этилацетатом (40 мл). Органический слой промывают водой, сушат над Мд8О4 и упаривают. Остаток вносят в небольшую колонку с ОО8 и элюируют смесями Н2О с СНзСN 1:1 и Н2О с СН3С\ 1:3. Последнюю фракцию упаривают и получают смесь криптофицина 152 и его Ζ-изомера (Ε/Ζ 7:3, 64,3 мг, 80%).
С использованием такой же методики эксперимента альдегид (криптофицин 108) вводят во взаимодействие с 1 -нафтилметилтрифенилфосфораном, 3-метоксибензилтрифенилфосфораном, 3,5-диметоксибензилтрифенилфосфораном, метоксиметилтрифенилфосфораном, 2,4-диметилбензилтрифенилфосфораном,
3-фуранметилтрифенилфосфораном, п-трифлуометилбензилтрифенилфосфораном, 2-метилбензилтрифенилфосфораном, 3,5-диметилбензилтрифенилфосфораном, 2-нафтилметилтрифенилфосфораном, 2-фторбензилтрифенилфосфораном, 3,5-дифторбензилтрифенилфосфораном, 4-гидроксиметилбензилтрифенилфосфораном, 4-(трет-Вос-аминометил)бензилтрифенилфосфораном, 3-(№трет-Вос-амино)бензилтрифенилфосфораном и фенилтиометилтрифенилфосфонием и получают криптофицины 151, 153, 154, 156, 159, 160, 161, 166, 167, 172, 181, 188, 234, 236, 247 и 255, соответственно.
При получении илидов из их соответствующих трифенилфосфонийхлоридов или бромидов в качестве основания используют бутиллитий, за исключением того, что при получении метоксиметилтрифенилфосфорана, 3-фуранметилтрифенилфосфорана и 4-гидроксиметилбензилтрифенилфосфорана используют фениллитий.
Подобное взаимодействие с участием гидроксиметилтрифенилфосфонийбромида, н-бутиллития и криптофицина 108 дает неожиданный аналог криптофицин 155.
Несколько измененная процедура применяется для получения карбоксиметильного аналога криптофицина 251. Раствор 4-(карбо117
118 ксиметил)бензилтрифенилфосфонийбромида (0,289 г, 0,59 ммоль) в ТГФ (5мл) обрабатывают фениллитием (1,8М, 653 мкл; 1,18 ммоль) при -78°С в течение 5 мин и переносят в колбу на ледяной бане. Через 30 мин 0,9 мл этой реакционной смеси при -78°С постепенно добавляют в колбу, содержащую криптофицин 108 (35 мг) в 3 мл ТГФ и перемешивают содержимое в течение 2 ч. Реакционную смесь подкисляют 1Ν НС1 (1 мл), добавляют воду (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл х 2). Органический слой сушат над Мд8О4 и упаривают. Остаток подвергают флэш-хроматографии на диоксиде кремния ΟΌ8 с элюированием смесями Н2О с СН3С№ 1:1 и Н2О с №3ΠΝ 35:65. Последнюю фракцию упаривают и очищают в колонке для ВЭЖХ с обращенной фазой (Есоиозй С18, 10 мкм, 250 х 22 мм, 6 мл/мин, Н2О с №^Ν 35:65). Получают загрязненный образец криптофицина 251, который окончательно очищают еще одной хроматографией с обращенной фазой (Есоиозй С18, 10 мкм, 250 х 10 мм, 3 мл/мин, 0,5% раствор уксусной кислоты в смеси Н2О с СН3СЫ 2:3) и получают криптофицин 251 (10 мг).
Основные экспериментальные данные по получению стирольных аналогов и данные по цитотоксичности сведены в таблицах 1 и 2.
Соли трифенилфосфония. Циннамилтрифенилфосфонийхлорид, 1-нафтилметилтрифенилфосфонийхлорид, метоксиметилтрифенилфосфонийхлорид и 2-метилбензилтрифенилфосфонийбромид доступны коммерчески, в то время как 3-метоксибензилтрифенилфосфонийхлорид, 3,5-диметоксибензилтрифенилфосфонийхлорид, 2,4-диметилбензилтрифенилфосфонийхлорид получают посредством кипячения с обратным холодильником трифенилфосфина с небольшим избытком соответствующего хлорида в толуоле в течение 4 ч. 4Трифлуометилбензилтрифенилфосфонийбромид, 3 -фуронметилтрифенилфосфонийоромид,
2- нафтилметилтрифенилфосфонийбромид, 3,5- дифторбензилтрифенилфосфонийбромид, 4(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бензилтрифенилфосфонийбромид, 4-(№трет-Вос-аминометил)бензилтрифенилфосфонийбромид и 3-(Νтрет-Вос-амино)бензилтрифенилфосфонийбромид получают путем обработки соответствующих бромидов трифенилфосфином в толуоле при комнатной температуре в течение 12 ч. 4(Карбоксиметил)бензилтрифенилфосфонийбромид получают путем обработки бромида трифенилфосфином в растворе в толуоле с ТГФ (5:1) при комнатной температуре в течение 48 ч. 3Фуронметилбромид, 2-нафталинметилбромид и
3- (№трет-Вос-амино)бензилбромид получают, соответственно, из 3-фуронметанола, 2нафталинметанола и 3-(№трет-Вос-амино)бензилового спирта при обработке РВг3 в ТГФ при 78°Сссылки 3-Фуронметанол и 2-нафталинметанол доступны коммерчески. 3-(№трет-Восамино)бензиловый спирт получают из коммер ческого образца 3-аминобензилового спирта. 4(Трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бензилбромид и 4-(№трет-Вос-аминометил)бензилбромид получают из коммерческих образцов метилового эфира 4-гидроксиметилбензойной кислоты и 4-аминометилбензойной кислоты, соответственно, с использованием описанной ниже методики эксперимента.
4-(Трет-бутилдиметилсилилоксиметил) бензилбромид. Смесь метилового эфира 4гидроксиметилбензойной кислоты (2 г) и триэтиламина (3,36 мл) в дихлорметане (15 мл) обрабатывают трет-бутилдиметилсилилтрифлатом (4,47 г) при -78°С. Через 30 мин содержимое нагревают до комнатной температуры и продолжают перемешивание еще в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляют воду (30 мл) и этилацетат (60 мл) и органический слой промывают 0,3М раствором КН8О4, водой и рассолом, сушат над Мд8О4 и фильтруют. Растворитель испаряют и подвергают остаток флэшхроматографии в колонке с диоксидом кремния при элюировании 10% ЕЮАс в гексане и получают метиловый эфир 4-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил) бензойной кислоты (3,3 г, выход 95%),
Диспергированный в диэтиловом эфире (20 мл) литийалюминий гидрид (0,21 г) охлаждают до -78°С в атмосфере аргона и обрабатывают, добавляя по каплям, метиловым эфиром
4-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бензойной кислоты (2,05 г) в 10 мл диэтилового эфира. Через 30 мин добавляют этилацетат (2 мл), чтобы погасить избыток гидрида, а затем добавляют насыщенный раствор хлорида аммония (1,5 мл). Выпавший осадок отделяют фильтрацией и промывают эфиром. Растворитель испаряют и получают 4-(трет-бутилдиметилсилилокси- метил)бензиловый спирт (1,71 г, выход 93%).
4-(Трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бензиловый спирт (1,7 г) растворяют в ТГФ (15 мл.) и обрабатывают трибромидом фосфора (0,609 г) при -78°С. Через 30 мин реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром (80 мл) и промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (30 мл), водой и рассолом и сушат над Мд§О4. Эфирный слой упаривают, а остаток (2,0 г) подвергают флэш-хроматографии на диоксиде кремния с использованием 5% ЕЮАс в гексане в качестве элюента и получают 4-(третбутил-диметилсилилоксиметил)бензилбромид (1,05 г, выход 49%).
4-(Х-трет-Вос-аминометил)бензилбромид. К раствору ди-трет-бутилдикарбоната (2,18 г, 10 ммоль) в триэтиламине с диметилформамидом (1:9, 7,5 мл) добавляют 4(аминометил)бензойную кислоту (0,75 г, 5 ммоль) при комнатной температуре и греют реакционную смесь при 40-50°С в течение 10 мин. После растворения аминокислоты перемешивание продолжают при комнатной температуре еще в течение 1 ч. Растворитель удаляют в
119
120 вакууме, а остаток подкисляют разбавленной НС1 (рН >2) и сразу же экстрагируют ЕЮАс и сушат органический слой над Мд§О4. Остаток, полученный после удаления растворителя, обрабатывают избытком диазометана (полученного из диазальда) в эфире в течение 30 мин и избыток диазометана разлагают уксусной кислотой. Остаток, полученный после удаления растворителя, хроматографируют в колонке на диоксиде кремния (20 г) с использованием для элюирования гексана с ЕЮАс (9:1) и получают метил-4-Щ-трет-Вос-аминометил) бензоат (1,07 г, выход 81%).
К охлажденной суспензии ЫА1Н4 (60 мг, 1,5 ммоль) в эфире (5 мл) при -78°С добавляют по каплям раствор метил-4-Щ-трет-Вос-аминометил)бензоата (0,8 г, 3 ммоль) в эфире (5 мл) и содержимое нагревают до температуры окружающей среды. Через 3 ч добавляют еще Ь1А1Н4 (100 мг) и продолжают реакцию при комнатной температуре еще в течение 10 мин. Избыток Ь1А1Н4 разлагают ЕЮАс и затем насыщенным раствором хлорида аммония (1,0 мл). Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают и промывают эфиром. Фильтрат упаривают и получают 4-Щ-трет-Вос-аминометил)бензиловый спирт (250 мг, 35%).
Раствор 4-Щ-трет-Вос-аминометил)бензилового спирта (250 мг, 1,1 ммоль) в ТГФ (5 мл) обрабатывают трибромидом фосфора (30 мкл, 0,32 ммоль) при -78°С в течение 2 ч. После этого периода реакцию гасят твердым NаНСОз (50 мг), смесь фильтруют для удаления твердых веществ и фильтрат упаривают и получают 4(трет-Вос-аминометил)бензилбромид (300 мг, 95%).
Нужные Е-изомеры выделяют из соответствующих смесей Е/Ζ посредством кристаллизации в растворах в этилацетате и этиловом эфире. В случае циннамильных и некоторых других аналогов со слабой Ε/Ζ-селективностью неочищенную смесь подвергают изомеризации с использованием процедуры, пример которой приводится ниже для циннамильното аналога криптофицина 152.
Изомеризация. Смесь криптофицина 152 и его цис-изомера (Е/Ζ 7:3, 62 мг, 0,10 ммоль) растворяют в бензоле (3 мл) и кипятят с обратным холодильником с тиофенолом (10 мкл, 0,10 ммоль) и 1,1'-азобис(циклогексанкарбонитрилом) (12 мг, 0,05 ммоль). Через 16 ч смесь приводят к температуре окружающей среды и вносят в небольшую колонку с диоксидом кремния.
Колонку промывают дихлорметаном и элюируют соединение этилацетатом с дихлорметаном (1:1). Растворитель испаряют и получают криптофицин 151 (53 мг, 85%), который пока еще загрязнен приблизительно 5% своего цис-изомера.
Криптофицин 151. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 688/690 (3,3/1,5),
412/414 (18/6), 277(100), 233(18), 195/197 (16/6), 193(29), 141(38); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е 688,2900 (вычислено для С39Н45СШ2О7, Δ 1,5 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 152. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 664/666 (24/7), 412/414 (21/7), 253(100), 91(85); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/е 664,2939 (вычислено для
С37Н45СШ2О7, Δ -2,3 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 153. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 668/670 (3,7/1,4), 412/414 (32/12), 257(62), 198(100), 195/197 (36/11); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/е 668,2817 (вычислено для С36Н45СШ2О8, Δ 4,7 м.м.е) . Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 154. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 698/700 (2,5/0,8), 412/414 (18/5), 287(28), 228(35), 195/197 (18/6), 139(100); М.-с., высокого разрешения, Е1, т/е 698,2946 (вычислено для С37Н47СШ2О9, Δ 2,5 м.м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 155. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 604/606 (20/6), 412/414 (24/8), 280/282 (24/8), 195/197 (100/33); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е 604,2894 (вычислено для С32Н45СШ2О7, Δ 2,1 м.-м.е). 1Н ЯМР (СЛС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,76 (2, д; 15,5), 6,66 (3, ддд; 15,5, 9,5 и
5,9), 2,32-2,44 (4-Н2, м), 4,92 (5, м), 2,66-2,76 (6, м), 0,98 (6-Ме, д; 6,8), 5,21 (7, т; 10,9), 5,46 (8, дт; 10,9 и 7,4), 2,00 (9-Н2, м), 1,38 (10-Н2, м), 0,91 (10-Ме, т; 7,5); В: 4,81 (2, м), 5,70 (2-ΝΉ, д;
8.5) , 3,04 (3, дд; -14,5 и 7,2), 3,14 (3, дд; -14,5 и
5.6) , 7,22 (5, д; 2,2), 3,87 (7-ОМе, с), 6,84 (8, д;
8.5) , 7,08 (9, дд; 8,5 и 2,2); С: 2,66-2,76 (2, м),
1,22 (2-Ме, д; 7,4), 3,27 (3, дт; 13,5 и 6,8), 3,52 (3, м), 6,93 (3-ΝΉ, ушт, 6,4); Ό: 4,86 (2, дд; 9,8 и
3.5) , 1,49 (3, м), 1,71-1,80 (3/4, м), 0,90 (4-Ме, д; 6,0), 0,94 (5, д; 6,5);
13С ЯМР (СЛС13), остаток, δ (положение углерода), А: 165,5(1), 125,0(2), 141,6(3), 36,5(4), 77,9(5), 36,2(6), 17,7(6-Ме), 130,0(7), 131,6(8), 29,6(9-Н2), 22,8(10-Н2), 13,8(11-Н3);
В: 171,0а(1), 53,5(2), 35,1(3), 129,9(4),
131,0(5), 122,4(6), 153,9 (7), 56,1 (7-ОСН3),
112,2(8), 128,4(9); С: 175,6(1), 38,3(2), 14,0(2Ме), 41,2(3); Ό: 170,9а(1), 71,6(2), 39,5(3), 24,7(4), 21,4(4-Ме), 23,1(5). а сигналы равноценные.
Криптофицин 156. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 412/414 (23/6), 381(11),
280/282 (22/6), 195/197 (100/33); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/ζ 592,2568 (вычислено для
С30Н41СШ2О8, Δ 1,6 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР
121
122 см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 159. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 666(3), 412/414 (16/4), 396(52), 255(100), 195/197 (30/8), 91(54); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/ζ 666,3060 (вычислено для С37Н47СШ2О7, Δ 1,1 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 160. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 628/630 (9/4), 412/414 (63/23), 280(25), 217(89), 195/197 (89/30); М.-с., высокого разрешения, Е1, т/ζ 628,2532 (вычислено для С33Н41СШ2О8, Δ 2,0 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 161. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 706/708 (6/2), 412/414 (49/18), 295(15), 280/282 (25/7), 195/197 (100/34); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/ζ 706,2623 (вычислено для С36Н42С1Ез^О7, Δ 1,0 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 166. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 652/654 (1,1/0,4), 412/414 (18/5), 241(37), 195/197 (64/20); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/е 652,2918 (вычислено для С36Н45СШ2О7, Δ -0,2 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 167. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 666/668 (3,4/1,1), 412/414 (26/9), 280(11), 255(67), 195/197 (46/15); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/е 666,3058 (вычислено для С37Н47СШ2О7, Δ 1,4 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 172. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 688/690 (3/2), 412/414 (12/4), 277(67), 218(100), 195/197 (29/10),
141(63); М.-с., высокого разрешения. Е1, т/ζ 688,2916 (вычислено для С39Н45СШ2О7, Δ -0,1 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 181. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 656/658 (9,0/3,3), 412/414 (84/34), 245(71), 195/197 (47/7); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/ζ 656,2674 (вычислено для С35Н42С1Е^О7, Δ -0,9 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 188. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 674/676 (20/4), 412/414 (57/20), 280/282 (20/7), 263(13), 195/197 (89/27); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/ζ 674,2551 (вычислено для СЩ^СШ^О^ Δ 1,9 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 3, данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 234. Смесь, содержащую Криптофицин 234 и 15% его Ζ-изомера (58,3 мг), повторно кристаллизуют из растворов в
Е1ОАс с этиловым эфиром и получают Криптофицин 234 и его Ζ изомер (11 мг). 1Н ЯМР (СЭСЕ). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,77 (2, д; 15,2), 6,68 (3, ддд; 15,2, 9,7 и
5,4), 2,37 (4, дт; 14,2 и 10,5), 2,52 (4, м), 4,99 (5, м), 2,55 (6, м), 1,13 (6-Ме, д; 6,8), 5,99 (7, дд; 15,8 и 8,8), 6,40 (8, д; 15,8), 7,25а (2'/6', д; 8,2), 7,29а (3'/5', д; 8,2), 4,71 (4'-СН2ОТВПМ§, ушс), 0,08 (6Н) и 0,93 (9Н) (4'-СН2ОТВОМ§); В: 4,81 (2, м), 5,77 (2-ΝΉ, маскируется другим сигналом), 3,03 (3, дд; -14,4 и 7,3), 3,14 (3, дд; -14,4 и
5.4) , 7,22 (5, д; 2,0), 3,86 (7-ОМе, с), 6,83 (8, д;
8.4) , 7,07 (9, дд; 8,4 и 2,0); С: 2,71 (2, м), 1,22 (2Ме, д; 7,2), 3,29 (3, м), 3,49 (3, м), 6,98 (3-1ЧН, ушт; 5,6); Ό: 4,84 (2, м), 1,36 (3, м), 1,59-1,71 (3/4, м), 0,73 (4-Ме, д, 6,4), 0,77 (5, д, 6,2). а равноценные.
13С ЯМР (СОС13), остаток, δ (положение углерода), А: 165,5(1), 125,2(2), 141,4(3), 36,4(4), 77,4(5), 42,2(6), 17,3(6-Ме), 129,6(7), 131,6(8), 136,4(1'), 126,0а (2'/6'), 126,3а (3'/5'), 140,9(4'),
64,7 (4'-СН2О-), 25,9 и -5,3 (4'-СН2ОТВПМ§); В: 171,0б(1), 53,6(2), 35,1(3), 129,9(4), 131,0(5), 122,4(6), 153,9(7), 56,1 (7-ОСН3), 112,2(8),
128,4(9); С:
175,6(1), 38,3(2), 14,0 (2-Ме), 41,1(3); Ό: 170,9б(1), 71,5(2), 39,5(3), 24,5(4), 22,7(4-Ме), 21,2(5). а и б - сигналы равноценные.
Криптофицин 236. 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А; 5,76 (2, д; 15,2), 6,68 (3, ддд; 15,2, 9,6 и 5,6), 2,37 (4, м), 2,51 (4, м), 5,00 (5, м), 2,54 (6, м), 1,13 (6-Ме, д; 6,9), 6,00 (7, дд; 15,9 и 8,6), 6,39 (8, д; 15,9), 7,20-7,30 (2'/3'/5'/6', ушм), 4,28 (4'-СН2МН-третВос, д; 4,9), 4,80 (4'-СН2ХН-трет-Вос, д; 4,9),
1,46 (4'-СН^Н-трет-Вос, с); В: 4,80 (2, м), 5,65 (2-ΝΠ, д; 8,5), 3,04 (3, дд; -14,4 и 6,9), 3,13 (3, дд; -14,4 и 5,5), 7,22 (5, д; 2,2), 3,87 (7-ОМе, с),
6,83 (8, д; 8,4), 7,08 (9, дд; 8,4 и 2,2); С: 2,71 (2, м), 1,22 (2-Ме, д; 7,3), 3,27 (3, м), 3,51 (3, м), 6,93 (3-ΝΉ, ушт; 5,6); Ό: 4,84 (2, дд; 9,9 и 3,5),
1,36 (3, м), 1,58-1,70 (3/4, м), 0,74 (4-Ме, д, 6,4), 0,78 (5, д, 6,4).
13С ЯМР (СЭСЕ,). остаток, δ (положение углерода), А: 165,4(1), 125,2(2), 141,4(3), 36,5(4), *(5) , 42,2(6), 17,3 (6-Ме), 130,1(7), 131,4(8), 135,9(1'), 126, 4 (2'/6'), 127,8(3'/5'), 138,4(4'), 44,4 (4'-СН2:Ж-трет-Вос), 28,4 (4'-СН2№-трет-Вос); В: 170,9(1), 53,5(2), 35,1(3), 129,9(4), 131,1(5), (6),
154,0(7), 56,2 (7-ОСН3), 112,3(8), 128,4(9) С: 175,6(1), 38,3(2), 14,0 (2-Ме), 41,2(3); Ό: 170,9(1), 71,6(2), 39,6(3), 24,5(4), 22,7 (4-Ме), 21,3(5). * - скрыт под сигналом растворителя.
Криптофицин 238. Криптофицин 234 (14 мг) в ТГФ (1,5 мл) обрабатывают раствором фторида тетрабутиламмония (25 мкл, 1М раствор в ТГФ) при 0°С. Через 1 ч к реакционной смеси добавляют насыщенный раствор №Н4С1 (5
123
124 мл), а затем воду (15 мл) и экстрагируют ЕЮАс (50 мл). Этилацетатный слой сушат над Мд§О4 и упаривают. Остаток очищают в небольшой колонке на диоксиде кремния с использованием в качестве элюентов СН2С12 и ЕЮАс. Последнюю фракцию упаривают и получают криптофицин 238 (11,8 мг).
М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность), 668/670 (3/0,5), 412/414 (38/14), 257(29), 195/197 (25/10); м.-с. высокого разрешения. Е1, т/е 668,2898 (вычислено для С36Н45С1Н2О8), Δ -3,4 м.-м.е).
1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц), А: 5,76 (2, д; 15,6), 6,68 (3, ддд; 15,6, 9,8 и 5,5), 2,36 (4, дт; 14,4 и 10,4), 2,51 (4, ушдд; 14,4 и 5,1), 5,00 (5, м), 2,55 (6, м), 1,13 (6-Ме, д; 6,8), 6,01 (7, дд; 15,9 и 8,8), 6,40 (8, д;
15,9), 7,31 (2'/3'/5'/6', ушс), 4,47 (4'-СН2ОН, ушс); В: 4,80 (2, м), 5,78 (2-ΝΉ, д; 8,4), 3,01 (3, дд; -14,4 и 7,4), 3,13 (3, дд; -14,4 и 5,5), 7,21 (5, д; 2,0), 3,86 (7-ОМе, с), 6,83 (8, д; 8,5), 7,07 (9, дд;
8,5 и 2,0); С: 2,71 (2, м), 1,21 (2-Ме, д; 7,1), 3,28 (3, м), 3,49 (3, м), 6,98 (3-ΝΉ, ушт; 6,0); Ό: 4,84 (2, дд; 9,9 и 3,2), 1,35 (3, м), 1,58-1,71 (3/4, м), 0,74 (4-Ме, д, 6,4), 0,77 (5, д, 6,3).
13С ЯМР (СЭСЕ). остаток, δ (положение углерода), А: 165,5(1), 125,2(2), 141,4(3), 36,4(4), 77,4(5), 42,2(6), 17,3 (6-Ме), 130,1(7), 131,4(8), 136,1(1'), 126,3а (2'/6'), 127,2а (3'/5'), 140,4(4'),
64,9 (4'-СН2ОН); В: 171,0б(1), 53,7(2), 35,0(3), 129,9(4), 131,0(5), 122,3(6), 153,9(7), 56,1 (7ОСН3), 112,2(8), 128,4(9); С: 175,6(1), 38,2(2), 14,0 (2-Ме), 41,1(3); Ό: 170,8б(1), 71,5(2), 39,5(3), 24,5(4), 22,7 (4-Ме), 21,3(5). а и б - сигналы равноценные.
Криптофицин 246. Криптофицин 236 (9 мг, 0,012 ммоль) в СН2С12 (50 мкл) обрабатывают 4Ν НС1 в диоксане (20 мкл, 0,08 ммоль) при комнатной температуре. Через 1 ч растворитель испаряют, а остаток подвергают флэшхроматографии в небольшой колонке с диоксидом кремния С18 (АШесй, 500 мг) с использованием для элюирования метанола с водой (1:1). Первая фракция (3 мл) после испарения растворителя дает криптофицин 246 (7 мг, 85%).
'Н ЯМР (СО3ОЭ). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц), А: 5,92 (2, дд; 15,2 и
1,7), 6,69 (3, ддд; 15,2, 11,1 и 3,8), 2,35 (4, м),
2,68 (4, м), 5,06 (5, м), 2,63 (6, м), 1,15 (6-Ме, д;
7.4) , 6,18 (7, дд; 15,9 и 8,9), 6,50 (8, д; 15,9), 7,40 (2'/6', ушд; 8,2), 7,46 (3'/5', ушд; 8,2), 4,08 (4'СН^Н2НС1, с); В: 4,51 (2, дд; 11,1 и 3,4), 2,75 (3, м), 3,17 (3, дд; -14,5 и 3,9), 7,27 (5, д; 2,0),
3,83 (7-ОМе, с), 6,97 (8, д; 8,5), 7,16 (9, дд; 8,5 и 2,0); С: 2,73 (2, м), 1,17 (2-Ме, д; 8,0), 3,26 (3, м),
3,56 (3, м); Ό: 4,92 (2, дд; 9,8 и 3,9), 1,35 (3, м),
1,54-1,65 (3/4, м), 0,71 (4-Ме, д; 6,4), 0,75 (5, д,
6.4) .
13С ЯМР (С’О3ОО). остаток, δ (положение углерода), А: 168,4(1), 125,7(2), 143,5(3), 37,7(4), 78,6(5), 43,5(6), 17,5 (6-Ме), 133,6(7), 131,9(8), 139,5а(1'), 128,0 (2'/6'), 130,3 (3'/5'), 133,3а(4'), 44,0 (4'-СН^Н2НС1); В: 174,1(1), 57,4(2),
36,3(3), 132,2(4), 131,5(5), 123,3(6), 155,4(7), 56,6 (7-ОСН3) , 113,5(8), 129,3(9); С; 177,5(1), 39,0(2),
15,1 (2-Ме), 41,2(3); Ό: 172,3(1), 72,8(2), 41,0(3), 25,7(4), 21,7 (4-Ме), 23,2(5). а - сигналы равноценные.
Криптофицин 250. Раствор криптофицина 247 (5,1 мг) в дихлорметане (80 мкл) обрабатывают хлористоводородной кислотой (40 мкл, 4М раствор в диоксане). Через 2 ч реакционную смесь концентрируют, разбавляют водой и пропускают через короткую колонку с ОЭ8. Колонку промывают водой (5 мл), а затем СН3СN (3 мл). Последнюю фракцию упаривают и получают криптофицин 250 (5 мг). Его дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Есоио811 С18, 25 см х 10 мм, 10 мкм, 35% Н2О в С'Н3СН 4 мл/мин) и получают чистый образец (4 мг, 18 мин).
М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 653/655 (15/10), 533(33), 242(48), 195/197 (36/13); м.-с. высокого разрешения. Е1, т/ζ 653,2865 (вычислено для С35Н44СШ3О7), Δ 0,3 м. -м.е.
1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц), А: 5,78 (2, д; 15,1), 6,68 (3, ддд; 15,1, 9,6 и 5,4), 2,35 (4, дт; 14,4 и 10,7), 2,48 (4, ушдд; 14,4 и 5,1), 5,01 (5, м), 2,53 (6, м), 1,12 (6-Ме, д; 6,8), 6,01 (7, дд; 15,9 и 8,7), 6,33 (8, д;
15,9), 6,81м, 6,89д, 6,94с и 6,99м (2'/3'-ΝΉ3/4'/6'), 7,15 (5', т; 7,8); В: 4,79 (2, м), 5,95 (2-ΝΉ), 3,02 (3, дд; -14,4 и 7,3), 3,15 (3,99; -14,4 и 5,5), 7,22 (5, д; 2,0), 3,86 (7-ОМе, с), 6,84 (8, д; 8,4), 7,08 (9, дд; 8,4 и 2,0); С: 2,70 (2, м), 1,23 (2-Ме, д;
7,1), 3,27 (3, м), 3,51 (3, м), 6,99 (3-ΝΉ, м); Ό:
4,87 (2, дд; 9,8 и 3,2), 1,39 (3, м), 1,59-1,73 (3/4, м), 0,76 (4-Ме, д, 5,4), 0,80 (5, д, 5,6).
(13С ЯМР (СОС13), остаток, δ (положение углерода),)
А: 165,8(1), 125,2(2), 141,5(3), 36,4(4), 77,3(5), 42,0(6), 17,1 (6-Ме), 131,0(7), 131,3(8), 138,3(1'), 116,0(2'), 121,1(4'), 130,0(5'), 118,0(6'); В: 171,2(1), 54,0(2), 35,0(3), 129,8(4), 131,0(5), 122,4(6), 153,9(7), 56,1 (7-ОСН3), 112,3(8),
128,4(9); С: 175,6(1), 38,2(2), 1 4,2 (2-Ме),
41,0(3); Ό: 170,9(1), 71,5(2), 39,6(3), 24,6(4), 22,8 (4-Ме), 21,4(5).
Криптофицин 251. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 696(0,7), 652 (М+-СО2; 0,7), 412/414(4/2), 285(6), 241(5), 195/197 (11/3); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е (вычислено для С37Н45СШ2О9, Δ м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см, в таблице 3; данные по 13С ЯМР см. в таблице 4.
Криптофицин 255. 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положе125
126 ние углерода, мультиплетность; I в Гц), А: 5,78 (2, д; 15,1), 6,67 (3, ддд; 15,1, 9,5 и 5,9), 2,37 (4, дт; 14,9 и 10,3), 2,45 (4, м), 4,96 (5, м), 2,52 (6, м), 1,09 (6-Ме, д; 6,8), 5,74 (7, дд; 15,1 и 8,9),
6,24 (8, д; 15,1), 7,20-7,33 (273747576', м); В: 4,83 (2, м), 5,64 (2-ΝΗ д; 8,8), 3,05 (3, дд; -14,6 и 7,1),
3,14 (3, дд; -14,6 и 5,4), 7,22 (5, д; 2,0), 3,88 (7ОМе, с), 6,85 (8, д; 8,5), 7,08 (9, дд; 8,5 и 2,0); С:
2,72 (2, м), 1,23 (2-Ме, д; 7,3), 3,29 (3, м), 3,50 (3, м), 6,95 (3-ΝΗ, м); 1): 4,86 (2, дд; 10,0 и 3,4), 1,49 (3, м), 1,63-1,85 (3/4, м), 0,89 (4-Ме, д, 6,4), 0,94 (5, д, 6,4).
Таблица 3. Данные 1Н ЯМР, 500 МГц, для криптофицинов 3, 151, 152, 153, 154, 156, 159, 160, 161, 166, 167, 172, 181, 188 и 251.
ские сдвиги даются для протонов или метильной, метоксильной или гидроксиметильной функциональной группы, расположенных на атоме углерода, указанном в таблице. Химические сдвиги для протонов в остатках В и С находятся в пределах ±0,2 м.д., а константы взаимодействия - в пределах ±0,5 Гц от соответствующих величин в криптофицине 3. 1(И,И), в Гц, для 151: 3',4' = 8,3; 5',6' = 8,0; 7',8' = 8,1; Ι(Η,Η), в Гц, для 152: 6,7 = 8,7; 7,8 = 15,3; 8,9 = 10,5; 9,10 = 15,7; 2',3' = 3', 4' = 4', 5' = 5', 6' = 7,4; Ι(Η,Η), в Гц, для 153: 2',4 = 2',6' = 2,0; 4',5' = 5',6' = 7,9; Ι(Η,Η), в Гц, для 154: 2',4' = 4'6' = 2,2; δ для 8-ОСН3 остатка А в 156 равен 3,51; Ι(Η,Η), в Гц, для 156: 6,7 = 9,3; 7,8 = 12,6; Ι(Η,Η), в Гц, для 159: 5',6' = 8,3; Ι(Η,Η), в Гц, для 161: 2',3' = 4',5' = 8,1; Ι(Η,Η), в Гц, для 251: 2',3' = 5',6' = 8,2. Наблюдаемые константы взаимодействия для протонов в состоянии покоя в таблице находят ся в пределах ±0,5 Гц от соответствующих величин в криптофицине 3.
Таблица 4. Данные 13С ЯМР, 125 МГц, для криптофицинов 3, 151, 152, 153, 154, 156, 159, 160, 161, 166, 167, 172, 181, 188 и 251.
р = положение
Р 3 151 152 153 154 156 159 160 161 166 167 172 181 188 25 1
А 165 165 165 165 165 165 165 165 165. 165 165 165 165 165 16
1 .4 .5 .4 .4 .4 .5 .5 .6 4 .4 .5 .4 .4 .3 5. 5
2 125 125 125 125 125 125 125 125 125. 125 125 125 125 125 12
.2 .3 .1 .2 .2 .0 .3 .0 3 .2 .1 .1 .3 .3 5.
3 141 141 141 141 141 141 141 141 141. 141 141 141 141 141 14
.4 .4 .4 .4 .4 .7 .5 .7 2 .5 .5 .4 .3 .1 1.
4 36. 36. 36. 36. 36. 36. 36. 36. 36.5 36. 36. 36. 36. 36. 35
5 6 4 4 5 3 5 4 5 5 5 5 5 .0
5 77. 77. 77. 77. 77. 77. 77. • 77.1 77. 77. 77. 77. 77
1 5 3 4 3 9 5 4 5 4 1 .2
6 42. 38. 41. 42. 42. 37. 42. 42. 42.3 42. 42. 42. 42. 42. 42
3 3 9 2 2 7 3 2 3 3 3 7 1 .2
6- 17. 17. 17. 17. 17. 18. 17. 17. 17.2 17. 17. 17. 17. 17. 17
Ме 3 4 2 3 3 5 4 3 4 4 4 3 2 .3
7 130 133 134 130 130 103 129 129 130. 130 129 130 127 133 13
.0 .3 .4 .4 .6 .0 .4 .8 5 .4 .3 .5 .1 .1 0.
В 130 128 132 131 132 148 130 121 133. 131 132 131 132 130 13
.1 .9 .3 .7 .0 .6 .3 .5 0 .3 .0 .8 .8 .0 1.
9 128 .4
10 132 .0
8/ 136 134 137 138 138 55. 134 140. 135 136 126 о 13
10 .7 .4 .1 .2 .7 9+ .8 2 .8 .6 .0 5.
Аг 1·
2’ 126 123 126 111 104 132 143 125. 135 124 134 • О 108 12
.1 .6 .2 .7 .4 .9 .6 6 .0 .0 .1 .8 6.
д 4
3· 12Θ 125 128 159 161 131 123 126. 127 138 128 115 12
.6 .5 .6 .9 .0 .1 .8 3 .5 .1 .2 .8 9.
4’ 128 128 127 118 99. 137 107 141. 126 129 126 128 102 13
.4 .0 .5 .8 7 .2 .3 2 .1 .6 .3 .8 2.
т 8
5’ 128 123 128 129 161 126 140 126. 129 138 127 124 о 12
.6 .5 .6 .6 .0 .8 .1 3 .5 .1 .8 .2 9.
6’ 126 125 126 113 104 125 125. 125 124 123 124 108 12
.1 .8а .2 .1 .4 .2 6 .4 .0 .3 .2 .8 6.
7· 126 125
-1а .8
8’ 128 127
.6 .6
9' 131 133
.0 .5
Спектры регистрируют в СЭС13. Химические сдвиги для углеродов в остатках В и С находятся в пределах ±0,5 м.д. от соответствующих величин в криптофицине 3. * - сигналы замаскированы сигналом СЭС13. ** - сигналы нельзя обнаружить. Т - сигнал для 8-ОСН3 остатка А; а - сигналы в колонке могут быть равноценными.
Углерод 3'-ОСН3 остатка А в криптофицине 153 попадает в резонанс при δ 55,1, а углероды 3'- и 5'-ОСН3 криптофицина 154 попадают в резонанс при δ 55,3. Углеродные сигналы 2'- и 4'-СН3 криптофицина 159 наблюдают при δ 19,7 и 20,9, соответственно. Углеродный сигнал 2'СН3 криптофицина 166 наблюдают при δ 19,8. Углеродные сигналы 3'- и 5'-СН3 криптофицина 167 наблюдают при δ 21,2. Сигналы метиленового и карбоксильного углеродов 4'-СН2СООН наблюдают при δ 40,4 и 174,5, соответственно.
Пример 92. Эпоксидные аналоги.
127
128
Криптофицины 157, 158, 164, 165, 168, 169, 170, 171, 173, 174, 177, 178, 179, 180, 182, 183, 200, 242 и 269.
Таблица 5
Криптоф.^тирол, з № Аг Эпоксид № Стерео хим., ¥ • Отношение ЯЯ/55
151 157 158 яя 55 2.4 : 1
153 168 169 ЯЯ 55 2.4 : 1
159 ж. 170 ЛЯ 2.8 ·. 1
166 αΐ. 177 17В ЯЯ 55 2.0 : 1
167 ж СИ. 179 180 ЯЯ 55 2.7 : 1
172 Ж 173 174 ЯЯ 55 1.5 : 1
1Я1 182 183 ЯЯ 55 2.0 : 1
168 Ό* г 200 ЛЛ 55 1.4 : 1
236 ж 242 ЯЯ 55 2 : 1
23Θ -Ж 269 ЯЯ 55 2 · 1**
* В случае 188 требуется 6 эквивалентов МСРВА и 36 ч для 70% конверсии в эпоксиды.
** Неразделяющаяся смесь.
Общая процедура эпоксидирования стирольных аналогов
Раствор стирольного аналога (0,1 ммоль) и м-хлорпероксибензойной кислоты (0,3 ммоль) в 3 мл дихлорметана перемешивают при комнатной температуре. Через 16 ч реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (3 мл) и промывают фосфатным буфером (0,1М, рН 8, 5 мл) для удаления 3-хлорбензойной кислоты, образовавшейся во время реакции. Органический слой отделяют, обрабатывают диметилсульфидом (20 мкл) для уничтожения избытка перкислоты и промывают буфером второй раз. Дихлорметановый слой отделяют, сушат над М§804, упаривают и выдерживают в вакууме в течение 24 ч. Остаток подвергают ВЭЖХ в колонке для ВЭЖХ с обращенной фазой (ЕсопозП С18, 10 мкм, 250 мм х 22 см, 35% Н2О в СН3СК, 6 мл/мин) и получают КК- и 88-эпоксиды.
Подробности эксперимента и данные по цитотоксичности приводятся в таблице 3.
Криптофицины 157 и 158. Криптофицин 151 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой и получают криптофицины 157 и 158.
Криптофицин 157. М.-с., ΕΣ, т/ζ (относительная интенсивность) 704/706 (1/0,3), 195/197 (14/4), 141(100), 115(27);
М.-с. высокого разрешения. ΕΣ, т/ζ 704,2865 (вычислено для С39Н45СШ208, ошибка -0,1 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 158. М.-с., ΕΣ, т/ζ (относительная интенсивность) 704/706 (2,2/1,9), 195/197 (25/9), 141(100); М.-с. высокого разрешения. Е^ т/ζ 704,2862 (вычисл. для С39Н45СШ2О8, ошибка 0,3 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицины 164 и 165. Раствор криптофицина 152 (53 мг, 0,08 ммоль) и мхлорпероксибензойной кислоты (15 мг, 0,087 ммоль) в 3 мл дихлорметана перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь подвергают тем же процедурам обработки и очистки и получают соединения 1 64/1 65А и 1 64/1 65В (5 мг каждого), исходное вещество (10 мг) и другие продукты разложения. Анализ основных структур показывает криптофицины 164 и 165, но стереохимию эпоксидов обозначить нельзя.
Криптофицин 164/165А. 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; Σ в Гц), А:
5,77 (2, д; 15,1), 6,67 (3, ддд; 15,1, 9,7 и 5,4), 2,37 (4, м), 2,44 (4, м), 4,98 (5, м), 2,48 (6, м), 1,06 (6Ме, д; 6,7), 5,83 (7, дд; 15,6 и 8,5), 5,40 (8, дд;
15,6 и 7,8), 3,32 (9, дд; 7,9 и 2,0), 3,75 (10, д; 2,0),
7,26 (2’/6’, м), 7,31-7,37 (37475’, м); В: 4,82 (2, м),
5.75 (2-ΝΗ, д; 9,2), 3,04 (3, дд; -14,5 и 7,3), 3,14 (3, дд; -14,5 и 5,5), 7,23 (5, д; 2,2), 3,87 (7-ОМе, с), 6,84 (8, д; 8,2), 7,09 (9, дд; 8,2 и 2,2); С: 2,73 (2, м), 1,23 (2-Ме, д; 7,2), 3,29 (3, м), 3,51 (3, м), 6,97 (3-ИН, ушт; 6,3); Ό: 4,88 (2, дд; 10,0 и 3,7),
1,52 (3, м), 1,79 (3/4, м), 0,92 (4-Ме, д; 6,5), 0,95 (5, д; 6,5).
13С ЯМР (СЭС13), остаток, δ (положение углерода), А: 165,4(1), 125,3(2), 141,2(3), 36,5(4), 77,0(5), 41,3(6), 17,0(6-Ме), 136,2(7), 129,4(8), 62,5(9), 60,1(10), 136,9(1’), 125,4 (2’/6’),
128,7(3’/5’), 128,4(4’); В: 171,0(1), 53,6(2), 35,0(3), 129,9(4), 131,0(5), 122,4(6), 154,0(7), 56,1 (7ОМе), 112,3(8); С: 175,6(1), 38,3(2), 14,1 (2-Ме), 41,2(3); Ό: 170,8(1), 71,5(2), 39,6(3), 24,7(4), 21,4 (4-Ме), 22,9(5).
Криптофицин 164/165В. 1Н ЯМР (СРС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; Σ в Гц), А:
5.76 (2, д; 15,3), 6,66 (3, ддд; 15,3, 9,6 и 5,7), 2,36 (4, м), 2,40 (4, м), 5,00 (5, м), 2,47 (6, м), 1,08 (6Ме, д; 6,8), 5,85 (7, дд; 15,5 и 8,5), 5,43 (8, ддд;
15,5, 7,6 и 0,6), 3,35 (9, дд; 7,6 и 1,9), 3,75 (10, д;
1,9), 7,27-7,37 (273747576’, м); В: 4,82 (2, м), 5,65 (2-МН, д; 8,5), 3,04 (3, дд; -14,4 и 7,2), 3,14 (3, дд; -14,4 и 5,5), 7,22 (5, д; 2,1), 3,87 (7-ОМе, с),
6,84 (8, д; 8,5), 7,08 (9, дд; 8,5 и 2,1); С; 2,72 (2,
129
130
м), 1,22 (2-Ме, д; 7,2), 3,27 (3, м), 3,52 (3, м),
6,90 (3-1ЧН, ушт; 6,3); Ό: 4,87 (2, дд; 9,8 и 3,8),
1,48 (3, м), 1,77 (3, м), 1,73 (4, м), 0,89 (4-Ме, д;
6,4), 0,90 (5, д; 6,6).
13С ЯМР (СБС13), остаток, δ (положение углерода). А: 165,4(1), 125,2(2), 141,2(3), 36,4(4), 41,3(6), 16,9 (6-Ме), 135,9(7), 129,1(8), 62,3(9), 60,4(10), 136,8(1'), 125,5 (276), 128,6(3'/5'),
128,4(4'); В: 170,9(1), 53,6(2), 35,1(3), 129,8(4), 131,0(5), 122,4(6), 154,0(7), 56,1 (7-ОМе),
112,2(8), 128,4(9); С: 175,5(1), 38,3(2), 14,0 (2Ме), 41,2(3); Ό: 170,8(1), 71,4(2), 39,7(3), 24,7(4),
21.5 (4-Ме), 22,9(5).
Криптофицины 168 и 169. Криптофицин 153 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой и получают криптофицины 168 и 169.
Криптофицин 168. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 684/686 (7/2), 412/414 (17/6), 280/282 (12/6), 257(20), 212/214 (14/4), 195/197 (69/24), 121(100); М.-с. высокого разрешения, 1Е, т/е 684,2789 (вычислено для
С39Н45СШ2О9, ошибка 2,6 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 169. Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицины 170 и 171. Криптофицин 159 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой и получают криптофицины 170 и 171.
Криптофицин 170. М.-с., ΕΙ, т/е (относительная интенсивность) 682/684 (4/3), 412/414 (11/4), 280/282 (15/4), 255(25), 195/197 (52/17); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е 682,3043 (вычислено для С37Н47СШ2О8, ошибка -2,2 м.м. е). Данные по 1 Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 171. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 682/684 (2,0/0,7), 412/414 (7/4), 280/282 (14/4), 255(19), 195/197 (50/17); М.-с. высокого разрешения, 1Е, т/е 682,3006 (вычислено для С37Н47СШ2О8, ошибка
1.5 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицины 173 и 174. Криптофицин 171 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой и получают криптофицины 173 и 174.
Криптофицин 173. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 704/706 (1,3/0,4), 412/414 (5,1/1,9), 277(6,3), 141(100); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е 704,2838 (вычислено для С39Н45СШ2О8, ошибка 2,7 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице. 7.
Криптофицин 174. Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицины 177 и 178. Криптофицин 166 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой и получают криптофицины 177 и 178.
Криптофицин 177. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 668(2,7), 412/414 (9/3), 280/282 (11/4), 241(16), 195/197 (45/17),
105(100); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е
668.2835 (вычислено для С36Н45СШ2О8, ошибка 2,9 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 178. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 668/670 (4/1,4), 412/414 (17/6), 280/282 (12/4), 241(24), 195/197 (59/18), 105(100); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е
668.2836 (вычислено для С36Н45СШ2О8, ошибка 2,9 м.-м.е). Данные по 1Н-ЯМР см, в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицины 179 и 180. Криптофицин 167 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием процедуры, описанной выше для эпоксидирования криптофицина 151, и получают криптофицины 179 и 180.
Криптофицин 179. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 682/684 (25/13), 412/414 (100/43), 280/282 (100/50), 255(100), 211(100), 195/197 (100/100), 121(100); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/е 682,2992 (вычислено для С37Н47СШ2О8, ошибка 2,9 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 180. М.-с., Е1, т/е (относительная интенсивность) 682/684 (4/3), 412/414 (14/7), 280/282 (16/11), 255(10), 195/197 (58/21), 119(100); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/ζ 682,3021 (вычислено для С37Н47СШ2О8, ошибка 0 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицины 182 и 183. Криптофицин 181 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой и получают криптофицины 182 и 183.
Криптофицин 182. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 672(1), 412/414 (11/4), 280/282 (10/4), 245(12), 195/197 (40/12), 109(77); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/ζ 672,2590 (вычислено для С35Н42С1ЕН2О8, ошибка 2,3 м.м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 183. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 672/674 (5/2), 412/414 (32/12), 280/282 (13/4), 245(29), 195/197 (92/30), 109(100); М.-с. высокого разрешения, Е1, т/ζ 672,2620 (вычислено для С35Н42С1Е^О8, ошибка -0,7 м.-м.е). Данные 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 200. Криптофицин 188 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием той же общей процедуры, за исключением того, что дополнительное количество перкислоты (3 эквивалента) добавляют через 12 ч и перемешивание продолжают в течение 36 ч и получают криптофицин 200 и 88эпоксид.
Криптофицин 200. М.-с., Е1, т/ζ (относительная интенсивность) 690/692 (42/16), 412/414
131
132 (7/1), 263(19), 195/197 (27); М.-с. высокого разрешения, Е^ т/ζ 690,2494 (вычислено для Ο^Η^ΟΡΝ^, ошибка 2,6 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 6; данные по 13С ЯМР см. в таблице 7.
Криптофицин 242. Криптофицин 236 обрабатывают т-СРВА и продукты реакции выделяют с использованием той же общей процедуры при получении криптофицинов 242 и его 88эпоксида. Криптофинин 242 очищают ВЭЖХ с нормальной фазой (ЕсопозП 81, 250х10 мм, 10 мкм, ЕЮАс с гексаном, 1:1, 3 мл/мин, 81 мин). Криптофицин 242. 1Η ЯМР (СЭС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц), А: 5,73 (2, д; 15,4), 6,64 (3, ддд; 15,4, 10,2 и 5,0), 2,42 (4, м), 2,57 (4, м), 5,14 (5, м), 1,79 (6, м), 1,12 (6-Ме, д; 6,7), 2,93 (7, дд; 8,4 и 1,6), 3,69 (8, д; 1,6), 7,26а (2'/6', д; 8,2), 7,22а (375’, д; 8,2), 4,28 (4’-СН2^трет-Вос, д; 5,9), 4,96 (4'-СН2№Н-трет-Вос, ушс),
1,44 ^'-С^ОТ-трет-Вос, с); В: 4,66 (2, м), 5,66 (2-Ν4, д; 7,8), 2,92 (3, дд; -14,5 и 7,2), 3,14 (3, дд; -14,5 и 5,0), 7,21 (5, д; 2,0), 3,85 (7-ОМе, с),
6,88 (8, д; 8,5), 7,09 (9, дд; 8,5 и 2,0); С: 2,68 (2, м), 1,17 (2-Ме, д; 7,4), 3,33 (3, м), 3,39 (3, м),
6,95 (3-ΝΗ, ушт; 6,1); О: 4,85 (2, дд; 10,0 и 3,3),
1,37 (3, м), 1,67-1,73 (3/4, м), 0,84 (4-Ме, д; 6,7), 0,86 (5, д; 6, 7).
13С ЯМР (СЭС13), остаток, δ (положение углерода), А: 165,7(1), 125,4(2), 141,7(3), 37,2(4), 76,6(5), 40,9(6), 13,7 (6-Ме), 63,4(7), 59,0(8), 136,4(1'), 126,2б (2'/6'), 127,9б (3'/5'), 140,2(4'), 44,5 (4’-СН^Н-трет-Вос), 28,5 (4'-СН ЛН-тро Вос); В: 171,2(1), 54,6(2), 35,5(3), 130,5(4), 131,2(5), 122,5(6), 154,4(7), 56,1 (7-ОСН3),
112,7(8), 128,8(9); С: *(1), 38,6(2), 14,4 (2-Ме), 41,1(3); Ό: 171,2(1), 71,6(2), 39,9(3), 24,9(4), 23,1 (4-Ме), 21,4(5). а и б - сигналы с идентичными верхними индексами равноценны.
Криптофицин 269. Криптофицин 243 (6 мг) в ацетоне (1,2 мл) обрабатывают твердым К2СО3 при энергичном перемешивании в реакторе при комнатной температуре. Через 12 ч реакционную смесь фильтруют и испаряют растворитель. Остаток очищают в короткой колонке с диоксидом кремния с использованием смесей С^С12 с ЕЮАс и получают криптофицин 269 (5,1 мг).
1Н ЯМР (СЭС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц), А: 5,70 (2, д; 15,4), 6,67 (3, м), 2,42 (4, дт; 14,4 и 10,4), 2,53 (4, м), 5,11-5,19 (5, м), 1,63-1,83 (6, м), 1,14 (6-Ме, д; 6,8), 2,92 (7, д; 7,6), 3,69 (8, ушс), 7,37а (2’/6’, д; 7,9), 7,24а (3'/5', д; 7,9), 4,71 (4'-СН2ОН, с); В: 4,74-4,85 (2, м), 5,76 (2-Ν4, д; 8,3), 2,98 (3, дд; -14,5 и 7,7),
3,13 (3, дд; -14,5 и 5,3), 7,20 (5, ушс), 3,86 (7ОМе, с), 6,82 (8, д; 8,3), 7,05 (9, ушд; 8,3); С:
2,68 (2, м), 1,14 (2-Ме, д; 7,3), 3,32 (3, м), 3,45 (3, м), 6,98 (3-ΝΗ, ушм); I): 4,74-4,85 (2, м), 1,35 (3, м), 1,63-1,83 (3/4, м), 0,85 (4-Ме, д; 6,1), 0,87 (5, д; 6,1). а - сигналы с идентичными верхними индексами равноценны.
Таблица 6. Данные 1Н ЯМР для криптофицинов 1, 157, 158, 168, 169, 170, 173, 174, 177, 178, 179, 180, 182, 183 и 200.
ские сдвиги даются для протонов или метильной, или метоксильной функциональной группы, расположенных на атоме углерода, указанном в таблице. Химические сдвиги для протонов в остатках В и С находятся в пределах ±0,2 м.д., а константы взаимодействия - в пределах ±0,5 Гц от соответствующих величин в криптофицине 1. Ι(Η,Η), в Гц, для 157: 2',3' = 3',4' = 7,7; 5',6' = 6', 7' = 7', 8' = 7,9; 5',7' = 1,5; 6',8' = 1,1; Ι(Η,Η), в Гц, для 168: 4',5' = 5', 6' = 8,0; Ι(Η,Η), в Гц, для 173: 3',4' = 8,5; 1',3' = 1,4; 5',6' = 7', 8' = 8,3. Наблюдаемые взаимодействия для протонов на арильном сегменте 158, 169 и 174 находятся в пределах ±0,5 Гц от величин для 157, 168 и 173, соответственно. Наблюдаемые константы взаимодействия для протонов в состоянии покоя в таблице находятся в пределах ±0,5 Гц от соответствующих величин в криптофицине 1.
Таблица 7. Данные 13С ЯМР, для криптофицинов 157, 158, 168, 169, 170, 173, 174, 177, 178, 179, 180, 182, 183 и 200
133
134
Спектры регистрируют в СЭС13. Химические сдвиги для углеродов в остатках В и С находятся в пределах ±0.5 м.д. от соответствующих величин в криптофицине 1. * - сигналы замаскированы сигналом СЭС13. ** - сигналы нельзя обнаружить, Т. а и б - сигналы с идентичными верхними индексами являются равноценными. Сигнал 3'-ОСН3, как в криптофицине 168. так и в 169 наблюдают при δ 55.3. Сигналы углеродов 2'- и 4'-СН3 криптофицина 170 наблюдают при δ 18.9 и 21.0. соответственно. Углеродные сигналы 2'-СН3 криптофицинов 177 и
178 попадают в резонанс при δ 19.0 и 18.9. соответственно. 3' и 5'-СН3 сигналы криптофицина
179 наблюдают при δ 21.3. а сигналы криптофицина 180 - при 21.2.
Пример 93. Хлоргидриновые аналоги.
Криптофицины 163. 184. 185. 186. 187. 191. 192. 193. 194. 195. 212. 216. 217. 222. 223.
224. 243. 252. 253. 263. 264. 265. 272 и 273.
Таблица 8
Криптоф.эпоксид, в № Аг : Хлоргидрин , № Стереохим. , У Отнош. транс /цис
157 191 192 транс цис 1.1 : 1
168 '“ХУ* 195 транс цис 1 : < 0.1
170 216 217 транс цис 1 : 2.6
179 •χτ'* СИ, 222 транс цис < 0.1 : I
172 СО5 193 194 транс цис 1 : 2
181 оС 223 транс цис 1 : < 0.1
200 V 212 'транс цис 1 : < 0.1
44 184 транс
44 ж 224 186 транс цис 1 ; 2
<444 243 транс цис 1 : < 0.1
* Криптофицин 200 претерпевает только 30% конверсию в этих условиях.
** Смесь КК-эпоксидов 3.4- и 2,3диметилфениловых аналогов.
*** Смесь КК- и 88-эпоксидов.
Криптофицин 163. К раствору криптофицина 81 (12 мг, 0.018 ммоль) в СН2С12 (1.5 мл) при 0°С добавляют т-СРВА (5 мг, 0.029 ммоль), а затем НС1 в уксусной кислоте (1,0М раствор, 25 мкл). и поднимают температуру до комнатной и продолжают перемешивание в течение 6 ч. Испарение растворителя и последующая флэш-хроматография остатка в колонке с диоксидом кремния С1 8 (12 см х 1 см) с использованием смесей Н2О с СН3СИ приводят к получению смеси хлоргидринов (12 мг, 93%). Попытка очистки ВЭЖХ с обращенной фазой приводит к частичному гидролизу до диолов. Однако очистка ВЭЖХ с нормальной фазой (диоксид кремния Εсοηοк^1. 250 мм х 10 мм, ΕЮАс с гексаном, 1:1) дает криптофицин 163 (ΐκ 37.2 мин, 3.0 мг) . Данные протонного и углеродного ЯМР приводятся в таблицах 9 и 10. соответственно.
Криптофицины 184, 185, 186, 187 и 224. Смесь 3,4-диметилбензилтрифенилфосфонийхлорида и 2.3-диметилбензилтрифенилфосфонийхлорида (7:3) превращают в 3.4- и 2.3диметилбензилтрифенилфосфораны и затем обрабатывают криптофицином 108 с использованием процедуры, описанной ранее для получения криптофицина 152. Получают неразделяемую смесь четырех изомеров стиролов с общим выходом 68%. Смесь (45 мг) в СН2С12 (3 мл) обрабатывают т-СРВА (25 мг) при комнатной температуре и при перемешивании в тече135
136 ние 15 ч. Растворитель удаляют, а остаток подвергают ВЭЖХ (Есоио811 С18, 250 х 22 мм, Н2О с СН3СМ 7:3, 6 мл/мин) и собирают двефракции - I (1К 54,0 мин, 20 мг) и II (1К 61,5 мин, 12 мг). Фракцию I (9 мг) в СН2С12 (2,0 мл) обрабатывают ТМ8С1 (40 мкл) при -78°С и постепенно поднимают температуру до комнатной. Через 3 ч испаряют растворитель, проводят хроматографию с обращенной фазой (Есоиокб С18, 10 мкм, 250 х 22 мм, Н2О с СН3СК 35:65, 6 мл/мин) и получают криптофицин 186 (1К 57,8 мин, 4,7 мг), криптофицин 224 (1К 74,5 мин, 2,3 мг) и криптофицин 184 (1К 78,2 мин, 2,6 мг). С использованием той же процедуры обрабатывают ТМ8С1 фракцию II и соединения разделяют и получают криптофицин 185 (1К 65,0 мин, 0,7 мг) и криптофицин 187 (1К 60,2 мин, 8,0 мг).
Криптофицин 184. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684 (1,1/0,4), 236(10), 195(9), 135(100), 119(83); М.-с. высокого разрешения. ΞΣ, т/ζ 682,2999 (М+-НС1), вычислено для С.'з-Н.ГСШ2О8. ошибка 2,2 м.-м.е). Данные по протонному и углеродному ЯМР приводятся в таблице 9 и таблице 10, соответственно.
Криптофицин 185. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684 (6/2), 412/414 (14/5), 280/282 (14/5), 255(10) 195/197 (50/16), 119(100); М.-с. высокого разрешения, Еф т/ζ 682,3015 (М+-НС1, вычислено для С37Н47С1Ч2О8, ошибка 0,6 м.-м.е). Данные по протонному и углеродному ЯМР приводятся в таблице 9 и таблице 10, соответственно.
Криптофицин 186. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684 (1,3/0,6), 412/414 (2,5/0,8), 254(7), 195(11), 119(100); М.-с. высокого разрешения, Еф т/ζ 682,3015 (М+-НС1, вычислено для С37Н47СШ2О8, ошибка 0,6 м.м. е). Данные по протонному и углеродному ЯМР приводятся в таблице 9 и таблице 10, соответственно.
Криптофицин 187. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684 (0,9/0,2), 412/414 (3/1), 255(3), 254(7), 195(11), 135(100), 119(94); М.-с. высокого разрешения. Еф т/ζ 682,3044 (М+-НС1, вычислено для С37Н47СШ2О8, ошибка -2,3 м.-м.е). Данные по протонному и углеродному ЯМР приводятся в таблице 9 и таблице 10, соответственно.
Криптофицин 224. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684 (3/1), 412/414 (3/1), 255(4), 254(9), 195/197 (28/6), 119(100); М.-с. высокого разрешения, Еф т/ζ 682,3064 (М+-НС1, вычислено для С37Н47С1Ч2О8, ошибка 4,3 м.-м.е). Данные по протонному и углеродному ЯМР приводятся в таблице 9 и таблице 10, соответственно.
Криптофицины 191, 192, 193, 194, 195, 212, 216, 217, 222 и 223. Общая процедура получения хлоргидринов.
Раствор КК-эпоксида в хлороформе охлаждают до -60°С и обрабатывают избытком три метилсилилхлорида (10 эквивалентов). Через 2 ч растворитель испаряют, а остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (ЕсоиокП С18, 10 мкм, 35% Н2О в СН3СЧ, 3 мл/мин) и получают транс- и цис-хлоргидрины.
Подробности эксперимента по получению криптофицинов 191, 192, 193, 194, 195, 212, 216, 217, 222 и 223 и данные по цитотоксичности приводятся в таблице 8.
Криптофицин 195. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 684/686(6/2), 412/414 (12/4), 257(11), 195/197 (46/15); М.-с. высокого разрешения. Е1, т/ζ 684,2784 (М'-НС'Ч. вычислено для С36Н45С1Ч2О8, Δ 3,0 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 9; данные по 13С ЯМР см. в таблице 10.
Криптофицин 212. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность); М.-с. высокого разрешения Еф т/ζ (М' -НС1, вычислено для С36Н41С1Т2Ч2О8, Δ м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 9; данные по 13С ЯМР см. в таблице 10.
Криптофицин 216. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684(6/3), 412/414 (6/2), 255(4), 195/197 (21/7); М.-с. высокого разрешения. Еф т/ζ 682,2990 (М+-НС1, вычислено для С37Н47СШ2О8, Δ 3,1 м.-м.е).
1Н ЯМР (СОСф), амино- или гидроксикис лотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,79 (2, д; 15,4), 6,70 (3, ддд; 15,4, 9,5 и 5,4), 2,36 (4, м), 2,67 (4, ушдд;
14,9 и 4,9), 5,01 (5, м), 2,52 (6, м), 1,07 (6-Ме, д;
7,1), 4,07 (7, ушд; 9,8), 5,01 (8, д; 9,8), 2,36 (2'СН3, с), 7,01 (2', ушс), 2,31 (4'-СН3, с), 7,06 (5', ушд; 8,1), 7,32 (6', д; 8,1); В: 4,81 (2, м), 5,71 (2ЧН, д; 8,5), 3,02 (3, дд; -14,4 и 7,4), 3,16 (3, дд; 14,4 и 5,6), 7,23 (5, д; 2,0), 3,88 (7-ОМе, с), 6,85 (8, д; 8,3), 7,09 (9, дд; 8,3 и 2,0); С: 2,74 (2, м),
1,23 (2-Ме, д; 7,1), 3,25 (3, м), 3,53 (3, м), 6,93 (3ЧН, ушм); Ό: 4,93 (2, дд; 10,2 и 3,2), 1,49 (3, м),
1,68-1,85 (3/4, м), 0,95 (4-Ме, д; 6,4), 0,96 (5, д;
6,4)
Криптофицин 217. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 682/684 (3/1), 412/414 (6/1), 255(5), 195/197 (23/7); М.-с. высокого разрешения, ЕI т/ζ 682,2920 (М+-НС1, вычислено для С37Н47С1Ч2О8, Δ 10,1 м.-м.е).
1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,72 (2, д; 15,4), 6,66 (3, ддд; 15,4, 9,7 и 5,4), 2,17 (4, дт; 13,9 и 10,9), 2,53 (4, ушдд; 13,9 и 5,0), 5,08 (5, м), 1,61 (6, м), 0,88 (6-Ме, д; 6,8), 4,28 (7, ушд; 9,6), 5,13 (8, д; 9,6),
2,38 (2'-СН3, с), 7,03 (2', ушс), 2,32 (4'-СН3, с), 7,03 (5', ушд; 8,5), 7,17 (6', д; 8,5); В: 4,80 (2, м),
5,66 (2-ΝΗ, д; 8,1), 3,03 (3, дд; -14,4 и 7,2), 3,14 (3, дд; -14,4 и 5,6), 7,21 (5, д; 1,6), 3,87 (7-ОМе, с), 6,83 (8, д; 8,3), 7,08 (9, дд; 8,3 и 1,7); С: 2,74 (2, м), 1,24 (2-Ме, д; 7,1), 3,29 (3, м), 3,50 (3, м),
6,96 (3-ΝΗ, ушм); Ό: 4,89 (2, дд; 9,8 и 3,4), 1,52
137
138 (3, м), 1,87 (3, м), 1,72 (4, м), 0,94 (4-Ме, д; 7,3), 0,97 (5, д; 6,8).
Криптофицин 222. М.-с., ΞΣ, т/ζ (относительная интенсивность) 718/720(0,4/0,2),
682/684(13/7), 412/414(15/2), 280/282 (16/5), 255(12), 195/197 (59/19); М.-с. высокого разрешения, ЕТ, т/ζ 718,2767 (вычислено для
С37Н48С12Ы2О8, Δ 2,1 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 9; данные по 13С ЯМР см. в таблице 10.
Криптофицин 223. М.-с., Еф т/ζ (относительная интенсивность) 672/674 (1/0,8), 412/414 (3/1), 195/197 (15/3); 149(100), 109 (35);М.-с. высокого разрешения, т/ζ 708,2373 (вычислено для С35Н43ЕС12Ы2О8, Δ 0,7 м.-м.е). Данные по 1Н ЯМР см. в таблице 9; данные по 13С ЯМР см. в таблице 10.
Криптофицин 243.
Эпоксидирование криптофицина 238. Криптофицин 238 (11,8 мг) растворяют в дихлорметане (1,5 мл) и обрабатывают МСРВА (9,6 мг). Через 15 ч реакционную смесь разбавляют дихлор метаном (3 мл) и промывают 0,1М фосфатным буфером при рН 8 (3 мл). Органический слой обрабатывают диметилсульфидом (10 мкл) и повторяют промывку буфером. Органический слой упаривают и остаток (12 мг) очищают, без успеха, ВЭЖХ с обращенной фазой (Есопо8Й С18, 25 см х 22 мм, 10 мкм, 35% Н2О в СН3СМ 6 мл/мин) и получают смесь КК- и 88эпоксидов (6,2 мг).
Обработка ТМ8С1. Смесь растворяют в хлороформе (1 мл) и обрабатывают ТМ8С1 (15 мкл) при -60°С. Через 2 ч растворитель испаряют, а остаток (7 мг) подвергают ВЭЖХ с нормальной фазой (Есопокй 81, 25 см х 10 мм, 10 мкм, 85% ЕЮАс в гексане, 4 мл/мин). Фракцию, собранную при 30 мин, дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Есопокй С18, 25 см х 10 мм, 10 мкм, 45%, Н2О в ΟΗ3ΟΝ, 3 мл/мин) и получают криптофицин 243 (2,4 мг).
Криптофицин 243. 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; Σ в Гц), А: 5,76 (2, д; 15,0), 6,67 (3, ддд; 15,0, 9,6 и 5,4), 2,35 (4, дт; 14,4 и 10,4), 2,64 (4, ушдд; 14,4 и 5,1), 5,07 (5, м), 2,50 (6, м), 1,04 (6-Ме, д; 6,8), 4,02 (7, ушд; 9,8), 4,68 (8, д; 9,8), 7,39 (2'/3'/5'/6'/ушс),
4,70 (4'-СН2ОН, ушс); В: 4,74 (2, м), 5,72 (2-ЫН, д; 7,8), 2,99 (3, дд; -14,4 и 7,3), 3,14 (3, дд; -14,4 и 5,6), 7,22 (5, д; 2,0), 3,88 (7-ОМе, с), 6,84 (8, д;
8,4), 7,08 (9, дд; 8,4 и 2,0); С: 2,73 (2 ,м), 1,21 (2Ме, д; 7,1), 3,23 (3, дт; 13,7 и 7,1), 3,50 (3, дт;
13,7 и 4,5), 6,93 (3-ЫН, ушдд; 7,1 и 4,5); Ό: 4,91 (2, дд; 10,0 и 3,4), 1,47 (3, м), 1,64-1,84 (3/4, м), 0,94 (4-Ме, д; 6,4), 0,95 (5, д; 6,3).
13С ЯМР (СОС13), остаток, δ (положение углерода), А: 165,6(1), 125,0(2), 141,9(3), 36,3(4), 76,4(5), 38,3(6), 8,7 (6-Ме), 74,0(7), 62,0(8), 137,7(1'), 127,4а (2'/6'), 128,2а (3'/5'), 142,2(4'),
64,6 (4'-СН2ОН); В: 171,1б(1), 53,6(2), 35,1(3),
129,9(4), 131,0(5), 122,4(6), 154,0(7), 56,2 (7СН3), 112,3(8), 128,4(9); С: 175,4(1), 38,5(2), 14,1(2-Ме), 41,2(3); Ό: 170,5б(1), 71,4(2), 39,7(3), 24,8(4), 23,2 (4-Ме), 21,6(5).
а б и - сигналы с идентичными верхними индексами равноценны.
Криптофицины 252 и 253.
Эпоксидирование криптофицина 247. Криптофицин 247 (12 мл) растворяют в дихлорметане (1 мл) и обрабатывают МСРВА (9,8 мг). Через 15 ч реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (3 мл) и промывают и 0,1М фосфатным буфером при рН 8 (3 мл). Органический слой отделяют и снова повторяют промывку буфером после добавления диметилсульфида (15 мл). Органический слой упаривают и остаток (11,5 мг) очишают ВЭЖХ с обращенной фазой (Есопокй С18, 25 см х 10 мм, 10 мкм, 35% Н2О в СН3СН 3 мл/мин) и получают основной КК-эпоксид (5 мг) и менее важный 88-эпоксид (3 мг).
КК-эпоксид. 1Н ЯМР (СЭСЕ). амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; Σ в Гц), А: 5,74 (2, д;
15,6), 6,67 (3, ддд; 15,6, 9,5 и 5,6), 2,44 (4, дт;
14,7 и 10,5), 2,50-2,58 (4, м), 5,15 (5, м), 1,62-1,81 (6, м), 1,12 (6-Ме, д; 6,8), 2,91 (7, дд; 7,3 и 1,5),
3,66 (8, д; 1,5), 7,38 (2', ушс), 6,54 (3'-ЫН, с), 1,51 (3'-NН-трет-Βοс), 7,21-7,30 (475', м), 6,91 (6', ушд; 6,8); В: 4,79 (2, м), 5,69 (2-ЫН, д; 8,5), 3,00 (3, дд; 14,5 и 7,3), 3,13 (3, дд; 14,5 и 5,5), 7,20 (5, д; 2,0), 3,86 (7-ОМе, с), 6,83 (8, д; 8,3), 7,06 (9, дд; 8,3 и 2,0); С: 2,70 (2, м), 1,22 (2-Ме, д; 7,1),
3,30 (3, м), 3,46 (3, м), 6,97 (3-ЫН, м); Ό: 4,83 (2, дд; 10,0 и 3,4), 1,36 (3, м), 1,62-1,81 (3/4, м), 0,85 (4-Ме, д; 5,9), 0,87 (5, д; 5,6).
Отщепление защитной группы от аминогруппы и получение хлоргидрина.
Раствор КК-эпоксида (8,0 мг) в дихлорметане (100 мкл) обрабатывают хлористоводородной кислотой (50 мкл, 4Ы раствор в диоксане). Через 30 мин растворитель испаряют и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Есопокй С18, 25 см х 10 мм, 10 мкм, 40% Н2О в СН3СН 3,5 мл/мин) и получают криптофицин 252 (5 мг, 1К мин) и криптофицин 253 (2 мг, 1К мин).
Данные по цитотоксичности криптофицина 252: клеточная линия (кратность возможности криптофицина 1).
КВ (1,20) и ЬоУо (1,25).
Криптофицин 252. М.-с., т/е (относительная интенсивность) 670/672 (7,2/2,2),
669/671 (19,2/7,8), 280/282 (6,8/2,4), 242(4,7), 195/197 (43/12); М.-с. высокого разрешения, т/е 669,2856 (М+-2НС1-Н, вычислено для
С35Н44СШ3О8, ошибка -3,9 м.-м.е).
1 Н ЯМР (МеОН), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; Σ в Гц). А: 5,93 (2, д; 15,1), 6,616,78 (3, м), 2,33 (4, дт; 14,7 и 9,8), 2,69-2,80 (4,
м), 5,11 (5, м), 2,46 (6, м), 0,95-1,04 (6-Ме, м),
139
140
3,99 (7, ушд; 9,4), 4,62 (8, д; 9,4), 7,28 (2', ушс),
7,17 (4', ушд; 8,1), 7,07 (5', т; 8,1), 6,98 (6', д; 8,1); В: 4,50 (2, дд; 10,5 и 3,2), 2,69-2,80 (3, м), 3,18 (3, ушд; 13,7), 6,61-6,78 (5, 8 и 9, м) , 3,86 (7ОМе, с); С: 2,69-2,80 (2, м), 1,19 (2-Ме, д; 7,3),
3,28 (3, ушд; 13,4), 3,58 (3, ушд; 13,4); Ό: 5,01 (2, дд; 9,8 и 2,7), 1,53 (3, м), 1,70-1,84 (3/4, м), 0,951,04 (4/5-Ме, м).
Криптофицин 253. 1Н ЯМР (МеОН), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,84 (2, дд; 15,3 и 1,6), 6,60-6,74 (3, м), 2,10 (4, дт;
14,9 и 11,2), 2,64 (4, м), 5,05 (5, м), 1,50 (6, м), 0,90 (6-Ме, д; 6,8), 4,01 (7, дд; 9,5 и 1,2), 4,75 (8, д; 9,5), 6,60-6,74 (27476', м), 7,09 (5', т; 7,8); В:
4,48 (2, дд; 11,4 и 3,9), 2,71 (3, дд; 14,4 и 11,4),
3,16 (3, дд; 14,4 и 3,7), 7,26 (5, д; 2,2), 3,86 (7ОМе, с), 6,96 (8, д; 8,4), 7,15 (9, дд; 8,4 и 2,2); С:
2,76 (2, м), 1,18 (2-Ме, д; 7,3), 3,26 (3, м), 3,58 (3, дд; 13,5 и 3,1); Ό: 4,94 (2, дд; 9,4 и 3,8), 1,58 (3, м), 1,80 (3, м), 1,70 (4, м), 0,97 (4-Ме, д; 6,1), 0,98 (5, д; 6,3).
Криптофицины 263, 264 и 265.
Смесь криптофицина 242 и его 88эпоксида (26 мг) растворяют в СН2С12 (5 мл) и обрабатывают ТМ8С1 (1,0М раствор в СН2С12, 120 мкл) при -78°С. Через 3 ч растворитель испаряют, а остаток (27 мг) подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (ЕсопозП С18, 250 мм х 22 мм, 10 мкм, СН3СЫ с Н2О, 65:35, 6 мл/мин) и получают криптофицин 264 (6,0 мг, 1К 43 мин) и смесь криптофицинов 263 и 265 (15,8 мг, 1К 59 мин). Криптофицины 263 и 265 разделяют ВЭЖХ с нормальной фазой (диоксид кремния ЕсопозП, 250 мм х 10 мм, 10 мкм, ЕЮАас с гексаном, 55:45, 3 мл/мин) и получают криптофицин 265 (7,1 мг, 51 мин) и криптофицин 263 (7,8 мг, 79,0 мин).
Данные по цитотоксичности
Криптофицин, № Цитотоксичность, кратность силе криптофицина 1, КВ, ЬоУо
263 1,67 0,56
264 0,044 0,023
265 0,0033 0,021
Криптофицин 263. 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,79 (2, д; 15,6), 6,68 (3, м), 2,37 (4, м), 2,66 (4, ушдд;
14,2 и 4,2), 5,10 (5, м), 2,49 (6, м), 1,03 (6-Ме, д;
6,8), 4,00 (7, ушд; 9,4), 4,64 (8, д; 9,4), 7,35 (2'/6', ушд; 7,9), 7,29 (375', ушд; 7,9), 4,31 (4'-СН2ИНтрет-Вос, д; 4,8), 4,92 (4'-СН2ЫН-трет-Вос, ушс),
1,45 (4'-СН2ХН-трет-Вос, с); В: 4,79 (2, м), 5,76 (2-ΝΉ, д; 8,6), 3,01 (3, дд; -14,4 и 7,3), 3,15 (3, дд; -14,4 и 4,9), 7,23 (5, д; 1,3), 3,87 (7-ОМе, с),
6,84 (8, д; 8,4), 7,09 (9, ушд; 8,4); С: 2,73 (2, м),
1,22 (2-Ме, д; 7,2), 3,24 (3, м), 3,53 (3, м), 6,93 (3ΝΉ, ушт; 5,5); Ό: 4,92 (2, дд; 9,7 и 3,1), 1,48 (3, м), 1,78 (3, м), 1,73 (4, м), 0,93 (4-Ме, д; 6,4), 0,94 (5, д; 6,4).
13С ЯМР (СОС13), остаток, δ (положение углерода) А: 165,6(1), 125,3(2), 141,6(3), 36,4(4), 76,5(5), 38,3(6), 8,7 (6-Ме), 74,1(7), 61,8(8), 137,5а(1'), 128,3 (2'/6'), 128,0 (3'/5'), 140,3а(4'),
44,2 (4'-СН2ХН-трет-ВОС), 28,4 и 155,9 (4'СН2Х1Н-трет-Вос); В: 171,1б (1), 53,7(2), 35,1(3), 130,0(4), 131,1(5), 1-22,4(6), 154,0(7), 56,2 (7ОСН3), 112,3(8), 128,5(9); С: 175,4(1), 38,4(2),
14.1 (2-Ме), 41,3(3); Ό: 170,6б (1), 71,4 (2), 39,8(3), 24,8(4), 23,2 (4-Ме), 21,6(5).
а и б - сигналы с идентичными верхними индексами являются равноценными.
Криптофицин 264. 1Н ЯМР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц), А: 5,71 (2, д; 15,4), 6,63 (3, ддд; 15,4, 9,9 и 5,5), 2,12 (4, м), 2,51 (4, ушдд; 14,2 и 5,0), 5,05 (5, м), 1,47 (6, м), 0,92 (6-Ме, д; 6,8), 4,06 (7, дд; 9,6 и 1,5), 4,87 (8, д; 9,6), 7,29 (2'/6', ушд; 8,4), 7,27 (3'/5', ушд;
8.4) , 4,33 (4'-СН2ХН-трет-Вос, ушс), 1,47 (4'СН-ХН-трет-Вос, с); В: 4,80 (2, м), 5,69 (2-ΝΉ, ушс), 3,01 (3, дд; -14,5 и 7,2), 3,13 (3, дд; -14,5 и
5.4) , 7,21 (5, д; 2,0), 3,86 (7-ОМе, с), 6,83 (8, д;
8.4) , 7,07 (9, дд; 8,4 и 2,0); С: 2,73 (2, м), 1,23 (2Ме, д; 7,3), 3,28 (3, м), 3,52 (3, м), 6,93 (3-ΝΉ, ушт; 5,7); Ό: 4,86 (2, м), 1,50 (3, м), 1,86 (3, м),
1,73 (4, М), 0,95 (4-Ме, д; 6,6), 0,98 (5, д; 6,8), 13С ЯМР (СЭС13). остаток, δ (положение углерода). А: 165,4(1), 125,1(2), 141,4(3), 36,2(4), 76,0(5), 38,3(6), 8,8(6-Ме), 74,3(7), 68,4(8), 136,6а (1'), 128,0 (2'/6'), 127,7 (3'/5'), 140,3а(4'), 44,2 (4'СН2ХН-трет-Вос), 28,4 (4'-С112ΝΙ 1-трет-Вос); В: 171,0б (1), 53,6(2), 35,0(3), 129,9(4), 131,0(5), 122,4(6), 153,9(7), 56,1 (7-ОСН3), 112,2(8),
128,4(9); С: 175,4 (1), 38,5(2), 1 4,1 (2-Ме), 41,2(3); Ό: 170,4б(1), 71,4(2), 39,8(3), 24,8(4),
23.2 (4-Ме), 21,7(5). а и б - сигналы с идентичными верхними индексами являются равноценными.
Криптофицин 265. 1Н ЯНР (СОС13), амино- или гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; 1 в Гц). А: 5,74 (2, д; 15,5), 6,68 (3, ддд; 15,5, 9,9 и 5,3), 2,36 (4, м), 2,54 (4, ушдд; 14,2 и 4,9), 5,40 (5, м), 1,87 (6, м), 1,05 (6-Ме, д; 7,0), 3,71 (7, ушт; 5,8), 5,07 (8, д; 5,3), 7,36 (2'/6', ушд; 8,2), 7,28 (3'/5', ушд; 8,2), 4, 30 (4'-СН2ХН-трет-Вос, ушс), 4,91 (4'-СН2ХНтрет-Вос, ушс), 1,46 (4' -СН2ХН-трет-Вос, с); В:
4,78 (2, м), 5,70 (2-ΝΉ, ушс), 3,03 (3, дд; -14,5 и
7,1), 3,12 (3, дд; -14,5 и 5,5), 7,21 (5, д; 1,8), 3,87 (7-ОМе, с), 6,84 (8, д; 8,4), 7,07 (9, дд; 8,4 и 1,8); С: 2,72 (2, м), 1,23 (2-Ме, д; 7,1), 3,33 (3, м), 3,48 (3, м), 6,97 (3-ΝΉ, ушт; 5,7); Ό: 4,83 (2, дд; 9,7 и 4,3), 1,43 (3, м), 1,70 (3, м), 1,63 (4, м), 0,93 (4Ме, д; 6,4), 0,88 (5, д; 6,4).
13С ЯМР (СОС13), остаток, δ (положение углерода). А: 165,5 (1), 125,0(2), 142,0(3),
34,6(4), 74,4(5), 39,8(6), 12,9 (6-Ме), 77,5(7),
66,7(8), 137,3а(1'), 127,9(2'/6'), 127,8 (3'/5'),
139,9а(4'), 44,2(4'-СН2ХН-трет-Вос), 28,4 (4'СН2ХН-трет-Вос); В: 171,0б(1), 53,6(2), 35,1(3),
141
142
129,9(4), 131,0(5), 122,4(6), 154,0(7), 56,1 (7ОСН3), 112,3(8), 128,4(9); С: 175,6(1), 38,4(2),
14,1 (2-Ме), 41,3(3); Ό: 170,3б(1), 71,5(2), 39,4(3), 24,7(4), 22,8 (4-Ме), 21,6(5).
а б и - сигналы с идентичными верхними индексами являются равноценными.
Криптофицин 272. Криптофицин 263 (4,9 мг, 0,006 ммоль) в СН2С12 (30 мкл) обрабатывают 4Ν раствором НС1 в диоксане (30 мкл, 0,012 ммоль) при комнатной температуре. Через 3 ч растворитель удаляют, а остаток держат под вакуумом в течение 2 суток для удаления последних следов диоксана и получают криптофицин 272 (4,4 мг, 98%). *Н ЯМР (СЭС13), аминоили гидроксикислотный остаток, δ (положение углерода, мультиплетность; I в Гц) . А: 5,94 (2, дд; 15,0, 1,8), 6,69 (3, ддд; 15,0, 11,1 и 4,9), 2,36 (4, м), 2,72 (4, м), 5,13 (5, м), 2,48 (6, м), 1,01 (6Ме, д; 7,1), 4,02 (7, дд; 9,4 и 2,0), 4,84 (8, д; 9,4),
7,45 (2’/6’, д; 8,4), 7,51 (375’, д; 8,4), 4,11 (4'СН2ЫН2НС1, с); В: 4,51 (2, дд; 11,2 и 3,9), 2,74 (3, м), 3,18 (3, дд; -14,5 и 3,9), 7,28 (5, д; 2,2),
3,84 (7-ОМе, с), 6,98 (8, д; 8,4), 7,17 (9, дд; 8,4 и 2,3); С: 2,77 (2, м), 1,19 (2-Ме, д; 7,5), 3,29 (3, м),
3,58 (3, дд; 13,7 и 3,3); Ό: 5,02 (2, дд; 9,5 и 3,8),
1,56 (3, м), 1,78 (3, м), 1,78 (4, м), 0,97 (4-Ме, д;
6,6), 0,99 (5, д; 6,6).
13С ЯМР (СЭС13), остаток, δ (положение углерода). А: 168,4 (1), 125,4(2), 144,0(3),
37,7(4), 77,3(5), 40,4(6), 8,1 (6-Ме), 74,8(7), 63,3(8), 142,5а(1'), 130,0(2'/6'), 130,3а (3'/5'),
134,6а(4'), 44,0 (4'-СН2ЫН2НС1); В: 174,1(1), 57,4(2), 36,3(3), 132,2(4), 131,5(5), 123,3(6), 155,4(7), 56,6 (7-ОСН3), 113,5(8), 129,3(9) С: 177,5(1), 39,1(2), 15,1 (2-Ме), 41,2(3); Ό: 172,1 (1), 72,8(2), 41,2(3), 26,0(4), 22,1 (4-Ме), 23,6(5). а - сигналы являются равноценными.
Криптофицин 273. К раствору криптофицина 234 (146 мг) в СН2С12 (8 мл) при 0°С добавляют 3-хлорпербензойную кислоту (128 мг). Раствор постепенно нагревают до комнатной температуры и продолжают перемешивание в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляют СН2С12 (7 мл) и промывают фосфатным буфером (2х10 мл, 0,1М, рН 8). Органический слой отделяют и обрабатывают диметилсульфидом (50 мл) для уничтожения избытка перкислоты и снова промывают буфером. Органический слой упаривают и остаток подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (250 мм х 22 мм, 10 мкм, 15% Н2О в СН3СН 6 мл/мин) и получают ККэпоксид (74 мг, 50%).
нический экстракт сушат над Мд8О4 и упаривают. Остаток очищают на небольшой колонке с использованием 50-100% ЕЮАс в СН2С12 и получают криптофицин 269 (62 мг, 98%).
С1 осн»
Криптофицин 269
К раствору криптофицина 269 (62 мг), Ν(трет-Вос)глицина (30 мг) и ОМАР (8 мг) в СН2С12 (3 мл) при 0°С добавляют ЭСС (160 мкл, 1М раствор в СН2С12). Получающуюся в результате смесь перемешивают при 0°С в течение 15 мин и при комнатной температуре в течение 2 ч. По окончании этого периода смесь фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток подвергают флэш-хроматографии на диоксиде кремния ОЭ8 с использованием 75-30% Н2О в ΠΗ^Ν и получают Ν-трет-ВОС-глицинат криптофицина 269 (64,4 мг, 85%).
К раствору глицината (64,4 мг) в хлороформе (3 мл) при -60°С добавляют 200 мкл 1М раствора ТМ8С1 в СН2С12. Через 1 ч растворитель испаряют, а остаток очищают в небольшой колонке с диоксидом кремния с использованием 40-90% ЕЮАс в гексане и получают трансхлоргидрин глицината (60 мг, 89%).
Раствор хлоргидрина (55 мг) в дихлорметане (0,25 мл) обрабатывают 4М раствором хлористого водорода в 1,4-диоксане (0,1 мл). Получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, концентрируют в вакууме и сушат в устройстве для сушки вымораживанием в течение 48 ч. Получают криптофицин 273 в виде белого твердого вещества.
Криптофицин 273.
Раствор эпоксида (74 мг) в ТГФ (3 мл) обрабатывают 115 мкл 1М раствора тетрабутиламмонийфторида в СН2С12. Через 1,5 ч к реакционной смеси добавляют насыщенный раствор ЫН4С1 и экстрагируют ЕЮАс (2х30 мл). Орга143
144
Таблица 9. Данные !Н ЯМР для криптофицинов 8, 163, 184, 185, 186, 187, 191, 192, 193, 194, 195, 212, 222, 223 и 224 р = положение
Р к 163 184 185 186 187 191 192 193 194 195 212 222 223 224
А2 5.79 5.80 5.79 5.74 5.71 5.75 5.80 5.68 5.80 5.67 5.79 5.80 5.71 5.80 5.79
3 6.69 6.70 6.70 6.68 6.64 6.69 6.70 6.63 6.70 6.62 6.69 6.68 .6.65 6.69 6.69
ДДД
АВ 2.37 2.35 2.38 2.36 2.15 2.37 2.40 2.10 2.40 2.09 2.37 2.40 2.17 2.39 2.37
И и м И и и
45 2.67 2.75 2.70 235 233 239 2.70 2.47 2.69 231 2.68 2.64 2.54 2.60 2.68
М _ и м м и м
5 5.10 5.00 5.12 5.32 5.06 5.40 5.14 5.07 5.13 5.07 5.11 5.10 5.07 5.11 5.11
цдд м м И
6 230 2.85 2.54 1.91 1.50 1.83 2.65 1.64 235 137 2.49 2.47 1.51 2.48 230
и К И
6-Ме 1.05 1.13 1.09 1.09 0.93 1.06 1.18 0.95 1.09 0.90 1.04 1.03 0.93 1.04 1.04
7 4.00 4.41 4.09 3.84 4.07 3.74 4.35 4.48 4.12 4.20 3.99 3.95 4.07 4.16 3.98
УВДТ
8 4.65 Д 4.80 5.12 5.46 4.83 5.02 5.66 5.72 4.84 5.06 4.61 439 4.81 5.03 4.60
9 10
8/10- 7.84 7.76
Аг-Γ м ушс
2’ 7.36 7.25 2.30 2.28 7.06 7.15 7.72 736 6.97 6.94 6.90 7.15
ДО Д С Д лис ушс УВД м ушс ушс
3 7.40 6.88 2.31 2.30 2127 2.24 730 7.49 732 7.42 7.30 2.32 7.06 2.26
м__ |д . с Д с уши м . ДД Т ДО
Спектры регистрируют в СБС13. Химические сдвиги даются для протонов или метильной, или метоксильной функциональной группы, расположенных на атомах углерода, указанных в таблице. Химические сдвиги для протонов в остатках В и С находятся в пределах ±0,2 м.д., а константы взаимодействия - в пределах ±0,5 Гц от соответствующих величин в криптофицине 8. 1(Н,Н), в Гц, для 163: 2',3' = 5', 6' = 8,7; 1(Н,Н), в Гц, для 186: 2',6' = 2,0; 5',6' = 7,7; 1(Н,Н), в Гц, для 193 и 194; 3',4' = 8,5; 1(Н,Н), в Гц, для 195: 2',3' = 3', 4' = 7,9; 2',6' = 4', 6' = 2,4. Наблюдаемые константы взаимодействия для протонов в состоянии покоя в таблице находятся в пределах ±0,5 от соответствующих величин в криптофицине 8. 1(Н,Н), в Гц, для 212: 3'-Р,4Н = 4-Н,5-Р = 8,7; 2',4' = 4', 6' = 2,3.
Таблица 10. Данные 13С ЯМР, 125 МГц,
Спектры регистрируют в СБС13. Химические сдвиги для углеродов в остатках В и С находятся в пределах ±0,5 м.д. от соответствующих величин в криптофицине 8. * Сигналы нельзя обнаружить из-за уменьшенного размера образца. + Обозначения ориентировочные. ** Слиты с сигналами растворителя. Углерод 4ОМе криптофицина 163, а также 195, попадает в резонанс при δ 55,3. Углероды 2'-Ме и 3'-Ме 185 появляются при δ 15,0 и 20,9, соответственно. Углероды 3'-Ме и 4'-Ме 186 наблюдают при δ 19,6 и 19,9, соответственно. Те же углероды наблюдают, соответственно, при δ 19,5 и 19,8 в 187 и при δ 19,5 и 19,8 в 224. Углероды 3' и 5'Ме 223 наблюдают при δ 21,3.
Пример 94. В общую группу К в 2' (ниже) включаются простой эфирный заместитель и некоторые ацильные заместители, как показано в таблице 1 (также ниже). Новые криптофициновые аналоги получают с выходом от умеренного до высокого с помощью приемов этерификации. См. Микег, I., Тго81 В.М. Р1еттд, I. Ей., СошргеЬеп81уе Огдатс 8упШе818; 6:323-380 (Регдатоп рге88: ОхГогй, 1991); Веп/, О. Тго81, В.М., Р1еттд, I., Ей., СотргеЬеп81уе Огдатс 8упШе818; 6:381-417 (Регдатоп рге88; ОхГогй, 1991). Гидрохлориды аминов получают с высоким выходом из соответствующих трет-бутилкарбаматов путем обработки хлористоводородной кислотой, в то время как динатриевую соль 7' получают из 6' после индуцированного хлористоводородной кислотой расщепления трет-бутилового эфира и обработки гидроксидом натрия. Пиридиниевую
145
146 соль 9' получают из 1' по способу №со1аои.
№со1аио, е1. а1., Аиде^. Сйет. ЙН. Еб. Еид1., 33:1583+ (1994).
2 (355702)
1' 2' (Обозначения используются в следующем ниже описании методов синтеза)
Таблица 1. Группы К общей структуры 2' (упомянутой выше)
Получение конъюгатов, показанных в таблице 1, осуществляют по нескольким схемам, обычно включающим методологию с активированным сложным эфиром с последующей хроматографией и, при необходимости, индуцируемым кислотой деблокированием. Так, путем обработки 1' уксусным ангидридом в присутствии триэтиламина и 4-диметиламинопиридина получают 3' с выходом 89% после флэшхроматографии. Подобным образом, 5' можно получить из 1' при действии янтарного ангидрида с последующей очисткой ВЭЖХ с обращенной фазой7. С другой стороны, после кислотной обработки моно-трет-бутилового эфира 4' получают 5'. Воздействие раствора 1' в пиридине на коммерчески доступный гидрохлорид никоти-ноилхлорида в присутствии триэтиламина и 4-диметиламинопиридина с последующей хроматографией и обработкой хлористым водородом приводит к образованию 8' с высоким выходом. Пиридиниевую соль 9' получают с выходом 47% по способу №со1аои (см. выше), когда 1' обрабатывают коммерчески доступным 2-фтор-1 -метилпиридиний-птолуолсульфонатом, а затем осуществляют очистку ВЭЖХ с обращенной фазой с сопутствующим анионным обменом (п-толуолсульфоната на ацетат) и лиофилизацию. Остальные сложные эфиры получают с выходом от умеренного до высокого из 1' и коммерчески доступных (за исключением соединений 4', 6, 10', 43' и 45') аминокислот с Ν-трет-Вос-защитной группой с активацией при действии 1,3-дициклогексилкарбодиимида в присутствии 4-диметиламинопиридина. Гидрохлориды получают с высоким выходом путем обработки 4,0М раствором хлористого водорода в диоксане и удаления растворителя в вакууме. Динатриевую соль 7' получают из 6' после расщепления трет-бутилового эфира, индуцированного хлористоводородной кислотой, и обработки гидроксидом натрия. Кислоту 24', необходимую для получения 5', синтезируют с выходом 63% в пять стадий, характерных для способа Джонса для введения фосфатной функциональной группы. См. Репей, 1.^.; 1ойи§ К.В., е1 а1., 8уи1йе818, 1988: 142.
Некоторые из новых конъюгатов испытаны на цитотоксичность 1и уйго на модели опухолевых клеток Сс3, как описано здесь выше. Результаты приводятся ниже в таблице 2.
Таблица 2. Данные по цитотоксичности криптофицинов 1и уйго
Соединение !(Л Ос3 (нМ) Соединение !(Л Ос3 (нМ)
1' 0,065 28' 2,60
3' 83 30' 30
5' 31 32' 7,2
7' 3,7 34' 6,5
8' 116 36' 2,8
9' 2,2 38' 1,6
11' 6,8 40' 2,0
13' 7,0 42' 15
15' 60 44' 28
17' 3,6 46' 50
19' 0,10 47' 2,5
21' 21 48' 10
25' 230
Исследования устойчивости проводят в водных средах с рН в интервале 4-8 и определяют процент оставшегося неизменным продукта.
Превращение трет-бутилкарбаматов в соответствующие соли можно осуществить с помощью любых сильных кислот, а именно минеральных кислот, образующих гидрогалогениды,
-сульфаты, -фосфаты, -нитраты, -перхлораты, или сильных органических кислот, таких как трифторуксусная, п-толуолсульфоновая и ме147
148 тансульфоновая. Те же кислоты можно использовать для получения солей типа 8' из соответствующих свободных оснований. Различные контрионы (катионы) могут входить в соли типа 7', в том числе любые из щелочных и щелочноземельных металлов. Различные контрионы (анионы) могут входить в состав солей типа 9', а именно, любое основание, сопряженное с кислотой (органической или минеральной).
Получение ацетата криптофицина 55 (3') (Σ8Ν 362376). К раствору 1' (93 мг, 0,13 ммоль) в 659 мкл метиленхлорида при 0°С добавляют триэтиламин (55 мкл, 0,40 ммоль), 4диметиламинопиридин (1,6 мг, 0,013 ммоль) и уксусный ангидрид (19 мкл, 0,20 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч реакцию гасят 19 мкл метанола, смесь концентрируют до 0,5 объема и вносят непосредственно в колонку для флэш-хроматографии (19 г флэшсиликагеля). Элюирование этилацетатом с гексаном (3:1) дает 88 мг (89%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (СНС13) δ 7,38-7,31 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,22-7,18 (м, 1Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,1 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,5 Гц),
6,75 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,6 Гц), 5,78 (дд, 1Н, 1=15, 1,0 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,46 (дд, 1Н, 1=9,8, 1,2 Гц), 4,95 (дд, 1Н, 1=11, 2,9 Гц), 4,89 (ддд, 1Н, 1=9,9, 9,9, 1,7 Гц), 4,81 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,79-4,74 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1=13, 8,1 Гц), 3,22 (дл, 1Н, 1=13, 4,1 Гц), 3,16 (дд, 1Н, 1=14, 5,1 Гц), 3,07 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2,65-2,55 (м, 2Н), 2,47-2,39 (м, 1Н), 1,95 (ддд, 1Н, 1=14, 13, 4,6 Гц), 1,86-1,77 (м, 1Н), 1,73-1,66 (м, 1Н), 1,68 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н), 1,09 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,97 (д, 3Н, 1=6,6 Гц).
Получение трет-бутилсукцината криптофицина 55 (4') (Σ8Ν 384665). К раствору 1' (133 мг, 0,188 ммоль), моно-трет-бутилового эфира янтарной кислоты10 (66 мг, 0,377 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (2,3 мг, 0,019 ммоль) в 850 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дицикло гексилкарбодмимида (78 мг, 0,377 ммоль) в 92 мкл метиленхлорида. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч реакционную смесь обрабатывают 150 мг целита и разбавляют 1 мл смеси этилацетата с гексаном (3:1) и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (25 г флэш-силикагеля) с элюированием этилацетатом с гексаном (2:1) дает 157 мг (97%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (СОС13) δ 7,38-7,30 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,22-7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,0 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,5 Гц),
6,74 (ддд, 1Н, 1=15, 10, 4,6 Гц), 5,76 (д, 1Н, 1=15
Гц), 5,51 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 5,47 (д, 1Н, 1=9,6 Гц),
4,97 (дд, 1Н, 1=11, 3,1 Гц), 4,90 (т, 1Н, 1=9,3 Гц),
4,83 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 4,79-4,73 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1=13, 8,0 Гц), 3,22 (дд, 1Н, 1=13, 4,0 Гц), 3,16 (дд, 1Н, 1=14, 5,1 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2, 63-2, 55 (м, 2Н), 2,442,37 (м, 1Н), 2,32-2,21 (м, 2Н), 2,19-2,06 (м, 2Н),
1,99-1,92 (м, 1Н), 1,85-1,68 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н),
1,27 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 0, 98 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Получение сукцината криптофицина 55 (5') (Σ8Ν 377092) из трет-бутилсукцината криптофицина 55.
К раствору 4' (127 мг, 0,147 ммоль) в 491 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (184 мкл, 0,737 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч. Концентрация в вакууме дает 119 мг (100%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
Получение сукцината криптофицина 55 (5') (Σ8Ν 377092) из янтарного ангидрида.
К раствору 1' (27 мг, 0,038 ммоль) и янтарного ангидрида (5,7 мг, 0,057 ммоль) в 383 мкл метиленхлорила при комнатной температуре добавляют триэтиламин (16 мкл, 0,115 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (4,7 мг, 0,038 ммоль). После перемешивания в течение 19 ч добавляют еще 5,7 мг (0,057 ммоль) янтарного ангидрида и 4,7 мг (0,038 ммоль) 4-диметиламинопиридина и перемешивают еще в течение 29 ч. Реакционную смесь обрабатывают 0,5 мл 1\ соляной кислоты и промывают метиленхлоридом (3х0,5 мл). Объединенные органические экстракты сушат (\а28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до белой пены. Очистка ВЭЖХ с обращенной фазой дает 10 мг (32%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, '11 ЯМР (ΟϋΟ13) δ 7,36-7,31 (м, 6Н), 7, 22 (ушс, 1Н), 7,08 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,02 (ушс, 1Н), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,61 (м, 1Н), 5,94-5,87 (м, 2Н), 5,51 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,95 (дд, 1Н, 1= 10, 2,8 Гц), 4,87-4,76 (м, 3Н), 3,90 (с, 3Н),
3,39 (дд, 1Н, 1=16, 5,6 Гц), 3,28 (дд, 1Н, 1=16, 8,2 Гц), 3,17 (дд, 1Н, 1=16, 5,6 Гц), 3,05 (дд, 1Н, 1=16, 8,2 Гц), 2,68-2,62 (м, 1Н), 2,60-2,46 (м, 2Н),
2,45-2,28 (м, 3Н), 2,01-1,93 (м, 2Н), 1,88-1,70 (м, 2Н), 1,26 (с, 3Н), 1,18 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 1,00 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Получение (2'-ди-трет-бутилфосфатил) фенилацетата криптофицина 55 (6') (Σ8Ν 379407).
К раствору 1' (0,102 ммоль), 24' (46 мг, 0,134 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (12 мг, 0,102 ммоль) в 250 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (27 мг, 0,134 ммоль) в 50 мкл метиленхлорида. После перемешивания при комнатной температуре в течение 6 ч реакционную смесь разбавляют 1 мл смеси этилацетата с гексаном (3:1) и фильтруют
149
150 через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до фиолетовой пены. Хроматография (15 г флэшсиликагеля) с элюированием этилацетатом с гексаном (4:1) дает 86 мг (82%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СЛС13) δ 7,35 (д, 1Н, 1=8,3), 7,30-7,19 (м, 8Н), 7,11 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,02 (т, 1Н, 1=7,5 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,84 (д, 1Н, 1=7,5 Гц), 6,73 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,7 Гц), 5,92 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,79 (дд, 1Н, 1=15, 1,0 Гц), 5,43 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,8 Гц), 4,98 (дд, 1Н, 1=12, 3,1 Гц), 4,81 (ддд, 1Н, 1=9,9, 9,9, 1,8 Гц),
4,75 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 4,73-4,67 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 3,49 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,44-3,38 (м, 1Н), 3,38 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,27-3,17 (м, 2Н), 3,10 (дд, 1Н, 1=14, 8,2 Гц), 2,55-2,46 (м, 2Н), 2,37-2,27 (м, 1Н),
1,95 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,5 Гц), 1,83-1,70 (м, 2Н),
1,49 (с, 18Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,03 (д, 3Н, 1=6,5 Гц), 0,97(д,ЗН, 1=6,4 Гц) , 0, 92 (д, 3Н, 1=7,0 Гц).
Получение 2'-(ди-трет-бутилфосфатил) фенилуксусной кислоты (24') (Σ8Ν 379402).
К раствору 2'-гидроксифенетилового спирта (1,05 г, 7,60 ммоль) в 15,2 мл Ν,Νдиметилформамида при 0°С добавляют имидазол (621 мг, 9,11 ммоль) и третбутилдиметилсилилхлорид (1,26 г, 8,34 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 40 мин и в течение 45 мин при комнатной температуре добавляют еще 155 мг (2,28 ммоль) имидазола и 229 мг (1,52 ммоль) трет-бутил-диметилсилилхлорида. Реакционную смесь перемешивают еще в течение 15 мин и в это время добавляют 150 мл трет-бутил-метилового эфира. Смесь промывают холодной 1Ν соляной кислотой (1х15 мл), а затем водой (1х15 мл). Органический слой сушат Ща28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме и получают желтое масло. Хроматография (70 г флэш-силикагеля) с элюированием гексаном с этилацетатом (5:1) дает 1,81 г (94%) первичного силилового эфира в виде почти белого масла. К раствору силилового эфира (506 мг, 2,00 ммоль) и ди-третбутилдиэтилфосфорамидита (600 мкл, 93%, 2,00 ммоль) в 2 мл тетрагидрофурана при комнатной температуре добавляют 1 -Н-тетразол (421 мг, 6,01 ммоль). После перемешивания в течение 45 мин реакционную смесь охлаждают до -10°С и быстро обрабатывают раствором м-хлорпербензойной кислоты (450 мг, 99%, 2,61 ммоль) в 3,6 мл метиленхлорида. Мутную белую реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 15 мин. Реакцию гасят 4 мл 10% водного раствора бисульфита натрия, энергично перемешивают в течение 10 мин, разбавляют смесь 15 мл третбутилметилового эфира и промывают 10% водным раствором бисульфита натрия (2х10 мл), а затем 0,5Ν водным раствором гидроксида натрия (2х10 мл). Органический слой сушат (Иа28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до бесцветного масла (941 мг), которое непосредственно используют на следующей стадии. Неочищенный фосфат растворяют в 10 мл тетрагидрофурана, охлаждают до 0°С и обрабатывают 1М раствором тетра-н-бутиламмонийфторида в тетра-гидрофуране (2,4 мл, 2,4 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 20 мин и в течение 1,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют 60 мл трет-бутилметилового эфира и промывают водой (1х10 мл), а затем рассолом (1х10 мл). Органический слой сушат (Ыа28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до желтого масла. Хроматография (50 г флэш-силикагеля) с элюированием этилацетатом с гексаном (3:1) дает 525 мг (79%) 1° спирта в виде не совсем белого масла. К раствору спирта (123 мг, 0,372 ммоль) в ацетонитриле с четыреххлористым углеродом (1:1, 1,49 мл) при комнатной температуре добавляют воду (1,1 мл), а затем периодат натрия (239 мг, 1,12 ммоль) и гидрат хлорида рутения (III) (1,8 мг, 0,0082 ммоль). Коричневую смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 55 мин. После концентрирования в вакууме и хроматографии (8 г флэшсиликагеля, элюирование 10% метанола в этилаце-тате) получают 109 мг (85%) названного в заголовке соединения в виде фиолетового масла.
500 МГц, 1Н ЯМР (СЛС13) δ 7,49 (д, 1Н, 1=7,53 Гц), 7,30-7,15 (м, 3Н), 3,77 (с, 2Н), 1,51 (с, 1 8Н).
Получение динатриевой соли (2'фосфатил)фенилацетата криптофицина 55 (7') (Γ8Ν 374122).
К раствору 6' (84 мг, 0,081 ммоль) в 400 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (81 мкл, 0,33 ммоль). Бледножелтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. После концентрирования в вакууме до не совсем белой пены сырой дигидрофосфат растворяют в 614 мкл тетрагидрофурана и обрабатывают 5,00Ν водным раствором гидроксида натрия (33 мкл, 0,163 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин смесь концентрируют в вакууме до желтоватокоричневой пены. Сырую соль растворяют в 1 мл горячего ацетонитрила и 0,1 мл горячей воды. Нерастворившиеся вещества отфильтровывают, а фильтрат концентрируют в вакууме и получают 69 мг (87%) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,58 (д, 1Н,
1=8,2), 7,38-7,32 (м, 2Н), 7,32-7,28 (м, 3Н), 7,28 (д, 1Н, 1=2,1), 7,17 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,1 Гц), 7,09 (ддд, 1Н, 1=7,8, 7,8, 1,7 Гц), 6,98 (д, 1Н, 1=8,5
Гц), 6,79-6,70 (м, 2Н), 6,67 (д, 1Н, 1=7,4 Гц), 5,91 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,7 Гц), 5,45 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,6
Гц), 5,06 (дд, 1Н, 1=10, 2,7 Гц), 5,01 (д, 1Н, 1=9,4
151
152
Гц), 4,89-4,80 (м, 1Н), 4,47 (дд, 1Н, 1=11, 3,8 Гц), 3,84 (с, 3Н), 3,67 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,45 (д, 1Н, 1=14 Гц), 3,42 (д, 1Н, 1=16 Гц), 3,18 (дд, 1Н, 1=14, 3,8 Гц), 3,12 (д, 1Н, 1=14 Гц), 2,77 (дд, 1Н, 1=14, 11 Гц), 2,67-2,60 (м, 1Н), 2,56-2,48 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,96-1,88 (м, 2Н), 1,85-1,77 (м, 2Н), 1,22 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,03 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 0,93 (д, 3Н, 1= 7,1 Гц).
Получение гидрохлорида никотиноата криптофицина 55 (8') (Ε8Ν 368265).
К раствору 1’ (50 мг, 0,071 ммоль) в 354 мкл пиридина при комнатной температуре добавляют гидрохлорид никотиноилхлорида (15 мг, 0,085 ммоль), а затем триэтиламин (23 мкл, 0,170 ммоль). После перемешивания в течение 1,5 ч добавляют 4-диметиламинопиридин (8,6 мг, 0,071 ммоль). После перемешивания в течение 5 ч добавляют еще триэтиламин (23 мкл, 0,170 ммоль), 4-диметиламинопиридин (8,6 мг, 0,071 ммоль) и гидрохлорид никотиноилхлорида (15 мг, 0,085 ммоль) вместе с 50 мкл пиридина для смывки. После перемешивания в течение 18 ч реакционную смесь обрабатывают 0,5 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и промывают метиленхлоридом (4х1 мл), объединенные органические экстракты сушат Ща28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до светло-коричневого масла. Хроматография (14 г флэш-силикагеля) с элюированием этилацетатом с гексаном (10:1) дает 49 мг (85%) свободного основания в виде белой пены. Никотиноат растворяют в 1 мл метиленхлорида и обрабатывают 1,0М раствором хлористого водорода в диэтиловом эфире (90 мкл, 0,090 ммоль). Прозрачный бесцветный раствор оставляют при комнатной температуре на 5 мин. После удаления растворителя в вакууме получают 51 мг названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СЭС13) δ 8,94 (с, 1Н),
6,78 (ушс, 1Н), 8,29 (д, 1Н, 1=7,0), 7,57 (ушс, 1Н), 7,38 (д, 2Н, 1=7,1), 1,30-7,16 (м, 5Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,7 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,71 (м, 1Н), 5,80 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,74 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 5,56 (ушс, 1Н), 5,00 (д, 1Н, 1=9,6 Гц),
4,95 (т, 1Н, 1=8,9 Гц), 4,84 (д, 1Н, 1=9,8 Гц),
4,77-4,72 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1=13,
8,2 Гц), 3,23-3,14 (м, 2Н), 3,06 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2,81-2,74 (м, 1Н), 2,62-2,45 (м, 2Н), 1,93 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,8 Гц), 1,78-1,70 (м, 1Η),
1,66-1,59 (м, 1Н), 1,25 (с, 3Н), 1,20 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,19 (с, 3Н), 0,98 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,84 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Получение Ν-метилпиридинийацетата криптофицина 55 (9') (Σ8Ν 366550).
К раствору 1’ (53 мг, 0,075 ммоль) в 751 мкл метиленхлорида при 0°С добавляют триэтиламин (13 мкл, 0,090 ммоль), а затем 2-фтор1-метилпиридиний-п-толуолсульфонат (23 мг, 0,083 ммоль). Неоднородную реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 3,5 ч, после чего добавляют еще 11 мг (0,039 ммоль) 2-фтор-1метилпиридиний-п-толуолсульфоната. После перемешивания в течение 14,5 ч добавляют еще 11 мг (0,039 ммоль) 2-фтор-1-метилпиридинийп-толуолсульфоната, затем, через 2,5 ч, еще 11 мг (0,039 ммоль) 2-фтор-1-метилпиридиний-птолуолсульфоната и 13 мкл (0,090 ммоль) триэтиламина. После перемешивания еще в течение 1 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме до оранжевой пены. Очистка ВЭЖХ с обращенной фазой с одновременным анионным обменом (п-толуолсульфонат на ацетат) с последующей лиофилизацией дает 30 мг (47%) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, 1Н ЯМР (ДМСО-66) δ 8,65-8,58 (м, 2Н), 8,36 (т, 1Н, 1=7,8 Гц), 7,68 (д, 1Н, 1=8,9 Гц), 7,60 (д, 1Н, 1=6,6 Гц), 7,48 (т, 1Н, 1=6,6 Гц),
7,35-7,21 (м, 6Н), 7,19 (дл, 1Н, 1=8,5, 1,9 Гц), 7,05 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,49 (ддд, 1Н, 1=16, 13, 4,0 Гц), 5,91 (д, 1Η, 1=16 Гц), 5,72 (д, 1Н, 1=8,0 Гц),
5,66 (дд, 1Н, 1=8,0, 1,9 Гц), 5,32-5,27 (м, 1Н),
4,73 (дд, 1Н, 1=9,7, 4,3 Гц), 4,24 (ддд, 1Н, 1=11,
9,8, 3,7 Гц), 3,93 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,32 (дд, 1Η, 1=13, 9,3 Гц), 3,05-2,97 (м, 2Н), 2,77-2,57 (м, 3Н), 2,54-2,47 (м, 1Η), 1,76 (с, 3Н), 1,68-1,62 (м, 1Н), 1,55-1,46 (м, 1Η), 1,37-1,30 (м, 1Н), 1,15 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,13 (с, 3Н), 1,00 (с, 3Н), 0,88 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,73 (д, 3, 1=6,5 Гц).
Получение №трет-Вос-3-(3-хлор-4-метоксифенил)-(Б)-аланината криптофицина 55 (10') (Ι.8Ν382049).
К раствору 1’ (23 мг, 0,033 ммоль), Ν-третВос-3 -(3 -хлор-4-метоксифенил)-(Э)-аланина4с (16 мг, 0,049 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (несколько кристаллов) в 143 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (10 мг, 0,049 ммоль) в 20 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 2 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (2:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (2:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (14 г флэшсиликагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 29мг (88%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СЭС13) δ 7,42-7,27 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,0), 7,25-7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,91-6,86 (м, 2Н), 6,84-
6,70 (м, 3Н), 5,75 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,53 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 5,47 (д, 1Н, 1=7,6), 5,00 (дд, 1Н, 1=10,
2,9 Гц), 4,90-4,80 (м, 2Н), 4,78-4,71 (м, 1Н), 4,63 (д, 1Н, 1=8,3 Гц), 4,19-4,12 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н),
3,88 (с, 3Н), 3,40 (дд, 1Н, 1=13, 8,1 Гц), 3,25-3,12 (м, 2Н), 3,07 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2,67-2,57 (м, 2Н), 2,39-2,27 (м, 2Н), 2,15 (дд, 1Н, 1=14, 8,0 Гц),
153
154
2,01 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,2 Гц), 1,87-1,76 (м, 2Н),
1,39 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,09-1,04 (м, 6Н), 1,01 (д, 3Н, 1=6,3 Гц).
Получение гидрохлорида 3-(3-хлор-4метоксифенил)-(Б)-аланината криптофицина 55 (11') (Ε8Ν 382048).
К раствору 10' (27 мг, 0,027 ммоль) в 265 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (33 мкл, 0,133 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 26 мг (96%, исправлено на 5 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7,3 Гц), 7,49-7,45 (м, 2Н), 7,47-7,48 (м, 3Н),
7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,13 (д, 1Н, 1=2,2 Гц), 7,07-6,95 (м, 3Н), 6,71 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,8 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15, 1,8 Гц), 5,69 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,22 (д, 1Н, 1=10 Гц),
5,18 (дд, 1Н, 1=10, 2,5 Гц), 4,89-4,80 (м, 1Н), 4,53 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 4,16 (дд, 1Н, 1=10, 4,4 Гц),
3,88 (с, 3Н), 3,87 (с, 3Н), 3,51 (дд, 1Н, 1=13, 9,9 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,7 Гц), 3,14 (дд, 1Н, 1=13, 2,3 Гц), 2,82-2,75 (м, 3Н), 2,45 (дд, 1Н, 1=15, 4,5 Гц), 2,42-2,34 (м, 1Н), 2,08-2,00 (м, 1Н), 1,97-1,86 (м, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,16 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,10 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,0 Гц).
Получение Х-трет-Вос-(Ь)-фенилаланината криптофицина 55 (12') (Ε8Ν 382235).
К раствору 1' (29 мг, 0,041 ммоль), Ν-третВос-(Ь)-фенилаланина (16 мг, 0,062 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0,5 мг, 0,0041 ммоль) в 165 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (13 мг, 0,062 ммоль) в 42 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 40 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (2:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (2:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (12 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 20 мг (50%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,40-7,47 (м, 2Н), 7,25-7,37 (м, 6Н), 7,12-7,22 (м, 4Н), 7,00 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,78-6,71 (м, 1Н), 5,94 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,48 (д, 1Н, 1=9, 5 Гц), 5,15-5,10 (м, 1Н), 5,06 (д, 1Н, 1=9,5 Гц), 4,68 (т, 1Н, 1=9,7 Гц),
4,52 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 4,14-4,10 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,49 (д, 1Н, 1=13 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14,
3,7 Гц), 3,14 (д, 1Н, 1=13 Гц), 2,77 (дд, 1Н, 1=14,
Гц), 2,67 (дд, 1Н, 1=14, 6,2 Гц), 2,62-2,57 (м, 2Н), 2,51 (дд, 1Н, 1=14, 9,1 Гц), 2,31-2,23 (м, 1Н), 2,00-1,92 (м, 1Н), 1,91-1,82 (м, 2Н), 1,38 (м, 2Н),
1,26 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=5,9 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=5,8 Гц), 0,87 (д, 3Н, 1=7,0 Гц).
Получение гидрохлорида (Е)-фенилаланината криптофицина 55 (13') (Ε8Ν 382236).
К раствору 12' (18 мг, 0,019 ммоль) в 189 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (24 мкл, 0,094 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 15 мг (88%, исправлено на 2 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7, 6 Гц), 7,48-7,23 (м, 11Н), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,6,
1,6 Гц), 6,75-6,68 (м, 1Н), 5,97 (д, 1Н, 1=16 Гц),
5,55 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 5,15-5,11 (м, 2Н), 4,71 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,55-4,51 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,21 (дд, 1Н, 1= 14, 3,8 Гц), 3,17-3,10 (м, 2Н), 2,94 (дд, 1Н, 1=15, 8,1 Гц), 2,78 (дд, 1Н, 1=14, 12 Гц),
2,69-2,63 (м, 2Н), 2,34-2,27 (м, 1Н), 1,98-1,92 (м,1Н), 1,89-1,82 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 0,89 (д, 3Н, 1=7,0 Гц).
Получение дигидрохлорида (Ь)-гистидината криптофицина 55 (15') (Б8Н 384046).
К раствору 1' (19 мг, 0,027 ммоль), Ν,Ν-дитрет-Вос-(Ь)-гистидинбензольного комплекса (18 мг, 0,040 ммоль) и 4-диметиламидопиридина (0,3 мг, 0,0027 ммоль) в 100 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (8,3 мг, 0,040 ммоль) в 35 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 60 мин добавляют еще 18 мг ^№ди-трет-Вос-(Ь)-гистидинбензольного комплекса (0,040 ммоль) и 8,3 мг 1,3дициклогексилкарбодиимида (0,040 ммоль). Мутную белую реакционную смесь перемешивают еще 4 ч, разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (13 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 3:1) дает 17 мг (61%) Ν,Ν'-ди-трет-Вос соединения (14') в виде белой пены. К раствору 14' (17 мг, 0,016 ммоль) в 160 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (24 мкл, 0,098 ммоль). После перемешивания в течение 5 ч мутную белую реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 15,7 мг (100%, исправлено на 4 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 8,91 (с, 1Н),
7,77 (д, 1Н, 1=9,5 Гц), 7,51-7,37 (м, 6Н), 7,31 (д,
1Н, 1=2,1 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 6,666,58 (м, 1Н), 5,99 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,57 (д, 1Н, 1=
155
156
9,6 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 5,15 (дд, 1Н, 1=10, 3,0 Гц), 4,58 (т, 1Н, 1=11 Гц), 4,53 (дд, 1Н, 1=11,
3.8 Гц), 4,14 (т, 1Н, 1=6,4 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,55-
3,47 (м, 1Н), 3,27-3,12 (м, 3Н), 2,81-2,68 (м, 3Н),
2,40-2,31 (м, 1Н), 1,98-1,81 (м, 3Н), 1,25 (с, 3Н),
1,21 (с, 3Н), 1,10-1,04 (м, 6Н), 1,04 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение Х-трет-Вос-(Ь)-пролината криптофицина 55 (16') (Σ8Ν 382926).
К раствору 1' (19 мг, 0,027 ммоль), Ν-третВос-(Ь)-пролина (8,7 мг, 0,040 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0,3 мг, 0,0027 ммоль) в 100 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (8,3 мг, 0,040 ммоль) в 35 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 45 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 3:1) дает 11 мг (46%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, !Н ЯМР (СПС13) δ 7,39-7,30 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,21-7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,80-6,68 (м, 1Н), 5,77 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,61 (ушс, 1Н), 5,56 (т, 1Н, 1=9,5 Гц), 5,04-4,68 (м, 4Н), 4,19-4,15 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 3,41-3,34 (м, 2Н), 3,27-3,02 (м, 4Н), 2,64-2,50 (м, 2Н), 2,35-
2,25 (м, 1Н), 2,10-2,00 (м, 1Н), 1,90-1,72 (м, 3Н), 1,70-1,50 (м, 3Н), 1,44 (с, 9Н), 1,28 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,08-0,90 (м, 3Н).
Получение гидрохлорида (Ь)-пролината криптофицина 55 (17') (Σ8Ν 382927).
К раствору 16' (11 мг, 0,012 ммоль) в 122 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (15 мкл, 0,061 ммоль). После перемешивания в течение 5 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 10 мг (100%) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, Ί1 ЯМР (МеОН-б4) δ 7,77 (дд, 1Н, 1=9,4, 2,3 Гц), 7,48-7,42 (м, 2Н), 7,39-7,35 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,2 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4,
2,2 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,68 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,8 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15, 1,4 Гц), 5,52 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,18 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,18-5,14 (м, 1Н), 4,78 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=11,
3.9 Гц), 3,99 (т, 1Н, 1=7,3 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,48 (дд, 1Н, 1=14,9, 9,7 Гц), 3,28-3,12 (м, 4Н), 2,82-
2,73 (м, 3Н), 2,42-2,34 (м, 2Н), 2,09-1,79 (м, 6Н),
1,24 (с, 3Н), 1,88 (с, 3Н), 1,16 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,07 (д, 3Н, 1=6,3 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,2 Гц).
Получение Ν-трет-Вос-глицината криптофицина 55 (18') (Ь8М 379403).
К раствору 1' (118 мг, 0,167 ммоль), Νтрет-Вос-глицина (44 мг, 0,251 ммоль) и 4диметиламинопиридина (2,0 мг, 0,0167 ммоль) в 490 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (52 мг, 0,251 ммоль) в 67 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 50 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (10 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 3:1) дает 138 мг (96%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, !Н ЯМР (СПС13) δ 7,34 (с, 5Н),
7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,23-7,19 (м, 1Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,79-
6,70 (м, 1Н), 5,77 (д, 1Н, 1=13 Гц), 5,50 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 5,47 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,97 (дд, 1Н, 1=11, 2,7 Гц), 4,89 (т, 1Н, 1=10Гц), 4,83 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,79-4,72 (м, 1Н), 4,68 (ушс, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,66 (дд, 1Н, 1=18, 5,3 Гц), 3,42-3,35 (м, 2Н), 3,21 (дд, 1Н, 1=13, 4,0 Гц), 3,17 (дд, 1Н, 1=15, 5,1 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=15, 7,6 Гц), 2,66-
2,57 (м, 2Н), 2,47-2,38 (м, 1Н), 1,95 (ддд, 1Н, 1=14, 12, 4,7 Гц), 1,85-1,77 (м, 1Н), 1,75-1,67 (м, 1Н), 1,43 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,7 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).
Получение гидрохлорида глицината криптофицина 55 (19') (Σ8Ν 368422).
К раствору 18' (122 мг, 0,141 ммоль) в 471 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (178 мкл, 0,707 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч 20 мин прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 120 мг (99%, исправлено на 7 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, !Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,81 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,2 Гц), 7,46-7,41 (м, 2Н), 7,40-7,36 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4,
2,1 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,70 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,97 (дд, 1Н, 1=15, 1,7 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=9,9 Гц), 5,18 (д, 1Н, 1=9,9 Гц), 5,14 (дд, 1Н, 1=10, 2,8 Гц), 4,84 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,78 (д, 1Н, 1=18 Гц), 3,50 (дд, 1Н, 1=13, 9,8 Гц), 3,23 (д, 1Н, 1=18 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (дд, 1Н, 1=13, 2,4 Гц), 2,80-2,69 (м, 3Н), 2,41-2,32 (м, 1Н),
1,99-1,92 (м, 1Н), 1,91-1,81 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н),
1,20 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,2 Гц).
Получение Ν-трет-Вос-в-аланината криптофицина 55 (20') (Σ8Ν 379404).
К раствору 1' (102 мг, 0,145 ммоль), Νтрет-Вос-в-аланина (41 мг, 0,217 ммоль) и 4157
158 диметиламинопиридина (18 мг, 0,145 ммоль) в 400 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (45 мг, 0,217 ммоль) в 82 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 3,5 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (21 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1, затем 4:1) дает 121 мг (95%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СОС13) δ 7,44-7,39 (м, 2Н), 7,37-7,31 (м, 3Н), 7,32 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,72 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,96 (дд, 1Н, 1=15, 1,6 Гц), 5,51 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,11-5,06 (м, 1Н), 5, 08 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,90-4,83 (м, 1Н),
4,50 (дд, 1Н, 1=11, 3,6 Гц), 3,86 (с, 3Н), 3,52-3,46 (м, 1Н), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (ушд, 1Н, 1=14 Гц), 3,05-2,92 (м, 2Н), 2,79-2,63 (м, 3Н),
2,45-2,37 (м, 1Н), 2,24 (дт, 1Н, 1=16, 7,0 Гц), 2,08-1,99 (м, 1Н), 1,96-1,79 (м, 3Н), 1,43 (с, 9Н),
1,25 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,02 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение гидрохлорида β-аланината криптофицина 55 (21') (Σ8Ν 377718).
К раствору 20' (119 мг, 0,136 ммоль) в 452 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (170 мкл, 0,679 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч мутную белую реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 110 мг (96%, исправлено на 4 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,80 (дд, 1Н, 1=9,7, 2,3 Гц), 7,45-7,40 (м, 2Н), 7,39-7,32 (м, 3Н), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,68 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,8 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15, 1,7 Гц), 5,48 (дд, 1Н, 1=9,4, 1,0 Гц), 5,15-5,11 (м, 1Н), 5,13 (д, 1Н, 1=9,4 Гц), 4,82 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,51 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,90 (с, 3Н), 3,50 (дд, 1Н, 1=14, 9,8 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,7 Гц), 3,14 (дд, 1Н, 1=14, 2,4 Гц), 2,85 (т, 2Н, 1=7,0 Гц), 2,80-2,65 (м, 5Н), 2,54 (дт, 1Н, 1=17, 7,4 Гц), 2,42-2,33 (м, 1Н), 2,22 (дт, 1Н, 1=17, 6,7 Гц), 1,90-1,81 (м, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,13 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,08 (д, 3Н, 1=6,3 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,2 Гц).
Получение Ν-трет-Вос-у-аминобутирата криптофицина 55 (22') (Σ8Ν 379401).
К раствору 1' (48 мг, 0,068 ммоль), Ν-третВос-4-аминомасляной кислоты (18 мг, 0,088 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (8 мг, 0,068 ммоль) в 150 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (18 мг, 0,088 ммоль) в 50 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 45 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3;1, 0,5 мл), перемешивают в течение 5 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 3:1) дает 55 мг (90%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СБС13) δ 7,38-7,32 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1= 1,9 Гц), 7,22-7,19 (м, 1Н),
7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,9 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,75 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,9 Гц), 5,78 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,60-5,55 (м, 1н), 5,49 (дд, 1Н, 1=9,8,
1,4 Гц), 4,96 (дд, 1Н, 1=11, 3,0 Гц), 4,89 (т, 1Н, 1=9,2 Гц), 4,81 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,78-4,70 (м, 1Н), 4,44 (ушс, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,40 (дд, 1Н, 1=14, 8,1 Гц), 3,22 (дд, 1Н, 1=14, 4,1 Гц), 3,22-
3,15 (м, 1Н), 3,08 (дд, 1Н, 1=14, 7,8 Гц), 2,89-2,82 (м, 2Н), 2,67-2,56 (м, 2Н), 2,47-2,38 (м, 1Н), 2,112,04 (м, 1Н), 2,00-1,77 (м, 3Н), 1,75-1,67 (м, 1Н),
1,45 (с, 9Н), 1,50-1,40 (м, 2Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,09 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6,6 Гц).
Получение гидрохлорида γ-аминобутирата криптофицина 55 (25') (Σ8Ν 368513).
К раствору 22' (53 мг, 0,059 ммоль) в 2.97 мкл метилен-хлорида при комнатной температуре добавляют 1,0М раствор хлористого водорода в диэтиловом эфире (297 мкл, 0,297 ммоль). Исходное вещество осаждается в виде белой пасты, которую снова растворяют в дополнительных 150 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 4 ч добавляют еще 59 мкл (0,059 ммоль) раствора хлористого водорода. Продолжают перемешивание еще в течение 14 ч и реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 49 мг (100%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 8,49 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,72 (ушс, 3Н), 7,44-7,33 (м, 5Н), 7,32 (д, 1Н, 1=1,9 Гц), 7,29 (дд, 1Н, 1=9,4, 2,6 Гц),
7,20 (дд, 1Н, 1=8,5, 1,9 Гц), 7,06 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,48 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,9 Гц), 5,87 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,37 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 5,33 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 5,04-5,01 (м, 1Н), 4,73 (т, 1Н, 1=11 Гц), 4,25 (ддд, 1Н, 1=12, 9,8, 3,5 Гц), 3,82 (с, 3Н), 3,40-3,30 (м, 1Н), 3,07-3,01 (м, 2Н), 2,72 (дд, 1Н, 1=14, 12 Гц), 2,65-2,47 (м, 4Н), 2,38-2,28 (м, 1Н), 2,21 (дт, 1Н, 1=17, 7,5 Гц), 1,97 (дт, 1Н, 1=17, 7,5 Гц),
1,80-1,70 (м, 3Н), 1,54-1,46 (м, 2Н), 1,17 (с, 3Н), 1,03 (с, 3Н), 1,03 (с, 3Н), 1,01 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 0,99 (д, 3Н, 1=5,8 Гц), 0,95 (д, 3Н, 1=5,8 Гц).
Получение №трет-Вос-(Ь)-аланината криптофицина 55 (26') (Σ8Ν 379405).
К раствору 1' (103 мг, 0,146 ммоль), Νтрет-Вос-(Ь)-аланина (41 мг, 0,219 ммоль) и 4диметиламинопиридина (18 мг, 0,146 ммоль) в
400 мкл безводного метиленхлорида при ком159
160 натной температуре добавляют раствор 1.3дициклогексилкарбодиимида (45 мг, 0.219 ммоль) в 87 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 5 ч 50 мин мутную белую реакционную смесь обрабатывают еще 5.5 мг (0.029 ммоль) И-трет-Вос-(Б)-аланина, 6.0 мг (0.029 ммоль) 1.3-дициклогексилкарбодиимида и несколькими кристаллами 4-диметиламинопиридина. После перемешивания еще в течение 1 ч реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1. 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (22 г флэш-силика-геля, этилацетат с гексаном, 1.5:1. затем 2:1. затем 4:1) дает 96 мг (75%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СОС13) δ 7.35-7.30 (м, 5Н). 7.26-7.21 (м, 2Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8.4. 1.9 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8.4 Гц), 6.76 (ддд, 1Н, 1=15. 13. 4.2 Гц), 5,77 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5.52 (д, 1Н, 1=7.6 Гц), 5,44 (д, 1Н, 1=9.7 Гц), 4,98 (дд, 1Н, 1=11. 2.5 Гц), 4,85-4,81 (м, 2Н). 4,75 (к, 1Н, 1=6.8 Гц), 4,56 (д, 1Н, 1=7.8 Гц), 4,01-3,96 (м, 1Н). 3.91 (с, 3Н), 3.41 (дд, 1Н, 1=13. 8.3 Гц), 3.20 (дд, 1Н, 1=13. 4.0 Гц), 3,16 (дд, 1Н, 1=15. 5.9 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=15. 7.6 Гц), 2,65-2,57 (м, 2Н). 2.40-
2.31 (м, 1Н). 2,02-1,96 (м, 1Н). 1,87-1,73 (м, 2Н), 1,43 (с,9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1.11-1.02 (м, 9Н), 0,99 (д, 3Н, 1=6,3 Гц).
Получение гидрохлорида (Б)-аланината криптофицина 55 (28') (Σ8Ν 377719).
К раствору 26' (95 мг, 0.108 ммоль) в 361 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4.0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (135 мкл, 0.542 ммоль). После перемешивания в течение 2.5 ч мутную белую реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 90 мг (96%. исправлено на 6 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 8,54 (д, 1Н, 1=7. 6 Гц), 7.81 (ушд, 1Н, 1=9.7 Гц), 7,46-7,44 (м, 2Н), 7.39-7.37 (м, 3Н). 7,32 (д, 1Н. 1=2.0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8.4. 2.0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=2.0 Гц),
6,69 (ддд, 1Н, 1=15. 11. 3.7 Гц), 5,99 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5.20 (д, 1Н. 1=9.8 Гц).
5.15 (дд, 1Н. 1=11. 2.7 Гц). 4,78 (т, 1Н. 1=11 Гц), 4,53-4,50 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3.65 (к, 1Н. 1=7.3 Гц), 3.50 (дд, 1Н, 1=13. 9.8 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14. 3.5 Гц), 3.14 (ушд, 1Н. 1=13 Гц), 2,81-2,71 (м, 3Н), 2.41-2.34 (м, 1Н). 1,98-1,93 (м, 1Н). 1.88-
1,82 (м, 2Н). 1,41 (д, 3Н, 1=7,3 Гц). 1.25 (с, 3Н).1.20 (с, 3Н).1.13 (д, 3Н, 1=7.0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6.2 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6.0 Гц).
Получение И-трет-Вос-(О)-аланината криптофицина 55 (29') (Γ8Ν 382426).
К раствору 1' (25 мг, 0.035 ммоль), Ν-третВос-(О)-аланина (10 мг, 0.053 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0.4 мг, 0.0035 ммоль) в 130 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1.3дициклогексилкарбодиимида (11 мг, 0.053 ммоль) в 47 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 5.5 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1. 0.5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 26 мг (83%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СПС13) δ 7.49-7.29 (м, 5Н). 7,24 (д, 1Н, 1=2.0 Гц), 7,22-7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8.4. 2.0 Гц), 6.87 (д, 1Н, 1=8.4 Гц),
6,76 (ддд, 1Н, 1=15. 13. 4.4 Гц), 5,77 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,56 (д, 1Н, 1=9.9 Гц), 5,48 (д, 1Н, 1=7.7 Гц), 5.01 (дд, 1Н. 1=10. 2.6 Гц), 4,91 (т, 1Н, 1=9.4 Гц),
4,84 (д, 1Н, 1=9. 9 Гц), 4,81-4,73 (м, 2Н). 3.993.93 (м, 1Н). 3.91 (с, 3Н). 3,39 (дд, 1Н, 1=13. 8.0 Гц), 3,22 (дд, 1Н, 1=13. 3.6 Гц), 3,17 (дд, 1Н, 1=14. 5.0 Гц), 3,08 (дд, 1Н, 1=14 Гц), 2.68-2.58 (м, 2Н). 2. 42-2.35 (м, 1Н). 2.04-1.94 (м,1Н), 1.87-
1.50 (м,2Н), 1,42 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1.09 (д, 3Н, 1=7.1 Гц), 1.04 (д, 3Н, 1=6.4 Гц), 0,99 (д, 3Н, 1=6.3 Гц), 0.65 (д, 3Н, 1=6.8 Гц).
Получение гидрохлорида (Б)-аланината криптофицина 55 (30') (Σ8Ν 382425).
К раствору 29' (24 мг, 0.027 ммоль) в 274 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4.0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (34 мкл, 0.137 ммоль). После перемешивания в течение 3.5 ч чистую бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 24 мг (100%. исправлено на 8 мас. % диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=9.5 Гц), 7.47-7,40 (м, 2Н), 7,40-7,36 (м, 3Н),
7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8.4. 2.0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8. 4 Гц), 6,71 (ддд, 1Н, 1=15. 13. 3.7 Гц), 5,98 (дд, 1Н, 1=15. 1.6 Гц), 5,65 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5.20 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,17 (дд, 1Н, 1=11. 2.5 Гц), 4.88-4.78 (м, 1Н). 4,53 (дд, 1Н, 1=11. 3.7 Гц), 3,95 (к, 1Н, 1=7.2 Гц), 3,87(с, 3Н),
3,51 (дд, 1Н, 1=13. 9.8 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14. 3.6 Гц), 3.14 (дд, 1Н, 1=13. 2.3 Гц), 2,82-2,74 (м, 3Н),
2.41-2.34 (м, 1Н). 2.07-1,99 (м, 1Н), 1.96-1.84 (м, 2Н). 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,15 (д, 3Н, 1=7.1 Гц), 1,09 (д, 3Н, 1=6.0 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6.0 Гц), 0,80 (д, 3Н, 1=7.4 Гц).
Получение Х-№-ди-трет-Вос-(Б)лизината криптофицина 55 (311) (Σ8Ν 379406).
К раствору 1' (105 мг, 0.149 ммоль), Να-Νεди-трет-Вос-(Б)-лизина (67 мг, 0.193 ммоль) и 4диметиламинопиридина (18 мг, 0.149 ммоль) в
400 мкл безводного метиленхлорида при ком161
162 натной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (40 мг, 0,193 ммоль) в 96 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 4 ч мутную белую реакционную смесь обрабатывают еще 10 мг (0,030 ммоль) Ыа-ЫЕ-ди-трет-Вос-(Ъ)-лизина и 6,1 мг (0,030 ммоль) 1,3-дициклогексилкарбодиимида в виде раствора в 100 мкл метиленхлорида. После перемешивания еще в течение 1 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до белой пены, которую снова обрабатывают в описанных выше условиях с использованием 34 мг (0,097 ммоль) Ыа-ЫЕ-ди-трет-Вос-(Ь)-лизина, 20 мг (0,097 ммоль) 1,3-дициклогексилкарбодиимида и 9,1 мг (0,075 ммоль) 4-диметиламинопиридина. После перемешивания в течение 1,5 ч реакционную смесь обрабатывают, как описано выше, и получают сырую белую пену. Хроматография (21 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 1:1, затем 4:1) дает 112 мг (73%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,42-7,37 (м, 2Н), 7,36-7,29 (м, 3Н), 7,27 (ушс, 1Н), 7,16 (ушд, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,97 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,72 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,5 Гц), 5, 92 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,50 (д, 1Н, 1=11 Гц), 5,11-5,04 (м, 2 Н), 4,84 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,48 (дд, 1Н, 1=11, 3,6 Гц), 3,84 (с, 3Н), 3,75 (ушс, 1Н), 3,50-3,43-(м, 1Н), 3,17 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,11 (д, 1Н, 1=14 Гц), 2,97-2,91 (м, 2Н), 2,76-2,58 (м, 3Н), 2,36-2,27 (м, 1Н), 1,98-
1,80 (м, 3Н), 1,48-1,38 (м, 2Н), 1,43 (с, 9Н), 1,40 (с, 9Н), 1,35-1,25 (м, 2Н), 1,23 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,15-1,09 (м, 2Н), 1,07 (д, 3Н, 1=6,8 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,0 Гц), 1,01 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение дигидрохлорида (Ь)-лизината криптофицина 55 (32') (Σ8Ν 377562).
К раствору 31' (107 мг, 0,103 ммоль) в 345 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (155 мкл, 0,621 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч мутную белую реакционную смесь фильтруют. Собранное белое твёрдое вещество промывают метиленхлоридом (2х1 мл) и сушат в вакууме при комнатной температуре и получают 87 мг (93%) названного в заголовке соединения.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 8,61 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 7,81 (д, 1Н, 1=7,7 Гц), 7,47-7,44 (м, 2Н), 7,40-7,38 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,2 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,2 Гц), 7,00 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,63 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,0 Гц), 6,00 (дд,1Н, 1=15, 1,6 Гц), 5,55 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=9,8 Гц), 5,15 (дд, 1Н, 1=10, 2,9 Гц), 4,68 (т, 1Н, 1=11 Гц), 4,55-4,49 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,79 (т, 1Н, 1=5,6 Гц), 3,52 (дд, 1Н, 1=14, 9,9 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (дд, 1Н, 1=13, 2,4 Гц),
3,06-2,98 (м, 1Н), 2,94-2,87 (м, 1Н), 2,85-2,74 (м, 3Н), 2,45-2,38 (м, 1Н), 1,98-1,76 (м, 5Н), 1,71-
1,64 (м, 2Н), 1,39-1,30 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н), 1,18 (д, 3Н, 1=8,2 Гц), 1,17 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение ^а-^-ди-трет-Вос-(Б)-лизината криптофицина 55 (33') (Ь8М 382504).
К раствору 1' (24 мг, 0,035 ммоль), Να-Νεди-трет-Вос-(Р)-лизина (27 мг, 0,069 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,4 мг, 0,0035 ммоль) в 140 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (14 мг, 0,069 ммоль) в 30 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 70 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 30 мг (87%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,46-7,40 (м, 2Н), 7,39-7,31 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=1,8 Гц),
7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,8 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,75 (ддд, 1Н, 1=16, 11, 3,7 Гц), 5, 93 (д, 1Н, 1=16 Гц), 5,59 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,13-5,09 (м, 2Н),
4,92 (т, 1Н, 1=9,8 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=11, 3,6 Гц),
3,87 (с, 3Н), 3,79-3,75 (м, 1Н), 3,48 (д, 1Н, 1=13 Гц), 3,21 (дд, 1Н, 1=14, 3,7 Гц), 3,12 (д, 1Н, 1=13 Гц), 2,97-2,91 (м, 2Н), 2,80-2,62 (м, 3Н), 2,41-
2,32 (м, 1Н), 1,98-1,82 (м, 3Н), 1,48-1,38 (м, 2Н),
1.46 (с, 9Н), 1,42 (с, 9Н), 1,35-1,20 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,15-1,09 (м, 2Н), 1,14 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,07 (д, 3Н, 1=6,0 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,0 Гц).
Получение дигидрохлорида (Б)-лизината криптофицина 55 (34') (Σ8Ν 377503).
К раствору 33' (28 мг, 0,027 ммоль) в 181 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (41 мкл, 0,162 ммоль). После перемешивания в течение 5,5 ч мутную белую реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 25 мг (96%, исправлено на 4,5 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, 1Н-ЯМР (МеОН-б4) δ 8,47 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,76 (дд, 1Н, 1=9,6, 2,1 Гц), 7,47-7,36 (м, 5Н), 7,28 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,17 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1Гц), 6,98 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,68 (ддд, 1Н, 1=15, 11, 3,7 Гц), 5,95 (дд, 1Н, 1=15, 1,1 Гц),
5,67 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,21 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,14 (дд, 1Н, 1=10, 2,5 Гц), 4,83-4,77 (м, 1Н), 4,52-
4,49 (м, 1Н), 3,92 (т, 1Н, 1=6,1 Гц), 3,84 (с, 3Н),
3.47 (дд, 1Н, 1=14, 9,8 Гц), 3,18 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,12 (дд, 1Н, 1=14, 2,2 Гц), 2,83 (т, 2Н, 1=7,6 Гц), 2,78-2,70 (м, 3Н), 2,38-2,30 (м, 1Н), 2,02-
1,82 (м, 3Н), 1,52-1,43 (м, 2Н), 1,23 (с, 3Н), 1,22
163
164
1,00 (м, 4Н), 1,18 (с, 3Н), 1,13 (д, 3Н, 1=8,2 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,02 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение Ч-трет-Вое-у-трет-бутил-(Ь)глутамата криптофицина 55 (35') (Σ8Ν
382366).
К раствору 1' (27 мг, 0,038 ммоль), γ-третбутилового эфира Ν-трет-Вос-(Ь)-глутаминовой кислоты (17 мг, 0,057 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0,5 мг, 0,0038 ммоль) в 150 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (12 мг, 0,057 ммоль) в 41 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 60 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (2:1, 2 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (2:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 1:1) дает 28 мг (74%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СОС13) δ 7,39-7,29 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1= 1,9 Гц), 7,22-7,18 (м, 1Н),
7,10 (дд, 1Н, 1=8,5, 1,9 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,76 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,5 Гц), 5,78 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,65 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 5,43 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,99 (дд, 1Н, 1=10, 2,7 Гц), 4,90-4,80 (м, 1Н),
4,83 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,69-4,61 (м, 1Н), 4,55 (дд, 1Н, 1=8,4 Гц), 4,01-3,96 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 3,40 (дд, 1Н, 1=13, 8,0 Гц), 3,24 (дд, 1Н, 1=13, 4,1 Гц),
3,18 (дд, 1Н, 1=15, 5,0 Гц), 3,11 (дд, 1Н, 1=15, 7,9 Гц), 2,65-2,57 (м, 2Н), 2,39-2,30 (м, 1Н), 2,142,09 (м, 2Н), 1,87-1,73 (м, 3Н), 1,60-1,50 (м, 1Н),
1,44 (с, 18Н), 1,27 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6,4 Гц), 1,00 (д, 3Н, 1=6,3 Гц).
Получение гидрохлорида (Ь)-а-глутамата криптофицина 55 (36') (Σ8Ν 382367).
К раствору 35' (23 мг, 0,023 ммоль) в 232 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (29 мкл, 0,116 ммоль). После перемешивания в течение 8,5 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 20 мг (97%, исправлено на 3 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,50-7,36 (м, 5Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,6, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,6 Гц), 6,75-6,65 (м, 1Н), 5,98 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,57 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=9,7 Гц),
5,15 (дд, 1Н, 1=11, 3,0 Гц), 4,90-4,80 (м, 1Н), 4,52 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,80-3,66 (м, 1Н), 3,49 (дд, 1Н, 1=13, 10 Гц), 3,21 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,15 (дд, 1Н, 1=14, 2,3 Гц), 2,82-
2,72 (м, 3Н), 2,41-2,30 (м, 3Н), 2,05-1,81 (м, 5Н),
1,25 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,15 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,07 (д, 3Н, 1=6,2 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение Ν-трет-Вос-в-трет-бутил-(Ь)аспартата криптофицина 55 (37') (Ь8Ч 382501) и Ν-трет-Вос-β -трет-бутил-(Э)-аспартата крипто фицина 55 (39') (Ь8Ч 387040).
К раствору 1' (176 мг, 0,249 ммоль), βтрет-бутилового эфира №трет-Вос-(Ь)-аспарагиновой кислоты (144 мг, 0,499 ммоль) и 4диметиламинопиридина (2,0 мг, 0,066 ммоль) в 1,0 мл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (103 мг, 0,499 ммоль) в 200 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 45 мин мутную белую реакционную смесь обрабатывают 88 мг целита и разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 2 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (30 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает чистый 37' (более низкий К£) вместе со смешанными фракциями. Смешанные фракции хроматографируют (25 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 1:1, затем 2:1, затем 3:1) и получают более чистый 37' вместе с чистым 39' (более высокий К1). Все фракции, содержащие чистый 37', объединяют и получают 149 мг (61%) вещества в виде белой пены и в то же время объединяют все фракции, содержащие чистый 39', и получают 56 мг (23%) вещества в виде белой пены.
Данные 500 МГц, 1Н ЯМР (СПС13) для 37': δ 7,39-7,30 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,24-
7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,76 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,3 Гц),
5,75 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,50 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,46 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 5,01-4,98 (м, 2Н), 4,93 (т, 1Н, 1=9,9 Гц), 4,85 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 4,78-4,71 (м, 1Н), 4,17-4,10 (м,1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,41 (дд, 1Н, 1=13, 8,2 Гц), 3,22 (дд, 1Н, 1=13, 3,9 Гц), 3,17 (дд, 1Н, 1=14, 5,1 Гц), 3,09 (дд, 1Н, 1=14, 7,7 Гц), 2,61-2,50 (м, 4Н), 2,36-2,28 (м, 1Н), 2,02-1,97 (м, 1Н), 1,83-1,76 (м, 2Н), 1,45 (с, 9Н), 1,41 (с, 9Н),
1,28 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,06-1,01 (м, 6Н), 0,99 (д, 3Н, 1=6,2 Гц).
Данные 500 МГц, !Н ЯМР (СПС13) для 39': δ 7,39-7,30 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,24-
7,18 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,88 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,73 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,3 Гц),
5,74 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,47 (д, 1Н, 1=7,9 Гц), 5,42 (д, 1Н, 1=9,1 Гц), 5,29 (д, 1Н, 1=9,0 Гц), 4,98 (дд, 1Н, 1=10, 3,0 Гц), 4,92 (т, 1Н, 1=9,6 Гц), 4,85 (д, 1Н, 1=9,1 Гц), 4,77-4,71 (м, 1Н), 4,18-4,12 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1=13, 8,1 Гц), 3,21 (дд, 1Н, 1=13, 4,0 Гц), 3,16 (дд, 1Н, 1=14, 5,2 Гц), 3,07 (дд, 1Н, 1=14, 7,6 Гц), 2,63-2,52 (м, 2Н), 2,45 (дд, 1Н, 1=17, 5,8 Гц), 2,36-2,26 (м, 1Н), 2,22 (дд, 1Н, 1=17, 4,5 Гц), 1,99-1,90 (м, 1Н), 1,86-1,69 (м, 2Н), 1,47 (с, 9Н), 1,43 (с, 9Н), 1,25 (с, 3Н), 1,19
165
166 (с, 3Н), 1,11 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=6,5 Гц), 0,99 (д, 3Н, 1=6,4 Гц).
Получение гидрохлорида (Ь) -аспартата криптофицина 55 (38') (Σ8Ν 382502).
К раствору 37' (146 мг, 0,149 ммоль) в 498 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (374 мкл, 1,49 ммоль). После перемешивания в течение 19 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 131 мг (100%, исправлено на 2 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (Ме0Н-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,45-7,З6 (м, 5Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,6, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,6 Гц), 6,75 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,96 (дд, 1Н, 1=15, 1,8 Гц), 5,54 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,17 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,14 (дд, 1Н, 1=11, 2,1 Гц), 4,89 (т, 1Н, 1=11 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,55 (т, 1Н, 1=4,4 Гц), 3,52-3,47 (м, 1Н),
3.21 (дд, 1Н, 1=14, 3,6 Гц), 3,13 (д, 1Н, 1=14 Гц),
2,99 (дд, 1Н, 1=18, 5,0 Гц), 2,83 (дд, 1Н, 1=18, 3,9 Гц), 2,81-2,68 (м, 3Н), 2,35-2,28 (м, 1Н), 2,02-
1,84 (м, 3Н), 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,08-1,02 (м, 9Н).
Получение гидрохлорида (Б)-аспартата криптофицина 55 (40') (Σ8Ν 387039).
К раствору 39' (53 мг, 0,054 ммоль) в 271 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (136 мкл, 0,542 ммоль). После перемешивания в течение 14 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 47 мг (94%, исправлено на 6 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (Ме0Н-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,45-7,36 (м, 5Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,6, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,6 Гц), 6,71 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,96 (дд, 1Н, 1=15, 1,8 Гц), 5,63 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,19 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,15 (дд, 1Н, 1=11, 2,1 Гц), 4,86-
4,80 (м, 1Н), 4,55-4,50 (м, 1Н), 4,24 (дд, 1Н, 1=8,4, 4,0 Гц), 3,87 (с, 3Н), 3,50 (дд, 1Н, 1=13, 9,7 Гц), 3,21 (дд, 1Н, 1=14, 3,0 Гц), 3,14 (дд, 1Н, 1=13, 2,5 Гц), 2,80-2,70 (м, 3Н), 2,40-2,32 (м, 1Н),
2.21 (дд, 1Н, 1=18, 4,0 Гц), 2,09-1,97 (м, 2Н), 1,92-1,84 (м, 2Н), 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,15 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,08 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,0 Гц).
Получение Х-трет-Вое-а-трет-бурил-(Ь)глутамата криптофицина 55 (41') (Σ8Ν
382572).
К раствору 1' (23 мг, 0,033 ммоль), а-третбутилового эфира №трет-Вос-(Ь)-глутаминовой кислоты (15 мг, 0,049 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0,4 мг, 0,0033 ммоль) в 120 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3дициклогексилкарбодиимида (10 мг, 0,049 ммоль) в 40 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 45 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 24 мг (75%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (СБС1з) δ 7,39-7,30 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,20-7,16 (м, 1Н), 7,09 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,74 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 4,6 Гц), 5,78 (д, 1Н, 1=15 Гц), 5,55 (ушд, 1Н, 1=6,4 Гц), 5,46 (дд, 1Н, 1=9, 6, 1,0 Гц), 4,96 (дд, 1Н, 1=11, 3,0 Гц), 4,91-4,80 (м, 2Н), 4,83 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 4,72 (ушс, 1Н),
3,99 (ушс, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,39 (дд, 1Н, 1= 13,
7.9 Гц), 3,24 (дд, 1Н, 1=13, 3,9 Гц), 3,18 (дд, 1Н, 1=14, 4,5 Гц), 3,09 (дд, 1Н, 1=14, 7,8 Гц), 2,63-
2,55 (м, 2Н), 2,44-2,37 (м, 1Н), 2,10-1,92 (м, 3Н), 1,85-1,78 (м, 1Н), 1,76-1,61 (м, 3Н), 1,46 (с, 9Н),
1,45 (с, 9Н), 1,27 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,08 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 0,98 (д, 3Н, 1=6,4 Гц).
Получение гидрохлорида (Ь)-у-глутамата криптофицина 55 (42') (Σ8Ν 382514).
К раствору 41' (21 мг, 0,021 ммоль) в 212 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (53 мкл, 0,212 ммоль). После перемешивания в течение 23,5 ч реакционную смесь разбавляют метанолом и пропускают через небольшой слой целита. Концентрация в вакууме дает 20 мг (100%, исправлено на 6 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (д, 1Н, 1=7, 6 Гц), 7,50-7,29 (м, 6Н), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,66 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5, 97 (дд, 1Н, 1=15, 1,5 Гц), 5,52 (дд, 1Н, 1=10, 0,8 Гц), 5,14 (дд, 1Н, 1=11, 3,0 Гц),
5.10 (д, 1Н, 1=10 Гц), 4,90-4,80 (м, 1Н), 4,51 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 3,90-3,80 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н),
3,50 (дд, 1Н, 1=13, 10 Гц), 3,19 (дд, 1Н, 1=14, 3,7 Гц), 3,13 (дд, 1Н, 1=14, 2,3 Гц), 2,81-2,67 (м, 3Н),
2,41-2,32 (м, 2Н), 2,15-2,06 (м, 1Н), 1,97-1,79 (м, 5Н), 1,25 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н), 1,13 (д, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,08 (д, 3Н, 1=5,9 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=5,8 Гц).
Получение ШШ-ди-трет-Вос-(8)-2,3-диаминопропионата криптофицина 55 (43') (Σ8Ν 382765).
К раствору 1' (21 мг, 0,030 ммоль), Ν,Ν'ди-трет-Вос-(8)-2,3-диаминопропионовой кислоты (18 мг, 0,060 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,3 мг, 0,0030 ммоль) в 110 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (12 мг, 0,060 ммоль) в 39 мкл метиленхлорида. После перемешивания в тече167
168 ние 70 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (15 г флэш-силикагеля, этилацетат с гексаном, 2:1) дает 24 мг (80%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, Ί1 ЯМР (МеОН-б4) δ 7,49 -7,40 (м, 2Н), 7,38-7,30 (м, 4Н), 7,19 (дд, 1Н, 1=8,5, 1,9 Гц), 7,00 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,74 (ддд, 1Н, 1=16, 11, 3,5 Гц), 5,95 (д, 1Н, 1=16 Гц), 5,49 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,16-5,08 (м, 2Н), 4,90-4,80 (м, 1Н),
4,51 (дд, 1Н, 1=11, 3,7 Гц), 4,06-4,10 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,48 (д, 1Н, 1=13 Гц), 3,19 (дд, 1Н, 1=14,
3,7 Гц), 3,14 (д, 1Н, 1=13 Гц), 3,03 (дд, 1Н, 1=14,
4,2 Гц), 2,94-2,87 (м, 1Н), 2,80-2,59 (м, 3Н), 2,392,30 (м, 1Н), 1,98-1,81 (м, 3Н), 1,43 (с, 18Н), 1,25 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,10 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,07 (д, 3Н, 1=6,0Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=5,8 Гц).
Получение дигидрохлорида (8)-2,3-диаминопропионата криптофицина 55 (44') (Σ8Ν 382764).
К раствору 43' (21 мг, 0,021 ммоль) в 211 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (42 мкл, 0,169 ммоль). После перемешивания в течение 5 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 18,5 мг (100%, исправлено на 3 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,50-7,39 (м, 5Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,68 (ддд, 1Н, 1=15, 11, 3,8 Гц), 5,99 (дд, 1Н, 1=15, 1,7 Гц),
5,56 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 5,24 (д, 1Н, 1=9,6 Гц), 5,16 (дд, 1Н, 1=10, 3,1 Гц), 4,90-4,80 (м, 1Н), 4,51 (дд, 1Н, 1=11, 3,8 Гц), 4,04-4,00 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н),
3,50-3,45 (м, 1Н), 3,26 (дд, 1Н, 1=14, 4,0 Гц),
3.22- 3,12 (м, 3Н), 2,81-2,75 (м, 3Н), 2,42-2,32 (м, 1Н), 1,98-1,78 (м, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н),
1.22- 1,16 (м, 3Н), 1,07 (д, 3Н, 1= 6,4 Гц), 1,04 (д, 3Н, 1=6,3 Гц).
Получение Х-трет-Вос-(Ь)-еерината криптофицина 55 (45') (Σ8Ν 384340).
К раствору 1' (38 мг, 0,053 ммоль), Ν-третВос-О-трет-бутилдиметилсилил-(Ь)-серина11 (51 мг, 0,160 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,6 мг, 0,0053 ммоль) в 200 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (33 мг, 0,160 ммоль) в 69 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 4 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (2:1, 1 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (2:1). Фильтрат и промывную жид кость концентрируют в вакууме до бесцветного масла, которое непосредственно используют на следующей стадии. К раствору неочищенного силилового эфира (54 мг, 0,054 ммоль) в 268 мкл тетрагидрофурана при комнатной температуре добавляют 268 мкл концентрированного раствора гидрофторида пиридина (полученного из 0,5 г НГ.пиридина (А1бпсй), 4 мл тетрагидрофурана и 1 мл пиридина). После перемешивания в течение 4 ч добавляют еще 67 мкл концентрированного раствора НГ.пиридина. После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь обрабатывают 0,6 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и промывают этилацетатом (1 мл х 3). Объединенные органические фазы сушат (№28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме до бледно-желтой пены. Хроматография (16 г флэш-81О2, элюирование этилацетатом с гексаном, 3:1, затем 6:1) дает 26 мг (44%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,79 (дд, 1Н, 1=9,5, 2,4 Гц), 7,45-7,38 (м, 2Н), 7,37-7,29 (М, 3Н), 7,29 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,18 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,0 Гц), 6,99 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,72 (ддд, 1н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,95 (дд, 1Н, 1=15, 1,6 Гц),
5,53 (д, 1Н, 1=9,5 Гц), 5,12-5,08 (м, 2Н), 4,94 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=12, 3,6 Гц), 3,92 (т, 1Н, 1=4,6 Гц), 3,85 (с, 3Н), 3,52-3,46 (м, 3Н), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,5 Гц), 3,14 (дд, 1Н, 1=13, 3,0 Гц),
2,75 (дд, 1Н, 1=14, 11 Гц), 2,73-2,66 (м, 1Н), 2,65-2,59 (м, 1Н), 2,38-2,29 (м, 1Н), 2,00-1,82 (м, 3Н), 1,43 (с, 9Н), 1,25 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,101,06 (м, 6Н), 1,03 (д, 3Н, 1=6,0 Гц).
Получение гидрохлорида (Ь)-серината криптофицина 55 (46') (Σ8Ν 384339).
К раствору 45' (26 мг, 0,029 ммоль) в 291 мкл метилен-хлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (36 мкл, 0,146 ммоль). После перемешивания в течение 2,5 ч прозрачную бесцветную реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 23 мг (94%, исправлено на 2 мас.% диоксана) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 1Н ЯМР (МеОН-б4) δ 7,48-7,40 (м, 2Н), 7,39-7,31 (м, 3Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,2 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,5, 2,0 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,5 Гц), 6,70 (ддд, 1Н, 1=15, 13, 3,7 Гц), 5,95 (дд, 1Н, 1=15, 1,8 Гц), 5,59 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,20 (д, 1Н, 1=10 Гц), 5,14 (дд, 1Н, 1=11, 2,1 Гц), 4,94 (т, 1Н, 1=10 Гц), 4,52 (дд, 1Н, 1=3,5 Гц), 3,96 (дд, 1Н, 1=11, 3,9 Гц), 3,83 (дд, 1Н, 1=11, 2,8 Гц), 3,66 (т, 1Н, 1=3,2 Гц), 3,50 (д, 1Н, 1=14 Гц), 3,20 (дд, 1Н, 1=14, 3,5 Гц), 3,13 (д, 1Н, 1=14 Гц), 2,80-2,71 (м, 3Н), 2,38-2,28 (м, 1Н), 2,01-1,82 (м, 3Н), 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,13 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,07 (д, 3Н, 1=6,1 Гц), 1,05 (д, 3Н, 1=6,1 Гц).
Получение гидрохлорида глицидилглицината криптофицина 55 (47') (Σ8Ν 387750).
169
170
К раствору 1' (18 мг, 0,026 ммоль), Ν-третВос-глицидилглицина (12 мг, 0,051 ммоль) и 4диметиламинопиридина (0,3 мг, 0,0026 ммоль) в 128 мкл безводного метиленхлорида и 28 мкл Ν,Ν-диметилформамида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (11 мг, 0,051 ммоль) в 28 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 3 ч добавляют еще 24 мг (0,102 ммоль) Ытрет-Вос-глицидилглицина и 22 мг (0,102 ммоль) 1,3-дициклогексилкарбодиимида в 30 мкл Ν,Ν-диметилформамида. После перемешивания в течение 1,5 ч мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до бесцветного масла. Хроматография (12 г флэш-силикагеля, 1% метанола в этилацетате) дает 12 мг белой пены, которую в таком виде используют в последующем эксперименте. К раствору полученного выше Ы-Восглицидилглицината (12 мг, 0,013 ммоль) в 130 мкл метиленхлорида при комнатной температуре добавляют 4,0М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (16 мкл, 0,065 ммоль). После перемешивания в течение 3,5 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и получают 11 мг (100%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 2Н ЯМР (МеОН-ё4) δ 7,45-7,29 (м, 5Н), 7,31 (д, 1Н, 1=2,1 Гц), 7,20 (дд, 1Н, 1=8,4, 2,1 Гц), 7,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 6,72 (ддд, 1Н, 1=15, 11, 3,8 Гц), 5,96 (дд, 1Н, 1=15, 1,4 Гц),
5.49 (дд, 1Н, 1=10, 0,8 Гц), 5,14-5,09 (м, 2н),
4.90- 4,80 (м, 1Н), 4,51 (дд, 1Н, 1=11, 3,9 Гц),
3.91- 3,84 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,70-3,65 (м, 2Н),
3.50 (д, 1Н, 1=14 Гц), 3,38 (д, 1Н, 1=18 Гц), 3,19 (дд, 1Н, 1=14, 3,6Гц), 3,12 (д, 1Н, 1=14 Гц), 2,82-
2,63 (м, 3Н), 2,40-2,30 (м, 1Н), 1,97-1,80 (м, 3Н),
1,25 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 1,12 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,06 (д, 3Н, 1=6,0 Гц), 1,03 (д, 3Н, 1=5, 9 Гц).
Получение 3,6,9-триоксадеканоата криптофицина 55 (48') (Σ8Ν 387414).
К раствору 1' (18 мг, 0,026 ммоль), 3,6,9триоксадекано-вой кислоты (7,8 мкл, 0,051 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,3 мг, 0,0026 ммоль) в 100 мкл безводного метиленхлорида при комнатной температуре добавляют раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида (11 мг, 0,051 ммоль) в 28 мкл метиленхлорида. После перемешивания в течение 30 мин мутную белую реакционную смесь разбавляют смесью этилацетата с гексаном (3:1, 0,5 мл), перемешивают в течение 10 мин и фильтруют через слой целита, промывая смесью этилацетата с гексаном (3:1). Фильтрат и промывную жидкость концентрируют в вакууме до не совсем белого масла. Хроматография (12 г флэш-силикагеля, 2% метанола в этилацетате) дает 19 мг (86%) названного в заголовке соединения в виде белой пены.
500 МГц, 2Н ЯМР (СЭС13) δ 7,49-7,29 (м, 5Н), 7,24 (д, 1Н, 1=1,8 Гц), 7,22-7,19 (м, 1Н), 7,10 (дд, 1Н, 1=8,4, 1,8 Гц), 6,87 (д, 1Н, 1=8,4 Гц),
6,74 (ддд, 1Н, 1=15, 10, 4,5 Гц), 5,32-5,28 (м, 2Н),
5,56 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,98-4,90 (м, 2Н), 4,83 (д, 1Н, 1=9,7 Гц), 4,77-4,71 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 3,83 (д, 1Н, 1=17 Гц), 3,65-3,55 (м, 7Н), 3,42-3,33 (м, 6Н), 3,24-3,18 (м, 2Н), 3,03 (дд, 1Н, 1=15, 8,1 Гц),
2,69-2,61 (м, 1Н), 2,61-2,56 (м, 1н), 2,54-2,46 (м, 1Н), 2,00-1,93 (м, 1Н), 1,85-1,77 (м, 1Н), 1,72-
1,66 (м, 1Н), 1,26 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н), 1,09 (д, 3Н, 1=7,0 Гц), 1,02 (д, 3Н, 1=6,6 Гц), 0,97 (д, 3Н, 1=6,5 Гц).

Claims (26)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение I где Аг выбирают из группы, состоящей из фенила, любой простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической, замещенной гетероароматической группы, незамещенной гетероароматической группы, гетероцикла, (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкенила, (С2С12)-алкинила, ЫК51К52, СОК52, ОК53 и Аг' формулы
    К51 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С3)-алкила;
    К52 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С3)-алкила;
    К53 выбирают из группы, состоящей из (С1С12)-алкила;
    К54 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, (С1-С6)-алкил(К57'К57''К57'''), простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической, гетероциклической группы, фенила, галогена, 4(трет-бутилдиметилсилокси)бензилтрифенилфосфония, СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58,
    Ы(К59)К60, ЫНОК61, ЫНСНК61', СЫ, ЫО2, галогена, ОК62, СН2(О)Кб2', -СН2ОС(О)К95,
    I
    ΟΗ2Ν(Κ96)Κ96', СОК100, ((С1-С6)-алкил)ОК100, и 8К63;
    К95 выбирают из группы, состоящей из
    -К98КН3;
    каждый из К96 и К96' выбирают независимо из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)алкила, -Κ97ΝΗ3 и -К99ЫК99'К99'';
    171
    172
    К97 выбирают из группы, состоящей из (С1С6)-алкила;
    К98 выбирают из группы, состоящей из (С1С6)-алкила;
    К99 представляет (С1-С6)-алкил;
    каждый из К99' и К99 выбирают независимо из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)алкила;
    К100 выбирают из группы, состоящей из водорода и 81(К101К102К103);
    К101 представляет (С1-С6)-алкил;
    К102 представляет (С1-С6)-алкил;
    К103 представляет (С1-С6)-алкил;
    К104 выбирают из группы, состоящей из С(О)(С1-С6)-алкил-М(К106)(К59)К60, С(О)(С1-С6)алкил-Ν', конденсированного бицикла и КНК^АК106)^59)^0;
    К105 выбирают из группы, состоящей из С(О)(С1-С6)-алкила, (С1-С6)-алкила;
    К106 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, С(О)ОК107;
    К107 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, СК108К109К110;
    К108 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила;
    К109 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила;
    К110 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила;
    К111 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и С(О)ОК107;
    К55 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, С(К57'К57К57'''), простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической группы, фенила, СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58, ΝΗ59Η60, ЯНОК61, МНСНК61', ΌΝ, ΝΟ-. галогена, ОК62 и 8К63;
    К56 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, С(К57'К57К57'), простой незамещенной ароматической, простой замещенной ароматической группы, фенила, СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58, ΧΠΊΓ. Х1ЮК . МНСНК61', (САЭ-алкил-Ж59^60, СЧ ХО-. галогена, ОК104, СК104, ОК62 и 8К63;
    К57 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С12)-алкила;
    К57' выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и (С1-С12)-алкила;
    К57 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и (С1-С12)-алкила;
    К57''' выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и (С1-С12)-алкила;
    К58 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С12)-алкила;
    К59 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, трет-бутоксикарбонила, карбо-трет-бутокси (ΐ-Вос) и фторметоксикарбонила (ЕМОС);
    К60 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила;
    К61 выбирают из группы, состоящей из водорода, ОК64, СН2ХНК65, NНК65' и фторметоксикарбонила (ЕМОС);
    К61' выбирают из группы, состоящей из водорода, ОК64, Ο^ΝΉ^5, NНК65' и фторметоксикарбонила (ЕМОС);
    К62 выбирают среди водорода и (С1-С6)алкила;
    К62' выбирают среди водорода, ОН, ОК62 и (С1-С6)-алкила;
    К63 выбирают среди водорода и (С1-С6) алкила;
    К64 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и СН^К66^7;
    К65 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, ΝΑ и фторметоксикарбонила (ЕМОС);
    К65' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, ΝΉ2 и фторметоксикарбонила (ЕМОС);
    К66 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и фторметоксикарбонила (ЕМОС);
    К67 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
    каждый из К1 и К2 выбирают независимо из группы, состоящей из галогена, моноалкила мино, диалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной группы, группы, ОК31, 8К31, ΝΕ31, ОН, 8Н, ΝΒ92, К93, ΝΒ94 и ΝΑ;
    каждый из К92, К93 и К94 выбирают независимо из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила;
    при условии, что один из группы, состоящей из К1 и К2, выбирают из группы, состоящей из ОК31; 8К31, ΝΕ31, ОН и 8Н; или
    К1 и К2 можно взять вместе с С-18 и С-19 с образованием эпоксидного кольца, азиридинового кольца, эписульфидного кольца, сульфат ного кольца, циклопропильного кольца или моно-(С1-С6)-алкилфосфатного кольца; или
    К1 и К2 можно взять вместе с образованием второй связи между С-18 и С-19;
    К3 представляет С1-6 алкильную группу;
    К4 представляет Н или ОН;
    К5 представляет Н или ОН;
    К4 и К5 можно взять вместе с образованием второй связи между С13 и С14;
    К6 представляет заместитель, выбранный из группы, состоящей из бензила, гидроксибензила, алкоксибензила, галогенгидроксибензила, дигалогенгидроксибензила, галогеналкоксибензила, или дигалогеналкоксибензильную группу, В-кольцевую гетероароматическую группу, замещенную гетероароматическую группу, Вкольцевой (С1-С6)-алкил, (С3-С8)-циклоалкил, замещенный (С3-С8)-циклоалкил, замещенный (С1-С6)-алкил, группу формулы III'
    173
    174 ηΐ7 III и группу формулы III
    К7 выбирают из группы, состоящей из ΝΚ51Κ52, Κ53ΝΚ51Κ52, ОК53, Н и С1-6 алкильной группы;
    К51 и К52 выбирают, независимо, из группы, состоящей из (С1-С3)-алкила;
    К53 представляет (С1-С3)-алкил;
    К8 представляет Н или С1-6алкильную группу;
    или К7 и К8 могут образовывать циклопропильное кольцо;
    К9 выбирают из группы, состоящей из Н, С1-6 алкильной группы, ненасыщенного С1-6 алкила, С1-6 алкил-(С3-С5)-циклоалкила и бензила;
    К10 представляет Н или С1-6 алкильную группу;
    К11 выбирают из группы, состоящей из водорода, ОН, С1-6 алкильной группы, замещенного фенила, бензила, замещенного бензила и фенила;
    К14 выбирают из группы, состоящей из водорода и С1-6 алкильной группы;
    каждый из К15, К16 и К17 выбирают независимо из группы, состоящей из водорода, ОК18, галогена, Ж18'К19', ΝΘ2, ОР();Н:, ОК19-фенила, 8СН2-фенила, СО^з, СО2Н, РО3Н2, 8О2К23 и ΖΖ;
    К18 выбирают из группы, состоящей из водорода, арила, (С1-С6)-алкила, С(О)К90 и фторметоксикарбонила (РМОС);
    К18 выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и С(О)К90;
    К19 представляет (С1-С6)-алкил, С(О)К90 и фторметоксикарбонил (РМОС);
    К19' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и С(О)К90 ;
    каждый из К90, К90, К90 и К90 выбирают независимо из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила, ОК91 и арила;
    К91' выбирают из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила, арила и водорода;
    К23 выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С3)-алкила;
    К30 представляет водород или (С1-С6)алкил; или
    К30 можно взять вместе с Ν при С-11 с образованием (трех-) - (семичленного) цикла;
    К31 выбирают из группы, состоящей из (С1С12)-алкила, К32;
    К32 выбирают из группы, состоящей из аминокислоты, углевода, аминосахара, (сахарида)^ С(О)К33 и
    К33 выбирают из группы, состоящей из К37К38, К38, К3Х, (К20')К38, К3^(К20')(С1-С6)алкил-С(О)К38, К3Х(К20')С(О)К38, К37О-(С1-С6)алкил-О-(С1-С6)-алкил-О-(С1-С6)-алкил-О-(С1С6)-алкила и К37(КК18'К20')К38;
    К20' выбирают из группы, состоящей из водорода, (С1-С6)-алкила и -СО2К21;
    К21' выбирают из группы, состоящей из водорода и (С1-С6)-алкила;
    К34 представляет (С1-С4)-алкил;
    К35 представляет водород или (С1-С3)алкил;
    К36 представляет водород, ОН, галоген, (С1-С3)-алкил, ОК34, NО2, ΝΙ12 и гетероароматическую группу;
    К37 представляет (С1-С6)-алкил;
    К38 представляет СООК39, Ν^, ^К18'К20'), гетероциклическую группу, гетероароматическую группу, ОН, (С1-С6)-алкил и аминокислоту;
    К39 представляет Н или (С1-С6)-алкил;
    каждый из К40, К41 и К42 выбирают независимо из группы, состоящей из водорода, ОК43, галогена, Ν^, ^2, ОРО(ОК46)2, -ОК44-фенила и К45; 2 2 2
    К43 представляет (С1-С6)-алкил;
    К44 представляет (С1-С6)-алкил;
    К45 выбирают из группы, состоящей из незамещенной простой ароматической группы и замещенной простой ароматической группы;
    К46 выбирают из группы, состоящей из Н, №, (С1-С6)-алкила и -С(СН3)3;
    К50 представляет водород или η равно 0, 1 или 2;
    т равно 0, 1 или 2;
    р равно 0, 1 или 2;
    д равно 2, 3 или 4;
    X выбирают из группы, состоящей из О, С,
    8, NН и алкиламино;
    Υ выбирают из группы, состоящей из С, О, ΝΙ I, 8, 8О, 8О2 и алкиламино;
    Ζ выбирают из группы, состоящей из -(СН2)п-, -(СН2)р-О-(СН2)т-и (С3-С5)-циклоалкила;
    ΖΖ выбирают из группы, состоящей из простой незамещенной ароматической группы и простой замещенной ароматической группы;
    или его фармацевтически приемлемая соль киламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, а К2 выбирают из группы, состоящей из ОН, или сольват;
    при условии, что если К1 выбирают из группы, состоящей из галогена, ОН, ОК31, 8Н, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триал175
    176
    NН2, NК31 и 8Н, или К1 и К2 вместе образуют эпоксидное кольцо, азиридиновое кольцо, эписульфидное кольцо, сульфатное кольцо, циклопропильное кольцо или моноалкилфосфатное кольцо, или К1 и К2 вместе образуют вторую связь; К3 представляет С1-6 алкил; К4 и К5 представляют Н или К4 и К5, взятые вместе, образуют двойную связь между С13 и С14; К6 представляет бензил, гидроксибензил, алкоксибензил, галогенгидроксибензил, дигалогенгидроксибензил, галогеналкоксибензил или дигалогеналкоксибензил; каждый из К7, К8, К9 и К10 представляет независимо Н или С1-6алкильную группу; и каждый из Х и Υ представляет независимо О, о
    ΝΗ или алкиламино, и К50 представляет Дк ' а К11 представляет водород; тогда Аг не выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической, незамещенной гетероароматической и замещенной гетероароматической группы; или если Аг выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической, незамещенной гетероароматической и замещенной гетероароматической группы; и К50 представляет Д ' а К11 представляет водород; тогда
    К2 выбирают из группы, состоящей из галогена, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, ОК31 и 8К31; или если К1 выбирают из группы, состоящей из галогена, ОН, ОК31, 8Н, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, и К2 выбирают из группы, состоящей из ОН, NН2, NК31 и 8Н, или К1 и К2 вместе образуют эпоксидное кольцо, азиридиновое кольцо, эписульфидное кольцо, сульфатное кольцо, циклопропильное кольцо или моноалкилфосфатное кольцо, или К1 и К2 вместе образуют вторую связь, и К3 представляет С1-6 алкил, а К4 представляет Н, и К5 представляет Н, и К50 представляет водород, и К11 представляет водород; тогда
    Аг не выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической и гетероароматической группы; или если К1 выбирают из группы, состоящей из галогена, ОН, ОК31, 8Н, амино, моноалкиламино, диалкиламино, триалкиламино, триалкиламмония, алкилтио, диалкилсульфония, сульфатной и фосфатной группы, и К2 выбирают из группы, состоящей из ОН, NН2, NК31 и 8Н, или К1 и К2 вместе образуют эпоксидное кольцо, азиридиновое кольцо, эписульфидное кольцо, сульфатное кольцо, циклопропильное кольцо или моноалкилфосфатное кольцо, или К1 и К2 вместе образуют вторую связь и К3 представляет С1-6 алкил, а К4 представляет Н, и К5 представляет Н, и К50 представляет водород, и К11 представляет водород; или К50 выбирают из группы, состоящей из Л и водорода;
    и К11 выбирают из группы, состоящей из ОН, С1-6 алкильной группы, замещенного фенила, бензила, замещенного бензила и фенила;
    тогда Аг не выбирают из группы, состоящей из (С1-С12)-алкила, (С2-С12)-алкинила, фенила, простой незамещенной ароматической, замещенной ароматической, замещенной гетероароматической и незамещенной гетероароматической группы; или если К3 представляет С1-6 алкил; К4 и К5 представляют Н или К4 и К5, взятые вместе, образуют двойную связь между С13 и С14; К6 представляет бензил, гидроксибензил, алкоксибензил, галогенгидроксибензил, дигалогенгидроксибензил, галогеналкоксибензил или дигалогеналкоксибензил; каждый из К7, К8, К9 и К10 представляет независимо Н или С1-6алкильную группу; и каждый из Х и Υ представляет независимо О, КН или алкиламино; и Аг представляет группу формулы Аг', и один из К54, К55, К56 выбирают из группы, состоящей из алкила или галогена; и К1 и К2 могут быть взяты вместе с образованием эпоксидного кольца, азиридинового кольца, эписульфидного кольца, сульфатного кольца, циклопропильного кольца или моноалкилфосфатного кольца; или К1 и К2 могут быть взяты вместе с образованием второй связи между С18 и С19; или К2 выбирают из группы, состоящей из ОН и 8Н;
    тогда, по меньшей мере, два из К54, К55 и К56 должны быть выбраны из группы, состоящей из (С1-С6)-алкила, простой ароматической группы, фенила, СООК57, РО3Н, 8О3Н, 8О2К58, №59К60, NНОК61, NНСНК61', СН ^2, галогена, ОК62 и 8К63; или если К3 представляет С1-6алкил; К4 и К5 представляют Н, или К4 и К5, взятые вместе, образуют двойную связь между С13 и С14; К6 представляет В-кольцевую гетероароматическую, замещенную гетероароматическую группу, В-кольцевой (С1-С6)-алкил, (С3-С8)циклоалкил, замещенный (С3-С8)-циклоалкил, замещенный (С1-С6)-алкил, группу формулы III' и группу формулы III
    177
    178 и каждый из Х и Υ представляет независимо О, \Н или алкиламино; тогда
    Аг не выбирают из группы, состоящей из фенила или любой простой незамещенной или замещенной ароматической или гетероароматической группы, (С1-С12) -алкила и (С2-С12)алкинила.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором Υ представляет О.
  3. 3. Соединение по п.2, в котором Х представляет О.
  4. 4. Соединение по п.3, в котором К6 выбирают из группы, состоящей из бензила, гидроксибензила, галогенгидроксибензила, дигалогенгидроксибензила, галогеналкоксибензила или дигалогеналкоксибензила.
  5. 5. Соединение по п.4, в котором К9 представляет изобутил и К10 представляет водород.
  6. 6. Соединение по п.5, в котором каждый из К8 и К7 независимо представляет водород или С1-6алкил.
  7. 7. Соединение по п.3, в котором К11 представляет водород.
  8. 8. Соединение по п.7, в котором К50 пред- д
    ставляет
  9. 9. Способ разрушения связывания микротрубочек у млекопитающего, включающий введение эффективного количества соединения по п. 1 .
  10. 10. Способ разрушения связывания микротрубочек ίπ У11го. включающий введение эффективного количества соединения по п. 1 .
  11. 11. Способ лечения неоплазмы (опухоли) у млекопитающего, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества соединения по п. 1.
  12. 12. Композиция, содержащая соединение по п.1 и один или несколько фармацевтически приемлемых разбавителей или носителей для него.
  13. 13. Способ лечения животного, зараженного или восприимчивого к заражению грибками, включающий введение противогрибкового эффективного количества соединения по п.1.
  14. 14. Способ по п. 13, когда указанное животное является млекопитающим.
  15. 15. Способ по п.13, отличающийся тем, что животное инфицировано грибками.
  16. 16. Соединение по п.1, в котором Υ представляет \Н.
  17. 17. Соединение по п.16, в котором К50
    О представляет ·
  18. 18. Соединение по п. 17, в котором Х представляет О.
  19. 19. Соединение по п.18, в котором К6 выбирают, из группы, состоящей из бензила, гидроксибензила, галогенгидроксибензила, дигалогенгидроксибензила, галогеналкоксибензила и дигалогеналкоксибензила.
  20. 20. Соединение по п.19, в котором К9 представляет изобутил и К10 представляет водород.
  21. 21. Соединение по п. 20, в котором каждый из К8 и К7 независимо представляет водород или С1-6алкил.
  22. 22. Соединение по п. 18, в котором К11 представляет водород.
  23. 23. Соединение по п.1, которое выбирают из группы, состоящей из ацетата криптофицина 55, сукцината криптофицина 55, (2'-ди-третбутилфосфатил)фенилацетата криптофицина 55, (2'-фосфатил)фенилацетата криптофицина 55, никотиноата криптофицина 55, Ν-метилпиридинийкриптофицина 55, №трет-Вос-3-(3-хлор4-метоксифенил)-(О)-аланината криптофицина 55, 3-(3-хлор-4-метоксифенил)-(О)-аланината криптофицина 55, Ν-трет-Вос-глицината криптофицина 55, Ν-трет-Вос-в-аланината криптофицина 55, \-трет-Вос-у-аминобутирата криптофицина 55, №трет-Вос-(Ь)-аланината криптофицина 55, Л-трет-Вос-(О)-аланината криптофицина 55, (О)-аланината криптофицина 55 и Να-Νε -ди-трет-Вос-(Ь) - лизината криптофицина 55, или их фармацевтически приемлемых солей.
  24. 24. Соединение по п. 1 , которое выбирают из группы, состоящей из криптофицина 129, криптофицина 138, криптофицина 139, крипто фицина 145, криптофицина 140 и криптофицина 141, или их фармацевтически приемлемых солей.
  25. 25. Соединение по п. 1, которое выбирают из группы, состоящей из криптофицина 152, криптофицина 160, криптофицина 255, криптофицина 153, криптофицина 154, криптофицина 161, криптофицина 234, криптофицина 236, криптофицина 247, криптофицина 251 и криптофицина 238, или их фармацевтически приемлемых солей.
  26. 26. Соединение по п. 1 , которое выбирают из группы, в которую входят третбутилсукцинат криптофицина 55, (2'-ди-третбутилфосфатил)фенилацетат криптофицина 55, (2'-ди-трет-бутилфосфатил)-фенилуксусная кислота, (2'-фосфатил)фенилацетат криптофицина 55, никотиноат криптофицина 55, Ν-метилпиридинийкриптофицин 55, Л-трет-Вос-3-(3хлор-4-метоксифенил-(О)-аланинат криптофицина 55, Ν-трет-Вос-(Ь)-фенилаланинат криптофицина 55, (Ь)-фенилаланинат криптофицина 55, (Ь)-гистидинат криптофицина 55, Ν-третВос-(Ь)-пролинат криптофицина 55, (Ь)-пролинат криптофицина 55, Ν-трет-Вос-глицинат криптофицина 55, глицинат криптофицина 55, Ν-трет-Вос-в-аланинат криптофицина 55, βаланинат криптофицина 55, Ν-трет-Вос-уаминобутират криптофицина 55, γ-аминобутират криптофицина 55, Л-трет-Вос-Ш)аланинат криптофицина 55, (Ь)-аланинат криптофицина 55, Ν-трет-Вос-(О)-аланинат криптофицина 55, (О)-аланинат криптофицина 55, ΝαК.-ди-трет-Вос-ЛЗ-лизинат криптофицина 55,
    179
    180 (Ъ)-лизинат криптофицина 55, Ν,,-Ν.-ди-третВос-(О)-лизинат криптофицина 55, (О)-лизинат криптофицина 55, №трет-Вос-у-трет-бутил-(Ь)глутамат криптофицина 55, (Ь)-а-глутамат криптофицина 55, N-трет-Вос-β-трет-бутиласпартат криптофицина 55, (О)-аспартат криптофицина 55, №трет-Вос-а-трет-бутил-(Ь)глутамат криптофицина 55, (Ь)-у-глутамат криптофицина 55, ^№-ди-трет-Вос-(8)-2,3диаминопропионат криптофицина 55, (8)-2,3диаминопропионат криптофицина 55, Ν-третВос-(Ь)-серинат криптофицина 55, (Ь)-серинат криптофицина 55 и сукцинат криптофицина 55;
    или их фармацевтически приемлемые соли.
EA199900246A 1996-08-30 1997-08-29 Фармацевтические соединения EA001913B1 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2581696P 1996-08-30 1996-08-30
US3911397P 1997-02-26 1997-02-26
US3953097P 1997-03-03 1997-03-03
US4002997P 1997-03-04 1997-03-04
PCT/US1997/015240 WO1998008505A1 (en) 1996-08-30 1997-08-29 Pharmaceutical compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199900246A1 EA199900246A1 (ru) 1999-10-28
EA001913B1 true EA001913B1 (ru) 2001-10-22

Family

ID=27487441

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199900246A EA001913B1 (ru) 1996-08-30 1997-08-29 Фармацевтические соединения

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0934065B1 (ru)
JP (1) JP4364944B2 (ru)
CN (1) CN100356916C (ru)
AT (1) ATE328592T1 (ru)
AU (1) AU722492B2 (ru)
BR (1) BR9711986A (ru)
CA (1) CA2264063C (ru)
CZ (1) CZ64599A3 (ru)
DE (1) DE69736067T9 (ru)
DK (1) DK0934065T3 (ru)
EA (1) EA001913B1 (ru)
ES (1) ES2267149T3 (ru)
HK (1) HK1025036A1 (ru)
IL (1) IL128610A (ru)
NO (1) NO314454B1 (ru)
PT (1) PT934065E (ru)
SI (1) SI0934065T1 (ru)
TR (1) TR199901104T2 (ru)
WO (1) WO1998008505A1 (ru)
YU (1) YU10899A (ru)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6680311B1 (en) 1996-08-30 2004-01-20 Eli Lilly And Company Cryptophycin compounds
BR9712805A (pt) * 1996-09-06 1999-11-23 Lilly Co Eli Processo para a preparação de compostos farmecêuticos
JP2001506970A (ja) * 1996-09-06 2001-05-29 イーライ・リリー・アンド・カンパニー 方法及び新規な中間体
EP0975610A4 (en) * 1997-02-26 2000-05-17 Lilly Co Eli PHARMACEUTICAL COMPOUNDS BASED ON TRIPEPTIDES AND TETRAPEPTIDES
AU6667198A (en) * 1997-02-26 1998-09-18 Eli Lilly And Company Process for preparing pharmaceutical compounds
EP0870506A1 (en) * 1997-04-11 1998-10-14 Eli Lilly And Company Compositions comprising a cryptophycin compound in combination with a synchronizing or activating agent for treating cancer
EP0870501A1 (en) * 1997-04-11 1998-10-14 Eli Lilly And Company Use of specific cryptophycin derivatives for the manufacture of a medicament in the treatment of fungal infections
EP0870510A3 (en) * 1997-04-11 1999-09-15 Eli Lilly And Company Synergistic combination comprising cryptophycin derivatives and microtubule synergizing agents
US6376230B1 (en) 1998-10-16 2002-04-23 Eli Lilly And Company Stereoselective process for producing intermediates of cryptophycins
US6103913A (en) * 1998-10-16 2000-08-15 Eli Lilly And Company Process for preparing enollactone derivatives
US6372936B1 (en) * 1999-06-09 2002-04-16 Eli Lilly And Company Optical resolution of aminoisobobutyric acid
CA2385528C (en) 1999-10-01 2013-12-10 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US6747021B2 (en) 2000-10-02 2004-06-08 Eli Lilly And Company Cryptophycin compound
DK1483251T3 (da) 2002-03-12 2010-04-12 Bristol Myers Squibb Co C3-cyano-epothilon-derivater
TWI426905B (zh) * 2006-02-09 2014-02-21 Enzon Pharmaceuticals Inc 用於乳癌、大腸直腸癌、胰臟癌、卵巢癌及肺癌之治療的７-乙基-１０羥喜樹鹼之多臂聚合性共軛物
FR2947269B1 (fr) 2009-06-29 2013-01-18 Sanofi Aventis Nouveaux composes anticancereux
BR112013009614A2 (pt) * 2010-10-22 2016-07-19 Centre Nat Rech Scient conjugados de pochoxime úteis para o tratamento de patologias relacionadas à hsp90
IT201600108581A1 (it) * 2016-10-27 2018-04-27 Navid Sobhani NUOVE E PIU' POTENTI MOLECOLE PER IL TRATTAMENTO E LA DIAGNOSI DI TUMORI NEUROENDOCRINI (NETs) E DELLE CELLULE STAMINALI DEI NETs
AU2018265333C1 (en) * 2017-05-10 2023-08-17 Sanofi Peptidic linkers and cryptophycin conjugates, useful in therapy, and their preparation
WO2021067460A1 (en) * 2019-09-30 2021-04-08 The Regents Of The University Ofmichigan Biocatalytic synthesis of cryptophycin anticancer agents

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4946835A (en) * 1988-07-15 1990-08-07 Merck & Co., Inc. Antifungal fermentation product and method
US4845086A (en) * 1988-08-09 1989-07-04 Merck & Co., Inc. Antifungal agent
US4845085A (en) * 1988-08-09 1989-07-04 Merck & Co., Inc. Antifungal agent
US5194605A (en) * 1989-12-08 1993-03-16 Merck & Co., Inc. Cyclic renin inhibitors containing 2-substituted (3S,4S)-4-amino-5-cyclohexyl-3-hydroxy pentanoic acid, 2-substituted (3S,4S)-5-cyclohexyl-3,4-di-hydroxy pentanoic acid or 2-substituted (4S,5S)-5-amino-6-cyclohexyl-4-hydroxyhexanoic acid or its analogs
US5952298A (en) * 1993-12-21 1999-09-14 The University Of Hawaii Cryptophycins
DE69427706T2 (de) * 1993-12-21 2001-10-25 University Of Hawaii, Honolulu Cryptophycine
TJ347B (en) * 1995-03-07 2002-10-06 Univ Hawaii Cryptophicin compounds pharmacentical composition method to inhibit the proliteration of cells and and method to treat neoplasia
CA2230540A1 (en) * 1995-08-30 1997-03-06 Eli Lilly And Company Pharmaceutical compounds
DE69626544T2 (de) * 1995-12-22 2004-01-15 Lilly Co Eli Arzneistoffe
EP0792875B1 (en) * 1996-02-27 2001-05-09 Eli Lilly And Company Cryptophycin derivatives and their use as anti-microtubule agents

Also Published As

Publication number Publication date
EP0934065A4 (en) 2000-10-11
IL128610A0 (en) 2001-01-28
DE69736067T9 (de) 2007-10-31
EA199900246A1 (ru) 1999-10-28
CA2264063C (en) 2007-03-13
JP2002514175A (ja) 2002-05-14
SI0934065T1 (sl) 2007-02-28
NO990833L (no) 1999-04-26
ATE328592T1 (de) 2006-06-15
DE69736067T2 (de) 2007-05-10
IL128610A (en) 2004-07-25
ES2267149T3 (es) 2007-03-01
EP0934065A1 (en) 1999-08-11
EP0934065B1 (en) 2006-06-07
WO1998008505A1 (en) 1998-03-05
CZ64599A3 (cs) 1999-10-13
CN1233957A (zh) 1999-11-03
HK1025036A1 (en) 2000-11-03
WO1998008505A8 (en) 1999-08-12
JP4364944B2 (ja) 2009-11-18
NO990833D0 (no) 1999-02-22
TR199901104T2 (xx) 1999-07-21
AU4170197A (en) 1998-03-19
NO314454B1 (no) 2003-03-24
CN100356916C (zh) 2007-12-26
YU10899A (sh) 2002-03-18
AU722492B2 (en) 2000-08-03
DE69736067D1 (en) 2006-07-20
PT934065E (pt) 2006-10-31
DK0934065T3 (da) 2006-10-09
BR9711986A (pt) 1999-08-24
CA2264063A1 (en) 1998-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA001913B1 (ru) Фармацевтические соединения
US6680311B1 (en) Cryptophycin compounds
AU706511B2 (en) A method of inhibiting tumor growth
DE69424166T2 (de) Delta 6, 7-taxolen, antineoplastische verwendung und diese enthaltende pharmazeutische zusammenstellungen
DE60012988T2 (de) Taxane mit carbonaten in c-4
LV13120B (en) Delta 12, 13-iso-taxol analogs, antineoplastic use and pharmaceutical compositions containing them
CA2230540A1 (en) Pharmaceutical compounds
BG63289B1 (bg) Нови криптофицини и метод за получаването им
EP3107919B1 (en) Macrocyclic therapeutic agents, methods of manufacture, and methods of treatment
CA2263420A1 (en) Pharmaceutical compounds
US20020128185A1 (en) Pharmaceutical compounds
WO1998008829A1 (en) Pharmaceutical compounds
JP4718449B2 (ja) コルヒチン類似体
FR2549062A1 (fr) Nouveaux derives de synergistines, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US6180679B1 (en) Method for treating fungal infections
KR100505779B1 (ko) 제약 화합물
TW533206B (en) A novel cryptophycin compound and its pharmaceutical composition
MXPA99001825A (en) Pharmaceutical compounds
AU2017377671A1 (en) Novel compounds as anti-mycobacterials
EP3737385A1 (en) Glycosyltransferase inhibitors
EP0870501A1 (en) Use of specific cryptophycin derivatives for the manufacture of a medicament in the treatment of fungal infections
CA2214565C (en) New cryptophycins from synthesis
AU726730B2 (en) Delta 12,13-iso-taxol analogs, antineoplastic use and pharmaceutical compositions containing them
WO1998046193A2 (en) Synergistic method for treating a neoplasm
CA2293311A1 (en) Synergistic method for treating cancer

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU