DE69424166T2 - Delta 6, 7-taxolen, antineoplastische verwendung und diese enthaltende pharmazeutische zusammenstellungen - Google Patents

Delta 6, 7-taxolen, antineoplastische verwendung und diese enthaltende pharmazeutische zusammenstellungen

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Description

  • Taxol ist ein Mitglied der Taxanfamilie von Diterpenen der folgenden Strukaur:
  • Das angegebene Nummerierungssystem für Taxol ist von der IUPAC(IUPAC, Commission on the Nomenclature of Organic Chemistry, 1978)empfohlen.
  • Über die Chemie des starken als Antikrebsmittel wirkenden Diterpenoids Taxol und seiner Analoga wird unter besonderer Gewichtung der Isolierung und Analyse; von Strukturmodifikationen,, der Teilsynthese und von Struktur/- Aktivitäts-Beziehungen von David G. I. Kingston in "The Chemistry of Taxol" in "Pharmac. Ther.", Band 52, S. 1-34, 1991, berichtet.
  • Ein zusammenfassender Bericht über die klinische Pharmakologie von Taxol findet sich bei Eric K. Rowinsky und Ross C. Donehower in "The Clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics" in "Pharmac. Ther.", Band 52, S. 35-84, 1991. Über klinische und vorklinische Studien mit Taxol wird von William J. Slichenmyer und Daniel D. Von Hoff in "Taxol: A New and Effective Anti-cancer Drug" in "Anti-Cancer Drugs", Band 2, 5. 519-530, 1991, berichtet.
  • Taxol und seine Analoga sind Gegenstand verschiedener Patente einschließlich beispielsweise US-A-4 814 470, 4 857 653, 4 942 184, 4 924 011, 4 924 012, 4 960 790, 5 015 744 " 5 157 049, 5 059 699, 5 136 060, 4 876 399 und 5 227 400, PCT-Veröffentlichung Nr. WO 92/09589, der europäischen Patentanmeldungen 90305845.1(Veröffentlichungsnr. A2 0 400 971), 90312366.9(Veröffentlichungsnr. A1 0 428 376), 89400935.6(Veröffentlichungsnr. A1 0 366 841), 90402333.0(Veröffentlichungsnr. 0 414 610 A1), 87401669.4(A1 0 2.53 739), 92308608.6(A1 0 534 708)und 92308609.4(A1 534 709)sowie der PCT-Veröffentlichungen Nr. WO 91/17977, WO 91/17976, WO 91/13066 und WO 91/13053.
  • Verschiedene Verfahren zur Herstellung von Taxol(sowie seiner Zwischenprodukte und Analoga)werden in "Tetrahedron Letters", 1992, 33, 5185, in "J. Org. Chem.", 1991, 56, 1681 und "J. Org. Chem.", 1991, 56, 5114, beschrieben.
  • Chen et al. berichteten in "Serendipitous Synthesis of a Cyclopropane-Containing Taxol Analog via Anchimeric Participation of an Unactivated Angular Methyl Group" in "Advance ACS Abstracts", Band 1, Nr. 2, 15. Juli 1993, daß die Behandlung eines 7-Epitaxolderivats mit DAST in Dichlormethan zu einer unerwarteten Reaktion unter Beteiligung der C-19-Methylgruppe und sauberer Bildung eines Cyclopropanrings führte(vgl. auch "J. Org. Chem.", 1993, 58, 4520(13. August 1993).
  • Chen et al. berichteten in "Tetrahedron Letters", 1994, 35, 41-44, daß die Reaktion von 2'-O-Cbz-Taxol mit DAST 2'-O-Cbz-7-Desoxy-7α-fluortaxol und 2'-O-Cbz-7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol lieferte. Die Entfernung der 2'-O- Cbz-Schutzgruppen aus letzteren beiden Verbindungen lieferte 7-Desoxy-7α-fluortaxol und 7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol. 7,8-Cyclopropataxane sind Gegenstand der US-A-5 254 580. Klein et al. berichten in "J. Org. Chem.", 1994, 59, 2370 über die Bildung von 7β,8β-Methanotaxolen.
  • Die US-A-5 294 637(erteilt am 15. März 1994)betrifft 7-Fluortaxalderivate.
  • Die US-A-5 248 796(erteilt am 28. September 1993)betrifft 10-Desacetoxy-11, 12-dihydrotaxol-10, 12(18)-dienderivate und die Herstellung von 10-Desacetoxytaxol.
  • A. G. Chaudhary et al. berichten in "J. Am. Chem. Soc.", 1994, 116, 4097-8 über verschiedene meta- und parasubstituierte 2-Benzoylanaloga von Taxol.
  • E. Didier et al. beschreiben in "Tetrahedron Lett.", 1994, 35, 2349-52 die Verwendung von 2-Aryloxarylidinen als Schutzgruppen für die Taxolseitenkette in einem Vorläuferfragment.
  • I. Ojima et al. beschreiben in "Bioorganic Med. Chem. Lett.", 1993, 3, 2472-82, verschiedene Seitenkettenharnstoffanaloga(einschließlich eines tert.- Butylharnstoffanalogs).
    • ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
  • Gegenstand dieser Erfindung sind 7-Desoxytaxolanaloga der Formel I:
  • worin die verschiedenen Gruppen R in Anspruch 1 definiert sind(ausschließlich der in EP-A-0 600 517 beschriebenen Verbindungen).
  • Die Verbindungen der Formel I eignen sich für dieselben Krebsarten, bei denen sich Taxol als aktiv erwiesen hat. Hierzu gehören humaner Eierstockkrebs, Brustkrebs und humanes malignes Melanom sowie Lungenkrebs, Magenkrebs, Kolonkrebs, Kopf- und Nackenkrebs sowie Leukämie.
    • ÜBEREINKÜNFTE BEZÜGLICH FORMELN UND DEFINITION VON VARIABLEN
  • Die chemischen Formeln, durch die in der Beschreibung und in den Ansprüchen die verschiedensten Verbindungen oder Molekülbruchstücke dargestellt sind, können neben den ausdrücklich festgelegten Strukturmerkmalen variable Substituenten enthalten. Diese variablen Substituenten werden durch einen Buchstaben oder einen Buchstaben mit tiefstehender Zahl, beispielsweise "Z&sub1;" oder "Ri" mit "i" gleich einer ganzen Zahl, identifiziert. Diese variablen Substituenten sind entweder ein- oder zweiwertig, d. h. sie repräsentieren eine an die Formel durch eine oder zwei chemische Bindung(en)gebundene Gruppe. Eine: Gruppe Z&sub1; steht beispielsweise für eine zweiwertige Variable, wenn sie an die Formel wie folgt CH&sub3;-C(=Z&sub1;)H gebunden ist. Die Gruppen Ri und Rj stehen für einwertige variable Substituenten, wenn sie an die Formel wie folgt CH&sub3;CH&sub2;-C(Ri)(Rj)H gebunden sind. Wenn chemische Formeln - wie oben - linear dargestellt sind, sind die in Klammern gehaltenen variablen Substituenten an das Atom unmittelbar zur Linken des in Klammern geschriebenen variablen Substituenten gebunden. Wenn zwei oder mehrere aufeinanderfolgende variable Substituenten in Klammern gesetzt sind, ist jeder der aufeinanderfolgenden variablen Substituenten an das zur Linken unmittelbar vorhergehende Atom, das nicht in Klammern steht, gebunden. So sind in der angegebenen Formel beide Reste Ri und Rj an das vorhergehende Kohlenstoffatom gebunden. Für irgendein Molekül mit einem etablierten System einer Kohlenstoffatomnummerierung, z. B. Steroide, werden ferner diese Kohlenstoffatome als Ci, mit "i" gleich einer ganzen Zahl entsprechend der Kohlenstoffatomzahl bezeichnet. So bezeichnet beispielsweise C&sub6; die 6-Stellung oder Kohlenstoffatomzahl in dem Kern in der dem Fachmann geläufigen traditionellen Bezeichnung.
  • Chemische Formeln oder Teile derselben in linearer Anordnung bezeichnen Atome in einer linearen Kette. Das Symbol "-" steht im allgemeinen für eine Bindung zwischen zwei Atomen in der Kette. So bezeichnet CH&sub3;-O-CH&sub2;-CH(Ri)-CH&sub3; eine 2-substituierte-1-Methoxypropanverbindung. In ähnlicher Weise steht das Symbol rrur für eine Doppelbindung, beispielsweise CH&sub2;=C(Ri)-O-CH&sub3;. Das Symbol " " steht für eine Dreifachbindung, beispielsweise HC C-CH(Ri)-CH&sub2;-CH&sub3;. Carbonylgruppen werden auf eine von zwei Arten dargestellt: -CO- oder -C(=O)-, wobei erstere aus Gründen der Einfachheit bevorzugt wird.
  • Chemische formeln cyclischer(Ring-)Verbindungen oder Molekülfragmente können in linearer Anordnung dargestellt werden. So kann die Verbindung 4-Chlor-2-methylpyridin in linearer Anordnung durch N* = C(CH&sub3;)-CH=CCl-CH=C*H mit der Übereinkunft, dass die mit einem Sternchen(*)markierten Atome unter Ringbildung aneinander gebunden sind, dargestellt werden. In ähnlicher Weise kann das cyclische Molekülfragment 4-(Ethyl)-1-piperazinyl durch -N*-(CH&sub2;)&sub2;-N(C&sub2;H&sub5;)-CH&sub2;-C*H&sub2; dargestellt werden. Ähnlich kann 2-Furyl durch -C*-O-CH=CH-C*H = und 2-Thienyl durch -C*-S-CH=CH-C*H= dargestellt werden.
  • Eine starre cyclische(Ring-)Struktur für irgendeine der vorliegenden Verbindungen legt für die an jedem Kohlenstoffatom der starren cyclischen Verbindung hängenden Substituenten eine Orientierung in bezug auf die Ringebene fest. Für gesättigte Verbindungen, bei denen zwei Substituenten an einem ein Teil eines Cyclussystems bildenden Kohlenstoffatom hängen, -C(X&sub1;)(X&sub2;)-, können die beiden Substituenten relativ zum Ring in entweder axialer oder äquatorialer Position sein und zwischen axial/äquatorial wechseln. Die Position der zwei Substituenten relativ zum Ring und zueinander bleibt jedoch fixiert. Zwar kann einer der Substituenten gelegentlich eher in der Ringebene(äquatorial)liegen als oberhalb oder unterhalb der Ebene(axial), doch liegt ein Substituent immer oberhalber des anderen. In den solche Verbindungen darstellenden Formeln wird ein "unterhalb" eines anderen Substituenten(X&sub2;)befindlicher Substituent(X&sub1;)als in Alpha(α)-Konfiguration befindlich identifiziert und durch eine unterbrochene, gepunktete oder gestrichelte Bindungslinie zu dem Kohlenstoffatom, d. h. durch das Symbol "---" oder "...." angegeben. Der entsprechende "oberhalb" des anderen Substituenten(X&sub1;)befindliche Substituent(X&sub2;)oberhalb der Ringebene wird als in Beta(β)-Konfiguration befindlich bezeichnet und durch eine ununterbrochene Bindungslinie zum Kohlenstoffatom angegeben.
  • Wenn ein variabler Substituent zweiwertig ist, können die Valenzen bei der Definition der Variablen zusammen genommew und/oder getrennt genommen werden. Wenn beispielsweise eine Variable Ri an einem Kohlenstoffatom wie folgt -C(=Ri)- hängt, könnte sie zweiwertig sein und als Oxo oder Keto(also eine Carbonylgruppe(-CO-)bildend)bezeichnet werden oder für zwei getrennt gebundene einwertige variable Substituenten α-Ri-j und β-Ri-k stehen. Wenn eine zweiwertige Variable Ri derart definiert ist, daß sie aus zwei einwertigen variablen Substituenten besteht, besitzt die zur Definition der zweiwertigen Variable benutzte Übereinkunft die Form α-Ri-j β-Ri-k oder irgendeiner Variante hiervon. In einem solchen Fall sind beide Reste α-Ri-j und β-Ri-k wie folgt -C(α-Ri-j)(β-Ri-k)- an das Kohlenstoffatom gebunden. Wenn beispielsweise die zweiwertige Variable R&sub6;&submin;&sub9; -C(=R&sub6;)-, derart definiert ist, daß sie aus zwei einwertigen variablen Substituenten besteht, sind die beiden einwertigen variablen Substituenten α-R&sub6;&submin;&sub1;: β-R&sub6;&submin;&sub2;, ........, α-R&sub6;&submin;&sub2; und dergleichen unter Bildung von -C(α-R&sub6;&submin;&sub1;)(β-R&sub6;&submin;&sub2;) ...... -C(α-R&sub6;&submin;&sub9;)(β-R&sub6;&submin;&sub1;&sub0;)- und dergleichen. In gleicher Weise sind für die zweiwertige Variable R&sub1;&sub1;, -C(=R&sub1;&sub1;)-, die einwertigen variablen Substituenten α-R&sub1;&sub1;&submin;&sub1; : β-R&sub1;&sub1;&submin;&sub2;. Für einen Ringsubstituenten, für den getrennte α- und β-Orientierungen nicht existieren(beispielsweise infolge der Anwesenheit einer Kohlenstoffdoppelbindung im Ring), und für einen an ein Kohlenstoffatom, daß keinen Teil eines Rings bildet, gebundenen Substituenten gilt die angegebene Übereinkunft ebenfalls, wobei die α- und β-Bezeichnungen weggelassen werden.
  • Genauso wie eine zweiwertige Variable als zwei getrennte einwertige variable Substituenten definiert werden kann, können zwei getrennte einwertige variable Substituenten auch zusammen eine zweiwertige Variable bildend definiert werden. So können beispielsweise in der Formel -C&sub1;(Ri)H-C&sub2;(Rj)H-(C&sub1; und C&sub2; stehen willkürlich für ein erstes bzw. zweites Kohlenstoffatom)Ri und Rj derart definiert werden, daß sie zusammen
  • (1)eine zweite Bindung zwischen C&sub1; und C&sub2; oder
  • (2)eine zweiwertige Gruppe, z. B. Oxa(-O-), bilden, und die Formel demnach ein Epoxid umschreibt. Wenn Ri und Rj zusammengenommen eine komplexere Einheit, z. B. die Gruppe -X-Y-, bilden, ist die Orientierung der Einheit derart, daß C&sub1; in der angegebenen Formel an X und C&sub2; an Y gebunden ist. Übereinkunftgemäß bedeutet folglich die Bezeichnung "... Ri und Rj bilden zusammen -CH2-CH&sub2;-O-CO-..." ein Lacton, in dem das Carbonyl an 02 gebunden ist. Die Bezeichnung "... Rj und Ri bilden zusammen -CH&sub2;-CH&sub2;-0-C&sub0;-" bedeutet jedoch ein Lacton, in dem das Carbonyl an C1 gebunden ist. Der Kohlenstoffatomgehalt variabler Substituenten wird auf eine von zwei Arten angegeben. Die erste Art benutzt ein Präfix zu dem gesamten Namen der Variable, z. B. "C&sub1;-C4", wobei sowohl "1" als auch "4" ganze Zahlen entsprechend der Mindestzahl und Höchstzahl von Kohlenstoffatomen in der Variablen bedeuten. Das Präfix ist von der Variablen durch einen Abstand getrennt. So steht beispielsweise "C&sub1;-C&sub4; Alkyl" für Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen (einschließlich isomerer Formen hiervon, sofern nicht ausdrücklich etwas gegenteiliges gesagt ist). Wenn dieses einzige Präfix angegeben ist, steht es für den gesamten Kohlenstoffatomgehalt der zu definierenden Variablen. So steht C&sub2;-C&sub4; Alkoxycarbonyl für eine Gruppe CH&sub3;-(CH&sub2;)n-O-CO- mit n = 0,1 oder 2. Durch die zweite Art wird der Kohlenstoffatomgehalt lediglich jeden Teils der Definition getrennt angegeben, indem die Bezeichnung "Ci-Cj" eingeklammert und unmittelbar vor(ohne Zwischenraum)den festzulegenden Teil der festzulegenden Definition gesetzt wird. Aufgrund dieser optimalen Übereinkunft besitzt(C&sub1;-C&sub3;)Alkoxycarbonyl dieselbe Bedeutung wie C2-C&sub4; Alkoxycarbonyl, da der Ausdruck "C&sub1;-C3" sich lediglich auf den Kohlenstoffatomgehalt der Alkoxygruppe bezieht. Während in ähnlicher Weise 02-C&sub6; Alkoxyal kyl und(C&sub1;-C&sub3;)Alkoxy(C&sub1;-C&sub3;)alkyl Alkoxyal kylgruppen mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen festlegen, unterscheiden sich beide Definitionen, da es erstere Definition ermöglicht, daß entweder der Alkoxy- oder Alkylteil alleine 4 oder 5 Kohlenstoffatome enthält, während letztere Definition beide Gruppen auf 3 Kohlenstoffatome beschränkt.
  • Wenn die Ansprüche einen recht komplexen(cyclischen) Substituenten enthalten, findet sich am Ende der den speziellen Substituenten benennenden/bezeichnenden Phrase eine Bezeichnungsweise(in Klammern), die dem(der)selben Namen/Bezeichnung in einer der Reaktionsschemata, in der auch die chemische Strukturformel dieses speziellen Substituenten dargestellt ist, entspricht.
    • DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
  • Beispiele für R&sub2; sind -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(OH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)(CH&sub2;CH&sub3;)&sub2;CH&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub2;CH&sub2;CH&sub3; und NHC(O)NHC(CH&sub3;)&sub3;.
  • R&sub1;&sub7; ist vorzugsweise -C(O)C&sub6;H&sub5; oder -C(O)Phenyl, einfach substituiert durch Azido, Cyano, Methoxy oder Halogen, insbesondere -C(O)C&sub6;H&sub5; oder -C(O)Phenyl, einfach substituiert durch Azido, Cyano, Methoxy oder ein Chloratom in meta-Stellung, insbesondere -C(O)C&sub6;H&sub5;.
  • Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I mit R&sub1; gleich Phenyl oder halogensubstituiertem Phenyl, R&sub2; gleich -NHC(O)C&sub6;H&sub5;, R&sub3; und R&sub5; gleich -H, R&sub4; gleich -OH, R&sub1;&sub0; gleich -H oder -C(O)CH&sub3; und R&sub1;&sub7; gleich -C(O)C&sub6;H&sub5;. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I mit Rj vorzugsweise gleich Phenyl oder halogensubstituiertem Phenyl, R&sub2; gleich -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, R&sub3; und R&sub5; gleich -H, R&sub4; gleich -OH und R&sub1;&sub0; gleich -H oder -COCH&sub3; und R&sub1;&sub7; gleich -C(O)C&sub6;H&sub5;. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I mit R&sub1; vorzugsweise gleich Phenyl oder halogensubstituiertem Phenyl, R&sub2; gleich -NHC(O)NHC(CH&sub3;)&sub3;, R&sub3; und R&sub5; gleich -H, R&sub4; gleich -OH, R&sub1;&sub0; gleich -H oder -COCH&sub3; und R&sub1;&sub7; gleich -C(O)C&sub6;H&sub5;.
  • Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I mit R&sub1; ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, substituiert durch 1, 2 oder 3 C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub3; Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3; Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6; Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro, und R&sub2; ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus -H, -NHC(O)H,
  • -NHC(O)C&sub1;-C&sub1;&sub0;Alkyl(vorzugsweise -NHC(O)C&sub4;-C&sub6;Alkyl),
  • - NHC(O)Phenyl, -NHC(O)Phenyl, substituiert durch 1, 2
  • oder 3 C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub3; Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3; Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6; Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro,
  • -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;, -NHC(O)OC(CH&sub3;)3, -NHC(O)OCH&sub2;Phenyl,
  • - NH&sub2;, -NHSO&sub2;-4-Methylphenyl, -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH,
  • -NHC(O)-4-(SO&sub3;H)Phenyl, -OH, -NHC(O)-1-Adamantyl,
  • -NHC(O)O-3-Tetrahydrofuranyl, -NHC(O)O-4-Tetrahydropyranyl,
  • -NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)OC&sub1;-C&sub1;&sub0;Alkyl,
  • - NHC(O)NHC&sub1;-C&sub1;&sub0;Alkyl, -NHC(O)NHPh substituiert durch 1, 2
  • oder 3 C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub3; Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3; Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6; Dialkylamino oder Nitro.
  • Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Δ6,7-Taxolanaloga der allgemeinen Formel I, worin bedeuten:
  • R&sub1; -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl substituiert durch 1, 2 oder 3 C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub3; Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3; Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6; Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro;
  • R&sub2; -H, -NHC(O)H, -NHC(O)C&sub1;-C&sub1;&sub0;Alkyl, -NHC(O)Phenyl,
  • - NHC(O)Phenyl substituiert durch 1, 2 oder 3 C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub3; Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3; Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6; Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro, -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;,
  • -NHC(O)CH&sub2;O(CH&sub3;)&sub3;, -NH&sub2;, -NHSO&sub2;-4-Methylphenyl,
  • -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH, -NHC(O)-4-(SO&sub3;H)Phenyl, -OH, -NHC(O)-1- Adamantyl, -NHC(O)0-3-Tetrahydrofuranyl, -NHC(O)O-4-Tetrahydropyranyl, -NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub3;.
  • -NHC(O)OC&sub1;-C&sub1;&sub0;Alkyl, -NHC(O)NHC&sub1;-C&sub1;&sub0;Alkyl, -NHC(O)NHPh substituiert durch 1, 2 oder 3 C&sub1;-C&sub9; Alkyl, C&sub1;-C&sub3; Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3; Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6; Dialkylamino oder Nitro oder -NHC(O)C&sub3;-C&sub8; Cycloalkyl;
  • R&sub1;&sub7; -C(O)C&sub6;H&sub5;, und worin R&sub3;, R&sub4;, R&sub5; und R&sub1;&sub0; der angegebenen Definition entsprechen.
  • - Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Δ6,7-Taxolanaloga der allgemeinen Formel I, worin R&sub1; für Phenyl oder halogensubstituiertes Phenyl steht, R&sub2; -NHC(O)C&sub6;H&sub5; darstellt, R&sub3; und R&sub5; -H bedeuten, R&sub1;&sub0; -C(O)CH&sub3; entspricht und R&sub1;&sub7; für -C(O)C&sub6;H&sub5; steht. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I mit R&sub1; vorzugsweise gleich Phenyl oder halogensubstituiertem Phenyl, R&sub2; gleich -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, R&sub1;&sub7;, gleich C(O)C&sub6;H&sub5; und R&sub3;, R&sub5; und R&sub1;&sub0; gleich -H.
  • Bevorzugte Ausführungsformen der Formel I umfassen eine Verbindung der Formel I, nämlich 2'-[{(2,2,2-Trichlor ethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-Δ6,7-taxol, und eine Verbindung der Formel I, nämlich N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol(Verbindung 16F).
  • Beispiele für -NHC(O)C&sub1;-CloAlkyl sind -NHC(O)-n-Pentyl und -NHC(O)CH(CH&sub3;)CH&sub2;CH&sub3;.
  • Beispiele für C&sub1;-C&sub6; Alkyl sind gerad- und verzweigtkettige Alkylketten einschließlich von beispielsweise Methyl, Ethyl, Isopropyl, tert.-Butyl, Isobutyl und 2- Methylpentyl.
  • Beispiele für C&sub1;-C&sub3; Alkoxy sind Methoxy, Ethoxy, Propoxy und deren isomere Formen.
  • Halogen bezeichnet -F, -Brt -C&sub1; oder -I.
  • Beispiele für erfindungsgemäße Verbindungen der Formel I sind:
  • 2'-([(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-Δ6,7-taxol (Verbindung 15AA);
  • N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-([(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-Δ6,7-taxol(Verbindung 15BA);
  • N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol(Verbindung 16B);
  • 2-Debenzoyl-2-(m-azido)benzoyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2' - [-C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;] -7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)-succinyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)-succinyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-Glycyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol; 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol; 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminoca rbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol (Verbindung 16F);
  • 2-Debenzoyl-2-(m-azido)benzoyl-7-desoxy-Δ6,7--taxoter;
  • 2-Debenzoyl-2-(m-azido)benzoyl-10-acetyl-7-desoxy-Δ6,7- taxoter;
  • N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-azido)benzoyl-N-tert.- butylaminocarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2-Debenzoyl-2-(m-chlor)benzoyl-7-desoxy-Δ6,7--taxoter;
  • 2-Debenzoyl-2-(m-chlor)benzoyl-10-acetyl-7-desoxy-Δ6,7- taxoter;
  • N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-chlor)benzoyl-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2-Debenzoyl-2-(m-methoxy)benzoyl-7-desoxy-Δ6,7-taxoter;
  • 2-Debenzoyl-2-(m-methoxy)benzoyl-10-acetyl-7-desoxy-Δ6,7 taxoter;
  • N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-methoxy)benzoyl-N-tert. - butylaminocarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • 2-Debenzoyl-2-(m-cyano)benzoyl-7-desoxy-Δ6,7-taxoter;
  • 2-Dibenzoyl-2-(m-cyano)benzoyl-10-acetyl-7-desoxy-Δ6,7- taxoter;
  • N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-cyano)benzoyl-N-tert.- butylaminocarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • N-Debenzoyl-N-(1-methyl-1-cyclohexylanoyl)-7-desoxy-Δ6,7 taxol;
  • N-Debenzoyl-N-(1-phenyl-1-cyclopentanoyl)-7-desoxy-Δ6,7 taxol;
  • N-Debenzoyl-N-phhalimido-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminothiocarbonyl-7-desoxy-Δ6,7- taxol;
  • N-Debenzoyl-N-tert.-amyloxycarbonyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol;
  • N-Debenzoyl-N-neopentyloxycarbonyl-7 -desoxy-Δ6,7-taxol;
  • N-Debenzoyl-N-(2-chlor-1,1-dimethylethyl)oxycarbonyl-7- desoxy-Δ6,7-taxol
  • und deren Salze.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden nach den Verfahren gemäß den Reaktionsschemata A, A', B, C und D hergestellt.
  • Der Ausgangspunkt für das in Reaktionsschema A dargestellte Verfahren ist ein Taxol- oder Taxaloanalogonderivat A-1. Die Umsetzung der Verbindung A-1 mit einem Reagens, wie Diethylaminoschwefeltrifluorid(DAST), Dimethylaminoschwefeltrifluorid(MethylDAST), Bis(dimethylamino)- schwefeldifluorid, Bis(diethylamino)schwefeldifluorid oder (Diethylamino)(dimethylamino)schwefeldifluorid liefert das 7-Desoxy-Δ6,7-Analogon A-2(Reaktionsschema A-I)sowie das 7-Desoxy-7β,8β-methanoanalogon A'-2(Reaktionsschema A-II) und ferner das 7-Desoxy-7-fluoranalogon A"-2(Reaktionsschema A-III). Das bevorzugte Verfahren für diese Umwandlung wird mit DAST oder MethylD. AST durchgeführt. Die Umsetzung mit DAST oder MethylDAST erfolgt in einem aprotischen Lösungsmittel, wie Methylenchlorid(CH&sub2;Cl&sub2;), Chloroform (CHCl&sub3;), Fluortrichlormethan(Freon 11®), Ethylenglykoldimethylether(Glyme), 2-Methoxyethylether(Diglyme), Pyridin, Kohlenwasserstoffen, wie Pentan, Hexan oder Isooctan, Tetrahydrofuran(THF), Benzol, Toluol oder Xylol. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Methylenchlorid. Die Umsetzung kann in einem Temperaturbereich von -100ºC bis 100ºC oder darüber durchgeführt werden. Im allgemeinen beginnt die Umsetzung unter Temperaturbedingungen, beispielsweise bei -78ºC, und wird dann bei höherer Temperatur, beispielsweise 25ºCC(weiter)ablaufen gelassen. Nachdem die Reaktion durch Wasserzusatz beendet wurde, wird das Rohprodukt nach Standardextraktionsverfahren isoliert und durch chromatographische Standardverfahren und/oder Kristallisation gereinigt. Das Produkt A-2 dieser Maßnahmen wird dann Reaktionsbedingungen unterworfen, unter denen jegliche Schutzgruppen entfernt werden. Wenn beispielsweise zur Maskierung einer Hydroxylgruppe von Taxol oder eines Taxolanalogon eine [(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl(Troc)-Gruppe verwendet wird, dient die Behandlung von A-2(Reaktionsschema A-I)mit aktiviertem Zink in methanolischer Essigsäurelösung zur Entfernung der Schutzgruppe und zur Bildung des gewünschten 7-Desoxy-Δ6,7-taxols oder 7-Desoxy-Δ6,7-taxolanalogon A-3(Reaktionsschema A-I).(Die Behandlung von A'-2(Reaktionsschema A-II)mit aktiviertem Zink in methanolischer Essigsäurelösung dient zur Entfernung der Schutzgruppe und Bildung des gewünschten 7-Desoxy-7β,8β methanotaxols oder 7-Desoxy-7β,8β-methanoltaxolanalogon A'-3(Reaktionsschema A-II). Die Behandlung von A"-2(Reaktionsschema A-III)mit aktiviertem Zink in methanolischer Essigsäurelösung dient zur Entfernung der Schutzgruppe und Bildung des gewünschten 7-Desoxy-7-fluortaxols oder 7-Desoxy-7-fluortaxolanalogon A"-3(Reaktionsschema A-III).] Methoden zur Addition der verschiedenen Schutzgruppen an Taxol oder Taxolanaloga und zur Entfernung solcher Gruppen finden sich bei T. W. Greene und P. G. M. Wuts in "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Auflage, Seiten 10-142, Wiley, N. Y. 1991.
  • Andererseits können die erfindungsgemäßen Verbindungen (der Formel I)auch durch Behandeln eines 7-Epitaxolderivats mit DAST in Dichlormethan hergestellt werden(vgl. Chen et al., "Serendipitous Synthesis of a Cyclopropane- Containing Taxol Analog via Anchimeric Participation of an Unactivated Angular Methyl Group" in "Advance ACS Abstracts", Band 1, Nr. 2,15. Juli 1993 und "J. Org. Chem.", 1993, 56, 4520(13. August 1993).
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen(der Formel I)können nach einem neuen und verbesserten Verfahren entsprechend den Reaktionsschemata A', B, C und D hergestellt werden. Die Herstellung von 3-Azido-2-hydroxycarbonsäureestern 1 kann entsprechend den Literaturangaben(vgl. J.-N. Denis, A. Correa und A. E. Green in "J. Org. Chem.", 1990, 55, 1957)erfolgen. Diese Substanzen lassen sich ohne Schwierigkeiten zu den freien Aminen 2 hydrieren, auch wenn die Literatur absichtlich dieses Zwischenprodukt vermeidet, indem vor der Reduktion des Azids das hydroxyacylierte Zwischenprodukt hergestellt wird. Amin 2 ist ausreichend stabil, so daß bei seiner Isolierung und direkten Weiterverarbeitung zur Herstellung der N-acylierten freien Hydoxyverbindungen 3 keinerlei Probleme auftreten. Die Verbindungen 3 wurden durch Schutz der Hydroxygruppe, Hydrolyse des Esters zu der Säure und direkte Kondensation mit einem Baccatin III-Derivat oder nach Umwandlung zu dem Oxazinon wieterverarbeitet(europäische Patentanmeldung A1 0 428 376 und US-A-436235). Diese Maßnahmen sind deutlich schlechter, da sie große Überschüsse an Acylierungsmittel erfordern und im allgemeinen nicht vollständiger als etwa 60% ablaufen.
  • Es wurden auch bereits Maßnahmen unter Verwendung eines β- Lactamzwischenprodukts beschrieben, diese erfordern jedoch ebenfalls große Überschüsse an Reagens oder die Mitverwendung sehr starker Basen, wie LDA, was deren Durchführung erschwert und sie für bestimmte Analoga ungeeignet macht (I. Ojima, I. Habus, M. Zhao, G. I. George, L. R. Jayasinghe in "J. Org. Chem.", 1991, 56, 1681, EP-A2-0 400 971). Ein sehr wirksames Kondensationsverfahren besteht in der Umwandlung des Hydroxyaminderivats 3 in ein Oxazolidin mit 2 Nicht-Wasserstoffsubstituenten in 2-Stellung(vgl. A. Commercon, D. Bezard, F. Bernard und J. D. Bourzat in "Tetrahedrons Lett.", 1992, 33, 5185 und PCT-Veröffentlichung WO 92/09589). Die Kondensation erfolgt in sehr hoher Ausbeute, die Entfernung der Schutzgruppe erfordert jedoch eine so starke Säure, daß empfindliche Taxolanaloga unter den Entschützungsbedingungen zerstört werden. Wir haben dieses Verfahren durch Bildung der Oxazolidine 5 nicht mit einem Keton, wie bei den beschriebenen Arbeiten, sondern mit einem elektronenreichen Benzaldehyd 4 modifiziert und verbessert. Die von dem Benzaldehyd 4 herrührenden Oxazolidine entstehen als Diastereomere ngemisch. Diese wurden jedoch in einigen Fällen aufgetrennt und es hat sich gezeigt, daß die Diastereomere bei ihrer Weiterverwendung bei der Synthese in gleicher Weise geeignet sind. Die Oxazolidine 5 werden ohne weiteres zu den Salzen 6 und den Säuren 7 hydrolysiert. Die Säure ist labil und muß kurz nach ihrer Herstellung verwendet werden. Beide Oxazolidinisomere sind bei der Kondensationsreaktion mit den geschützten Baccatinen 8 in gleicher Weise wirksam und liefern die oxazolidingeschützten Taxolanaloga 8 in hervorragender Ausbeute. Noch wichtiger ist, daß beide Oxazolidinisomere aus diesen elektronenreichen Benzaldehyden ohne Schwierigkeiten unter sehr milden sauren Bedingungen hydrolysiert werden und somit eine Entschützung ohne unerwünschte Umwandlungen hoch säureempfindlicher Taxolderivate, wie 10 oder der Δ6,7-Taxolanaloga 16, die Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind, gestatten. Es gibt zwar Hinweise auf die Verwendung elektronenreicher Aldehyde zur Entschützung von 1,2-Diolen, als Dioxolanen, bislang gibt es jedoch nocht keine Hinweise auf die Verwendung solcher Aldehyde für die Entschützung von 2-hydroxygeschützten Aminen. Die Entschützung kann derart durchgeführt werden, daß beide, nämlich das Oxazolidin und das 7-geschützte Hydoxyl von 9, gleichzeitig oder unabhängig voneinander entfernt werden. Beschrieben ist ferner die Entschützung von ausgewählten Urethananaloga 10 zu dem freien Amin 11(Reaktionsschema B). Dieses wird dann in die verschiedensten aminacylierten Analoga 10 überführt.
  • Die Umwandlung des Azids 1 in das Amin 2 erfolgt bekanntlich durch Reduktion. Somit kann die(se)Reaktion durch Hydrieren in Gegenwart der verschiedensten Hydrierungskatalysatoren, wie Palladium, Platin, Rhodium oder Ruthenium erfolgen. Andererseits kann das Azid auch durch Behandeln mit einem Phosphin, wie Triphenyl- oder Tributylphosphin, oder einer Säure, z. B. Chlorwasserstoff-, Schwefel-, Trifluoressig- oder Bromwasserstoffsäure, in Gegenwart eines Metalls, wie Zink, Eisen oder Zinn, reduziert werden. Diese Reaktionen können in einem Lösungsmittel, wie Ethanol, Methanol, Ethylacetat, Methyl-tert.-butylether oder Tetrahydrofuran u. dgl. bewerkstelligt werden. Die Umwandlung des Amins 2 in sein acyliertes Derivat 3 erfolgt durch Behandeln des Amins in Pyridin oder einem nichtbasischen Lösungsmittel, wie Methylenchlorid oder Tetrahydrofuran, mit einem Gehalt an einem tertiären Amin, wie Triethylamin oder Ethyldiisopropylamin, mit einem Acylierungsmittel. Wenn 3 aus einem Urethan besteht, wird 2 mit einem Mittel, wie Benzylchlorformiat, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonylchlorid, Di-tert.-butyldicarbonat oder einem sonstigen, auf dem einschlägigen Fachgebiet bekannten, Urethan bildenden Mittel behandelt. Wenn 3 aus einem Amid besteht, wird 2 mit einem Acylierungsmittel, z. B. einem Acylhalogenid oder Acylanhydrid oder einem sonstigen, auf dem einschlägigen Fachgebiet bekannten Acylierungsmittel behandelt. Wenn 3 ein Harnstoff oder ein Thioharnstoff ist, wird 2 mit einem Mittel, z. B. einem Alkyl- oder Arylisocyanat, Alkyl- oder Arylisothiocyanat oder einem sonstigen, auf dem einschlägigen Fachgebiet bekannten, Harnstoff- oder Thioharnstoff bildenden Mittel, behandelt.
  • Das Hydroxyamid oder Urethan 3 wird durch Behandeln mit einem mit elektronenreichen Benzaldehyd oder seinem Acetal, z. B. Dimethyl- oder Diethylacetal, 4 und einem Säurekatalysator, wie p-Toluolsulfonsäure, Pyridinium-ptoluolsulfonat oder sonstigen, auf dem einschlägigen Fachgebiet bekannten Säurekatalysatoren, in einem Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran, ToluoL, Methylenchlorid oder einem sonstigen aprotischen Lösungsmittel, in das Oxazolidin 5 umgewandelt. Beispiele für elektronenreiche Benzaldehyde sind - ohne darauf beschränkt zu sein 2-, 3- oder 4-Methoxybenzaldehyd, 2,4-, 3,5- oder 2,5-Dimethoxybenzaldehyd, 2,4, 6-Trimethoxybenzaldehyd und 4-Ethoxybenzaldehyd. Der bevorzugte Benzaldehyd ist 2,4-Dimethoxybenzaldehyd. Die Oxazolidinbildung erfolgt im allgemeinen durch Erwärmen auf Rückflußtemperatur zum Abdestillieren sowohl des Lösungsmittels als auch zur Beseitigung des entwickelten Wassers oder Alkohols. Der Ester von 5 wird durch Behandeln mit einem Alkali oder quaternären Aminhydroxid oder mittels eines Alkalicarbonats oder einer sonstigen, auf dem einschlägigen Fachgebiet bekannten Base, in einem Lösungsmittel, wie Wasser, Methanol, Ethanol oder einem sonstigen protischen Lösungsmittel, zu dem Salz 6 hydrolysiert. Die Umsetzung kann bei -78ºC bis 100ºC durchgeführt werden. Das Produkt 6 ist stabil und kann durch Verdampfen der Lösungsmittel isoliert und als Feststoff gelagert werden. Andererseits kann das Reaktionsgemisch auch durch Behandeln mit einer Säure zur Umwandlung von 6 in die Säure 7 direkt weiterverarbeitet werden. Im allgemeinen erhält man 7 durch Behandeln einer wäßrigen Lösung von 6 in einem Scheidetrichter mit einer ausreichenden Säure, z. B. Chlorwaserstoff- oder Schwefelsäure, Kaliumhydrogensulfat u. dgl., Verteilen der gewünschten Säure in ein organisches Lösungsmittel, wie Ethylacetat, Methylenchlorid, Ether, u. dgl. und Verdampfen des Lösungsmittels. Die gebildete Säure 7 ist zur Verwendung bei der Folgereaktion ausreichend rein und stabil, im allgemeinen ist sie jedoch für eine Langzeitlagerung nicht stabil genug. Die Säure 7 wird unter Verwendung eines Hydratisierungsmittels mit dem Baccatinderivat 8 zur Bildung des Esters 9 kondensiert. Zu diesem Zweck am meisten bevorzugt werden Carbodiimide, wie Dicyclohexylcarbodiimid, Diisopropylcarbodiimid, Di-p-tolylcarbodiimid, Ethyldimethylaminopropylcarbodiimid-hydrochloridsalz u. dgl., und ein basischer Katalysator, vorzugsweise 4-Dimethylaminopyridin.
  • Die Reaktion wird im allgemeinen in einem aprotischen Lösungsmittel, wie Toluol, Benzol, Tetrahydrofuran, Dioxan o. dgl., bei 25ºC bis 100ºC durchgeführt. Andere Dehydratisierungsverfahren für die Bildung von 9 können verwendet werden, beispielsweise eine Umwandlung von 7 in seinen Mischester mit einer Sulfonsäure, wie Toluolsulfonylchlorid oder Benzolsulfonylchlorid, oder die Bildung des Säurehalogenids aus dem getrockneten 6 in Gegenwart von Oxalylchlorid(wie dies für säureempfindliche Carbonsäuren bekannt ist). Die Oxazolidine 9 können derart entschützt werden, daß das schützende Oxazolidin und die die Hydroxylgruppe der Baccatin-7-Stellung blockierenden Gruppen entsprechend der Schutzgruppe in 7-Stellung und den Reaktionsbedingungen einzeln in beliebiger Reihenfolge oder beide gleichzeitig entfernt werden. Wenn R&sub1;&sub4; aus einer säurelabilen Gruppe, z. B. einem Silylether besteht, kann die Hydrolyse des Oxazolidins unter milden Säurebedingungen ablaufen gelassen werden, wobei unter direkter Bildung von 10MZ eine Entschützung der 7-Stellung stattfindet. Die Bedingungen für solche Umwandlungen umfassen eine Hydrolyse in wäßriger Essigsäure, wäßrig-alkoholischer Säure von 0,01 bis 0,1 N bei 0ºC bis 50ºC oder alkoholischer Säure von 0,01 bis 0,1 N bei 0ºC bis 50ºC. Andererseits kann der Schutz in 7-Stellung auch in einer zweiten Stufe entfernt werden, wenn er nicht säurelabil ist. So läßt sich beispielsweise die Trichlorethoxycarbonylgruppe in Stellung 7 aus 10MY (Reaktionsschema B)durch auf dem einschlägigen Fachgebiet bekannte Reduktion unter Bildung von 10HZ entfernen. Je nach der Natur der Schutzgruppe am Stickstoff(d. h. R&sub2; oder R&sub3;)von 10HZ(Reaktionsschema B)kann die Schutzgruppe unter Bildung von 112 entfernt werden. Wenn beispielsweise R&sub2; PhCH2ºC(O)NH bedeutet, kann die Entfernung durch milde Hydrogenolyse erfolgen. Die Bedingungen für solche Umwandlungen umfassen eine Reduktion mit Wasserstoff über einem Metallkatalysator, wie Palladium, in einem Lösungsmittel, wie Ethanol oder Ethylacetat, bei Raumtemperatur unter 1 bis 3 Atmosphäre(n)Druck. Es sind auch noch andere Verfahren bekannt. Das gebildete Amin 112 kann erneut in ein Amid oder Urethan 10HZ(Reaktionsschema B)durch für die Umwandlung von 2 in 3 beschriebene Acylierungsmaßnahmen umgewandelt werden. Das Produkt 10HZ kann am 2'-Hydroxyl unter Bildung von 12MZ(Reaktionsschema B)geschützt werden. So kann beispielsweise die 2'-Hydroxylgruppe mit Trichlorethoxycarbonylchlorid in Pyridin oder sonstigen aromatischen Aminlösungsmitteln oder in einem nichtbasischen Lösungsmittel, wie Toluol, Methylenchlorid oder Tetrahydrofuran, mit einem Gehalt an einer tertiären Aminbase acyliert werden. Die Reaktion kann bei -50ºC bis 100ºC ablaufen gelassen werden. Auf dem einschlägigen Fachgebiet sind auch noch andere Verfahren für solche Acylierungen bekannt.
  • Die Reaktion von Taxol, Taxolanaloga 10HZ(R&sub1;&sub5; ist Acetat oder eine sonstige geeignete Acyleinheit), Baccatin III oder Baccatin III-Analoga 8(R&sub6; ist Acetat oder eine sonstige geeigete Acyleinheit)mit Hydrazin bildet ein besonders vorteilhaftes Verfahren zur Herstellung von 10- Deacetyltaxol, 10-Deacyltaxolanaloga(10HZ, R&sub1;&sub5; = H), 10- Deacetylbaccatin III und 10-Deac ylbaccatin III-Analoga(8, R&sub6; = H). Während das bekannte Verfahren(G. Samaranayake et al. in "J. Org. Chem.", 1991, 56, 5114)zur Entfernung der Acylgruppe aus dieser Stellung von Taxol- und Baccatinstrukturen mit Zinkbromid in Methanol neben dem gewünschten Deacylierungsprodukt eine Reihe sonstiger Produkte liefert, erhält man bei der Reaktion mit Hydrazin nahezu ausschließlich das gewünschte Deacylierungsprodukt. Die Reaktion kann bei Raumtemperatur in einem organischen Lösungsmittel durchgeführt werden und erfordert üblicherweise eine Zeit von 15 min bis zu 24 h. Dies hängt vom Substrat ab. Das bevorzugte Lösungsmittel für die Umsetzung ist 95%iges Ethanol. 98%iges Hydrazin ist die bevorzugte Reagenzform.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen(der Formel I)lassen sich auch aus Taxol oder Taxolanaloga mit einem Substituenten am C-7 mit den Eigenschaften einer guten abspaltbaren Gruppe, beispielsweise
  • (a)einem Methylxanthat, -C(= S)SCH&sub3;,
  • (b)einem Diazoniumionvorläufer, wie -NH&sub2;,
  • (c)einem Sulfonatester, -OSO&sub2;R(mit R gleich einer Gruppe, wie -CH&sub3;, -CF&sub3;, C&sub6;H&sub4;-(p)-CH&sub3;, C&sub6;H&sub4;-(p)-Br, C&sub6;H&sub4;-(p)-NO&sub2;
  • oder
  • (d)einem der Halogene, Iod oder Brom(-I oder -Br) herstellen. Ein Methylxanthat erfährt beim Erwärmen(auf etwa 100-200ºC)eine Eliminierungsreaktion unter Bildung des Olefins. Ein C-7-Aminsubstituent wird bei der Reaktion mit salpetriger Säure(HNO&sub2;)in ein Diazoniumion überführt. Das Diazoniumion erfährt einen spontanen Stickstoffverlust unter Bildung des 7-Carbokations. Aus diesem entsteht unter Verlust des benachbarten C-6-Protons das gewünschte Δ6,7- Olefin. Ein C-7-Sulfonatester erfährt beim Auflösen in einem polaren Lösungsmittel(z. B. Methanol-Wasser, Ethanol- Wasser oder Trifluoressigsäure)eine Ionisierung, was zur Bildung des 7-Carbokations mit anschließendem Verlust des C-6-Protons unter Bildung des gewünschten Δ6,7-Olefins führt. Die Ionisierung des C-7-Sulfonatesters kann durch Zusatz einer nicht-nucleophilen Base [Kaliumcarbonat, Kaliumbicarbonat oder 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octan(DABCO)] zu dem Reaktionsmedium verstärkt werden. Ein C-7-Iodid oder -Bromid erfährt in einem polaren Lösungsmittel in Gegenwart von Metallsalzen, insbesondere Silbersalzen, wie Silberacetat, Silbertrifluoracetat oder Silbertetrafluoroborat, eine Ionisierung und Bildung des 7-Carbokations.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I [mit R&sub1;&sub7; ungleich -C(O)C&sub6;H&sub5;)] lassen sich entsprechend dem Reaktionsschema D nach dem Verfahren von A. G. Chaudhary et al. in "J. Am. Chem. Soc.", 1994, 116, 407-8, herstellen.
    • Herstellungsbeispiel 1
  • Herstellung von(2R; 3S)-β-Phenylisoserinmethylester(2)
  • Der(2R, 35)-3-Azido-2-hydroxy-3-
  • phenylpropionsäuremethylester(1, 0,5 g)wird bei Atmosphärendruck 1 h lang in Ethanol über 10% Palladium-auf-Kohle (0,1 g)hydriert. Nach dem Filtrieren des Reaktionsgemischs und Eindampfen desselben erhält man das gewünschte Amin eines Fp von 106-108ºC.
  • NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 2,1(breites); 3,80(s, 3H); 4,31 (m, 2H); 7,28-7,45(m, 5H).
    • Herstellungsbeispiel 2
  • Herstellung von(4S,5R)-N-Benzoyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)- 4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Aa und 5Ab) N-Benzoyl-β-phenylisoserinmethylester(3A, 0,5 g, 1,67 mM)wird in trockenem THF(10 ml)und Benzol(10 ml)gelöst, worauf die Lösung mit 2,4-Dimethoxybenzaldehyddimethylacetal(4, 0,420 g, 1,98 mM)und Pyridinium-p-toluolsulfonat(12 mg)versetzt und anschließend auf Rückflußtemperatur erwärmt wird. 30 min später wird das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt und über Nacht stehengelassen. Durch erneutes Erwärmen wird innerhalb von 1 h die Hälfte des Lösungsmittels langsam abdestillieren gelassen. Die Dünnschichtchromatographie zeigt, daß die Reaktion zu diesem Zeitpunkt beendet ist. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt, worauf der Verdampfungsrückstand über 50 g in(5-95)Methanol-Toluol gepacktem Silicagel chromatographiert wird. Das Eluieren der Säule erfolgt mit Methanol-Toluol(5-95). Es werden Fraktionen von 12 ml aufgefangen. Das Produkt eluiert als Gemisch. Somit werden die sowohl 5Aa als auch 5Ab enthaltende Fraktionen wieder miteinander vereinigt und eingedampft. Der Verdampfungsrückstand (0,90 g)wird erneut über Silicagel(100 g)chromatographiert. Das Eluieren der Säule erfolgt mit Ethylacetat- Toluol(500 ml 15-85 und 500 ml 20-80). Es werden Fraktionen von 20 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die jeweils 5Aa uncl 5Ab enthaltenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Weniger polares Isomer 5Aa
  • Gemisch aus weniger polaren und stärker polaren Isomeren 5Aa und 5Ab.
  • Stärker polares 5Ab.
  • Das Isomer 5Ab wird aus EtOAc zur Kristallisation gebracht, wobei weiße Kristalle(142 mg, Fp: 138-141ºC)erhalten werden.
  • Daten für 5Aa:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel; 20% EtOAc-80% Toluol: Rf-Wert: 0,50.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS)δ 3,69(s, 3H); 3,77(s, 3H); 3,86 (s, 3H); 4,93(d, 1H); 5,6(br. s, 1H); 6,28-6,37(m, 2H); 6,90(s, 1H); 7,03(d, 1H); 7,15-7,55(m, 9);
  • Daten für 5Ab:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel; 20% EtOAc-80% Toluol: Rf-Wert: 0,41.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS)δ 3,62(br.s, 3H); 3,75(br.s, 6H); 4,65(d, 1H); 5,68(br. s, 1.H); 6,2-6,5(m, 2H); 6,8-7,55(m, 11H).
  • UV-Spektrum: EtOH; 229(16 000), 277(3 240), 281 Schulter(3 170).
  • Elementaranalyse: Berechnet: C 69,79; H 5,63; N 3,13. Gefunden: C 69,61; H 5,61; N 2,93.
    • Herstellungsbeispiel 3
  • Herstellung von(4S,5R)-N-Benzyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz 6Ab
  • (4S, 5R)-N-Benzyl-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäuremethylester(Herstellungsbeispiel 2, 5Ab, 355 mg, 0,79 mM)wird in 9 ml Methanol gelöst, worauf die Lösung mit Wasser(350 ul)und Kaliumcarbonat(155 mg, 1,12 mM)versetzt wird. Nach 5-stündigem Rühren war kein Feststoff mehr feststellbar. Die Dünnschichtchromatographie zeigt nur sehr wenig restlichen Methylester. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft, worauf der ölige Verdampfungsrückstand mit Wasser(10 ml)versetzt wird. Beim Gefriertrocknen der Lösung bleiben 500 mg flaumiges weißes Pulver mit 374 mg des Kaliumsalzes zurück.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 1 : 2 EtOAc:Hexan; Rf-Wert: Ursprung.
    • Herstellungsbeispiel 4
  • Herstellung von 7-TES-Baccatin III-13-(4S,5R)-N-benzoyl-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl--5-oxazolidincarbonsäureester (9AbA)
  • Eine Lösung des(4S, 5R)-N--Benzoyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalzes(6Ab, Herstellungsbeispiel 3, 91,4 mg, etwa 0,15 mM)in Ethylacetat wird mit 5%iger wäßriger Na HSO&sub4;-Lösung gewaschen. Die Ethylacetatlösung wird getrocknet und eingedampft, wobei die entsprechende Säure 7Ab zurückbleibt. Der Verdampfungsrückstand wird in Methylenchlorid(0,8 ml)und Toluol (1,75 ml)gelöst und mit 7-Triethylsilylbaccatin III (68 mg)vereinigt. Nachdem das Gemisch mit 4-Dimethylaminopyridin(6,3 mg)und 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid(34 mg) versetzt worden ist, wird es 90 min lang auf 80ºC erwärmt, abgekühlt, filtriert und auf Silicagel in Ethylacetat- Hexan-Gemischen chromatographiert. Hierbei wurde in 86%iger Ausbeute das Kopplungsprodukt 9AbA erhalten.
  • NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 0.58(m, 6H); 0.90(m); 1.73(s, 3H); 1.87(m,1H); 2.03(m, 3H); 2,17(br.s, 3H); 2,20(s,3H); 2,23(m,2H); 2,50(m,1H); 3,78(br.s,3H); 3,80(s,3H); 3,8 (d, 1H); 4.13(d, 1H); 4.27(d, 1H); 4.50(m, 1H); 4.90(m, 2H); 5.63(bs, 1H); 5.68(d, 1H); 6.25-6.48(m, 3H); 6.50(s, 1H); 6.86(s, 1H); 7.09(m, 1H); 7.15-7.65(m, 13H); 8.05(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 5 Herstellung von Taxol(Verbindung 10AA)
  • 7-TES-Baccatin III-13-(4S,5R)-N-Benzoyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9AbA) wird durch 10-minütiges Verrühren in 0,1 M methanolischer HCl entschützt. Nach dem Verdünnen mit Ethylacetat wird die Lösung mit 5%iger NaHCO&sub3;-Lösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Verdampfungsrückstand wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel in Aceton-Hexan-Gemischen gereinigt. Die Proton- und Kohlenstoff-NMR-Daten entsprechen denjenigen von natürlichem Taxol.
    • Herstellungsbeispiel 6
  • Herstellung von(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(58a und SEb) N-Boc-β-phenylisoserinmethylester(3B)(0,5 g, 1,69 mM)wird in trockenem THF(10 ml)und Toluol(10 ml)gelöst 0und zur Trockene eingeengt, um jegliches Kristallwasser zu entfernen. Danach wird der Rückstand in trockenem THF(10 ml)gelöst. Die erhaltene Lösung wird mit 2,4-Dimethoxybenzaldehyddimethylacetal(4)(0,425 g, 2,0 mM)und Pyridinium-p-toluolsulfonat(12 mg)versetzt und anschließend auf Rückflußtemperatur erwärmt. Nach 30 min wird das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt und über Nacht stehen gelassen. Danach wird es erneut. 3 h lang auf Rückflußtemperatur erwärmt. Das Reaktionsgemisch wird dünnschichtchromatographisch untersucht, wobei sich zeigte, daß die Reaktion noch unvollständig war. Danach wird das Reaktionsgemisch zum Abdestillieren von etwa 2/3 des THF auf 85ºC erwärmt. Nach Zugabe von frischem THF(10 ml)und Acetal(200 mg) wird das Reaktionsgemisch weitere 2 h auf Rückflußtemperatur erwärmt. Die dünnschichtchromatographische Analyse zeigte, daß zu diesem Zeitpunkt die Reaktion beendet war. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Verdampfungsrückstand wird über 100 g von in (15-85)Aceton-Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit Aceton-Hexan(500 ml, 15-85 und 500 ml 20-80)eluiert. Es werden Fraktionen von 20 ml aufgefangen. Die gewünschten Produktisomere eluieren als Gemisch. Die das Gemisch aus 58a und 5Bb enthaltenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und im Vakuum eingeengt, wobei ein weißer Schaum zurückbleibt. Der Schaum wird erneut über 100 g von in(10-90)EtOAc-Toluol gepacktem Silicagel rechromatographiert, wobei ebenfalls mit(10-90)EtOAc-Toluol eluiert wird. Es werden Fraktionen von 20 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Es wurden 34 mg des weniger polaren Isomers 5Ba und 187 mg eines Gemischs aus weniger polaren und stärker polaren Isomeren 5Ba und 5Bb und 500 mg des stärker polaren Isomers SEb isoliert.
  • Das Isomer 58b wurde aus EtOAc-Hexan zur Kristallisation gebracht, wobei weiße Kristalle(378 mg)erhalten wurden.
  • Das Isomerengemisch wurde ebenfalls aus EtOAc-Hexan zur Kristallisation gebracht, wobei kristallines 5Bb(113 mg)einer durch dünnschichtchromatographische Analyse ermittelten ähnlichen Reinheit wie die Mutterlaugen aus der Kristallisation des Isomers 5Bb, erhalten wurde. Diese Kristalle und die Mutterlaugen wurden folglich vereinigt und aus EtOAc-Hexan umkristallisiert, wobei stärker reines SEb (160 mg)erhalten wurde.
  • Daten für 5Ba:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 10% EtOAc- 90% Toluol: Rf-Wert: 0,44.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,26(s, 9H; 1; 3,80(s, 3H); 3,84(s, 3H); 3,85(s, 3H); 4,86 (d, 1H); 5,24(s, 1H); 6,40(dd, 1H); 6,47(d, 1H); 6,72(s, 1H); 7,12(d, 1H); 7,30-7,43(m, 3H); 7,53(d, 2H).
  • Daten für 5Eb:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 10% EtOAc- 90% Toluol: Rf-Wert: 0,38.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS)δ 1,10(s, 9H); 3,52(br. d, 3H); 3,81(s, 3H); 3, 87(s, 3H); a4,54(d, 1H); 5,43(br. s, 1H); 6,48(s, 2H); 6,81(br. s, 1H); 7,13(br. s, 1H); 7,30-7,48 (m, 5H).
  • UV: EtOH; 233(10 600), 260 Schulter(1010), 277 (2840), 281 Schulter(2680).
  • Elementaranalyse:
  • Berechnet: C 65,00; H 6,59; N 3,16.
  • Gefunden: C 64,86; H 6,42; N 3,24.
    • Herstellungsbeispiel 7
  • Herstellung von(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Ba)und freie Säure 7Ba
  • 100 mg(0,23 mM)(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(Herstellungsbeispiel 6, 5Ba)wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 3 ml MeOH verrührt. Dann werden 0,1 ml Wasser und 43 mg(0,31 mM)Kaliumcarbonat zugesetzt. Nach 1 h zeigte die dünnschichtchromatographische Analyse, daß kein Ausgangsmaterial mehr vorhanden war. Nach dem Stehenlassen über Nacht in einem Gefrierschrank wurde das Lösungsmittel abgedampft, wobei(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Ba)erhalten wurde. Der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und Wasser mit 0,9 ml 1 N HCl verteilt. Nach Trennung der Schichten wurde die wäßrige Schicht erneut mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Schichten wurden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft, wobei(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(7Ba)als weißer Feststoff zurückblieb.
  • Dünnschichtchromatographie(Silicagel 60): 20% EtOAc- 80% Hexan-2% HOAc: Rf-Wert: 0,07.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,26(s, 9H); 3,76(s, 6H); 4,77(s, 1H); 5,34(s, 1H);
  • 6,33-6,45(d, 2H); 6,60(s, 1H); 7,07-7,16(d, 1H); 7,24-7,40(m, 3H); 7,42-7,54(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 8
  • Herstellung von 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BaA)
  • 0,23 mM(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(Herstellungsbeispiel 7, 7Ba)wird in 1,5 ml Methylenchlorid-3 ml Toluol gelöst, worauf die Lösung mit 106 mg(0,15 mM)7-TES-Baccatin III (8A), 11 mg(0,09 mM)DMAP und 49 mg(0,24 mM)DCC versetzt wird. Das Reaktionsgemisch wird unter Stickstoff gerührt, 90 min lang auf 75ºC erwärmt und auf Raumtemperatur abgekühlt. Das gebildete Harnstoffnebenprodukt wird abfiltriert und das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der Verdampfungsrückstand wird über 20 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 30-70 EtOAc-Hexan. Es werden Fraktionen von 5 ml aufgefangen. Analysiert werden sie mittels Dünnschichtchromatographie. Die Fraktionen 17-34 enthalten das gewünschte Produkt und werden miteinander vereinigt und eingedampft. Hierbei wird als weißer Feststoff 7-TES- Baccatin III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9BaA)erhalten. Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 30% EtOAc- 70% Hexan: Rf-Wert: 0,56.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 1112, 1012, 874, 328, 284, 115, 105, 87.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 0,52-0,66(m. 6H); 0,85-1,00(m, 9H); 1,80-1,93(m, 1H); 2,15(s, 3H); 2,20(s, 3H); 2,21-2,30(m, 1H); 2,40-2,54(m, 1H); 3,82(s, 3H); 3,87(s, 3H); 3,81(d, 1H): 4,10(d. 1H); 4,26(d, 1H); 4,49(m, 1H); 4,83-4,93(m, 2H); 5,31(d, 1H); 5,67(d, 1H); 6,29(t, 1H); 6,38-6,53(m, 3H); 6,69(s, 1. H); 7,13(d, 1H); 7,29-7,65(in, 8H); 8,05(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 9
  • Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (10BA)
  • Aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH wird eine 0,1 M HCl-Lösung zubereitet und vor Gebrauch 30 min lang stehengelassen.
  • 57 mg(0,051 mM)7-TES-Baccatin-III--13-(4S, 5R)-N-Boc- 2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure ester(Herstellungsbeispiel 8, 9BaA)werden unter Rühren und unter Stickstoff mit 0,5 ml der zuvor zubereiteten methanolischen HCl-Lösung versetzt. Eine dünnnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß die Umsetzung nach 75 min vollständig war. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat-5% Natriumbicarbonat verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht erneut mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 10 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 50-50 Ethylacetat-Toluol. Es werden Fraktionen von 2 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 19-42. Diese werden vereinigt und eingedampft, wobei 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(10BA)als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Toluol: Rf-Wert: 0,38.
  • Massenspektrum(FAB):(M+H), gemessen bei 850,3680; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub6;N&sub1;O&sub1;&sub5; 850, 3650; m/z 794, 569, 509, 105, 57.
  • ¹H-NMR(CDCl³, TMS): δ 1,14(s, 3H); 1,27(s, 3H); 1,33(s, 9H); 1,67(s, 3H); 1,84 (s, 3H); 2,24(s, 3H); 2,38(s, 3H); 3,44(d, 1H); 3,81(d, 1H); 4,17(d, 1H); 4,30(d, 1H); 4,41 (m,1H); 4,63(br. s, 1H); 4,95(d,1H); 5,26(br. d, 1H); 5,43 (br.d,1H); 5,67(d,1H); 6, 23(t,1H); 6,28(s, 1H); 7,27-7,45(m, 5H); 7,50(t, 2H); 7,62(t, 1H); 8,11(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 10
  • Herstellung von(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Bb)
  • Eine Lösung von(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)- 4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(Herstellungsbeispiel 6; 5Bb, 374 mg, 0,84 mM)in MeOH(11 ml)wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt und mit Wasser (0,37 ml)und Kaliumcarbonat(161 mg, 1,17 mM)versetzt. Nach 2 h zeigte eine dünnschichtchromatographische Analyse, daß die Reaktion zu etwa 70% abgelaufen war. Nach dem Rühren über Nacht hat sich die Reaktion als vollständig erwiesen. Das Lösungsmittel wird abgedampft, worauf der Verdamp fungsrückstand in 10 ml Wasser gelöst und gefriergetrocknet wird. Hierbei bleiben 507 mg eines flaumigen weißen Feststoffs mit(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl- 5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Bb, 393 mg)zurück.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel; 20% EtOAc-80% Hexan; Rf-Wert: Ursprung.
    • Herstellungsbeispiel 11
  • Herstellung von 7-TES-Baccatin-LII-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BbA)
  • 0,12 mM rohes(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(Herstellungsbeispiel 10, 6Bb)wird zwischen Ethylacetat-5% Natriumbisulfat verteilt. Nach Trennen der Schichten wird die wäßrige Schicht erneut mit Ethylacetat Extrahiert. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt.
  • Die erhaltene Säure 7Bb wird zusammen mit 53 mg(0,076 mM)7-TES-Baccatin III(8A: vgl.. J.-N. Denis, A. E. Greene, D. Guenard, F. Gueritte-Vogelein, L. Mangatal und P. Potier in "J. Am. Chem. Soc." 1988, 110, 5917), 6 mg(0,049 mM) 4-Dimethylaminopyridin(DMAP)und 25 mg(0,12 mM)Dicyclohexylcarbodiimid(DCC)in 0,8 ml Methylenchlorid-1,5 ml Toluol gelöst. Das Reaktionsgemisch wird unter Stickstoff gerührt und 90 min lang auf 75ºC erwärmt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird das Harnstoffnebenprodukt abfiltriert. Das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft.
  • Der Rückstand wird über 15 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 30-70 EtOAc-Hexan. Aufgefangen werden Fraktionen von 7 ml. Eine Analyse derselben mittels Dünnschichtchromatographie zeigt, daß die Fraktionen 16-38 das Produkt enthalten. Sie werden miteinander vereinigt und eingedampft, wobei 7-TES-Baccatin III-13-(4S,5R)-N-Boc-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BbA)als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 30% EtOAc- 70% Hexan; Re-Wert: 0,33.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 1112, 1012, 384, 328, 284, 115, 105, 87, 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 0,50-0,61(m, 6H); 0,84-0,97(m, 9H); 1,08(s, 9H); 2,21(s, 3H); 3,67(d, 1H); 3,80(s, 3H); 3,90(s, 3H); 4,07(d, 1H); 4,23(d, 1H); 4,40(m, 1H); 4,53(br. d, 1H); 4,87(d, 1H); 5,44(br.d,1H); 5,60(d,1H); Ei,34(s, 1H); 6,44(br.s,1H); 6,48(s,1H); 7,20 (br.s, 1H); 7,30-7,50(m, 7H); 7,60(t, 1H); 8,01(d,2H).
    • Herstellungsbeispiel 12
  • Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (10 BA)
  • Aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH wird eine 0,1 M HOi-Lösung zubereitet und vor Gebrauch 30 min lang stehengelassen.
  • 45 mg(0,040 mM)7-TES-Baccatin III-13-(4S,5R)-N-Boc- 2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(Herstellungsbeispiel 11, 9BbA)werden unter Rühren und unter Stickstoff mit 0,395 ml der zuvor zubereiteten methanolischen HCl-Lösung versetzt und reagieren gelassen. Eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß die Umsetzung nach 20 min beendet ist.
  • Nach 30 min wird das Reaktionsgemisch zwischen Ethylacetat-5% Natriumbicarbonat verteilt. Die Schichten werden getrennt, worauf die wäßrige Schicht erneut mit Ethylacetat extrahiert wird. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das hierbei erhaltene Rohprodukt wird über 5 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 50-50 Ethylacetat- Toluol. Es werden Fraktionen von 5 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 5-12. Diese werden vereinigt und eingedampft, wobei 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(lOBA)als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Toluol; Rf-Wert: 0,42.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 1,15(s, 3H); 1,27(s, 3H); 1,33(s, 9H); 1,68(s, 3H); 1,85 (s, 3H); 2,25(s, 3H); 2,38(s, 3H); 3,44(d, 1H); 3,80(d, 1H); 4,17(d, 1H); 4,30(d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,62(br. s,1H); 4,95(d,1H); 5,26(br. d,1H); 5,43(br. d,1H); 5,67(d,1H); 6, 23(t,1H); 6,29(s, 1H); 7,13-7,45(m, 5H); 7,49(t, 2H); 7,62(t, 1H); 8,11(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 13
  • Herstellung von 7-(2,2,2-Trichlo rethoxycarbonyl)-baccatin- III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäureester(9Baß, 9BbB)
  • 0,39 mM(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Ba, GEb)werden zwischen Ethylacetat-5% Natriumbisulfat verteilt. Nach Trennen der Schichten wird die wäßrige Schicht erneut mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt.
  • Die hierbei als Verdampfungsrückstand angefallene Säure 7Ba, 7Bb wird unter Rühren und unter Stickstoff in 2 ml Methylenchlorid-6 ml Toluol gelöst. Nach Zusatz von 187 mg (0,245 mM)7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-baccatin III (8B, vgl. beispielsweise L. Mangatal, M.-T. Adeline, D. Guenard, F. Gueritte-Vogelein und P. Potier in "Tetrahedron" 1989, 45, 4177)und anschließend 22 mg(0,18 mM)DMAP und 80 mg(0,39 mM)DCC sowie bald, nachdem alles in Lösung gegangen ist, beginnt das Harnstoffnebenprodukt auszufallen. Nachdem unter dünnschichtchromatographischer Überwachung der Reaktion 70 min lang auf 80ºC erwärmt worden war und danach das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt worden war, wird der(ausgefallene)Feststoff abfiltriert. Das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Das hierbei erhaltene Rohprodukt wird über 50 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 400 ml 30-70, 200 ml 40-60 und 100 ml 70-30 Ethylacetat-Hexan. Es werden Fraktionen von 15 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten werden.
  • Fraktionen 14-20, weniger polares Isomer 9BaB Fraktionen 21-26, Isomerengemisch 9Baß, 9BbB Fraktionen 27-32, stärker polares Isomer 9BbB Fraktionen 37-34, Rückgewinnung des Ausgangsalkohols 8B
  • Daten für das Isomer 9BaB:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 40-60 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,67.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;. TMS)δ 1,26(s); 1,82(s, 3H); 2,12(s, 3H); 2,19(s, 3H); 2,58(m, 1H); 3,81(s, 3H); 3,91(s. 3H); 3,97(d, 1H); 4,13(d, 1H); 4,28(d, 1H); 4,66(d, 1H); 4,92(m. 2H); 5,03(d, 1H); 5,36(d, 1H); 5,63(m, 1H); 5,67(d, 1H); 6,32(m. 1H); 6,40(s, 1H); 6,51(d, 1H); 6,69(s, 1H); 7,16(d, 1H); 7,37-7,62(m, 8H); 8,02(d, 2H).
  • Daten für das Isomer 9BbB:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 40-60 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,55.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 2,17(bs); 3,47(m); 3,79-3,94(m); 4,08(d); 4,27(d); 4,54 (m); 4,65(m); 4,89(d); 5,01(m); 5,40(m); 5,50(m); 5,62(d); 6,24 6,24(br.s); 6,49(br.s); 7,37-7,65(m); 8,03(d).
    • Herstellungsbeispiel 14
  • Herstellung von 7-(2,2,2-Trichlo rethoxycarbonyl)-13-(N-Bocβ-phenylisoserinyl)-baccatin 1III(10BB)
  • Aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH wird eine 0,1 M Hoi-Lösung in MeOH zubereitet und vor Gebrauch 30 min lang stehengelassen.
  • 252 mg(0,216 mM)7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)- baccatin-III-13-(4S,SR)-N-Boc-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(Herstellungsbeispiel 13; 9Baß, 9BbB)wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff mit 2,2 ml der zuvor zubereiteten 0,1 M methanolischen HCl- Lösung verrührt. Die Reaktion wird auf dünnschichtchromatographischem Wege überwacht. Da sie nach 20 min noch unvollständig ist, werden weitere 0,5 m1HOi-Lösung zugegeben und die Umsetzung 15 min lang fortgesetzt.
  • Danach wird das Reaktionsgemisch mit Ethylacetat verdünnt und mit 5%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht erneut mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Das hierbei angefallene Rohprodukt wird über 30 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 200 ml 35-65 und 300 ml 40-60 Ethylacetat-Hexan. Es werden Fraktionen von 5 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die Fraktionen 25-54 enthalten das reine Produkt, werden miteinander vereinigt und unter Vakuum ein gedampft, wobei 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Bocβ-phenylisoserinyl)-baccatin III(1088)als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 40-60 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,36.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)bei 1024, 1026, 1028; (M+H)gemessen bei 1024, 2556; theoretisch für C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub7;Cl&sub3;N&sub1;O&sub1;&sub7; 1024,2692; 1024, 968, 924, 743, 683, 105, 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,17(s, 3H); 1,24(s, 3H); 1,34(s, 9H); 1,83(s, 3H); 1,91 (s, 3H); 2,17(s, 3H); 2,39(s, 3H); 2,62(m, 1H); 3,60(d, 1H); 3,94(d, 1H); 4,16(d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,63 und 5,04(2d, 2H); 4,62(br.s,1H); 4,95(d,1H); 5, 26(br.d,m); 5,45-5,60(m, 2H); 5,66(d, 1H); 6,20(t, 1H); 6,36(s, 1H); 7,24-7,44(m, 5H); 7,49(t, 2H); 7,61(t, 1H); 8,08(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 15
  • Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (10BA)und 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-βphenylisoserinyl)-baccatin III(10BG)
  • 150 mg(0,146 mM)7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-13- (N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(Herstellungsbeispiel 14, 1088)wird unter Stickstoff bei Raumtemperatur in 13,5 ml MeOH und 1,5 m1HOAc verrührt. Nach Zugabe von 150 mg aktivierten Zinks wird das Reaktionsgemisch 60 min lang auf 50ºC erwärmt. Die Reaktion wird auf dünnschichtchromatographischem Weg überwacht. Dabei werden vier weitere 150- mg-Portionen Zink zugegeben. Nach jeder Zugabe wird 45 min lang erwärmt. Das Reaktionsgemisch wird filtriert, worauf das Filtrat unter Vakuum eingedampft wird. Der hierbei angefallene Verdampfungsrückstand wird zwischen Methylenchlorid-Wasser verteilt. Die Schichten werden getrennt, worauf die wäßrige Schicht mit Methylenchlorid rückextrahiert wird. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das hierbei angefallene Rohprodukt wird über 20 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 200 ml 60-40 und 200 ml 70-30 Ethylacetat-Hexan. Es werden Fraktionen von 5 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden miteinander verei nigt und eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten wurden.
  • Fraktionen 9-13, 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-βphenylisoserinyl)-baccatin III(105%
  • Fraktionen 14-44, 13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(10BA)
  • Daten für 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-βphenylisoserinyl)-baccatin III(10BG)
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,81(Bei diesem dünnschichtchromatographischen System laufen dieses Produkt und das Ausgangsmaterial gemeinsam.)
  • ¹H-NMR:(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,17(s, 3H); 1,24(s, 3H); 1,35(s, 9H); 1,61(s, 3H); 1,81 (s, 3H); 2,19(s, 3H); 2,39(s, 3H); 2,52-2,68(m, 1H); 3,37(d, 1H); 3,92(d, 1H); 4,16(d, 1H); 4,32(d, 1H); 4,53(m, 2H); 4,63(br.s, 1H); 4,95(d, 1H); 5,26(br.d, 1H); 5,40(br.d, 1H); 4,48(m, 1H); 5,67(d, 1H); 5,96(m. 1H); 6,20(t, 1H); 6,45(s. 1H); 7,28-7,44(m, 5H); 7,50(t. 2H); 7,62(t, 1H); 8,10(d, 2H).
  • Daten für 10BA:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,32.
  • ¹H-NMR:(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,14(s, 3H); 1,24(s, 3H); I,32(s, 9H); 1,67(s, 3H); 1,84 (s, 3H): 2,23(s, 3H); 2,37(s, 3H); 2,44-2,59(m, 1H); 2,64(br.d,1H); 3,70(br.s,1H); 3,78(d, 1H); 4,15(d, 1H); 4,28(d, 1H); 4,40(m, 1H); 4,61(br.s,1H); 4(d,1H); 5,25(br.d,1H); 5,57 (br.d,1H); 5,65(d,1H); 6,22(t,1H); 6,29(s,1H); 7,24-7,44(m,5H); 7,48(t,2H); 7,60(t, 1H); 8,08(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 16
  • Herstellung von 7,10-Bis-Troc-baccatin-III-13-(4S,5R)-N- Boc-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9BbC)
  • Rohes(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl- 5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(Herstellungsbeispiel 10; 6Bb)(0,089 mM)wird zwischen EtOAc-5% NaHSO&sub4; verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht erneut mit EtOAc extrahiert. Die organischen Schichten werden mit einander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt, wobei(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(7Bb)zurückbleibt. Der erhaltene Rückstand wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in Methylenchlorid(0,8 ml)und Toluol(1,5 ml) gerührt. Nach Zusatz von 7, 10-Bis-Troc-10-deacetylbaccatin III(8C, vgl. beispielsweise V. Senilh, F. Gueritte- Vogelein, D. Guenard, M. Colin und P. Potier in "C. R. Acad. Sci. Paris" 1984, 299, 4177)(50 mg 0,056 mM)wird die erhaltene Lösung mit 4-Dimethylaminopyridin(5 mg, 0,04 mM)und 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid(18 mg, 0,087 mlvi)versetzt und dann 25 min lang auf 75ºC erwärmt. Eine nach 15- minütigem Erwärmen durchgeführte dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß die Reaktion beendet war.
  • Der ausgefallene Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert. Das Filtrat wird auf Silicagel(1 g)aufgegeben und über Silicagel(10 g)chromatographiert. Eluiert wird mit EtOAc-Hexan(30-70). Es werden Fraktionen von 4 ml aufgefangen und auf dünnschichtchromatographischem Wege analysiert. Die Fraktionen 16-42 enthalten das Produkt. Sie werden miteinander vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei 7,10-Bis-Troc-baccatin III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9BbC) als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie(Silicagel 60): 40% EtOAc- 60% Hexan; Rf-Wert: 0,56.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 1304, 1306, 1308(M+H), 1204, 875, 683, 384, 328, 284, 105(Base), 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,07(s, 3H); 1,14(s, 3H); 1,22(s, 3H); 1,79(s, 3H); 2,56 (m, 1H); 3,79(d, 1H); 3,81(s, 3H); 3,89(s, 3H); ; 4,08(d, 1H); 4,25(d, 1H); 4,54(d, 1H); 4,59 und 4,88(2d, 2H); 4,78(s, 2H); 4,89(br.t, 18); 5,43(m, 18); 5,50(m, 18); 5,62(d, 18); 6,05 (br.s,1H); 6,12(s,1H); 6,47(d,1H); 6,49(s,1H); 6,75(br.s,1H); 7,21(m 18); 7,35-7,53(m, 7H); 7,62(t,18); 8,01(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 17
  • Herstellung von 7, 10-Bis-Troc-13-(N-Boc-(3-phenylisoserinyl)-baccatin III(10BC)
  • Acetylchlorid(0,071 ml, 80 mg, 1,0 mM)wird zu Methanol(10 ml)zugegeben, worauf die Lösung 30 min lang ste hengelassen wird. Hierbei erhält man eine 0,1 N HOi-Lösung. 7,10-Bis-Troc-baccatin III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(Herstellungsbeispiel 16, 9BbC)(73 mg, 0,056 mM)wird in der zuvor zubereiteten methanolischen HOi-Lösung(0,553 ml)gelöst, worauf die Lösung 25 min lang stehengelassen wird. Die Lösung wird danach mit EtOAc verdünnt und anschließend mit 5%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht erneut mit EtOAc extrahiert. Die organischen Phasen werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt. Das hierbei angefallene Rohprodukt wird auf Silicagel(1 g) aufgetragen und über Silicagel(10 g)chromatographiert. Die Säule wird mit 20% EtOAc-80% Toluol eluiert. Es werden Fraktionen von 4 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 10-20. Diese werden miteinander vereinigt und eingedampft. Die unreines Produkt enthaltenden Fraktionen 7-9 werden in der geschilderten Weise rechromatographiert. Die das reine Produkt enthaltenden Fraktionen 11-26 werden mit dem reinen Produkt aus der ersten Säule vereinigt, wobei 7,10-Bis-Troc-13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III (10BC) als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie(Silicagel 60): 30% EtOAc- 70% Toluol; Rf-Wert: 0,59. Das Nebenprodukt 2,4-Dimethoxybenzaldehyd läuft unmittelbar vor dem Produkt und gerade dann, wenn Ausgangsmaterial kommt.
  • Massenspektrum(FAB, m/z) 1156, 1158, 1160(M+H), 1100, 1056, 701, 685, 105(Base), 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,20(s, 3H); 1,27(s, 3H); 1,35(s, 9H); 1,85(s, 3H); 1,95 (s, 3H); 2,35(s, 3H); 3,41(d, 1H); 3,90(d, 1H); 4,17(d, 1H); 4,33(d, 1H); 4,60 und 4,92(2d, 2H); 4,62(br.s, 1H); 4,78(5, 2H); 4,95(d, 1H); 5,26(br.d, 1H); 5,42(bnd, 18); 5,54(dd, 18); 5,69 (d, 1H); 6,21(t, 1H); 6,24(s, 1H); 7,12-7,42(m, 6H); 7,49(t, 2H); 7,62(t, 1H); 8,09(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 18
  • Herstellung von 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-βphenylisoserinyl)-baccatin III(1050), 10-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III (10BE)und 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(10 BF, Taxoter)
  • 7, 10-Bis-Troc-13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(Herstellungsbeispiel 17, 1.OBC)(48 mg, 0,041 mM)wird unter Stickstoff bei Raumtemperatur in 90% MeOH-10% HOAc(3 ml)gerührt und mit aktiviertem Zink(85 mg)versetzt. Nach 30-minütiger Reaktion tritt eine Trübe ein. Nach Zugabe eines weiteren ml MeOH&supmin;HOAc-Lösung wird das Reaktionsgemisch wieder klar. Dünnschichtchromatographische Analysen nach 30 und 60 min sehen sehr ähnlich aus, sie zeigen nämlich kein Ausgangsmaterial sowie stärker polare Produkte(zwei in untergeordneter Menge und eines in größerer Menge). Nach 70- minütiger Reaktion wird das feste Zink abfiltriert. Das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der hierbei angefallene Rückstand wird zwischen Methylenchlorid und Wasser verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit Methylenchlorid rückextrahiert. Die organischen Schichten werden erneut mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Das Rohproduktgemisch wird auf Silicagel(1 g)aufgetragen und über Silicagel(5 g)chromatographiert. Eluiert wird die Säule mit EtOAc-Hexan(100 ml jeweils 40-60, 50-50, 60- 40 und 70-30). Es werden Fraktionen von 4 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft.
  • Fraktionen 12-24, 10BD
  • Fraktionen 29-42, 10BE
  • Fraktionen 48-84, 10BF
  • Daten für 10BD:
  • Dünnschichtchromatographie(Silicagel 60): 60% EtOAc- 40% Hexan; Rf-Wert: 0,92.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 948, 950, 952(M+H), 892, 848, 830, 667, 649, 105(Base), 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,09(s, 3H); 1,23(s, 3H); 1,34(s, 9H); 1,86(s, 3H); 1,89 (s, 3H); 2,04(m, 1H); 2,29(d, 2H); 2,39(s, 3H); 3,4 (br.s,1H);3,99(d, 1H);4,05(s, 1H);4,20 1H); 4,33(d, iM); 4,48(m, 2H); 4,62 und 4,93(2d, 2H); 5,30(m, 1H); 5,37(s, 1H); 5,46 (d, 1H); 5,68(d, 1H); 5,83(t, 1H); 6,21(t, 1H); 7,3-7,45(m, 6H); 7,50(t, 2H); 7,62(t, 1H);8,10(d, 2H).
  • Daten für 10BE:
  • Dünnschichtchromatographie(Silicagel 60): 60% EtOAc- 40% Hexan; Rf-Wert: 0,65.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 948, 950, 952(M+H), 892, 848, 667, 527, 509, 105(Base), 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): d 1,16(s, 3H); 1,27(s, 3H); 1,33(s, 9H); 1,70(s, 3H); 1,89 (s, 3H); 2,39(s, 3H); 2,57(m, iM); 3,40(d, 1H); 3,75(d, 1H); 4,17(d, 1H); 4,33(d, 1H); 4,35 (m, 1H); 4,56(dd, 2H); 4,64(m, 1H); 4,95(d, 1H); 5,28(m. 1H); 5,37(d, 1H): 5,68(d, 1H); 5,92(d, 1H); 6,15(s, 1H); 6,25(t, 1H); 7,20-7,45(m, 6H); 7,50(t, 2H); 7,64(t, 1H); 8,10 (d, 2H).
  • Daten für 10BF:
  • Dünnschichtchromatographie(Silicagel 60): 60% EtOAc- 40% Hexan; Rf-Wert: 0,23.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 808(M+H), 790, 752, 708, 527, 509, 345, 327, 105(Base), 57.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,12(s, 3H); 1,23(s, 3H); 1,33(s, 9H); 1,74(s, 3H); 1,84 (s, 3H); 2,37(S. 3H); 2,56(m, 1H); 3,60(br.s,1H); 3,89(d, 1H); 4,18(d, 18); 4,21(m; 1H); 4,30(d, 1H); 4,32(s, 1H); 4,62(br.s, 18); 4,94(d, 211); 5,23(s, 18); 5,28(br.s, 18); 5,54(d, 18); 5,66(d, 1H); 6,20(t, 1H); 7,25-7,45(m, 6H); 7,50(t, 2H); 7,61(t, 1H); 8,09(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 19
  • Herstellung von(2R,35)-N-Carbobenzyloxy-β-phenylisoserinmethylester(3C)
  • Eine Lösung von(2R, 35)-β--Phenylisoserinmethylester (2)(Herstellungsbeispiel 1, 2 mm)in Pyridin mit einer kleinen Menge DMAP wird in einem Eisbad gekühlt und mit Benzylchlorformiat(0,8 ml)behandelt. Nach Rühren bei Raumtemperatur über Nacht wird das Reaktionsgemisch mit Ethylacetat verdünnt, mit 5%iger wäßriger Natriumbisulfatlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Das Produkt erhält man in reiner Form durch Silicagelchromatographie in Ethylacetat-Hexan-Gemischen. Fp: 120-121ºC.
  • NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 3,26(m, 1H); 3,79(s, 3H); 4,47 (m, 1H); 5,06(m, 2H); 5,27(d, 1H); , 5,75(m, 1H); 7,20- 7, 50(m, 10 H).
    • Herstellungsbeispiel 20
  • Herstellung von(4S,5R)-N-Carbobenzyloxy-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Cb)
  • N-Carbobenzyloxy-β-phenylisoserinmethylester(Herstellungsbeispiel 19, 3C, 0,375 g, 1,14 mM)wird in trockenem THF(10 ml)gelöst, worauf die Lösung mit 2,4-Dimethoxybenzaldehyddimethylacetal(4, 0,300 g, 1,42 mM)und Pyridinium-p-toluolsulfonat(10 mg)versetzt und zum Abdestillieren des THF und Methanols erwärmt wird. Nachdem die Hälfte des THF abdestilliert ist, wird THF(10 ml)zugegeben. Danach wird das Reaktionsgemisch erneut auf die Hälfte seines Volumens destilliert. Diese Maßnahmen werden dreimal wiederholt. Dann wird das Reaktionsgemisch im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 75 g von in Aceton-Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Eluiert wird ebenfalls mit Aceton-Hexan(300 ml 20-80 und 300 ml 25-75). Es werden Fraktionen von 20 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und unter Vakuum eingedampft.
  • Fraktionen 26-44, 543 mg, Isomer SOb(weitere Laufversuche haben gezeigt, daß es sich hierbei um das stärker polare Isomer handelt).
  • Daten für 5Cb:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel; 20% Aceton-80% Hexan; Rf-Wert: 0, 19.
  • ¹H-NNIR(CDCl&sub3;; TMS): δ 3,51(bs, 3H); 3,81(bs, 6H); 4,56(d, 1H); 4,8(bd, 1H); 4,94(d, 1H); 5,54(d, 1H); 6,4(bs, 2H); 6,78(d, 3H); 7,05-7,50(m. 9H).
    • Herstellungsbeispiel 21
  • Herstellung von(4S,5R)-N-CBZ-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Cb)
  • (4S, 5R)-N-CBZ-2-(2, 4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäuremethylester(Herstellungsbeispiel 20, SCb, 444 mg, 0,93 mM)wird in 10 ml Methanol gelöst, worauf die Lösung mit Wasser(400 ul)und Kaliumcarbonat(200 mg, 1,45 mM)versetzt wird. Nach dem Rühren über Nacht sind keine Feststoffe mehr zurückgeblieben. Die Dünnschichtchromatographie zeigt, daß lediglich sehr wenig Methylester zurückgeblieben ist. Das Lösungsmittel wird im Vakuum verdampft, worauf der ölige Rückstand mit Wasser(20 ml)versetzt wird. Beim Gefriertrocknen der Lösung bleiben 638 mg flaumiges weißes Pulver mit 466 mg des Kaliumsalzes 6Cb zurück.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 1 : 4 EtOAc:Toluol; Rf-Wert: Ursprung.
    • Herstellungsbeispiel 22
  • Herstellung von 7-Triethylsilyl-baccatin-III-13-(4S,5R)-N- CBZ-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9CbA)
  • Rohes(4S,5R)-N-CBZ-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl- 5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(Gob, Herstellungsbeispiel 21; 75 mg, 0,11 mM)wird zwischen.CH&sub2;Cl&sub2; und 5%iger NaHSO&sub4;-Lösung verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden durch wasserfreies Natriumsulfat filtriert und im Vakuum eingeengt, wobei 51 mg(4S,5R)- N-CBZ-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(7Cb)erhalten werden.
  • 7-Triethylsilyl-baccatin III(8A, 50 mg, 0,07 mM)wird in 700 ul Toluol gelöst, worauf die gesamte(4S,5R)-N-CBZ- 2-(2, 4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure in einer Lösung von CH&sub2;Cl&sub2; zugegeben wird. Nach Zugabe von DCC (25 mg, 0,11 mM)und DMPAP(4 rng, 0,04 mM)wird die Lösung auf 80ºC erwärmt, wobei das CH&sub2;Cl&sub2; abgeht. Die Reaktion wird dünnschichtchromatographisch überwacht. Nach 1,5 h ist nur noch sehr wenig 7-Triethylsilyl-baccatin III feststellbar. Nachdem sich das Reaktionsgemisch abgekühlt hatte, wird die Aufschlämmung filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum eingeengt und über 7 g von in 1 : 3 EtOAc-Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 40 ml 1 : 3 EtOAc-Hexan und 75 ml 1 : 2 EtOAc-Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 3 ml. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 17-32.
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend)theoretisch:
  • 1146,4882 - gefunden: 1146,4915.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 0,51-0,59(m,6H); 0,88-0,94(m); 1,13(s,3H); 1,18(s,3H); 1,79-1,89(m,1H); 2,17(s,3H); 2,40-2,50(m1H); 3,67(d,1H); 3,80(br.s,6H); 4,07(d,1H); 4,22 (d,1H); 4,39(m,1H); 4,54(d,1H); 4,77(d,1H); 4,86(d,1H); 4,94(d,1H); 5,54(d,1H); 5,61 (d,1H); 5,90(m,1H); 6,33(s,1H); 6,43(m,2H); 6,78(m,3H); 7,12-7,21(m,4H); 7,38-7,50 (m,7H); 7,59(m,1H); 8,01(d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 23
  • Herstellung von 13-(N-CBZ-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (10CA)und 10-Deacetyl-13-(N-CBZ-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(10DB)
  • 7-Triethylsilyl-baccatin-III-13-(4S, 5R)-N-CBZ-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9CbA, Herstellungsbeispiel 22; 630 mg, 0,55 mM)wird in 10 ml 0,1 N HCl in Methanol gelöst. Die 0,1 N HCl-Lösung wird durch Verdünnen von 71 ul Acetylchlorid mit Methanol auf 10 ml und mindestens 0,5-stündiges Reagierenlassen zubereitet. Die Reaktion wird durch Dünnschichtchromatographie überwacht. Nach 0,5 h ist kein Ausgangsmaterial mehr feststellbar. Die Reaktionslösung wird zwischen Salzlake, 5%iger NaHCO&sub3;-Lösung und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht mit 5%iger NaHCO&sub3;- Lösung extrahiert. Die vereinigten wäßrigen Schichten werden mit EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden durch wasserfreies Natriumsulfat filtriert. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 60 g von in 1 : 1 EtOAc:Hexan gepacktem Silicagel. chromatographiert. Die Säule wird mit 500 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan, 250 ml 3 : 2 EtOAc:Hexan und 240 ml 2 : 1 EtOAc:Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 25 ml.
  • Fraktionen 16-36, 13-(N-CBZ-β-Phenylisoserinyl)- baccatin III(10CA).
  • Fraktionen 44-52, 10-Deacetyl-13-(N-CBZ-β-phenylisocerinyl)-baccatin III(10DB).
  • Daten für 10CA:
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend)theoretisch: 884,3493 - gefunden: 884,3490.
  • ¹H-NMR(CDCl3; TMS)·δ 1,13 (s,3H); 1,80(s, 3H); 1,86(m, 1H); 2,24 (s,3H); 2,37 (s,3H); 2,54(m,2H); 3,43(m,1H); 3,76(d,1H); 4,19(d,1H); 4,28(d,1H); 4,39(m,1H); 4,66 (br. s, 1H); 4,90-4,97(m, 1H); 4,94(d, 1H); 5,05(d, 1H); 5,34(d,1H); 5,64(d, 1H); 5,75(d, 1H); 6,23(m,1H); 6,25(s,1H); 7,17(br.s,28); 7,25(br.s,3H); 7,29-7,41(m,5H); 7,50(m,2H); 7,61 (m, 1H); 8,12(d,2H).
  • Daten für 10CB:
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend)theoretisch:
  • 842,3388 - gefunden: 842,3364.
  • ¹H NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 2,37(s,3H); 2,57(m,1H); 3,40(d,1H); 3,87(d,1H); 4,18- 4,32(m); 4,65(br. s, 1H); 4,92(d, 1H); 4,95(d, 1H); 5,06(d, 1H); 5,18(s,1H); 5,35(d, 1H); 5,65 (d,1H); 5,78(d, 1H); 6,20(m,1H); 7,18(m,1H); 7,22-7,46(m); 7,50(m,2H); 7,61(m,1H); 8,11 (d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 24
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(11A) aus 13-(N-CBZ-β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(10CA)
  • 405 mg(0,46 mM)13-(N-CBZ-β-Phenylisoserinyl)- baccatin III(Herstellungsbeispiel 23; 10CA)werden bei Raumtemperatur gerührt und unter Atmosphärendruck mit 40 ml absolutem Ethanol und 100 mg 10% Pd/C hydriert. Die Reaktion wird auf dünnschichtchromatographischem Wege überwacht und hat sich nach 5 h als vollständig erwiesen.
  • Das Reaktionsgemisch wird durch Celite filtriert. Der Filterkuchen wird mit Ethylacetat gewaschen. Das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der hierbei angefallene Rückstand wird mit einer geringen Menge Ethylacetat und einer größeren Menge Hexan versetzt und zwei weitere Male eingedampft, wobei 13-(β- Phenylisoserinyl)-baccatin III(11A)als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 70-30 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: Streifen zwischen Ursprung und 1/3 plattenaufwärts.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 1,13(s, 3H); 1,24(s, 3H); 1,66(s, 3H); 1,88(s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,24(s, 3H); 2,45-2,61(m, 1H); 3,75(d, 1H); 4,14(d, 1H); 4,23-4,33(m, 3 H); 4,40 (m, 1H); 4,93(d, 1H); 5,63(d, 1H); 6,13(t, 1H); 6,27(s, 1H); 7,26(m, 1H); 7,39(d, 4H); 7,52 (t, 2H); 7,65(t, 1H); 8,06(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 25
  • Herstellung von(2R,35)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-βphenylisoserinmethylester(3D)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen von Herstellungsbeispiel 19 [(2R, 3S)-N-Carbobenzyloxy-β-phenylisoserinmethylester(3C)], jedoch ausgehend von 2,2,2-Trichlorethoxycarbonylchlorid zur Acylierung des Amins β-Phenylisoserinmethylester(2)wird das Produkt N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinmethylester(3D)hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel 26
  • Herstellung von(4S,5R)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Da und 5Db)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen des Herstellungsbeispiels 20 [Herstellung von(4S,5R)-N-Carbobenzyloxy-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(Seb)], jedoch ausgehend von(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinmethylester(3D)wird das Produkt(4S,5R)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Da, 5Db)hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel 27
  • Herstellung von(4S,5R)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Da, 6Db)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen des Herstellungsbeispiels 21 [(4S,5R)-N-Carbobenzyloxy-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz (Gob)], jedoch ausgehend von(4S,5R)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Da, 5Db)wird das Produkt (4S,5R)-N-(2,2, 2-Trichlorethoxycarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Da, 6Db)hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel 28
  • Herstellung von 7-Triethylsilyl-baccatin-IiI-13-(4S,5R)-N- (2,2, 2-trichlorethoxycarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9DaA, 9DbA)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen des Herstellungsbeispiels 22 [Herstellung von 7-Triethylsilylbaccatin-III-13-(4S,5R)-N-CBZ-2--(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester; 9CbA], jedoch ausgehend von(4S,5R)-N-(2,2,2-Chlorethoxycarbonyl)-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(6Da, 6Db)wird der gewünschte 7-Triethylsilyl-baccatin-III-13- (4S,5R)-N-(2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9DaA, 9DbA) erhalten.
    • Herstellungsbeispiel 29
  • Herstellung von 13-(N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-βphenylisoserinyl)-baccatin III(10DA)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen von Herstellungsbeispiel 23 [Herstellung von 13-(N-CBZ-β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III(10CA)], jedoch ausgehend von 7-Triethylsilyl-baccatin III-13-(4S,5R)-N-(2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9Da, 9Db)] wird das Produkt 3-N- (2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(lODA)erhalten.
    • Herstellungsbeispiel 30
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(11A) aus 13-(N-2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(10DA)
  • 13-(N-2, 2, 2-Trichlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(Herstellungsbeispiel 29; 10DA, 1g) wird in Methanol(50 ml)gelöst, worauf die Lösung mit Zinkpulver(2 g)und Ammoniumchlorid(2 g)versetzt und bei Raumtemperatur gerührt wird. Nach 3-stündigem Rühren wird das Reaktionsgemisch filtriert. Das Filtrat wird unter Vakuum(weniger als 20 Torr)eingedampft. Der hierbei angefallene Rückstand wird zwischen Ethylacetat und 5%iger wäßriger Natriumbicarbonatlösung verteilt. Die organische Schicht wird abgetrennt, getrocknet(Natriumsulfat)und unter Vakuum eingeengt, wobei das Produkt 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(11A)erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 31
  • Herstellung von 13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III (10 BA)
  • 68 mg(0,09 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 0,5 ml trockenem THF verrührt. Nach Zugabe von 20 mg(0,092 mM)Di-tert.-butyldicarbonat in 0,2 ml trockenem THF und 0,013 ml(0,093 mM)Triethylamin wird das Ganze 24 h lang reagieren gelassen. Eine dünnschichtchromatographische Analyse nach 5 h zeigte, daß der Hauptteil der Reaktion abgelaufen war.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und Salzlake verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit Ethylacetat rückextrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt.
  • Das Rohprodukt wird über 10 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 60-40 EtOAc-Hexan. Es werden Fraktionen von 2 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die Fraktionen 12-30 enthalten das Produkt, werden miteinander vereinigt und im Vakuum eingedampft. Hierbei erhält man die Titelverbindung 10BA als weißen Feststoff.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 60-40 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: 0,46.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,15(s, 3H); 1,33(s, 9H); 1,85(s, 3H); 2,25(s, 3H); 2,30 (m); 2,38(s, 3H); 2,54(m); 3,46(d, 1H); 3,80(d, 1H); 4,17(d, 1H); 4,31(d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,63(br.s, 1H); 4,95(d, 1H); 5,28(br. d, 1H); 5,42(br.d, 1H); 5,67(d, 1H); 6,24(t, 1H); 6,29(s, 1H); 7,18(d, 1H); 7,38(m, 5H); 7,50(t, 2H); 7,62(t, 1H); 8,10(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 32
  • Herstellung von 13-N-(1-Adamantoyl)-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(10EA)
  • 44 mg(0,06 mM)13-(β-Phen ylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden bei 0ºC unter Stick stoff in 1 ml trockenen Pyridins verrührt und mittels einer Spritze in 0,2 ml Methylenchlorid mit 13 mg(0,06 mM)1- Adamantancarbonylchlorid eingetragen. Nach 30 min zeigte eine dünnschichtchromatographische Analyse die Vollständigkeit der Reaktion.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen 1 N HC&sub1;-Ethylacetat verteilt. Die organische Schicht wird mit Salzlake gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Der Rückstand wird über 5 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 65-35 EtOAc-Hexan. Es werden Fraktionen von 2 ml gesammelt und dünnschichtchromatographisch analysiert. Das Produkt findet sich in den Fraktionen 8-23. Sie werden miteinander vereinigt und eingedampft, wobei 33 mg(60%ige Ausbeute)eines weißen Feststoffs zurückbleiben. Die Spektraldaten zeigen immer noch das Vorhandensein von 1-Adamantancarbonsäure.
  • Das unreine Produkt wird in 1 ml frisch destilliertem THF gelöst. Nach Zugabe eines Überschusses an etherischem Diazomethan wird das Reaktionsgemisch 30 min lang reagieren gelassen. Danach wird das Reaktionsgemisch unter Vakuum eingedampft und - wie zuvor - chromatographiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 6-25, aus denen 13- (N-(1-Adamantoyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(10EA) als Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: 0,48.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)gemessen bei 912, 4168; theoretisch für C&sub5;&sub1;H&sub6;&sub2;N&sub1;O&sub1;&sub4; 912, 4170; 912, 852, 834, 569, 551, 509, 344, 326, 298, 268, 180, 135, 105.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,16(s); 1,27(s); 1,60-2,10(m); 2,24(s, 3H); 2,30(m); 2,36 (s, 3H); 2,52(m); 3,54(d, 1H); 3,77(d, 1H); 4,18(d, 1H); 4,2 g(d, 1H); 4,40(m,1H); 4,68 (m, 1H); 4,94(d, 1H); 5,56(dd, 1H); 5,68(d, 1H); 6,15(t, 1H); 6,28(s, 1H); 6,47(d, 1H); 7,37 (m, 5H); 7,50(t, 2H); 7,61(t, 1H); 8,10(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 33
  • Herstellung von 13-(N-(3-Tetrah ydrofuranyloxycarbonyl)-(3- phenylisoserinyl)-baccatin III(10FA)
  • 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(Herstellungsbeispiel 24; 11A; 16,8 mg, 0,022 mM)wird mit racemischem 3- Tetrahydrofuranolsuccinimidylcarbonat(5,0 mg, 0,023 mM), Pyridin(5 ul)und Methylenchlorid(180 ul)versetzt, worauf das Reaktionsgemisch 2 Tage lang bei Raumtemperatur verrührt wird. Nach dem Verdünnen mit Ethylacetat wird es mit 5%iger wäßriger Natriumbisuifatlösung und 5% wäßriger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die organische Lösung wird getrocknet und eingeengt, wobei ein Diastereomerengemisch von 13-(N-(3-Tetrahydrofuanyloxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(lOFA)erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie:: Silicagel 60; 40-60 Acetonacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,16.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, INIS)δ 1,16(s); 1,27(s); 1,68(s+m); 1,83(s); 1,90(m); 2,25(s+m); 2,37(s); 2,55(m); 3,7-4,0(m); 4,18(d, 1H); 4,30(d, 1H); 4,43(m,1H); 4,64(m, 1H); 4,95(dd, 1H); 5,09(m, 1H); 5,30(m, 1H); 5,67(m, 2H); 6,28(s+m, 2H); 7,39(m, 5H); 7,50(m, 2H); 7,62(m, 1H); 8,12(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 34
  • Herstellung von 13-(N-4-Tetrahydropyranyloxycarbonyl)-βphenylisoserinyl)-baccatin III(10 GA)
  • 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III(Herstellungsbeispiel 24, 11A, 10 mg, 0,013 mM)wird mit 4-Tetrahydropyranolsuccinimidylcarbonat(3,3 mg, 0,014 mM), Pyridin(5 ul) und Methylenchlorid(100 ul)versetzt, worauf das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur verrührt wird. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und dann mit 5%iger wäßriger Natriumbisulfatlösung und 5%iger wäßriger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die Ethylacetatlösung wird getrocknet und eingeengt, wobei 10,3 mg Rohprodukt erhalten werden. Beim Reinigen durch Säulenchromatographie auf Silicagel in(40-60)Aceton-Hexan erhält man reines 13-(N-4- Tetrahydropyranyloxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(10GA).
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 40-60 Acetonacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,17.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,15(s); 1,27(s); 1,5-1,8(m); 1,68(s); 1,84(s); 1,89(m); 2,1-2,4(m); 2,25(s, 3H); 2,41(s, 3H); 2,49(d, 1H); 2,55(m, 1H); 3,08(m, 1H); 3.27(m, 1H); 3,33(d, 1H); 3,70(m, 1H); 3,80(d+m, 2H); 4,16(d, 1H); 4,29(d, 1H); 4,42(m,1 W); 4,66 (m, 2H); 4,94(d, 1H); 5,33(m, 1H); 5,57(m, 1H); 5,65(d, 1H); 6,28(s+m, 2H); 7,37(m,5H); 7,51(m, 2H); 7; 61(m, 1H); 8,14(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 35
  • Herstellung von 13-(N-(tert.-But ylacetyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(1OHA)und 2'-tert.-Butylacetyl-13- (N-(tert.-butylacetyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III (12CA)
  • 51 mg(0,068 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden unter Stickstoff bei 0ºC in 1 ml trockenen Pyridins verrührt. Getrennt davon werden 0,01 ml(9,1 mg, 0,068 mM)tert.-Butylacetylchlorid in 0,1 ml Methylenchlorid gelöst, worauf die erhaltene Lösung in das Ausgangsamin eintropfen gelassen wird. Danach wird das Ganze 3 h lang bei 0ºC und über Nacht im Gefrierschrank reagieren gelassen.
  • Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit 1 N HG und 5%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die wäßrigen Schichten werden mit Ethylacetat rückextrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt.
  • Das Rohprodukt wird über 7 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 50-50 und 70-30 EtOAc-Hexan. Es werden Fraktionen von 2 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und im Vakuum eingedampft.
  • Fraktionen 11-21: Unreines 2'-tert.-Butylacetyl-13-(N- (tert.-butylacetyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III (12CA).
  • Fraktionen 22-45 : 13-(N-(tert.-Butylacetyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(10HA), weißer Feststoff.
  • 12CA ist immer noch unrein und wird über 3 g Silicagel rechromatographiert. Eluiert wird mit 10-90 Aceton-Methylenchlorid. Es werden Fraktionen von 1 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die Fraktionen 11-28 enthalten das Produkt, werden miteinander vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei reines 2'-tert.-Butylacetyl-13-(N-(tert.-butylacetyl)-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(12CA)als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Daten für 12CA:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 60-40 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,70.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)gemessen bei 946, 4618; theoretisch für C&sub5;&sub2;H&sub6;&sub8;N&sub1;O&sub1;&sub5; 946, 4589; 946, 509, 378, 360, 280, 262, 234, 105, 99, 57, 43.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ0,98(s); 1,28(s, 3H); 2,3(s, 3H); 2,42(s, 3H); 2,53(m); 3,81(d, 1H); 4,19(d, 1H); 4,31(d, 1H); 4,45(m., 1H); 4,97(d, 1H); 5,34(d, 1H); 5,69(d, 1H); 5,75(m, 1H); 6,08(d, 1H); 6,24(m, 1H); 6,31(s, 1H); 7,28-7,45(m, 5H); 7,51(t, 2H); 7,61(t, 1H); 8,11(d, 2H).
  • Daten für 10HA:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 60-40 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,27.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)gemessen bei 848, 3863; theoretisch für C&sub4;&sub6;H&sub5;&sub8;N&sub1;O&sub1;&sub4; 848, 3857; 848, 830, 788, 770, 569, 551, 509, 280, 262, 234, 182, 136, 115, 105, 99, 57, 43.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 0,97(s); 1,26(s, 3H); 2,24(s, 3H); 2,33(s, 3H); 2,52(m, 2H); 3,60(d, 1H); 3,78(d, 1H); 4,18(d, 1H); 4,29(d, 1H); 4,39(m, 1H); 4,65(m, 1H); 4,93(d, 1H); 5,55(dd, 1H); 5,67(d, 1H); 6,19(t, 1H); 6,28(s, 1H); 7,39(m, 5H); 7,50(t, 2H); 7,62(t, 1H); 8,10(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 36
  • Herstellung von 13-(N-(Pivaloyl)-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(10IA)
  • 44 mg(0,06 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden bei 0ºC unter Stickstoff in 1 ml trockenen Pyridins verrührt und anschließend innerhalb von 5 min mit einer Lösung von 8 mg(0,06 mM) Trimethylacetylchlorid in 0,2 ml Methylenchlorid versetzt. Nach 30-minütiger Umsetzung zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse, daß der Hauptteil des Amins umgesetzt ist.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen 1 N HCl und Ethylacetat verteilt. Die organische Schicht wird mit Salzlake gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt.
  • Das Rohprodukt wird über 5 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit(65-35)EtOAc-Hexan, Es werden Fraktionen von 2 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Das Produkt findet sich in den Fraktionen 10-38. Diese werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei die Titelverbindung erhalten wird.
  • Die Spektraldaten zeigen, daß noch eine geringe Menge Pivalinsäure vorhanden ist. Folglich wird das Produkt in Ethylacetat gelöst, mit 5%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt, wobei 10IA als weißer Feststoff erhalten wird. Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: 0,29.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)gemessen bei 834, 3712; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub6;N&sub1;O&sub1;&sub4; 834, 3700; 834, 816, 774, 569, 551, 509, 387, 327, 266, 248, 220, 190, 105, 57.
  • ¹H-NMR:(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,16(s); 1,23(s); 2,23(s, 3H); 2,29(d, 1H); 2,35(s, 3H); 2.51(m, 1H); 3.77(d, 1H); 4.17(d, 1H); 4.28(d, 1H); 4.38(m, 1H); 4.68(d, 1H); 4.93(d, 1H); 5,56(dd, 1H); 5,66(d, 1H); 6,17(m, 1H); 6,28(s, 1H); 6,54(d, 1H); 7,35(m, 5H); 7,49(m, 2H); 7; 60(m, 1H); 8,10(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 37
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7- baccatin III(17)aus 13-(N-(Benzyloxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7-baccatin III(16B)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen von Herstellungsbeispiel 24(Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)- baccatin III(11A)), jedoch ausgehend von 13-(N-(Benzyloxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7-baccatin III (16B aus Beispiel 4)wird 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy- Δ6,7-baccatin III(17)hergestelt.
    • Herstellungsbeispiel 38
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7- baccatin III(17)aus 13-(N-(2,2,2-Trichlorchlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7-baccatin III (16C).
  • 13-(N-(2,2, 2-Trichlorchlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7-baccatin III(Herstellungsbeispiel 12A; 16C, 1g)wird in Methanol(50 ml)gelöst, worauf die Lösung unter Rühren bei Raumtemperatur mit Zinkpulver(2 g) und Ammoniumchlorid(2 g)versetzt wird. Nach 3-stündigem Rühren wird das Reaktionsgemisch filtriert. Das Filtrat wird unter Vakuum(weniger als 20 Torr)eingedampft. Der hierbei angefallene Rückstand wird zwischen Ethylacetat und 5%iger wäßriger Natriumbicarbonatlösung verteilt. Die organische Schicht wird abgetrennt, getrocknet(Natriumsulfat) und unter Vakuum eingeengt, wobei das Produkt 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6,7-baccatin III(17)zurückbleibt.
    • Herstellungsbeispiel 39
  • Herstellung von 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(18)aus 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenylisoserinyl)-2'-troc-baccatin III(13BA)
  • Eine Lösung von 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenylisoserinyl)- 2'-troc-baccatin III(13BA, Beispiel 3)(0,079 g)in 9 : 1 Methanol/Essigsäure(20 ml)und Ethylacetat(8 ml)wird mit aktiviertem Zink(0,153 g)bei Raumtemperatur 2 h lang verrührt. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt über Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 40% EtOAc-Hexan und hierbei wird 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(18)erhalten.
  • Massenspektrum: 886, 571, 511, 371,347, 329, 316, 298, 105, 91 m/z.
    • Herstellungsbeispiel 40
  • Herstellung von 7-Fluor-13-(β-phenylisoserinyl)-baccatin III(19)
  • 23,5 mg(0,027 mM)7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(Herstellungsbeispiel 39, 18)werden in 3 ml absolutem Ethanol gelöst, worauf die Lösung mit 7 mg 10% Pd/C versetzt und bei Atmosphärendruck und Raumtemperatur 4,5 h lang hydriert wird. Das Verschwinden von Ausgangsmaterial wird auf dünnschichtchromatographischem Wege überwacht. Das Reaktionsgemisch wird durch Celite filtriert, worauf das Celite mit Ethylacetat gewaschen wird. Das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Filtrat wird unter Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird zweimal mit Ethylacetat-Hexan behandelt und unter Vakuum eingedampft. Hierbei erhält man 7-Fluor-13-(β-phenylisoserinyl)-baccatin III(19)als weißen Feststoff.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,11.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 2,20(s, 3H); 2,26(s, 3H); 2,54(m, 1H); 3,99(d, 1H); 4,24 (d, 1H); 4,27-4,42(m, 3H); 4,55(dd, J=48 H&sub2;, J=5 H&sub2;, 1H); 4,99(d, 1H); 5,72(d, 1H); 6,11 (m, 1H); 6,55(s, 1H); 7,27(s, 1H); 7,39(m, 4H); 7,51(m, 2H); 7,64(m, 1H); 8,08(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 41
  • Herstellung von 7-Fluor-13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(20)und 7-Fluor-2'-Boc-13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(13CA)
  • 0,027 mM 7-Fluor-13-(β-phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 40; 19)werden unter Rühren bei Raumtemperatur und unter Stickstoff in 0,2 ml frisch destillierten THF gelöst, worauf die Lösung mit 6 mg(0,027 mM) Di-tert.-butyldicarbonat und 0,004 ml(0,029 mM)Triethylamin versetzt wird. Nach 20-stündigem Reagierenlassen wird das Reaktionsgemisch zwischen Ethylacetat und Salzlake verteilt. Die Schichten werden getrennt, worauf die wäßrige Schicht mit Ethylacetat rückextrahiert wird. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Produktgemisch wird über 3 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 30-70 Ethylacetat-Hexan bis zum Erscheinen des ersten Produkts und danach wird auf 50-50 Ethylacetat-Hexan umgeschaltet. Es werden Fraktionen von 1 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten werden.
  • Fraktionen 16-30 : 13CA
  • Fraktionen 32-46: 20
  • Daten für 13CA:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Re-Wert: 0,83.
  • Massenspektrum(FAB, m/z)952(M+H), 878, 822, 778, 571, 511, 389, 329, 106, 162, 105, 57.
  • ¹H-NMR(CDCl³, TMS): δ 1,17(s, 3H); 1,24(s, 3H); 1,25(s, 9H); 1,90(s, 9H); 2,08 (s, 3H): 2,22(s, 3H); 2,0-2,7(m, 4H); 4,02(d, 1H); 4,24(d, 1H); 4,36(d, 1H); 4,59(dd, 3-48 Hz, J=5 Hz, 1H); 4,77 (br. s, 1H); 5,02(d, 1H); 5,22(br.s,1H); 5,68(m,1H); 5,77(d,1H); 6,27 (m, 1H); 6,57(s, 1H); 7,27-7,70(m. 9H); 8,09(d, 2H).
  • Daten für 20:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf-Wert: 0,54.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)gemessen bei 852, 3638; theoretisch für C&sub4;&sub6;H&sub5;&sub5;F&sub1;N&sub1;O&sub1;&sub4; 852, 3606; 852, 796, 752, 692, 674, 571, 511, 389, 347, 329, 105, 57, 43.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;. TMS): δ 1,17(s, 3H); 1,23(s, 3H); 1,34(s, 9H); 2,22(s, 3H); 2,39 (s, 3H); 2,0-2,7(m, 4H); 3,36(m, 1H); 4,04(d, 1H); 4,28(d, 1H); 4,37(d, 1H); 4,48-4,68(m, 2H); 5,01(d, 1H); 5,30(m. 1H); 5,45(m. 1H); 5,76(d, 1H); 6,21(m, 1H); 6,56(s, 1H); 7,30- 7,70(m. 9H); 8,13(d. 2H).
    • Herstellungsbeispiel 42
  • Herstellung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III(21)aus 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenylisoserinyl)-2'-troc-7- desoxy-7β,8β-methanobaccatin III(14BA)
  • Eine Lösung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenylisoserinyl)-2'-troc-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III(14BA, Beispiel 3)(0,040 g)in 9 : 1 Methanol/Essigsäure(10 ml) wird bei Raumtemperatur 3 h lang mit aktiviertem Zink (0,144 g)verrührt. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt über Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 40% EtOAc-Hexan, wobei 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-7ß,8ß-methanobaccatin III(21)erhalten wird.
  • Massenspektrum: Gefunden: 866, 3423, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub1;NO&sub1;&sub4; + H erfordert 866,3388, 848, 806, 788, 551, 533, 491, 105, 91 m/z.
    • Herstellungsbeispiel 43
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-7β,8βmethanobaccatin III(22)
  • 14 mg(0,016 mM)13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenylisoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III(Herstellungs beispiel 42, 21)werden in 1 ml absolutem Ethanol gelost, worauf die erhaltene Lösung mit 5 mg 10% Pd/C versetzt und bei Atmosphärendruck während 6 h bei Raumtemperatur hydriert wird. Die Umsetzung wird dünnschichtchromatographisch überwacht. Nach Beendigung der Umsetzung wird das Reaktionsgemisch durch Celite filtriert. Der Filterkuchen wird mit Ethylacetat gewaschen. Das Filtrat und die Waschflüssigkeit werden miteinander vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Nach zweimaligem Zusatz von Ethylacetat-Hexan und jeweils erneutem Eindampfen erhält man 22 als weißen Feststoff. Über Nacht im Gefrierschrank gelagert wird es - so wie es ist - in Herstellungsbeispiel 44 weiterverarbeitet.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: Streifen vom Ausgangspunkt teilweise plattenaufwärts.
  • ¹H-NNIR(CDCl&sub3;, TMS)δ 5,62(d, 1H); 6,11(t, 1H); 6,31(s, 1H); 7,39(m): 7,53(m, 2H); 7,66(m, 1H); 8,08(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 44
  • Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy- 7β,8β-methanobaccatin III(23)und 13-(N-Boc-2'-Boc-β- Phenylisoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III(14CA)
  • 0,016 mM 22(Herstellungsbeispiel 43)wird unter Rühren und unter Stickstoff in 0,12 ml trockenem THF gelöst, worauf die Lösung mit 3,5 mg(0,016 mM)Di-tert.-butyldicarbonat in 0,05 ml trockenem THF und 0,0025 ml(0,018 mM) Triethylamin in 0,015 ml trockenem THF versetzt wird. Nach 27-stündiger Reaktion zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse, daß die Reaktion fast vollständig ist.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und Salzlake verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit Ethylacetat rückextrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingeengt.
  • Das Rohproduktgemisch wird über 3 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit einem Gradienten von 30-70 bis 50-50 EtOAc-Hexan. Es werden Fraktionen von 1 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die folgenden Fraktionen werden miteinander vereinigt und eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten werden.
  • Fraktionen 16-30 : 14CA
  • Fraktionen 33-53 : 23
  • 23 ist nicht recht rein und wird über 1 g Silicagel rechromatographiert. Eluiert wird mit einem Gradienten von 40-60 bis 50-50 EtOAc-Hexan. Es werden Fraktionen von 0,5 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 11-20. Diese werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei das gewünschte Produkt in einer Menge von 4 mg als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Daten für 14CA:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: 0,87.
  • Massenspektrum(FAB, m/z): 858, 803, 798, 551, 491, 369, 327, 206, 105, 57.
  • ¹H-NMR:(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,25(s); 2,01(s, 3H); 2,21(s, 3H); 2,43(m); 4,01(d, 1H); 4,07(d, 1H); 4,28(d, 1H); 4,70(m, 2H); 5,18(br. s,1H); 5,64(m, 2H); 6,25(m,1H); 6,33(s, 1H); 7,39(m, 5H); 7,51(m, 2H); 7,64(m, 1H); 8,09(d, 2H).
  • Daten für 23:
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 50-50 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: 0,77.
  • Massenspektrum(FAB, m/z):(M+H)gemessen: 832,3588; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub4;N&sub1;O&sub1;&sub4; 832, 3544; 832, 814, 776, 732, 714, 696, 672, 551, 491, 105, 57.
  • ¹H-NMR:(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,28(s); 1,37(m); 1,68(m); 1,85(s); 2,10(m); 2,21(s, 3H); 2,26(m); 2,39(s. 3H); 2,47(m); 3,30(m, 1H); 4,06(m, 2H); 4,31(d, 1H); 4,63(m, 1H): 4,74(d, 1H); 5,30(m, 1H); 5,36(d, 1H); 5,66(d, 1H); H); 6,28(m, 1H); 6,33(s, 1H); 7,37(m, 5H); 7,51(m, 2H); 7,61(m, 1H); 8,15(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 45
  • Herstellung von 13-(N-Phenylharnstoff-β-phenylisoserinyl)- baccatin III; 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-Nphenylharnstoff(10JA)
  • 48 mg(0,064 mN)13-(β-Phen ylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden in 700 ul THF gelöst und mit 6,5 ul(0,060 mM)Phenylisocyanat versetzt. Eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt kein restliches Amin. Die Lösung wird mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSO&sub4;-Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird über 5 g von in 1 : 1 EtOAc-Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 20 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan, 20 ml 3 : 2 EtOAc:Hexan und 20 ml 2 : 1 EtOAc: Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 3 ml. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 17-31. Massenspektrum(FAB-hochauflösend): theoretisch:
  • 869,3496; gefunden: 869,3512.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,13(s,3H); 1,19(s,3H); 1; 81(s,3H); 2,19(s,3H); 2,27 (m); 2,37(s,3H); 2,51(m,1H); 2,66(m,1H); 3,76(d,1H); 4,18(d,1H); 4,28(d,1H); 4,37(m,1H); 4,67(m,1H); 4,93(d,1H); 5,49(dd,1H); 5,67(d,1H); 6,21(m,1H); 6,27(s,1H); 6,93(m.2H); 7,07(m,2H); 7,19(m,3H); 7,26-7,40(m): 7,48(m.1H); 7,60(m,1H); 8,10(d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 46
  • Herstellung von 13-(N-tert.-Butylharnstoff-β-phenylisoserinyl)-baccatin III; 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III-N-tert.-butylharnstoff(lOKA)
  • 51 mg(0,07 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden in 700 ul THF gelöst und mit 7 ul(0,061 mM)tert.-Butylisocyanat versetzt. Da eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß noch etwas Amin vorhanden ist, werden weitere 3 ul zugegeben. Diese Maßnahmen werden noch zwei weitere Male wiederholt, bis eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß nur noch wenig Amin zurückgeblieben ist(3 ul und 4 ul). Nach Verdünnen mit EtOAc wird die Lösung mit gesättigter CuSOq-Lösung extrahiert. Nach dem Filtrieren durch Na&sub2;SO&sub4; wird die organische Schicht im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 5 g von in 1 : 1 EtOAc:
  • Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 50 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan, 25 ml 3 : 2 EtOAc:Hexan und 25 ml 2 : 1 EtOAc:Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 3 ml. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 21-40.
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend): Theoretisch:
  • 849,3809 - Gefunden: 849,3809.
  • ¹H-NMR(CDCl³; TMS): δ 1,14(s,3H); 1,22(s); 1,24(s); 1,83(s,3H); 2,23(s,3H); 2,44(s,3H); 2,50(m,1H); 3,77(d,1H); 4,17(d,1H); 4,29(d,1H); 4.38(m,1H); 4,61(m,1H); 4 94 (d,1H); 5,29(m,2H); 5,67(d, 1H); 6,18(m,1H); 6,29(s,1H); 7,33(m,5H); 7,49(m,1H); 7,61 (m,1H); 8,09(d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 47
  • Herstellung von 13-(N-1-Methyl-1-cyclohexamid-β-phenylisoserinyl)-baccatin III;
  • 13-(N-1-Methyl-1-cyclohexanoyl)-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(10 MA)
  • 30 mg(0,04 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden in 400 ul Pyridin gelöst und auf 0ºC gekühlt Nachdem die Lösung abgekühlt ist, werden 20 ul von 300 mg pro 1 ml 1-Methyl-1-cyclohexylcarbonylchlorid in CH&sub2;Cl&sub2;(0,037 mM)zugegeben. Da eine dünnschichtchromatographische Analyse noch etwas restliches Amin erkennen läßt, werden weitere 10 ul zugegeben. Nachdem die dünnschichtchromatographische Analyse nur noch eine geringe Menge an zurückgebliebenem Amin offenbart, wird die Lösung mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSO&sub4;-Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird über 3 g an in 1 : 1 EtOAc:Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 50 m 1 : 1 EtOAc:Hexan und 20 ml 3 : 2 EtOAc:Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 2 ml. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 11-28.
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend): Theoretisch:
  • 874,4013 - Gefunden: 874,4011.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,12(s,3H); 1,15(s,3H); 1,26(s,3H); 1,81(s,3H); 1,87 (m,3H); 2,24(s,3H); 2,36(s,3H); 2,54(m,1H); 3,78(d,1H); 4,18(d,1H); 4,29(d,1H); 4,40 (m,1H); 4,70(d,1H); 4,94(d,1H); 5,61(dd,1H); 5,67(d,1H); 6,19(m,1H); 6,28(s,1H); 6,5I (d,1H); 7,38(m,5H); 7,50(m,2H); 7,61(m,1H); 8,11(d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 48
  • Herstellung von 13-(N-1-Phenyl-1-cyclopentamid-β-phenylisoserinyl)-baccatin III;
  • 13-(N-(1-Phenyl-1-cyclopentanoyl)-β-phenylisoserinyl)- baccatin III(10NA)
  • 26 mg(0,035 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24, 11A)werden in 400 ul Pyridin gelöst und auf 0ºC gekühlt. Nach dem Abkühlen werden 20 ul von 350 mg pro 1 ml 1-Phenyl-1-cyclopentylcarbonylchlorid in CH2Cl&sub2;(0,033 mM)zugegeben. Da die dünnschichtchromatographische Analyse zeigte, daß noch etwas Amin vorhanden war, werden weitere 20 ul zugegeben. Nun zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Amin mehr. Die Lösung wird mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSOq- Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Danach wird der Rückstand über 3 g von in 1 : 1 EtOAc:Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 50 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan und 25 ml 3 : 2 EtOAc:Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 2 ml. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 12-29.
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend): Theoretisch: 922,4013 - Gefunden: 922,4022.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,16(s,3H); 1,27(s,3H); 1,77(s,3H); 1,60-2,10(m); 2,25 (s.3H); 2,35(s,3H); 2,25-2.65(m); 3,75(d, 1H); 4,19(d, 1H); 4,28(d, 1H); 4,38(m, 1H): 4,59 (d,1H); 4,92(d,1H); 5,49(dd,1H); 5,66(diE); 6,10(m,2H); 6,26(siE); 7,08(m,2H); 7,29 (m); 7,53(m,2E); 7,63(m,1E); 8,12(d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 49
  • Herstellung von 13-(N-Phthalimid-β-phenylisoserinyl)- baccatin III;
  • 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-N-phthalimid(102A)
  • 29 mg(0,04 mM)13-(β-Phen ylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden in 400 ul Pyridin und 15 mg(0,07 mM)Carbethoxyphthalimid gelöst. Die Reaktion wird dünnschichtchromatographisch überwacht. Nach 72 h wird kein Amin mehr gefunden. Die Lösung wird mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSO&sub4;-Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 4 g von in 1 : 1 EtOAc:Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 20 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan, 20 ml 3 : 2 EtOAc: Hexan, 20 ml 2 : 1 EtOAc:Hexan und 20 ml 4 : 1 EtOAc:Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 2 ml. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 16-28.
  • ¹H NMR(CDCl&sub3;; TMS): δ 1,09(s,3H); 1,16(s,3H); 1,81(s,3H); 2,21(s,3H); 2,44 (s,3H); 2,52(m,2H); 3,76(d,1H); 4,15(d,1H); 4,28(d,1H); 4,41(m,2H); 4,96(d,1H); 5,31 (m,1H); 5,61(d, 1H); 5,76(d, 1H); 6,08(m,1H); 6,24(s,1H); 7,23(m,1H); 7,36(m,2H); 7,52 (m,4R); 7,66(m,1H); 7,80(m,4H); 8,10(d,2H)
    • Herstellungsbeispiel 50
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-Ntert.-butylthioharnstoff(10LA)
  • 24 mg(0,032 nM) 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)werden bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 0,2 ml trockenem THF verrührt und mit 4 ul(0,032 mM)tert.-Butylisothiocyanat versetzt. Eine dünnschichtchromatographische Analyse nach 5 h zeigt, daß die Reaktion noch unvollständig ist. Nach Zugabe von weiterew 4 u1 tert.-Butylisothiocyanat wird das Ganze über Nacht reagieren gelassen. Das Rohprodukt wird auf 0,5 g Silicagel aufgetragen und über 3 g Silica gel chromatographiert. Eluiert wird mit 60-40 Ethylacetat-Hexan. Es werden Fraktionen von 1 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die Fraktionen 7-20 enthalten das Produkt. Sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei das gewünschte Produkt erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 60-40 EtOAc- Hexan; Re-Wert: 0,40.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,14(s, 3H); 1,40(s, 9H); 1,80(s, 3H); 2,25(s, 3H); 2,40(s. 3H): 3,50(s, 1H); 3,80(d, 1H); 4,23(m, 2H); 4, 4.0(br.s, 15); 4,86(s, 15); 4,93(d, 15); 5,66(d, 1H): 6,18(s, 1H); 6,27(s, 1H); 6,28-6,40(m. 2H); 6,59(d, 1H); 7,30-7,54(rn. 7H); 7,58(t., 1H); 8,09(d, 2H).
  • Massenspektrum(FAß, m/z):(M+H)gemessen bei 865, 3577; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub7;N&sub2;O&sub1;&sub3;S 865, 3581; 865, 569, 509, 297, 279, 251, 133, 105, 77, 57.
    • Herstellungsbeispiel 51
  • Herstellung von Taxoter(10BF)aus 10-Acetyltaxoter(10BA)
  • 25 mg(0,029 mM)10-Acetyltaxoter(Herstellungsbeispiel 1, 10BA)werden bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 1,0 ml 95%igen Ethanols verrührt, mit zwei Tropfen wasserfreien Hydrazins versetzt und 1,5 h lang reagieren gelassen. Zu diesem Zeitpunkt zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse, daß die Reaktion nahezu vollständig ist. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Wasser und Methylenchlorid verteilt. Die wäßrige Schicht wird mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 3 g Silicagel chromatographiert. Eluiert wird mit 70-30 Ethylacetat-Hexan. Es werden Fraktionen von 1 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die Fraktionen 14-28 enthalten das Produkt. Sie werden vereinigt und im Vakuum eingedampft.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 70-30 EtOAc- Hexan; Rf-Wert: 0, 33.
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;, TMS)δ 1,12(s, 3H); 1,23(s, 3H); 1,34(s, 9H); 1,74(s, 3H); 1,85(s, 3H); 2,37(s, 3H); 2,56(m, 1H); 3,53(br.s,1H); 3,90(d,18); 4,18(d,18); 4,21(m,m); 4,30 (d, 1H); 4,32(S. 1H); 4,62(br.s, 1H); 4,94(d, 1H); 5,23(s, 1H); 5,28(br.s, 1H); 5,52(d, 1H)15,66 (d, 1H); 6,20(t, 1H); 7,25-7,45(m, 6H); 7,50(t, 2H); 7,61(t, 1H); 8,11(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 52
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-Ntert.-amylurethan(10KA)
  • Teil A: Herstellung von tert.-Amyl-4-nitrophenylcarbonat Eine Lösung von tert.-Amylalkohol(0,54 ml, 5,0 mM)in Pyridin(1 ml)wurde bei 0ºC mit 4-Nitrophenylchloroformiat(1,00 g, 4,97 mM)versetzt. Nach Zugabe von 1,5 ml Methylenchlorid wurde das Reaktionsgemisch über Nacht bei Raumtemperatur verrührt. Dann wurde das Reaktionsgemisch mit Toluol verdünnt und filtriert. Verunreinigungen kristallisierten aus Methylenchlorid-Hexan aus.
  • NMR: δ 0, 981(t, 3H); 1,54(s, 6H); 1,88(q, 2H); 7,36 (d, 2H); 8,28(d, 2H).
    • Teil B:
  • 29 mg(0,039 mN)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24 : 11A)und tert.-Amyl-4-nitrophenylcarbonat(13 mg, 0,051 mM)in Pyridin(0,10 ml)werden 3 Tage lang bei Raumtemperatur verrührt. Nach dem Verdünnen mit Ethylacetat wird das Reaktionsgemisch mit 5%iger wäßriger Natriumbisulfatlösung gewaschen. Die Ethylacetatlösung wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird auf einer Silicagelsäule (3 g, 230-400 mesh)chromatographiert. Die Säule wird mit Ethylacetat-Hexan-Gemischen eluiert. Das gewünschte Produkt ist nicht vollständig rein und wird folglich in einem Aceton--Hexan-System rechromatographiert.
  • NMIR(CDCL&sub3; TMS): δ 0,86(t, 3H); 1,15(s, 3H); 1,27(s,38); 1,29(s,3H); 1,30 (s,3H); 1,68(s, 3H); 1,85(s+m, 4H); 2,25(s+m, 4H); 2,38(s, 3H); 2,53(m, 2H); 3,37(d, 1H); 3,80(d, 1H); 4,17(d, 1H); 4,30(d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,63(m, 1H); 4,95(d, 1H); 5,30(m, 1H); 5,40(m, 1H); 5,67(d, 1H); 6,24(m, 1H); 6,29(s, 1H); 7,31-7,68(m, 8H); 8,11(d, 2H). ¹³C-NMR(CDCl&sub3;, TMS): 8,16, 9,53, 14,85, 20,85, 21,86, 22,61, 25,25, 25,71, 25,91, 26,73, 33,22, 35,42, 35,56, 43,18, 45,59, 56,05, 58,53, 72,14, 72,36, 73,57, 74,94, 75,55, 76,44, 79,03, 79,28, 81,05, 82,68, 84,37, 126,67, 128,05, 128,68, 128,84, 128,91, 130,16, 132,95, 133,69, 138,28, 142,28, 155,25, 167,03, 170,16, 171,27, 172,92, 203,66.
  • Massenspektrum(FAB):(m+H)+ = 864. Hauptionen m/z 794, 569, 527, 509, 345, 327.
    • Herstellungsbeispiel 53
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-Nneopentylurethan(10UA)
  • Teil A: Herstellung von Neopentyl-4-nitrophenylcarbonat Eine Lösung von Neopentylalkohol(0,54 ml, 5,01 mM), Pyridin(1 ml), 4-Nitrophenylchlorformiat(1,00 g, 5,0 mM) und destilliertem THF(2 ml)in einem durch Abflammen ge trockneten Kolben wird bei Raumtemperatur 40 h lang verrührt. Nach dem Verdünnen mit Hexan wird das Reaktionsgemisch filtriert und eingedampft. Der hierbei angefallene Verdampfungsrückstand wird auf Silicagel in Ethylacetat- Hexan-Gemischen chromatographiert. Das aus der Säule elulerte Produkt wird durch Umkristallisieren aus Methylenchlorid-Hexan weiter gereinigt.
  • NMR(CDCl3, TMS): δ 1,02(s, 9H); 3,99(s, 2H); 7,39 (d, 2H); 8,29(d, 2H).
    • Teil B:
  • 20 mg(0, 027 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)und Neopentyl-4-nitrophenylcarbonat(7,4 mg, 0,031 mM)in Pyridin(80 u1)werden über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Verdünnen mit Ethylacetat wird das Reaktionsgemisch mit 5%iger wäßriger Natriumbisulfatlösung gewaschen. Die organische Lösung wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das hierbei erhaltene Rohprodukt wird zweimal auf Silicagel, das erste Mal in Aceton-Hexan, und danach in Ethylacetat- Hexan-Gemischen chromatographiert, wobei das gewünschte Produkt erhalten wird.
  • NMR(CDCL&sub3;, TMS): δ 0,82(s, 9H); 1,15(s, 3H); 1,26(s, 3H); 1,68(s, 3H); 1,84 (s+m, 4H); 2,25(s+m, 4H); 2,38(s, 3H); 2,52(m, 2H); 3,40(d, 1H); 3,61(d, 1H); 3,72(m, 1H); 3,79(d, 1H); 4,18(d, 1H); 4,29(d, 1H); 4,41(m, 1H); 4,66(m, 1H); 4,94(d, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,59(m, 1H); 5,66(d, 1H); 6,28(s+m, 2H); 7,30-7,70(m, 8H); 8,12(d, 2H).
  • ¹³C-NMR(CDCl&sub3;, TMS): 9,45, 14,74, 20,73, 21,79, 22,47, 26,09, 26,72, 31, 32, 35,46, 43,05, 45,50, 56,38, 58,45, 72703, 73,47, 74,57, 75,42, 76,36, 79,02, 81,00, 84,28, 126,61, 128,09, 128,58, 128,79, 128,96, 130,11, 132,97, 133,61, 138,10, 141,97, 156,30, 166,91, 170,23, 171,14, 172,47, 203,50.
  • Massenspektrum(FAB):(m+H)+ = 864. Hauptionen m/z 569, 551, 509, 327, 296, 250.
    • Herstellungsbeispiel 54
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-N- (2-chlor-1,1-dimethylethyl)urethan(10SA)
    • Teil A:
  • Eine Lösung von 1-Chlor-2-methyl-2-propanol(0,51 ml, 5,0 mM), 4-Nitrophenylchlorformiat(0,999 g, 5,00 mM), Pyridin(400 ul, 5,0 mM)und THF(2 ml)wird in einem trockenen Kolben bei Raumtemperatur 40 h lang gerührt. Nach dem Verdünnen mit Hexan wird das Reaktionsgemisch filtriert. Das Filtrat wird eingedampft. Der Rückstand wird aus Methylenchlorid-Hexan umkristallisiert, wobei das gewünschte Produkt erhalten wird.
  • NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 1,64(s, 6H); 3,87(s, 2H); 7,38 (d, 2H); 8,28(d, 2H).
    • Teil B:
  • 28 mg(0,037 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)und Chlor-tert.-butyl-4- nitrophenylcarbonat(12,0 mg, 0,044 mM)in Pyridin(0,10 ml)werden über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Verdünnen mit Ethylacetat wird das Reaktionsgemisch mit 5%iger wäßriger Natriumbisulfatlösung gewaschen. Die organische Schicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das hierbei erhaltene Rohprodukt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel in Aceton- Hexan-Gemischen gereinigt.
  • NMR(CDCL&sub3; TMS): δ 0,82(s, 9H); 1,15(s, 3H); 1,26(s, 3H); 1,68(s, 3H); 1,84 (s+m, 4H); 2,25(s+m, 4H); 2,38(s, 3H); 2,52(m, 2H); 3,40(d, 1H); 3,61(d, 1H); 3,72(m, 1H); 3,79(d, 1H); 4,18(d, 1H); 4,29(d, 1H); 4,41(m, 1H); 4,66(m, 1H); 4,94(d, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,59(m, 1H); 5,66(d, 1H); 6,28(s+m, 2H); 7,30-7,70(m, 8H); 8,12(d, 2H).
  • ¹³C-NMR(CDCl&sub3;, TMS): 9,45, 14,74, 20,73, 21,79, 22,47, 26,09, 26,72, 31, 32, 35,46, 43,05, 45,50, 56,38, 58,45, 72,03, 73,47, 74,57, 75,42, 76,36, 79,02, 81,00, 84,28, 126,61, 128,09, 128,58, 128,79, 128,96, 130,11, 132,97, 133,61, 138,10, 141,97, 156,30, 166,91, 170,23, 171,14, 172,47, 203,50.
  • Massenspektrum(FAB)(m+H)&spplus; = 864. Hauptionen m/z 569, 551, 509, 327, 296, 250.
    • Herstellungsbeispiel 55
  • Herstellung von 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-N-(3- methyl-3-pentyl)urethan(10TA)
    • Teil A: Herstellung von 3-Methyl-3-pentyl-4-nitrophenylcarbonat
  • Ein Gemisch aus 3-Methyl-3-pentanol(0,62 ml, 5,0 mM), 4-Nitrophenylchlorformiat(1,01 g, 5,0 mM), THF(2 ml)und Pyridin(1 ml)wird bei Raumtemperatur 40 h lang gerührt. Nach Zusatz von Acetonitril(2 ml)wird das Rühren über Nacht fortgesetzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Methylenchlorid und Hexan verdünnt, filtriert und eingedampft. Das hierbei erhaltene Produkt wird auf Silicagel in Ethylacetat-Hexangemischen chromatographiert.
  • NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 0,95(t, 6H); 1,50(s, 3H); 1,90 (m, 4H); 7,35(d, 2H); 8,27(d, 2H).
    • Teil B:
  • 32 mg(0,043 mM)13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 24; 11A)und 3-Methyl-3-pentyl-4- nitrophenylcarbonat(12,5 mg, 0,047 mM)in Pyridin(0,15 ml)werden bei Raumtemperatur 60 h lang gerührt. Nach dem Verdünnen mit Ethylacetat wird das Reaktionsgemisch mit 5%iger wäßriger Natriumbisulfatlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das hierbei erhaltene Produkt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel in Aceton-Hexan-Gemischen gereinigt.
  • NMIR(CDCL&sub3;, TMS): δ 0,76(t, 6H); 1,15(s. 3H); 1,24(s,3H); 1,27(s,3H); 1,50-1,98 (3 s+m 12H); 2,25(s+m, 5H); 2,38(s, 3H); 2,53(m, 2H); 3,37(br. s,1H); 3,80(d,1H); 4,17(d, 1H); 4,30(d, 1H); 4,41(m, 1H); 4,64(m, 1H); 4,95(d, 1H); 5,29(m, 1H); 5,42(m. 1H); 5,66 (d, 1H); 6,24(m, 1H); 6,29(s 1H); 7,30-7,70(m, 8H): 8,11(d, 2H).
  • ¹³C-NMR(CDCl&sub3;, TMS): 7,61, 9,27, 14,58, 20,58, 21,63, 22,35, 22,58, 26,46, 30,18, 30,26, 35,15, 35,29, 42,91, 45,31, 55,68, 58,26, 71,88, 72,13, 73,27, 74,71, 75,29, 76,31, 78, 78, 80,79, 84,10, 84,95, 126.38, 127,77, 128,41, 128,58, 128,81, 129,90, 132,71, 133,41, 138,06, 142,03. 154,86, 166,70, 169,88, 171,00, 172,68, 203,40.
  • Massenspektrum(FAB):(m+H)+ = 878. Hauptionen m/z 794, 569, 527, 509, 345, 327.
    • Herstellungsbeispiel 56
  • Herstellung von N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenylisoerinmethylester(3K)
  • (2R,35)-β-Phenylisoserinmethylester(4,35 g, 22 mlvi) wird in 100 ml trockenem THF gelöst, worauf der Kolben auf 0ºC gekühlt wird. Dann wird die Lösung mit tert.-Butylisocyanat(2,8 ml, 25 mM)versetzt. Eine nach 15 min durchgeführte dünnschichtchromatographische Analyse zeigt noch etwas Ausgangsmaterial, so daß weitere 0,5 ml des Isocyanats zugegeben werden. Nach 1 h zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr, so daß das Lösungsmittel im Vakuum abgedampft wird. Hierbei bleibt N- (tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenylisoserinmethylester(3K) übrig.
  • Proton-NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 1,27(s,9H); 3,43(d,1H); 3,81(s,3H); 4,34(br.s,1H); 4,48(m,1H); 5,27(m,1H); 5,32(m,1H); 7,29(m,2H); 7,34(m,3H)
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend)Theoretisch für C&sub1;&sub5;H&sub2;&sub2;N&sub2;O&sub4;+H: 295, 1658 - Gefunden: 295, 1663.
    • Herstellungsbeispiel 57
  • Herstellung von(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Ka & 5Kb)
  • N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenylisoserinmethylester(68 mg, 0,23 mM; 3K, Herstellungsbeispiel 56)wird in 5 ml trockenem THF gelöst, worauf die Lösung mit 2,4-Dimethoxybenzaldehyddimethylacetal(70 mg, 0,33 mM)und Pyridinium-p-toluolsulfonat(6 mg, 0,02 mM)versetzt und dann auf Rückflußtemperatur erwärmt wird. Etwa 2 ml Lösungsmittel kochen dreimal innerhalb von 45 min weg, sie werden durch 2 ml frisches THF ergänzt. Zu diesem Zeitpunkt zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft. Der Verdampfungsrückstand wird über 7 g von in 1 : 1 EtOAc: Hexan gepacktem Silicagel chronnatographiert. Die Säule wird mit 80 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan, 45 rnl 1 : 2 EtOAc:Hexan, 30 ml 2 : 3 EtOAc:Hexan und 30 ml 1 : 1 EtOAc:Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 3 ml.
  • Ein weniger polares Isomer(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Ka)findet sich in den Fraktionen 21-31.
  • Proton-NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 1,19(s,9H); 3,82(s,3H); 3,85(s,3H); 3,89(s,3H); 4,68 (br.s,1H); 4,88(d,1H); 5,52(d,1H); 6,46(m); 6,70(s, 1H); 7,25-7,50(m).
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend): Theoretisch für C&sub2;&sub4;H&sub3;&sub1;N&sub2;O&sub6;+H: 443, 2182 - Gefunden: 443, 2172.
  • Ein stärker polares Isomer(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(5Kb)findet sich in den Fraktionen 33-42.
  • Proton NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 0,99(m,9H); 3,53(m,3H): 3,81(m,3H): 3,88(m,3H); 4,05(m, 1H); 4,55(m, 1H); 5,45(m,1H): 6,48(m,2H); 6, 79(m,1H); 7,25-7,25-7,50(m)
  • Massenspektrum(FAB-hochauflösend): Theoretisch für C&sub2;&sub4;H&sub3;&sub1;N&sub2;O&sub6;+H: 443, 2182 - Gefunden: 443, 2180.
    • Herstellungsbeispiel 58
  • Herstellung von(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Ka)und freie Säure(7Ka)
  • 100 mg(0,23 mM)des weniger polaren Isomers von (4S, 5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester(Herstellungsbeispiel 57, 5Ka)werden bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 3 ml MeOH verrührt und dann mit 0,1 ml Wasser und 43 mg(0,31 mM)Kaliumcarbonat versetzt. Nach 1 h zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr. Nach der Lagerung über Nacht im Kühlschrank wird am nächsten Morgen das Lösungsmittel abgedampft, wobei das(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Ka) erhalten wird.
  • Proton-NMR(d&sub6;-DMSO): δ 1,20(s, 9H): 3,51(s, 1H); 3,76(s, 3H); 3,96(s, 3H); 4,32(d, 2H); 4,80(s, 1H); 5,29(d, 1H); 6,60-6,68(m, 2H); 6,71(d, 1H); 7,26(d, 1H); 7,35(5, 1H); 7,45(t, 2H); 7,53(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 59
  • Herstellung von(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2- (2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-S--oxazolidincarbonsäure (7Ka)
  • (4S,5R)-N-(tert.-Butylamino carbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz(6Ka, Herstellungsbeispiel 58)wird zwischen Methylenchlorid und Wasser mit 0,9 ml 1 N HCl verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit Methylenchlorid rückextrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Hierbei erhält man(4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(7Ka)als weißen Feststoff.
    • Herstellungsbeispiel 60
  • Herstellung von 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-(tert.- butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäureester(9Ka.A)
  • (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure(1,07 mli, Herstellungsbeispiel 59, 71(a)wird in I,5 ml Methylenchlorid- 3 ml Toluol gelöst, worauf die Lösung mit 7-TES-Baccatin III(500 mg, 0,71 mM, 8A), DMAP(45 mg, 0,36 mli)und DCC (240 mg, 1,15 mM)versetzt wird. Nachdem das Reaktionsgemisch unter Sticktoff 1 h bei Raumtemperatur gerührt worden war, wird das gebildete Harnstoffnebenprodukt abfiltriert. Das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der hierbei angefallene Rückstand wird über Silicagel(80 g)chromatographiert. Eluiert wird mit 25-75 EtOAc-Hexan(200 ml)und 33-67 EtOAc-Hexan(1 l). Es werden Fraktionen von 20 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Die Fraktionen 28-47 enthalten das gewünschte Produkt. Sie werden miteinander vereinigt und eingedampft. Dabei erhält man den 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-(tert.-butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(9KaA)als weißen Feststoff.
  • Massenspektrum(FAB, M+H): Berechnet für C&sub6;&sub0;H&sub7;&sub9;N&sub2;O&sub1;&sub6;Si: 1111,5198 - Gefunden: 1111,5189.
    • Herstellungsbeispiel 61
  • Herstellung von 13-(N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III; N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyltaxol; 13-(β-Phenylisoserinyl)-baccatin-III-Ntert.-butylharnstoff(101(A)
  • Aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH wird eine 0,1 M HCl-Lösung hergestellt und vor Gebrauch 30 min lang stehengelassen.
  • 7-TES-Baccatin-III-13-(45, SR)-N-(tert.-butylaminocarbonyl)-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester(100 mg, Herstellungsbeispiel 60, 9KaA) wird unter Rühren und unter Stickstoff mit der zuvor zubereiteten methanolischen HOb-Lösung(0,5 ml)versetzt. Nach 45 min zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse, daß die Reaktion vollständig ist. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und 5% Natriumbicarbonatlösung verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit Ethylacetat rückextrahiert. Die organischen Schichten werden miteinander vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das erhaltene Rohprodukt wird über Silicagel(8 g) chromatographiert. Eluiert wird mit 33-67 Aceton-Hexan(70 ml)und 40-60 Aceton-Hexan(35 ml). Es werden Fraktionen von 2 ml aufgefangen und dünnschichtchromatographisch analysiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 18- 29. Diese werden miteinander vereinigt und eingedampft, wobei man 13-(N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenylisoserinyl)-baccatin III(10KA)als weißen Feststoff erhält. Die physikalischen Daten entsprechen denjenigen, die in Herstellungsbeispiel 46 erhalten wurden.
    • Herstellungsbeispiel 1A
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxylcarbonyl]taxol-7-methylxanthat
  • Methyliodid(1,3 Äquivalente)wird in eine gerührte Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol (1 Äquivalent)in Schwefelkohlenstoff eingetragen. Nach Zugabe von Natriumhydrid(2,1 Äquivalente)wird das erhaltene Gemisch gerührt und auf dünnschichtchromatographischem Wege auf die Bildung von Methylxanthat hin untersucht. Nachdem die Reaktion vollständig ist, werden der überschüssige Schwefelkohlenstoff und das überschüssige Methyliodid abgedampft. Der Rückstand wird zwischen Wasser und Ether verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei die Titelverbindung erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 2A
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-methansulfonat
  • Methansulfonylchlorid(1, 2 Äquivalente)wird in eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol (1 Äquivalent)und Pyridin(5 Äquivalente)in CH&sub2;Cl&sub2;, die bei Eisbadtemperatur gerührt wird, eintropfen gelassen. Das Reaktionsgemisch wird sich erwärmen gelassen und weitergerührt, bis eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß die Reaktion vollständig ist. Das Reaktionsgemisch wird mit Eiswasser abgeschreckt und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Die Extrakte werden nach und nach mit verdünnter wäßrige Säure, verdünnter wäßriger NaHCO&sub3;-Lösung und Wasser gewaschen und danach getrocknet, filtriert und eingeengt. Dabei erhält man das rohe Reaktionsprodukt. Dieses wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 3A
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-trifluormethylsulfonat
  • Trifluormethansulfonsäureanhydrid(1,3 Äquivalente) wird in eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl]taxol(1 Äquivalent)in Pyridin, die unter Kühlen auf -30ºC gerührt wird, eintropfen gelassen. Nachdem sich das Reaktionsgemisch erwärmen gelassen worden ist, wird es so lange weitergerührt, bis eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß die Reaktion vollständig ist. Die Reaktionslösung wird mit Eiswasser abgeschreckt und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Die CH&sub2;Cl&sub2;-Extrakte werden sukzessive mit kalter verdünnter wäßriger Säure, verdünnter wäßriger NaH- CO&sub3; und Wasser gewaschen und anschließend getrocknet, filtriert und eingeengt. Hierbei wird das rohe Reaktionspro dukt erhalten. Dieses wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 4A
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7- azidotaxol
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl]taxol-7-trifluormethylsulfonat(1 Äquivalent)in N,N-Dimethylformamid wird mit Kaliumazid(10 Äquivalente) verrührt. Das Reaktionsgemisch wird gerührt und erwärmt, bis eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß die Reaktion vollständig ist. Das Reaktionsgemisch wird mit kaltem Wasser abgeschreckt, worauf die erhaltene Lösung mit Ether extrahiert wird. Der Etherextrakt wird gründlich mit Wasser gewaschen, getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Eine Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel liefert die reine Titelverbindung.
    • Herstellungsbeispiel 5A
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl]-7-desoxy-7-azidotaxol in Ethanol wird mit einem 10% Palladium-auf-Kohle-Katalysator unter Wasserstoffatmosphäre verrührt. Nach der Reaktion wird der Katalysator abfiltriert. Das Filtrat wird eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Eine Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel liefert die reine Titelverbindung.
    • Herstellungsbeispiel 6A
  • Herstellung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'- [{(2,2,2-trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol, (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzyloxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]-oxy}benzolpropionsäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a, 3, 4, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-dodecahydro- 4,11-dihydroxy-4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7, 11-methano- 1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))(12BA)und N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2',7-bis{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}taxol,
  • (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzyloxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]-oxy}benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-4-{[(trichlorethoxy)carbonyl]oxy}- 2a, 3, 4, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-dodecahydro-11-hydroxy- 4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)).
  • Das für die Herstellung von 2'-Troc-Taxol von Magri et al. in "J. Org. Chem.", 1986, 51, 797 beschriebene Verfahren wird unter Verwendung von N--Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyltaxol(0,290 g, 0,328 mmol)und 2,2,2-Trichlorethylchlorformiat(59 ul, 0,091 g, 0,43 mmol)in CH&sub2;Cl&sub2;(11 ml) mit Pyridin(1,6 ml)nachgearbeitet. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt(0,340 g)über Silicagel(40-63 um, Merck-Säule der Größe B)unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;- Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und von 40% EtOAc-Hexan(90 Fraktionen), 60% EtOAc-Hexan(30 Fraktionen)und EtOAc zum Eluieren der Säule chromatographiert. Es werden Fraktionen von 8 ml aufgefangen. N-Debenzoyl-Nbenzyloxycarbonyl-2',7-bistroc-taxol(0,053 g, 13%)eluiert in die Fraktionen 14-23. Ausgangsmaterial(0,014 g, 5%) findt sich in den Fraktionen 139-143. Das gewünschte N- Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-troc-taxol(12BA)(0,248 g, 0,234 mmol, 71%)eluiert in den Fraktionen 49-80 und ist durch die folgenden Spektraldaten gekennzeichnet:
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;; TMS)δ 8,15(d, 2H, aromatisch), 7,62(t, 1H, aromatisch), 7,52(t, 2H, aromatisch), 7,30-7,50(m, 5H, aromatisch), 7,17(m, 2H, aromatisch), 6,26(m, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,25(s,1H, H&sub1;&sub0;), 5,71(m, 1H, -NH-), 5,67(d, 1H, H&sub2;), 5,58(m, 1H, H&sub3;), 5,41(d, 1H, H&sub2;,), 5,08(d, 1H, PhCHaHO-), 4,96(d, 1H, PhCHBbO-), 4,94(m, 1H, H5), 4,79(d, 1H, -OCHaHCCl&sub3;), 4,68(d, 1H, J=11,8 H&sub2;, -OCHHbCCl&sub3;), 4,42(m, 1H, H7), 4,31(d, 1H, H20a), 4,18(d, 1H, H20b), 3,78 (d, 1H, H&sub3;), 2,55(m, 1H, H6a), 2,47(m, 1H, H, H14a), 2,45(s, 3H, -CH&sub3;), 2,31(m, 1H, H14b), 2,24(s, 3H, -CH&sub3;), 1,92(m, 1H, H6b), 1,86(s, 3H, -CH&sub9;, 1,68(s, 3H, -CH&sub3;), 1,23(s, 3H, CH&sub3;), 1,14(s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum 1058, 569, 551, 509, 105, 91 m/z.
    • Herstellungsbeispiel 7A
  • 10-Deacetyltaxol
  • Eine Lösung von Taxol(0,026 g, 0,030 mmol)und 98% Hydrazin(0,035 g, 1,1 mmol)in 95%igem Ethanol(1,0 ml) wird bei Raumtemperatur 2 h lang verrührt. Danach wird die Lösung in Wasser und Ether gegossen. Das Gemisch wird gründlich geschüttelt, worauf die Schichten getrennt werden. Die wäßrige Schicht wird mit weiterem Ether extrahiert. Die vereinigten Etherextrakte werden über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei 0,021 g Titelverbindung erhalten werden. Das ¹H-NMR-Spektrum in CDCl&sub3; ist mit dem für 10-Deacetyltaxol veröffentlichten Spektrum (I. Ringel und S. B. Horwitz in "J. Pharmacol. Exp. Ther.", 1987, 242, 692)und mit dem Spektrum einer authentischen Probe identisch.
    • Herstellungsbeispiel 8A
  • 10-Deacetylbaccatin III
  • Durch Erwärmen eines Gemischs aus Baccatin III(0,024 g, 0,041 mmol)in 95%igem Ethanol(1,0 ml)wird eine Lösung zubereitet. Diese wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit 98%igem Hydrazin(0,035 g, 1,1 mmol)versetzt und 24 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Danach wird die Lösung in Wasser/Ether gegossen. Nach gründlichem Schütteln der Mischung werden die Schichten getrennt. Die Etherschicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet(Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei 0,010 g der Titelverbindung erhalten werden. Das ¹H-NMR-Spektrum in CDCl&sub3;(kaum löslich)ist mit demjenigen einer authentischen Probe von 10-Deacetylbaccatin III identisch.
    • Herstellungsbeispiel 9A
  • 7-Desoxy-M6,7-baccatin III
  • Das in Beispiel 1 zur Umsetzung von 2'-Troc-Taxol mit MethylDAST beschriebene Verfahren wird unter Verwendung von Baccatin III nachgearbeitet. Nach dem Aufarbeiten des Reaktionsgemischs wird das Rohproduktgemisch durch Mitteldruckchromatographie über Silicagel getrennt, wobei die Titelverbindung erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 10A
  • N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-2'- triethylsilyltaxol
  • N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}- taxol,((13-[N-2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-β-phenylisoserinyl]-baccatin III; 10DA, Herstellungsbeispiel 28))wird durch Umsetzen mit Triethylsilylchlorid in Pyridin mit einer katalytischen Menge 4-Dimethylaminopyridin selektiv silyliert. Die Reaktion wird durch Eingießen des Reaktionsgemischs in Eiswasser abgebrochen. Extrahiert wird mit CH&sub2;Cl&sub2;. Der Extrakt wird getrocknet, filtriert und eingeengt. Das hierbei erhaltene Rohprodukt wird durch Silicagelchromatographie gereinigt, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 11A
  • N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)-oxy]carbonyl}-2'- triethylsilyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol
  • Entsprechend den Maßnahmen des Beispiels 1 wird N- Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)-oxy]carbonyl}-2'- triethylsilyltaxol(Herstellungsbeispiel 10A)mit MethyIDAST in CH&sub2;Cl&sub2; reagieren gelassen. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Reaktionsgemisch getrennt und chromatographisch gereinigt, wobei N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethoxy)oxy]carbonyl}-2'-triethylsilyl-7-desoxy-7-fluortaxol, N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}- 2'-triethylsilyl-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol und die Titelverbindung erhalten werden.
    • Herstellungsbeispiel 12A
  • N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7- desoxy-Δ6,7-taxol(16C)
  • Eine Lösung von N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyll-2'-triethylsilyl-7-desoxy-Δ6,7-taxol in Essigsäure-H&sub2;O-Tetrahydrofuran(1 : 11)wird bei Raumtemperatur so lange gerührt, bis die Entfernung der Silylgruppe vollständig ist. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Reaktionsprodukt einer Silicagelchromatographie unterworfen, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Herstellungsbeispiel 13A
  • N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-([(2,2,2- trichlorethyl)oxy]carbonyl}taxol. A(Verbindung 12DA); (({2aR[2aα,4β,4aβ,6β,9α(αR*,βS*)-,11α,12α,12aα,12bα]}-β- (tert.-Butyl)oxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)- carbonyl]oxy}benzolpropionsäure--6, 12-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a, 3, 4, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-dodecahydro- 4,11-dihydroxy-4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7, 11-methano- 1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)), und N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxyca rbonyl-2',7-bis{[(2,2,2- trichlorethyl)oxy]carbonyl}taxol,
  • (((2aR- [2aα,4β, 4aβ, 6β, 9α,(αR*, βS*), 11α, 12α, 12aα, 12bα] }-β- [tert.-Butyloxycarbonyl-amino]-α-[((2,2,2-trichlorethoxy)- carbonyl}-oxy]benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-4-([(trichlorethoxy) carbonyl] oxy}- 2a, 3, 4, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-dodecahydro-11-hydroxy- 4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7, 11-methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Entsprechend den Maßnahmen für die Herstellung von 2'- Troc-Taxol(Magri et al. in "J. Org. Chem.", 1986, 51, 797), jedoch ausgehend von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyltaxol(Verbindung 10BA; 1,98 g, 2,33 mmol)und 2,2,2-Trichlorethylchlorformiat(405 ul, 0,622 g, 2,94 mmol)in CH&sub2;Cl&sub2;(80 ml)wird das Produkt 12DA hergestellt. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt über Silicagel (40-63 um, 37 · 350 mm, 190 g)unter Verwendung einer CH&sub2;Ol&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und von 40% EtOAc-Hexan(63 Fraktionen)und anschließend 75% EtOAc-Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert. Es werden Fraktionen von 45 ml aufgefangen. N-Debenzoyl-N- (tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-7-bistroc-taxol(0,140 g)eluiert in Fraktion 6. Ausgangsmaterial(0,192 g)findet sich in den Fraktionen 70-78. Das gewünschte N-Debenzoyl-N- (tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-tro c-taxol(Verbindung 12DA) eluiert in den Fraktionen 18-38 und ist durch folgende Spektraldaten gekennzeichnet:
  • ¹H-NMR(CDCl&sub3;. TMS)δ 8,12(d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,62(t, 1H. J = 7,2 Hz), 7,51(t, Mi, J = 7,7 Hz), 7,30-7,44(m, 5H), 6,30(s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,30(t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,68(d, 1H, J = 7,1 Hz, H&sub2;). 5,48(d, 1H, -NH- oder H3'), 5,44(d,1H, H&sub3;, oder -NH-), 5,36(d, 1H, J = 2,2 Hz,H&sub2;), 4,98(d, 1H. J = 9,3 Hz, H&sub5;), 4,79(d, 2H, J = 11,9 Hz, 2-Troc-Ha), 4,70(d, 2H, J = 11,8 Hz, 2'-Troc-Hb), 4,44(m, 1H, H&sub7;), 4,32(d, 1H,J = 8,4 Hz, H20a), 4,18(d, 1H, J = 8,4 Hz, H20b), 3,82(d, 1H, J = 6,8 Hz, H&sub3;)
    • Herstellungsbeispiel 14A
  • 2'-Triethylsilyl-taxol-7-methylxanthat
  • 500 mg(0,52 mM)2'-Triethylsilyl-taxol werden in 5 ml destilliertem THF gelöst, worauf die Lösung mit 50 ul(0,80 mM)Methyliodid und 155 ul(2,58 mM)Schwefelkohlenstoff versetzt wird. Es wird eine Aufschlämmung von 40 mg(60% Natriumhydrid in Öl)in destilliertem THF zubereitet und etwa die Hälfte zugegeben. Das erhaltene Gemisch wird gerührt und auf dünnschichtchromatographischem Wege auf die Bildung des Methylxanthats hin untersucht. Nach 0,5 h wird der Rückstand zwischengesättigter NHqCl-Lösung und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und eingeengt, wobei die Titelverbindung erhalten wird. Das Produkt wird durch Säulenchromatographie unter Verwendung von 60 g Silicagel in 1 : 4 EtOAc-Hexan gereinigt. Die Zugabe des Produkts erfolgt unter Verwendung von Methylenchlorid. Die Säule wird mit 400 ml 1 : 4, 400 ml 1 : 3 und 300 ml 1 : 2 EtOAc:Hexan eluiert. Die aufgrund einer dünnschichtchromatographischen Analyse als produkthaltig identifizierten Fraktionen werden vereinigt und eingedampft, wobei 2'-Triethylsilyl-taxol-7-methylxanthat als weißer Feststoff erhalten wird.
  • Dünnschichtchromatographie: Silicagel 60; 33% EtOAc- 67% Hexan; Rf-Wert: 0, 40.
  • NMR(CDCl&sub3;, TMS): δ 0,44(m, 6H); 0,81(m); 1,19(s, 3H); 1,22(s,3H); 2,16(s, 3H); 2,48(s, 3H); 2,58(s, 3H); 2,94(m, 1H); 4,03(d, 1H); 4,25(d, 1H); 4,37(d, 1H); 4,70(s, 1H); 5,00(d, 1H); 5,73(m,2H); 6,28(m, 1H); 6,32(s, 1H); 6,40(im 1H); 7,11(d, 1H); 7,30- 7,65(m); 7,75(d,2H); 8,15(d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel 15A
  • 2'-TES-Taxol-7-trifluormethansulfonat
  • Eine Lösung von 2'-Triethylsilyltaxol [0,10 g; Chaudhary et al. in "J. Org. Chem.", 1993, 58, 3798] und trockenem Pyridin(0,29 ml)in CH&sub2;Cl&sub2;(4 ml)wird auf -20ºC gekühlt und mit Trifluormethansulfonsäureanhydrid (0,17 ml)versetzt. Die Lösung wird gerührt und sich auf etwa -10ºC erwärmen gelassen. Nach 3 h wird das Reaktionsgemisch mit gesättigter NH&sub4;Cl-Lösung versetzt und mit EtOAc extrahiert. Die organische Extraktlösung wird mit verdünnter wäßriger NaHSO&sub4;-Lösung und mit gesättigter NaHCO&sub3;- Lösung gewaschen und über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet, filtriert und bei Raumtemperatur eingeengt. Das rohe Reaktionsprodukt wird über Silicagel(flash-)chromatographiert. Eluiert wird die Säule unter Verwendung von 30% EtOAc in Hexan. Es werden Fraktionen des Volumens von 5 ml aufgefangen. Die Fraktionen(4-10), die das gewünschte Produkt enthalten, werden miteinander vereinigt und liefern die Titelverbindung (0,094 g).
  • Die folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung weiter veranschaulichen.
    • Beispiel 1 Herstellung von:
  • 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7- fluortaxol(Verbindung 13AA; III),
  • (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]- oxy}benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a, 3, 9, 4a, 5, 6, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b-dodecahydro-4-fluor-11- hydroxy-4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1Hcyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)
  • 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]ca rbonyl}-7-desoxy-7β,8βmethanotaxol(Verbindung 14AA),
  • (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]oxy]- benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a, 3, 4, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-dodecahydro-11-hydroxy- 8,13, 13-trimethyl-5-oxo-4,4a; 7, 11-bismethano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))und
  • 2' - { [(2, 2, 2-Trichlorethyl)oxy] carbonyl } -7-desoxy-Δ6,7-taxol (Verbindung 15AA),
  • (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]-oxy)- benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-doclecahydro-11-hydroxy- 4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7, 11-methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Dimethylaminoschwefeltrifluord(MethylDAST)(250 ul, 0,340 g, 2,56 mmol)wird auf einmal mittels einer Spritze in eine gerührte und gekühlte(Aceton-Trockeneis-Bad-) Lösung von 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}taxol (12AA)[N. F. Magri, D. G. Kingston in "J. Org. Chem.", 1986, 51, 797](1,60 g, 1,55 mmol)in CH&sub2;Cl&sub2;(180 ml)eingetragen. Nach Entfernen des Kühlbades darf sich der Reaktionsbehälter auf Raumtemperatur erwärmen. Die Reaktionsmischung wird gerührt. Aufgrund einer dünnschichtchromatographischen Analyse hat sich gezeigt, daß das Ausgangsmaterial innerhalb von 70 min vollständig verbraucht ist. Die Reaktion wird durch Zusatz von Wasser abgebrochen, worauf das Reaktionsgemisch mit Hilfe von weiterem CH&sub2;Cl&sub2; in einen Scheidetrichter überführt wird. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht einmal mit Wasser gewaschen, getrocknet(Na&sub2;SO&sub4;), filriert und eingeengt, wobei ein weißer Feststoff(1,65 g)erhalten wird. Der Rückstand wird über Silicagel(40-63 um, 195 g in einer 3,7 · 35-cm Säule; es werden Fraktionen von 40 ml aufgefangen)unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation auf die Säule und von 25% Aceton in Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert.
  • Die Fraktionen 32-39 enthalten ein Gemisch aus mindestens zwei Verbindungen.
  • Die Fraktionen 40-42 enthalten ein Gemisch, welches etwas Verbindung 14AA enthalten kann.
  • Die Fraktionen 43-49(0,391 g)enthalten vornehmlich die Verbindung 14AA(Rf-Wert: 0,22 in 30% Aceton-Hexan)zusammen mit zwei Komponenten in untergeordneter Menge.
  • Die Fraktionen 50-54 enthalten 0,162 g eines Gemischs aus 14AA und 13AA. Dieses Gemisch wird erneut über Silicagel(Säule Lobarº, Größe B, von Merck, es werden Fraktionen von 8 ml aufgefangen)unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2; zur Applikation auf die Säule und von 25% Aceton-Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert.
  • Die Fraktionen 58-70 enthalten 0,056 g 14AA. Dieses wird mit den genannten 0,391 g aus den Fraktionen 43-49 kombiniert (Pool A) (insgesamt 0,447 g).
  • Die Fraktionen 76-92 enthalten 0,053 g 13AA.
  • Eine der beiden in untergeordneter Menge vorkommenden Komponenten des Pools A wird abgetrennt und durch erneutes Chromatographieren des Gemischs über Silicagel (zwei Säulen Lobar®, Größe B, von Merck, es werden Fraktionen von 9 ml aufgefangen) als reine Verbindung gewonnen. Das Gemisch wird auf die Säule in CH&sub2;Cl&sub2; aufgegeben. Die Säule wird mit 25% EtOAc-Hexan bis Fraktion 72, 30% EtOAc-Hexan bis Fraktion 180 und danach mit 40% EtOAc-Hexan eluiert. Die Fraktionen 164-180 enthalten die reine, in ungeordneter Menge vorliegende Komponente, die auf der Basis der folgenden Analysedaten als 15AA charakterisiert wird:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,18 (dd, 2H, J = 1,5, 7,0 Hz), 7,76 (dd, 2H, J = 1,5, 7,0 Hz), 7,63 (t, 1H), 7,48-7,55 (m, 3H), 7,35-7,45 (m, 7H), 6,92 (d, 1H, J = 9,4 Hz, -CONH-), 6,37 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,23 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,02-6,10 (m, 2H, H3', H&sub6;), 5,86 (Paar von d, 2H,J = 9,6 HZ, H&sub2;, H&sub7;), 5,53 (d, 1H, J = 2,7 Hz, H&sub2;.), 5,12 (d, 1H, J = 5, 6 Hz, H&sub5;), 4,77 (dd, 2H, J = 15,4, 11,8 Hz,Troc-CH&sub2;-), 4,46 (d, 1H, J = 8,3 Hz, H20a), 4,32 (d, 1H, J = 8,2 Hz. H20b), 4,02 (d, 1H, J = 6,5 Hz, H&sub3;, 2,48 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,45 (m, 1H, H14a), 2,24 (m, 1H, H14b), 2,22 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,87 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,84 (d, 3H, J = 1,7 Hz, -CH&sub3;), 1,24 (s, 3H, -CH), 1,15 (s, 3H, - CH&sub3;);
  • FAB-Massenspektrum: 1010, 2357, C&sub5;&sub0;H&sub5;&sub0;Cl&sub3;NO&sub1;&sub5; + H&sub1; erfordert 1010,1324, 551, 460, 442, 210, 105 m/e.
  • Die Fraktionen 195-215 (0,373 g) enthalten 14AA und die zweite Komponente in untergeordneter Menge. Diese wird bis zur Entfernung der Troc-Schutzgruppen nicht abgetrennt. Trotz der Anwesenheit der Komponente in untergeordneter Menge bildet die Verbindung 14AA beim langsamen Verdampfen des Lösungsmittels schöne Kristalle. Die folgenden Spektraldaten werden aufgezeichnet:
  • Das FAB-Massenspektrum liefert Peaks bei 1012, 1010, 551, 533, 511, 491, 460 und 442 Masseeinheiten;
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,19 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,71 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,59 (t, 1H),7,48 (m), 7,36 (m), 6,98 (d, 1H, -NH-), 6,57 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,28 (t, 1 H, J = 8,7 Hz, H&sub1;&sub3;), 6,08 (dd, 1H, J = 9,5, 2,7 Hz, H&sub3;.), 5,67 (d, 1H, J = 7,6 Hz, H&sub2;). 5,54 (d, 1H, J = 2,8 Hz, H&sub2;.), 4,77 (dd, 2H, 2'Troc-CH&sub2;-), 4,74 (1H, H&sub5;), 4,32 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20a), 4,09 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20b), 4,07 (1H, H&sub3;), 2,47 (s. 3H, -CH&sub3;), 2,23 (dd, 1H, JH-7 =9,9Hz,JH19-a = 5,3 Hz, H19b), 2,19 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,90 (d, 3H. J = 1,3 Hz, -CH&sub3;), 1,67 (dd, 1H, JH-7 = 7,2. JH-19a = 5,3 Hz, H19b), 1,38 (m, 1H, H&sub7;), 1,26 (s, 3H,-CH&sub3;) 1,21 (s, 3H, -CH&sub3;); ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 201,88, 169,64, 169,59, 167,45, 167,03, 166,96, 153,24, 140,41, 136,43, 133,89, 133,61, 133,36, 132,05, 130,31, 129,25, 129,15, 129,07, 128,95, 128,75, 128,68, 128,59, 127,17, 126,49, 93,82, 84,83, 80,11, 79,56, 79,47, 77, 78, 77,23, 75,66, 75,41, 72,17, 52,58, 42,85, 38,57, 35,93, 35,04, 32,26, 26,05, 22,30, 21,60, 20,83, 15,82, 146 ppm.
  • Die Fraktionen 55-65 (0,480 g) enthalten die reine
  • Verbindung 13AA. Zusammen mit der aus dem erneuten Chromatographieren der Mischfraktionen erhaltenen Verbindung 13AA erhält man 13AA als farblosen kristallinen Feststoff.
  • Rf-Wert: 0,19 in 30% Aceton-Hexan;
  • Das FAB-Massenspektrum liefert Peaks bei 1034, 1032, 1030, 571, 511, 460, 442, 210 und 105 Masseeinheiten;
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,18 (dd, 2H, J = 7,0, 1,5 Hz), 7,76 (dd, 2H, J = 7,0, 1,5 Hz), 7,62 (t, 1H), 7,50 (m), 7,43 (m), 6,95 (d, 1H, -NH-), 6,57 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,27 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,08 (dd, 1H,J = 9,5, 2,6 Hz, H3'), 5,78 (d, 1H J = 7,3 Hz, H&sub2;), 5,55 (d, 1H, J = 2,7 Hz, H&sub2;.), 5,05 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H&sub5;), 4,78 (d, 1H, J = 11,8 Hz, H20a), 4,74 (d, 1H, J = 11,8 Hz, H20b), 4,48 (dd, 1H, JF = 48 Hz, H&sub7;), 4,40 (d, 1 H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,31 (d, 1 H, J = 8,2 Hz. H20b), 4,04 (d, 1H, 7,2 Hz, H&sub3;), 2,63-2,45 (m), 2,49 (s, 3H), 2,27-2,10 (m), 2,20 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) und 1,17 (s, 3H); ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 206,0, 169,9, 168,8, 167,2, 167,17, 153.,2, 140,9, 136,4, 133,7, 133,5, 132,1, 130,3, 129,3, 129,2, 128,8, 128,7, 128,6, 127,2, 126,5, 96,2, 93,9, 81,9, 80,8, 78,8., 77,9, 77,8, 77,4, 77,2, 75,0, 72,1, 56,8 (d, J = 18 H&sub2;), 52,7, 42,7, 40,1, 35,7, 33,9, 33,6, 25,8. 22,6, 21,3, 20,8, 14,6, 14,4 ppm.
    • Beispiel 2
  • Herstellung von 7-Desoxy-Δ6,7-taxol (Verbindung 16A), (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-hydroxybenzolp ropansäure-6, 12b-bis- (acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b- dodecahydro-11-hydroxy-4a,8, 13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11- methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Eine Lösung von 2'-([(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbo- nyl } -7-desoxy-Δ6,7-taxol (15AA, 0,010 g, 0, 0099 mmol) in MeOH-HOAc (9/l, 2,0 ml) wird mit aktiviertem Zink (24 mg
  • plus 50 mg zusätzlich im Laufe der Reaktion) entschützt. Nach dem Aufarbeiten und Chromatographieren des Rohprodukts über Silicagel (40% EtOAc in Heaan) erhält man weniger als 1 mg weniger polare Substanzen und das stärker polare gewünschte Produkt 16A (6,0 mg, 0,0072 mmol) als weißen Feststoff.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,17 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 7,64 (t, 1H), 7,36-7,55 (m,10H, aromatische Protonen), 7,02 (d, 1H, -NH-), 6,21 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,20 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,06 (dd, 1H. H&sub6; oder &sub7;), 5,87 (d,1H, H&sub3;,), 5,83 (m, 2H, H&sub2; ind H&sub6; oder&sub7;), 5,10 (d, 1H, H&sub5;), 4,79 (d, 1H, H&sub2;.), 4,44 (d, 1H. H20a), 4,32 (d, 1H, H20b), 4,00 (d, 1H, H&sub3;), 2,39 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,23 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,87 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,70 (s, 3M, CH&sub3;), 1,24 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,16 (s, 3H, -CH&sub3;).
    • Beispiel 3
  • Herstellung von
  • N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-7-fluortaxol (13BA), (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12αα,12bα]}-β- (Benzyloxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)- carbonyl]-oxy}benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy) -2a, 3, 4, 4a, 5, 6, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b-dodecahydro- 4-fluor-11-hydroxy-4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11- methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)); N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (14BA), (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzyloxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbo- nyll -oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a, 3, 4, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12a, 12b-dodecahydro- 11-hydroxy-8, 13, 13-trimethyl-5-oxo-4,4a; 7,11-bismethano-1H- cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)), und N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl.-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-A6,7-taxol (Verbindung 15BA), (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-([(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]- oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis (acetyloxy)-12-(benzoyloxy) - 2a, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12α, 12b-dodecahydro-11-hydroxy- 4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclo- deca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl--ester)) Die zur Behandlung von 2'-Troc-Taxol mit MethylDAST beschriebenen Maßnahmen (Beispiel 1) werden unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-troc-taxol (12BA, Herstellungsbeispiel 6A; 0,223 g, 0,21 mmol) und Dimethylaminoschwefeltrichlorid (MethylDAST, 49 ul, 0,066 g, 0,50 mmol insgesamt, zugesetzt in zwei Portionen) in CH&sub2;Cl&sub2; (20 ml) unter N&sub2; bei -78ºC nachgearbeitet. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Reaktionsproduktgemisch (0,211 g, weißer Feststoff) über Silicagel (40-63 um, zwei Säulen, Größe B, von Merck) unter Verwendung einer CH&sub2;O&sub1;&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und von 25% Aceton-Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert. Es werden Fraktionen eines Volumens von 8 ml aufgefangen. Die Fraktionen 107-118 enthalten ein Gemisch aus zwei Komponenten (0,065 g), die - wie später beschrieben werden wird im Rahmen einer zweiten Chromatographie getrennt werden.
  • Die Fraktionen 128-140 enthalten die Verbindung 13BA (0,081 g, 0,076 mmol, 36%> . Diese ist durch die folgenden Spektraldaten gekennzeichnet:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS) δ 8,16 (d, 2H, J = 7,2 Hz, aromatisch), 7,63 (t, 1H, J = 7,5 H&sub2;, aromatisch), 7,53 (t, 2H, J = 7,6 Hz, aromatisch), 7,30-7,45 (m, 5H, aromatisch), 7,24 (m, aromatisch), 7,12-7,19 (m, 2H, aromatisch), 6,56 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,24 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,74 (d, 1H, J = 7,4 Hz, H&sub2;), 5,74 (1H, -NE-), 5,62 (d, 1H, H&sub3;.), 5,44 (d, 1H, H&sub2;t), 5,09 (d, 1H, J = 12,5 Hz, PhCHaHO-), 5,03 (d, 1H, H&sub5;), 4,97 (d, 1H, PhCHHbO-), 4,77 (d, 1H, J = 11,9 Hz, -OCHaHCCl&sub3;), 4,68 (d, 1H, J = 11,9 Hz, -OCHHbCCl&sub3;), 4,56 (dd, 1H, JF = 50 Hz, H&sub7;), 4,37 (d, 1H, H&sub2;Oa), 4,30 (d, 1H, H&sub2;&sub0;b), 4,00 (d, 1H, J = 7,3 Hz, H&sub3;, 2,57 (m, 1H, H6a), 2,46 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,40 (m, 1H, H14a), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,15 (m, 1H, H14b), 1,89 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,85 (m, 1H, H6b), 1,74 (s, 3H, CH&sub3;), 1,19 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,16 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum (FAB): 1060,2466, C&sub5;&sub1;H&sub5;&sub3;C&sub1;&sub3;FNO&sub1;&sub6; + H erfordert 1060,2492, 571, 553, 511, 472, 389, 347, 329, 105, 91 m/z.
  • Gepoolte Fraktionen 107-118 (0,065 g) aus der vorhergehenden Säule werden erneut über Silicagel (40-64 um, eine Säule, Größe B, von Merck) unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2; zur Applikation auf die Säule und 10% MeCN-CH&sub2;C12 zum Eluieren der Säule chromatographiert. Es werden Fraktionen ei nes Volumens von 8 ml aufgefangen. Die Fraktionen 55-70 enthalten 0,011 g (5%) der Verbindung 15BA.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS) δ 8,17 (dd, 2H, J = 7,2, 1,3 Hz aromatisch), 7,63 (t, 1H, J = 7,3 Hz, aromatisch), (t, 2H, aromatisch), 7,32-7,46 (m, 5H, aromatisch), 7,28 (m, aromatisch), 7,15-7,22 (m, 2H, aromatisch), 6,25 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,21 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,05 (dd, 1H, J = 9,9, 5,7 Hz H&sub5;), 5,85 (d, 1H, J = 9,7 Hz, H&sub7;), 5,83 (d, 1H, H&sub2;), 5,75 (d, 1H, J = 9,7 Hz, -NH-), 5,57 (d, 1H, 1-9,8 Hz, H&sub3;), 5,40 (d, 1H, J = 2,7 Hz, H2,), 5,10 (d, 1H, J = 5,7 Hz, H&sub5;), 5,09 (d, 1H, J = 12,4 Hz, ArCHaHO-), 4,97 (d, 1H, J = 12,5 Hz, ArCHHbO-), 4,77 (d, 1H, J = 11,8 Hz, -OCHaHCCl&sub3;), 4,67 (d, 1H, J = 11,8 Hz, -OCHHbCCl&sub3;), 4,43 (d, 1H, J = 8,3 Hz, H&sub2;&sub0;a), 4,31 (d, 1H, J = 8,3 H&sub2;, H&sub2;&sub0;b), 3,99 (d, 1H, J = 6,6 Hz, H&sub3;), 2,46 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,36 (m, 1H, H14a), 2,23 (s, 3H, - CH&sub3;), 1,93 (m, 1H, H14b), 1,87 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,81 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,24 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,14 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum (FAB): 1040, 2446, C51H52C13NO16 + H erfordert 1040,2430, 551, 491, 369, 327, 105 m/z.
  • Die Fraktionen 96-120 enthalten 0,043 g (0,041 mmol, 20%) Verbindung 14BA:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS) δ 8,17 (d, 2H, J = 7, 1 Hz, aromatisch), 7,59 (t, 1H, aromatisch), 7,52 (t, 2H, aromatisch), 7,31-7,46 (m, 5H, aromatisch), 7,24 (m, aromatisch), 7,09 (m, 2H, aromatisch), 6,32 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6, 28 (t, 1H, J = 8,6 H&sub2;, H&sub1;&sub3;), 5,75 (d, 1H, J = 10,0 Hz, -NH-), 5,64 (d, 1H, J = 7,8 Hz, H&sub2;), 5,59 (d, 1H, H&sub3;), 5,41 (d, 1H, J = 2,6 Hz, H&sub2;,), 5,00 (d, 1H, J = 12,5 Hz, ArCHaHO-), 4,91 (d, 1H, J = 12,6 Hz, ArCHbO-), 4,76 (d, 1H, J = 9,8 Hz, -OCHaCCl&sub3;), 4,73 (d, 1H, H&sub5;), 4,68 (d, 1H, J = 9,9 Hz, -OCHHbCCl&sub3;), 4,30 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub2;&sub0;a), 4,07 (d, 1H, H&sub3;), 4,05 (d, 1H, H&sub2;&sub0;b), 2,50 (m, 1H, H14a), 2,43 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,36 (m, 1H, H6a), 2,24 (m, 1H, H19a), 2,20 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,10 (d, 1H, J = 16,1 Hz, H14b), 1,88 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,66 (m, 1H, H19b), 1,38 (m, 1H, H&sub7;), 1,26 (s, 3H, -CH), 1,21 (s, 3H, -CH&sub3;); Massenspektrum (FAB) 1040, 2416, C&sub5;&sub1;H&sub5;&sub2;C&sub1;&sub3;NO&sub1;&sub6; + H erfordert 1040,2430, 980, 962, 551, 491, 369, 105, 91 m/z.
    • Beispiel 4 Herstellung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-7-desoxyΔ6'7-taxol (Verbindung 16B)
  • Nach den in Beispiel 2 beschriebenen Maßnahmen wird N-
  • Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-Δ6'7-taxol (Verbindung 15BA, Beispiel 3) entschützt. Nach der Entschützung mit aktiviertem Zink in MeOH/HOAc (9 : 1) wird das isolierte Rohprodukt durch Chromatographieren über Silicagel gereinigt, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Beispiel 5
  • Herstellung der Verbindung 15AA aus 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonylltaxol-7-(methyl)xanthat (Herstellungsbeispiel 1A)
  • 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}-taxol-7- (methyl)xanthat (Herstellungsbeispiel 1A) wird in einen Rundkolben eingetragen. Dieser wird dann unter N2-Atmosphäre in einem Ölbad auf eine Temperatur von 150-225ºC erwärmt. Das Rohprodukt aus dieser Pyrolyse wird durch Säulenchromatographie gereinigt, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Beispiel 6 Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-Δ6'7-taxol (Verbindung 15AA) aus 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol (Herstellungsbeispiel 5A)
  • Eine eiskalte Lösung von Natriumnitrit (1,5 Äquivalente) wird portionsweise in ein kräftig gerührtes, eiskaltes zweiphasiges Gemisch einer Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol (1 Äquivalent) in Ether und einer Schwefelsäurelösung in Wasser eingetragen.
  • Nach beendeter Zugabe wird das Gemisch bei Eisbadtemperatur einige h lang gerührt. Danach wird überschüssige salpetrige Säure durch Zusatz einer wäßrigen Harnstofflösung beseitigt. Die wäßrige Phase des Gemischs wird durch sorgfältige Zugabe von Natriumcarbonat auf einen nahezu neutralen pH- Wert gebracht. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Phase mit weiterem Ether weiter extrahiert. Die vereinigten Etherextrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt: erhalten wird. Beim Chromatographieren des Rohprodukts über Silicagel erhält man die reine Verbindung 15AA.
    • Beispiel 7 Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-Δ6'7-taxol (Verbindung 15AA) aus 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl) oxy}carbonyl] -taxol--7-trifluormethylsulfonat (Herstellungsbeispiel 3A)
  • Eine Lösung von 2'-[[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]-carbonyl]taxol-7-trilfuormethylsulfonat in 80% Ethanol-Wasser wird erwärmt. Die Reaktion wird auf dünnschichtchromatographischem Wege überwacht. Nachdem sie beendet ist, wird die Reaktionslösung mit Natriumbicarbonat neutralisiert. Überschüssiges Ethanol wird unter vermindertem Druck entfernt.
  • Die wäßrige Phase wird mit Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Das Rohprodukt wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Verbindung 15AA erhalten wird.
    • Beispiel 8 Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6'7- baccatin III (16D) aus 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy- Δ6'7-baccatin III (17)
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen von Herstellungsbeispiel 31 [Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6'7-baccatin III (10BA)], jedoch ausgehend von 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6'7-baccatin III (17) wird 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-Δ6'7- baccatin III (16D) hergestellt.
    • Beispiel 9 Herstellung von 10-Deacetyl-13-(N-Boc-β-phenylisoserinyl)- 7-desoxy-Δ6'7-baccatin III (16E)
  • Eine Lösung von 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-A6'7-baccatin III (16D, Beispiel 8) (0,010 g) und 98% Hydrazin (0,050 g) in 95%igem Ethanol wird bei Raumtemperatur so lange gerührt, bis eine dünnschichtchromatographi sche Analyse zeigt, daß die Reaktion vollständig ist. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Reaktionsprodukt über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Verbindung 16E erhalten wird.
  • Derivate von 7-Desoxy-Δ6'7-taxolen, bei denen die 2'- Hydroxylgruppe verestert ist, werden direkt aus dem gewünschten 7-Desoxy-Δ6'7-taxol nach aus A. E. Mathew et al. in "J. Med. Chem.", 1992, 35, 145 sowie den US-A-4 960 790, 4 942 184 und 5 059 699 bekannten Verfahren hergestellt.
  • Beim Nacharbeiten der allgemeinen Maßnahmen von Mathew et al. (vgl. US-A-4 960 790, 4 924 184 und 5 059 699), jedoch unter Einsatz des jeweils geeigneten 7-Desoxy-Δ6'7 taxolanaloga, werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(β-Alanyl) -7-desoxy-Δ6'7-taxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-[-C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)-7-Desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl) -7-desoxy--Δ6'7-taxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(tert.-Buyldimethylsilyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-Glycyl-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Alanyl) -7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Leucyl) -7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2' (L-Glutamyl) -7-desoxy-Δ6'7-taxol;
  • 2' (L-Arginyl) -7-desoxy-Δ6'7-taxol.
  • Auch deren pharmazeutisch akzeptable Salze werden hergestellt, wenn die Verbindungen entweder eine saure oder basische funktionelle Gruppe enthalten.
    • Beispiel 10
  • Herstellung von [2aR-{2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα}]-β- (Benzoylamino)-α-[{(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl}- oxy]benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α,12b-dodecahydro-4-fluor-11- hydroxy-4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester));
  • 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-fluor- taxol (Verbindung 13AA, IIIa)
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}-carbonyl]taxol [N. F. Magri, D. G. Kingston in "J. Org. Chem.", 1986, 51, 797] (0, 021 g, 0, 020 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (1,5 ml) wurde mittels einer Spritze innerhalb von 5 min in eine gerührte und gekühlte (Aceton-Trockeneis-Bad)-Lösung von Dimethylaminoschwefeltrifluorid (DAST) (2 ul, 0,014 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (0,5 ml) in einer 3 ml-Reacti-Phiole® eingetragen.
  • Das Kühlbad wurde nach 15 min weggenommen, worauf sich der Reaktionsbehälter auf Raumtemperatur erwärmen darf. Das Reaktionsgemisch wird gerührt, worauf die Lösung erneut in einem Aceton-Trockeneis-Bad gekühlt und mit mehr DAST (4 ul, 0,028 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; versetzt wird. Das Kühlbad wird nach 15 min weggenommen. Nach 90 min wird die Reaktionslösung mit weiterem CH&sub2;Cl&sub2; verdünnt und danach mit Wasser gewaschen. Die Schichten werden getrennt. Die organische Schicht wird getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein Rückstand (0,017 g) erhalten wird. Der Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, 60 g) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation auf die Säule und von 30% Aceton in Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert, wobei das gewünschte Titelprodukt eines Rf- Werts von 0,19 (30% Aceton-Hexan) erhalten wird.
  • Das FAB-Massenspektrum liefert Peaks bei 1034, 1032, 1030, 571, 511, 460, 442, 210 und 105 Masseeinheiten;
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,18 (dd, 2H), 7,76 (dd, 2H), 7,62 (t, 1H), 7,50 (m), 7; 43 (m), 6,95 (d, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,27 (t, 1H), 6,08 (dd, 1H), 5,78 (d, 1H), 5,55 (d, 1H), 5,05 (d, 1H), 4,78 und 4,76 (d, 2H), 4,66 (d, 0,5H), 4,50 (d, 0,5H), 4,40 (d, 1H), 4,31 (d, 1H), 4,04 (d, 1H), 2,63-2,45 (m), 2,49 (s, 3H), 2,27-2,10 (m). 2,20 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,74 (s, 3H). 1,20 (s, 3H) und 1,17 (s, 3H); ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 206,0, 169,9, 168,8, 167,2, 167,17, 153> 2, 140,9, 136,4, 133,7, 133,5, 132,1, 130,3, 1292, 29,2, 128,8, 128,7, 128,6, 127,2, 126,5, 96'7 93,9, 81,9, 80,8, 78,8, 77,9, 77,8, 77,4, 77,2, 75,0, 72,1, 56; 8d, J = 18 Hz), 52,7,.42,7, 40,1, 35,7, 33,9, 33,6, 25,8, 22,6, 21,3, 20,8, 14,6, 14,4 ppm.
    • Beispiel 11 Herstellung von [2aR-{2aα,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α, 12aα, 12bα}]-β-(Benzoylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyl- oxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α,12b- dodecahydro-4-fluor-11-hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5- oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1, 2-b]-oxet-9-yl- ester)); 7-Desoxy-7-fluortaxol (Verbindung IIIb)
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 13AA, IIIa; 0,010 g, 0,0097 mmol) in 9 : 1 Methanol/Essigsäure (1,0 ml) wird bei Raumtemperatur mit aktiviertem metallischem Zink (0,012 g) verrührt. Nach 90 min wird das Reaktionsgemisch nach Abfiltrieren des Zinks und Einengen des Filtrats unter vermindertem Druck aufgearbeitet. Der Verdampfungsrückstand wird in CH&sub2;Cl&sub2; gelöst, worauf die erhaltene Lösung mit 0,1 N wäßriger Salzsäure mit 5%iger wäßriger NaHC&sub0;&sub3;-Lösung und mit Wasser gewaschen wird. Die wäßrige Schicht wird mit CH&sub2;Cl&sub2; rückextrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein Rückstand (0,009 g) erhalten wird. Der erhaltene Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, 8 mm · 250 mm-Säule) unter Applikation als CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung auf die Säule chromatographiert. Die Säule wird mit 60 ml 20% EtOAc in Hexan und danach mit 40% EtOAc in Hexan eluiert. Das gewünschte Produkt (Verbindung Ilib) wird als Feststoff erhalten.
  • FAB-Massenspektrum: 856, 571, 511, 286, 268, 250, 210, 105 Masseeinheiten;
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (dd, 2H), 7,75 (dd, 2H), 7,63 (t, 1H), 7,50 (m), 7,38 (m), 7,06 (d, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,18 (t, 1H), 5,83 (dd, 1H), 5,76 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,80 (t, 1H), 4.65 (d, 0,5H), 4,50 (d, 0,5H), 4,38 (d, 1H), 4,29 (d, 1H), 4,04 (d, 1H), 3,55 (d, 1H). 2,70- 2,40 (m), 2,40 (s, 3H), 2,37-2,25 (m), 2,21 (s, 3H; ), 1,75 (3H), 1,62 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1,18 (s, 3H); ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 205,7, 172,4, 169,5, 169,4, 167,1, 166,9, 140,4, 138,0, 133,8, 133,7, 132,4, 131,9, 130,2, 129,2, 129,0, 128.,75, 128> 71, 128,3, 127,02, 126,98, 81,9, 81,0, 78,6, 77,2, 74,8, 73,2, 72,1, 57,0 (J = 17 Hz), 54,7, 42,6, 39,9, 35,8, 16,0, 22,5, 21,0, 20,8, 14,7, 14,2 ppm.
  • Entsprechend den von Magri und Kingston für die Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol beschriebenen Maßnahmen wird das 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)-oxy}carbonyl]derivat von 7-Epitaxol (vgl. I. Ringe und S. B. Horwitz in "J. Pharmacol. Exp. Ther.", 1987, 242, 692; vorzugsweise Chaudhary et al. in "J. Org. Chem.", 1993, 58, 3798) hergestellt.
    • Beispiel 12
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-epifluortaxol
  • Entsprechend den Maßnahmen des Beispiels 10, jedoch unter Ersatz des 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- taxols durch 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxy)carbonyl]-7-epitaxol wird die Titelverbindung hergestellt. Der im Namen
  • der Titelverbindung benutzte Ausdruck "7-Desoxy-7-epifluortaxol" bedeutet lediglich, daß die Konfiguration des Fluorsubstituenten zu derjenigen in 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)- oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 13AA, IIIa; Beispiel 1) epimer ist und unterstellt keine Konfiguration analog zu derjenigen von 7-Epitaxol.
    • Beispiel 13
  • 7-Desoxy-7-epifluortaxol Entsprechend den Maßnahmen des Beispiels 11, jedoch unter Ersatz des 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy)carbonyl]-7- desoxy-7-fluortaxols durch 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl)-7-desoxy-7-epifluortaxol wird die Titelverbindung hergestellt. Der im Namen der Titelverbindung benutzte Ausdruck "7-Desoxy-7-epifluortaxol" bedeutet lediglich, daß die Konfiguration des Fluorsubstituenten zu derjenigen in 7-Desoxy-7-fluortaxol (Verbindung Ilib, Beispiel 11) epimer ist und unterstellt keine Konfiguration analog zu derjenigen von 7-Epitaxol.
    • Beispiel 14 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxylcarbonyl]taxol-7-methansulfonat
  • Methansulfonylchlorid (1, 2. Äquivalente) wird in eine Lösung von 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol (1 Äquivalent) und Pyridin (5 Äquivalente) in CH&sub2;Cl&sub2;, die in einem Eisbad gerührt wird, eintropfen gelasse. Das Reaktionsgemisch darf sich erwärmen tznd wird so lange weitergerührt, bis eine dünnschichtchromatographische Überwachung anzeigt, daß die Reaktion vollständig ist. Das Reaktionsgemisch wird mit Eiswasser abgeschreckt und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Die erhaltenen Extrakte werden sukkzessive mit verdünnter wäßriger Säure, verdünnter wäßriger NaHCO&sub3;-Lösung und Wasser gewaschen, danach getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Beim Chromatographieren des Rohprodukts über Silicagel erhält man die reine Titelverbindung.
    • Beispiel 15 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7α-chlortaxol
  • Eine Lösung von 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-methansulfonat (1 Äquivalent) in N,N-Dimethylformamid (DMF) wird mit Kaliumchlorid (10 Äquivalente) verrührt. Nach Zugabe eines Phasenübertragungskatalysators wird das Reaktionsgemisch zur Erhöhung der Reaktiongsgeschwindigkeit erwärmt. Der Reaktionsverlauf wird dünnschichtchromatographisch überwacht. Das Reaktionsgemisch wird durch Zusatz von Wasser und Extrahieren mit CH&sub2;Cl&sub2; aufgearbeitet. Die organischen Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt. Das hierbei als Verdampfungsrückstand erhaltene rohe Reaktionsprodukt wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Beispiel 16
  • 7-Desoxy-7α-chlortaxol Entsprechend den Maßnahmen des Beispiels 11, jedoch unter Ersatz von 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-7-fluortaxol durch 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl]-7-desoxy-7α-chlortaxol wird die Titelverbindung hergestellt.
    • Beispiel 17 7-Desoxy-7ß-chlortaxol Entsprechend den Maßnahmen der Beispiele 14 und 15, jedoch ausgehend von 2'-[((2,2, 2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-epitaxol wird die Titelverbindung hergestellt.
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen der Beispiele 15 und 11, jedoch unter Verwendung geeigneter Metallsalze, z. B. von Natrium- oder Kaliumbromid und Natrium- oder Kaliumiodid, im Rahmen des Beispiels 15 werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 7-Desoxy-7α-bromtaxol;
  • 7-Despxy-7β-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7α-iodtaxol;
  • 7-Despxy-7β-iodtaxol.
  • Verbindungen der Formel III mit X = Chlor, Brom oder Iod lassen sich auch durch Umsetzen eines in geeigneter Weise geschützten Vorläufers (beispielsweise I mit R&sub1; = -C&sub6;H&sub5;; R&sub2; = -NHC(O)C&sub6;H&sub5;; R&sub3; = H; Rq = -OTROC; R&sub5; = H; R&sub1;&sub0; = -COCH&sub3; und X = OH) mit (C&sub6;H&sub5;)&sub3;P/X&sub2;; (C&sub6;H&sub5;)&sub3;P/CX&sub4; oder (C6H503P/X2> herstellen, wenn man beispielsweise die zahlreichen Beispiele und Experimentalbedingungen, wie sie von B. R. Casto in "Organic Reactions", 1983, 29, Seiten 1-162 beschrieben sind, nacharbeitet.
  • Derivate der 7-Desoxy-7-halogentaxole, bei denen die 2'-Hydroxylgruppe verestert ist, werden direkt aus den gewünschten 7-Desoxy-7-halogentaxolen nach den bei A. E. Mathew et al. in "J. Med. Chem.", 1992, 35, 145 und in den US-A-4 960 790, 4 942 184 und 5 059 699 beschriebenen Verfahren hergestellt.
  • Entsprechend den allgemeinen Verfahren nach Mathew et al. (vgl. beispielsweise US-A-4 960 790, 4 924 184 und 5 059 699), jedoch unter Einsatz des geeigneten 7-Desoxy-7- halogentaxolanalogon, werden die folgenden Verbindungen:
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-fluortaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-[-C(O)CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-'7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7--fluortaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-fluorta xol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-fluo rtaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 7-Desoxy-7-fluortaxoter;
  • 2' -Succinyl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-chlort:axolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-[-C(O)CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;] -7-Desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy--7-chlortaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl·-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 7-Desoxy-7-chlortaxoter;
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-bromtaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-[-C(O)CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-Desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl) -7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-bromtaxc> 1;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7--bromtaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7-bromtaxoter;
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-iodtaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-[-C(O)CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-Desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy--7-iodtaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-'7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)·-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Valyl) -7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-iodta xol;
  • 2'-(L-Arginyl) -7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 7-Desoxy-7-iodtaxoter und
  • deren pharmazeutisch akzeptable Salze im Falle, daß die betreffende Verbindung entweder eine saure oder basische funktionelle Gruppe enthält, hergestellt.
    • Beispiel 18 Herstellung von {2aR-[2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-([(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]oxy}- benzolpropionsäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α,12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13, 13-trimethyl-5-oxo-4,4a;7,11-bismethano-1H-cyclodeca[3,4)benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester; 2'-([(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung 14AA; IIa)
  • Eine Lösung von 2'-([(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]- carbonyl}taxol [N. F. Magri und G. D. Kingston in "J. Org. Chem. ", 1986, 51, 797] (0,021 g, 0,020 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (1,5 ml) wird mittels einer Spritze innerhalb von 5 min in eine gerührte und gekühlte (Aceton-Trockeneis-Bad)-Lösung von Dimethylaminoschwefeltrifluorid. (DAST) (2 ul, 0,014 mol in CH&sub2;Cl&sub2; (0, 5 ml) in einer 3 ml fassenden Reacti-Phiole eingetragen. Das Kühlbad wird nach 15 min weggenommen, worauf sich der Reaktionsbehälter auf Raumtemperatur erwärmen darf. Die Reaktionslösung wird gerührt, erneut in einem Aceton-Trockeneis-Bad gekühlt und mit mehr DAST (4 ul, 0,028 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; versetzt. Das Kühlbad wird nach 15 min entfernt. Nach 90 min wird die Reaktionslösung mit weiterem CH&sub2;O12 verdünnt und danach mit Wasser gewaschen. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein Rückstand (0,017 g) erhalten wird. Der Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, 60 g) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation auf die Säule und von 30% Aceton in Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert. Die gewünschte Titelverbindung besitzt einen Rf-Wert von 0,22 (30% Aceton Hexan) und kristallisiert aus Aceton-Hexan in Form farbloser Nadeln aus.
  • Das FAB-Massenspektrum liefert Peaks bei 1012, 1010, 551, 533, 511, 491, 460 und 442 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,19 (d, 2H), 7,71 (d, 2H), 7,59 (t, 1H), 7,48 (m), 7,36 (m), 6,98 (d, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,28 (t, 1H), 6,08 (dd, 1H), 5,67 (d, 1H), 5,54 (d, 1H), 4,77 (dd, 2H), 4,74, 4,32 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,07, 2,47 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,67 (dd, 1H), 1,38 (m, 1H), 1,26 (s, 3H) und 1,21 (s, 3H); 13C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 201,88, 169,64, 169,59, 167,45, 167,03, 166,96, 153,24, 140,41, 136,43, 133,89, 133,61, 133,36, 132,05, 130,31, 129,25, 129,15, 129,07, 128,95, 128,75, 128,68, 128,59, 127,17, 126,49, 93,82, 84,83, 80,11, 79,56, 79,47, 77, 78, 77,23, 75,66, 75,41, 72,17, 52,58, 42,85, 38,57, 35,93, 35,04, 32,26, 26,05, 22,30, 21,60, 20,83, 15,82, 14,56 ppm.
    • Beispiel 19 Herstellung von {2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,11α, 11α,12α,12αα,12bα]}-β- (Benzoylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure-6, 12b-bis-(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α, 12b- dodecahydro-11-hydroxy-8,13, 13-trimethyl-5-oxo-4,4a; 7, 11- bismethano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester;
  • 7-Desoxy-7ß,8ß-methanotaxol (Verbindung lib) Eine Lösung von 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]-carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung 14AA, IIa; 0,008 g, 0,0079 mmol) in 9 : 1 Methanol/Essigsäure (1,0 ml) wird bei Raumtemperatur mit aktiviertem metallischem Zink (0,010 g) verrührt. Nach 60 min wird weiteres Zink (0,010 g) zugegeben und 30 min lang weitergerührt. Die Feststoffe werden aus dem Reaktionsgemisch abfiltriert, worauf das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt wird. Der hierbei erhaltene Rückstand wird in CH&sub2;C12 gelöst, worauf die Lösung suksessive mit wäßriger O,1 N Salzsäure, mit wäßriger 5%iger NaHC&sub0;&sub3;-Lösung und mit Wasser gewaschen wird. Die organische Schicht wird getrocknet (Na&sub2;S0q), filtriert und eingeengt. Der hierbei erhaltene Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, 8 · 250 mm-Säule, appliziert als Lösung in CH&sub2;Cl&sub2; und eluiert mit 40% Ethylacetat in Hexan) chromatographiert. Die Titelverbindung besteht aus einem farblosen Feststoff.
  • Das FAB-Massenspektrum liefert Peaks bei 836, 776, 758, 551, 533, 491, 286, 240 und 105 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 5,19 (d, 2H), 7,69 (d, 2H), 7,60 (t, 1H), 7,60-7,35 (m), 6,95 (d, 1H), 6,31 (s, 1H), 6,25 (t, 1H), 5,82 (d, 1H) 5,66 (d, 1H). 428 (dd, 1H), 4,72 (d, 1H), 4,31 (d, 1H), 4,07 (d, 1H), 4,06 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,60 (s, 3H), 1,38 (m. 1H), 1,26 (s, 3H) und 1,22 (s, 3H); ¹³C NMR (CDCl&sub3;, EMS) 204,45, 201,81, 172,74, 169,87, 169,56, 167,41, 166,96, 140,12, 138,04, 134,07, 133,53, 131,93, 130,33, 129,28, 129,04, 128,74, 128,55, 128,32, 127,04, 126,86, 84,86, 80,03, 79,57, 79,4, 77,21, 75,66, 75,46, 73,22, 72,28, 54,79, 42,86, 38,54, 36,07, 35,09, 32,15, 26,11, 22,27, 21,49, 20,88, 15,77 und 14,59 ppm.
    • Beispiel 20 Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-7β,8β-methanotaxol (14AA; IIa) aus 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol
  • Eine eiskalte Lösung von Natriumnitrit (1,5 Äquivalente) wird portionsweise in eine kräftig gerührte eiskalte, zweiphasige Mischung aus einer Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol (1 Äquivalent) in Ether und einer Lösung von Schwefelsäure in Wasser eingetragen. Nach der Zugabe wird das Gemisch einige h lang auf einem Eisbad gerührt. Danach wird überschüssige salpetrige Säure durch Zusatz einer wäßrigen Harnstofflösung beseitigt. Die wäßrige Phase des Gemischs wird durch sorgfältige Zugabe von Natriumcarbonat auf einen nahezu neutralen pH-Wert gebracht. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Phase mit zusätzlichem Ether weiterextrahiert. Die vereinigten Etherextrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird.
  • Beim Chromatographieren des Rohprodukts über Silicagel erhält man die reine Verbindung 14AA.
    • Beispiel 21 Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-7β,8β-methanotaxol (14AA, IIa) aus 2'-[{(2,2,2- Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-trifluormethylsulfonat
  • Eine Lösung von 2'-([(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]- carbonyl]taxol-7-trifluormethylsulfonat in 80% Ethanol- Wasser wird erwärmt. Die Reaktion wird auf dünnschichtchro matographischem Wege überwacht. Nach Beendigung der Reaktion wird die Reaktionslösung mit Natriumbicarbonat neutralisiert. Überschüssiges Ethanol wird unter vermindertem Druck entfernt. Die wäßrige Phase wird mit Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Das Rohprodukt wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Verbindung 14AA erhalten wird.
    • Beispiel 22 N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 18);
  • (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12αα,12bα]}-β- (Benzyloxycarbonylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure-6,12b- bis-(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12, 12α, 12b-dodecahydro-11-hydroxy--4a, 8,13, 13-tetramethyl-5- oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1, 2-b]-oxet-9-yl- ester))
  • Beim Nacharbeiten des Beispiels 11 [Reaktion von 2'- Troc-7-Desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink], jedoch unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'- ([(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7-fluortaxol (Beispiel 3, Verbindung 13BA; 0,079 g, 0,074 mmol) und aktiviertem metallischem Zink (0,153 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1, 16 ml) und EtOAc (8 ml) wird das gewünschte Produkt 18 hergestellt. Nach dem Aufarbeiten (2 h Reaktionsdauer) und chromatographieren (Silicalgel, 40% EtOAc-Hexan, aufgefangen werden Fraktionen von 8 ml) des Rohprodukts, wird das in den Fraktionen 59-76 eluierende gewünschte Produkt 18 als Feststoff gewonnen. Es wird aufgrund der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,14 (d, 2H, J = 7,4 Hz), 7,62 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 1,52 (t, 2H, J = 7,75, 7,30 Hz), 7,30-7,42 (m, 5H). 7,17 (m, 2H). 6,53 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,18 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,75 (d, 1H, -NH-), 5,73 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H&sub2;), 5,38 (d, 1H, H&sub3;), 5,09 (d, 1H, J = 12,5 Hz, - OCHaHPh), 4,99 (d, 1H, H&sub5;), 4,96 (d, 1H. J = 12,3 Hz, -OCHHbPh), 4,66 (d, 1H, H&sub2;.), 4,57 (dd, 1H, JF = 54 Hz, H&sub7;), 4,36 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,29 (d, 1H, H&sub2;&sub0;b), 3,41 (d, 1H, J = 7,3 Hz. H&sub3;), 2,63-2,46 (7TLinien,1H),2,38 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,43-2,30 (m, 1H), 2,28-2,10 (m, 1H), 2,22 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,01 (m, 1H), 1,77 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,73 (s. 3H, -CH&sub3;), 1,19 (s, 3H. -CH&sub3;), 1,16 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS), 206, 172, 169,5, 169,3, 166,9, 156, 140,5, 138, 137, 133,7, 132, 130,2, 129,3, 128,8, 128,7, 128,4, 128,0, 127,6, 126,7, 96, 93, 81,9, 80,9, 78,6, 78, 74,8, 73,6, 71,8, 66,8, 57, 56, 42,5, 39,9, 35,9, 34, 34, 25,9, 22,4; 21,0, 20,8, 14,5, 14 ppm; Massenspektrum: 886, 571, 511, 371, 347, 329, 316, 298, 105, 91 m/z.
    • Beispiel 23 N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-7-desoxy-7ß,8ß-methanotaxol (Verbindung 21);
  • (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α(αR*,βS*),11α,12α,12αα,12bα]}-β- (Benzyloxycarbonylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure-6, 12b- bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11, 12, 12α, 12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13,13-trimethyl-5-oxo- 4,4a,7,11-bismethano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1, 2-b]-oxet-9- yl-ester))
  • Beim Nacharbeiten des Beispiels 11 [Umsetzung von 2'- Troc-7-Desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink], jedoch unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'- ([(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (14BA; 0,040 g, 0,038 nmol) und aktiviertem metallischem Zink (0,072 g, plus weitere 0,072 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1,10 ml) wird das gewünschte Produkt 21 hergestellt.
  • Nach dem Aufarbeiten nach 3-stündiger Reaktionsdauer und Chromatographieren (Silicagel, 40% EtOAc-Hexan, es werden Fraktionen von 8 ml aufgefangen) des Rohprodukts wird in den Fraktionen 30-37 Ausgangsmaterial (0,007 g) erhalten.
  • Das in den Fraktionen 75-100 eluierende gewünschte Produkt (21, 0,020 g, 0,023 mmol, 61%) wird als Feststoff gewonnen und aufgrund der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 5,17 (d, 2H, J = 7,3 H&sub2;), 7,58 (m, 1H), 7,50 (t, 2H), 7,42- 7,30 (m, 5H), 7,24 (m), 7,08 (m, 2H), 6,31 (s, 1H. H&sub1;&sub0;). 6,26 (t, 1H, J = 8,6 H&sub2;, H13), 5,70 (d, 1H, J = 9,6 Hz, -NH-), 5,64 (d, 1H, J = 7, 7 H&sub2;, H&sub2;), 5,38 (d, 1H, J = 8,1 H&sub2;, H&sub3;.), 4,98 (d, 1H. J = 12,5 Hz. -OCHaHPh), 4,88 (d, 1H, J = 12,5 Hz, -OCHHbPh), 4,71 (d, 1H, 1H, 3,7 H&sub2;. H&sub5;), 4,65 (s, 1H. H&sub2;), 4,28 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub2;&sub0;a), 4,07 (d, 1H, H&sub3;), 4,05 (d, 1H, Hiob). 2,49- 2,34 (m, 1H), 2,38 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,23 (m), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,08 (m), 1,94 (m), 1,82 (s. 3H, -CH&sub3;). 1,37 (in, 1H. H&sub3;), 1,25 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,21 (s. 3H, -CH&sub3;);
  • ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 202, 172,5, 169,2, 169,1. 167, 155,5, 149,5, 138, 136, 133,5, 133, 130,0, 128,6, 128,4, 128,1, 127,7, 127,2, 126,3, 84,5, 79,9, 79,2, 79,0, 75,3, 75,2, 73. 71,7, 66,5, 56, 42,5, 38,2, 36, 34,7, 32, 25,7, 21,5, 21, 20,5, 15,5, 14,2 ppm; Massenspektrum: 866, 3423, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub1;NO&sub1;&sub4; + H erfordert 866,3388, 848, 806, 788, 551, 533, 491,. 105, 91 m/z.
    • Beispiel 24 N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 13DA),
  • (({2aR-[2aα,4aß,6ß,9α,(αR*,ßS*),11α,12α,12αα,12bα]}-β- [tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]-oxy}benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α,12b-dodecahydro- 4-fluor-11-hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11- methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)) und N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7ß,8f3-methanotaxol (Verbindung 14DA), (({2aR- [2aα, 4β,4aβ,6β,9α,(αR*, βS*), 11α, 12α, 12αα,12bα]}-β-[(tert.-Butyl)oxvcarbonylamino]-α-{[(2,2,2- trichlorethoxy)carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis- (acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12, 12α,12b-dodecahydro-11-hydroxy--8, 13,13-trimethyl-5-oxo- 4,4a; 7,11-bismethano-1H-cyclode ca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9- yl-ester)) und
  • N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-tri- chlorethyl)oxy]carbonyl 1-7-desoxy-Δ6'7-taxol (Verbindung 15CA),(({2aR-[2aα, 4aβ, 6β, 9α, aR*, βS*), 11α, 12α, 12αα, 12bα]}- β-[(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-([(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]-oxy}benzolpropansäure-6, 12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a, 4a, 5, 6,9, 10,11, 12, 12α, 12b-dodecahydro-11-hydroxy-4a, 8,13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-¹H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)) Das Beispiel 10 [Reaktion von 2'-troc-Taxol mit MethylDAST] wird nachgearbeitet, wobei jedoch N-Debenzoyl-N- (tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-Troc-taxol (Verbindung 12DA; 1,800 g, 1,75 mmol) und Dimethylaminoschwefeltrifluorid (MethylDAST, 286 ul, 0, 390 g, 2, 93 mmol) in CN&sub2;Cl&sub2; (120 ml) unter N&sub2; bei -78ºC eingesetzt werden. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohproduktgemisch (1,T7 g) über Silicagel (40-63 um, 191 g in einer 37 · 350 mm-Säule, es werden Fraktionen von 45 ml aufgefangen) unter Verwendung einer CE-12Cl&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und von 20% Aceton-Hexan (1,5 l) und anschließend 25% Aceton-Hexan zum Eluieren der Säule chromatographiert. Eine Mischung von 15CA und 14DA (0,511 g) eluiert in den Fraktionen 41-46.
  • Die Fraktionen 47-48 (0,085 g) enthalten ein Gemisch sämtlicher drei Reaktionsprodukte. Die Fraktionen 49-61 (0,814 g) enthalten reine 13DA. Beim erneuten Chromatographieren der Mischfraktionen 47-48 erhält man zusätzliche Mengen des Gemischs an 14DA und 15CA und von reiner 13DA.
  • Reines 13DA erhält man als Feststoff. Es wird auf der Grundlage der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,2 H&sub2;), 7,62 (t, 1,3-7,2 H&sub2;), 7,51 (t, 2H, J = 7,7 HZ), 7,25-7,44 (m, 5H), 6,58 (s, 1H. H&sub1;&sub0;), 6,28 (t, 1H, J = 8,7 Hz, H&sub1;&sub3;). 5,77 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H,), 5,51 (d. 1H, -NH-), 5,46 (d, 1H, J = 10,0 Hz, H&sub3;), 5,40 (d, 1H. J = 2,0 Hz, H&sub2;.), S. OS (d, 1H, J = 8,1 H&sub2;, H5), 4,77 (d, 1H, J = 11,8 Hz, Troc-Ha), 4,68 (d, 1K, J = 11,8 Hz Troc.Hb), 4,58 (dd, 1H, J = 4,6, 46,9 Hz. H&sub7;), 4,39 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H&sub2;&sub0;a). 4,27 (d, 1H. J = 8,4 Hz. H&sub2;&sub0;b) 4,04 (d. 1H. J = 7,1 Hz. H&sub3;), 2,57 (m. 1H, H&sub6;a). 2,48 (s, 3H. -CW). 2,21 (s, 3H. -CH&sub3;), 1,91 (s, 3H, -CH&sub3;), 1.73 (s, 3H, -CH&sub3;), 1.34 (s, 9H, Me&sub3;C-), 1.23 (s, 3H, -CH&sub3;), 1.17 (s, 3H, -CH&sub3;); Massenspekrum: 1026, 2660, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub5;C&sub1;&sub3;FNO&sub1;&sub6; + H erfordert 1026, 2648, 970, 571, 511, 407, 389, 347, 329, 105, 57 m/z.
  • Sämtliche ein Gemisch von 14DA und 15CA enthaltende Fraktionen werden miteinander vereinigt und über Silicagel (zwei Merck-Lobar-Säulen, Größe B, es werden Fraktionen von 9 ml aufgefangen) unter Applikation des Materials auf die Säule in Form einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung und unter Eluieren der Säule mit 10% CH&sub3;CN-CH&sub2;Cl&sub2; (68 Fraktionen) und danach 15% CH&sub3;CN-CH&sub2;Cl&sub2; rechromatographiert. Das reine Olefin 15CA elutert in den Fraktionen 76-94 und fällt letztlich als Feststoff an. Charakterisiert wird er auf der Basis der folgenden Analysedaten:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,16 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,63 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 7,52 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,30-7,45 (m, 5H), 6,27 (t, 1H, J = 9,2 Hz, H&sub1;&sub3;), 6,24 (s, 1H, H10), 6,07 (dd, 1H, J = 5.7, 9,9 Hz, H&sub6;), 5,86 (d, 1H, 1-10,0 Hz, H&sub7;), 5,85 (d, 1H, H&sub2;), 5.52 (d, 1H, -NH-), 5,45 (d, 1H, H&sub3;). 5,36 (d, 1H, J = 2,4 Hz, H&sub2;.), 5,12 (d, 1H, J = 5,b Hz, H&sub5;), 4,77 (d, 1H, J = 11,8 Hz,Troc-Ha), 4,68 (d, 1H,3 11,8 Hz,Troc-Fib), 4,45 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H&sub2;O). 4,30 (d, 1H, J = 8.1 Hz. H&sub2;&sub0;b), 4.03 (d, 1H, J = 6.6 Hz, H&sub3;), 2.47 (s, 3H, -CH&sub3;), 2.41 (m, 1H, H&sub1;&sub4;a)' 2,23 (s, 1H, -CH&sub3;), 1,87 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,84 (d, 3H, J = 2,8 Hz, -CH&sub3;). 1,34 (s, 9H, Me&sub3;C-). 1,27 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,16 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum: Gefunden: 1006, 2580, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub4;C&sub1;&sub3;NO&sub1;&sub6; + H erfordert 1006,2586, 950, 551, 491, 369, 105, 57 m/z.
  • Die reine Verbindung 14DA eluiert in den Fraktionen 100-131 und fällt als Feststoff an. Charakterisiert wird er auf der Basis der folgenden Analysedaten:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,61 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,30-7,44 (m, 5H), 6,34 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,30 (t, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub1;&sub3;), 5,67 (d, 1H, J = 7,6 Hz, H&sub2;), 5,54 (d, 1H, -NH-), 5,45 (d, 1H, J = 10,1 Hz, H&sub3;&sub9;), 5,38 (d, 1H, J = 2,3 Hz. H&sub2;), 4,76 (d, 1H, J = 11,8 Hz,Troc-Ha), 4,76 (1H, H&sub5;), 4,69 (d, 18,1- 11,8 Hz. troc-Hb). 4,33 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub2;&sub0;a), 4,09 (d, 1H. J = 7,5 Hz, H&sub3;), 4,04 (d, 1H, J = 8,7 Hz. H&sub2;&sub0;b), 2,48 (m. 1H. H14a). 2,44 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,37 (m, 18, H&sub6;a), 2,24 (m, 1H. H&sub1;&sub9;a). 2,20 (s. 3H, - CH&sub3;), 2,11 (d, 1H, J = 16,0 Hz, H&sub1;&sub4;b), 1,90 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,66 (m, 1H, H&sub1;&sub9;b). 1,37 (m, 1H. H&sub7;). 1,28 (s, 9H, Me&sub3;C-), 1,27 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,25 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum: Gefunden: 1006, 2560, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub4;C&sub1;&sub3;NO&sub1;&sub6; + H erfordert 1006,2486, 950, 551, 533, 491, 369, 327, 105, 57 m/e.
    • Beispiel 25 N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-7-desoxy-7- fluortaxol (Verbindung 20),
  • (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12αα,12bα]}-β- [(tert.-Butyl)oxycarbonylamino)-α- hydroxybenzolpropansäure-6, 12b·-bis(acetyloxy)-12-(benzoyl- oxy) -2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α,12b-dodecahydro-4-fluor- 11-hydroxy-4a,8, 13, 13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3, 4]benz[1, 2-b]-oxet-9-yl-ester)) Die allgemeinen Maßnahmen des Beispiels 11 [Umsetzung von 2'-Troc-7-Desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink] werden unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)- oxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy)carbonyl}-7- desoxy-7-fluortaxol (13DA, 0,100 g, 0,097 mrnol) und aktiviertem metallischem Zink (0,183 g und anschließend noch mals 0,050 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1, 10 ml) nachgearbeitet.
  • Nach 1-stündiger Reaktionsdauer wird das Reaktionsgemisch über Nacht bei -33ºC gelagert und anschließend aufgearbeitet. Das hierbei erhaltene Rohprodukt wird chromatographiert (Silicagel, 40% EtOAc-Hexan, es werden Fraktionen von 8 ml aufgefangen), wobei das gewünschte Produkt 20 in Fraktionen 53-76 eluiert. Letztlich fällt es als Feststoff an und wird auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,13 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,62 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,30-7,42 (m, 5H), 6,56 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,21 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,76 (d, 18. J = 7,2 Hz, H&sub2;), 5,42 (d, 1H, J = 9,7 Hz, -NH-), 5,29 (d, 1H, H&sub3;,), 5,01 (d, 1H,1-7,5 H&sub2;, H5), 4,63 (m, 1H, H&sub2;&sub1;), 4,57 (dd, 1H, J = 4,3, 46,8 Hz, H7), 4,37 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H&sub2;&sub0;a), 4,27 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H&sub2;, H&sub2;&sub0;), 4,04 (d, 1H,1-7,1 Hz. H&sub3;), 2,56 (sieben Linien 1H, H6a) 1.2,39 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,31 (m. 1H), 2,25 (m, 1H), 2,22 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,14 (dd, 1H), 1,81 (s. 3H. -CH&sub3;), 1,73 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,34 (s, 9H, Me&sub3;C), 1,23 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,18 (s, 3H, -CH&sub3;);
    • Beispiel 26
  • N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol (Verbindung 23),
  • (({2aR- [2aα, 4β,4aβ, 6β, 9α, (αR*, βS*), 11α, 12α,12α, 12αα, 12bα])-β- [(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-hydroxybenzolpropan- säure-6,12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12α,12b-dodecahydro-11-hydroxy- 8,13, 13-trimethyl-5-oxo-4, 4a; 7, 11-bismethano-1H-cyclo- deca[3, 4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl--ester))
  • Die allgemeinen Maßnahmen des Beispiels 11 [Reaktion von 2'-Troc-7-Desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink] werden unter Verwendung von N-I7ebenzoyl-N-(tert.-butyl)oxy- carbonyl-2'-([(2,2,2-trichloret hyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy- 7ß,8ß-methanotaxol (14DA, 0,10() g, 0,099 mmol) und aktiviertem metallischem Zink (0,200 g und anschließend weiter 0,050 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1, 10 ml) nachgearbeitet. Nach dem Aufarbeiten nach 3-stündiger Reaktionsdauer und Chromatographieren (Silicagel, 40% EtOAc-Hexan, es werden Fraktionen von 8 ml aufgefangen) des Rohprodukts wird letztlich das in den Fraktionen 58-86 eluierende gewünschte Produkt 23 als Feststoff erhalten. Es wird auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,61 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 7,28-7,45 (m, 5H), 6,33 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,27 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,67 (d, 1H, J = 7,6 Hz, H&sub2;), 5,36 (d, 1H, J = 9,5 Hz, H&sub3;), 5,30 (m, 1H, -NH-), 4,73 (d, 1H, J = 3,7 H&sub2;, H&sub2;&sub1;), 4.62 (m, 1H, H&sub5;), 4,31 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20a), 4,09 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H&sub3;), 4,04 (d, 1H, J = 8,7 H&sub2;, H&sub2;&sub0;b), 2,46 (d vont,1H, J = 4,3, 16,1 Hz, H6a), 2,38 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,24 (m, 1H), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,10 (d, 1H, J = 16,0 Hz), 1,85 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,67 (dd, 1H, J = 7,1, 5,2 Hz), 1,36 (m. 1H. H&sub7;), 1,28 (s, 12 H, Me&sub3;C-, CH&sub3;-), 1,25 (s, 3H, -CH);
    • Beispiel 27 N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-7-desoxy-Δ6'7-taxol (Verbindung 16D),
  • (({2aR-[2aα,4aβ,6β,9α(αR*βs*),11α,12α,12αα,12bα]}-β- [(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-hydroxybenzolpropan- säure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,4a,5,6,9, 10,11,12,12α,12b-decahydro-11-hydroxy-4a, 8,13,13-tetra- methyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3, 4]benz[1, 2-b]- oxet-9-yl-ester))
  • Die allgemeinen Maßnahmen des Beispiels 11 [Reaktion von 2'-Troc-7-Desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink) werden unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl} 7-desoxy- Δ6'7-taxol (15CA, 0,086 g, 0,085 mmol) und aktiviertem metallischem Zink (0,180 g und anschließend weitere 0,030 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1, 10 ml) nachgearbeitet. Nach 1-stündiger Reaktionsdauer wird das Reaktionsgemisch aufgearbeitet. Das Rohprodukt wird chromatographiert (Silicagel, 40% EtOAc- Hexan, es werden Fraktionen von 9 ml aufgefangen), wobei das in den Fraktionen 42-65 eluierende gewünschte Produkt 16D letztlich in fester Form erhalten wird. Charakterisiert wird es aufgrund der folgenden Analysedaten:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,61 (t, 1H), 7,51 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,30-7,43 (m, 5H), 6,22 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,21 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,06 (dd, 1H, J = 5,6, 9,9 Hz, H&sub6;), 5,87 (d, 1H, 3-9,6 Hz, H&sub7;), 5,84 (d, 1H, Hz), 5,39 (d, 1H, J = 9,6 Hz, -NH- oder H&sub3;,), 5,26 (d, 1H, H&sub3;, oder -NH-), 5,10 (d, 1H, J = 5,6 Hz, H&sub5;), 4,61 (m, 1H, H&sub2;), 4,43 (d, 1H, J = 8,1 H&sub2;, H&sub2;&sub0;a). 4,30 (d, 1H, J = 8,2 H&sub2;, H&sub2;&sub0;b), 4,01 (d, 1H, J = 6,5 Hz, H&sub3;), 2,39 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,33 (m, 1H), 2,24 (s, 3H. -CH&sub3;), 1,86 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,76 (s, 3H, -CH&sub3;). 1,34 (s, 9H. Me3C-), 1,27 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,16 (s, 3H. -CH&sub3;).
    • Beispiel 28
  • Herstellung von 7-Desoxy-Δ6'7-taxol (16A) aus 2'-TES-Taxol- 7-trifluormethansulfonat
  • Eine Lösung von 2'-TES-Taxol-7-trifluormethansulfonat (Herstellungsbeispiel 15A; 0,044 g) und 1,8- Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en (DBU; 34 ul) in THF 0,4 ml) wird über Nacht bei Raumtemperatur verrührt. Nach dem Vermischen der Reaktionslösung mit Wasser und Ethylacetat werden die Schichten getrennt. Die organische Schicht wird mit wäßrigen NaHCO&sub3;- und NaCl-Lösungen gewaschen. Die organische Schicht wird getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt. Das hierbei angefallene Rohprodukt wird über Silicagel (Flash-säule) chromatographiert. Zum Eluieren der Säule wird 42,5% EtOAc in Hexan verwendet. Es werden Fraktionen eines Volumens von 5 ml aufgefangen. Die das gewünschte Produkt (identifiziert durch Dünnschichtchromatographie) enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, wobei 16A (0,009 g) erhalten wird. Das 1H-NMR (CDCl&sub3; ist mit demjenigen von in Beispiel 2 erhaltenem 16A identisch.
    • Beispiel 29 2 -TES-7-desoxy-7α-chlortaxol
  • Eine Lösung von 2'-TES-Taxol-7-trifluormethansulfonat (Herstellungsbeispiel 15A; 1 Äquivalent) in N,N-Dimethyl- formamid (DMF) wird mit Kaliumchlorid (10 Äquivalente) verrührt. Nach Zugabe eines Phasen-Transferkatalysators wird das Reaktionsgemisch zur Steige rung der Reaktionsgeschwindigkeit erwärmt. Der Reaktionsverlauf wird auf dünnschichtchromatographischem Wege überwacht. Das Reaktionsgemisch wird nach Zusatz von Wasser und Extraktion mit CH&sub2;Cl&sub2; aufgearbeitet. Die organischen Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt. Das hierbei erhaltene rohe Reaktionsprodukt wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Beispiel 30 7-Desoxy-7α-chlortaxol
  • Entsprechend den Maßnahmen von Herstellungsbeispiel 12A wird ausgehend von 2'-TES-7-Desoxy-7α-chlortaxol die Titelverbindung hergestellt.
  • Entsprechend den allgemeinen Maßnahmen der Beispiele 29 und 30, jedoch unter Verwendung geeigneter Metallsalze, wie Natrium- oder Kaliumbromid und Natrium- oder Kaliumiodid, im Rahmen des Beispiels 29 werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 7-Desoxy-7α-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7ß-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7α-iodtaxol;
  • 7-Desoxy-7ß-iodtaxol.
    • Beispiel 31 Herstellen von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7- desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 29)
  • N-Debenzoyl-N-Cbz-7-desoxy-fluortaxol 18 (60 mg, 0,07 mM; Herstellungsbeispiel 39) wird in 3 ml absolutem Ethanol gelöst und mit 20 mg 10% Pd-auf-Kohle versetzt. Danach wird bei Atmosphärendruck 6 h lang hydriert. Eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß (zu diesem Zeitpunk) kein Ausgangsmaterial mehr vorhanden ist. Somit wird das Reaktionsgemisch durch Celite filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand, bei dem es sich um 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-fluor-baccatin III handelt (19,52 mg, 0,07 mM, Herstellungsbeispiel 40) wird:in 700 ul THF gelöst, auf 0 ºC gekühlt und mit 7 ul (0,061 mM) tert.-Butylisocyanat versetzt. Da die dünnschichtchromatographische Analyse zeig, daß noch etwas Amin vorhanden ist, werden weitere 7 ul zugegeben. nach 20 h wird die Lösung im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird über 6 g in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit 30 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 60 ml 2 : 3 : EtOAc : Hexan, 50 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan und 20 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei Fraktionen von 3 ml aufgefangen werden. Das gewünschte N- Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol findet sich in den Fraktionen 35-52.
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend): Theoretisch:
  • 851,3766 - Gefunden: 851,3792.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,16 (s,3H); 1,20 (s); 1,72 (s,3H); 1,80 (s,31-1); 2,15-2,60 (m); 2,19 (s,3H); 2,52 (s,3H); 4,02 (d,1H); 4,28 (d,1H); 4,35 (d,1H); 4,55 (dd,lH); 4,59 (d,1H); 4,88 (br.s,1H); 4,99 (d,1H); 5,34 (m,2H); 5,76 (d,1H); 6,13 (m,1H); 6,55 (s,1H); 7,32 (m); 7,49 (m,2H); 7,61 (m,1H); 8,11 (d,2H)
    • Beispiel 32 Herstellung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminflocarbonyl-7- desoxy-7ß,8ß-methanotaxol (Verbindung 30)
  • N-Debenzoyl-N-Cbz-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol 21 (60 mg, 0,07 mM; Herstellungsbeispiel 42) wird in 3 ml absolutem Ethanol gelöst und mit 20 mg 10% Pd-auf-Kohle versetzt.
  • Danach wird bei Atmosphärendruck 5,5 h lang hydriert. Wenn eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß kein Ausgangsmaterial mehr vorhanden ist, wird das Reaktionsgemisch durch Celite filtriert und im Vakuum eingeengt.
  • Der Rückstand, bei dem es sich um 13-(β-Phenylisoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III (22, 52 mg, 0,07 mM; Herstellungsbeispiel 43) handelt, wird in 1 ml THF gelöst und mit 8 ml (0,07 mM) tert.-Butylisocyanat versetzt. Da eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt, daß noch etwas Amin vorhanden ist, wird das Reaktionsgemisch auf 0ºC gekühlt und mit 7 ml tert.-Butylisocyanat versetzt. Da immer noch etwas Amin vorhanden ist, werden weitere 7 ml und dreimal 5 ml zugegeben, wobei die Reaktion zwischen den einzelnen Zugaben jeweils durch Dünnschichtchromatographie überwacht wird. Das Reaktionsgemisch wird schließlich zum Abschrecken mit Wasser versetzt und zwisehen saurer Salzlake und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird über 6 g von in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chroräatographiert. Die Säule wird mit 30 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 50 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan und 80 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei Fraktionen von 3 ml aufgefangen werden. Das gewünschte N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7-desoxy-7ß,8ß-methanotaxol findet sich in den Fraktionen 29-48.
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend): Theoretisch:
  • 831,3704 - Gefunden: 831,3717.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,18 (s); 1, 2 : 3 (s,3H); 1,26 (s,3H); 1,66 (m); 1,82 (s,3H); 1,98-2,48 (m); 2,20 (s,3H); 2,38 (s,3H); 4,05 (m,2H); 4,30 (d,1H); 4,50 (miR); 4,60 (d,1H); 4,73 (m, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,19 (m, 1H); 6,31 (s, 1H); 7,32 (m); 7,51 (m,2H); 7,61 (m, 1H); 8,13 (d,2H)
    • Beispiel 33 Herstellung von Baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonat (Verbindung 8D)
  • Eine Lösung von Baccatin-III (Beispiel 33; 5,25 g, 8, 93 mmol) in CH&sub2;CIz (21 ml) und Pyridin (18, 1 ml) wird in einem -30ºC kalten Bad gekühlt. Nach Zugabe von Trifluormethansulfonsäureanhydrid (3,76 ml, 6,31 g, 22,3 mmol) wird das erhaltene Gemisch gerührt und sich innerhalb von 1 h auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Die Reaktion ist nach 4 h beendet. Nach Zugabe von gesättigter wäßriger NH&sub4;C&sub1;-Lösung (50 ml) wird das Gemisch mit CH&sub2;C12 extrahiert. Der organische Extrakt wird sukzessive mit 1 M wäßriger NaHSO&sub4;- Lösung (50 ml), gesättigter wäßriger NaHC&sub0;&sub3;-Lösung (2 · 50 ml) und gesättigter wäßriger NaCl-Lösung gewaschen, getrocknet (Na&sub2;S09), filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Während der Lösungsmittelentfernung wird dafür Sorge getragen, daß sich die Lösung nicht auf mehr als 40ºC erwärmt. Der feste Verdampfungsrückstand wird über Silicagel (6'7 Silicagel in einer 75 mm-Säule, es werden Fraktionen von 125 ml aufgefangen) flash-chromatographiert.
  • Das Material wird auf die Säule in Form einer CH&sub2;C&sub1;&sub2;-Lösung aufgegeben. Die Säule wird mit 5% CH&sub3;CN-CH&sub2;O&sub1;&sub2; eluiert. Die Fraktionen 19-35 enthalten das gewünschte 7-O-Trifluormethansulfonat 8D (4,837 g, 6,71 mmol, 75%) als weißen Feststoff.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,10 (d. 2H, J = 7,2 Hz), 7,63 (t, 1H. J = 7,4 Hz), 7,49 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 6,63 (s, 1H. H&sub1;&sub0;), 5,68 (d. 1K, J = 7,0 Hz, H&sub2;), 5,52 (dd, 1H, J = 7,5, 10,1 H&sub2;, H&sub7;), 4,94 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H&sub5;). 4,86 (m. 1H. H&sub1;&sub3;). 4,35 (d, 1H, J = 8,4 Hz. H&sub2;O&sub4;). 4,15 (d. 1H, 1-8,4 Hz, H&sub2;&sub0;b), 4,01 (d, 1H, J = 7,0 Hz. H&sub3;), 2,87 (5 Linien, H&sub1;&sub4;a) 2,30 (s, 3H,-CH&sub3;), 2,20 (s, 3H. -CH&sub3;), 2,10-2.30 (m. H6a, H6b, H14b) 1,87 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,59 (s, 3H. -CH&sub3;), 1,19 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,05 (s, 3H, -CH&sub3;).
    • Beispiel 34 Herstellung von Δ6'7-Baccatin-III
  • Eine Lösung von Baccatin-:III-7-O- trifluormethansulfonat (Verbindung 8D; 0,97 g, 1,35 mmol) und 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en (1,01 ml, 1,03 g, 6,76 mmol) in THF (6 ml) wird bei Raumtemperatur 1 h, bei 50ºC 2,5 h und bei Rückflußtemperatur 3 h lang gerührt.
  • Danach ist die Reaktion beendet. Nach Zugabe von ETOAc wird die Lösung mit gesättigter wäßriger NaHCO&sub3;-Lösung und mit gesättiger wäßriger NaCl-Lösung gewaschen. Die organische Schicht wird getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und unter vermindertem Druck eingedampft. Der hierbei angefallene Verdampfungsrückstand (0,876 g) wird über Silicagel (6'7-Silicagel in einer 45 mm-Säule) unter Verwendung einer Lösung in 0112012 (1 ml) zur Applikation auf die Säule flash-chromatographiert. Die Säule wird mit 10% CH&sub3;CN-CH&sub2;Cl&sub2; (1 l), 15% CH&sub3;CN-CH&sub2;Cl&sub2; (0,5 l) und mit 20% CH&sub3;CN-CH&sub2;C12 (0,5 l) eluiert. Fraktionen, die aufgrund einer dünnschichtchromatographischen Analyse das gewünschte Material enthalten, werden miteinander vereinigt, wobei die Titelverbindung erhalten wird (0,556 g, 0,978 mmol, 72%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,14 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,63 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7,50 (t, 2H. J = 7,6 Hz), 6,24 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,07 (dd, 1H, 35,7, 9,9 Hz, H&sub6;), 5,87 (d, 1H, J = 9, 9 Hz, H&sub7;), 5,80 (d, 1H, J = 6,6 Hz, H&sub2;), 5,12 (d, 1H, J = 5,5 Hz, H&sub5;), 4,87 (m, 1H, H13), 4,43 (d, 1H, J = 8,1 H&sub2;, H&sub2;&sub0;a), 4,29 (d, 1H, J = 8,1 Hz, H&sub2;&sub0;b), 4,10 (d, 1H. J = 6,6 Hz, H9, 2,31 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,20-2,31 (m, 2H, H14a,b) δ 2,24 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,97 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,85 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,12 (s, 6H. 2 -CH&sub3;); ¹³C NMR (CDCl&sub3;) δ 205,6, 170,3, 169,7, 167,0, 145,5, 139,8, 133,7, 132,6, 130,1, 129,4, 128,6, 126,2, 81,2, 81,0, 18,7, 76,4, 75,5, 67,9, 55,5, 42,7, 41,7, 39,0, 30,9, 26,3, 22,7, 21,0, 20,9, 20,2, 15,0.
    • Beispiel 35 Herstellung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-2'-triethylsilyl-baccatin III (Verbindung 12DA)
  • 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel 23, 450 mg, 0,51 mM) wird in 5 ml trockenen Pyridins gelöst und auf 0ºC gekühlt. Danach wird die Lösung mit Chlortriethylsilan (100 ul, 0,61 mM) versetzt. Nachdem sich die Lösung auf Raumtemperatur erwärmen durfte, zeigt eine nach 1-stündigem Rühren durchgeführte dünnschichtchromatographische Analyse keine Reaktion. Nach 3 weiteren Zugaben von 100 ul, 200 ul bzw. 100 ul Chlortriethylsilan zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein restliches Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird zwischen gesättigter CuSO&sub4;-Lösung und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht unter Verwendung von gesättigter CuSO&sub4;-Lösung rüccextrahiert. Die organische Schicht wird durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird auf 40 g von in 1 : 3 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CHZC12. Die Säule wird mit 300 ml 1 : 3 EtOAc : Hexan, 450 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan und 150 ml 1 : 1 EtOAc: Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 20 ml.
  • Die Verbindung 12DA findet sich in den Fraktionen 17-32 in einer Menge von 502 mg (98%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 0,38 (m, 6H); 0,77 (m, 9H); 1,14 (s, 3H); 1,26 (s, 3H); 1,69 (s, 3H); 1,84 (s, 3H); 1,91 (m, 2H); 2,24 (s, 3H); 2.35 (m, 1H); 2,55 (m, 4H); 3,79 (d, 1H); 4,21 (d, 1H); 4.80 (d, 1H); 4,43 (m, 1H); 4,58 (s, 1H); 4.94 (m; 2H); 5,04 (d, 1H); 5,33 (d, 1H); 5,66 (d, 1H); 5,76 (d, 1H); 6,26 (s, 1H); 6,29 (m, 1H); 7; 27 (m); 7,38 (m, 2K); 7,50 (m, 2K); 7,59 (m, 1H); 8,12 (d, 2H).
  • Massenspektrum: Theoretisch: 998,4358 - Gefunden: 998,4344.
    • Beispiel 36 Herstellung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-2'-triethylsilyl-baccatin-III-7-O- trifluormethansulfonat (Verbindung 24)
  • 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-2'-triethylsilyl-baccatin III (Verbindung 12DA; 200 mg, 0,20 mM) wird in 2, 5 ml CH&sub2;O&sub1;&sub2; und trockenem Pyridin (500 ul, 6 mM) gelöst und auf -40ºC gekühlt. Danach wird die Lösung mit Trifluormethansulfonsäureanhydrid (100 ul, 0,60 mM) versetzt. Nach 45 min darf sich die Lösung auf Raumtemperatur erwärmen. Nach 2,5-stündigern Rühren zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein restliches Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird zwischen gesättigter CuSO&sub4;- Lösung und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht unter Verwendung von gesättigter Cu- SO&sub4;-Lösung rückextrahiert. Die organische Schicht wir durch Na&sub2;SC4 filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird über 20 g von in 1 : 4 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;C&sub1;&sub2;. Die Säule wird mit 150 ml 1 : 4 EtOAc : Hexan und 200 ml 1 : 3 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 10 ml. Die Verbindung 24 findet sich in den Fraktionen 9-28 in einer Menge von 212 mg (94%) ¹H NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 0,38 (m, 6H); 0,77 (m, 9H); 1,88 (m, 1H); 1,89 (s, 3H); 2,04 (s, 3H); 2,20 (s, 3H); 2,30 (m, 2H); 2,54 (s, 3H); 2,87 (m, 1H); 3,93 (d, 1H); 4.,22 (d, 1H): 4,33 (d, 1H); 4,58 (d, 1H); 4,93 (m, 2H); 5,04 (d, 1H); 5,35 (d, 1H); 5,49 (m, 1H); 5,73 (m, 2H); 6,26 (m, 1H); 6,61 (s, 1H); 7,147,41 (m); 7,52 (m, 2H); 7,62 (m, 1H); 8 12 (d, 2H).
  • Massenspektrum: Theoretisch: 1130,3851 - Gefunden: 1130, 3845.
    • Beispiel 37 Herstellung von 13-(N-tert.-Butylharnstoff-β-phenylisoserinyl)-baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonat (Verbindung 27)
  • 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β--phenyl-isoserinyl)-2'-triethylsilyl-baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonat (Verbindung 24; 191 mg, 0,18 mM) wird in 3 ml Methanol und 2 ml trockenem THF gelöst. Danach wird die Lösung mit Ammoniumformiat (100 mg) und 10% Pd/C (50 mg) versetzt. Nach 0,5- stündigem Rühren zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird durch Celite filtriert. Das Filtrat wird zwischen 5%iger NaHC&sub0;&sub3;-Lösung und EtOAc verteilt, worauf die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt wird. Hierbei bleiben 160 mg Verdampfungsrücktand übrig.
  • Dieser wird in 5 ml trockenen THF gelöst und mit tert.- Butylisocyanat (200 ul, 1,6 mM) versetzt. Nach 1-stündigem Rühren zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse noch restliches Ausgangsmaterial, so daß weitere 200 ul tert.-Butylisocyanat zugegeben werden. Um eine vollständige Reaktion zu gewährleisten werden zwei weitere Male 200 ul tert.-Butylisocyanat zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt und mit 9 ml 0,1 N Salzsäure in Methanol versetzt. Nach 0,25-stündigem Rühren zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein restliches Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird zwischen 5%iger NaHCO&sub3;-Lösung und EtOAc verteilt, worauf die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt wird. Der hierbei angefallene Verdampfungsrückstand wird über 20 g von in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2;. Die Säule wird mit 100 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan und 150 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 10 ml. Die Verbindung 27 findet sich in den Fraktionen 19-40 in einer Menge von 159 mg (90%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,22 (m); 1,87 (s, 3H); 2,01 (s, 3H); 2,18 (s, 3H); 2,28 (m. 3H); 2,42 (s, 3H); 2,85 (m, 1H); 3,92 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,33 (d, 1H); 4.55 (m, 1H); 4,63 (d, 1H); 4,91 (d, 1H); 5,20 (m, 1H): 5,32 (m, 1H); 5,45 (m, 1H); 5,73 (d, 1H); 6,15 (in, 1H); 6,60 (s, 1H); 7,32 (m, SH); 7,50 (m. 2H); 7,62 (m, 1H); 8 O8 (d, 2H).
  • Massenspektrum: Theoretisch: 981,3302 - Gefunden: 981,3302.
    • Beispiel 38 Herstellung von Baccatin-III-7-O-trifluormethansulfonsäure- 13-[(4S, 5R)-N-benzyloxycarbonyl-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidin]carbosäureester (Verbindung 26)
  • Rohes (4S,5R)-N-Benzyloxycarbonyl-2-(2, 4-dimethoxy- phenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurenatriumsalz (Herstellungsbeispiel 21; 700 mg, 1,05 mM) wird zwischen CH&sub2;Cl&sub2; und 5%iger NaHSOq-Lösung verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht mit EtOAc extrahiert.
  • Die vereinigten organischen Schichten werden durch wasserfreies Natriumsulfat filtriert und im Vakuum eingeengt, wobei 465 mg (4S, 5R)-N-Benzyloxy-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure zurückbleiben. Die gesamte (4S,5R)-N-Benzyloxy-2-(2, 4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäure wird als Lösung in 3 ml Toluol und 3 ml CH&sub2;Cl&sub2; zu Baccatin-III-7-O-trifluormethansulfonsäure (Verbindung 8D; 500 mg, 0,70 mM) zugegeben. Die hierbei erhaltene Aufschlämmung wird mit. DCC (230 mg, 1,12 mM) und DMAP (40 mg, 0,35 mM) versetzt. Nach 4-stündigem Rühren wird das Reaktionsgemisch durch Celite filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 70 g von in 1 : 3 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2;. Die Säule wird mit 900 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 500 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan und 200 ml 1 : 1 EtOAc: Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 25 ml.
  • Ein weniger polares Produkt. findet sich in den Fraktionen 17-38.
  • Ein stärker polares Produkt findet sich in den Fraktionen 23-48.
  • Das weniger polare Produkt wird in den Fraktionen 17- 22 in einer Menge von 50 mg gesammelt.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,23 (s, 6H); 1,86 (s, 3H); 2,08 (s, 3H); 2,22 (s, 6H); 2,38 (m, 1H); 2,82 (m, 1H); 3,82 (m, 6H); 3,98 (d, 1:H); 4,15 (d, 1H); 4,31 (d, 1H); 4,89 (d, 1H); 4,96 (m, 1H); 5,02 (d); 5,52 (m, 2H); 5,72 (m, iM); 6,26 (m, 1H); 6,40 (m, 1H); 6,48 (m, 1H); 6,65 (s, 1H); 6,74 (s, 1H); 7,40 (d, 1H); 7,22 (m); 7,37-7,67 (m); 8,03 (d, 2H).
  • Das stärker polare Produkt wird in den Fraktionen 39 und 40 in einer Menge von 56 mg gesammelt.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,13 (s, 3H); 1,17 (s, 3H); 1,81 (s, 3H); 2,03 (s, 3H); 2,10 (m, 1H); 2,18 (m, 1H); 2,19 (s, 3H): 2,80 (zu. 1H); 3,81 (m, 6H); 4,09 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,54 (d, 1H); 4,80 (m, 2H); 4,94 (d, 1H); 5,41 (m, 1H); 5,57 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 5,89 (m, 1H); 6,48 (m): 6,78 (m); 7,15 (m); 7,43 (m); 7,62 (m, 1H); 8,00 (d, 2H) Die Gemischfraktionen (Fraktionen 23-38) enthalten 650 mg, insgesamt 706 mg (87%).
    • Beispiel 39 Herstellung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonsäure (Verbindung 25)
  • Die Gemischfraktionen 23-38 (Beispiel 38; 650 mg, 0,56 mM) werden in 1 ml CH&sub2;Cl2 und 30 ml O,1 N methanolischer Salzsäure gelöst. Nach 1-stündigem Rühren zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird zwischen 5%iger NaHCO&sub3;- Lösung, Salzlake und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die wäßrige Schicht unter Verwendung von EtOAc rückextrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 60 g von in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Zugabe des Rückstands erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;O&sub1;&sub2;.
  • Die Säule wird mit 900 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 200 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan und 210 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 25 ml
  • Die Verbindung 25 findet sich in den Fraktionen 25-43 in einer Menge von 525 mg (93%)
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,22 (s, 3H); 1,26 (s, 3H); 1,92 (s, 3H); 2,02 (s. 3H); 2,24 (s, 3H); 2,29 (m); 2,43 (s, 3H); 2,88 (m, 1H); 3,40 (d, 1H); 3,94 (d, 1H); 4,23 (d, 1H); 4,36 (d, 1H); 4,71 (m, 1H); 4,93 (d, 1H); 5,00 (d, 1H); 5,12 (d, 1H); 5 39 (d, 1H); 5,48 (m, 1H); 5,74 (d, 2H); 6,24 (m, 1H); 6,63 (s, 1H); 7,23 (m); 7,30 (:m); 7,40 (m); 7,56 (m, 2H); 7,67 (m, 1H); 8,15 (d, 2H).
  • Massenspektrum: Theoretisch: 1016,2986 - Gefunden: 1016, 3008.
    • Beispiel 40 Herstellung von 13-(N-tert.-Butylharnstoff-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonsäure (Verbindung 27)
  • Das 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonsäure (Verbindung 25; 200 mg, 0,20 mM) wird in 2 ml trockenem THF und 3 ml Methanol gelöst, worauf die erhaltene Lösung mit 100 mg NH&sub4;CO&sub2;H und 50 mg 10% Pd/C versetzt wird. Nach 0,5-stündigem Rühren zeigt eine dünnschichtchromatodraphische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird durch Celite filtriert, worauf das Filtrat zwischen 5%iger NaHCO&sub3;-Lösung, Salzlake und EtOAc verteilt wird. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt, wobei 160 mg (0,18 mM, 90%ige Ausbeute) Rückstand zurückbleiben. Der Rückstand wird in 5 ml trockenem THF gelöst und auf 0ºC gekühlt.
  • Dann wird die Lösung mit tert.-Butylisocyanat (25 ul, 0,23 mM) versetzt. Eine dünnschichtchromatographische Analyse zeigt nach 1 h noch Ausgangsmaterial, so daß weitere 15 ul tert.-Butylisocyanat zugegeben werden. Nach insgesamt 2 h zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr, so daß das Reaktionsgemisch im Vakuum eingeengt wird. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 18 g von in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Zugabe des Rückstands erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;C&sub1;&sub2;. Die Säule wird mit 100 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 100 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan und 200 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 10 ml. Die Verbindung 27 findet sich in den Fraktionen 17-31 in einer Menge von 160 mg (83%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,22 (m); 1,87 (s, 3H); 2,01 (s, 3H); 2,18 (s, 3H); 2,28 (m, 3H); 2,42 (s, 3H); 2,85 (m, 1H); 3,92 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,33 (d, 1H); 4,55 (m, 1H); 4,63 (d, 1H); 4,91 (d, 1H); 5,20 (m, 1H); 5,32 (in, 1H); 5,45 (m, 1H); 5,73 (d, 1H); 6,15 (m, 1H); 6,60 (s, 1H); 7,32 (m, SH); 7,50 (m, 2H); 7,62 (m, 1H); 8,08 (d, 2H).
  • Massenspektrum: Theoretisch: 981,3302 - Gefunden: 981, 3302.
    • Beispiel 41 Herstellung von 13-(N-tert.-Butylharnstoff-β-phenylisoserinyl)-Δ6'7-baccatin III (Verbindung 16F)
  • Das 13-(N-tert.-Butylharnstoff-β-phenylisoserinyl)- baccatin-III-7-0-trifluormethansulfonsäure (20 mg, 0,02 mM) wird in 0,2 ml trockenem THF gelöst und mit DBU (15 ul, 0,10 mM) versetzt. Nachdem die Lösung auf 60ºC erwärmt und 1 h lang gerührt worden war, zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse noch vorhandenes Ausgangsmaterial. Somit werden weitere 10 ul DBU und 2 ml THF zugegeben. Nach 2,5-stündiger Reaktion wird das Reaktionsgemisch zwischen 5%iger NaHC&sub0;&sub3;-Lösung, Salzlake und EtOAc verteilt. Die Schichten werden getrennt, worauf die organische Schicht durhc Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt wird. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 2 g von in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2;. Die Säule wird mit 10 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 30 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan und 15 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 1 ml. Die Verbindung 16F findet sich in den Fraktionen 32-51 in einer Menge von 13 mg (75%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,23 (m); 1,75 (s, 3H); 1,86 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,32 (m, 2H); 2,42 (s, 3H); 3,99 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,42 (d, 1H); 4,60 (m, 2K); 5,10 (d, 1H); 5,15 (m, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,85 (m, 2H); 6,04 (m, 1H); 6,17 (m, 1H); 6,22 (s, 1H); 7,33 (m, 5K); 7,51 (m, 2H); 7,63 (m, 1H); 8,14 (d, 2H).
  • Massenspektrum: Theoretisch: 831,3704 - Gefunden: 831,3742.
    • Beispiel 42 Herstellung von 13-(N-BOC-β-Phenylisoserinyl)-7- trifluormethansulfonsäure-baccatin III (Verbindung 28)
  • Das 13-(N-CBZ-β-Phenylisoserinyl)-7- trifluormethansulfonsäure-baccatin III (Verbindung 25; 200 mg, 0,20 mM) wird in 2 ml trockenem THF und 3 ml Methanol gelöst, worauf die Lösung mit 100 mg NH&sub4;CO&sub2;H und 50 mg 20% Pd/C versetzt wird. Nach 0,5-stiindigem Rühren zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein restliches Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird durch Celite filtriert, worauf das Filtrat zwischen 5%iger NaHCO&sub3;- Lösung, Salzlake und EtOAc verteilt wird. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Hierbei fallen 160 mg (0,18 mM, 90%ige Ausbeute) Rückstand an. Der Rückstand wird in 5 ml trockenem THF gelöst und mit Di-tert.-butyldicarbonat (43 mg, 0,20 mM) und Triethylamin (30 ul, 0,22 mM) versetzt. Eine dünnschichtchromatographische Analyse nach 18- stündigem Rühren zeigt kein Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt, worauf der Verdampfungsrückstand über 18 g von 1 : 2 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert wird. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;O&sub1;&sub2;. Die Säule wird mit 200 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan und 200 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 10 ml.
  • Die Verbindung 28 findet sich in den Fraktionen 13-33 in einer Ausbeute von 165 mg (86%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,22 (s, 3M); 1,24 (s, 3H); 1,35 (s, 9H); 1,88 (s, 3H); 2,02 (s, 3H); 2,20 (s. 3H); 2,28 (m, 3H); 2,40 (s, 3H); 2,86 (m, 1H); 3,93 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,34 (d, 1H); 4,63 (m, 1H); 4,91 (d, 1H); 5,26 (m, 1H); 5,37 (d, 1H); 5,46 (m, 1H); 5,73 (d, 1H); 6,20 (in, 1H); 6,61 (s, 1H); 7,38 (m, SH); 7,51 (m, 2H); 7,63 (m, 1H); 8,10 (d, 2H) Massenspektrum: Theoretisch: 982,3142 - Gefunden: 982, 3120.
    • Beispiel 43 Herstellung von 13-(N-BOC-β-Phenylisoserinyl)-Δ6'7-baccatin III (Verbindung 16D)
  • Das 13-(N-BOC-β-Phenylisose rinyl)-7-trifluormethansulfon-baccatin III (Verbindung 28; 165 mg, 0,17 mM) wird in 3 ml trockenem THF gelöst und mit DBU (250 ul, 1,7 mM) versetzt. Nachdem die Lösung auf 60ºC erwärmt und 2,5 h lang gerührt worden war, zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse noch etwas restliches Ausgangsmaterial. Somit werden weitere 50 ul DBU zugegeben. Nach 5 h zeigt eine dünnschichtchromatographische Analyse kein Ausgangsmaterial mehr. Das Reaktionsgemisch wird zwischen 5%iger NaHCO&sub3;- Lösung, Salzlake und EtOAc verteilt. Nach Trennung der Schichten wird die organische Schicht durch Na&sub2;SO&sub4; filtriert und im Vakuum eingeengt. Der hierbei angefallene Rückstand wird über 16 g von in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Produktzugabe erfolgt unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2;. Die Säule wird mit 200 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan und 250 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan eluiert. Aufgefangen werden Fraktionen von 8 ml. Die Verbindung 16D findet sich in den Fraktionen 17-32 in einer Ausbeute von 115 mg (82%).
  • Derivate der 7-Desoxy-7ß,8ß-methanotaxole, bei denen die 2'-Hydroxylgruppe verestert. ist, werden direkt aus dem gewünschten 7-Desoxy-7ß,7ß-methanotaxol nach von A. E. Mathew et al. in "J. Med. Chem." 1992, 35, 145 und US-A-4 960 790, 4 942 184 und 5 059 699 beschriebenen Verfahren hergestellt.
  • Beim Nacharbeiten der allgemeinen Maßnahmen gemäß Mathew et al. (vgl. beispielsweisse US-A-4 960 790, 4 924 184 und 5 059 699), jedoch unter Einsatz des geeigneten 7- Desoxy-7β,8β-methanotaxolanalogon, werden folgende Verbindungen:
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-[-C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7ß,8ß-methanotaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Lysyl> -7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
  • 7-Desoxy-7β,8β-methanotaxoter und deren pharmazeutisch akzeptable Salze im Falle, daß die betreffende Verbindung entweder eine saure oder eine basische funktionelle Gruppe enthält, hergestellt.
  • Taxol und die sonstigen als Ausgangsmaterial verwendeten Taxolanaloga sind bekannt oder lassen sich ohne weiteres nach bekannten Verfahren herstellen. Vgl. "The Chemistry of Taxol" in "Pharmac. Ther.", Band 52, S. 1-34, 1991 sowie US-A-4 814 470, 4 857 653, 4 942 184, 4 924 011, 4 924 012, 4 960 790, 5 015 744, 5 059 699, 5 136 060, 5 157 049, 4 876 399 und 5 227 400 sowie PCT-Veröffentlichung WO 92/09589, europäische Patentanmeldung 90305845.1 (Veröffentlichung A2 0 400 971), 894009356 (Veröffentlichung A1 0 366 841) und 90402333.0 (Veröffentlichung A1 0 414 610), 87401669.4 (Veröffentlichung A1 0 253 739), 92308608.6 (Veröffentlichung A1 0 534 708), 92308609.4 (Veröffentlichung A1 534 709) sowie PCT-Veröffentlichungen WO 91/17977, WO 91/17976, WO 91/13066 und WO 91/13053. Auf sämtliche dieser Literaturstellen wird hierin Bezug genommen.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen lassen sich als solche oder in Form ihrer pharmazeutisch akzeptablen Salze, insbesondere ihrer nichttoxischen pharmazeutisch akzeptablen Additionssalze oder akzeptablen Basesalze, in Arzneimittelpräparate überführen. Die Salze lassen sich aus den erfindungsgemäßen Verbindungen mit sauren oder basischen Gruppen nach üblichen chemischen Verfahren herstellen.
  • Normalerweise werden die Salze durch Umsetzen der freien Base oder Säure mit stöchiometrischen Mengen oder mit einem Überschuß an der gewünschten salzbildenden anorganischen oder organischen Säure in einem geeigneten Lösungsmittel oder in verschiedenen Lösungsmittelkombinationen hergestellt. So kann beispielsweise die freie Base in einer wäßrigen Lösung der geeigneten Säure gelöst werden.
  • Das Salz wird dann nach Standardmaßnahmen, beispielsweise durch Eindampfen der Lösung, gewonnen. Andererseits kann die freie Base auch in einem organischen Lösungsmittel, 2. B. einem Niedrigalkanoyl, einem Ether, einem Alkylester oder Mischungen derselben, beispielsweise Methanol, Ethanol, Ether, Ethylacetat, einer Ethylacetat-Etherlösung u. dgl. gelöst und dann zur Bildung des entsprechenden Salzes mit einer geeigneten Säure behandelt werden. Das Salz wird nach Standardrückgewinnungsverfahren, beispielsweise durch Abfiltrieren des gewünschten Salzes bei spontaner Abscheidung (desselben) aus der hösung, gewonnen. Andererseits kann es auch durch Zusatz eines Lösungsmittels, in dem das Salz unlöslich ist, ausgefällt und daraus rückgewonnen werden.
  • Die erfindungsgemäßen Taxolderivate können infolge ihrer cytotoxischen Antitumoraktivität bei der Krebsbehandlung eingesetzt werden. Die neuen Verbindungen sind in Form von Tabletten, Pillen, Pulvergemischen, Kapseln, injizierbaren Lösungen, Suppositorien, Emulsionen, Dispersionen, Nahrungsmittelvormischungen und in sonstiger geeigneter Form verabreichbar. Das Arzneirnittelpräparat, welches die Verbindung enthält, ist übliche rweise mit einem nichttoxisehen pharmazeutischen organischen Träger oder einem nichttoxischen pharmazeutischen anorganischen Träger, üblicher-Weise von 0,01 mg bis zu 2500 mg oder höher pro Dosiseinheit, vorzugsweise 50-500 mg, gemischt. Typische Beispiele für pharmazeutisch akzeptable Träger sind Mannit, Harnstoff, Dextrane, Lactose, Kartoffel- und Maisstärken, Ma gnesiumstearat, Talkum, Pflanzenöle, Polyalkylenglykole, Ethylcellulose, Poly(vinylpyrro:lidon), Calciumcarbonat, Ethyloleat, Isopropylmyristat, Benzylbenzoat, Natriumcarbonat, Gelatine, Kaliumcarbonat, Kieselsäure und sonstige üblicherweise eingesetzte akzeptable Träger. Die Arzneimittelzubereitung kann auch nichttoxische Hilfsstoffe, z. B. Emulgier-, Konservier- und Befeuchtungsmittel u. dgl., beispielsweise Sorbitanmonolaurat, Triethanolaminoleat, Polyoxyethylenmonostearat, Glyceryltripalmitat, Dioctylnatriumsulfosuccinat u. dgl., enthalten.
  • Ein Beispiel für ein typisches Verfahren zur Herstellung einer Tablette mit den aktiven Mitteln besteht darin, zuerst das Mittel mit einem nichttoxischen Bindemittel, wie Gelatine, Akazienschleim, Ethylcellulose u. dgl., zu misehen. Das Mischen erfolgt zweckmäßigerweise in einem Standard-V-Mischer und üblicherweise unter wasserfreien Bedingungen. Danach kann das gerade hergestellte Gemisch mittels üblicher Tablettiervorrichtungen zerstoßen und das zersto-Bene Gemisch zu Tabletten verarbeitet werden. Die frisch hergestellten Tabletten können beschichtet werden oder unbeschichtet bleiben. Beispiele für geeignete Überzüge sind nichttoxische Überzüge einschließlich Schellack, Methylcellulose, Karnaubawachs, Styrol/Maleinsäure-Copolymere und dergleichen. Zur oralen Verabreichung werden Preßtabletten mit 0,01 mg, 5 mg, 25 mg, 50 mg, , 500 mg u. dgl. bis zu 2500 mg hergestellt (vgl. hierzu die einschlägigen Erläuterungen und Beschreibungen bekannter Fabrikationstechniken in "Remington's Pharmaceutical Science, Kapitel 39, Mack Publishing Co., 1965).
  • Zur Formulierung der Tablette werden die aktive Verbindung, Maisstärke, Lactose, Dicalciumphosphat und Calciumcarbonat unter trockenen Bedingungen in einem üblichen VMischer so lange gleichförmig gemischt, bis eine einheitliche Mischung sämtlicher Bestandteile erhalten ist. Danach wird die Maisstärkepaste als 10%ige Paste zubereitet und so lange mit dem eben hergestellten Gemisch vermischt, bis eine gleichförmige Mischung erhalten ist. Die Mischung wird schließlich durch ein Standardsieb lichter Maschenweite gesiebt, unter wasserfreier Atmosphäre getrocknet und danach mit Calciumstearat gemischt, zu Tabletten gepreßt und gewünschtenfalls beschichtet.
  • In ähnlicher Weise werden andere Tabletten mit 10, 50, 100, 150 mg u. dgl. hergestellt.
  • Die folgende Rezeptur I stellt ein Beispiel für eine Tablettenrezeptur mit einer erfindungsgemäßen Verbindung dar. REZEPTUR I
  • Die Herstellung von Kapseln mit 10 mg bis 2500 mg zur oralen Einnahme besteht im wesentlichen darin, die aktive Verbindung mit einem nichttoxischen Träger zu vermischen und das Gemisch in eine polymere Hülle, üblicherweise Gelatine o. dgl. einzuschließen. Die Kapseln können aus bekannten Weichkapseln bestehen. Diese erhält man durch Einschluß der Verbindung in enger Dispersion mit einem eßbaren, verträglichen Träger. Andererseits kann die Kapsel aus einer Hartkapsel mit im wesentlichen der neuen Verbindung in Mischung mit einem nichttoxischen Feststoff, wie Talkum, Calciumstearat, Calciumcarbonat u. dgl. bestehen. Kapseln mit 25 mg, 75 mg, 125 mg u. dgl. der neuen Verbindung alleine oder in Mischung aus zwei oder mehr der neuen Verbindungen werden beispielsweise wie folgt. hergestellt: REZEPTUR II
  • Die genannten Bestandteile werden miteinander in einem Standardmischer gemischt und danach in handelsübliche Kapseln abgefüllt. Wenn höhere Konzentrationen an dem aktiven Mittel verwendet werden, wird die Lactosemenge entsprechend vermindert.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch gefriergetrocknet und gewünschtenfalls mit anderen pharmazeutisch akzeptablen Streckmitteln zur Herstellung von für eine parenterale injizierbare Verabreichung geeigneten Rezepturen kombiniert werden. Für eine solche Verabreichung kann die Rezeptur in Wasser (normal, physiologische Kochsalzlösung) oder einem Gemisch aus Wasser und einem organischen Lösungsmittel, wie Propylenglykol, Ethanol u. dgl., wieder aufbereitet werden.
  • Die Verabreichungsdosis, Entweder als Einzeldosis, Mehrfachdosis oder tägliche Dosis, variiert selbstverständlich entsprechend der jeweils verwendeten erfindungsgemäßen Verbindung (unterschiedliche Stärke), der gewählten Verabreichungsroute, der Größe des Empfängers und der Art des Zustands des Patienten. Die Verabreichungsdosis unterliegt keinen speziellen Beschränkungen, sie erfolgt üblicherweise in einer aus einer Dosisrezeptur bei metabolischer Freisetzung des aktiven Mittels erhaltenen wirksamen Menge oder einem Äquivalent derselben auf molarer Basis der pharmakologisch aktiven freien Form zum Erreichen der gewünschten pharmakologischen und physiologischen Wirkungen.
  • In typischer Weise werden die erfindungsgemäßen Verbindungen durch intravenöse Injektion in Dosen von 1-500 mg pro Patient im Behandlungsverlauf, vorzugsweise in Dosen von 2-100 mg, verabreicht. Die genaue Dosis hängt vom A1ter, Gewicht und Zustand des Patienten ab. Ein Beispiel für eine geeignete Injektionsrezeptur ist die Verwendung einer Lösung der erfindungsgemäßen Verbindung in einem Gemisch aus Polysorbatalkohol und entwässertem Alkohol (beispielsweise 1 : 1) nach Verdünnung mit 5% Dextrose in Wasser vor der Infusion oder Injektion.
  • Die Verbindungen der Formel I (einschließlich II, III und IV) eignen sich für dieselben Krebsarten, bei denen sich Taxol als aktiv erwiesen hat. Hierzu gehören humane Eierstocktumore, Brusttumore und malignes Melanom, Lungentumore, Magentumore, Kolontumore, Kopf- und Nackentumore sowie Leukämie. Die klinische Pharmakologie von Taxol wird beispielsweise von Eric K. Rowinsky und Ross C. Donehower in "The Clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics, Pharmac. Ther.", Band 52, S. 35-84 (1991) beschrieben. Über klinische und vorklinische Studien mit Taxol wird von William J. Slichenmyer und Daniel D. Von Hoff in "Taxol: A New and Effective Anticancer Drug" in "Anti-Cancer Drugs", Band 2, S. 519-530 (1991) berichtet.
  • Die biologische Aktivität der erfindungsgemäßen 7- Desoxy-7β,8β-methanotaxolverbindungen (Formel II) wurde unter Heranziehung bekannter Maßnahmen bestätigt. So zeigte beispielsweise ein Vergleich der Cytotoxität von 7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung IIb; Produkt des Beispiels 19) mit Taxol selbst bei L1210-Mäuseleukämiekarzinomzellen in einer Kultur, daß die IC&sub9;&sub0; (90%-Wachstumshemmkonzentra- tion) für 7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol 0,025 ug/ml und für Taxol 0,06 ug/ml betrug. Bei einem in-vitro-Tubulinpolymerisationstest entsprechend der Beschreibung von F. Gaskin et al. in "J. Mol. Biol.", 89 : 737, 1974, vermochte 7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol eine Tubulinpolymerisation in vitro bei 20ºC in sehr ähnlicher Weise wie Taxol zu induzieren.
  • Die biologische Aktivität der 7-Desoxy-7-halogentaxolverbindungen (Formel III) gemäß der Erfindung wurde nach üblichen bekannten Maßnahmen bestätigt. So zeigte beispielsweise ein Vergleich der Cytotoxizität von 7-Desoxy-7- fluortaxol (Verbindung IIIb; Produkt des Beispiels II) mit Taxol selbst bei A2780 (humanes Eierstockkarzinom)-Zellen in einer Kultur, daß die I%0 (90% -Wachstumshemmkonzentration) für 7-Desoxy-7-fluortaxol 0,016 ug/ml und für Taxol 0,007 ug/ml betrug. Bei einem in vitro durchgeführten Tublinpolymerisationstest entsprechend den Angaben von F. Gaskin et al. in "J. Mol. Biol.", 89 : 737, 1974, vermochte 7-Desoxy-7-fluortaxol in vitro bei 20ºC eine Tubulinpolymerisation in sehr ähnlicher Weise zu induzieren wie Txol. Bei diesem Test war 7-Desoxy-7-fluortaxol etwa halb so stark wie Taxol.
  • Die biologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde weiterhin unter Benutzung bekannter Maßnahmen gegen L1210-Leukämie bestätigt. Die Ergebnisse finden sich in Tabelle I. Die Ergebnisse wurden im Rahmen üblicher bekannter Standardmaßnahmen (L. H. Li, S. L. Kuentzel, L. L. Murch, L. M. Pschigoga und W. C. Krueger, "Comparative biological and biochemical effects of nogalamycin and its analogs on L1210 leukemia" in "'Cancer Res." 39 : 4816-4822 (1979)) gewonnen. Die Ergebnisse sind als 1050 angegeben.
  • Hierbei handelt es sich um diejenige Arzneimittelkonzentration, die zu einer 50%igen Hemmung der Zellenproliferation gegenüber unbehandelten Kontrollzellen erforderlich ist.
  • Geringere Zahlenwerte entsprechen einer stärkeren Aktivität. TABELLE I REAKTIONSSCHEMA A-I REAKTIONSSCHEMA A-II REAKTIONSSCHEMA A-III REAKTIONSSCHEMA A' REAKTIONSSCHEMA B REAKTTONSSCHEMA B-II REAKTIONSSCHEMA B-III REAKTIONSSCHEMA C REAKTIONSSCHEMA D FORMELTABELLE FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLIE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELLE (Fortsetzung) FORMELTABELILE (Fortsetzung)

Claims (14)

1. Verbindung der Formel I: worin bedeuten:
R&sub1; -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5;, ein-, zwei- oder dreifach C&sub1;-C&sub4;-alkyl-, C&sub1;-C&sub3;-alkoxy-, halogen-, C&sub1;-C&sub3;-alkylthio-, trifluormethyl-, C&sub2;-C&sub6;-dialkylamino-, hydroxy- oder nitrosubstituiertes Phenyl, -2-Furyl, 2-Thienyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl oder 3,4-Methylendioxyphenyl;
R&sub2; -H, -NHC(O)H, -NHC(O)C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)Phenyl, ein-, zwei- oder dreifach C&sub1;-C&sub4;-alkyl-, C&sub1;-C&sub3;-alkoxy-, halogen-, C&sub1;-C&sub3;-alkylthio-, trifluormethyl-, C&sub2;-C&sub6;-dialkylamino-, hydroxy- oder nitrosubstituiertes -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;, -NHC(O)OCH&sub2;-Phenyl, -NH&sub2;, -NHSO&sub2;&submin;&sub4;- Methylphenyl, -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH, -NHC(O)-4-(SO&sub3;H) -Phenyl, -OH, -NHC(O)-1-Adamantyl, -NHC(O)O-3-Tetrahydrofuranyl, -NHC (O)O-4-Tetrahydropyranyl, -NHC (O) OC&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NHC&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NHPh, ein-, zwei- oder dreifach C&sub1;-C&sub4;-alkyl-, C&sub1;-C&sub3;-alkoxy-, halogen-, C&sub1;-C&sub3;-alkylthio-, trifluormethyl-, C&sub2;-C&sub6;-dialkylamino- oder nitrosubstituiertes -NHC(O)NHPh, -NHC(O)C&sub3;-Ce-Cycloalkyl, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub2;CH&sub2;Cl, Phthalimido, -NHC (O) -1-Phenyl-1- cyclopentyl, -NHC(O)-1-Methyl-1-cyclohexyl oder -NHC(S)NHC(CH&sub3;)&sub3;:
R&sub3; -H, -NHC(O) Phenyl oder -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, wobei gilt, daß zwar einer der Reste R&sub2; und R&sub3;, jedoch nicht beide für -H stehen;
R&sub4; -H, -OH, -OAc (-OC(O)CH&sub3;), -OO(O) OCH&sub2;O(Cl)&sub3;, -OCOCH&sub2;OH&sub2;NHAHCOO&sub3;&spplus; -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;. -OCOCH&sub2;CH&sub2;OOH, -!!000 < OCO (CH&sub2;) 3COOH, -OC(O)-Z -C(O)-R'[mit Z gleich Ethylen (-CH&sub2;OH&sub2;-), Propylen (-CH&sub2;CH&sub2;CH&sub2;-), -CH=CH-, 1,2-Cyclohexan oder 1,2-Phenylen und R' gleich -OH, -OH-Base, -NR'&sub2;R'&sub3;, -OR'&sub3;, -SR'&sub3;, -COOH&sub2;O(OCHZC (O) NR'&sub4;R'&sub5; mit R'&sub2; gleich -H oder -CH&sub3;, R'&sub3; gleich -(CH&sub2;)nNR'&sub6; R'&sub7; oder -(CH&sub2;) nN+R'&sub6; R'&sub7; R'&sub8; X (n = 1 bis 3, R'&sub4; gleich -H oder -C&sub1;-C&sub9;- Alkyl, R'&sub5; gleich -H, -C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, Benzyl, Hydroxyethyl, - CH&sub2;CO&sub4;H oder Dimethylaminoethyl, R'&sub6; und R'&sub7;, gleich -CH&sub3;, - CH&sub2;-CH&sub3; oder Benzyl oder R'&sub6; und R'&sub7;, zusammen mit dem Stickstoffatom von NR'&sub6; R'&sub7; gleich einer Pyrrolidino-, Piperidino-, Morpholino- oder N-Methylpiperizinogruppe, und R'&sub8; gleich -CH&sub3;, -CH&sub2;-CH&sub3; oder Benzyl, X gleich einem Halogenid) und Base gleich NH&sub3;, (HOC&sub2;H&sub4;)&sub3;N, N(CH&sub3;)&sub3;, CH&sub3; N (C&sub2;H&sub4;) 2NH&sub2;, NH&sub2; (CH&sub2;) 6NH&sub2;, N-Methyl-glucamin, NaOH oder KOH], -OC(O)(CH&sub2;)ONR&sub2;R&sub3; [mit n ist 1 bis 3, R&sub2; gleich -H oder -C&sub1;-C&sub3;-Alkyl und R&sub3; gleich -H oder -C&sub1;-C&sub3;-Alkyl], -OC(O)CH(R")NH&sub2;[mit R" gleich -H, -CH&sub3;, -CH&sub2;CH(CH&sub3;)&sub2;, -CH(CH&sub3;)CH&sub2;OH&sub3;, -CH(CH&sub3;)&sub2;, -CH&sub2;-Phenyl, - (CH&sub2;)&sub4;NH&sub2;, -CH&sub2;OH&sub2;COOH, -(CH&sub2;)&sub3;NHC(=NH)NH&sub2;], den Rest der Aminosäure Prolin, -OC(O)CH=CH&sub2;, -C(O)CH&sub2;OH&sub2;C(O)NHCH&sub2;CH&sub2;SO&sub3;&supmin;Y&spplus;, -OC(O)CH&sub2;CH&sub2;C(O)NHCH&sub2;OH&sub2;SO&sub3;Y&spplus; mit Y&spplus; gleich Na&spplus; oder N&spplus; (Bu)&sub4; oder -OC(O)CH&sub2;CH&sub2;O (O) OCH&sub2;OH&sub2;OH;
R&sub5; -H oder -OH, wobei gilt, daß im Falle, daß R&sub5; -OH darstellt, R&sub4; für -H steht und im Falle, daß R&sub5; -H darstellt, R&sub4; von -H verschieden ist;
R&sub1;&sub0; -H oder -C(O)OH&sub3;;
R&sub1;&sub7; -H oder -C(O) Phenyl, gegebenenfalls ein-, zwei- oder dreifach substituiert durch Azido-, Cyano-, Methoxy- oder Halogensubstituenten;
sowie die pharmazeutisch akzeptablen Salze hiervon im Falle, daß die Verbindung entweder eine saure oder eine basische funktionelle Gruppe enthält;
wobei insgesamt gilt, daß die folgende Kombination ausgeschlossen ist:
R&sub1; ist -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder ein- bis dreifach alkyl-, alkoxy-, halogen- oder CF&sub3;-substituiertes Phenyl;
R&sub2; ist -NHC (O) H, -NHC (O) C&sub1;&sub6;-Alkyl, -NHC (O) Phenyl, -NHC (O) - Phenyl, ein- bis dreifach alkyl-, alkoxy-, halogen- oder CF&sub3;-substituiert, -NHC (O) C (CH&sub3;) =CHCH&sub3;, -NHC (O) OC&sub1;&sub6;-Alkyl oder -NHC (O) C> 6-Cycloalkyl;
R&sub3; ist H;
R&sub4; ist OH;
R&sub5; ist H und
R&sub1;&sub7; ist -C (O) Phenyl.
2. Verbindung nach Anspruch 1, wobei R&sub1;&sub7; für -C(O)Phenyl, substituiert durch einen Azido-, Cyano-, Methoxy- oder Halogensubstituenten, steht.
3. Verbindung nach Anspruch 1, wobei R&sub1;&sub7; für -C(O)Phenyl, substituiert durch einen Azido-, Cyano-, Methoxy- oder Halogensubstituenten in m-Stellung, steht.
4. Verbindung nach Anspruch 1, wobei R1-, für -CO(O)Phenyl steht.
5. Verbindung nach Anspruch 4, wobei R&sub2; für -NHC (O) C&sub6;H&sub5; steht, R&sub4; Hydroxy darstellt, R&sub3; und R&sub5; -H bedeuten und R&sub1; Phenyl oder substituiertem Phenyl entspricht.
6. Verbindung nach Anspruch 4, wobei R&sub2; für -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3; steht, R&sub1; Phenyl oder substituiertes Phenyl darstellt, R&sub4; Hydroxy bedeutet und R&sub3; und R&sub5; -H entsprechen.
7. Verbindung nach Anspruch 4, wobei R&sub2; für NHC(O)NHC(CH&sub3;)&sub3; steht, R&sub1; Phenyl oder substituiertes Phenyl darstellt, 1% Hydroxy bedeutet und R&sub3; und R&sub5; -H entsprechen.
8. Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei R&sub2; für -NHCONH-Alkyl oder gegebenenfalls substituiertes -NHCONHPh steht.
9. Verbindung nach Anspruch 4, nämlich N-Debenzoyl-N- tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol.
10. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl) oxy}carbonyl]-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-Succinyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(&beta;-Alanyl.) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxolformiat;
2'-Glutaryl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-[-C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)]-7-Desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(&beta;-Sulfopropionyl) -7-desoxy--&Delta;6'7-taxol;
2'-(2-Sulfoethylamido) succinyl--7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(N, N-Diethylaminopropionyl) --7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-Glycyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Alanyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Leucyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Isoleucyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Valyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Prolyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2'-(L-Glutamyl)-7-ciesoxy-&Delta;6'7-taxol und
2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol.
11. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
N-Debenzoyl-N-(1-methyl-1-cyclohexanoyl)-7-desoxy-&Delta;6'7 taxol;
N-Debenzoyl-N-(1-Phenyl-1-cyclopentanoyl)-7-desoxy-&Delta;6'7- taxol;
N-Debenzoyl-N-phthalimido-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminothiocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7- taxol;
N-Debenzoyl-N-tert.-amyloxycarbony1-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
N-Debenzoyl-N-neopentyloxycarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol und
N-Debenzoyl-N-(2-chlor-1,1-dimethylethyl)oxycarbonyl-7- desoxy-&Delta;6'7-taxol.
12. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus 2-Debenzoyl-2-(m-azidobenzoyl)-'7-desoxy-&Delta;6'7-taxoter;
2-Debenzoyl-2-(m-azidobenzoyl)-10-acetyl-7-desoxy-&Delta;6'7- taxoter;
N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-azidobenzoyl)-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2-Debenzoyl-2- (m-chlorbenzoyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxoter;
2-Debenzoyl-2-(m-chlorbenzoyl)-10-acetyl-7-desoxy-&Delta;6'7- taxoter;
N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-chlorbenzoyl)-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2-Debenzoyl-2-(m-methoxybenzoyl)-7-desoxy-&Delta;6'7-taxoter;
2-Debenzoyl-2-(m-methoxybenzoyl)-10-acetyl-7-desoxy-&Delta;6'7 taxoter;
N, 2-Bisdebenzoyl-2-(m-methoxybenzoyl)-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol;
2-Debenzoyl-2-(m-cyanobenzoyl) -7-desoxy-&Delta;6'7-taxoter;
2-Debenzoyl-2-(m-cyanobenzoyl)-10-acetyl-7-desoxy-&Delta;6'7- taxoter und
N,2-Bisdebenzoyl-2-(m-cyanobenzo yl)-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-&Delta;6'7-taxol.
13. Arzneimittelzubereitung, umfassend eine Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche und einen nichttoxischen Träger.
14. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 12 zur Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Krebsbehandlung.
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