CZ46194A3

CZ46194A3 - Eye lens with anti-toxic agent

Info

Publication number: CZ46194A3
Application number: CZ94461A
Authority: CZ
Inventors: Douglas G Vanderlaan; Susan K Brown-Skrobot; Clyde L Schultz
Original assignee: Johnson & Johnson Vision Prod
Priority date: 1993-03-02
Filing date: 1994-03-01
Publication date: 1994-10-19
Also published as: UY23735A1; RU94007090A; CN1099605C; KR940021079A; EP0613694B1; CN1101722A; ES2122163T3; IL108820A; CA2116834A1; SG63541A1; GR1002257B; EP0613694A1; BR9400787A; HU214060B; US5472703A; PH31000A; NO940707D0; AU675101B2; HUT67519A; GT199400014A

Description

Oční čočka s antitoxickým činidlem

Oblast techniky

Vynález se týká oční čočky se zlepšenými vlastnostmi, zejména oční čočky u níž je možná dlouhodobá aplikace. Přesněji se vynález týká oční čočky, která obsahuje sloučeninu schopnou zabránit uvolňování bakteriálních toxinů do oka pacienta, nebo toto uvolňování alespoň snížit.

Dosavadní stav techniky

Prudký vývoj v technologii očních čoček nastal v posledním desetiletí, přičemž zlepšení této technologie vedla i ke změně způsobu nošení očních čoček pacientem. Tato technologie je výhodná v tom, že umožňuje dlouhodobé nošení očních čoček, a to i během spánku. To je možné vzhledem k tomu, že tyto čočky, převážně kontaktní čočky, se staly mnohem slučitelnějšími s jemnou oční tkání. Postupně se pacientovo pohodlí zlepšilo do té míry, že čočka mohla být nošena dlouhodobě, aniž by pacient pociťoval vyditelnější nepohodlí.. Typ kontaktní čočky, který nejtěsněji souvisí s dlouhodobými aplikacemi je typ měkké hydrogelové čočky, která je tvořena hydrofilním polymerem nabobtnalým značným množstvím vody.

Bohužel, použití očních čoček pro dlouhodobé aplikace se neobešlo bez problémů. Například byly zaznamenány bakteriální infekce rohovky. V případě, že dojde k menšímu poranění vnějšího povrchu rohovky (epitelu), může bakterie vniknout do rohovky a přivodit bezprostředně ulceraci rohovky (vředovitý zánět rohovky), stav, který v případě, že není správně ošetřen, může vyvolat u rohovky vady zraku.

Přesto že byly prováděny pokusy vyrobit kontaktní čočky, které by byly schopny odrazit bakteriální infekce obecně, malá pozornost byla věnována návrhu čočky, která je schopna zabránit uvolňování toxinu, které mohou způsobit vředovitý zánět rohovky, nebo jejich uvolňování alespoň omezit. Společným pokusem bylo impregnovat čočku širokospektrým bakteriostatikem. Meslard a kol. (Polym. Prepr. Am. Chem. Soc., Div. Polym. Chem. 30 str. 488-489 (1989)), popisuje reversibilní chemickou imobilizací indomethacinu, který je protizánětovým činidlem, na očních hydrogelech. Účinná látka je hydrolyticky štěpena a uvolňuje se z čočky na oko. Schwartz a kol. (Am. J. Ophthalmol., 109, str. 701-704) popisují použití kontaktních čoček vyrobených z kolagenu uvolňujících amphotericin B, jenž je protiplísňovým činidlem, do očí králíka. Patent US 4 931 279 popisuje kontaktní čočku vyrobenou pomocí iontoměničové pryskyřice a účinné látky jakou je pilokarpin, který je antiglaukomálním činidlem, jež se má uvolnit do oka. Konečně evropská patentová přihláška 219 207 popisuje použití hydrofobních polymerů, jako účinnou látku dodávající činidla. Z těchto hydrofobních polymerů lze vyrobit oční čočky.

Dosavadní pokusy o minimalizování nebo eliminování nemocí souvisejících s dlouhodobým nošením očních čoček s sebou přinášejí značné nedostatky. Ačkoliv použití širokospektrých antimikrobiálních látek může hubit nežádoucí bakterie, podobně také hubí normální biotu slzné tekutiny přítomné v oku. Vyhubení kladných bakterií může mít samo za následek nežádoucí vedlejší efekty způsobující zhroucení vlastního imunitního obranného systému oka.

Další pokus zabránit škodlivým účinkům způsobujícím infikování rohovky je popsán v patentu US 4 485 029. Tento patent popisuje vodný roztok glycerylmonolaurátu, který lze použít jako čistící, desinfekční a ochranný systém pro kontaktní čočky. Zatímco ponoření této čočky do tohoto roztoku umožňuje nošení čočky po dobu delší než v jiných případech, které nezahrnují tuto technologii, nezabraňuje uvolňování bakteriálních toxinů nebo nesnižuje takové uvolňování a oko pacienta je i v tomto případě vystaveno účinku těchto toxinů. To je způsobeno tím, že množství glycerylmonolaurátu absorbovaného do čočky nebo na čočce je nedostatečné k zabránění uvolňování bakteriálních toxinů nebo k jeho snížení.

Vzhledem k nedostatkům vyjmenovaným v předcházející části je žádoucí vývinout oční čočku, která je schopna zabránit produkci bakteriálních toxinů, nebo jí alespoň snížit v případě, že je čočka vystavena bakteriím. Kromě toho je zejména žádoucí vyvinout takovou čočku, jejíž specifická účinnost spočívá v eliminování ulcerativních toxinů spojených s bakteriálním zánětem rohovky.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je oční čočka určená pro aplikování na přední povrch oka. Uvedená čočka je napuštěna esterem vícemocného alifatického alkoholu a mastné kyseliny, nebo má na svém povrchu povlak tvořený tímto esterem. Uvedený ester je přítomen v množství, jež je účinné pro zabránění nebo alespoň snížení uvolňování bakteriálních toxinů, v případě, že je čočka vystavena působení těchto toxinů. Uvedený ester může být zvolen z libovolné z následujících skupin:

a) monoestery výcemocného alifatického alkoholu a mastné kyseliny obsahující osm až osmnáct atomů uhlíku, přičemž uvedený monoester má alespoň jednu hydroxylovou skupinu spojenou s alifatickým alkoholovým zbytkem,

b) diestery vícemocného alifatického alkoholu a mastné kyseliny obsahující osm až osmnáct atomu uhlíku, přičemž uvedený diester má alespoň jednu hydroxylovou skupinu spojenou s alifatickým alkoholovým zbytkem, a

c) směsi uvedeným monoesterů a diesterů.

Překvapivě bylo zjištěno, že zabudování esteru do uvedené oční čočky značně snižuje nebo úplně zabraňuje uvolňování bakteriálních toxinů na oko pacienta. Kromě toho ester mastných kyselin výhodně selektivně zabraňuje nebo snižuje uvolňování bakteriálních toxinů, které mohou mít souvislost s ulcerativním zánětewm rohovky. V tomto ohledu, jsou oční čočky podle vynálezu schopny zabraňovat škodlivým účinkům těchto toxinů, aniž by podstatným způsobem poškozovaly normální floru slzné kapaliny a aniž by vyvolávaly další možné vedlejší účinky širokospektrých antibiotik.

Oční čočky podle vynálezu lze použít pro jakékoliv aplikace, při nichž je čočka nošena pacientem, ale zejména pro dlouhodobé nošení a to i v případě, že čočka zůstáví na oku i během spánku.

Pro účely definované tímto vynálezem lze použít libovolnou oční čočku, která je navržena pro umístění na přední povrch oka. Výhodnou oční čočkou je kontaktní čočka nebo rohovková bandážní čočka (corneal bandage lens). Nejvýhodnější je kontaktní čočka, především měkká hydrogelová kontaktní čočka. Uvedená měkká hydrogelová čočka je čočka, která je nejběžněji používána pro dlouhodobé aplikace.

Výhodnou hydrogelovou kontaktní čočkou je syntetická polymerní čočka. Polymer z něhož je čočka vyrobena je výhodně získán polymeraci monomeru zvoleného z množiny hydroxyesterů kyseliny akrylové nebo methakrylové. Výhodným monomerem je hydroxyethylmethakrylát (HEMA). Výhodně je do monomeru, z něhož je vyráběna polymerní čočka, za účelem zlepšení mechanické pevnosti čočky a následně jejich manipulační vlastnosti, přidáváno síťovací činidlo. Síťovacími činidly, jež lze použít, jsou polyfunkční monomery, například ethylenglykoldimethakrylát (EGDMA).

Čočka může být buď vyříznuta z polymerního surového výlisku čočky nebo jí lze polymerovat ve formě, jež má tvar odpovídající čočce, . bez nebo za přítomnosti inertního ředidla. V obou případech je žádoucí, aby byla hydrogelová čočka nabobtnána vodou do té míry, že voda bude představovat alespoň 30 hmotnostních procent celkového složení.

Esterem, který může být použit pro napuštění oční čočky nebo k potažení jejího povrchu, je monoester nebo diester, který má alespoň jednu nezreagovanou hydroxylovou skupinu potom co vícemocný alifatický alkohol zreaguje s mastnou kyselinou.

Uvedená mastná kyselina má výhodně osm až osmnáct atomů uhlíku.-Část mastné kyseliny již zmíněných monoesterů a diesterů může být odvozena od kyseliny kaprylové, kaprinové, laurové, myristové, palmitové nebo stearové, což jsou nasycené mastné kyseliny jejich délky řetězce odpovídají ϋθ, ^C14' ^C16 ^aC-|8«Část mastné kyseliny již zmíněných monoesterů a diesterů může být stejně tak odvozena od nenasycených mastných kyselin majících tako osm až osmnáct atomů uhlíku, jedním příkladem takové nenasycené mastné kyseliny je kyselina olejová. Výhodnou mastnou kyselinou pro použití podle vynálezu v praxi, je kyselina laurová, nasycená mastná kyselina obecného vzorce C₁ ^2^00011.

Výraz alifatický, jak je používán v této popisné části a v přiložených patentových nárocích, odpovídá výrazu užívanému běžně v organické chemii, t.j. alifatický označuje organické sloučeniny, které mají přímý nebo větvený uhlíkatý řetězec.

Výraz vícemocný, jak je použit v této popisné části a v přiložených patentových nárocích, označuje přítomnost alespoň dvou hydroxylových (OH) skupin v chemické sloučenině. Takže vícemocný alifatický alkohol je alkohol, který má alespoň dvě hydroxylové skupiny, přičemž jeho uhlíkatý řetězec je buď přímý nebo větvený.

Výcemocnými alkoholy vhodnými pro přípravu monoesterú a/nebo diesterů, které mohou být zase použity v praxi podle vynálezu, jsou 1 ,2-ethandiol, 1,2,3-propantriol (glycerol), 1,2-propandiol, 1,4-butandiol, 1,2,4-butantriol a další. Výhodným vícemocným alifatickým alkoholem pro přípravu monoesterú a diesteru použitelných v praxi podle vynálezu je 1,2,3-propantriol (obecně označovaný glycerol), jehož obecný vzorec je HOCH₂CH(OH)CH₂OH.

Estery, které jsou zvláště vhodné v praxi podle vynálezu, mají alespoň jednu hydroxylovou skupinu připojenou k jejich alifatickému alkoholovému zbytku. Takže je zřejmé, že monoester 1 ,2- ethanďiolu a některé z již zmíněných mastných kyselin může být použit v praxi podle vynálezu, protože uvedený ester, jehož obecný vzorec je ^Cn^H2n+1-C-0-CH_o-CH_o0H II 2 2 o

má alespoň jednu hydroxylovou skupinu (t.j. hydroxylovou skupinu na pravostranném konci výše uvedeného strukturního vzorce) v té části esteru, která je odvozena od alifatického alkoholu 1,2-ethandiolu. Na druhé straně, je zřejmé, že nebude žádoucí použití diesteru připraveného z 1,2-ethan7 diolu a některé již zmíněné mastné kyseliny v praxi podle vynálezu, vzhledem k tomu, že ester, jehož obecný vzorec je ^Cn^H2n-M-C-°-^CH2-^CH2^OT^Cn^H2n₊1 0 0 nemá v části esteru, jež je odvozena od 1,2-ethandiolu ani jednu hydroxylovou skupinu. U těchto diesterů a dalších esterů, které nemají na svém alkoholovém zbytku hydroxylovou skupinu bylo zjištěno, že nevykazují požadovaný stupeň antibakteriální aktivity.

Monoester glycerolu a některé z označených mastných kyselin je pro použití v praxi podle vynálezu vhodný, vzhledem k tomu, že tento ester bude mít dvě hydroxylové skupiny skupiny na části, která je odvozená od glycerolu. Uvedený diester připravený z glycerolu a jedné z uvedených mastnuch kyselin může být také použit, vzhledem k tomu, Že bude mít jednu hydroxylovou skupinu připojenou k části, která je odvozena od alifatického alkoholu glycerolu. V praxi podle vynálezu lze tedy vhodně použít směs glycerylmonolaurátu a glyceroldilaurátu.

Výhodnými estery pro použití v praxi podle vynálezu jsou glycerylmonolaurát (GML), glyceryldilaurát a jejich směsi.

Zvláště výhodným se jeví glycerylmonolaurát, který je dostupný pod obchodním označením Monomuls 90; L-12 (Henkel Corporation). Tato sloučenina obsahuje asi 96 hmotnostních procent glycerylmonolaurátu. Glycerylmonolaurát je obecně znám jako Safe (GRAS) sluočenina vedená v seznamu FDA jako potravinový emulgátor.

Mezi dalšími výhodné estery použitelné podle vynálezu patří monolaurátové deriváty alkoholů s Třemi atomy uhlíku, například 2-hydroxyl-1-propyllaurát a 3-hydroxy1-propyllaurát. Také se dá očekávat, že dilaurátové deriváty alkoholů s třemi atomy uhlíku, například glycerol-1,3dilaurát, glycerol-1,2-dilaurát redukují množství produkovaných bakteriálních toxinú. Lze očekávat, že deriváty ethylenglykolu, jako například ethylenglykolmonolaurát, stejně jako polyethylenglykollauráty, t. j. diethylenglykolmonolaurát a triethylenglykolmonolaurát

I u skutečných polymerů,například (200 MW) monolauratu, polyethylenglykol (400 MW)monolaurátu, polyethylenglykolu (1000 MW) monolaurátu a polypropylenglykollaurátů, například polypropylenglykol monolaurátu, se dá očekávat, že budou vykazovat redukční aktivitu vůči toxinům.

budou také aktivní, u polyethylenglykol

Estery dalších mastných kyselin, u nichž lze předpokládat, že vykazují aktivitu proti bakteriálním toxinům a které lze použít pro oční čočky podle vynálezu, jsou glycerylmonokaprylát, glycerylkaprinan, směs glycerylmonokaprylátu a glycerylkaprinanu,glycerylmonomyristan r glycerylmonopalmitát . glycerylmonostearát a glycerylmonooleát .

Uvedená čočka může být napuštěna esterem mastné kyseliny za použití běžných metod. Čočka může být například napouštěna v rozpouštědle, které bobtná čočku a rozpouští uvedený ester. Výhodnými rozpouštědly jsou roztoky těkavých alkoholů s krátkým uhlíkatým řetězcem, t. j. ethanol. Roztok je výhodně ředěn vodným roztokem, přičemž koncentrace esterů je od asi 0,1 do 10 hmotnostních procent, ale výhodně okolo 1 hmotnostního procenta, čočka je v uvedeném vodně alkoholickém roztoku po dostatečně dlouhou dobu na to, aby ester a rozpouštědlo pronikly do uvedené čočky a nabobtnaly jí a následně jí uvést do rovnováhy. Obvykle tato časová perioda trvá 2 až 3 hodiny. Potom je čočka vyjmuta z roztoku, a zbylého rozpouštědla je zbavena prostým vysušením na vzduchu.

Nebo může být čočka napuštěna způsobem, při němž je čočka míchána alespoň několik minut v suspenzi roztaveného esteru ve vodě nebo tlumeném fyziologickém roztoku.

Je také možné potáhnout povrch čočky esterem mastné kyseliny. To může být zejména vhodné v případě, kdy je uvedenou čočkou čočka tvrdá nebo měkká hydrogelová čočka. Potažení vnějších povrchů těchto čoček lze provést za použití běžných metod, například nastřikováním, máčením nebo potahování pomocí válečku.

Množství esteru mastné kyseliny, které je účinné pro zabránění v produkci bakteriálních toxinů, nebo alespoň ke snížení této produkce, bude záviset na množství faktorů, jakými jsou cílový specifický toxin a rozsah existující infekce, v případě že existuje nějaká. Toto množství lze snadno empiricky určit. Ve většině případů, a zejména v případě, že je žádoucí zabránit nebo snížit produkci bakteriálních toxinů, které mohou způsobit ulceraci a zjizvení spojené se zánětem rohovky, se množství esteru, jímž je čočka napuštěna nebo jímž je potažen povrch čočky, pohybuje od asi 0,05 do asi 5,0 procent hmotnosti uvedené čočky. V případě, že by množství esteru bylo menší než asi 0,05 hmotnostních procent, nemůsí k požadovanému zabránění nebo snížení produkce bakteriálních toxinů vůbec dojít. A naopak pokud by bylo množství esteru větší než asi 5,0 hmotnostních procent, potom by ester mastné kyseliny mohl interferovat s optickými vlastnostmi uvedené čočky, nebo by mohlo dojít k nežádoucí krystalizací esteru v oku nebo v jejím pouzdře. Výhodně množství esteru mastné kyseliny činí asi 0,5 až asi 1,0 hmotnostních procent.

Do rozsahu vynálezu spadá i množství dalších provedení, která mohou být odborníky v oboru snadno realizovány. Následující příklady mají pouze ilustrativní charakter a ilustrují výhodná provedení podle vynálezu, nikterak však neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně určen přiloženými patentovými nároky.

Příklady provedení podle vynálezu

Příprava vzorku

Kontaktní čočky 105 Acuvue jsou umístěny do roztoku 1,0 gramu glycerylmonolaurátu (GML) v 100 gramech ethanolu s reagenční čistotou. Po šestnáctihodinovém namáčení jsou čočky vyjmuty pomocí štětečku a umístěny na fólii ze silikonové pryže, kde je po dobu šesti hodin sušena vzduchem. Srovnávací čočky byly ponořeny do ethanolu s reagenční čistotou bez přítomnosti GML a podobně sušeny. Další soubor srovnávacích čoček byl připraven máčením čoček ACUVUE v isopropylalkoholu (IPA) a sušením.

Příklad 1

Sterilní odstředivá kyveta na jedno použití obsahuje 1,0 ml sterilního proteinu obohaceného mozko-srdeční infuzní živnou půdou (BHI), v němž je buď neošetřená kontaktní čočka, nebo kontaktní čočka ošetřená GML nebo v něm není žádná kontaktní čočka (srovnávací). Dvacetčtyřhodinová kultura TSST-1 produkující S. aureus (FRI-1169) byla kultivována na BHI živné půdě za statických podmínek při teplotě 37°C, načež se každá kyveta zaočkuje 10θ CFU. Kyvety se inkubují za statických podmínek při teplotě 37°C. Po 24 hodinách se obsah kyvet analyzuje za účelem zjištění jak životaschopnost buněk tak produkce toxinů. Koncentrace TSST-1 byly určeny testem ELISA (Enzyme Linked Immuno 25624), který popisuje Resiser a kol. v Applied and Enviromental Microbiology, prosinec 1982, str. 1349-1355, zatímco počty živých' buněk byly stanoveny za použití konvenční metody nalité plotny.

Výsledky tohoto experimentu jsou uvedeny v tabulce 1.

Data ukazují, že GML obsažený v kontaktních čočkách bylo účinné při redukci tvorby TSST-1 z 99 procent.

1.2 tu tu

I

Ό <*> I

Φ «

I I σ ι ι σ»

Účinky GML kontaktních čoček na produkci EXOTOXINU ι

Eh cn tn • ε o \ c tn '0 c

I ><U α c o 3 JZ Λ ϋ cn tn «3 35 r-t

UME o « \ >0-3 •H < fa >N · CJ cn c

m	m	ro
cn	'kD	co
	*
o			o
tn		tn	r—
r*	o	o	V

T—

o	SZ	Oi	o
c	0	0	co	o	(N	i—
0	'>1			co	r-	r*
>4	c	—	co	K	*»
				σ*	o	co

Ό (O f-H

Ή )>U

CU

		>1
	ε	44
cn	3	>O
to		0
r-	3	>O
r”	44
	0	'rl	>1
cn	c	0	44
3	•H	(0	>CJ	44
(U		>	0	>U
lu	'tu	'fl	>O	0
3	JJ	c		><U
(C	tn	>
	•H	0	<	J
•	>c	lu	Oj	Σ
cn	---	cn	H	U

Příklad 2

Sterilní odstředivá kyveta na jedno použití obsahuje 1,0 ml sterilního proteinu obohaceného mozko-srdeční infuzní živnou půdou (BHI), v němž je buď neošetřená kontaktní čočka, nebo kontaktní čočka ošetřená GML nebo v něm není žádná kontaktní čočka (srovnávací). Dvacetčtyřhodinová kultura exotoxinu A produkující S. aureus (FRI-100) byla kultivována na BHI živné půdě za statických podmínek při teplotě 37°C, načež se každá kyveta zaočkuje 10θ CFU. Kyvety se inkubují za statických podmínek při teplotě 37°C. Po 24 hodinách se obsah kyvet analyzuje za účelem zjištění jak životaschopnosti buněk tak produkce exotoxinu. Koncentrace enterotoxinu A byly určeny testem ELISA , zatímco počty živých buněk byly stanoveny za použití konvenční techniky nalité plotny.

Výsledky tohoto experimentu jsou uvedeny v tabulce 2.

Data ukazují, že GML obsažený v kontaktních čočkách redukuje produkovaný Enterotoxin A z 99 procent.

l 'φ c

(ϋ >

o o

o

Sí

T3

OJ

K o*>

i i σ>

i i σ

Účinky GML kontaktních čoček na produkci ENTEROTOXINU (ENT)

Ό

ο	<
Μ
α	Ε-<	rH
*	ζ	ε
ο	W
C		σ
ο	0	C
	Λ Si >φ
1	C
Οι	3
0 JZ	Λ
ο	ω	——
ω	ο	r-Η
(0	Η	Ξ
4->	α	\
0		Ο
>	<	b
•—i	•	U
>Ν	ω	C
ϋ	JZ	σ>
C	υ	0
0		j
	C .

Ό <0 ι—t λ:

'γ4 >1—1

Λ t

o r[*co oo «· η ·*τ «— oo co σ r-

	to λ: >ο	(0 Si >o
ε			0	0
3	λ:		>o	>o
Γ^-ι	>ϋ
3	0		Ή	Ή
U	>υ	—	c	c
0		Ή	4J	4-1
C		Ο	Si	Si
Μ	Ή	Φ	to	<0
	C	>	4-1	4-1
<3	4-·	'to	c	c
Ο	λ:	c	0	0
—	(0	>	Λί	Si
1	4J	0
Μ	C	'«	<	►J
0Í	0	tn	Ď4	2
fci	ν;		H	o

Ί·

II

C

Příklad 3

Sterilní odstředivá kyveta na jedno použití obsahuje 1,0 ml sterilního proteinu obohaceného mozko-srdeční infúzní živnou půdou (BHI), v němž je buď neošetřená kontaktní čočka, nebo kontaktní čočka ošetřená GML nebo v něm není žádná kontaktní čočka (srovnávací). Dvacetčtyřhodinová kultura enterotoxinu B produkující S. aureus (MnHoch) byla kultivována na BHI živné půdě za statických podmínek při teplotě 37°C, načež se každá kyveta zaočkuje 10 CFU. Kyvety se inkubují za statických podmínek při teplotě 37°C. Po 24 hodinách se obsah kyvet analyzuje za účelem zjištění jak životaschopnosti buněk tak produkce exotoxinu. Koncentrace enterotoxinu B byly určeny testem ELISA , zatímco počty živých buněk byly stanoveny za použití konvenční techniky nalité plotny.

Výsledky tohoto experimentu jsou uvedeny v tabulce 3.

Data ukazují, že GML obsažený v kontaktních čočkách redukuje produkovaný Enterotoxin B z 99 procent.

<u

O oe Ό <U

CS σ\

I cr,

I

Účinky GML kontaktních čoček na produkci ENTEROTOXINU B

I

'CU c <c > 0 AC 3 Ό 0	ca
X
CX	Eh	r—4
•	a	ε
o	a	\
c		Cn
0	0	c
*	x

I a o x o cn cn ><u c

XI

r-	T—	O
t“	o	m
m	kO	m
*»	*»	K
cn	m	o	00
	r—	CN	1—

<Ú

X a

a

0	a		m	KO
>	a	a		o	in	o
•H	c	a			00	00
>N	•	o	O	O
	cn	o	r-	r—	cn	r-
•
o	x	a
c	0	0
0		a
	c	-

T3 ca rH

Ή >Uí

Λ	«3
				A!
				>O	>o
				0	0
		«3		>o	>o

		>υ		M	Ή
		0		C	c
		>o	Ά	X	X
			u	Aí	Aí
		Ή	cú	«3	ca
	ε	C	>	X	X
X	3	X	'(0	C	c
ϋ	»—(	Ai	c	0	0
0	3	«3	>	a:	a:
	0	X	0
	0	C	X	<	a
c	c	0	cn	a	Σ	II
Σ	H	a		JX	.O	c

Příklad 4

Sterilní odstředivá kyveta na jedno použití obsahuje 1,0 ml sterilního proteinu obohaceného mozko-srdeční infuzní živnou půdou (BHI), v němž je buď neošetřená kontaktní čočka, nebo kontaktní čočka ošetřená GML nebo v něm není žádná kontaktní čočka (srovnávací). Dvacetčtyřhodinová kultura enterotoxinu C produkující S. aureus (xMnDon) byla kultivována na BHI živné půdě za statických podmínek při teplotě 37°C, načež se každá kyveta zaočkuje 10° CFU. Kyvety se inkubují za statických podmínek při teplotě 37°C. Po 24 hodinách se obsah kyvet analyzuje za účelem zjištění jak životaschopnosti buněk tak produkce exotoxinu. Koncentrace enterotoxinu C byly určeny testem ELISA , zatímco počty živých buněk byly stanoveny za použití konvenční techniky nalité plotny.

Výsledky tohoto experimentu jsou uvedeny v tabulce 4.

Data ukazují, že GML obsažený v kontaktních čočkách redukuje produkovaný Enterotoxin C z 99 procent.

o o

Jí

O OP Ό O cs ι on

I on 'Φ c

ιϋ >

O

Jí

O

Účinky GML kontaktních čoček na produkci ENTEROTOXINU C

Ό

O

S-l	O
a
	Eh
•	Z	ε
0	w	\
c		σ>
O	0	c
	X X >Q)
1	£
a	3
0 X	X
u	w	•—
«	z	r—i
«3	H	ε
4J	os	\
O	z	z
>	<
•H	•	u
»N	M	c
O	X	Cn
£	0	0
O	'>1	X
	£

Ό (0 r-1 St 'S >1-1 a-

	«—	O
in	cs	m
		kO
*	*1	K	in
	k£>	r~	w—

O

K o

in o

o ro o

«3
				st	«3
				>o	Si
				o	>o
		«3		>o	0
		Si			>o
		>O		Ή
		0		£	Ή
		>o	M	4-1	£
			υ	St	X
		M	<0	Π3	St
	ε	£	>	4->	Π3
	3	4-1	'(0	£	4J
£	(-4	Jí	£	0	£
0	3	£	>	st	0
a	Jí	4-1	0		Si
	0	£	l-i	<
£	£	0	cn	Cu	X	Ό·
2	Η	iC		t—I	2	II
					O	£

iríl-tfl/-

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1 Oční čočka určená pro aplikování na přední povrch oka, vyznačená tím, že je napuštěna esterem vícemocného alifatického alkoholu a mastné kyseliny, nebo má na svém povrchu povlak tvořený tímto esterem, který je přítomen v množství, jež je účinné pro zabránění nebo alespoň snížení uvolňování bakteriálních toxinů, v případě, že je čočka vystavena působení těchto toxinů, přičemž uvedený ester je zvolen ze skupiny obsahující:

a) monoestery výcemocného alifatického alkoholu a mastné kyseliny obsahující osm až osmnáct atomů uhlíku, přičemž uvedený monoester má alespoň jednu hydroxylovou skupinu spojenou s alifatickým alkoholovým zbytkem,

b) diestery vícemocného alifatického alkoholu a mastné kyseliny obsahující osm až osmnáct atomů uhlíku, přičemž uvedený diester má alespoň jednu hydroxylovou skupinu spojenou s alifatickým alkoholovým zbytkem, a

c) směsi uvedeným monoesterů a diesterů.
2. Oční čočka podle nároku 1,vyznačená tím, že uvedenou čočkou je kontaktní čočka nebo korneální bandážová čočka (corneal bandage lens).
3. Oční čočka podle nároku 3,vyznačená tím, že je kontaktní čočkou.
4. Oční čočka podle nároku 3,vyznačená tím, že kontaktní čočkou je měkká hydrogelová kontaktní čočka.
5. Oční čočka podle nároku 4,vyznačená tím, že je napuštěna uvedeným esterem.
6. Oční čočka podle nároku 5,vyznačená tím, že množství uvedeného esteru činí asi 0,05 až asi 5,0 procent hmotnosti uvedené čočky.
7. Oční čočka podle nároku 6,vyznačená tím, že přítomné množství uvedeného esteru činí asi 0,5 až asi 1,0 hmotnostních procent.
8. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedenou mastnou kyselinou je kyselina laurová.
9. Oční čočka podle nároku 8,vyznačená tím, že uvedeným vícemocným alkoholem je glycerol.
10. Oční čočka podle nároku 9,vyznačená tím, že uvedeným esterem je glúycerylmonolaurát.
11. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedený ester zahrnuje směs glycerylmonolaurátu ryldilaurátu.

a glyce21
12. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedeným esterem je glycerylmonokaprylát.
13. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedeným esterem je glycerylkaprinan.
14. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedený ester zahrnuje směs glycerylmonokaprylátu a glycerylkaprinanu.
15. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedeným esterem je glycerylmonomyristan.
16. Oční čočka podle nároku 7,vyznačená tím, že uvedeným esterem je glycerylmonopalmitan.
17. Oční čočka podle nároku 7, vyznačená tím, že uvedeným esterem je glycerylmonostearát.
18. Oční čočka podle nároku 7, vyznačená tím, že uvedeným esterem je glycerylmonooleát.