CZ45195A3

CZ45195A3 - Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu

Info

Publication number: CZ45195A3
Application number: CZ95451A
Authority: CZ
Inventors: Michael Catt; John Coley; Paul James Davis
Original assignee: Unilever N. V.
Priority date: 1992-08-21
Filing date: 1993-08-10
Publication date: 1999-07-14
Also published as: CZ285802B6; EP0754950A1; DE69308858D1; NZ254822A; KR950703148A; WO1994004925A1; FI950760A0; CZ12996A3; BG99436A; AU4709393A; FI950760A; PL174930B1; PL307571A1; CZ286019B6; JP2761291B2; CA2142301C; JPH08500670A; EP0656119B1; CA2142301A1; JPH10115614A

Description

Oblast techniky 5

Vynález se zabývá způsoby monitorováni ovulačniho cyklu u samic savců, a zvláště u žen,

Hlavním, i když ne jediným, aspektem vynalezu je zajištění spolehlivé informace o stavu plodnosti ženy v rámci antikoncepce, a to jednoduchým způsobem, který mohou snadno používat i laici v domácím prostředí.

¹⁵

Dosavadní stav techniky vyraz pioana ráze” používaný v této patentové přihlášce označuje v menstruačním cyklu ženy časový interval kolem ovulace, ve kterém vede pohlavní styk ve většině případů k početí.

2°

V odborné literatuře lze najít řadu studií zabývajících se profily hormonů v moči v průběhu ovulačniho cyklu. Největší pozornost je, coby ukazatelům , stadia cyklu, věnována derivátům estradiolu, zvláště estron-3-glukuronidu (E3G), luteinizačnímu hormonu (LH) a derivátům progesteronu, zvláště pregnandiol-3glukuronidu (P3G).

LH je využíván komerčně pro zvýšení pravděpodobnosti početí.

Předpovídáním plodné fáze ovulačniho cyklu pomocí každodenního měření hladin hormonů E3G a Pd-3=G (t.j. P3G) v první ranní moči se zabývá práce

CC. ýj

A prospective multicentre study to develop universal tests for predicting the fertile phase in women (WHO, Int J Fertil, 30 (3), 1985, str. 18-30). Ačkoli hlavním cílem této studie je analyzovat rozdíly ve výpočtech plodné fáze cyklu u žen různých ras, vychází tato práce z předpokladu, že relativní hladiny E3G a Pd-3-G mohou být použity k určení začátku a konce plodné fáze. Pokud je začátek plodné fáze definován jako trvalý vzestup hladiny E3G v moči, pak konec této plodné fáze (t.j.

začátek luteální fáze) nastává 5 dní po pozorovaném vrcholu E3G. Podobně, pokud je začátek plodné fáze definován jako vzestup poměru E3G : Pd-3-G, pak konec plodné fáze nastává 6 dní po té, co je pozorována nej vyšší hodnota tohoto poměru.

V článku New asseys for identifying the fertile period, (Int J Gynecol Obstet, 1989, Suppl 1, str. 111-122) diskutují autoři Blackwell, Holmes a Smyth možnost předpovědi ovulace pomocí stanovení hladiny estrogenu, ačkoli estrogen sám o sobě je pro předpověď ovulace nespolehlivý. Mezi hormonální markéry se řadí také pregnandiol, který označuje konec plodného období. Ve výše zmíněných studiích je nezbytné zdržet se pohlavního styku v průměru 17 dní; spokojenost testovaných párů s takovou antikoncepční metodou a také ochota pokračovat v ní, jsou nepřímo.úměrné počtu dnů, po které je nutno se zdržet pohlavního styku. Ve studii jsou hladiny E3G a P3G měřeny denně, ale autory je zvažována možnost, že pro stanovení plodného období stačí 12 měření měsíčně. Ve snaze snížit počet dnů sexuální abstinence na teoretických minimálních sedm dní je navrhováno používat pro předpověď plodného období kombinaci hodnocení stavu cervikálního hlenu se stanovením nesymptomatických markérů.

Určování plodného období pomocí stanovení několika látek v moči diskutuje Collins v článku Biochemical Indices of Potential Fertility (Int J Gynecol Obstet, 1989, Suppl. 35-43). Avšak užívané

.. testy jsou v předpovědi plodné fáze úspěšné jen v 80% a méně, navíc ve všech případech je délka plodné fáze (a tím i doby zdrženlivosti) větší než 10 dní.

Patentová přihláška EP 367 615 (Monoclonal

Antibodies lne) popisuje způsob přirozené kontroly porodnosti využívající měření metabolitu (progesteronu) v moči, coby ukazatele stadia menstruačního cyklu.

Jedinými sledovanými hormony jsou metabolity progesteronu, takže metoda stanovuje pouze bezpečnou luteálni fázi.

V článku Fertility Awarness: Jet-Age Rhythm. Method? (Science, 1 June 1990, str. 1061-2) navrhuje Djerassi určování plodné fáze pro účely antikoncepce, a zvláště koncepce, pomocí analýzy tělních tekutin (t.j.

⁰ krve, moči a slin). Autor předpokládá, že začátek plodného období lze bezpečně stanovit pomocí nárůstu koncentrace estradiolu (nebo jeho metabolitu). Začátek luteálni fáze může být určen buď pomocí druhého vzestupu koncentrace estradiolu nebo pomocí většího nárůstu koncentrace progesteronu (nebo jeho metabolitů).

Z této literatury vyplývají následující závěry:

estradiol a jeho metabolity, zvláště E3G, jsou jedinými hormony v moči, které mohou být použity v preovulační fázi cyklu jako dostatečně včasné varování pro anikoncepční účely; a jakýkoli test, který má spolehlivě určit stav plodnosti pro účely antikoncepce, musí zahrnovat měření E3G nebo ekvivalentní molekuly a zároveň musí zaznamnenat vzestup koncentrace E3G, který předchází 5 ovulaci.

Nicméně, z literatury (například viz Djerassi) zároveň vyplývá, že žádný uspokojivý test založený na měření E3G zatím nebyl vyvinut.

Jelikož bazální hladina E3G výrazně kolísá od jedince k jedinci, má se obecně za to, že není možné žádnou jednoduchou, univerzálně použitelnou zkoušku vyvinout.

Ve snaze obejít tento problém jsou užívány složité matematické postupy, (např. CUSUM). Tak je možné během ovuluačního cyklu vypočíst prahovou koncentraci E3G a zaznamenat každý signifikantní vzestup. Nevýhodou těchto systémů ale je, že v okamžiku, kdy je matematicky zaznamenána signifikantní změna, může být z hlediska antikoncepce příliš pozdě. Z tohoto důvodu se obecně soudí, že pomocí CUSUM nelze zajistit prospektivní informaci o stavu plodnosti. Přehled metod založených na CUSUM podává Royston ve Statistics in Medicine, Vol. 10 (1991) 221-240.

Při shrnutí výsledků dříve navrhovaných způsobů určování plodné fáze je zřejmé, že stanovená plodná fáze je příliš dlouhá a tak je příliš dlouhá i doba, kdy je nutno zdržet se pohlavního styku. Velmi často, například v EP 367 615, trvá doba zdrženlivosti od menstruace do konce plodné fáze. To je bezpochyby dáno obtížností přesného stanovení začátku plodného období.

Jedním z rysů dříve navrhovaných způsobů určování plodné fáze také je, že metoda je z hlediska antikoncepce spolehlivá jen při častém, většinou každodenním, měření hladin hormonů v moči během cyklu.

Podstata vynálezu

Pro účely této patentové přihlášky bude estradiol a všechny jeho měřitelné metabolity souhrnně označen jako E3G. Vedle již zmíněného estron-3-glukuronidu je možné podle vynálezu testovat tyto metabolity estradiolu: estradiol-3-glukuřonid, estradiol-17-glukuronid, estriol-3-glukuronid, estriol-16-glukuronid a (pouze u subjektů nehumánního původu) estron-3-sulfát. Jak vyplyne z následujícího popisu, vynález lze aplikovat na data získaná měřením koncentrací jiných látek analyzovaných v tělní tekutině, které mají vztah ke stadiu ovulačního cyklu. Nejvhodnějšími látkami k analýze jsou hormony a jejich metabolity, například folikuly stimulující hormon (FŠH). Příkladem relativně dostupné tělní tekutiny jsou sliny, cervikální hlen, pot, kožní maz, slzy a poševní hlen. Samozřejmě lze použít i vnitřní tělní tekutiny, například krev, jejichž nevýhodou ale je, že jsou odebírány invazívními technikami.

Výhodou tohoto způsobu monitorování cyklu je, že měření koncentrace vybrané látky nebo látek v tělní tekutině nemusí být absolutní. Stačí, aby byl testováním analyzované látky získán určitý signál, který má vztah k aktuální koncentraci a který lze převést na číselnou hodnotu. Porovnáním takto získaných číselných hodnot z různých stádií cyklu se určí, zdali došlo k signifikantní změně aktuální koncentrace nebo ne. Termín koncentrace analyzované látky užívaný v této patentové přihlášce a v nárocích má tedy přenesený význam.

Podstatu vynálezu tvoří způsob monitorování stadia ovulačniho cyklu u samic savců, zvláště člověka, spočívající v opakovaném stanovení změny koncentrace alespoň jedné látky v tělní tekutině, která má významný vztah ke stadiu ovulačního cyklu, zvláště pro ovulační fázi, postup spočívá v tom, že se identifikuje změna koncentrace analyzované látky, indikující počínající ovulaci na základě srovnání s referenční hodnotou této látky, získanou sledováním odpovídající koncentrace této látky v průběhu alespoň jednoho předchozího cyklu u téhož subjektu.

Koncentrace analyzované látky může být stanovena v hodnotách absolutních nebo v hodnotách relativních, například jako její poměr k referenční koncentraci analyzované látky ze stejného vzorku tělní tekutiny.

Vynález zahrnuje jakýkoli způsob monitorování stadia cyklu, při němž jsou srovnávány vlastnosti tělní tekutiny (například vazkost, iontová pevnost nebo tažnost) se vztahem ke stadiu ovulačniho cyklu s referenční hodnotou, která je pro subjekt stanovena na základě dat získaných v průběhu jednoho nebo více předchozích cyklů.

Je výhodné, když je testována pouze moč.

Tento způsob monitorování stadia ovulačniho cyklu nezahrnuje měření bazální teploty, zvláště, pokud je nutné provádět měření v průběhu každého cyklu.

Vhodnou látkou k analýze je estradiol nebo jeho metabolit, například estron-3-glukuronid.

Vhodnou látkou k analýze je estradiol nebo' jeho metabolit, například estron-3-glukuronid.

Pro účely vynálezu je možno využít elektronické zařízení pro způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u savce, například u ženy, které je naprogramované na zpracování dat z testování analyzované látky v tělní tekutině v průběhu alespoň části preovulační fáze cyklu a na rozpoznání takové změny koncentrace analyzované láúkv vůči referenční hodnotě, která je známkou blížící se ovulace(referenční hodnota je odvozená z dat získaných testováním koncentrace analyzované látky v průběhu jednoho nebo více předcházejících cyklů).

Elektronické zařízení je-'součászí zaznamenávacího zařízení, které jednak zaznamenává výsledky.z testování koncentrace analyzované látky a jednak zobrazuje informaci o stadiu probíhajícího ovulačního cyklu individuálního subjektu, jehož vzorky jsou testovány. Je výhodné, pokud má zaznamenávací zařízení prostředky, jimiž měří výsledky ze zařízení na testování koncentrace analyzované látky po jeho přiložení k zaznamenávacímu zařízení.

Využít je možno .také zařízení na testování koncentrace analyzované látky v tělní tekutině, které se používá v kombinaci s elektronickým zařízením a se zaznamenávacím zařízením podle vynálezu. Zařízení na testování koncentrace analyzované látky obsahuje součást na odebrání vzorku tělní tekutiny a prostředky na provedení imunochromatografie, které podávají výsledky testování ve formě čitelné pro měřící prostředky zaznamenávacího zařízení.

S výhodou'lze užít testovací kit pro zjištění stadia probíhajícího ovulačního cyklu u savce, resp. u ženy, který se skládá z jednoho nebo více zařízení na určování koncentrace (relativní nebo absolutní) analyzované látky, která má vztah ke stadiu ovulačního cyklu, v tělní tekutině a z elektronického zařízení naprogramovaného na zpracování dat z testování koncentrace analyzované látky v průběhu alespoň části preovulační fáze cyklu a na rozpoznání takové změny koncentrace analyzované látky vůči referenční hodnotě, která je známkou blížící se ovulace (referenční hodnota je odvozena z dat získaných testováním koncentrace analyzované látky v během jednoho nebo více předcházejících cyklů) ..

Testovací kit obsahuje několik zařízení na testování koncentrace analyzované látky v tělní tekutině na jedno použití.

Nej lepší uspořádání testovacího kitu je, pokud na něm lze, kromě estradiolu nebo jeho metabolitu v moči, testovat a elektronicky zpracovat současně koncentraci LH v moči.

Důležitým aspektem vynálezu je způsob předpovídání plodného období v probíhajícím cyklu u individuálního savčího, např. lidského, subjektu podle změny koncentrace analyzované látky v moči během preovulační fáze, která má vztah ke stadiu ovulačního cyklu. Změna koncentrace je hodnocena vzhledem k prahové hodnotě, která je určena podle měření koncentrace analyzované látky v tělní tekutině v průběhu preovulační fáze nejméně jednoho předcházejícího ovulačního cyklu. Vhodnou analyzovanou látkou je E3G v moči; prahová koncentrace odvozená pro právě probíhající cyklus je ta koncentrace, která je v předcházejícím cyklu častěji překračována během celkového počtu dnů přechodné fáze než během stejného počtu dnů neplodné fáze, která přechodné fázi předchází.

Využít lze také zařízení na monitorování savčího, např. lidského, ovuíačního cyklu, jehož součástí je zařízení na zahájení zaznamenávání cyklu, zařízení na měření (v případě potřeby ve spojení s jedním nebo více zařízeními na testování koncentrace analyzované látky čitelnými monitorovacím zařízením) a zaznamenávání koncentrace E3G v moči, zařízení na stanovení prahové koncentrace E3G podle měření během, neplodné a přechodné fáze alespoň v jednom přecházejícím cyklu a prostředky' na upozornění uživateiky v případě, že naměřená koncentrace E3G přesahuje před začátkem plodné fáze cyklu určený práh. Zvláště výhodné je využít klt na monitorování savčího, např. lidského, ovuíačního cyklu, který se skládá z výše popsaného zařízení a z alespoň jednoho zařízeni schooného testovat koncentraci E3G v moči.

Dalším vhodným přístrojem je elektronické zařízení, jako.je mikroprocesor, naprogramované na použití při způsobu monitorování stadia Ovuíačního cyklu podle vynálezu.

Nikde v literatuře nelze najít zmínku o tom, ž se referenční hodnota koncentrace*analyzované látky,

t.j. prahová hodnota, stanovuje nikoli na základě měření získaných během probíhajícího cyklu, ale na základě měření v jednom nebo více cyklech předcházejících téhož subjektu.

Pro stanovení prahové hodnoty koncentrace analyzované látky je vhodné rozdělit část ovulačního cyklu, kdy je hladina E3G měřitelná, na následující fáze:

i) Plodná fáze, je období od -3 do +2 dnů kolem aktuální ovulace. Den ovulace může být přesně stanoven podle hladiny LH v moči, například tak, že ovulace nastává den poté, co jsou v moči naměřeny nejvyšší koncentrace LH.

ii) Přechodná fáze, je období, během něhož by měla být žena upozorněna na blížící se ovulaci. Tato fáze je období od -8 do.-4 dnů před aktuální ovulací.

iii) Neplodná fáze, je období od začátku menstruace do -9 dne, včetně, před aktuální ovulací.

Prahová hodnota koncentrace E3G je stanovena podle měření koncentrace E3G v průběhu přechodné a prefertilní fáze v jednom nebo více předcházejících cyklech. Při stanovování prahové hodnoty koncentrace E3G individuálního subjektu jsou v průběhu těchto fází prováděna měření koncentrace E3G v moči pravidelně (nejlépe denně) v jednom a více, cyklech, s výhodou alespoň ve dvou cyklech, a zvláště ve třech cyklech.

Při více než jednom zahajujícím cyklu následují tyto cykly za sebou.

V případě potřeby lze zároveň stanovit den aktuální ovulace, a to již známými způsoby, jako je nález rázu LH, vzestup P3G, nebo pomocí jiných tělesných změn, například zvýšené bazální teploty (BT).

Nej vhodnější z těchto způsobů je nález rázu LH. Zde užívaný výraz ráz LH označuje výrazný vzestup koncentrace LH, který předchází ovulaci. V oboru je ráz LH označován také jako LH max, t.j. vrchol koncentrace LH. U většiny žen je z praktických důvodů vhodné monitorovat cyklus každý den. U části populace, asi u 20% žen, nelze vrchol LH pozorovat, dokud nezačne koncentrace LH klesat. Pro účely vynálezu je kritickým parametrem pozorovatelný vrchol LH.

Po té, co je prahová koncentrace E3G stanovena, je možné pravidelné testování E3G v současném cyklu během časné fáze neplodného období přerušit. Testování může být, například, započato až po určité době od začátku menstruace.

, Je-li popisovaný způsob monitorování stadia ovulačního cyklu užíván pro účely antikoncepce, musí být uživatelka upozorněna, že již v okamžiku, kdy začne hladina E3G stoupat, existuje jistá malá pravděpodobnost, že uživatelka je plodná.

Z praktických důvodů může být prahová koncentrace E3G definována jako ta koncentrace E3G, která je častěji překračována ve fázi přechodné než ve fázi neplodné. Prahová koncentrace E3G je tedy například koncentrace, která je překračována ne ve více než 30% dnů neplodné fáze, ale je překračována alespoň v 60% dnů přechodné fáze. Je výhodné, pokud je prahová koncentrace E3G taková koncentrace, která je v neplodné fázi překračována ne ve více než ve 20% dnů, ale která je překračována nejméně v 80% dnů přechodné fáze.

Prahová koncentrace E3G se výrazně liší u jednotlivých subjektů, ale vždy se pohybuje v rozmezí od 5 do 40 ng/ml.

Přesné stanovení prahové koncentrace E3G je sice možné, ale pohodlnější je používat prahová pásma, např. pásma prahových koncentrací 5, 10, 15,

20, 30, 40 a 50 ng/ml, kdy je na základě koncentrací E3G odvozených z předešlých cyklů každému subjektu přiřazeno určité prahové pásmo. Použití prahových pásem je pro účely antikoncepce dostatečně přesné. Zkoušky užívané ve způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu lze upravit tak, aby jimi byla taková prahová pásma rozpoznávána .

V článku New asseys for identifying the fertile period, Int. J. Gynecol. Obstet., 1989 Suppl. 1, 111-112, popisuje Brown se spolupracovníky způsob monitorování cyklu, založený na měřění hladiny estrogenů v moči, s tímto závěrem:

.... denní nárůst produkce estradiolu v průběhu preovulačního vrcholu je nápadně stálý ve všech cyklech a blíží se faktoru 1,4 za den.

Z hladiska statistiky populace je tato hodnota faktoru 1,4 přesná, ale v praxi se u jednotlivých subjektů výrazně liší. Při užití nárůstového nebo raciometrického způsobu odvození dat z řady po sobě následujících hodnot testování estradiolu nebo jeho metabolitu (např.E3G v moči) je nevhodné spolehnout se na nárůst 1,4 za den jako na univerzálně významný spouštěč preovulačního vzestupu. V praxi se zjišťuje, že spouštěčem je faktor nárůstu 2,0 a že tedy faktor nárůstu 1,4 neodráží typické kolísání v koncentraci E3G u jednotlivých subjektů. Jiné individuální subjekty mají spouštěč významně nižší než 1,4, takže při použití faktoru nárůstu 1,4 není preovulační vzestup koncentrace E3G zachycen.

Vynález může být použit pro kterýkoli způsob θ monitorování stadia ovulačního cyklu, který je založen na analýze nárůstu (raciometrické analýze) detekovatelného parametru významně se měnícího v průběhu preovulační fáze a ve kterém je nadcházející ovulace signalizována, když je rozpoznán předem stanovený referenční poměr, který je pro subjekt odvozen z dat získaných v jednom nebo více předcházejících cyklech. Zde užívaný výraz referenční hodnota koncentrace analyzované látky zahrnuje referenční hodnoty ve formě poměru.

⁰ _ Vynález lze s výhodou použít v kterémkoli zkušebním systému založeném na matematické analýze po sobě následujících koncentrací testované látky, zvláště analýze koncentrací E3G v moči, a to například na analýze CUSUM. Obvykle jsou po sobě následující koncentrace (nebo po sobě následující měření jakéhokoli relevantního parametru v souladu s vynálezem) zaznamenávány několik po sobě následujících dní.

Obvykle je v probíhajícím cyklu první zkouška provedena alespoň 5 dní po začátku menstruace.

Jednou zjištěné zvýšení hladiny E3G, t.j. hladiny přesahující předem stanovený práh, neznamená, že žena je v plodné fázi cyklu, ale že je jisté, že se blíží její ovulace.

Výhodou tohoto způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu je, že může pracovat s jedním parametrem, například se zvýšenou hladinou jednoho hormonu.

V dalším textu je vynález popisován na příkladu hormonů E3G, LH a P3G v moči, avšak princip vynálezu lze použít i na testování dalších biochemických markérů v jiných tělních tekutinách, například na testování hormonů estrogenu a progesteronu v krvi nebo ve slinách. Vynález je možné použít v kombinaci s pozorováním jiných fyziologických známek stavu plodnosti ženy a nebo jej lze na tato pozorování přímo aplikovat, příkladem je sledování markérů v jiných tělních tekutinách.

Den ovulace lze stanovit pomocí kteréhokoli chemického nebo fyziologického parametru, nej vhodnějším způsobem je ale měření hladiny LH. Ráz LH je jistou známkou blížící se ovulace. Den ovulace stanovený podle rázu LH slouží jako výchozí orientační bod. Je vysoce pravděpodobné, že ode dne ovulace, přesně stanoveného podle rázu LH, nebude uživatelka plodná déle než tři dny (4 dny od vzestupu hladiny LH). Z praktického hlediska je důležité, že za všech okolností je indikačním prahem pro ráz LH koncentrace LH v moči 20 mlU/ml.

Konec plodného období (to znamená ne přímo den ovulace) se určuje měřením hladin hormonu P3G v moči. Hladina P3G v moči je poměrně nízká až do začátku luteální fáze, kdy prudce stoupá. Nález zvýšené hladiny

P3G tedy znamená, že v cyklu nastala luteální fáze, t.j. poslední neplodné období. Zvýšení hladiny P3G v moči lze stanovit při jejím porovnání s výší hladiny P3G v současném cyklu nebo v jednom nebo více cyklech předchozích. Hladina P3G je například zvýšená, jak v případě, kdy je vyšší než součet čtyř předchozích hladin P3G v témže cyklu, tak v případě, kdy je vyšší než 3500 hg/ml. Hladina P3G je zvýšená, dosáhne-li jednoho ze dvou těchto prahů, i když je hodnota tohoto dosaženého prahu nižší než hodnota prahu druhého. Nález zvýšené hladiny P3G znamená, že žena je již do konce cyklu neplodná.

Nález jak LH, tak P3G je znamením, že žena je od této chvíle až do konce cyklu neplodná, přičemž jeden hormon je pojistkou tomu druhému. Nálezu LH lze s výhodou použít jako primárního indikátoru ovulace právě probíhající nebo těsně nadcházející, neboť na rozdíl od P3G je možné z hladin LH den ovulace přesně určit. <

Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu má tu výhodu, že podle něj lze s vysokou přesností určit den ovulace a plodné období v průběhu cyklu. Pro účely antikoncepce vyžaduje tento způsob určení plodné fáze velmi krátkou dobu zdrženlivosti od nechráněného pohlavního styku v jakémkoli typu menstruačním cyklu.

Výhodou vynálezu také je, že tento způsob monitorování stadia ovulačního cyklu vyžaduje méně testování v průběhu měsíce, čímž se snižuje finanční náročnost a nepohodlnost pro uživatelku bez ovlivnění spolehlivosti metody. Určení vrcholu LH není nezbytné,.

ale může posloužit jako'pojistka, která v případě, že není pozorována zvýšená hladina E3G upozorní na to, že uživatelka může být plodná.

Další výhodou způsobu monitorování cyklu podle vynálezu je, že při něm uživatelka nemusí měřit bazální teplotu, čímž se vyhne časově náročné a nepohodlné proceduře, jejíž spolehlivost je diskutabilní.

Zařízení na monitorování ovulačního cyklu u samice savce, zvláště u ženy, můžesestávat ze zařízení zahajujícího zaznamenávání cyklu, ze zařízení na měření (v případě potřeby ve spojení s jedním nebo více zařízeními na testování vzorků moči čitelnými monitorovacím zařízením) a zaznamenávání koncentrací E3G v moči, ze zařízení na určování prahové koncentrace E3G z výsledků měření získaných v průběhu neplodné a přechodné fáze alespoň jednoho předcházejícího cyklu a ze zařízení, které upozorní uživatelku, pokud koncentrace E3G naměřené během přechodné fáze probíhajícího cyklu překročí předem stanovený práh.

Zařízení zahajující zaznamenávání cyklu je vstupní zařízení, jako je spínač nebo tlačítko, kterým ₉ uživatelka zadává začátek nebo konec menstruace.

Je výhodné, pokud monitorovací zařízení obsahuje také prostředky na určování aktuální ovulace, například prostředky na měření a zaznamenávání rázu LH nebo vzestupu koncentrace P3G v moči.

Informace je uživatelce předána například pomocí tekutého krystalu nebo LED displeje. Informace o stavu plodnosti je znázorněna jednoduchou vizuální indikací, například kombinací barev, kdy zelená značí neplodnost, červená plodnost a žlutá mezistav, ve kterém je koncepce méně pravděpodobná, ale stále možná. Lze také použít kombinaci žluté a červené, kde červená signalizuje možnost koncepce. Zvláště v případě, kdy je zařízení užíváno jako pomocník při antikoncepci, je důležitá zejména indikace signálu plodná.

Monitorovací zařízení musí být (v případě potřeby) schopno na základě aktuálních měření z jednoho nebo více předcházejících cyklů modifikace předem stanoveného prahu pro právě probíhající cyklus nebo pro cyklus další.

. Je možno vyrobit . . kit pro monitorování ovulačního cyklu u samice savce, respektive u ženy, který sestává z monitorovacího zařízení popsaného výše a z alespoň jednoho testovacího zařízení schopného měřit hladinu jedné nebo více složek v moči. Je zřejmé, že monitorovací zařízení je možné použít v průběhu mnoha cyklů. Naproti tomu testovací zařízení pro měření složek v moči je na jedno použití, což je vhodnější, ale uživatelk* je nucena jej doplňovat.

Jednou z vhodných forem je jedno balení několika testovacích zařízení na měření složek v tělní tekutině (např. v moči) na jedno použití s přiloženým návodem na použití způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu. Pokud je to žádoucí, lze na každém z těchto testovacích zařízení určit současně koncentraci E3G a LH v moči (v případě potřeby ve spojení s monitorovacím zařízením nebo elektronikou popsanou výše).

Způsoby detekce analyzovaných látek v tělních tekutinách, jako jsou metabolity hormonů v moči, vhodné pro účely vynálezu, jsou známy z oboru. Vhodné testovací metody a zařízení k jejich provádění jsou popsány v žadatelově patentové přihlášce GB 2204398. Na tuto přihlášku jsou také odkazy dále v textu.

Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu spočívá v měření složky v moči, je tedy nutné testovat vzorek moči. Složku v moči lze stanovit vhodnou imunologickou zkouškou. Pro určování složek v moči je možné snadno upravit některé z mnoha testovacích zařízení na pevné bázi, jako jsou dipsticks nebo chromatografické proužky popsané v literatuře. Zařízení musí indikovat alespoň relativní hladiny analyzované látky, například E3G, v prahových pásmech. . V patentových přihláškách EP 0225054, EP 0183442, EP 0186799, GB 2204398 a EP 383619 jsou uvedeny příklady jednoduchého testovacího zařízení, které lze snadno upravit pro použití v domácím prostředí. V textu jsou odkazy na závěry z těchto publikací. K testování je možné použít testovací proužky na jedno použití popsané v patentových přihláškách GB 2204398 a EP 383619. Tyto testovací proužky jsou jednoduchým způsobem kontaktovány s močí a výsledek testu je zřejmý v semikvalitativní formě: na proužku je umístěna například serie testovacích zon, jejichž reakce je tím více pozitivní, čím vyšší jsou hladiny analyzované látky. Při testování lze použít jeden proužek nebo více proužků reagujících na různé prahy analyzované látky. Jinou možností je vizuálně odečitatelná kvantitativní zkouška založená na postupu viditelné (např. barevné) plochy nebo čela po povrchu (např. radiální difúze). Lze použít například enzymem značenou esej.

σι.

'Ve vypracovanější verzi příslušného přístroje ' může být zaznamenávací zařízení vybaveno prostředky pro odečítání výsledků testů v moči, například pro měření reflektance nebo fluorescence testovacích proužků. Takové vybavení umožňuje přesněji číselně definovat hladinu analyzované látky, a tím zvyšuje spolehlivost metody.

Při současném měření dvou a více analyzovaných látek je možné použít zařízení na testování jedné tělní tekutiny, a to například tím způsobem, že zařízení testuje více zkušebních proužků, nebo tím způsobem, že je testován proužek jeden, na kterém lze zjišťovat hladiny různých analyzovaných látek nezávisle na sobě.

Zaznamenávací zařízení musí být schopno asimilace, zapamatování a podržení dat o koncentraci analyzované látky, stejně jako předpovídání dalších, cyklů na základě těchto dat. Pro odborníky v oboru elektroniky, kteří jsou informováni o fakrorech, které ⁰ musí být při výrobě takového zařízení vzaty v úvahu a o skutečnosti, že zařízení musí být přizpůsobeno uživatelce, je snadné vybavit takové zařízení přesnou elektronikou s vybranými charakteristikami zde již dříve diskutovanými. Tato detailní elektronika není součástí vynálezu.. Pro. ilustraci jsou základní funkce tohoto zařízení načrtnuty v Obrázku 3, který je součástí doprovodných vyobrazení a který je popsán dále.

θ Pokud je zařízení, které měří hladiny hormonů ve vzorku moči, elektronické, pak může upravovat prahovou hodnotu E3G podle individuálních potřeb uživatelky, například ze 30 ng/ml na 20 ng/ml nebo ng/ml v případě, že je doba zdrženlivosti pro '· uživatelku příliš dlouhá nebo krátká.

Dále jsou pro ilustraci popsány praktické aspekty vynálezu s odkazy na doprovodná vyobrazení, Přehled obrázků na výkresech

Na Obrázku 1 je zobrazeno monitorovací zařízení i Lr] ' β laodie.

ovulačního cyklu K. JjrOltQ&U-i' s přidruženým zařízením na testování vzorku moči.

Obrázek 2 ukazuje detail zařízení na testování vzorků moči.

Na Obrázku 3 je schéma základních funkcí elektronického monitoru, - ' provede to/

Nařízeni na testování vzorků moči na Obrázku' 1 má plochý podlouhlý kryt (100), na jehož spodní ploše (102) je umísťovací výstupek (101) . Z jednoho konce krytu vystupuje součást pro nasátí vzorku (103).

Na norni stene (112) krytu monitoru (110) je výklenek (111) pro umístění plochého podlouhlého krytu zařízení na testování vzorků moči. Ve výklenku (111) je umísťovací drážka (113), do které zapadá umísťovací výstupek (101) na krytu zařízení na testování vzorků 25 moci, cimz je toto zařízeni udržováno ve správném postavení vůči odečítacínu oknu (114) ve výklenku. Pod krytem (110) je zařízení (nezobrazeno) na odečítání výsledků testování koncentrace analyzované látky v moči z testovacího zařízení, například odečítač fluorescence.

Na zkosené čelní stěně (115) krytu monitoru je umístěno velké okno (116), které zprostředkovává informaci uživatelce, a to například pomocí LED displeje nebo jinou vizuální cestou. Tato informace může mít různé formy. Může být například zobrazen kalendář s avizováním nutnosti provádět testování moči nebo může být zobrazen aktuální stav ovulačního cyklu. Na zkosené čelní stěně (115) krytu monitoru je také tlačítko (117), jehož stištěním uživatelka indikuje začátek ovulačního cyklu a tím uvádí monitor s cyklem do souladu.

Energetickým zdrojem monitoru jsou baterie.

Na boční stěně (118) krytu monitoru je vstup, například odklopitelná dvířka (119), která umožňují baterie vkládat a měnit.

Na Obrázku 2 je znázorněno zařízení na testování vzorků moči z druhé strany. Umísťovací výstupek (101) je nyní na horní ploše (200). Na této horní ploše (200) je také výsledkové okno (201) . Do zařízení na testování vzorků moči se vkládá ²⁰ imunochromatografický proužek (nezobrazen), na němž jsou nanesena· všechna nezbytná reagenční činidla ke stanovení koncentrace analyzované látky imunologickou zkouškou ve vzorku moči, který je aplikován do součásti pro nasátí vzorku (103). Pokud je ve vzorku moči přítomna analyzovaná látka, dochází k imobilizaci značené komponenty sendvičovou nebo kompetiční reakcí, přičemž značená komponenta se koncentruje v zóně viditelné skrz výsledkové okno. Po otočení zařízení na testování vzorků moči a jeho umístění do výklenku (111)

3θ v krytu monitoru je výsledkové okno přiloženo na odečítací okno (114) v monitoru a výsledek zkoušky může být stanoven. Pokud je komponenta značená fluorescenčním činidlem, pak odečítací zařízení monitoru detekuje a měří výdej fluorescence v detekční zóně proužku, kde je značená komponenta nahromaděná. Tak může být hodnota koncentrace analyzované látky ve vzorku moči přesně číselně definovaná. Tuto informaci zpracuje monitor tak, že ji dá do souladu s kalendářem (po té, co uživatelka zadala začátek cyklu) a s daty z předchozích cyklů, které drží v paměti.

Na Obrázku 3 jsou zobrazeny základní součásti elektronického monitorovacího zařízení. Jednotlivé součásti tohoto zařízení mohou být zcela konvenční, ale pro účely vynálezu lze vytvářet jiné kombinace a sestavy. Místo běžných mikroprocesorů na bázi čipu lze použít například takzvané hard - wired systémy a neurální sítě. Na Obrázku 3 se kombinace skládá ze :

čtecí jednotky (300) odvozující informace ze zařízení na testování vzorků moči, například z testovacího proužku. Čtecí jednotka obsahuje iluminátor (301) a odečítač (302) (zde reprezentovaný fotodiodou). Na čtecí jednotku navazuje konverzní jednotka (303), ve které je optický .signál přeměněn na formu použitelnou v mikroprocesoru (304). Volitelně může být připojen kalibrační systém (305), který mění signál ze čtecí jednotky na data odpovídající, například, hodnotě absolutní koncentrace. Časoměřič, jako jsou hodiny (306), koordinuje měření s cyklem. Mikroprocesor (304) zpracovává, ukládá do paměti a interpretuje aktuální výsledky ve vztahu k výsledkům získaným dříve, a zvláště ve vztahu k výsledkům zaznamenaným v předchozích cyklech. Na styčné ploše pro uživatelku (307) je alespoň tlačítko, jehož stištěním zadává uživatelka začátek ovulačního cyklu, čímž zahajuje práci celého zařízení. Ve zdroji energie (308) je zabudován kondenzátor (309) zálohování paměti, který brání ztrátě dat při výměně baterií.

Pro ilustraci jsou dále uvedeny Příklady vynálezu. Tyto příklady se týkají monitorování ovulačního cyklu u žen.

V příkladu jsou předvedeny profily E3G u dvou žen. První žena má hladiny E3G v moči relativně nízké, druhá žena má hladiny E3G v moči relativně vysoké. V

1θ každé tabulce označuje první sloupec den cyklu a druhý sloupec stav plodnosti. První fáze cyklu je fáze neplodná a je to ta část folikulární fáze, kdy nechráněný pohlavní styk nevede k otěhotnění. Po ní . následuje fáze přechodná, ve které se objevují změny vedoucí k nástupu plodné fáze. V této přechodné fázi by' měla žena být pomocí signálu upozorněna, že nadchází plodná fáze. Plodná fáze je období před a po ovulaci, ve kterém nechráněný pohlavní styk vede ve většině případů k otěhotnění. Trvání plodné fáze před ovulací j_e dáno dobou přežití spermií, která závisí zvláště na stavu hlenu, jež je řízen ženskými pohlavními hormony. Období po skončení plodné fáze je opět fáze neplodná, fáze luteální, ve které vejce opustilo dělohu a početí již není ve stávajícím cyklu možné.

Ve třetím sloupci každé z tabulek jsou zaznamenány hodnoty E3G v prvních 20 dnech cyklu. Tyto hodnoty jsou výsledkem každodenního testování prvních ranních vzorků moči imunologickou zkouškou.

_3Q Imunologická zkouška je běžně užívaná zkouška typu

ELISA. Hodnoty E3G jsou měřeny v ng/ml.

Ovulace nastává 24 hodin poté, co jsou naměřeny nejvyšší hodnoty LH. Hodnoty LH jsou stanovovány ze stejných vzorků moči běžně užívanou imunologickou zkouškou, ale v tabulkách zaneseny nejsou, neboť nejdůležitější hodnotou je termín ovulace.

Pro určování prahové hodnoty E3G pro následující cyklus jsou stanovena následující pravidla:

1. Práh E3G může mít hodnotu 5, 10, 15, 20, 25 a 30 ng/ml, ale ne vyšší.

2. Signál plodná má uživatelka v ideálním případě dostat 6 dnů před ovulací.

3. Překročení prahové hodnoty 4. nebo 5. den přechodné fáze je významnější než její překročení v časnějších dnech přechodné fáze.

4. První hodnota koncentrace E3G zvolená jako prahová musí být ta hodnota koncentrace E3G, která je v zahajujícím cyklu během přechodné fáze překračována, nej častěji a během naplodné fáze nejméně často. Je výhodné, pokud tato hodnota není v neplodné fázi přakročena vůbec.

5. V prvním cyklu musí být testování prováděno každý den, dokud není rozpoznán ráz LH a není tak určena hlavní zahajující fáze.

6. V následujícím cyklu může být prahová hodnota upravena v případě, že

a) stanovená prahová hodnota není překročena 4. a nebo 5. den přechodné fáze;

b) stanovená prahová hodnota je zbytečně nižší než hodnota, která je nutná pro signál přicházející 4. a nebo 5. den přechodné fáze.

7. Prvních 5 dnů cyklu nejsou hladiny E3G 5 vzaty v úvahy s tím předpokladem, že v domácím prostředí se nebude testování provádět ihned v průběhu menstruace.

Příklady provedení vynálezu

U ženy B je v cyklu 1 hodnota 25 překročena 8. a 11. den (neplodné fáze), tudíž prahová hodnota musí být vyšší než tato hodnota. Hodnota 30 je překročena 4. a 5. den přechodné fáze (15. a 16. den cyklu), takže tato hodnota 30 je vybrána jako nejvyšší volba prahové hodnoty, která zároveň vyhovuje pravidlu 2, 3 a 4.

Prahová hodnota 30 je vyhovující, ale v cyklu 3 je 13. den (5. den přechodné fáze) hodnota E3G 23,9 a tak je podle pravidla 6a třeba snížit prahovou hodnotu na 20, což je nejvyšší volba prahové hodnoty, která je ten den překročena.

V cyklu 4 je podle pravidla 6b prahová hodnota upravena na 25, protože z hodnot dosažených ve dvou vybraných vhodných dnech přechodné fáze vyplývá, že hodnota 20 je příliš nízká a že hodnota 25 bude vyhovovat lépe.

V cyklu 5 je podle pravidel 2, 3-a 6b prahová hodnota pro další cyklus upravena na hodnotu 30.

První den, na který je zvolená prahová hodnota E3G překročena, jev tabulce označen (****).

Volitelně lze prahovou nebo jinou referenční hodnotu koncentrace analyzované látky, např. referenční poměr, určit z hodnot získaných pomocí rolling referenční baze sestávající z neměnného počtu po sobě následujících cyklů těsně předcházejících cyklu 30 současnému. Tuto rolling referenční bázi tvoří 4 až 10 těsně předcházejících cyklů, s výhodou 5 až 6 těsně předcházejících cyklů. Pomocí takové rolling referenční baze je možné zaznamenat každý významný posun v referenční hodnotě. Referenční hodnota pro další cyklus může být, například, průměr referenčních hodnot z dat volitelně získaných v cyklu nebo cyklech těsně předcházejících.

CYKLUS

ZENA A

A 1: Zahajující cyklus

Den

Fáze

Hodnota E3G

Ovulace neplodná 2,7 ” 3,3

2,4

1,8

3,6

2,5

1,7

1,9

3,1 přechodná 5,4

2,1

5,3

10,5

7,7 plodná 5,2

8,3

6,8

4,3 LHM + 1

19- ’’ 4,9 ’’ 5,3 neplodná . .

Ovulace avizována: 0 dní předem (ustavující parametry) Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 5 ng/ml

CYKLUS A 2

Den	Fáze	Hodnota E3G Ovulace
1	neplodná	2, 0
2	II	1,5
3	II	1,1
4	II	4,1
5	II	4,0
6	II	3,5
7	II	2,3
8	II	1,9
9	přechodná	3, 6
10	II	3,7
11	II	3, 0
12	II	g, 2 * ·· *
13	II	8,9
14	plodná	14, 6
15	VI	12, 6
16	VI	8,8
17	II	15,8 LHM + 1
18	II	6,9
19	IV	6, 5
20	neplodná	6, 5
21	VI
22	II
23	IV
24	VI
25	VI
26	VI
27	II
28	IV
29	II
30	IV
Ovulace	avizována: 6 dní	předem
Prahová	hodnota E3G pro	další cyklus: 5 ng/ml

CYKLUS A 3

Den	Fáze	Hodnota E3G
1	neplodná	2,0
2	I»	2,0
3	II	2,7
4	II	2,9
5	II	2,7
6	II	1,6
7	přechodná	2,5
8	II	5,4 ***
9	II	4,0
10	•1	5, 6
11	II	3,7
12	plodná	6, 2
13	II	23,6
14	II	21,3
15	II	8,3
16	II	4,5
17	II	3,7
18	neplodná	3,4
19	II	2, 8
20	II	3,1
21	II
22	II
23	II
24	II
25	II
26	II
27	II
28	II
29	II
30	II

Ovulace

LHM +' 1

Ovulace avizována: 8 dní předem Prahová hodnota E3G pro další cyklus:

ng/ml

W LM-qr

2/2

A

06.66.

95T/Sf

Fig.1.

III

12. Způsob podle některého z nároků 8 až 11, v y značující se tím, že se k indikaci konce fertilní fáze stanoví koncentrace LH a/nebo P3G v moči.

V3. Testovací kit k monitorování stadia ovulačniho cyklu podle nároků 1 až 12,vyznačující se t í m , zte obsahuje prostředky, například tlačítko (117) pro zahájení záznamu ovulačniho cyklu, odečítací okno (114) pro odečitatelný signál koncentrace tělní tekutiny, pokud jde o koncentraci analyzované látky ve vztahu k ovulačnímu cyklu z\alespoň jednoho testovacího zařízení (100), elektronické prostředky (300 až 309) pro záznam měřené koncentrace analyzované látky a pro stanovení referenční koncentrace této látky z. údajů, získaných v alespoň jednom předchozím cyklu u ténbž jedince a velké okno (116) s displejem pro indikaci stadia ovulačniho cyklu a pro upozornění uživatele v případě ,\že v průběhu prefertilní fáze průběžného cyklu překročí měřená koncentrace zvolené analyzované látky referenční koncentraci o hodnotu, která indikuje počínající ovulaci. \

14. Testovací kit podle nároku 13, vyznačuj ící se tím, že je vybaveno velkým oknem (116) pro znázornění informace o stadiu průběžného cyklu.

15. Testovací kit podle nároku 13,\v y z n a Sující s e t í m , že obsahuje \ výklenek (111) pro uložení testovacího zařízení (100) pro jeho odečtení elektronickými prostředky (303 \ž 309).

16. Testovací kit podle některého z nároků \L3 až 15, vyznačující se tím,že se při možnosti početí převádí do velkého okna (116) barevný signál. \

i

II

7. Způsob podle nároku 1, vyznačuj íc í se t í m , že změna koncentrace analyzované látky se vztahem ke stadiu ovulačního cyklu je definována vzhledem k prahové koncentraci analyzované látky, která je pro individuální subjekt odvozena z měření koncentrace analyzované látky v tělní tekutině během preovulační fáze alespoň jednoho předcházejícího cyklu.

8. Způsob podle nároku 1 pro předpovídání plodného období v probíhajícím ovulačním cyklu u lidí pomocí nálezu zvýšené koncentrace E3G v moči během preovulační fáze, vyznačující se tí m , že zvýšená koncentrace E3G v moči je definována vzhledem k prahové koncentraci, která je pro individuální subjekt stanovena podle měření koncentrace E3G v moči v preovulační fázi alespoň jednoho předcházejícího cyklu.

9. Způsob podle nároku 8,vyznačuj ící se t í m , že prahová koncentrace E3G v moči odvozená pro současný cyklus je ta koncentrace E3G, která je v předchozím ovulačním cyklu během celkového počtu dní přechodné fáze překročena častěji než během stejného počtu dní fáze neplodné, těsně předcházející přechodné fázi.

10. Způsob podle nároku 9, vyznačující s e t í m , že prahová koncentrace E3G v moči je ta koncentrace E3G, která není překročena ve více než 30 % dnů neplodné fáze, ale je překročena alespoň v 60 % dnů přechodné fáze.

11. Způsob podle nároku 9, vyznačují c í se t í m , že prahová koncentrace je ta koncentrace E3G, která není překročena ve více než 20 % dnů neplodné fáze, ale je překročena alespoň v 80 % dnů přechodné fáze.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u samic savců, zvláště člověka, spočívající v opakovaném stanovení změny koncentrace alespoň jedné látky v tělní tekutině, která má významný vztah ke stadiu ovulačního cyklu, a to zvláště pro ovulační fázi, vyznačující se tím, že se identifikuje změna koncentrace analyzované látky, indikující počínající ovulaci na základě srovnání s referenční hodnotou této látky, získané sledováním odpovídající koncentrace této látky v průběhu alespoň jednoho předchozího cyklu u téhož subjektu.

ý,)·'
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se koncentrace analyzované látky stanoví alespoň v části preovulační fáze průběžného ovulačního cyklu a počínající ovulace se indikuje srovnáním získané koncentrace s referenční koncentrací z alespoň jednoho předchozího cyklu.
3. Způsob podle nároku 1 nebo 2, vyznačuj í c í se t í m , že se koncentrace stanoví pouze v tělní tekutině.
4. Způsob podle některého z nároků 1 až 3, vyzná č u jí c í s e t í m , že se stanoví koncentrace estradiolu nebo jeho metabolitu, například estron-3-glukuronidu, E3G.
5. Způsob podle některého z nároků 1 až 4, v y značující se tím, že se stanoví koncentrace analyzované látky v moči.
6. Způsob podle některého z nároků 1 až 5, v y značující se tím, že se stanoví poměr koncentrací analyzovaných látek.

8 9

20 21 22 23

2-4

II

II

II

II

II

II

II

II přechodná

II

II

II

II plodná

II

II

II

II

II neplodná

II

II

II

II

II

II

II

II

27.3 20,2
7,0

12.7 7,2

14,5

14.8

10.8 8,7

14.1

17.4

41,3****

57.5 42,0 55, 4

60.1 39, 4 24,7

10.5

LHM + 1

Ovulace avizována: 6 dní předem Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 30 ng/ml

Zastupuje :

8 9

20 21 22 23 24.

přechodná

IV rv rv

VT plodná vr vr

IT rv rt neplodná

12,2

7.2

6.2

13.9

12.9

12.7 9,3

16,5

17.7

26,O**** 38, 3 70, 6 74, 6 70, 6

49.7 23, 5 29, 8 44,4

32.7

LHM + 1

Ovulace avizována: 6 dní předem Prahová hodnota E3G pro další cyklus:

CYKLUS B 5

Den Fáze Hodnota E3G

1 neplodná 33,9

25 ng/ml

Ovulace

2 IV 30, 0 3 I» 12,4 4 IV 6, 5 5 »» 8,7 6 11 17,2 5 7 Π 14,9 8 H 11, 8 9 přechodná 11/ 0 10 TI 13, 1 11 IV 25, 6 10 12 «1 32,5**** 13 IT 23,9 14 plodná 63,8 15 VI 22,1 16 VI 65,9 17 VI 41, 2 LHM 15 18 VI 7,6 19 VI 35,3 20 neplodná. 33,7 21 VI 22 IV 23 IV 20 24 VI 25 VI 26 IV 27 VI 28 VI 25 29 VI 30 VI Ovulace avizována: 6 dní předem Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 20 ng/ml

CYKLUS B 4 Den Fáze Hodnota E3G Ovulace 1 neplodná 17,7

Den Fáze Hodnota E3G Ovulace 1 neplodná 27,5 2 »1 28,8 3 II 24,7 4 II 22,6 5 II 24,9 6 II 28, 9 7 II 14,6 8 II θ/4 9 II 24,7 10 přechodná 33,6**** 11 II 39,3 12 II 25, 6 13 II 43, 2 14 II 67,1 15 plodná 62,0 16 II 94,6 17 II 58,4 .LHM + 1 18 II 42,4 19 II 60, 4 20 II 56,0

21 neplodná

2 6

Ovulace avizována: 8 dní předem

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 30 ng/ml

CYKLUS B 3

Den Fáze Hodnota E3G Ovulace 1 neplodná 46,4

CYKLUS B 1: Zahajující cyklus

Den Fáze

1 neplodná

8 9

12 přechodná

17 plodná

18 19

20,

23 neplodná

2 6

2 9

Ovulace avizována: 0 dní předem (ustavující parametry Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 30 ng/ml

Hodnota E3G

10, 9

15.2

21.2

12.7

11, 8

16.5

15, 6

25.1

10.1

16, 8 28,2 24, 6

28.7

27.7 62, 6

68.5 61, 9

103, 4 85, 4 45,4

Ovulace

LHM + 1

CYKLUS B 2

CYKLUS A5

Den Fáze Hodnota E3G Ovula 1 neplodná 2,3 2 II 2,8 3 n 2,7 4 n 2,3 5 II 2,8 6 II 4,8 7 II 5,6 **** 8 II 4,5 9 přechodná 3, 2 10 II 8,5 11 II 7,3 12 II 6,3 13 II 7,0 14 plodná 11,8 15 II 19, 3 16 II 18,5 17 íl 9,2 LHM + 18 II 5, 3 19 II 4,8 20, neplodná 6,1 21 II 22 II 23 II 24 II 25 II 2 6 II 27 II 28 II 29 II 30 II Ovulace avizována: 11 dní předem Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 5 ng/ml

ZENA B

CYKLUS A 4

Den Fáze Hodnota E3G 1 neplodná 2,4 2 IV 2,8 3 II 5,2 4 VI 3, 6 5 VI 2,5 6 přechodná 3,1 7 IV 3,9 8 II 4,6 9 VI 5,1 **** 10 IV 6,1 11 plodná 16, 7 12 VI 10, 8 13 VI 22,8 14 IV 21, 3 15 IV 9,4 16 VI 12,2 17 neplodná 5,7 18 II 5,2 19 VI 7,5 20 II 9,0 21 . VI 22 VI 23 II 24 VI 25 II 26 II 27 VI 28 »f 29 VI 30 VI Ovulace avizována: 6 dní předem Prahová hodnota E3G pro další cyklus:

ng/ml