CZ286000B6

CZ286000B6 - Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu

Info

Publication number: CZ286000B6
Application number: CZ95453A
Authority: CZ
Inventors: Michael Catt; John Coley; Paul James Davis
Original assignee: Unilever N. V.
Priority date: 1992-08-21
Filing date: 1993-08-10
Publication date: 1999-12-15
Also published as: BG62063B1; FI950759A; CA2142264A1; DE69308147D1; JPH08500671A; US6234974B1; NO950636L; ES2100556T3; AU5538698A; JP2755823B2; EP0754949A1; AU4709493A; ATE148946T1; CZ45395A3; GB9217864D0; BR9306941A; EP0656120A1; BG99437A; NO950636D0; US5467778A

Abstract

Řešení tvoří způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u samic savců, zejména člověka, spočívající v opakovaném testování koncentrace alespoň jedné látky v tělní tekutině, která má významný vztah ke stadiu ovulačního cyklu při nejmenším v preovulační fázi, postup spočívá v tom, že a/ testování koncentrace uvedené látky je zahájeno v průběžném ovulačním cyklu v časovém rozmezí alespoň 2 dny po začátku menstruace až 2 dny přede dnem, v němž nastala ovulace u téhož subjektu v jednom nebo více předcházejících cyklech nejdříve, b/ ze získaných výsledků se identifikuje změna koncentrace analyzované látky, indikující blížící se ovulaci srovnáním s referenční hodnotou této látky, získanou sledováním odpovídající koncentrace této látky v průběhu alespoň jednoho předchozího cyklu u téhož subjektu.ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se zabývá způsoby monitorování ovulačního cyklu u samic savců, a zvláště u žen.

Dosavadní stav techniky

Hlavním, i když ne jediným, aspektem vynálezu je zajištění spolehlivé informace o stavu plodnosti ženy v rámci antikoncepce, a to jednoduchým způsobem, který mohou snadno používat i laici v domácím prostředí.

Výraz „plodná fáze“ používaný v této patentové přihlášce, označuje v menstruačním cyklu ženy časový interval kolem ovulace, ve kterém vede pohlavní styk ve většině případů k početí.

Zajištěním spolehlivé informace o stavu plodnosti se rozumí, že je uživatelka pomocí určitého způsobu monitorování informována o začátku plodné fáze cyklu. Navrhované způsoby monitorování cyklu jsou založeny na sledování jednoho nebo více parametrů, měnících se v závislosti na ovulaci. Příkladem těchto parametrů může být koncentrace analyzované látky v tělní tekutině, jako je koncentrace estradiolu nebo jeho metabolitů, například estron-3-glukoronidu (E3G). Jinými používanými parametry jsou měření bazální teploty nebo sledování různých fyziologických změn, jako je například charakter vaginálního hlenu.

Těmito parametry se zabývá mnoho vynikajících akademických studií. Vyplývá z nich, že používané parametry korelují se stavem plodnosti průměrného člena velkého populačního vzorku.

Avšak při pokusu vypracovat skutečně praktický způsob monitorování cyklu, vhodný pro jednotlivce, vychází najevo skutečnost, že mnoho individuálních subjektů se od průměru liší délkou cyklu a nebo trváním a načasováním plodné fáze. Rozdíly mezi jednotlivci, a dokonce rozdíly mezi jednotlivými cykly u téhož jedince, vedou k tomu, že jsou průměrná data z populace pro praktické požití příliš nespolehlivá.

Také prachová nebo základní hladina parametru, který je zvolen za signál nadcházející plodné fáze, se může od jednotlivce k jednotlivci výrazně lišit. Průměrná prahová nebo základní hladina, stanovená na základě dat z populace, může být tedy pro individuální použití zcela nevhodná.

Vynález spočívá ve způsobu monitorování ovulačního cyklu zejména pro účely antikoncepce, který je založen na sledování významných charakteristik individuálního subjektu a který bere v úvahu možné odchylky.

Důležitým aspektem vynálezu je zajištění spolehlivé informace o stavu plodnosti bez nutnosti častého (např. denního) testování v průběhu každého ovulačního cyklu. Nezbytnost pravidelného, např. denního, testování v průběhu cyklu je charakteristická pro mnoho dříve navrhovaných způsobů monitorování ovulačního cyklu.

V odborné literatuře lze najít řadu studií, zabývajících se profily hormonů v moči v průběhu ovulačního cyklu. Největší pozornost je, coby ukazatelům stadia cyklu, věnována derivátům estradiolu, zvláště estron-3-glukuronidu (E3G), luteinizačnímu hormonu (LH) a derivátům progesteronu, zvláště pregnandiol-3-glukuronidu (P3G).

LH je využíván komerčně pro zvýšení pravděpodobnosti početí.

-1 CZ 286000 B6

Předpovídáním plodné fáze ovulačního cyklu pomocí každodenního měření hladiny hormonů E3G a Pd-3-G (t.j. P3G) v první ranní moči se zabývá práce „A prospective multicentre study to develop universal tests for predicting the fertile period in women“ (WHO, Int J Fertil, 30 (3), 1985, str. 18-30). Ačkoli hlavním cílem této studie je analyzovat rozdíly ve výpočtech plodné fáze cyklu u žen různých ras, vychází tato práce z předpokladu, že relativní hladiny E3G a Pd-3-G mohou být použity k určení začátku a konce plodné fáze. Pokud je začátek plodné fáze definován jako trvalý vzestup hladiny E3G v moči, pak konec této plodné fáze (t.j. začátek luteální fáze) nastává 5 dní po pozorovaném vrcholu E3G. Podobně, pokud je začátek plodné fáze definován jako vzestup poměru E3G: Pd-3-G, pak konec plodné fáze nastává 6 dní poté, co je pozorována nejvyšší hodnota tohoto poměru.

V článku „New asseys for identifying the fertile phase“, (Int J Gynecol Obstet, 1989, Suppl 1, str. 111-122) diskutují autoři Brown, Blackwell, Holmes a Smyth možnost předpovědi ovulace pomocí stanovení hladiny estrogenu, ačkoli estrogen sám o sobě je pro předpověď ovulace nespolehlivý. Za hormonální markér je požadován také pregnandiol, který označuje konec plodného období. Ve výše zmíněných studiích je nezbytné zdržet se pohlavního styku v průměru 17 dní; spokojenost uživatelky s takovou antikoncepční metodou a ochota testovaných párů v ní pokračovat jsou nepřímo úměrné počtu dnů, po které je nutno se zdržet pohlavního styku. Ve studii jsou hladiny E3G a P3G měřeny denně, ale autory článku je zvažována možnost, že pro stanovení plodného období měřením E3G a P3G stačí 12 měření měsíčně. Ve snaze snížit počet dnů sexuální abstinence na „teoretických“ minimálních sedm dní je navrhováno používat pro předpověď plodného období kombinaci hodnocení stavu cervikálního hlenu se stanovením nesymptomatických markérů.

Určování plodného období pomocí stanovení několika látek v moči diskutuje Collins v článku „biochemical Indices of Potential Fertility“ (Int J Gyneco Obstet, 1989, Suppl. 35-43). Avšak užívané testy jsou v předpovědi plodné fáze úspěšné jen v 80 % a méně, navíc ve všech případech je délka plodné fáze (a tím i doby zdrženlivosti) větší než 10 dní.

Patentová přihláška EP 367 615 (Monoclonal Antibodies lne) popisuje způsob přirozené kontroly porodnosti, využívající měření metabolitů (progestoronu) v moči coby ukazatele stadia menstruačního cyklu. Jedinými sledovanými hormony jsou metabolity progesteronu, takže metoda stanovuje pouze bezpečnou luteální fázi.

V článku „Fertility Awamess: Jet-Age Rhythm Method?“ (Science, 1 June 1990, str. 1061-2) navrhuje Djerassi určování plodné fáze pro účely antikoncepce, a zvláště koncepce, pomocí analýzy tělních tekutin (t.j. krve, moči a slin). V článku se předpokládá, že začátek plodného období lze bezpečně stanovit pomocí nárůstu koncentrace estradiolu (nebo jeho metabolitů). Začátek luteální fáze může být určen buď pomocí druhého vzestupu koncentrace estradiolu nebo pomocí většího nárůstu koncentrace progesteronu (nebo jeho metabolitů).

Z této literatury vyplývají následující závěry:

estadiol a jeho metabolity, zvláště E3G, jsou jedinými hormony v moči, které mohou být použity v preovulační fázi cyklu jako dostatečně včasné varování pro antikoncepční účely; a jakýkoli test, který má spolehlivě určit stav plodnosti pro účely antikoncepce, musí zahrnovat měření E3G nebo ekvivalentní molekuly a zároveň musí zaznamenat vzestup koncentrace E3G, který předchází ovulaci.

Nicméně z literatury (například viz Djerassi) zároveň vyplývá, že žádný uspokojivý test, založený na měření E3G, zatím vyvinut nebyl.

-2CZ 286000 B6

Jelikož bazální hladina E3G výrazně kolísá od jedince k jedinci, má se obecně za to, že není možné žádnou jednoduchou, univerzálně použitelnou zkoušku vyvinout.

Ve snaze obejít tento problém jsou užívány složité matematické postupy, (např. „CUSUM“). Pomocí nich je možné během ovulačního cyklu vypočíst prahovou koncentraci E3G a zaznamenat každý signifikantní vzestup koncentrace E3G vůči prahové hodnotě. Nevýhodou těchto systémů aleje, že v okamžiku, kdy je matematicky zaznamenána signifikantní změna, může být z hlediska antikoncepce „příliš pozdě“. Z tohoto důvodu se obecně soudí, že pomocí CUSUM nelze zajistit prospektivní informaci o stavu plodnosti. Přehled metod, založených na CUSUM, podává Royston ve Statistics in Medicine, Vol. 10 (1991) 221-240.

Při shrnutí výsledků dříve navrhovaných způsobů určování plodné fáze je zřejmé, že stanovená plodná fáze je příliš dlouhá a tak je příliš dlouhá i doba, kdy je nutno zdržet se pohlavního styku. Velmi často, například v EP 376 615, trvá doba zdrženlivosti od menstruace do konce plodné fáze. To je bezpochyby dáno obtížností přesného stanovení začátku plodného období. Jedním z rysů dříve navrhovaných způsobů určování plodné fáze také je, že metoda je z hlediska antikoncepce spolehlivá jen při častém, většinou každodenním, měření hladin hormonů v moči během cyklu.

Pro zajištění spolehlivosti antikoncepční metody je důležité, aby byl pomocí určitého způsobu monitorování v cyklu zcela zřetelně označen začátek normálně nadcházející plodné fáze, přičemž termín „normálně“ může znamenat jak normálně v rámci dat z populace, tak normálně pro individuální subjekt.

Dříve navržené způsoby monitorování se vyznačují velkou opatrností a tudíž nezbytností provádět testování příslušného parametru v průběhu celého cyklu, a zvláště ihned od začátku cyklu (od začátku menstruace). Z hlediska uživatelky je nesporně výhodnější, pokud stačí, aby prováděla testování po srovnatelně kratší dobu než je celý cyklus. Vedle pohodlnosti zde zraje roli i cena způsobu monitorování, která je samozřejmě nižší, když je, například, pro každý měsíc potřeba menší množství testovacího zařízení najedno použití.

Obecně lze počet testů snížit tak, že je pomocí dat, získaných v populaci, definováno, do kterého určitého dne cyklu, nebo po jaký časový interval od začátku menstruace není nutné testy provádět. Avšak vzhledem k individuální variaci nejsou jakékoli všeobecně platné závěry, odvozené z dat v populaci, dostatečně bezpečné (viz výše).

Podstata vynálezu

Pro účely této patentové přihlášky bude estadiol a všechny jeho měřitelné metabolity souhrnně označen jako „E3G“. Vedle již zmíněného estron-3-glukuronidu je možné podle vynálezu testovat tyto metabolity estradiolu: estradiol-3-glukuronid, estradiol-17-glukuroid, estroil-3glukuroid, estriol-16-glukurodi a (pouze u subjektů nehumánního původu) estron-3-sulfát. Jak vyplyne z následujícího popisu, vynález lze aplikovat na data, získaná měřením koncentrací jiných látek, analyzovaných v tělní tekutině, které mají vztah ke stadiu ovulačního cyklu. Nejvhodnějšími látkami k analýze jsou hormony a jejich metabolity, například folikuly, stimulující hormon (FSH). Příkladem relativně dostupné tělní tekutiny jsou sliny, cervikální hlen, pot, kožní maz, slzy a poševní hlen. Samozřejmě lze použít i vnitřní tělní tekutiny, například krev, jejiž nevýhodou aleje, že jsou odebírány invazívními technikami.

Výhodou tohoto způsobu monitorování cyklu je, že měření „koncentrace“ vybrané látky nebo látek v tělní tekutině nemusí být absolutní. Stačí, aby byl testováním analyzované látky získán určitý signál, který má vztah k aktuální koncentraci a který lze převést na číselnou hodnotu. Porovnáním takto získaných číselných hodnot z různých stádií cyklu se určí, zdali došlo

-3 CZ 286000 B6 k signifikantní změně aktuální koncentrace nebo ne. Termín „koncentrace“ analyzované látky, užívaný v této patentové přihlášce a v nárocích, má tedy přenesený význam.

Podstatu vynálezu tvoří způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u samic savců, zejména člověka, spočívající v opakovaném testování koncentrace alespoň jedné látky v tělní tekutině, která má významný vztah ke stadiu ovulačního cyklu při nejmenším v preovulační fázi. Postup spočívá v tom, že

a) testování koncentrace uvedené látky je zahájeno v průběžném ovulačním cyklu v časovém rozmezí alespoň 2 dny po začátku menstruace až 2 dny přede dnem, v němž nastala ovulace u téhož subjektu v jednom nebo více předcházejících cyklech nejdříve,

b) ze získaných výsledků se identifikuje změna koncentrace analyzované látky, indikující blížící se ovulaci, srovnáváním s referenční hodnotou této látky, získanou sledováním odpovídající koncentrace této látky v průběhu alespoň jednoho předchozího cyklu u téhož subjektu.

Ke stanovení je možno použít testovací kit, který se skládá z:

a) jednoho nebo více zařízení na testování výše zmíněné alespoň jedné analyzované látky ve výše zmíněné tělní tekutině;

b) zařízení, které podle srovnání koncentrace analyzované látky s referenční hodnotou, odvozenou z jednoho nebo více předcházejících cyklů, umožní uživatelce určit stav plodnosti v současném cyklu; a

c) zařízení, které podle dne, v němž nastala u téhož subjektu ovulace v alespoň jednom předcházejícím cyklu, umožní uživatelce přesně stanovit den začátku testování.

Je výhodné, pokud jsou v testovacím kitu zařízení b) a c) spojená a obsahují elektronické zařízení, naprogramované pro použití při způsobu monitorování cyklu podle vynálezu.

Součástí kitu je také elektronické zařízení pro způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u savce, které je naprogramované na zpracování dat z testování analyzované látky v tělní tekutině v průběhu alespoň části preovulační fáze cyklu a na rozpoznání takové změny koncentrace analyzované látky vůči referenční hodnotě, která je známkou blížící se ovulace (referenční hodnota je odvozená z dat, získaných testováním koncentrace analyzované látky v průběhu jednoho nebo více předcházejících cyklů). Toto zařízení je zároveň schopno určit začátek testování analyzované látky, který nastává několik dní po zahájení menstruace, ale nejméně 2 dny před dnem, ve kterém nastala u téhož individuálního subjektu ovulace v jednom nebo více předcházejících cyklech.

Užívá se tedy zařízení na monitorování ovulačního cyklu u lidí, jehož součástí je zařízení na zahájení zaznamenávání cyklu, zařízení na měření (v případě potřeby ve spojení s jedním nebo více zařízeními na testování koncentrace analyzované látky, čitelnými monitorovacím zařízením) a zaznamenávání koncentrace E3G v moči, zařízení na stanovení prahové koncentrace E3G podle měření během neplodné a přechodné fáze alespoň v jednom předcházejícím cyklu a prostředky na upozornění uživatelky v případě, že naměřená koncentrace E3G přesahuje před začátkem plodné fáze cyklu určený práh, zařízení na měření (v případě potřeby ve spojení s jedním nebo více testovacími zařízeními, čitelnými monitorovacím zařízením) a zaznamenávání koncentrace LH a nebo P3G v moči, zařízení, které z koncentrací LH a nebo P3G v moči, zařízení, které z koncentrací LH a nebo P3G určí den, ve kterém nastala ovulace v jednom nebo více předcházejících cyklech nejdříve, a zařízení, které upozorní uživatelku na nejvhodnější den pro začátek testováni E3G v současném cyklu, přičemž tento nejvhodnější den pro začátek testování

-4CZ 286000 B6

E3G je alespoň 5 dní po začátku menstruace současného cyklu, ale nejméně 2 dny před dnem, ve kterém nastala ovulace v předchozích cyklech nejdříve.

Koncentrace analyzované látky může být stanovena v hodnotách absolutních nebo v hodnotách relativních, například jako její poměr k referenční koncentraci analyzované látky ze stejného vzorku tělní tekutiny.

Vynález zahrnuje jakýkoli způsob monitorování stadia cyklu, při němž jsou srovnávány vlastnosti tělní tekutiny (například vazkost, iontová pevnost nebo tažnost) se vztahem ke stadiu ovulačního cyklu s referenční hodnotou, která je pro subjekt stanovena na základě dat, získaných v průběhu jednoho nebo více předchozích cyklů.

Nejpohodlněji lze příslušnou referenční hodnotu, např. prahovou hodnotu, určit z hodnot, získaných pomocí „rolling“ referenční báze, sestávající z neměnného počtu po sobě následujících cyklů, těsně předcházejících cyklu současnému. Tuto „rolling“ referenční bázi tvoří 4 až 10 těsně předcházejících cyklů, s výhodou 5 až 6 těsně předcházejících cyklů. Pomocí takové „rolling“ referenční báze je možné zachytit každý významný posun v prahové hodnotě u individuálního subjektu. Referenční hodnota pro další cyklus může být, například, průměr referenčních hodnot z dat, volitelně získaných v cyklu nebo cyklech těsně předcházejících.

Je výhodné, když jsou při tomto způsobu monitorování cyklu testovány pouze vzorky moči.

Tento způsob monitorování stadia ovulačního cyklu nezahrnuje měření bazální teploty, zvláště pokud je nutné provádět měření v průběhu každého cyklu.

Vhodnou látkou k analýze je estradiol nebo jeho metabolit, například estron-3-glukuronid.

Dále se popisuje také elektronické zařízení pro způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u savce, například u ženy, které je naprogramované na zpracování dat z testování analyzované látky v tělní tekutině v průběhu alespoň části preovulační fáze současného cyklu a na rozpoznání takové změny koncentrace analyzované látky vůči referenční hodnotě, která je známkou blížící se ovulace (referenční hodnota je pro individuální subjekt odvozená z dat, získaných testováním koncentrace analyzované látky v průběhu jednoho nebo více předcházejících ovulačních cyklů).

Elektronické zařízení je součástí zaznamenávacího zařízení, které jednak zaznamenává výsledky z testování koncentrace analyzované látky, a jednak zobrazuje informaci o stadiu probíhajícího ovulačního cyklu individuálního subjektu, jehož vzorky jsou testovány. Je výhodné, pokud má zaznamenávací zařízení prostředky, jimiž měří výsledky ze zařízení na testování koncentrace analyzované látky po jeho přiložení k zaznamenávacímu zařízení.

Dále bude popsáno také zařízení na testování koncentrace analyzované látky v tělní tekutině, které se používá v kombinaci s elektronickým zařízením a se zaznamenávacím zařízením podle vynálezu. Zařízení na testování koncentrace analyzované látky obsahuje součást na sebrání vzorku tělní tekutiny a prostředky na provedení imunochromatografie, které podávají výsledky testování ve formě, čitelné pro měřicí zařízení zaznamenávacího zařízení.

Využívá se tedy testovací kit pro zjištění stadia probíhajícího ovulačního cyklu u savce, resp. u ženy, který se skládá z jednoho nebo více zařízení na určování koncentrace (relativní nebo absolutní) analyzované látky, která má vztah ke stadiu ovulačního cyklu, v tělní tekutině, a z elektronického zařízení, naprogramovaného na zpracování dat z testování koncentrace analyzované látky v průběhu alespoň části preovulační fáze cyklu a na rozpoznání takové změny koncentrace analyzované látky vůči referenční hodnotě, která je známkou blížící se ovulace (referenční hodnota je odvozena z dat, získaných testováním koncentrace analyzované látky během jednoho nebo více předcházejících cyklů).

-5CZ 286000 B6

Testovací kit obsahuje několik zařízení na testování koncentrace analyzované látky v tělní tekutině najedno použití.

Nej lepší uspořádání testovacího kitu je, pokud na něm lze, kromě estrodiolu nebo jeho metabolitu v moči, např. E3G, testovat a elektronicky zpracovat současně koncentraci LH v moči.

Důležitým aspektem vynálezu je způsob předpovídání plodního období v probíhajícím cyklu u individuálního savčího, např. lidského, subjektu podle změny koncentrace analyzované látky v tělní tekutině během preovulační fáze, která má vztah ke stadiu ovulačního cyklu. Změna koncentrace je hodnocena vzhledem k prahové hodnotě, která je určena podle měření koncentrace analyzované látky v tělní tekutině v průběhu preovulační fáze nejméně jednoho předcházejícího ovulačního cyklu. Vhodnou analyzovanou látkou je E3G v moči; prahová koncentrace, odvozená pro právě probíhající cyklus, je ta koncentrace, která je v předcházejícím cyklu častěji překračována během celkového počtu dnů přechodné fáze než během stejného počtu dnů neplodné fáze, která přechodné fázi předchází.

Kit zahrnuje zařízení na monitorování savčího, např. lidského, ovulačního cyklu, jehož součástí je zařízení na zahájení zaznamenávání cyklu, zařízení na měření (v případě potřeby ve spojení s jedním nebo více zařízeními na testování koncentrace analyzované látky, čitelným monitorovacím zařízením) a zaznamenávání koncentrace E3G v moči, zařízení na stanovení prahové koncentrace E3G v moči podle měření koncentrace E3G během neplodné a přechodné fáze alespoň v jednom přecházejícím cyklu a prostředky na upozornění uživatelky v případě, že naměřená koncentrace E3G přesahuje před začátkem plodné fáze cyklu určený práh. Součástí vynálezu je také kit na monitorování savčího, např. lidského, ovulačního cyklu, který se skládá z výše popsaného zařízení a z alespoň jednoho zařízení, schopného testovat koncentraci E3G v moči.

Uvedený kit zahrnuje také elektronické zařízení, jako je mikroprocesor, naprogramované na použití při způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu.

Nikde v literatuře nelze najít zmínku o tom, že se referenční hodnota koncentrace analyzované látky, t.j. prahová hodnota, stanovuje nikoli na základě měření, získaných během probíhajícího cyklu, ale na základě měření v jednom nebo více cyklech předcházejících u téhož subjektu.

Vynález spočívá v kombinovaném způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu, který respektuje charakteristiky individuálního subjektu.

Testování začíná alespoň 3, s výhodou alespoň 4, dny před dnem, ve kterém nastala ovulace v jednom nebo více předcházejících dnech u téhož individuálního subjektu nejdříve.

Nejčasnější termín aktuální ovulace je odvozen zdát, sbíraných během posledních 3, s výhodou během posledních 5, po sobě následujících předcházejících cyklů.

Nejčasnější termín aktuální ovulace pro výpočet časového intervalu pro testování v současném cyklu je v nejlepším případě odvozen z hodnot, získaných v posledním těsně předcházejícím cyklu.

Nejpohodlněji lze den, ve kterém nastala ovulace v předchozích cyklech nejdříve, určit z hodnot, získaných pomocí „rolling“ referenční báze, sestávající z neměnného počtu po sobě následujících cyklů, těsně předcházejících cyklu současně. Tuto rolling referenční bázi tvoří 4 až 10 těsně předcházejících cyklů, s výhodou 5 až 6 těsně předcházejících cyklů. Pomocí takové rolling referenční báze je možné zaznamenat každý významný posun v ovulaci a upravit podle něj začátek dalšího testování.

-6CZ 286000 B6

Svrchu popsaný testovací kit se tedy skládá z jednoho nebo více testovacích zařízení na stanovení koncentrace (absolutní nebo relativní) výše zmíněné alespoň jedné analyzované látky ve výše zmíněné tělní tekutině, z návodu, ve kterém se uživatelka dozví, že s testováním se začíná v průběhu výše popsaného časového intervalu, a ze zařízení, které uživatelce umožní odvodit výše popsaný časový interval a nebo přesně určit začátek testování, pokud je znám den ovulace v alespoň jednom předcházejícím cyklu.

Vynález může být obecně aplikován na jakýkoli způsob monitorování stadia ovulačního cyklu individuálního savčího, např. lidského, ženského subjektu, spočívající v měření určitého parametru, který má vztah ke stadiu ovulačního cyklu a který vykazuje zaznamenatelnou změnu v průběhu preovulační fáze cyklu, přičemž tato změna nastává nejméně 2 a s výhodou nejméně 3 dny před začátkem ovulace.

Určení začátku testování je ovlivněno časovým intervalem mezi začátkem menstruace a dnem, ve kterém nastala v předchozích cyklech ovulace nejdříve. Interval mezi začátkem menstruace a dnem, ve kterém nastala ovulace v předchozích cyklech nejdříve, může být u některých subjektů poměrně dlouhý. Toto je pozorováno především u žen, jejichž cyklus je často nebo vždy delší než průměrných 28 dní. Pokud u těchto žen nastane ovulace dříve, než je pro ně obvyklé, je nutné posunout začátek testování vpřed. Začátek testování je výhodné vypočítat podle následujícího vztahu:

Den, ve kterém nastala ovulace v předchozích cyklech nejdříve

8-10

11-14

15-18

19-23

24-28

29+

Den začátku testování

Parametr nebo parametry, signalizují blížící se ovulaci, musí v časovém intervalu od začátku 25 testování (tak jak je zde popsán) do konce neplodných dnů nadcházející ovulací projevit zachytitelnou změnu. Nejvhodnějším parametrem je obecně změna koncentrace (absolutní nebo relativní) určité analyzované látky v tělní tekutině. Zvláště vhodnou látkou k analýze je hormon nebo jeho metabolit. Nejvhodnější tělesnou tekutinou je moč.

Pro stanovení prahové hodnoty koncentrace analyzované látky u individuálního subjektu je vhodné rozdělit část ovulačního cyklu, kdy je hladina E3G měřitelná, na následující fáze:

i) Plodná fáze, je období od „-3“ do „+2“ dnů kolem aktuální ovulace. Den ovulace může být přesně stanoven podle hladiny LH v moči, například tak, že ovulace nastává den poté, kdy jsou v moči naměřeny nejvyšší koncentrace LH.

ii) Přechodná fáze, je období, během něhož by měla být žena upozorněna na blížící se ovulaci. Tato fáze je obdobím od „-8“ do „-4“ dnů před aktuální ovulací.

iii) Neplodná fáze, je období od začátku menstruace do „-9“ dne, včetně, před aktuální ovulací.

Prahová hodnota koncentrace E3G je stanovena podle měření koncentrace E3G v průběhu přechodné a prefertilní fáze v jednom nebo více předcházejících cyklech. Při stanovování prahové hodnoty koncentrace E3G individuálního subjektu jsou v průběhu těchto fází prováděna měření koncentrace E3G v moči pravidelně (nejlépe denně) v jednom a více cyklech, s výhodou alespoň ve dvou cyklech, a zvláště ve třech cyklech. Při více než jednom zahajujícím cyklu následují tyto cykly za sebou.

V případě potřeby lze zároveň stanovit den aktuální ovulace, a to již známými způsoby, jako je nález rázu LH, vzestup P3G, nebo pomocí jiných tělesných změn, například zvýšené bazální teploty (BT). Nejvhodnější z těchto způsobů je nález rázu LH. Zde užívaný výraz „ráz LH“ označuje výraz vzestup koncentrace LH, který předchází ovulaci. V oboru je ráz LH označován také jako „LH max“, t.j. vrchol koncentrace H. U většiny žen je z praktických důvodů vhodné monitorovat cyklus každý den. U části populace, asi u 20 % žen, nelze vrchol LH pozorovat, dokud nezačne koncentrace LH klesat. Pro účely vynálezu je kritickým parametrem pozorovatelný vrchol LH.

Poté, co je prahová koncentrace E3G stanovena, je možné pravidelné testování E3G v současném cyklu během časné fáze neplodného období přerušit. Testování může být, například, započato až po určité době od začátku menstruace.

Je-li popisovaný způsob monitorování stadia ovulačního cyklu užíván pro účely antikoncepce, musí být uživatelka upozorněna, že již v okamžiku, kdy začne hladina E3G stoupat, existuje jistá malá pravděpodobnost, že uživatelka je plodná.

Z praktických důvodů může být prahová koncentrace E3G definována jako ta koncentrace E3G, která je častěji překračována ve fázi přechodné než ve fázi neplodné. Prahová koncentrace E3G je tedy například koncentrace, která není překračována ve více než 30 % dnů neplodné fáze, ale je překračována alespoň v 60 % dnů přechodná fáze. Je výhodné, pokud je prahová koncentrace E3G taková koncentrace, která není v neplodné fázi překračována ve více než ve 20 % dnů, ale která je překračována nejméně v 80 % dnů přechodné fáze.

Prahová koncentrace E3G se výrazně liší u jednotlivých subjektů, ale vždy se pohybuje v rozmezí od 5 do 40 ng/ml. U mnoha žen je prahová hodnota E3G kolem 30 ng/ml.

Přesné stanovení prahové koncentrace E3G je sice možné, ale pohodlnější je používat „prahová pásma“, např. pásma prahových koncentrací 5, 10, 15, 20, 30, 40 a 50 ng/ml, kdy je na základě koncentrací E3G, odvozených z předešlých cyklů, každému subjektu přiřazeno určité prahové pásmo. Použití prahových pásem je pro účely antikoncepce dostatečně přesné. Zkoušky, užívané při způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu, lze upravit tak, aby jimi byla taková prahová pásma rozpoznávána.

V článku „New assays for identifying th fertile period“, Int. J. Gynecol. Obstet., 1989 Suppl. 1,

111-112, popisuje Brown se spolupracovníky způsob monitorování cyklu, založený na měření hladiny estrogenů v moči, s tímto závěrem:

„... denní nárůst produkce estradiolu v průběhu preovulačního vrcholu je nápadně stálý ve všech cyklech a blíží se faktoru 1,4 za den.“

Z hlediska statistiky populace je tato hodnota faktoru 1,4 přesná, ale v praxi se u jednotlivých subjektů výrazně liší. Při užití nárůstového nebo raciometrického způsobu odvození dat z řady po sobě následujících hodnot testování estradiolu nebo jeho metabolitu (např. E3G v moči) je nevhodné spolehnout se na nárůst 1,4 za den jako je univerzálně významný spouštěč preovulačního vzestupu. V praxi se zjišťuje, že spouštěčem je faktor nárůstu 2,0 a až tedy faktor nárůstu 1,4 neodráží typické kolísání v koncentraci E3G u jednotlivých subjektů. Jiné individuální subjekty mají spouštěč významně nižší než 1,4, takže při použití faktoru nárůstu 1,4 není preovulační vzestup koncentrace E3G zachycen.

-8CZ 286000 B6

Vynález může být použit pro kterýkoli způsob monitorování stadia ovulačního cyklu, který je založen na analýze nárůstu („raciometrické analýze“) detekovatelného parametru, významně se měnícího v průběhu preovulační fáze a ve kterém je nadcházející ovulace signalizována, když je rozpoznán předem stanovený referenční poměr, který je pro subjekt odvozen z dat, získaných v jednom nebo více předcházejících cyklech. Zde užívaný výraz „referenční hodnota koncentrace analyzované látky“ zahrnuje referenční hodnoty ve formě poměru.

Vynález lze s výhodou použít v kterémkoli zkušebním systému, založeném na matematické analýze po sobě následujících koncentrací testované látky, zvláště analýze koncentrací E3G v moči, a to například na analýze „CUSUM“. Obvykle jsou po sobě následující koncentrace (nebo po sobě následující měření jakéhokoli relevantního parametru v souladu s vynálezem) zaznamenávány několik po sobě následujících dní.

Obvykle je v probíhajícím cyklu první zkouška provedena nejméně 5 dní po začátku menstruace.

Jednou zjištěné zvýšení hladiny E3G, t.j. hladiny, přesahující předem stanovený práh, neznamená, že žena je v plodné fázi cyklu, ale že je jisté, že se blíží jejich ovulace.

Výhodou tohoto způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu je, že může pracovat s jedním parametrem, například se zvýšenou hladinou jednoho hormonu. Jedním z provedení vynálezu ale zároveň je, že srovnáním hodnot z testování dvou a více analyzovaných látek je získán například poměr koncentrací dvou nezávisle na sobě testovaných látek.

V dalším textuje vynález popisován na příkladu hormonů E3G, LH a P3G v moči, avšak princip vynálezu lze použít i na testování dalších biochemických markérů, například na testování hormonů estrogenů a progesteronu v krvi nebo ve slinách. Vynález je možné použít v kombinaci s pozorováním jiných fyziologických známek stavu plodnosti ženy a nebo jej lze na toto pozorování přímo aplikovat, například je sledování markérů v jiných tělních tekutinách.

Den ovulace lze stanovit pomocí kteréhokoli chemického nebo fyziologického parametru, nejvhodnějším způsobem je ale měření hladiny LH. Ráz LH je jistou známkou blížící se ovulace. Den ovulace, stanovený podle rázu LH, slouží jako výchozí orientační bod. Je vysoce pravděpodobné, že ode dne ovulace, přesně stanoveného podle rázu LH, nebude uživatelka plodná déle než tři dny (4 dny od vzestupu hladiny LH). Z praktického hlediska je důležité, že za všech okolností je indikačním prahem pro ráz LH koncentrace LH v moči 20 mlU/ml.

Konec plodného období (to znamená ne přímo den ovulace) se určuje měřením hladin hormonu P3G v moči. Hladina P3G v moči je poměrně nízká až do začátku luteální fáze, kde prudce stoupá. Nález zvýšené hladiny P3G tedy znamená, že v cyklu nastala luteální fáze, t.j. poslední neplodné období. Zvýšení hladiny P3G v moči lze stanovit při jejím porovnání svýší hladiny P3G v současném cyklu nebo v jednom nebo více cyklech předchozích hladina P3G je například „zvýšená“ jak v případě, kdy je vyšší než součet čtyř předchozích hladin P3G v témže cyklu, tak v případě, kdy je vyšší než 3500 ng/ml. Hladina P3G je zvýšená, dosáhne-li jednoho ze dvou těchto prahů, i když je hodnota tohoto dosaženého prahu nižší než hodnota prahu druhého. Nález zvýšené „hladiny“ P3G znamená, že žena je již do konce cyklu neplodná.

Nález jak LH, tak P3G je znamením, že žena je od této chvíle až do konce cyklu neplodná, přičemž jeden hormon je „pojistkou“ tomu druhému. Nálezu LH lze s výhodou použít jako primárního indikátoru ovulace právě probíhající nebo těsně nadcházející, neboť na rozdíl od P3G je možné z hladin LH den ovulace přesně určit.

Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu má tu výhodu, že podle něj lze s vysokou přesností určit den ovulace a plodné období v průběhu cyklu. Pro účely antikoncepce

-9CZ 286000 B6 vyžaduje tento způsob určení plodné fáze velmi krátkou dobu zdrženlivosti od nechráněného pohlavního styku v jakémkoli typu menstruačního cyklu.

Výhodou vynálezu také je, že tento způsob monitorování stadia ovulačního cyklu vyžaduje méně testování v průběhu měsíce, čímž se snižuje finanční náročnost a nepohodlnost pro uživatelku bez ovlivnění ale může posloužit jako „pojistka“, která v případě, že není pozorována zvýšená hladina E3G, upozorní na to, že uživatelka může být plodná.

Další výhodou způsobu monitorování cyklu podle vynálezu je, že při něm uživatelka nemusí měřit bazální teplotu, čímž se vyhne časově náročné a nepohodlné proceduře, jejíž spolehlivost je diskutabilní.

Dále bude popsáno zařízení na monitorování ovulačního cyklu u samice savce, zvláště u ženy, sestávající ze zařízení, zahajujícího zaznamenávání cyklu, ze zařízení na měření (v případě potřeby ve spojení s jedním nebo více zařízeními na testování vzorků moči,čitelnými monitorovacím zařízením) a zaznamenávání koncentraci E3G v moči, že zařízení na určování prahové koncentrace E3G z výsledků měření, získaných v průběhu neplodné a přechodné fáze alespoň jednoho předcházejícího cyklu, a ze zařízení, které upozorní uživatelku, pokud koncentrace E3G, naměřená během přechodné fáze probíhajícího cyklu, překročí předem stanovený práh.

Zařízení, zahajující zaznamenávání cyklu, je vstupní zařízení, jako je spínač nebo tlačítko, kterým uživatelka zadává začátek nebo konec menstruace.

Je výhodné, pokud monitorovací zařízení obsahuje také prostředky na určování aktuální ovulace, například prostředky na měření a zaznamenávání rázu LH nebo vzestupu koncentrace P3G v moči.

Informace je uživatelce předávána například pomocí tekutého krystalu nebo LED displeje. Informace o stavu plodnosti je znázorněna jednoduchou vizuální indikací, například kombinací barev, kdy zelená značí neplodnost, červená plodnost a žlutá mezistav, ve kterém je koncepce méně pravděpodobná, ale stále možná. Lze také použít kombinaci žluté a červené, kde „červená“ signalizuje možnost koncepce. Zvláště v případě, kdy je zařízení užíváno jako pomocník při antikoncepci, je důležitá zejména indikace signálu „plodná“.

Monitorovací zařízení musí být (v případě potřeby) schopno na základě aktuálních měření z jednoho nebo více předcházejících cyklů modifikace předem stanoveného prahu pro právě probíhající cyklus nebo pro cyklus další.

Použít je možno kit pro monitorování ovulačního cyklu u samic savce, respektive u ženy, který sestává z monitorovacího zařízení popsaného výše a z alespoň jednoho testovacího zařízení, schopného měřit hladinu jedné nebo více složek v moči. Je zřejmé, že monitorovací zařízení je možné použít v průběhu mnoha cyklů. Naproti tomu testovací zařízení pro měření složek v moči je najedno použití, což je vhodnější, ale uživatelka je nucena jej doplňovat.

Jednou z vhodných forem je jedno balení několika testovacích zařízení na měření složek v tělní tekutině (např. v moči) najedno použití s přiloženým návodem na použití způsobu monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu. Pokud je to žádoucí, lze na každém z těchto testovacích zařízení určit současně koncentraci E3G a LH v moči (a nebo P3G) (v případě potřeby ve spojení s monitorovacím zařízením nebo elektronikou, popsanou výše).

Způsoby detekce analyzovaných látek v tělních tekutinách, jako jsou metabolity hormonů v moči, vhodné pro účely vynálezu, jsou známy z oboru. Vhodné testovací metody a zařízení k jejich provádění jsou popsány v žadatelově patentové přihlášce GB 2204398. Na tuto přihlášku jsou také odkazy dále v textu.

-10CZ 286000 B6

Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle vynálezu spočívá v měření složky v moči, je tedy nutné testovat vzorek moči. Složku v moči lze stanovit vhodnou imunologickou zkouškou. Pro určování složek v moči je možné snadno upravit některé z mnoha testovacích zařízení na pevné bázi, jako jsou dispticks nebo chromatografické proužky, popsané v literatuře. Zařízení musí indikovat alespoň relativní hladiny analyzované látky, například E3G, v prahových pásmech. V patentových přihláškách EP 0225054, EP 0183442, EP 0186799, GB 2204398 a EP 383619 jsou uvedeny příklady jednoduchého testovacího zařízení, které lze snadno upravit pro použití v domácím prostředí. V textu jsou odkazy na závěry z těchto publikací. K testování je možné použít testovací proužky na jedno použití, popsané v patentových přihláškách GB 2204398 a EP 383619. Tyto testovací proužky jsou jednoduchým způsobem kontaktovány s močí a výsledek testu je zřejmý v semikvalitativní formě: na proužku je umístěna například série testovacích zón, jejichž reakce je tím více pozitivní, čím vyšší jsou hladina analyzované látky. Při testování lze použít jeden proužek nebo více proužků, reagujících na různé prahy analyzované látky. Jinou možností je vizuálně odečitatelná kvantitativní zkouška, založená na postupu viditelné (např. barevné) plochy nebo „čela“ po povrchu (např. radiální difúze). Lze použít například enzymem značenou esej.

Ve vypracovanější verzi přístroje může být zaznamenávací zařízení vybaveno prostředky pro odečítání výsledků testů v moči, například pro měření reflektance nebo fluorescence testovacích proužků. Takové vybavení umožňuje přesněji číselně definovat hladinu analyzované látky, a tím zvyšuje spolehlivost metody.

Při současném měření dvou a více analyzovaných látek je možné použít zařízení na testování jedné tělní tekutiny, a to například tím způsobem, že zařízení testuje více zkušebních proužků, nebo tím způsobem, že je testován proužek jeden, na kterém lze zjišťovat hladiny různých analyzovaných látek nezávisle na sobě.

Zaznamenávací zařízení musí být schopno asimilace, zapamatování a podržení dat o koncentraci analyzované látky, stejně jako předpovídání dalších cyklů na základě těchto dat. Pro odborníky v oboru elektroniky, kteří jsou informováni o faktorech, které musí být při výrobě takového zařízení vzaty v úvahu, a o skutečnosti, že zařízení musí být přizpůsobeno uživatelce, je snadné vybavit takové zařízení přesnou elektronikou s vybranými charakteristikami zde již dříve diskutovanými. Tato detailní elektronika není součástí vynálezu. Pro ilustraci jsou základní funkce tohoto zařízení načrtnuty na obrázku 3, který je součástí doprovodných vyobrazení a který je popsán dále.

Pokud je zařízení, které měří hladiny hormonů ve vzorku moči, elektronické, pak může upravovat prahovou hodnotu E3G podle individuálních potřeb uživatelky, například ze 30 ng/ml na 20 ng/ml nebo 40 ng/ml v případě, že je doba zdrženlivosti pro uživatelku příliš dlouhá nebo krátká.

Dále jsou pro ilustraci popsána praktická provedení vynálezu s odkazy na připojené výkresy.

Přehled obrázků na výkresech

Na obrázku 1 je vyobrazeno zařízení na monitorování ovulačního cyklu pro provádění způsobu podle vynálezu spolu s přidruženým zařízením na testování vzorku moči.

Obr. 2 ukazuje detail zařízení na testování vzorků moči.

Na obr. 3 je schéma základní funkcí elektronického monitoru podle vynálezu.

-11 CZ 286000 B6

Příklady provedení vynálezu

Zařízení na testování vzorků moči na obrázku 1 pro provádění způsobu má plochý podlouhlý kryt 100, na jehož spodní ploše 102 je umísťovací výstupek 101. Z jednoho konce krytu vystupuje součást pro nasátí vzorku 103.

Na horní stěně 112 krytu monitoru 110 je výklenek 111 pro umístění plochého podlouhlého krytu zařízení na testování vzorků moči. Ve výklenku 111 je umísťovací drážka 113, do které zapadá umísťovací výstupek 101 na krytu zařízení na testování vzorků moči, čímž je toto zařízení udržováno ve správném postavení vůči odečítacímu oknu 114 ve výklenku. Pod krytem 110 je zařízení (nezobrazeno) na odečítání výsledků testování koncentrace analyzované látky v moči z testovacího zařízení, například odečítač fluorescence.

Na zkosené čelní stěně 115 kiytu monitoru je umístěno velké okno 116, které zprostředkovává informaci uživatelce, a to například pomocí LED displeje nebo jinou vizuální cestou. Tato informace může mít různé formy. Může být například zobrazen kalendář s avizováním nutnosti provádět testování moči, nebo může být zobrazen aktuální stav ovulačního cyklu. Na zkosené čelní stěně 115 krytu monitoruje také tlačítko 117, jehož stisknutím uživatelka indikuje začátek ovulačního cyklu a tím uvádí monitor s cyklem do souladu.

Energetickým zdrojem monitoru je baterie. Na boční stěně 118 krytu monitoru je vstup, například odklopitelná dřívka 119, která umožňují baterie vkládat a měnit.

Na obrázku 2 je znázorněno zařízení na testování vzorků moči z druhé strany. Umísťovací výstupek 110 je nyní na horní ploše 200. Na této horní ploše 200 je nejvýše umístěno výsledkové okno 201. Do zařízení na testování vzorků moči se vkládá imunochromatografický proužek (nezobrazen), na němž jsou nanesena všechna nezbytná reagenční činidla ke stanovení koncentrace analyzované látky imunologickou zkouškou ve vzorku moči, který je aplikován do součásti pro nasátí vzorku 103. Pokud je ve vzorku moči přítomna analyzovaná látka, dochází k imobilizaci značené komponenty sendvičovou nebo kompetiční reakcí, přičemž značená komponenta se koncentruje v zóně, viditelné skrz výsledné okno. Po otočení zařízení na testování vzorků moči a jeho umístění do výklenku 111 v krytu monitoru je výsledkové okno přiloženo na odečítací okno 114 v monitoru a výsledek zkoušky může být stanoven. Pokud je komponenta značená fluorescenčním činidlem, pak odečítací zařízení monitoru detekuje a měří výdej fluorescence v detekční zóně proužku, kde je značená komponenta nahromaděná. Tak může být hodnota koncentrace analyzované látky ve vzorku moči přesně číselně definovaná. Tuto informaci zpracuje monitor tak, že ji dá do souladu s kalendářem (poté, co uživatelka zadala začátek cyklu) a s daty z předchozích cyklů, která drží v paměti.

Na obrázku 3 jsou zobrazeny základní součásti elektronického monitorovacího zařízení. Jednotlivé součásti tohoto zařízení mohou být zcela konvenční, ale pro účely vynálezu lze vytvářet jiné kombinace a sestavy. Místo běžných mikroprocesorů na bázi „čipu“ lze použít například takzvané „hard - wired“ systémy a „neutrální sítě“. Na obrázku 3 se kombinace skládá ze:

čtecí jednotky 300, odvozující informace ze zařízení na testování vzorků moči, například z testovací proužku. Čtecí jednotka obsahuje iluminátor 301 a odečítač 302 (zde reprezentovaný fotodiodou). Na čtecí jednotku navazuje konverzní jednotka 303, ve které je optický signál přeměněn na formu, použitelnou v mikroprocesoru 304. Volitelně může být připojen kalibrační systém 305, který mění signál ze čtecí jednotky na data, odpovídající například hodnotě absolutní koncentrace. Časoměřič, jako jsou hodiny 306, koordinuje měření s cyklem. Mikroprocesor 304 zpracovává, ukládá do paměti a interpretuje aktuální výsledky ve vztahu k výsledkům, získaným dříve, a zvláště ve vztahu k výsledkům, zaznamenaným v předchozích cyklech. Na

- 12CZ 286000 B6 styčné ploše pro uživatelku 307 je alespoň tlačítko, jehož stisknutím zadává uživatelka začátek ovulačního cyklu, čímž zahajuje práci celého zařízení. Ve zdroji energie 308 je zabudován kondenzátor 309 pro zálohování paměti, který brání ztrátě dat při výměně baterií.

Pro ilustraci jsou dále uvedeny příklady vynálezu. Tyto příklady se týkají monitorování ovulačního cyklu u žen.

V příkladu jsou předvedeny profily E3G u dvou žen. První žena má hladiny E3G v moči relativně nízké, druhá žena má hladiny E3G v moči relativně vysoké. V každé tabulce označuje první sloupec den cyklu a druhý sloupec stav plodnosti. První fáze cykluje fáze neplodná a je to ta část folikulámí fáze, kdy nechráněný pohlavní styk nevede k otěhotnění. Po ní následuje fáze přechodná, ve které se objevují změny, vedoucí k nástupu plodné fáze. V této přechodné fázi by měla žena být pomocí signálu upozorněna, že nadchází plodná fáze. Plodná fáze je období před a po ovulaci, ve kterém nechráněný pohlavní styk vede ve většině případů k otěhotnění. Trvání plodné fáze před ovulací je dáno dobou přežití spermií, která závisí zvláště na stavu hlenu, jež je řízen ženskými pohlavními hormony. Období po skončení plodné fáze je opět fáze neplodná, fáze luteální, ve které vejce opustilo dělohu a početí již není ve stávajícím cyklu možné.

Ve třetím sloupci každé z tabulek jsou zaznamenány hodnoty E3G v prvních 20 dnech cyklu. Tyto hodnoty jsou výsledky každodenního testování prvních ranních vzorků moči imunologickou zkouškou. Imunologická zkouška je běžně užívaná zkouška typu ELIS A. Hodnoty E3G jsou měřeny v ng/ml.

Ovulace nastává 24 hodin poté, co jsou naměřeny nejvyšší hodnoty LH. Hodnoty LH jsou stanovovány ze stejných vzorků moči běžně užívanou imunologickou zkouškou, ale v tabulkách zaneseny nejsou, neboť nejdůležitější hodnotou je termín ovulace.

Pro určování prahové hodnoty E3G pro následující cyklus jsou stanovena následující „pravidla“:

1. Práh E3G může mít hodnotu 5, 10, 15, 20, 25 a 30 ng/ml, ale ne vyšší.

2. Signál „plodná“ má uživatelka v ideálním případě dostat 6 dnů před ovulací.

3. Překročení prahové hodnoty 4. nebo 5. den přechodné fáze je významnější než její překročení v časnějších dnech přechodné fáze.

4. První hodnota koncentrace E3G, zvolená jako prahová, musí být ta hodnota koncentrace E3G, která je v „zahajujícím cyklu“ během přechodné fáze překračována nejčastěji a během neplodné fáze nejméně často. Je výhodné, pokud tato hodnota není v neplodné fázi překročena vůbec.

5. V prvním cyklu musí být testování prováděno každý den, dokud není rozpoznán ráz LH a není tak určena hlavní „zahajující“ fáze.

6. V následujícím cyklu může být prahová hodnota upravena v případě, že

a) stanovená prahová hodnota není překročena 4. a nebo 5. den přechodné fáze;

b) stanovená prahová hodnota je zbytečně nižší než hodnota, která je nutná pro signál, přicházející 4. a nebo 5. den přechodné fáze.

7. Prvních 5 dnů cyklu nejsou hladiny E3G vzaty v úvahy s tím předpokladem, že v domácím prostředí se nebude testování provádět ihned v průběhu menstruace.

-13CZ 286000 B6

Po skončení prvního měřeného ovulačního cyklu se u jednotlivých subjektů určuje v domácích podmínkách začátek testování (v tabulce je označen „***“) v dalším cyklu podle vzorce, popsaného výše. Takže například v cyklu Al nastala ovulace 18. den, v cyklu A2 začne tedy testování 12. den (18-6).

Z výsledků měření v cyklu A2 vyplývá, že začátek testování, t.j. 12. den cyklu, koinciduje se zvyšováním hladiny E3G, což je známkou blížící se ovulace. Ovulace v cyklu A2 nastává 17. den. Podle vzorce začne testování v dalším cyklu A3 11. den.

Ovulace v cyklu A3 nastává 4 dny po začátku testování - 11. den. Začátek testování v dalším cyklu A4 je stanoven na 9. den.

V cyklu A4 nastává ovulace 14. den, což je 5 dní po začátku testování (9. den). V dalším cyklu A5 začne testování opět 9. den.

V cyklu A5 nastává ovulace až 17. den. Tím u této ženy končí posun ovulace do časnější fáze cyklu a ovulace se nyní vrací k původnímu „normálnímu“ načasování. Začátek testování by měl být zůstat na 9. dnu, alespoň po dobu překlenutí dalšího posunu ovulace do časné fáze cyklu.

Na této sérii ovulačních cyklů je ukázáno, jak je výhodné, je-li optimální den pro začátek testování stanovován pomocí několika za sebou následujících cyklů.

U druhé ženy (B) je podle cyklu Bl stanoven začátek testování na 13. den, podle cyklu B2 na 11. den a nakonec po skončení cyklu B4 na 10. Den.

Při určování prahové hodnoty E3G je u ženy B v cyklu 1 hodnota 25 překročena 8. a 11. den (neplodné fáze), tudíž prahová hodnota musí být vyšší než tato hodnota. Hodnota 30 je překročena 4. a 5. den přechodné fáze (15. a 16. den cyklu), takže tato hodnota 30 je vybrána jako nejvyšší volba prahové hodnoty, která zároveň vyhovuje pravidlu 2, 3 a 4.

Prahová hodnota 30 vyhovuje, ale v cyklu 3 je 13. den (5. den přechodné fáze) hodnota E3G 23,9 a tak je podle pravidla 6a třeba snížit prahovou hodnotu na 20, což je nejvyšší volba prahové hodnoty, která je tak den překročena.

V cyklu 4 je podle pravidla 6b prahová hodnota upravena na 25, protože z hodnot, dosažených ve dvou vybraných vhodných dnech přechodná fáze, vyplývá, že hodnota 20 je příliš nízká a že hodnota 25 vyhovuje lépe.

V cyklu 5 je podle pravidel 2, 3 a 6b prahová hodnota pro další cyklus upravena na hodnotu 30.

První den, ve kterém je zvolená prahová hodnota E3G překročena, je v tabulce označena (****).

- 14CZ 286000 B6

Žena A

Cyklus A 1: Zahajující cyklus

Den	Fáze	Hodnota E3G	Ovulace
1	neplodná	2,7
2	95	3,3
3	99	2,4
4	55	1,8
5	55	3,6
6	55	2,5
7	55	1,7
8	55	1,9
9	59	3,1
10	přechodná	5,4
11	59	2,1
12	99	5,3
13	99	10,5
14	99	7,7
15	plodná	5,2
16	99	8,3
17	99	6,8
18	99	4,3	LHM+ 1
19	99	4,9
20	59	5,3
21	neplodná
22	95
23	95
24	55
25	99
26	99
27	99
28	59
29	55
30	95

Ovulace avizována: 0 dnů předem (zahajující cyklus).

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 5 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 12. den.

- 15CZ 286000 B6

Cyklus A2

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace

12*** neplodná přechodná plodná neplodná

2,0

1.5

1,1

4,1

4,0

3.5

2,3

1.9

3.6

3.7

3,0 p 2****

8^9

14.6

12.6

8.8

15,8

6.9

6,5

LHM+ 1

Ovulace avizována: 6 dní předem.

Prahová hodnota E3G pro příští cyklus: 5 ng/ml.

Začátek testování v dalším cyklu: 11. den.

-16CZ 286000 B6

Cyklus A3

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace j 1 *** neplodná přechodná plodná neplodná

2,0

2,7

2,9

2,7

1,6

2.5

5.4

4,0

5.6

3.7

6,2****

23,6

21,3

8.3

4.5

3.7

3.4

2.8

3,1

LHM+ 1

Ovulace avizována: 3 dny předem. Prahová hodnota E3G v dalším cyklu: 5 ng/ml. Začátek testování v příštím cyklu: 9. den.

-17CZ 286000 B6

Cyklus A 4

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace q*** neplodná

5, přechodná plodná neplodná

2.4

2,8

5.2

3,6

2.5

3.1

3,9

4.6 ]****

6.1

16.7

10.8

22,8

21,3

9.4

12.2

5,7

5,2

7.5

9,0

LHM+ 1

Ovulace avizována: 6 dní předem.

Prahová hodnota E3G pro příští cyklus: 5 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 9. den.

-18CZ 286000 B6

Cyklus A 5

Ovulace

Den	Fáze	Hodnota E3G
1	neplodná	2,3
2	59	2,8
3	9?	2,7
4	99	2,3
5	99	2,8
6	99	4,8
7	99	5,6
8	99	4,5
q***	přechodná	3,2
10	99	g 5****
11	99	7,3
12	99	6,3
13	99	7,0
14	plodná	11,8
15	99	19,3
16	99	18,5
17	99	9,2
18	99	5,3
19	99	4,8
20	neplodná	6,1
21	99
22	99
23	99
24	99
25	99
26	99
27	99
28	99
29	99
30	99

LHM+ 1

Ovulace avizována: 7 dní předem.

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 5 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 9. den.

-19CZ 286000 B6

Žena B

Cyklus B 1: Zahajující cyklus

Den	Fáze	Hodnota E3G	Ovulace
1	neplodná	10,9
2	55	15,2
3	55	21,2
4	55	12,7
5	55	11,8
6	55	16,5
7	55	15,6
8	55	25,1
9	55	10,1
10	55	16,8
11	55	28,2
12	přechodná	24,6
13	55	28,7
14	55	27,7
15	55	62,6
16	55	68,5
17	plodná	61,9
18	55	103,4
19	55	85,4
20	55	45,4	LHM+ 1
21	55
22	55
23	neplodná
24	55
25	55
26	55
27	55
28	55
29	55
30	55

Ovulace avizována: 0 dní předem (ustavující parametiy).

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 30 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 13. den.

-20CZ 286000 B6

Cyklus B 2

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace

Ί

13*** neplodná přechodná plodná neplodná

27.5

28,8

24,7

22.6

24.9

28.9

14.6

8,4

24.7

33.6

39.3

25.6

2****

67,1

62,0

94.6

58.4

42.4

60.4

56,0

LHM+ 1

Ovulace avizována: 4 dny předem.

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 30 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 11. den.

-21 CZ 286000 B6

Cyklus B 3

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace

I ] *** neplodná

9?

přechodná plodná neplodná

46.4

30,0

12.4

6.5

8,7

17,2

14.9

11,8

11,0

13.1

25.6

5****

23.9

63.8

22.1

65.9

41.2

7.6

35.3

33.7

LHM+ 1

Ovulace avizována: 6 dní předem.

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 20 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 11. den (beze změny).

-22CZ 286000 B6

Cyklus B 4

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace j 1 *** neplodná ,9 přechodná plodná neplodná

17.7

12,2

7.2

6.2

13.9

12.9

12.7

9,3

16.5

17.7

26,0****

38.3

70.6

74.6

70.6

49.7

23,5

29.8

44.4

32,7

LHM+ 1

Ovulace avizována: 6 dni předem.

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 25 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 10. den.

-23CZ 286000 B6

Cyklus B 5

Den

Fáze Hodnota E3G

Ovulace

JQ*** neplodná přechodná plodná neplodná

33,9

27.3

20,2

7,0

12.7

7,2

14,5

14.8

10.8

8,7

14.1

17.4

3****

57’5

42,0

55.4

60.1

39.4

24,7

10.5

LHM+ 1

Ovulace avizována: 6 dní předem.

Prahová hodnota E3G pro další cyklus: 30 ng/ml.

Začátek testování v příštím cyklu: 10. den (beze změny).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu u samic savců, zejména člověka, spočívající v opakovaném testování koncentrace alespoň jedné látky v tělní tekutině, která má významný vztah ke stadiu ovulačního cyklu přinejmenším v preovulační fázi, vyznačující se tím, že

a) testování koncentrace uvedené látky se zahájí v průběžném ovulačním cyklu v časovém rozmezí alespoň 2 dny po začátku menstruace až 2 dny přede dnem, v němž nastala ovulace u téhož subjektu v jednom nebo více předcházejících cyklech nejdříve,

b) ze získaných výsledků se identifikuje změna koncentrace analyzované látky, indikující blížící se ovulaci, srovnáním s referenční hodnotou této látky, získanou sledováním odpovídající koncentrace této látky v průběhu alespoň jednoho předchozího cyklu u téhož subjektu.
2. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle nároku 1, vyznačující se tím, že testování se zahájí alespoň 3 dny před dnem, ve kterém nastala u téhož subjektu ovulace v jednom nebo více předcházejících cyklech nejdříve.
3. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle nároku 1, vyznačující se tím, že se testování zahájí alespoň 4 dny před dnem, ve kterém nastala ovulace v jednom nebo více předcházejících cyklech u téhož subjektu nejdříve.
4. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků laž3, vyznačující se tím, že testování se zahájí alespoň 5 dní po začátku menstruace.
5. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle nároku 1, vyznačující se tím, že testování se zahájí den před dnem, ve kterém nastala ovulace v jednom nebo více předcházejících cyklech u téhož subjektu nejdříve, přičemž tento začátek testování se vypočte podle vztahu, ve kterém 8 až 10, 11 až 14, 15 až 18, 19 až 23, 24 až 28 a 29+, přičemž hodnoty 8 až 29+ udávají den, ve kterém nastala ovulace v předchozích cyklech nejdříve a odpovídají -4, -5, -6, -7, -8, resp. -9, přičemž hodnoty -4 až -9 udávají začátek testování ve dnech průběžného cyklu.
6. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, vyznačující se tím, že tělní tekutinou je moč.
7. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že analyzovanou látkou je estradiol nebo jeho metabolit, například estron-3-glukuronid, E3G.
8. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků laž7, vyznačující se t í m , že se testuje 2 nebo více látek kporovnání dat, například ke stanovení poměru koncentrací dvou analyzovaných látek, testovaných samostatně.
9. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků laž8, vyznačující se tím, že nejčasnější termín aktuální ovulace se odvodí zdát, shromážděných alespoň v posledních 3 po sobě následujících cyklech.

-25CZ 286000 B6
10. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 9, vyznačující se tím, že nejčasnější termín aktuální ovulace se odvodí z dat, nasbíraných alespoň v 5 posledních po sobě následujících cyklech.
11. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že nejčasnější termín aktuální ovulace se odvodí z dat, získaných alespoň v těsně předcházejícím cyklu.
12. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle nároku 11, vyznačující se tím, že nejčasnější termín ovulace se odvodí z dat referenční báze, která se skládá z neměnného počtu po sobě následujících cyklů, bezprostředně předcházejících cyklu současnému.
13. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle nároku 12, vyznačující se tím, že referenční báze se skládá ze 4 až 10 bezprostředně předcházejících cyklů.
14. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle nároku 12, vyznačující se tím, že referenční báze se skládá z 5 až 6 bezprostředně předcházejících cyklů.
15. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 14, vyznačující se tím, že den aktuální ovulace je dán nálezem vrcholu koncentrace luteinizačního hormonu LH v moči.
16. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 14, vyznačující se tím, že ovulace je určena podle nálezu rázu LH v moči.
17. Způsob monitorování stadia ovulačního cyklu podle kteréhokoli z nároků 1 až 16, vyznačující se tím, že změna koncentrace analyzované látky se vztahem ke stadiu ovulačního cykluje definována vzhledem k prahové koncentraci analyzované látky, která je pro individuální subjekt odvozena z měření koncentrace analyzované látky v tělní tekutině během preovulační fáze alespoň jednoho předcházejícího cyklu.
18. Způsob podle nároku 1, vy z n a č uj í c í se t í m , že zvýšená koncentrace E3G v moči je definována vzhledem k prahové koncentraci, která je pro individuální subjekt stanovena podle měření koncentrace E3G v moči v preovulační fázi alespoň jednoho předcházejícího cyklu.
19. Způsob podle nároku 18, vyznačující se tím, že prahová koncentrace E3G v moči, odvozená pro současný cyklus, je ta koncentrace E3G, která je v předchozím ovulačním cyklu během celkového počtu dní přechodné fáze překročena častěji než během stejného počtu dní fáze neplodné, těsně předcházející přechodné fázi.
20. Způsob podle nároku 19, vyznačující se tím, že prahová koncentrace E3G v moči je ta koncentrace E3G, která není překročena ve více než 30 % dnů neplodné fáze, aleje překročena alespoň v 60 % dnů přechodné fáze.
21. Způsob podle nároku 20, vyznačující se tím, že prahová koncentrace je ta koncentrace E3G, která není překročena ve více než 20 % dnů neplodné fáze, ale je překročena alespoň v 80 % dnů přechodné fáze.
22. Způsob podle kteréhokoli z nároků 1 až 21, vyznačující se tím, že referenční hodnota koncentrace E3G je odvozena z dat, získaných pomocí referenční báze, která se skládá z neměnného počtu po sobě následujících cyklů, těsně předcházejících cyklu současnému.

-26CZ 286000 B6
23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že se referenční báze skládá ze 4 až 10 těsně předcházejících cyklů.
24. Způsob podle nároku 23, vyznačující se tím, že se referenční báze skládá z 5 5 nebo 6 těsně předcházejících cyklů.
25. Způsob podle nároku 19, vyznačující se tím, že konec plodného období je určen podle měření koncentrace LH a nebo P3G v moči.

2 výkresy