CZ363198A3

CZ363198A3 - Inhibitory produkce s-CD23 a sekrece TNF

Info

Publication number: CZ363198A3
Application number: CZ983631A
Authority: CZ
Inventors: Stuart Bailey; Derek Richard Buckle; Andrew Faller; David Glynn Smith
Original assignee: Smithkline Beecham P. L. C.
Priority date: 1996-05-10
Filing date: 1997-05-06
Publication date: 1999-06-16
Also published as: EP0918747A1; PL329855A1; JP2000510473A; NO985214D0; WO1997043249A1; NO985214L; CO4990945A1; BR9709450A; US6235753B1; TR199802271T2; KR20000010892A; AR007060A1; AU2897397A; ES2205218T3; ZA973964B; DE69723984D1; IL126860A0; CA2253590A1; DE69723984T2; GB9609794D0

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká inhibitorů tvorby rozpustných lidských CD23 a jejich použití při léčbě stavů spojených s přebytečnou tvorbou rozpustných CD23 (s-CD23), jako je autoimunitní choroba a alergie. Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou též inhibitory uvolňování faktoru nekrózy tumoru (TNF).

Dosavadní stav techniky

CD23 (nízkoafinitní receptor IgE FceRII, Blast 2) je integrálním proteinem typu II 45 kDa,exprimováným na povrchu různých zralých buněk včetně B a T lymfocytů, makrofágů, buněk přirozených zabíječů, Langerhansových buněk, monocytů a destiček [(Delespesse a kol., Adv. Immunol. 49, 149-191 (1991)]. Existuje též molekula podobná CD23 na eosinofilech [(Grangette a kol., J. Immunol. 143, 3580-3588 (1989)].

CD23 se účastní regulace imunitní odpovědi (Delespesse a kol., Immunol. Rev. 125, 77-97 (1992)]. Lidský CD23 existuje ve formě dvou diferenciálně regulovaných izoforem a a b, které se liší pouze v aminokyselinách na intracelulárním konci N [Yokota a kol., Cell 55, 611-618 (1988)].

U člověka je konstitutivní izoforma a je přítomna pouze v B-lymfocytech, zatímco typ b indukovaný interleukinem IL4 je na všech buňkách^schopných exprese CD23.

Je známo, že se intaktní CD23,vázaný na buňky (i-CD23)_; podrobuje odštěpení od buněčného povrchu s vytvořením řady dobře definovaných rozpustných fragmentů (s-CD23), *· · • 4 ·· ··· · «» * · · « · · ···♦ • · · 9 9 9 · · · · • «···«· · · » · · · · · · • 9 9 9 9 9 9 9 ···· 9 99 ·9 99 ·* které se vytvářejí jako výsledek komplexní sekvence proteolytických dějů, jejichž mechanismus dosud není příliš znám (Bourget a kol., J. Biol. Chem. 269, 6927-6930 (1994)].

I když to nebylo dosud prokázáno, předpokládá se, že hlavní rozpustné fragmenty (Mr 37, 33, 29 a 25 kDa) těchto proteolytických dějů, které všechny zachovávají doménu

C-terminálního lektinu společnou všem Í-CD23, se postupně objevují díky počáteční tvorbě fragmentu 37 kDa [Letellier a kol., J. Exp. Med. 172, 693-700 (1990)]. Mechanismus alternativního intracelulárního štěpení vede ke stabilnímu fragmentu 16 kDa, který se liší od Í-CD23 v C-terminální doméně [Grenier-Brosette a kol., Eur. J. Immunol. 22,

1573-1577 (1992)].

Í-CD23 vázanému na membránu u lidí se připisuje několik účinků, a ukázalo se, že všechny hrají svou úlohu při regulaci IgE. Konkrétní cytotoxicita, c) usazení buněk b v germinálních centrech lymfatických uzlin a sleziny d) regulace syntézy IgE ve smyslu jejího snížení [Delespesse a kol., Adv. Immunol. 49, 149-191 (1991)]. Tři fragmenty rozpustného CD23 s vyšší molekulovou hmotností (Mr 37, 33 a 29 kDa) vykazují multifunkční cytokinové vlastnosti, které hrají důležitou úlohu ve tvorbě IgE. Proto se nadměrné vytváření S-CD23 implikuje při nadprodukci IgE, indikátoru alergických onemocnění, jako je astma vnějšího původu, rhinitida, alergické konjuktivitidy, ekzém, atopická dermatitida a anafylaxe [Sutton a Gould, Nátuře 366, 421-428 (1993)]. Ostatní biologické aktivity,přisuzované s-CD23_zzahrnuj i stimulaci růstu B-buněk a indukci uvolňování mediátorů z monocytů. Proto byly pozorovány zvýšené hladiny S-CD23 v krevním séru nemocných s B-chronickou lymfocytární leukémií [Sarfati a kol., Blood 71, 94-98 (1988)] a v synoviální tekutině nemocných s revmatickou artritidou [Chomarat

4 4 ♦«···· 44 · 4

4 4 44 4 4444

444 44 4 4444

4444 (» 4 4 44 444 444

4 4444 4 4

4444 « 4« 44 44 44 a kol., Arthritis and Rheumatism 36, 234-242 (1993)]. Skutečnost, že existuje úloha, kterou hraje CD23 při zánětu, se uvádí z řady zdrojů. Především se zjistilo, že S-CD23 se váže na extracelulární receptory, které se při aktivaci účastní dějů zprostředkovaných buňkami při zánětu. Proto se uvádí, že S-CD23 přímo aktivuje uvolňování faktoru nekrózy tumoru a interleukinů IL-1 a IL-6 [Armant a kol.,J.Exp. Med. 180, 1005-1011 (1994)]. Uvádí se, že CD23 interaguje s B2-integrin-adhesivními molekulami, CDllb a CDllc na monocytu/makrofágu [S. Lecoanet-Henchoz a kol., Immunity 3., 119-125 (1995)], které spouštějí uvolňování dusitanových iontů, peroxidu vodíku a cytokinu (IL-1, IL-6 a TNF). Konečně interleukin IL-4 nebo IFN indukuje expresi CD23 a jeho uvolňování jako S-CD23 (rozpustný CD23) lidskými monocyty. Navázání receptoru CD23 _fvázaného na membránu na imunokomplexy IgE/anti-IgE nebo anti CD23 mAb_zaktivuje tvorbu cyklického adenosinmonofosfátu a interleukinu IL-6 a vytváření tromboxanu B2, což ukazuje na úlohu CD23 při zánětu zprostředkovanou receptory.

Vzhledem k různým vlastnostem CD23 by sloučeniny, které inhibují vytváření S-CD23, měly mít dva účinky: (a) zvyšování inhibice negativní zpětné vazby syntézy IgE udržováním hladin Í-CD23 na povrchu B-buněk a b) inhibici imunostimulačních cytokinových aktivit rozpustných fragmentů S-CD23 o vyšší molekulové hmotnosti (Mr 37, 33 a 29 kDa). Navíc by měla inhibice štěpení CD23 zmírňovat aktivitu monocytů a vytváření mediátorů indukovanou S-CD23 a tím snižovat zánětlivou odpověď.

Faktor nekrózy tumoru TNFa je prozánětlivý cytokin, který se uvolňuje ze stimulovaných buněk specifickým štěpením signální sekvencí 76 aminokyseliny v neaktivním prekur9 9 9

9 9 9 9 · · · 9 9

9 9 9 9 · 9 9 9 9

9999 999 · 9 999 999 · 9 · 9 · · · • 9 · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 zořu pro vytvoření zralé formy. TNFa se štěpí metaloproteázou [Gearing, A. J. H. a kol., Nátuře 370, 555-557 (1994), McGeehan G. M. a kol., Nátuře 370. 558-561 (1994), Mohler K. M. a kol., Nátuře 370, 218-220 (1994)]. Sloučeniny, o kterých se uvádí, že inhibuj i štěpení TNFa enzymem_/ zpracovávajícím faktor nekrózy tumoru, mohou být široce popsány jako inhibitory metaloproteázové matrice, zejména třídy hydroxamových kyselin.

Faktor nekrózy tumoru TNFa se indukuje v různých buněčných typech jako jako odpověď na bakterie, endotoxin, různé viry a parazity, takže jednou z fyziologických funkcí připisovaných TNFa je příspěvek k zánětlivé odpovědi na infekci bakteriemi, parazity atd. [Dinarello C. A., Immunol. 4, 133-145 (1992)]. Nadměrná tvorba faktoru nekrózy tumoru TNFa se zúčastňuje chorobných stavů, jako je revmatická artritida, septický šok, Crohnova choroba a kachexie (Dinarello, 1992). Inhibice zpracování TNFa na zralou aktivní formu by proto byla příznivá při léčbě těchto zánětlivých poruch příznivá. TNFa může též přispívat k destrukci tkáně při autoimunní chorobě, i když není spouštěcím faktorem těchto chorob. Při ověřování důležitosti TNFa při revmatické artritidě se ukázalo, že protilátky TNFa snižují závažnost onemocnění při krátkodobých studiích na modelech revmatické artritidy [Elliott M. J. a kol., Arthrit. Rheum. 12, 1681-1690 (1993), Elliott a kol., Lancet 344, 1125-1127 (1994) ] .

Mezinárodní patentová přihláška č. WO 96/02240 (Smithkline Beecham plc) uvádí, že sloučeniny inhibující působení matricových metaloproteáz (například kolagenázy, stromelysinu a gelatinázy) jsou účinnými inhibitory uvolňování lidského rozpustného CD23 přeneseného do savčích systé·· · mů buněčných kultur.

Patentová přihláška UK č. 9601041.8 (Smithkline Beecham plc) uvádí, že některé sloučeniny obecného vzorce I jsou účinnými inhibitory uvolňování lidského rozpustného CD23 přeneseného do systémů savčích tkáňových kultur:

Podstata vynálezu

Tento vynález poskytuje sloučeninu obecného vzorce I ve které

R je hydroxylová skupina, atom vodíku, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina nebo arylová skupina,

R¹ je arylmethylová skupina nebo heterocyklylmethylová skupina,

R je alkylová skupina, alkenylova skupina, arylova skupina, cykloalkylová skupina nebo cykloalkenylová skupina a • · · * • · · · • · · · · · · • · • · ··

R³ je atom vodíku, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina nebo arylová skupina s podmínkou že, je-li R⁴ fenylmethylová skupina nebo naftylmethylová skupina, kde fenylová či naftylová skupina je nesubstituovaná nebo substituovaná až pěti substituenty zvolenými ze seznamu atom halogenu, (0_1-6) alkylová skupina, aryl-[(C₁_₆) alkylová] skupina, (Ci-g) alkoxyskupina, C(C₁__e) alkoxy]-[ (C_1-6) alkylová] skupina, halogen-[ (C-j__₆) alkylová] skupina, hydroxylová skupina, nitroskupina, aminoskupina, monoa di-N-ÍC-L-g) alkylaminoskupina, acylaminoskupina, acyloxyskupina, karboxylová skupina, karboxylové soli, karboxylové estery, karbamoylová skupina, mono- a di-N-CC^g) alkylkarbamoylová skupina, (C-^g) alkoxykarbonylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, ureidoskupina, guanidinoskupina, sulfonylaminoskupina, aminosulfonylová skupina, (Cg_g) alkylthioskupina, (0_1-6) alkylsulfinylová skupina, (C_1-6) alkylsulfonylová skupina, heterocyklylová skupina, heterocyklyl-[(0_1-6) alkylová] skupina a (C₃_₅)alkylenový řetězec spojující dva přilehlé atomy uhlíku s vytvořením karbocyklického kruhu, potom R je hydroxylová skupina.

Alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny, které se zde citují, zahrnují přímé nebo rozvětvené skupiny obsahující až šest atomů uhlíku a mohou být případně substituované jednou či více skupinami zvolenými ze seznamu arylová skupina, heterocyklylová skupina, (C-j__g) alkylthioskupina, (C-j__g) alkoxyskupina, aryl- [ (C-j__g) alkoxyskupina ], aryl-[ (C-j__g) alkylthioskupina], aminoskupina, mono- nebo di-[(C2_g) alkylaminoskupina], cykloalkylová skupina, cyklo• · · φ * · · · * · • · « · · · · · · · φ ···· · · · * · ·♦· ··· • · ···· · · _ 7 — ···· · ·· ·· ·« ·· alkenylová skupina, karboxylová skupina a příslušné estery, hydroxylová skupina a atom halogenu.

Cykloalkylové a cykloalkenylové skupiny, které se zde citují, zahrnují skupiny mající tři až osm atomů uhlíku v kruhu a mohou být případně substituované, jak se popisuje výše pro alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny.

Termín arylová skupina” tak, jak se zde užívá, znamená jednoduché a kondenzované kruhy, které ve vhodných případech obsahují 4 až 7 atomů, přednostně 5 či 6 atomů v každém kruhu a každý kruh může být nesubstituovaný nebo substituovaný například až třemi substituenty. Kondenzovaný kruhový systém může zahrnovat alifatické kruhy a musí zahrnovat pouze jeden aromatický kruh.

Vhodné arylové skupiny zahrnují fenylovou a naftylovou skupinu, jako je 1-naftylová nebo 2-naftylová skupina.

Je vhodné, jestliže kterákoliv arylová skupina včetně fenylové skupiny a naftylové skupiny je případně substituovaná až pěti, nejlépe až třemi substituenty. Vhodné substituenty zahrnují atom halogenu, (C^-g) alkylovou skupinu, arylovou skupinu, aryl-[(C₁_₆) alkylovou] skupinu, (C-|__q) alkoxyskupinu, [ (C-j__₆) alkoxy]-[ (C-j__₆) alkylovou] skupinu, halogen-[) alkylovou] skupinu, aryl-[(C_1-6) alkoxyskupinu], hydroxylovou skupinu, nitroskupinu, kyanoskupinu, azidoskupinu, aminoskupinu, mono- a di-N-[(C₁_₆) alkylaminoskupinu], acylaminoskupinu, arylkarbonylaminoskupinu, acyloxyskupinu, karboxylovou skupinu, karboxylové soli, karboxylové estery, karbamoylovou skupinu, mono- a di-N-CCC^.g) alkylkarbamoylovou] skupinu, alkoxykarbonylovou skupinu, aryloxykarbonylovou skupinu, ureidoskupinu, guanidi44 « ····

4« 44

4 4 4 noskupinu, sulfonylaminoskupinu, aminosulfonylovou skupinu, (C-|__6) alkylthioskupinu, (C_1—g) alkylsulfinylovou skupinu, (C-L-g) alkylsulf onylovou skupinu, heterocyklylovou skupinu a heterocyklyl-[(0_1-6) alkylovou] skupinu. Navíc mohou být dva přilehlé atomy uhlíkového kruhu spojeny (C₃_₅) alkylenovým řetězcem s vytvořením karbocyklického kruhu.

Termíny heterocyklylový nebo heterocyklický tak, jak se zde používají, zahrnují ve vhodných případech, pokud se nedefinují jinak, aromatické a nearomatické, jednoduché a kondenzované kruhy, které ve vhodných případech obsahují až čtyři heteroatomy v každém kruhu z nichž každý je vybrán z atomů kyslíku, dusíku a síry a tyto kruhy mohou být nesubstituované či substituované, například až třemi substituenty. Každý heterocyklický kruh má ve vhodných případech 4 až 7, přednostně 5 nebo 6 atomů kruhu. Kondenzovaný heterocyklic ký kruhový systém může zahrnovat karbocyklické kruhy a musí zahrnovat pouze jeden heterocyklický kruh.

Přednostně se substituent pro heterocyklylovou skupinu volí ze seznamu atom halogenu, (0_1-6) alkylová skupina, aryl-CÍC^-g) alkylová] skupina,, (C-|__g) alkoxyskupina, [(C-^_g) alkoxy]-[ (0_1-6 ) alkylová] skupina, halogen-[ (C-j__₆ ) alkylová] skupina, hydroxylová skupina, aminoskupina, monoa di-N—(C^-g) alkyl-aminoskupina, acylaminoskupina, karboxylové soli, karboxyestery, karbamoylová skupina, monoa di-N-[ (C-|__g) alkylkarbonylová] skupina, aryloxykarbonylová skupina, [(C₁_₆) alkoxykarbonyl]-[(0_1-6) alkylová] skupina, arylová skupina, oxyskupina, ureidoskupina, guanidinoskupina, sulfonylaminoskupina, aminosulfonylová skupina, (C^-g) alkylthioskupina, (C-j__g) alkylsulfinylová skupina, (C-j__g) alkylsulfonylová skupina, heterocyklylová skupina a heterocyklyl-[ (C-]__g) alkylová] skupina.

·· ··· ·

V jednom konkrétním aspektu tohoto vynálezu je R hydroxylová skupina, R¹ je 1- nebo 2- naftylmethylová skupina, a/nebo R² je benzylová skupina nebo terč.butylová skupina, a/nebo R³ je atom vodíku nebo methylová skupina.

V dalším aspektu tohoto vynálezu je R hydroxylová skupina,

R¹ je případně substituovaná, například para-substituovaná benzylová skupina, R² je terč.butylová skupina a R³ je atom vodíku nebo methylová skupina. V dalším aspektu tohoto vynálezu je každý substituent R až R³ zvolen ze skupiny obsahující položky, které jsou mu připsány v případech udaných níže. Přednostně se sloučenina obecného vzorce 1 podle tohoto vynálezu volí ze skupiny obsahující sloučeniny popsané v případech uvedených zde níže.

Podle svého dalšího aspektu poskytuje tento vynález použití sloučeniny obecného vzorce 1 pro přípravu léku pro léčbu či profylaxi poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunní onemocnění, při kterých dochází k nadměrné tvorbě S-CD23.

Ve svém dalším aspektu tento vynález poskytuje způsob léčby či profylaxe onemocnění, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunní onemocnění, při kterých dochází k nadměrné tvorbě S-CD23 a tento způsob zahrnuje podávání sloučeniny obecného vzorce I člověku či jinému savci, který tuto léčbu potřebuje.

Tento vynález též poskytuje farmaceutický prostředek pro léčbu či profylaxi poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunní onemocnění, při kterých dochází k nadměrné produkci S-CD23, který obsahuje sloučeninu obecného vzorce I a případně její farmaceuticky přijatelný nosič.

• I 4 44 4 ··· · · · 4 4··

444 44 4 4444

4444 444 44 444 444

4 4444 4 4 _ 10 -.............

Podle svého dalšího aspektu poskytuje tento vynález použití sloučeniny obecného vzorce I pro přípravu léku pro léčbu či profylaxi stavů zprostředkovaných faktorem nekrózy tumoru včetně, avšak nikoliv s omezením na tyto stavy, zánětu, horečky, kardiovaskulárních projevů, krvácení, koagulace a odpovědi akutní fáze, kachexie a anorexie, akutních infekcí, šokových stavů, reakcí mezi štěpem a příjemcem a autoimunních onemocnění.

Ve svém dalším aspektu tento vynález poskytuje způsob léčby či profylaxe stavů zprostředkovaných faktorem nekrózy tumoru a tento způsob zahrnuje podávání sloučeniny obecného vzorce I člověku či jinému savci, který toto podávání potřebuj e.

Tento vynález též poskytuje farmaceutický prostředek pro léčbu či profylaxi stavů zprostředkovaných faktorem nekrózy tumoru obsahující sloučeninu obecného vzorce I a případně též farmaceuticky přijatelný nosič této sloučeniny.

Ve svém dalším aspektu tento vynález poskytuje způsob léčby či profylaxe poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunní onemocnění, při kterých dochází k nadměrné produkci S-CD23 a tento způsob zahrnuje podávání člověku či savci, který toto podávání potřebuje, sloučeniny, která je inhibitorem zpracování faktoru nekrózy tumoru s podmínkou, že tato sloučenina není inhibitorem matricové metaloproteázy.

Konkrétní zánětlivé poruchy zahrnují poruchy centrálního nervového systému, jako je Alzheimerova choroba, roz- 11 ·« ···· • · · • · · · · • · · · · · • ······ · • · · · · ·· · · · · · · · ·· ·· troušená skleróza a multiinfarktová demence, stejně tak jako následky mrtvice či traumatu hlavy zprostředkované zánětlivým procesem.

Je třeba chápat, že farmaceuticky přijatelné soli, solváty a jiné farmaceuticky přijatelné deriváty sloučeniny obecného vzorce I jsou rovněž předmětem tohoto vynálezu.

Soli sloučeniny obecného vzorce I zahrnují například adiční soli s kyselinou odvozené od anorganických či organických kyselin, jako jsou hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, p-toluensulfonaty, fosfáty, sulfáty, acetaty, trifluoracetaty, propionaty, citráty, maleaty, fumaraty, malonaty, sukcinaty, laktaty, oxalaty, tartaraty a benzoaty.

Mohou se též vytvářet soli se zásadami. Takové soli zahrnují soli odvozené od anorganických či organických baží, například soli alkalických kovů, jako jsou sodné či draselné soli a soli organických aminů, jako jsou soli morfolinu, piperidinu, dimethylaminu nebo diethylaminu.

Překvapivě bylo zjištěno, že sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou účinnými a selektivními inhibitory zpracování CD23 a uvolnění faktoru nekrózy tumoru, a přitom vykazují sníženou kolagenázovou inhibíční aktivitu ve srovnání s výše citovanými sloučeninami.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou připravit použitím jakékoliv vhodné konvenční metody, například na základě analogie s metodami uveřejněnými v publikovaném GB patentu č. 2 268 934.

V souladu s tím poskytuje další aspekt tohoto vynále- 12 »· · «· ···· ·· ♦· • · · · · · · · · • · · ·· · · · · · • ···· · · · · · ··· ··· » · · · · · · · »·· · ·· «· ·· ·· zu způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I, jak se definuje výše, který zahrnuje (a) odstranění chránících skupin sloučeniny obecného vzorce II:

XONH

R 0 R (II) ve kterém

R až R³ se definují zde výše a

X je chránící skupina jako je benzylová skupina nebo trimethylsilylová skupina nebo (b) reakci sloučeniny obecného vzorce III:

NHFb ve kterém

R až R³ se definují zde výše a kterákoliv hydroxylová « 9 * · * · ·· ·· • · · · · • · · · · • · ··· ··· • · · ·« ·· ·· skupina může být případně chráněna, s hydroxylaminem či jeho solí nebo (c) reakci sloučeniny obecného vzorce IV:

HONH

ve kterém

3

R až R jsou podle definice popsané výše, s thiolem s obdržením sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R je methylová skupina substituovaná alkylthioskupinou, arylthioskupinou, aralkylthioskupinou nebo heterocyklylthioskupinou nebo (d) převedení sloučeniny obecného vzorce I na jinou sloučeninu obecného vzorce I, jak se definuje výše.

Sloučeniny obecných vzorců II a III, ve kterých R je hydroxylová skupina nebo chráněná hydroxylová skupina η

a sloučenina obecného vzorce IV, ve ktere R je heterocyklylmethylová skupina, jsou nové sloučeniny a představují další aspekt tohoto vynálezu.

Sloučeninu obecného vzorce II lze připravit ze sloučeniny obecného vzorce III reakcí s chráněným hydroxylami- 14 • fc · • · · · · • · · · · • ·»·· fcfc · • · · · • fcfcfc · ·· ·« fcfcfcfc • fc fcfc • · · · · • fcfcfcfc • fc fcfcfc fcfcfc • · fcfc • fc fcfc fcfc nem. Sloučenina obecného vzorce III mající jednu nebo více chráněných hydroxylových skupin se může převést hydrolýzou na odpovídající nechráněnou sloučeninu obecného vzorce III.

Vhodné chránící skupiny pro kyselinu hydroxamovou jsou v oboru dobře známy a zahrnují benzylovou skupinu, trimethylsilylovou skupinu, terč.butylovou skupinu a terc.butyldimethylsilylovou skupinu.

Vhodné chránící skupiny pro karboxylovou skupinu jsou v oboru dobře známy a zahrnují terč.butylovou skupinu, benzylovou skupinu a methylovou skupinu.

Určité sloučeniny obecného vzorce III lze připravit redukcí sloučeniny obecného vzorce V:

ve kterém se

R¹ až R³ definují výše,

Y je chránící skupina, jako je terč.butylová skupina a

Z je taková skupina, že ZCH₂- je R.

Sloučenina obecného vzorce m se též může připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce VI:

ve kterém π

R, R a Y se definuji výše, se sloučeninou obecného vzorce VII:

NHR3 (VII) ve kterém

R a R se definuji výše, nebo s jejich aktivovaným derivátem.

Sloučeninu obecného vzorce III lze též připravit t> · · o · • · · · · · • ······ · • · · · · ···· · · · ·· • · · · • · · · · · • · • · · · reakcí sloučeniny obecného vzorce VIII:

Q R’

HO

O R^z

NHR' (VIII) ve kterém

R az R se definuji vyse, s thiolem s obdržením sloučeniny obecného vzorce III, ve kterém R je methylová skupina substituovaná alkylthioskupinou, aryíthioskupinou, aralkylthioskupinou nebo heterocyklylthioskupinou.

Sloučenina obecného vzorce VIII se může připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce IX:

OH (IX) • · 9 · • · · ·

9* · 9 9 ve kterém

R¹ a Y se definují výše, se sloučeninou obecného vzorce VII, jak se definuje výše, nebo s jejím aktivovaným derivátem s následnou hydrolýzou pro odstranění chránící skupiny Y.

Jeden specifický aspekt tohoto vynálezu poskytuje způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I, jak se definuje výše, při kterém R je hydroxylová skupina, který zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce X:

ve kterém π o

R až R jsou podle výše popsané definice a

R⁴ a R⁵ jsou stejné nebo rozdílné a každý z nich je atomem vodíku nebo hydroxylovou ochrannou skupinou nebo

R⁴ a R⁵ spolu vytvářejí divalentní hydroxylovou ochrannou skupinu s hydroxylaminem nebo jeho solí.

Sloučenina obecného vzorce X, ve kterém R⁴ a R⁵ jsou atomy vodíku, se může připravit odstraněním ochranné skupiny (například hydrolýzou a/nebo deetherifikací) odpovídající

Φ · φ • · · ·· φφφ · · • φ φ φ φ φ φ φ • · ·· tt · · » · • φ φ φ · φ φ Φ·· φφφ sloučeniny, ve které R⁴ a R⁵ nejsou atomy vodíku.

Sloučenina obecného vzorce X, ve atomem vodíku, se může připravit reakcí vzorce XI:

které R⁴ a R⁵ nejsou sloučeniny obecného

OH (XI) ve kterém

R¹, R⁴ a R⁵ jsou podle definice popsané výše, se sloučeninou obecného vzorce VII, jak se definuje výše.

Preferovanou sloučeninu obecného vzorce IX lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XII:

O

R

HO

OH

OH (xii) ve kterém je podle výše popsané definice, s dimethoxypropanem.

• ·

II lili • ·

- 19 Sloučeninu obecného vzorce XII lze připravit reakcí diesteru (jako je dimethylester nebo diethylester) kyseliny 2-hydroxyjantarové se sloučeninou obecného vzorce R-^X' za přítomnosti silné zásady, jako je lithná sůl diisopropylamidu, ve které X' je odstupující skupina, jako je atom bromu nebo atom jodu s následnou hydrolýzou výsledné sloučeniny pro odstranění esterových skupin.

Izomery sloučeniny podle tohoto vynálezu včetně stereoizomerů lze připravit jako směs izomerů nebo jako jednotlivé izomery. Jednotlivé izomery lze připravit jakýmkoliv vhodným způsobem, například lze jednotlivé stereoizomery připravit stereospecifickou chemickou syntézou počínaje chirálními substráty nebo separací směsí diastereoizomerů s použitím známých způsobů. V jednom preferovaném aspektu poskytuje tento vynález sloučeniny obecného vzorce IA:

(TA)

Dává se přednost izolaci sloučenin ve formě, která je v podstatě čistá.

Jak se zde popisuje, má inhibitor tvorby rozpustného ··♦· lidského CD23 užitečné léčivé vlastnosti. Přednostně se aktivní sloučenina podává ve farmaceuticky přijatelných prostředcích. Tyto prostředky se přednostně upravují pro perorální podávání. Avšak mohou být upraveny i pro jiné způsoby podávání, například ve formě spreje, aerosolu nebo pro jiné konvenční způsoby inhalace pro léčbu poruch dýchacích cest, nebo pro parenterální podávání nemocným, kteří trpí srdečním selháním. Další alternativní způsoby podávání zahrnují sublingvální nebo transdermální podávání.

Tyto prostředky mohou být ve formě tablet, tobolek, prášků, granulí, pastilek, čípků, rozpustných prášků nebo kapalných přípravků, jako jsou perorální či sterilní parenterální roztoky či suspenze.

Pro obdržení konzistentního podávání se dává přednost tomu, aby bylo složení podle tohoto vynálezu ve formě jednotkové dávky.

Formy prezentace jednotkové dávky pro perorální podávání mohou být tablety a tobolky a mohou obsahovat konvenční pomocné látky, jako jsou pojivá, například sirup, akáciová klovatina, želatina, sorbitol, tragakant nebo polyvinylpyrrolidon, plnidla, například laktózu, cukr, kukuřičný škrob, fosforečnan vápenatý, sorbitol či glycin, maziva pro přípravu tablet, například stearát hořečnatý, rozvolňovadla, například škrob, polyvinylpyrrolidon, glykolát škrobu sodného či mikrokrystalickou celulózu nebo farmaceuticky přijatelná smáčedla, jako je laurylsulfát sodný.

Pevné perorální prostředky lze připravit konvenčními způsoby míšení, plnění a tabletování. Lze použít opakované kroky míšení pro distribuci účinné složky v těchto prostřed• · • 444 • 4 • 4 4 4 · 4 4 4 4

4 4 · · 4 · · · ·

4444 · · · 44 444 444

4 4 4 4 · ·

4 44 44 44 44 cích s použitím velkého množství plnidel. Tyto způsoby jsou ovšem známy v oboru jako konvenční způsoby. Tablety se mohou potahovat podle způsobů dobře známých v běžné farmaceutické praxi, zejména s použitím enterického potahování.

Perorální kapalné prostředky mohou být například ve formě emulzí, sirupů či elixírů nebo mohou být prezentovány jako suchý přípravek pro zředění vodou či jiným vhodným vehikulem před použitím. Takové kapalné prostředky mohou obsahovat konvenční přísady jako suspenzační činidla, například sorbitol, sirup, methylcelulózu, želatinu, hydroxyethylcelulózu, karboxymethylcelulózu, gel stearatu hlinitého, hydrogenované jedlé oleje, emulgační činidla, například lecitin, monooleat sorbitanu nebo akáciovou klovatinu, nevodná vehikula (která mohou zahrnovat jedlé oleje) například mandlový olej, frakcionovaný kokosový olej, olejové estery, jako jsou estery glycerolu, propylenglýko1 nebo ethylalkohol, konzervační přísady, například methyl- nebo propyl(p-hydroxybenzoat) nebo kyselinu sorbovou a v případě požadavku konvenční složky pro ochucení či barvení.

Pro parenterální podávání se kapalné jednotkové dávkové formy připraví s použitím sloučeniny a sterilního vehikula a v závislosti na použité koncentraci se mohou buď suspendovat či rozpouštět ve vehikulu. Při přípravě roztoků lze sloučeninu rozpustit ve vodě pro injekce a sterilizovat pomocí filtru před plněním do vhodné lahvičky či ampule a uzavřením. S výhodou lze ve vehikulu rozpustit adjuvanty, jako jsou lokální anestetika, konzervační přísada a pufrační prostředky. Pro zvýšení stability lze přípravek po plnění do lahviček zmrazit a odstranit vodu ve vakuu. Parenterální suspenze se připraví v podstatě stejným způsobem s tím rozdílem, že se sloučenina suspenduje ve vehikulu místo rozpuš• · · · · · fcfc ·· • · · · · · · • · · fc · · · · · · • ······ fc ·· fcfcfc fcfcfc • · fc fcfcfc · · • fcfcfc fc fcfc fcfc fcfc ·· tění a sterilizaci nelze provést filtrací. Sloučenina se může sterilizovat expozicí ethylenoxidu před přípravou suspenze ve sterilním vehikulu. S výhodou se do směsi zahrnuje povrchově aktivní látka či smáóecí činidlo pro usnadnění jednotné distribuce sloučeniny.

Prostředky podle tohoto vynálezu mohou být též vhodným způsobem prezentovány pro podávání do dýchacího traktu jako látka pro šňupání nebo aerosol či roztok pro nebulizer či jako mikročásticový prášek pro insuflaci, samotné či v kombinaci, s inertním nosičem, jako je laktóza. V takovém případě je vhodné, aby částice účinné složky měly průměry menší než 50 μπι, přednostně menší než 10 μπι, například průměry v rozmezí 1 až 50 μπι, 1 až 10 mikrometrů nebo 1 až 5 μπι. Je-li to vhodné, může prostředek obsahovat malá množství antiastmatik a bronchodilatačních prostředků, například sympatomimetických aminů, jako je isoprenalin, isoetharin, salbutamol, fenylefrin a efedrin, xantinových derivátů, jako je theofylin a aminofylin a kortikosteroidů, jako je prednisolon a stimulátory nadledvinek, jako je adekokortikotropní hormon (ACTH).

Prostředky mohou obsahovat od 0,1 do 99 hmotnostních procent, přednostně od 10 do 60 hmotnostních procent účinné složky v závislosti na způsobu podávání. Preferované rozmezí pro podávání inhalací je 10 až 99 %, zejména 60 až 99 %, například 90, 95 nebo 99 %.

Mikročásticové práškové prostředky se mohou vhodným způsobem podávat ve formě aerosolu jako odměřované dávky nebo pomocí vhodného zařízení ovládaného dýcháním.

Vhodné aerosolové prostředky pro odměřovanou dávku • · · ·

9 9 9 » 9 9 9

999 « zahrnují konvenční hnací látky, pomocná rozpouštědla, jako je ethanol, povrchové aktivní látky, jako je oleylalkohol, maziva, jako je oleylalkohol, vysoušeči látky, jako je síran vápenatý a modifikátory hustoty, jako je chlorid sodný.

Vhodné roztoky pro nebulizátor jsou izotonické sterilizované roztoky, které mohou být případně pufrované, například při pH mezi 4 až 7, obsahující až 20 mg/ml sloučeniny, avšak obvykleji 0,1 až 10 mg/ml pro použití se standardním nebulizačním zařízením.

Účinné množství bude záviset na relativní účinnosti sloučeniny podle tohoto vynálezu, závažnosti léčené poruchy a hmotnosti pacienta. Je vhodné, aby jednotková dávková forma prostředku .podle tohoto vynálezu obsahovala od 0,1 do 1000 mg sloučeniny podle vynálezu (0,001 až 10 mg pro inhalaci) obvykleji od 1 do 500 mg, například 1 až 25 nebo 5 až 500 mg. Takové prostředky se mohou podávat jedenkrát až šestkrát denně, obvykleji dvakrát až čtyřikrát denně takovým způsobem, že denní dávka je od 1 mg do 1 g pro dospělého člověka o hmotnosti 70 kg, zejména od 5 do 500 mg. To představuje rozmezí od zhruba 1,4 x 10”² mg/kg za den do 14 mg/kg za den, zejména rozmezí od zhruba 7 x 10“² mg/kg za den do 7 mg/kg za den.

Následující příklady ilustrují vynález, avšak žádným způsobem jej neomezují.

Příklady provedeni vynálezu

Způsoby biologického testování

Způsob 1 «· ····

·· ·· • · · · · • · · · • · ·· · · · · • · ·

Schopnost zkoušených látek inhibovat uvolňování rozpustného CD23 se zjišťuje s použitím následujícího způsobu.

Analýza aktivity štěpení CD23 na buněčné membráně RPMI 8866

Plazmatické membrány buněk RPMI 8866, linie B-buněk transformovaných lidským Barrové-Epsteina virem [Sarfati a kol., Immunology 60, 539-547 (1987)] vykazující vysoké hladiny CD23 se čistí s použitím vodného extrakčního způsobu. Buňky resuspendované v homogenizačním pufru (HEPES pH 7,4 20 mM, chlorid sodný 150 mM, chlorid horečnatý 1,5 mM, DTT 1 mM)se rozbijí kavitací dusíkem v Parrově bombě a frak ce plazmatické membrány smísené s ostatními membránami se získá centrifugací při 10000 g. Lehká peleta se resuspenduj v roztoku fosforečnanu draselného 0,2 M, pH 7,2 s použitím 2 ml na 1 až 3 g vlhkých buněk a nukleární peleta se odstra ní. Membrány se dále frakcionují rozdělením mezi Dextran 500 (6,4 hmotnostních procent) a polyethylenglykol (PEG) 5000 (6,4 hmotnostních procent) za přítomnosti 0,25 M rozto ku sacharózy o celkovém množství 16 g na 10 až 15 mg membrá nových proteinů [Morre a Morre, BioTechniques 7, 946-957 (1989)]. Fáze se rozdělí krátkou centrifugací při 1000 g a fáze polyethylenglykolu (vrchní) se odebere, zředí třikrát až pětkrát draselným fosfátovým pufrem 20 mM o pH 7,4 a centrifuguje při 100000 g pro získání membrán v této fázi Peleta se resuspenduje ve fyziologickém roztoku pufrovaném fosfátem a obsahuje 3krát až 4krát obohacené plazmatické membrány spolu s některými jinými buněčnými membránami (například lysosomy, Golgi). Z membrán se připraví alikvóty a uloží při -80 °C. Frakcionace 6,6% dextranem/polyethylenglykolem poskytuje desetinásobně obohacené plazmatické • · ·· · ··· · • · · · • · · · • ······ • · ·

membrány.

Frakcionované membrány se inkubují při 37 °C po dobu až 4 h pro získání fragmentů CD23, které se separují z membrány filtrací na filtračních deskách Durapore 0,2 mikrometrů (Millipore) po přidání přípravku 1 5 μΜ z P 30994. S-CD23 uvolněný z membrány se určí pomocí soupravy EIA od The Binding Site (Birmingham, UK) nebo podobným pomocí MHM6 anti-CD23 mAb [Rowe a kol., Int. J. Cancer 29., 373-382 (1982)] nebo jiného anti-CD23 mAb jako zachycovací protilátky v sendvičové EIA. Množství rozpustného CD23 produkovaného 0,5 μg membránového proteinu v celkovém objemu fyziologického roztoku pufrovaného fosfátem 50 μΐ se měří pomocí EIA a srovnává s množstvím produkovaným v přítomnosti různých koncentrací inhibitorů. Inhibitory se připraví v roztoku ve vodě nebo dimethylsulfoxidu (DMSO) a konečná koncentrace dimethylsulfoxidu nepřevyšuje 2 %. Hodnoty IC₅₀ se určí proložením křivky jako koncentrace, při kterých se pozoruje 50% inhibice tvorby S-CD23 vzhledem k diferenci S-CD23 oproti kontrolám inkubovaným bez inhibitoru.

Způsob 2

Schopnost zkoušených látek inhibovat kolagenázu se zjišťovala pomocí následujícího způsobu.

Analýza inhibice kolagenázy

Schopnost sloučenin působit jako inhibitory kolagenázy se určuje způsobem Cawstona a Barretta [Anal. Biochem.

99, 340-345 (1979)], který se zde uvádí formou odkazu, při kterém se 1-mM roztok testovaného inhibitoru nebo jeho zředění inkubuje při 37 °C po dobu 18 h s kolagenem a lidskou • · ··· · ·· · • · · · · · • · · · · · • ······ · · • · · · ♦ · ···· · ·· ·· rekombinantní kolagenázou ze synoviálních fibroblastů klonovaných, exprimovaných a čištěných z E. Coli (pufrovaných pufrem Tris 150 mM, pH 7,6, s koncentrací chloridu vápenatého 15 mM, Brij 35 0,05 %, chloridu sodného 200 mM a azidu sodného 0,02 %). Kolagen se acetyluje bovinním kolagenem typu 1 značeným radionuklidem ³H připraveným způsobem Cawstona a Murphyho [Methods in Enzymology 80, 711 (1981)]. Vzorky se centrifugují pro sedimentaci nerozloženého kolagenu a alikvót radioaktivního supernatantu se odebere pro měření na scintilačním počítači, které slouží pro vyjádření stupně hydrolýzy. Kolagenázová aktivita v případě inhibitoru 1 mM nebo zředění tohoto inhibitoru se srovnává s aktivitou kontroly prosté inhibitorů a výsledky se uvádějí jako koncentrace způsobující 50% inhibici kolagenázy (IC₅₀).

Způsob 3

Schopnost zkoušených látek inhibovat uvolňování faktoru nekrózy tumoru se zjišťovala pomocí následujícího způsobu.

Analýza inhibice uvolňování faktoru nekrózy tumoru TNFa z lidských monocytů stimulovaných lipopolysacharidovým (LPS) endotoxinem

Lidské monocyty pěstované v médiu RPMI 1640 obohaceném 10% fetálním telecím sérem se centrifugují při 1000 g po dobu 5 min a poté se resuspendují v prostředí při koncentraci 2 x 10⁶ buněk/ml. AIikvóty buněčné suspenze se umístí na 24 jamkové desky, 1 ml/jamku. Testované sloučeniny se rozpustí v čistém dimethylsulfoxidu a přidávají do kultury s dosažením konečné koncentrace dimethylsulfoxidu 0,1 %. Sloučeniny se přidávají k buňkám v jamkách po trojicích.

• · · · · · ··· ·· · ·· ····

- 27 Uvolňování TNFa se stimuluje přídavkem LPS k buňkám při konečné koncentraci 200 ng/ml. Příslušné kontrolní kultury se též připraví po trojicích. Desky se inkubují po dobu 18 až 20 h při 37 °C, 5 %CO₂ a poté se centrifugují při 1000 g po dobu 5 min. Používá se specifický test ELISA pro lidský TNFa (SmithKline Beecham) pro zjištění hladin TNF v superna tantech kultury bez buněk.

Příklad 1

Příprava N'-[3S-hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamidu

a) Dimethyl-[2S-hydroxy-3R-(2-nafthylmethyl)sukcinat]

K roztoku diisopropylaminu (3,1 ml, 22 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml) se při -10 °C přidává po kapkách n-butyllithium (1,6 M roztok v hexanu, 13,75 ml, 22 mmol). Roztok se míchá po dobu 30 min, poté se ochladí na teplotu -70 °C a po kapkách se přidává roztok (S)-dimethylmaleatu (1,6 g, 10 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml). Po 90 min se přidá 2-nafthylmethylbromid (4,42 g, 22 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 2 h, poté se vylije do 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové a produkt se extrahuje diethyletherem (3x50 ml). Spojené extrakty se promyjí vodou (30 ml), roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml), roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem horečnatým. Filtrace a odpaření poskytuje olejovitou kapalinu, které se čistí chromatografií na silikagelu. Gradientovi eluce (0 až 50% směsí ether/hexan) poskytuje bílou tuhou látku (1,08 g) s teplotou tání 91 až 92 °C.

^XH NMR (CDC1₃) 3,13-3,47 (3H, m), 3,26 (1H, d, J = 7 Hz), 3,69 (3H, s), 3,74 (3 H, s), 4,12 (1 H, dd, J = 7, 2,5 Hz), 7,38-7,50 (3H, m), 7,73 (1 H, s)), 7,81 (4 H, Široký d, J = 8 Hz).

b) Ν'-[2,2-Dimethyl-4-oxo-l,3-dioxalan-5S-yl)-3-(2-nafthyl)propanoyl]-S-terc.leucin-N-methylamid

K roztoku dimethyl-2S-hydroxy-3R-(2-nafthylmethyl)sukcinatu (2,0 g, 6,6 mmol) v dioxanu (15 ml) a vodě (30 ml) se přidá hydroxid draselný (1,11 g). Žlutý roztok se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3 h, okyselí s použitím iontoměniče Dowex 50x8 a odpaří. Výsledná růžová tuhá látka se rozpustí v dimethylformamidu (50 ml) a 2,2-dimethoxy• · • · · · ··· · · · · · · · • ···· · · · · β ··· ··· · · ···· · · z y — ···· · «· ·· propanu (50 ml) a přidá se tosylchlorid (0,1 g). Po míchání po dobu 18 h se roztok odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetatu a promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného, suší síranem hořečnatým a odpaří s obdržením žluté pěny (1,664 g). Ta se rozpustí v suchém dimethylformamidu (10 ml) a l-hydroxybenzotriazolhydratu (367 mg) a přidá se terč.leucin-methylamid (218 mg, 1,5 mmol) a l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochlorid (312 mg, 1,6 mmol). Roztok se míchá po dobu 18 h a poté se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetatu a promyje roztokem kyseliny citrónové (10 %, 2x20 ml), vodou (20 ml), roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a roztokem chloridu sodného (10 ml) a vysuší se síranem hořečnatým. Odstranění rozpouštědla a chromatografie zbytku na silikagelu (vyvíjení diethyletherem) poskytuje N'-[2R-(2,2-dimethyl-4-oxo-l,3-dioxalan-5S-yl)-3-(2-nafthyl)propanoyl]-S-terc.leucin-N-methylamid (434 mg) ve formě bílého prášku s teplotou tání 118 až 119 °C.

^TH NMR (D₆ DMSO) 0,84 (9 H, s), 1,49 (3 H, S), 1,59 (3 H, s), 2,33 (3 H, d, J = 4,5 Hz), 3,0 - 3,24 (2 H, m), 4,16 (1 H, d, J = 10 Hz), 4,55 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 7,33 (1 H, d, J = 7 Hz), 7,4-7,5 (2 H, m), 7,65 (1 H, s), 7,67 7,86 (5 H, m).

c) N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid • · ♦ · · ·

ΗΟΗΝ

Roztok Ν' - [2R-(2,2-dimethyl-4-oxo-l,3-dioxalan-5S-yl )-3-( 2-naf thyl )propanoyl ] -S-terc. leucin-N-methylamidu (410 mg, 0,9 mmol), hydroxylaminhydrochloridu (259 mg, 3,7 mmol) a N-methylmorfolinu (0,41 ml, 3,7 mmol) v methanolu (5 ml) se míchá po dobu 24 h. Roztok se odpaří, trituruje diethyletherem, vodou a poté se zfiltruje s obdržením N' - [ 3S-hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamidu ve formě bílé tuhé látky (257 mg) s teplotou tání 189 až 190 °C.

¹H NMR (D₆ DMSO) 0,85 (9 H, s), 2,25 (3H, d, J = 4,5 Hz), 2,74 (1H, dd, J = 13,4, 5 Hz), 2,94 (1H, app t, J = 11 Hz), 3,07-3,09 (1H, m), 3,86 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,09 (1H, d, J = 10 Hz), 5,55 (1H, d, J = 8 Hz), 7,29 (1H, d, J = 8 Hz), 7,4-7,51 (3H, m), 7,51 (1H, s), 7,75-7,85 (4H, m), 8,89 (1H, s), 10,67 (1H, s).

S použitím způsobu popsaného v příkladu 1 byly připraveny následující sloučeniny:

Příklad 2

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthyl• · · · ·· · • · · ·· · ···· ·«« · · · · · · · • ···· ♦ · · » · ··· ··· « · · · · · · · ···· · ·· ·· ·· ·· methyl)sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

Teplota tání 168 až 170 °C.

	^XH NMR (dg DMSO)	2,28 (3H,	d, J = 4	Hz) ,	2,77-2,96
(5H,	m), 3,94 (1H, t, J	= 4 Hz),	4,27 (1H,	q, J	= 5 HZ),
5,77	(1H, d, J = 6 Hz),	7,1-7,87	(13H, m),	7,98	(1H, d, J

7,5 Hz), 8,93 (1H, s), 10,74 (1H, s).

Příklad 3

N3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid

HOHN

• · · · · · ·· * * · · · · 4 ··· ·· · · · · · ···· · · · · » ··· »·· • · · · · · · • · ·· · · ·· ··

Teplota tání 175 až 177 °C.

¹H NMR (dg DMSO) 2,75-3,0 (4H, m) , 3,01 (1H, dd, J 13,5, 5 Hz), 3,93 (1H, t, J = 6 Hz), 4,26 (1H, dd, J = 8,

5,5 Hz), 5,82 (1H, d, J = 6 Hz), 7,02 (1H, široký s), 7,16 (5H, s), 7,22 (2H, d, J = 10 Hz), 7,41-7,50 (2H, m), 7,55 (1H, široký S), 7,75-7,86 (3H, m) , 7,95 (1H, d, J = 8 Hz), 8,91 (1H, s), 10,70 (lH,s).

Příklad 4

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(3-jodbenzyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid MH⁺ 512

Příklad 5

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-methylbenzyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid MNa⁺ 422

Příklad 6

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(3-methylbenzyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid MNa⁺ 422

Příklad 7

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(benzyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid MNa⁺ 408

Příklad 8

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino) -2R-(2-methylbenzyl)- 33 ·· · »» ·· • · · · · · • · · · · · • · · · · · ··· • · · · » • I ·· · · ·· sukcinyl ]-S-fenylalanin-N-methylamid MH⁺ 414

Příklad 9

N' - [ 3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(benzyl)sukcinyl]-S -fenylalanin-N-methylamid MH⁺ 400

Příklad 10

Ν'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-fenylbenzyl)sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid MNa⁺ 498

Příklad 11

N * — C3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(3-j odbenzyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid MH⁺ 492

Příklad 12

N' - [ 3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-methylbenzyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid MH⁺ 380

Příklad 13

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(3-methylbenzyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid MH⁺ 380

Příklad 14

Ν'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(benzyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid MH⁺ 366

Příklad 15 • · · · • · • · ·

N' -[3S-Hydroxy-4- (N-hydroxyamino) -2R-(4-azidobenzyl)sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid MH⁺ 407

Příklad 16

Ν' - [3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-benzothiofenylmethyl)-sukcinyl]-S-fenylalaninamid

Teplota tání 189 až 190 °C.

1H NMR (d⁶ DMSO) 2,8-3,14 (5H, m), 4,00 (1H, t, J

6,5 Hz)	, 4	,31 (1H,	dd, J	= 5,3 Hz), 5,	85 (1H,	d, J =	6,5
Hz), 6,	97	(1H, s),	7,06	(1H, široký s)	, 7,15	(5H, S)	t
7,24-7,	32	(2H, m),	7,34	(1H, široký s)	, 7,67	(1H, d,	J =
Hz), 7,	84	(1H, d,	J = 7	Hz), 7,99 (1H,	d, J =	= 8 Hz),	8,93
(1H, d,	J	= 2 Hz),	10,70	(1H, d, J = 2	Hz) .
Příklad	17

N' - [3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(3-benzothiofenyl• · * · «·· ·· · · · · · ··· ·· · · · · · • ···· · · · · · ··· ··· • · ··«· * · ···« · ·· ·· ·· ♦· methyl)-sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

Teplota tání 148 až 150 °C. MH⁺ = 456, MNa⁺ = 478.

Příklad 18

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino) -2R-(3-benzofuranylmethyl) sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

Teplota tání 160 až 161 °C.

• · · · · · • to to • toto to · · ·· to ······ · • · · · ···· · ·· ·· ·· • · · · · • · · · · ·· ··· ··· • ·· to· ·· ··

1H NMR, (d⁶ DMSO) 2,43 (3H, d, J = 4 Hz), 2,75-3,10 (5H, m), 4,01 (1H, t, J = 6 Hz), 4,33 (1H, app q, J = 5,5 Hz), 5,86 (1H, d, J = 6 Hz), 6,40 (1H, s), 7,02-7,25 (7H, m), 7,44-7,50 (2H, m), 7,66 (1H, q, J = 4 Hz), 8,07 (1H, d, J = 6 Hz), 8,94 (1H, s), 10,75 (1H, s).

Příklad 19

N' - [ 3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-hydroxybenzyl)sukcinyl]-S-fenylalanamid

Teplota tání 154 až 155 °C.

1H NMR, (D⁶ DMSO) 2,49-2,58 (2H, obs), 2,66 (1H, dd,

J = 14,8 Hz), 2,84 (1H, dd, J = 14,8 Hz), 3,08 (1H, dd, J =

14,5 Hz), 3,85 (1H, t, J = 6,5 Hz), 4,27 (1H, m) , 5,74 (1H, d, J = 6,5 Hz)., 6,58 (2H, d, J = 8 Hz) , 6,81 (2H, d, J = 8 Hz), 7,05 (1H, široký s), 7,15-7,26 (6 H, m) , 7,83 (1H, d, J = 8 Hz), 8,86 (1H, s), 9,14 (1H, s), 10,64 (1H, s).

• · · •fc ···· ·· ··

Příklad 20

N ’ — [ 3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(7-methoxybenzofuranyl methyl)sukcinyl ]-S-fenylalanin-N-methylamid

Teplota tání 161 až 163 °C. MH⁺ = 470, MNa⁺ = 492.

Příklad 21

N' - [ 3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(3-methyl)benzothiofenylmethyl)sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

MH⁺ = 470, MNa⁺ =

492 ·· 4 •4 4444

Příklad 22

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-benzyloxybenzyl)sukcinyl]-S-fenylalanamid

Teplota tání 179 až 180 °C (methanol/ethylacetat).

1H NMR (d⁶ DMSO) 2,5-2,93 (4H, m) , 3,02 (1H, dd, J

14.5 Hz), 3,86 (1H, t, J = 6 Hz), 4,28 (1H, dd, J = 14,5 Hz), 5,03 (2H, s), 5,72 (1H, d, J = 6 Hz), 6,83 (2H, d, J

8.5 Hz), 6,93 (2H, d, J = 8,5 Hz), 7,04 (1H, s), 7,08 (1H s), 7,1-7,3 (5H, m) , 7,3-7,5 (5H, m) , 7,86 (1H, d, J = 8 Hz), 8,86 (1H, s), 10,64 (1H, s).

Příklad 23

N3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(3,4-dimethylbenzyl) sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid ·· ···· • · · · · · • · · · · · ······· · · · • · · · · ·

Teplota tání 163 až 165 °C. MH⁺ = 428.

Příklad 24

N'-[3 S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-(prop-2-y1)ben zy 1) sukcinyl]-S-fenylalanamid

Teplota tání 168 až 170 °C. MNa⁺ =

450.

9 •9 99·· · 9 · · 9 · · 9 9 9 9 9 • 9 99 999 999

9 · 9 · 9 ·9 99 9·

Příklad 25

Ν'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-benzthiazalylmethyl) sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid

Teplota tání 132 až 134 °C.

1H NMR, (d⁶ DMSO) 0,86 (9H, s), 2,39 (3H, d, J = 4,5 Hz), 2,5-2,6 (1H, obs), 3,0-3,24 (2H, m) , 3,95 (1H, t, J =

Hz), 4,15 (1H, d, J = 8 Hz), 7,4-7,7 (3H, m), 7,75 (1H, široký q, J = 4,5 Hz), 7,88 (1H, d, J = 9 Hz), 8,94 (1H, s), 10,73 (1H, S).

Příklad 26

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-benzthiazalylmethyl) sukcinyl]-S-fenylalanamid •4 *··· • · • · · » ····

Teplota tání 165 až 167 °C.

1H NMR (d⁶ DMSO) 2,88 (1H, dd, J = 14,8 Hz),

3,01-3,22 (4H, m) , 4,06 (1H, app t, J = 6,5 Hz), 4,28 (1H, dd, J = 8,3 Hz), 5,80 (1H, d, J = 6 Hz), 7,05-7,15 (6H, m) 7,38-7,51 (3H, m), 7,89 (1H, d, J = 8 Hz), 8,02 (1H, d, J

Hz), 8,08 (1H, d, J = 8 Hz), 8,95 (1H, s), 10,71 (1H, s)

Příklad 27

N3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-{2-(4-nitrobenzyl)}sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

MH⁺ =

445.

»· · • < · • · · • ··«· · • · ··*· · ·· «··· • * · • · · • · · · • · · · ·· ·® »« ·· • · · · • · · · ··· Λ · · « · ·· ··

Příklad 28

Ν¹ -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-{2-(4-aminobenzyl)}sukciny1]-S-fenylalanin-N-methylamid

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-{2-(4-benzoylamino benzyl)}sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

MNa⁺ =

541.

9 9 · « · « ·

999 999 • *

9 9 9

- 43 Příklad 30

Ν'-[3 S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-{2RS-(1,2,3,4-tetrahydronafthylmethyl)} sukcinyl ] -S-fenylalanin-N-methylamid

MNa⁺ = 476.

l-H NMR (d₆ DMSO) 1,07-1,45 (2H, m) , 1,49-1,67 (2H, m), 2,10-2,31 (1H, m), 2,46 (3H, d, J = 4,4 Hz, kolabuje na singlet s D₂0), 2,51-2,65 (4H, m), 2,81-2,87 (2H, m),

3,06 (1H, d, d, J = 4,2 a 8,0 Hz), 3,89 (1H, t, J = 7,3 Hz, kolabuje na dublet, J = 7,0 Hz s D₂0), 4,30-4,47 (1H, m) , 5,65 (1/3H, d, J = 7,2 Hz, výměna s D₂0), 5,72 (2/3H, d, J =

7,2 Hz), výměna S D₂0), 7,03-7,18 (9H, m), 7,80 (2/3H, q, J = 4,3 Hz, výměna s D₂0), 7,89 (1/3H, q, J = 4,3 Hz, výměna s D₂O), 7,98 (1H, d, J = 8,25 Hz, výměna s D₂0), 8,88 (1H, s, výměna s D₂0), 10,66 (1H, s, výměna s D₂0).

- 44 • · · • · 4 • · · · · • · ···· o ’· i^-

Příklad 31

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)-sukcinyl]-S-terc.leucinamid

MNa⁺ = 424.

-’-Η NMR (dgDMSO) 0,90 (9H, s), 2,75 (1H, dd, J = 13,5 Hz), 2,97-3,31 (2H, m) , 3,84 (1H, t, JJ = 7 Hz), 4,15 (1H, d, J = 10 Hz)/ 5,61 (1H, d, J = 8 Hz), 6,88 (1H, s), 7,242 (1H, s), 7,32 (1H, d, J = 8 Hz), 7,45 (2H, m) , 7,55 (1H, d, J = 10 Hz), 7,63 (1H, m), 7,82 (3H, m) , 8,88 (1H, s), 10,68 (1H, s).

Příklad 32

N' - [3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(5-benzothiofenylmethyl)sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid «· £

9· ··· · • 9 • · · · • Ο · · tt ·

OH

HO

MH⁺ = 456, MNa⁺ = 478.

^•H NMR.(dg DMSO) 2,36 (3H, d, J = 4 Hz), 2,81-3,15 (5H, m), 3,92 (1H, m) , 4,30 (1H, m) , 5,78 (1H, d, J = 6 Hz), 7,05 (1H, d, J = 8 Hz), 7,17 (5H, m) , 7,35 (2H, d, J = 5,5 Hz), 7,52 (1H, s), 7,71 (1H, d, J = 5 Hz), 7,83 (1H, d, J =

Hz), 7,96 (1H, d, J = 8 Hz), 8,92 (1H, s), 10,73 (1H, s).

Příklad 33

N' - [ 3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-bifenylmethyl)sukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

OH

HO

NHMe • · · * ·· * • · « • · · · · · · • 9

9 9 9 ·>

• · » · • · 9 • · « • 99 9 9 9

9 φ 9 9 9

ΜΗ⁺ = 476, MNa⁺ = 498.

¹Η NMR (d₆ DMSO) 2,44 (3H, d, J = 5 Hz), 2,56-2,87 (4H, m), 3,01 (1H, dd, J = 13,7, 5 Hz), 3,93 (1H, t, J = 6,5 Hz), 4,31 (1H, m), 5,78 (1H, d, J = 6 Hz), 7,10-7,65 (15H, m), 7,97 (1H, ,d, J = 8 Hz), 8,92 (1H, s), 10,72 (1H, s).

Příklad 34

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-5,6,7,8-tetrahydronafthylmethyl)-sukcinyl]-S-terc.leucin-N-methylamid

MNa

442.

·· · ·· • · fc fcfc • · « · · •fcfc···· · • * · · fcfcfcfc · ·· • fc · fc • · · · · • · · · ·

Ofc fcfcfc fcfcfc • · · · fc· fc· * e

Příklad 35

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(1-nafthylmethyl)sukcinyl]-s-terc.leucin-N-methylamid

Příklad 36

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(4-benzyl)benzylsukcinyl]-S-fenylalanin-N-methylamid

MNa⁺ =

512.

• · · · · *

Příklad 37

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino) -2R-(2-(3-chinolinyl)methyl)sukcinyl]-S-fenyl-alaninamid ^ΤΗ NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,83-3,02 (5H, m) , 3,97 (1H, široký d), 4,28 (1H, m), 5,81 (1H, široký s), 6,98 (1H, široký s), 7,16 (5H, m), 7,28 (1H, široký m), 7,57 (1H, ddd, J = 8,7, 1 Hz), 7,70 (1H, ddd, J = 8, 7, 1 Hz), 7,86 (1H, dd, J = 8,1 Hz), 7,95-7,99 (3H, m), 8,66 (1H, d, J = 2 Hz), 8,91 (1H, široký s), 10,72 (1H, m).

Příklad 38

N' - [ 3 S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(3-chinoliny1)methyl)sukcinyl]-S-tyrosinamid ¹H NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,73-2,94 (5H, m), 3,97 (1H, široký t), 4,21 (1H, m), 5,84 (1H, široký d, J = 6 Hz), 6,60 (2H, d, J = 8 Hz), 6,95 (1H, široký s), 6,96 (2H, d, J = 8 Hz), 7,24 (1H, široký s), 7,56 (1H, ddd, J = 8, 7, 1 Hz), 7,69 (1H, ddd, J = 8, 7, 1 Hz), 7,85-7,98 (4H, m), 8,66 (1H, d, J = 2 Hz), 8,91 (1H, široký s), 9,13 (1H, s), 10,73 (1H, s).

Příklad 39

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(6,7-difluornafthy1) methyl) sukcinyl ] -S-tyrosinamid ¹H NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,67-2,87 (5H, m), 3,89 (1H, t, J = 6 Hz), 4,16 (1H, m), 5,74 (1H, d, J = 6 Hz),

9 9999 • » · « * * • 9 9 9 9 • ····»« · • · · · • · · · * · · • · • 9 · · · • » · · · • · 999 999 • · · •V 99 9·

6,56 (2H, d, J = 8 Hz), 6,90 (1H, široký s), 6,92 (2H, d, J = 8 Hz), 7,04 (1H, široký s), 7,21 (1H, d, J = 8 Hz), 7,51 (1H, s), 7,73-7,92 (4H, m), 8,86 (1H, s), 9,09 (1H, s), 10,66 (1H, s).

Příklad 40

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(6-hydroxynaf thyl) methyl) sukcinyl ] -S-f enylalaninamid ¹H NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,69-2,88 (4H, m), 3,01 (1H, dd, J = 14,4 Hz), 3,90 (1H, t, J = 6 Hz),4,26 (1H, m), 5,83 (1H, d, J = 6 Hz), 7,02-7,25 (10 H, m), 7,40 (1H, s), 7,53 (1H, d, J = 8 Hz), 7,62 (1H, d, J = 9 Hz), 7,95 (1H, d, J = 8 Hz), 8,93 (1H, s), 9,64 (1H, s), 10,72 (1H, s).

Příklad 41

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(6-fluornafthyl)methyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid

Teplota tání 198 až 201 °C.

¹H NMR (d₆ DMSO, 400 MHz) 2,74-2,93 (4H, m), 3,01 (1H, dd, J = 14,5 Hz), 3,93 (1H, t, J = 6 Hz), 4,27 (1H, m), 5,78 (1H, d, J = 6 Hz), 6,98 (1H, Široký s), 7,16 (6H, m), 7,26 (1H, d, J = 8 Hz), 7,37 (1H, m), 7,59 (1H, s), 7,63 (1H, dd, J = 12,2 Hz), 7,76 (1H, d, J = 9 Hz), 7,86 (1H, m), 7,93 (1H, d, J = 8 Hz), 8,90 (1H, s), 10,69 (1H, s).

Příklad 42

N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(7-fluornafthyl)• · · · • · • · · ·· * ···· • ·*··«· · ♦· ··· ··· • · ···· · · ···· · ·· ·· * * ··

- 50 methyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid

Teplota tání 197 až 198 °C.

¹H NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,76-2,93 (4H, m), 3,01 (1H, dd, J = 14,5 Hz), 3,93 (1H, t, J=6Hz), 4,28 (1H, m), 5,77 (1H, d, J = 7 Hz), 6,99 (1H, široký s), 7,17 (7H, m) , 7,34 (1H, m) , 7,55 (2H, m), 7,80 (1H, d, J = 8 Hz), 7,92 (2H, m), 8,90 (1H, s), 10,69 (1H, s).

Příklad 43

N' -[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(6-chinolinyl)methyl)sukcinyl]-S-fenylalaninamid

Teplota tání 215 až 220 °C.

¹H NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,80-2,96 (4H, m), 3,01 (1H, dd, J = 14,5 HZ), 3,95 (1H, t, J = 6 Hz), 4,28 (1H, m), 5,79 (1H, d, J = 6 Hz), 6,99 (1H, Široký s), 7,15 (5H, m) , 7,23 (1H, široký s), 7,44-7,50 (2H, m), 7,60 (1H, s), 7,87 (1H, d, J = 9 Hz), 7,95 (1H, d, J = 8 Hz), 8,23 (1H, d, J = 8 Hz), 8,83 (1H, dd, J = 4,1 Hz), 8,91 (1H, s), 10,70 (1H, s).

Příklad 44

N'3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-(6-benzyloxynafthyl)methylsukcinyl ] -S-f enylalaninamid

Teplota tání 201-204 °C.

NMR (dg DMSO, 400 MHz) 2,75 (1H, m) , 2,83-2,91 • to ♦ • to toto · to to · to • ···· · ·· · ·· · ·· · to · (3H, m), 3,01 (1H, dd, J = 14,5 Hz), 3,95 (1H, t, J = 6 Hz),

4,28 (1H, ddd,‘ J = 8, 8, 5 Hz) , 5,21 (2H, s), 5,78 (d, J = 6

Hz), 6,99 (1H, Široký S), 7,17 (8H, m), 7,35 (2H, m) , 7,41 (2H, m), 7,50 (3H, m), 7,64 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,72 (1H, d, J = 9 Hz), 7,91 (1H, d, J = 8 Hz), 8,88 (1H, s), 10,67 (1H, s).

Příklad 45

Příprava N¹ -[3S-hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)sukcinyl]-S-tyrosinylamidu

a) Ν'-[2R-(2,2-Dimethyl-4-oxo-l,3-dioxalan-5S-yl)-3- (2-nafthyl)propanoyl]-S-tyrosinylamid

Tato sloučenina se připraví obecným způsobem popsaným v příkladu l(b) s použitím S-tyrosinylamidu místo terč.leucin-methylamidu.

5H E(CD₃)₂SO] 1,47 (3H, s), 1,50 (3H, s), 2,69 (1H, ABq, J = 13,8, 8,1 Hz), 2,82 (1H, ABq, J = 13,8, 5,3 Hz), 3,14 (2H, m), 4,38 (1H, m), 4,49 (1H, d, J = 6,2 Hz), 6,60

4444 ·· ··

4 · 4 4 4 4 • 4 · 4 · · · • 4 4# 444 444

4 4 4 · ·

44 44 44 (2H, d, J = 8,5 Hz), 6,96 (3H, m), 7,12 (1H, s), 7,38-7,55 (3H, m), 7,69 (1H, S), 7,79-8,00 (4H, m) a 9,16 (1H, s).

MNa⁺ 499 (+ ve iontový elektrosprej).

b) N'-[3S-Hydroxy-4-(N-hydroxyamino)-2R-(2-nafthylmethyl)sukcinyl]-S-tyrosinylamid

Tato sloučenina se připraví obecným způsobem popsaným v příkladu l(cj s použitím Ν'-[2R-(2,2-dimethyl-4-oxo-l,3-dioxalan-5S-yl)-3-(2-nafthyl)propanoyl]-S-tyrosinylamidu.

Teplota tání 179 až 180 °C.

δΗ /(CD₃)₂SO/ 2,70-3,00 (5H, m), 3,93 (1H, m), 4,20 (1H, m), 5,85 (1H, d, J = 6,4 Hz), 6,60 (2H, d, J = 8,2 Hz), 6,97 (3H, m), 7,23 (2H, s), 7,43-7,57 (3H, m) , 7,72-7,92 (4H, m), 8,92 (1H, S), 9,17 (1H, s) a 10,72 (1H, s). (M-H) 450 (- ve iontový elektrosprej).

i • ·

4 4

4 4 4« • 4

14·· ·

4« 4·«4

4 • 4

I «

4*

Údaje ο aktivitě

Sloučenina

Inhibice CD23 proteinázy

Inhibice kolagenázy μΜ

Inhibice zpracování faktoru nekrózy tumoru % při 1 μΜ

Příklad 1	88	při	1	μΜ
Příklad 2	90	při	2	μΜ
Srovnávací
příklad*	96	při	1	μΜ

větší než 10

8,6 45

0,005 76,4 ± 0,9 *Srovnávací příklad je příklad 2 z WO 90/05719, sloučenina obecného vzorce

ve kterém

R je CH₂S-(2-thienylová) skupina a R¹ je methylová skupina.

Claims

1. Sloučenina obecného vzorce I

HON

R

NHR³ (i:

ve které

R¹ je arylmethylová skupina nebo heterocyklylmethylová skupina, o

R je alkylova skupina, alkenylová skupina, arylova skupina, cykloalkylová skupina nebo cykloalkenylová skupina a o >

R je atom vodíku, alkylova skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina nebo arylová skupina s podmínkou že, je-li R^x fenylmethylová skupina nebo naftylmethylová skupina, kde fenylová či naftylová skupina je nesubstituovaná nebo substituovaná až pěti substituenty_fzvolenými ze seznamu

44 444*

4 4 4 4 4 » 444« atom halogenu, C(C_1—6) alkylová skupina], aryl-EÍCj.g) alkylová] skupina, (C-]__₆) alkoxyskupina, [(C-j__₆) alkoxy]-[ (C₁__g ) alkylová] skupina, halogen-[ (C-j__₆) alkylová] skupina, hydroxylová skupina, nitroskupina, aminoskupina, mono- a di-N-(C₁_₆) alkylaminoskupina, acylaminoskupina, acyloxyskupina, karboxylová skupina, karboxylové soli, karboxylové estery, karbamoylová skupina, mono- a di-N-(C₁_₆) » alkylkarbamoylová skupina, (Cg-g) alkoxykarbonylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, ureidoskupina, guanidinoskupina, • sulfonylaminoskupina, aminosulfonylová skupina, (0_1-6) alkylthioskupina, (C₁_g) alkylsulfinylová skupina, (0_1-6) alkylsulfonylová skupina, heterocyklylová skupina, heterocyklyl-[(Ci_6) alkylová] skupina a ()alkylenový řetězec spojující dva přilehlé atomy uhlíku s vytvořením karbocyklického kruhu, potom je R hydroxylová skupina.

2. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je hydroxylová skupina.

3. Sloučenina podle nároku 2, ve které R je hydroxylová skupina, R¹ je 1- nebo 2-nafthylmethylová skupina a/nebo R² je benzylová skupina nebo terč.butylová skupina a/nebo R³ je atom vodíku nebo methylová skupina.

*

4. Sloučenina podle nároku 2, ve které R je hydroxylová skupina, R¹ je případně substituovaná benzylová skupina, R² je terč.butylová skupina a R³ je atom vodíku nebo methylová skupina.

5. Sloučenina podle nároku 2, ve které se každý R až R³ volí ze skupiny obsahující případy, které jsou připsány ·· * • · · ·· ··· · těmto substituentům v příkladech výše.

6. Sloučenina podle nároku 2 vybraná ze skupiny sloučenin popsaných v příkladech výše.

7. Sloučenina podle nároku 1 ninou obecného vzorce IA:

nebo 2, která je slouče- (IA),

8. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z předchozích nároků pro přípravu léku pro léčbu či profylaxi poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunitní onemocnění, při kterých se implikuje nadměrná produkce S-CD23.

9. Způsob léčby či profylaxe poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunitní onemocnění, při kterých se implikuje nadměrná tvorba s-CD23, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7 člověku nebo jinému savci, který tuto léčbu či profylaxi potřebuje.

10. Farmaceutický prostředek pro léčbu či profylaxi poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunitní onemocnění, při kterých se předpokládá nadměrná produkce s-CD23, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7 a případně její farmaceuticky přijatelný nosič.

φφ · *· ····

11. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7 pro výrobu léku pro léčbu či profylaxi stavů zprostředkovaných faktorem nekrózy tumoru včetně, avšak nikoliv s omezením na tyto případy, zánětu, horečky, kardiovaskulárních stavů, krvácení, koagulace a odpovědi akutní fáze, kachexie a anorexie, akutních infekcí, šokových stavů, reakcí štěpu vůči hostiteli a autoimunního onemocnění.

'

12. Způsob léčby či profylaxe stavů zprostředkovaných i faktorem nekrózy tumoru, vyznačující se tím, že se podává sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7 člověku či jinému savci, který tuto léčbu či profylaxi potřebuj e.

13. Způsob léčby či profylaxe poruch, jako je alergie, zánětlivé poruchy a autoimunní onemocnění, při kterých se implikuje nadměrná produkce S-CD23, vyznačující se tím, že se člověku či jinému savci, který tuto léčbu či profylaxi potřebuje, podává sloučenina, která je inhibitorem zpracování faktoru nekrózy tumoru s podmínkou, že tato sloučenina není inhibitorem matricové metaloproteázy.

14. Způsob přípravy sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7,vyznačující se tím, že se provádí (a) odstraněním chránící skupiny ze sloučeniny obecného ? vzorce II:

44 ····

- 58 • · • · · 4 4 4 4 4 · ··· ·· 4 · · · • ···· · · · 4 · 444 444 » 4 4 · 4 · · · »444 4444 4· ·4

ΧΟΝΗ (II), ve kterém R až R³ jsou podle výše popsané definice a X je chránící skupina, jako je benzylová skupina nebo trimethylsilylová skupina, nebo (b) reakcí sloučeniny obecného vzorce III:

NHFV (III) ve kterém R až R jsou podle definice popsané výše a kterákoliv hydroxylová skupina může být případně chráněná, s hydroxylaminem nebo jeho solí nebo (c) reakcí sloučeniny obecného vzorce IV:

Q R’

HONH

HR^ (iv;

ve kterém R¹ až R³ jsou podle definice popsané výše, ·· ···· •··· · · • · · · » fcfc · > · · · • · · · · ·

- 59 s thiolem pro obdržení sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R je methylová skupina substituovaná alkylthioskupinou, arylthioskupinou, aralkylthioskupinou nebo heterocyklylthioskupinou nebo (d) převedením sloučeniny obecného vzorce I na jinou sloučeninu obecného vzorce I, jak se definuje výše.

15. Sloučenina obecného vzorce II, jak se definuje v nároku 14, ve které R je hydroxylová skupina nebo chráněná hydroxylová skupina.

16. Sloučenina obecného vzorce IV, jak se definuje v nároku 14, ve které R¹ je heterocyklylmethylová skupina.

17. Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 2, vyznačující se tím, že se provádí reakcí sloučeniny obecného vzorce X:

NHFb (x;

ve kterém R¹ až R² jsou podle výše popsané definice a R⁴a R⁵ jsou stejné nebo rozdílné substituenty a každý z nich je atom vodíku či skupina chránící hydroxylovou skupinu nebo R a R tvoři spolu divalentni skupinu chrámci hydroxylovou skupinu, s hydroxy1aminem nebo jeho solí.