CZ311997A3

CZ311997A3 - Kompozice určená k péči o pleť obsahující retinoidy a liposomy

Info

Publication number: CZ311997A3
Application number: CZ973119A
Authority: CZ
Inventors: Jonas C.T. Wang; Mohammed Yusuf; Jue-Chen Liu
Original assignee: Johnson & Johnson Consumer Products, Inc.
Priority date: 1995-04-03
Filing date: 1996-04-03
Publication date: 1998-01-14
Also published as: AP789A; CN1185729A; WO1996031194A3; EP0818988A2; JPH11503165A; PL322624A1; HUP9801607A3; NZ306694A; BR9604954A; KR19980703668A; OA10520A; WO1996031194A2; EA199700289A1; AU5532296A; CA2217201A1; AP9701101A0; HUP9801607A2

Description

Oblast techniky

Vynález se týká kompozic určených k péči o pleť obsahujících retinoidy, které obecně zlepšují kvalitu pokožky, zejména lidské obličejové pokožky. Vynález se zejména týká chemicky stabilních kompozic, k péči o pleť, obsahujících liposomovou formulaci prostou lipidů a určité retinoidy.

Dosavadní stav techniky

V posledních letech se do oblasti značného zájmu dostaly kompozice určené k péči o pleť obsahující retinoidy. Je dobře známo, že kyselinu retinovou, rovněž známou jako kyselinu vitamínu A, nebo-li tretdnoin, lze použit pro ošetření takových stavů pokožky, jakým je například akné, přičemž produkty obsahující kyselinu retinovou jsou komerčně dostupné v různých formách. Mezi tyto produkty lze zařadit například krémy, Retin A⁺, což jsou emulze „olej ve vodě kyseliny retinové obsahující antioxidační činidla rozpustná v oleji, kterým je butylovaný hydroxytoluen (BHT); kapalinu Retin AJ což je roztok kyseliny retinové ve směsi polyethylenglykolu a ethanolového rozpouštědla, který se používá jako antioxidační činidlo BHT a je komerčně dostupný od společnosti Ortho PharmaceuLical Corporation ol Raritan, New Jersey; a gel Retin A*, který obsahuje kyselinu retinovou v gelovém vehikulu, ve kterém je jako rozpouštědlo přítomen ethylalkohol a jako zahušťovadlo nebo gelačni činidlo hydroxypropylceluloza a jako antioxidačni činidlo BHT.

Tyto produkty, obsahující kyselinu retinovou, se pyšní stabilitou a schopností poskytovat účinné složky i po dlouhodobějším skladování. Nicméně v nedávné době bylo navrženo širší použiti retinoidů. Zjistilo se, že retinoidy lze kromě léčení akné použít například i pro ochranu kůže před stárnutím v důsledku světelného záření a před poškozením, způsobeným sluncem. U mnoha jedinců, kteří v mládí dobře snášeli působení slunce, se v pozdější dospělosti projevila různá kožní podráždění a změny: vrásčitost, zežloutnutí a povadnutí pokožky, hrubost, vysoušení, žilkování (hyperpígmentace) a různé premaligní růsty. Tyto změny

... Λ _ .ΪΛ ..4---J. ' .. „ ~ „ U _ 1 4-. ' | , j_ ,í. — oe pit;vaóiic u .o-c o v tu l _l zj u. £_'_l i_ _l , rs. v <- ±. usnadno spálí a špatně opalují. Tyto kumulující se účinky slunečního světla se často označují jako „fotostárnutí (stárnutí v důsledku působení světla). Ačkoliv anatomická degradace kůže je nejzřejmější v pokročilejším věku, jsou destrukční účinky nadbytečného slunění patrné již v druhé dekádě věku. Vážná mikroskopická poranění epidermu a dermu existují již v dekádách předcházejících dekádám věku, kdy jsou již viditelná. Vrásky, žloutnutí, tvrdnutí kůže a ztráta elasticity jsou velmi pozdními změnami.

Patent US 4,603,146 navrhuje použití kyseliny vitamínu A ve zvláčňovaclm vehikulu pro zmírnění účinků řotopoškození. Kromě toho patent US 4,877,805 uvádí, že celá řada retinoidů je použitelná pro regeneraci lidské kůže poškozené slunečním zářením.

• flfl · * fl flfl ·

Určité retinoidy, například retínoi (alkohol vitamínu A), retinal (aldehyd vitamínu A) a retinylestery, zejména retinylacetát a retinylpalmitát, mohou být výhodně použity v kompozicích určených k péči o pleť namísto kyseliny retinové. Retinol je endogenní sloučeninou přirozeně se vyskytující v lidském těle a důležitou pro zdravý růst, diferenciaci epitelových tkání a reprodukci. Další výhodou retinolu je jeho lepší snášenlivost s pokožkou, tj. je šetrnější a méně dráždivý než ostatní retinoidy, například kyselina retinová. Kromě toho se přebytečný retinol ukládá v lidském těle, většinou v neaktivní esterové formě, například jako retinylpalmitát a v určitém množství jako retinylacetát. Výhodnou formou je rovněž aldehyd retinal, který je aktivním metabolitem retinalu a je potřebný pro zrakovou funkci.

V souvislosti s tím se p n z ⁿ r ⁿ o st nh r111 1 a k formulaci kompozic určených k péči o pleť, které obsahují tyto výhodné přírodně se vyskytující retinoidy, které mají podobné vlastnosti jako existující kompozice na bázi kyseliny retinové, tj. k poskytnutí kompozice a která by byla estetická a která by mohla dopravovat účinné látky do kůže i po dlouhodobějším skladování.

Existujícími formulacemi obsahujícími retinoidy jsou zpravidla emulze „olej vc vodě, vc kterých je kyselina retinová nesena uvnitř olejové fáze a chráněna před oxidací použitím antioxidačního činidla rozpustného ve vodě. Emulze „olej ve vodě jsou obecně považovány za výhodnější než emulze „voda v oleji, vzhledem k tomu, že jsou neokluzní, nemastné, slučitelné s dalšími takovými emulzními produkty, snadno odstranitelné z pokožky, esteticky přijatelnější a rovněž jejich výroba je ekonomicky výhodnější. Obecně se dá říci, že chemická stabilita aktivní složky, kterou je kyselina retinová, je poměrně dobrá vzhledem k tomu, že je chráněna olejovou bází, zejména v případě, kdy je přítomno antioxidační činidlo rozpustné v oleji, například již zmíněný olej Retin A⁺ je emulzí „olej ve vodě obsahující kyselinu retinovou a jako antioxidant rozpustný v oleji BHT. Patent US 3,906,108 popisuje emulzi „olej ve vodě kyseliny retinové, která může zahrnovat antioxidant rozpustný v oleji, například BHT nebo di-alfa-Lokoferol a chelatizační činidlo, například kyselinu ethylendiamintetraoctovou (EDTA). Patent US 4,466,805 popisuje opalovací kompozici, která může kromě jiných složek zahrnovat vitamín A v emulzi „olej ve vodě obsahující vitamín E a kyselinu citrónovou. V patentu US 4,247,547 je popsána ještě další forma kompozice obsahující kyselinu retinovou, jmenovitě gel, kde je účinná složka chráněna antioxidantem zvoleným ze skupiny zahrnující butylovaný hydroxytoluen, butylovaný hydroxyanisol (BHA), kyselinu askorbovou (vitamín C) , propylgallát a alfa-tokoferol (vitamín E).

Na trhu se objevuje celá řada produktů určených k péči o pleť, do kterých jsou zabudovány další retinoidy, například retinol, retina1 a retinylestery, zejména retinylacetát a retinylpalmitát. Není překvapením, že tyto kompozice napodobuji formule komerčních kompozic na bázi kyseliny retinové a jsou formulovány jako emulze „olej ve vodě a chráněny antioxidanty rozpustnými v oleji. Avšak důvody, proč retinoidy s výjimkou kyseliny retinové rychle ztrácejí • · oxidují nebo což má za v těchto kompozicích svou účinnost a isomerují na neúčinné chemické formy, následek, že množství retinoidu skutečně dostupného pro poskytnutí požadovaných účinků produktu se v nepřijatelně krátké době sníží na neúčinné množství a případně pouze na stopová množství, nejsou dosud zcela známy.

Produkty obsahující retinoidy se omezily na emulze „olej ve vodě a pokud jde o produkty obsahující jiné retinoidy než kyselinu retinovou, tyto trpí chemickou nestabilitou, nicméně v několika případech se vyrobily produkty a/nebo navrhly produkty obsahující retinoidy, jakými jsou například retinol, retinylacetát, retinylpalmitát, ve formě emulzí „voda v oleji.

Takže například patent US 4,826,828 popisuje stabilní kompozici obsahující retinol, retinylacetát a retinylpalmitát, které mohou obsahovat retinol v emulzi „voda v oleji, ve které emulze dále zahrnuje dva antioxídanty rozpustné v oleji, BHT a BHA.

Společnost Avon Products, lne., získala patent (US 4,826,828) na dva produkty určené k péči o pleť, prodávané pod označením Bioadvance a Bíoadvance 2000. Oba tyto produkty jsou dodávány ve dvou láhvích, jejichž části se vzájemně smíchají bezprostředně před použitím. První lahvička obsahuje tzv, „pleťový lotion, zatímco druhá lahvička obsahuje tzv. „ztužovadlo. „Pleťový lotion je emulzi „voda v oleji obsahující celou řadu přísad, které zahrnují vodu, emulgátory, silikon a rostlinné oleje, konzervační činidla, změkčovadla a butylovaný hydroxytoluen (BI1T) . „Ztužovadlo je bezvodým roztokem, který obsahuje • · * « nese oznámeni,

BIOADVANCE začíná množství přísad včetně cyklomethikonu (silikonového oleje), denaturovaného ethanolu, emulgátoru (Polysorbátu 20), retinolu, retinylacetátu, retínylpalmitátu, BHT a BHA. Jakmile se specifi kovaná část ztužovadla přidá do specifikované části „pleťového lotionu a smíchá, získá se emulze „voda v oleji, která obsahuje retinol, retinylcetát, retinylpalmitát, BHT a BHA, což jsou antioxidanty rozpustné v oleji. Vnější obal, ve kterém je produkt Bioadvance dodáván, které říká: „Vzhledem k tomu, že jednom míšení ztrácet svou po ť ř o bt o n r o, 7 o o a v £ η í 'w Λ-' CA i i -i.

i x i m 31 π i h o úspěch li použít každý měsíc čerstvou dávku. Z tohoto tvrzení se dá usuzovat, že chemická stabilita retinoidů ve směsi „pleťového lotionu a „ztužovadla je poměrně omezená. Skutečnost, že jak v produktu Bioadvance, tak v produktu Bioadvance 200 musí být přísady ztužovadla smíseny s přísadami „pleťového lotionu bezprostředně před použitím naznačuje, že výsledná emulze „voda v oleji, která se aplikuje na pokožku, má rovněž omezenou chemickou stabilitu, pokud jde o jeden nebo více výše zmíněných retinoidů zahrnujících retinol, retinylacetát a retinylpalmitát.

Patent US 4,720,353 (Bell) popisuje emulzní nosiče („voda v oleji) pro různá léčiva a účinné látky, určené pro místní aplikaci na pokožku. Vodou rozpustné mísitelná nebo dispergovatelné účinně lácky lze zabudovat do vodné fáze emulze. Olejem rozpustné mísitelné nebo dispergovatelné účinné látky lze zabudovat do olejové fáze. Účinné látky, které lze zabudovat do emulze zahrnují deriváty kyseliny retinové. Přísady, které mohou být případně přidány do emulze zahrnují konzervační činidla, například methylparaben, propylparaben nebo imidazolidinylmočovinu nebo antioxidant, například butylovaný hydroxyanisol a vodou nebo olejem rozpustný vitamin, například vitamin C, tokoferollinoleát apod..

Patent EP 0,343,444 A2 (Siemer a kol.) popisuje kosmetické přípravky na bázi retinylpalmitátu. Příklad 3 popisuje noční krém, který má formu emulze „voda v oleji obsahující retinylpalmitát a butylovaný hydroxyanisol (BHA). Příklad 4 popisuje emulzi „voda v oleji obsahující retinylacetát a alfa-tokoferol (vitamín E).

Patent EP 0,330,496 A2 (Batt) popisuje kompozice určené k ošetření pleti obsahující místně přijatelnou bázi a účinné množství alespoň jednoho retinolu. Tyto kompozice se používají při ošetření pokožky, zestárlé v důsledku působení světla. Příklad 6 popisuje emulzi voda v oleji obsahující propionát vitamínu A a BHT jako antioxidant rozpustný v oleji.

Naneštěstí žádný z těchto dřívějších pokusů napodobit stabilitu kompozic obsahujících kyselinu retinovou, prováděných za použití jiných retinoidů než kyseliny retinové nebyl úspěšný a ve všech případech se dosáhlo značné a nepři jaté].né chemické nestability zde použitého retinolu, retinalu nebo retinylesterů. Proto vznikla potřeba vytvořit kompozici, ve které by mohly být retinoidy jiné než retinová kyselina přítomny v chemicky stabilní formě.

Jonas C. T. Wang a kol. popisuje v patentové přihlášce USSN 719, 764, podané 15. listopadu 1.993 • · • · stabilizaci retinolu v emulzi „voda v oleji”, ve které je retinol dispergován a chráněn v olejové bázi. Nicméně jak již bylo uvedeno, emulze typu „olej ve vodě” jsou mnohem výhodnější, než emulze typu „voda v oleji”, pokud jde o kosmetické aplikace. To je dáno skutečností, že emulze typu „olej ve vodě” jsou zpravidla méně okluzní, méně mastné a slučitelné s dalšími produkty, jako je například make-up, a snadno se odstraňují z pokožky a z estetického hlediska jsou tedy přijatelnější. Kromě toho formulace typu „olej ve vodě lze považovat za ekonomičtější z hlediska složení přísad a výrobního procesu.

Proto je žádoucí vyvinout účinné a rovněž kosmeticky přijatelné produkty určené k péči o pleť obsahující retinoidy zahrnující kyselinu retinovou, retinal, retinol a retinylestery, které by rozšířily nnii7Ítí rptinnli] oři ošetřování Dleli.

IU “ * i i.

Dalším cílem vynálezu je poskytnout kompozice obsahující retinoidy určené k péči o pleť, které by měly přijatelnou skladovatelnost.

Ještě dalším cílem vynálezu je poskytnou kompozici obsahující retinoidy určenou k péči o pleť, která umožní v průběhu doby kontrolované uvolňování účinných složek do pokožky.

Dalším cílem vynálezu je poskytnout způsob výroby stabilní kompozice obsahující retinoidy určené k péči o pleť, která by si zachovala dlouhodobější účinnost.

Ještě dalším cílem vynálezu je poskytnutí kompozic určených k péči o pleť, které by byly relativně • · «99 9 nedráždivé, ale současně ještě účinné, pokud jde o dopravu účinné složky do pokožky.

Dalši cíle tohoto vynálezu se stanou zřejmějšími po prostudování následujícího popisu.

Podstata vynálezu

Jak již bylo uvedeno, nyní se neočekávaně zjistilo, že určité retinoidy lze úspěšně stabilizovat proti chemické degradací. Jejích zabudování do liposomů prostých fosfolipidů pomocí speciticky definovaného stabilizačního systému a stabilizačního procesu. Retinoidy, které lze stabilizovat proti chemické degradaci způsobem podle vynálezu zahrnují retinol (alkohol vitamínu A), retinal (aldehyd vitamínu A), retinylacetát, retinylpalmitát a jejich směsi.

Výraz „chemická stabilita nebo „stabilita retinoidů, jak je zde použit, znamená procentické množství specifikovaného retinoidů, který zůstane potom, co byla kompozice skladována po specifikovanou časovou periodu při specifikované teplotě v původní chemické formě. Takže pokud byla původní koncentrace trans-retinolu v absolutním ethanolovém roztoku 0,20 hm. % a po dvoutýdenním skladování při pokojové teplotě (21°C + 1°C), činila koncentrace tohoto transretinolu 0,18 hm. %, potom by bylo možné původní roztok trans-retinolu v absolutním ethanolu charakterizovat jako roztok, mající po dvoutýdenním skladování při pokojové teplotě devadesátiprocentní chemickou stabilitu retinolu. Stejně tak pokud měla nefosfolipidová liposomová formulace obsahující trans9 · retinol v počáteční koncentraci 30 hm. % a po třináctitýdenním skladování při 50°C měla koncentraci trans-retinolu 0,24 hm. %, potom by bylo možné původní emulzi charakterizovat jako emulzi mající po třináctitýdenním skladování při 50°C osmdesátiprocentní chemickou stabilitu retinolu.

Pro specifické retínoidy, které jsou předmětem vynálezu, bude nefosfolipidová líposomová forma v kombinaci s volbou stabilizačního systému produkovat kompozice mající po třináctitýdenním skladování při 50°C osmdesátiprocentní chemickou stabilitu. Předložený vynález poskytuje systém pro stabilizaci retinoidů, který neočekávaně postrádá antioxidant rozpustný ve vodě.

Jak již bylo uvedeno, kompozice určená k péči o pleť obsahující nefosfolipidový liposom a retinoid zvolený ze skupiny zahrnující retinol, retinal, retinylacetát, retinylpalmitát a jejich směsi dále obsahuje stabilizační systém zvolený ze skupiny zahrnuj icí:

a) antioxidant rozpustný v oleji;

b) chelatizační činidlo a alespoň jeden antioxidant rozpustný v oleji;

přičemž tato kompozice má pH hodnotu pohybující se přibližně v rozmezí od 5 do 10 a po třináctitýdenním skladování při 50°C zachovává přibližně alespoň 80 % zmíněných retinoidů ve své účinné aktivní formě.

Rovněž se neočekávaně zjistilo, že kompozice mohou být obdařeny materiálovými změnami, které mají za νινί ·· 4 «44« 44 4 · 4 4 4 4 4 ·

4 44 4 444444 *444 4 4 4«

4« 44 4 444 4 4 4 následek kontrolované uvolňování účinné složky z liposomového nosiče. Kompozice podle vynálezu mohou být rovněž sestaveny tak, aby zlepšovaly nebo zhoršovaly pronikání účinné látky do kůže.

Kompozice podle vynálezu obsahující relativně vysoké množství povrchově aktivních činidel, například více než 8 %, vykazují překvapivě úroveň podráždění, kterou by bylo možné očekávat u jednotlivců, vystavených působení krémů typu „voda v oleji obsahujících 2 % povrchově aktivního činidla.

Stručný popis obrázků

Obr. 1 znázorňuje graf vyjadřující závislost vlivu pH hodnoty na stabilitě retinolu v l.i posomových formulacích prostých fosfolipidů;

obr. 2 znázorňuje graf vyjadřující srovnání množství retinolu uvolněného z formulace z příkladu 8C s množstvím retinolu uvolněného z formulace typu „voda v oleji;

obr. 3 znázorňuje graf vyjadřující srovnání množství účinné složky, která prostupuje epidermem a dermem z formulace z příkladů 8C a 6 s množstvím účinné přísady z formulace typu „voda v o.lej.i;

obr. 4 znázorňuje graf vyjadřujících srovnání senzorických vjemů určitých formulací podle vynálezu s dalšími kompozicemi, určenými k péči o p].eť.

Jak již bylo uvedeno, kompozice podle vynálezu má formu určitého typu liposomů, konkrétně nefosfolipidového liposomů.

Nejběžnějšími kompozicemi určenými k péčí o pleť, například kompozicemi obsahujícími retinovou kyselinu, jsou emulzní systémy typu olej ve vodě. V těchto emulzních systémech typu „olej ve vodě mohou mít určité retinoidové sloučeniny, zejména retinol, retinal a retinylestery tendenci být chemicky nestabilní, tj. mohou degradovat v důsledku oxidace nebo isomerace a proto nejsou dostupné pro vykonávání zamýšleného účinku a i když to není zcela zřejmé, dá se předpokládat, že k této degradaci dochází v důsledku rychlé difúze kyslíku vnější vodnou fází do vnitřní olejové fáze obsahující retinoid. Kyslík, je tedy pro degradací retinoidů snadno dostupný. Vzhledem k tomu, že difúze kyslíku je ve vodné fázi větší než olejové fázi má systém typu „olej ve vodě větší tendence podléhat této degradaci.

Kompozice podle vynálezu překonávají tyto nedostatky a představují nefosfolipidovou liposomovou kompozici obsahující alespoň jednu retinovou sloučeninu, ve které je jak fyzikální stabilita lipozomů, tak chemická stabilita účinných složek udržována na vysoké úrovni.

Liposomy jsou sférické samouzavřené struktury tvořené zakřivenými lipidovými dvoj vrstvami, které zachycují část. rozpouštědla, vc kterém volně plovou do svého vnitřku. Mohou být tvořeny jednou nebo několika soustřednými membránami. Liposomy se vyrábí převážně z amfifilů, což je zvláštní třída povrchově aktivních molekul, které se vyznačují tím, žc mají na stejné • v · « • · · ·· · · · · Λ i · · * · 9 9 9 • · · * · ···«·· • · · · * · » » ^...........

molekule hydrofilní a hydrofobní skupinu. Tyto molekuly nejsou rozpustné ve vodě, a spíše než roztoky, tvoří koloídní disperze.

Do současné doby se liposomová technologie zaměřovala převážně na bubliny, tvořené fosfolipidem. Fosfolipidy jsou labilní a pokud jde o jejich čištění nebo syntézu neekonomické. Navíc výroba fosfolipidových liposomů je v průmyslovém měřítku náročná a ekonomicky nepřijatelná. Tyto skutečnosti byly důvodem pro zvýšený zájem o získání nefosfolipidových liposomů. Určité syntetické povrchově aktivní látky s dvojitým řetězcem, aniontovými polárními hlavami a povrchově aktivní činidla s jednoduchým řetězcem ve směsi s cholesterolem, mohou tvořit neíontový liposom. Tyto liposomy mají zvýšenou chemickou stabilitu oproti přírodním fosfolipidům a jejich výroba ve velkém průmyslovém měřítku není tak náročná. Protože na rozpustnost struktury těchto agregátů má rovněž vliv řazení lipidových molekul, má hydrofilní část tendenci být v kontaktu s vodou, zatímco hydrofobní uhlíkové řetězce se raději před vodou skrývají ve vnitřní části struktur. Jednou z nejčastěji se vyskytujících agregátových struktur je lípidová dvojvrstva. Na površích obou stran jsou polární hlavy, které chrání polární paty uvnitř vrstvy před vodou. Při vyšších koncentracích lip.i.dů tyto dvojvrstvy tvoří vrstvené krystalické fáze, ve kterých se dvojrozměrné rovinné lípídové dvojvrstvy střídají s vodními vrstvami. Po naředění tyto lipidové dvojvrstvy vytvoří liposomy.

Tyto liposomy mohou zachytit hydrofilní materiály ve vodních komůrkách a lipofilní materiály ve zmíněných dvoj vrstvách. Molekuly, které se zachycují ve * * • · · dvoj vrstvách, jsou někdy označovány jako „kargomolekuly. Lipofllní záchyt je vážně omezen schopností dvoj vrstvy zachytit „kargo-molekulu. Liposomy mohou být velké nebo malé a mohou být tvořeny jednou až několika desítkami soustředných dvojvrstev. Pokud jde o velikost a počet vrstev lze rozlišit velké vícevrstvé bubliny (MLV) a velké a malé jednovrstvé bubliny (LUV, resp. SUV). Do současné doby se výzkumy zaměřovaly na výše zmíněný typ bublin.

V nedávné době Donald F. H. Wallach (patent US 4,911,928) popisuje další typ lipidových bublin, kterými jsou méněvrstvé lipidové bubliny (PLV). Vynález popisuje tyto méněvrsvé lipidové bubliny, které jsou tvořeny dvěma až osmi periferními dvojvrstvami obklopujícími velkou nestrukturovanou centrální dutinu, která může být vyplněna zcela nebo zčásti nepolárním olejem nebo voskem. Množina lipidových dvojvrstev a nepolární jádro méněvrstvých lipidových bublin umožňuje těmto bublinám transportovat větší množví lipofilních materiálů.

Donald F. H. Wallach (patent US 5,147,123) dále popisuje nefosfolipidová povrchově aktivní činidla, která mohou tvořit méněvrsvé lipidové bubliny. Toto povrchově aktivní činidlo lze zvolit ze skupiny zahrnující polyoxyethylenové mastné estery, mající obecný vzorec Ri-COO (C2H4O) _nH, ve kterém Fh znamená radikál kyseliny laurové, myristové, cetylové, stearové nebo olejové a n znamená celé číslo od dvou do desíti; polyoxyethylenové éthery mastných kyselin mající obecný vzorec R₂-CO (C2H4O) _mH, ve kterém Ed znamená radikál kyseliny, stearové nebo olejové, jednoduše nebo dvojně nenasycených oktadekylových kyselin nebo dvojně • · · • · nenasycených eikodienových kyselin a m zmámená celé číslo od dvou do Čtyř; mono- nebo trioleát polyoxyethylen(20)sorbitanu; a polyoxyethylenglycerilmonostearát s jednou až deseti polyoxyethylenovými skupinami.

hydroxyanisol naftylamin, za j írnavých například butylovaný fenyl-alfakyselina

Všechny tyto struktu mají mnoho fyzikálních a chemických vlastností, osmotickou účinnost, propustnost jejich membrán pro různé rozpuštěné látky, solubilizační sílu, interakci s různými hydrofobními a hydrofilními rozpuštěnými látkami nebo agregační chování, které může záviset na teplotě, chemickém složení a povrchových vlastnostech membrány a přítomnosti různých činidel.

Antioxidanty, rozpustné v oleji, které lze použít v rámci kompozic podle vynálezu zahrnuji butylovaný hydroxytoluen (BHT) , askorbylpalmitát, (BHA), alfa-tokoferol, hydrochinon, propylgallát, nordihydroguiarová a jejich směsi, stejně jako libovolná další známá v oleji rozpustná antioxidační činidla, slučitelná s dalšími složkami kompozic.

Antioxidační činidla, rozpustná v oleji použitelná v kompozicích podle vynálezu, mohou být použita ve stabilizačně účinném množství, které se může pohybovat v rozmezí přibližně od 0,001 do 5 hm. %, vztaženo k celkové hmotnosti kompozice, a výhodně přibližně v rozmezí 0,01 do 1 hm. %. Množství antioxidantů, použitých v kompozicích podle vynálezu závisí částečně na aktuální volbě antioxidantů, množství a typu retinoidu, který má být chhráněn a provozních podmínkách. Retinolová formulace by mohla například « · zahrnovat přibližně 0,01 až 1 hm. % BHT. Retinalová formulace by mohla rovněž zahrnovat přibližně 0,01 až hm. %.

V určitých provedeních vynálezu mohou kompozice zahrnovat chelatizační činidlo, jehož úkolem je v průběhu výrobního procesu minimalizovat kontaminaci kovových iontů. Retínoidové sloučeniny podle vynálezu jsou citlivé na kovové ionty a zejména na dvojmocné a trojmocné katíonty a v určitých případech se zdá, že v jejich přítomnosti rychle degradují. Chelatizační činidlo tvoří s kovovými ionty komplex, čímž je deaktivuje, a brání jim v ovlivňování retinoidových sloučenin. Chelatizační činidla, která lze použít v kompozicích podle vynálezu ethylendiamintetraoctovou kyselinu (EDTA) deriváty soli, dihydroxyethylglicín, zahrnuj i a její kyselinu směsi.

jej ich kyselinu tartarovou a Chelatizační činidla lze použít ve stabilizačně účinném množství, které se může pohybovat přibližně v rozmezí od 0,01 do 2 hm. %, vztaženo k hmotnosti celkové kompozice a výhodně přibližně v rozmezí od 0,05 do 1 hm. %.

(retinoi), vitamínu A

Retínoidové sloučeniny, které lze použít v kompozicích podle vynálezu tvoří alkohol vitamínu A aldehyd vitamínu A (retínal) a estery (retinylacetát a retinylpalmitát). Tyto retinoidy se používají v daných kompozicích podle vynálezu v terapeuticky účinném množství, které se může pohybovat přibližně v rozmezí od 0,001 do 5 hm. %, vztaženo k celkové hmotnosti kompozice a výhodně přibližně v rozmezí od 0,001 do 1 hm. %.

« ·

Kompozice určené k péči o pleť podle vynálezu neobsahující fosfolipidy mohou mít podle potřeby formu krému nebo lotionu, přičemž tyto formy se liší vzájemným poměrem lipidové a vodné fáze emulze, přičemž pH hodnota těchto kompozic by se měla pohybovat přibližně v rozmezí od 5 do 9 a výhodně přibližně v rozmezí od 5 do 7.

Pro účely vynálezu lze zvolit libovolnou formulaci z celé řady formulací krémového nebo lotionového typu, které se v současnosti pouužívají v přípravcích určených k péči o pleť za předpokladu, že nebude fosfolipidová a že bude chemicky slučitelná s retinoidovými sloučeninami. Poměr olejové fáze nefosfolipidového liposomu ve vodní fází se přibližně může pohybovat v rozmezí od 5 : 95 do 40 : 60. Skutečný poměr těchto dvou částí bude záviset na požadovaném konečném produktu.

Výhody vynálezu a specifická provedení kompozit určených k péči o pleť připravená podle vynálezu stejně jako srovnání s kompozicemi nespadajími do rozsahu vynálezu ilustrují následující příklady. Nicméně je zřejmé, že tato příkladná provedení mají pouze ilustrativní charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen přiloženými patentovými nároky.

* · · • 0 • · *

Příklady provedení vynálezu

Kontrolní příklad 1

Připravily se tři vitaminu A) typu „olej emulze retinolu (alkoholu ve vodě mající složení (% hm./hm.) uvedená v tabulce 1. Výraz „o/v v tabulce 1 označuje kompzici typu „olej ve vodě. Tyto emulze se připravily následujícím způsobem. Přísady, jejichž výčet je uveden pod záhlavím „přísady vodní f Λ 7P' <=: P- r\riHal\7 Hr

- - U. J £_· A A -U.

;1τΊ íCO ΩΓιό Ci ro w o t vcmo ώ v e* v i. v m míchadlem z nerezavějící ocele a ohřívaly za stálého míchání na teplotu 75 až 85°C pod argonovou atmosférou. Přísady uvedené pod záhlavím „přísady olejové fáze se přidaly do druhé skleněné nádoby opatřené míchadlem z nerezavějící ocele a ohřívaly za stálého míchání na teplotu přibližně od 85°C do 90°C rovněž pod argonovou atmosférou. Přísady, uvedené pod záhlavím „retínoidová směs se přidaly do třetí skleněné nádoby opatřené míchadlem z nerezavějící ocele a míchaly při pokojové atmosférou. V míchání se případech až do dosažení homogenity. Složky vodné fáze se následně přidaly při teplotě 75 až 85°C do složek olejové fáze. Během tohoto kroku se teplota složek olejové fáze udržovala v rozmezí od 85 do 90°C a složky se nadále míchaly pod argonovou atmosférou. Směs složek vodné fáze a složek olejové fáze se míchaly při teplotě 90°C pod argonovou atmosférou až do dosažení rovnoměrné emulze typu „olej ve vodě. Po ochlazení výsledné emulze přibližně na teplotu 50 až 53°C se přidala za stálého míchání teplotě pod argonovou pokračovalo ve všech

• · retinoidová směs. Emulze se udržovala pod argonovou atmosférou při teplotě 50 až 53°C v průběhu celého přidávání retinoidové směsi. Po přidání celého množství této směsi se emulze postupně za stálého míchání pod argonovou atmosférou ochladila na pokojovou teplotu (přibližně 21°C). Finální emulze se následně přemístila pod argonovou atmosférou do hliníkových trubic s jedním uzavřeným koncem (56,8 cm³), které se rychle a pevně uzavřely. Uzavřené trubice se následně daly stranou za účelem stanovení stability retinolu po různě dlouhém skladování při různých teplotách. Retino! degraduje v důsledku působení UV záření. Proto je třeba ve všech stupních přípravy emulze důkladně chránit retinol před působením UV záření. Tuto ochranu lze zajistit zhasnutím světel v provozní oblasti nebo prováděním různých manipulačních nebo zpracovatelských kroků pod žlutým světlem.

TABULKA 1

ABC

Označení vzorku Složky vodné fáze

Voda, a. s. 100 %	—	—	—
Propylenglykol	4,00	4,00	4,00
Carbomer 934	0,50	0,50	0, 50

Složky olejové fáze

Směs A	8,75	8,75	6,75
Polysorbát 61 (Tween 61)	1,20	1,20	1,25
Dimethikan	1,00	1,00	1,00
Sorbitanstearát	0,80	0,80	0, 80

• · · · to ·

Retinoidová směs

Kyselina askorbová	0,00	0,00	0, 10
EDTA	0,00	0, 10	0, 10
Benzylalkohol	0, 30	0,30	0,30
50 % NaOh, u.s. OH 4,7	—	—	—
Methylparaben	0, 15	0, 15	0, 15
Propylparaben	0, 10	0,10	0,10
Butylparaben	0,05	0,05	0,05
BHT	0,02	0, 02	0, 02
Vůně	0,25	0,25	0,25
Retinol (pouze trans.), USP	i on 1 _r U Ό	0 _z 8 6	η n r~ u a o
Emulzni typ	o/v	o/v	o/v

Ve výše uvedené tabulce 1 je složka olejové fáze označena jako směs A tvořená 1,50 g myristy.1 myristátu; 1,25 g kyseliny olejové (Emersol 228); 1,25 g grycerylstearátu (Emerest 2400); 1,25 g kyseliny stearové (Emersol 132); 1,00 g ísopropylpalmitátu; 1,00 g stearoxytrimethylsilanu (Dow Corning 580 Wax); 0,50 g syntetického včelího vosku; 0,50 g stearylalkoholu; a 0,50 g cetylalkoholu. Směs A se připravila smísením jmenovaných složek ve skleněné nádobě a mícháním za stálého ohřevu až do okamžiku, kdy složky zkapalněly a vytvořily homogenní směs; nalitím kapalné směsi do mělké nádoby; a ochazenírr. směsi na pokojovou teplotu.

Koncentrace trans-retinolu ve vzorcích emulze typu „olej ve vodě A, B a C v tabulce 1 se určovaly po různě dlouhé době skladováni, při různých teplotách. Koncentrace retinolu a dalších retinoi.dů, například retinalu (aldehydu vitamínu A) , retinylacetátu a naředil roztokem ethylacetátu na retinylpalmitátu lze určit pomoci libovolného analytického postupu. Jak je zde uvedeno, v těchto příkladech se koncentrace retinoidů stanovily pomocí vysokovýkonné kapalinové chromatografie (HPLC), na chromatografu opatřeném 5 mikrometrovou kolonou C-8 s reverzní fázi (25 cm délka x 4,6 mm průměr) a UV detektorem při 340 nm. Vzorek určený pro analýzu se 50 hm. % methanolu a 50 hm. % koncentraci 18 mikrogramů/ml a retinoid se určil při 340 nm. GradienČni mobilní fázi představovala organická část tvořená pěti procenty i oh a o vvdrořn r on li v η η ΰ h n r. i h - lil n viňdn Λ 7 m. c; Ή /hhcahniin

V A . _i_ í- -X- o--*— - - -4 j -χ. X- —

0,05N octanu amonného. Rozpouštědlový program z počátečního složení: 70 % organické /30 % vodné postupně v průběhu třinácti minut lineárně vzrostl na 80 % organické/20 % vodné a posléze během patnácti minut opět lineárně vzrostlo na 100 % organické, přičemž toto složení zůstalo stabilní dalších devatenáct minut. Po vstříknutí 15 mikrolitrů testovaného roztoku do chromatografu se rozběhla analýza pří průtoku 2 ml/min a teplota se udržovala na hodnotě 40°C. Retenční doba retinolu (alkoholu vitamínu přibližně 6,4 minut. Retenční časy ret.inalu je (aldehydu vitamínu A), retinylacetátu a retinylpalmitátu jsou přibližně 7,5 min, 10,1 min, resp. 18,7 min. Zjistilo se, že výsledky HPLC jsou reprodukovatelné s odchylkou menší než + 3 i standardní odchylky.

Dosažené výsledky byly následující:

Pro vzorek A: Po 26 týdnech stárnutí při pokojové teplotě (21°C + 10^cC), bylo v emulzi zjištěno pouze 39 % původního množství trans-retínolu. Po 26 týdnech •· 4 4 «4 • 44 4

4 stárnutí při 40°C byla v emulzi nalezena pouze 3 % původního množství trans-retinolu. Z těchto výsledků vyplývá, že emulze typu „olej ve vodě obsahující retinol a butylovaný hydroxytoluen (BHT) jako antioxidant rozpustný v oleji nemá přijatelnou chemickou stabilitu pokud jde o retinol.

Pro příklad B: Po třinácti týdnech stárnutí při pokojové teplotě se v emulzi zjistilo pouze 87 % původního množství trans-retinolu. Po třinácti týdnech stárnuti při 40°C se v emulzi zjistily přesně 4 % původního množství trans-retinolu. Po třinácti týdnech stárnutí při 50°C se v B vzorku emulze nezjistilo žádné množství trans-retinové kyseliny. Po 26 týdnech stárnutí při pokojové teplotě se v emulzi zjistilo 57 % původního množství trans-retinolu. Z těchto výsledků vyplývá, že chemická stabilita trans-retinolu v emulzi tvou ..nlpi ve vnriž eHcehující trans —retinol, BHT a EDTA disodný (chelatizační činidlo) není přijatelná.

Pro příklad C: Po třinácti týdnech stárnutí při pokojové teplotě se v emulzi zjistilo pouze 60 % původního množství trans-retinolu, zatímco po třinácti týdnech stárnutí při 40°C se v emulzi zjistilo 23 % původního množství trans-retinolu. Po třinácti týdnech skladování při 50°C se v C vzorku emulze nezjistilo žádné množství trans-retinolu.

Po 26 týdnech stárnutí při pokojové teplotě bylo ve vzorku C zjištěno pouze 42 % původního množství trans-retinolu. Po 52 týdnech stárnutí při pokojové teplotě bylo ve vzorku C nalezeno pouze 31 % původního množství trans-retinolu.

·· ····

··· *· φ

Z těchto výsledků vyplývá, že chemická stabilita trans-retinolu v emulzi typu „olej ve vodě obsahující trans-retinol a butylovaný hydroxytoluen (BHT) jako antioxidant rozpustný v oleji, vodou rozpustný antioxidant (kyselinu askorbovou) a chelatizační činidlo (kyselinu ethylendiamintetraoctovou) není chemicky přijatelná.

Kontrolní příklad 2

V tomto příkladu byla společností CIT.AG AG připravena fosfolipidová líposomová formulace retinolu (alkoholu vitaminu A) mající složení (% hm./hm.) uvedené v tabulce 2. Po čtyřtýdenním stárnutí při 50°C bylo ve formulaci zjištěno pouze 64,87 % původního množství retinolu, takže ani tato formulace nesplnila kritéria stanovená pro chemickou stabilitu.

·· ·«·*

• * · ·

Tabulka 2

Složky	% hm./hm.
Čištěná voda	81,44
Lecitinová čištěná sója	7,50
Cholesterol	1,00
Ethanol	8,00
BHT	0,01
Methylparaben	0, 14
Propylparaben	0,01
Dihydrát ethylendiamintetraacetátu disodného	0,10
Monohydrát kyseliny citrónové	0,23
Hydroxid sodný	0,44
Carbomer 934P	0,80
Retinol (45 %)	0, 33

Kontrolní příklad 3

V tomto příkladu byla společností BioZone připravena za použití postupů popsaných v patentech US 4,485,054 a 4,761,288 fosfolipidová lipozomová formulace retinolu (alkoholu vitamínu A). Po čtyřtýdenním stárnutí při 50°C bylo ve formulaci zjištěno pouze 64,61 % původního množství retinolu, takže tato formulace rovněž nesplňuje kritéria stability.

Kontrolní příklad 4

V tomto příkladu se použila formulace připravená společností Micro Vesicular Systems, lne. of New Jersey podle patentu US 4,911,928. Po dvanáct itýdenním • · 4444 a ^w ·

........

• 4 4 4 * ·· · 444 444 « stárnutí při 50°C, 40°C a pokojové teplotě se ve formulaci zjistilo pouze 58,1 %, 79,4 %, resp. 89,3 % původního množství retinolu, takže tato formulace rovněž nesplnila kritéria stability.

Výsledky jasně demonstrují, že retinol byl mnohem stabilnější jak v lipidovém, tak v nelipidovém liposomovém typu formulace než v emulzi typu „olej ve vodě. I když je retinol částečně stabilizován, pokud se při hodnocení postupuje od typu formulace „olej ve vodě k nefosfolipídovému liposomu, dosáhlo se pouze dvanáctitýdenní skladovatelnost při pokojové teplotě, což je stále chemicky nepřijatelné.

Příklad 5 a 6

Retinol se zapouzdřil v nefosfolipidové liposomové formulaci při následujícím složení níže popsaným způsobem. Finální formulace měla pH hodnotu 5,6.

·· ·*··

	• « • 26	· • · • ♦ · ♦ · · ·	♦ · · · · * · ····» • · · · ·····♦ «, ,
Olejová fáze	Příklad 5	Příklad 6
	% hm.	/hm.	% hm./hm.
Kaprylikapriktriglycerid	10,00	o 0	10,00 %
Cholesterol	5, 56	Q, '0	6,80 %
Glyceryldistearét	4, 33	O Ό	5, 30 %
Stearylalkohol	3, 90	O O	4,75 %
Steareth-10	3,28	O. 0	4,00 %
Glycerylmonostearát	2,08	0 0	2,55 %
Polysorbate 80	1, 00	%	1,05 %
Tokofero]acetát	0, 15	0 0	0,34 %
Butylovaný hydroxytoluen	0, 05	0 ó	0,05 %
Vodná fáze
Deionozovaná voda	68,14	0 'c	63, 90 %
Kyselina citrónová	0, 13	o, o	0, 12 %
Hydroxid sodný	0,03	0 o	0,07 %
Methylparaben	0,20	o 'σ	0,20 %
Propylparaben	0,03	C	0,03 %
Aktivní složka
Retinol (45 % hm./hm.)	1,12	o 'P	0,34 %
Pod žlutým světlem	a uvnitř argonové	atmosféry,
která sloužila k omezení	množství kyslíku ve	formulaci,
se vzájemně smísily složky olejové fáze a	ohřály na

·· · · · · teplotu přibližně 35°C. Složky vodné fáze se posléze rovněž smísily a ohřály na teplotu 85°C a následně ochladily na 60°C. Vodná fáze se následně propláchla argonem za účelem odstranění kyslíku. „Novosome, výrobní stroj na liposomy od společnosti Micro Vesicular Systems of New Jersey komerčně dostupný a popsaný v patentu US 4,895,452 se vytemperoval na teplo tu 60°C čerpáním vodné fáze skrze zařízení. 1,13 % retinolu (45 % aktivní složky) se přidalo do olejové fáze. Jak vodná fáze, tak olejová fáze se čerpaly skrze zařízení na výrobu liposomů „Novosome a produkt se shromažďoval v nerezovém, ocelovým pláštěm opatřeném kotli, který se nacházel pod argonovou atmosférou. Kotel byl opatřen škrabkou/míchadlem, zubovým koloidním mlýnem, rozpouštěcím a vakuovým odvzdusňovacím systémem. Produkt se vakuoval až do okamžiku, kdy tlak v kotli klesl pod 0,8 mBar. Produkty se balily do pro ně určených obalů pod argonovou atmosférou. Vlastní obaly mohly tvořit hliníkové tuby, plechovky, pumpičky a/nebo spreje.

Výsledky stability uvedené v tabulkách 3 a 4 jasně ukazují, že retinol je mnohem stabilnější v přikladech 5 a 6 než v příkladu 4 a že v těchto příkladech splňuje kritéria stability vzhledem k tomu, že po třináctítýdenním skladování při 50°C se zachovalo 80 % původního množství retinolu. Pokud jde o stabilitu retinolu, který byl v dané formulaci obsažen v koncentracích představujících 0,153 % až 0,504 1, nebyl zaznamenán podstatný rozdíl.

• · ···· ·« ··« «·

Tabulka 3

Stability retinolu v příkladu 5 při různých teplotách

	% retinolu	% počáteční	pH
Na počátku	0,5059	100	5,53
3 týdny 50°C	0,4498	88,91	5,32
8 týdnů 40°C	0,4704	92, 98	5,36
50°C	0,4636	91, 64	5,32
13 týdnů	0,4884	97,0	r -i O, O i
40°C	0,4566	90, 69	5, 33
50°C	0,4355	86, 5	5,22
26 týdnů 30°C	0,4754	93, 97	5,4 3
40°C	0,4454	88,04	5,28

Stability retinolu v příkladu 6 při různých teplotách ·» ·»·· ««

Tabulka 4

	% retinolu	% počáteční	pH
Na počátku	0,153	100	5, 64
4 týdny 40°C	0,143	93,46	5,65
50°C	0,142	92,81	5, 61
8 týdnů 40°C	0,1375	89, 87	5, 60
50°C	0,1355	88,56	5,56
13 týdnů 40°C	0,1335	87,25	5,55
50’C	0,1275	83, 33	5, 55
20 týdnů 30°C	0,1375	89, 87	5,69
40°C	0,1295	84,64	5, 62
50°C	0,1220	79,74	5,56

Příklad 7

Za účelem dalšího zlepšení formulací podle vynálezu se připravila v tmavé komoře v nepřítomnosti argonové atmosféry níže uvedeným způsobem formulace za použití kyseliny askorbové jako vodou rozpustného antioxidantu a EDTA disodného jako chelatizačního činídla.

Údaje shrnuté v tabulce 5 dávají tušit, že stabilita retinolu v příkladu 7 bude srovnatelná se stabilitou retinolu v příkladu 5, kdy se kompozice připravovala sice bez použití kyseliny askorbové a EDTA ** v « ·« • *· · žlutým světlem a argonovou rovněž ukazují, že přidání kyseliny askorbové a EDTA disodného by mohlo zvýšit chemickou stabilitu retinolu v liposomech „Novasome bez toho, že by bylo zapotřebí argonové atmosféry, takže v kompozicích podle vynálezu mohou být rovněž vodou rozpustné antioxidanty, disodného, ale pod atmosférou. Výsledky použity kyselina sodný, například askorbová, bisulfit siřičitan sodný, metabisulfit formaldehydsulfoxylát sodný, sodný, thioglycerol, thiosorbitol, thíosulfit sodný, kyselina isoaskorbová, thiomočovina, kyselina t^rn nnl vlrnl mrá cysteinhyd1och1orid, 1,4^—diazobicyklo· (2,2,2)oktan a jejich směsi .V a · « · ? í

Glyceroldistearát

Cholesterol

POE-IO Stearylalkohol

Stearylalkohol a Ceteareth-20

Cetearylalkohol a Ceteareth-20

Cetylacetát a acetylovaný lanolinalkohol Dow Corning 344 kapalný silikonový olej Tokoferol

Butylovaný hydroxytoluen

Glycerin

Methylparaben

Propylparaben

Chlorid sodný

Polysorbát 80

Kyselina askorbová

EDTA disodný

Butylenglykol

C12-15 alkylbenzoát

Retinol (45 % hm./hm.)

Pufrová 10 mM kyselina citrónová % hm./hm.

2,80 % 1,00 % 1,40 % 1,50 % 1,00 % 1,00 %

5, 00 % 0,15 % 0,05 %

10,00 % 0,20 % 0,03 % 0,10 % 0,75 %

0, 10 % 0,10 %

10,00 % 6,7 0 % 1,12 i

57,00 %

Tabulka 5 Stability retinolu v příkladu 7

	1 retinolu	% počáteční	PH
Na počátku	0,491	100	5, 56
50°C ť v Η n v - j “ j-	0,459	93,48	5,56
7 týdnů	0,449	91,45	5,47
12 týdnů	0,407	82,89	5, 60

• · 4 44 4

4« · · » «· 44

4 4 4 4 4 *4

4« 44 4 444*44

4444 4 * 4»

44 *44 4*4 *4 *

Přiklad 8

Za účelem zlepšení vzhledu a přitažlivosti formulací retinolu, pokud jde o kosmetické aplikace, se nefosfilipidová liposomová formulace retinolu (příklad 8A) fyzikálně smísila s různými objemy nefosfolipidového liposomu obsahujícího 30 % (hm./hm.) cyklomethikonu (příklad 8B). Výsledky týkající se stability jsou shrnuty v tabulkách 6 až 8.

Přiklad 8A	% hm./hm
Voda	54,95 %
Kaprylikkapriktriglycerid	6,00 %
Glycerin 96 %	10,00 %
Butylenglykol	10,00 %
Cholesterol	3,95 %
Glyceryldistearát	3,15 %
Stearylalkohol	2,8 5 %
Steareth-10	2,50 %
Tokofero1acetát	2,00 %
Glycerylmonostearát	1,58 %
Polysorbate 80	1,00 %
Retinol (45 % hm./hm.)	0,7 5 %
Kyselina citrónová	0,50 %
hydroxid sodný	0,2 5 %
Methylparaben	0,20 %
EDTA disodný	0,10 í
Butylovaný hydroxytoluen	0, 10 %
Kyselina askorbová	0,10 %
Propylparaben	0,03 %

• · · « • · « • * · v • · · « • · · · ·

Příklad 8B (nefosfolipidový liposom obsahující cyklomethikon

30 hm./hm. %)
	% hm./hm.
Voda	40,10 %
Cyklomethikon	30,00 %
Glyceryldistearát	7,95 %
Glycerin 96 %	7,00 %
1,3-butylenglykol	7,00%
Steareth-10	3,98 %
Ch η 1pqtprn}	1 QV %

Citrát sodný	0, 95 %
Polysorbate 80	0, 52 %
Kyselina citrónová	0, 16 %
Methylparaben	0,14 %
Tokoferolacetát	0,11 %
Kyselina askorbová	0,07 %
EDTA disodný	0,07 %
Propylparaben	0,02 %

Tabulka 6 Příklad 8C {50 % příkladu 8A & 50 % příkladu 8B)

	% retinolu	% počáteční	pH
Na počátku	0,1735	100	5, 56
4 týdny 40°C	0, 1705	98,27	5, 54 5,54
50°C	0,1690	97,41
8 týdnů 40°C	0,1690	97,41	5, 53
50°C	0,1670	96, 25	5,56
13 týdnů 30°C	0,1660	95,68	5, 52
40°C	0,1650	95,10	5,58
50°C	0,1580	91,07	5,57
20 týdnů 30°C	0,1715	98,84	5,61
40°C	0,1655	95,39	5, 60
50°C	0,1550	89,34	5,60

Tabulka 7 Příklad 8D (60 % příkladu 8A & 40 % příkladu 8B)

	% retinolu	% počáteční	pH
Na počátku	0,1869	100	5, 62
4 týdny 40°C	0,1869	98,37	5, 57
50°C	0,1831	96, 37	5, 57
8 týdnů 30°C	0,1896	99,77	5, 57
40°C	0,1858	97,78	5, 64
50C	0,1816	95,59	5, 62
13 týdnů 30°C	0,1867	98,26	5, 65
4 0°C	0,1809	95,21	5,64
50°C	0,1750	92, 11	5, 64

♦ * · • «9 9 • · 9 9

Tabulka 8 Příklad 8E (70 % příkladu 8A & 30 % příkladu 8B)

	% retinolu	% počáteční	pH
Na počátku	0,2235	100	5,64
4 týdny 40°C	0,2201	98,50	5, 64
50°C	0,2161	96, 70	5, 62
8 týdnů 30°C	0,2213	99, 04	5,62
40°C	0,2181	97,58	5,67
50ⁿC	0,2138	95, 67	5, 66
13 týdnů 3Q°C	0,2205	98,66	5, 66
40°C	0,2146	96,02	5, 66
50°C	0,2075	92,84	5,67

Tyto údaje ukazují, že v případě smísení nefosfolipidové líposomové retinolové formulace s 30 až 50 % nefosfolipidové .líposomové formulace obsahující 30 % cyklomethikonu, která udílí primární formulaci kosmetickou přijatelnost, nedochází k podstatnějším změnám stability. To je velmi důležité, protože příjemný vzhled, vůně a konzistence jsou pro zákazníka velmi důležité.

Příklad 9

Vliv pH hodnoty na stabilitě rétinolu v nefosf olipidové líposomové formulaci

Za účelem definování nejvhodnějšího rozmezí pH hodnot pro kompozice obsahující retinol podle, vynálezu • •fefe •fe fefe·* fe · ··*· fefe · ··« · · · · * « · · · ···«· fefe·· · ·· ·· fefe ··« fefefe fefe fe se pH hodnota vzorku z příkladu 8D nastavila na pH hodnoty v rozmezí od 3,6 do 7,4 pomocí ředěné kyseliny chlorovodíkové nebo ředěného hydroxidu sodného. Tyto vzorky se skladovaly při různých teplotách (4°C, 30^ůC,

40°C a 50°C). Vzorky se odebíraly periodicky jak pro fyzikální, tak pro chemické vyhodnocení. Výsledky znázorněné na obrázku 1 jasně ukazují, že optimální pH hodnotou pro retínolový krém je při 50°C hodnota vyšší než 5.

ΓΊ Λ J ). 1 - J o rnKidu y

In vitro biologická dostupnost liposomových formulací

Kožní biologická dostupnost, která je definována dostupností účinné látky uvolněné z formulace stejně jako rozsahem kožní penetrace po aplikaci zpravidla slouží jako dobrý indikátor pro účinnost účinné látky. Biologická dostupnost in vitro retinolu se určovala pomocí standardních in vitro testů pro uvolnění a kožní penetraci za použití Franzových difúzních buněk. Při studiu uvolňování účinné látky se na syntetickou membránu, přichcenou na jednotlivých Franzových difúzních buňkách, aplikovalo odvážené množství krému. Syntetická membrána vystupovala jako nosič krému a neovlivňovala podstatným způsobem uvolňování účinné látky. Vzorky se odebíraly z receptorové komory v předem stanovených intervalech. Množství retinolu uvolněného z formulace do receptorového roztoku se stanovila pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie (HPLC)- Výsledky zobrazené na obrázku 2 jasně ukazují, že uvolnění retinolu z nefosfolipidového liposomu z příkladu 8C je mnohem rychlejší než uvolnění z formulace RoC s.a. („voda v oleji 0,15 % retinolu), satbilního retinolového krému typu „voda v oleji, vyráběného podle patentu Wanga a kol., který je na trhu běžně dostupný. Po uplynutí sedmi hodin se z nefosfolipidového liposomů a RoC s.a. uvolnilo přibližně 10 % a 5 % retinolu.

In vitro studie kožní penetrace se prováděly za použití podobného postupu jako studie, týkající se uvolňování účinné látky s tou výjimkou, že se namísto syntetické membrány použila kůže z lidské mrtvoly. Po 48 hodinovém experimentu se povrch kůže zcela vyčistil a množství retinolu, proniklého kůží se analyzovalo rovněž pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie. Zjistilo se, že nefosfolipidové liposomové formulace mohou být připraveny tak, aby poskytovaly široký rozsah biologické dostupnosti. Například vzorek 8C (kterým je 50 : 50 směs nefosfolipidového liposomů obsahujícího 0,34 % retinolu a nefosfolipidového liposomů obsahujícího 30 % cyklomethikonu) poskytuje mnohem vyšší hodnotu kožní penetrace, pokud jde o retinol v porovnání s produktem RoC s.a,. Na druhé straně v příkladu 6 nefosfolipid obsahující 0,15 1 retinolu poskytuje podobnou kožní penetraci jako produkt RoC s.a. (obrázek 3).

• 9 9··

• · · « ·« · « • · • 9 ·

Příklad 10

Test stanovující kožní podráždění

U nefosfolipidových liposomových formulací obsahujících retinol se hodnotila dráždivost pokožky, která se následně porovnávala s dráždivostí pokožky retinolové formulace „voda v oleji.

Modifikovaný Draizeho test stanovující primární kožní podráždění u králíků je postup pro určení schopnosti testovaných výrobků vyvolat zánětlivé odezvy po dlouhodobějším uzavřeném kontaktu s kůží nevykastrovaného a uměle vykastrovaného novozélandského bílého králíka. Po načasované expozici se testované produkty odstranily a aplikační místa se vyhodnotila. Ze získaných hodnot se pro každý testovný vzorek vypočetl index primárního kožního podráždění (PDI) a na základě tohoto indexu se klasifikoval.

Testovaný výrobek se aplikoval tak, že se 0,25 až 0,30 g aplikovalo na 25 mm Hílltopovy komůrky obsahující netkané polštářky Webril. Tyto komůrky se následně aplikovaly na příslušná testovaná místa a přidržovaly na místě pomocí proužků pásky Dermícel. Tělo zvířat se obvázalo za účelem překrytí testovaných míst a udržení testovaných výrobků na místě. Po 4 hodinové expozici se testované výrobky odstranily a odečet se provedl po jedné hodině, kdy kůže dosáhla rovnovážného stavu. Testování kožní dráždivostí se opakovalo opět po 72 hodinové aplikaci a vyhodnootilo za použití následující stupnice;

**«*«· · • · · · • · · « • · · · · • * · · · ·· ·· ·*·

Index	PDI	Klasifikace
0,0		Nedráždivý
0,1 -	2,0	Mírně dráždivý
2,1 -	5,0	Středně dráždivý
5,1 -	8,0	Silně dráždivý

Tabulka 9

		PDI	Class.....
	Formulace 6 (0,15% retinolu)	0,9	Mírné podráždění
Studie I	Placebo (negativní kontrolní vzorek)	0,7	Mírné podráždění
	v / o-I (0,15 % retinolu)	1,7	Mírné podráždění
	Placebo (negativní kontrolní vzorek)	0,5	Mírné podráždění
	Formulace 8C (0,15 % retinolu)	3,0	Střední podráždění
Studie II	Placebo (negativní kontrolní vzorek)	2,2	Střední podráždění
	v/o-II (0,15 % retinolu)	2,4	Střední podráždění
	Placebo (negativní kontrolní vzorek)	1,2	Mírné podráždění

Zpravidla se dráždivost topické formulace zvyšuje s koncentrací účinné látky a povrchově aktivních činidel. Výsledky shrnuté v tabulce 9 ukazují, že 0,15 % retinolové formulace typu „voda v oleji, které obsahují přibližně 2 % povrchově aktivních činidel vykazují mírnou nebo převážně střední dráždivost. Překvapivě se zjistilo, že 0,15 % retinolové nefosfolipidové liposomové formulace, které obsahují více než 8 % povrchově aktivních činidel, vykazují • · · ·· · podobnou dráždívost jako testovaná formulace „voda v oleji. Výsledky ukazují, že nefosfolipidové liposomové formulace mohou mít potenciál pro snížení dráždivosti způsobované určitými složkami těchto formulací.

Příklad 11

Vyhodnocení kosmetického provedení

U tří nefosfolipidúbvých liposomových formulací a emulze „voda v oleji (stabilní retinolový produkt uváděný na trh společností RoC s.a.) obsahující 0,15 % retinolu se hodnotila kvantitativní deskriptivní analýzou (QDA). Jako kontrolní vzorek se použil komerční produkt společnosti Procter & Gamble s označením Night of Olay. Cílem těchto testů je stanovit celkové kosmetické vlastnosti retinolových krémů. Hodnocení, prováděl tým školených vědců. Hodnocenými parametry byly vzhled v kelímku, pocit mezi prsty, pocit v průběhu aplikace a pocit na pokožce po aplikaci.

Výsledky pro různé parametry po aplikací jsou uvedeny na obrázku 4 spolu s výsledky pro produkt Night of Olay. Z dosažených výsledků vyplývá, že liposomové formulace retinolu jsou v tomto ohledu úspěšnější, než retinolová formulace „voda v oleji. Z výsledků rovněž vyplývá, že mastnota, která je velkým nedostatkem emulze „voda v oleji, může být regulována mírnou modifikací liposomové formulace, aniž by při tom došlo ke zhoršení stability retinolu. Výsledky srovnání formulací z příkladů 6 a 8 a dvou komerčních kompozic jsou znázorněny na obrázku 4.

• · · · · · » 99 · že produkty podle zlepšení chemické

Z výše uvedeného vyplývá, vynálezu poskytují neočekávaně stability, programovatelnost biologické dostupností retinoidů pro kůži stejně jako zlepšení kosmetického provedeni vehikula, čehož lze dosáhnout v jediné nefosfolipidové liposomové formulaci.

0 0 0 0 0 0 « * · · · · « Φ • 0 0 «0

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

0* 00 000 00« 43

00«« 0 0 0 ·

0 0 »

0 *0 0

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1, Kompozice určená k péči o pleť, která obsahuje nefosfolipidový liposom a retinoid, zvolený ze skupiny zahrnující retinol, retinal, retinylacetát retinylpalmitát a jejich směsi, vyznačená tím, že dále obsahuje stabilizační systém zvolelný ze skupiny zahrnující:

Η Λ π Τ’

b) chelatizační činidlo a alespoň jeden antioxidant rozpustný v oleji;

přičemž uvedená kompozice má pH hodnotu ležící přibližně v rozmezí alespoň od 5 do 10 a po třináctitýdenním skladování pří 5Q°C zachovává alespoň 80 % zmíněných retinoidů.
2. Kompozice podle nároku 1, vyznačená tím, že uvedeným retinoidem je alkohol vitamínu A.
3, m ,

Kompozice podle nároku 1, vyznačená že uvedeným retinoidem je kyselina vitamínu A.
4. Kompozice podle nároku 1, vyznačená tím, že uvedeným retinoidem je aldehyd vitamínu A.

*»<»· ·» »·»« « « * ·· ·· • · ft · · « · Λ Λ * 4 _t • · · · » · • · >· »!·« 44
5. Kompozice podle nároku 1, vyznačená tím, že se uvedený antioxidant rozpustný v oleji zvolí ze skupiny zahrnující butylovaný hydroxytoluen, askorbylpalmitát, butylovaný hydroxyanisol, alfatokoferol, fenyl-alfa-naftylamin a jejich směsi.

• · · • · · »·· · • » ·· ·
6. Kompozice podle nároku 1, vyznačená tím, že se uvedené chelatizační činidlo zvolí ze skupiny zahrnující kyselinu ethylendiamintetraoctovou a její deriváty a soli, dihydroxyethylglycin, kyselinu citrónovou, kyselinu tartarovou a jejich směsi.
7. Kompozice podle nároku 6, vyznačená tím, že se uvedené chelatizační činidlo zvolí ze skupiny zahrnující kyselinu ethylendiamintetraoctovou a její deriváty a soli.
8. Kompozice podle nároku 1, vyznačená tím, že pH hodnota uvedené kompozice leží přibližně v rozmezí od 5 do 7.
9. Kompozice určená k péčí o pleť, která obsahuje nefosfolipídový liposom a retinoid, zvolený ze skupiny zahrnující retinoi, retínal, retinylacetát retinylpalmitát a jejich směsi, vyznačená tím, že dále obsahuje stabilizační systém obsahující antíoxidační Činidlo rozpustné v oleji, přičemž uvedená kompozice má pH hodnotu ležící • · ·Μ· přibližně v rozmezí alespoň od 5 do 10 a po třináctitýdenním skladování při 50°C zachovává alespoň

80 % zmíněných retinoidu.
10. Kompozice podle nároku 9, vyznačená tím, že se uvedený antioxidant rozpustný v oleji zvolí ze skupiny zahrnující butylovaný hydroxytoluen, askorbylpalmitát, butylovaný hydroxyanisol, alfatokoferol, fenyl-alfa-naftylamin a jejich směsi.
11. Kompozice určená k péči o pleť, která obsahuje nefosfolipidový liposom a retinoid, zvolený ze skupiny zahrnující retinol, retínal, retinylacetát retinylpalmítát a jejich směsi, vyznačená tím, že dále obsahuje stabilizační systém obsahující alespoň jedno antioxidační činidlo rozpustné v oleji a chelatizační činidlo, přičemž uvedená kompozice má pH hodnotu ležící přibližně v rozmezí alespoň od 5 do 10 a po třináctitýdenním skladování při 50°C zachovává alespoň 80 % zmíněných retinoidu.
12. Kompozice podle nároku 11, vyznačená tím, že se uvedený antioxidant rozpustný v oleji zvolí ze skupiny zahrnující butylovaný hydroxytoluen, askorbylpalmitát, butylovaný hydroxyanisol, alfatokoferol, fenyl-alfa-naftylamin a jejich směsi.

«· ·
13. Kompozice podle nároku 11, vyznačená tím, že se uvedené chelatizační činidlo zvolí ze skupiny zahrnující kyselinu ethylendiamintetraoctovou a její deriváty a soli, dihydroxyethylglycin, kyselinu citrónovou, kyselinu tartarovou a jejich směsi.
14. Kompozice podle nároku 9, vyznačená tím, že uvedeným retinoidem je alkohol vitamínu A.
15. Kompozice podle nároku 11, vyznačená tím, že uvedeným retinoidem je alkohol vitamínu A.
16. Kompozice podle nároku 9, vyznačená tím, že se její pH hodnota pohybuje přibližně v rozmezí od 5 do 7.
17. Kompozice podle nároku 11, vyznačená tím, že se její pH hodnota pohybuje přibližně v rozmezí od 5 do 7.