CZ303072B6 - Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika - Google Patents
Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika Download PDFInfo
- Publication number
- CZ303072B6 CZ303072B6 CZ20090085A CZ200985A CZ303072B6 CZ 303072 B6 CZ303072 B6 CZ 303072B6 CZ 20090085 A CZ20090085 A CZ 20090085A CZ 200985 A CZ200985 A CZ 200985A CZ 303072 B6 CZ303072 B6 CZ 303072B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- drug
- ptx
- derivative
- group
- conjugate
- Prior art date
Links
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 title claims abstract description 73
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 title claims abstract description 72
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 title claims abstract description 70
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 title abstract description 56
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 title abstract description 54
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 title description 10
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 title description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 78
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 31
- VHSHLMUCYSAUQU-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropyl methacrylate Chemical compound CC(O)COC(=O)C(C)=C VHSHLMUCYSAUQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 150000004715 keto acids Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N n-(2-hydroxypropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(O)CNC(=O)C(C)=C OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 69
- -1 glycylglycyl Chemical group 0.000 claims description 22
- JOOXCMJARBKPKM-UHFFFAOYSA-N 4-oxopentanoic acid Chemical compound CC(=O)CCC(O)=O JOOXCMJARBKPKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000003118 drug derivative Substances 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 9
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims description 7
- FLZUYXUBDVKWPO-UHFFFAOYSA-N 4-(2-oxopropyl)benzoic acid Chemical compound CC(=O)CC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 FLZUYXUBDVKWPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 5
- XQAHOFAHGMZYNU-UHFFFAOYSA-N 5-oxohex-2-enoic acid Chemical compound CC(=O)CC=CC(O)=O XQAHOFAHGMZYNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 230000010933 acylation Effects 0.000 claims description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 108010009504 Gly-Phe-Leu-Gly Proteins 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 claims description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 2
- XGTKSWVCNVUVHG-NSCUHMNNSA-N (e)-4-oxopent-2-enoic acid Chemical compound CC(=O)\C=C\C(O)=O XGTKSWVCNVUVHG-NSCUHMNNSA-N 0.000 claims 1
- WEZDRVHTDXTVLT-GJZGRUSLSA-N 2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 WEZDRVHTDXTVLT-GJZGRUSLSA-N 0.000 claims 1
- CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N Gly-Leu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims 1
- IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N Gly-Phe-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 IGOYNRWLWHWAQO-JTQLQIEISA-N 0.000 claims 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004442 acylamino group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims 1
- 150000004625 docetaxel anhydrous derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- RTYRONIMTRDBLT-UHFFFAOYSA-N hept-5-en-2-one Chemical compound CC=CCCC(C)=O RTYRONIMTRDBLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims 1
- 125000005616 oxoacid group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 36
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 11
- 229950005692 larotaxel Drugs 0.000 abstract description 10
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 abstract description 7
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 abstract description 4
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- SEFGUGYLLVNFIJ-QDRLFVHASA-N larotaxel dihydrate Chemical compound O.O.O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@@]23[C@H]1[C@@]1(CO[C@@H]1C[C@@H]2C3)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 SEFGUGYLLVNFIJ-QDRLFVHASA-N 0.000 abstract 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 41
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 41
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 15
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 15
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 10
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 9
- DXOJIXGRFSHVKA-BZVZGCBYSA-N larotaxel Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@@]23[C@H]1[C@@]1(CO[C@@H]1C[C@@H]2C3)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 DXOJIXGRFSHVKA-BZVZGCBYSA-N 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 6-phosphonohexylphosphonic acid Chemical compound OP(O)(=O)CCCCCCP(O)(O)=O WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 229940040102 levulinic acid Drugs 0.000 description 6
- 239000012704 polymeric precursor Substances 0.000 description 6
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 5
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 229920000578 graft copolymer Polymers 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 4
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 3
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 3
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001562 poly(N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide) Polymers 0.000 description 3
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 3
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical group C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 3
- 150000004579 taxol derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 description 2
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000007073 chemical hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 125000002456 taxol group Chemical group 0.000 description 2
- XGTKSWVCNVUVHG-UHFFFAOYSA-N trans-beta-acetylacrylic acid Natural products CC(=O)C=CC(O)=O XGTKSWVCNVUVHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DZXVWJCTZXNVAU-UHFFFAOYSA-N 2-(2-oxopropyl)benzoic acid Chemical compound CC(=O)CC1=CC=CC=C1C(O)=O DZXVWJCTZXNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SPBQWHPKNVUQLO-UHFFFAOYSA-N 6-oxohept-2-enoic acid Chemical compound CC(=O)CCC=CC(O)=O SPBQWHPKNVUQLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 150000001558 benzoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 208000017561 flaccidity Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 125000005597 hydrazone group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- LYUQWAGPWZUFNV-UHFFFAOYSA-N n-(6-hydrazinyl-6-oxohexyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(=C)C(=O)NCCCCCC(=O)NN LYUQWAGPWZUFNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 108700027936 paclitaxel poliglumex Proteins 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000008884 pinocytosis Effects 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000029305 taxis Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- ZPUHVPYXSITYDI-HEUWMMRCSA-N xyotax Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUHVPYXSITYDI-HEUWMMRCSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
V predloženém rešení je popsán polymerní konjugát, sestávající z derivátu cytostatika zvolených ze skupiny taxanu, jmenovite paclitaxelu (PTX), docetaxelu (DTX) nebo larotaxelu (LTX) a polymerního nosice pripraveného na bázi lineárního nebo biodegradabilního roubovaného kopolymeru tvoreného jednotkami základního kopolymeru N-(2-hydroxypropyl)methakroylamidu (HPMA) a jednotkami obsahujícími methakryloylovaný hydrazon aminokyselin nebo oligopeptidu. Dále rešení obsahuje zpusob prípravy uvedeného polymerního konjugátu, pricemž polymerní nosic je podroben polymeranalogické premene nosice reakci s esterem oxo-kyseliny a cytostatika. Polymerní konjugát se používá pro prípravu léciva k lécbe nádorových onemocnení.
Description
(57) Anotace:
V předloženém řešení je popsán polymemí konjugát. sestávající z derivátu cytostatika zvolených ze skupiny taxanů, jmenovité paclitaxelu (PIX).docetaxelu(DTX) nebo larotaxelu (LTX) a polymerního nosiče připraveného na bázi lineárního nebo biodegradabilního roubovaného kopolymerů tvořeného jednotkami základního kopolymerů N-(2hydroxy pmpyl )methakroylamidu (HPMA) a jednotkami obsahujícfmi methakryloylovaný hydrazon aminokyselin nebo oligopeptidů. Dále řešení obsahuje způsob přípravy uvedeného polymerního konjugátu, přičemž polymemí nosič je podroben polymeranalogícké přeměně nosiče reakcí s esterem oxokyseliny a cytostatika. Polymemí konjugát se používá pro přípravu léčiva k léčbě nádorových onemocněni.
Polymerní konjugáty paclítaxelu a docetaxelu s pH řízeným uvolňováním kancerostatika
Oblast techniky
Vynález se týká struktury a vlastností vodorozpustných polymemích terapeutík (pro-drug) na bázi derivátu paclítaxelu (PTX), docetaxelu (DTX) a Larotaxelu (LTX) určených především pro léčbu pevných nádorů při terapii nádorových onemocnění v humánní medicíně.
Dosavadní stav techniky
Trendy vývoje léčiv se v poslední době velmi často zaměřují na vývoj lékových forem umožňujících specifický účinek léčiva pouze v místě požadovaného terapeutického efektu. Takto cíleně působící biologicky aktivní látky nalézají uplatnění zejména v oblastech, kdy nežádoucí vedlejší účinky léčiva mohou vést k poškození zdravých částí organizmu. Toto nebezpečí je zvláště aktuální pri léčbě cytotoxickými látkami pri chemoterapii nádorových onemocnění. Je známo, že připojení cytostatika k vodorozpustnému polymemímu nosiči chemickou vazbou umožňuje zvýšit rozpustnost jinak nerozpustných nebo málo rozpustných léčiv a výrazně snížit jejich přímou toxicitu. Vysoká molekulová hmotnost polymerů zabraňuje rychlému vyloučení léčiva z organizmu glomerulární filtrací, a tím zajišťuje prodlouženou dobu cirkulace v krvi a setrvání v organizmu a tím i časově delší biologickou využitelnost léčiva.
V minulosti bylo připraveno a studováno mnoho polymemích konjugátů kancerostatik s rozpustnými polymery, ve kterých bylo léčivo s protinádorovým účinkem připojeno k polymeru neštěpitclnou kovalentní vazbou, hydrolyticky nestabilní iontovou vazbou a nebo kovalentní vazbou umožňující řízené uvolňování léčiva a tím i jeho aktivaci na základě enzymatické Či prostě chemické hydrolýzy této vazby. Obecně jsou polymemí nosiče systému konstruovány tak, aby byly schopné uvolnit terapeuticky aktivní kancerostatikum z nosiče buď v nádoru, nebo i více specificky, přímo v nádorové buňce. Významnou skupinu polymemích terapeutík tvoří polymerní léčiva připravená na bázi kopolymeru N-(2hydroxypropyl)methakrylamidu (HPMA), z nichž je řada aktivně směrována k nádorům prostřednictvím k polymeru připojené směřující struktury (protilátky, lektinu, hormonu). [Duncan 1985, Říhová 2000, Kopeček 2001, 2000, Duncan, 2005; Satchi-Fainako et al., 2006]. Jejich syntéza je však značně složitá. Pri vývoji polymemích kancerostatik bylo rovněž ukázáno, že pro specifickou dopravu léčiva do místa výskytu nádoru není nutné použít aktivně směrovaného nosiče, ale výrazně zvýšené akumulace polymemích cytostatik, zvláště v pevných nádorech, může být dosaženo zvýšením molekulové hmotnosti polymemího terapeutika nad vylučovací mez nosiče ledvinami (tzv. pasivní směrování do pevných nádorů). Tato schopnost makromolekul akumulovat se v pevných nádorech byla nazvána EPR efektem (Enhanced Permeability and Retention) a bylo ukázáno, že se tento efekt významně projevuje i u nosičů na bázi kopolymerů HPMA [Noguchi et al., 1998; Seymour et al., 1995].
Jedním z hlavních problémů použití HPMA kopolymerů jako pasivně směrovaných vysokomolekulámích nosičů je jejich neštěpitelný uhlíkatý řetězec a z organizmu vylučitelné jsou pouze polymery nepřesahující molekulovou hmotnost 40 až 50 000 g/mol. To znamená, že nemá-li dojít po opakovaném podání léčiva k hromadění polymeru v organizmu a má-li být molekulová hmotnost nosiče co nejvyšší, aby bylo pasivní směrování co nejúčinnější, musí být polymemí nosič konstruován jako v organizmu degradovatelný. Takové polymemí nosiče na bázi HMPA kopolymerů byly nedávno vyvinuty a jejich struktura byla patentována [Chybil et al. 2008; Etrych et al, 2008, ChytU PV 2006-207, Etrych PV 2006-592].
V literatuře existuje celá řada informací o přípravě a studiu vlastností polymerů nesoucích kancerostatikum připojené k polymeru vazbou náchylnou khydrolýze ve vodném prostředí [Kratz 1999], Mezi nimi zaujímají významné postavení kopolymery HPMA, nesoucí kancerostatikum
- 1 CZ 303072 B6 doxorubicin vázaný k polymemímu řetězci hydrolyticky štěpitelnou hydrozovanou vazbou [Etrych 2002, Ulbrich 2004a, Ulbrich 2004b, Ulbrich pat CZ 293 787 B6]. Tato vazba je relativně stálá v prostředí krevního řečiště (v průběhu transportu v organizmu) a hydrolyticky labilní v mí mě kyselém prostředí živé buňky. Rychlost hydrolýzy této vazby řídí i rychlost uvolňování léčiva, a tedy i koncentraci aktivní látky v místě požadovaného účinku. Takováto polymerní kancerostatika vykazovala při in vitro i in vivo testech na myších podstatně vyšší protinádorovou účinnost proti řadě nádorových linií nežli volné léčivo a v řadě případů vedlo jejich použití k úplnému vyléčení pokusných zvířat i pri terapeutickém způsobu podání. [Říhová 2001, Etrych 2001]. Zvýšení molekulové hmotnosti nosiče (biodegradovatelné roubované polymery, micelární io a nanogelové systémy) vždy vedlo ke zvýšení účinnosti protinádorové aktivity léčiva ověřované v in vivo systémech.
Paclitaxel a docetaxel patří do skupiny taxanů, protinádorových léčiv rutině používaných při léčbě ovaríálních nádorů a nádorů prsu, plic, prostaty a dalších [Vanhoefer et al., 1997]. Kromě ved15 lejší toxicity běžné u kancerostatik je jejich další nevýhodou velmi malá rozpustnost ve vodných roztocích a tedy nezbytnost podání v různých excipientech, především v Cremoforu EL, což rovněž vede k dalším vedlejším účinkům lékové formy. Při některých schématech podání může dokonce podání taxanů v Cremophoru EL významně snížit efekt léčby [Ng et al., 2006].
2» Vazbou těchto léčiv na polymerní nosiče (PEG, HPMA kopolymer, poly(glutamová kyselina) byla získána ve vodě velmi dobře rozpustná pro-léčiva, s prodlouženou dobou cirkulace v organizmu a zvýšenou akumulací v pevných nádorech. Jejich protinádorová aktivita byla ověřována in vivo na zvířecích modelech a v některých případech i klinicky. Tak paclitaxel (PTX) byl kovalentně vázán na poly(ethylenglykol) (PEG) neštěpitelnou esterovou nebo 7-karbamátovou vazbou (C2 -OH skupina) a nebo pomocí hydrolyticky labilní aminokyselinové spojky (Ala, Gly) [Greenwald et al., 1995; Greenwald, 2002; Greenwald et al., 2003; Pendri et al., 1998]. Bylo ukázáno, že protinádorová aktivita konjugátu závisí na struktuře použité vazby mezi polymerem a léčivem a že významným faktorem je i molekulová hmotnost nosiče. Konjugát s PTX byl testován ve fázi 1 klinických testů [Satchi—Fainaro et al., 2006], ale zřejmé s malým úspěchem.
Mnohem úspěšnější v klinických testech se ukazuje být konjugát paclitaxelu s poly(glutamovou kyselinou) (Xyotax) [Winter 2005, kratz et al., 2008]. V tomto konjugátu je PTX vázán na polyaminokysetinový nosič esterovou vazbou přes -OH skupinu v pozici 2. K uvolnění léčiva dochází v důsledku degradace polymerního řetězce, vzniku Glu derivátu PTX a jeho následné hydrolýzy. V současné době je tento konjugát ve fázi 111 klinických testů.
Paclitaxel byl rovněž vázán na HPMA kopolymery esterovou vazbou za použití biodegradovatelné oligopeptidové GlyPheLeuGly spojky. Bylo ukázáno, že PTX se po inkubaci s lysozomálními enzymy uvolňuje z nosiče a toto uvolnění je důležité pro dosažení protinádorové aktivity in vivo.
PNU 166945 je konjugát HPMA kopolymerů s esterově vázaným PTX, který byl klinicky testován na fázi I [Tarwogt et al., 2000; Terwogt et al., 2001], po této fázi však bylo další testování zastaveno. Zvýše uvedených výsledků je zřejmé, že konjugace paclitaxelu spolymemím nosičem vede k výraznému zlepšení vlastností léčiva (rozpustnost, zlepšená biologická využitelnost). Má-li však léčivo najít uplatnění v humánní medicíně, je třeba pečlivě volit a na míru připravit jak strukturu a molekulovou hmotnost nosiče, tak i strukturu spojky mezi polymerem a léčivem řídící rychlost a tedy i koncentrace léčiva v místě požadovaného účinku. Při vývoji optimálních struktur je nezbytné ověřit funkci těchto struktur ve vhodných in vivo modelech.
Podstata vynálezu
Polymerní léčiva podle vynálezu se vyznačuje tím, že je na vodorozpustný polymerní nosič připravený na bázi lineárního nebo roubovaného kopolymerů HPMA navázáno kancerostatikum ze skupiny taxanů, paclitaxel (PTX), docetaxel (DTX) nebo larotaxel (LTX) (dále léčiva). Léčivo je
připojené k polymemím řetězcům přes esterovou skupinu vzniklou acylací sekundárních -OH skupin v poloze 2 pomocí spojek (spaceru) obsahujících pH-senzitivní hydrolyticky štěpitelné hydrazonově vazby. Tyto spojky mohou být tvořeny kyselinovými zbytky různých oxokyseiin, kterými je do struktury léčiv zavedena karbonylová skupina, spojených se zbytky jednotlivých aminokyselin, oligopeptidů a nebo dalšími strukturami dovolujícími zakončení postranních řetězců polymemího nosiče hydrazovanou skupinou. Molekulová hmotnost polymemího řetězce je v případě lineárního polymeru volena pod vylučovací mezí HPMA kopolymerů z organizmu, s výhodou v rozmezí 10 až 50 000 g/mol. V případě roubovaného kopolymeru je molekulová hmotnost volena v rozmezí 50 az 250 000 g/mol.
Polymemí léčivo podle vynálezu je připraveno pro intravenózní (injekce nebo infuze) podání v roztoku, může být ale podáno i intratumorálně či intraperitoneálně a je určeno pro léčbu pevných nádorů. Polymer s chemicky vázaným cytostatikem je konstruován tak, aby byl stabilní v průběhu cirkulace v krevním řečišti a nedocházelo k hydro lýze hydrozonové vazby mezi daným taxanem a polymerem, případně, aby byla rychlost hydrolýzy v průběhu transportu organizmem minimální (pri pH v krevním řečišti 7,4), tak aby se nemohl projevit cytotoxický efekt uvolněného léčiva ěi jeho derivátu. Celý systém je konstruován jako systém působící dvoufázově. Díky vhodné volbě molekulové hmotnosti nosiče, umožňující extravasaci ale i účinnou akumulaci v nádorové tkáni, by mělo po počáteční akumulaci léčiva v nádorové tkáni dojít k interakci s buněčnou membránou a k průniku molekulárně rozpuštěného polymemího léčiva do jednotlivých nádorových buněk pinocytózou. Uvnitř cílových buněk by mělo dojít v důsledku poklesu pH z vnějšího pH (7,4) na intracelulámí pH (5 až 6) k rychlé hydrolýze hydrazonově vazby a k uvolnění léčiva nebo jeho derivátu z nosiče. V následném kroku by mělo dojít k hydrolýze esterové vazby již z polymeru uvolněného derivátu léčiva chemickou hydrolýzou a nebo specifič25 těji účinkem intracelulámích enzymů, např. karboxyesteráz. Reálnost výše navrženého mechanizmu působení polymemích léčiv podle vynálezu je doložena experimenty modelového uvolňování léčiv z polymemího nosiče. Výsledky těchto testů, včetně testů protinádorové aktivity, jsou uvedeny v příkladové části přihlášky.
w Polymemí konjugáty s cíleným protinádorovým účinkem podle vynálezu se vyznačují tím, že cytostatikum (taxol, docetaxel, larotaxel) je připraveno prostřednictvím esterové vazby a spaceru na polymemí nosič tvořený lineárním [Etrych pat CZ 297 827 B6, publ 2008] a nebo roubovaným [Etrych pat CZ 298 945 (B6), publ 2008] HPMA kopolymerem prostřednictvím hydrolyticky labilní hydrazonově skupiny vzniklé reakcí karbonytové skupiny derivátu molekuly léčiva s hydrazidovou skupinou polymemího nosiče. Polymemí nosiče jsou připraveny zpravidla radikálovou roztokovou kopoiymerizací HPMA skomonomery odpovídajícími požadovanému složení. Vazbou příslušného taxanu na polymemí nosič dojde k výraznému snížení jeho cytotoxicity, výraznému zvýšení molekulové hmotnosti léčiva a tím k prodloužení doby cirkulace v krevním oběhu, dojde k prodloužení celkové doby setrvání léčiva v organizmu a tedy i ke zvýšení κι jeho biologické využitelnosti (bioavailability). Polymemí léčivo podle vynálezu se dále vyznačuje tím, že vazba léčiva k polymemfmu nosiči je relativně stálá v průběhu transportu v krevním řečišti a tělních tekutinách a je hydrolyticky štěpitelná v mírně kyselém prostředí národu a zejména uvnitř cílových nádorových buněk v endozómech vyznačujících se mírně kyselým pH. To znamená, že léčivo je transportováno krevním řečištěm v neaktivní, na polymer vázané formě, a kjeho uvolnění a aktivaci dojde především až po průniku do cílových nádorových buněk. Aktivace léčiva až v cílových buňkách vede k eliminaci vedlejších účinků jinak toxických cytostatik a k zacílení jejich účinku přednostně na nádorové buňky. Za cílený (pasivní) transport do nádoru či nádorových buněk je odpovědný polymemí nosič připravený na bázi kopolymerů HPMA, jehož molekulová hmotnost a tedy i účinnost akumulace v nádorové tkáni může být řízena změnami ve struktuře skeletu polymemího nosiče (nedegradovatelný lineární polymer, vysokomolekulámí biodegradovatelný roubovaný polymer).
Oblastí použití předloženého vynálezu je použití polymemích léčiv podle vynálezu pro léčbu solidních nádorů při maligních onemocněních v humánní medicíně.
-3 CZ 303072 B6
Syntéza a struktury polymemích konjugátů
Syntéza polymemích konjugátů podle vynálezu je prováděna v několika krocích, detailní finální struktura konjugátu významně záleží na zvolené syntetické cestě.
V prvním kroku syntézy jsou syntetizovány základní monomery: HPMA, methakryloylované deriváty aminokyselin a oligopeptidů zakončené hydrazidovou (CONHNH2) skupinou, případně zakončené hydrazidovou skupinou chráněnou t.-butyloxy karbony lovou skupinou (Boc).
Ve druhém kroku jsou syntetizovány polymemí prekurzory, tj. HPMA kopolymery nesoucí funkční skupiny (randon copolymers) sloužící jako polymemí nosiče pro léčiva.
Polymemí prekurzor nesoucí podél řetězce funkční hydrazidové skupiny je možné připravit buď radikálovou kopolymerizací výše uvedených funkčních monomerů s HPMA, nebo polymeranalo15 gickou přeměnou základního kopolymeru nesoucího funkční skupiny.
Roubované kopolymery jsou připraveny z multivalentních a sem ite lechel ických HPMA kopolymerů podle postupu popsaného Etrychem et ak v CZ 298 945, J. Controlled Release 2008, 132, 184 až 192.
Základní kopolymer (prekurzor) je kopolymer HPMA a methakryloylovaných hydrazidů aminokyselin nebo oligopeptidů vybraných ze skupiny glycyl, glycylglycyl, β-alanyk 6-aminohexanoyl (AH), 4—aminobenzoyl a nebo složený acyl vycházející z oligopeptidů GlyPheGly, GlyLeuGly, GlyLeuPheGly a GlyPheLeuGly), vyznačující se tím, že obsahuje 70 až 98 mol %
HPMA a 2 až 30 % mol jednotek s hydrazidovými funkčními skupinami (viz Schéma 2. se spojkou tvořenou 6-aminohexanoylem).
Derivát léčívaje sloučenina léčiva (PTX, DTX nebo LTX) vzniklá acylaci hydroxylové skupiny v pozici 2 léčiva příslušnou oxokysehnou. S výhodou byly použity následující oxokyseliny: kyselo lina levulová, 4-<2-oxopropyl)benzoová kyselina, A-oxo-pent-2-enová a kyselina 5-oxo-hex2-enová a 6-oxo-hept-2-enová (viz Schéma 1.).
Polymemí konjugát je sloučenina polymemího prekurzoru s derivátem léčiva, kde derivát léčiva je navázán na polymemí prekurzor hydrazonovou vazbou připravenou reakcí karbonylové skupiny derivátu léčiva s hydrazidovými skupinami polymeru, vyznačující se tím, že obsahuje 70 až 98 mol % HPMA, 1,5 až 29,5 mol % jednotek s hydrazidovými funkčními skupinami a 0,5 až 10 mol % jednotek s hydrazonové navázaným derivátem léčiva (viz Schéma 3. se spojkou tvořenou 6-aminohexanoylem a kyselinou levulovou).
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1. Graf rychlosti uvolňování PTX a jeho derivátů z lineárních polymemích konjugátů v pufrou o pH 5 (model intracelulámí ho prostředí).
Obr. 2: Graf rychlosti uvolňování PTX a jeho derivátů z lineárních polymemích konjugátů v pufru o pH 7,4 (model krevního řečiště).
Obr. 3: Přežití myší C57BL/6 s lymfomem EL-4, který byl podán DTX, derivát LEV-DTX a lineární polymemí konjugát PHPMA-AH-N-N=DTX-LEV. Dávky léčiv byly 2x20 mg ekvivalentu DTX/kg, konjugát PHPMA-AH~NH=DTX-LEV byl podán v dávce 2x20 a 2x40 mg ekvivalentu DTX/kg.
-4CZ 303072 B6
Obr. 4: Přežití myší 57BL/6 s lymfomem EL—4, kterým byl podán derivát paclitaxelu LEVPTX a lineární polymemí konjugát PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV. Pro omezenou rozpustnost nemohl být podán PTX ve volné formě.
s Obr. 5: Přežití myší BALB/c s karcinomem mléčné žlázy 4T1, kterým byl podán paclitaxel, derivát paclitaxelu LEV-PTX a lineární polymemí konjugát PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV. PTX a PTX-LEV byl injikován v dávce 2x30 mg ekvivalentu PTX v den 8 a 12 (viz text), a konjugát PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV v dávce 2x60 mg ekvivalentu PTX/kg v den 8 a 12.
m Obr. 6: Přežití myší C57BL/6 s lymfomem EL-4, kterým byl podaný lineární polymemí konjugát PHPMA-AH-NH-N=DTX-LEV s obsahem DTX 8,2 % a 16,3 %, v dávce 2x30 mg ekvivalentu DTX i.v., den 9 a 13, is Příklady provedení vynálezu
Příklady provedení syntézy meziproduktů a konjugátů podle vynálezu
2o Příklad 1: Syntéza monomerů a derivátů léčiv
HPMA byl připraven podle dříve pospaného postupu [Ulbrich a kol. 2000]. Elementární analýza: vypočteno 58,8 % C, 9,16 % H, 9,79 % N; nalezeno 58,98 % C, 9,18 % H, 9,82 % N. Produkt byl ehromatografleky čistý.
6-(Methakryloylamino)hexanoylhydrazin (V’-{ň-hydrazino-6-oxohexyl)-2-methylakrylamid (MA-AH-NHNH2) byl připraven podle drive popsaného postupu (Etrych et al., CZ 297 827 B6).
Ester kyseliny levulové a paclitaxelu (v pozici -OH2) (LEV-PTC) byl připraven reakcí kyseliny io levulové s pac li taxe lem pomocí karbodiimidové metody (dicyklohexylkarbodiimid, DCC) v /V,Vr-dimethylformamidu (DMF).
Kyselina levulová (19,4 mg, 0,167 mmol) a DCC (37,5 mg, 0,182 mmol) byly při laboratorní teplotě rozpuštěny každý v 0,15 mL DMF. Oba roztoky byly ochlazeny na -18 °C a smíchány.
Po 20 minutách byl k tomuto roztoku přidán roztok paclitaxelu (10 mg, 0,117 mmol) a NfNdimethylaminopyridinu (DMAP) (14 mg, 0,117 mmol) v 0,3 mL DMF. Reakce probíhala 30 minut při -18 °C a 16 h při 4 °C. Průběh reakce sledován na TLC - destičky Silikagel 60 F254 (ethylacetát: hexan 1:1, Rf(PTX) = 0,25, Rfl(LEV-PTX) - 0,15, Rf (Levulic acid)- 0,45). produkt byl vyčištěn od nízkomolekulámích příměsí pomocí chromatografie na koloně (60 cm x
4 cm) naplněné Silikagelem v ethylacetátu. Frakce obsahující produkt PTX-LEV byla zachycena a zahuštěna na 0,4 mL a produkt vysrážen do 20 mL diethyleteru. Produkt byl odsát, promyt malým množstvím diethyleteru a vakuově sušen do konstantní hmotnosti. Výtěžek činil 98 mg produktu (84 %) s teplotou tání 136 až 138 °C. TLC (ethylacetát: hexan 1:1) jedna skvrna při Rf - 0,15. MALDI-TOF MS: 970 (M+Na).
Čistota všech monomerů a derivátů léčiv byla stanovena pomocí HPLC systému [Schmidzu HPLC systém vybavený kolonou s reverzní fází Chromolith Performance RP-I8e (100 x
4.6 mm) a UV-V1S detektoru Shimadzu SPD-lOAVvp (230 nm); eluent voda-acetonítril s gradientem 50 až 100 vol. % acetonitrilu, průtok 0,5 mL.min '].
Ester kyseliny levulové a docetaxelu (v pozici -OH 2) (LEV-DTX) byl připraven obdobně jako LEV-PTX reakcí kyseliny levulové s docetaxelem karbodiimidovou metodou (DCC) v DMF. Kyselina levulová (38 mg, 0,327 mmol) a DCC (100 mg, 0,487 mmol) byly při laboratorní teplotě rozpuštěny každý v 0,25 mL DMF. Oba roztoky byly ochlazeny na -18 °C a smíchány. Po
20 minutách byl k tomuto roztoku přidán roztok docetaxelu (200 mg, 0,247 mmol) a N.N-5 CZ 303072 Β6 dimethylaminopyridinu (DMAP) (28 mg, 0,229 mmol) v 0,6 mL DMF. Reakce probíhala 30 minut pri -18 °C a 16 h pri 4 °C. Průběh reakce sledován na TLC - destičky Silíkagel 60 F2m (ethylacetát: hexan 1:1, Rfi(DTX) = 0,3, Rf(LEV-DTX) = 0,2, Rf(Levulic acid) = 0,45). produkt byl vyčištěn od nízkomolekulámích příměsí dvakrát pomocí chromatografie na koloně (60 cm x 4 cm) naplněné Silikagelem v ethylacetátu. Frakce obsahující produkt DTX-LEV byla pokaždé zachycena a zahuštěna na 0,6 mL a produkt vysrážen do 20 mL diethyleteru. Produkt byl odsát, promyt malým množstvím diethyleteru a vakuově sušen do konstantní hmotnosti. Výtěžek činil 179 mg produktu (80 %) s teplotou tání 86 až 89 °C. TLC (ethylacetát: hexan 1:1) jedna skvrna při Rf - 0,20. MALDI-TOF MS; 929 (M+Na).
A B
Schéma 1 struktury esterů kyseliny levulové a 4-(2-oxy propy l)benzoové s paclitaxelem a docetaxelem: A) Ester kyseliny levulové a paclitaxelu, LEV-PTX; B) Ester 4—(2—oxo— propy hbenzoové kyseliny a paclitaxelu, OPB-PTX; C) Ester kyseliny levulové a docetaxelu, LEV-DTX.
Ester 4-(2-oxopropyí)benzoové kyseliny a paclitaxelu (v pozici -OH 2) (OPB-PTX byl připraven stejným výše popsaným postupem pro přípravu LEV-PTX, a to reakcí 4-(2-oxopropyl)benzoové kyseliny s paclitaxelem pomocí konjugačního činidla DCC v DMF.
Výtěžek činil 85 %. Teplota tání 143 až 145 °C. TLC (ethylacetát: hexan 1:1) jedna skvrna pri Rf = 0,25. MALDI-TOF MS: 1032 (M+Na).
Ester 4-(2-oxopropyI)benzoové kyseliny a docetaxelu (v pozici -OH 2) (OPB—DTX) byl připraven stejným výše popsaným postupem pro přípravu DTX-LEV, a to reakcí 4-(2-oxopropyI)benzoové kyseliny s docetaxelem pomocí DCC v DMF.
Výtěžek činil 81 %. Teplota tání 94 až 96 °C. TLC (ethylacetát: hexan 1:1) jedna skvrna při Rf= 0,28, MALDI-TOF MS: 990 (M+Na).
Ester 4-oxo—pentenové [3-acetylakrylovéj kyseliny a paclitaxelu (v pozici -OH 2) (AAK-PTX) byl připraven stejným výše popsaným postupem pro přípravu LEV-PTX, a to reakcí 4-oxopentenové kyseliny s paclitaxelem pomocí DCC v DMF.
-6CZ 303072 B6
Výtěžek Činil 86 %. Teplota tání 138 až 139 eC. TLC (ethylacetát: hexan 3:1) jedna skvrna při Rf = 0,6. MALDI-TOF MS: 968 (M+Na).
Ester 5-oxo-hexenové kyseliny a paclitaxelu (v pozici -OH 2) (OHE-PTX) byl přípraven stejným výše popsaným postupem pro přípravu PTX-LEV, a to reakcí 5-oxo-hexenové kyseliny s paclitaxelem pomocí konjugačního činidla DCC v DMF.
Výtěžek činil 85 %. Teplota tání 132 až 134 °C. TLC (ethylacetát: hexan 3:1) jedna skvrna při Rf - 0,65. MALDI-TOF MS: 982 (M+Na).
io Ester 5-oxo-Hexenové kyseliny a docetaxelu (v pozici -OH 2) (OHE-DTX) byl připraven stejným výše popsaným postupem pro přípravu DTX-LEV, a to reakcí 5-oxo-hexenové kyseliny s docetaxelem pomocí konjugačního činidla DCC v DMF.
Výtěžek činil 86 %. Teplota tání 84 až 86 °C. TLC (ethylacetát: hexan 3: l) jedna skvrna při Rf = 0,7, MALDI-TOF MS: 940 (M+Na).
Příklad 2: Syntéza polymemího prekurzoru - kopolymerů HPMA s MA-AH-NHNH?
Kopolymer poly(HPMA-co-MA-AH-NHNH2) byl připraven roztokovou radikálovou kopoly2o merizací HPMA a MA-AH-NHNH2 v methanolu při 60 °C podle dříve popsaného postupu [Etrych patent].
Schéma struktury polymemího prekurzoru, kopolymerů poly(HPMA-co-MA-AH-NHNH2).
Příklad 3: Příprava polymemích konjugátů obsahujících deriváty léčiv (PHPMA-AH-NHN—LEV—PTC, PHPMA-AH-NH-NLEV-DTX, PHPMA-AH-NH-N=OPB~PTX, PHPMA-AH-NH-N=OPB-DTX, PHPMA-AH-NH-N=OHE-PTX, PHPMA-AH30 NH-N=OHE-DTX, PHPMA-AH-NH-N=AKK-PTX a PHMPA-AH-NHN-AKK-DTX)
Kopolymery s deriváty PTX, DTX a LTX navázanými k PHPMA nosiči hydrolyticky štěpitelnou hydrazonovou vazbou byly připraveny reakcí polymemích prekurzorů obsahujících hydrazidové skupiny s příslušným derivátem léčiva v methanolu za katalýzy kyselinou octovou.
Roztok 100 mg kopolymerů póly (HPMA-co-MA-AH-NHNH?) v 1,1 mL methanolu byl smíchán s roztokem LEV-PTX v 0,2 ml methanolu. Do míchané reakční směsi bylo při 25 °C po 1 minutě přidáno 40 pL kyseliny octové. Průběh reakce (úbytek LEV-PTX) byl sledován promocí
-7CZ 303072 B6
TLC (destičky Si 1 ikagel 60 F254, ethylacetát, Rf(LEV-PTX) - 0,8). Po 2 h byla reakční směs čištěna gelovou filtrací od volného derivátu léčiva na koloně naplněné Sephadexem LH-20 v methanolu. Polymemí frakce byla izolována, zahuštěna na vakuové odparce a produkt srážen do 50 ml ethylacetátu, izolován filtrací na fritě S4, promyt 150mL ethylacetátem a sušen do konstantní hmotnosti. Obsah celkového PTX nebo jeho derivátu v polymemím konjugátu byl stanoven pomocí HPLC stavení (HPLC Shimadzu systém) po úplné hydrolýze polymemího konjugátu v roztoku HCL (pH 2) po dobul h pri 37 °C a extrakci derivátu PTX do chloroformu. <Mw> a distribuce molekulových hmotností byly zjištěny pomocí kapalinové chromatografie (kolona TSKGel 400 (3000x10 mm), 20% 0,3 M octanový pufr (CH3COONa/CH3COOH; pH io 6,5; 0,5 g/L NaN3) a 80% methanol, průtok 0,5 mL/min, detekce diferenciálním refraktometrem, detektorem rozptylu světla (DAWN-DSP-F, Wyatt, Technology, USA) a UV detektorem (250 mm). Charakterizace polymemího léčiva: Celkový výtěžek reakce vazby léčiva: 96 mg (88 %), obsah celkového LEV-PTX 9,2 % váhových, obsah volného PTX <0,2 % z celkového obsahu PTX. Postup vazby derivátu PTX na polymemí prekurzory hydrazonovou vazbou byl is stejný pro všechny typy prekurzoru a derivátů léčiv.
Schéma 3 struktury polymemího konjugátu PHPMA-AH-NH-N=DTX-LEV s navázaným derivátem, esterem kyseliny levulové a docetaxelu.
Příklad 4: Uvolňování PTX, DTX nebo jejich derivátů z polymemích konjugátů
Bylo měřeno množství PTX, DTX nebo jejich derivátů uvolněných z polymemích konjugátů po 25 jejich inkubaci ve fosfátovém pufru o pH 5,0 (0,1 M fosfátový pufr obsahujícím 0,05 M NaCl) modelujícím intracelulámí prostředí a fosfátovém pufru pH 7,4 modelujícím prostředí krevního řečiště. Množství uvolňovaných léčiv nebo jejich derivátů v inkubačním roztoku bylo stanoveno pomocí HPLC (Shimadzu). V předem určených časových intervalech bylo odebíráno 200 pL inkubačního roztoku a po extrakci uvolněných léčiv ajejich derivátů do chloroformu bylo jejich množství stanoveno pomocí HPLC systému [Schimadzu HPLC systém vybavený kolonou
-8CZ 303072 B6 s reverzní fází Chromalith Performance RP-18e (IOOx 4,6 mm) a UV-VIS detektoru Schimadzu SPD-lOAVvp (230 nm); eluent voda-acetonitril s gradientem 50 až 100 vol. % acetonitrilu, průtok 0,5 mL.min'1.
Po inkubaci konjugátů (koncentrace 5 mg/mL) ve fyziologickém prostředí pri 37 °C (fosfátový pufr, pH 7,4) se uvolňují léčiva PTX a DTX (či jejich deriváty) významně pomaleji (Obr. 2) než v mírně kyselém prostředí při pH 5,0 modelujícím prostředí v endozomech a lysozomech nádorových buněk (Obr. 1) U obou léčiv má na rychlost uvolňování z polymemího konjugátu a poměr uvolněných složek (léčivo a jeho derivát) zásadní vliv struktura oxokyselinové spojky. Spojka ni tvořená kyselinou levulovou nebo 4-(2—oxopropyl)benzovou uvolňuje velmi rychlé uvolnění derivátu léčiva v pH 5, k hydrolýzy esterové vazby mezi léčivem a kyselinou ovšem dochází jen velmi pomalu. Naproti tomu spojka tvořená kyselinou T-oxo-pentenovou stabilizuje jak hydrazonovou vazbu, tak vazbu esterovou, nedochází k významnému uvolnění léčiva ani jeho derivátu. Při inkubaci ve fyziologickém prostředí o pH 7,4 dochází u polymemích konjugátů se spojkou i s tvořenou kyselinou levulovou nebo 4-(2-oxopropyl)benzoovou k částečné hydrolýze hydrazonové vazby, ve srovnání s prostředím o pH 5 významně nižší rychlostí. V pH 7,4 je patrné, že stabilita esterové vazby mezi kyselinou levulovou a léčivem je nižší a z jedné třetiny se uvolňuje volné léčivo. Naproti tomu v případě spojky tvořené 4-(2-oxopropyl)benzoovou kyselinou se uvolňuje jen derivát léčiva, esterová vazba je stabilní. Rozpad derivátu léčiva na volné léčivo nebo přímé odštěpení léčiva z polymemího konjugátu je předpokládáno účinkem enzymů, a to především karboxy esteráz.
Příklad 5: Ukázka in vitro biologické aktivity lineárních polymemích konjugátů docetaxelu a paclitaxelu pří inkubaci s buňkami nádorových linií; T-buněčného lymfomu EL—4 a karcinomu m léčné žlázy 4T1,
Tabulka I Hodnoty IC50 (v ng/ml)
| EL 4 | 4T1 | |
| DTX | 0.0001 | 0.0004 |
| DTX-LEV | 0.015 | 0.0031 |
| PHPMA-AH-NH-N-DTX-LEV | 3.9 | 0.750 |
| PTX | 0.0013 | 0.0003 |
| PTX-LEV | 0.19 | 0.0054 |
| PHPMA-AH-NH-N-PTX-LEV | 33.6 | 8.90 |
Příklad 6; Ukázka in vivo biologické aktivity lineárních polymemích konjugátů docetaxelu a paclitaxelu u myší inokulovaných T buněčných lymfomem EL4.
Pro in vivo demonstraci aktivity konjugátů docetaxelu a paclitaxelu byl použit model myšího syngenního T buněčného lymfomu EL—4. Myším kmene C57BL/6 (samice byl v den 0 subkutánně implantováno lxlO5 nádorových buněk EL—4. Léčiva byla podána intravenózně (i.v.), a to ve dvou dávkách podaných v den 8 a den 12 pro transplantaci nádorových buněk. První dávka byla podána v době, kdy byly nádory dobře vyvinuté, hmatatelné, o velikosti zhruba 300 mm3. V pokusu byla sledována velikost nádorů, tělesná váha myší, celkový zdravotní stav a přežití. Efekt konjugátu byl vždy porovnáván s efektem volného léčiva (DTX, PTX) a jeho derivátů
-9CZ 303072 B6 (DTX-LEV, PTX-LEV). Průměrná doba přežití ne léčených kontrolních myší s lymfomem EL^I byla 31,3 dne (SD 3,66, střední doba přežití 30,5 dne).
DTX, PTX a deriváty DTX-LEV, PTX-LEV byly pro í.v. aplikaci rozpouštěny ve směsi Cremophor EL (Sigma, USA) a etanol (1:1), po rozpuštění léčiva byl objem doplněn 4 objemovými díly PBS (fosfátem pufrovaný fyziologický roztok). Konjugát PHPMA-AH-NH-NDTX-LEV, PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV byly rozpouštěny v PBS. Objem každé jednotlivé dávky léčiva byl 0,2 ml. Aplikovány byly následující dávky léčiv. DTX a derivát DTX-LEV 2x20 ng ekvivalentu DTX/kg, konjugát PHPMA-AH-NH-N=DTX-LEV v dávce 2x20 a 2c40 mg DTX ekvivalentu/kg. PTX a derivát PTX-LEV v dávce 2x30 mg ekvivalentu PTX/kg konjugát PHPMA-AH-NH-N-PTX-LEV v dávce 2x60 mg ekvivalentu PTX/kg.
A. Protinádorová účinnost konjugátu PHPMA-AH-NH-N='DTX-LEV (Obr. 3)
Volný DTX indukoval úplnou regresi nádorů EL-4 u 4 myší ze 7 testovaných.Derivát LEV-DTX měl nižší efekt a indukoval úplnou regresi nádoru EL-4 u I z 8 testovaných myší. Konjugát PHPMA-AH_NH~N=DTX-LEV v dávce ekvivalentní volnému DTX (2x20 mg ekvivalentu DTX/kg) vyléčil také 1 myš ze skupiny 8 myší. Zvýšení dávky konjugát na dvojnásobek (2x40 mg DTX ekvivalentu DTX/kg) však vedlo k vyléčení 7 myší ze skupiny (n=8). V žádné testované skupině nebyl zaznamenán úbytek váhy (jakožto znak toxicity léčiva). Myší, u nichž došlo k úplné regresi nádoru, zůstaly bez známek nádorového růstu Či toxicity do dne 94, kdy jim byly znovu transplantovány nádorové buňky EL-S4 ve stejné (tj. letální) dávce, a myši byly ponechány bez léčby. Tato druhý transplantace byla provedena pro průkaz imunologicky zprostředkované resistence proti nádoru. Statisticky významný podíl myší vyléčených konjugátem PHPMA-AH-NH-N=DTX-LEV (2x40 mg qp. DTX/kg) byl resistentní vůči nádoru EL-4 (5 myší resistentních ze 7, tj. 71 %). Odpovídající podíl resistentních jedinců byl i mezí myšmi vyléčenými volným DTX (ze 4 vyléčených myší byly 3 myši resistentní).
Závěr: Konjugát PHPMA-AH-NH-N=DTX-LEV měl významný protinádorový účinek u myší C57BL/6 s lymfomem EL-4, jeho podání nebylo prokázáno vedlejšími toxickými efekty a umožnilo ustavení resistence proti nádoru u 71 % vy léčených jedinců.
B. Protinádorová účinnost konjugátu PHPMA-AH-NH-N-PTX-LEV (Obr. 4)
Volný PTX se pro velmi omezenou rozpustnost nepodařilo myším podat (myši ihned po injekci hynuly). Derivát PTX-LEV neměl protinádorový efekt u lymfomu EL^f (neprodloužil průměrné přežití, žádná myš se nevyléčiva; n=8), Konjugát PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV v dávce 2x60 mg ekvivalentu PTX/kg nevyléčil žádnou myš ani neprodloužil průměrné přežití (n=8). V žádné skupině nebyl zaznamenán pokles váhy jako příznak toxicity léčiva.
Závěr: Derivát PTX-LEV (2x30 mg PTX eq./kg) ani konjugát obsahující derivát PTX (2x60 mg ekvivalentu PTX/kg) neměly při léčiní syngenního myšího lymfomu EL-4 terapeutický efekt.
Příklad 7: Ukázka in vivo biologické aktivity lineárního polymemího konjugátu paclitaxelu u myší inokulovaných karcinomem mléčné žlázy ETl (obr. 5).
Byl použit model myšího syngenního karcinomu mléčné žlázy 4TL Myším kmene BALB/C (samice) bylo v den 0 subkutánně implantováno lxlO6 nádorových buněk 4T1. Léčiva byla podána intravenózně (í.v.). a to ve dvou dávkách podaných v den 8 a den 12 po transplantaci nádorových buněk. První dávka byla podána v době, kdy byly nádory dobře vyvinuté, hmatatelné, o velikosti zhruba 300 mm3. V pokusu byla sledována velikost nádorů, tělesná váha myší, celkový zdravotní stav a přežití. Efekt konjugátu byl porovnáván s efektem volného léčiva (PTX) ajeho
- 10CZ 303072 B6 derivátu (PTX-LEV). Průměrné přežití neléčených kontrolních myší bylo 34,9 dní (SD 2,59; střední doba přežití 35 dní).
PTX. PTX-LEV a konjugát PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV byly pro i.v. aplikace připraveny stejně jak uvedeno výše (viz. Příklad 6 A, B). Aplikovány byly tyto dávky: PTX as derivát PTXLEV v dávce 2x30 mg ekvivalentu PTX/kg, konjugát PHPMA-A H-N H-N=PTX-LEV v dávce 2x60 mg ekvivalentu PTX/kg.
Konjugát PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV úplně vyléčil 3 z 8 testovaných myší. Po aplikaci io derivátu PTX-LEV došlo k regresi nádoru 4T1 u 1 z 8 myší. Aplikace volného léčiva (PTX) byla provázena významnými nežádoucími účinky: aplikace druhé dávky i.v. vyvolala prudkou reakci (křeče, později Špatný celkový stav - naježená srst, ochablost, který trval nejméně 24 hodin) u první z myší. Ostatním myším ve skupině pak byla druhá dávka snížena o 10%, a aplikována intraperitoneálně místo i.v. Vyléčila se pouze jedna myš, které byla dávka injikována i.v., u ostatních se neprojevil žádný léčebný efekt PTX. V Žádné pokusné skupině se neprojevilo snížení váhy jako příznak toxicity léčiva.
Pro zjištění resistence vyléčených myší proti nádoru 4T1 byly vyléčené myši znovu transplantovány 129 dní po první transplantaci nádorových buněk. Podruhé bylo injikováno IxlO3 buněk w 4T1 s.c. a myši byly ponechány bez léčby. U všech těchto myší (3 vyléčené konjugátem
PHPMA-AH-NH-N=PTX-LEV, 1 vyléčená PTX-LEV) nádory nerostly, to znamená že tyto myši byly resistentní vůči danému nádoru.
Závěr: Konjugát PHPMA-AH—NH—N=PTX-LEV měl významný protinádorový účinek u myší BALB/C s karcinomem mléčné žlázy 4T1, jeho podání nebylo provázeno vedlejšími toxickými efekty a umožnilo ustavení resistence proti nádoru u 38 % vyléčených jedinců
Příklad 8: Ukázal in vivo biologické aktivity lineárních polymemích konjugátů docetaxelu s růz30 ným obsahem léčiva u měření inokulovaných T buněčným lymfomem EL4 (Obr. 6)
Byl použit nádorový model lymfomu EL—4, popsaný výše (Příklad 6). Konjugáty PHPMA-AHNH-N=DTX-LEV s obsahem léčiva 8,2 hmotn. % DTX (9,1 hmotn. % DTX-LEV) a 16,3 hmotn. % DTX (18,0 hmotn. % DTX-LEV) byly pro aplikaci rozpuštěny v PBS (0,2 ml) a byla použita suboptimální dávka 2x30 mg ekvivalentu DTX/kg intravenózně, den 9 a 13 po transplantaci nádorových buněk.
Konjugát s nižším obsahem léčiva (8,2 % DTX) vyléčil 1 myš z 8 testovaných a u ostatních statisticky významně prodloužil přežití (neléčené kontroly průměr přežití 27,25 dne, SD 1,64,
4i) medián 28 dní; léčené myši průměr 41,75 dne, SD 6,54, medián 45 dní; p<0,01). Konjugát s vyšším obsahem léčiva (16,3 % DTX) vyléčil také 1 z 8 testovaných myší, ale přežití ostatních myší ve skupině nebylo významně prodlouženo.
Závěr: Obsah derivátu léčiva v konjugátu PHPMA-AH-NH-N=DTX—LEV měl významný vliv na protinádorový účinek u myší C57BL/6 s lymfomem EL-4 při podání suboptimální dávky 2x30 mg ekvivalentu DTX/kg. Polymemí konjugát s nižším obsahem prokázal vyšší protinádorovou aktivitu.
Literatura.
R. Duncan, J.B. Lloyd, J. Kopeček. P. Rejmanová, J. Stohalm, K. Ulbrich, B. Říhová, V. Chytrý, Synthetic Polymeric Drugs (1985). Czech. PV 0095/85, Australia 589587, Canada 130053, Denmark 164485, Europe 0187547, US 5 037 883, Japan 000137/86.
R. Duncan, N-(2-Hydro xy propy l)methac ryl amide copolymer conjugates, in j Swarbrick (ed), Drugs and the Pharmaceutiutical Sciences: Boča Raton, Taylor & Francis, p. 1 až 92 (2005).
- 11 CZ 303072 B6
T. Etrych, M. Jelínková. B. Říhová, K. Ulbrich K., New HPMA copolymers Containing doxorubicin bound via pH sensitive linkage.Synthesis, in vitro and in vivo biological properties.
J. Controlled Release 73, 89 až 102 (2001).
T. Etrych, P. Chytil, M. Jelínková, B. Říhová, K. Ulbrich, Synthesis of HPMA Copolymers > Containing Doxorubicin Bound via a Hydrazone Linkage. Effect of Spacer on Drug Release and in vitro Cytotoxicity. Macromolecular Biosci. 2,43 až 52 (2002).
T. Etrych, P. Chytil, M. Pechar, M. Studenovský, B. Říhová, K. Ulbrich, Způsob přípravy polymemích konjugátů doxorubicinu s pH-řízeným uvolňováním léčiva, CZ 297 827 B6.
T. Etrych, P. Chytil, K. Ulbrich, T. Mrkvan, B. Říhová, Polymemí léčiva a způsob jeho výroby, in CZ 298 945 B6.
T. Etrych, K. Ulbrich: Polymemí konjugáty doxorubicinu s pH-řízeným uvolňováním léčiva a způsob jejich přípravy: CZ PV-2006-505, CZ pat. 299 053 B6.
T. Etrych, P. Chybil, T, Mrkvan, M. Šírová, B. Říhová, K. Ulbrich, Conjugates of doxorubicin with graft HPMA copolymers for passive tumor targeting: Journal of Controlled Release 132,
184 až 192(2008)
R.B. Greenwald, PEG drugs: and overview, Journal of Controlled Release 74, 159 až 171 (2001).
R.B. Greenwald, Y. H. Choe, J. McGuire, C.D. Conover, Effective drug delivery by PEGylated drug conjugates, Advanced Drug Delivery Reviews 55, p. 217 až 250 (2003).
R.B. Greenwald, A. Pendri, D. Bolikal, Highly Water-Soluble Taxol Derivatives - 72o Polyethylene Glycol Carbamates and Carbonates, Journal of Organic Chemistry 60, 331 až 336 (1995).
P. Chytil, T. Etrych, M. Hrubý, K. Ulbrich, B. Říhová: Micelámí nosiče léčiv s protinádorovou aktivitou. CZ PV 2006-207.
P. Chytil, T. Etrych, Č. Koňak, M. Sírová, T. Mrkvan, J. Bouček, B. Říhová, K. Ulbrich, New
HPMA copolymer-based drug carriers with covalently bound hydrophobíc substituents for solid tumour tangeting, Journal of Controlled Release 127, 121 až 130 (2008).
J. Kopeček. P. Kopečková, T. Minko, Z. Lu, HPMA Copolymer-Anticancer Drug Conjugates: Design, Activity and Mechanism of Action, Europ. J. Pharm. Biopharm. 50, 61 až 81 (2000).
J. Kopeček, P. Kopečková, T. Minko, Z. Lu, C.M. Peterson, Water soluble polymers in tumor jo tangeted delivery, J. Controlled Release 74, 165 až 173 (2001).
F. Kratz, U. Beyer, M.T. Schutte, Drug-polymer conjugates containing acid~cleavable bonds, Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst. 16, 245 až 288 (1999).
F. Kratz, I.A. Muller, C. Ryppa, A. Wamecke, Prudrug strategies in anticancer chemotherapy, Chemmedchem 3, 20 až 53 (2003).
S.Ng, A. Sparreboom, Y. Shaked, C. Lee, S. Man, N. Desai, P. Soon-Shieng, W.d. Figg, R. Korbel, Influence of Formulation Vehicle on Metronomic Taxane Chemotherapy: AlbuminBound versus Cremophnor EL-Based Paclitaxel, Clin Cancer Res 26; 433 až 4338, 2006
Y. Noguchi, J. Wu, R. Duncan, J. Strohalm, K. Ulbrich, T. Akaike, H. Maeda, Early phase tumor accumulation of macromolecules: a great difference in clearance rate between tumor and normál tissues, Jpn. J. Cancer Res. 89,307 až 314 (1998).
A. Pendri, C.D. Conover, R.B. Greenwald, Antitumor activity of paditaxel-2-glycinate conjugated to poly(ethylene glycol): a water-soluble prodrug, Anti-Cancer Drug Design 13, 387 až 395 (1998).
B. Říhová, M. Jelínková, J. Strohalm, V. Šubr, D. Plocová, O. Hovorka, M. Novák, D.
Plundrová, Y. Germano, K. Ulbrich, Pólymeric Drugs Based on Conjugates of Synthetic and
Natural Macromolecules II. Anti-cancer Activity of antibody or (Fab')r-targeted Conjugates and Combined Therapy with Immunomodulatiors. J. Controlled Ret 64, 241 až 261 (2000).
- 12CZ 303072 B6
B. Říhová, T. Etrych, M. Pechar, M. Jelínková, M. Šťastný, O, Hovorka, M. Kovář, K. Ulbrich, Doxorubicin bound to a HPMA copolymer carrier through hydrazone bond is effective also in a cancer cell line with a limited content of lysosomes, J. Controiled Release 74, 225 až 232 (2001)
R. Satchi-Fainaro, R. Duncan, C. Bames, Polymer therapeutics for cancer: Current status and future challenges, in R Satchi-Fainero and R Duncan (eds), Advances in Polymer Science, Polymer Therapeutics II: Berlin / Heidelberg, Springer, p. 1 až 65 (2006).
L. W. Seymour, Y. Miyamoto, H. Maeda, M. Brereton, J. Strohalm, K. Ulbrich, R. Duncan, Influence of Molecular-Weight on Passive Tumor Accumulation of A Soluble Macromolecular Drug Carrier, Eur. J. Cancer 31 A, 766 až 770 (1995).
m J.M.M. Terwogt, W.T. Huinink, J.H.M. Schellens, M. Schot, I.A.M. Mandjes, M. Zurlo, M. Rocchetti, H, Rosing, F.J. Koopman, J.H. Beijnen, Phase I clinical and pharmacokinetic study of PNU 166945, a novel water-soluble polymer-conjugated prodrug of paclitaxel, Anti-Cancer Drugs 12, 3 15 až 323 (2001).
J. M.M. Terwogt, H. Rosing, M. Rocchetti, E. Frigerio, D. Fraier, F.J. Koopman, J.H.M. is Schellens, W.T, Huinink, J.H. Beijnen, High-performance liquid chromatographic methods for the determination of a novel polymer-bound paclitaxel derivative and free paclitaxel in human plasma, J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 23, 1233 až 1251 (2000).
K. Ulbrich, V, Subr, J. Strohalm, D. Plocová, M. Jelínková, B. Říhová, Polymeric Drugs Base on Conjugates of Synthetic and Natural Macromo leču les I. Synthesis and Physico-chemical
2o Characterisation J. Controiled Rel. 64, 63 až 79 (2000)
K. Ulbrich, T. Etrych, P. Chytil, M. Jelínková, B. Říhová, Antibody-Tangeted Polymer-Doxorubicin Conjugates with pH-Controlled Activation. J. Drug Targeting 12, 477 až 489 (2004) (A),
K. Ulbrich, V. Šubr, Polymeric Anticancer Drugs with pH-Controlled Activation, Ad v. Drug Delivery Rev. 56/7, 1025 až 1052 (2004) (B).
K. Ulbrich, T. Etrych, B. Říhová, M. Jelínková, M. Kovář: pH Senzitivní polymemí konjugáty atracyklinového kancerostatika pro cílenou terapii. CZ 293 787 YB6
U. Vanhoefer, et al., Comparative antitumor efficacy of docetaxel and paclitaxel in nudě míče bearing human tumor xenografts that overexpress the multidrug resistance protein (MRP), Annals ofOncology 8, 1221 až 1228(1997).
io J. W. Winter, Paclitaxel poliglumex (XYOTAX, CT-2103): A macromolecular taxane, Journal of Controiled Release 109, 120 až 126 (2005).
Claims (7)
1. Polymemí konjugát sestávající ze základního kopolymeru a na tento kopolymer hydrazova40 nou vazbou kovalentně vázaného derivátu léčiva, kde základní kopolymer je vytvořen monomerními jednotkami N-2-hydroxypropylmethakrylamidu (HPMA) a monomemími jednotkami na aminoskupině methakryloyl ováné aminokyseliny nebo na aminoskupiné methakryloylovaného oligopeptidu, kde acyl aminokyseliny tvořící součást monomemt jednotky nebo složený acyl oligopeptidu tvořícího součást monomemí jednotky je vybrán ze skupiny sestávající z glycylu,
45 glycylglycylu, beta-alanylu, 6-aminohexanoylu (AH), 4-aminobenzoylu, GlyPheGly, GlyLeuGly, GlyLeuPheGly a GlyPheLeuGly, vyznačující se tím, že derivát léčívaje sloučenina léčiva vybraného ze skupiny složené z paclitaxelu (PTX), docetaxelu (DTX) vzniklá acylací hydroxylové skupiny v pozici 2 léčiva oxokyselinou mající 5 až 10 uhlí50 kových atomů a hydrazonová vazba je vytvořena mezi uhlíkovým atomem původně nesoucím
- 13CZ 303072 B6 karbonylovou skupinu oxokyseliny a koncovým dusíkovým atomem hydrazidové skupiny základního kopolymeru.
2. Konjugát podle nároku 1 obecného vzorce I kde symbol SP) představuje na aminoskupině methakryloylovanou aminokyselinu nebo na aminoskupinč methakryloylovaný oligopeptid, n, m a p jsou přirozená čísla a symboly R1 až R4 io představují substituenty tvořící jednu ze skupin a), b), c), kde
a) R1 = benzoyl, R2 = acetyl, R3 = methyl, R4 = hydroxy, takže derivát léčiva je derivátem paclitaxelu,
b) R1 = tert-butoxykarbonyl, R2 ~ H, R3 = methyl, R4 = hydroxy, takže derivát léčívaje derivátem docetaxelu,
15 vyznačující se tím, že oxokyselina je vybrána ze skupiny složené z kyseliny levulové, 4-(2-oxopropyI)benzoové, 4-oxo-pent-2-enové, 5-oxo-hex-2-enové a ó-oxo-hept-2enové, takže symbol = R- znamená
3. Konjugát podle některého z předchozích nároků vyznačující se tím, že monomemí jednotky HPMA tvoří 70 až 98 molámích %, monomemí jednotky s hydrazidovými funkčními skupinami 1,5 až 29,5 molámích % a jednotky s navázaným derivátem cytostatika 0,5 až 10 molámích % všech monomem ích jednotek konjugátu.
- 14CZ 303072 Bó
4. Konjugát podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že sestává z hlavního řetězce nesoucího léčivo a dalších řetězců- roubů, které případně rovněž nesou léčivo, přičemž tyto rouby jsou k hlavnímu řetězci připojeny vazbou v organismu štěpitelnou.
s
5. Konjugát podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že pokud je lineární, spadá jeho molámí hmotnost do intervalu 10 000 až 50 000 g/mol a pokud je roubovaný, spadá jeho molámí hmotnost do intervalu 50 000 až 250 000 g/mol.
io
6. Způsob přípravy polymemího konjugátu definovaného některým z nároků 1 až 5, vyznačuj ící se tím, že se radikálovou kopolymerací připraví základní kopolymer nesoucí hydrazidové funkční skupiny a na ten se připojí derivát léčiva podle nároku 1 reakcí karbony lově skupiny oxokyseliny s hydrazidovou skupinou základního kopolymeru.
i s
7. Derivát léčiva jak je definován v nároku 1 vybraný ze skupiny
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20090085A CZ303072B6 (cs) | 2009-02-13 | 2009-02-13 | Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika |
| EP10716267A EP2413973A1 (en) | 2009-02-13 | 2010-02-09 | Polymeric conjugates of paclitaxel and docetaxel with ph-controlled releasing of the cancerostatic agent |
| PCT/CZ2010/000014 WO2010091650A1 (en) | 2009-02-13 | 2010-02-09 | Polymeric conjugates of paclitaxel and docetaxel with ph-controlled releasing of the cancerostatic agent |
| UAA201115172A UA104187C2 (ru) | 2009-02-13 | 2010-02-09 | Полимерные конъюгаты паклитакселя и доцетакселя с рн-контролируемым высвобождением средства, которое оказывает статическое действие на злокачественные новообразования |
| EA201190315A EA022803B1 (ru) | 2009-02-13 | 2010-02-09 | ПОЛИМЕРНЫЕ КОНЪЮГАТЫ ПАКЛИТАКСЕЛЯ И ДОЦЕТАКСЕЛЯ С КОНТРОЛИРУЕМЫМ ПОД ДЕЙСТВИЕМ pH ВЫСВОБОЖДЕНИЕМ КАНЦЕРОСТАТИЧЕСКОГО АГЕНТА |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20090085A CZ303072B6 (cs) | 2009-02-13 | 2009-02-13 | Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ200985A3 CZ200985A3 (cs) | 2010-08-25 |
| CZ303072B6 true CZ303072B6 (cs) | 2012-03-21 |
Family
ID=42309667
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20090085A CZ303072B6 (cs) | 2009-02-13 | 2009-02-13 | Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP2413973A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ303072B6 (cs) |
| EA (1) | EA022803B1 (cs) |
| UA (1) | UA104187C2 (cs) |
| WO (1) | WO2010091650A1 (cs) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3239139B1 (en) | 2010-05-27 | 2020-10-28 | Ningbo Combireg Pharmaceutical Technology Co. Ltd | Chemical synthesis and anti-tumor and anti-metastatic effects of dual functional conjugate |
| CN112807299B (zh) | 2015-05-15 | 2022-06-24 | 珠海贝海生物技术有限公司 | 包含多西他赛和人血清白蛋白的固体组合物及其制备方法和应用 |
| GB2551979A (en) * | 2016-06-30 | 2018-01-10 | Rs Arastirma Egitim Danismanlik Llac Sanayi Ticaret Ltd | Cleavable polymer drug conjugates |
| CN110062622B (zh) | 2016-10-27 | 2022-10-14 | 珠海贝海生物技术有限公司 | 多西他赛和人血清白蛋白的中性pH组合物 |
| WO2021158632A1 (en) | 2020-02-04 | 2021-08-12 | Zhuhai Beihai Biotech Co., Ltd. | Formulations of docetaxel |
| RU2753479C1 (ru) * | 2020-10-14 | 2021-08-17 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Пермская государственная фармацевтическая академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации | 2-Амино-1-бензамидо-5-[2-(нафталин-1-ил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамид, обладающий цитотоксическими и проапоптогенными свойствами в отношении клеток солидных опухолей человека, в том числе резистентных к химиопрепаратам |
| KR20240154544A (ko) | 2022-02-25 | 2024-10-25 | 주하이 베이하이 바이오테크 컴퍼니 리미티드 | 도세탁셀 조성물 및 방법 |
| CN114588272B (zh) * | 2022-04-08 | 2023-05-26 | 皖西学院 | 一种负载no的多西紫杉醇纳米药物及其制备方法和应用 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ62094A3 (en) * | 1992-06-19 | 1994-07-13 | Erba Carlo Spa | Paclitaxel derivatives bound onto a polymer |
| US20020197261A1 (en) * | 2001-04-26 | 2002-12-26 | Chun Li | Therapeutic agent/ligand conjugate compositions, their methods of synthesis and use |
| CZ298945B6 (cs) * | 2006-09-18 | 2008-03-19 | Zentiva, A. S. | Polymerní lécivo a zpusob jeho výroby |
| WO2008076771A2 (en) * | 2006-12-15 | 2008-06-26 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Coatings of acrylamide-based copolymers |
| US20080171067A1 (en) * | 2007-01-17 | 2008-07-17 | Immunomedics, Inc. | Polymeric Carriers of Therapeutic Agents and Recognition Moieties for Antibody-Based Targeting of Disease Sites |
| CZ301004B6 (cs) * | 2007-06-27 | 2009-10-07 | Ústav experimentální botaniky AV CR v. v. i. | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ2006207A3 (cs) * | 2006-03-28 | 2008-01-16 | Zentiva, A. S. | Micelární nosiče léčiv s protinádorovou aktivitou |
| CZ2006505A3 (cs) * | 2006-08-09 | 2008-04-09 | Zentiva, A. S. | Polymerní konjugáty doxorubicinu s pH-rízeným uvolnováním léciva a zpusob jejich prípravy |
-
2009
- 2009-02-13 CZ CZ20090085A patent/CZ303072B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2010
- 2010-02-09 EA EA201190315A patent/EA022803B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-02-09 EP EP10716267A patent/EP2413973A1/en not_active Withdrawn
- 2010-02-09 WO PCT/CZ2010/000014 patent/WO2010091650A1/en active Application Filing
- 2010-02-09 UA UAA201115172A patent/UA104187C2/ru unknown
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ62094A3 (en) * | 1992-06-19 | 1994-07-13 | Erba Carlo Spa | Paclitaxel derivatives bound onto a polymer |
| US20020197261A1 (en) * | 2001-04-26 | 2002-12-26 | Chun Li | Therapeutic agent/ligand conjugate compositions, their methods of synthesis and use |
| CZ298945B6 (cs) * | 2006-09-18 | 2008-03-19 | Zentiva, A. S. | Polymerní lécivo a zpusob jeho výroby |
| WO2008076771A2 (en) * | 2006-12-15 | 2008-06-26 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Coatings of acrylamide-based copolymers |
| US20080171067A1 (en) * | 2007-01-17 | 2008-07-17 | Immunomedics, Inc. | Polymeric Carriers of Therapeutic Agents and Recognition Moieties for Antibody-Based Targeting of Disease Sites |
| CZ301004B6 (cs) * | 2007-06-27 | 2009-10-07 | Ústav experimentální botaniky AV CR v. v. i. | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Advanced Drug Delivery Release 56 (2004) s. 1023-1050 * |
| Anticancer Drugs 12 (4) 2001 s. 315-23 (abstrakt) * |
| Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 13 (2003) s. 355-360 (schema 1 a 2) * |
| Expert Opin. Investig. Drugs 16 (7) 2007 s. 1037-58 * |
| Journal of Controlled Release 132 (3) str. e63-e65 (2008) * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA201190315A1 (ru) | 2012-05-30 |
| EA022803B1 (ru) | 2016-03-31 |
| WO2010091650A1 (en) | 2010-08-19 |
| CZ200985A3 (cs) | 2010-08-25 |
| EP2413973A1 (en) | 2012-02-08 |
| UA104187C2 (ru) | 2014-01-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Etrych et al. | Polymer conjugates of doxorubicin bound through an amide and hydrazone bond: Impact of the carrier structure onto synergistic action in the treatment of solid tumours | |
| Chytil et al. | New HPMA copolymer-based drug carriers with covalently bound hydrophobic substituents for solid tumour targeting | |
| Chytil et al. | HPMA copolymer–drug conjugates with controlled tumor‐specific drug release | |
| JP6013424B2 (ja) | Ｈｐｍａ−ドセタキセルコンジュゲートおよびその使用 | |
| Etrych et al. | Conjugates of doxorubicin with graft HPMA copolymers for passive tumor targeting | |
| CZ303072B6 (cs) | Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika | |
| Nakamura et al. | Comparison between linear and star-like HPMA conjugated pirarubicin (THP) in pharmacokinetics and antitumor activity in tumor bearing mice | |
| EP2063914B1 (en) | Grafted macromolecular conjugates of doxorubicin with anticancer activity and method of their preparation | |
| JP5749273B2 (ja) | 抗がん剤送達のためのポリマー系 | |
| Etrych et al. | Comparison of the pharmacological and biological properties of HPMA copolymer-pirarubicin conjugates: A single-chain copolymer conjugate and its biodegradable tandem-diblock copolymer conjugate | |
| ES2458841T3 (es) | Portadores de fármacos de polímero de alto peso molecular dendrítico y sus conjugados con fármacos especialmente para el tratamiento de tumores sólidos | |
| SK2912004A3 (en) | pH-sensitive polymeric conjugates of an anthracycline cancerostatic drug for targeted therapy | |
| WO2017177991A1 (en) | Block copolymer for overcoming drug resistance of tumours to chemotherapy, its polymer-drug conjugate, pharmaceutical composition containing them, method of preparation and use thereof | |
| CZ2006207A3 (cs) | Micelární nosiče léčiv s protinádorovou aktivitou | |
| CZ22175U1 (cs) | Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH řízeným uvolňováním kancerostatika | |
| JP5734209B2 (ja) | プロドラッグ | |
| EP2349343B1 (en) | Polymeric composition with synergistic effect in treatment of tumour diseases | |
| WO2021121446A1 (en) | Copolymer with hydrolytic release of cancerostatic agent cytarabine, method of its preparation and use thereof | |
| CZ293886B6 (cs) | pH senzitivní polymerní konjugáty antracyklinového kancerostatika pro cílenou terapii |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20190213 |