CZ302343B6 - Farmaceutický prípravek založený na alfa-cyklodextrinu pro perorální podávání analogu LH-RH - Google Patents

Farmaceutický prípravek založený na alfa-cyklodextrinu pro perorální podávání analogu LH-RH Download PDF

Info

Publication number
CZ302343B6
CZ302343B6 CZ20011173A CZ20011173A CZ302343B6 CZ 302343 B6 CZ302343 B6 CZ 302343B6 CZ 20011173 A CZ20011173 A CZ 20011173A CZ 20011173 A CZ20011173 A CZ 20011173A CZ 302343 B6 CZ302343 B6 CZ 302343B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
npg
cyclodextrin
ala
group
leu
Prior art date
Application number
CZ20011173A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20011173A3 (cs
Inventor
Delansorne@Rémi
Bonnet@Paule
Paris@Jacques
Original Assignee
Laboratoire Theramex
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Laboratoire Theramex filed Critical Laboratoire Theramex
Publication of CZ20011173A3 publication Critical patent/CZ20011173A3/cs
Publication of CZ302343B6 publication Critical patent/CZ302343B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/24—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A61K38/09—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH], i.e. Gonadotropin-releasing hormone [GnRH]; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/16—Masculine contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/18—Feminine contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A61P5/04—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin for decreasing, blocking or antagonising the activity of the hypothalamic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Rešení se týká použití .alfa.-cyklodextrinu nebo jeho derivátu pro výrobu farmaceutického prípravku urceného pro perorální podávání peptidových analogu LH-RH. Dále se rešení týká farmaceutických prípravku obsahujících peptidové analogy LH-RH v kombinaci s .alfa.-cyklodextrinem nebo jeho derivátem.

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká oblasti farmacie. Konkrétně se vynález týká použití a-cyklodextrinu nebo jeho derivátů pro výrobu farmaceutického přípravku pro perorální podávání peptidových analogů LH-RH (Hormon uvolňující luteinizační hormon). Vynález se také týká perorálních ío farmaceutických přípravků obsahujících peptidové analogy LH-RH v kombinaci s a-cyklodextrinem.
Dosavadní stav techniky 15
Přírodní a modifikované cyklodextriny (CD) jsou známou složkou mnoha různých farmaceutických přípravků, kde se využívá jedné nebo více jejich vlastností pokud jde o rozpustnost a stabilitu léků (Loftsson a Brewster, 1996, J. Phar. Sci. 85 (10): 1017-1025) nebo celkového zlepšení příjmu léčiva in vivo (Rajewski a Stella, 1996, J. Phar, Sci. 85 (11):1142-1169). CD jsou cyklické oligosacharidy obsahující alespoň 6 a-D-(+)-glukopyranózových jednotek spojených a(l-4)glukosidickými vazbami (Nash, Handbook of Pharmaceutical Excipients, ed. Wade a Weller, 1994, American Pharmaceutical Association, Washington, The Pharmaceutical Press, London, s. 145-148), přičemž tři nejobvyklejší formy CD jsou α-, β- a γ-CD, které se skládají ze 6, 7 a 8 cukerných jednotek, v uvedeném pořadí. Mnoho různých derivátů každého typu CD lze získat náhodnými nebo řízenými modifikacemi jedné, několika nebo všech volných hydroxylových skupin cukerných jednotek.
LH-RH je neurohormon, který se tvoří v neuronech hypotalamu a je secemován vportální vaskulatuře hypoťyzy, aby stimuloval sekreci luteinizačního hormonu (LH) hormonu stimuluj í30 čího folikuly (FSH), které dále řídí endokrinní a germinální funkce vaječní ků u žen a varlat u mužů. LH-RH je peptid následující struktury: pGlu-His-Tip-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-ProGly-NHj. Četné lineární nebo cyklické peptidové analogy LH-RH s normální nebo menší velikostí, obsahující přirozené, neobvyklé nebo chemicky modifikované aminokyseliny, byly v průběhu uplynulých let syntetizovány s cílem získat analog se silným agonistickým nebo antagonis35 tickým účinkem (Karten a Rivier, Endocr. Rev., 1986, 7(1), 44 46, Dutta, 1988, Drug of the future, 13(8): 761-787, Kutscher a kol., 1997, Angew Chem. Int. Ed. Engl. 36: 2148-2161). Vzhledem k jejich úplné nebo částečné peptidové struktuře všechny tyto analogy vykazují špatnou biologickou dostupnost po perorálním podání a špatnou biologickou aktivitu.
Dosud byly popsány peptidové analogy LH-RH vhodné pouze pro jiné než perorální podávání. Tak např. Matsubara a kol. (1996, J. Pharm, Sci. 84(11):1295-1300) popsali nazální lékovou formu buserelinu, založenou na dimethyl-β—CD, která měla zlepšenou biologickou dostupnost.
Existuje proto značná potřeba, z hlediska uživatelského komfortu pacienta, získat přípravky vhodné pro perorální podávání peptidových analogů LH-RH.
Podstata vynálezu
Bylo překvapivě zjištěno, že α-CD nebo jejich deriváty zvyšují biologickou aktivitu peptidových analogů LH-RH, pokud jsou podávány perorálně.
Takže jeden aspekt předkládaného vynálezu se týká použití α-cyklodextrinu nebo jeho derivátů pro výrobu farmaceutických přípravků pro perorální podávání peptidových analogů LH-RH.
- 1 CZ 302343 B6
K příkladům peptidových analogů LH-RH, které se mohou užít podle předkládaného vynálezu, patří analogy popsané v mezinárodní patentové přihlášce WO 98/21229 a WO 98/55505, jejichž obsah je formou odkazu součástí předkládané přihlášky, stejně jako standardní agonisté a antago5 nisté LH-RH, jako je např. buserelin, nafarelin, leuprorelin, goserelin, histrelin, triptorelin, desloreiin, lutrelin, avorelin, cetrorelix, antid, ganirelix, azalin B, antarelix, detirelix, ramorelix, teverelix nebo abarelix.
Výhodně mají takové peptidové analogy vzorec (sekvence id. č. 1): io
A1-A2-A3-A4-A5-A6—A7-A8-Pro-Z (A) ve kterém:
- Al je pGlu, D-pGlu, Sar, AcSar, Pro nebo jeho deriváty jako jsou AcPro, ForPro, OH-Pro,
Ac-OH-Pro, dehydro-Pro nebo Ac-dehydro-Pro, Ser, D-Ser, Ac-D-Ser, Thr, D-Thr, AcD-Thr, nebo aromatická D-aminokyselina, která může být acylována, jako je D-Phe, DHPhe, D-Tyr, D-Trp, D-2MeTrp, D-Nal, D-lNal, D-difenyl-Ala, D-Bal, D-Pal, D-4Pal nebo D-Qal, kde D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-HTyr a D-Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, (Ci-C4)alky lovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy C ((C]-C4)alky lovou skupinou), alkoxy skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou,
- A2 je přímá vazba, His, nebo aromatická D-aminokyselina, jako je D-Phe, D-HPhe, D-Tyr,
D-HTyr, D-Trp, D-2MeTrp, D-Nal, D-lNal, D-difenyl-Ala, D-Bal, D-Pal, D-4Pal nebo
D-Qal, kde D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-HTyr a D-Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, jo - A3 je aromatická L- nebo D-aminokyselina jako je Phe, HPhe, Tyr, HTyr, Trp, 2MeTrp, Nal, INal, difenyl-AIa, Bal, Pal, 4Pal nebo Qal, kde Phe, HPhe, Tyr, HTyr a Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou,
- A4 je Ala, Ser, D-Ser, MeSer, SerfOBu1), Ser(OBzl) nebo Thr,
- A5 je aromatická L-aminokyselina jako je Phe, HPhe, Tyr, HTyr, Trp, 2MeTrp, Nal, INal, difenyl-Ala, Bal, Pal, 4Pal nebo Qal, kde Phe, HPhe, Tyr, HTyr a Trp mohu být substituo40 vány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, nebo Ν-α-substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, volitelně substituovanou jedním nebo několika atomy fluoru, nebo bazická L- nebo D-aminokyselina jako je Arg, HArg, Orn, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo ACha, kde Arg a HArg mohou být Ν-α-substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloal kýlovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku na jednom nebo obou atomech dusíku, a kde Om, Lys, HLys, APhe, a ACha mohou být N-substituovány jednou nebo dvěma alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovými skupinami obsahujícími 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou aminotriazolylovou skupinou, nikotinoylovou, izonikotinoy lovou, 6-methyl-nikotinoylovou, glycyl-nikotinoylovou, nikotinyl-azaglycylovou, furylovou, glycyl-fury lovou, fůry 1-azaglycy lovou, pyrazinylovou, pyrazinyl-karbonylovou, pikolinoylovou, 6-methyl-pikolinoylovou, šikimylovou, šikimylglycylovou skupinou nebo skupinou Fmoc nebo Boc,
-2 CZ 302343 B6
A6 je Gly, (S)spirolaktam-Pro, D-Pro, D-Ser, D-Thr, D-Cys, D-Met, D-Asn, D-Pen, D(S-Me)Pen, D(S-Et)Pen, D-Ser(OBu’), D-AspCOBu’), D-Glu(OBu'), D-ThiýOBu'), DCys(OBu), D-Ser(ORi), kde R] je sacharidová skupina, aza-aniinokysciina jako je azaGiy nebo azaAla, D-His, který může být substituován na imidazolovém kruhu alkylovou skupi5 nou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo acylovou skupinou obsahující 2 až 7 atomů uhlíku nebo benzylovou skupinou, alifatická D-aminokyselina s postranním alkylovým řetězcem obsahujícím 1 až 8 atomů uhlíku nebo cykloalkylovým řetězcem obsahujícím 3 až 6 atomů uhlíku, jako je D-Ala, D-Abu, D-Aib, D-3Aib, D-Val, D-Nva, D-Leu, D-lle, D-Tle, DNle, D-Hol, D-Npg, D-CPa, D-Cpa, EMDba nebo EM2ha, aromatická D-aminokyselina io jako je D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-Htyr, D-Trp, D-2mcTrp, D~Nal, D-INal, D-difenylAla, D-antryl-Ala, D-fenantryl-Ala, D-benzhydryl-Ala, D-fluorenyl-Ala, D~Bal, D-Pal. D-4Pal nebo D-Qal, kde D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-HTyr a D-Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethy lovou sku15 pinou, D-cyklohexadienyl-Gly, D-perhydronaftyl-Ala, D-perhydrodifenyl-Ala, nebo bazická L- nebo D-aminokyselina jako je Arg, HArg, Orn, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo ACha, kde Arg a HArg mohou být N—substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku na jednom nebo obou atomech dusíku, a kde Om, Lys, HLys, APhe a ACha mohou být N-substitllová20 ny jednou nebo dvěma alkytovými skupinami obsahujícími I až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovými skupinami obsahujícími 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou aminotriazolylovou nebo nikotinoylovou, izonikotinoylovou, 6-methyl-nikotinoylovou, glycyl-nikotinoylovou, nikotinyl-azaglycylovou, furylovou, glycyl-furylovou, furyl-azaglycylovou, pyrazinylovou, pyrazinyl-karbonylovou, pikolinoylovou, 6—methylpikolinoylovou, šikimylovou, šikimyl2? glycylovou, nebo skupinou Fmoc nebo Boc,
- A7 je lineární, rozvětvená nebo cyklická alifatická aminokyselina obsahující 3 až 20 atomů uhlíku, jako je např. Ala, Abu, Aib, 3Aib, Val, Leu, Ile, Tle, Nle, Hol, Npg, CPa, Cpa, Cba, Cha nebo Ada, které mohou být Ν-α-substituovány alkylovou skupinou obsahující I až
3« 4 atomy uhlíku, volitelně substituovanou jedním nebo několika atomy fluoru,
- A8 je bazická L- nebo D-aminokyselina jako je např. Arg, HArg, Om, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo ACha, kde Arg nebo HArg mohou být N-substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku i nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku na jednom nebo obou atomech dusíku, a kde Om, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo
ACha mohou být substituovány jednou nebo dvěma alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovým i skupinami obsahujícími 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou aminotriazolylovou nebo nikotinoylovou, izonikotinoylovou, 6-methyl-nikotinoylovou, glycyl-furylovou, furyl-azaglycylovou, pyrazinylovou, pyrazinylkarbonylovou, pikolinoylovou, 6-methyl-pikolinoylovou, Šikimylovou, šikimyl-glycylovou, nebo skupinou Fmoc nebo Boc,
- Z je GlyNH2, D-AlaNH2, azaGlyNH2, nebo skupina -NHR2, kde R2 je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, která může být substituována hydroxyskupinou nebo jedním či několika atomy fluoru, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, nebo heterocyklická skupina vybraná z morfolinylové, pyrolidinylové a piperidylové skupiny, ajejich farmaceuticky přijatelné soli.
V předkládaném popisu vynálezu termín „alkylová skupina obsahující I až 4 atomů uhlíku“ označuje skupinu methylovou, ethylovou, n-propylovou, i-propylovou, n-butylovou, i-butyiovou, s-butylovou a t-butylovou.
-3 CZ 302343 B6
Termín „alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku“ zahrnuje methylovou, ethylovou, npropylovou, i—propylovou, n-butylovou, i-butylovou, s-butylovou, t-butylovou, n-pentylovou, i-pentylovou, s-pentylovou, t-penty lovou a hexy lovou.
Termín „alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku“ zahrnuje methylovou, ethylovou, npropylovou, i—propylovou, π-butylovou, i-butylovou, s-butylovou, t-butylovou, n—pentylovou, i-pentylovou, s-pentylovou, t-pentylovou, hexylovou, heptylovou a oktylovou skupinu.
Termín „alkoxy skupina obsahující I až 4 atomy uhlíku“ označuje skupinu -OR, kde R je io alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku.
Termín „acylová skupina obsahující 2 až 7 atomů uhlíku“ označuje skupinu -COR, kde R je alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku.
Termín „cykloalkylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku“ označuje skupinu cyklopropylovou, cyklobutylovou, cyklopentylovou a cyklohexylovou.
Termín „sacharidová skupina“ označuje D- nebo L-pentózy nebo hexózy a jejich aminoderiváty.
2o Termín „analogy LH-RH“ označuje peptidy, ve kterých alespoň jedna aminokyselina v sekvenci LH-RH byla modifikována.
Termín „(S)spirolaktam-Pro“ označuje skupinu podle vzorce:
Termín „perorální podávání“ znamená podávání peptidových analogů podle předkládaného vynálezu do gastrointestinálního traktu prostřednictvím perorálních lékových forem nebo farmaceutických přípravků.
Peptidomimetické analogy LH-RH definované absencí alespoň jedné peptidové amidové vazby, které jsou uvedeny v přehledu Kutscher a kol. (1997, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 36: 21482161), nespadají do rozsahu předkládaného vynálezu.
V popisu předkládaného vynálezu a v patentových nárocích jsou použity následující zkratky:
Abu: kyselina 2—aminomáselná ACha: aminocyklohexylalanin 3Aib: kyselina 3-aminoizomáselná
AlaNIT: alaninamid Arg: arginin azaAla: aza-alanin azaGlyNH?: azaglycinamid Boc: íerc-butoxykarbonyl
Cha: cyklohexylalanin CPa: cyklopropylalanin Fmoc: fluorenylmethoxykarbonyl Glu: kyselina glutamová
Ac: acetyl
Aib: kyselina 2—aminoizomáselná Ala: alanin
APhe: p-aminofenylalanin Asp: kyselina asparagová azaGly: aza-glycin Bal: benzothienylalanin Cba: cyklobutylalanin Cit: cítrulin
Cpa: cyklopentylalanin For: formyI Gly: glycin
-4CZ 302343 B6
GlyNH2: glycinamid HCit: homocitrulin HLys: homolysín lič: isoleucin
Leu: leucin
MeSer: N-methylserin Nal: 3-<2-naftyl)alanin NEt: N—ethy lam id Nle: norleucín io Nva: norvalin
OBzl: benzy lester Pal: 3-(3-pyridyl)alanÍn Pen: penicilamin Phe: fenylalanin i5 Qal: 3-(3-chinolyl)alanin Ser: serin (S-Et)Pen: S-ethyl-penicilamin Tle: /erc-leucin Tyr: tyrosin
Ada: adamantylalanin
MeNpg: N-methylneopentylglycin HTyr: homotyrosin
Bzl: benzyl Asn: asparagin
MeTyr: N-methyltyrosin
HArg: homoarginin
His: histidin
Hol: homoleucin
IprLys: N5-isopropyl lysin Lys: lysin Met: methionin INal: 3-(l-naftyl)alanin NicLys: Ne-nikotinoyllysin Npg: neopentylglycín Obu': íerc-butoxyskupina Om: omitin
PClPhe: 3—(4-chlorofenyl)alanin PGlu: kyselina pyroglutamová Pro: prolin
Sar: sarkosin (S-Me)Pen: S-methylpenicilamin Thr: threonin Trp: tryptofan Val: valin
HPhe: homofenylalanin 4Pal: 3-(4-pyridyl)alanin 2MeTrp: 2-methyltryptofan SPL: (S)spirolaktam-Pro MeLeu: N~methyl leucin MeHtyr: N-methylhomotyrosin
Výhodná skupina peptidových analogů (A) obsahuje peptidy podle vzorce (sekvence id. č. 2):
A1-His~A3-A4-A5-A6—A7—A8-Pro-Z (I) ve kterém:
- A1 je pGlu, Sar nebo AcSar,
- A3 je aromatická L-aminokyselina jako je Phe, HPhe, Tyr, HTyr, Trp, 2MeTrp, Nal, INal, difenyl-Ala, Bal, Pal, 4Pal nebo Qal, kde Phe, HPhe, Tyr, HTyr a Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alky lovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou,
- A4 je Ala, Ser, D-Ser, MeSer, Sei^OBu*), Ser(OBzl) nebo Thr,
A5 je aromatická L-aminokyselina jako je Phe, HPhe, Tyr, HTyr, Trp, 2MeTrp, Nal, INal, difenyl-Ala, Bal, Pal, 4Pal nebo Qal, kde Phe, HPhe, Tyr, HTyr a Trp mohu být substituová45 ny jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou,
- A6 je Gly, D-Pro, (S)spirolaktam-Pro, D-Ser, D-Thr, D-Cys, D-Met, D-Pen, D-(SMe)Pen, D(S-Et)Pen, D-SeiýOBu'), D-AspíOBu1), D-GlufOBu1), D-ThrfOBu'), D50 Cys(OBu‘), D-SeitORO, kde Ri je sacharidová skupina, aza-aminokyselina jako je azaGly nebo azaAla, D-His, který může být substituován na imidazolovém kruhu alkylovou skupi-5 CZ 302343 B6 nou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo benzylovou skupinou, alifatická D-aminokyselina s postranním alkylovým řetězcem obsahujícím I až 8 atomů uhlíku nebo cykloalkylovým řetězcem obsahujícím 3 až 6 atomů uhlíku, jako je D-Ala, D-Abu, D-Aib, D-3Aib, D-Val, D-Nva, D-Leu, D-Ile, D-Tle, D-Nle, D-Hol, D-Npg, D-CPa, D-Cpa, D-Cba nebo D5 Cha, aromatická D-aminokyselina jako je D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-Htyr, D-Trp, D2meTrp, D-Nal, D-lNal, D-difenyl-Ala, D-anthryl-Ala, D-fenanthryl-Ala, D-benzhydryl-Ala, D-fluorenyl-Ala, D-Bal, D-Pal, D-4Pal nebo D-Qal, kde D-Phe, D-HPhe, DTyr, D-HTyr a D-Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující I až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, ío nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, D-cyklohexadienyl-Gly, D-perhydronaťtyl-Ala, D-perhydrodifenyl-Ala, nebo bazická D-aminokyselina jako je D-Arg, DHArg, D-Orn, D-Lys, D-HLys, D-Cit, D-HCit, D-APhe volitelně substituovaná aminotriazolylovou skupinou, nebo D-ACha, kde D-Arg a D-HArg mohou být N-substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo eykloalkylovou skupinou obsahují15 cí 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou Fmoc nebo Boc,
A7 je lineární, rozvětvená nebo cyklická alifatická L-aminokyselina obsahující 3 až 20 atomů uhlíku, jako je např. Ala, Abu, Aib, 3Aib, Val, NVa, Leu, Ile, Tle, Nle, Hol, Npg, CPa, Cpa, Cba, Cha nebo Ada, které mohou být Ν-α-substituovány alkylovou skupinou obsahu20 jící I až 4 atomy uhlíku, volitelně substituovanou jedním nebo několika atomy fluoru,
A8 je bazická L-aminokyselina jako je např. Arg, HArg, Om, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe volitelně substituovaná aminotriazolylovou skupinou, nebo ACha
- Z je GlyNH2, azaGlyNH2, nebo skupina -NHR2, kde R2 je alkylová skupina obsahující 1 až atomy uhlíku, která může být substituována hydroxyskupinou nebo jedním či několika atomy fluoru, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, nebo heterocyklícká skupina vybraná z morfolinylové, pyrolidinylové a piperidylové skupiny, ajejich farmaceuticky přijatelné soli.
Z peptidových analogů podle vzorce 1 jsou výhodné analogy podle vzorce (sekvence id. Č. 3):
pGlu-His-A3-Ser-A5-A6-A7-Arg-Pro-Z (II) ve kterém:
- A3 a A5 jsou aromatická L-aminokyseliny jak byly definovány ve vzorci I
- Λ6 je podle definice ve vzorci I
- A7 je Leu, Tle, Nle, Hol, Npg, Cha nebo Ada, které mohou být Ν-α-substituovány methylovou nebo ethylovou skupinou,
- Z je definováno jako ve vzorci I, ajejich farmaceuticky přijatelné soli.
Zvláště výhodné peptidové analogy jsou podle vzorce (sekvence id. č. 4):
pG lu-H i s-A3-Ser-A5-A6-A 7-Arg-Pro-Z (III)
-6CZ 302343 B6 ve kterém:
- A3 a A5 jsou navzájem nezávisle Phe, Tyr, Trp, 2MeTrp, Nal, INal, Bal, Pal, 4Pal nebo pCIPhe,
- A6 je (S)spirolaktam-Pro, Gly, D-Pro, D-Ser(OBu’), D-Asp(OBu'), D-Glu(OBu'), DThr(OBu’), D—Cys(OBul), D-His nebo D-His(Bzl), D-Ala, D-Leu, D-Tle, D-Nle, D-Hol, D-Npg, nebo D-Cha, D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-HTyr, D-Trp, D-2meTrp, D~Nal, Οι o INal, D-Bal, D-Pal, D-4Pal nebo D-pCIPhe, D-cyklohexadienyl-Gly, D-perhydronaftylAla, D-perhydrodifenyl-Ala, nebo D-APhe volitelně substituovaná aminotriazotylovou skupinou, — A7 je Leu, Npg, nebo Cha, které mohou být N—a—substituovány methylovou skupinou,
Z je GlyNH2, azaGlyNH2, nebo skupina-NC2H5.
Zvláště výhodné peptidové analogy jsou podle vzorce (sekvence id. č. 5):
pGIu-His-Trp-Ser-Tyr-A6—A7-Arg-Pro-Z (IV) ve kterém;
- A6 je (S)spirolaktam-Pro, D-Leu, D~Ala, D-Nal, D-Phe, D-SeiýOBu') nebo D-Trp,
- A7 je Leu, MeLeu, Npg nebo MeNpg,
Z je GlyNH2, azaGIyNH2, nebo skupina -NC2H5.
Peptidové analogy podle vzorce I až IV, kde A7 je Npg, jsou zvláště výhodné.
K reprezentativním peptídům podle vzorce I až IV patří leuprorelin, [Npg7]-Ieuprorelin, triptorelin, [Npg7]-triptorelin, goserelin, [Npg7]-goserelin, buserelin a [Npg7]~buserelin.
K dalším výhodným peptidovým analogům podle vynálezu patří peptidy podle vzorce (sekvence id. č. 6):
A l-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-Pro-Z (I') ve kterém:
— Al je pGlu, D-pGlu, Sar, AcSar, Pro nebo jeho deriváty jako jsou AcPro, ForPro, OH—Pro, Ac-OH-Pro, dehydro-Pro nebo Ac-dehydro-Pro, Ser, D-Ser, Ac-D-Ser, Thr, D-Thr, AcD-Thr, nebo aromatická D-aminokyselina, která může být acylována, jako je D-Phe, D45 HPhe, D-Tyr, D-Trp, D-Nal, D-INal, D-difenyl-Ala, D-Bal, D-Pal, D-4Pal nebo D-Qal, kde D-Phe a D-Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou,
- A2 je přímá vazba nebo aromatická D-aminokyselina, jako je D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, DTrp, D-Nal, D-lNal, D-difenyl-Ala, D-Bal, D-Pal, D-4Pal nebo D-Qal, kde D-Phe a DTrp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo triťluormethylovou skupinou,
-7CZ 302343 B6
- A3 je aromatická L- nebo D-aminokyselina jako je Phe, HPhe, Tyr, Trp, Nal, INal, difenyl-Ala, Bal, Pal, 4Pal nebo Qal, kde Phe a Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující I až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trífluormethylovou skupinou.
- A4 je Ala, Ser, D-Ser, MeSer, Ser(OBu’), Ser(OBzl) nebo Thr,
- A5 je aromatická L-aminokyselina jako je Phe, HPhe, Tyr, HTyr, Trp, Nal, INal, difenylAla, Bal, Pal, 4Pal nebo Qal, kde Phe, Tyr, HTyr a Trp mohu být substituovány jedním nebo io více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trífluormethylovou skupinou, a/nebo N-a-substituovány alkylovou skupinou obsahující I až 4 atomy uhlíku, volitelně substituovanou jedním nebo několika atomy fluoru, nebo bazická L- nebo D-aminokyselina jako je Arg, HArg, Orn, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo ACha, kde Arg nebo HArg mohou být N-a15 substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku na jednom nebo obou atomech dusíku, a kde Om, Lys, HLys, APhe, a ACha mohou být N-substituovány jednou nebo dvěma alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovými skupinami obsahujícími 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou nikotinoylovou, izonikotinoylovou, 6-methyl-nikotinoylo20 vou, glycyl-nikotinoylovou, nikotinyl-azaglycylovou, furylovou, glycyl-furylovou, furylazaglycylovou, pyrazinylovou, pyrazinyl-karbonylovou, pikolinoylovou, 6—methyl—pikolinoylovou, Šikimylovou, šikimyl-glycylovou, skupinou Fmoc nebo Boc,
A6 je Gly, (S)spirolaktam-Pro, D-Pro, D-Ser, D-Thr, D-Cys, D-Met, D-Asn, D-Pen, D25 (S-Me)Pen, D(S-Et)Pen, D-Ser(OBu'), D-Asp(OBu'), D-Glu(OBu'), D-Thr(OBu'), DCys(OBu*), D-Ser(OR[), kde R| je sacharidová skupina, alifatická D-aminokyselina s alkylovým postranním řetězcem obsahujícím 1 až 8 atomů uhlíku nebo cykloalkylovým postranním řetězcem obsahujícím 3 až 6 atomů uhlíku, jako je D-Ala, D-Abu, D-Aib, D-3Aib, DVal, D-Nva, D-Leu, D-Ile, D-Tle, D-Nle, D-Hol, D-Npg, D-CPa, D-Cpa, D-Cba nebo io D-Cha, aromatická D-aminokyselina jako je D-Phe, D-HPhe, D-Tyr, D-Trp, D-Nal, DINal, D-difenyl-Ala, D-antryl-Ala, D-fenantryl-Ala, D-benzhydryl-Ala, D-fluorenylAla, D-Bal, D-Pal, D~4Pal nebo D-Qal, kde D—Phe a D-Trp mohou být substituovány jedním nebo více halogeny, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo trífluormethylovou skupinou, D35 cyklohexadienyl-Gly, D-perhydronaftyl-Ala, D-perhydrodifenyl-Ala, nebo bazická Lnebo D-aminokyselina jako je Arg, HArg, Om, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo ACha, kde Arg a HArg mohou být N-substituovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku na jednom nebo obou atomech dusíku, a kde Orn, Lys, HLys, APhe a ACha mohou být N-substituovány jednou nebo dvěma alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovými skupinami obsahujícími 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou nikotinoylovou, izonikotinoylovou, 6-methyl—nikotinoylovou, glycyl-nikotinoylovou, nikotinyl-azaglycylovou, furylovou, glycyl-fury lovou, fůry 1-azaglycy lovou, pyrazinylovou, pyrazinyl-karbonylovou, pikolinoylovou, 6-methyl-pikolinoylovou, šikimylovou, šikimyl-glycylovou, skupinou Fmoc nebo Boc,
A7 je lineární, rozvětvená nebo cyklická alifatická L-aminokyselina obsahující 3 až 20 atomů uhlíku, jako je např. Ala, Abu, Aib, 3Aib, Val, Nva, Leu, Ile, Tle, Nle, Hol, Npg, CPa, Cpa, Cba, Cha nebo Ada, které mohou být Ν-α-substituovány alkylovou skupinou obsa50 hující 1 až 4 atomy uhlíku, volitelně substituovanou jedním nebo několika atomy fluoru,
A8 je bazická L-aminokyselina jako je Arg, HArg, Orn, Lys, HLys, Cit, HCit, APhe nebo ACha, kde Arg nebo HArg mohou být N-substítuovány alkylovou skupinou obsahující 1 až 6 atomů uhlíku i nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku na jednom nebo obou atomech dusíku, a kde Om, Lys, HLys, APhe a ACha mohou být N-substituová-8CZ 302343 B6 ny jednou nebo dvěma alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 6 atomů uhlíku nebo cykloalkylovými skupinami obsahujícími 3 až 6 atomů uhlíku, nebo skupinou nikotinoylovou, izonikounoylovou, ó-rneihyi-nikounoyiovou, giycyí-nikoíinoyiovou, nikotinyi-azagiycyiovou, fůry lovou, glyeyl-fury lovou, fůry l-azaglycy lovou, pyraziny lovou, pyraziny I-karbony5 lovou, pikolinoylovou, 6-methyl-pikolínoy lovou, šikimylovou, šikimyl-glycylovou, skupinou Fmoc nebo Boc,
- Z je GlyNH2 nebo D-AlaNH2, io a také jejich farmaceuticky přijatelné soli.
K výhodným peptidům podle vzorce (T) patří peptidy podle vzorce (sekvence id. č. 7):
Ac-D-Nal-D-pCIPhe-D-Pal-Ser-A5-A6-A7-A8-Pro-D-AlaNH2 (IT) kde:
- A5 je Tyr, HTyr, MeTyr, MeHTyr, NicLys nebo IprLys,
A6 je (S)-spirolaktam-Pro, D-Arg, D-NicLys, D-IprLys, D-Cit, D-HCit nebo D-Asn,
- A7 je Leu, MeLeu, Npg nebo MeNpg,
A8 je Arg, NicLys nebo IprLys a také jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Peptidové analogy podle vzorce (T) a (IT), kde A7 je Npg, jsou zvláště výhodné.
K reprezentativním peptidům podle vzorce (I ) a (IT) patří antid, [Npg7]-antid, cetrorelix, [Npg7]-cetrorelix, abarelix a [Npg7]-abarelix.
K dalším výhodným peptidovým analogům patří peptidy podle vzorce (A), kde A6 je jak byla definována výše s výjimkou D-Asn.
Příklady solí s farmaceuticky přijatelnými kyselinami jsou soli s minerálními kyselinami, jako je například hydrochlorid, hydrobromid, síran, fosforečnan, boritan, hydrogensíran, dihydrogen35 fosforečnan nebo dusičnan, a soli s organickými kyselinami, jako je například acetát, oxalát, tartrát, sukcinát, maleát, fumarát, glukonát, citrát, pamoát, malát, askorbát, benzoát, p-toluensulfonát nebo naftalensulfonát.
Příklady solí s farmaceuticky přijatelnými bázemi jsou soli s alkalickými kovy či kovy alkalic40 kých zemin, jako je sodík, draslík, vápník nebo hořčík a soli s organickými bázemi, jako jsou aminy, trometamol, N-methylglutamin apod.
Peptidy podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny metodami peptidové chemie, které jsou odborníkům známy, jako je například syntéza peptidů v roztoku nebo syntéza pcptidů v pev45 né fázi. Obecně tyto metody zahrnují postupné přidávání jedné nebo více aminokyselin, které jsou vhodně chráněny, k vytvářejícímu se peptidovému řetězci. Tyto postupy lze nalézt např. v publikaci „Synthetic peptides: A Users Guide“, G. A. Grant (ed.), 1992, UWBC Biotechnical Resources Series, Washington, University Press, Saint-Louis, USA.
Každá molekula α-CD nese 6 primárních hydroxylových skupin a 12 sekundárních hydroxylových skupin, které, v uvedeném pořadí, odpovídají skupinám 6-OH a 2- a 3-OH každé ze 6 glukopyranózových jednotek. Další obecný aspekt předkládaného vynálezu se týká a-CD ajejich derivátů, které jsou definovány jako výsledek chemických nebo biochemických modifi-9 CZ 302343 B6 kácí týkajících se buďto přesného nebo průměrného počtu mezi 1 a 18 hydroxylových skupin molekuly α-CD, a sice náhodným nebo oblastně selektivním způsobem, jedním nebo více typy reakcí jako je např. oxidace, redukce, alkylace, hydroxyalkylace, esterifikace organickými nebo minerálními kyselinami, intramolekulární de hydrogenace, tosylace následovaná redukční aminací nebo substitucí halogenem, větvení cukru nebo další polymerizace, a jejich všemožné kombinace. K příkladům derivátů α-CD patří α-CD modifikované jednou nebo více skupinami vybranými ze skupiny methylové, karboxy methylové, ethylové, butylové, oktylové, hydroxy ethylové, hydroxypropylové, hydroxy butylové, acetylové, propionylové, butyrylové, sukcinylové, benzoylové, palmitylové, sulfonylové, toluensulfonylové, a dále aminoskupiny a skupiny aminopropyloio vé, glukosylové, maltosylové, dimaltosylové, karboxymethyletherové, sulfobutyletherové a fosfátesterové.
K výhodným derivátům ocCD podle předkládaného vynálezu patří methylované a-CD: hexakis(2,3,6-tri-O-methyl)-a-CD známý jako „perm ethyl ováný α-CD“, karboxymethylovaný α-CD a fosfátovaný α-CD. Pro přípravu farmaceutického přípravku podle vynálezu je zvláště výhodný α-CD a hexakis(2,3,6-tri-O-methyl)-a-CD.
Jak bylo již uvedeno výše, α-CD a jejich deriváty zvyšují biologickou aktivitu peptidových analogů LH-RH v perorálních farmaceutických přípravcích.
Takže další aspekt předkládaného vynálezu se týká perorálního farmaceutického přípravku, který obsahuje jako účinnou látku peptidový analog LH-RH, jak byl definován výše, a sice ve formě kombinace s α-CD nebo jeho derivátem, přičemž je tento přípravek určen pro podávání do gastrointestinálního traktu.
Peptidy podle obecného vzorce (1) vykazují in vivo agonistickou aktivitu k receptorům LH-RH, vedoucí ke stimulaci sekrece LH hypofyzou, což u samců stimuluje sekreci testosteronu ve varlatech.
Dospělí samci laboratorního potkana kmene Sprague Dawley dostávali perorálně žaludeční sondou perorální přípravek obsahující leuprorelin (LEU, Bachem), triptorelin (TRI, Bachem), deslorelin (DES, Saxon Biochemicals), goserelin (GOS, Saxon Biochemicals) a nebo, v odpovídajících příkladech, následující analogy LH-RH: příklad 1 ([(S)spirolaktam(Pro6, Npg7), desGly10ProNet9] LH-RH), příklad 2 ([D-Ala6, Npg7, desGly10-ProNet9] LH-RH), příklad 3 ([Npg7]35 leuprorelin), příklad 4 ([D-Phe6, Npg7, desGly'°-ProNet9] LH-RH), příklad 5 ([Npg7]-tryptorelin) a příklad 6 ([D-Ala6, desGlyl0-ProNet9] LH-RH, Biochem), v kombinaci s α-CD (Sigma nebo Wacker Chemie). Pro srovnání byly stejní agonisté podáváni perorálně žaludeční sondou ve standardním vodném vehikulu neobsahujícím α-CD (srovnávací příklad). Pro účely screeningu byly odebírány vzorky krve 2 hodiny po perorálním podání přípravku v obecné dávce 2 nmol agonisty peptidu LH-RH na jednoho potkana, a sice ve vodném roztoku obsahujícím 10 nebo 100 mM α-CD (viz tabulky 1 a 2 a obrázky 1,4 a 6). Pro účely sledování kinetiky byl účinek dávky 2nmol/potkan v příkladu 3 buďto s nebo bez 100 mM α-CD testován mezi 0,5 a 8 hod. sledováním hladiny LH a testosteronu v krvi (viz obrázky 2 a 5). Účinek zvyšující se koncentrace a-CD (5 %, 10 % nebo 14 %) byl testován v příkladu 2 s dávkou 5 pg/kg a 2 hodiny po perorál45 ním podání (obrázek 3). Celková hladina testosteronu (Diagnostic System Laboratories) a LH (Amersham Pharmacia Biotech) v plazmě byly stanoveny radioimunologickým testem. V případě sledování po 2 hodinách bylo v každé skupině 6 až 8 potkanů, ve studiích kinetiky každý časový bod představuje 4 zvířata.
- 10CZ 302343 B6
Tabulka 1
Stimulace sekrece testosteronu (hodnoty uvedeny jako průměr ± střední chyba průměru)
Sloučenina bez a- CD Celkový testosteron v plazmě (nmol/1) Sloučenina s a-CD Celkový testosteron v plazmě (nmol/1)
Kontrola 8/6 ± 3,32 Kontrola ΐα-CD) 3,8 ± 0,66
Triptorelin 25,8 ± 3,14 Triptorelin(a-CD) 61,9 ± 6,01
Leuprorelin 26,3 ± 5,77 Leuprorelin(a-CD) 70,7 ± 4,06
Goserelin 21,4 ± 5,99 Goserelin(a-CD) 66,5 ± 6,19
Deslorelin 9,7 ± 2,41 Deslorelin(a-CD) 43,2 ± 7,29
Sloučenina Př.l 40,1 ± 6,78 Sloučenina Př.l 58,0 ± 8,75
Sloučenina Př.2 23,0 ± 8,54 Sloučenina Př.2 72,8 + 4,64
Sloučenina Př.3 39,7 ± 8,11 Sloučenina Př.3 69,7 ± 3,6
Sloučenina Př.4 30,1 ± 5,86 Sloučenina Př.4 67,9 ± 9,11
Sloučenina Př.5 15,8 ± 4,24 Sloučenina Př.5 52,1 ± 6,99
Sloučenina Př.6 28,3 ±4,56 ^Sloučenina Př.6 61,8 ± 5,10
io Jak je vidět zvýše uvedených výsledků a také z obrázků 1 až 4, perorální přípravky obsahující α-CD významně zvyšují stimulaci sekrece testosteronu indukovanou analogy LH-RH. Zejména deslorelin samotný byl inaktivní v prahové dávce 2 nmol/potkan, ale vykazoval významný účinek, pokud byl formulován s α-CD. Klíčová role, kterou mají α-CD, je dobře viditelná na závislosti účinku na koncentraci: při kombinaci s lOmM a-CD (0,972 %), aktivita po perorálním podání v příkladu 3 nebyla významně zlepšena (viz obrázek 1), při 5 % (51,4 mM) α-CD zvýšil stimulaci sekrece testosteronu indukovanou v příkladu 2, i když ne na maximální úroveň, která byla dosažena s 10 % (103 mM) a také 14 % (144mM) (viz obrázek 3).
Stojí také za zmínku (viz obrázky 1 a 3), že β-CD, hy d roxy propy Ι-β-CD (ΗΡ-β-CD) a γ-CD nemají tento zesilující účinek na analogy LH-RH indukovanou stimulaci sekrece testosteronu.
- ll CZ 302343 B6
Tabulka 2
Stimulace sekrece LH (hodnoty uvedeny jako průměr ± střední chyba průměru)
Sloučenina bez a-CD Celkový LH v plazmě (nmol/1) Sloučenina s a- CD Celkový LH v plazmě (nmol/1)
Kontrola 1,2 ± 0,11 Kontrola 1,1 ± 0,10
Triptorelin 1,4 ± 0,10 Triptorelin 10,1 ± 2,54
Leuprorelin 1,2 ± 0,14 Leuprorelin 12,3 ± 2,03
Sloučenina Př.l 1,5 ± 0,19 Sloučenina Př.l 7,1 ± 1,68
Sloučenina Př.2 1,6 ± 0,14 Sloučenina Př.2 19,7 ± 3,70
Sloučenina Př.3 2,2 ± 0,58 Sloučenina Př.3 10,9 ± 1,66
Sloučenina Př.4 1,4 ± 0,17 Sloučenina Př.4 16,1 ± 5,22
Sloučenina Př. 5 1,4 ± 0,10 Sloučenina Př. 5 3,2 ± ,56
io Jak je vidět z výše uvedené tabulky a obrázků 5 a 6, zesilující účinek α-CD v přípravku obsahující analogy LH-RH na uvolňování LH je dokonce ještě výraznější než účinek na sekreci testosteronu: všechny testované analogy byly inaktivní, když byly podávány samotné při dávce 2 nmol/potkan, zatímco když byly podávány v kombinaci s α-CD, v závislosti na druhu analogu, indukovaly 3- až 16—násobné zvýšení nad kontrolní hladinu.
Podobné nebo dokonce ještě lepší výsledky byly získány s deriváty α-CD jako např. methylovaným α-CD, hexakis(2,3,6-tri-O-methyl)-a-CD, karboxymethylovaným α-CD nebo fosfátovaným α-CD. Všechny deriváty α-CD byly získány od firmy Cyclolab (Budapešť, Maďarsko). Vliv derivátů α-CD byl porovnáván s účinkem samotného a^CD na zesílení aktivity agonisty
LH-RH v příkladu 3, kdy se perorálně, žaludeční sondou, potkanům podal v nízké dávce 5 pg/kg: 2 hodiny po podání byla měřena hladina celkového testosteronu v plazmě (tabulka 3).
Testované deriváty α-CD, jak je ukázáno výše, při perorálním podávání přinejmenším zdvojnásobily účinek v příkladu 3. Přírodní α-CD ajejich permethylované deriváty se zdají být zvláště výhodné neboť vedou k 2,9- a 3,8-násobnému zvýšení agonistické aktivity na testosteron při p.o. dávce 5 pg/kg, jak ukazuje příklad 3.
V dalším experimentu byl příklad 3 testován s α-CD nebo permethylovaným derivátem a-CD při stejné koncentraci 10 %. 2 hodiny po podání byla měřena hladina LH v plazmě u 8 potkanů v každé skupině (viz obrázek 7). Dávka 5 pg/ks přípravku podle příkladu 3 byla neúčinná, a p.o. dávky 10 a 20 pg/kg byly zjevně prahové dávky za těchto experimentálních podmínek.
- 12 CZ 302343 B6
Tabulka 3
Stimulace sekrece testosteronu (sloučenina příklad 3) (hodnoty uvedeny jako průměr ± střední chyba průměru)
Dávka pg/kg) (p.o. Typ cyklodextrinu (CD)(koncentrace) Hladina testosteronu (ng/ml) počet potkanů
0 (kontrola) žádný 1,0 ± 0,17 24
S žádný 3,4 ± 0,79 16
5 karboxymethylováný a-CD (50%) 6,9 ± 1,62 10
5 methylovaný a-CD (30%) 7,1 ± 1,59 10
5 fosfátovaný a-CD (30%) 7,4 ± 2,00 10
5 a-CD (10%) 10,0 ± 1,22 24
5 permethylováný a-CD (15%) 12,9 ± 1,10 10
io Kombinace přípravku podle příkladu 3 s 10 % α-CD vedla k mírné, ale významné stimulaci p.o. dávky 5 a 10 pg/kg, a k mnohem významnější stimulaci při dávce 20 pg/kg, při srovnání se samotným přípravkem podle příkladu 3 (více než 5-násobné zvýšení LH-uvolňujíct aktivity). Kromě toho, kombinace přípravku podle příkladu 3 s 10 % permethyl ováného α-CD vedla k ještě výraznějšímu zesílení: při p.o. dávkách 2,5, 5 a 10 pg/kg, které zůstávají neúčinné, pokud se podává přípravek podle příkladu 3 samotný, vedl k markantnímu zesílení stimulačního účinku závislému na dávce (viz obrázek 7).
Peptidy podle obecného vzorce (I) projevují antagonistickou aktivitu vůči receptorům LH-RH in vivo, což má za následek inhibici ovulace.
Byl testován vliv α-, β a γ-CD na aktivitu antidu (příklad peptidového antagonisty LH-RH) při perorálním podávání žaludeční sondou u dospělých samic laboratorního potkana kmene Wistar s normálním estrálním cyklem mezi 1.30 a 3.00 hod. odpoledne v den proestru, po dokončení alespoň dvou úplných pravidelných cyklů, což bylo monitorováno denními vaginálními výtěry.
Antiovulační účinnost byla testována následující ráno, v den očekávaného estru, vyhledáním vajíček ve vejcovodu ošetřených samic. Přítomnost alespoň jednoho vajíčka ukázala, že spontánní ovulace se alespoň do určité míry uskutečnila, a pouze úplná absence vajíčka byla považována za účinnou inhibici ovulace způsobenou antagonistou LH-RH. Antid byl solubilizován ve vehikulu obsahujícím 20 % (obj./obj.) propylenglykolu ve vodě již obsahující 1 % hovězího albuminu, ke kterému se pak ještě přidalo 10 % (hmotn./obj.) buďto α-, β- nebo γ-CD. Výsledky těchto pokusů jsou shrnuty v tabulce 4.
Vehikulum buďto bez a nebo s α-CD samo o sobě nemělo žádný účinek. Prahová účinná dávka antidu byla při perorálním podávání 400 pg/kg, kdy se pouze u 3 zvířat ze 22 projevila inhibice ovulace, β- a γ-CD neměly žádný vliv na minimální aktivitu při těchto dávkách.
Avšak α-CD významně zvýšil účinnost antidu, a sice ze 14% inhibice na 73% inhibici při 400 pg/kg. Dvakrát nižší dávky 200 pg/kg byly jen méně účinnější (25% inhibice) v kombinaci s 10% α-CD. Tudíž při perorálním podávání α-CD byly schopné zesilovat aktivitu peptidových antagonistu LH-RH, avšak β- a γ-CD neměly takový účinek.
- 13 CZ 302343 B6
Tabulka 4
Inhibice ovulace
Perorální přípravek Dávka Antidu (pg/potkan) Počet ovulací /celkový počet ošetřených samic Procento inhibice
samotné vehikulum 0 24/24 0 %
vehikulum + a-CD (10%) 0 STš 0 %
samotné vehikulum 200 8/8 0 %
400 19/22 14 %
600 5/8 44 %
vehikulum + a-CD (10%) 200 6/8 25 %
400 6/22 73 %
600 75 %
vehikulum + β-CD (10%) 400 7/7 0 %
vehikulum + y-CD (10%) 400 7/7 0 %
Perorální přípravky podle vynálezu se připravují metodami, které jsou odborníkům známy, obecně tedy následujícím postupem: známé množství léčiva se přidá k vodnému roztoku cyklodextriio nu v dostatečné koncentraci, k interakci cyklodextrin-léčivo dojde v roztoku nebo suspenzi během několika minut nebo po míchání až do jednoho týdně při požadované teplotě buďto s nebo bez sonikace, v závislosti na povaze léčiva a cyklodextrinu a jejich koncentracích. Výsledná kombinace nebo komplex cyklodextrin-léčivo se získá filtrací, centrifugaci, evaporací nebo sublimací v suché formě.
Pro ilustraci je dále uvedena jedna metoda přípravy farmaceutického přípravku podle vynálezu s kombinací analogu LH-RH s α-CD v roztoku, nehledě na jejich další zpracování na další suché formy, které mají stejnou výhodu zesílení účinku.
zo Tyto přípravky dále obsahují jeden nebo více farmaceuticky přijatelných excipientů pro perorální podávání, jako je laktóza, fruktóza, glukóza, sacharóza, komprimovatelný cukr, sacharin, povidon, krospovidon, stearát hořečnatý, kaolín, bentonit, koloidní oxid křemičitý, man ito 1, sorbitol, škrob ajeho deriváty, mikrokrystalická nebo prášková celulóza, methylcelulóza, kar boxy methyl celulóza, ethylcelulóza nebo jiné chemicky modifikované celulózy, další cyklodextriny, malto25 dextrin, dextráty, dextrin, dextróza, algináty, pektiny, pektáty, sorbitanestery, polysorbát 80, chitosan, guarová nebo xanthanová klovatina, mono-, di- nebo triethanolamin, kyselina oleová nebo ethyloleát, kyselina stearová, voda, roztok glukózy, propylenglykol, laktát, malát, ethanol, isopropylmyristát nebo palmitát, glycerin, glycerylmonostearát, glycerylpalmitostearát, lecitin, triglyceridy se středně dlouhými nebo krátkými řetězci, různé oleje jako kukuřičný, bavlníkový, olivový, podzemnicový, sezamový nebo sojový apod. Tyto přípravky se podávají ústy (nebo nasogastrickou sondou) v různých vodných nebo jiných roztocích nebo suspenzích jako jsou např. pravé roztoky, sirupy, elixíry, rosoly, želé, gely, mléka, cukerné sirupy, makro-, mikronebo nanoemulze, nebo v různých tuhých formách jako jsou lisované, obalované, bukální, sublingvální, šumivé nebo odlévané tablety, měkké nebo tvrdé tobolky, pilulky, pastilky nebo oplat- 14CZ 302343 B6 ka. Výhodné lékové formy pro podávání účinné látky podle vynálezu jsou formy obvyklé tuhé perorální formy nebo měkké tobolky obsahující tekutý přípravek s enterosolventním obalem, a dáie lékové formy nebo dávkovači systémy s řízeným, zpožděným nebo programovaným uvolňováním léčiva v tenkém nebo tlustém střevu.
Hlavním terapeutickým cílem peptidových analogů LH-RH podle vzorce (I) je hypofyza, ale bylo popsáno i přímé působení na samotné gonády (varlata a vajec niky), na thymus a některé lymfoidní buněčné linie, a také na tumory prsů, prostaty, pankreatu nebo nervového systému. Agonisté LH-RH projevují na každém cíli citlivém na LH-RH buď stimulační aktivitu při ío krátkodobém akutním nebo pulzním podávání, nebo inhibiční účinek při opakovaném či kontinuálním podávání, které vyvolává desenzibilizaci a utlumení receptorů LH-RH. V případě osy hypothalamus—hypofyza—gonády má dlouhotrvající podávání za následek takzvanou „chemickou“ kastraci.
Hlavním terapeutickým cílem peptidových analogů LH-RH podle vzorce (Γ) je také hypofyza, kde se váží na LH-RH receptory a zabraňují tak působení endogenních LH-RH. Tímto mechanismem může být inhibována osa hypofýza-gonády. Programované použití antagonistů LH-RH může být výhodné k dosažení spontánní stimulace osy hypofýza-gonády v libovolném okamžiku tím, že se zastaví jejich podávání ve vhodném předcházejícím okamžiku.
Tudíž agonisté nebo antagonisté LH-RH podle vzorce (A) jsou užitečné přípravky v situaci, kdy je třeba působení LH-RH buďto inhibovat, zabránit mu nebo ho stimulovat. Peptidové analogy LH-RH podle vynálezu jsou zejména vhodné k léčené LH-RH-senzitivních onemocnění, zejména takových nemocí, kdy je potřeba agonista nebo antagonista LH—RH.
Tudíž perorální přípravky podle předkládaného vynálezu mohou nalézt příslušné léčebné použití jak u lidí, tak i u zvířat, v závislosti na dávce, léčebném režimu a způsobu podávání, v reprodukční endokrinologii a v léčení nebo prevenci benigních či maligních tumorů závislých na pohlavních hormonech, přičemž takové léčení nebo prevence zahrnuje paralelní a/nebo postupný doplň30 kový léčebný režim založený na podávání dalších hormonálních nebo proti nádorových přípravků. Benigní nebo maligní tumory nezávislé na pohlavních hormonech a citlivé na LH-RH mohou také ustoupit při léčbě perorálním i přípravky podle předkládaného vynálezu, samotnými nebo v paralelní či postupné kombinace s dalšími protinádorovými přípravky. Také imunitní mechanismus může být modifikován perorálním i přípravky podle předkládaného vynálezu, samotnými nebo v paralelní či postupné kombinaci s imunomodulačními nebo imunosupresivními přípravky, jako jsou glukokortikoidy, cyklosporin, rapamycin, takrolimus, jejich deriváty apod. Perorální farmaceutické přípravky podle vynálezu jsou proto velice cenné v léčbě a prevenci autoimunitních chorob, rejekce štěpu nebo atopických nemocí a v léčbě benigních nebo maligních lymfoproliferativních chorob.
Perorální farmaceutické přípravky podle vynálezu jsou obzvláště užitečné při inhibici, řízení a spouštění ovulace v programech in vitro fertilizace a při léčení mužské a ženské neplodnosti nebo hypogonádních stavů. Naproti tomu mohou být také použity pro mužskou nebo ženskou antikoncepci nebo léčení hypergonádních stavů. V obou případech léčení zahrnuje paralelní nebo postupné podávání pohlavních steroidů a/nebo gonadotropinů. To lze použít u mužů a žen, ale také u divokých nebo domácích zvířat s cílem zlepšit nebo kontrolovat reprodukci, nebo jako nástroj pro optimalizaci chovatelské strategie.
Perorální farmaceutické přípravky podle vynálezu jsou také obzvláště užitečné u mužů pro léčbu pokročilého karcinomu prostaty, ale mohou být také použity jako léčba první volby v této indikaci a u benigní hypertrofie prostaty, v obou případech se užijí samotné nebo v paralelní či postupné kombinaci s inhibitory androgenů, tj. antíandrogeny, jako jsou cyproteronacetát, osateronacetát, chlormadinonacetát, flutamid, nilutamid nebo bikalutamid apod., nebo inhibitory 5areduktázy, jako jsou fínasterid, epristerid nebo turosterid apod., nebo inhibitory Ci7_20lyázy, jako je abirateron apod.
-15 CZ 302343 B6
Perorální farmaceutické přípravky podle vynálezu jsou také obzvláště užitečné v léčbě nebo prevenci karcinomu prsu u žen a mužů, zejména u tumorů pozitivních na estrogenové receptory, takové léčení zahrnuje paralelní nebo postupné podávání v kombinaci s antiestrogeny, jako je lamoxifen, raloxifen nebo droloxifen apod., nebo s inhibitory aromatázy, jako je atamestan, formestan, letrozol, anastrozol apod., nebo s inhibitory Cn^olyázy, jako je abirateron apod. Přípravky podle vynálezu jsou také užitečné k léčení nebo prevenci určitých tumorů negativních na estrogenové receptory, které odpovídají na přímý účinek analogů LH-RH nebo nepřímo na jimi vyvolanou aktivitu potlačující gonády.
Také dalším gynekologickým onemocněním, jako jsou hyperplazie endometria, leiomyom, adenomyom, endometrióza, syndrom polycystických ovarií, hirsutismus a benigní onemocnění prsů (bolest, cysty nebo fibróza) se může předcházet či jim může prospět léčení farmaceutickými přípravky podle předkládaného vynálezu, kdy taková prevence nebo léčení zahrnuje další para lei15 ní nebo postupné léčení antiestrogeny (uvedenými výše), progestiny, jako je cyproteronacetát, osatcronacetát, chlormadinonacetát, nomegestrolacetát, promegeston, demegeston, trimegeston apod., nebo kombinované přípravky s estrogeny, jako je estradiol nebo ethynylestradiol, používané jako antikoncepční přípravky nebo postmenopauzální substituční přípravky. Farmaceutické přípravky podle vynálezu mohou také interferovat s gestací vyvoláním abortu nebo spuštěním io porodu, v takovém případě se mohou také užít v paralelní nebo postupné kombinaci s estrogeny (uvedenými výše), antiprogestiny, jako je mifepriston nebo analogy prostaglandinů, jako je sulproston.
S podobnými indikacemi je možné se setkat ve veterinární medicíně u samců nebo samic domá25 cích či divokých zvířat, která mohou potřebovat farmaceutické přípravky podle předkládaného vynálezu.
Vynález se tedy týká léčení a/nebo prevence výše uvedených nemocí, které spočívá v podávání farmaceutického přípravku podle vynálezu pacientovi nebo zvířeti, potřebujícím tuto léčbu, při30 čemž přípravek obsahuje účinné množství peptidového analogu LH-RH, jak byl výše definován, v kombinaci s α-cyklodextrinem nebo jeho derivátem. Léčení obsahuje další podávání alespoň jedné další účinné látky, jak byly uvedeny výše, např. hormonální přípravek, proti nádorový přípravek, imunomodulační nebo imunosupresivní přípravek, pohlavní steroidní hormon, gonadotropin, inhibitor působení androgenu, inhibitor 5a-reduktázy, inhibitory C)7-2o lyázy, anti35 estrogen, inhibitor aromatázy, progestin, estrogen, antiprogestin nebo analog prostaglandinů, a sice paralelně, postupně nebo po určité době.
Jednotková perorální dávka peptidového analogu LH-RH podle vzorce (A) je v rozmezí od 0,1 mg do 100 mg pro člověka, při podávání 1 až 16 x denně (v případě pulzního podávání), v kombinaci s alespoň ekvimolárním množstvím α-CD nebo jeho derivátu až do celkové zbývající části perorální lékové formy.
Všechny výše zmíněné perorální přípravky podle vynálezu mohou navíc obsahovat jeden nebo několik inhibitorů proteáz a/nebo jeden nebo několik zesilovačů absorpce.
Příklady provedení vynálezu
Příklady přípravy leeuprorelinu, tríptorelinu, goserelinu, deslorelinu a příkladů I až 6 v kombinaci se lOOmM roztokem a-CD
Každý den experimentu byl čerstvě připraven roztok α-CD rozpuštěním 9,72 g a-CD ve 100 ml čisté vody nebo 4, 86 g v 50 ml čisté vody, 1 hodinu při teplotě místnosti za mírného míchání magnetickým míchadlem, mezitím byl odebrán vhodný objem z roztáté zásobní lahvičky obsahu- 16CZ 302343 B6 jící 50 pg čistého peptidu v 50 pl solného roztoku pufrovaného fosfátem obsahujícím 1% hovězí sérový albumin, což představovalo 20 nm (odpovídalo 24,2 pí LEU, 26,2 pl TRI, 23,4 pl GOS, 25,4 pl DES, 24,7 pl přípravku příklad 1, 23,6 pl přípravku příklad 2, 24,5 pl přípravku přiklad 3, 25,1 pl přípravku příklad 4, 26,5 pl přípravku příklad 5, a 23,4 pl přípravku příklad 6), a vnesen do 10 ml odměmé baňky. Pak byl přidán roztok α-CD a doplněn do 10 ml, čímž vznikl roztok o koncentraci 2 nmol/ml, z něhož se pak 1 ml podával potkanům žaludeční sondou.
Příklady přípravy přípravku příklad 2 v kombinaci s 5%, 10% nebo 14% roztokema-CD
Každý den experimentu se odebralo 45 pl z jednotlivé roztáté lahvičky obsahující 50 pl čistého přípravku příklad 2 v 50 pl solného roztoku pufrovaného fosfátem obsahujícího 1% hovězí sérový albumin, naředilo 36 ml destilované vody, což poskytlo roztok o koncentraci 1,25 pg/ml, ze kterého byly odebrány tři frakce po 3,8 ml a k frakcím bylo přidáno 190, 380 a 532 mg a-CD, aby byla koncentrace a-CD 5 %, 10 % a 14 %. Po míchání na magnetické míchačce přes noc při teplotě místnosti, z každého roztoku byla potkanům žaludeční sondou podána dávka 4ml/kg, aby byla dávka shodná s 5 pg/kg příkladu 2 bez zvýšení koncentrace a-CD.
Příklady přípravy přípravku příkladu 3 pro perorální podávání v kombinaci s deriváty a-CD
Každý den experimentu roztátá lahvička obsahující 50 pg čistého přípravku příklad 3 v 50 pl solného roztoku pufrovaného fosfátem obsahujícího 1% hovězí sérový albumin, naředilo na polovinu shodným objemem čerstvého roztoku stejného hovězího sérového albuminu. Pak se 12,5 pl tohoto roztoku o koncentraci 0,5 pg/pl přidalo k 5 ml vodného vehikula pro perorální podávání (buďto s nebo bez derivátu α-CD), a po míchání na magnetické míchačce přes noc vznikl přípravek obsahující příklad 3 v koncentraci 1,25 pg/ml, který se podával potkanům žaludeční sondou v dávce 4ml/kg.
Roztoky derivátů α-CD byly připraveny odvážením příslušného množství, které se dalo do 10 ml odměmé baňky a doplnilo vodou: a sice 5 g karboxymethylo váného a-CD (50%), 3 g methylovaného a-CD (30%), 3 g fosfátovaného a-CD (30%) a 1 nebo 1,5 g permethylováného a-CD (10 nebo 15%).
Vhodné objemy obvyklých ředění ze zásobní lahvičky s čistým příkladem 3 v koncentraci 50 pg/50 pl byly přidány k 10% roztokům α-CD nebo permethylovaného α-CD ve vodě, čímž se získaly dávky popsané na obrázku 7.
Příklady přípravy přípravku příkladu pro perorální podávání obsahující antid v kombinaci s deriváty α-, β- nebo γ-CD
Každá lahvička s 5 mg práškového antidu (od firmy Bachem, Bubensdorf, Švýcarsko) obsahující 4,2434 mg čistého peptidu byla rozpuštěna ve směsi 2,122 ml propylenglykolu s 8,487 ml vody obsahující 0,1% hovězí sérový albumin. Ke každým 10,609 ml roztoku antidu (400 pg/ml) se přidalo přímo 1,061 g buďto α-, β- nebo γ-CD, čímž se získal 10% roztok. Každá samice potkana dostala stejný objem, tj. 1 ml, testovaného přípravku, žaludeční sondou.
Stejný objem byl použit pro podání dávek 200 a 600 mí dávek 200 a 600 pg/potkan. Vhodné koncentrace antidu pro podávání (200 a 600 pg/ml) byly získány naředěním na polovinu roztoku 400 pg/ml stejnou směsí (20% (obj.) propylenglykol/80% (obj.) voda s album i nem/10% (hmot.) α-CD) a rozpuštěním další 5mg lahvičky v 1,415 ml propylenglykolu s 5,658 ml vody obsahující 0,1% hovězí sérový albumin, ke kterému se nakonec přidalo 0,707 mg a-CD.

Claims (6)

  1. 5 1. Použití α-cyklodextrinu nebo jeho derivátu pro přípravu farmaceutického přípravku určeného k perorální aplikaci peptidového analogu LH-RH, kde peptidový analog má vzorec:
    ιο A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7—A8-Pro-Z (A) ve kterém:
    A1 je pGlu, D-Ala nebo Ac-D-Nal;
    15 - A2 je His nebo D-pCIPhe;
    - A3 je Trp, D-Pal nebo D-Ala;
    - A4 je Ser;
    - A5 je Tyr nebo NicLys;
    - A6 je Gly, (S)-spirolaktam-Pro, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Trp, D-Npg, D-Nal, D-NicLys,
    D-Cit, D-HCit, D-Asn, D-HArg, D-Ser(OBu') nebo D-His, který je nesubstituovaný nebo
    25 substituovaný na imidazolovém kruhu benzylovou skupinou;
    - A7 je Leu, Ada nebo Npg, přičemž uvedené aminokyseliny jsou nesubstituované nebo N-asubstituované alkylovou skupinou obsahující l až 4 atomy uhlíku;
    30 - A8 je Arg nebo IprLys;
    - Zje GlyNH?, D-AlaNH2, azaGlyNH2, nebo skupina —NHR2, kde R2 je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku;
    35 a kde derivát α-cyklodextrinu je vybraný ze skupiny sestávající z methyl o váného a—cyklodextrinu, hexakis(2,3,6-tri-O-methyl)-a~cyklodextrinu, karboxymethylovaného a-cyklodextrinu a fosfátovaného a-cyklodextrinu.
  2. 2. Použití podle nároku 1, při kterém ve vzorci (A)
    - AljepGlu;
    - A2jeHis;
    - A3jeTrp;
    - A5jeTyr;
    45 - A6 je Gly, (S)-spirolaktam-Pro, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Trp nebo D-SeifOBu1);
    - A7 je Leu nebo Npg;
    - A8 je Arg;
    - Zje GlyNH2, azaGlyNH2 nebo skupina -NHR2, kde R2 je ethyl.
    - 18 CZ 302343 B6
  3. 3. Použití podle nároku 1, při kterém ve vzorci (A)
    A1 je D_Ala nebo Ac-D-Nal;
  4. 5 - A2 je D-pCIPhe;
    A3 je D-Ala nebo D-Pal;
    - A6 je D-NicLys, D-Cit nebo D-Asn;
    - ZjeD-AlaNH2.
    ío 4. Použití podle nároku 2, kde peptidový analog je vybrán ze skupiny obsahující leuprorelin, [Npg7]-leuprorelin, triptorelin, [Ňpg7]-triptorelin, goserelin, [Ňpg7]-goserelin, buserelin a [Npg7]-goserelin.
    5. Použití podle nároku 3, kde peptidový analog je vybrán ze skupiny obsahující antid, [Npg7]15 antid, cetrorelix, [Npg7]—cetrorelix, abarelíx a [Npg7]—abarelíx,
  5. 6. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, kde derivátem a-cyklodextrinu je hexakis(2,3,6tri-O-methy I)—a-cy k 1 odextri n.
    20 7. Farmaceutický přípravek určený pro gastrointestinální perorální podávání peptidového analogu LH-RH, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství peptidového analogu v kombinaci s a-cyklodextrinem nebo jeho derivátem a excipienty vhodnými pro gastrointestinální dodávání uvedeného peptidového analogu
    25 kde peptidový analog má vzorec:
    A1-A2-A3-A4-A5-A6—A7-A8-Pro-Z (A) ve kterém:
    Al je pGIu, D-Ala nebo Ac-D-Nal;
    - A2 je His nebo D-pCIPhe;
    35 - A3 je Trp, D-Pal nebo D-Ala;
    - A4 je Ser;
    - A5 je Tyr nebo NicLys;
    A6 je Gly, (S)-spirolaktam-Pro, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Trp, D-Npg, D-Nal, D-NicLys, D-Cit, D-HCit, D-Asn, D-HArg, D-Ser^OBu1) nebo D-His, který je nesubstituovaný nebo substituovaný na imidazolovém kruhu benzylovou skupinou;
    45 - A7 je Leu, Ada nebo Npg, přičemž uvedené aminokyseliny jsou nesubstituované nebo N-asubstituované alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku;
    - A8 je Arg nebo IprLys;
    50 - Z je GlyNH2, D-AlaNH2, azaGlyNH2) nebo skupina -NHR2, kde R? je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku;
    - 19CZ 302343 B6 a kde derivát α-cyklodextrinu je vybraný ze skupiny sestávající z methylovaného a-cyklodextrinu, hexakis(2,3,6-tri-O-methyl)-a-cyklodextrinu, karboxy methy lovaného a-cyklodextrinu a fosfátovaného a-cyklodextrinu.
    5 8. Farmaceutický přípravek podle nároku 7, vyznačující se tím, že ve vzorci (A)
    AljepGlu;
    - A2jeHis;
    A3jeTrp;
    io - A5jeTyr;
    A6 je Gly, (S)-spirolaktam-Pro, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D~Trp nebo D-SerCOBu');
    - A7je Leu nebo Npg;
    - A8jeArg;
    - Z je GlyNHb, azaGlyNH? nebo skupina-NHR2, kde R2 je ethyl.
    9. Farmaceutický přípravek podle nároku 7, vy z n a č u j í c í se t í m , že ve vzorci (A)
    - AI je D-Ala nebo Ac-D-Nal;
    - A2 je D-pCIPhe;
    20 - A3 je D-Ala nebo D-Pal;
    A6 je D-NicLys, D-Cit nebo D-Asn;
    - ZjeD-AlaNH2.
    10. Farmaceutický přípravek podle nároku 8, vyznačující se tím, že peptidový 25 analog je vybrán ze skupiny obsahující leuprorelin, [Npg7]~leuprorelin, triptorelin, [Npg7]-triptorelin, goserelin, [Npg7]-goserelin, buserelin a [Npg7]—goserelin.
    11. Farmaceutický přípravek podle nároku 9, vyznačující se tím, že peptidový analog je vybrán ze skupiny obsahující antid, [Npg7]-antid, cetrorelix, [Npg7]-cetrorelix, abarelix .io a [Npg7]-abarelix.
    12. Farmaceutický přípravek podle jednoho z nároků 7ažll, vyznačující se tím, že derivátem α-cyklodextrinu je hexakis(2,3,6-tri-O-methyl)—a—cyklodextrin.
    35 13. Farmaceutický přípravek podle nároku 11, vyznačující se tím, že dále obsahuje inhibitor proteázy a/nebo činidlo zesilující absorpci.
  6. 7 výkresů
    -20CZ 302343 B6
    75Obr. 1
    Celková koncentrace testosteronu (nmol/1)
    Kontrola Kontr.Př.3 Př. 3
    Př.3(p-CD)
    Př.3(y-CD)
    Kontrola 0 10 100 10 10 100 ct-CD β-CD y-CD
    Koncentrace cyklodextrinů (mM) *p < 0.05 pro srovnaní s Kontr, Př. 3
    -21 CZ 302343 B6
    Obr. 2 (l/iomu) amzEfd λ nuojajsojsa;
    CO
    -Q o
    Kontr. Př. 2 p<0 05 *** p<0 00 Pr0 srovnánl s kontrolní skupinou p<0.05, ODO p<0.001 pro srovnání s příkladem 2 ve vehikulu (im/Sn) ^uizBjd λ nuojajsojsaj dotujnoonox
    -23CZ 302343 B6
    C
    U
    I o
    io o w o r- m cn * p<0.05, **p<0.01 pro srovnání s kontrolou bez a-CD °°p<0.01, ooop<0.001 pro srovnání s kontrolou s a-CD (l/ioiuu) aiuzqd a nuojejsojsoj aoe.qu33tio>f BA<nip3
    -24CZ 302343 B6
    Obr.
    s (ira/Su) a hT[ Áao>íP3
    Čas (hodiny)
    -25CZ 302343 B6
    Obr. 6 έ
    ρ<0.05, **ρ<0.01, ***ρ<0.001 Pro srovnání s kontrolou s α-CD (jui/3u) ^razB(d λ ΗΊ ΒΠΪΡΕΙΗ
    -26CZ 302343 B6
    Obr. 7
    Hladina LH v plazmě (ng/ml) **p<0.01;***p<0.00l pro srovnáni s kontrolní nestimulovanou hladinou LH
CZ20011173A 1998-09-30 1999-09-23 Farmaceutický prípravek založený na alfa-cyklodextrinu pro perorální podávání analogu LH-RH CZ302343B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP98402403A EP0998940A1 (en) 1998-09-30 1998-09-30 Pharmaceutical compositions based on alpha-cyclodextrin for the oral administration of LH-RH analogues

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20011173A3 CZ20011173A3 (cs) 2001-09-12
CZ302343B6 true CZ302343B6 (cs) 2011-03-23

Family

ID=8235503

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20011173A CZ302343B6 (cs) 1998-09-30 1999-09-23 Farmaceutický prípravek založený na alfa-cyklodextrinu pro perorální podávání analogu LH-RH

Country Status (28)

Country Link
EP (2) EP0998940A1 (cs)
JP (1) JP4485060B2 (cs)
KR (1) KR100652457B1 (cs)
CN (1) CN1200727C (cs)
AR (1) AR023056A1 (cs)
AT (1) ATE218358T1 (cs)
AU (1) AU756233B2 (cs)
BR (1) BR9914125A (cs)
CA (1) CA2344470C (cs)
CZ (1) CZ302343B6 (cs)
DE (1) DE69901721T2 (cs)
DK (1) DK1117420T3 (cs)
EE (1) EE04872B1 (cs)
ES (1) ES2178478T3 (cs)
HK (1) HK1042047B (cs)
HU (1) HUP0103649A3 (cs)
ID (1) ID28650A (cs)
IL (2) IL142112A0 (cs)
MX (1) MXPA01003340A (cs)
NO (1) NO330234B1 (cs)
NZ (1) NZ510446A (cs)
PL (1) PL200693B1 (cs)
PT (1) PT1117420E (cs)
RU (1) RU2214270C2 (cs)
SI (1) SI1117420T1 (cs)
TR (1) TR200100887T2 (cs)
WO (1) WO2000018423A1 (cs)
ZA (1) ZA200102452B (cs)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10024451A1 (de) * 2000-05-18 2001-11-29 Asta Medica Ag Pharmazeutische Darreichungsform für Peptide, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung
SE0104462D0 (sv) * 2001-12-29 2001-12-29 Carlbiotech Ltd As Peptide purifcation (Peptidrening)
WO2024210903A1 (en) * 2023-04-07 2024-10-10 Najib Lamharzi Modified peptide ligands for stable delivery of highly potent payloads to tumors: method of making and using same

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4659696A (en) * 1982-04-30 1987-04-21 Takeda Chemical Industries, Ltd. Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use
US4659969A (en) * 1984-08-09 1987-04-21 Synektron Corporation Variable reluctance actuator having position sensing and control
EP0308181A1 (en) * 1987-09-14 1989-03-22 Novo Nordisk A/S Trans-mucosal delivery formulations and a method for preparation thereof
EP0839525A1 (en) * 1996-10-31 1998-05-06 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
EP0842946A1 (en) * 1996-11-14 1998-05-20 Laboratoire Theramex S.A. Conformationally constrained LH-RH analogues, their uses and pharmaceutical compositions containing them
EP0845265A1 (en) * 1995-08-15 1998-06-03 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha Mucosal preparation containing physiologically active peptide

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SI9300470A (en) * 1993-09-10 1995-04-30 Lek Tovarna Farmacevtskih Inclusion complexes of optically active and racemic ibuproxan with cyclodextrin derivates,process for their preparation,pharmaceutical preparations comprising the same and their use
WO1997021448A1 (en) * 1995-12-13 1997-06-19 Dullatur Limited A calcitonin preparation

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4659696A (en) * 1982-04-30 1987-04-21 Takeda Chemical Industries, Ltd. Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use
US4659969A (en) * 1984-08-09 1987-04-21 Synektron Corporation Variable reluctance actuator having position sensing and control
EP0308181A1 (en) * 1987-09-14 1989-03-22 Novo Nordisk A/S Trans-mucosal delivery formulations and a method for preparation thereof
EP0845265A1 (en) * 1995-08-15 1998-06-03 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha Mucosal preparation containing physiologically active peptide
EP0839525A1 (en) * 1996-10-31 1998-05-06 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
EP0842946A1 (en) * 1996-11-14 1998-05-20 Laboratoire Theramex S.A. Conformationally constrained LH-RH analogues, their uses and pharmaceutical compositions containing them

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Pharmaceutical Research 9 (2) 1992 str. 244-249 (abstrakt) *

Also Published As

Publication number Publication date
EE200100196A (et) 2002-06-17
ZA200102452B (en) 2002-03-26
MXPA01003340A (es) 2004-04-21
KR20010075255A (ko) 2001-08-09
ES2178478T3 (es) 2002-12-16
NO20011576D0 (no) 2001-03-28
AR023056A1 (es) 2002-09-04
ID28650A (id) 2001-06-21
SI1117420T1 (en) 2002-12-31
CZ20011173A3 (cs) 2001-09-12
RU2214270C2 (ru) 2003-10-20
WO2000018423A1 (en) 2000-04-06
AU6199999A (en) 2000-04-17
BR9914125A (pt) 2001-06-19
DE69901721T2 (de) 2003-01-09
EP0998940A1 (en) 2000-05-10
HUP0103649A3 (en) 2002-05-28
PL200693B1 (pl) 2009-01-30
JP2002525336A (ja) 2002-08-13
IL142112A (en) 2006-10-31
CA2344470C (en) 2009-01-06
EP1117420B1 (en) 2002-06-05
DE69901721D1 (de) 2002-07-11
AU756233B2 (en) 2003-01-09
ATE218358T1 (de) 2002-06-15
IL142112A0 (en) 2002-03-10
KR100652457B1 (ko) 2006-11-30
CN1200727C (zh) 2005-05-11
PL346939A1 (en) 2002-03-11
NO20011576L (no) 2001-03-28
JP4485060B2 (ja) 2010-06-16
NO330234B1 (no) 2011-03-07
EP1117420A1 (en) 2001-07-25
EE04872B1 (et) 2007-08-15
CA2344470A1 (en) 2000-04-06
HK1042047B (zh) 2005-12-16
TR200100887T2 (tr) 2001-10-22
HUP0103649A2 (hu) 2002-02-28
NZ510446A (en) 2003-01-31
DK1117420T3 (da) 2002-09-16
CN1324241A (zh) 2001-11-28
PT1117420E (pt) 2002-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6699833B1 (en) Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
US6586402B1 (en) LH-RH peptide analogues, their uses and pharmaceutical compositions containing them
EP0973801B1 (en) GnRH ANTAGONISTS
HRP980197A2 (en) GnRH ANTAGONISTS
EP1117420B1 (en) Pharmaceutical compositions based on alpha-cyclodextrin for the oral administration of lh-rh analogues
HK1042047A (en) Pharmaceutical compositions based on alpha-cyclodextrin for the oral administration of lh-rh analogues
Janecka et al. Superiority of an antagonist of the luteinizing hormone releasing hormone with emphasis on arginine in position 8, named Argtide
RU2001111842A (ru) Фармацевтические композиции на основе альфа-циклодекстрина для перорального введения аналогов рилизинг-гормона лютеинизирующего гормона (lh-rh)
AU779930B2 (en) Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
HK1117388A (en) Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20110923