CZ300774B6 - Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty pro použití jako antagonisté cytokininových receptoru a prípravky obsahující tyto slouceniny - Google Patents
Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty pro použití jako antagonisté cytokininových receptoru a prípravky obsahující tyto slouceniny Download PDFInfo
- Publication number
- CZ300774B6 CZ300774B6 CZ20070691A CZ2007691A CZ300774B6 CZ 300774 B6 CZ300774 B6 CZ 300774B6 CZ 20070691 A CZ20070691 A CZ 20070691A CZ 2007691 A CZ2007691 A CZ 2007691A CZ 300774 B6 CZ300774 B6 CZ 300774B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- purine
- hydroxy
- alkylbenzylamino
- substituted
- methylbenzylamino
- Prior art date
Links
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 title claims abstract description 111
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 111
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 229940083251 peripheral vasodilators purine derivative Drugs 0.000 title claims abstract description 30
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 title claims abstract description 21
- 125000000561 purinyl group Chemical class N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 title abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 60
- -1 nitro, thio Chemical group 0.000 claims abstract description 39
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims abstract description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 50
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 claims description 33
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 23
- LYHDZSQXAKLVHV-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-6-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1O LYHDZSQXAKLVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 19
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 18
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 16
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 12
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 7
- DRQVHTWVNLHDPO-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 DRQVHTWVNLHDPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 6
- JEQYNNYHYIOOBP-UHFFFAOYSA-N 2-ethyl-6-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CCC1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1O JEQYNNYHYIOOBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- YUKKQQVXGSHAJZ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethyl-6-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=CC=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 YUKKQQVXGSHAJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YTVABKDNBGJXAU-UHFFFAOYSA-N 2,4-dimethyl-6-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC1=CC(C)=C(O)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 YTVABKDNBGJXAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NBAVFMXDZGQOIG-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound OC1=CC(C)=CC=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 NBAVFMXDZGQOIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims description 4
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 4
- GVWUSRWBJCDXKD-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-3-ethylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CCC1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1N GVWUSRWBJCDXKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SQBJFNDWBQWDMK-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-3-methylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1N SQBJFNDWBQWDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OMCNPOFAJNVTEX-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-4-methylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound NC1=CC(C)=CC=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 OMCNPOFAJNVTEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JDKOKBDKFXDULZ-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-5-ethylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CCC1=CC=C(N)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 JDKOKBDKFXDULZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 claims description 4
- PQXVAXDICZGHJF-UHFFFAOYSA-N 3,6-diethyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CCC1=CC=C(CC)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1O PQXVAXDICZGHJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 claims description 3
- BVUIWUOQWUXYFX-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-3,6-dimethylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC1=CC=C(C)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1N BVUIWUOQWUXYFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DVDSUACPJRJQCX-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-5-methylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC1=CC=C(N)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 DVDSUACPJRJQCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- YBHZHGWSQDVEIV-UHFFFAOYSA-N n-[(3-methyl-2-nitrophenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1[N+]([O-])=O YBHZHGWSQDVEIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GGNDLODNKVOYDQ-UHFFFAOYSA-N 2-propan-2-yl-6-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC(C)C1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1O GGNDLODNKVOYDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DWYAWZCTKWVABM-UHFFFAOYSA-N 4-propan-2-yl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC(C)C1=CC=C(O)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 DWYAWZCTKWVABM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XRHCRONSXNCQQI-UHFFFAOYSA-N 5-ethyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound OC1=CC(CC)=CC=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 XRHCRONSXNCQQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000012939 Caryocar nuciferum Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000207199 Citrus Species 0.000 claims description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 2
- 244000043261 Hevea brasiliensis Species 0.000 claims description 2
- 235000008694 Humulus lupulus Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000025221 Humulus lupulus Species 0.000 claims description 2
- 235000014056 Juglans cinerea Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000004929 Juglans cinerea Species 0.000 claims description 2
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 claims description 2
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 claims description 2
- 241000219873 Vicia Species 0.000 claims description 2
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 235000021015 bananas Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021038 drupes Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000000921 morphogenic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229920003052 natural elastomer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001194 natural rubber Polymers 0.000 claims description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 2
- FBLRDPRCLWJPNE-UHFFFAOYSA-N 2,4-diethyl-6-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CCC1=CC(CC)=C(O)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 FBLRDPRCLWJPNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- CZZZABOKJQXEBO-UHFFFAOYSA-N 2,4-dimethylaniline Chemical compound CC1=CC=C(N)C(C)=C1 CZZZABOKJQXEBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- HXFHWYZIYKGYOO-UHFFFAOYSA-N 3,6-dimethyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC1=CC=C(C)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1O HXFHWYZIYKGYOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- VCTPUZMQKCZWNE-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CCC1=CC=CC(O)=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 VCTPUZMQKCZWNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000219071 Malvaceae Species 0.000 claims 1
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 claims 1
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 claims 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 claims 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 claims 1
- YHKUCAZTRSUFOM-UHFFFAOYSA-N n-[(4-methyl-2-nitrophenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC(C)=CC=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 YHKUCAZTRSUFOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 244000045561 useful plants Species 0.000 claims 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 abstract 1
- 239000005648 plant growth regulator Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 48
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 39
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 31
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 29
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 27
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 27
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 101100269449 Arabidopsis thaliana AHK4 gene Proteins 0.000 description 14
- NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N N-benzyladenine Chemical compound N=1C=NC=2NC=NC=2C=1NCC1=CC=CC=C1 NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 12
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 12
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 11
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 8
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 8
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 235000009328 Amaranthus caudatus Nutrition 0.000 description 6
- 240000001592 Amaranthus caudatus Species 0.000 description 6
- 101100269448 Arabidopsis thaliana AHK3 gene Proteins 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101100523938 Phytophthora infestans (strain T30-4) PexRD21 gene Proteins 0.000 description 6
- 101100478266 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) SPT10 gene Proteins 0.000 description 6
- 230000000100 anti-cytokinin effect Effects 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 6
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 6
- 229940023877 zeatin Drugs 0.000 description 6
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical class NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000012735 amaranth Nutrition 0.000 description 5
- 239000004178 amaranth Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 5
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 5
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 5
- LKCRLZSIDXPEGZ-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CCC1=CC=C(O)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 LKCRLZSIDXPEGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 4
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 4
- JEEITJDDXCBUKJ-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-3,5-dimethylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC1=CC(C)=C(N)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 JEEITJDDXCBUKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 4
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- UZKQTCBAMSWPJD-FARCUNLSSA-N trans-zeatin Chemical compound OCC(/C)=C/CNC1=NC=NC2=C1N=CN2 UZKQTCBAMSWPJD-FARCUNLSSA-N 0.000 description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 3
- 101100109983 Arabidopsis thaliana ARR5 gene Proteins 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 3
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 239000007931 coated granule Substances 0.000 description 3
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol monoethyl ether Chemical compound CCOCCOCCO XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 3
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229920005552 sodium lignosulfonate Polymers 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- UZKQTCBAMSWPJD-UQCOIBPSSA-N trans-Zeatin Natural products OCC(/C)=C\CNC1=NC=NC2=C1N=CN2 UZKQTCBAMSWPJD-UQCOIBPSSA-N 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000004563 wettable powder Substances 0.000 description 3
- GCUVWBFOTMJVLI-UHFFFAOYSA-N 2-(3-methylbut-3-enyl)-7h-purin-6-amine Chemical compound CC(=C)CCC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 GCUVWBFOTMJVLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LHPVTMAMEMZFIJ-UHFFFAOYSA-N 2-benzyl-7h-purin-6-amine Chemical compound N=1C=2N=CNC=2C(N)=NC=1CC1=CC=CC=C1 LHPVTMAMEMZFIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HGCBKZYVMNOIMT-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-2-[(7h-purin-6-ylamino)methyl]phenol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1CNC1=NC=NC2=C1NC=N2 HGCBKZYVMNOIMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSHNITRMYYLLCV-UHFFFAOYSA-N 4-methylumbelliferone Chemical compound C1=C(O)C=CC2=C1OC(=O)C=C2C HSHNITRMYYLLCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZKBQDFAWXLTYKS-UHFFFAOYSA-N 6-Chloro-1H-purine Chemical compound ClC1=NC=NC2=C1NC=N2 ZKBQDFAWXLTYKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 2
- DHHFDKNIEVKVKS-FMOSSLLZSA-N Betanin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC(C[C@H]2C([O-])=O)=C1[N+]2=C\C=C\1C=C(C(O)=O)N[C@H](C(O)=O)C/1 DHHFDKNIEVKVKS-FMOSSLLZSA-N 0.000 description 2
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QFOHBWFCKVYLES-UHFFFAOYSA-N Butylparaben Chemical compound CCCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QFOHBWFCKVYLES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 241000656145 Thyrsites atun Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 235000000842 betacyanins Nutrition 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 2
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 2
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 2
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 2
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 238000004807 desolvation Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- SFXJLDFBTMARRM-UHFFFAOYSA-N n-[(3-ethyl-2-nitrophenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CCC1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1[N+]([O-])=O SFXJLDFBTMARRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CQNKINZXFIFTRM-UHFFFAOYSA-N n-[(5-methyl-2-nitrophenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 CQNKINZXFIFTRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 2
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000012205 qualitative assay Methods 0.000 description 2
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000004546 suspension concentrate Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- BZDFPWGLIQUXIT-UHFFFAOYSA-N 1-methoxy-3-propoxypropane Chemical compound CCCOCCCOC BZDFPWGLIQUXIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 1-naphthaleneacetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CC=CC2=C1 PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APXRHPDHORGIEB-UHFFFAOYSA-N 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine Chemical class N1=CN=C2C=NNC2=C1 APXRHPDHORGIEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JCCBZCMSYUSCFM-UHFFFAOYSA-N 2-chlorobenzenesulfonamide Chemical compound NS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1Cl JCCBZCMSYUSCFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHIZVZJETFVJMJ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropyl dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(C)O BHIZVZJETFVJMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RUZQLRPRQPKGJL-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-n-pentyl-2h-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-amine Chemical compound CCCCCNC1=NC=NC2=C(C)NN=C12 RUZQLRPRQPKGJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSGQCCSGKGJLRL-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-2h-chromen-2-one Chemical group C1=CC=CC2=C1OC(=O)C=C2C PSGQCCSGKGJLRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ARQXEQLMMNGFDU-JHZZJYKESA-N 4-methylumbelliferone beta-D-glucuronide Chemical compound C1=CC=2C(C)=CC(=O)OC=2C=C1O[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ARQXEQLMMNGFDU-JHZZJYKESA-N 0.000 description 1
- OPIFSICVWOWJMJ-LNNRFACYSA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 OPIFSICVWOWJMJ-LNNRFACYSA-N 0.000 description 1
- 101150019147 ARR5 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000219144 Abutilon Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000743339 Agrostis Species 0.000 description 1
- 241000743985 Alopecurus Species 0.000 description 1
- 241000219318 Amaranthus Species 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 101100269447 Arabidopsis thaliana AHK2 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000005781 Avena Nutrition 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 244000056139 Brassica cretica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000209200 Bromus Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 241000219312 Chenopodium Species 0.000 description 1
- 235000007516 Chrysanthemum Nutrition 0.000 description 1
- 240000005250 Chrysanthemum indicum Species 0.000 description 1
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241001672694 Citrus reticulata Species 0.000 description 1
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 1
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 240000000491 Corchorus aestuans Species 0.000 description 1
- 235000011777 Corchorus aestuans Nutrition 0.000 description 1
- 235000010862 Corchorus capsularis Nutrition 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000219112 Cucumis Species 0.000 description 1
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 1
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 1
- 241000219122 Cucurbita Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- 241000234653 Cyperus Species 0.000 description 1
- 235000017896 Digitaria Nutrition 0.000 description 1
- 241001303487 Digitaria <clam> Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000192043 Echinochloa Species 0.000 description 1
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 1
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 108010072039 Histidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 101000715854 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase 2 Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000002397 Kinins Human genes 0.000 description 1
- 108010093008 Kinins Proteins 0.000 description 1
- 240000004322 Lens culinaris Species 0.000 description 1
- 235000014647 Lens culinaris subsp culinaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 241000209082 Lolium Species 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 235000003990 Monochoria hastata Nutrition 0.000 description 1
- 240000000178 Monochoria vaginalis Species 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N Nonylphenol Natural products CCCCCCCCCC1=CC=C(O)C=C1 IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000207836 Olea <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 240000001090 Papaver somniferum Species 0.000 description 1
- 235000008753 Papaver somniferum Nutrition 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 1
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 108010043400 Protamine Kinase Proteins 0.000 description 1
- 240000005809 Prunus persica Species 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 241000220324 Pyrus Species 0.000 description 1
- 235000003846 Ricinus Nutrition 0.000 description 1
- 241000322381 Ricinus <louse> Species 0.000 description 1
- 241000857233 Rottboellia Species 0.000 description 1
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 description 1
- 240000009132 Sagittaria sagittifolia Species 0.000 description 1
- 241000202758 Scirpus Species 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 235000005775 Setaria Nutrition 0.000 description 1
- 241000232088 Setaria <nematode> Species 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000220261 Sinapis Species 0.000 description 1
- 244000019194 Sorbus aucuparia Species 0.000 description 1
- 240000002439 Sorghum halepense Species 0.000 description 1
- 240000003829 Sorghum propinquum Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 1
- 240000006694 Stellaria media Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 240000001260 Tropaeolum majus Species 0.000 description 1
- 235000004424 Tropaeolum majus Nutrition 0.000 description 1
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 1
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- NYRAVIYBIHCEGB-UHFFFAOYSA-N [K].[Ca] Chemical compound [K].[Ca] NYRAVIYBIHCEGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- LMBKHPSPJWILFL-UHFFFAOYSA-N aniline 7H-purine Chemical compound NC1=CC=CC=C1.N1=CN=C2N=CNC2=C1 LMBKHPSPJWILFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- OJHAHQJRQIOCFK-UHFFFAOYSA-N azane;chloroform;methanol Chemical compound N.OC.ClC(Cl)Cl OJHAHQJRQIOCFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003939 benzylamines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000440 benzylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021029 blackberry Nutrition 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- PSGWNCVLDUCUCV-UHFFFAOYSA-N bromopurine Chemical compound BrC1=NC=NC2=NC=N[C]12 PSGWNCVLDUCUCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015709 bud dormancy process Effects 0.000 description 1
- 229940067596 butylparaben Drugs 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOCMUZJPDXYRFD-UHFFFAOYSA-L calcium;2-dodecylbenzenesulfonate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O.CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O OOCMUZJPDXYRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 description 1
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000006369 cell cycle progression Effects 0.000 description 1
- 230000036978 cell physiology Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- 230000035572 chemosensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000003336 chlorophyll retention Effects 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000012272 crop production Methods 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- RVGAEGHWOZOGRZ-UHFFFAOYSA-N cyclohexanone;oxirane Chemical compound C1CO1.O=C1CCCCC1 RVGAEGHWOZOGRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000009025 developmental regulation Effects 0.000 description 1
- 229940075557 diethylene glycol monoethyl ether Drugs 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- LLRANSBEYQZKFY-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid;propane-1,2-diol Chemical compound CC(O)CO.CCCCCCCCCCCC(O)=O LLRANSBEYQZKFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010410 dusting Methods 0.000 description 1
- 230000000431 effect on proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000004495 emulsifiable concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 241001233957 eudicotyledons Species 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 230000008124 floral development Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 101150054900 gus gene Proteins 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000054634 human CDK2 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000014634 leaf senescence Effects 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- LZQOCBTXNHNSGB-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-3-propan-2-ylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC(C)C1=CC=CC(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1N LZQOCBTXNHNSGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWOFHYPGFKXLBU-UHFFFAOYSA-N n-[(2-amino-5-propan-2-ylphenyl)methyl]-7h-purin-6-amine Chemical compound CC(C)C1=CC=C(N)C(CNC=2C=3NC=NC=3N=CN=2)=C1 NWOFHYPGFKXLBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](OC=2C=C3OC(=O)C=C(C)C3=CC=2)O[C@@H]1CO UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N 0.000 description 1
- RIWRFSMVIUAEBX-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-phenylmethanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1 RIWRFSMVIUAEBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N nonylphenol Chemical compound CCCCCCCCCC1=CC=CC=C1O SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- BTFQKIATRPGRBS-UHFFFAOYSA-N o-tolualdehyde Chemical class CC1=CC=CC=C1C=O BTFQKIATRPGRBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 235000021017 pears Nutrition 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 208000016021 phenotype Diseases 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 1
- 230000037039 plant physiology Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 235000021018 plums Nutrition 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 201000005484 prostate carcinoma in situ Diseases 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004172 pyridoxine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019171 pyridoxine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011764 pyridoxine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- 150000004943 pyrrolo[2,3-d]pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 235000021013 raspberries Nutrition 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000026267 regulation of growth Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 108091008020 response regulators Proteins 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 230000021749 root development Effects 0.000 description 1
- 230000002786 root growth Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- PYODKQIVQIVELM-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3-bis(2-methylpropyl)naphthalene-1-sulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(S([O-])(=O)=O)=C(CC(C)C)C(CC(C)C)=CC2=C1 PYODKQIVQIVELM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- AYEKOFBPNLCAJY-UHFFFAOYSA-O thiamine pyrophosphate Chemical compound CC1=C(CCOP(O)(=O)OP(O)(O)=O)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N AYEKOFBPNLCAJY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 229940100640 transdermal system Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 1
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/32—Nitrogen atom
- C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I pro použití jako antagonistu cytokininových receptoru, jako regulátoru rustu rostlin, ve kterých R1 znamená substituent vybraný ze skupiny zahrnující hydroxyl, amino, nitro, thio a alkyl skupinu, R2 znamená 1 až 4 alkyl skupiny.
Description
Oblast techniky
Vynález se týká substituovaných 6-(alkylbenzylamino)purinových derivátů, jejich použití jako antagonistů cytokininových receptoru a přípravků obsahujících tyto sloučeniny.
io
Dosavadní stav techniky
Cytokininy jsou rostlinné hormony, které hrají klíčovou úlohu v rozdílných aspektech regulace růstu a vývoje. Celá skupina zahrnuje chemikálie s rozdílnými stupni strukturální podobnosti, i5 z nichž některé se vyskytují přirozeně v rostlinách, kdežto jiné byly připraveny chemicky (Mok& Mok Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 52: 89—118, 2001). Přirozené cytokininy jsou adeninové deriváty, které je možné klasifikovat podle postranního řetězce na isoprenoidní nebo aromatické. Důležitými představiteli těchto dvou tříd jsou zeatin a 6-benzylaminopurin.
Cytokininy jsou centrálními regulátory buněčného cyklu a indukce buněčného dělení je považována za diagnostickou pro tuto skupinu rostlinných hormonů. Molekulární podstata této aktivity je pochopena pouze částečné a může se lišit u různých buněčných typů. Bylo prokázáno, že cytokininy kontrolují defosforylaci tyrosinu a aktivují p34cdc2-podobnou H1 histonovou kinasu (Zhang et al., Planta 200: 2-12,1996), stejně jako transkripčně aktivují cytiin D3 (Riou-Khamli25 chi etal. Science 283: 1541-1544, 1999). Některé z důležitých fyziologických a vývojových procesů jakými jsou tvorba a aktivita apikálního meristému, vývoj květů, přerušení dormance pupenů a klíčení semen, které jsou kontrolovány cytokininy, mají přinejmenším funkční vazby s mechanismy kontroly buněčného cyklu.
Jak rostliny rozpoznávají cytokininy bylo po dlouhou dobu záhadou. Zcela nedávno se však podařilo identifikovat několik cytokininových receptorů v Arabidopsis (Inoue et al. Nátuře 409: 1060-1063, 2001) a Zea mays (Yonekura-Sakakibara etal. Plant Physiol. 134: 1 654-1 661, 2004). Arabidopsis má tři cytokininové receptory, AHK2, AHK3 a CRE1/AHK4. Všechny jsou membránově-lokalizované sensorové histidin kinasy s extracelulámí ligandvazebnou doménou a cytoplasmatickou His-kinasovou doménou. Bylo rovněž ukázáno, že cytokininový signál je transmitován několikakrokovým fosfát-přenosovým systémem, který byl známý u prokaryot a nižších eukaryot. U vyšších eukaryot jsou dvoučlenné signální dráhy známé pouze u rostlin (Ferreira & Kieber, Curr. Opin. Plant Biol. 8: 518-525,2005). Vývoj agonístů a antagonistů určitého fyziologického účinku je důležitý pro studium mechanismu účinku biologicky aktivních přirozených látek. Potenciální cytokininové antagonisty byly navrženy na základě domněnky, že se (1) aktivní cytokininy mohou vázat na jeden nebo více buněčných receptorů a (2) že bude možné připravit sloučeniny, které mají minimální cytokininovou aktivitu, avšak vysoký stupeň strukturální podobnosti umožňující jim kompetovat o dostupná receptorová vazebná místa, čímž omezí biologickou aktivitu cytokininů. Účinný přirozeně se vyskytující cytokinín N6-isopente45 nyladenin posloužil jako základ úvodních studií vztahů mezi strukturou a aktivitou. Modifikace heterocyklického purinového systému přinesla první analoga s antagonistickou aktivitou, která významně redukovala cytokininovou aktivitu v biotestech (Skoog & Armstrong, Annu, Rev. Plant Physiol. 21: 359-384, 1970; Skoog etal., Phytochemistry 6: 1 169-1 192, 1967). Identifikace třídy cytokininových antagonistů racionálními postupy naznačila, že další strukturálně příbuzné heterocyklické sloučeniny mohou mít cytokininovou antagonistickou aktivitu. Proto byla připravena řada substituovaných pyrrolo[2,3-J]pyrimidinů, pyrazolo[4,3-ťflpyrimídinů, striazinů, N-benzyl-N -fenylmočovin a N-arylkarbamátů, které byly testovány na schopnost ínhibovat cytokininy stimulované procesy v různých biotestech, jež prokázaly řadu látek jako potenciální anticytokininy (Hecht, Proč. Nati. Acad. Sci USA 68: 2608-2610, 1971; Skoog et al.
Phytochemistry 12: 25-37, 1973; Shimizu etal. J. Agríc. Food Chem.37: 236-240, 1989,
CZ 300774 Bó
Iwamura etal. Biochim. Biophys. Res. Commun. 57: 412-416, 1974; Hecht etal. 1976: US4, 282, 361; Skoog et al. 1981: US3,988, 338). Vzhledem ke strukturální podobnosti s přirozenými cytokininy a vzhledem k jejich antagonistickým účinkům, které byly reverzibilní v závislosti na zvyšujících se koncentracích cytokininů bylo předpokládáno, že tyto sloučeniny fungují skrze interakci se společným molekulárním cílem, tedy cytokininovými receptory (in Mok & Mok, CRC Press, Boča Raton, USA, pp.43-55, 1994). Nicméně, přímý důkaz, že cytokininové receptoiy jsou místem cytokinin-anticytokininové interakce chyběl, protože cytokininové receptory byly v té době neznámé. Nedávný objev a pochopení cytokininového signalingu nás motivoval k přezkoumání anticytokininového mechanismu účinku. Nejprve jsme prokázali, že reprezentaio tivní anticytokininy nejsou kompetitivními inhibitory dvou cytokininových receptorů zArabidopsis. S použitím velmi účinného anticytokininu 3-methyl-7-pentylaminopyrazolo[4,3-íř]pyrimidinu jsme prokázali, že tato sloučenina inhibuje progres v buněčném cyklu a vyvolává změny připomínající účinek inhibitorů cyklin-dependentních kinas (CDK). Potvrdili jsme rovněž inhibicí CDK anticytokininy u rostlin a lidí vazbou anticytokininu do ATP-vazebného místa lid15 ské CDK2 (Spíchal et al, J. Biol. Chem. 282: 14 356-63,2007).
Ze současných prací je patrné, že percepce cytokininů je nezbytným krokem v regulaci mnoha aspektů růstu a vývoje rostlin. Studium rostlin pozbývajících funkční cytokininové receptoryjednoduchých, dvojitých a kompletních mutantů - ukazuje, že snížená schopnost vnímat cyto20 kininy vede k ovlivnění růstu prýtu, oddálení senescence listů, zvětšení velikosti semen, zkrácení doby klíčení a zvětšení kořenového systému (Higuchi etal. Proč. Nati. Acad. Sci USA 101: 8821-8826, 2004; Nishimura et al. Plant Cell 16: 1365-1377, 2004; Riefler et al. Plant Cell 18: 40-54, 2006). Mutace způsobující vyřazení z funkce, nebo naopak zvýšenou aktivitu cytokininových receptorů luštěnin napomohly objasnění klíčového postavení percepce cytokininů při modu25 láci (Gonzalez-Rizzo et al. Plant Cell 18: 2680-2693, 2006; Murray et al. Science 315: 101-104, 2007; Tirichine etal. Science 315: 104-107, 2007). Inhibitor percepce cytokininů - antagonista cytokininových receptorů-aplikovaný v určité době růstu rostlin, nebo orgánově specificky by tak mohl najít široké využití v zemědělství.
V nedávné době jsme objevili první generaci antagonistů cytokininových receptorů založenou na substituovaných 6-(alkylbenzylamino)purinech. Mezi nejslibnější substituenty, ve smyslu přípravy specifických antagonistů, patří 2-hydroxy, 2-amino a 2-nitro skupiny. Nově připravené látky vykazují zajímavé in vivo účinky na růst modelových rostlin.
Předmětem tohoto vynálezu jsou cytokininová analoga vykazující unikátní růstověregulační účinky a selektivitu vůči cytokininovým receptorům, která jsou netoxická pro živočišné buňky.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I
- 2 .
ve kterém
R1 znamená substituent vybraný ze skupiny zahrnující hydroxyl, amino, nitro, thio a alkyl skupinu,
R2 znamená 1 až 4 alkyl skupiny, stejné nebo různé, a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisty cytokininových receptorů.
Výše uvedené generické skupiny máji významy uvedené v následující legendě, přičemž amino znamená skupinu -NH2, nitro znamená skupinu -NO2, thio znamená skupinu -SH, hydroxyl znamená skupinu -OH, alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou aíkylovou skupinu obsahující 1 až 5 uhlíkových atomů.
Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I ze skupiny zahrnující: 6-(2-amino-3-methylbenzylamino)purin, 6—(2— amino-4-methylbenzylamino)purin, 6-(2-amino-5-methylbenzyIamino)purin, 6-(2-amino-325 ethylbenzvlamino)purin, 6-(2-amino-5-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-amino-3-isopropylbenzylamino)purin, 6-{2-amino-5-isopropylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy~3-methylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-4-methylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-5-methylbenzylaminojpurin, 6-(2-hydroxy-6-methylbenzylamino)purin, 6-~(2-hydroxy-3-ethylbenzylamino)purin, 6-{2-hydroxy-4-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-5-ethylbenzylamino)purin, 630 (2-hydroxy-6-ethylbenzytamino)purin, 6-(2-hydroxy-3-isopropylbenzylamino)purin, 6—(2— hydroxy-5-isopropylbenzylamino)purin, 6-(2-nÍtro-3-methylbenzylainino)purin, 6-(2-nitro-4— methylbenzylaminojpurin, 6-(2-thio-3-methylbenzylamino)purin, 6—(2-thio-5-methyIbenzylamino)purín, 6-(2-thio-3-ethylbenzylamino)purin 6-(2-hydroxy—3,5—dimethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-3,4-dimethylbenzyiamino)purin, 6-(2-hydroxy-3,6-dimethylbenzyl35 aminojpurin, 6-(2-hydroxy-3)4,5-trimethylbenzylamino)purin, 6-(2-amÍno-3,5-dimethylbenzylamino)purin, 6-(2-amÍno-3,6-dimethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-3,5-diethylbenzylaminojpurin, 6-(2-hydroxy-3,6-diethyIbenzylamino)purin, a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy,
-3CZ 300774 B6 ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů.
Mimořádně výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou substituované 6-(methylbenzyl5 amino)purinové deriváty zahrnující zejména 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purin a 6-(2hydroxy-5-methylbenzylamino)purin a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů.
ío Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů pro morfogenní účinky vedoucí ke zvětšení kořenového systému rostlin.
Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů pro urychlení nalévání semen a zvětšení velikosti semene a plodů rostlin a hub a pro zkrácení doby klíčení semen rostlin.
Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(aIkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů v tkáňových kulturách k regulaci proliferace a tnorfogeneze,
Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů, zejména pro zvýšení výnosu a kvality zemědělských produktů.
Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce l a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů při produkci užitkových rostlin, s výhodou obilovin (pšenice, ječmen, rýže, kukuřice, žito, oves, čirok a další druhy), řep (cukrová a krmná řepa); malvic, peckovic a bobulovin (jablka, hrušky, švestky, broskve, mandle, jahody, maliny a ostružiny); vikvovitých rostlin (bob, čočka, hrách, sója); olejnin (řepka, hořčice, mák, olivy, slunečnice, kokos, Ricinus, kakaový bob, podzemnice olejna); Iilkovitých rostlin (dýně, okurky, melouny); přadných rostlin (bavlna, len, konopí, juta); citrusů (pomeranče, citrony, grapefruity, mandarinky); zeleniny (špenát, skořice, kafr) nebo rostlin jakými jsou tabák, ořešák, baklažán, cukrová třtina, čajovník, réva vinná, chmel, banány a přírodní kaučukovníkové a léčivé rostliny stejně tak jako okrasné rostliny. Plodiny zahrnují ty, které poskytují toleranci vůči třídám růstových faktorů konvenčním křížením nebo metodami genetického inženýrství. Plevely, jejichž růst může být kontrolován, zahrnují jak jednoděložné tak dvouděložné druhy, například Stellaria, Nasturtium, Agrostis, Digitaria, Avena,
Setaria, Sinapis, Lolium, Solárium, Echinochloa, Scirpus, Monochoria, Sagittaria, Bromus, Alopecurus, Sorghum halepense, Rottboellia, Cyperus, Abutilon, Sida, Xanbthium, Amaranthus, Chenopodium, Ipomoena, Chrysanthemum, Galium, Viola and Veronice.
Předmětem vynálezu jsou substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzor50 ce I a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití při přípravě přípravků pro klonování rostlinných i savčích zárodečných buněk a embryí.
Vynález dále zahrnuje přípravky pro klonování rostlinných i savčích zárodečných buněk a embryí obsahující alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I či sůl takovéto sloučeniny
CZ 300774 Bó s alkalickým kovem, amoniakem Či aminem, ve formě racemátu nebo opticky aktivního izotneru, nebo jeho adiční soli s kyselinou, a pomocné látky.
Předmětem vynálezu jsou substituované 6~(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzor5 ce I ajejich soli s alkalickými kovy, amoniakem Či aminy, ve formč racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití při přípravě růstově-regulačních přípravků.
Vynález rovněž zahrnuje růstově-regulační přípravky obsahující alespoň jednu sloučeninu obec10 ného vzorce I či sůl takovéto sloučeniny s alkalickým kovem, amoniakem či aminem, ve formě racemátu nebo opticky aktivního izomeru, nebo jeho adiční soli s kyselinou, a pomocné látky.
Použití substituovaného 6-(alkylbenzylamino)purinového derivátu obecného vzorce I nebo jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem Či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izome15 rů, nebo jejich adičních solí s kyselinami pro přípravu přípravku pro inhibici cytokininových receptorů.
Vynález dále zahrnuje přípravky pro inhibici cytokininových receptorů obsahující alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I či sůl takovéto sloučeniny s alkalickým kovem, amoniakem či aminem, ve formě racemátu nebo opticky aktivního izomeru, nebo jeho adiční soli s kyselinou, a pomocné látky.
Sloučeniny obecného vzorce I jsou používány v nemodifikované formě, nebo s výhodou společně s pomocnými látkami běžně využívanými v přípravcích. Jsou přednostně používány koncentráty aktivních látek a dále také suspenze nebo disperze, obzvláště izotonické vodné roztoky, suspenze a disperze, ředěné emulze, rozpustné prášky, prach, granuláty, krémy, gely, olejové suspenze a rovněž enkapsulované produkty, např. polymemí substance. Ve vztahu k typu přípravku je určena i metoda aplikace, například sprejování, atomizace, poprach, rozptyl, nátěr a polévání, která je zvolena ve vztahu k předurčenému použití a převažujícím okolnostem. Přípravky mohou být sterilizovány anebo obsahují další přídavné látky neutrální povahy, například konzervační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadla anebo emulgátory, rozpouštěcí činidla, hnojivá, či donory mikrohnojiv nebo další přípravky za účelem získání speciálních účinků.
Sloučenina obecného vzorce I může být smíchána s dalšími růstovými regulátory za účelem dosažení synergického účinku.
Přípravky
Přípravky obsahující sloučeniny obecného vzorce I (aktivní složka) nebo jejich soli a pokud je třeba, jednu nebo více pevných nebo kapalných pomocných látek, jsou připraveny známými způsoby, například smísením nebo mletím účinné látky s pomocnými látkami, jako jsou např. rozpouštědla nebo pevné nosiče. Do přípravků mohou být přidávány povrchově aktivní látky (surfaktanty).
V závislosti na povaze sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, která má být formulována, vhodné povrchově aktivní látky jsou neiontové, kationtové a/nebo aniontové povrchově aktivní látky ajejich směsi mající dobré emulzifikační, díspergační a zvlhčovači vlastnosti.
Příklady vhodných aniontových, neíontových a kationtových smáčedel jsou shrnuty například ve
WO 97/34485.
Pro přípravu formulací obsahujících antagonisty cytokininových receptorů na bázi substituovaných 6-(alkyIbenzylamÍno)purinových derivátů jsou podle tohoto vynálezu používána smáčedla konvěčně používaná při přípravách přípravků, které jsou popsány, např. v „McCutcheon's Deter55 gents and Emulsifiers Annual“ MC Publishing Corp., Ridgewood New Jersey, 1981, Stache, H,, „Tensid-Taschenbuch“, Carl Hanser Verlag, MunichNienna, 1981 and M. and J. Ash, „Encyclopedia of Surfactants“, Vol—lil, Chemical Publishing Co., New York, 1980—81.
Formulace přípravku s cytokininovým antagonistou obsahuje hmotnostně 0,1 do 99% (w/w), s zejména pak od 0,1 do 95 % (w/w) aktivní složky odpovídající látce nebo směsi látek obecného vzorce I, přičemž obsahuje i od 5 do 99,9% směsi přísad či farmaceutických nosičů, a to v závislosti na způsobech aplikace, a popřípadě obsahuje i váhově od 0,1 do 25 % smáčedla.
Ačkoliv jsou komerční produkty obvykle připravovány ve formě koncentrátů, konečný uživatel ío upotřebí nareděný přípravek. Kompozice může proto obsahovat i další přísady, jakými jsou stabilizátory, např. rostlinné oleje nebo epoxidizované rostlinné oleje (epoxidizovaný palmový olej
0; 1, řepkový nebo olivový olej), odpěňovače, např. silikonový olej, konzervační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadla anebo emulgátory, viskozitní činidla, pojivá, lepidla, a také hnojivá a další aktivní přísady. S výhodou jsou využívány přípravky následujícího složení: (% = hmotnostní pro15 cento)
Emulgované koncentráty:
aktivní složka:
smáčedlo: kapalný nosič:
Prášky:
aktivní složka: pevný nosič:
Suspenzní koncentráty:
aktivní složka: voda: smáčedlo:
Smáčivé prášky:
aktivní složka: smáčedlo: pevný nosič:
Granule:
aktivní složka: pevný nosič:
až 90 %, s výhodou 5 až 20 % až 30 %, s výhodou 10 až 20 % 5 až 94%, s výhodou 60 až 85 %
0,1 až 10 %, s výhodou 0,1 až 5 % 99,9 až 90 %, s výhodou 99,9 až 95 % až 75 %, s výhodou 10 až 50 % 94 až 24 %, s výhodou 88 až 30 % 1 až 40 %, s výhodou 2 až 30 %
0,5 až 90 %, s výhodou 1 až 80 % 0,5 až 20 %, s výhodou 1 až 15 % 5 až 95 %, s výhodou 15 až 90 %
0,1 až 30 %, s výhodou 0,1 až 15 % 99,9 až 70 %, s výhodou 99,9 až 85 %
Kompozice mohou rovněž obsahovat další příměsi, jakými jsou stabilizátory, například rostlinné oleje nebo epoxidizované rostlinné oleje (epoxidizovaný kokosový olej, řepkový olej nebo sojový olej), odpěňovače, např. silikonový olej, konzervační látky, regulátory viskozity, pojivá, zahušťovadla, a také hnojivá a další aktivní látky. Pro použití sloučenin obecného vzorce 1 nebo jejich solí, nebo kompozic je obsahujících, při ochraně rostlin před škodlivým vlivem růstových regulá50 torů se používají rozdílné metody a technologie, kterými jsou například následující:
£.
i) Obalování osiva
a) Obalování osiva smáčivou práškovou formulací sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, a to mícháním vnádobč až do stejnorodé distribuce na povrchu semen (suché obalování).
Při takové proceduře je přibližně 1 až 500 g sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, (4 g až 2 kg smáčívého prášku) používáno na 100 kg osiva.
b) Obalování osiva emulzífikovaným koncentrátem sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, io v souladu s metodou a) (mokré obalování).
c) Obalování osiva cestou máčení semen po dobu 1 až 72 h v tekutině obsahující od 1000 1.10-6 (ppm) sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, a s výhodou následného usušení semen (imerzní obalování).
Obalování semen nebo ošetření klíčících semen jsou upřednostňovanou metodou aplikace, protože ošetření aktivní látkou je určeno cílovou plodinou. Obecně jsou látky vzorce 1 nebo jejich soli používány v množství od l do 1000 g, s výhodou od 5 do 250 g, na 100 kg semen, avšak v závislosti na metodice, která rovněž umožňuje přidání dalších aktivních látek nebo mikroživin; určené koncentrační limity se mohou pohybovat nahoru nebo dolů (opakované obalování).
ii) Aplikace cisternové směsi
Kapalná formulace směsi růstového regulátoru a antidota je používána v hmotnostním poměru jednoho k druhému od 10:1 do 1:100, rychlost aplikace růstového regulátoru od 0,005 do 5,0 kg na hektar. Taková cisternová aplikace směsi se provádí před anebo po setí.
iii) Aplikace do semenné brázdy
Sloučenina obecného vzorce I nebo její sůl, je zavedena do otevřené brázdy oseté semenem ve formě emulzifikovaného koncentrátu, smáčivého prášku nebo granulí. Jakmile je semenná brázda zaklopena, je růstový regulátor aplikován cestou obvykle používanou při preemergentním procesu.
iv) Kontrolované uvolňování aktivních látek
Sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich soli, jsou aplikovány v roztoku k minerálním granulovaným nosičům nebo polymerizovaným granulím (močovina, formaldehyd) a jsou vysušeny. V případě, že je to žádoucí, tak se provádí obalování, které umožňuje postupné uvolňování látky v měřitelných množstvích po určitou specifickou periodu (obalované granule).
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 ukazuje vazebný test s CRE1/AHK4- a AHK3-obsahujícími membránami E. coli. (A) Vazba 2 nM 3HtZ byla testována v kombinaci se stoupající koncentrací kompetitoru 8, nebo v přítomnosti neznačeného /raws-zeatinu (tZ; positivní kontrola). (B) Dvojitě reciproké vynesení ukazující kompetitivní charakter inhibice vazby 3HtZ do receptoru CRE1/AHK4 látkou 8.
Obr. 2 ukazuje efekt látky 8 na cytokininem indukovanou expresi genu Parrs::GUS. (A) Parrs-GUS transgennní semenáčky Arabidopsis inkubované s 2,5 μΜ 6-benzylaminopurinem (BA) za přítomnosti, či absence 5 μΜ látky 8; DMSO (0.1%) bylo testováno jako kontrola rozpouštědla použitého pro rozpouštění aplikovaných látek. (B) Kvantitativní vyjádření koncentračně závislého inhibičního účinku látky 8 na indukci exprese genu PARRp:GUS spuštěné 1 μΜ BA.
-7CZ 300774 B6
Obr. 3 znázorňuje antagonistický efekt látky 8 ve standardních cytokininových biotestech. (A) Efekt na proliferaci buněk cytokinin-depenentního kalusu Arabidopsis. (B) Efekt na cytokininem stimulovanou tvorbu betacyaninu v hypokotylech Amaranthu ve tmě. (C) Efekt na cytokininem stimulovanou retenci chlorofylu v listech pšenice.
Obr, 4 ukazuje in vivo účinek látky 8 na formování laterálních kořenů. (A) Počet laterálních kořenů formovaných semenáčky Arabidopsis (divoký typ) 10 dnů po vyklíčení - zleva: DMSO kontrola, tvorba postranních kořenů v přítomnosti cytokininu BA, látky 8, a kompetiční efekt při aplikaci obou látek. (B) Nárůst počtu postranních kořenů u rostlin Arabidopsis divokého typu io a receptorových mutantů rostoucích na médiu obsahujícím látku 8.
Obr. 5 ukazuje in vivo účinek látky 8 na klíčení. Zkrácení doby klíčení semen Arabidopsis divokého typu kultivovaných na médiu obsahujícím různé koncentrace látky 8 po přemístění ze tmy na bílé světlo (režim 16 hod den/8 hod noc).
Příklady provedení vynálezu
Výchozím materiálem pro přípravu sloučenin obecného vzorce I je 6-chlorpurín nebo 620 brompurin. Výchozí substituované benzylaminy, které nebyly komerčně dostupné (ostatní získány od Sigma Aldrich nebo Fluorochem), byly připraveny z odpovídajících aldehydů v přítomnosti katalyzátoru. Ty, které mají více methyl skupin, mohou být s výhodou připraveny z příslušných methyíbenzaldehydů. Hydroxyderiváty se připravují demetylací odpovídajících methoxyderivátů 48% HBr v N2 atmosféře.
Elementární analýzy (C, H a N) byly měřeny na EA1108CHN analyzátoru (Fissons Instruments). Na zjišťování teploty tání byl použit přístroj BŮCHI Melting Point B-540. Analytická tenkovrstvá chromatografie (TLC) byla prováděna na destičkách silikagelu 60 WF;y (Merck), v mobilní fázi CHCI3:MeOH:konc. NH4OH (8:2:0,2, v/v/v). ES+ hmotová spektra byla naměřena za použití přímého nástřiku na Waters ZMD 2000 hmotovém spektrometru. Hmotnostní interval při měření byl 10- 1500amu. Spektra byla měřena za použití cyklických skenů o délce 3,0 sekundy, při napětí na vstupní štěrbině 25 V a teplotě vypařovacího bloku 150 °C, desolvatační teplotě 80 °C a průtoku desolvatačního plynu 200 1/hodinu, Získaná data byla zpracována pomocí programu MassLynx data systém. NMR spektra byla měřena na přístroji Bruker Avance
AV 300 pří teplotě 300 K a frekvenci 300,3 MHz (’H) respektive 75,48 MHz (nC). Vzorky byly připraveny rozpuštěním daných látek v DMSO-d6. Tetramethylsilan (TMS) byl použit jako interní standard.
Příklad 1
Příprava 6-(2-hydroxy-3-methyIbenzylamino)purinu mmol 6-chIorpurinu byly rozpuštěny v 15 ml butanolu a byly přidány 4 mmol 2-hydroxy-3~ 45 methylbenzylaminu a 5 mmol triethylaminu. Roztok byl zahříván na 90 °C po dobu 4 hodin.
Po ochlazení byl surový produkt odfiltrován a rekrystalován v etanolu. T.t. 276 až 277 °C. TLC: chloroform-metanol-amoniak (90:9:1): žádné nečistoty; bez výchozích látek, HPLC čistota: 98+ %. Výtěžek 92 %.
Tabulka 1
Látky připravené postupem podle příkladu 1
PŘIPRAVENÉ | CHN ANALÝZY | MS ANALÝZA-ZMD | ||
LÁTKY | [%] | [M-H]' .) | [M+H]+b> | |
1 | 6-(2*amitM>3-mMhylben2ylamino)puriii | 060,8; H=5,7; N=32,7 | 253 | 255 |
2 | 6-{2-emini>4-methylbcnzylamino)purin | 061,2; H=5,6; N“32,9 | 253 | 255 |
3 | 6-(2-emino-í-fnethylbenzy)ainiiK>)purin | 061,2; H=*S,6;N“32,9 | 253 | 255 |
4 | 6-(2-amino-3-ethylben^lamino)purin | 062,4; H-6,0;N-31,l | 267 | 269 |
S | 6-(2-«miiK>5-ethylbenzylainino)purin | 062,5; H-6,0;N-31,2 | 267 | 269 |
6 | 6-{2-amino-3-Í3opropylben2ylamtno)ptirin | 063,8; H=6,1;N“29,4 | 281 | 283 |
7 | 6-(2-amino-5-ísopropylben^laniiiio)purín | 063,6; H-6,3; N-29,8 | 281 | 283 |
8 | 6-(2-hydroxy-3-methytbcnzylemino)piinn | C=60,9;H=5,4;N-273 | 254 | 256 |
9 | 6-<2-hydroxy4-methylbenzyl«mino)purin | 060,5; H“53;N»27,2 | 254 | 256 |
to | 6-{2-hydroxy-5-inethylbeiuylainino)purin | 060,8; H-53.N-27.4 | 254 | 256 |
11 | M2-hydroxy-6-methylbenzylsmino)punn | 060,8; H“5,3; N“27,2 | 254 | 256 |
12 | 6-(2-hydroxy-3-ethylbenzyIainino)purin | 062,4; H=5,5; N-25,9 | 268 | 270 |
13 | 6-(2-hydroxy-í-íthylbenzylamino)purin | C“62,3; H-5,5; N-25,8 | 268 | 270 |
14 | 6-(2-hydroxy-3-isopn>pylbeiuylimiin)purín | 063,6; H=6,2;N=24.5 | 282 | 284 |
ÍS | 6-{2-nitro-3-methytbenzylamino)piirin | C=54,7;H-43;N-29,3 | 283 | 285 |
16 | 6^2-mtro-5-methylbenzylanino)purin | C=54,8; H“4,3; N-29,3 | 283 | 285 |
17 | 6-{2-njtro-3-etfaylbenzytunino)purín | 056,3; H-4,7; N-28,2 | 297 | 299 |
18 | 6-<2-thicH3-niethylbenzylaniino)purin | 057,4; H=4,7;N=25,6 | 270 | 272 |
19 | M2-1hio-5-methylbenzylamino)purin | 057,3; H-4,7; N-25,7 | 270 | 272 |
20 | 6T2-thio-3<thyibcnzy!aniino)purin | 058,3; H=53; N-24,6 | 284 | 286 |
21 | 6-(2-amino-3,5-dimethylben2ylamino)purin | 062,5; H=5,9; N=30,9 | 267 | 269 |
22 | 6-(2-amino-3,6-dimethylbenzylamino)purin | O62,3;H=5,8;N-30,7 | 267 | 269 |
23 | 6<2-liydroxy-3,5-<liniethylbenaylamino)purin | C=62,2; H=5,5;N=25,8 | 268 | 270 |
24 | 6-(2-hydroxy-3,4-dimeihylbenzylBniino)purin | 062,3; H=5,S;N=25,9 | 268 | 270 |
25 | 6-{2-hydroxy-3.6-dÍniethylbenzylaniino)purin | 062,2; H-5,6; N=25,8 | 268 | 270 |
26 | 6-(2-hydiOxy-314,5-trimethylbenzylamíno)purin | 063,2; H=S,9; N=24,5 | 282 | 284 |
27 | 6-{2-hydroxy-3,5-díethylbcnzylainino)purin | C=64,0; H-6,6; N=23,2 | 296 | 298 |
-9CZ 300774 B6
Příklad 2
Testování agonistické aktivity na cytokininových receptorech
Escherichia coli kmene ΚΜΙ00Ι nesoucí plasmid pIN-III-AHK4 nebo pSTV28-AHK3 byly pěstovány přes noc při 25 °C vM9 médiu obohaceném 0,1% kasami novým i kyselinami do ODfioo-l. Prekultura byla naředěna 1:600 v 1 ml M9 média obsahujícího 0,1%kasaminových kyselin a k ní byl přidán 1 μΐ zásobního roztoku testované látky (10~7 M - 5 x 10 5 M) nebo rozio pouštědla (DMSO, ethanol, methanol). Kultury byly dále kultivovány pří 25 °C v mikrotitraění destičce, 200 μΐ na jamku, po dobu 17 h v případě CRE1/AHK4 kultury a 28 h v případě AHK3 kultury. Poté byly kultury zcentrifugovány a 50 μΙ alikvoty supematantu byly přeneseny do mikrotitraění destičky obsahující 2 μΐ 50mM 4-methylumbelliferyl gaiaktosidu v každé jamce a následně inkubovány 1 h při 37 °C. Reakce byla zastavena přídavkem 100 μΐ 0,2 M Na2CO3.
Fluorescence vzorků byla změřena spektrofotometrem Fluoroscan Ascent (Labsystems, Finsko) při vlnových délkách 365 nm (excitační) and 460 nm (emisní). Bylo stanoveno OD60q zbylé kultury a aktivita β-galaktosidasy byla vyjádřena jako nmol 4-methyIumbelliferonu x ODmo 1 x h 1.
Hodnoty EC50, tedy koncentrace látky aktivující receptor z 50 %, byla spočtena ze získaných křivek odezvy. Látka účinkující jako cytokíninový antagonista by neměla aktivovat cytokininovou signální dráhu. V tabulce 2 jsou uvedené průměry ze tří opakování, celý test byl proveden nejméně dvakrát Nově připravené 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I vykazovaly výrazně sníženou afinitu k cytokininovým receptorům v porovnání s kontrolním cytokininem Zra/rv-zeatinem.
Tabulka 2
Účinek nových látek na aktivaci cytokininových receptorů Arabidopsis thaliana CRE1/AHK4 and AHK3.
č. | Testované látky | EC50 (gmol.L·1) | |
CRE1/AHK4 | AHK3 | ||
Z/ww-zeatin | 0,9 | V | |
ó-(benzylamino)piirin | 19f7 | 18,2 | |
1 | 6-(2'amino-3-methylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
2 | 6-(2-amino-4-methylbenzylainino)purin | n.i. | n.i |
3 | 6-(2-aniino-5-methylbenzylannno)purin | n.i. | n.i |
4 | 6-(2-amino-3-ethylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
5 | 6-(2-amino-5-ethylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
8 | 6-(2'hydroxy-3-methy!benzylamino)puTÍn | n.i. | >100 |
9 | 6-(2-hydroxy-4-methylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
10 | 6-(2-hydroxy-5-methylbenzylamino)purin | n.i. | >100 |
11 | 6-(2-hydroxy-6-methylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
12 | 6-(2-hydroxy-3-ethylbenzyIamino)purin | n.i. | n.i |
13 | 6-(2-hyclroxy-5-ethylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
t Λ
15 | 6-(2-nítro-3 -methy lbenzy lamino)purin | n.i. | >100 |
16 | 6-(2-nítro-5-methyIbenzylaniino)purin | n.i. | n.i |
17 | 6-(2-nitro-3-ethylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
19 | 6-(2-thio-5-methylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
21 | 6-(2-amino-3,5-dimethylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
23 | 6-(2-hydroxy-3,5-dimethy lbenzy lamino)purin | n.i. | n.í |
24 | 6-(2-hydroxy-3,4-dimethylbenzylamino)purin | n.i. | n.i |
n.i. znamená bez interakce
Příklad 3
Inhibice vazby přirozeného ligandu cytokininového receptoru 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purinem (látka 8)
K vazebnému testu byly použity izolované membrány E. coli obsahující CRE1/AHK4 a AHK3 io receptory (viz příklad 2). Membrány byly izolovány a vazebný test byl proveden postupem publikovaným Románovém etal. (Romanov etal. Analytícal Biochemistry 347:129-134, 2005).
V testu byl posuzován vliv stoupající koncentrace kompetitoru (látka 8) na vazbu radioaktivně značeného přirozeného ligandu frans-zeatinu (3HtZ). Neznačený trans-zeatin (tZ) byl použít jako pozitivní a adenín jako negativní kontrola. Látka 8 snížila vazbu 3HtZ na 50% v koncentraci
3 μΜ (obr. 1), zatímco ani lOOOx vyšší koncentrace adeninu nebyla efektivní.
Příklad 4
Snížení indukce exprese cytokininového reportéru ARR5 vlivem aplikace cytokininového antagonisty 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purinem (látka 8)
Cytokíniny specificky indukují expresi genu ARR5, který patří do rodiny typu A regulátorů odpovědi. Parrs:GUS (D'Agostino et al. Plant Phystol, 124:1706-1717,2000) transgennní seme25 náčky Arabidopsis byly kultivované v MS médiu obsahujícím 2,5 μΜ 6-benzylaminopurin (BA) za přítomnosti, či absence 5 μΜ látky 8; DMSO (0,1 %) bylo testováno jako kontrola rozpouštědla použitého pro rozpouštění aplikovaných látek. Semena byla sterilizována 70% ethanolem a potom přidána do jamek 6-jamkové desky (TPP, Švýcarsko) obsahujících 3 ml MS média. Desky byly uloženy ve 4 °C ve tmě za účelem synchronizace klíčení. Poté byly desky přeneseny do fytotronu (22 °C, 16h světlo/8h tma), kde pak byla po 23 dnech po vyklíčení provedena aplikace testovaných látek přímo do media rostlin. V případě kvalitativního stanovení byly rostliny inkubovány s testovanými látkami 4 h, v případě kvantitativního testu 17 h. Kvalitativní stanovení - barvení GUS bylo provedeno podle Jeffersona et al. (Jefferson et al. EMBO J. 6: 3901-3907, 1987). Rostliny byly nejprve zbaveny zelených barviv 1 h inkubací v 90% acetonu při 4 °C, poté bylo provedeno barvení substrátem X-Glc (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-(3-D-glucuronid, sodná sůl) po dobu 40 min při 37 °C. Reakce byla zastavena přenesením rostlin do 70% ethanolu. Jak je patrné z obrázku 2A, látka 8 vyvolala snížení úrovně exprese cytokininového reportéru ARR5:GUS indukovanou cytokíninem BA v kořeni i nadzemní části testovaných rostlin. Kvantitativní stanovení míry indukce genu ARR5:GUS bylo provedeno podle práce Romanova etal.
(Romanov etal. FEBS Letters 515: 39-A3, 2002). Po extrakci proteinů byla aktivita GUS (βglukuronidasa) stanovena po inkubaci s fluorogenním substrátem MUG (4-methylumbelliferyl glukuronid; 1 h, 37 °C) měřením fluorescence při 365 nm a 460 nm (excitační a emisní vlnové délky), jak je detailně popsáno v práci Spíchal et al. (Spíchal et al. Plant and Cell Physiology 45: 1299-1305, 2004). Kvantitativní stanovení potvrdilo, že pokles indukce exprese ARR5OUS
1 μΜ BA je závislý na aplikaci vzrůstající koncentrace látky 8 (obr. 2B). Tento pokles dokazuje,
- 11 CZ 300774 B6 že došlo k zablokování percepce cytokininu receptorem, byla tedy inhibována událost, která je lokalizována „up-stream“ vzhledem k odpovědi na účinek cytokininu.
Příklad 5
Testování vlivu nových látek na buněčné dělení rostlinných buněk
Stimulační vliv nově připravených derivátů byl testován v kalusovém biotestu za použití cytoío kinin-dependentního kal usu tabáku. Tento cytokinin-dependentní tabákový kalus Nicotiana tabacum L, cv. Wisconsin 38 byl udržován při 25 °C na modifikovaném mediu MurashigeSkoog (MS) obsahujícím na 1 litr: 4 μιηοΐ kys. nikotinové, 2,4 μπιοΙ pyridoxin hydrochloridu, 1,2 μπιοί thiaminu, 26,6 μπιοί glycinu, 1,37 μπιοί glutaminu, 1,8 pmol myoinositolu, 30 g sacharosy, 8 g agaru, 5,37 μηιοί a-naftyloctové kyseliny a 0,5 μπιοί 6-benzylaminopurinu. Subkulti15 vace probíhala každé 3 týdny. Čtrnáct dní před započetím biotestu byl kalus přenesen na médium bez 6-benzylaminopurinu. Stimulační růstová aktivita byla stanovena na základě nárůstu čerstvé hmoty kalusu po 4 týdnech kultivace. Pět replikátů bylo připraveno pro každou testovanou koncentraci a daný test byl opakován minimálně 2-krát. V každém experimentu byla použita jako kontrolní látka kinetin, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokí20 niny byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na ΙΟ-3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu IO-8 až ΚΓ1 M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu.
Ze získaných dat byla opět vypočítána maximální účinná koncentrace testované látky a její relativní účinnost v této koncentraci (Tab. 3). 10 6 M koncentrace kontrolní látky 6-benzylaminopurinu byla postulována jako 100% biologické aktivity.
Látka účinkující jako cytokininový antagonista by neměla mít stimulační vliv na buněčné dělení rostlinných buněk. Výsledky v tabulce 11 naznačují, že nově připravené 6—(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I vykazovaly výrazný pokles až ztrátu cytokininové aktivity v kalusovém biotestu ve srovnání s klasickým cytokininem - ΙΟ“6 M koncentrace kontrolní látky 6-benzylaminopurinu byla postulována jako 100% biologické aktivity (BA).
Tabulka 3
Vliv nových antagonistů cytokininu na růst cytokinin-dependentního tabákového kalusu Nicotiana tabacum L. cv. Wisconsin 38
č. | Testovaná sloučenina | maximální účinná koncentrace (molT1) | aktivita (%) [lOÝnol.l'1 BA = 100%] |
ó-(benzylamino)purin | 10* | 100 | |
1 | 6-{2-amino-3-methylbenzylamino)purin | n.a. | |
2 | 6-(2-amino-4-methylbenzylamino)purin | n.a. | |
5 | 6-(2-amino-5-methylbenzylamino)purin | n.a. | |
4 | 6-(2-amino-3 -ethy lbenzy iamino)purín | n.a. | |
5 | ó-(2-amino-5 -ethy lbenzy lamino)purin | n.a. | |
8 | 6-(2-hydroxy-3-methyIbenzylamino)purin | io* | 2 (±2) |
9 | 6-(2-hydroxy-4-methylbenzyIamino)purin | n.a. | |
10 | 6-(2-hydroxy-5-methylbenzylamino)purin | KT* | 35 (±8) |
11 | 6-(2-hydroxy-6-methylbenzylamino)purin | 10* | 23 (±5) |
12 | 6-(2-hydroxy-3-ethylbenzylamino)purin | n.a. | |
13 | 6-(2-hydroxy-5-ethylbenzylamino)purin | n.a. | |
15 | 6-<2-nitro-3-methylbenzylammo)purin | n.a. | |
16 | 6-(2-nitro-5-methylbenzylamino)purin | n.a. | |
17 | 6-(2-nitro-3-eíhylbenzylamino)purin | n.a. | |
19 | 6-{2-thio-5-methylbenzylamino)purin | KT* | 1.3 (±1) |
21 | 6-(2-amino-3,5-dimethy lbenzylamíno)purin | n.a. | |
23 | 6-(2-hydroxy-3,5-dimethylbenzylannno)purin | n.a. | |
24 | 6-(2-hydroxy-3,4-dimethy lbenzy lammo)purin | n.a. |
n.i. znamená neaktivní
Příklad 6
Testování nových látek v amarantovém biotestu
Pro studium cytokíninové aktivity byl rovněž použit „amarantový“ biotest v následující modifikaci. Semena Amaranthus caudatus var. Atropurpurea byla povrchově sterilizována 10% Nio chlorbenzensulfonamidem (w/v) po dobu 10 min a poté promyta 5-krát deionizovanou vodou.
Semena byla rozmístěna v 15 cm Petriho miskách s filtračním papírem saturovaným destilovanou vodou. Po 72 hodinách kultivace při 25 °C ve tmě byly ze semenáčků odstraněny kořeny. Tyto explantáty obsahující 2 kotyledony a hypokotyl byly umístěny do 5 cm Petriho misek na 2 vrstvy filtračního papíru nasyceného 1 ml inkubačního média obsahujícího 10 pmol Na2HPO4-KH2PO4, pH 6,8, 5 pmol tyrosinu a testovaný cytokinin. Na misku bylo umístěno 20 explantátů. Veškeré manipulace byly prováděny pod zeleným světlem v temné komoře. Po 48 hodinách inkubace při 25 °C ve tmě byl betacyanin extrahován cestou zmražení explantátů v 3,33 μΜ kyselině octové. Koncentrace betacyaninu byla stanovena porovnáním absorbancí při 537 a 620 nm a vypočtena pomocí vzorce ΔΑ = Α537ηπ, - A^o™· Hodnoty byly vyneseny do grafů závislosti ΔΑ na koncent20 raci. Pět replikátů bylo připraveno pro každou testovanou koncentraci a daný test byl opakován minimálně 2-krát. V každém experimentu byl použit jako kontrolní látka 6-benzylaminopurin, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 103 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 10-* až ΚΓ4 M. Finální koncentrace
DMSO v médiu nepřevýšila 0,2% a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu. 104 M koncentrace kontrolní látky 6-benzylaminopurinu byla postulována jako 100 % biologické aktivity.
Látka účinkující jako cytokinínový antagonista by neměla mít stimulační vliv na indukci betacy30 aninu v amarantovém biotestu. Stejně jako v případě kalusového testu vykazovaly nově připravené 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty obecného vzorce I výrazný pokles až ztrátu cytokininové aktivity ve srovnání s klasickým cytokininem 6-benzylaminopurinem (BA).
Příklad 7
Antisenescenční aktivity nových látek při testování v senescenčním biotestu na segmentech listů pšenice
Semena ozimé pšenice Triticum aestivum cv. Hereward byla promyta pod tekoucí vodou po 24 hod, a poté vyseta do vermikulitu nasyceného Knopovým živným roztokem. Nádoby se semeny byl umístěny do klimatizované růstové komory s 16/8 hodinovou světelnou periodou (světelná ío intenzita 50 mmol.m'2.s_1) a teplotou 15 °C. Po 7 dnech měly semenáčky vyvinutý první praporcový list a druhý list začínal prorůstat. Z prvních listů vždy od 5 rostlin byly odebrány vrcholové sekce dlouhé přibližně 35 mm, které byly zkráceny tak, aby jejich váha byla přesně 100 mg,
Bazální konce těchto 5 listových segmentů byly umístěny do jamek mikrotitračních polystyrénových destiček obsahujících 150 ml roztoku testovaného derivátu. Destičky byly umístěny do plašíš tového boxu vystlaného filtračním papírem, který byl nasycen vodou za účelem maximální vzdušné vlhkosti. Po 96 hodinách inkubace ve tmě při 25 °C byly listové sekce vyjmuty a chlorofyl extrahován v 5 ml 80% ethanolu zahřátím při 80 °C po dobu 10 min. Objem vzorku byl poté doplněn na 5 ní 1 přidáním 80% ethanolu. Absorbance extraktů byla měřena při 665 nm. Jako kontroly byly měřeny rovněž chlorofylové extrakty z listů a listových vrcholů inkubované v de20 ionizované vodě. Vypočtené hodnoty jsou průměrem z 5 opakování a celý experiment byl zopakován minimálně 2-krát. V každém experimentu byla použita jako kontrolní látka 6-benzylaminopurin, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 10‘3M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu ΚΓ* až 101 M. Finál25 ní koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2% a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu. ΙΟ-4 M koncentrace kontrolní látky 6-benzylaminopurinu byla postulována jako 100% biologické aktivity.
Látka účinkující jako cytokininový antagonista by neměla mít pozitivní vliv na oddálení senes30 cence v segmentech listů pšenice. Stejně jako v případě kalusového testu vykazovaly nově připravené 6-(alkylbenzylamÍno)purinové deriváty obecného vzorce I výrazný pokles až ztrátu cytokíninové aktivity ve srovnání s klasickým cytokininem 6-benzylaminopurinem (BA).
Příklad 8
Antagonistický efekt 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purinu (látka 8) v cytokininem mediovaných procesech
Výše uvedené klasické biotesty (kalusový, amarantový, senescenční) byly dále použity pro ověření in vitro antagonistického účinku látky 8 na cytokininem mediované procesy. V testech byl použit cytokinin 0,5-1 μΜ BA k vyvolání cytokinin-dependentního efektu. Látka 8 byla aplikována buď samostatně v koncentraci 1 μΜ pro zjištění vlastní cytokininové aktivity, nebo v širší koncentrační škále od 10 nM- 10 μΜ v kombinaci s BA pro ověření antagonistického efektu.
Jak je zřejmé z obr. 3, ve všech použitých biotestech látka 8 významně snižovala biologický účinek aktivního cytokininu 6-benzylaminopurinu (BA) aplikovaného v jeho optimální koncentraci. Síla antagonistického účinku byla závislá na zvyšující se koncentraci látky 8.
.4
Příklad 9
In vivo účinek 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purinu (látka 8) na zvětšení kořenového systému modelové rostliny Arabidopsis
Cytokininy jsou negativními regulátory růstu a vývoje kořenů. Rostliny Arabidopsis divokého typu, nebo transgenní rostliny se sníženou percepcí cytokininů byly pěstovány na MS médiu obsahujícím buď cytokinin 1 a 5 nM BA pro ověření inhibičního efektu cytokininů na zakládání ío postranních kořenů, nebo látku 8 v koncentraci 1 a 10 nM, nebo kombinaci těchto látek v koncentracích uvedených v obr. 4A. Jak je patrné z obr. 4A, cytokinin způsobil inhibici formování postranních kořenů. Aplikace látky 8 působila na tento efekt antagonisticky a vedla k obnovení přirozeného feno typu u rostlin stáří 14 dnů od vyklíčení, V případě, že byla do média aplikována pouze látka 8 v submikromolámích koncentracích, docházelo ke zvětšení kořenového· systému navýšením počtu postranních kořenů oproti kontrole. Z toho vyplývá, že látka 8 působí antagonisticky na endogenní hladiny cytokininů v kořenech modelových rostlin. U receptorových mutantů, které mají zachovaný vždy pouze jeden ze tří cytokininových receptorů byl efekt nejvýraznější u mutanta ahk2ahk3, což na in vivo úrovni potvrzuje, že látka 8 blokuje vazbu cytokininů do receptorů AHK4 (obr. 4B).
Příklad 10
In vivo účinek 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purinu (látka 8) na klíčení semen modelové rostliny Arabidopsis
V průběhu klíčení semen bylo zjištěno, že semena inkubovaná na MS médiu obsahujícím látku 8 vyklíčila rychleji po přemístění ze tmy na světlo, než semena kontrolních rostlin (obr. 5). Po 30 hodinách vyklíčilo více než 60 % semen kultivovaných na médiu obsahujícím 1 nM lát30 ku 8, což představovalo dvojnásobné množství oproti kontrole, při vyšší koncentraci (10 nM) dosahoval počet vyklíčených semen až 80 %.
Stejně jako u předešlého příkladu se jedná o stejný efekt, který byl pozorovaný u receptorových mutantů se sníženou percepcí cytokininů (Riefler et al, Plant Cell 18: 40-45, 2006).
Příklad 11
In vitro cytotoxická aktivita nových derivátů
Jedním z předpokladů využití 6-(alkylbenzylamino)purinových derivátů v zemědělských aplikacích je absence toxického působení na člověka a zvířata. Standardním postupem je hodnocení toxicity látek na savčích, především lidských, buněčných liniích. Toxicita se mimo jiné projevuje snížením metabolické aktivity buňky, což je možné s výhodou hodnotit pomocí standardních testů založených na metabolizaci umělého substrátu na produkt detekovatelný např. spektrometricky. Naměřené hodnoty jsou pak dány jak počtem živých buněk v daném vzorku, tak jejich metabolickým stavem. Testy je možné s výhodou provádět v mikrotitrační destičce. Rozšířenou metodou používanou v programech pro screening léků a testech chemosensitivity je test založený na kvantifikaci metabolizace Calceinu AM. Calcein AM je v živých buňkách enzymaticky hydro50 lyžován na calcein, jehož kumulace se projeví zelenou fluorescencí.
Pro rutinní screening sloučenin byly používány následující lidské buněčné linie: normální diploidní lidské fibroblasty BJ, erythroleukemická linie K562, linie prsního karcinomu MCF-7, linie lidského osteosarkomu HOS a linie odvozená z lidského maligního melanomu G361.
- 15CZ 300774 Bó
Buněčné suspenze byly připraveny a naředěny na základě růstových charakteristik jednotlivých buněčných linií a podle očekávané konečné hustoty buněk (obvykle IO4 buněk na jamku). Do jednotlivých jamek 96-jamkové mikrotitrační destičky bylo pipetováno 80 μΐ buněčné suspenze, lnokuláty byly stabilizovány 24 hodinovou preinkubací při 37 °C, 100 % vlhkosti a v atmosféře obsahující 5,5 % COr Testované látky se obvykle ředily do šesti koncentrací v trojnásobné ředící řadě a k buňkám byly přidány v objemu 20 μΙ. Při rutinním testování byla nejvyšší sledovaná finální koncentrace obvykle 100 μΜ, případné změny závisely na fyzikálně chemických charakteristikách dané látky. Každá koncentrace testované látky byla testována v triplikátu. Inkubace buněk s testovanými deriváty trvala 72 hodin při 37 °C, 100 % vlhkosti a v atmosféře obsahující io 5,5% CO2. Na konci inkubační doby byl k buňkám přidán roztok CalceinuAM (Molecular Probes) v PBS (finální koncentrace 1 pg/ml) a inkubace probíhala další 1 hodinu. Fluorescence (FD) byla změřena pomocí Labsystem FIA readeru Fluorscan Ascent (Microsystems). Efekt látky byl vyjádřen jako IC = (FDjamka s derivátem /FDtarobii jamka) x 100 %. Hodnota IC50, která odpovídá koncentraci látky způsobující 50% redukci esterázové aktivity byla vypočtena ze získaných dávkových křivek. Výsledky ukazuje tabulka 4.
Tabulka 4
Cytotoxicita nových sloučenin pro savčí buňky
Sloučenina | Použitá buněčná linie / IC50 (pmoI/L) | Maximální testovaná koncentrace (pmol/L) | ||||
BJ | K-562 | MCF7 | HOS | G-361 | ||
Kinetin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
isopentenyladenin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
benzyladenin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
/rans-zeatin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
meřa-topolin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
ortAo-topoIin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
Adenin | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
8 | >50 | >50 | >50 | >50 | >50 | 50 |
10 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | 100 |
Ze získaných výsledků vyplývá, že testované (alkylbenzylamino)purinové deriváty jsou v koncentračních rozmezích předpokládaných v zemědělských aplikacích netoxické.
Příklad 12
Sledování in vitro viability lidských diploidních fibroblastů pomocí MTT
MTT test je standardní kolorimetrickou metodou pro měření proliferace a přežívání buněk. Žluté MTT je v metabolicky aktivních buňkách redukováno na fialový formazan a ten je stanoven spektrofotometricky. Diploidní lidské fibroblasty SNF25 (19. pasáž) byly vysety do 96 jamkové mikrotitrační desky v počtu 5000 na jamku, po 6 hodinách bylo médium (DMEM obsahující 5 g/1 glukózy, 2 mM glutaminu, 100 U/ml penicilinu, 100 pg/ml streptomycinu a 10% fetálního telecího séra) odsáto a nahrazeno médiem obsahujícím testovanou látku v koncentračním rozmezí ΟΙ 00 μΜ. V případě nerozpustných látek byla maximální testovaná koncentrace upravena. Každá f
koncentrace byla testována v pentaplikátu. MTT bylo k buňkám přidáno po 72 hodinách (finální koncentrace 0,5 mg/ml) a inkubace probíhala 3 hodiny.
Absorbance vzniklého MTT byla po rozpuštění v DMSO změřena při vlnové délce 570 nm (refe5 renční vlnová délka 650). Cytotoxický účinek byl vyjádřen jako IC - (Aj^ ,^νήΐίη/Α^^ jamka)x 100%. Hodnota ICSo, která odpovídá koncentraci látky způsobující 50% redukci mitochondriální aktivity byla vypočtena ze získaných dávkových křivek. Výsledky ukazuje tabulka 5.
io
Tabulka 5
Cytotoxicita nových sloučenin pro lidské diploidní fibroblasty
Sloučenina | ic50 (μπιοΙ/L) | Maximální testovaná koncentrace (pmol/L) |
kinetin | >100 | 100 |
isopentenyladenin | >100 | 100 |
benzyladenin | >100 | 100 |
trans-zeatin | >100 | 100 |
meto-topolin | >100 | 100 |
or/Ao-topolin | >100 | 100 |
adenin | >100 | 100 |
8 | >50 | 50 |
10 | >100 | 100 |
Z výsledků testování vyplývá, že testované látky nejsou pro lidské diploidní fibroblasty v koncentracích předpokládáných pro zemědělské aplikace toxické.
Příklad 13
Přípravky
Přípravky obvykle obsahují od 0,1 do 99 % (w/w), zejména pak od 0,1 do 95 % (w/w) aktivní složky odpovídající látce nebo směsi látek obecného vzorce I, od 1 do 99,9% (w/w) pevných nebo tekutých pomocných látek, a od 0,1 do 25 % (w/w), zejména od 0,1 do 25 % (w/w) surfaktantu. Zatímco komerční přípravky jsou obvykle formulovány jako koncentráty, koncový uživatel používá přípravek ředěný. Přípravek může zahrnovat i další komponenty jako stabilizátory, např. rostlinné oleje nebo epoxidované rostlinné oleje (epoxidovaný kokosový olej 0;l, řepkový olej, podzemnicový olej), protipěnivé látky, např. silikonový olej, konservační látky, látky regulující viskozitu, pojivá, látky zvyšující přilnavost, hnojivá, případně další aktivní složky. Preferované přípravky mají zejména toto složení (uvedena hmotnostní procenta):
Al. Emulaovatelné koncentráty | a) | b) | c) | d) |
Aktivní složka | 5% | 10% | 25% | 50% |
dodecylbenzensulfonát vápenatý | 6% | 8% | 6% | 8% |
polyoxyethylovaný ricinový olej (polyglykol ether ricinového oleje) | 4% | _ | 4% | 4% |
17CZ 300774 B6 (36 mol ethylen oxid)
oktylfenol polyglykol ether - | 2% | 2 | ||
(7-8 mol ethylen oxid cyklohexanon | 10% | 20% | ||
směs aromatických uhlovodíků | 83% | 82% | 53% | 18% |
C9-C12
Emulze o vyžadované finální koncentraci mohou být získány z takového koncentrátu zředěním
vodou. | ||||
A2. Roztoky | a) | b) | c) | d) |
Aktivní složka | 5% | 10% | 50% | 90% |
l-methoxy-3-(3-methoxypropoxy-propan | - | 20% | 20% | - |
polyethylenglykol MW 400 | 20% | 10% | - | - |
N-methy 1-2-pyrro 1 idon | - | - | 30% | 10% |
směs aromatických uhlovodíků | 75% | 60% | - | - |
C9-C[2
Roztoky jsou vhodné k aplikaci ve formě mikrokapének.
A3. Skučivé nráškv | a) | b) | c) | d) |
Aktivní složka | 5% | 25% | 50% | 80% |
lignosulfonát sodný | 4% | - | 3% | - |
laurylsulfonát sodný | 2% | 3% | - | 4% |
diisobutylnaftalensulfonát sodný | - | 6% | 5% | 6% |
oktylfenol polyglykol ether - | 1 % | 2% | - | |
(7-8 mol ethylen oxid) vysoce disperzní kyselina křemičitá | 1 % | 3% | 5% | 10% |
kaolin | 87% | 61% | 37% |
Aktivní složka je důkladně promísena s pomocnými látkami a směs je důkladně rozemleta ve 10 vhodném mlýnu. Suspenzi libovolné koncentrace je možné získat smísením vzniklého prachu s vodou.
A4. Potahované granule | a) | c) | c) |
Aktivní složka | 0,1 % | 5% | 15% |
vysoce disperzní kyselina křemičitá | 0,9 % | 2% | 2% |
anorganický nosič | 99,0 % | 93% | 83% |
(0,1-1 mm) např. CaCO3 nebo SiO2
Aktivní složka je rozpuštěna v methylenchloridu a nasprejována na nosič. Rozpouštědlo je odpa15 reno ve vakuu.
o
A5. Potahované granule | a) | b) | c) |
Aktivní složka | 0,1 % | 5% | 15% |
polyethylenglykol MW 200 | 1,0% | 2% | 3% |
vysoce disperzní kyselina křemičitá | 0,9 % | 1 % | 2% |
anorganický nosič | 98,0 % | 92% | 80% |
(AE 0,1-1 mm) např. CaCO3 nebo S1O2
Jemně rozemletá aktivní složka je v mixéru stejnoměrně nanesena na nosič zvlhčený polyethylen-
glykolem. Takto jsou získány neprašné granule. | ||||
A6. Extrudované granule | a) | b) | c) | d) |
Aktivní složka | 0,1 % | 3% | 5% | 15% |
lignosulfonát sodný | 1,5% | 2% | 3% | 4% |
karboxymethylcelulosa | 1,4% | 2% | 2% | 2% |
kaolin | 97,0 % | 93% | 90% | 79% |
Aktivní složka je smísena a rozemleta s pomocnými látkami a složka je zvlhčena vodou. Směs je
extrudována a usušena v proudu vzduchu. | |||
A7, Prachy | a) | b) | c) |
Aktivní složka | 0,1 % | 1 % | 5% |
talek | 39,9 % | 49% | 35% |
kaolin | 60,0 % | 50% | 60% |
Prachy k přímému použití jsou získány rozemletím aktivní složky s nosičem ve vhodném mlýnu.
A8. SusDenzní koncentrát | a) | b) | c) | d) |
Aktivní složka | 3% | 10% | 25% | 50% |
ethylen glykol | 5% | 5% | 5% | 5% |
nonylfenol polyglykol ether | 1 % | 2% | - | |
(15 mol ethylen oxid) lignosulfonát sodný | 3% | 3% | 4% | 5% |
karboxymethylcelulosa | 1 % | 1 % | 1 % | 1% |
37 % vodný roztok formaldehydu | 0,2 % | 0,2 % | 0,2 % | 0,2 % |
emulse silikonového oleje | 0,8 % | 0,8 % | 0,8 % | 0,8 % |
voda | 86% | 78% | 64% | 38% |
Jemně rozemletá aktivní složka je smíchána s pomocnými látkami. Vzniklý suspenzní koncentrát 15 umožňuje přípravu suspenze o požadované koncentraci zředěním vodou.
19CZ 300774 B6
Příklad 14
Gel
Názvy složek jsou uváděny v souladu s terminologií registračních úřadů. Obsah složek je uváděn v gramech na 100 g.
Gel | /100 g | |
to Aktivní látka 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purin(20H3MeBAP) | 1,0 g | |
butylhydroxytoluen | (Nipanox BHT) | 0,2 g |
butylparaben | (Nípabutyl) | 0,2 g |
diethylenglykol monoethyl ether | (Transcutol P) | 10,0 g |
bezvodá koloidní silika | (Zeopharm 177) | 5,0 g |
15 propylenglykollaurát | (Lauroglycol FCC) | 83,6 g |
Konzistence gelu může být dále modifikována přidáním bezvodé koloidní siliky.
Účinek aktivní látky může být zvýšen pomocí transdermálního systému Transcutol P/Lauroglycol 20 FCC. Bezvodá koloidní silika pravděpodobně zpomalí penetraci účinné látky, což povede k protrahovanému účinku.
Claims (16)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Substituované 6-(alkylbenzylamÍno)purinové deriváty obecného vzorce I ve kterém35 R1 znamená substituent vybraný ze skupiny zahrnující hydroxyl, amino, nitro, thio a alkyl skupinu,R2 znamená 1 až 4 alkyl skupiny, stejné nebo různé,40 a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů.
- 2. Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty podle nároku 1 vybrané ze skupiny5 zahrnující 6-(2-amino-3-methylbenzylamino)purin, 6-(2-amino-4-methylbenzylamino)purin,6-(2-amino~5-methyIbenzyIamino)purin, 6-(2“amino-3-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-amino_ 5-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-amino-3-ÍsopropylbenzyIamino)purin, 6-{2-amÍno-5-isopropylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-3-methylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-4-methylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-5-methylbenzylamíno)purín, 6-(2-hydroxy-6-methylbenzylio aminojpurin, 6-(2-hydroxy-3-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-4-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-5-ethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy_6-ethylbenzylamino)purin, 6(2-hydroxy-3-isopropylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-5-isopropyIbenzylamino)purin, 6(2-nitro-3-methylbenzylamino)purin, 6-{2-nitro-4-methylbenzy!amino)purin, 6-(2-thio-3methy lbenzy lamino)purin, 6-(2-thio-5-methylbenzylamtno)purin, 6-(2-thio-3-ethylbenzyl15 aminojpurin, 6-(2-hydroxy-3,5-dimethylbenzylamino)purin, 6-{2-hydroxy-3,4-dimethyIbenzylammo)purin, 6-(2-hydroxy-3,6-dimethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-3,4,5-trimethy lbenzy laminojpurin, 6~(2-amino-3,5-dimethylbenzylamino)purin, 6-(2-amino-3,6dimethylbenzylaminoípurin, 6-(2-hydroxy-3,5-diethylbenzylamino)purin, 6-(2-hydroxy-3,6diethy lbenzylamino)purin, a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy ve formě race20 mátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejích adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů.
- 3. Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty podle nároku 2 vybrané ze skupiny25 zahrnující 6-(2-hydroxy~3-methylbenzylamino)purín a 6-(2-hydroxy-5-methy lbenzy lam ino)purin a jejich soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy ve formě racemátů nebo opticky aktivních izomerů, nebo jejich adičních solí s kyselinami, pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů.30
- 4. Substituované 6-ýalkylbenzylamino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů pro morfogenní účinky vedoucí ke zvětšení kořenového systému rostlin.
- 5. Substituované 6-(alkylbenzyIarnino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 335 pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů pro urychlení nalévání semen a zvětšení velikosti semene a plodů rostlin a hub a pro zkrácení doby klíčení semen rostlin.
- 6. Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů ve tkáňových kulturách k regulaci prolife40 race a morfogeneze.
- 7. Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů pro zvýšení výnosu a kvality zemědělských produktů.
- 8. Substituované 6-{alkylbenzylamino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů při produkci užitkových rostlin, zejména obilovin, řep, malvic, peckovic a bobulovin, vikvovitých rostlin, olejnin, lilkovitých rostlin, přadných rostlin, citrusů, zeleniny, nebo rostlin vybraných ze skupiny zahrnující tabák, ořešák, bakla50 žán, cukrová třtina, čajovník, réva vinná, chmel, banány, přírodní kaučukovníkové a léčivé rostliny a okrasné rostliny.
- 9. Substituované 6-(alky lbenzy lam ino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití jako antagonisté cytokininových receptorů při kontrole růstu plevelů.-21 SVVIIH BÓ
- 10. Substituované 6 (alkylbenzylaniino)punnové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití při přípravě přípravků pro klonování rostlinných i savčích zárodečných buněk a embryí.5
- 11. Přípravky pro klonování rostlinných i savčích zárodečných buněk a embryí, vyznačující se tím, že obsahují alespoň jeden substituovaný 6-(alkylbenzylamino)purinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 a pomocné látky.
- 12. Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 ío pro použití při přípravě růstově regulačních přípravků.
- 13. Růstově-regulační přípravky, vyznačující se tím, že obsahují alespoň jeden substituovaný 6-(alkylbenzylamino)purinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 a pomocné látky.
- 14. Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 pro použití při přípravě přípravků pro inhibici cytokininových receptorů.
- 15. Přípravky pro inhibici cytokininových receptorů, v y z n a č u j í c í se t í m, že obsahují
- 20 alespoň jeden substituovaný 6 (alkylbenzylamino)purinový derivát podle kteréhokoliv z nároků1 až 3 a pomocné látky.
Priority Applications (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ20070691A CZ300774B6 (cs) | 2007-10-05 | 2007-10-05 | Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty pro použití jako antagonisté cytokininových receptoru a prípravky obsahující tyto slouceniny |
EP08836001.1A EP2203451B1 (en) | 2007-10-05 | 2008-10-03 | Substituted 6-(alkylbenzylamino)purine derivatives for use as cytokinin receptor antagonists and preparations containing these derivatives |
PCT/CZ2008/000118 WO2009043320A2 (en) | 2007-10-05 | 2008-10-03 | Substituted 6-(alkylbenzylamino)purine derivatives for use as cytokinin receptor antagonists and preparations containing these derivatives |
US12/680,762 US20100240537A1 (en) | 2007-10-05 | 2008-10-03 | Substituted 6-(alkylbenzylamino)purine derivatives for use as cytokinin receptor antagonists and preparations containing these derivatives |
PL08836001T PL2203451T3 (pl) | 2007-10-05 | 2008-10-03 | Podstawione pochodne 6-(alkilobenzyloamino)puryny do zastosowania jako antagoniści receptora cytokininowego i preparaty zawierające te pochodne |
US13/730,293 US20130130906A1 (en) | 2007-10-05 | 2012-12-28 | Substituted 6-(alkylbenzylamino) purine derivatives for use as cytokinin receptor antagonists and preparations containing these derivatives |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CZ20070691A CZ300774B6 (cs) | 2007-10-05 | 2007-10-05 | Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty pro použití jako antagonisté cytokininových receptoru a prípravky obsahující tyto slouceniny |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ2007691A3 CZ2007691A3 (cs) | 2009-04-15 |
CZ300774B6 true CZ300774B6 (cs) | 2009-08-05 |
Family
ID=40404151
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ20070691A CZ300774B6 (cs) | 2007-10-05 | 2007-10-05 | Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty pro použití jako antagonisté cytokininových receptoru a prípravky obsahující tyto slouceniny |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20100240537A1 (cs) |
EP (1) | EP2203451B1 (cs) |
CZ (1) | CZ300774B6 (cs) |
PL (1) | PL2203451T3 (cs) |
WO (1) | WO2009043320A2 (cs) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CZ307722B6 (cs) * | 2015-08-28 | 2019-03-27 | Univerzita PalackĂ©ho v Olomouci | Adeninové deriváty a jejich použití |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PT2448938E (pt) | 2009-06-29 | 2014-07-31 | Incyte Corp | Pirimidinonas como inibidoras de pi3k |
CZ302618B6 (cs) | 2009-09-10 | 2011-08-03 | Univerzita Palackého | Cyklobutan-1,1-dikarboxylátokomplexy platiny s deriváty N6-benzyladeninu, zpusoby jejich prípravy a použití techto komplexu jako léciv v protinádorové terapii |
TW201130842A (en) * | 2009-12-18 | 2011-09-16 | Incyte Corp | Substituted fused aryl and heteroaryl derivatives as PI3K inhibitors |
US8759359B2 (en) * | 2009-12-18 | 2014-06-24 | Incyte Corporation | Substituted heteroaryl fused derivatives as PI3K inhibitors |
US9193721B2 (en) | 2010-04-14 | 2015-11-24 | Incyte Holdings Corporation | Fused derivatives as PI3Kδ inhibitors |
WO2011163195A1 (en) | 2010-06-21 | 2011-12-29 | Incyte Corporation | Fused pyrrole derivatives as pi3k inhibitors |
WO2012087881A1 (en) | 2010-12-20 | 2012-06-28 | Incyte Corporation | N-(1-(substituted-phenyl)ethyl)-9h-purin-6-amines as pi3k inhibitors |
US9108984B2 (en) | 2011-03-14 | 2015-08-18 | Incyte Corporation | Substituted diamino-pyrimidine and diamino-pyridine derivatives as PI3K inhibitors |
WO2012135009A1 (en) | 2011-03-25 | 2012-10-04 | Incyte Corporation | Pyrimidine-4,6-diamine derivatives as pi3k inhibitors |
KR102371532B1 (ko) | 2011-09-02 | 2022-03-07 | 인사이트 홀딩스 코포레이션 | Pi3k 억제제로서 헤테로시클릴아민 |
AR090548A1 (es) | 2012-04-02 | 2014-11-19 | Incyte Corp | Azaheterociclobencilaminas biciclicas como inhibidores de pi3k |
CZ306894B6 (cs) | 2013-02-08 | 2017-08-30 | Univerzita PalackĂ©ho v Olomouci | 2-Substituované-6-biarylmethylamino-9-cyklopentyl-9H-purinové deriváty, jejich použití jako léčiva a farmaceutické přípravky tyto sloučeniny obsahující |
WO2015191677A1 (en) | 2014-06-11 | 2015-12-17 | Incyte Corporation | Bicyclic heteroarylaminoalkyl phenyl derivatives as pi3k inhibitors |
SI3262046T1 (sl) | 2015-02-27 | 2021-01-29 | Incyte Corporation | Soli zaviralca PI3K in postopki za njihovo pripravo |
WO2016183063A1 (en) | 2015-05-11 | 2016-11-17 | Incyte Corporation | Crystalline forms of a pi3k inhibitor |
US9732097B2 (en) | 2015-05-11 | 2017-08-15 | Incyte Corporation | Process for the synthesis of a phosphoinositide 3-kinase inhibitor |
US10647727B2 (en) | 2015-06-25 | 2020-05-12 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted pyrazolo/imidazolo bicyclic compounds as PDE2 inhibitors |
MX2020001261A (es) | 2017-08-02 | 2020-08-17 | Univ Northwestern | Compuestos de pirimidina fusionada sustituida y usos de los mismos. |
PE20211208A1 (es) | 2018-06-01 | 2021-07-05 | Incyte Corp | Regimen de dosificacion para el tratamiento de trastornos relacionados con pi3k |
WO2022012702A1 (en) | 2020-07-13 | 2022-01-20 | Univerzita Palackeho V Olomouci | Nitrogen heterocyclic cytokinin derivatives, compositions containing these derivatives and use thereof |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2636118B2 (ja) * | 1991-09-10 | 1997-07-30 | 三省製薬株式会社 | 育毛剤 |
FR2741881B1 (fr) * | 1995-12-01 | 1999-07-30 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux derives de purine possedant notamment des prorietes anti-proliferatives et leurs applications biologiques |
CZ294535B6 (cs) * | 2001-08-02 | 2005-01-12 | Ústav Experimentální Botaniky Avčr | Heterocyklické sloučeniny na bázi N6-substituovaného adeninu, způsoby jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující |
US20070161582A1 (en) * | 2003-08-08 | 2007-07-12 | Dusan Mijikovic | Pharmaceutical compositions and methods for metabolic modulation |
-
2007
- 2007-10-05 CZ CZ20070691A patent/CZ300774B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-10-03 WO PCT/CZ2008/000118 patent/WO2009043320A2/en active Application Filing
- 2008-10-03 US US12/680,762 patent/US20100240537A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-03 PL PL08836001T patent/PL2203451T3/pl unknown
- 2008-10-03 EP EP08836001.1A patent/EP2203451B1/en not_active Not-in-force
-
2012
- 2012-12-28 US US13/730,293 patent/US20130130906A1/en not_active Abandoned
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CZ307722B6 (cs) * | 2015-08-28 | 2019-03-27 | Univerzita PalackĂ©ho v Olomouci | Adeninové deriváty a jejich použití |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
PL2203451T3 (pl) | 2015-05-29 |
WO2009043320A3 (en) | 2009-05-28 |
US20100240537A1 (en) | 2010-09-23 |
CZ2007691A3 (cs) | 2009-04-15 |
EP2203451B1 (en) | 2014-07-30 |
EP2203451A2 (en) | 2010-07-07 |
US20130130906A1 (en) | 2013-05-23 |
WO2009043320A2 (en) | 2009-04-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ300774B6 (cs) | Substituované 6-(alkylbenzylamino)purinové deriváty pro použití jako antagonisté cytokininových receptoru a prípravky obsahující tyto slouceniny | |
CZ2007453A3 (cs) | Substituované 6-anilinopurinové deriváty jako inhibitory cytokinin oxidasy a prípravky obsahující tyto slouceniny | |
US9220269B2 (en) | Use of 6-substituted 9-halogenalkyl purines for regulation of growth and development of whole plants, plant cells and plant organs; novel 6-substituted 9-halogenalkyl purines | |
EP3233860B1 (en) | Substituted 6-anilino-9-heterocyclylpurine derivatives for inhibition of plant stress | |
Iwamura | Cytokinin antagonists: synthesis and biological activity | |
Rothwell et al. | Phytokinin activity in some new 6-substituted purines | |
KR101486090B1 (ko) | 사이토카이닌 신호전달을 저해할 수 있는 물질 | |
Bíbová et al. | New generation of Arabidopsis thaliana cytokinin oxidase/dehydrogenase inhibitors affect shoot/root growth and seed yield | |
EP4178959B1 (en) | Nitrogen heterocyclic cytokinin derivatives, compositions containing these derivatives and use thereof | |
EP4153592B1 (en) | Mesylate salts of heterocyclic cytokinins, compositions containing these derivatives and use thereof | |
CZ310363B6 (cs) | Krystalická forma 1-fenyl-3-(4H-1,2,4-triazol-4-yl)močoviny, přípravky ji obsahující, a její použití | |
EP3191482B1 (en) | 1,2,3-thiadiazol-5yl-urea derivatives, use thereof for regulating plant senescence and preparations containing these derivatives | |
CZ310218B6 (cs) | Inhibitory cytokinin oxidázy na bázi sloučenin 1-[2(hydroxyalkyl)fenyl]-3-ylmočoviny, přípravky je obsahující a jejich použití | |
CA2991519A1 (en) | 1,2,3-thiadiazol-5yl-urea derivatives, use thereof for regulating plant senescence and preparations containing these derivatives | |
CZ2015230A3 (cs) | Použití N-furfuryl-N´-1,2,3-thiadiazol-5-yl močoviny pro inhibici senescence, stresu a oxidativního poškození |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20221005 |