CZ298089B6 - Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem - Google Patents

Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem Download PDF

Info

Publication number
CZ298089B6
CZ298089B6 CZ20031362A CZ20031362A CZ298089B6 CZ 298089 B6 CZ298089 B6 CZ 298089B6 CZ 20031362 A CZ20031362 A CZ 20031362A CZ 20031362 A CZ20031362 A CZ 20031362A CZ 298089 B6 CZ298089 B6 CZ 298089B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
mmol
compound
vla
solution
Prior art date
Application number
CZ20031362A
Other languages
English (en)
Inventor
Zheng@Zhongli
L. Ensinger@Carol
P. Adams@Steven
Original Assignee
Biogen Idec Ma Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biogen Idec Ma Inc. filed Critical Biogen Idec Ma Inc.
Publication of CZ298089B6 publication Critical patent/CZ298089B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/28—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C275/40—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/28—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C275/42—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C311/03—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C311/06—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to acyclic carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/50—Compounds containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C07C311/52—Y being a hetero atom
    • C07C311/54—Y being a hetero atom either X or Y, but not both, being nitrogen atoms, e.g. N-sulfonylurea
    • C07C311/57—Y being a hetero atom either X or Y, but not both, being nitrogen atoms, e.g. N-sulfonylurea having sulfur atoms of the sulfonylurea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/60—Y being a hetero atom either X or Y, but not both, being nitrogen atoms, e.g. N-sulfonylurea having sulfur atoms of the sulfonylurea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having nitrogen atoms of the sulfonylurea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/39—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton at least one of the nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C07C323/40—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C07C323/41—Y being a hydrogen or an acyclic carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C07D207/09—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/263—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms
    • C07D207/27—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals directly attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/08—Indoles; Hydrogenated indoles with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/34—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/70—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/68—Halogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/88—Nitrogen atoms, e.g. allantoin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/04—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having less than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/12—1,5-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,5-benzodiazepines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C07D243/16—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals
    • C07D243/18—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals substituted in position 2 by nitrogen, oxygen or sulfur atoms
    • C07D243/24—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
    • C07D253/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 not condensed with other rings
    • C07D253/06—1,2,4-Triazines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/10—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles
    • C07D271/107—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles with two aryl or substituted aryl radicals attached in positions 2 and 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/10—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles
    • C07D271/113—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D273/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
    • C07D277/46—Acylated amino or imino radicals by carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/12—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms
    • C07D295/135—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/145—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/15—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/68—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/58—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/60—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D335/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D335/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D335/10—Dibenzothiopyrans; Hydrogenated dibenzothiopyrans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/021—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)n-C(=0)-, n being 5 or 6; for n > 6, classification in C07K5/06 - C07K5/10, according to the moiety having normal peptide bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)

Abstract

IIb/IIIa inhibitory obecného vzorce II, ve kterémX zahrnuje IIb/IIIa determinant specificnosti, který nemá významnou VLA-4 aktivitu, pricemz X je vybráno ze skupiny definované v patentových nárocích, a Y je peptoid obecného vzorce PB1 nebo PB2, pricemz symboly obsazené v techto vzorcích jsou definovány v patentových nárocích. Zpusob prípravy techto inhibitoru zahrnuje prípravu VLA-4 inhibitoru obsahujícího VLA-4 determinant specificnosti a integrinový skelet; a nahrazení jmenovaného VLA-4 determinant specificnosti IIb/IIIa determinantem specificnosti. Tyto inhibitory a farmaceutické prostredky s jejich obsahem jsou vhodné pro inhibici a prevenci bunecné adheze a onemocnení zprostredkovaných bunecnou adhezí.

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nových sloučenin, které jsou vhodné pro inhibici. změnu nebo prevenci buněčné adheze a chorobných změn zprostředkovaných buněčnou adhezí. Vynález se také týká způsobu identifikace nových sloučenin, které mají požadovanou aktivitu a také farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny a způsobů jejich použití pro inhibici a prevenci buněčné adheze a chorobných změn zprostředkovaných buněčnou adhezí. Sloučeniny a farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být použity jako terapeutická a profylaktická činidla. Jsou zvláště vhodné pro léčbu mnoha zánětlivých a autoimunnícli onemocnění.
Dosavadní stav techniky
Buněčná adheze je proces, pomocí kterého se buňky shlukují, migrují směrem ke specifickému cíli nebo sc lokalizují na mimobuněčné matrici. Buněčná adheze jako taková tvoří jeden ze základních mechanismů mnoha biologických jevů. Buněčná adheze je například zodpovědná za adhezí hematopo i etických buněk k buňkám endotelu a následující migraci těchto hcmopoictických buněk z krevních ccv a na místo zranění. Buněčná adheze jako taková hraje roli při onemocněních jako jsou záněty a imunitní reakce savců.
Výzkumem molekulárního základu buněčné adheze se zjistilo, že různé makromolekuly na povrchu buněk - společně známé jako molekuly nebo receptory buněčné adheze - zprostředkují interakce buňka buňka a bunka-matrice. Například, proteiny ze skupiny nazývané „integriny“ jsou klíčovými prostředníky při adhezní interakci mezi hematopo i ctíc kým i buňkami a jejich mikrookolím (Μ. E. Hemler, „VLA Proteins in the Integrin Family: Structures, Functions, and Their Role on LeukocytesAnn, Rev., Immunol., 6, p. 365 (1990)). Integriny jsou nekovalentní lictcrodimcrní komplexy skládající sc zc dvou podjednotek nazývaných a a β. Existuje nejméně 16 různých podjednotek (ocl—cc9, οι-L. cc-M. α-D, oc-X, a-IIB, ci-V a a-E a nejméně 9 různých β podjednotek (β!-β9). Na základě typu složek podjednotky a a β je každá molekula integrinu přiřazena do podskupiny.
Integrin α4-β1. známý také jako velmi pozdní antigen aktivace—I („VLA^J) nebo CD49d/CD29, jc rcceptorcm na povrchu buňky Icukocytu, který se podílí na mnoha různých adhezních interakcích, jak buňka-buňka. tak buňka-matrice (Μ. E. Hemler. Arn. Rev. Immunol.. 6, str. 365 (1990)). Slouží jako rcccptor pro cytokincni indukovatelný povrchový protein cndolelových buněk, vaskulární buněčnou adhezní molekulu I („VCAM-I), stejně jako protein mimobuněčné matrice fibronektin („FN“) (Ruegg a kol., J. Cell. Biol. 177. str. 179 (1991); Wayner a kol.. J. Cell. Biol., 105, str. 1873 (1987); Kramer a kol., J. Biol. Chcm., 264, str. 4684 (1989); Gchiscn a kol. Science, 24, str. 1228 (1988)). Bylo prokázáno, že anti-VLA4 monoklonální protilátky („mAb“) i nh i bují adhezní interakce závislé na VLA4 jak in vitro. tak in vivo (Ferguson a kol. Proč. Nati. Acad. Sci., 88, str. 8072 (1991): Ferguson a kol.. J. Immunol., 150. str. 1172 (1993)). Výsledky in vivo experimentů naznačují, že tato inhibice VLA-4 závislé buněčné adheze může předejít nebo inhibovat některé zánětlivě a au to imunní choroby (R. L. Lobb a kol., „The Pathophysiologic Role of a 4 Integrins In Vivo. .1. Clin, Invcst., 94, str. 1722-28 (1994)).
Jiný integrin, allbpiHa integrin („llb/llla“). je velmi častým integrinem vyskytujícím se na povrchu membrán běžných krevních destiček. (Jennings, a kol., J, Biol. Chem.. 257. str. 10458 (1982)). Funkce krevních destiček Je závislá na adhezních interakcích glykoprotcinú, jako je IlbSHIa integrin. J. Hawiger, Aterosclerosis Rewiews, 21, str. 165 -86 (1990). Inhibice těchto interakcí jc tedy jednou z metod regulace vzniku nebo agregace sraženin krevních destiček. Jc známo mnoho sloučenin, které inhibují vaznost cxllbpilla integrinů k jejich přírodním ligandům a mohou tedy regulovat poruchy spojené s hyperthrombotickými stavy.
Sloučeniny, o kterých jc známo, že inhibují Hb/llla jsou popsány v následujících patentech a patentových přihláškách: GB 2 271 567 A: GB 2 292 558 A: EP 0 645 376 Λ1;
EP0 668 278 A1; EP 0 608 759 Λ2: EP 0 635 492 Al; WO 94/22 820; US 5 340 798 a WO 94/09 029; US 5 256 812. EP 0 381 033 a US 5 084 466; WO 94/18 981; WO 94/01 396 a US 5 272 162; WO 94/21 602; WO 94/22 444; WO 94/29 273; WO95/18 111; WO 95/18 619:
WO 95/25 091; WO 94/18 162. US 5 220 050 a WO 93/16 038; US 4 879313 io a EP 0 352 249 Bl; WO 93/16 697, US 5 227 490, EP 0 478 363 A2, US 5 229616 aWO 5 94/12 181; US 5 258 398 a WO 93/11 759; WO 93/08 181 a EP 0 537 980 Al;
WO 93/09 133; EP 0 530 505 Bl; EP 0 566 919 Al; EP 0 540 334 Bl; EP 0 560 730Λ2;
WO 93/10091, EP 0 542 363 A2 a WO 93/14 077; EP 0 505 868 Bl; EP 0614 664Al;
US 5 358 956; US 5 334 596 a WO 94/26 745: WO 94/12 478; WO 94/14 776; WO 93/00 095:
WO 93/18 058. WO 93/07 867, US 5 239 113, US 5 344 957 a EP 0 542 708 Al; WO 94/22 825;
US 5 250 679 a WO 93/08 174; US 5 084 466; EP 0 668 278 Λ1; US 5 264 420; WO 94/08 962;
EP 0 529 858; US 5 389 631; WO 94/08 577: EP 0 632 016; EP 0 503 548; EP0512 831 a WO 92/19 595; WO 93/22 303; EP 0 525 629: EP 0 604 800; EP 0 587 134; EP 0 623 615;
EP 0 655 439; US 5 446 056 a WO 95/14 682; US 5 399 585; WO 93/12 074, EP 0 512 829; 20 EP 0 372 486 a US 5 039 805; EP 0 632 020 a US 5 494 922; US 5 403 836; WO 94/22 834;
WO 94/21 599; EP 0 478 328; WO 94/17 034; WO 96/20 192, WO 96/19 223, WO 96/19221,
WO 96/19 222, EP 727 425, EP 478 362, EP 478 363, US 5 272 158. US 5 227 490,
US 5 294 616, US 5 334 596, EP 645 376. EP 711 770, US 5 314 902, WO 94/00 424,
US 5 523 302, EP 718 287, DE 4 446 301, WO 96/22 288. WO 96/29 309, EP 719 775.
EP 635 492. WO 96/16 947, US 5 602 155, WO 96/38 426. EP 712 844. US 5 292 756,
WO 96/37 482, WO 96/38 416. WO 96/41 803, WO 97/11 940. Všechny tyto odkazy jsou zde specificky uvedeny jako celek.
Za účelem identifikace minimální aminokyselinové sekvence s aktivitou potřebnou pro vazbu 30 VLA-4. Komoriya a kol. (,.The Minimal -Essential Sequence for a Major Cell Type-Spccific
Adhesion Site (CS1) Within the Alternatively Spliced Type III Connecting Segment Doma i n of Fibronectin ls Lcucinc-Aspartic Acid-Valine, T Biol., Chem., 266 (23), str. 15075-79 (1991)) syntetizovali sadu překrývajících sc pcptidú založených na aminokyselinové sekvenci CS-1 úseku (VLA 4 vazebná doména) různých druhů fibronektinu. (..The Minimal Essential Sequence 35 for a Major Cell Type. Spcciflc Adhesion Site (C’S 1) Within the Alternatively Spliced Type III
Connecting Segment Domain of Fibronectin Is Leucíne-Aspartic Acid-Valine, .1. Biol. Chem., 266 (23), str. 15075-79 (1991)). Identifikovali osmiaminokyselinový peptid. Glu Ile Leu Asp Val-Pro-Ser-Thr (sekvence id. čísla I), stejně jako dva menší překrývající se peptidy, Glu-Ile-Leu-Asp Val (sekvence id. čísla 2). a Leu-Asp-Val-Pro-Ser (sekvence id. čísla 3).
které mají inhibiční aktivitu proti FN závisle buněčné adhezi. Tyto výsledky naznačují, že tripeptid Leu-Asp-Val je minimální sekvence pro aktivitu k buněčné adhezi. Později bylo prokázáno, že Leu-Asp-Val váže pouze lymfocyty, které vykazují aktivovanou formu VLA-4, atak se objevila otázka využitelnosti těchto peptidů in vivo (E. A. Wayncr a kol.. „ActivationDependenl Recognition by Hematopoietic Celíš of the LDV Sequence in the V Region of Fibronectin“, J. Cell, Biol.. 116(2), str. 489-497 (1992)). Určitě větší peptidy obsahující LDV postupně vykázaly aktivitu in vivo (T, A. Fcrguson a kol., ..Two lntegrin Binding Pcptides
Abrogate T-cell-Mediated Immune Responses ln Vivo“, Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 88, str. 8072 76 (1991); a S. M. Wahl a kol.. „Synthetic Fibronectin Peptides Suppress Artritis in Rats by Interrupting Lcukocytc Adhesion and Rccruitmcnt“, .1. Clin. Invcst., 94. str. 655-62 50 (1994)].
Bylo popsáno, že cyklický pentapeptid Arg-Cys -Asp TPro-Cys (kde TPro znamená
4-thioprolin), může inhibovat jak VLA^4. tak VLA-5 adhezi k FN (D. M. Noulin a kol. „A Novel Cyclic Pentapeptide Inhibits ot4|31 a α5βΙ Integrin-mediated Cell Adhesion“, J. Biol.
Chem., 268(27), str. 20352-59 (1993); a publikace WO 92/00995). Tento peptid byl založen na tripeptidové sekvenci Arg-Oly-Asp z FN. která byla známa jako obvyklý motiv v místě rozpoznání pro několik mimobuněčných matricových proteinu.
Příklady jiných VLA-4 inhibitoru jsou uvedeny například v patentu US 6 306 840. který je zde uveden jako odkaz. USSN 376,372 popisuje lineární peptidylové sloučeniny obsahující β-am i noky seliny, které mají inhibiční aktivitu k buněčné adhezi. Mezinárodní patentové přihlášky WO 94/15 958 a WO 92/00 995. které jsou zde uveden} jako odkazy, popisují cyklický peptid a peptidomimetické sloučeniny, které mají inhibiční aktivitu k buněčné adhezi. Mezinárodní patentové přihlášky WO 93/08 823 a WO 92/08 464 (uvedeny jako odkaz) popisují sloučeniny io inhibující buněčnou adhezi obsahující guanidylovou skupinu, inočovinovou skupinu a thiomočovinovou skupinu. Patent US 5 260 277 popisuje guanidínylové sloučeniny regulující buněčnou adhezi (patent uvedený jako odkaz).
Přes tento pokrok jsou potřebné malé, specifické inhibitory buněčné adheze. zejména silné 15 inhibitory' VTA-4 nebo Ilb/IHa buněčné adheze. V ideálním případě by tyto inhibitory měly být malé, aby mohly být podávány orálně. Takové sloučeniny by poskytovaly užitečná činidla pro léčbu, změnu, prevenci nebo potlačení různých chorob způsobených buněčnou adhezi a vázáním Vl.A -4 nebo Ilb/IHa.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález řeší tento problém poskytnutím nových sloučenin, které inhibují buněčnou adhezi a specificky vazbu ligandů k Ilb/IHa. Tyto sloučeniny jsou vhodné pro inhibici. prevenci 25 a potlačení buněčné adheze zprostředkované Ilb/Hla a onemocnění spojených s touto adhezi. jako jsou záněty a imunitní reakce. Sloučeniny podle vynálezu mohou být pro inhibici, změnu, prevenci nebo potlačení buněčné adheze použity samotné nebo v kombinaci s jinými terapeutickými nebo profylaktickými činidly.
Předkládaný vynález tedy poskytuje nové sloučeniny, prostředky a způsoby, které mohou být použity při studiu, diagnostice, léčbě nebo prevenci onemocnění a stavů, které souvisí s buněčnou adhezi, kc kterým patří včetně artritida, astma, alergie, syndrom dechové tísně dospělých, kardiovaskulární onemocnění, trombóza nebo škodlivé shlukování krevních destiček, odmítnutí transplantátu, neoplastické onemocnění, psoriáza. mnohočetná skleróza, zánět centrální nervové 35 soustavy, Crohnova choroba, ulceróz.ní kolitida, glomelulámí nefritida a příbuzná zánětI ivá onemocnění ledvin, diabetes, oční zánět (jako je uveitida), aterosklcróza. zánět 1 ivá a autoimunitní onemocnění. Vynález také poskytuje farmaceutické prostředky obsahující tyto inhibitory buněčné adheze zprostředkované Hb/HIa a způsoby použití sloučenin a prostředků podle vynálezu pro inhibici buněčné adheze, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
V souladu s jedním provedením podle vynálezu jsou tyto nové sloučeniny, prostředky a způsoby s výhodou použitelné pro léčbu zánětlivých a imunitních onemocnění. Předkládaný vynález také poskytuje způsoby přípravy sloučenin podle vynálezu a meziproduktů vhodných pro tyto způsoby,
Předkládaný vynález se tedy týká inhibitorů buněčné adheze (Hb/llla inhibitorů) obecného vzorce II
X-Y (li ), ve kterém X zahrnuje Ilb/Hla determinant specifičnosti, který nemá významnou VLA-4 aktivitu, přičemž X je vybráno ze skupiny, kterou tvoří:
NH
N
CAa /
_ 4 .
C'Z 298089 B6
a Y je peptoíd obecného vzorce PB1 nebo PB2
R'5 0 (CR1R2)mW R15
/: A . 'A5 N PA3(CR1R2
0 R16 0 R16
( PB1) 1 ( PB2) y
kde
A1 je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina NR1. atom kvslíku. atom síry a skupina (CR’rV
A je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina SCNR11, skupina COR a skupina (CR'R2)nR7;
n je 0 až 5:
m jc 1 až 4;
r jc 0, 1;
- s.
Cl 298089 B6
W je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina CCLH, skupina SOUL skupina PCLEL. tetrazolová skupina, a atom vodíku;
P je vybráno ze skupiny; kterou tvoří skupina CO. skupina SO2;
R1 a R2 jsou nezávisle na sobě atom vodíku; alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina; cykloalkvlová skupina; cykloalkenylová skupina: arylová skupina: arylalkx lová skupina; helerocyklická skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupilo nou. cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkvnylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinoti, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou:
is R' je vybráno ze skupiny; kterou tvoří atom vodíku: arylová skupina; substituovaná arylová skupina; ary laiky lová skupina; alkylová skupina; alkenylová skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná heterocyklickou skupinou, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou, alkoxyskupinou nebo atomem halogenu;
2o Rb a R10 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methylová skupina;
R11 je vybráno ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina: cykloalkylová skupina; cykloalkenylová skupina: arylová skupina; arylalkylová skupina: heterocyklická skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupinou, 25 cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkvnylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinou, thioalkoxyskupinou, karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou.
Předkládaný vynález úzce souvisí s nalezením inhibitorů buněčné adheze zprostředkované VLA--4 (VLA-4 inhibitorů) zahrnujících sloučeninu obecného vzorce I
A-B ( I ) kde A jc determinant specifičnosti, který nemá významnou llb/Illa aktivitu a B je integrinový skelet. (Těsněji tylo sloučeniny vzorce 1 mají VLA-4 inhibiční aktivitu a integrinový skelet je odvozen od sloučeniny; která má llb/Illa aktivitu. Zvýše uvedeného důvodu jsou některá provedení předkládaného vynálezu blíže vysvětlena na příkladu těchto VLA-4 inhibitorů, je však nutno mít na paměti, že tyto VI A ) inhibitory netvoří součást předkládaného vynálezu.
Výhodné jsou VLA-4 inhibitory; kde B jc vybráno z integrinových skeletů sloučenin uvedených v tabulce 2 nebo, výhodněji ze skeletů obsažených ve sloučeninách v tabulce 1. Nej výhodnější mi VLA—4 inhibitory jsou sloučeniny uvedené v tabulce 3, stejně jako výhodné determinanty specifičnosti jsou odvozeny od sloučenin uvedených v tabulkách 1. 2 a 3.
Dále se předkládaný vynález týká způsobu přípravy llb/Illa inhibitorů buněčné adheze, obecně pomocí odstranění VLA-4 determinantu specifičnosti z VLA 4 inhibitoru a náhrady jmenovaného determinantu specifičnosti llb/Illa determinantem specifičnosti za vzniku nových, dosud nepopsaných, llb/Illa inhibitorů.
Způsoby přípravy llb/Hla inhibitorů podle vynálezu jsou opět velmi blízké způsobům přípravy VLA—1 inhibitorů, které však netvoří součást předkládaného vynálezu a slouží pouze pro ilustraci. Tyto způsoby přípravy VLA-4 inhibitorů buněčné adheze zahrnují kroky přípravy první sloučeniny; která má llb/Illa inhibiční aktivitu. První sloučenina obsahuje llb/Illa determinant 55 specifičnosti obsahující bazickou dusíkatou funkční skupinu, kterou může být například
-6CZ 298089 Β6 fenylamidinová skupina, a intcgrinový skelet. Odstraní se fenylamidinová skupina nebo, pokud není přítomna, například, když dusíkatou funkční skupinou je piperidin nebo benzylamin, vytvoří se ..fantom fenylamidinová skupina vznikem fantom vazeb v para poloze a odstraní se nežádoucí vazby, což je podrobněji diskutováno níže a odstraní sc .Jántom skupina. Eenylamidinová skupina se potom nahradí VEA-4 determinantem specifičnosti, čímž vznikne nová sloučenina, která má VLA-4 determinant specifičnosti a integrinový skelet a má VE A 4 aktivitu.
V určitých provedeních může být výhodné vložit další skupinu na místo nebo do sousedství spojení mezi integrinovyin skeletem a determinantem specifičnosti, čímž sc získají požadované charakteristiky sloučeniny, lakové vhodné charakteristiky jsou odborníkovi v této oblasti zřejmé a mohou to být například takové charakteristiky jako je flexibilita nebo strukturní modifikace navržené pro změnu aktivity sloučeniny. Mohou být použity jakékoli vhodné funkční skupiny, které jsou odborníkům v této oblasti známé. Mezi výhodné skupiny patří karbonylová skupina, karboxamidová skupina, etherová skupina, atom kyslíku, atom dusíku, sulfidová skupina, sulfuramidová skupina a methylenová skupina, vynález se však neomezuje pouze na tvto příklady.
V dalších provedeních může být způsob popsaný výše použit pro přípravu farmaceutických prostředků pro léčbu stavů spojených s buněčnou adhezí. Postupuje se podle způsobů popsaných výše a mohou se přidat vhodné farmaceuticky přijatelné nosiče, přísady, aditiva, stabilizátory a tak dále. Vynález také zahrnuje „smíšené prostředky, tj. prostředky obsahující sloučeniny podle vynálezu společně s jinými aktivními činidly. Takové prostředky jsou podrobněji popsány níže.
Stavů související s buněčnou adhezí u savců lze použít podáváním terapeuticky účinného množství prostředku podle vynálezu. Tyto způsoby léčby jsou nejvhodnější pro člověka, ačkoli jc možné léčit i jiné savce. Z důvodu relativně malé velikosti sloučenin podle vynálezu jsou prostředky zvláště vhodné pro orální podávání ve formě pevné látky, kapaliny nebo suspenze.
Dalšími rysy a výhody podle vynálezu budou uvedeny v popisu níže a budou zřejmé z popisu nebo z praktických příkladů. Cíle a ostatní výhody podle vynálezu budou zřejmé a budou dosaženy způsoby a prostředky zdůrazněnými v popisu a v nárocích.
Podrobnv popis vy nálezu
A. Definice
V popisu jsou použity následující zkratky:
Označení Činidlo nebo fragment
Ac acetylová skupina
Bn benzylová skupina
Boc terc-bu toxykarbony !ová skupina
Bu butvlová skupina
Cbz karbobenzyloxyskupina
Cy cyklohcxylová skupina
CyM cyklohexylmcthylová skupina
DIPEA diizopropylethy lamin
EDC 1 -(3-diethylaminopropyl)- 3- ethylkarbodiimid
HOBT hydrát 1 -hydroxy benzotriazolu
l-amyl izoamylová skupina
l-Pn izopenty lová skupina
1-Pr izopropy lová skupina
Me methy lová skupina
2-MPUBA 4-(N=-(2-mcthylfeny l)urea)f’enylmethylaminoskupina
2-MPUPA 4—(N— (2-methylfcnyl)urea)fenylacctylová skupina
NMP
NMM
Ph
PUPA
Su
IBTU
ΤΕΛ
TFA
ΤΗΛΜ
N-methylpyrrolidinon
N-methylmorfolin fenvlová skupina
4-(N= (fenyhirca)fenylacetylsukcimidylová skupina suke i n i m idy lová sk u p i n a
2-( 1 H-benzotriazol-l-yl)-I.E3.3-tetramethyluroniumtctrafluorborát triethy lamin kyselina trifluoroctová tris(hydroxy)mcthylammomcthan
A. Definice
Termín ..alkylová skupina, používaný podle vynálezu, samotný nebo v kombinaci, znamená přímý nebo rozvětven} alkvlový zbytek obsahující I až 10, s výhodou I až 6 a výhodněji 1 až 4 atomy uhlíku. Mezi příklady takových zbytků patří methylová skupina, ethylová skupina, n-propylová skupina, izopropylová skupina, n-butylová skupina, izobutylová skupina, sek-butylová skupina, terč butylová skupina, penty lová skřípina, izoamylová skupina, hexylová skupina, decylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „alkenylová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená přímý nebo rozvětvený alkenylový zbytek obsahující 2 až 10. s výhodou 2 až 6 a výhodněji 2 až 4 atomy uhlíku. Mezi příklady takových zbytků patři ethenylová skupina, E a Z-propenylová skupina, izopropcnylová skupina. E- a Z-butenylová skupina. E a Z-izobutenylová skupina, E- a Z pentenylová skupina, decenylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „alkinylová (alkynylová) skupina“, samotný nebo v kombinaci, znamená přímý nebo rozvětvený alkynylový zbytek obsahující 2 až 10, s výhodou 2 až 6 a výhodněji 2 až 4 atomy uhlíku. Mezi příklady takových zbytku patří ethynylová skupina (acetylenylová skupina), propvnylová skupina, propargylová skupina, butynylová skupina, hexynylová skupina, decynylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
érmín „cykloalkvlová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená cyklický alkvlový zbytek obsahující 3 až 12. s výhodou 3 až 8 a výhodněji 3 až 6 atomů uhlíku a může být popřípadě spojen s arylovou skupinou. Mezi příklady lakových zbytků patří cyklopropylová skupina, cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina a podobně.
Termín „cykloalkenylová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená cyklický uhlíkatý zbytek obsahující 4 až 8. s výhodou 5 až 6, atomů uhlíku a jednu nebo více dvojných vazeb. Mezi příklady takových cykloalkcnylových zbytků patří cyklopentenyiová skupina, cyklohexenylová skupina, cyklopentadienylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „arylová skupina“ znamená cyklickou uhlíkatou aromatickou skupinu vybranou ze skupiny, kterou tvoří fenylová skupina, naftylová skupina, indenylová skupina, indanylová skupina, azulenylová skupina, fluorenylová skupina, a antracenylová skupina; nebo heterocyklická aromatická skupina vybraná ze skupiny, kterou tvoří furylová skupina, thienylová skupina, pyridylová skupina, pyrrolylová skupina, oxazolylová skupina, thiazolylova skupina, imidazolylová skupina, pyrazolylová skupina, 2-pyrazolinylová skupina, pyrazolidinylová skupina, izoxazolylová skupina, izothiazolylová skupina, 1,2,3-oxadiazolylová skupina, 1,2,3-triazolylová skupina, 1,3.4-thiadtazolylová skupina, pyridazinylová skupina, pyrimidinylová skupina, pyrazinylová skupina, 1.3,5-triazínylová skupina. 1,3,5-trithíanv lová skupina, indol izinylová skupina, indolylová skupina, izoindolylová skupina. 3H-indolylová skupina, indol inv lová skupina. benzo[b]furanylová skupina, 2,3-díhydrobenzo i urany lová skupina, beuzo[bjthieny lová skupina, IH -indazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, benzthiazolylová skupina, purinylová skupina, 4 H-ch i nol izinylová skupina, chinolinylová skupina, izochinolin
-8CZ 29SV89 B6 ylová skupina, cinnolinylová skupina, ftalazinylová skupina, chinazolinylová skupina, chinoxalinvlová skupina, 1,8—naftyridinylová skupina, ptcridinylová skupina, karbazolylová skupina, akridinylová skupina, fenazinylová skupina, fenothiazinylová skupina, fenoxazinylová skupina, pyrazolo[ l.5-c]lriazinylová skupina a podobně.
„Ary lová skupina”, „acykloal kýlová skupina a „acykloalkenylová skupina, jak byly definovány výše, mohou nezávisle obsahovat až tři substituenty, které jsou nezávisle vybrány ze skupiny obsahující atom halogenu, hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, nitroskupinu. trifluormethylevou skupinu, trifluormethoxyskupinu, alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, alkinylovou skulo pinii, kyanoskupinu, karboxylovou skupinu, karboalkoxy skupí nu. skupinou Ar' substituovanou alkylovou skupinu, skupinou Ar' substituovanou alkenylovou skupinu nebo alkinylovou skupinu. 1.2-dioxymethylcnovou skupinu. 1.2--dioxyethylenovou skupinu, alkoxyskupinu, alkenoxyskupinu nebo alkinoxyskupinu. skupinou Ar' substituovanou alkenoxyskupinu nebo alkinoxyskupinu, alkylaminoskupinu. alkenylaminoskupinu nebo alkinylaminoskupinu, skupinou Ar' substi15 tuovanou alkylaminoskupinu, skupinou Ar' substituovanou alkenylaminoskupinu nebo alkinylaminoskupinu, skupinou Ar' substituovanou karbonyloxyskupinu, alkylkarbonyloxyskupinu, alifatickou nebo aromatickou acylovou skupinu, skupinou Ar' substituovanou acylovou skupinu, skupinou Ar' substituovanou alkylkarbonyloxyskupinu. skupinou Ar' substituovanou karbonylaminoskupinu. skupinou Ar' substituovanou aminoskupinou. skupinou Ar' substituovanou oxy20 skupinu, skupinou Ar' substituovanou karbonylovou skupinu, alkylkarbonylaminoskupinu, skupinou Ar' substituovanou alkylkarbonylaminoskupinu, alkoxykarbonylaminoskupinu, skupinou Ar' substituovanou alkoxykarbonylaminoskupinu, skupinou Ar' substituovanou oxykarbonylaminoskupinu, alkylsulfbnylaminoskiipinu, mono- nebo bis- (Ar-sulfonyl)aminoskupinu, skupinou Ar' substituovanou alkyIsulfonylaminoskupinu. morfolinokarbonylaminoskupinu, thiomorfolino25 karbonylaminoskupinu, N-alkylguanidinoskupinu, N-Ar'-guanidinoskupinu, N N —(Ar\alkyl)guanidinoskupinu, N,N-(Ar',Ar')guanidinoskupinu. N.N-dialkylguanidinoskupinu, N.N,N-trialkylguanidinoskupinu, N-alkyimočovinu, N.N-dialkylmočovinu, N Aťmočovinu, N,N(Ar',alkyl)močovinu, N,N-(Ar')2močoviiui. arylalkyloxykarbonylovou skupinou substituovanou alkylovou skupinu, arylalkylaminokarbonylovou skupinu, thioaryloxyskupinu a podobně: kde 30 „Ar' je analogické arylové skupině, ale obsahuje až tři substituenty vybrané zc skupiny, kterou tvoří atom halogenu, hydroxylová skupina, aminoskupina, nitroskupina, trifluormcthylová skupina, trifluormcthoxyskupina, alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, 1,2 dioxymcthylenová skupina. 1,2-dioxyethylenová skupina, alkoxyskupina. alkenoxyskupina, alkinoxyskupina. alkylaminoskupina, alkenylaminoskupina nebo alkinylaininoskupina, alkyl35 karbonyloxyskupina, alifatická nebo aromatická acylová skupina, alkylkarbonylaminoskupina, alkoxykarbonylaminoskupina, alkylsulfonylaminoskupina, N alkyl nebo N.N -dialkylmočovina.
Termín „arylalkylová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená arylovou skupinou substituovaný alkylovv zbytek, kde termín „alkylová skupina“ a „arylová skupina“ jsou definovány 4o výše. Mezi příklady vhodných arylalkylových zbytků patří feny lmethylová skupina, fenethylová skupina, fenylhexylová skupina, difenylmethylová skupina, pyridylmethylová skupina, tetrazolylmethylová skupina, fůrylmethylová skupina, imidazolylmethylová skupina, indoly Imethylová skupina, thienyipropylová skupina a podobné, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „alkoxylová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená alkyletherový zbytek, kde termín „alkylová skupina je definován výše. Mezi příklady vhodných alkylelhcrových zbytků patří methoxvskupina, ethoxyskupina. n-propoxyskupina, izopropoxyskupina, n -butoxy skupina, izobutoxyskupina, sek-butoxyskupina. terc-butoxyskupina a podobně, vynález se však 50 neomezujc pouze na tyto příklady.
Termín „alkenoxyskupina“. samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek obecného vzorce alkenyl—O—. kde termín „alkenyl“ je definován výše, za předpokladu, žc zbytkem není enolether.
-9CZ Z9WÍV B6
Mezi příklady vhodných alkenoxyzbytků patří allyloxyskupina, E-a Z- 3-methvl-2-propenoxyskupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „alkinyloxyskupina, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce alkinyl-O-. kde termín „alkinyl je definován výše, pod podmínkou, žc zbytkem není -inolcther. Mezi příklady vhodných alkinoxyzbytků patří propargyloxy skupí na, 2-butynvloxy skupina a podobně, vynalez se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „thioalkoxyskupina znamená thioetherový zbytek vzorce alkyl-S-, kde termín „alkyl je definován výše.
Termín „alkylaminosktipina”, samotný nebo v kombinaci s jinými substituenty. znamená mononebo dialkylovou skupinou substituovaný aminozbytek (tj. zbytek vzorce alkyl-NH- nebo (alkyly N-. kde termín „alkylová skupina je definován výše. Mezi příklady vhodných alkylaminozbytků patří methy lam inoskupi na, ethyl ani inoskupi na, propylaminoskupina, izopropylaminoskupina, t-butylaminoskupina. N.N-dicthylaminoskupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „aIkenylaminoskupina, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce alkenyl-NH- nebo (alkcnyljjN- kde termín „alkenylová skupina je definován výše, pod podmínkou, že zbytkem není enamin. Mezi příklady takových alkenylaminozbytků patří allylaminoskupina.
Termín „alkinylaminoskupina, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek obecného vzorce alkínyl-NH— nebo (alkinylfiN- kde termín „alkinylová skupina je definován výše, pod podmínkou. Že zbytkem není amin. Mezi příklady takových alky lam inozbytků patří propargylová skupina, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „aryloxyskupina”, .samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce ary l-Ο-, kde arvl je definován výše. Mezi příklady ary loxy skupin patří fenoxy skupina, naftoxy skupina, py ridyloxyskupina a podobně, vynález se však neomezuje potíže na ty to příklady.
Termín „arylaminoskupina. samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek obecného vzorce ary 1NH . kde arylová skupina je definovaná výše. Příklady vhodných ary laminoskupin jsou fenylaminoskupina (ani lidoskupina). nafty lam inoskupina. 2 . 3- a 4-pyridylaminoskupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín ..biarylová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce ary I—ary I—, kde termín „ary lová skupina je definován výše.
Termín „thioary lová skupina“, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce ary I- S- kde termín „arylová skupina je definován výše. Mezi příklady thioary lových zbytků patří thiofenylový zbytek.
Termín „arylová skupina spojená s cykloalkylovou skupinou, samotný nebo v kombinaci, znamená cykloalkylovou skupinu, která sdílí dva sousední atomy s arylovou skupinou, kde termíny „cykloalkylová skupina“ a „arylová skupina“ jsou definovány výše. Příkladem arylové skupiny spojené s cykloalkylovou skupinou je benzoskupina spojená s cyklobutylovou skupinou.
Termín „alifatická acylová skupina, samotný nebo ve spojení, znamená zbytek vzorce alky 1—CO--, alkenyl-CO a alkinyl—CO odvozený od alkankarboxylové, alkenkarboxylové nebo alkinkarboxylové kyseliny, kde termíny „alkylová skupina, „alkenylová skupina a „alkinylová skupina“ jsou definovány výše. Mezi příklady vhodných alifatických acvlových zbytků patří acetylová skupina, propionylová skupina, butyrylová skupina, valerylová skupina, 4-methylvalerylová skupina, akryloylová skupina, krotylová skupina, propiolylová skupina.
- 10CZ 29SU89 B6 metliylpropiolylová skupina a podobně, předkládaný vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „aromatická acylová skupina nebo „aroylová skupina, samotné nebo v kombinaci.
znamenají zbytek vzorce aryl-CO· . kde termín ..arylová skupina jc definován výše. Příklady vhodných aromatických acylových zbytků jsou bcnzoylová skupina, 4-halogenbenzoylová skupina, 4 karboxybenzoylová skupina, naftoylová skupina, pyridylkarbonylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „heterocykloylová skupina, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek obecného vzorce heterocyklus-CO, kde termín „heterocyklus“ je definován výše. Příklady vhodných hcterocykloylových zbytků jsou tetrahydrofuranylkarbonylová skupina, pipcridinylkarbonylová skupina, tetrahydrothiofenkarbonylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termíny „morfolinokarbonylová skupina“ a „thiomorfolinokarbonylová skupina“, samotné nebo v kombinaci s ostatními termíny, znamenají N-karbonylovanou morfolinoskupinu a N-karbonylovanou thiomorfolinoskupinu v tomto pořadí.
Termín „alkylkarbonylaminoskupina“, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce alkyl-CONH, kde termín „alkylová skupina“ je definován výše.
Termín „alkoxykarbonylaminoskupina“, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce alkyl-OCONH , kde termín „alkylová skupina“ je definován výše.
Termín „alkylsulfonylaniinoskupina. samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce alkyl-SOiNH- kde termín „alkylová skupina je definován výše.
Termín „aiylsultbnylaminoskupina, samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce 30 aryl-SOiNH-, kde termín „arylová skupina je definován výše.
Termín „N-alkylmočovina“. samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce alkyl—Nil—CO NH-, kde termín „alkylová skupina“ je definován výše.
3? Termín „N-arylmočovina. samotný nebo v kombinaci, znamená zbytek vzorce aryl Nll-CO-NH- , kde termín „arylová skupina je definován výše.
Termín „atom halogenu znamená atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu.
Termíny „hcterocyklus a „heterocyklický kruh“, samotný nebo ve spojení, znamená nearomatický tří až desetičlenný kruh obsahující nejméně jeden atom dusíku, atom kyslíku nebo atom síry uvnitř kruhu. Heterocyklus může být popřípadě spojen sarylovou skupinou, Hcterocyklus může být také popřípadě substituovaný jedním až třemi substituenty. které jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, amino45 skupina, nitroskupina. trifluormethylová skupina, trifluormethoxyskupina, alkylová skupina, arylalkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, arylová skupina, kyanoskupina, karboxylová skupina, karboalkoxyskupina, Ar' skupinou substituovaná alkylová skupina. Ar' skupinou substituovaná alkenylová skupina nebo alkinylová skupina, l.2-dioxymelhy lenová skupina, 1.2-dioxyethylenová skupina, alkoxvskupina, alkenoxyskupina nebo alkinoxyskupina,
5o Ar' skupinou substituovaná alkoxyskupina. Ar' skupinou substituovaná alkenoxyskupina nebo alkinoxyskupina, alkylaminoskupina. alkenylaminoskupina nebo alkinylaminoskupina, Ar' skupinou substituovaná alkylaminoskupina, Ar' skupinou substituovaná alkenylaminoskupina nebo alkinylaminoskupina, Ar' skupinou substituovaná karbonyloxyskupina, aIkylkarbonyloxyskupina, alifatická nebo aromatická acylová skupina. Ar' skupinou substituovaná acylová skupina. Ar'
CZ ^Vříll»9 B6 skupinou substituovaná alkylkarbonyloxyskupina, Ar' skupinou substituovaná karbonylaminoskupina, Ar' skupinou substituovaná aminoskupina. Ar' skupinou substituovaná oxylová skupina. Ar' skupinou substituovaná karbonylová skupina, alkvlkarbonylaminoskupina. Ar' skupinou substituovaná alkylkarbonylaminoskupina. alkoxy-karbonylaminoskupina. Ar' skupinou substi5 tuovaná alkoxykarbonylaminoskupina, Ar'-oxvkarbonylaminoskupina. alky Isulfonylaminoskupina. mono- nebo bis-(Ar'-sulfonyl)aminoskupina. Ar' skupinou substituované alkylsulfonylaminoskupina, morfolinokarboiivlaminoskupina. thiomorfol inokarbony lam inoskupina, N-alkylguanidinoskupina. N -Ar-guanidinoskupina. N-N-(Ar\alkyI)guanidinoskupina, Ν.Ν,Νtrialkylguanidinoskupina, N-alkylmočovina, Ν,Ν-dialkyl močovin a, N-Ar'-močovina, N.N10 (Ar'.alkyl)močovina. N,N-f'Ar')2močovina. arylalkoxykarbonylovou skupinou substituovaná alkylová skupina, karboxvalkylová skupina, oxoskupina, arylsulfony lová skupina a arylalkylam inokarbony lová skup i na.
Termín „odstupující skupina obecně znamená skupinu, kterou lze snadno nahradit nukleofilcin. 15 jako je aminový nuklcofil, alkoholický nuklcofil nebo thioiový nukleofil. Tyto odstupující skupiny jsou pro odborníky v této oblasti známé a patří mezi ně karboxylátová skupina, Nhydroxysukcinimid, N-hydroxybenzotriazol, atom halogenu (halogenidy). trifláty, tosyláty, mesyláty, alkoxyskupina, thioalkoxvskupina a podobně.
Termín „hydrofobní skupina znamená skupinu, která jc odolná proti slučování s vodou nebo absorpci vody. Mezí příklady takových vhodných hydrofobních skupin patří methylová skupina, ethylová skupina, propylová skupina, butylová skupina, pentylová skupina, hexylová skupina, fenylová skupina, benzylová skupina, naftylová skupina, bl-benzylimidazolylová skupina, methylthioethylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „kyselá funkční skupina znamená skupinu, která obsahuje kyselý vodíkový atom. Mezi příklady takových skupin patří karboxylová kyselina, tetrazolová skupina, imidazolová skupina, hydroxylová skupina, merkaptoskupina, hydroxylaminokarbonylová skupina, sulfonová kyselina, sulfinová kyselina, fosforečná kyselina a fosfonová kyselina.
Termíny „aktivovaný derivát vhodně chráněné aminokyseliny a „aktivovaný substituovaný derivát fenyloctové kyseliny znamenají derivát karboxylovc kyseliny, kde je hydroxylová skupina nahrazena vhodnou odstupující skupinou. Mezi příklady vhodných derivátů aktivovaných kyselin patří odpovídající acylhalogenidy (například fluorid kyseliny, chlorid kyseliny a 35 bromid kyseliny), odpovídající aktivované estery (například nitrofenylester. ester l-hydroxybenzotriazolu. HOBT. nebo ester hydroxysukcinimidu, HOSu) a jiné běžné deriváty, které se v této oblasti běžně používají.
Termín „postranní řetčzcc(e) aminokyseliny znamená vedlejší řetězce připojený k a-uhlíku 40 aminokyseliny. Příklady postranních řetězců aminokyselin zahrnují methylovou skupinu, izopropylovou skupinu, benzylovou skupinu a karboxymetbylovou skupinu pro alanin, valin, fenyIalanin a kyselinu asparagovou, v tomto pořadí, vynález sc však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termíny „chráněná nebo chránící skupina znamenají vhodnou chemickou skupinu, která může být připojena k funkční skupině molekuly, potom, v pozdějším stupni, odstraněna za získání neporušené funkční skupiny a molekuly. Příklady vhodných chráničích skupin pro různé funkční skupiny jsou popsány v T. W. Greene a P. G. M. Wuts. Protéct i ve Groups in Organic Synthesis, druhé vydání. John Wiley and Sons (1991); L. Fieser a M. Fiescr, Ficserand Fieser's Reagents 50 for Organic Synthesis. John Wiley and Sons (1994); 1.. Paquette, cd. Encyklopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley a Sons (1995).
Sloučeniny podle vynálezu mohou obsahovat jeden nebo více asymetrických uhlíkových atomů a mohou se tedy vyskytovat jako racemáty a raccmické směsi, jednotlivé enantiomery. diastcrco
- 12CZ 298UH9 B6 měrní směsi a jednotlivé diaslereomery. Všechny tyto izomcrni formy těchto sloučenin jsou předmětem podle předkládaného vynálezu. Každý stcreogenní atom uhlíku muže mít 1< nebo S konfiguraci. Ačkoli mohou být specifické sloučeniny uvedené jako příklady v této přihlášce popsány v určité stcreochemické konfiguraci, sloučeniny, které mají buď opačnou slereochemii na jakémkoli chirálním centru, nebo jejich směsi jsou také součástí předkládaného vynálezu. Ačkoli mohou být aminokyseliny a postranní řetězce aminokyselin popsány v určité konfiguraci, vynález zahrnuje jak přírodní, tak umělé formy těchto kyselin.
Vzhledem k výše uvedeným definicím budou jiné chemické termíny použité v přihlášce odborníkům v teto oblasti zřejmé. Termín} mohou být použity samostatně nebo v kombinacích. Výhodné a výhodnější délky řetězců sc týkají všech těchto kombinací.
B. Popis
Sloučeniny podle vynálezu vycházejí ze zjištění, že existující sloučeniny inhibující integrin Ilb/IIIa mohou být převedeny na sloučeniny inhibující VLA^l a sloučeniny inhibující Ilb/llla mohou být připraveny kombinací zvláštního skeletu integrinu VLA—4 s llb/IIIa determinantem specifičností. Struktura známých inhibitorů llb/llla může být popsána tak, žc obsahuje „determinant specifičnosti a „integrinový skelet. „Determinant specifičnosti je taková část sloučeniny, která propůjčuje jmenované sloučenině požadovanou selektivitu vzhledem k vazebnému partnerovi. „Integrinový skelet je zbývající část jmenované sloučeniny, l edy například typický determinant specifičnosti llb/llla může obsahovat bazickou dusíkatou funkční skupinu a integrinový skelet může označovat část s kyselou funkční skupinou.
Z výše uvedeného je opět zřejmá úzká souvislost předkládaného vynález s problematikou VLA^l inhibitorů a způsobů jejich přípravy za použití llb/llla inhibitorů, a proto jc předkládaný vynález blíže vysvětlen také na příkladu VLA-4 inhibitorů, jc však nutno mít na paměti, že tyto VLA-4 inhibitory' a způsoby jejich přípravy a stejně tak farmaceutické prostředky sjejich obsahem a způsoby jejich přípravy netvoří součást předkládaného vynálezu a jsou uvedeny pouze pro ilustraci.
VLA-4 inhibitory například zahrnují sloučeniny vzorce I
A-B ( 1 ).
kde A je determinant specifičnosti a B jc integrinový skelet. Konkrétněji má sloučenina vzorce 1 VLA-4 inhibiční aktivitu a A obsahuje determinant specifičnosti, který sloučenině nepropůjčuje významnou llb/llla aktivitu, a B je odvozeno od inhibitoru llb/llla. Termín „významná aktivita, který se používá podle vynálezu, znamená, žc má hodnoty ICýo nižší než 50 μΜ.
VLA -4 inhibitory obsahující VLA J determinant specifičnosti a skelet llb/llla
Sloučenina vzorce I VLA 4 inhibitorem, kde A je VLA-4 determinant specifičnosti, který nepropůjčuje významnou Ilb/IIIa aktivitu a B je integrinový skelet odvozený od molekuly, která má Ilb/IIIa aktivitu. Výhodněji jc B integrinový skelet odvozený od jakéhokoli inhibitoru llb/llla popsaného v tabulce 2. Je však třeba poznamenat, žc mohou být vlastně jakékoli sloučeniny, které mají Ilb/IIIa aktivitu převedeny na VLA-4 inhibitor pomocí odstraněním llb/llla determinantu specifičnosti a jeho nahrazení VLAl determinantem specifičnosti. Způsoby převedení jsou podrobně popsány níže.
Překvapivě, pokud jc integrinový skelet inhibitoru llb/llla připojen k VLA 4 determinantu specifičnosti, vzniká sloučenina s VLA 4 inhibiční aktivitou. Dále vznikající VLA-4 inhibitory jako třída nevykazují významnou llb/llla inhibiční aktivitu vztahující se k Ilb/IIIa inhibitorům, od kterých je skelet odvozen. Takové VL A l inhibitory obsahují integrinový skelet odvozený od sloučeniny, která má Ilb/IIIa inhibiční aktivitu a jakýkoli VLAl determinant specifičnosti.
- 13 Vynález také zahrnuje způsob přípravy sloučenin podle vynálezu, které mají inhibiční aktivitu vůči buněčné adhezi, zprostředkované llb/llla. Dále zahrnuje způsob přípravy farmaceutických prostředku obsahujících tyto sloučeniny , které lze použít při způsobech léčby.
Přihlašovatelé poskytují způsob identifikace sloučenin, které mají Hb/IIla inhibiční aktivitu a způsob identifikace sloučenin, které mají VLA-4 inhibiční aktivitu. Dále přihlašovatel popisuje způsoby identifikace „skeletu“ na jakékoli sloučenině, která má Hb/llla aktivitu a způsob identifikace determinantu specifičnosti na jakékoli sloučenině, která má VLA 4 inhibiční aktivitu. Dále popisují způsoby kombinace „skeletu“ s V1.A 4 determinantem specifičnosti za vzniku nového VLA 4 inhibitoru.
Způsoby převedení sloučenin, které mají Hb/llla inhibiční aktivitu na sloučeniny, které mají VLA 4 inhibiční aktivitu
Předkládaný vynález obecně poskytuje způsob převedení sloučeniny, která má llb/llla inhibiční aktivitu na sloučeniny, které mají VLA-4 inhibiční aktivitu a neponechávají si významnou llb/llla aktivitu. Způsoby obecně zahrnují identifikaci integrinového skeletu v llb/llla inhibitoru a identifikaci VI A 4 determinantu specifičnosti. Determinant specifičnosti je ta část sloučeniny, která zajišťuje vazebnou aktivitu na molekule. Jakmile se tyto struktury identifikují, může sc kombinovat llb/llla integrinový skelet s determinantem specifičnosti ze sloučeniny, která má VLA 4 inhibiční aktivitu za získání VLA-4 inhibitoru.
Nejprve sc tedy opatří sloučenina, která má llb/llla inhibiční aktivitu. Sloučeniny, které mají llb/llla inhibiční aktivitu jsou odborníkům v této oblasti známe a jsou snadno dostupné, viz. například tabulka 2 a odkazy uvedené v dosavadním stavu techniky. Pro popisované účely lze využít jakoukoli z těchto známých sloučenin. Alternativně je možné určit pomocí testu, který je odborníkům v této oblasti známý, zda má příslušná sloučenina Ilb/UIa aktivitu. Pokud je test pozitivní, může být skelet vhodný podle předkládaného vynálezu, festy na llb/llla inhibiční aktivitu jsou v této oblasti známé. Například tedy může být llb/IHa aktivita může zjištěna pomocí testování schopnosti sloučenin inhibovat vazbu Hb/lHa rcccptoru například k známému llb/IHa ligandu, jako je ílbrtnogcn nebo fibronektin, nebo, alternativně, ke známému antagonistovi. (WO 93/00 095, uvedeno zde jako odkaz.) Dále, výše uvedená vazba k ligandům může být testována odborníky v teto oblasti pomocí testu agregace krevních destiček.
Mnoho z existujících gp Hb/HIa inhibitorů obsahuje determinant specifičnosti, který obsahuje fenylamidinovou skupinu, která pro účely podle vynálezu může sloužit jako orientační bod pro převedení jmenovaného llb/llla inhibitoru k VLA-4 inhibitoru. V inhibitorech, které nemají fenylamidinovou skupinu se přítomná bazická funkční skupina převede na „fantom“ fenylamidinovou skupinu, což jc popsáno dále. Podle popisů uvedených v předkládaném vynálezu je možné převést vlastně jakoukoli sloučeninu, která má Hb/llla aktivitu na VLA-4 inhibitor nahrazením Hb/IIla determinantu specifičnosti.
Následující popis umožní odborníkům v této oblasti připravit VLA 4 inhibitory, přičemž se jako výchozí látka použije sloučenina, která má llb/IHa inhibiční aktivitu. Na základě popisu uvedeného níže je tedy možné vzít chemickou strukturu jakékoli llb/IHa sloučeniny a předpovědět strukturu sloučeniny, která má VLA-4 inhibiční aktivitu. Přihlašovatel úspěšně použil tento postup u mnoha sloučenin a zjistil, že sloučeniny identifikované tímto způsobem mají skutečně VLA 4 inhibiční aktivitu.
Postup I:
V určitých provedeních odborník identifikuje chemickou strukturu sloučeniny, která má llb/IHa aktivitu, jako je například následující struktura:
- 14LJ(j
Jak je popsáno výše, pro převedení této llb/llla struktury na strukturu, která má VLA 4 inhibiční aktivitu je třeba nahradil llb/llla determinant specifičnosti VLA-4 determinantem specifičnosti.
Známé llb/llla inhibitory často mají determinant specifičnosti obsahující fenylamidinovou skupinu nebo jinou bazickou funkční skupinu. Například tedy v inhibitoru VI A 4 uvedeném výše (US 5 239 113, uvedeno jako odkaz), determinant specifičnosti obsahuje fenylamidinovou skupinu. Pro převedení této sloučeniny na VLA-4 inhibující sloučeninu, sc fvnylamidinová skupina „odstraní“ a připojí se VLA-4 determinant specifičnosti.
V prvním kroku této konverze může být například fenyl o vý kruh feny lam id i nové skupiny výše uvedené sloučeniny převeden na vnitřní fenylový kruh difenylmočoviny. V druhem kroku se amidinová funkční skupina odstraní a připojí se zbytek močoviny. V tomto případě je vazba spojení mezi determinantem specifičnosti a integrinovým skeletem amidovou vazbou vodic 5 vnitřního feny levého kruhu močoviny. Kroky v tomto postupu nejsou omezeny na feny love kruhy nesoucí ainidinovoti skupinu. Mohou sc použít také například pro piperazinové a piperidinové kruhy nesoucí amidinovou funkční skupinu.
Sloučenina připravená pomocí tohoto postupu je novou sloučeninou, která má V1A 4 inhibiční aktivitu. Obecně se skládá z intcgrinovcho skeletu llb/IIIa inhibitoru a VLA 4 determinantu specifičnosti, tj. močoviny. Tato sloučenina nemá významnou llb/llla inhibiční aktivitu.
Postup 11
Ne všechny llb/llla inhibitory obsahují fenylamidinovou skupinu. Pro převedení llb/llla sloučeniny bez lenylamidinové skupiny na VLA 4 inhibitor muže být použita bazická funkční skupina. Například v llb/llla inhibitoru níže (WO 92/19595, uvedeno jako odkaz), muže odborník použít bazickou funkční skupinu, tj. piperidinový atom dusíku, determinantu specifičnosti pro přípravu, teoreticky, „fantom“ fenylamídinu.
Me
H
- 15LZ. ZVSUXV b6
Toto se provede pomocí nakreslení „fantom vazeb mezi polohou 3 piperidinu a alfa atomem uhlíku u laktamového atomu dusíku. „Fantom” vazby jsou ve struktuře níže nakreslené přerušovanou čarou. Orientace skupin na „fantom knihuje s výhodou para.
Druhý krok při tvoření „fantom fenylamidínu je odstranění nadbytečných vazeb a atomů za vzniku struktury, která má („fantom“ parasubstituovaný fénylamidin, jak jc nakresleno níže.
Me
Za třetí, protože „fantom determinantu specifičnosti je obsažen ve fenylamidinové skupině, struktura sloučeniny, která má VLA J aktivitu může být nakreslena podle kroků postupu I. ίο V tomto příkladu vazba spojení mezi determinantem specifičnosti a integrinovým skeletem je vazba spojující vnitřní fenylový kruh močoviny a laktamový atom dusíku.
Me nA^C0;H H
Postup III:
V jiném provedení může původní [Ib/llla sloučenina obsahovat determinant specifičnosti v guanidinovc skupině. Jako v postupu II může být jako referenční bod pro převedení llb/llla inhibitoru na VLA-4 inhibitor použita bazická funkční skupina.
NH
Ve struktuře uvedené níže (WO 93/081 174, uvedeno jako odkaz) je „fantom fenylamidinová 2o skupina vytvořena z vnitřního guanidinového dusíku a uhlíku alfa k amidovému karbonylu. Tato konstrukce je vybrána tak, že skupiny na „fantom kruhu jsou ve výhodné para poloze. „Fantom“ vazby jsou vc struktuře níže nakresleny přerušovanou čarou.
Jak bylo podrobně popsáno výše, amid i nová funkční skupina se odstraní a nahradí zbytkem močovinové skupiny. Vazbou spojení jc v tomto případě amidová vazba. V některých provedeních muže být vhodné přidat funkční skupinu na nebo těsně vedle vazby spojení. V tomto případě 5 se tedy volitelná methylenová skupina vloží inezi vnitřní fenylový kruh močoviny a amidový karbony 1. Sloučenina, která má strukturu uvedenou níže, má VI A 4 inhibiční aktivitu, přičemž nemá významnou llb/IIIa aktivitu.
Postup IV:
V dalším provedení mají určité původní Ilb/IIla sloučeniny 4,4'—bispiperidylovou skupinu jako determinant specifičnost i, jak je uvedeno ve struktuře níže (WO 94/14 776. uvedeno jako odkaz).
Tento příklad je podobný postupu 11: „fantom kruh se vytvoří mezi 3 a 3' atomy uhlíku bispiperidyIového systému následujícím způsobem:
NH
Jak je uvedeno výše, nepotřebné atomy sc odstraní tak, že „fantom kruh jc para substituovaný.
- 17(./ zwro&y Βϋ
Odstraní sc amidinová funkční skupina a močovina se vytvoří tak. jak jc popsáno v postupu I. V tomto příkladu je vazbou spojení amidová vazba. V některých provedeních se miižc požadovat úprava funkční skupiny vc vazbě spojení. V tomto případě se příslušná amidová vazba může 5 obrátit. Sloučeniny vzniklé touto konverzí mají inhibiční aktivitu vzhledem k VLA-4 bez významné llb/llla aktivity.
Kroky postupu IV mohou být použity na struktury, které mají podobné llb/IIIa determinanty specifičnosti. Mezi příklady těchto determinantů specifičnosti patří 4-pipcrazinylfcnylová 10 skupina, 4-pyridylpiperazinylová skupina, 4-piperidinylpiperaziny lová skupina, 4 piperidinylfenylová skupina, a 4-vinylpiperidinylová skupina.
Podobný způsob jako je popsáno v postupech I až IV pro identifikaci nových VLA-4 inhibuj ících sloučenin může být použit pro Ilb/IHa inhibitory, které obsahují funkční skupiny vc svých i? determinantech specifičnosti, jako jsou například amidinofenylová skupina, bispiperidylová skupina, piperidylová skupina, benzylaminoskupina. pyridinylová skupina, aminopyridylová skupina, alkylaminoskupina, amidinopiperazinylová skupina, guanidinoskupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Tyto analýzy jsou tedy podobné těm, které byly specificky popsány výše. Dále použití výše uvedených postupů nejen identifikuje determinanty 20 specifičnosti a intcgriiiové skelety, ale také vazbu spojení mezi dvěma skupinami. Proto podíl determinantu specifičnosti llb/IIIa inhibitoru je snadno rozeznatelný od integrinového skeletu tak, žc VLA-4 inhibujíci sloučeniny vzniknou z vhodné výměny determinantů specifičnosti. VLA-4 inhibitory vznikající z analýzy uvedené zde. mohou být dále zlepšeny prodloužením, zkrácením, překlopením nebo nahrazením funkční skupiny na skupině na nebo těsně vedle vazby 25 spojení mezi VLA 4 determinantem specifičnosti a integrinovým skeletem. Mezi takové spojující funkční skupiny patří alkylová skupina obsahující I až 3 atomy uhlíku, alkenylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkinylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, amidová skupina, esterová skupina, etherová skupina a thioetherová skupina, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Avšak odborníkovi v této oblasti budou takové změny zřejmé
- 18CZ 298089 B6 a bude moci provést jakékoli jejich záměny na základě požadovaných charakteristik sloučenin. Dále ačkoli všechny postupy I až IV nabízejí zavedení o-methylfenylureidofenylove skupiny pro VLA-4 determinant specifičnosti, jc zřejmé, že jakýkoli VLA-4 determinant specifičnosti může být vyměněn za jakýkoli jiný, který je podrobně uveden v předkládaném vynálezu. Postupy uvedené výše tedy umožňují odborníkovi v této oblasti převést vlastně jakoukoli sloučeninu, která má llb/IIIa inhibiční aktivitu na VI,A 4 inhibitor.
Postup V:
V jiném provedení může být jakýkoli VI .A -I determinant specifičnosti, jakmile se identifikuje, převeden na jakýkoli jiný za získání nové sloučeniny, která má VLA-4 inhibiční aktivitu. Například sloučenina uvedená níže je VLA-4 inhibitorem získaným tak, jak je popsáno výše.
Vazbou spojení jc amidová vazba. Tedy VLA-4 determinant specifičnosti je o-methylfenylureidofcnylacetylová skupina. Ta může být nahrazena jako celek jiným VI A 4 determinantem specifičnosti jako je například indolylkarbonylaminofenylacctylová skupina, jak je popsáno níže. Tato sloučenina má VLA-1 inhibiční aktivitu.
Postup VI:
V dalším provedení podle vynálezu muže být VLA-4 determinant specifičnosti nahrazen a vazba spojení může být také upravena tak. jak je popsáno výše. Například o-methylfenylureidofcnyL acetylová skupina z postupu V může být nahrazena VLA 4 determinantem specifičnosti o-hydroxyfcnylethinylfcnylacetylovOu skupinou, jak jc popsáno níže. Tento alternativní VL.A -1 determinant specifičnosti je v teto přihlášce popsán. Tato nová sloučenina má VI.A-4 inhibiční aktivitu.
V druhém kroku může být amidová vazba spojení nahrazena například etherovou spojkou, jak jc vidět na obrázku níže.
i n
Protože takové změny funkčních skupin mohou byt provedeny v nebo těsně vedle vazby spojení, etherová spojka muže být umístěna na místě jakéhokoli zvýrazněného atomu uhlíku. Sloučeniny vznikající touto konverzí mají VIA4 inhibiční aktivitu. Postupy V a VI tedy umožňují odbor5 níkovi jakoukoli změnu V! A 4 determinantu specifičnosti, jakož i modifikaci funkčních skupin na vazbě spojení za zachování selektivní VLA-4 inhibiční aktivity.
Prostředky podle vynálezu io Předkládaný vynález poskytuje rozsáhlou třídu nových sloučenin, které jsou schopny inhibovat buněčnou adhezi zprostředkovanou Ilb/IIIa pomocí inhibicc vázání ligandu k tomuto receptoru. Takové sloučeniny mají obecný vzorec II
X-Y ( Π L ve kterém X zahrnuje Ilb/IIIa determinant specifičnosti, který nemá významnou VI..A 4 aktivitu, přičemž X jc vybráno ze skupiny, kterou tvoří;
. τη _
NH
NH
H2N
NH
NH
NH
NH
H
U h2n
f
NH
NH hnz'n
O
H \ lY?
H?N O
NH
O a Y je peptoid obecného vzorce PB1 nebo PB2
R15 O (CR1R2)mW R15
Af N—PAWR2)
O R'6 O R16
PB1 PB2
kde
A' je vybráno ze skupiny; kterou tvoří skupina NR1, atom kyslíku, atom sírv a skupina (CR'R)r:
A' je vybráno ze skupiny, kterou tvoři skupina SO2R11. skřípina COR7 a skupina (CR'R:)i>R ίο n je 0 až 5:
m je I až 4;
r je 0. 1;
W je vybráno ze skupiny, kterou tvoři skupina CO?H, skupina SÓJI, skupina PO^hB. tetrazolová skupina a atom vodíku;
P je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina CO. skupina SO2;
Rl a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku; alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina; cykloalkylová skupina; cykloalkenylová skupina; arylová skupina; arylalkylová skupina; hcterocyklická skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkyn25 ylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinou, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou;
R je vybráno ze skupiny, kterou tvoři atom vodíku; alkylová skupina; substituovaná arylová jo skupina; arylalkylová skupina; alkylová skupina; alkenylová skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná heterocyklickou skupinou, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou, alkoxyskupinou nebo atomem halogenu;
Rb a R16 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methylová skupina;
R je vybráno ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina; cykloalkylová skupina; cykloalkenylová skupina; arylová skupina; arylalkylová skupina; heterocyklická skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkyn40 ylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arvlalkoxyskupinou, thioalkoxyskupinou, karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou.
Chemické skupiny definované jako ..X vc vzorci II jsou příklady výše uvedených ..determinantů 45 specifičností”. Chemické skupiny definované jako ,,Y” ve vzorci II jsou příklady výše uvedených „intcgrinových skeletů.
_ os _
I když jsou uvedeny specifické příklady „intcgrinovych skeletů od inhibitorů buněčné adheze, odborníkovi v této oblasti bude zřejmé, že chemické strukturní deriváty těchto inhibitorů buněčné adheze mají podobnou inhibiční aktivitu. Je také zřejmé, že „integrinové skelety od takových VLA 4 derivátů nebo od jakékoli sloučeniny, která může vykazovat VLA 4 aktivitu, mohou byt zabudovány do llb/llla inhibitorů podle vynálezu.
„Farmaceuticky přijatelný derivát znamená jakoukoli farmaceuticky přijatelnou sůl. ester, sůl takového esteru, amid nebo sůl takového amidu, sloučeniny podle vynálezu. Vynález také zahrnuje jakoukoli jinou sloučeninu, která jc. při podávání pacientovi, schopná poskytnout (přímo nebo nepřímo) sloučeninu podle vynálezu (například prolcčivo). Vynález také zahrnuje metabolity nebo zbytky sloučenin podle vynálezu, které jsou charakteristické schopností inhibovat. preventivně působit nebo potlačovat buněčnou adhezi a chorobné změny způsobené buněčnou adhezi.
Dále, výhodné sloučeniny mají 1C\() asi 1 pM až 10 μΜ. měřeno pomoci testu vazby. Výhodnější inhibitory mají [Cs() nižší než lOOnM, výhodněji asi I pM až 100 nM a nejvýhodněji 1 pM až 10 nM.
Nové Ub/llIa inhibitory a způsoby jejich přípravy
V souladu s předkládaným vynálezem bylo zjištěno, ze je možno úspěšně převést VLA-4 inhibitory, které mají integrinový skelet, a pro které neexistuje llb/llla precedens, na nové llb/llla inhibitory. Dále byla demonstrována přenosnost llb/llla a VLA-4 skeletů při přípravě nových llb/llla inhibitorů, nahrazením determinantu specifičnosti VLA-4 inhibitoru llb/llla determinantem specifičnosti. Konkrétno. VLA-4 inhibitory; které mají skelety, jako jsou peptoídní skelety, mohou být převedeny na nové llb/llla inhibitory nahrazením VLA 4 determinantu specifičnosti llb/llla determinantem specifičnosti. Například tedy; pokud máme sloučeninu vzorce L kde A je VLA—4 determinant specifičnosti a B jc VLA-4 skelet, který s výhodou obsahuje peptoid. Potom se nahradí původní A determinantem specifičnosti, který' má Ilb/IIIa aktivitu, za vzniku nové sloučeniny, která má Ilb/IIIa inhibiční aktivitu.
Tato představa jc demonstrována sloučeninou A. jejíž struktura jc uvedena níže:
Sloučenina A
Sloučenina A, tj. sloučenina, která má VLA-4 inhibiční aktivitu, obsahuje determinant specifičnosti, který nemá významnou llb/llla aktivitu, a integrinový skelet. V literatuře pojednávající o llb/llla nejsou uvedeny žádné příklady takových integrinových skeletů. Náhradou VLA-4 determinantu specifičnosti llb/llla determinantem specifičnosti, jako je bispiperidinylová skupina, vznikne sloučenina, jako jc sloučenina R, která je silným Ilb/IIIa inhibitorem.
V souladu s tím jedno provedení předkládaného vynálezu nárokuje nové sloučeniny obecného vzorce II ve kterém X zahrnuje Ilb/IIIa determinant specifičnosti, který nemá významnou VLA-4 aktivitu, přičemž X je vybráno zc skupiny, kterou tvoří:
-24CZ 298089 B6
- 25 CZ 298089 B6 a Y je peptoid obecného vzorce PBI nebo PB2
R15 O (CR’R2)mW
AA
O R’6 (PBI).
kde
A’ je vybráno ze skupinv. kterou tvoří skupina NR1. atom kvslíku. atom síry a skupina (CR'R;)..
Λ je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina SCRR1skupina COR a skupina (CR'R:)nR :
n jc 0 až 5;
m je 1 až 4;
r je 0, 1;
W je vybráno zc skupiny, kterou tvoří skupina C()2H, skupina SO,H, skupina POjH?. tetrazolová skupina a atom vodíku;
P je vybráno ze skupiny, kterou tvoři skupina CO. skupina SO;
R1 a R2 jsou nezávisle na sobě atom vodíku; alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina; cykloalkylová skupina; cykloalkenylová skupina: arylová skupina: arylalkylová skupina; heterocykl ická skupina: a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkynylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinou, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou;
R je vybráno zc skupiny, kterou tvoří atom vodíku: arylová skupina; substituovaná arylová skupina; arylalkylová skupina; alkylová skupina; alkenylová skupina; alkylová skupina popřípadě substituovaná heterocyklickou skupinou, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou, alkoxyskupinou a atomem halogenu;
R|S a R,(’jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methylová skupina;
R11 je vybráno zc skupiny, kterou tvoří alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina: cykloalkylová skupina; cykloalkenylová skupina; arylová skupina: arylalkylová skupina; heterocyklická skupina; a alkylová skupina substituovaná popřípadě cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkynylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinou. thioalkoxyskupinou, karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou.
tj. nove llb/llla inhibitory odvozené kombinací nového VIA 4 skeletu a známého Ilb/IIIa determinantu specifičnosti, jehož příklady lze nalézt v tabulce 2.
-26CZ 298089 B6
Toto převedeni demonstruje, že nové llb/IIIa inhibitory mohou být nyní vytvořeny na základě integrinových skeletů objevených u VLA-4 inhibitorů. Tak jsou VLA^l inhibitory novým zdrojem integrinových skeletů vhodných pro vytváření nových Ilb/IIla inhibitoru.
Pro usnadnění diskuse jsou jako příklady uvedeny farmaceutické prostředky a způsoby léčby týkající se VLA-4 inhibitorů, které však nejsou předmětem předkládaného vynálezu. Předkládaný vynález však zahrnuje stejné prostředky, které lze obdobně použít, avšak obsahující místo VLA-4 inhibitorů, nebo společné s nimi, nové llb/IIIa inhibitory.
-27CZ 298089 B6
Tabulka 1 (Name - označení, Act =- aktivita, prodrug - pro farní akum)
-28CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokrj (Namc označení, Act = aktivita, prodrug - profarmakunt)
-29CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Namc = označení, Act aktivita, prodrug profarmakum)
-30CZ 298089 R6
Tabulka 1 (pokr.) (Name = označeni. Acl ~ aktivita, prodrug profarmakum)
1 .................... —--- - -- • ..................... -
o O
A ď'% m1 ΓΝ co. J <2 I S
cj V .... ,o fy o
< r Z-. £ c-V <
i //
i \ X.. i J \ J
i / \ i
-31 CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Nanic - označení, Act - aktivita, prodrug - profarmakum)
co; D
;7Í J ío! Γ 1
ω1
c o! v λ , 0 o i
i oí <0 Z ,
\ K z.. C'1 <<. '·
Γ7 (- ύ /! \ 1 1
\.. .J ! /
r 1 Λ”’’
1 xz [ -'Z i.:
\ -0 o i 0
\ Z · \ j \
z A v, i
* / 1
t (
z~ inl CO· fo;
o \ CO O \ o ”
Z1 X: Z < xl
ca, / ov
Ý. ř ω' E! r\...... v? bj! El /
ro! (IJ
______ ... ______ zi ______________ z!
-32CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr,) (Name označení, Act ~ aktivita, prodrug profarmakum)
- j.) CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name označení, Au aktivita, prodrug - profarmakum)
-34Tabulka 1 (pokr.) (Name = označení, Act ~ aktivita, prodrug ~ profarmakum)
I o ,Á.
OV} O (N O Ój
I/, zySUBV B6 'w° i o X
<r> o oj o to o kH>* k/Á
U
Act ia.333 i Name: AX2____ Act:
i t— $
I o
ZI *1
-35Tabulka 1 (pokr.) (Name = označení, Act aktivita, prodrug - profarmakum)
-36CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name “ označení, Act = aktivita, prodrug “ profarmakum)
-37 CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name označení, Act - aktivita, prodrug profarmakum)
I o >
T o
l'.! o
no
0' oo <—*'
V. Z ; z W i
\
A·· // \
z.
to
T o
v.
// ó
ZT
O.<
zx
X x.//
φ! r-! □ 0
Φ i
! O ' z
Si \ 0--(
εΐ ro:
38CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name = označení, Act aktivita, prodrug = profarmakum)
-39CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name ~ označení, Act = aktivita, prodrug = profarmakum)
-40CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name ~ označení, Act - aktivita, prodrug ~ protarmakum)
-41 CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name označení, Act - aktivita, prodrug ~ profarmakum)
oZ \> -n 1 i 0
0 (z \ Q..V )-/ mi cn| có. rtí £)< j
u u-
2T i <1 ZI <: i
í i i o -y £ rz 1 i i
yo
xz l —z V A
i 1 U λ
ou r* ‘ '-A Y-ri 101 r~ 0=ý <Π; r--
X: X ZI XI
Wf z rj (0i / to!
ώ: T ů>· /' <uj
& \ J e!
w: «51
zl Z; zj
-42CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name označení, Act - aktivita. Produkt % profarmakum)
-43 C7. 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name = označení, Act aktivita, prodrug = profarmakum)
-44CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Nanic = označení, Act =7 aktivita, prodrug profarmakum)
O=í o
0.7 o τ ω
E z
rtí co;
<*>( r> Oíj
I Ol <1
Ο/ \ O o \ /
X í/7 !
ro z
-45 CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name - označení, Act aktivita, prodrug =2 profarmakum)
-46CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Namc - označení, Act aktivita, prodrug proiarmakum)
0 ( (*>| X. ZI
2-r L. tul ď
w E rc. Z
-47C7. 298089 B6
Tabulka I (pokr.) (Namc ~~ označení, Act = aktivita, prodrug = profarmakum)
A /
o
^=0 1
XT
O-^
w zx
-48CZ 298089 B6
Tabulka 1 (pokr.) (Name - označení, Act = aktivita, prodrug profarmakum)
-49labulka 1 (pokr.) (Name = označení, Act = aktivita, prodrug = profarmakum)
Z.
rz \····α
i
ul <:
X O
CT>: F'. O.
Oj oí
T.Z z
O1 CX| X 02 ať E! ω ZÍ
IZ >O /
O c>nj·
Z
- 50 Tabulka 1 (pokr.) (Namc = označení, Act ~ aktivita, prodrtig ~ profarmakum)
-51 CZ 298U89 B6
Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny podle běžných postupu. S výhodou se tyto sloučeniny chemicky syntetizují ze snadno dostupných výchozích látek, jako jsou «-aminokyseliny a jejich funkční ekvivalenty. Výhodné jsou také modulové a konvergentní způsoby přípravy těchto sloučenin. Při konvergentním přístupu se například velké části konečných produktů spojují v konečných krocích syntézy a molekuly sc nevytváří pomocí přidávání malých kousků rostoucího řetězce molekuly.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být také upraveny připojením vhodných funkčních skupin, čímž se zlepší selektivní biologické vlastnosti. Takové úpravy jsou odborníkům v teto oblasti známé a patří mezi nč takové úpravy, při kterých se zlepšuje biologická průchodnost do daného biologického systému (například krve, lymfatickcho systému, centrální nervové soustavy), zvyšuje se orální dostupnost, zvyšuje sc rozpustnost, čímž se umožní injekční podávání, mění se metabolismus a mění sc rychlost vylučování. Mezi příklady takových úprav patří esterifikace polyethylenglykoly, derivatizace p i volaty nebo substituenty mastných kyselin, převedení na kar ba máty, hydroxy láce aromatických kruhů a substituce heteroatomů v aromatických kruzích, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Termín „pacient, který' se používá podle vynálezu, znamená savce včetně člověka. Λ termín ..buňka znamená buňky savců, včetně buněk člověka.
Když se sloučeniny podle vynálezu syntetizují, může sc určit a/nebo porovnat jejich aktivita a VLA 4 nebo llb/IIIa specifičnost pomocí bi viíro a in vivo testů.
Například aktivita sloučenin ve smyslu inhibicc buněčné adheze může být měřena stanovením koncentrace inhibitoru potřebná pro zablokování vazby buněk exprimujících VLA-4 k destičkám potaženým fibronektinem nebo CSL Při této zkoušce se mikrotitrační jamka obalí buď fibroncktincm (obsahujícím CS-1 sekvenci), nebo CS 1. Pokud se použije CS-1, musí být konjugováno s nosičovým proteinem, jako jc sérum hovězího albuminu, aby došlo k vazbě na jamku. Když je sonda obalena, přidávají se různé koncentrace testované sloučeniny společně s vhodně označenými buňkami vylučujícími VLA 4. Alternativně muže být testovaná sloučenina přidána nejdříve a může se před přidáním buněk nechat inkubovat s obalenou jamkou. Buňky se nechají inkubovat v jamce nejméně 30 minut. Po inkubaci se buňky izolují a promyjí. Inhibicc vazby se měří pomocí určení fluorescence a radioaktivity vazby k desce pro každou různou koncentraci testované sloučeniny a pomocí kontrolního testu bez testované sloučeniny.
Buňky exprimujicí VLÁL které mohou být použity při této zkoušce, zahrnují Ramosovy buňky. Jurkatovy buňky, buňky melanomu A375 a lymfocyty lidské periferní krve (PBL). Buňky, použité při teto zkoušce, jsou komerčně dostupné a mohou být fluorescenčně nebo radioaktivně značené.
Pro určení hodnoty inhibiční aktivity sloučenin může být také použita přímá zkouška vazby (DBA). Při této zkoušce se spojený protein VCAM-lgG obsahující první dvě imunoglobu línové domény VCAM-lgG obsahující první dvě imunoglobulinové domény VCAM (D1D2) připojené nad oblastí, na kterou jc připojena molekula IgG 1 („VCAM 2D-IgG), konjuguje k označenému enzymu, jako je alkalická fosfatáza („AP). Příprava tohoto spojení VCAM-lgG jc popsána v PC I' přihlášce WO 90/13 300. která je zde uvedena jako odkaz. Konjugace tohoto spojeni s označeným enzymem se provede pomocí zcsítční. které je odborníkům v této oblasti známé.
Konjugát VCAM-lgG - enzym se poté umístí do jamek mnohojamkové filtrační desky, jako je deska z milipórového mu 1tifiltračního testovacího systému (Millipore Corp.. Bedford, MA). Poté sc do jamek přidá testovaná inhibiční sloučenina v různých koncentracích a buňky exprimujicí VLA-4. Buňky, sloučenina a konjugát VCAM-lgG - enzym se smísí a nechají inkubovat při teplotě místnosti.
- 52 Poté se jamky pomocí vakua odvodní a zůstanou buňky a všechen vázaný VCAM. Množství vázaného VCAM se určí pomocí přidání vhodného kolorimetrického substrátu pro konjugát VCAM-IgG - enzym a určí se množství produktu reakce. Úbytek produktu reakce znamená zvýšení vazebné inhibiční aktivity. Postup je podrobněji popsán níže.
A. Příprava desky pro test
1. Blok 96jamkovc Millipore Multiscreen Assay Systém filtrační destičky (Millipore Multiscreen Assay Systém, Millipore Corp., Bedford, ΜΛ; 96jamková filtrační deska (katalog io #MAHV N45 50; zdroj vakua (katalog #XX55 00 00); rozvod vakua (katalog #MAVM 096 01)) s 200:1/Jamka blokujícího pufru (lx fosfátem pufrovaná solanka, 0,1% Twccn 20, 1% BSA) sc udržuje nejméně 1 hodinu při teplotě místnosti.
2. Deska sc odvodní pomocí rozvodu vakua a promyje se 200 μΙ/jainka testovaného pufru (Tris 15 pufrovaná solanka, 0,1% BSA. 2mM glukóza, lOmM HEPES. pH 7.5) a odvodní se. Postup se opakuje dvakrát. Aby se odstranil zbývající pufr, dno desky se osuší papírem.
B. Přidání testovaných činidel na desku
3. Připraví se 4 pg/ml VCAMlg-AP roztoku (alkalická fosfaláza spojená s VCAMlg) v testovaném pufru a filtruje se 0,2 : stříkačkovým filtrem vážícím nízko proteiny (Gelman Sciences #4454). Z tohoto roztoku sc připraví 0.4 pg/ml pracovního roztoku VCAMlg-AP v testovém pufru. Do každé jamky se přidá 25:1 0,4 pg/ml VCAMlg AP.
5. Připraví se roztoky testovaných sloučenin v testovém pufru. Koncentrace jsou čtyřnásobkem požadované konečné koncentrace a testy sc provádí trojmo. Do označených jamek se přidá 25 μΐ roztoku sloučeniny.
6. Přidá se 25 μΐ testovaného pufru (namísto testované sloučeniny) do jamek pro úplnou vazbu 30 (TB) a 75 μΙ testového pufru do jamek pro nespecifickou vazbu (NSB). ve kterých dále nejsou buňky.
7. Jurkatovy buňky sc odstředí a odstraní se kultivační médium a jednou se promyjí testovým pufrem. Promyté Jurkatovy buňky se znovu suspendují při koncentraci 8 x lOÚml v testovém pufru obsahujícím 2mM chlorid manganatý. Směs sc promísí pomocí nasáti a vypuštění pipetou.
Do každé jamky kromě NSB jamek sc přidá 50:1 suspenze buněk.
8. Aby se promíchal obsah jamek, na desku se opatrně poklepe. Deska se inkubuje 60 minut při teplotě místnosti.
C. Test vyvíjení barvy
9. Deska se umístí do rozvodu vakua a obsah jamek sc odvodní. Dvakrát se promyje 100 μΙ/jatnka promývacího pufru (testový pufr obsahující ImM chlorid manganatý). Desky se odvodní a umístí na papírový ručník.
10. K substrátovému pufru (0,1 M glycin. ImM chlorid zinečnatý, ImM chlorid manganatý, pH 10,5) se přidá 10 mg/ml 4-nitrofénylfosfátu. Přidá se 100 μΐ/jamka a inkubuje se přesně 30 minut při teplotě místnosti.
11. Aby se ukončila reakce, přidá sc 100 μΙ/jamka 3N roztoku hydroxidu sodného.
12. 96jamková deska se vyhodnocuje v přístrojích ELISA při 405 um. Data se analyzují pomocí software SoftMax.
Za účelem stanovení VLA-4 inhibiční specifitv sloučenin sc mohou provést testy pro ostatní větší skupiny integrálů, tj. pro integríny β2 a β3, stejně jako pro jiné integríny βΙ, jako jsou VLA-5. VLA 6 a α4β7. Tyto zkoušky by mély být podobné zkoušce inhibice adheze a zkoušce přímé vazby, kterc jsou popsány výše, při náhradě vhodné buňky exprimující integrin a odpovídajícího ligandu. Například polymorfonukleární buňky (PMN) exprimují na svém povrchu integríny β2 a váží se k 1CAM. Integríny β3 se účastní agregace krevních destiček a inhibice se muže merit pomocí standardního testu na agregaci krevních destiček. VLA-5 se specificky váží k sekvenci Arg-Gly-Asp, zatímco VLA-6 se váže k lamininu. O α4β7 se nedávno zjistilo, že je homologem VLA4. který také váže fibronektin a VCAM. Specifita vzhledem k α4β7 sc určí při vazebné zkoušce, při které se využívá výše popsaný konjugát VCAM-IgG - značený enzy m a buňky, které vylučují α4β7. ale nevylučují VLA 4, jako jsou buňky RPMI-8866 nebo JY^buňky.
Když se identifikují specifické inhibitory pro VLA-4, mohou se dále charakterizovat pomocí in vivo testů. Jedna taková zkouška testuje inhibici přecitlivělosti při doteku u zvířat, například zkouška popsaná v P. L. Chisholm a kol.. „Monoclonal Antibidies to the Integrin a-4 Subunit lnhibit the Murine Contact Hypcrsensitivity Response“. Eur. J. lmmunol.. 23, str. 682-688 (1993) a v ..Current Protocols in Immunology .1. E. Colligan a kol.. Eds., John Wiley and Sons. New York, I, str. 4,2,1. až 4,2,5. (1991), což je zde uvedeno jako odkazy. Při této zkoušce se kůže zvířat dráždí vystavením nějakému dráždidlu, jako je dinitrofluorbenzen. poté následuje lehké fyzické dráždění, jako je lehké poškrábání pokožky pomocí ostré hrany. Následuje uzdravovací období, po kterém jsou zvířata drážděna pomocí stejného postupu. Několik dní po podráždění se ucho zvířete vystaví chemickému dráždidlu, a druhé ucho se potře nedráždi vy m kontrolním roztokem. Krátce po aplikaci na uši se zvířatům pomocí podkožní injekce podá různá dávka inhibitoru VLA-4. In vivo inhibice buněčné adheze spojené se zánětem se stanoví pomocí měření otoku ucha zvířete v porovnání s druhým uchem. Otok se měří pomocí posuvného měřidla nebo jiného nástroje, který je v hodný pro měření tloušťky ucha. Tímto způsobem mohou být identifikovány inhibitory' podle předkládaného vynálezu, které jsou nej lepší pro inhibici zánětů.
Další in vivo zkouškou, která může být využita pro testování inhibitorů podle předkládaného vynálezu, jc testování astmatu ovcí, lato zkouška sc provádí podle postupu, který jc popsán v W, M, Abraham a kol., „tx Integrins Mcdiated Antigen-lnduced Latě Bronchial Responscsand Prolongated Airway Ilypcrresponsivcncss in Sheep“. J. Clin. Invest., 93, str. 776-87 (1994), což jc zde uvedeno jako odkaz. Pomocí této zkoušky se měří inhibice pozdní odpovědi dýchacích cest vyvolaná Ascarix antigenem a dýchací odpověď u alergických ovcí.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být také testovány při testu agregace krevních destiček.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být použity ve formě farmaceuticky přijatelných solí odvozených od anorganických nebo organických kyselin a bází. Mezi takové soli kyselin patří následující: acetát, adipát, alginát, aspartát, benzoát, benzensulfonát, hydrogensíran. butyrát, citrát, kafrát, kafrsulfonát, cyklopentanpropionát diglukonát dodecylsulťát, ethansulfonát, fumarát, glukoheptanoát, glyccrofosfát. hemisulfát, heptanoát, hexanoát. hydrochlorid, hydrobromid. hydrojodid, 2-hydroxyethansulfonát, laktát, maleát. methansulfonát, 2-naftalensulfonát, nikotinát, oxalát, pamoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, pikrát, pivalát, propionát, sukcinát, tartrát, thiokyanát, tosylát a undckanoát.
Mezi soli bází patří amonné soli, soli alkalických kovů jako jsou sodné a draselné soli, soli kovů alkalických zemin jako jsou vápenaté a horečnaté soli, soli s organickými bázemi, jako jsou soli dicyklohexylaminu. N-methyl-D-glukaminu. tris(hydroxymethyl)methylaininu a soli aminokyselin jako je arginin, lysin, a podobně. Bazické dusíkaté skupiny mohou být také kvartem izovány činidly, jako jsou nižší alky lhalogenidy . jako je mcthylchlorid, ctliy leh lorid,
- 54 ι /. ívouov do propyichlorid a butylehlorid. bromidy a jodidy: dialkylsulfáty, jako jsou dimethyI. diethyl. dibutyl a diamylsulfáty, halogenidy s dlouhým řetězcem, jako jsou decyl. lauryl. myristyl a stearyl chloridy, bromidy a jodidy. arylalkyl halogenidy, jako jsou benzyl a fenethylbromidy a jiné. Takto je možné připravit prostředky, které jsou rozpustné nebo dispcrgovatelné ve vodě nebo v oleji.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být upraveny do farmaceutických prostředku, které mohou být podávány orálně, parenterálně, pomoci inhalačního spreje, místně, rektálně, nasál ně, bukálně. vaginálně nebo pomocí implantovaného zásobníku. Termín „parenterální podávání zahrnuje podkožní, nitrožilní, mezi svalové, intraartikulární. do kloubu, intrasternální, intratekální. intrahepatikální. intralesionální a intrakraniální injekci nebo infuzní techniku.
Farmaceutické prostředky podle obsahují jakoukoli sloučeninu podle vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelný derivát, společně s jakýmkoli farmaceuticky přijatelným nosičem. Termín „nosič zahrnuje farmaceuticky přijatelné adjuvanty a vchikula. Farmaceuticky přijatelné nosiče, které mohou být použity ve farmaceutických prostředcích podle vynálezu, zahrnují jontoměniče. oxid hlinitý, stearát hlinitý, lecitin, sérové proteiny, jako je lidský sérový albumin, pufrovací látky jako jsou fosfáty, glycin. kyselinu sorbovou, sorban draselný, částečně glyceridované směsi nasycených rostlinných mastných kyselin, vodu, soli nebo elektrolyty, jako je protamin sulfát, hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidní oxid křemičitý, trikřemičitan hořečnatý. polyvinylpyrrolidon, látky založené na celulóze, polyethylenglykol, sodnou sůl karboxy methyl celulózy, polvakrylátv. voskv. blokové polymery polycthylen-polyoxypropylcn, polyethylenglykol a lanolin.
Podle vynálezu mohou být farmaceuticky prostředky vc formě sterilního roztoku pro injekční podávání, například sterilního vodného roztoku pro injekční podáváni nebo olejové suspenze pro injekční podávání. Takové suspenze mohou být připraveny podle technik, které jsou v této oblasti známé za použití vhodných díspergujících nebo zvlhčujících činidel a suspendujících činidel. Sterilní prostředky pro injekční podávání mohou být sterilní roztoky pro injekční podávání nebo suspenze v netoxických parenterálně přijatelných ředidlech nebo rozpouštědlech, například jako roztok v 1,3-butandiolu. Mezi přijatelná vchikula a rozpouštědla, která mohou být použita, patří voda. Ringerův roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Dále se jako rozpouštědlo nebo suspendující činidlo požívají sterilní, stabilizované oleje. Pro tento účel je možné použít jakýkoli nedráždi vy stabilizovaný olej, včetně mono a diglyceridů. Mastné kyseliny, jako jc kyselina olejová a její glyceridové deriváty jsou vhodné při přípravě injektovatelných prostředků, stejně jako farmaceuticky přijatelné přírodní oleje, jako jsou olivový olej nebo ricínový olej, zejména v jejich polyoxyethylováných formách. Tyto olejové roztoky nebo suspenze mohou také obsahovat jako ředidlo nebo dispergující látku alkoholy s dlouhým řetězcem, jako je Ph. Heív. nebo podobné alkoholy.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být orálně podávány v jakékoli orálně přijatelné dávkovači formě včetně tobolek, tablet, vodných suspenzí nebo roztoků, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady .
V případě tablet pro orální podávání se jako nosiče běžně používají laktóza a kukuřičný škrob. Typicky se také přidávají mazadla, jako je stearát hořečnatý. Pro orální podávání ve formě tobolek jsou vhodnými ředidly laktóza a sušený kukuřičný škrob. Pokud je pro orální použití potřebná vodná suspenze, aktivní složka se smísí s eniulgátorem a suspendujícím činidlem. Pokud se to požaduje, může se také přidal určité sladící činidlo, příchuť nebo barvicí činidlo.
Alternativně mohou být farmaceutické prostředky podle vynálezu podávány ve formě čípků pro rektální podávání. Cípky sc mohou připravovat smísením činidla s vhodnou nedráždivou přísadou. která jc pevná při teplotě místnosti, ale kapalná při rektální teplotě, a tak taje v konečníku za uvolnění léčiva. Takovými materiály jsou kakaové máslo, včelí vosk a polyethylengly koly.
- 55 I /. Ζ'ίΟυΟ'# L50
Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu mohou být podávány místně, zvláště pokud jsou místem léčby místa nebo orgány, které jsou dobře přístupné pro místní aplikaci. Patří mezi ně oční onemocnění, kožní onemocnění nebo onemocnění konečníku. Pro každou z těchto oblastí nebo orgánu se vhodné farmaceutické prostředky snadno připravují.
Místní aplikace pro spodní intestinální trakt může být provedena pomocí rektální čípkové formy (viz výše) nebo pomocí vhodného klystýrového prostředku. Mohou být také použity místní transdermální náplasti.
id Pro místní aplikaci mohou být farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu upraveny do vhodných mastí obsahujících aktivní složku suspendovanou nebo rozpuštěnou v jednom nebo více nosičích. Nosiče pro místní podávání sloučenin podle předkládaného vynálezu zahrnuji minerální oleje, kapalnou vazelínu z ropy, bílou vazelínu z ropy, propylenglykol. polyoxyethylenové sloučeniny, emulgační vosky a vodu, předkládaný vynález však není omezen pouze na tyto příklady. Alternativně mohou být farmaceutické prostředky připraveny ve vhodném roztoku nebo krému obsahujícím aktivní složky suspendované nebo rozpuštěné v jednom nebo více farmaceutických nosičích. Mezi vhodné nosiče patří minerální olej, sorbitan monostearát, polysorbát 60, cetylesterový vosk, cetearylalkohol. 2-oktyldodckanol. benzylalkohol a voda, předkládaný vynález však není omezen pouze na tyto příklady.
Pro oční použití mohou být farmaceutické prostředky připraveny jako mikronizované suspenze v izotonickém roztoku, pH upravené pomocí sterilní solanky, nebo, s výhodou jako roztoky v izotoniku, pH upravené pomocí sterilní solanky, bud' s, nebo bez konzervačních látek jako je benzylakoniumchlorid. Alternativně mohou být farmaceutické prostředky pro oční použití 25 připraveny ve formě oleje jako je kapalná vazelína z ropy.
Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu mohou být také podávány pomocí nasálního aerosolu nebo inhalačně pomocí použití nebulizeru, suché práškově formy pro inhalaci nebo odměřovacího dávkovacího inhalátoru. Takové prostředky sc připraví v souladu 30 s technikami, které jsou odborníkům v oblasti farmaceutických prostředků známé, a mohou být připraveny jako roztoky v solance, za využití benzylalkoholu nebo jiných vhodných konzervačních látek, látek podporujících absorpci pro zvýšení biologické využitelnosti, fluorovaných uhlovodíků a/nebo jiných běžných látek podporujících rozpustnost nebo disperguj íeíeh činidel.
Množství aktivní složky, která může být kombinována s nosičem za vzniku jedné dávkové formy, se bude měnit v závislosti na léčeném pacientovi a konkrétním způsobu podávání. Je zřejmé, že specifická dávka a léčebný režim pro konkrétního pacienta bude závislý na různých faktorech zahrnujících aktivitu využité sloučeniny, věk, tělesnou hmotnost, zdravotní stav, pohlaví dietu, dobu podávání, rychlost vylučování, kombinaci léčiva, a úsudek lékaře a závažnost choroby.
která je léčena. Množství aktivní složky může také záviset na léčebném nebo profylaktickém činidle, se kterým je složka podávána.
Dávkování a častost dávek sloučenin podle předkládaného vynálezu účinné při prevenci, potlačení nebo ínhibici buněčné adheze bude závisel na různých faktorech, jako je povaha inhibitoru.
velikost pacienta, cíl léčby, povaha onemocnění, které je léčeno, konkrétní použitý farmaceutický prostředek, a úsudek lékaře. Je užitečné dávkové množství mezi 0.001 až lOOmg/kg tělesné hmotnosti za den, s výhodou mezi 0,1 až IOmg/kg tělesné hmotnosti za den aktivní složky sloučeniny podle předkládaného vynálezu.
V souladu s jiným provedením, prostředky, které obsahují sloučeninu podle předkládaného vynálezu, mohou také obsahovat další činidla vybraná ze skupiny obsahující kortikosteroidy, bronchodilatátory, antiastmatika (buněčné stabilizátory), proti zánětI ivé látky, antirevmatika, imunosupresiva, antimetabolita, imunomodulátory, antipsoriatika a antidiabetika. Specifické sloučeniny z těchto tříd mohou být vybrány ze sloučenin, uvedených pod vhodným názvem v „Comprehensive Mědícinal Chemistry, Pergamon Press, Oxford, Fngland. str. 970-986
-56CZ 2980X9 B6 (1991), což je zde uvedeno jako odkaz. Kromě teto skupiny mohou prostředky obsahovat sloučeniny jako jsou theofilin. sulfasalazin a atninosalicyláty (protizánětlivé látky): cyklosporin, T'K-506, a rampamycin (imunosupresivum); cyklofosfamid a mcthotrcxát (antimetabolita); steroidy (inhaiační, orální a místní podávání), a ínterferony (imunoniodulátory).
V souladu s jiným provedením, předkládaný vynález poskytuje způsob pro prevenci, inhibicc nebo potlačení zánětů spojených s buněčnou adhezí a imunitními a autoimunitními reakcemi spojenými s buněčnou adhezí. Buněčná adheze hraje klíčovou roli při různých zánětech, imunitních a auloimunitních onemocněních, ledy, inhibice buněčné adheze pomocí sloučenin podle předkládaného vynálezu může být využitelná při způsobech léčení nebo prevence zánět li vy ch, imunitních a autoimunilních onemocnění. S výhodou jsou onemocněni, která se budou léčit pomocí způsobů podle předkládaného vynálezu vybrána ze skupiny, která obsahuje astma, artritidu, alergie, syndrom dýchací tísně dospělých, kardiovaskulární onemocnění, trombózu nebo škodlivou agregaci krevních destiček, odmítnutí transplantátu, ncoplastická onemocnění, psoriázu, mnohočctnou sklerózu, záněty centrální nervové soustavy, Crohnovu nemoc, ulccrativní kolitidu, glomerulámí nefritidu a příbuzná zánčtlivá onemocnění ledvin, cukrovku, oční záněty (jako je uveitida), aterosklcrózu, zánčtlivá a autoimunní onemocnění. Vynález také poskytuje farmaceutické prostředky obsahující tyto inhibitory buněčné adheze. které lze použít k inhibici buněčné adheze. S výhodou jsou onemocněními, která se mají léčit pomocí prostředku a sloučenin podle vynálezu vybrána zc skupiny, kterou tvoří astma, artritida, alergie, syndrom dýchací tísně dospělých, kardiovaskulární onemocnění, trombóza nebo škodlivá agregace krevních destiček, odmítnutí transplantátu, ncoplastická onemocnění, psoriá/a. mnohočetná skleróza, záněty centrální nervové soustavy. Crohnova nemoc, oční záněty (jako je uveitida) , aterosklcróza, psoriáza, odmítnutí transplantátů, mnohočetná skleróza, diabetes a zánčtlivá střevní onemocnění.
Při léčení se mohou sloučeniny podle předkládaného vynálezu použít v monoterapii nebo v kombinaci s protizánčtlivými nebo imunosupresivními činidly, fakovc kombinované léčení zahrnuje podávání činidla v jednotlivé dávkové formě nebo ve vícenásobných dávkových formách podávaných ve stejném čase nebo v různých časech.
Příklady provedení vynálezu
Příprava AX7
Λ) K roztoku t-butylesteru β-alaninu (67 mg, 0.124 mmol) v NMP (20 ml) se při 0 °C pomalu přidá roztok benzyl-2-bromacetátu v NMP (10 ml). Reakční směs se míchá 4 hodiny při 0 °C, potom 6 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí ethylacelátcm (150 ml), promyje se vodou (50 ml x 2), nasyceným roztokem chloridu sodného (30 ml) a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chroinatografie za použití směsi hexan/ethylacetát (1:1) jako cluentu za získání 210 mg (72 %) aminu. K roztoku tohoto aminu (160 mg, 0.55 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se při 5 °C za přítomnosti tríethylaminu přikapc p-anisolchlorid (167 mg; 1.65 mmol). Po 18 hodinách míchání při teplotě místnosti se směs zředí diethyletherem (150 ml), promyje se 5% kyselinou citrónovou (30 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatog rafie za použití směsi hexan/ethylacetát (2:1) jako eluentu za získání 230 mg (98 %) požadovaného produktu.
'H NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 7,33 (m. 7H, Ar). 6.80 (m. 211, Ar). 5.15 (s. 211. Bn), 4.19 (m. 2H). 3.79 (s. 311. OMe). 2.62 (ιη, 2H). 2.55 (m. 211), 1.40 (s. 911);
LC, hexan/ethylacetát (1:1), R, _ 0.43.
-57CZ 298089 B6
B) Sloučenina z kroku Λ (170 mg: 0,4 mmol), 10% Pd(OH)2 (140 mg. 0,1 mmol) a ethylacetát (30 ml) se míchá ve vodíkové atmosféře (100 kPa) 18 hodin. Směs se filtruje a filtrát se zahustí za sníženého tlaku za získání 100 mg (74 %) požadované sloučeniny.
'11 NMR (deuterochioroform. 300 MHz, ppm) 7,32 (m, 2H, Ar). 6.88 (m, 2Π. Ar). 4.16 (m. 2H), 3.79 (s, 3H. OMe). 3.67 (m. 2H), 2,56 (ni, 2H), 1.40 (s, 9H);
1LC, 10% methanolu v dichlormethanu. Rf- 0,09.
C) Sloučenina z kroku B (50 mg. 0,148 mmol) v dimethylformamidu (1,0 ml) se 15 minut aktivuje EDO.HO (34 mg, 0,178 mmol). Aktivovaná kyselina se váže 18 hodin při teplotě místnosti s (33 mg. 0,148 mmol). Směs se zředí cthylacetátem. promyje sc 5% kyselinou citrónovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší sc nad síranem sodným. Organická vrstva sc odpaří za sníženého tlaku za získání 67 mg (84 %) požadované sloučeniny.
!H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9.60- 6,61 (m, 10 H, Ar+NH), 4,25 -3,30 (m. 9 H). 3,13 - 2.48 (m, 411), 1,54 (m, 2 H), 1.34 (s, 9 11), 1,18 (m, 1 H), 0,84 (m, 6 H);
Hmotová spektroskopie, m/z 540 (CiftH-i.iN-A, pro M+l se požaduje 540).
D) Roztok sloučeniny z kroku C (67 mg, 0.124 mmol) v dichlormethanu (5 ml) se reaguje s kyselinou trifluoroctovou (5 ml). Reakční směs se míchá 6 hodin při teplotě místnosti, potom sc odpaří ve vakuu. Surový produkt se čistí na koloně s reverzní fází Vydac Cl8 (22 mm x 25 cm) za použití lineárního gradientu 15 % acetonitril/voda (0.1 % TFA) až 40 % acetonitril/voda (0,1 % TFA) při průtoku lOml/min za získání sloučeniny AX7 (10.0 mg, 17 % výtěžek po izolaci):
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm) 9,94 (ni, 1 H), 7,59- 6,91 (m, 9 H), 4,36- 4,03 (m, 4 H), 3.76 (s, 3 H, OMe). 3,53 - 3.11 (m. 4 H). 2,59 (m. 2 II), 1.52 - 0.71 (m, 9 H);
Hmotová spektroskopie, m/z 484 (C^JONTý, pro Μ + 1 se požaduje 484).
Příprava sloučeniny BX17
A) K roztoku kyseliny 2-methylamin-5-jodbenzoovc (6.93 g: 25 mmol) a uhličitanu sodného (2,65 g) ve vodě (70 ml) se přikape roztok fosgenu v toluenu (1.93 M; 20 ml: 38,5 mmol). Po 4 hodinách míchání při teplotě místnosti se reakční směs filtruje a pevná látka se oddělí. Pevná látka se promyje vodou (100 ml x 2) a suší sc za získání 5,9 g (78 %) požadovaného produktu. Směs výše uvedené pevné látky (5,33 g. 17.6 mmol), (hydrochloridu ethylesteru 3 alaninu (3,07 g; 20 mmol), triethylaminu (2,23 g. 22 mmol) a 4-dimethylaminopyridinu (50 mg; 0,41 mmol) v dimethylformamidu (50 ml) sc zahřívá 2 hodiny na 60 °C. Směs se odpaří ve vakuu a zbytek sc zředí cthylacetátem (90 ml), promyje se vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla sc získá 5,7 g (86 %) požadované sloučeniny:
'H NMR (deuterochioroform. 300 MHz, ppm) 7,52 - 7.46 (m, 2 H, Ar+NH). 6,67 (s. 1 Η, NH), 6,40 (d, J = 8,7 Hz, 1 H, Ar), 4,14 (kv, J = 7,2 Hz, 2 H), 3.61 (kv. J = 6,0 Hz, 2 H), 2,79 (s. 3 H. N-Me). 2,58 (t, ,1 - 6,0 Hz, 3 H), 1,24 (t, J - 7.1 Hz. 3 H):
Hmotová spektroskopie, m/z 399 (C| J-lnNiOd pro M +Na se požaduje 399).
B) Směs sloučeniny z kroku A (3,76 g; 10 mmol), a-bromacetylbromidu (3,03 g; 15 mmol), dichlormethanu (25 ml) a vody (25 ml) sc míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Po oddělení se
-58LZ. bO organická vrstva promyje 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se získá 4,2 g (85 %) požadované sloučeniny:
'11 NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 7.87 - 7.80 (m, 2 H. Ar), 7,06 (d. J = 8.2 Hz. 1 H, Ar). 6.75 (s, 1 Η. NH). 4. i 2 (kv. J - 7,1 Hz. 2 H). 3.73 - 3,57 (m. 4 H). 3.14 )s. 3 H, N-Mc). 2.56 (t. J = 5,8 Hz, 3 H). 1.22(t, J ~ 7,1 Hz. 3 H).
C) Směs sloučeniny kroku B (3.1 g; 6,24 mmol) a uhličitanu česného (3,05 g; 9,36 mmol) v dimethy Iformamidu (20 ml) se směs míchá 2 hodiny v dusíkové atmosféře. Směs sc zředí ethy lacetátem (90 ml), promyje sc vodou, 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla sc zbytek čistí pomoci velmi rychlé chromatografie za použití směsi hcxan/cthylacctát (1:2)jako eluentu za získání 1,65 g (64 %) požadované sloučeniny.
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm) 8.29 (d, J = 1,8 Hz, 1 11), 7,76 (m, 1 II).
6,90 (d. .1 = 8,6 Hz, 1 H), 4,10 (kv, J = 7,1 liz, 2 II), 4,04 - 3.83 (m. 4 H). 3,32 (s. 3 Η, N Me). 2,77 - 2.56 (m. 2 H). 1.22 (t, J “7.1 Hz. 3 H);
TEC, hcxan/cthylacctát (1:1), Rf - 0,22.
D) Směs sloučeniny z kroku C (100 mg; 0,24 mmol), 2-methylfenyhireafeny laminu (87 mg; 0,36 mmol). PdCE(PPhJ2 (17 mg; 0,024 mmol) a tributylaniinu (89 mg, 0.48 mmol) v dimethylformamidu (10 ml) se pod oxidem uhelnatým (100 kPa) zahřívá 18 hodin na 100 °C. Směs sc zředí ethylacetátem (90 ml), promyje se 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi 5 % methanolu v dichlormethanu jako eluentu za získání 40 mg (30 %) požadované sloučeniny.
]H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9,18 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 11), 8,19 (d, J - 8,5 Hz, 1 11), 7,69 (s, 1 H), 7,41 (d, .1 - 8,3 Hz, 3 H), 7,24 - 7.09 (m. 7 H), 4,10 (l, J = 7.1 Hz, 2 H). 4.01 3,85 (m. 4 H). 3,36 (s. 3 Η, N Me), 2,70 - 2,59 (m. 2 H), 2,24 (s, 3 H, Mc), 1.22 (t, ,1-7.1 Hz, 3 H);
Hmotová spektroskopie, m/z 580 (CmH.mNOo pro M’+Na se požaduje 580);
TEC, 5% methanolu v dichlormethanu, Rr= 0.56.
E) Roztok sloučeniny z kroku D (20 mg. 0.036 mmol) v methanolu (4 ml) se reaguje s vodným roztokem hydroxidu Iithného (2N, 2 ml). Reakční smčs sc míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, potom se okyselí kyselinou trifluoroctovou (do pH _ 5-6). Produkt se čistí na koloně s reverzní fází Vydac C18 (22 mm x 25 cm) za použití lineárního gradientu 15 % acetonitril/voda (OJ % TFA) až 27% acetonitril/voda (0,1 % TFA) při průtoku 10 ml/min za získání sloučeniny BX17 (12,0 mg, 63 % výtěžek po izolaci):
lH NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9,02 (s, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,16 (d. J -8.5 Hz, 1 H), 7,91 - 6.90 (m. 11 H). 4,11 -3,75 (ni, 4 H). 3,33 (s. 3 Η, N Me), 2.88 - 2.56 (tn, 2 H), 2.24 (s, 3 H, Mc);
Imotová spektroskopie, m/z 530 (C>J I?7N5O6 pro M +1 se požaduje 530).
Příprava sloučeniny BX31
A) K roztoku 3 methyl 4-nitrobenz.oové kyseliny (3,62 g. 20 mmol) v pyridinu (48 ml) se při teplotě místnosti přidá bcnzcnsulíbnylchlorid (7,1 g, 40 mmol). Po 10 minutách míchání se smčs
- 59 w. ívíiuov no ochladí na 5 °C a přidá se t—butylalkohol (4,44 g. 60 mmol). Vzniklá směs sc míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Směs se nalije do směsi vody a ledu (200 ml, 1:1). Pevná látka se oddělí a promyje se vodou (30 ml x 3). Po sušení ve vakuu se získá 4,6 g (97 %) esteru.
K roztoku výše uvedeného esteru (3.55 g. 15 mmol) v tctrachlorrncthanu (50 ml) se při teplotě místnosti přidá N-bromsukcinimid (2,94 g. 16,5 mmol) a benzoxylperoxid (182 mg, 0,75 mmol). Směs se zahřívá 18 hodin k varu. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi hcxan/cthylacetát (19:1) jako eluentu za získání
1,90 g (40 %) bromidu ve formě žlutého oleje.
Roztok bromidu (1.57 g, 10 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se při teplotě místnosti během 60 minut přidá k roztoku methylamin (2N v tetrahydrofáránu; 30 ml; 60 mmol). Vzniklá směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti a potom se odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu (80 ml), promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) anasy15 ccným roztokem chloridu sodného (20 ml) a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi licxan/clhylacciát (1:1) jako eluentu za získání 810 mg (61 %) požadované sloučeniny ve formě světle Žlutého oleje:
'H NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm) 8,47 (s, 1 H). 8.15 (d, J= 8,0 Hz, 1 II), 7,69 (d, J ~ 8,0 liz, I H), 4,02 (s, 2 H, Bn), 2.43 (s, 3 11, Me), 1,62 (s. 1 Η, NH), 1,58 (s, 9 H);
TI ,C. hcxan/cthylacetát (1:1). Rf ~ 0,27.
B) Směs sloučeniny z kroku A (810 mg; 3,05 mmol). di-t-butyl dikarbonátu (1,33 g, 6.1 mmol) a triethylaminu (926 mg, 9,15 mmol) v dichlormethanu (50 ml) se míchá 18 hodin, Směs se zředí dichlormethanein (50 ml), promyje sc 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi hexan/cthylacctát (3:1) jako 31) eluentu za získání 1,06 g (95 %) produktu.
Směs chráněného aminu (1.06 g; 2,9 mmol), 10% palladia na uhlí (300 mg, 0,28 mmol) a ethanolu (40 ml) se míchá při teplotě místnosti ve vodíkové atmosféře (0.4 MPa) 18 hodin. Směs se filtruje a filtrát sc odpaří za sníženého tlaku. Zbytek sc čistí pomocí kolonové chromatografie za 35 použití směsi hcxan/cthylacetát (4:1) jako eluentu za získání 620 mg (64 %) požadované sloučeniny:
’H NMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm) 7,72 - 7,65 (m. 2 H. Ar), 6,56 (d,.) - 8,3 Hz, 1 H, Ar), 5,06 (s, 2 Η, NH), 4,32 (s, 2 H. Bn). 2.73 (s, 3 H, Me), 1.55 (s. 9 H). 1.45 (s.9 H);
TLC, hexan/cthylacetál (3:1), Rf - 0,49.
C) Směs sloučeniny z kroku B (0,62 g; 1,84 mmol) a dimethylacetylendikarboxylátu (275 mg;
1,93 mmol) v methanolu (30 ml) se v dusíkové atmosféře zahřívá 1 hodinu k varu. Po odstranění 4? přebytku rozpouštědla se získá 0.85 g (96 %) aduktu. Směs tohoto aduktu (0.85 g. 1.78 mmol).
10% palladia na uhlí (300 mg, 0.28 mmol) a ethanolu (40 ml) se míchá při teplotě místnosti ve vodíkové atmosféře (0,28 MPa) 5 hodin. Směs se filtruje a filtrát sc odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se čistí pomocí velmi rychle chromatografie za použití směsi hexan/ethylacctát (3:1) jako eluentu za získání 0,75 g (88 %) redukovaného produktu.
Roztok výše uvedeného redukovaného produktu (0.99 g, 2,06 mmol) v dichlormethanu (30 ml) se při teplotě místnosti reaguje s kyselinou trilluoroctovou (10 ml). Reakční směs se míchá 2 hodiny. Směs sc odpaří za sníženého tlaku za získání 0,68 g (99 %) požadovaného produktu ve formě soli s kyselinou trifluoroctovou:
-60LZ. Í7OUO7 DO 'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm) 8.57 (s. 1 II. NH). 7.89 (s. 1 H, Ar). 7,79 (d, J = 9,0 Hz. I 11. Ar), 6,76 (d, J - 8,8 Hz. 1 H, Ar). 6.34 (d, J = 8,6 Hz. I 11, NH), 4,64 (ni. 1 H). 3,64 (s, 3 H, Me). 3,61 (s, 3 H, Me), 3,05-2,87 (m. 2 H). 2.43 (s. 3 H. N-Me);
Hmotová spektroskopie, m/z 325 (C^H^jNLOf., pro M+l sc požaduje 325):
TLC, 10 % methanolu v dichlormethanu. Rf= 0.13.
D) Směs sloučeniny z kroku C (200 mg; 0,62 mmol) a methoxidu sodného (0,5N; 2,47 ml:
1.23 mmol) v methanolu (30 ml) sc v dusíkové atmosféře zahřívá 5 hodin k varu. Po ochlazení na 0 °C se přidá kyselina chlorovodíková (1N, 2 ml). Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi methanol/dichlomicthan (1:9) jako rozpouštědla za získání 110 mg (82 %) požadované kyseliny ve formě světle žluté pevné látky:
'Η NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm) 7,58 (s, 1 H. Ar), 7,53 (d. J = 8,5 Hz.
H, Ar). 6.62 (s. 1 II. NH), 6,56 (d, .1 - 8,5 Hz. 1 H. Ar), 5,45 (d, J - 16,4 Hz, I H, Bn), 5.16 (s, 1 II). 3.92 (d, J - 16,6 Hz. 1 H. Bn), 3,59 (s. 3 H. Mc), 2,90 (s. 3 H, Me). 2.76 (m. 2 II);
Hmotová spektroskopie, m/z 293 (Ci4Hlř,N2O5 pro M+l se požaduje 293):
TLC, 10 % methanolu v dichlormethanu, R| = 0,47.
E) Kyselina z kroku D (45 mg. 0,154 mmol) v dimcthy I formám idu (1,0 ml) se 15 minut aktivuje EDC.HCI (35,5 mg, 0.185 mmol). Aktivovaná kyselina se při teplotě místnosti 72 hodin reaguje s 2-methylfenylureafenylamincm (41 mg. 0.169 mmol). Směs se zředí cthylacctátem. promyje se 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem livdrogenuhličilanu sodného a suší se nad síranem sodným. Organický roztok sc odpaří za sníženého tlaku za získání požadované sloučeniny ve výtěžku 82 %:
'li NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9.70 6.40 (m, 15 II). 5,50 (m, I H, Bn), 5.11 (m, 1 H), 3,90 (ni. I H, Bn), 3.60 (s, 3 II, OMe). 2,92 (s, 3 H, Me), 2.81 - 2.48 (ni. 2 11),
2.23 (s. 3 H, Me);
Hmotová spektroskopie, m/z 538 (C28H29N5O5: M+Na se požaduje 538).
E) Roztok sloučeniny z kroku E (65 mg. 0.13 mmol) v methanolu (3 ml) se reaguje s vodným roztokem hydroxidu 1 i t líného (2 N, 1 ml). Reakční směs sc míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, potom se okyselí kyselinou trifluoroctovou (do pH - 5 6). Produkt se čisti na koloně s reverzní fází Vydac CIS (22 mm x 25 cm) za použití lineárního gradientu 15% acetonitrii/voda (0.1 % TFA) až 32% acetonitril/voda (0.1 % TFA) při průtoků 10 ml/min za získání sloučeniny BX31(15 mg, 23 % výtěžek po izolaci):
'li NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm) 9,73 (s, 1 11), 8,94 (s, I H), 7.89-6,40 (m. 13 H). 5,52 (d. J = 16,6 Hz, I H). 5.11 (ni, 1 H), 3,88 (d. J - 16.6 Hz, 1 H), 2.94 (s, 3 H, NMc), 2,82 - 2,52 (m, 2 H), 2,23 (s, 3 H. Me);
Hmotová spektroskopie, m/z 502 (CztHitNsCL pro Μ H Se požaduje 502).
Příprava sloučeniny BX36
A) K roztoku 4--methy 1-3-nitrobcnzoovc kyseliny (10 g, 55 mmol) v pyridinu (100 ml) se při teplotě místnosti přidá benzensiilfonylchlorid (19,4 g. 110 mmol). Po 10 minutách míchání se směs ochladí na 5 °C a přidá se t-butylalkohol (12,2 g, 165 mmol). Vzniklá směs se míchá hodiny při teplotě místnosti. Směs se nalije do směsi vody a ledu (500 ml; 1:1). Pevná látka sc oddělí a promyje vodou (30 ml x 3). Po sušení za vakua se získá 12,5 g (96 %) esteru.
-61 v/ i7ouo7 du
K roztoku výše uvedeného esteru (7.1 g. 30 mmol) v tetrachlomiethanu (50 ml) sc při teplotě místnosti přidá N-bromsukcinimid (5.88 g, 32 mmol) a benzoxylperoxid (727 mg, 3 mmol). Směs se zahřívá 18 hodin k varu. Po odstranění přebytku rozpouštědla sc směs čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi hexan/cthylacctát (19:1) jako eluentu za získání 8,0 g (91 %) bromidu ve formě žlutého oleje. Roztok bromidu (3,16 g, 10 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se při teplotě místnosti během 60 minut přidá k roztoku methylaminu (2N v tctrahydrofuranu: 30 ml; 60 mmol). Vzniklá směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti a odpaří se ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu (80 ml), promyje sc nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (20 ml) a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla sc zbytek čistí pomoci velmi rychle chromatografie za použití směsi hcxan/cthylacetát (1:1) jako rozpouštědla za získání 1.43 g (54 %) požadovaného aminu ve formě světle žlutého oleje:
’H NMR (deuterochloroform. 300 MHz. ppm) 8.47 (s. I II), 8.15 (d. J- 8,0 Hz. I H), 7.69 (d. J _ 8.0 Hz, I H). 4.02 (s. 2 H. Bn). 2.43 (s. 3 H. Me). 1,62 (s, I H, Nil). 1,58 (s, 9 H);
TLC, 10 % methanolu v dichlormethanu. Rr= 0.49.
B) Směs sloučeniny z kroku A (1,09 g: 3,45 mmol). di l -blityIdikarbonátu (1.5 g, 6,9 mmol) a triethylaminu (1,05 g, 10,35 mmol) v dichlormethanu (50 ml) sc 18 hodin míchá. Směs se zředí dichlormethanem (50 ml), promyje se 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného a suší se nad síranem sodným. Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi hcxan/cthylacetát (3:1) jako eluentu za získání 1,16 g(92 %) požadovaného produktu.
Směs chráněného aminu (1,16 g; 3.17 mmol). 10% palladia na uhlí (300 mg, 0,28 mmol) a etlianolu (40 ml) se míchá 18 hodin při teplotě místnosti ve vodíkové atmosféře (0,4 MPa). Směs se filtruje a filtrát sc odpaří za sníženého tlaku. Zby tek se čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsi hcxan/cthylacetát (4:1) jako eluentu za získání 0.78 g (73 %) požadované sloučeniny:
H NMR (deuterochloroform. 300 MHz. ppm) 7,25 - 7.0 (m, 3 H, Ar). 4.60 (s. 2 Η. NH), 4,34 (s, 2 11. Bn). 2,71 (s, 3 H, Me), 1,54 (s. 9 H). 1.45 (s. 9 11);
TLC, hexan/ethylacetát (4:1). R. - 0.29.
C) Směs sloučeniny z kroku B (0.78 g; 2,32 mmol) a dimethylacetylendikarboxylátu (363 mg; 2,55 mmol) v mel hano lu (30 ml) sc v dusíkové atmosféře zahřívá 2 hodiny k varu. Po odstranění přebytku rozpouštědla se získá 1.05 g (95 %) aduktu. Směs tohoto aduktu (1,05 g. 2,2 mmol). 10% palladia na uhlí (300 mg. 0,28 mmol) a ethanolu (40 ml) se míchá při teplotě místnosti ve vodíkové atmosféře (0.4 MPa) 6 hodin. Směs se filtruje a filtrát sc odpaří za sníženého tlaku za získání 0.99 g (94 %) požadovaného produktu.
Roztok výše uvedeného redukovaného produktu (0.99 g, 2,06 mmol) v dichlormethanu (30 ml) sc při teplotě místnosti reaguje s kyselinou triíluoroctovou (15 ml). Reakční směs se míchá 4 hodiny. Směs se odpaří za sníženého tlaku za získání 0,90 g (99 %) požadované sloučeniny ve formě soli s kyselinou triíluoroctovou:
'11 NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz. ppm) 8,63 (s, 1 H), 7.37 - 7,26 (m, 3 H, Ar), 5,96 (d, J = 8.8 Hz, IH, NH), 4,53 (m, IH). 4,15 (m, 2H, Bn), 3,64 (s, 3 H. Me). 3,62 (s, 3 H, Mc), 3,04 2,85 (m. 2 11). 2.57 (s. 3 H. Me);
TLC. 10 % methanolu v dichlormethanu, Rt - 0,22.
-62 L/, i'MUO7 DO
D) Směs sloučeniny z kroku C (550 mg; 1.70 mmol) a mcthoxidu sodného (0.5 N; 6,8 ml; 3,4 mmol) v methanolu (60 ml) se v dusíkové atmosféře zahřívá přes noc k varu. Po ochlazení na 0 CC se přidá kyselina chlorovodíkové (IN. 5 ml). Po odstranění přebytku rozpouštědla se zbytek čistí pomocí velmi rychlé chromatografie za použití směsí mcthanol/dichlormethan (1:9) jako 5 rozpouštědla za získání 200 mg (40 %) požadované kyseliny ve formě světic žluté pevné látky.
'H NMR (pcrdeulerodiniethylsulfoxid, 300 MHz. ppm) 7,18 (s, 1 H, Ar), 7.04 (s. 2 H, Ar), 6,17 (s, 1 H. NH), 5,47 (t. J = 6,6, I H). 5,07 (m. 3 H, OMc). 3,89 (d. J - 6,6 Hz, 2 H), 3,58 (s, 3 H. Me), 2,89 (s. 3 H. Me), 2,83 - 2,60 (s. 2 H);
Hmotová spektroskopie, m/z 291 (CuH^NiO? pro M-l se požaduje 291);
TLC; 10 % methanolu v dichlormethanu, Rt-~ 0.22.
E) Kyselina z kroku D (50 mg, 0,17 mmol) v d i methyl formani idu (0,5 ml) se 15 minut aktivuje s EDC (39 mg, 0,204 mmol). Aktivovaná kyselina sc reaguje s 2-mcthylfenylureafenylaininem (45 mg, 0,188 mmol) 96 hodin při teplotě místnosti. Směs sc zředí ethylacetátcm, promyje sc 5% kyselinou citrónovou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu draselného a suší se nad síranem sodným. Organický roztok se odpaří za sníženého tlaku za získáni požadované slouče20 niny vc výtěžku 10 %:
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm) 9.97 - 8.57 (m. 2 HE 7.95- 6.50 (m, 12 H). 6,10 (m, IH), 5.50 Jn. I H. Bn). 4,98 (ni, 1 H),3,90(m. 1 II, Bn).3.58(s,3 H. OMc).
2,90 (s, 3 H, Me), 2,89 - 2,55 (m. 2 H), 2.20 (s. 3 H, Me);
Hmotová spektroskopie, m/z 538 (CNsIEqNsO? pro M+Na sc požaduje 538).
F) Roztok sloučeniny z kroku E (9,0 mg. 0,017 mmol) v methanolu (3 ml) se reaguje s vodným roztokem hydroxidu lithného (2N. 1 ml). Reakční směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, 30 potom se okyselí kyselinou trifluoroctovou (do pH - 5 6). Produkt sc čistí na koloně s reverzní fází Vydac Cl8 (22 mm x 25 cm) za použití lineárního gradientu 15 % acetonitril/voda (0,1 % TFA) až 32% acetonitril/voda (0.1 % TFA) pří průtoku 10 ml/min za získání sloučeniny BX36 (3,0 mg, 35 % výtěžek po izolaci):
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9,98 (s, 1 H), 8,98 (s. I H). 7.89- 6,92 (m, 12 H), 6,06 (s. 1 II), 5,48 (d. J 6,6 Hz, 1 H). 5,03 (m, 1 H). 3,89 (d, J ™ 6,6 Hz, 1 H), 2,91 (s. 3 H. NMe), 2,75 - 2,53 (m, 2 H), 2,23 (s, 3 H, Me);
Hmotová spektroskopie, m/z 502 (C^lEjNsOs pro M‘ + l se požaduje 502).
Příprava sloučeniny BX47
A. Suspenze anhydridu N-methylisatoové kyseliny (10,12 g, 57,15 mmol) a glycinu (4.29 g, 57.17 mmol) v ledové kyselině octové (125 ml) se 3,5 hodiny zahřívá na 120 °C. Reakční směs 45 se potom odpaří vc vakuu za vzniku hustého oleje a přidá se 100 ml etheru. Vzniklá pevná látka se odfiltruje a suší na vzduchu za získání 8,80 g žlutohnědé pevné látky. Pevná látka se I hodinu suspenduje v chloroformu (250 ml). Roztok se filtruje a odpaří se ve vakuu za získání 7,43 g (68 %) požadovaného produktu ve formě žlutohnědé pevné látky:
Hmotová spektroskopie (ESP+) 190,9 m/z;
'li NMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm) 3,38 (s, 3H), 3,78 - 3,83 (ni. 211), 6.85 (široký t, 1H), 7,20- 7,34 (111, 211),7.52 7.58(m. IH). 7,88 (dd, J - 7.81. 1,65 Hz, IH).
- 63 V/ ώΖΟυΟΎ DO
B. Sloučenina z kroku A (1,52 g, 8,01 mmol). bezvodý fluorid česny (1.22 g. 8.03 mmol), tetracthyiortosilikát (1,79 ml. 8.03 mmol) a ethylakrylát (0.96 mí. 8,86 mmol) sc 26 hodin při teplotě místnosti suspenduje v bezvodéni tetrahydroťuranu (8,0 ml). Reakční směs sc filtruje přes křemelinu, filtrát se odpaří ve vakuu a vzniklá pevná látka se čistí pomocí kolonové chromatografie (chloroform 6 10:1 chloroform/ether) za získání 1.63 g (výtěžek 70%) požadovaného produktu ve formě světle žluté pevné látky:
Imotová spektroskopie (ESP+) 291 m/z;
Ή NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 1.24 (t. J= 7,12 Hz. 3H). 2.60-2,78 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3,94 (ABkv, J = 14.86 Hz, J = 52.41 Hz. 2H). 3.92 (t, J 7,01 Hz. 2H), 4,13 (kv, J - 7,10 Hz. 2H), 7.17 (d, J - 8.07 Hz. 1H). 7.29 (d, J 8.57 Hz. 1H), 7,50 (dt, J = 7,78. 1.67 Hz, IH), 7,84 (dd. J = 7,83. 1.63 Hz, IH).
C. Sloučenina z kroku B (1,61 g. 5.55 mmol) se rozpustí v ledové dýmavé kyselině dusičné (7.4 ml). Reakční roztok se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti a po 2 hodinách se nalije do směsi nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a ledu (100 g). pH suspenze se upraví na neutrální pomocí pevného hydrogenuhličitanu sodného. Vodný roztok se extrahuje ethyiacetátem (4 x 100 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodou (1 x 100 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (I x 100 ml), suší se nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání 1,83 g (výtěžek 98 %) požadovaného produktu ve formě žlutého oleje:
Hmotová spektroskopie (ESP+) 336. 358 m/z:
'H NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 1,25 (t. .1 = 7,10 liz, 3H). 2.62 - 2.81 (m. 2H). 3.42 (s. 3H). 3,90- 3.95 (m, 2H). 4,01 (s. 2H). 4.13 (q, J = 7,17 Hz. 2H). 7,32 (d. J -9.05 Hz, IH), 8,33 (dd. J = 8.97, 2,70 Hz. III). 8,73 (d, J - 2.71 Hz, lil).
D. Suspenze sloučeniny z kroku C (1.82 g. 5.44 mmol) a < 10 mikronového železného prášku (0,91 g, 16,99 mmol) ve směsi 2:1 ethanol/voda (54 ml) se zahřeje k varu a přidá se ledová kyselina octová (0,63 ml, 11,01 mmol). Po 2 hodinách se horká reakční směs filtruje přes křemelinu a filtrační koláč se promyje horkým ethanolem (3 x 50 ml). Filtrát se odpaří ve vakuu, rozpustí se v ethylacetátu (125 ml), promyje se nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 40 ml), vodou (I x 40 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1 x 40 ml), suší se nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání žluté pevné látky. Pevná látka se rozpustí ve směsi 1:1 chloroforni/tclrahydrofuran. přefiltruje sc přes lůžko ze silikagelu a odpaří se ve vakuu za získání 20 g (výtěžek 72 %) požadovaného produktu vc formě žluté pěny:
Hmotová spektroskopie (ESP+) 306,1, 328,2 m/z;
'11 NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm) 1.21 (t, J = 7,13 Hz. 3H), 2,57- 2,76 (ιη. 2H). 3,27 (s, 3H). 3.63 (široký s. IH). 3.87 (t, .1= 7.25 Hz, 2H). 3,89 (ABkv. J = 14,69 Hz, J- 77,45 Hz. 2H). 4,10 (kv. J = 7.12 Hz, 2H), 6,79 (dd, J= 8,84, 2,56 Hz, IH). 6,95 (d.J = 8.66 liz. III). 7.07 (d. J = 2.56 Hz, IH).
E. 4-o-tolylurcidofenyloctová kyselina (0.57 g, 2.00 mmol), EDC.HCI (0,43 g. 2,24 mmol) a sloučenina z kroku D (0,61 g. 2.00 mmol) sc při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře rozpustí v bezvodem dimethylformamidu (10 ml). Po 3 dnech míchání se reakční směs rozloží vodou (30 ml). Vzniklá suspenze se míchá 24 hodin a filtruje se. Žlutohnědá sraženina sc promyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 20 ml), 10% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 20 ml) a vodou (2 x 20 ml) a suší sc vc vakuu za získání 0.76 g (výtěžek 66 %) požadovaného produktu ve formě žlutohnědé pevné látky:
Hmotová spektroskopie (ESP+) 572.4. 594,5 m/z:
-64CZ 298089 B6 'H NMR (perdeuteroaceton, 300 MHz, ppm) 1,19 (t. .1 = 7,1 7 Hz, 3H). 2.25 (s, 3H), 2,62 - 2.68 (m, 2H), 3.31 (s, 3H). 3.64 (s. 2H), 3.78 - 3,96 (m. 2H), 3.96 (ABkv, J = 14,87 Hz, J 86.48 Hz, 2H), 4,07 (kv. J - 7,08 Hz, 211), 6,94 (dd. J - 8.42. 7,51 Hz. 1H). 7.13 (dd. J = 7.90, 5.36 Hz, 5 2H). 7.27 - 7.32 (m. 3H). 7.47 - 7.59 (m. 311). 7.91 - 7.94 (m, 3H). 8,40 (s, 1H), 9,46 (s, I H).
F. LOM trímethylsilanolát sodný v dichiormethanu (4,0 ml, 4,0 mmol) se při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře přidá k roztoku sloučeniny z kroku E (0,57 g. 0,99 mmol) v bczvodcrn tetrahydrofuranu (100 ml). Po 5 hodinách míchá se reakční směs filtruje a sraženina se promyje 10 tetrahydrofuranem. Sraženina se 22 hodin suspenduje ve směsi 1:1 ledová kyselina octová/ether (10 ml), filtruje sc, promyje se směsí 1:1 ledová kyselina octová/ether (.3 x 10 ml) a etherem a sučí se na vzduchu za získání 0.42 g (výtěžek 78 %) sloučeniny BX47 ve formě bílé pevné látky:
i? Hmotová spektroskopie (ESP+) 544.2, 566,2 m/z:
'11 NMR (perdeuteroaceton, 300 MHz, ppm) 2.14 (s. 311), 2,56 (t, J = 7.10 Hz, 1H), 2,57 (t,.l -7,50 Hz, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,53 (s, 2H), 3,72 - 3,77 (m, 211), 3,87 (ABkv, .1 = 15.13 Hz. J-75.08 Hz. 2H), 6.82 - 6,85 (m, 1H), 7.01 - 7,05 (in. 2H). 7,27 (ABkv. J = 8,59 Hz.
J = 60,76 Hz, 4H). 7.16 - 7.21 (m, 1H), 7,80 - 7,84 (m, 3H), 8,28 (s, IH), 9.34 (s. 1H).
Příprava sloučeniny RX18
Λ. Triethylamin (0,35 ml, 2,51 mmol) sc v dusíkové atmosféře přidá k suspenzi ,,-brom-325 nitrotoluenu (0,22 g, 1,04 mmol) a β-cthylalanin.HCI (0,19 g. 1.24 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (5 ml). Reakční směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti a při 60 °C 18 hodin, ochladí se na teplotu místnosti, zředí se ethylacctátcm (50 ml), promyje se vodou (1x15 m), 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (1 x 15 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1x15 ml), suší sc nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání 30 žlutého oleje. Olej se čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie (2:1 ethylacetát/hexan) za získání 0,22 g (výtěžek 84 %) požadované sloučeniny ve formě žlutého oleje:
'H NMR (dcuterochloroform. 300 MHz. ppm) 1.24 (t. J - 7.16 Hz, 3H). 1,68 (široký s, lil), 2,52 (t, J - 6.30 Hz. 2H). 2.88 (t. J = 6.31 Hz. 211). 3.89 (s. 211). 4.13 (kv. J - 7.14 Hz. 2H). 7.47 35 (I. J = 7.89 Hz. III). 7.66 (d. J - 7.52 Hz. IH). 8,09 (d. .1 - 8.12 liz. III). 8.02 (s. IH).
B. Roztok sloučeniny z příkladu Λ (0,072 g, 0.28 mmol), bezvodého pyridinu (0,035 ml,
0.43 mmol) a benzoylchloridu (0,050 ml, 0,43 mmol) se míchá 2 hodiny při 0 °C. Reakční roztok se potom zředí etliylacetátem (14 ml), promyje se 5% roztokem kyseliny citrónové (2x5 ml), 4d 10% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 5 ml), vodou (1x5 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1x5 ml), suší se nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání hustého oleje. Olej se čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie (95:5 chloroform/ether) za získání 0.089 g (výtěžek 92 %) požadovaného produktu ve formě bezbarvého oleje:
'H NMR (dcutcrochloroform. 300 MHz, ppm) 1,23 (široký s, 3H). 2,50 (široký s, III), 2,72 (široký s, IH), 3.65 (široký s, 2H), 4,10 (široký s, 211), 4,73 (široký s, 2H). 7.40 (s. 5H). 7.53 (t,,1 = 7,81 Hz, IH), 7,60 (široký s. IH), 8,00 (široký s. IH). 8,14 (d. J = 7,13 Hz, IH).
C. Suspenze 10% palladia na uhlí (0,016 g, 0.15 mmol) a sloučeniny z kroku B (0,086 g, 0.25 mmol) ve směsi 2:1 ethanol/cthylacetál (1.8 ml) se 18 hodin hydrogenujc (0,41 MPa, fL) při teplotě místnosti. Reakční směs sc potom filtruje přes křemelinu. důkladně se promyje ethylacetátcm. Spojené promývací roztoky se odpaří ve vakuu za získání 0,80 g (výtěžek 95 %) požadovaného produktu ve formě oranžového oleje:
Hmotová spektroskopie (ESP+) 327 m/z:
Ή NMR (deuterochloroform. 300 MHz. ppm) píky jsou velmi široké, ale odpovídají požadovanému produktu.
D, Roztok produktu z kroku C (0.077 g. 0.24 mmol), 4-o-toIylurcidofenyloctové kyseliny (0,075 g. 0,26 mmol). TBTU (0.089 g. 0.28 mmol) a diizopropylethy laminu (0,046 ml, 0,26 ml) v NMP (0,60 ml) se při teplotě místnosti 3 dny míchá v dusíkové atmosféře. Potom sc zředí ethylacctálem (25 ml), promyje se 5% vodným roztokem kyseliny citrónové (2 x 6 ml), 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x6 ml), vodou (1x6 ml), nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1x6 ml), suší se nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání žlutého oleje. Olej se čistí pomoci velmi rychlé kolonové chromatografie (99:1 chloroform/methanol až 98:2 chloroform/methanol) za získání 0.11 g (výtěžek 78 %) požadovaného produktu ve formě bílého skla:
Hmotová spektroskopie (E$P+) 593, 615 m/z:
’H NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) píky jsou velmi široké, ale odpovídají požadovanému produktu.
E. Roztok produktu z kroku D (0,047 g. 0,079 mmol) a hydrát hydroxidu lithného (0,021 g. 0,51 mmol) ve směsi 2: i tetrahydrofuran/voda (3 ml) se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti, Reakční směs se polom rozloží ledovou kyselinou octovou a odpaří sc ve vakuu za vzniku pevné látky. Pevná látka se potom čistí pomocí velmi rychlé kolonové chromatografie (98:1:1 chloroform/methanol/kyselina octová - 94:5:1 chlorofomi/mcthanol/kysclina octová) a po lyofilizaci sc získá 0,037 g (výtěžek 82 %) sloučeniny RX18 ve formě bílého skla:
Hmotová spektroskopie (ESP+) 565, 587 m/z;
H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm) 2.23 (Γ, 3/). 2,48 2,59 (in. 2/), 3,31 3,70 (m. 4/), 4,44 (F. I/). 4.66 (F, I/), 6.84 - 7.56 (m, 16H), 7.83 (d. J = 7,55 Hz. 1H), 7,88 (s. III), 8,89 (s, I Η). 10,17 (s. 111).
Obecný postup pro přípravu l,4-benzodiazcpin-2,5-dionů na pevné fázi.
Analoga β alaninu
A. Wangova pryskyřice s navázaným β-alaninem chráněným skupinou Fmoc (7,0 g, 2,8 mmol) se 15 minul reaguje s 20% piperidinem v dimethylformamidu (75 ml). Pryskyřice sc potom promyje dimethylformamidem (3 x 75 ml), mcthanolem (1 x 75 ml) a dichlormethanem (3x75 ml).
B. K pryskyřici se přidá roztok 2 fkior-5-nitrobenzoové kyseliny (5,18 g. 28,0 mmol) a diizopropylkarbodiimidu (4,4 ml, 28.0 mmol) v N-mcthylpyrrolidinonu (50 ml). Pryskyřice se mechanicky třepe 5 hodin, promyje sc N-mcthylpyrrolidinonem (3 x 10 ml) a dichlormethanem (3 x 75 ml).
C. Pryskyřice sc rozdělí do 14 stejných (hmotnostně) dílů a umístí se do oddělených reaktorů Do každého reaktoru s pryskyřicí se přidá 0.20M roztoku (10 ml) primárního aminu v N methyl pyrrolidinonu. Některými příklady primárních aminů použitých v tomto kroku jsou: benzylamin fenethylamin, sek-buty lamin, tetrahydrofurylamin, inethylester glvcinu, ethylester β—alaninu methylesler valinu. t-butylester β-alaninu, 2-amino-1-methoxypropan, izobutylamin, (amino methyl)cyklopropan. 4-amino-l-benzylpiperidin. 4-fluorbenzylamin a cyklohexylamin. Všech ny pryskyřice se mechanicky míchají 20 hodin. Pryskyřice se promyjí N-mcthylpyrrolidinonem (3 x 10 ml) a dichlormethanem (2 x 10 ml).
-66CZ 298089 B6
D. Každá pryskyřice se 1 hodinu při 80 °C reaguje s 2.0g (8.86 mmol) dihydrátu chloridu cínatcho v 10 ml směsi 1/1 cthanol/N-mcthylpyrrolidinon. Pryskyřice se promyjí N-mcthylpyrrolidinonem (2 x 10 ml), 0.5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného ve směsi 1/1 voda/N- methylpyrrolidinon (5 x 10 ml), N-methylpyrrolidinonem (5 x 10 ml) a dichlormethanem.
E. Ke každé pryskyřici se přidá směs 4-(2-tolylureido)fenyloctové kyseliny (570 mg. 2,0 mmol) a diizopropylkarbodiimidu (0.315 ml, 2 mmol) v 5 ml N methylpyrrolidinonu. Pryskyřice se 5 hodin mechanicky protrepávají. Polom se každá pryskyřice promyje N-methyl- io pyrrolidinonem (3 x 10 ml) a dichlormethanem (2x10 ml).
F. Do každého reaktoru s pryskyřicí se přidá 0.2M roztok bromacctylbromidu vN-methylpyrrolidinonu (10 ml) a diizopropylethylamin (0,350 ml. 2.0 mmol). Po 5 hodinách mechanického třepání sc každá pryskyřice promyje N-methylpyrrolidinonem (5 x 10 ml).
G. Ke každé pryskyřici se přidá 0.2M roztok l,8-diazabicyklo[5.4,01undec-7-cnu (10 ml). Pryskyřice sc mechanicky třepou 5 hodin, promyjí sc N-methylpyrrolidinonem (3 x 10 ml), dichlormethanem (3 x 10 ml) a potom se suší.
2o H. Ke každé pryskyřici se přidá roztok kyselina trifluoroctová/voda 9,5/0,5 (5,0 ml). Pryskyřice se 30 minut protřepávají. Pryskyřice se filtrují. Každý roztok kyseliny se umístí do zvláštní 50 ml odstřeďovací zkumavky Do každé zkumavky se přidá dicthylcthcr (30 ml). Každá zkumavka se odstřeďujc 5 minut. Ether se oddělí. Surové produkty (kuličky) se čistí pomocí RP-HPLC za získání odpovídajících l,4-benzodiazepin-2.5-dionů. Příklady: BX58, HS, m/z 620; BX52. HS, m/z 634; BX49, HS, m/z 586; BX40, HS. m/z 612; BX55, HS. m/z 614; BX39, HS, m/z 602; BX57, HS, m/z 602; BY84. HS, m/z 630; BX63. HS, m/z 644; BX53. HS, m/z 586; BX54, HS. m/z 602; BX46, HS, m/z 584; BX43, HS, m/z 703; BX48, HS. m/z 638.
Analoga DL-3-aminobutanové kyseliny
Přesně stejným postupem jako jc popsáno pro analoga β-alanin se reaguje s Wangovou pryskyřicí obsahující Fmoc-DL-aminobutanovou kyselinu (0,476 g, 0.20 mmol). Poměr pryskyřice k rozpouštědlům a činidlům je úměrný výše uvedenému postupu. V kroku C sc k pryskyřici přidá 0,20M roztok t-butylesteru β-alaninu (10 ml) v N-methylpyrrolidinonu. Po kroku 11 sc 35 získá sloučenina BY76.1IS. m/z 616.
Obecný postup pro přípravu peptoidů
Postup A
1. K 4-nitrofenylizokyanátu (60,0 mmol) v dichlormethanu (100 ml) se při teplotě místnosti přidá anilin nebo substituovaný anilin (60,0 mmol) a reakční směs sc míchá při teplotě místnosti 1,5 hodiny. Pevný močovinový produkt se filtruje, promyje se dichlormethanem (3 x 100 ml) a etherem (3 x 100 ml). Potom sc močovinový produkt suší na vzduchu.
Prekurzor pro E-l: Výtěžek: 94 ‘HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm): 8.52 (d, IH), 8,2 - 8.4 (m, 2H). 7,78 7,9 (m, 4H), 7,06 7,35 (in, 111), 2.35 (s. 3H); hmotová spektroskopie (ΓΛΒ): 272.2.
5d Prekurzor pro E-2. Výtěžek: 95 %: 'li NMR (perdeuteromethanol, 300 MHz, ppm) 8.4 (d, 2H). 7.86 (d. 2H), 7,65 (d. 2H), 7,51 (t, 2H), 7,35 (t, 1H); hmotová spektroskopie (FAB): 258.
2. K produktu kroku A (15,0 mmol) v ethanolu (30 ml), sc přidá dihydrát chloridu cínatcho (45,0 mmol, Aldrich) a vzniklá směs se zahřívá na 75 °C (za použití olejové lázně) 2.5 hodiny.
Reakční směs se ochladí pomocí ledové lázně a roztok se okyselí 1N kyselinou chlorovodíkovou.
-67CZ 298089 B6
Okyselená reakční směs se promyje ethylacctátem (3 x 100 ml). Vodné extrakty se spojí a pH se pomocí nasyceného roztoku uhličitanu draselného upraví na 10 až 12. Tento roztok se extrahuje ethylacetátcm (3 x 100 ml). Ethylacetátové extrakty se spojí a promyjí se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší se nad bezvodým síranem horečnatým. Po filtraci a odpaření ve vakuu se získá čistý produkt.
E-l: Výtěžek: 85 %; Ή NMR (pcrdeuterodimethylsulíbxid. 300 MHz. ppm): 8.91 (s. IH). 8.09 (5. III). 7.92 (d, IH), 7.15 - 7.26 (m.4H). 6,98 (t. IH). 6,6 (d. 211). 4.82 (s, 2H), 2.32 (s. 3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 241.
E—2: Výtěžek: 88%; 'H NMR (perdeutcromethanol, 300 MHz. ppm): 7,58 (m. 2H). 7.45 25 (t. 2H). 7,32 (d, 2H), 7,27 (t, 1H), 6,88 (d, 2H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 227.
Postup B
1. pil roztoku dihydrochloridu 4.4 - bipiperidinu (5,0 g. 20 mmol) v 20 ml deionizované vody sc pomoci 5N roztoku hydroxidu sodného upraví na 8-9. Potom se roztok zředí 240 ml ethanolu a míchá se při teplotě místnosti, potom se najednou přidá di-t-butyldikarbonát v 160 ml ethanolu. Pomocí periodického přidávání 5N hydroxidu sodného sc pH udržuje mezi 8 9. Po 3 hodinách při teplotě místnosti se roztok okyselí IN kyselinou chlorovodíkovou. Po promytí ethylacetátcm (2 x 100 ml) se pl I vodného roztoku upraví na 7 a potom se promyje ethylacetátcm a tak sc extrahuje mono-Boc produkt. Organická vrstva se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 100 ml), nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (2 x 100 ml), a suší se nad síranem horečnatým. Po odpaření roztoku ve vakuu se získá monoBoc sekundární amin.
B-l; *H NMR (perdcuteromcthanol, 300 MHz, ppm): 4,3 (d. 211), 3,25 (d, 2H), 2,9 (t 2H). 2,73 (t, 2H). 1,93 (d, 4H). 1,65 (s,9H), 1,22 - 1,56 (m,6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 268,9;
HPLC (Gr A: 5% B až 95% B v 15 min; C18 kolona, 100 A; pufr B: 0.1% kyseliny trifluoroctové v acctonitrilu; pufr A: 0,1 % kyseliny trifluoroctové v HPLC vodě): 5,67 min.
Postup C
I. K roztoku primárního aminu (1,0 mmol, získáno v postupu A) nebo k roztoku sekundárního aminu (1,0 mmol, získáno z postupu B) v NMP (5 ml), se přidá LDC (1,1 mmol) a potom se při teplotě místnosti rychle přidá kyselina bromoctová (1,0 mmol). Reakční směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti, extrahuje se mezi ethylacetát (15 ml) a dcionizovanou vodu (10 ml). Organická vrstva sc promyje 5% roztokem kyseliny citrónové (2 x 10 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 10 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml). Organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání bromidu jako produktu:
F-l: Výtěžek; 84 %; 'H NMR (perdeutcromethanol, 300 MHz, ppm): 7,83 (d, IH), 7,57 7.73 (m. 4H), 7.4 (m, 2H), 7,34 (l, III), 4,39 (s. 2H). 2,49 (s, 3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 362.
F 2: Výtěžek: 89%; ’ΐΐ NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm); 7,44- 7.61 (3m,6H), 10 7,41 (t, 2H), 7,02 (t. lil). 3,25 (s, 2H);
-68CZ 298089 B6
Hmotová spektroskopie (FAB): 348.
F 3: Výtěžek: 6í %: ‘11 NMR (perdeuterochloroform, 300 MHz. ppm rotamery): 4,53 (d, 1H), 3,92 - 4.12 (m, 4H), 3,82 (d, 1H), 3,0 (t, IH). 2,4 - 2,7 (m. 311). 1.55 1.8(m.4H). l.4(s,9H).
0,98 - 1,33 (3m, 6H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 382 (Na adukt).
2, K roztoku aminu (5 mmol) v NMP (4 ml) sc při 0 °C přikape roztok bromidovcho produktu z kroku Cl (1,0 mmol) v NMP (2 ml). Reakční směs se míchá 30 minut při 0 °C. potom se extrahuje mezi ethylacctát (15 ml) a deionizovanou vodu (10 ml). Organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 10 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml). Organická vrstva se suší nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání sekundárního aminu jako produktu.
G-l: Výtěžek: 78 %; 'H NMR (perdeuteromelhanol, 300 MHz. ppm): 7,55 - 8,0 (široký m, 6H), 7,4 (m. 211), 7.24 (m, IH). 3.61 (s, 2H), 2,9 (t, 2H). 2.52 (s. 3H), 1,9 (m. 1H), 1,69 (m. 211), 1,23 (d, 6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 369,
G-2; Výtěžek: 80%: ’H NMR (perdeutcromethanol, 300 MHz. ppm): 7,55 - 7.72 (širokým. 611), 7,49 (t, 2H). 7,21 (t, 1H). 3.59 (s. 211). 2,84 (t, 2H), 1,89 (m, IH). 1,64 (kv. 2H), 1,12 (d, 611);
Hmotová spektroskopie (FAB): 355.
G-3: Výtěžek: 75 %: (perdculeromethanol, 300 MHz, ppm).· 7.55- 7,72 (široký m, 611), 7,49 (ni.2H), 7,21 (t, 1H). 3,59 (s, 2H), 2,95 (t, 2H), 2.8 (t, 2H), 2.5 (s, 3H). 2,29 (s, 3H). 2,05 (m, 2H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 387.
3. K roztoku sekundárního aminu (1,0 mmol) z kroku C.2 v NMP (3 ml), se při 0 °C přidá EDC (1,1 mmol) a potom se rychle přidá kyselina bromoctová (1,0 mmol). Reakční směs sc 3 hodiny míchá při 0 °C, potom se extrahuje mezi ethylacetát (15 ml) a deionizovanou vodu (10 ml). Organická vrstva sc promyje 5% roztokem kyseliny citrónové (2 x 10 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 101) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 mi). Organická vrstva sc suší nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání N-substituovancho bromacetylového produktu.
H-l; Výtěžek: 82 %: (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) částečné NMR sloučeniny: 9,08 (d, IH). 7,94 (m, 2H), 7.43 - 7,62 (m, 4H). 7,22 (kv, 2H), 7,02 (t, 111), 4,58 (s, 1 H). 4.44 (s, 1H). 4,28 (s, III). 4,18 (s, IH). 2,32 (s. 3H), 1,54 - 1,75 (m, 2H), 1,38 - 1.53 (m. 1H). 0,98 (m, 6H).
H 2: Výtěžek: 72 %: (deuterochloroform, 300 MHz, ppm rotamery): 4,9 (d. 1 H), 3,54- 3,82 (široký m, 6H), 3.4 (d. 1H), 2.49- 2,78 (m, 214). 2.0 - 2.3 (m, 3H). 1.02 - 1,43 (široký m. 811), 0,9 (s, 9H), 0,58 - 0.88 (široký m, 6H). 0,49 (m, 6H).
H -3: Výtěžek: 50%; (deuterochloroform, 300 MHz. ppm rotamery): 4,9 (d, 1H), 3,54- 3,82 (široký m, 6H). 3,4 (d, 1H), 2,49 - 2,78 (m, 211), 2,3- 2.52 (širokým. 3H), 2,2 (s. 3H), 1,45 -1.72 (m,4H), 1.3 (s, 9H). 0,8- 1.2 (široký m. 611).
-69CZ 298089 B6
Η 4: Výtěžek: 45%: (deuterochloroform, 300 MHz. ppm rotamery): 4.5 (d. IH). 3,9- 4.1 (m, 6H). 3,6 (d, 1H), 2,75 - 3,0 (široký m. IH), 2,4 2.6 (m, 3H). 1,48 - 1,71 (široký m. 411). 1.3 (s.9H). 0.9- 1,25 (široký m. 6H).
4.a, K roztoku hydrochloridu t-butvlesteru β-alaninu (5 mmol, SIGMA) v dichlormethanu (20 ml) se při teplotě místnosti přidá triethy lamin (5 mmol) a roztok se míchá při teplotě místnosti 15 minut, vzniklá sraženina se odfiltruje dichlormcthan se odpaří ve vakuu za získání volného aminu, t- butytesteru β-alaninu.
io 4.b. K roztoku t-butylesteru β alaninu (5 mmol) z kroku 4.a. (5 mmol) v NMP (10 ml) se při 0 °C přikape roztok N substituovaného bromacetylovcho produktu z kroku C3 v NMP (2 ml). Reakční směs se míchá 18 hodin při 0 °C, extrahuje se v cthylacetátu (15 ml) a dcionizovanc vodě (10 ml). Organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 10 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml). Organická vrstva se suší nad síranem horečnatým a odpaří sc ve vakuu za získání sekundárního aminu jako produktu.
Výtěžek: 75%: 'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm): 9,1 (d. 1H), 7,92- 8,1 (m, 2H), 7,45 7.61 (m, 4H), 7,25 (m. 2H), 7,04 (t. IH), 4,1 -4,28 (široký d, 2H). 3.5 (m. 2H),
2.74-2.91 (m,3H). 2.44 (m.3H). 2,32 (s.3H), 1.55 2.1 (m. 3H). 1.5 (s, 9H). 0,99 (m, 6H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 554.
1-2: Výtěžek: 45 %; ‘H NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm rotamery): 4.6 (d, IH).
3,9-4,2 (m. 6H). 3,63- 3,9 (m, 111), 3.25 (m. IH), 2,89 - 3,04 (ni, 2H), 2,4- 2,7 (m. 511). 1,0 - 1,85 (široký m, 28H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 511,4.
1-3: Výtěžek: 50%: '11 NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm rotamery): 4,55 (d, IH). 4,0 -4,3 (m. 411), 3.5 - 3.85 (m. 411), 2.85- 3,18 (ni, 511), 2.48 - 2,71 (m. 511), 1,0 1,85 (široký m, 28H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 525.4.
M: Výtěžek: 60%: '11 NMR (deuterochloroform. 300 MHz. ppm rotamery): 3,75- 4,62 (m, 10 811), 3,25 (m, IH). 2,9 (m, 2H). 2,49 2,75 (m, 5H), 1,0- 1,85 (široký ιη, 32H). 0,9
4o (m, 6H):
Iknotová spektroskopie (FAB): 581,5.
Postup D
1. K míchajícímu se roztoku Boc-L-prolimi nebo Boc-1-substituovaného prolinu (10 mmol) a EDC (11 mmol) v NMP (10 ml) se při teplotě místnosti přidá amin E-l (10 mmol) získaný v postupu A. Roztok se míchá 18 hodin, reakční směs sc extrahuje mezi ethylacelát (100 ml) a deionizovanou vodu (60 ml). Organická vrstva se promyje 5% kyselinou citrónovou 50 (2 x 60 ml). Organická vrstva se promyje 5% kyselinou citrónovou (2 x 60 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (50 ml). Organická vrstva sc suší nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání kondenzovaného produktu.
-70CZ 298089 Β6
Prekurzor pro J-l: Výtěžek: 70 %; 'H NMR (perdeuteromethanol, 300 MHz, ppm): 7,82 (d. IH). 7,56 - 7.77 (m, 4H), 7,4 (m. 2H). 7.22 (L IH). 4.4 4,6 (m, IH). 3.6-3,85 (ni. 2H). 2,5 (s. 3H), 2.0 - 2.33 (m. 411). 1.5 - 1.75 (bd, 911);
Hmotová spektroskopie (FAB); 439,2.
2. K produktu z kroku Dl se při 0 °C pomalu přidá 75% kyselina trifluoroctová v dichlormethanu (25 ml). Směs se míchá 2 hodiny při 0 °C, potom se odpaří ve vakuu. Produkt se znovu rozpustí v dichlormethanu. dvakrát se odpaří a suší se ve za vysokého vakua, aby se odstranily stopy kyseliny trifluoroctovc. Potom sc pevný zbytek triturujc 18 hodin etherem, filtruje se a suší na vzduchu (kvantitativní výtěžek).
J 1: Výtěžek: 80%; !HNMR (perdeuteromethanol, 300 MHz, ppm): 7.82 (d, IH), 7.6- 7.8 (m.4H). 7,82 - 7.93 (kv,2H). 7,74 (t. 111), 4,58 (m. 111), ~3,6 (m, 2H). 2,62 (m. 1H). 2,5 (s. 311), 2,32 (m.3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 339.5.
J 2: Výtěžek: 75%; 'HNMR (perdeuteromethanol, 300 MHz, ppm): 7.82 (d, IH). 7,6 - 7,8 (m. 411), 7,82 - 7,93 (kv. 211), 7.74 (t. IH). 4.58 - 4.76 (ni. 3H). 3,75 (m, 2H), 2.5 (s, 3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 358,4 (Na adukt).
Příklad 1
ΛΥ50
A. Postupuje sc podle popsaného postupu C za použití aminu E- 1 (získaných za použití o—tokiidinu v postupu A) v kroku Cl a izoamylaminu v kroku C2. za získání aminového produktu (I-l) v kroku C4.
B. Míchající se roztok aminu připraveného v příkladu ΙΛ (0,9102 mmol, 0,504 g) se nejprve reaguje s DIEA (0,9102 mmol, 158,6 μΙ) v 20 ml NMP při 0 °C (v dusíkové atmosféře) a potom se přikape benzoylchlorid (0,9102 mmol, 105,7 μΙ). Roztok se míchá 4 hodiny, reakční směs sc extrahuje mezi ethylacetát (50 ml) a deionizovanou vodu (40 ml). Organická vrstva se promyje 5% kyselinou citrónovou (2 x 25 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhl ičitanu sodného (2 x 25 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (25 ml). Organická vrstva sc suší nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu za získání požadované sloučeniny (350 mg. 59 %) ve formě pěny:
'HNMR (deuterochlorolbrm, 300 MHz, ppni): 6,72 - 7,55 (širokým. 1211), 6.3 - 6.7 (široký d, IH), 3,8- 4,2 (ni, 4H), 3,55 3,7 (m, 2H), 3,1 - 3,5 (široký ni, 2H), 2.45 (t, 1H). 2,1 (m,3H), 0,6- 1,6 (širokým, I9H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 658,5.
C. K produktu z příkladu 1B (350 mg, 0.53 15 mmol) se při 0 °C pomalu přidá roztok 25% kyseliny trifluoroctovc v dichlormethanu (5 ml). Směs se míchá 1 hodinu při 0 °C, potom se odpaří ve vakuu. Produkt se znovu rozpustí v dichlormethanu, a ještě dvakrát se odpaří a umístí se do vysokého vakua, aby se odstranily stopy kyseliny trifluoroctové. Produkt se čistí pomocí HPLC za získání sloučeniny AY50 (260 mg, 91 %) ve Formě lyofilizovaného prášku;
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm): 9,7 - 10,32 (m, IH), 9.05 (s, IH). 7,99 (m, 211), 7,35 - 7,77 (ni. 7H). 7,25 (kv, 2H). 7,05 (t. IH), 4.0- 4,55 (široký m. 4H), 3.68
- 71 CZ 298089 B6 (kv, IH). 3,2 (m, IH). 2,72 (m, IH). 2.3 (s. 3H), 1,3 - 1,75 (širokým, 4H), 0.77-1.22 (široký m, 6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 602.5; HPLC (Gr A): 8.72 min,
Příklad 2
AY49
A. Postupuje se podle postupu popsaného v příkladu IB. za použití aminu (I 1. 0,9102 mmol. 0,504 g) připraveného způsobem popsaným v příkladu 1A, DlEA (0.9102 mmol, 158,5 μ!) a m-anisoylchloridu (0,9102 mmol. 127.9 μΙ) za získání požadovaného produktu (380 mg, výtěžek 61 %) ve formě pěny:
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm): 9,1 (s, IH), 7.95 (m, 211), 7.37,65 (m, 5H). 7,23 (m. 2H), 6.83 - 7,15 (široký m, 4H), 4,0 - 4.5 (široký m, 4H). 3.8 - 3,91 (m, 3H). 3,15 3.22 (m, 411), 2,5 - 2,8 (m, 211), 2,35 (s, 3H). 1,35 - 1.8 (m, 12H), 0.77- 1.22 (široký m. 611):
Hmotová spektroskopie (FAB): 710.2 5 (Na adukt).
B, Postupuje se podle způsobu popsaného v příkladu 1C za použili sloučeniny z kroku B (380 mg. 0,5523 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu (10 ml) za získání sloučeniny AY49 (315,0 mg. 91 %) ve formě lyofílizovancho prášku:
'HNMR (perdcuterodinicthylsulfoxid, 300 MHz, ppm): 9,1 (s, IH), 7,95 (m, 211), 7.37,65 (m, 511), 7.23 (m, 2H), 6,83 - 7,15 (široký m, 3H), 4.0-4,5 (široký m, 4H), 3,8 - 3,91 (m, 3H), 3,15 - 3,22 (m, 4H), 2,5 2.8 (m, 2H), 2.35 (s. 3H), 1,35 - 1.8 (m, 311). 0.77 - 1.22 (široký
m. 6H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 632.3, 654,2 (Na' adukt);
HPLC(GrA): 9,05 min.
Příklad 3
AY62
A, K roztoku 2,3-dimethoxybenzoové kyseliny (10.9781 mmol, 2.0 g) v dichlormethanu (20 ml) s kapkou dimethylformamidu sc při teplotě místnosti přikape oxalylchlorid (10,9781 mmol, 957.702 μΙ). Směs se nechá 2 hodiny reagovat a potom sc odpaří ve vakuu za získání 2,3-dimethoxybenzoylchloridu (1,9 g, 90 %):
’H NMR (deuterochioroform. 300 MHz, ppm): 7.52 (rn. 111), 7,12 (d, 2H), 3.89 (s. 3H), 3,88 (s.3H).
B. Postupuje sc podle způsobu popsaného v příkladu 1B za použití aminu (1 1, 2,0031 mmol, 1,073 g) připraveného podle postupu popsaného v příkladu l A. DIEA (2,2034 mmol, 383,81 μΐ) a 2.3-dimcthoxybenzoylchloridu (2,2034 mmol, 440,677 mg) připraveného v příkladu 3A za získání požadovaného produktu (856,0 mg. výtěžek 51 %) ve formě pěny:
-72CZ Z98U89 B6 'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm): částečné NMR sloučeniny: 9.1 (s, 1H).
7,9-8.1 (m. 2H). 7,4 - 7,65 (ni, 3H), 6,95- 7.3 (široký m. 4H), 6,65 6.9 (široký m. 1H). 3,7-4.7 (širokým, 10H), 2.38 (s. 3H), 1,2- 1.8 (široký m. 12H). 0.9-1.1 (m, 5H), 0,8 (d. 2H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 740,4 (Na adukt).
C. Postupuje se podle způsobu popsaného v příkladu IC za použití sloučeniny z kroku B (856,0 mg, 1,1922 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu za získání sloučeniny AY62 (786,0 mg, 98 %) jako lyofilizovaného prášku:
’HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm) částečné NMR sloučeniny: 9.1 (s, IH).
7,9 8.1 (m, 2H). 7,4 7^65 (m, 311), 6,95- 7.3 (širokým, 4H). 6.6 - 6,9 (široký m. 1H),
3,7 -4,7 (širokým. 10H). 2.38 (s, 3H). 1,2- 1.8 (širokým, IH). 1.18(1.311),0.89 1,1 (m, 4H).
0.8 (d. 2H),
Hmotová spektroskopie (FAB): 662,2, 684,2 (Na adukt);
HPLC (Gr A); 8.795 min.
Příklad 4
CX13
A, Amin (G-L 0,271 mmol, 100.0 mg), získaný v kroku C2 v postupu C za použití aminů E 1 (získaných s využitím o—toluidinu v postupu A) v kroku Cl a izoamylaminu v kroku C2, se přidá k míchajícímu sc roztoku mono-methyladipátu (0,271 mmol, 40,15 μΙ) a EDC (0,271 mmol. 51,951 mg) ve 4 ml NMP při teplotě místnosti. Po 18 hodinách míchání při teplotě místnosti sc reakční směs extrahuje mezi ethylacctát (15 ml) a deionizovanou vodu (10 ml). Organická vrstva se promyje 5% kyselinou citrónovou (2 x lOinl), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 ml). Organická vrstva se suší nad síranem horečnatýma odpaří se vc vakuu za získání požadované sloučeniny (103 mg. 75 %) vc formě pěny:
!11 NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm rotamery): 8,88 (s. 111). 7,55 (d. 2H), 6,6- 7.4 35 (širokým, 7H). 4,0 (m, 2H). 3,62 (s, 3H). 3,43 (m, IH), 5 1,9-2.4 (širokým. 711). 1,29- 1,8 (široký m, 8H), 0,9 (d, 6H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 511,3.
B. Míchající se roztok sloučeniny z kroku A (103 mg, 0,2034 mmol) v methanolu (2 ml) sc 3 hodiny při teplotě místnosti reaguje svodným roztokem hydroxidu lithného (LOM, 1,0 ml, 1,0 mmol). Reakční směs se okyselí IN roztokem kyseliny chlorovodíkové a odpaří se vc vakuu. Surový produkt se čistí pomocí HPLC za získání sloučeniny CX13 (66,0 mg, 65%) ve formě lyofilizovaného prášku:
'li NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm): 9,9- 10,1 (široký d, 1H), 9.05 (d, IH). 7.95 (m, 2H), 7,55 (m, 4H), 7.25 (kv, 2H), 7,05 (t, 1II), 4,1 - 4.25 (široký d. 1H), 3,5 (m, 1H). 2,21 -2,52(m, 711). 1,38- 1,71 (m, 7H), 1,2 (t. IH), 0,95 (m. 6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 497,2;
HPLC (Gr Λ): 8.24 min.
-73CZ ZV8U89 B6
Příklad 5
PÍ
A. Postupuje se podle způsobu popsaného v postupu C za použití aminů E-l (získaných za použití 4,4'-bipiperidindihydrochloridu v postupu B) v kroku Cl a amoniaku v kroku C2. za získání aminového produktu (I 2) v kroku C4.
B. K míchajícímu sc roztoku kyseliny benzoové (0.1351 mmol, 16.5 25 mg) a EDC (0,1351 mmol. 25.902 mg) v 3 ml NMP se přidá amin (1-2. 0,1351 mmol, 69,0 mg) připravený podle postupu popsaného v příkladu 5A. Roztok se míchá 18 hodin, potom sc extrahuje mezi elhylacetát (10 ml) a deionizovanou vodu (5 ml). Organická vrstva sc promyje 5% kyselinou citrónovou (2 x 5 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhliěitanu sodného (2 x 5 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (5 ml). Organická vrstva se suší nad síranem 15 horečnatými a odpaří se ve vakuu za získání požadovaného produktu (35,0 mg, 51 %) ve formě pěny.
C. Postupu se podle způsobu popsaného v příkladu 1C za použití sloučeniny z kroku B (35.0 mg. 0.068 mmol) a 25% kyseliny triíluoroctové v dichlormethanu za získání sloučeniny PI (17.0 mg, 55 %) ve formě lyofilizováného prášku:
'li NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) částečné NMR sloučeniny: 8,4 (m, IH),
7.9-8,25 (m. 2H). 7.4 (d. 311). 4.4 (d, IH), 3.7-4,2 (m, 5H), 2.18-3,12 (m. 4H). 1,6- 1.85 (d,4H). 0.85- 1,41 (m, 6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 458,8;
HPLC (Gr A): 4,1 min.
Příklad 6
P2
A. Postupuje se podle postupu C za použití aminů E-l (získaných za použití 4,4-bipiperidindihydrochloridu v postupu B) v kroku Cl a methylaminu v kroku C2, za získání aminového produktu (1-3) v kroku C4.
B. Postupuje se podle způsobu popsaného v příkladu 5B za použití aminu (1-3. 0,2835 mmol,
148,8 mg) připraveného podle postupu popsaného v příkladu 6A, benzoové kyseliny (0,2836 mmol, 34,63 mg) a EDC (0,2836 mmol, 54.37 mg) za získání požadovaného produktu (84,0 mg, výtěžek 56 %) ve formě pěny.
C. Postupuje se podle způsobu popsaného v příkladu 1C za použití sloučeniny z kroku B (84,0 mg, 0,158 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu za získání sloučeniny P2 (49,0 mg, 66 %) ve formě lyofilizovaného prášku.
’H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) částečné NMR sloučeniny: 8,5 (m, 1 H). 8,2 (m, IH), 7,35- 7,6 (m, 4H), 4,1 - 4.6 (m, 6H), 3,8 - 4,1 (m. 3H). 2,77 3.2 (m, 7H),
1,7- 2,0(m. 4H), 1,0- l.6(m.6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 473,2; HPLC (Gr A): 4.403 min.
-74Přiklad 7
A. Pracuje se podle postupu C za použití aminů E-l (získaných za použití 4,4'-bipiperidindihydrochloridu v postupu B) v kroku Cl a izoamylaminu v kroku C2, za získání aminového produktu (M) v kroku C4.
B. Postupuje se podle způsobu popsaného v příkladu 5B za použití aminu (1-4, 0,05131 mmol, ίο 29,8 mg) připraveného podle způsobu popsaného v příkladu 7Λ. benzoové kyseliny (0,05 131 mmol. 6,2657 mg) a EDC (0.05131 mmol, 9.836 mg) za získání požadovaného produktu (15,0 mg. výtěžek 51 %) vc formě pěny.
C. Postupuje se podle způsobu popsaného v příkladu 1C za použití sloučeniny z kroku B (15.0 mg, 0,0256 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu za získání sloučeniny
P3 (9,0 mg, 67 %) jako lyofilizovaného prášku:
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz. ppm) částečné NMR sloučeniny: 8.5 (m. 1H), 8.2 (m. 111), 7,33 - 7.6 (m. 411), 3.85 4.6 (široký m, 6H). 2,8 - 3.2 (m, 4H), 0,78 - 2,0 (široký 20 m. 19H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 529.4. 551,3 (Na adukl);
HPLC(GrA): 6,27 min.
Příklad 8
CYI4
A. K míchajícímu se roztoku mono-inethyladipátu (0,2955 mmol, 43,78 μΐ) a EDC (0,2955 mmol, 56,65 mg) v 4 ml NMP se při teplotě místnosti přidá volný aminový produkt (J-l, 0,2955 mmol, 100,0 mg), získaný v postupu D s využitím Boc-I-prolinu. Roztok sc míchá 18 hodin, reakční směs sc potom extrahuje mezi ethylacctát (15 ml) a deionizovanou vodu. 35 Organická vrstva sc potom promyje 5% kyselinou citrónovou (2x10 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 10 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (lOinl), Organická vrstva se suší nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání požadovaného produktu (88.2 mg, 62 %) vc formě pěny:
•to ’H NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm): 7,1 7.52 (široký m, 8H), 6.1 - 6.42 (s. 111), 4,75 (d, IH), 3,42 - 3,68 (m, 5H). 1.94 - 2.42 (široký m, 10H), 1,615 l,8(m,4H);
Hmotová spektroskopie (EAB): 481.4,503,3 (Na‘ adukl).
B. Stejným postupem, jako jc popsáno v příkladu 4B za použití sloučeniny z kroku A (88,2 mg, 0,1832 mmol) a vodného roztoku hydroxidu lithného (1.0M, 1.0 ml, 1,0 mmol) v methanolu (2 ml) sc připraví sloučenina CY14 (50,8 mg, 60 %) ve formě lyofilizovaného prášku:
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm): 9,9 10,12 (široký d, 1H), 9,05 (d. 1H), 50 7,95 (m, 2H), 7,45-7,61 (m. 4H). 7.24 (kv, 2H), 7,05 (t, IH). 4,45-4,61 (m, 1H), 3,52-3.74 (m, 2H). 1,88 - 2.44 (široký m, 11 H). ],6( m, 4H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 467.2. 489,2 (Na adukt);
HPLC (Gr A): 6,66 min.
-75 CZ Z98U89 B6
Příklad 9
CY17
A. K roztoku terc-butyldiethylfosfonoacetátu (3.0 mmol, 756,75 mg) v 25 ml bezvodcho tetrahydrofuranu. který se míchá v dusíkové atmosféře při -75 °C (suchý led/accton) se v průběhu 5 minut při kape n—buty] lithium (3,0 mmol, 1,875 ml). Roztok se míchá 1 hodinu při 0 °C, potom se pod dusíkovou atmosférou při 0 °C přidá ethylIcvulínát (2,7 mmol. 425.7 μΐ). Reakční směs se nechá pomalu během 3,5 hodiny ohřát na teplotu místnosti. Po 3,5 hodinách se reakční směs promyje nasyceným roztokem chloridu amonného (3 x 100 ml) a odpaří se ve vakuu. Potom se ke zbytku přidá 100 ml etheru a etherová vrstva se promyje deionizovanou vodou (60 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (2 x 60 ml). Organická vrstva sc suší nad síranem horečnatým a odpaří se ve vakuu za získání surového produktu. Surový produkt sc čistí pomoci velmi rychlé chromatografie za použití směsi 20:1 hexan:ethylacetát za získán ortogonálně chráněného t-butyl-6-karboethoxy-3-methyl-3- pentenoátu (404,0 mg, 54 %) ve formě viskózní kapaliny:
'HNMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm izomery): 5,6 (s. 1H). 4,12 (kv. 2H), 20 2,84 (t, IH). 2,4- 2,53 (m.4H), 2.1 (s, 2H). 1.47 (s.9H), 1,23 (t,3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 264,6 (Na adukt);
HPLC (Gr A): 12,24 min a 12.48 min.
B. Produkt z příkladu 9 A (0,8277 mmol. 200,3 mg) v 10 ml ethylacctátu se redukuje za použití Smol % 10% palladia na uhlí (0,04139 mmol, 43,63 mg) v tlakové hydrogenační nádobě. Po 1 hodině se reakční směs 30 minut odstřeďujc. Odstředění s ethylacctátem (2 x 30 ml) trvá dalších 30 minut. Všechny organické vrstvy se spojí a odpaří se ve vakuu za získání t butyl-6karboethoxy-3-methyl-3-pentanoátu (150,0 mg. 75 %):
'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm): 4,1 (kv, 211), 2,18- 2,4 (m, 311), 1,88-2,1 (m, 2H). 1.45 - 1,75 (m, 3H), 1.44 (s, 9H), 1,23 (t. 311), 0,92 (d, 3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 266,6 (Na adukt).
C. Pomocí stejného postupu, jako je popsáno v příkladu 4B za použití l-butyl-6-karboethoxy 3-mcthyl-3-pcntanoátu (150,0 mg, 0,6147 mmol) a vodného roztoku hydroxidu lithného (1,0 M. 1,0 ml, 1,0 mmol) v methanolu (2 ml) sc připraví nionokyselina (100 mg, 75 %) ve formě pevné látky:
'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm): 2,18- 2,4 (m. 3H), 1,88 - 2.1 (m, 2H), 1,45 - 1.75 (m,3H). 1.44 (s. 9H), 0,92 (d, 3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 239.1 (Na adukt).
D. Podle postupu popsaného v příkladu 8A za použití kyseliny z příkladu 9C (0,0925 mmol. 20,0 mg), aminu (J 1, 0,925 mmol. 31,30 mg), získaného za použití Boc-L-prolinu v postupu D. a EDC (0,925 mmol, 17,73 mg) v NMP (3 ml) sc získá požadovaná sloučenina (39.3 mg, 73 %):
’HNMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) částečné NMR sloučeniny: 7,1 - 7,8 (širokým, 811). 4.75 (m. IH), 3.43 - 3,62 (m, 2H), 1,9 - 2.6 (široký m, 1211),0,8 1.0(m,3H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 559.3.
E. Podle postupu popsaného v příkladu IC za použití sloučeniny z kroku D (39.3 mg, 0,0703 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu se získá sloučenina CY17 (20.2 mg, 60 %) ve formě lyofilizovaného prášku:
'H NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm): 7,81 (d. IH). 7.52 - 7,71 (m, 4H), 7,38 (kv. 2H), 7,23 (t. 111). 4,64 - 4,8 (m. lil), 3.7 - 4.0 (m. 2H). 2.05 - 2,74 (široký m. 1211), 1,68- 2.0 (m. 2H). 1.05 - 1.23 (m, 3H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 481,3, 503.4 (Na adukt); HPI.C (Gr A): 8,1 min.
Příklad 10
CX12
A. Podle postupu popsaného v příkladu 8Λ za použití aminu (.1-2, 0.2974 mmol, 100,0 mg), získaného pomocí Boc-I-thioprolinu v postupu D. adipovc kyseliny (0,2974 mmol, 43.46 mg) a EDC (0.3569 mmol. 68,414 mg) vNMP (3 ml) sc získá surový produkt. Ten se čistí pomocí HPLC za získání sloučeniny CX12 (30.0 mg, 30%) jako lyofilizovaného prášku:
’H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm): 9,99 (s, IH), 9,1 (s. IH), 7,98 (m. 211), 7,48 7.62 (m, 4H), 7.25 (kv. 2H). 7.05 (ΐ, 1H). 4.55 - 5.05 (m, 411), 3.22 (m, I H). 2.41 (m, 6H). l,6(m, 4H):
Hmotová spektroskopie (FAB): 485.5;
HPLC(Gr A); 7,935 min,
Příklad 11
A. Pomocí postupu C za použití aminu E-l (získaného za použití o-toluidinu v postupu A) v kroku Cl a izoaniylaminu v kroku C2. se získá amin (1-1) v kroku C4.
B. K míchajícímu se roztoku aminu připravenému v příkladu 11A (0.072 mmol. 39,8 mg) a DIEA (0,864 mmol, 15.1 μΐ) vNMP (4 ml) se při 0 °C přidá anhydrid kyseliny octové (0,0792 mmol, 7,5 μ|). Roztok se míchá 4 hodiny při 0 °C, reakční směs se extrahuje mezi cthylacetát (10 ml) a deionizovanou vodu (5 ml). Organická vrstva se promyje 5% kyselinou citrónovou (2 x 5 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 5 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (5 ml). Organická vrstva se suší nad síranem horečnatým a odpaří sc ve vakuu za získání požadované sloučeniny (20 mg, 50 %) vc formě pěny.
C. Podle postupu popsaného v příkladu 1C za použití sloučeniny z kroku B (20,0 mg, 0.034 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu se připraví sloučenina AX4I (9,0 mg, 50 %) ve formě lyofilizovaného prášku:
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) část NMR sloučeniny: 9,76 - 10,22 (široký m, IH), 9,05 (d. IH), 7,95 (m, 2H), 7.45 - 7,65 (m, 4H), 7.24 (kv, 2H), 7,03 (t, 1Π). 4,1 - 4,54 (široký m, 4H). 2.33 (s. 3H). 2,18 (s, 1 Η), 1,98 (d, 211), 1,3 1,8 (širokv m. 3H). 0.98 (m. 6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 540,3;
HPEC(GrA): 7,047 min.
-77CZ ŽV8089 B6
Příklad 12
AY48
A. Podle postupu C za použití aminu E-l (získaného za použití o toluidinu ve způsobu A) v kroku Cl a izoamylaminu v kroku C2, se připraví amin (1-1) v kroku C4.
B. Podle postupu popsaného v příkladu 5B za použití amin z příkladu 12A (0.905 mmoL 50,0 mg), mono-methylsukcinátu (0.905 mmol. 11,96 mg) a EDC (0.09955 mmol. 19.084 mg) se připraví požadovaná sloučenina (30 mg, 50 %) ve formě pěny.
C\ Podle postupu popsaného v příkladu 1C za použití sloučeniny z kroku B (30 mg. 0,045 mmol) a 25% kyseliny triíluoroctové v dichlormethanu sc připraví sloučenina AY4B (15 mg, 46 %) vc formě lyofilizovancho prášku:
*11 NMR (perdculerodimcthylsulfoxid. 300 MHz. ppm) část NMR sloučeniny: 9.7610,22 (široký m, IH), 9.05 (d, 1H). 7.95 (m, 2H), 7.45 - 7,65 (m. 411), 7,24 (kv, 2H). 7.03 (t, IH), 4.1 4.54 (široký m, 4H), 3.18 (s. 3H). 2,33 (s. 3H). 1,3 - 1.8 (široký m, 3H). 0,98 (m, 6H);
Hmotová spektroskopie (FAB): 612,4;
HPLC (Gr A): 7,998 min.
Příklad 13
AY44
A. Podle postupu C za použití aminu E-l (získaného za použití o—toluidinu v postupu A) v kroku Cl a izoamylaminu v kroku C2, sc připraví amin (1-1) v kroku C4.
B. Podle postupu popsaného v příkladu 5B za použití aminu z příkladu 12A (0,0398 mmol, 22,0 mg). 3-mcthoxypropionové kyseliny (0.398 mmol, 3.7 μΙ) a EDC (0,04378 mmol. 8,393 mg) se připraví sloučenina (15 mg, 59 %) ve formě pěny.
C. Podle postupu popsaného v příkladu 1C pomocí sloučeniny z kroku B (15 mg, 0,0234 mmol) a 25% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu se připraví sloučenina AY44 (10 mg, 74 %) ve formě lyofilizovancho prášku:
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm) částečné NMR sloučeniny: 9,05 (d, 1 H),
7,95 (m, 2H), 7,45 - 7.65 (m, 4H), 7,24 (kv, 2H). 7.03 (L IH), 4,1 - 4.54 (široké m, 4H). 3,29 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 1,3 1.8 (široký m, 3H), 0,98 (ni. 6H);
Hmotová spektroskopie (FAR): 584.3, 607.4 (Na adukt);
HPLC (Gr A); 6,17 min.
Syntéza sloučeniny SX44
Λ. K suspenzi 1,4-fenylencdiaminu (9.15 g, 86 mmol) v dichlormethanu (30 ml) se přidá o-tolylizokyanát (10,5 ml, 86 mmol). Po 30 minutách míchání pří teplotě místnosti sc suspenze filtruje a promyje dichlonnethancin (200 ml). Po sušení ve vakuu se získá požadovaný produkt ve formě šedé pevné látky (15.8 g, 65.6 mmol. 76 %). >99% čistota podle HPLC.
- 78 LZ. 2WUÍW 136 'HNMR (pcrdeuterodimethylsiilfoxid): 6 8.61 (1H. s). 7,95 (III. d), 7.81 (lil, s). 7.30 (211. in). 7.15 (2H. d). 7,0 (IH, t), 6.61 (2H. d). 4.88 (2H. široký s). 2.32 (3H. s).
B. K roztoku (2R)-[(t-butyloxykarbonyl)iiiethyl]-4-methylvalerovč kyseliny (Oxford Asvm5 metry) (2.4 g, 10.4 mmol) v dimethylformamidu (20 ml) ochlazeném na 0 °C se přidá HOBT (24 g, 15.5 mmol), potom EDC (2.4 g. 13,0 mmol) a Hunigova báze (5,4 ml, 31.1 mmol). Po 15 minutách míchání se přidá hydrochlorid methylestcru 2,3-dimethoxy-p-fenylalaninu (2,9 g. 10,4 mmol). Po míchání přes noc za ohřívání na teplotu místnosti se reakční směs zpracuje srážením produktu 60% vodným hydrogenuhličitanem. Produkt se filtruje a promyje vodou, 5% io kyselinu citrónovou a solankou. Produkt se suší ve vakuu za získání požadované sloučeniny (4,5 g. 9.9 mmol, 99 %). >88% čistota podle HPLC ve formě bílého prášku.
'H NMR (deuterochloroform); δ 6,81 (311. m). 6.60 (1H. široký d). 5.35 (IH. m), 3,76 (3H, s). 3.75 (3H,s). 3,63 (3H, s), 2,90 2.50 (4H, m). 2,30 (IH. - 1.45 (2H.m). 1,40 (9H. s), 1,15 (1H. m).0.88 (311, d), 0.82(311, s).
C. K roztoku sloučeniny z kroku B (4,5 g. 9.9 mmol) v dichionnethanu (15 ml) se přidá kyselina trifluoroctová (5 ml) a reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a roztok sc sráží přidáním etheru. Po odfiltrování pevné látky a sušení ve vakuu se získá požadovaná sloučenina (2,9 g, 7,3 mmol, 74 %) ve formě bílého prášku >96% čistota podle 1IPLC, 'HNMR (deuterochloroform); 6 6,92 (IH, široký d), 6,70 (311, m), 5,35 (111, m), 3,85 (611, s). 3,65 (3H, s), 2,95 - 2.40 (511, m), 1,55(211, m), 1,35 (1IL rn). 0,90 (3H,d), 0,87 (31 Ld).
D. K roztoku sloučeniny z kroku C (L9g, 4.8 mmol) v dimethylformamidu (15 ml) se přidá HBTU (2,1 g, 5.5 mmol) potom Hunigova báze (2,1 ml, 12,1 mmol) a sloučenina z kroku A (1.15 g, 4,8 mmol). Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a zpracuje se srážením 60% vodným hydrogenuhličitanem. promvtím vodou. 5% kyselinou citrónovou a solankou. Po sušení ve vakuu se získá požadovaný produkt (2.9 g. 4,7 mmol, 98 %) ve formě žlutohnědé pevné látky > 87% čistota podle HPLC.
HNMR (deuterochloroform): δ 9,01 -6.81 (I5H. m), 5,35 (IH. m), 3,85 (31L 20 s), 3,84 (3H, s). 3,65 (3H, s). 2,90- 2,35 (51L m), 2,33 (311. s). 1.65 - 0.90 (3H, m). 0,90 (31L d), 0,86 35 (3H, d).
E. K roztoku sloučeniny z kroku I) (2,9 g. 4,6 mmol) v methanolu (30 ml) obsahujícím dimethylfbrmamid (15 ml) se přidá 2M roztok hydroxidu lithného (7 ml, 13.8 mmol) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Methanol se odpaří ve vakuu a surová směs se io přikape k roztoku 1M kyseliny chlorovodíkové ochlazenému na 0 °C. Sraženina se odfiltruje a promyje vodou, směsí methanol/ether (1:9) a etherem. Produkt se suší za vakua za získání surové sloučeniny SX44. která má podle HPLC čistotu vyšší než 91 %. Po rekrystalizaci z izopropanolu se získá čistá sloučenina SX44 ve formě bílé pevné látky (1.25 g, 2.1 mmol, 46 %) >98 % čistota podle 1 IPLC.
'HNMR (perdcuterodimethylsulfoxid): δ 9,95 (IH. s), 9,11 (IH, s), 8.61 (IH, d), 8,01 (]H,s),
7,95 (1H. d), 7,60 (2H. d), 7,47 (2H, d), 7.24 (211, m). 7.02 (2H. m), 6,90 (2H. m), 5.25 (1H, m), 3.82 (311, s), 3,81 (3H. s). 2.98- 2,60 (311, m), 2,46 (2H, m). 2,33 (3H. s), 1,65- 1,10 (311, m). 0,93 (3H,d), 0,84 (3H, s).
ES hmotová spektroskopie (tj: m/z = 605
-79<./. 49W89 B6
Příprava sloučeniny SY62
A. K roztoku (S) 3-(l-oxopropyl)-4-(ťenylmethyl)-2-oxazolidinonu (922 mg, 3,95 mmol) v suchém tet rahvdrof uranu (40 ml) ochlazeném na 78 °C se přikape lithiumdiizopropylamid (2.4 ml. 4,5 mmol, Aldrích 2,0 M). Reakční směs se udržuje 1 hodinu při 78 °C za vzniku světle žlutého roztoku. t-Butylbromacctát (1,74 ml, 11.8 mmol) se potom najednou přidá k reakční směsi, která se potom míchá 15 minut při -78 °C. potom se ohřeje na 0 °C a nechá se míchat dalších 45 minut, Reakční směs se rozloží nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a odstraní se tetrahydrofuran. Vodná vrstva sc extrahuje dichlormethanem (3 x 50 ml) a spojené ίο organické extrakty se promyjí solankou, suší sc nad síranem sodným a odpaří se za získání hustého sirupu, který se nechá tuhnout v lednici za vzniku voskovité pevné látky. Po trituraci studeným hexanem se získá požadovaný produkt (735 mg, 2,1 I mmol, 54 %) ve formě bílé pevné látky >90% čistota podle HPLC.
ΪΙ NMR (deuterochloroform): δ 7,40 - 7.15 (5H. m), 4.65 (1H. m). 4,25 - 4.0 (3H. m). 3,32 (I H. dd). 2.83 (IH. dd). 2.76 (lil. dd). 2,37 (1H. 5 dd), 1.41 (9H. s). l.l9(3H.d).
B. K roztoku sloučeniny z kroku A (350 mg, 1,00 mmol v tetrahydrofuranu ochlazenému na 0 °C (15 ml) a vodě (5 ml) se přidá 30% peroxid vodíku (1,10 ml, 10,1 mmol), potom 2,0 M hydroxid lithný (1,0 ml, 2,0 mmol) a roztok se nechá 2 až 3 hodiny míchat, dokud sc podle HPLC nedokončí reakce. Reakční smčs se rozloží přebytkem siřičitanu sodného a pH sc upraví, pokud je to nutné, pomocí nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného na 10. Tetrahydrofuran se odpaří ve vakuu a vodná vrstva se zředí vodou (30 ml) a dvakrát se extrahuje dichlormethanem (30 ml). Vodná vrstva se potom okyselí 1M kyselinou chlorovodíkovou na pil asi 2 a extrahuje 25 se ethylacetátem (3 x 50 ml). Spojené organické extrakty se promyjí solankou (30 ml, suší se nad síranem sodným a odpaří se za získání požadovaného produktu (153 mg, 0,81 mmol, 81 %) >95% čistota podle HPLC ve formě čirého sirupu, který stáním v lednici voskovatí.
'H NMR (deuterochloroform): δ 2,88 (IH, m). 2.61 (IH. dd). 2.35 (IH. dd). 1,42 (9H,s), 1.22 30 (3H.d).
C. Podle postupu použitého pro přípravu sloučeniny SX44B. se sloučenina z kroku B (153 mg. 0,81 mmol) kondenzuje s hydrochloridem methylesteru 2,3-dimethoxy-f3- fenylalaninu (253 mg. 0,85 mmol) za získání požadované sloučeniny (268 mg. 0.6 mmol. 78 %) v > 85% čistotě podle
HPLC ve formě bílé pěny, ’HNMR (deuterochloroform): δ 6.81 (3H, m), 6,72 (IH. široký d), 5.40 (IH, m), 3,85 (3H, s), 3,84 (3H,s), 3,41 (3H, s). 2,96 - 2,15 (511, m). 1.41 5 (9H, s), 1,14 (3H,d).
ίο D. Podle postupu pro přípravu sloučeniny SX44C, sc sloučenina z kroku C (268 mg, 0,6 mmol) zbaví chránící skupiny za získání požadovaného produktu (210 mg, 0,59 mmol, 98 %) ve formě hustého světle žlutého sirupu, ’HNMR (deuterochloroform): δ 6,97 (IH, široký d). 5,33 (IH, m), 3,85 (3H, s), 3.84 (3H, s), 45 3,58 (3H, s), 2,95 - 2,40 (5H, m). 1,24 (3H. d).
E, Podle postupu pro přípravu sloučeniny SX44D sc sloučenina z kroku D (210 mg, 0,60 mmol) kondenzuje se sloučeninou SX44A (168 mg, 0,70 mmol) za získání požadované sloučeniny (320 mg, 0.55 mmol, 92 %) - 72% čistota podle HPLC vc formě žlutohnědé pevné 5(i látky.
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid): δ 9,92 (IH, s). 9,42 (IH, široký), 8,52 (IH. d), 8,15 (IH.široký), 7.92 (1H, d), 7.61 (2H, d), 7,47 (2H, d), 7,25 (2H, m), 7.10-6,85 (4H,m), 5,35 (114, m), 3,85 (3H, s), 3,84 (3H, s), 3,63 (3H. s). 3.15 - 2.40 (5H, m). 2,35 (3H, s). 1,12 (31L d).
-80l /, B6
F. Podle postupu pro hydrolýzu sloučeniny SX44D se ze sloučeniny z kroku E (300 mg, 0,52 mmol) získá surová sloučenina SY62 (108 mg) >90% čistota podle UPEC. Malé množství sc čistí pomocí HPEC za získání sloučeniny SY62 (8 mg) o čistotě >99 % ve formě bílé pevné látky.
’HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid): 6 9,95 (IH, s). 9,04 (IH, s), 8.46 (lil, d). 7.93 (2H, široký m), 7,59 (211, d). 7,47 (2E1, d), 7,24 (2H, m). 7,21 - 6.89 (4H, m). 5.22 (IH.m), 3,83 (3H. s), 3,8 (311, s). 2.95 - 2.65 (5H. ni). 2.34 (311. s), 1,10 (311. d).
ES hmotová spektroskopie m/z-H = 561
Příprava sloučeniny SY60
A. K roztoku anhydridu kyseliny jantarové (200 mg, 2.0 mmol) v dichlormethanu (5 ml) se přidá sloučenina SX44A (482 mg, 2,0 mmol) a suspenze se míchá přes noc při teplotě místnosti. Pevná látka se odfiltruje a promyje se dichlormethanem za získání požadovaného produktu (630 mg, 1,8 mmol, 92 %) ve formě světle šedé pevné látky.
!I1NMR (perdeuterodimethylsulfoxid): 6 12.25 (IH, široký), 9.95 (IH, $), 9,05 (IH. s), 7,95 (2H, ní), 7.60 (211, d), 7.50 (2H, d). 7,25 (2H, m), 7.05 (IH, m), 2,33 (411, m).
B. K roztoku sloučeniny z kroku A (192 mg, 0,56 mmol) v dimethyIformamidu (4 ml) se přidá HBTU (265 mg. 0,70 mmol), potom Hunigova báze (0,25 ml) a methy lester 2,3-dimcthoxy-pfenylalaninu (154 mg, 0,56 mmol). Směs sc míchá při teplotě místnosti přes noc a produkt se sráží 60% vodným roztokem hydrogenuhličitanu, promyje sc vodou, 5% kyselinou citrónovou, solankou a suší se za vakua za získání požadovaného produktu (100 mg, 0,18 mmol, 32 %) ve formě žlutohnědé pevné látky o čistotě >85 % podle HPEC.
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid): δ 9.93 (IH, s), 9.10 (lil, s), 8.47 (1H, d). 8,0 (1H. s),
7,95 (IH. d), 7.60 (2H.d), 7,46 (211. d), 7,25 (2H. m). 7,05 (IH. ni), 6,92 (211, m), 5,26 (IH. m). 3,85 (311, s), 3,84 (3H. s). 3.66 (3H. s). 2,85 (2H. ní), 2.55 (211, m). 2,36 (3H. s).
C. K roztoku sloučeniny z kroku B (100 mg, 0,18 mmol) v methanolu se přidá 2M roztok hydroxidu lithného (0,3 ml) a reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti. Mcthanol se odstraní a produkt se sráží IN roztokem kyseliny chlorovodíkové. Pevná látka se odfiltruje, promyje se vodou, směsí ether/methanol (9:1) a etherem. Po sušení ve vakuu se získá sloučenina SY60 (74 mg, OJ3 mmol. 72 %) vc formě světlé žlutohnědé pevně látky o čistotě >97 % podle HPLC.
'HNMR (pcrdeutcrodimclhylsulfoxid): δ 9.88 (lil.s). 9,05 (IH.s). 8.41 (IH.d). 8,47 (IH. s), 7.90 (IH, d). 7.54 (211. d). 7.43 (2H. d), 7.20 (2H. m). 6.96 (211. bm). 6.90 (2H. bm), 5,21 (III. m). 3,81 (311. s), 3.80 (3H. s). 2.71 (2H. m), 2,50 (211, ni). 2.30 (3H. s). ES hmotová spektroskopie (-): m/z-l - 547
Příprava sloučeniny RXI9
Λ. K esteru N-t-boc-L-lcucin N-hydroxysukcinimidu (3,28 g, 0,01 mmol) v dimethyIfbrniamidu (20 ml) se při teplotě místnosti po částech během 30 minut za míchání přidá tyrani in (1,37 g, 0.01 mmol). Po 2 hodinách míchání se dimethylformamid odpaří za sníženého tlaku a zbytek se převede do 50 ml dichlormethanu. Organická vrstva se promyje 5% roztokem kyseliny citrónové (2x15 ml), vodou (15 ml) a solankou (15 ml) a suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se za získání požadované sloučeniny (3.32 g, 95 %) ve formě bílé pěny.
-81 V Ζ. B6 'HNMR (deuterochlorofonn, 300 MHz. ppm) 7,96 (d. lil, 8 Hz). 6,93 (d. 2H. 8 Hz),6.73 (d,2H. 8 Hz), 6,53 (široký s. IH), 5.09 (d. 1H. 8 Hz). 4.02 (široký s, 1H), 3,47-3.31 (široký m, 2H). 2.64 (t, 2H. 7 Hz). 1,55 (m, 2H), 1,37 (s. 9H), 0.84 (d, 6H. 6 Hz), m/z351.
B. Směs sloučeniny z kroku Λ (1 g. 2,85 mmol) a brom-methylacetát (0,45 g, 2,85 mmol) v acetonu (15 ml) se zahřívá k varu s pevným uhličitanem draselným 3.5 hodiny. Reakční směs se ochladí, filtruje a odpaří za získání požadovaného produktu (1.09 g, 91 %) ve formě žluté gumy.
'HNMR (deuterochloroform. 300 MHz. ppm), 7,08 (d, 211. 8 Hz). 6.81 (d, 2H. 8 Hz), 6,14 (s. IH). 4,84 (s. 1H). 4.59 (s. 2H). 4,00 (s. 1H), 3,78 (s. 3H). 3.78 3.40 (široký m, 2H), 2,71 (t. 2H, 7 Hz), 1.60 1.39 (m, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,87 (d, 6H. 6 Hz); m/z 423.
O. Ke sloučenině z kroku B (353 mg, 0.836 mmol) v 1 inl studeného dichlormethanu se přidá kyselina trifluoroctová (3 ml) a směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs se odpaří za sníženého tlaku za získání požadovaného produktu, který se použije bez čištění.
]H NMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm) 7,59 (široký s, 3H). 7,24 (m, 1 H), 7,04 (d, 2H. 9 Hz), 6,77 (d. 2H, 9 Hz). 4,60 (s. 2H). 4.04 (m, 1 H). 3.79 (s, 3H). 3.52 - 3.43 (široký m, 2H), 2,75 - 2,70 (t. 2H. 6 1 Iz), 1,56 (m, 2H). 1,46 (m, IH), 0.84 (d, 611, 6 Hz): m/z 323.
D. Směs 2-MPUPA (225 mg, 0,79 mmol). HOBt (169 mg. 1.75 mmol), a EDC (192 mg, 1,00 mmol) se míchá v dirnethylformamidu (5 ml) 1,5 hodiny při teplotě místnosti. V oddělené viálce se sloučenina z kroku C (0,836 mmol) v dirnethylformamidu (1 ml) ochladí a po kapkách se za míchání neutralizuje TEA (zelený lakmus). Oba roztoky sc spojí a míchají se při teplotě místnosti přes noc. Reakční směs se filtruje a objem se za vakua sníží na polovinu, potom se přikape k energicky míchanému 5% roztoku hydrogcnuhličitanu sodného (50 ml). Po 1 hodině míchání se pevné složky odfiltrují, promyjí se vodou a suší se na vzduchu za získání požadované sloučeniny (140 mg. 35 %) ve formě béžové pevné látky.
’H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9.06 (s, IH), 8.20 (d, 1H, 8 Hz), 8.07 (m, IH). 8,00 (s, III), 7.94 (d, 1H, 8 Hz). 7.47 (d. 2H, 9 Hz). 7,27 - 7.19 (m. 6H), 7,03 (t, IH, 7 Hz). 6.92 (d. 2H, 9 Hz). 4,84 (s, 2H). 4.34 - 4,31 (ni, IH). 3,78 (s, 2H). 3,48 (d. IH, 6 Hz), 3.44 (s, 311), 3.37 - 3.27 (m. 2H), 2.72 (t, 2H. 7 Hz), 2,33 (s, 3H), 1.58- 1,46 (m. 3H), 0,91 (dd,6H,6Hz, 13 Hz); m/z ,589.
E, Roztok sloučeniny z kroku D (24 mg, 0,041 mmol) a 2N hydroxid lithný (62 μΙ, 0,122 mmol) v dirnethylformamidu (1 ml) sc míchá 6 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se okyselí (červený lakmus) kyselinou trifluoroctovou a čisti se přimo pomoci preparativni HPLC za získání sloučeniny RX19 (10 mg. 43 %) ve formě bílé pevné látky.
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm) 9,27 (s. IH), 8,18 (m, IH), 8,16 (m. IH), 7,92 (d, IH, 7 Hz). 7.46 (d. 211, 8 Hz). 7,19- 7,03 (m, 1211), 6,88 (d, 2H, 8 Hz), 4.63 (s, 2H). 4,33 (m, IH), 2,69 (t, 8 Hz), 2,34 (s, 3H). 1,51 - 1,33 (m,3H). 0,96-0,88 (dd, 6H. 6 Hz, 12 Hz), m/z 5.73.
Příprava sloučeniny RX23
A. K míchajícímu se roztoku m-liydroxyanilínu (1.09 g, 0,01 mmol) a HOBt (2,0 g. 0,015 mmol) v diinclhylformamidu (12 ml) se při 0 ĎC přidá EDC (2.7 g. 0,014 mmol). Směs sc nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 1 hodinu. Potom se reakční směs ochladí na 0 °C a přidá se 2-MPUPA (2.84 g. 0,01 mmol). Do bazické reakce (zelený lakmus) se přikape tricthylamin a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Potom se filtruje, přikape se do 500 ml 5% hydrogenuhličitanu sodného, který se energicky míchá. Po 2 hodinách míchání se pevná látka
CZ 298089 Β6 odfiltruje přes fritu a promyje se vodou. Po sušení ve vakuu přes noc se získá požadovaný produkt (3,2 g, 85 %) ve formě bělavé pevné látky.
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz. ppm) 7.94 (s. 1H). 7.82 (d. IH. 8 Hz). 7,21 (d, 2H. 8 Hz), 7.20 - 6,90 (m. 7H), 6,42 (d. 1H. 7 Hz). 3.53 (s. 211). 2.22 (s. 3 H >: m/z 376.
Β. K míchajícímu sc roztoku sloučeniny z kroku A (200 mg. 0,53 mmol) a 4 bromethylbutvrátu (104 mg. 0.53 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se přidá uhličitan draselný (120 mg, 1,45 mmol). Suspenze se míchá 6 hodin při 70 až 75 °C, filtruje se přes nálevku s fritou a přikape sc do 50 ml energicky míchaného roztoku 5% kyseliny chlorovodíkové. Vodná suspenze sc extrahuje 3 x 50 ml ethylacetátu. Organické vrstvy se spojí a pro myjí se solankou (25 ml), suší se nad síranem horečnatým a odpaří se za získání požadované sloučeniny (150 mg, 57 %) ve formě žluté pevné látky.
'HNMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz. ppm) 8,98 (s, 1H). 7.88 (s. 111), 7.85 (d. 1 H, 8 Hz), 7,40 (d, 211, 7 Hz). 7,3 - 7.1 (m. 6H). 6.95 (t, IH, 6 Hz). 6,6 (d, 1H, 6 Hz), 4.45 (t. IH. 6 liz), 4,02 (kv. 2H, 7 Hz). 3,91 (t, 2H, 7 Hz), 3,54 (s. 2H), 2,42 (t, 2H, 7 Hz), 2,25 ($. 3H). 1,94 (t, 2H. 7 líz), 1,15 (t. 3H. 7 Hz): m/z 490.
C. K míchajícímu se roztoku sloučeniny z kroku Β (150 mg, 0,31 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se při teplotě místnosti přidá 2N roztok hydroxidu lithnélio (385 μΙ. 0.77 mmol). Směs se míchá přes noc a potom se okyselí kyselinou trifluoroctovou (červený lakmus) a alikvotní díl se čistí pomocí preparát i vní HPLC za získání sloučeniny RX23.
'1INMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz, ppm) 9,01 (s, 1H), 7,91 (s, 1H). 7.83 (d. IH, 8 Hz), 7,39 (d, 1H. 8 Hz). 7,29 (s. 1H), 7,23 - 7,14 (m, 5H), 6,92 (t, 1H, 8 Hz), 6.6 (d, 1H, 8 I Iz), 3,92 (t, 2H. 7 Hz). 3,54 (s, 2H). 2.35 (t, 2H, 7 Hz), 2,22 (s. 1 Η), 1.90 (m, 2H); m/z 460.
Příprava sloučeniny RX19
A. Sloučenina se připraví podle postupu pro přípravu sloučeniny RX23B za použití sloučeniny RX23A (119 mg, 0,317 mmol) a dimethylacetalu 3-brom -propionaldclivdu (89 mg, 0,49 mmol) s 250 mg uhličitanu draselného. Pevná látka se odfiltruje a dimethylformamid se odpaří ve vysokém vakuu. Po rekrystalízaci z met hano lu se získá požadovaný produkt (75 mg. 52%) ve formě bílé pevné látky.
'H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz. ppm) 8.98 (s. IH). 7,88 (s. IH), 7,83 (d, IH, 8 IIz), 7.39 (d, 211, 8 Hz). 7,32 (s, IH), 7,32 - 7,12 (m, 6H). 6.93 (t, IH. 6H). 6,6 (m, IH), 4.53 (t. 6H). 3.92 (t, 2H, 7H). 3.54 (s, 2H), 3.33 (s, 3H). 3,24 (s, 311), 2,22 (s. 311), 1.95 (q, 2H. 6 Hz. 6 Hz), m/z (M+Na) 500.
B. Sloučenina z kroku A (29 mg. 0,061 mmol) ve 2 ml směsi 50/50 tetrahydrofuran/voda s katalytickým množstvím p -toluensul fonové kyseliny sc míchá 4 hodiny při 40 °C. Reakční směs se odpaří za vakua a použije se bez čištění: m/z 454. Surový zbytek se rozpustí vše 2 ml acetonu, ochladí sc v ledové lázni na 0 °C a přidá se 44 μ| Jonesova činidla. Reakční směs sc nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá sc přes noc. Přidá sc izopropanol (2 ml) a směs se míchá dalších 30 minut, filtruje se a odpaří se za vysokého vakua. Po preparativní HPLC se získá sloučenina RXI9 (15,5 mg. 57 %) ve formě žlutohnědé pevné látky.
“HNMR (perdcutcrodimethylsulíbxid, 300 MHz, ppm) 9,01 (s, 1H). 7,9 (s, IH), 7,83 (d, IH, 8 Hz), 7.40 (d. 211, 8 Hz), 7,31 (s, IH). 7,24 - 7,09 (m. 611). 6.93 (t, 111, 7 Hz), 6,59 (d, IH. 8 Hz), 4,09 (t, 2H. 6 1 Iz), 3,54 (s, 211), 2,66 (t. 2H, 6 Hz), 2,22 (s. 3); m/z 448.
Příprava sloučeniny BX41
A. K roztoku uhličitanu sodného (1.33 g. 12,51 mmol) ve vodě (35 ml) se po částech přidá 2-amíno-4-fluorbenzoová kyselina (1.94 g, 12,51 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti dokud se nestane homogenní, potom se ochladí v ledové lázní. Ke studenému roztoku se postupné přidá fosgen (9,72 ml, 1,93M roztoku v toluenu, 18.76 mmol). Po dokončení přidávání se reakční směs rychle míchá při teplotě místnosti 2 hodiny. Pevná sraženina se odfiltruje ze sání.
promyje se vodou (I x 35 ml, 1 x 20 ml), propláchne se n-hexanem a suší se na filtru. Získá se 2,023 g (89 %) požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky: teplota táni 228 až 229 °C: TLC (1:1 dichlormcthan/diethylethcr) Rf = 0.74;
io 'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 7,97- 7,93 (m. 111).6,84 6,79 (m,2H).
B. Pod proudem suchého dusíku se hydrid sodný (0.459 g. 60% disperze. 11.48 mmol) promyje n-hexanem (2 x 10 ml), suspenduje se v bezvodém dimethylformamidu (55 ml) a ochladí se v ledové lázni. Studená suspenze se přikape k roztoku produktu zčásti A (1,98 g. 10.93 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (55 ml). Po dokončení přidávání se směs míchá 45 minut při °C. K tomuto téměř bezbarvému roztoku se přidá methyIjodid (0,71 ml, 11,48 mmol). Reakční směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti dokud sc podle TLC nedokončí reakce. Dimethylformamid se odpaří za vysokého vakua na rotační odparce. Sirupovitý zbytek se rozpustí vc směsi ethylacetát/voda. oddělí sc a organická vrstva se promyje vodou (Ix), solankou (lx) a suší 2o sc nad síranem horečnatým. Po filtraci a odpaření sc získá 2,04 g (96 %) požadovaného produktu ve formě světle žluté pevné látky: TLC (100 % dichlormethan) Rt·= 0,18:
'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 8,10 - 8,04 (m, IH), 6,95 - 6.89 (m, IH). 6,84 -6,77 (m. 1H), 3,46 (s,3H).
C. Směs produktu zčásti B (2.04 g, 10,45 mmol) a glycinu (0,79 g, 10,45 mmol) v ledové kyselině octové (22 ml) se pod dusíkem zahřívá k varu. Po 18 hodinách je podle TLC analýzy reakce dokončena a ochladí se na teplotu místnosti. Většina kyseliny octové se odpaří na rotační odparce za vysokého vakua. Sirupovitý zbytek sc trituruje diethylethereni (20 ml) a 2 hodiny sc pří teplotě místnosti rychle míchá. Pevná sraženina sc odfiltruje za sání, promyje sc etherem a suší se na filtru. Získá se 1,806 g (83 %) požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky: hmotová spektroskopie (LSP-t) 208.9: TLC (100 % ethylacetát) R( = 0,30:
'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm) 7,84 (široký l. 111), 7,89 - 7.74 (m, 1H), 35 6,92 6,86 (m, 1H), 6,83 - 6,79 (m. 1H), 3,65 (m, 2H), 3,24 (s, 3H).
D. Stejným způsobem, jako je popsáno pro přípravu sloučeniny BX47, část B, se produkt zčásti C výše (0,50 g, 2.402 mmol), ethylakrylát (0,39 ml. 3,60 mmol), bezvodý fluorid česný (0,401 g, 2,642 mmol) a tetraethylortosilikái (0,54 ml, 2,40 mmol) reagují v tetrahydrofuranu (8 ml) 18 hodin pod dusíkem při teplotě místnosti. Surový produkt se čistí pomocí velmi rychle kolonové c h rom atog rafie (100% dichlormethan až 10 % diethylether/dichlorinetlian) za získání 0,51 g (69 %) čistého produktu ve formě bílé pevné látky: hmotová spektroskopie (ESP+) 309,2; TLC (10 % diethylcther/dichlormethaii) Rf” 0,30:
'HNMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm) 7,83 - 7,78 (m. IH), 6,97- 6,90 (m. III), 6,86-6,82 (m, lil), 4,08 (kv. 211, J - 7.15 Hz). 3,98 (B z AB. IH. J =- 14.91 Hz). 3.87 - 3.80 (m. 311), 3.30 (s, 311). 2,74 - 2,54 (m. 211), 1,19 (t. 3H, J = 7.20 Hz).
E. Stejným způsobem, jako je popsáno pro přípravu sloučeniny BX47, část C, se produkt 50 z části D výše (0,51 g, 1,68 mmol) reaguje s dýmavou kyselinou dusičnou (3 ml) 18 hodin. Získá sc 0,49 g (83 %) surového požadovaného produktu ve formě pěny: hmotová spektroskopie (ESP+) 354,0: TLC (100 % diethylether) R, ” 0,25:
-84CZ 298089 B6 ]HNMR (deuterochioroform, 300 MHz. ppm) 8,61 (d. IH, J= 8,34 Hz), 7,07 (d. lil. J 11,83 Hz), 4,11 (kv. 2H. J = 7.11 Hz). 4.02 (s. 2H). 3.88 (t, 2H. J - 6,63 Hz). 3.38 (s, 3H), 2.80 - 2.57 (m. 2H). 1.23 (t, 3H, J = 7.21 1 Iz).
F. Stejným způsobem, jako je popsáno pro přípravu sloučeniny BX47, část D. se produkt z části E výše (0,35 g. 0,991 mmol). prášek železa (0,166 g. 2.97 mmol) a ledová kyselina octová (0,1 l ml. 1.98 mmol) zahřívají k varu ve směsi 2:1 diethylclher/voda (10 ml) 3 hodiny v dusíkové atmosféře. Získá se 0,302 g (94 %) surového požadovaného produktu ve formě oleje: hmotová spektroskopie (ESP+) 324,0; TEC (100 % ethylacetát) K- 0.53;
'HNMR (deuterochioroform. 300 MHz, ppm) 7,32 (d. IH. J= 9,41 Hz). 6,85 (d, lil, J-11.8 Hz), 4,51 (široký s, IH), 4,15- 4.00 (m. 3H), 3.89- 3,79 (m. 3H), 3,29 (s. 311), 2,78 - 2.60 (m. 21 í). 1,26 - 1.20 (m. 3H).
i? G, Produkt zčásti F (0.30 g, 0.93 mmol), 4-nitrofenyloctová kyselina (0.169 g. 0,93 mmol) a EDC (0,269 g, 1,40 mmol) se rozpustí v bezvodém dimethylformamidu a míchá se pod dusíkem při teplotě místnosti. Po 18 hodinách se reakční směs podle TLC analýzy dokončí a diinethylformamid se odpaří na rotační odparce za vysokého vakua. Zbytek sc rozpustí ve směsi cthylacetát/voda, oddělí se a organická vrstva sc promyje vodou (Ix) a 5% roztokem 20 hydrogenuhličitanu sodného (1 x). Spojené vodné vrstvy sc extrahují ethy lacctátem (2x). Spojené organické vrstvy sc promyjí solankou (Ix) a suší se nad síranem horečnatým. Roztok se filtruje, odpaří a čistí se pomocí kolonové chroniatografie (100 % chloroform až 40 % tetrahydrofuran/chloroform) za získání 0,279 g (61 %) čistého požadovaného produktu ve formě pěny: hmotová spektroskopie 486,6; TLC (1:1 tclrahvdrofuran/chloroform) R, = 0,53;
'H NMR (dculeroclilorofonn. 300 MHz, ppm) 8,54 (d. 211. J = 8,64 Hz), 8,22 (dd. IH. J - 1,90. 6,82 Hz), 7,52 (d. 2H, J = 8,68 Hz). 6,89 (d, HU = 11,79 Hz), 4.12 (kv, 2H. J - 7.13 Hz), 4.01 (A z AR. IH, J = 14,98 Hz). 3,87 (s, 211), 3,92 3.77 (m. 3H). 3.31 (s. 311), 2,79 - 2.57 (m. 2H). 1.23 (t, 3H. J = 7,13 Hz).
H. Stejným způsobem, jako jc uvedeno v části E výše, sc produkt zčásti G (0,28 g, 0,574 mmol), železný prášek (0,096 g, 1.722 mmol) a ledová kyselina octová (66 μΕ) zahřívají k varu ve směsi 2:1 ethanol/voda (6 ml) pod dusíkovou atmosférou 2 hodiny. Získá sc 0,208 g (78 %) surového požadovaného produktu ve formě pěny: hmotová spektroskopie (ESP+) 457,3;
TEC (1:1 tetrahydrofuran/chlorofonn) Rt- = 0,38;
Ή NMR (deuterochioroform, 300 MHz. ppm) 8.54 (d. 1H. ,1 = 8,64 Hz), 7,53 (široký s, IH), 7,07 (d, 2LL J - 8,24 Hz), 6,84 (d, HEJ = 11,70 Hz), 6,73 (d, 2H, J = 8,06 Hz). 4,14 - 4,04 (m, 2H), 3,99 (A z AB, IH. J - 14.92 Hz). 3,88 - 3,72 (m, 3H), 3.64 (s. 2H). 3,27 (s, 3H). 2,78-2,58 40 (m.2H), 1,25 - 1,20 (m. 311).
I. Roztok produktu zčásti H (0.21 g. 0,456 mmol) a o-tolylizokyanát (0,1 I ml, 0,89 mmol) v ethylacetátu (4,5 ml) se zahřívá k varu 2 hodiny v dusíkové atmosféře dokud sc podle TLC analýza reakce nedokončí. Reakční směs sc ochladí na teplotu místnosti. Sražená pevná látka se odfiltruje za sání, promyje se cthylacetátem a suší se na filtru za získání 0,159 g (59 %) čistého produktu vc formě bílé pevné látky: hmotová spektroskopic(ESP+) 590,2: TLC (1:1 tctrahydrofuran/chloroform) Rf= 0,50;
H NMR (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz. ppm) 10,07 (s, IH), 8,99 (s. IH), 8,22 (d. 11L 50 J = 8,77 I Iz), 7,89 (s, ΗI), £83 (d, 1H, J = 7,96 Hz). 7,427.38 (m, 3H), 7,23 (d. 2H J = 8,46 Hz). 7,17- 7.10 (m, 2H), 6.92 (L IH. J= 7.33 Hz), 4.08 3,98 (ni, 3H). 3,84 - 3,76 (m, 2H),
3,70- 3,60 (m, IH), 3,66 (s. 2H), 3,25 (s. 3H), 2,60- 2.54 (m, 2H), 2,23 (s, 3H), 1,14 1, (3H, J = £ll Hz).
- 85IZ 298089 B6
J. K slabě vroucí suspenzi produktu zčásti 1 (O.lOOg, 0,170 mmol) v bezvodém tetrahydrofuránu (17 ml) se v dusíkové atmosféře přidá trímethylsilanolát sodný (0,68 ml 1.0M roztoku v dichiormethanu, 0,678 mmol). Odstraní se zahřívání a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Sraženina sc odfiltruje za sáni, promyje se tetrahydrofuranem a suší se na filtru, s Surový produkt se rozpustí v ledové kyselině octové (1 ml), reaguje se s etherem {1 ml) a rychle se míchá přes noc. Pevná látka se odfiltruje, promyje se směsí 1:1 diethy lethcr/kyselina octová a suší se na filtru. Získá se 0,059 g (62 %) sloučeniny BX41 ve formě bíle pevné látky: hmotová spektroskopie (ESP+) 584,0 (Μ 4- Na);
to '14 NMR (perdeuterodimethy Isulfoxid. 300 MHz. ppm) 10,07 (s. HI), 9,03 (s, IH), 8,22 (d, IH. J = 8,71 Hz), 7,93 (s, IH), 7,82 (d, IH. J= 7.91 Hz), 7,42 - 7.38 (m, 3H). 7,24 (d, 2H.
J = 8,36 Hz), 7,17 7.10 (m, 2H). 6,92 (t, IH. J = 7.32 Hz). 4,05 (A z ΛΒ. IH,J= 15,1 Hz), 3,83 (B z AB, 1H. J - 15.1 Hz). 3.72 - 3.66 (ni, 4H). 3,25 (s. 3H), 2,50 - 2.46 (m. 2H). 2.23 (s, 3H).
Příprava sloučeniny BX67
A. Způsobem popsaným pro přípravu sloučeniny BX41, část D, se I-methyl-1.4-benzodiazepin-2,5-dion (5,00 g. 26.29 mmol). bc/vodý fluorid česný (4,393 g. 28.92 mmol), ethyikrotonát (4.90 ml, 39,44 ml) a tetraethylortosiIikát (5.86 ml, 26.29 mmol) reagují v bezvodém tetrahydrofuranu (88 ml) 72 hodin při teplotě místnosti pod dusíkem. Surový produkt se čistí pomocí velmi rychle chromatografie (100 % dichlormcthan až 25 % diethylether/dichlormethan) za získání 4,04 g (50 %) čistého požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky: hmotová spektroskopie (ESP+) 305.4; teplota tání 84 až 86 °C; TEC (1:1 diethvlcther/dichlormcihan) Rť=0,5l;
'HNMR (deuterochloroform. 300 MHz. ppm, rotamery) 7,87 - 7,79 (m, IH). 7,51- 7.45 (m, 1 H), 7,28- 7,23 (m. 111).7,17 7.14(m, 1H), 5.31 - 5,22 a 5,19 - 5,08 (m. 111).4,1310 4.03 (m, 211), 3,86 3.73 (m, 2H), 3,35 (s. 3H). 2,85 - 2,77 a 2,59 - 2,45 (m. 2H). 1.33 a 1,28 (d. 311. J = 6.9 Hz). 1,24- 1,16 (m, 3H).
B. Způsobem popsaným pro přípravu sloučeniny BX47. část E, se produkt zčásti A výše (4,04 g, 13.27 mmol) reaguje 2 hodiny s dýmavou kyselinou dusičnou (26 ml). Surový produkt sc při -20 °C trituruje diethyletherem (45 ml), pevná hmota se rozruší pomocí špachtle. Suspenze se potom rychle míchá 18 hodin při teplotě místnosti. Pevná látka sc odfiltruje za sáni a suší sc na
3? filtru. Získá se 4,061 g (88%) čistého produktu ve formě nažloutlého prášku: hmotová spektroskopie (ESP+) .350,3; teplota tání 104 až 106 °C; TLC (100 % ethy lacctát) Rt· - 0.76;
'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm, rotamery) 8,75 - 8.70 (m. IH), 8,34 - 8,29 (m, 1 H), 7,33-7,30 (m, IH), 5,24 - 5,06 (m. HI), 4,154,03 (m, 2H), 3.94 - 3.78 (m, 2H). 3.41 ίο (s, 311). 2,85 - 2,76 a 2.63 - 2,47 (m.2H), 1,35 a 1.30 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,27 - 1,17 (m, 311).
C. Suspenze produktu zčásti B (4,06 g, 11.62 mmol), železný prášek (1,95 g, 34,87 mmol) a ledová kyselina octová (1,33 ml, 23.24 mmol) ve směsi 2:1 cthanol/voda (120, ml) se zahřívá pod dusíkem 3 hodiny k varu. Po dokončení reakce sc směs ochladí na teplotu místnosti, zředí se vodou (40 ml) a filtruje se přes křemelinu. Reakční baňka a filtrační koláč sc promyjí ethylacetátem (4 x 100 ml). V dělicí nálevce se spojené filtráty promyjí 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 100 ml). Spojené vodné vrstvy se extrahují ethylacctátem (I x 100 ml) a spojené organické vrstvy se promyjí solankou (1 x 100 ml) a suší sc nad síranem horečnatým. Po filtraci a odpaření se získá surový produkt ve formě pěny. Čistí se pomocí triturace etherem. 50 nejprve při -20 °C, potom 2 hodiny za varu. Po ochlazení na teplotu místnosti se pevná látka oddělí filtrací za sání, promyje se diethyletherem a suší se na filtru. Získá sc 3.09 g (83 %) čistého produktu broskvové barvy: hmotová spektroskopie (ESP+j 320.0; teplota tání 116 až 118 °C; TEC (100 % ethylacelát) Rt = 0.35;
-86CZ 298089 B6 '11 NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm. rotamery) 7.15- 7,08 (ni, 1H), 6.96 6,93 (m. IH), 6.84 - 6,79 (m, IH), 5.27 - 5.05 (m, 1H). 4,27 (široký s. 2H), 4.11 - 4,01 (m. 2H), 3,84- 3,62 (m, 2H). 3.26 (s, 3H). 2.81 - 2.73 a 2.56- 2,42 (m. 211), 1.30 - 1,24 (d. 311, J = 6,9 Hz). 1.22- 1,14 (m,3H).
I). Způsobem popsaným pro přípravu sloučeniny BX41, část G, se produkt zčásti C (3.09 g, 9,66 mmol) kondenzuje s 4-nitrofcnyloctovou kyselinou (2,10g. 11.59 mmol) v přítomnosti EDC (2.78 g, 14,49 mmol) v bezvodcm dimethyl formani idu (50 ml) 18 hodin pod dusíkem při teplotě místnosti. Surový produkt se čistí pomocí triturace diethylelherem při teplotě místnosti. Pevná látka se odfiltruje za sání, promyje se diethylethcrem (100 ml) a suší sc na filtru. Získá sc 4,30 g (92 %) požadovaného produktu ve formě nažloutlého prášku: hmotová spektroskopie (ESP+) 483,3; teplota tání 118 až 120 °C; TLC (100 % ethylacetál) Rt ~ 0,45;
'HNMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm, rotamery) 8,77 a 8,32 (s. III), 8,25 (dd. 1H. J - 2.54. 8,99 Hz). 8,19 a 8,17 (d. 2H, J 8,67 a 8,64 Hz. v tomto pořadí). 7.69 a 7.59 (d, IH, J = 2.60 a 2.56 Hz. v tomto pořadí), 7,50 a 7,49 (d. 211, J = 8.73 a 8,68 Hz, v tomto pořadí). 7J5 (d, IH, J - 8,98 Hz), 5.28 - 5.13 (m, IH), 4,09 a 3,98 (kv, 2H, J ‘ 7.12 a 7,13 Hz, v tomto pořadí), 3,873,73 (m. 411). 3.35 a 3,32 (s, 3H). 2,84 - 2,75 a 2.54 2,47 (m. 211), 1,32 a 1,25 (d, 3H. 6,93 a 6,86 Hz, v tomto pořadí), 1,21 a 1,15 (t, 311, .1 = 7,23 a 7,12 Hz, v tomto pořadí).
E. Způsobem popsaným v části C výše, se produkt zčásti D (4,30 g, 8.91 mmol) redukuje železným práškem (1,49 g. 26.74 mmol) a kyselinou octovou (1.02 ml. 17,82 mmol) za varu ve směsi 2:1 ethanol/voda (90 ml). Po vodném zpracování se získá 3.98 g (99 %) surového produktu jako křehké pěny: hmotová spektroskopie (ESP+) 453,5; TLC (100 % ethylacctát) Rr = 0.30;
;H NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm. rotamery) 8,09 (m. III). 7,43 - 7,38 (m. IH). 7,10 7,02 (m, 311), 6,73 - 6,69 (m, 2H), 5,21 - 5,08 (m, 1H). 4,13-4,01 (m, 2H), 3,76 (s. 211), 3,60 (s, 2H), 3,31 a 3.30 (s, 3H), 2,82 - 2,74 a 2,53 - 2,46 (m, 20 2H), 1,34 1,15 (ni, 611).
F. Způsobem popsaným pro přípravu sloučeniny BX41, část L sc produkt zčásti E (3,98 g.
8,8 mmol) zahřívá 3 hodiny k varu v ethylacetátu (90 mi) s o-tolvlizokyanátcm (2,18 ml. 17,6 mmol). Reakční směs sc ochladí na teplotu místnosti a odpaří se zhruba na jednu třetinu původního objemu. Pevná sraženina se odfiltruje za sání, promyje sc cthylacetálem (1 x 25 ml) a suší sc na filtru. Získá sc 3.77 g (73 %) požadovaného produktu jako bílého prášku; hmotová spektroskopie (ESP+) 586,4; teplota tání 164 až 166°C; TLC (1:1 letrahydrofuran/chloroform) Rf-0,45;
'11 NMR (deuterochloroform, 300 MHz, ppm. rotamery) 9,02 a 8.90 (široký s, 1 H), 7,96 a 7,92 (Široký s, IH), 7,88 - 7,84 (m, 111), 7.68 - 7,63 (m, 1H), 7.51 - 7,48 (m, 1Hj, 7,31 (široký s, IH). 7,03 - 6,85 (m, 811). 5.22 - 5,10 (m. IH), 4,06 - 3.92 (m, 2H), 3,75 - 3.65 (ιη, 2H), 3,40 (s. 2H), 3,26 a 3,23 (s, 3H), 2,79 2,70 a 2.51 - 2,44 (m, 2H), 2,06 (s, 314), 1,30 a 1,22 (d, 3H, .1 - 6.9 Hz), 1,17- I.11 (m, 3H).
G. K zamlženému roztoku produktu zčásti F (LOOg, 1,71 mmol) v dichlormethanu (7 ml) se postupně při teplotě místnosti přidá trimelhylsilanolát sodný (10,25 ml l,0M roztoku v dichlormethanu, 10,25 mmol). Po míchání přes noc při teplotě místnosti se reakční směs odpaří do sucha a pevný zbytek se pomocí 1N kyseliny chlorovodíkové okyselí na pII2-3. Viskózní směs se zředí vodou (50 ml) a extrahuje se 20% směsí dielhy lethcru v tetrahydroluranu (1 x 100 ml). Organický extrakt sc promyje vodou (1 x 25 ml) a solankou (2 x 25 ml) a suší sc nad síranem horečnatým. Po filtraci a odpařeni sc získá 0,93 g surového produktu, který se rekrystalizuje z aceton itrilu za získání 0,657 g (69 %) sloučeniny BX67 jako béžového prášku: hmotová spektroskopie (ESP+) 558.2; teplota tání 237 až 239 °C; TLC (3:1 tctrahydrofuran/chloroform) Rf = O,37;
-87CZ 298089 B6 ’ΗΝΜΚ (perdeuterodimethylsulfoxid, 300 MHz. ppm. rotamery) 10.46 (s. IH), 8.99 (s, IH). 7,95 - 7,93 (m, 111), 7,88 (s, 111), 7.84 - 7,76 (m, 2H). 7,40 (d. 211, J - 8,56 1 Iz). 7,33 ídd. 1 H. J= 1.82. 8.93 Hz). 7.23 (d. 211. .1 - 8,50 Hz). 7.17- 7.07 (m. 211). 6,95 - 6,90 (m, lil), 5.03 - 4,90 (m. IH). 3,84 - 3,71 (ABkv, 2H). 3,56 (s, 2H). 3,24 a 3.22 (s, 3H). 2.56- 2.40 (m, 211), 2,22 (s. 3H). 1.17 a 1J4 (d, 3H. J = 7.0 a 6.80 Hz, v tomto pořadí).
Příprava sloučeniny MX3
A. K roztoku Z-Asp(OtBu) (1.00 g, 3,09 mmol) v bezvodém DME (8 ml) se při -20 °C pod dusíkem přidá N—methyImorfolin (0,34 ml. 3,09 mmol) a izobutvlchlorforniiát (0,40 ml. 3,09 mmol). Po 5 minutách se reakční směs filtruje přes skelnou vatu, a tak se odstraní pevné zbytky. K filtrátu sc při 0 °C přidá ethericky roztok diazomethanu (asi 4.64 mmol). Po 30 minutách se přebytek diazomethanu odstraní probubláváním proudem dusíku 10 minut. Reakční směs sc odpaří do sucha a zbytek se rozpustí při teplotě místnosti v methanolu (16 ml) ke kterému sc přidal roztok benzoálu stříbrného (0.14 g. 0,62 mmol) v triethy laminu (1,55 ml). Po 30 minutách míchání sc reakční směs odpaří do sucha, zby tek se rozpustí v ethylacetátu a tento roztok se přefiltruje přes lůžko ze silikagelu. filtrát se promyje 5% roztokem hydrogenuhliěitanu sodného (3x), vodou (1 x), 5% kyselinou citrónovou (3x) a solankou (2x) a suší se nad síranem horečnatým. Po filtraci a odpaření se získá surový produkt ve formě oleje (0.70 g, 64 %): hmotová spektroskopie (FAB) 348; TLC (20 % ethylacetát/hcxan) lý - 0.30:
!H NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm) 7.35 - 7,27 (m. 5H). 5.72 a 5,58 (široký d, HL
8.9 Hz). 5.10 a 5.06 (s, 2H), 4.60-4,51 a 4.36 - 4,29 (m, I), 3,73 a 3.64 (s, 3H), 2.75-2,47 (m. 411). 1.40 (s, 9H).
B. Roztok výše uvedeného produktu (0,70 g, 1,99 mmol) v methanolu (3 ml) se při teplotě místnosti reaguje s IN roztokem hydroxidu sodného (3 ml). Po 1 hodině míchání je reakce podle TLC analýzy dokončena. Zbytek se zředí vodou a extrahuje etherem (3x). Tyto extrakty se vylijí. Vodná vrstva se okyselí (pH 4) přidáním 1M roztoku hydrogensíranu sodného a extrahují se ethylacetátem (3x). Spojené ethylacctátové extrakty se promyjí vodou (1 x), a solankou (I x) a suší se nad síranem horečnatým. Produkt se získá ve formě oleje (0,52 g, 77 %): hmotová spektroskopie (FAB) 338 (M+H), 360 (Μ i Na); TLC (1:1 ethylacetát/chloroform) R, ~ 0.13;
'HNMR (CDCh. 300 MHz. ppm) 7,33 7,28 (m. 5H). 5.77 a 5.63 (d. IH. J - 8.7 Hz). 5,1 I a 5,07 (s, 2H). 4.63 -4.58 a 4,37- 4.30(m. IH), 2.78-2.50 (m. 4H). l.40(s.9H).
C. Směs DCC (1.85g, 8,95 mmol) a HOBT (1.37 g, 8,95 mmol) v ethylacetátu (55 ml) sc míchá při teplotě místnosti 20 minul dokud se nestane homogenní. Přidá se produkt z části B (3,02 g, 8,95 mmol), 4-methoxybenzylamin (1,17 ml. 8,95 mmol) a N-mcthylmorfblin (1,97 ml.
17.9 mmol). Směs se míchá přes noc, filtruje se a filtrační koláč sc promyje studeným ethylacetátem (50 ml). Filtrát se promyje vodou (2x), 5% kyselinou citrónovou (Ix). 5% hydrogenuhličitanem sodným (Ix) a solankou (ix) a suší se nad síranem horečnatým. Po velmi rychle chromatografii na silikagelu za eluce 100% chloroformem a potom 10% ethylacetátu v chloroformu se získá produkt ve formě bílé pevné látky (3,41 g, 83 %): teplota tání = 100 až 102 °C: hmotová spektroskopie (FAB) 457; TLC (9:1 chloroform/methanol) Rf = 0,71;
'H NMR (deuterochloroform, 300 MHz. ppm) 7,33 - 7.27 (ni. 5H). 7.16 (d, 2H, J = 8,6 Hz). 6,82 (d. 2H. J- 8,7 Hz), 6,06 (široký s. lil), 5,89 (široký d, IH). 5.04 (s, 2H). 4.31 (d, 2H. J ~ 5,6 Hz), 4.31 -4,22(m, IH). 3.76 (s, 3H). 2,68 2,44 (m,4H), 1,39 (s, 9H).
D. Suspenze tohoto produktu (0.50 g. 1,1 mmol) a 10% palladia na uhlí Degussa typu El01 NE/W (0,117 g) v methanolu (20 ml) se hydrogenuje při ilaku vodíku 0,17 MPa 18 hodin. Reakční smčs se filtruje přes křemclinu a promyje se mctlianolem. Filtrát sc odpaří do sucha. Produkt se získá ve formě bezbarvého oleje (0,36 g, 100 %): hmotová spektroskopie (FAB) 323; 1 LC (9:1 chloroform/methanol) Rs ~ 0,30;
-88CZ 298089 B6 'H NMR (deuterochloroform. 300 MHz, ppm) 7.58 (široký s, ΠΙ), 7.15 (d. 2H, J = 8,6 Hz). 6.79 (d, 2H, J 8.6 Hz). 4,30 (d. 2H, J = 6,50 Hz), 3.74 (s. 3H), 3.54 (m, 1H), 3.15 (široký s. 2H). 2,46 - 2.29 (m. 411), 1,40 (s, 911).
E. Produkt zčásti D (0,36 g. 1.1 mmol) a Eschenmoserova sůl (0,204 g, 1,1 mmol) se zahřívá k varu v acetonitrilu (10 ml) 42 hodin v inertní atmosféře. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří se do sucha. Zbytek se zředí 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se ethylacelátem (3x). Spojené organické extrakty sc promyjí 5% roztokem hydrogen10 uhličitanu sodného (lx). vodou (Ix) a solankou (Ix) a suší se nad síranem horečnatým). Po velmi rychlé chromatografíi za eluce gradientem směsi chloroform/ethylacctát se získá produkt ve formě oleje (0.19 g, 51 %): hmotová spektroskopie (FAB) 335; TLC (1:1 ethylacctál/ehloroforni) Rf=0.22;
'11 NMR (deuterochlorofbnn. 300 MHz. ppm) 7.16 (d. 211. .1 = 8.6 Hz). 6.81 (d. 2H. .1 -= 8.6 Hz).
4.64 (A zAB. 1H. J- 14.6 Hz). 4.27 (ΒζΛΒ. III. J- 14.6 Hz). 4.10 (ABkv. 211. J - 11.7 liz). 3,75 (s. 311), 3,28 (m, IH). 2,50 (dd, 111. J = 4.4, 17,2 I Iz), 2,37 (AB z. ABX. 211. J = 15.8 Hz). 2,24 (dd. 1H. J - 11.2. 17.2 Hz). 1.99 (široký s. IH). 1.40 (s, 9H).
F. Směs o-tolylureidofcnyloctové kyseliny (3,53 g. 12.4 mmol), H-Leu-OtBu-HCI (2,78 g, 12,4 mmol). TBTU (3.98 g, 12,4 mmol), a diizopropyletliylaminu (4,32 ml. 24.8 mmol) vdimethylformamidu (25 ml) se míchá přes noc při teplotě místnosti. Produkt se sráží přidáním vody (10 ml). Pevná látka se odfiltruje na střední fritě, promyje se směsí 2:1 dimethylformamid/voda (35 ml), vodou (25 ml) a diethyletherem (2 x 25 ml) a suší se na filtru (4,18 g, 74 %), Tento 2? produkt sc suspenduje v dichlormethanu (16 ml) a reaguje se s kyselinou trifluoroctovou (16 ml) a míchá se 2 hodiny při teplotě místnosti, Reakční směs se odpaří za získání sirupu, který se odpaří z dichlormethanu (2 x 20 ml). Zbytek se trituruje diethyletherem (100 ml) 2 hodiny při teplotě místnosti. Pevná látka se odfiltruje na střední fritě, promyje sc diethyletherem (50 ml) a suší sc na filtru (3,40 g, 93 %): hmotová spektroskopie (FAB) 398,
II. Produkt z kroku G (0.66 g, 1,96 mmol). produkt zčásti F (0,78 g. 1.96 mmol) a EDC (0,410 g, 2,14 mmol) se míchají v NMP (4 ml) 48 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se nalije do ethylacctátu (60 ml), promyje sc vodou (8x6 ml), solankou (I x), a suší sc nad síranem horečnatým. Požadovaný diastereoizomer se izoluje čistý (0,34 g. 24 %) po opakované velmi 35 rychlé chromatografíi za použití směsi 1.1 ethylacctát/dichlormcthan: hmotová spektroskopie (ESP+) 714,3; TEC (100 % ethylacetát) R( = 0,53;
'H NMR (deuterochloroform, 300 Ml Iz, ppm) 7,53 - 7,43 (ni, 211). 7,20 - 7.00 (m. 9H). 6,806,73 (ni. 2H), 6,45 - 6,33 (m. 1H), 5,31 - 4,58 (m, 4H), 4,21 - 4.00 (m, IH), 3,73 (s, 3H). 3,41 w (s, 2H), 2,74 2,35 (πι. 4H). 2,14 (s. 3H), 1.36 (s, 9H), 1.56 - 1,05 (m. 311), 0,88. 0.82. 0,68, 0,63 (4d. 6H celkem, J - 6,17. 6,32, 6,46, 6.37 Hz, v tomto pořadí),
G. Tento produkt (0,34 g. 0.476 mmol) se míchá v kyselině trifluoroctové (3 ml) 3 hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs se odpaří do sucha a zbytek se odpaří z dichlormethanu 45 (3 x 3 ml). Surový produkt se při teplotě místnosti trituruje diethyletherem, odfiltruje sc a suší se na filtru. Produkt MX3 se získá ve formě světle žluté pevné látky (0,263 g, 84 %): hmotová spektroskopie (ESP+) 680,2 (M+Na);
'11 NMR (perdeuterodimethylsulfoxid. 300 MHz, ppm) odpovídá struktuře a potvrzuje, že se 50 jedná o rotamery'.
Odborníkům v této oblasti bude zřejmé, že mohou být provedeny různé úpravy způsobu a prostředků podle vynálezu bez toho, aby došlo k odchýlení sc nebo omezení rozsahu podle předkládaného vynálezu. Předkládaný vynález tedy zahrnuje modifikace a variace podle vynálezu pod 55 podmínkou, žc odpovídají rozsahu připojených nároků a jejich ekvivalentů.
-89CZ ZVBU89 B6
Tabulka 2 (Namc označení, Act = aktivita) 'Ί i
X
T7. TZ
ΖΣ ....../ zx >;
O < ΦΪ <
Ei c·
<0
z; Z!
-90CZ B6
Tabulka 3 (Name = označení, Act ~ aktivita, prodrug - profarmakum)
ΞΕΖ
ZI
<0! Z!
-91 CZ 298089 B6
Tabulka 3 (pokr.) (Name označení. Act = aktivita, prodrug = profarmakum)
S >-
- 92 Tabulka 3 (pokr.) (Name = označení, Act = aktivita, prodrug = profarmakum)
C7. 298089 R6
- 93 CZ 298089 B6
Tabulka 3 (pokr.) (Name ~ označení, Act = aktivita, prodrug profarmakum)
-94CZ 298089 B6
Tabulka 3 (pokr.) (Name = označení, Act - aktivita, prodrug - profarmakum)
-95CZ 298089 B6
Tabulka 3 (pokr.) (Nanic = označení, Act = aktivita, prodrug profarmakum) ί
Z o c-.( /
X f
''
o VO~( zx !
\J /Τ’ _// \\
Z
O i
r.
\ z
C°Λ (
i o (J<
Y > O ijj ξ 0) Z .Ξ1.
-96CZ 29NUS9 B6
Spol. Pat, č . .. Výhodná s]oucenina Hybridní struktura
-97C7. 298089 B6
-98CZ Z9SU89 B6
-99CZ ZV8U89 B6
- 100CZ 298089 B6
- 101 CZ 298089 B6
- 102 CZ 298089 Βΰ
- 103-
- 104I./. zveuay L36
WO 93/00174
- 105 CZ 298089 B6
-106CZ 298089 B6
Searls WO 94/00424
- 107 CZ 298089 B6
- 108 CZ 298089 B6
- 109CZ 298089 B6
-110CZ 298089 B6
- 113CZ 298U89 Βΰ
-114CZ 29X089 136
115 CZ 298089 B6
- 116CZ 298089 B6
- [ 17Cl 298089 B6
-118CZ 298089 B6

Claims (5)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    L llb/Illa inhibitor obecného vzorce II (11 ).
    io ve kterém X zahrnuje llb/Illa determinant specifičnosti, který nemá významnou VLA-4 aktivitu, přičemž X je vybráno ze skupiny, kterou tvoří:
    H
    - 119CZ 298089 B6 a Y je peptoid obecného vzorce PBI nebo PB2 ( PB1) i
    kde
    A' jc vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina NR1, atom kyslíku, atom síry a skupina (CR'R2V
    A~ je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina SO2R', skupina COR1 a skupina (CR1 R2)t)R2 n jc0až5;
    m je I až 4;
    15 r je 0, 1;
    W je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina C()>H, skupina SÓJI, skupina PO4H> tetrazolová skupina a atom vodíku;
  2. 2d P je vybráno ze skupiny, kterou tvoří skupina CO, skupina SO2;
    - 120CZ 298089 B6
    R1 a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku: alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina; cykloalkylová skupina: cykloalkenylová skupina; arylová skupina; arylalkylová skupina; heterocyklická skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkynylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinou, thioalkoxyskupinou. karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou;
    R' jc vybráno ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku; arylová skupina: substituovaná arylová skupina; arylalkylová skupina: alkylová skupina; alkenylová skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná heterocyklickou skupinou, thioalkoxyskupinou, karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou, alkoxyskupinou nebo atomem halogenu;
    R a Rl(’jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methylová skupina;
    Ru je vybráno ze skupiny, kterou tvoří alkylová skupina; alkenylová skupina; alkynylová skupina; cykloalkylová skupina; cykloalkenylová skupina; arylová skupina; ary laiky lová skupina; heterocyklická skupina; a alkylová skupina popřípadě substituovaná cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, alkenylovou skupinou, alkynylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, atomem halogenu, arylalkoxyskupinou. thioalkoxyskupinou, karboxylovou skupinou, alkoxykarbonylovou skupinou nebo karboxamidovou skupinou.
    2. Způsob přípravy llb/UIa inhibitoru podle nároku 1, vy z n a č uj í c í se tím, že zahrnuje stupně, při nichž se:
    a) připraví VLA-4 inhibitor obsahující VI A-4 determinant specifičnosti a integrinový skelet;
    b) nahradí jmenovaný VLA-4 determinant specifičnosti llb/IIIa determinantem specifičnosti za vzniku sloučeniny, která má Ilb/llla inhibiční aktivitu.
  3. 3. Způsob podle nároku 2. v y z na č uj í c í se tím. že integrinovým skeletem ve stupni a) je peptoid.
  4. 4. Použití Ilb/llla inhibitoru podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení stavu souvisejícího s llb/IHa buněčnou adhezí.
  5. 5. Farmaceutický prostředek, vyznačující s c t í m , že obsahuje 1 lb/11 la inhibitor podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.
CZ20031362A 1996-07-25 1997-07-24 Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem CZ298089B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2289096P 1996-07-25 1996-07-25
US3278696P 1996-12-06 1996-12-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ298089B6 true CZ298089B6 (cs) 2007-06-20

Family

ID=26696476

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20031362A CZ298089B6 (cs) 1996-07-25 1997-07-24 Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem
CZ0023299A CZ298080B6 (cs) 1996-07-25 1997-07-24 Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0023299A CZ298080B6 (cs) 1996-07-25 1997-07-24 Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem

Country Status (25)

Country Link
EP (1) EP0917462B1 (cs)
JP (1) JP2000516596A (cs)
KR (3) KR100504449B1 (cs)
CN (2) CN1230110A (cs)
AT (1) ATE339196T1 (cs)
AU (1) AU3738597A (cs)
BG (2) BG64902B1 (cs)
BR (1) BR9710570A (cs)
CA (1) CA2261848C (cs)
CZ (2) CZ298089B6 (cs)
DE (1) DE69736669T2 (cs)
EA (1) EA005526B1 (cs)
EE (1) EE04604B1 (cs)
ES (1) ES2271971T3 (cs)
HK (1) HK1020262A1 (cs)
IL (1) IL128221A (cs)
IS (1) IS4955A (cs)
NO (1) NO990338L (cs)
NZ (1) NZ333904A (cs)
PL (2) PL191082B1 (cs)
PT (2) PT914605E (cs)
SG (2) SG158733A1 (cs)
SK (1) SK8199A3 (cs)
TR (1) TR199900781T2 (cs)
WO (2) WO1998004913A1 (cs)

Families Citing this family (88)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69820614T2 (de) * 1997-05-30 2004-09-30 Celltech Therapeutics Ltd., Slough Entzündungshemmende tyrosin-derivate
US6492421B1 (en) 1997-07-31 2002-12-10 Athena Neurosciences, Inc. Substituted phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6362341B1 (en) 1997-07-31 2002-03-26 Athena Neurosciences, Inc. Benzyl compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6423688B1 (en) 1997-07-31 2002-07-23 Athena Neurosciences, Inc. Dipeptide and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US7030114B1 (en) 1997-07-31 2006-04-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6583139B1 (en) 1997-07-31 2003-06-24 Eugene D. Thorsett Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6559127B1 (en) 1997-07-31 2003-05-06 Athena Neurosciences, Inc. Compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6291453B1 (en) 1997-07-31 2001-09-18 Athena Neurosciences, Inc. 4-amino-phenylalanine type compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
US6939855B2 (en) 1997-07-31 2005-09-06 Elan Pharmaceuticals, Inc. Anti-inflammatory compositions and method
US6489300B1 (en) 1997-07-31 2002-12-03 Eugene D. Thorsett Carbamyloxy compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
DE19741235A1 (de) 1997-09-18 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19741873A1 (de) * 1997-09-23 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
EP1027328B1 (en) 1997-10-31 2006-08-23 Aventis Pharma Limited Substituted anilides
GB9723789D0 (en) 1997-11-12 1998-01-07 Zeneca Ltd Chemical compounds
DE19751251A1 (de) 1997-11-19 1999-05-20 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmezeutische Präparate
ES2221227T3 (es) * 1997-11-24 2004-12-16 MERCK &amp; CO., INC. Derivados sustituidos de beta-alanina como inhibidores de la adhesion celular.
US6645939B1 (en) 1997-11-24 2003-11-11 Merck & Co., Inc. Substituted β-alanine derivatives as cell adhesion inhibitors
US6407065B1 (en) 1998-01-23 2002-06-18 Novartis Ag VLA-4 antagonists
US6329372B1 (en) 1998-01-27 2001-12-11 Celltech Therapeutics Limited Phenylalanine derivatives
GB9805655D0 (en) 1998-03-16 1998-05-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6521626B1 (en) 1998-03-24 2003-02-18 Celltech R&D Limited Thiocarboxamide derivatives
WO1999052493A2 (en) * 1998-04-16 1999-10-21 Texas Biotechnology Corporation Compounds that inhibit the binding of integrins to their receptors
DE19821483A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
GB9811159D0 (en) 1998-05-22 1998-07-22 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
IL139967A (en) * 1998-05-28 2005-11-20 Biogen Idec Inc Beta-alanine derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
GB9811969D0 (en) * 1998-06-03 1998-07-29 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9814414D0 (en) 1998-07-03 1998-09-02 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
WO2000002903A1 (en) * 1998-07-10 2000-01-20 Cytel Corporation Cs-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
US6352977B1 (en) 1998-07-13 2002-03-05 Aventis Pharma Limited Substituted β-alanines
GB9916374D0 (en) 1998-07-23 1999-09-15 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9821061D0 (en) 1998-09-28 1998-11-18 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9821222D0 (en) 1998-09-30 1998-11-25 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9825652D0 (en) 1998-11-23 1999-01-13 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9826174D0 (en) 1998-11-30 1999-01-20 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6407066B1 (en) 1999-01-26 2002-06-18 Elan Pharmaceuticals, Inc. Pyroglutamic acid derivatives and related compounds which inhibit leukocyte adhesion mediated by VLA-4
GB9909409D0 (en) * 1999-04-24 1999-06-23 Zeneca Ltd Chemical compounds
JP4707240B2 (ja) * 1999-05-05 2011-06-22 アベンティス・フアーマ・リミテッド 細胞接着調節剤としての尿素
US6972296B2 (en) 1999-05-07 2005-12-06 Encysive Pharmaceuticals Inc. Carboxylic acid derivatives that inhibit the binding of integrins to their receptors
EP1189881B2 (en) * 1999-05-07 2013-01-23 Encysive Pharmaceuticals, Inc. Propanoic acid derivatives that inhibit the binding of integrins to their receptors
US6723711B2 (en) 1999-05-07 2004-04-20 Texas Biotechnology Corporation Propanoic acid derivatives that inhibit the binding of integrins to their receptors
JP3620577B2 (ja) * 1999-05-14 2005-02-16 栗田工業株式会社 超純水製造システムの洗浄方法
DE19922462A1 (de) 1999-05-17 2000-11-23 Aventis Pharma Gmbh Spiro-imidazolidinderivate, ihre Herstellung ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
US6518283B1 (en) 1999-05-28 2003-02-11 Celltech R&D Limited Squaric acid derivatives
US6756378B2 (en) 1999-06-30 2004-06-29 Pharmacopeia Drug Discovery, Inc. VLA-4 inhibitor compounds
AU5826100A (en) 1999-07-13 2001-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Benzazepinones and quinazolines
CN1377268A (zh) 1999-08-13 2002-10-30 比奥根公司 细胞粘合抑制剂
SI1214091T1 (sl) * 1999-09-14 2006-10-31 Biogen Idec Inc Terapija za kronicno ledvicno odpoved z uporabo enega ali vec integrinskih antagonistov
PT1214091E (pt) * 1999-09-14 2006-09-29 Imperial College Terapias para a insuficiencia renal cronica utilizando um ou mais antaginistas de integrina
US6534513B1 (en) 1999-09-29 2003-03-18 Celltech R&D Limited Phenylalkanoic acid derivatives
WO2001042192A2 (en) * 1999-12-07 2001-06-14 Novartis Ag Vla-4 integrin antagonists
US6455539B2 (en) 1999-12-23 2002-09-24 Celltech R&D Limited Squaric acid derivates
JP2003519697A (ja) 1999-12-28 2003-06-24 ファイザー・プロダクツ・インク 炎症性疾患、自己免疫疾患および呼吸器疾患の処置に有用な非ペプチド系のｖｌａ−４依存性細胞結合阻害薬
GB0001348D0 (en) * 2000-01-21 2000-03-08 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
DE10006453A1 (de) * 2000-02-14 2001-08-16 Bayer Ag Piperidylcarbonsäuren als Integrinantagonisten
JP2003531141A (ja) 2000-04-17 2003-10-21 セルテック アール アンド ディ リミテッド エナミン誘導体
GB0011817D0 (en) * 2000-05-16 2000-07-05 Pharmacia & Upjohn Spa Antagonists of integrin receptors
US6403608B1 (en) 2000-05-30 2002-06-11 Celltech R&D, Ltd. 3-Substituted isoquinolin-1-yl derivatives
US6545013B2 (en) 2000-05-30 2003-04-08 Celltech R&D Limited 2,7-naphthyridine derivatives
US7065453B1 (en) 2000-06-15 2006-06-20 Accelrys Software, Inc. Molecular docking technique for screening of combinatorial libraries
AU2001268607A1 (en) 2000-06-21 2002-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Piperidine amides as modulators of chemokine receptor activity
US6740654B2 (en) 2000-07-07 2004-05-25 Celltech R & D Limited Squaric acid derivatives
WO2002010136A1 (en) 2000-08-02 2002-02-07 Celltech R & D Limited 3-substituted isoquinolin-1-yl derivatives
GB2369357A (en) * 2000-10-09 2002-05-29 Bayer Ag Aliphatic, cyclic amino carboxylic acids as integrin antagonists
HUP0402305A2 (hu) 2000-11-28 2005-02-28 Genentech, Inc. LFA-1-antagonista vegyületek, az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények és alkalmazásuk
US7157487B2 (en) 2000-12-28 2007-01-02 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Vla-4 inhibitors
ES2200617B1 (es) 2001-01-19 2005-05-01 Almirall Prodesfarma, S.A. Derivados de urea como antagonistas de integrinas alfa 4.
DK1379520T3 (da) 2001-02-23 2006-08-21 Merck & Co Inc N-substituerede ikke-aryl-heterocykliske NMDA/NR2B-antagonister
DE10111877A1 (de) 2001-03-10 2002-09-12 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
EP1390034A4 (en) 2001-04-03 2005-07-13 Merck & Co Inc NMDA / NR2B NONARYL-HETEROCYCLO AMIDYL N-SUBSTITUTE ANTAGONISTS
US7056917B2 (en) 2001-04-26 2006-06-06 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Drug efflux pump inhibitor
GB2377933A (en) * 2001-07-06 2003-01-29 Bayer Ag Succinic acid derivatives useful as integrin antagonists
DE10137595A1 (de) 2001-08-01 2003-02-13 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
JP4676884B2 (ja) 2003-07-24 2011-04-27 第一三共株式会社 シクロヘキサンカルボン酸類
WO2005066124A1 (ja) * 2003-12-26 2005-07-21 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. ピロリジン誘導体の製造法
US7196112B2 (en) 2004-07-16 2007-03-27 Biogen Idec Ma Inc. Cell adhesion inhibitors
GB0517292D0 (en) 2005-08-24 2005-10-05 Univ Dundee Cell migration modulating compounds
EP2124996A4 (en) 2007-02-20 2010-03-24 Merrimack Pharmaceuticals Inc METHODS OF TREATING MULTIPLE SCLEROSIS BY ADMINISTERING ALPHA-FETOPROTEIN COMBINED WITH INTEGRIN ANTAGONIST
CA2680275C (en) 2007-03-09 2016-08-23 Renovis, Inc. Bicycloheteroaryl compounds as p2x7 modulators and uses thereof
CA2721093A1 (en) 2008-04-11 2009-10-15 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Human serum albumin linkers and conjugates thereof
US8563690B2 (en) 2008-11-03 2013-10-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Modulation of platelet aggregation
LT2558499T (lt) 2010-04-16 2017-07-25 Biogen Ma Inc. Antikūnai prieš vla-4
US20140094512A1 (en) 2012-10-02 2014-04-03 Nikolas Gunkel Method of modulating the degree of adipose tissue deposited intramuscularly
US10875875B2 (en) 2017-04-26 2020-12-29 Aviara Pharmaceuticals, Inc. Propionic acid derivatives and methods of use thereof
AU2019373242B2 (en) 2018-10-30 2023-07-13 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of alpha 4 beta 7 integrin
AU2019373240B2 (en) 2018-10-30 2023-04-20 Gilead Sciences, Inc. Quinoline derivatives as alpha4beta7 integrin inhibitors
KR102641718B1 (ko) 2018-10-30 2024-02-29 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 알파4베타7 인테그린 억제제로서의 이미다조피리딘 유도체
CN112969504B (zh) 2018-10-30 2024-04-09 吉利德科学公司 用于抑制α4β7整合素的化合物
WO2021030438A1 (en) 2019-08-14 2021-02-18 Gilead Sciences, Inc. Compounds for inhibition of alpha 4 beta 7 integrin

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1992008464A1 (en) * 1990-11-15 1992-05-29 Tanabe Seiyaku Co. Ltd. Substituted urea and related cell adhesion modulation compounds
WO1993008823A1 (en) * 1991-11-06 1993-05-13 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
US5260277A (en) * 1990-09-10 1993-11-09 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
US5403836A (en) * 1991-10-18 1995-04-04 Genentech, Inc. Benzazepine platelet aggregation inhibitors having specificity for the GPIIb IIIa receptor

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5256812A (en) * 1989-01-31 1993-10-26 Hoffmann-La Roche Inc. Carboxamides and sulfonamides
US5084466A (en) * 1989-01-31 1992-01-28 Hoffmann-La Roche Inc. Novel carboxamide pyridine compounds which have useful pharmaceutical utility
WO1991010140A2 (en) * 1989-12-29 1991-07-11 University Technologies International Inc. Methods for modelling tertiary structures of biologically active ligands including agonists and antagonists thereto and novel synthetic antagonists based on angiotensin
AU666318B2 (en) * 1991-06-28 1996-02-08 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic fibrinogen antagonists
US5272162A (en) * 1992-07-02 1993-12-21 G. D. Searle & Co. Platelet aggregation inhibitors
US5358956A (en) * 1992-10-14 1994-10-25 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
US5340798A (en) * 1992-10-14 1994-08-23 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
DE4302485A1 (de) * 1993-01-29 1994-08-04 Merck Patent Gmbh Piperazinderivate
JP3173792B2 (ja) * 1993-02-22 2001-06-04 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド フィブリノーゲンレセプターアンタゴニスト
US5614539A (en) * 1993-03-15 1997-03-25 G. D. Searle & Co. Urea compounds which are useful as platelet aggregation inhibitors
WO1994022444A1 (en) * 1993-03-29 1994-10-13 Smithkline Beecham Corporation Tricyclic compounds for inhibiting platelet aggregation
US5721366A (en) * 1993-03-31 1998-02-24 G. D. Searle & Co Platelet aggregation inhibitors
US5441952A (en) * 1993-04-05 1995-08-15 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
IL110172A (en) * 1993-07-22 2001-10-31 Lilly Co Eli Bicycle compounds and pharmaceuticals containing them
DE4332384A1 (de) * 1993-09-23 1995-03-30 Merck Patent Gmbh Adhäsionsrezeptor-Antagonisten III
DE4341665A1 (de) * 1993-12-07 1995-06-08 Basf Ag Bicyclen-Derivate, ihre Herstellung und Verwendung
DE4405378A1 (de) * 1994-02-19 1995-08-24 Merck Patent Gmbh Adhäsionsrezeptor-Antagonisten
US5525617A (en) * 1994-08-24 1996-06-11 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5260277A (en) * 1990-09-10 1993-11-09 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds
WO1992008464A1 (en) * 1990-11-15 1992-05-29 Tanabe Seiyaku Co. Ltd. Substituted urea and related cell adhesion modulation compounds
US5403836A (en) * 1991-10-18 1995-04-04 Genentech, Inc. Benzazepine platelet aggregation inhibitors having specificity for the GPIIb IIIa receptor
WO1993008823A1 (en) * 1991-11-06 1993-05-13 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Guanidinyl and related cell adhesion modulation compounds

Also Published As

Publication number Publication date
BG64470B1 (bg) 2005-04-30
EE04604B1 (et) 2006-04-17
IL128221A (en) 2003-12-10
ATE339196T1 (de) 2006-10-15
DE69736669D1 (de) 2006-10-26
KR20040084945A (ko) 2004-10-06
EE9900032A (et) 1999-08-16
NZ333904A (en) 2000-06-23
BR9710570A (pt) 2005-06-28
IL128221A0 (en) 1999-11-30
EP0917462B1 (en) 2006-09-13
CA2261848A1 (en) 1998-02-05
PL190866B1 (pl) 2006-02-28
PL331332A1 (en) 1999-07-05
PT917462E (pt) 2006-12-29
PL191082B1 (pl) 2006-03-31
CZ298080B6 (cs) 2007-06-13
PT914605E (pt) 2007-08-07
EA005526B1 (ru) 2005-04-28
EP0917462A1 (en) 1999-05-26
KR20050085979A (ko) 2005-08-29
CN1478472A (zh) 2004-03-03
WO1998004247A1 (en) 1998-02-05
AU3738697A (en) 1998-02-20
IS4955A (is) 1999-01-25
CZ23299A3 (cs) 1999-06-16
AU737372B2 (en) 2001-08-16
JP2000516596A (ja) 2000-12-12
NO990338D0 (no) 1999-01-25
CA2261848C (en) 2006-10-24
BG103193A (en) 1999-09-30
KR100637110B1 (ko) 2006-10-23
BG64902B1 (bg) 2006-08-31
KR100504449B1 (ko) 2005-07-29
SK8199A3 (en) 2000-04-10
WO1998004913A1 (en) 1998-02-05
CN1230110A (zh) 1999-09-29
KR20000029538A (ko) 2000-05-25
NO990338L (no) 1999-03-25
TR199900781T2 (xx) 1999-07-21
SG124234A1 (en) 2006-08-30
AU3738597A (en) 1998-02-20
ES2271971T3 (es) 2007-04-16
HK1020262A1 (en) 2000-04-07
BG108806A (en) 2005-04-30
EA199900162A1 (ru) 1999-10-28
SG158733A1 (en) 2010-02-26
DE69736669T2 (de) 2007-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ298089B6 (cs) Inhibitory bunecné adheze, zpusob jejich prípravya farmaceutické prostredky s jejich obsahem
US6630503B1 (en) Cell adhesion inhibitors
US20060030553A1 (en) Cell adhesion inhibitors
BG63876B1 (bg) Инхибитори на клетъчна адхезия
AU737372C (en) Cell adhesion inhibitors
AU759063B2 (en) Cell adhesion inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20090724