CZ295955B6

CZ295955B6 - Analog vitaminu D, způsoby a meziprodukt pro jeho přípravu, jeho použití a farmaceutický prostředek s jeho obsahem

Info

Publication number: CZ295955B6
Application number: CZ20001178A
Authority: CZ
Inventors: Daehne Welf Von; Gunnar Grue-Sorensen; Martin John Calverley; Claus Aage Svensgaard Bretting
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S (Lovens Kemis
Priority date: 1997-10-06
Filing date: 1998-10-02
Publication date: 2005-12-14
Also published as: CN1140509C; CN1274344A; GB9721156D0; DE69806035T2; CZ20001178A3; ATE219053T1; WO1999018070A1; ES2175784T3; HUP0004226A2; HK1031868A1; DK1023263T3; NZ503344A; EP1023263A1; PL339668A1; JP2001519327A; HUP0004226A3; DE69806035D1; AU9432398A; PT1023263E; AU740457B2

Abstract

Analog vitaminu D obecného vzorce I, kde X je vodík nebo hydroxyskupina nebo chráněná hydroxyskupina; R.sup.1.n. a R.sup.2.n. znamená vodík, methyl nebo ethyl, nebo, pokud se vezmou dohromady s uhlíkovým atomem nesoucím skupinu X, mohou R.sup.1.n. a R.sup.2.n. tvořit C.sub.3.n.-C.sub.5.n. karbocyklický kruh; Q je C.sub.3.n.-C.sub.6.n. hydrokarbylen, kde hydrokarbylen znamená dvojmocný zbytek získaný po odstranění 2 atomů vodíku z přímého nebo větveného, nasyceného nebo nenasyceného uhlovodíku, v němž jedna z kterýchkoliv CH.sub.2.n. skupin může být popřípadě nahrazena atomem kyslíku nebo karbonylovou skupinou, tak, že atom uhlíku (C-22) přímo vázaný na C-20 je sp.sup.2.n. nebo sp.sup.3.n. hybridizovaný atom uhlíku, tedy je vázaný na 2 nebo 3 jiné atomy; a v němž jiná z CH.sub.2.n. skupin může být nahrazena fenylenem, a kde Q může být popřípadě substituovaný jednou nebo více hydroxyskupinami nebo C.sub.1.n.-C.sub.4.n.-alkoxyskupinami. Tyto analogy vykazují výjimečně vysoké imunosupresivní účinky spolu s vysokými inhibičními aktivitami vůči proliferaci nádorových buněk. Způsoby a meziprodukt pro jeho přípravu, jeho použití pro výrobu léčiv a farmaceutický prostředek s jeho obsahem.

Description

Tento vynález se týká analogů vitaminu D, které vykazují silnou aktivitu při indukování diferenciace a inhibující nežádoucí proliferaci určitých buněk, včetně kožních buněk a rakovinných buněk, jakož i imunomodulační a protizánětlivé účinky, dále se týká farmaceutických přípravků, které obsahují tyto sloučeniny, dávkových jednotek těchto přípravků a jejich použití pro léčení a/nebo profylaxi chorob, které jsou charakterizované abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci, jako je např. psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatózy spojené s HIV, léčení zranění, rakovina, včetně rakoviny kůže, a nemoci nebo nevyváženost imunitního systému, jako jsou reakce hostitel versus štěp a štěp versus hostitel a odmítnutí transplantátu, a nemoci autoimunity, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatózy autoimunního typu, jako je sklerodermie a pemfigus prostý, a zánětlivá onemocnění, jako je revmatická artritida, jakož i řada dalších chorobných stavů včetně hyperparatyreodismu, zejména sekundární hyperparatyreodismus spojený se selháním činnosti ledvin, kognitivní poruchy nebo senilní demence (Alzheimerova nemoc) a jiné neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie, stárnutí kůže včetně fotostárnutí, a pro podporování osteogenese a léčení/prevenci osteoporosy a osteomalacie. Vynález se také týká způsobů a meziproduktu pro přípravu těchto analogů, jejich použití a farmaceutických prostředků s jejich obsahem.

Dosavadní stav techniky

V EP 0 717 034 jsou popsány 21-nor-17(20)-enové analogy vitaminu D, které jsou charakterizovány možnou přítomností dvojné vazby mezi uhlíkovými atomy 17 a 20. Sloučeniny podle vynálezu se od nich liší přítomností uhlíkového atomu 21, který ve výše uvedených sloučeninách podle EP 0 717 034 chybí.

Ve WO 94/01 398 jsou popsány analogy vitaminu D obsahující C-17,20 dvojnou vazbu, ve kterých je zachována C-21 methylskupina. Tyto sloučeniny obsahují C-22,23 trojnou vazbu.

Bylo zjištěno, že výše uvedené sloučeniny vykazují výjimečně vysoký imunosupresivní účinek spolu s vysokou schopností inhibovat proliferaci nádorových buněk. Ve srovnání s těmito sloučeninami mají sloučeniny podle vynálezu lepší vlastnosti, jako zvýšenou antiproliferační účinnost a snížený in vivo kalcemický účinek.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je analog vitaminu D obecného vzorce I

-1 CZ 295955 B6

R ‘25

kde

X je vodík nebo hydroxyskupina nebo chráněná hydroxyskupina;

R¹ a R² znamená vodík, methyl nebo ethyl, nebo, pokud se vezmou dohromady s uhlíkovým atomem nesoucím skupinu X, mohou R¹ a R² tvořit C₃-C₅ karbocyklický kruh;

Q je C₃-C₆ hydrokarbylen, kde hydrokarbylen znamená dvojmocný zbytek získaný po odstranění 2 atomů vodíku z přímého nebo větveného, nasyceného nebo nenasyceného uhlovodíku, v němž jedna z kterýchkoliv CH₂ skupin může být popřípadě nahrazena atomem kyslíku nebo karbony lovou skupinou, tak, že atom uhlíku (C-22) přímo vázaný na C-20 je sp² nebo sp³ hybridizovaný atom uhlíku, tedy je vázaný na 2 nebo 3 jiné atomy; a v němž jiná z CH₂ skupin může být nahrazena fenylenem, a kde Q může být popřípadě substituovaný jednou nebo více hydroxyskupinami nebo Ci-C4-alkoxyskupinami.

Příklady sloučenin vzorce I zahrnují, ilustrativně nikoliv jako omezující, vodorovné záznamy v tabulce 1, kde jako výhodné Q se považuje kombinace segmentů Qa až Qf, kde vynechaným místem se rozumí přímá vazba, tak, že Qa je přímo vázán na C-20, a R¹ je stejné jako R², pokud není uvedeno jinak. Tudíž segmenty s Q, jako je methylen, methen (v sousedících párech, tedy atomy uhlíku navázané dvojnými vazbami), methin (v sousedících párech, tedy atomy uhlíku navázány trojnými vazbami), fenylen (doložený m-fenylenem), alkyliden (doložený 1,1-propylidenem), hydroxymethylen, alkoxymethylen (doložený ethoxymethylenem), ketoa oxa- mohou být vázány za vzniku bočních řetězců, které jsou ve skutečnosti identické (kromě 17,20-dvojné vazby), jak je to známo z řady aktivních analogů vitaminu D.

Sloučeniny podle vynálezu mohou obsahovat více než jednu diastereomerní formu (tedy E nebo Z konfiguraci 17,20-dvojné vazby a také jakékoliv dvojné vazby, která není v kruhu, přítomnéve skupině Q; R a S konfiguraci, kdy je v Q přítomna hydroxyskupina nebo alkoxyskupina nebo atom větvení). Vynález pokrývá všechny tyto diastereoizomery v čisté formě a také jejich směsi. Předpokládají se také proléčiva sloučenin vzorce I, v nichž jedna nebo více hydroxyskupin jsou maskovány jako skupiny, které mohou být in vivo konvertovány na hydroxyskupiny.

Sloučeniny vzorce I mohou být získány v krystalické formě buď přímo koncentrováním z organického rozpouštědla, nebo krystalizací nebo rekrystalizací z organického rozpouštědla nebo směsi uvedeného rozpouštědla a spolurozpouštědla, které může být organické nebo anorganické, jako je voda. Krystaly mohou být izolovány ve formě v podstatě prosté rozpouštědla nebo jako solvát, jako je hydrát. Vynález pokrývá všechny krystalické modifikace a formy a také jejich směsi.

-2CZ 295955 B6

Řada analogů vitaminu D byla popsána, že vykazují určitý stupeň selektivity ve prospěch aktivity indukující buněčnou diferenciaci /inhibující buněčnou proliferaci in vitro ve srovnání s účinky na metabolismus vápníku in vivo (měřeno ve zvýšené koncentraci vápníku v séru a/nebo zvýšeném vylučování vápníku moči), které nepříznivě omezuje dávku, která může být bezpečně podávána. Jedny z těchto prvních objevů, kalcipotriol (INN) nebo kalcipotrien (USÁN), byly vyvinuty na bázi této selektivity a nyní jsou v celém světě uznávané jako účinná a bezpečná léčiva pro topické léčení psoriasy.

Studie s dalšími analogy vybranými na této bázi podporuje názor, že systematicky podávané analogy vitaminu D mohou inhibovat buněčnou proliferaci při rakovině prsu in vivo v subtoxických dávkách (Colston, K.W. a kol., Biochem. Pharmacol, 44, 2 273-2 280 (1992)).

Nadějné imunosupresivní aktivity analogů vitaminu D byly zhodnoceny (Binderup, L., Biochem. Pharmacol, 43, 1 885-1 892 (1992)). Řada analogů 20-epi-vitaminu D byla identifikována jako potentni inhibitory aktivace T-lymfocytu in vitro (Binderup, L. a kol., Biochem. Pharmacol. 42, 1 569-1 575 (1991)). Dva z těchto analogů, MC 1 288 a KH 1 060, systematicky podávané, vykazují imunosupresivní aktivity in vivo u experimentální živočišných modelů. Aditivní nebo synergické účinky byly pozorovány v kombinaci s nízkými dávkami cyklosporinu A. KH 1 060, samotný nebo v kombinaci s cyklosporinem A, rovněž byl nalezen, že brání autoimunitní destrukci transplantovaných ostrůvků u diabetické NOD myši (neobézní diabetická myš) (Bouillon,R a kol., V: Vitamin D. Proceedings of the Ninth Workshop on Vitamin D, Orlando, Florida, Walter de Gruyter, Berlin, 1994, str. 551-552). MC 1 288 byla schopná prolongovat přežití srdečních a malých střevních štěpů u krys (Johnsson, C. akol.. V: Vitamin D, Proceedings od the Ninth Workshop on Vitamin D, Orlando, Florida, Walter de Gruyter, Berlin, 1994, str. 549-550). Nicméně ve všech těchto studiích indukovaly dávky analogů, které produkovaly výraznou imunosupresi, také zvýšení hladin vápníku v séru. Existuje tedy stálá potřeba nových analogů s vysokou potencí, dokládající přijatelnou kombinaci prolongované terapeutické aktivity a minimum toxických účinků.

Předložený vynález tedy poskytuje doposud nepopsanou řadu analogů vitaminu D, které jsou charakterizované přítomnosti dvojné vazby mezi C-17 a C-20.

Analogy 21-nor-17(20)-en vitaminu D jsou popsány v EP 0 717 034, ale pouze předtím popsané analogy vitaminu D s C-17,20 dvojnou vazbou a chráněnou C-21 methylovou skupinou jsou ty s C-22,23 trojnou vazbou (WO 94/01 398). Sloučeniny z předloženého vynálezu rozšiřuji rozsah typů vedlejších řetězců a obsahuji úplnější výběr vedlejších řetězců, známých ze stavu techniky u analogů vitaminu D.

U těchto sloučenin bylo nalezeno, že vykazují výjimečně vysoké imunosupresivní aktivity společně s vysokou účinností inhibice buněčné proliferace tumoru.

V popisu dále jsou používány následující standardní zkratky:

18C6 = ΑΠ3Ν = b.p.= Bu = Bu‘ = DIBAH = DMAP = DMF = DMR = Et = Ether =

18-Crown-6

2,2'-azobisisobutyronitril

t.t., teplota tání a-butyl

Zerc.-butyl diisobutylaluminiumhydrid

4-dimethylaminopyridin

N,N-dimethylformamid

Dess-Martin-Reagens =1,1 ,l-triacetoxy-l,l-dihydro-l,2-benz-jodoxol-3(lH)-on ethyl diethylether

-3CZ 295955 B6

Fg =	funkční skupina
LDA =	diisopropylamid lithný
Lg =	odstupující skupina
Me =	methyl
m.p. =	teplota varu
PCC =	pyridinium chlorchromat
PDC =	pyridinium dichromat
Ph =	fenyl
PPTS =	pyridinium p-toluensulfonat
Py =	pyridin
r.o.s. =	zbytek kroků postupu (rest of sequence)
TBABr =	tetra-a-butylamonium-bromid
TBAF =	tetra-a-butylamonium-fluorid
TBAOH =	tetra-a-butylamonium-hydroxid
TBAHSO4 =	tetra-a-butylamonium-hydrogensulfat
TBS =	terc.-butyldimethylsilyl
Tf=	trifluormethansulfonyl
TFA =	trifluoroctová kyselina
THF =	tetrahydrofuran
THP =	tetrahydro-4H-pyran-2-yl
TMS =	trimethylsilyl
Tol =	toluen
Ts =	4-toluensulfonyl

Sloučeniny vzorce I, jak jsou doloženy v tabulce 1, mohou být připraveny obecnými metodami ze schémat 1 a 3. Ve schématu 2 stavební blok aldehyd la jádra vitaminu D je konvertován na klíčový meziprodukt typu II (schéma 2) přes meziprodukty 2, 3 nebo 4.

-4CZ 295955 B6 gghémfl 1

OH I

R = CHO (lla); CH₂OH (lib); CH₂Lg (11c); CH(SeMe)₂(lld); CH₂SO₂Ph(lle)a CN (llf)

N = N_e oř N_z or N_cd

Poznámky ke schématu 1 (a) HCN (b) 1) POC1₃ /Py llf; 2) DIBAH -> Ha (c) W. von Daehen a kol., plakát na X. semináři Vit.D, Strasbourg 1997; WO 98/24 762 (d) NaOH, CH₂C1₂, TBABr -+ Ha (e) Cf. N. Ohmori a kol., Tetr.Lett. 1986, 27, 71

-5CZ 295955 B6 (f) Pro lib, líc, lid a Ile: Viz schéma 2 (g) Viz schéma 3, Tabulka 1, a Metody syntézy 1-7 (h) Ib (N=Nco): B. Femandez a kol., J.Org.Chem. 1992, 57, 3173

Ib (N=Ng) : K. Hansen a kol., ve : Vitamin D: Gene Regulation, Structure-Function Analysis and Clinical Application; Norman, A,W., Bouillon, R., Thomasset, M., Eds.; De Gruyter, Berlin, 1991, str. 161-162 (i) Femandez a kol., J. Org. Chem. 1992, 57, 3173

Ve schématu 2 je znázorněna metoda přípravy každého typu sloučeniny II, to jest Ha, lib, líc, lid a Ile ze sloučeniny 2, 3, a 4. V tabulce 2 a přípravcích 1 až 6, 10, 18, 31 a 34 jsou popsány syntézy některých sloučenin typů Ha, lib a líc podrobněji.

Schéma 2

2/3 (a)

J-CHO

11a j-ch₂oh lib (c) (d)

J-CH₂Lg —j-CH₂SO₂Ph llc Ile

L-*’ J-CH(SeMe)₂

(E a /nebo Z)

N = N_e, N_z nebo N_cd.

Poznámky ke schématu 2 (a) Viz tabulka 2, přípravky 1-4, a 31 (b) NaBH₄/CeCl₃ (c) Lg = odstupující skupina, jako je halogen (Cl, Br, I) nižší alkanoat, p-toluensulfonat (tosylat), methansulfonat (mesylat) nebo trifluormethansulfonat (triflat).

(d) Sloučeniny líc jsou získány z lib standardními postupy použitím vhodných derivátů kyselin, které odpovídají požadované Lg.

(e) 1) PhS~K⁺, 2) H₂O₂, NaW0₄ (M.J. Calverley, v : Trends in Medicinal Chemistry '90; S. Sarel a kol. Eds., Blackwell Scientifíc Publ., Oxford 1992, str 299-306).

(f) B(SeMe)₃, TFA, CH₂C1₂, (WO 89/10 351; M.J. Calverley, Tetr. Lett. 1987, 28, 1 337)

Ve schématu 3 jsou znázorněny obecně syntézy sloučenin I z klíčových meziproduktů II (a-e).

Podrobnější popisy syntéz výhodných sloučenin I, uvedených v tabulce 1, jsou uvedeny

-6CZ 295955 B6 v Methods of synthesis 1-7”, a v dalších podrobnostech v přípravcích (tabulka 3) a příkladech (tabulka 4).

Schéma 3

II (_a_e) ^F-2^L J-Qp-Z-W J-Q-W D-Q-CX(R1)(R2)

I

D = D_ž a/nebo D_£

Sloučeniny II nejprve reagují se stavebními bloky bočního řetězce Fg-Z-W, za vzniku meziproduktů J-Qp-Z-W. Fg je reaktivní funkční skupina, jejíž druh je označen v Methods of synthesis 1-7; Z je vazebná skupina, která spolu s Q_p tvoří část bočního řetězce, která může být buď identická s Q ve sloučenině I, nebo alternativně to může být část, která může být konvertována na Q v jakémkoliv následném stupni syntézy; Q_p je část Q, která může být buď identická s Qa, nebo Qa, Qb, nebo Qa, Qb, Qc, v závislosti na konkrétní metodě syntézy, nebo Q_pmůže být podobně konvertován na Qa, nebo na Qa, Qb, nebo na Qa, Qb, Qc později v průběhu syntézy; W je buď identické se skupinou CX(R?) (R²) ve sloučenině I, nebo může být podobně konvertováno později během syntézy.

Zbývající kroky syntézy zahrnují dále zmíněné operace 1-4, v následujícím textu jsou nazývané zbytek kroků postupu, ve zkratce r.o.s; tyto operace mohou být prováděny v jakémkoliv pořadí, v souladu s požadavky syntéz každé konkrétní sloučeniny I, která se připraví:

Volitelnou konverzí skupiny Q_p-Z na Q;

Volitelnou konverzí skupiny W na C(R') (R²) (X).

Volitelnou konverzí skupiny N_E /N_Cd na skupinu N_z prostřednictvím:

a tripletu senzitizovaného fotoizomerizací trienu vitaminu D {5E na 5Z); nebo b desilylaci, oxidaci na keton a Homer-kuplováním s A-kruhem stavebního bloku 5 ze schématu 3 (viz např. WO 94/14 766);

Konverzí skupiny N_z na skupinu M odstraněním silylových chránících skupin z jádra vitaminu D.

Tabulka.........1 „ _____Výhodné sloučeniny I

Qa

Qb Qc Qd

Qe

Qf

RVR2 X

CH2	CH2	CH2	Me	H
CH2	CH2	CH2				Me	OH
CH	CH	CH2				Et	OH
CH2	0	CH2				Et	OH
CH(OH)	CH2	CH2				Me	OH
CH(OH)	CH	CH				Me	OH
CH	CH	CH(OH)				(CH2)2	H
CH(OH)	C	C				Et	OH
CH(OC2H5)	CH2	CH2				Et	OH
CH(OC2H5)	CH	CH				Me	OH
CH(OC2H5)	C	C				Et	OH
C(=O)	CH2	CH2				Me	OH
C(=O)	CH	CH				Me	OH
C(=O)	C	C				Et	OH
CH2	CH2	CH2	CH2			Et	OH
CH	CH	CH2	CH2			Me	OH
CH	CH	CH	CH			Et	OH
CH	CH	C	C			Et	OH
CH2	0	CH2	CH2			Et	OH
CHOH	CH2	CH2	CH2			H	H
CH(OH)	CH2	CH2	CH2			Et	OH
CH(OH)	CH	CH	CH2			Et	OH
CH(OH)	C	C	CH2			Et	OH
CH(OC2H5)	CH2	CH2	CH2			Et	OH
CH{OC2H5)	CH	CH	CH2			Et	OH
CH{OC2H5)	C	C	CH2			Et	OH
CH(OC2H5)	C	c	CH2			Et	OTHP
C(=O)	CH2	CH2	CH2			Et	OH
C(=O)	CH	CH	CH2			Et	OH
C(«O)	C	C	CH2			Et	OH
CH2	CH2	CH2	CH2	CH2		Me	OH
CH	CH	CH2	CH2	CH2		Me	OH
CH	CH	CH	CH	CH2		Me	OH
CH2	0	CH2	CH2	CH2		Me	OH
CH2	0	CH2	CH2	CH2		Et	OH
CH	CH	CH2	O	CH2		Me	OH
CH(OH)	CH2	CH2	CH2	CH2		Me	OH
CH(OH)	CH	CH	CH2	CH2		Me	OH
CH(OH)	C	C	CH2	CH2		Me	OH
CH(C2H5)	O	CH2	CH2	CH2		Et	OH
CH(OC2H5) CH2	CH2	CH2	CH2		Me	OH
CH(OC2He) CH	CH	CH2	CH2		Me	OH
CH(OC2H5) C	C	CH2	CH2		Me	OH
C(=O)	CH2	CH2	CH2	CH2		Me	OH
C(=O)	CH	CH	CH2	CH2		Me	OH
C(«O)	C	C	CH2	CH2		Me	OH
CH2	0	m-C6H4				Me	OH
CH2	0	CH2	m-C6H4			Me	OH
CH2	CH2	CH2	CH2	CH2	CH2	Me	OH

-8CZ 295955 B6

Poznámky k tabulce 1

Sloučeniny mohou mít buď 17(20)E, nebo 17(20)Z--konfíguraci, obě konfigurace jsou zahrnuty. Pro sloučeniny s 22-OH nebo 22-OR³ substituentem jsou zahrnuty obě konfigurace 22R a 22S. Pro sloučeniny s dvojnými vazbami na C-22, C-23 nebo C-24 jsou obě konfigurace E a Z zahrnuty.

Metody syntézy: 1-7

Metody popsané v následujícím textu jsou založeny na postupech popsaných pro přípravu analogů vitamínu D, které mají 173,20-jednoduchou vazbu s buď 20-normální nebo 20-epi konfigurací namísto 17,20-dvojné vazby ve sloučeninách z předloženého vynálezu.

Jsou uváděny odkazy na známý stav techniky, v nichž lze nalézt podrobnosti experimentů.

Jsou použity následující definice:

R³ = C1-C5 alkyl; Y = halogen. Další symboly a zkratky mají výše uvedené významy.

Abstrakty dokumentů a plakátů, prezentovaných na Tenth Workshop on Vitamin D, Strasbourg, Francie - 24-29. květen, 1997, které jsou zmiňovány v této přihlášce, jsou zveřejněny:

a) Bretting.C a kol., str. 77-78;

b) Calverley, M a kol., str.30-31;

c) Hansen, K. a kol., str. 87-88;

d) von Daehne, W. a kol., str. 81-82 ve Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormon (Vydavatel Norman, A.W.; Bouillon, R.; Thomasset, M.), University of Califomia, Riverside, 1997.

Metoda 1 = D-(CH₂)₃.₆CR¹R²X

1.1 WO 91/00271

YMgZW llc -------------------Jťat. U₂CtiCI₄ j ch₂zw

1.2 WO 89/10351

1)BuLi lid ----------------

1)SO₂ 2) Bu₃SnH - hv *- JCH(Se Me)ZW ------------------»

2) YZW

3) NaHCO₃,prwc4^z EtOH jch₂zw

r..o.s.

-9CZ 295955 B6

1.3 WO 91/00 271; WO 97/46 522; M.Robins a kol., JACS 1983, 105, 4 059; D. Schummer a kol., Synlett 1990, 705

YMgZW Cl-CS-OPh

Ha ------------JCHOH-ZW ------------JCH(O-CS-OPh)ZW

DMAP, CH₃CN neio

1) SO₂ 2) Bu₃SnH (CH₃SÍ)₃SiH, A1BN r.o.s.

---------------------------— jch₂zw -----*-1

3) NaHCOj,

Metoda 2

I = D-C22( H.OH / H,OR³/ O )-(CH₂)₂.₅-CR¹R2-X

WO 91/00 271; WO 97/46 522; C.Bretting a kol., plakát na X. semináři vit.D, Strasbourg, 1997

Ha

YMg-Z-W

---------- J-CHOH-Z-W

r.o.s. -------------I io Metoda 3

I = D-C22( H.OH / H.OR3/ O )-CH^CH-(CH₂)₀.₂-CR¹R2-X

3.1.1 WO 98/18759

CH=CH-MgY TBSOTf

Ha------------ J-CHOH-CH=CH₂---------2,6 lutiďrn

J-CH(OTBS)-CH=CH₂

1) SO₂ 2) O₃ 3) Ph₃P 4) EtOH, NaHCO₃, 80°

Ph₃P⁺-CH-₂-COOCH₃

J-CH(OTBS)CHO —-----------nebo

1,R¹Li R¹MgY

J-CH(OTBS)CH=CH-COOCH₃-----------------*

J-CH(OTBS)CH=CH-CRí₂OH -^Γ·?··-··»~ l (C22-OH; (CH₂)₀.X*OH)

-10CZ 295955 B6

3.1.2 Jako v 3.1.1., ale namísto silylace C²²-OH v kroku 2 je tato skupina alkylována na C²²OR³nebo oxidována na C²²O, jak je popsáno v poznámce (a), za vzniku výsledné sl. I (C²²-OR³nebo C²²O; (CH₂)₀; X = OH)

3.2,

YMgCH=CH-Z-W r.o.s.

............................................................ J-CHOH-CH=CH-Z-W --lla

3.3 lla

Me₃SiCN

J-CH(OSiMe₃)CN ^DIBAH »

J-CH(OSiMe₃)-CHO

J-C(OSiMe₃)-CH~CH-Z“W|

Metoda 4

I = D-C22( H,OH / H.OR3/ O )CsC-(CH₂V₂-CR^R2-X

WO 93/19044 „ UC=C-Z-Wros

Ha ------------ J-CHOH-C=C-Z-Wi

Metoda 5

I = D-C²²H=CH-Z-CR¹R²-X

5.1.1 WO 87/00834 lla (b)

Ph₃P⁺-CH'-CO-C(CH₂)₂ —^á-------------J-CH=CH-CO-CH(CH₂)₂

NaBH₄ WWW.,...... '.......1¾.......»»· CeCI₃	J-CH=CH-CHOH-CH(CH₂)₂
r.o.s.	1 = D-CH=CH-CHOH-CH(CH₂)₂

5.1.2 (wpř.WO 95/02577)

Ph₃P⁺-CH--Z-W

Ha ------------J-CH=CH-Z-W

r.o.s.

5,2 WO 91/00271 ,, 1)Ph-SO₂-CH₂-Z-W,LDA

Ha ---------------------->· j._Ch=cH-Z-W

2) PhCOCI, 3) Na/Hg

5.3 M.J. Calverley, ,:Trends in Medicinal Chemistry '90; S. Sarel * ktl < Ed Blackwell Scientific Publ., Oxford 1992, 299-306.

1) LDA, 2) OHC-Z-W |_[e » J-CH=CH-Z-W

3) PhCOCI, 4) Na/Hg

r.o.s.

YMgCH₂ZW

Ha a—z—- J-CHOH-CH₂Z-W

J-CH=CH-Z-W —- »·' I (d)

Dehydrat>

5.5 WO 94/10139

DPh^-CHyCOOMe..., _ ¹> BrCH₂COO-Bu‘, KOH, TBAHSO, lla ^{7 3} ......Xzzri:. J-CH-CH-CH₂-OH -----------------------------2) DIBAH ²) ^R1M9^Y

J-CH=CH-CH₂-O-CH₂-CR¹ ₂-OH I - D-CH=CH-CH₂-O-CH₂-CRyOH

- 12CZ 295955 B6

Metoda 6

I- oA^x^XCH^-crifp-x ^U 23

6.1.1 WO 91/00855

Ha

Ph_aP⁺-CH--CH=CH-COOMe

----2---------------------------------J-CH=CH-CH=CH-COOMe

RiLi

r.o.s.

J-CH“CH-CH=CH-CR¹ ₂-OH ----I « D-CH=CH-CH=CH-CRyOH

6.1.2 WO 91/00855

1) Ph₃P*-CH₂--COOMe _______ p_hSO^CH,CH,-CRiR2-X, LDA iia........................ ¹ ** J-CH=CH-CHO -------------------------------*2) D1BAH, 3) PDC 2) PhCOCI 3) Na/Hg

J-CH=CH-CH=CH-CH₂-CR1R2-X I = D-CH=CH-CH=CH-CH₂-CR¹R2-X

6.2 A. FOrstner, Synth.7989, 571; Y. Shen a ítf.,Tetr. Lett. 1988,29, 6119

Ha

BrZnCH₂-CH~CH-COOEt, Bu_aP^ ^(e)

J-CH=CH-CH=CH-COOEt

J-CH=CH-CH=CH-CR1₂-OH i = d-ch-ch-ch=ch-crⁱ ₂-oh

Metoda 7

I = D-CH(H/R³)-O-Z-CR¹R²~X

7,1 WO 91/15475 llc + OH-Z-W___ např. NaH/DMF

7.2 j-ch₂-o-z-w

r.o.s. --------->_ j lib + Lg-Z-W _______base________ např. KOH, KOBu‘ or KH v THF(18C6)

J-CH₂-O-Z-W

r.o.s. ------► ,

- 13CZ 295955 B6

7.2.1 G. Neef a kol., Tetr. Lett. 1991, 32, 5 073; M. Calverley, dokument na X. semináři Vit. D, Strasbourg, 1997

1) BrChLCOO-Bu’, KOH, TBAHSO₄, H₂O, Tol lib ----------------------------------------------2) R¹MgY

J-CH₂-O-CH₂-CR¹2-OH —

I - D-CH₂-O-CH₂-CRVOH

7.2.2 N. Kubodera a kol, Chem.Pharm.Bull. 1992,40,1494 _||b CH,=CH,-COOEt _rNaOH, TBAOH, H₂O, Tol

J-CH₂~O-CH₂-CH_rCOOEt

R¹Li/R¹MgY

--------J-CH₂-O-(CH₂)₂-CR1₂-OH

r.o.s.

I = D-CH₂-O-(CH₂)₂-CR¹ ₂-OH .3 K. Hansen a kol., plakát na X.semináři Vit.D, Strabourg, 1997 nebo „ R³Li or R³MgY , _, Metoda 7.2, 7.2.1 7.2.2

Ha----------J-CHR³-OH---------------------**

J-CHR³-O-Z-W —^: > I = D-CHR³-O-Z-CR¹R²-X

Poznámky k metodám syntéz: 1-7 (a) Případná alkylace C²²-OH na C²²-OR³, např. s R³Y + KH + 18C6 jako ve WO 93/19 044 nebo WO 97/46 522 nebo oxidace C²²-OH na C²² = O, např. s PCC nebo DMR, jako ve WO 97/20 811.

(b) Případně může být použito další reakční činidlo Wittigova typu, jako je (EtO)₂PO-CH₂-Z-W + báze nebo Ph₂PO-CH₂-Z-W + báze.

(c) Případná desilylace C²²-OSíMe₃ na C²²-OH, následovaná alkylací nebo oxidací, jak je popsáno v poznámce (a).

(d) Mohou být použity standardní metody dehydrátace, jako je kysele katalyzovaná dehydratace, nebo zpracování s POC1₃ /pyridinem, nebo zpracování Martin-sulfaranovým dehydrátačním činidlem.

(e) Obdobně může být vyloučen tributylfosfín, mající za následek 22-ol. Ten může být dehydrátován na 22,23-en v samostatném kroku standardními metodami, viz. např. M.W.Rathke, Org.React. 1975, 22, 432.

Předložené sloučeniny jsou uvažovány pro použití ve farmaceutických prostředcích, které jsou vhodné pro lokální nebo systémové léčení lidských a veterinárních poruch, jak je popsáno výše.

-14CZ 295955 B6

Předložené sloučeniny mohou být použity v kombinaci s jinými léčivy nebo léčivými formami. Při léčení psoriázy mohou být použity předložené sloučeniny v kombinaci s např. steroidy nebo s jiným i typy léčení, např. světelným nebo UV-světelným léčením nebo kombinovaným PUVA-léčením. Při léčení rakoviny mohou být použity předložené sloučeniny v kombinaci s dalšími protirakovinnými léčivy nebo protirakovinným léčením, jako je léčení ozařováním. Při prevenci odmítnutí štěpu a reakce štěp versus hostitel, nebo při léčení autoimunních chorob, mohou být předložené sloučeniny výhodně použity v kombinaci s jinými imunosupresivními/imunoregulačními léčivy nebo léčením, např. cyklosporinem A.

Požadované množství sloučeniny vzorce I (dále označované jako účinná složka) se bude pro léčebné účely samozřejmě měnit spolu s konkrétní sloučeninou, cestou podávání a léčeným savcem. Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány parenterální, intra-artikulámí, enterální nebo topickou cestou. Při podávání enterálně jsou dobře absorbovány, a tato cesta podávání je výhodná při léčení systémových poruch. Při léčení dermatologických chorob, jako je psoriáza nebo oční choroby, se dává přednost topickým nebo enterálním formám.

Ačkoliv je možné, aby byla účinná složka podávána samotná jako surová chemikálie, je výhodné, aby byla přítomna jako farmaceutická formulace. Obvykle obsahuje účinná složka od 0,1 ppm do 0,1 % hmotnostních formulace.

Formulace, jak pro veterinární tak pro humánní medicínu, tedy obsahuje podle předloženého vynálezu účinnou složku ve spojení s jejím farmaceuticky přijatelným nosičem a popřípadě jinou léčebnou složkou (složkami). Nosič(e) musí být přijatelný ve smyslu kompatibilní s dalšími složkami formulací a nesmí být pro příjemce zdraví škodlivý.

Formulace zahrnují např. ty ve formě vhodné pro orální, oční, rektální, parenterální (včetně subkutánního, intramuskulámího a intravenózního), transdermální, intra-artikulámí a topické, nasální nebo bukální podávání.

Termínem dávková jednotka se míní jednotná, tedy jediná dávka, která je schopná být podána pacientovi, a se kterou lze snadno manipulovat a zabalit ji, zbývající jako fyzikálně a chemicky stabilní jednotková dávka obsahující buď aktivní materiál jako takový, nebo směs s pevnými nebo kapalnými farmaceutickými ředidly nebo nosiči.

Formulace mohou být běžně přítomny ve formě jednotkové dávky a mohou být připraveny kteroukoliv z metod dobře známých ve farmacii. Všechny metody zahrnují krok vnesení účinné složky do spojení s nosičem, který tvoří jedna nebo více průvodních složek. Obecně jsou formulace připravovány jednotně těsným vnesením účinné složky do spojení s kapalným nosičem nebo jemně děleným pevným nosičem nebo oběma, a potom, pokud je to nezbytné, tvarováním produktu do požadovaného tvaru.

Formulace podle předloženého vynálezu, vhodné pro orální podávání, mohou být ve formě diskrétních jednotek jako jsou kapsle, sáčky, tablety nebo pastilky, každá obsahující předem stanovené množství účinné složky; ve formě prášku nebo granulí; ve formě roztoku nebo suspenze ve vodné kapalině nebo nevodné kapalině; nebo ve formě emulze oleje-ve-vodě nebo emulze vodyv-oleji. Účinná složka může také být podávána ve formě pilule, lektvaru nebo pasty.

Formulace pro rektální podávání mohou být ve formě čípků tvořených účinnou složkou a nosičem, nebo ve formě výplachu.

Formulace vhodné pro parenterální podávání běžně obsahují sterilní olejový nebo vodný přípravek z účinné složky, který je přednostně isotonický s krví příjemce. Transdermální formulace mohou být ve formě náplastí.

-15 CZ 295955 B6

Formulace vhodné pro intra-artikulární nebo oční podávání mohou být ve formě sterilního vodného přípravku z účinné složky, která může být v mikrokrystalické formě, například ve formě vodné mikrokrystalické suspenze. Liposomální formulace nebo biodegradovatelné polymemí systémy mohou být rovněž použity pro přítomnost účinné složky pro intra-artikulární i oční podávání.

Formulace vhodné pro topické nebo oční podávání zahrnují kapalné nebo polokapalné přípravky, jako jsou tekuté masti, omývací prostředky, gely, aplikační prostředky, emulze olej-ve-vodě nebo voda-v-oleji jako jsou krémy, masti nebo pasty + nebo roztoky nebo suspenze, jako jsou kapky.

Formulace vhodné pro podávání do nosu nebo ústní dutiny zahrnují práškové, samohybné a sprejové formulace, jako jsou aerosoly a atomizéry.

Spolu s výše uvedenými složkami mohou zahrnovat formulace podle tohoto vynálezu jednu nebo více přídavných složek, jako jsou ředidla, pojivá, ochranné látky a podobné.

Prostředky mohou dále obsahovat další terapeuticky účinné sloučeniny obvykle aplikované pří léčení výše zmiňovaných patologických stavů, jako jsou imunosupresivní látky při léčení imunologických onemocnění, nebo steroidy při léčení dermatologických chorob.

Předložený vynález se dále týká výše definovaného analogu vitaminu D pro použití pro léčení a/nebo profylaxi výše uvedených chorob a patologických stavů.

Konečně se vynález také týká použití tohoto analogu vitaminu D pro výrobu léčiva pro léčení a/nebo profylaxi výše uvedených chorob.

Při léčení se pacientovi, který je potřebuje, podává účinné množství jedné nebo více sloučenin vzorce I, samotných nebo v kombinaci s jednou nebo více dalšími terapeuticky aktivními sloučeninami, používanými obvykle při léčení uvedených patologických stavů. Léčení sloučeninami podle vynálezu a/nebo s dalšími terapeuticky aktivními sloučeninami může být kontinuální nebo přerušované a simultánní nebo oddělené s intervaly.

Při systemickém léčení jsou podávány denní dávky sloučeniny I od 0,001 až 2 pg na kilogram tělesné hmotnosti, přednostně od 0,002 až 0,3 pg/kg tělesné hmotnosti savce, například 0,003 až 2 pg/kg; typicky to odpovídá denní dávce pro dospělého člověka od 0,2 do 15 pg. Při topickém léčení dermatologických chorob jsou podávány masti, krémy nebo oplachovací roztoky obsahující od 0,1 až 500 pg/g, a přednostně od 0,1 až 100 pg/g, sloučeniny vzorce I. Pro topické použití jsou podávány sloučeniny vzorce I v očních mastech, kapkách nebo gelech obsahujících od 0,1 až 500 pg/g, a přednostně od 0,1 až 100 pg/g. Orální prostředky jsou formulovány přednostně jako tablety, kapsle nebo kapky, obsahující od 0,05 až 50 pg, přednostně od 0,1 až 25 pg, sloučeniny vzorce I na dávkovou jednotku.

Vynález bude dále doložen následujícími nikoliv omezujícími obecnými postupy, přípravky a příklady.

Příklady provedení

Obecné postupy, přípravky a příklady

Příkladné sloučeniny I jsou uvedeny v tabulce 4, meziprodukty obecného vzorce II jsou uvedeny v tabulce 2, a další meziprodukty jsou uvedeny v tabulce 3.

-16CZ 295955 B6

Obecně:

THF byl sušen nad sodíkem/benzofenonem. Reakce probíhaly rutinním způsobem pod atmosférou argonu, pokud není uvedeno jinak.

Ve standardním pracovním postupu byla organická vrstva oddělena, promyta vodou a nasycena roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem horečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku produktu, který byl purifíkován chromatografíí nebo krystalizací.

Pro 'H nukleární magnetické resonanční spektrum (300 MHz) a ¹³C NMR (75,6 MHz) jsou udány chemické hodnoty posunu (δ) (v ppm), pro roztoky deuteriochloroformu vzhledem k vnitřnímu tetramethylsilanu (δ = 0,00) nebo chloroformu (δ = 7,25) nebo deuteriochloroformu (δ = 76,81 pro C NMR). Je uvedena hodnota pro multiplet, bud’ definovaný (doublet (d), triplet (t), kvartet (q) nebo nikoliv (m) v přibližném středním bodě, pokud není rozmezí udáno (s = singlet, b = broad, široký).

Tabulka 2. Některé sloučeniny typu II

Vzorec	N	Konfig. v 17,20	Slouč. typu	Slouč.č.	Přípr.č.
J-CHO	n_e	Z	Ha	201	1,2
J-CHO	N_e	E	Ha	202	1,2,4
J-CH₂OH	N_e	Z	lib	203	5
j-ch₂oh	n_e	E	lib	204	6
J-CH₂OOCC(CH₃)₃	N_e	Z	líc	205	10
J-CH₂OOCC(CH₃)₃	n_e	E	Uc	206	18
J-CN	n_e	E	Uf	211	3
J-CN	N_e	Z	Uf	212	3
J-CHO	N_e	Z	Ha	207	31
J-CH₂C1	N_e	Z	líc	208	34

J: viz schéma 2

N (Ne/N_z): viz schéma 1

Tabulka 3. Některé meziprodukty

Vzorec	N	Konfig. v 17(20)	Konfig. na C22 (A nebo B)	Slouč. č.	Přípr. č.
j-choh-c₄h₉	Ne	Z	A	301	7
j-choh-c₄h₉	Ne	Z	B	302	7
j-choh-c₄h₉	Nz	z	A	401	8
j-choh-c₄h₉	N_z	z	B	402	9
J-(CH₂)₃CH(CH₃)₂	N_e	z		303	11
J-(CH₂)₃CH(CH₃)₂	N_z	z		403	12
j-choh-c=c-ch₂-	N_e	z	A	304	13
C(C₂H₅)₂OTHP j-choh-c=c-ch₂-	N_e	z	B	305	13
C(C₂H₅)₂OTHP J-CHOH-CsC-CH₂-	N_z	z	A	404	14
C(C₂H₅)₂OTHP j-choh-c=c-ch₂-	N_z	z	B	405	15

C(C₂H₅)₂OTHP

-17CZ 295955 B6

Tabulka 3. Některé meziprodukty - pokračování

Vzorec	N	Konfig. v 17(20)	Konfig. na C22 (A nebo B)	Slouč. č.	Přípr. č.
J-CHOC₂H₅-C=C- CH₂C(C₂H₅)₂OTHP	N_z	Z	A	406	16
J-CHOC₂H₅-C=C- CH₂C(C₂H₅)₂OTHP	N_z	Z	B	407	17
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂- OTMS	n_e	z		308	19
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂- OTMS	n_e	E		309	20
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH	N_e	Z		408	21
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH	n_e	E		409	22
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH	Nz	Z		508	23
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH hoc-ch₂C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	E		509	24 25
J-CHOH-C=C-CH₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	n_e	Z	A	310	26
j-choh-oc-ch₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	n_e	Z	B	311	26
J-CHOH-CeeC-CH₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	Z	A	410	27
j-choh-c=c-ch₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	Nz	Z	B	411	28
J-CHOEt-C=C-CH₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	Z	A	510	29
J-CHOEt-CsC-CH₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	Z	B	511	30
jc²²h=chc²⁴h=ch- COOEt,22E,24E	N_z	Z		312	32
jc²²h=chc²⁴h=ch- CEt₂_OH, 22E, 24E	N_z	Z		412	33
J-CH₂O-(m)-C₆H₄- C(CH₃)₂OH	N_e	Z		313	35
J-CH₂O-(m)-C₆H₄- CCH₃)₂_OH	N_z	Z		413	36
J-CH₂-O-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_e	Z		314	37
J-CH₂-O-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	Z		414	38
J-CH₂-OH-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_e	Z	A	315	39
J-CH₂-OH-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_e	Z	B	316	39
J-CH₂-OH-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	Z	A	415	40
J-CH₂-OH-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_z	Z	B	416	41
J-CH²²=CH²³-CO- C(CH₂)₂, 22E	N_z	z		317	42
J-CH²²=CH²³ choh-	N_z	z		417	43

C(CH₂)₂, 22E

-18CZ 295955 B6

J: viz schéma 2

N (N_E/N_Z): viz schéma 1

Konfigurace na C22: Izomer A je, nebo je odvozený z, méně polární A izomer v N_E-stavu meziproduktu; izomer B je, nebo je odvozený z, odpovídající polárnější B izomer v N_E-stavu meziproduktu.

Tabulka 4: Příkladné sloučeniny I

Vzorec	Konfíg. na C22	Slouč. č.	Příkl. č.	Obecný postup syntézy
D_z-CHOH-C₄H₉	A	101	1	2
D_z-CHOH-C₄H₉	B	102	2	2
D_z-(CH₂)₃CH(CH₃)₂		103	3	1
D_z-CHOH-CsC-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	A	104	4	4
Dz-CHOH-CsC-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	B	105	5	4
Dz-CHOC₂H₅-C=C-CH₂-C(C₂H₅)₂OTHP	A	106	6	4
D_z-CHOC₂H₅-CsC-CH₂-C(C₂H₅)₂OTHP	B	107	7	4
Dz-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH		108	8	1
D_e-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH		109	9	1
D_z-CHOC₂H₅-CsC-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	A	110	10	4
D_z-CHOC₂H₅-C=C-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	B	111	11	4
D_z-C²²H=CHC²⁴H=CH-C(C₂H₅)₂OH		112	12	6
22E,24E
D_z-CH₂-O-(m)C₆H₄-C(CH₃)₂OH		113	13	7
Dz-CH₂-O-(CH₂)₃-C(C₂H₅)₂OH		114	14	7
D_z-CH₂-OH-(CH₂)₃-C(C₂H₅)₂OH	A	115	15	2
Dz-CH₂-OH-(CH₂)₃-C(C₂H₅)₂OH	B	116	16	2
Dz-CH²²=CH²³CHOH-C(CH₂)₂, 22E		117	17	5

D(Dz/D_e ): viz schéma 3

Konfigurace na C22: Izomer A je 22 izomer sloučeniny I odvozený z méně polárního A izomer vN_E-stavu meziproduktu; izomer B je 22 izomer sloučeniny I odvozený z odpovídajícího polárnější B izomeru v N_E-stavu meziproduktu (viz tabulka 3).

Obecný postup 1 Fotoizomerace

Roztok vhodné sloučeniny (N=N_E) (0,28 mmol), antracenu (0,1 g) a triethylaminu (0,20 ml, 1,4 mmol) v dichlormethanu (16 ml) byl ozařován ve 25 ml Pyrexově baňce s kulatým dnem při asi 10 °C UV-světlem z vysokotlaké UV-lampy, typu TQ760Z2 (Hanau), při 700 W, po 30 minut ( 15 minut při 0,08 mmol) za míchání. Reakční směs byla odpařena ve vakuu, a zbytek byl zpracován s petroletherem (2x2 ml) a filtrován. Filtrát byl koncentrován a purifikován chromatografií za získání sloučeniny, kde N=N_Z.

-19CZ 295955 B6

Obměna: Obecný postup 1 a

Byl proveden obecný postup 1 s tou výjimkou, že namísto antracenu byl použit 9-acetylantracen, a namísto lampy a doby v obecném postupu 1 bylo použito 45 minut ozařování lampou TQ 150Z2 (Hanau).

Obměna: Obecný postup 1 b

Byl proveden obecný postup 1 s tou výjimkou, že namísto antracenu byl použit 9-acetylantracen (25 mg), toluen (20 ml) byl použit namísto dichlormethanu a lampa byla použita při 500 W po 10 minut (5 minut při 0,05 mmol) namísto 700 W po 30 minut.

Obecný postup 2

Odstranění chrániči skupiny s HF

Do míchaného roztoku příslušné sloučeniny s chráněnou silylovou skupinou (0,25 mmol) v ethylacetátu (1,5 ml) byl přidán acetonitril (6 ml) následovaný 5 % roztokem kyseliny fluorovodíkové v acetonitrilu-H₂O 7 : 1 (2,0 ml). Po míchání po dalších 45-60 minut byl přidán 1 M hydrogenuhličitan draselný (10 ml) a reakční směs byla zpracována (ethylacetát). Zbytek byl purifikován chromatografíí (eluens: 30 % pentan v ethylacetátu) za vzniku požadované sloučeniny I.

Obecný postup 3

Odstranění chránící skupiny s TBAF

Do roztoku příslušné sloučeniny s chráněnou silylovou skupinou (0,18 mmol) v THF (4,5 ml) byl přidán TBAF trihydrát (0,29 g, 0,9 mmol), a směs byla zahřívána pod refluxem za míchání po jednu hodinu. Po přidání 0,2 M hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) byla směs zpracována (ethylacetát). Zbytek byl purifikován chromatografíí (eluens: 30 % pentan v ethylacetátu) za získání požadované sloučeniny I.

Obecný postup 4 (C.f. metoda 4)

Reakce sloučeniny Ila s acetylenickým vedlejším řetězcem jako stavebním blokem

Do roztoku příslušného stavebního bloku acetylenického vedlejšího řetězce (3,0 mmol) v suchém THF (5 ml), ochlazeného na -78 °C a míchaného pod argonem byl přidáván po kapkách, v průběhu 2 minut, roztok a-butyllithia (1,6 M v hexanu; 1,5 ml). Míchání pokračovalo při -78 °C po 15 minut a potom při 20 °C po dalších 15 minut. Směs byla opět ochlazena na -78 °C a během 4 minut byl přidán po kapkách roztok příslušného aldehydu, sloučeniny Ila, (1,5 mmol) v suchém THF (5 ml) a potom míchání pokračovalo při -78 °C po 30 minut. Reakční směs byla zpracována (ether) za vzniku surového produktu obsahujícího izomemí 22-hydroxysloučeniny A (méně polární) a B (více polární). Tyto byly odděleny chromatografíí (směs ethylacetátu a petroletheru jako eluens) za vzniku čistých sloučenin.

-20CZ 295955 B6

Obecný postup 5 (C.f. metoda 4)

Alkylace acetylenické C-22-hvdroxy-sloučeniny (R³= H) na odpovídající sloučeninu, kde R³=C,-C₅

Do roztoku příslušné 22-hydroxysloučeniny (R³= H) (0,5 mmol) v suchém THF (5 ml) byla přidána za míchání při 20 °C pod argonem 20 % suspenze hydridu draselného v minerálním oleji (0,2 ml), následovaná alkylačním činidlem, R³Y (1,5 mmol).

Potom byl přidán roztok 18-crown-6 (0,13 g) v suchém THF (2 ml) v průběhu 5 minut. Míchání při 20 °C pokračovalo po dvě hodiny, potom byla reakční směs zpracována (ether). Surový produkt byl purifikován chromatografíí (směs etheru a petroletheru jako eluens) za získání požadované alkoxy-sloučeniny.

Příprava 1

Sloučeniny 201 a 202

Do roztoku l(S),3(R)-di(terc.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),16-tetraenu (W. von Daehne a kol., plakát na X. semináři o vit.D, Strasbourg 1997,; WO 98/24 762)(3; N=N_E, 20S-izomer)(2,28 g, 4 mmol) v dichlormethanu (20 ml) byl přidán za míchání TBABr (258 mg, 0,8 mmol) následovaný 2N vodným hydroxidem sodným (10 ml). Po míchání při teplotě místnosti po 40 minut byla směs zředěna dichlormethanem, (20 ml) a vodou (30 ml). Organická fáze byla oddělena a vodná vrstva byla extrahována dichlormethanem (40 ml). Spojené organické extrakty byly promyty vodou ( 4 x 25 ml) a solankou (25 ml), sušeny nad síranem horečnatým a odpařeny ve vakuu za vzniku směsi sloučenin 201 (Z-forma) a 202 (E-forma) v přibližném molárním poměru 95 : 5. Separace obou sloučenin byla prováděna chromatografií na silikagelu (eluens: 2,5 až 5 %etheru v petroletheru) za vzniku méně polárního Zizomeru 201 a více polárního E-izomeru 202, oba jako bezbarvé krystaly (z etheru-methanolu).

Sloučenina 201

Ή NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,85 (s, 9H), 0,90 (s, 9H), 0,95 (s, 3H), 1,70 (bs, 3H), 1,50-2,70 (m, 14H), 2,87 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,96 (m,lH), 4,99 (m, 1H), 5,92 (d, 1H), 6,43 (d, 1H), 10,2 (s, 1H).

Teplota tání 113 až 114 °C

Anal. vypočteno pro C₃4H₅₈O₃SÍ2: C 71,52, H 10,24. Nalezeno: C 71,51, H 10,19

UV (EtOH, nm): Xmax 265 (ε 35 900)

IR(KBr) 1 665, 1620 cm¹.

Sloučenina 202

Ή NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,83 (s, 3H), 0,84 (s, 9H), 0,89 (s, 9H), 1,80 (bs, 3H), 1,50-2,00 (m, 8H), 2,23 (dd, 1H) , 2,33 (m, 2H), 2,57 (dd, 1H), 2,88 (m,2H), 3,09 (dd, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,96 (m, 1H), 4,99 (m, 1H), 5,91 (d, 1H), 6,44 (d, 1H), 9,99 (s, 1H).

Teplota tání 109 až 110 °C

-21 CZ 295955 B6

EIMS vypočteno pro C34H58O3SÍ2 + 570,3925, nalezeno: 570,39

UV (EtOH, nm) : ymax 268 (ε 37 500)

IR (KBr) 1 670, 1 620 cm’¹

Příprava 2

Sloučeniny 201 a 202

Náhradou 1 (S), 3 (R)-di(/erc.butyldimethylsilyloxy)-20 (R)-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7 (E),10(19),16-tetraenu (W. von Daehne a kol., plakát na X. semináři o vit.D, Strasbourg 1997,; WO 98/24 762) (3; N=_E, 20R-izomer) za odpovídající 20S izomer v postupu přípravy 1 byla získána obdobná směs sloučenin 201 a 202 (přibližný molámí poměr 95 : 5).

Příprava 3

Sloučeniny 211 a 212

Kyanid draselný (7,0 g) byl míchán v ledově chladném roztoku 1(S), 3(R)-di (Zerc.butyldimethylsilyloxy) -20-oxo-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19)-trienu; lb (N=N_E) (K. Hansen a kol., ve : Vitamin D: Gene Regulation, Structure-Function Analysis and Clinical Application; Norman, A,W., Bouillon, R., Thomasset, M., Eds.; De Gruyter, Berlin, 1991, str. 161-162) (3,0 g) ve směsi s ethanolem (30 ml) a kyselinou octovou (15 ml) po 30 minut. Po míchání po 21 h při teplotě místnosti byla směs filtrována. Do filtrátu byla přidána voda (45 ml) a sraženina byla spojena a sušena ve vakuu. Sraženina byla rozpuštěna v suchém pyridinu (5 ml) a při 0 °C byl přidán oxychlorid fosforečný (1,3 g). Po míchání po 22 h při teplotě místnosti byla reakční směs rozdělena mezi vodu (150 ml) a ether (150 ml). Organická fáze byla promyta vodou (150 ml) a solankou (100 ml), sušena nad síranem horečnatým a odpařena do sucha ve vakuu. Chromatografie na silikagelu s methylenchloridem/petroletherem 2 : 1 poskytla oddělené produkty, sloučeninu 211 (E-formu) a sloučeninu 212 (Z-formu) v poměru přibližně 3:1.

Sloučenina 211

Sloučenina 212

Příprava 4

Sloučenina 202

Roztok sloučeniny 211 (50 mg) v toluenu (2 ml) byl ochlazen na -78 °C a byl přidán roztok DIBAH (83 μΐ, 20 % v hexanu). Po míchání při -78 °C po 30 minut a při teplotě místnosti po 27 hodin byla směs míchána nasyceným vodným chloridem amonným (4 ml) po 30 min. Směs byla extrahována ethylacetátem (30 ml). Organická fáze byla promyta vodou (20 ml) a solankou (20 ml), sušena se síranem horečnatým a odpařena do sucha ve vakuu. Chromatografíí na silikagelu s etherem/petroletherem 1 : 10 se získala sloučenina uvedená v názvu.

-22CZ 295955 B6 ¹³C NMR δ 193,4, 171,9, 153,3, 140,6, 136,3, 127,9, 121,1, 117,5, 106,7, 70,0, 67,0, 54,6, 49,8, 43,7, 36,5, 36,4, 28,3, 28,2, 25,7, 25,6, 23,0, 18,0, 17,9, 15,4, 10,0, -5,0, -5,1, -5,1.

Příprava 5

Sloučenina 203

Do míchaného roztoku sloučeniny 201 (366 mg, 0,64 mmol) v THF (3 ml) byl postupně přidáván při 0 °C 0,4 M methanolický chlorid čeřitý, heptahydrát (1,6 ml), methanol (3 ml) a tetrahydroboritan sodný (60,8 mg, 1,6 mmol). Po míchání při 0 °C po 40 minut byla reakční směs zředěna ethylacetátem (40 ml) a byla přidána voda (15 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (10 ml) a solankou (10 ml), sušena nad síranem horečnatým a odpařena ve vakuu. Zbytkový olej byl purifikován chromatografií na silikagelu (eluens: 5 % ethylacetát v petroletheru) za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako bezbarvého oleje.

’H NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,75 (s, 3H), 0,85 (s, 9H), 0,89 (s, 9H), 1,69 (bs, 3H), 2,46-0,60 (m, 14H), 2,56 (dd, 1H), 2,84 (dd, 1H), 3,95 (d, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,87 (d, 1H), 6,44 (d, 1H).

Příprava 6

Sloučenina 204

Náhradou sloučeniny 202 za sloučeninu 201 v postupu přípravy 5 byla získána izomemí sloučenina 204.

'H NMR δ 6,44 (d, 1H), 5,86 (d, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,04 (s, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,56 (dd, 1H), 2,60-0,60 (m, 14H), 1,79 (bs, 3H), 0,89 (s, 9H), 0,85 (s, 9H), 0,75 (s, 3H), 0,05 (m, 12H).

Příprava 7

Sloučeniny 301 a 302

Míchaný roztok sloučeniny 201 (17,1 mg, 0,03 mmol) v suchém THF (2 ml) byl ochlazen na -78 °C a stříkačkou bylo přidáno 1, 6 M butyllithium v hexanu (0,04 mmol). Po míchání při -78 °C po dalších 20 minut byla reakční směs zchlazena několika kapkami vody a ohřátá na teplotu místnosti. Reakční směs byla zředěna etherem (20 ml), promyta vodou (4x5 ml), sušena nad síranem horečnatým a odpařena ve vakuu za vzniku směsi sloučenin 301 (méně polární, izomer A) a 302 (více polární, izomer B) v přibližném molámím poměru 1 : 2. Oba izomery bylo možno oddělit chromatografií na silikagelu (eluens: 10 % ether v petroletheru).

Sloučenina 301 *H NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,80 (s, 3H), 0,85 (s, 9H), 0,89 (s, 9H), 1,55 (bs, 3H), 2,45-0,62 (m, 23H), 2,57 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,87 (d, 1H), 6,44 (d, 1H).

-23CZ 295955 B6

Sloučenina 302

Ή NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,73 (s, 3H), 0,85 (s, 9H), 0,89 (s, 9H), 1,55 (bs, 3H), 2,45-0,62 (m, 23H), 2,57 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,87 (d, 1H), 6,44 (d, 1H).

Příprava 8

Sloučenina 401

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 301

Příprava 9

Sloučenina 402

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 302

Příprava 10

Sloučenina 205

Do roztoku, udržovaného při asi 5 °C, pyridinu (0,2 ml), DMAP (15 mg) a sloučeniny 203 (0,070 g, 0,12 mmol) v suchém dichlormethanu (2 ml) byl přidán v jediné dávce pivaloylchlorid (0,060 g, 0,5 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 1 hodinu byla reakční směs zahlazena vodou a rozdělena mezi ether a 5 % roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem horečnatým, a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikaci chromatografíí na silikagelu (15 g) (eluens: 5 % ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako pěna.

Příprava 11

Sloučenina 303

Do roztoku, udržovaného při asi 5 °C, Grignardova činidla připraveného z hořčíku (1,1 atomových ekvivalentů) a bočního řetězce stavebního bloku 3-methyl-l-brombutanu (0,300 g, 2 mmol) v suchém THF (3 ml) byl stříkačkou přidán tetrachlorměďnatan lithný ( 1 ml 0,1 M roztoku v suchém THF), následovaný sloučeninou 205 (0,055 g, 0,083 mmol) v suchém THF (2 ml). Po míchání při stejné teplotě po 16 hodin byla reakční směs zchlazena vodou a rozdělena mezi ether a nasycený roztok chloridu amonného. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem horečnatým a koncentro

-24CZ 295955 B6 vána ve vakuu za vzniku oleje. Purifikaci chromatografií na silikagelu (15 g) (eluens: 2 % ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako olej.

Příprava 12

Sloučenina 403

Metoda: Obecný postup la

Výchozí materiál: Sloučenina 303

Eluens pro chromatografií: 2 % ether v petroletheru

Příprava 13

Sloučeniny 304 a 305

Metoda: Obecný postup 4

Výchozí materiál: Sloučenina 201

Stavební blok acetylenického bočního řetězce:

3-ethyl-3-(tetrahydro-4H-pyran-2-yl-oxy)-5-hexin (WO 93/19 044)

Eluens pro chromatografií: 0 % až 10 % ethylacetátu v petroletheru

Sloučenina 304 (izomer 22A) ’H NMR δ 6,24 (d, 1H), 5,86 (d, 1H), 5,44 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,81 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,56 (dd, 1H), 2,46 (m, 2H), 1,70 (bs, 3H), 2,42-1,37 (m, 24H), 0,89 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,93-0,80 (t, 6H), 0,80 (s, 3H), 0,05 (m, 12H).

Sloučenina 305 (izomer 22B) 'H NMR δ 6,24 (d, 1H), 5,86 (d, 1H), 5,49 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,80 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,56 (dd, 1H), 2,46 (m, 2H), 1,72 (bs, 3H), 2,41-1,36 (m, 24H), 0,89 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,93-0,80 (t, 6H), 0,75 (s, 3H), 0,05 (m, 12H).

Příprava 14

Sloučenina 404

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 304

-25CZ 295955 B6

Eluens pro chromatografíí: 0 % až 5 % ethylacetátu v petroletheru

Příprava 15

Sloučenina 405

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 305

Eluens pro chromatografíí: 0 % až 5 % ethylacetátu v petroletheru

Příprava 16

Sloučenina 406

Metoda: Obecný postup 5

Výchozí materiál: Sloučenina 404

Alkylační činidlo: Ethylbromid

Eluens pro chromatografíí: 0 % až 2,5 % ethylacetátu v petroletheru

Příprava 17

Sloučenina 407

Metoda: Obecný postup 5

Výchozí materiál: Sloučenina 405

Alkylační činidlo: Ethylbromid

Eluens pro chromatografíí: 0 % až 2,5 % ethylacetátu v petroletheru ¹³C NMR δ 148,5, 148,1, 139,7, 135,3, 123,9, 122,8, 118,3, 111,2, 93,0, 82,5, 80,2, 79,9, 72,0, 67,9, 67,3, 62,9, 62,8, 56,3, 47,0, 45,9, 44,6, 38,0, 32,0, 30,4, 28,5, 28,4, 26,7, 25,7, 25,6, 25,3, 23,4, 22,7, 20,1, 18,3,18,0, 17,9, 17,7, 15,2, 14,9, 7,7, 7,6, -4,9, -5,0, -5,3.

-26CZ 295955 B6

Příprava 18

Sloučenina 206

Náhradou sloučeniny 204 za sloučeninu 203 v postupu přípravy 10 byla získána izomerní sloučenina 206 jako pěna.

Příprava 19

Sloučenina 308

Náhradou l-brom-3-methyl-3-trirnethyl-silyloxybutanu za 3-methyl-l-brombutan v postupu přípravy 11 byla získána sloučenina 308.

Příprava 20

Sloučenina 309

Náhradou sloučeniny 206 za sloučeninu 205 v postupu přípravy 19 byla získána sloučenina 309.

Příprava 21

Sloučenina 408

Do roztoku sloučeniny 308 (lmmol) v THF (5 ml) a ethylalkoholu (10 ml) byl přidán PPTS (30 mg) a směs byla míchána po 1 hodinu při 25 °C pod argonem. Po zpracování (ethylacetátem s další extrakcí vodným hydrogenuhličitanem sodným) byl zbytkový surový produkt purifíkován chromatografíí s 30 % etheru v petroletheru jako eluens za vzniku sloučeniny 408.

Příprava 22

Sloučenina 409

Náhradou sloučeniny 309 za sloučeninu 308 v postupu přípravy 21 byla získána sloučenina 409.

’H NMR δ 6,44 (d, 1H), 5,85 (d, 1H), 4,98 (bs, 1H), 4,93 (bs, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 2,83 (dd, 1H), 2,58 (dd, 1H), 2,4-1,10 (m, 20H), 1,68 (bs, 3H), 1,21 (bs, 6H), 0,89 (s, 9H), 0,86 (s, 9H), 0,77 (s, 3H), 0,05 (bs, 12H).

-27CZ 295955 B6

Příprava 23

Sloučenina 508

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 408

Příprava 24

Sloučenina 509

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál : Sloučenina 409

Příprava 25

3-Ethyl-3-trimethvlsilyloxy-5-hexin

Do roztoku 3-ethyl-3-hydroxy-5-hexinu (12,6 g )(WO 93/19 044), triethylaminu (67 ml) a DMAP (0,47 g) v dichlormethanu (150 ml) byl přidán za míchání při 0 °C trimethylchlorsilan (38 ml), v průběhu 10 minut. Míchání pokračovalo při 0 °C po 15 minut, a při 25 °C po 45 minut. Reakční směs byla zpracována a surový produkt byl purifíkován destilaci ve vakuu za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje, teplota varu 83 až 85 °C/25 mm Hg.

¹³C NMR δ 81,6, 77,9, 69,7, 31,4, 28,9, 7,9, 2,3.

Příprava 26

Sloučeniny 310 (izomer 22A) a 311 (izomer 22B)

Metoda: Obecný postup 4

Výchozí materiál: Sloučenina 201

Stavební blok acetylenického bočního řetězce:

3-ethyl-3-trimethylsilyloxy-5-hexin

Eluens pro chromatografíí: 2,5 % ethylacetát v petroletheru

Sloučenina 310 (izomer 22A)

-28CZ 295955 B6

Sloučenina 311 (izomer 22B)

Příprava 27

Sloučenina 410 (izomer 22A)

Metoda: Obecný postup Ib

Výchozí materiál: Sloučenina 310

Eluens pro chromatografií: 2,5 % až 5 % ether v petroletheru

Příprava 28

Sloučenina 411 (izomer 22B)

Metoda: Obecný postup Ib

Výchozí materiál: Sloučenina 311

Eluens pro chromatografií: 0 % až 10 % ether v petroletheru

Příprava 29

Sloučenina 510 (izomer 22A)

Metoda: Obecný postup 5

Výchozí materiál: Sloučenina 410

Alkylační činidlo: Ethylbromid Eluens pro chromatografií: 0 % až 6 % ether v petroletheru

-29CZ 295955 B6

Příprava 30

Sloučenina 511 (izomer 22B)

Metoda: Obecný postup 5

Výchozí materiál: Sloučenina 411

Alkylační činidlo: Ethylbromid Eluens pro chromatografíi: 0 % až 2 % ether v petroletheru

Příprava 31

Sloučenina 207

Metoda: Obecný postup lb

Výchozí materiál: Sloučenina 201

Eluens pro chromatografíí: 0 % až 10 % ether v petroletheru ¹³C NMR δ 190,9, 174,0, 148,1, 138,2, 136,2, 130,0, 122,5, 119,2, 111,1,71,8, 67,3, 56,0, 48,8,

45,8, 44,6, 40,4, 32,4, 28,1,25,6, 25,6, 23,3,22,4, 19,5, 18,0, 17,9, 11,8, -4,9,-5,0,-5,2

Příprava 32

Sloučenina 312

Roztok sloučeniny 207 (0,144 g, 0,25 mmol) a 3-(methoxykarbonyl)-2-propenyl-l-iden-trifenylfosforanu v suchém toluenu (3 ml) byl zahříván při 100 °C po 18 hodin. Po koncentrování ve vakuu byl zbytek purifikován chromatografíí, eluens: 0 % až 2,5 % etheru v petroletheru, za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

Příprava 33

Sloučenina 412

Do míchaného roztoku sloučeniny 312 (20 mg, 0,031 mmol) v THF (2 ml), ochlazeného na -78 °C, byl přidán čerstvě připravený 1,16 M roztok ethyllithia v etheru (0,08 ml, 0,093 mmol). Míchání při -78 °C pokračovalo po jednu hodinu, potom byla přidána voda (15 ml). Reakční směs byla zpracována (etherem) za vzniku surového produktu, který byl purifikován chromatografíí, eluens: 0 % až 5 % ether v petroletheru, za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

-30CZ 295955 B6 'H NMR δ 6,81 (d, 1H) , 6,3-6,0 (m, 4H), 5,61 (d, 1H) , 5,18 (bs, 1H), ,87 (bs, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 2,80 (bd, 1H), 2,5-0,9 (m, 17H), 1,72 (bs, 1H), 1,57 (bq, 4H), 0,90 (bt, 6H), 0,88 (bs, 18H), 0,83 (s, 3H), 0,06 (bs, 12H)

Příprava 34

Sloučenina 208

Do roztoku N-chlorsukcinimidu (21 mg) v suchém dichlormethanu (1,5 ml) byl přidán v průběhu 5 minut roztok dimethylsulfídu (12,2 μΐ) v suchém dichlormethanu (0,9 ml) při 0 °C za míchání. Míchání pokračovalo po 10 minut při 0 °C a po 20 minut při -20 °C. Do reakční směsi byl přidán roztok sloučeniny 203 (77 mg, 0,134 mmol) v suchém dichlormethanu (2,0 ml) v průběhu 5 minut při -20 °C. Míchání pokračovalo po 45 minut při -20 °C až -30 °C. Zpracování: Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát (20 ml) a vodu (20 ml). Vodná fáze byla extrahována dalším (15 ml) podílem ethylacetátu, a spojené organické fáze byly extrahovány vodou (20 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml), sušeny síranem sodným a odpařeny při (0 až 10 °C) ve vakuu; všechna zpracovatelská kapalina byla ledově chladná. Surová sloučenina 208 byla použita bez další purifikace v následujícím kroku (příprava 35).

Příprava 35

Sloučenina 313

Do roztoku 3-(2-hydroxy-2-propyl)-fenolu (46 mg, 0,30 mmol) (WO 1/15 475) v suchém DMF (3 ml) byla přidána 50 % disperze hydridu sodného-v-oleji (15 mg), a směs byla míchána při 20 °C po 90 minut. Potom byla přidána do surové sloučeniny 208 z přípravy 34 a směs byla míchána při 20 °C po 3 hodiny, potom byla zpracována (ethylacetátem). Purifikací chromatografíí na silikagelu (eluens: 0 % až 20 % etheru v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako olej.

Příprava 36

Sloučenina 413

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 313

Eluens pro chromatografii: 0 % až 10 % etheru v petroletheru

Ή NMR δ 7,25 (m, 1H), 7,09 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 6,81 (m, 1H), 6,21 (d, 1H), 6,06 (d, 1H), 5,18 (bd, 1H), 4,87 (bd, 1H), 4,65 (d, 1H), 4,36 (d, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 2,78 (bd, 1H), 2,5-0,9 (m, 15H), 1,74 (bt, 3H), 1,57 (s, 6H) , 0,87 (s, 18H), 0,78 (s, 3H), 0,05 (bs, 12H)

-31 CZ 295955 B6

Příprava 37

Sloučenina 314

Do roztoku sloučeniny 203 (80 mg, 0,140 mmol) v suchém THF byla přidána, za míchání při 20 °C pod argonem, 20 % suspenze hydridu draselného v minerálním oleji ( 54 μ 1), následovaná 6-brom-3-ethyl-3-trimethylsilyloxy-hexanem (WO 89/10 351) (111 μΐ). Po 5 minutách byl přidán 18-crown-6 (39 mg) a míchání při 20 °C pokračovalo po jednu a půl hodiny, po níž byla reakční směs zpracována (etherem). Surový produkt byl purifíkován chromatografíí (0 % až 5 % ether v petroletheru jako eluens) za získání sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

Příprava 38

Sloučenina 414

Metoda: Obecný postup 1; s tou výjimkou, že v následujícím kroku (příklad 14) byl použit surový produkt bez předchozí purifikace chromatografíí

Výchozí materiál: Sloučenina 314 'H NMR δ 6,22 (d, 1H), 6,05 (d, 1H), 5,18 (m, 1H), 4,86 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,10 (d, 1H), 3,37 (t, 2H), 2,78 (d, 1H), 2,44 (dd, 1H), 2,4-2,1 (m, 5H), 1,9-1,4 (m, 8H), 1,63 (s, 3H), 1,45 (q, 4H), 0,9-0,7 (m, 4H), 0,87 (d, 18H), 0,81 (t, 6H), 0,74 (s, 3H), 0,08 (s, 9H), 0,06 (s, 12H)

Příprava 39

Sloučenina 315 a sloučenina 316

Roztok 6-brom-3-ethyl-3-trimethylsilyloxy-hexanu (WO 89/10 351) (1,375 g, 4,9 mmol) v suchém THF (5 ml) byl přidáván po kapkách, v průběhu 10 minut, do hořčíkových závitů (118 mg, 4,9 mgAt) (předtím míchaných dosucha během 20 hodin pod argonem) spolu s etherem (1 ml) za míchání pod argonem při 20 °C. Míchání pokračovalo pod refluxem (olejová lázeň, 75 °C) po jednu a půl hodiny do vytvoření Grignardova činidla, a 1,0 ml roztoku byl odebrán pomocí stříkačky, dokud byl ještě teplý (40 až 50 °C). Ten byl přidán do roztoku sloučeniny 201 (171 mg, 0,30 mmol) v THF (2 ml) za míchání pod argonem při 0 až 5 °C. Míchání pokračovalo po 40 minut při 20 °C, potom byla reakční směs nalita do směsi etheru (25 ml) a vody (25 ml), obsahující chlorid amonný (2,5 g), za míchání. Reakční směs byla zpracována (etherem) za získání surového produktu obsahujícího izomemí 22-hydroxysloučeniny: A (méně polární) a B (více polární). Tyto byly odděleny chromatografíi (0 % až 10% ether v petroletheru jako eluens) za vzniku sloučenin uvedených v názvu.

Sloučenina 315 (izomer 22A)

17,9, 13,0, 8,0, 2,5,-5,0, -5,1

-32CZ 295955 B6

Sloučenina 316 (izomer 22B)

Příprava 40

Sloučenina 415 (izomer 22A)

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 315

Eluens pro chromatografii: 0 % až 10 % ether v petroletheru

Příprava 41

Sloučenina 416 (izomer 22B)

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 316

Eluens pro chromatografii: 0 % až 10 % ether v petroletheru.

Příprava 42

Sloučenina 317

Roztok sloučeniny 207 (0,25 mmol) v cyklopropylkarbonyl-methylen-trifenylfosforánu (0,5 mmol) v suchém toluenu (3 ml) byl zahříván při 100 °C po 18 hodin. Po koncentrování ve vakuu byl zbytek purifíkován chromatografíí, eluens: 0 % až 2,5 % ether v petroletheru, za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

Příprava 43

Sloučenina 417

Do míchaného roztoku sloučeniny 317 (0,3 mmol) v THF (1 ml) byl přidán při 0 °C 0,4 M methanolický chlorid čeřitý, heptahydrát (1 ml), methanol (1 ml) a tetrahydroboritan sodný (60 mg, 1,6 mmol). Po míchání při 0 °C po 40 minut byla reakční směs zředěna ethylacetátem (40 ml) a byla přidána voda (15 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (10 ml) a solankou (10 ml), sušena nad síranem horečnatým a odpařena ve vakuu. Zbytkový olej byl purifikován chromatografíí na silikagelu (eluens: 5 % ethylacetát v petroletheru) za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako směsi epimerů na boční pozici hydroxylu, která je použita jako taková v následném stupni (příklad 17).

-33 CZ 295955 B6

Příklad 1: l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-hydroxy-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22A

Sloučenina 101

Metoda: Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 401

Příklad 2: 1 (S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-hydroxy-l-pentvl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22B

Sloučenina 102

Metoda: Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 402

Příklad 3: l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 103

Metoda: Obecný postup 2

Výchozí materiál: Sloučenina 403

Ή NMR δ 6,37 (d, 1H), 6,04 (d, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,01 (bs, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 2,80 (dd, 1H), 2,61 (dd, 1H), 1,56 (bs, 3H), 1,10-2,35 (m, 22H), 0,87 (d, 6H), 0,73 (s, 3H)

Příklad 4:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxy-5-ethyl-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22A

Sloučenina 104

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 410

Eluens pro chromatografií: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru ¹³C NMR δ 149,8, 147,5, 141,5, 136,2, 127,5, 124,7, 119,6, 112,1, 83,5, 82,4, 75,3, 71,5, 67,4,

62,4, 58,0,46,2,43,7, 40,5, 32,0, 31,2, 29,7, 29,5, 24,8, 24,2, 18,3, 14,5, 8,1

Příklad 5:

1(S),3 (R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxy-5-ethyl-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna-5 (Z),7 (E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22B

-34CZ 295955 B6

Sloučenina 105

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 411

Metoda purifikace: Krystalizace z etheru.

T.t. 161 až 175 °C ’H NMR δ 6,34 (d, 1H), 6,05 (d, 1H), 5,51 (bs, 1H), 5,33 (bs, 1H), 4,99 (bs, 1H), 4,43 (bs, 1H), 4,22 (bs, 1H), 2,79 (d, 1H), 2,58 (dd, 1H), 2,37 (d, 2H), 2,35-1,0 (m, 17H), 1,71 (s, 3H), 1,55 (bq, 4H), 0,86 (bt, 6H), 0,76 (s, 3H)

Příklad 6:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethyl-5-(tetrahydro-4H-pyran-2-yl)oxy-2-heptin-lyl)-9,10-sekopregna-5 (Z), 7(E), -10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22A

Sloučenina 106

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 406

Příklad 7:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethyl-5-(tetrahydro-4H-pyran-2-yl)oxy-2-heptin-lyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), -10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22B

Sloučenina 107

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 407

Příklad 8:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10(19), 17(20)(Z)-tetraen

-35CZ 295955 B6

Sloučenina 108

Metoda: Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 508 ¹³C NMR δ 147,6, 143,4, 142,8, 133,1, 125,7, 125,0, 117,3, 111,9, 70,8, 66,9,56,8, 47,1, 45,3,

44,2, 42,9, 38,5, 34,4, 30,1, 29,3, 29,2, 28,9, 24,0, 23,9, 23,1, 19,9, 17,8

Příklad 9:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5 (Z),7 (E), 10( 19),17(20)(E)-tetraen

Sloučenina 109

Metoda: Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 509

Ή NMR δ 6,37 (bd, 1H), 6,04 (bd, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,02 (bs, 1H), 4,44 (bm, 1H), 4,23 (bm, 1H), 2,80 (bd, 1H), 2,60 (m, 2H), 2,4-1,0 (m, 21H), 1,70 (bs, 3H), 1,21 (s, 6H), 0,73 (s, 3H)

Příklad 10:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethyl-5-hydroxy-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22A

Sloučenina 110

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 510

Eluens pro chromatografií: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru.

¹³C NMR δ 148,1, 147,6, 141,8, 133,6, 124,5, 117,8, 111,9, 82,1, 81,6, 74,0, 70,8, 68,6, 66,8,

63,4, 56,6, 47,2, 45,3,42,9, 39,1, 30,8, 30,3, 29,9, 28,7, 23,7, 23,1, 17,9, 15,3, 14,3, 7,9

Příklad 11:

(S), 3 (R-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethyl-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10(19),17(20)(Z)-tetraen, izomer 22B

Sloučenina 111

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 511

Eluens pro chromatografií: 0 % až 100 % ethylacetátu v petroletheru.

-36CZ 295955 B6 ¹³C NMR δ 148,8, 147,6, 141,8, 133,5, 124,7, 117,7, 111,9, 81,9, 81,8, 74,0, 70,8, 68,0, 66,8,

63,2, 56,4, 47,3, 45,2, 42,9, 38,1, 30,8, 30,5, 29,7, 28,7, 23,7, 23,0, 18,6, 15,4, 15,1, 7,9

Příklad 12:

1(S), 3 (R)-Dihydroxy-20-(5-ethyl-5-hydroxy-hepta-1 (E) ,3 (E)-dien-l-yl)-9,10-sekopregna-5 (Z),7(E), 10( 19), 17(20) (Z)-tetraen

Sloučenina 112

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 412

Eluens pro chromatografíi: 25 % až 50 % ethylacetát v petroletheru.

*H NMR δ 6,81 (d, 1H),6,37 (d, 1H), 6,28 (dd, 1H), 6,12 (dd, 1H), 6,08 (bd, 1H), 5,63 (d, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,01 (bs, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,24 (m, 1H), 2,80 (bd, 1H), 2,60 (dd, 1H), 2,5-0,90 (m, 16H), 1,74 (bs, 3H), 1,58 (bq, 4H), 0,90 (t, 6H), 0,82 (s, 3H)

Příklad 13:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-/3-(2-hydroxy-2-propyl)-fenoxymethyl/-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 113

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 413

Eluens pro chromatografií: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru.

Ή NMR δ 7,24 (m, 1H), 7,10 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 6,39 (d, 1H), 6,06 (d, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,01 (bs, 1H), 4,66 (d, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,37 (d, 1H), 4,23 (m, 1H), 2,79 (bd, 1H), 2,60 (dd, 1H), 2,40-0,9 (m, 16H), 1,75 (bs, 3H), 1,58 (s, 6H, 0,80 (s, 3H).

Příklad 14:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-/(3-ethyl-3-hydroxy-6-hexyl)-oxymethyl/-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 114

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 414

Eluens pro chromatografíi: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru.

-37CZ 295955 B6 ^,3C NMR δ 148,8, 147,6, 142,3, 133,4, 124,8, 122,9, 117,6, 111,9, 74,1, 70,8, 70,8, 66,8, 56,4,

47,3, 45,3, 42,9, 38,4, 35,4, 31,0, 30,0, 28,8, 23,9, 23,7, 23,0, 18,4, 7,9

Příklad 15:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxy-5-ethyl-l-heptyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10(19),17(20) (Z)-tetraen, izomer 22A

Sloučenina 115

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 415

Eluens pro chromatografíí: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru.

Příklad 16:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxy-5-ethyl-l-heptyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10(19), 17 (20) (Z)-tetraen, izomer 22B

Sloučenina 116

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 416

Eluens pro chromatografíi: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru.

Příklad 17:

l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(3-cyklopropyl-3-hydroxy-prop-l(E)-en-l-yl)-9,10-sekopregna5(Z),7(E),10(19), 17 (20) (Z)-tetraen

Sloučenina 117

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 417

Eluens pro chromatografíi: 50 % až 100 % ethylacetát v petroletheru.

Příklad 18: Kapsle obsahující sloučeninu 105

Sloučenina 105 byla rozpuštěna v arašídovém oleji na výslednou koncentraci 1 pg sloučeniny 105/ml oleje. Deset dílů hmotnostních želatiny, 5 dílů hmotnostních glycerinu, 0,08 dílů hmotnostních sorbatu draselného a 14 dílů hmotnostních destilované vody bylo smíšeno dohromady za ohřívání a formováno do želatinových kapslí. Tyto byly plněny každá 100 μΐ sloučeniny 105 v olejovém roztoku, takže každá kapsle obsahovala 0,1 pg sloučeniny 105.

-38CZ 295955 B6

Příklad 19: Dermatologický krém obsahující sloučeninu 108

V 1 g mandlového oleje bylo rozpuštěno 0,05 mg sloučeniny 108. Do tohoto roztoku bylo přidáno 40 g minerálního oleje a 20 g samoemulgačního včelího vosku. Směs byla zahřátá, až zkapalnila.

Po přidání 40 ml horké vody byla směs dobře promísena. Získaný krém obsahuje přibližně 0,5 pg sloučeniny 108 na gram krému.

Claims

1. Analog vitaminu D obecného vzorce I kde

X je vodík nebo hydroxyskupina nebo chráněná hydroxyskupina;

Q je C₃-C₆ hydrokarbylen, kde hydrokarbylen znamená dvoj mocný zbytek získaný po odstranění 2 atomů vodíku z přímého nebo větveného, nasyceného nebo nenasyceného uhlovodíku, v němž jedna z kterýchkoliv CH₂ skupin může být popřípadě nahrazena atomem kyslíku nebo karbonylovou skupinou, tak, že atom uhlíku (C-22) přímo vázaný na C-20 je sp² nebo sp³ hybridizovaný atom uhlíku, tedy je vázaný na 2 nebo 3 jiné atomy; a v němž jiná z CH₂ skupin může být nahrazena fenylenem, a kde Q může být popřípadě substituovaný jednou nebo více hydroxyskupinami nebo Ci-C₄-alkoxyskupinami.

2. Diastereoizomer analogu vitaminu D podle nároku 1 v čisté formě; nebo směs diastereoizomerů analogu vitaminu D podle nároku 1.

3. Analog vitaminu D podle nároku 1, kterým je:

a) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17 (20)(Z)-tetraen

-39CZ 295955 B6

b) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

c) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentyI)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraen

d) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxy-5-ethyl-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, oba izomery

e) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethyl-5-hydroxy-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna5(Z),7(E), 10(19), 17(20)(Z)-tetraen, oba 22-izomery

f) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(5-ethyl-5-hydroxy-hepta-l(E),3(E)-dien-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17(20)(Z)-tetraen

g) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-/3-(2-hydroxy-2-propyl)-fenoxy-methyl/-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17(20)(Z)-tetraen

h) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-/(3-ethyl-3-hydroxy-6-hexyl)-oxymethyl/-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17(20)(Z)-tetraen

i) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxy-5-ethyl-l-heptyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, oba 22-izomery

j) l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(3-cyklopropyl-3-hydroxy-prop-l(E)-en-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E), 10( 19), 17(20)(Z)-tetraen

4. Způsob přípravy analogu vitaminu D obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že se

a) boční řetězec napojený na C-20, nebo jeho alkoholová chráněná forma, ve sloučenině I vypracuje z 1 (S),3(R)-bis-/erc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraenu, nebo z l(S),3(R)-bis-terc-butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraenu, nebo jejich odpovídajících 5(Z) izomerů, buď (i) reakcí s lithnou solí stavebního bloku bočního řetězce HC=C(CH₂)_nCR₂-OPG, kde PG je chránící skupina, a kde n je 0, 1 nebo 2, R je methyl nebo ethyl a PG je trimethylsilyl nebo tetrahydropyranyl, připravenou reakcí s butyllithiem, v rozpouštědle, nebo (ii) reakcí s Grignardovým činidlem BrMg(CH₂)_nC(R)O-Si(CH₃)3, kde n = 2, 3 nebo 4 a R = methyl nebo ethyl, v rozpouštědle, a

b) sloučenina z kroku a) výše se (i) popřípadě oddělí z diastereoizomerů, (ii) podrobí se fotoizomerizaci senzitizovaného tripletu na 5(Z)izomer, (iii) alkyluje na 22-hydroxyskupině C|—C₃ alkylbromidem nebo jodidem za přítomnosti báze a katalyzátoru fázového přenosu, v rozpouštědle, a (iv) desilyluje se.

5. Způsob přípravy analogu vitaminu D obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že

a) boční řetězec napojený na C-20 se vypracuje z l(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraenu, nebo z jeho odpovídajícího 17(20)(E)-izomeru, reakcí s reakčním činidlem Wittigova typu (C₆H₅)3P=CH-CH=CH-COOR, kde R je methyl nebo ethyl, v rozpouštědle, a

-40CZ 295955 B6

b) sloučenina z kroku a) výše se nechá reagovat s organokovovým reakčním činidlem R’Li, kde R¹ = methyl nebo ethyl, a poté desilyluje.

6. Způsob přípravy analogu vitaminu D obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že boční řetězec napojený na C-20 ve sloučenině I se vypracuje z 1 (S), 3 (R)-bis-(/erc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E), 10(19),17(20)(Z)-tetraenu, nebo z l(S),3(R)-bis-(íerc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraenu, nebo jejich odpovídajících 5(Z) izomerů,

a) redukcí 20-CHO skupiny na odpovídající 20-CH₂OH skupinu, a buď

b) se alkyluje 20-CH₂OH skupina stavebního bloku bočního řetězce Hal-(CH₂)_n-CR₂OSi(CH₃)₃, kde Hal je Cl, Br nebo I, n je 2, 3 nebo 4 a R je methyl nebo ethyl, za přítomnosti báze a katalyzátoru fázového přenosu v rozpouštědle, nebo

c) se konvertuje hydroxyskupina z 20-CH₂OH sloučeniny z kroku a) výše na odstupující skupinu, buď (i) na nižší alkanoát, jako je pivalát, reakcí s pivaloylchloridem, pyridinem a 4-dimethylaminopyridinem v dichlormethanu; přičemž nižší alkanoát se nechá reagovat s Grignardovým činidlem HalMg(CH₂)_nCR₂X, kde Hal je chlor, brom nebo jod, n je 1, 2, 3 nebo 4, R je methyl nebo ethyl, a X je H nebo OSi(CH₃)₃, za přítomnosti Li₂CuCl₄, v tetrahydrofuranu; a následuje, pokud X je OSi(CH₃)₃, odstranění silylové skupiny vedlejšího řetězce částečnou desilylací pyridinium p-toluensulfonátem v ethanolu, nebo (ii) na chlorid nebo bromid, reakcí s A-chlorsukcin-imidem nebo A-bromsukcinimidem, a dimethylsulfidem v dichlormethanu; přičemž chlorid nebo bromid se nechá reagovat s 3-(2-hydroxy-2-propyl)fenolátem sodným v Ν,Ν-dimethylformamidu, a

d) sloučenina z kroku b) nebo c) výše se (i) podrobí tripletem senzitizované fotoizomerizaci na 5(Z)izomer, a (ii) desilyluje se tetra-a-butylamoniumfluoridem.

7. Meziprodukt pro syntézu analogu vitaminu D obecného vzorce I, kterým je

a) l(S),3(R)-bis-(/erc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, a odpovídající 5(Z)izomer,

b) l(S),3(R)-bis-(Zerc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraen, a odpovídající 5(Z) izomer,

c) l(S),3(R)-bis-(/erc.butyldimethylsilyloxy)-20-hydroxy-methyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, a odpovídající 5(Z)izomer,

d) 1 (S), 3 (R)-bis-(/erc.butyldimethylsilyloxy)-20-hydroxy-methyl-9,10-sekopregna-5 (E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraenu, a odpovídající 5(Z) izomer.

8. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství jedné nebo více analogů vitaminu D podle nároků 1 až 3 spolu s farmaceuticky přijatelnými, netoxickými nosiči a/nebo pomocnými prostředky.

9. Farmaceutický prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že je ve formě jednotkové dávky obsahující od 0,1 ppm do 0,1 % hmotnostních analogu vitaminu D obecného vzorce I na dávkovou jednotku.

-41 CZ 295955 B6

10. Analog vitaminu D podle nároku 1 pro použití pro léčení a/nebo profylaxi nemocí charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci buněk, jako je např. psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatózy spojené s HIV, léčení zranění, rakovina, včetně rakoviny kůže, a nemoci nebo nevyváženost imunitního systému, jako jsou reakce hostitel versus štěp a štěp versus hostitel a odmítnutí transplantátu, a poruchy autoimunity, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatózy autoimunního typu, jako je sklerodermie a pemfigus prostý, a zánětlivá onemocnění, jako je revmatická artritida, jakož i řada dalších chorobných stavů včetně hyperparatyreodismu, zejména sekundární hyperparatyreodismus spojený se selháním činnosti ledvin, kognitivní poruchy nebo senilní demence (Alzheimerova nemoc) a jiné neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie, jako kožní atrofíe vyvolaná steroidy, stárnutí kůže, včetně fotostámutí, a k podporování osteogenese a léčení/prevenci osteoporosy a osteomalacie.

11. Použití analogu vitaminu D podle některého z nároků laž3 pro výrobu léčiva pro léčení a/nebo proxylaxi nemocí charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci buněk, jako je např. psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatózy spojené s HIV, léčení zranění, rakovina, včetně rakoviny kůže, a nemoci nebo nevyváženost imunitního systému, jako jsou reakce hostitel versus štěp a štěp versus hostitel a odmítnutí transplantátu, a poruchy autoimunity, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatózy autoimunního typu, jako je sklerodermie a pemfigus prostý, a zánětlivá onemocnění, jako je revmatická artritida, stejně jako řada dalších chorobných stavů včetně hyperparatyreodismu, zejména sekundární hyperparatyreodismus spojený se selháním činnosti ledvin, kognitivní poruchy nebo senilní demence (Alzheimerova nemoc) a jiné neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofíe, jako kožní atrofie vyvolaná steroidy, stárnutí kůže, včetně fotostámutí, a podporování osteogenese a léčení/prevenci osteoporosy a osteomalacie.