CZ20001178A3

CZ20001178A3 - Analogy vitaminu D

Info

Publication number: CZ20001178A3
Application number: CZ20001178A
Authority: CZ
Inventors: Daehne Welf Von; Gunnar Grue-Sorensen; Martin John Calverley; Claus Aage Svensgaard Bretting
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S (Lovens Kemiske Fabrik Produktionsaktieselskab)
Priority date: 1997-10-06
Filing date: 1998-10-02
Publication date: 2000-09-13
Also published as: CA2304152A1; HUP0004226A3; KR20010030966A; PT1023263E; DE69806035T2; CN1274344A; CZ295955B6; GB9721156D0; EP1023263B1; ES2175784T3; DK1023263T3; HUP0004226A2; HK1031868A1; AU9432398A; JP2001519327A; EP1023263A1; US6399797B1; ATE219053T1; RU2196132C2; NZ503344A

Description

Oblast techniky:

Tento vynález se týká až dosud neznámé třídy sloučenin, které vykazují silnou aktivitu při indukování diferenciace a inhibující nežádoucí proliferaci určitých buněk, včetně kožních buněk a rakovinných buněk, stejně tak s imunomodulačními a protizánětlivými účinky, dále se týká farmaceutických přípravků, které obsahují tyto sloučeniny, dávkových jednotek těchto přípravků a jejich použití při léčení a /nebo profylaxi chorob, které jsou charakterizované abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci, jako je např. psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatozy spojené s HIV, léčení zranění, rakovina, včetně rakoviny kůže, a nemoci nebo nevyváženost imunitního systému, jako jsou reakce hostitel versus štěp a štěp versus hostitel a odmítnutí transplantátu, a nemoci autoimunity, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatozy autoimunního typu, jako je sklerodermie a pemfigus prostý, a zánětlivá onemocnění, jako je revmatická artritida, stejně jako řada dalších chorobných stavů včetně hyperparatyreodismu, zejména sekundární hyperparatyreodismus spojený se selháním činnosti ledvin, kognitivní poruchy nebo senilní demence (Alzheimerova nemoc) a jiné neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie, stárnutí kůže včetně fotostárnutí, a jejich použití k podporování osteogenese a léčení / prevenci osteoporosy a osteomalacie.

Podstata vynálezu:

Sloučeniny podle vynálezu tvoří novou třídu analogů vitaminu D, reprezentovaných obecným vzorcem I:

• · · · • ·

v němž

X je vodík nebo hydroxyskupina nebo chráněná hydroxyskupina;

R¹ a R² znamená vodík, methyl nebo ethyl, nebo, pokud se vezme dohromady s uhlíkovým atomem nesoucím skupinu X, mohou R a R² tvořit C3-C5 karbocyklický kruh;

Q je C₃-C₆ hydrokarbylen, hydrokarbylen znamenající diradikál získaný po odstranění 2 atomů vodíku z přímého nebo větveného, nasyceného nebo nenasyceného uhlovodíku, v němž jedna z jakýchkoliv CH₂ skupin může být popřípadě nahrazena atomem kyslíku nebo karbonylovou skupinou, tak, že atom uhlíku (C-22) přímo vázaný na C-20 je sp² nebo sp³ hybridizovaný atom uhlíku, tedy je vázaný na 2 nebo 3 další atomy; a v němž jiná z CH₂ skupin může být nahrazena fenylenem, a kde Q může být popřípadě substituovaný jednou nebo více hydroxyskupinami nebo C^-Cj-alkoxyskupinami.

Příklady sloučenin vzorce I zahrnují, ilustrativně nikoliv jako omezující, vodorovné záznamy v tabulce 1, kde jako výhodné Q se považuje kombinace segmentů Qa až Qf, kde • · • · · · • · ··· · · · · ··· • ··· · · ··· · · · · * · · · · · ··· ·· · ··· ·· · ···· ···· ·· ·· ··· ·· ·· vynechaným místem se rozumí přímá vazba, tak, že Qa je přímo vázán na C-20, a R¹ je stejné jako R², pokud není uvedeno jinak. Tudíž segmenty s Q, jako je methylen, methen (v sousedících párech, tedy atomy uhlíku navázané dvojnými vazbami), methin ( v sousedících párech, tedy atomy uhlíku navázány trojnými vazbami), fenylen (doložený m-fenylenem), alkyliden (doložený 1,1-propylidenem), hydroxymethylen, alkoxymethylen (doložený ethoxymethylenem), keto- a oxa- mohou být vázány za vzniku bočních řetězců, které jsou ve skutečnosti identické (kromě 17,20-dvojné vazby), jak je to známo z řady aktivních analogů vitaminu D.

Sloučeniny podle vynálezu mohou obsahovat více než jednu diastereomerní formu (tedy E nebo Z konfiguraci 17,20-dvojné vazby a také jakékoliv dvojné vazby, která není v kruhu, přítomné ve skupině Q; R a S konfiguraci, kdy je v Q přítomna hydroxyskupina nebo alkoxyskupina nebo atom větvení).

Vynález pokrývá všechny tyto diastereoisomery v čisté formě a také jejich směsi. Předpokládají se také proléčiva sloučenin vzorce I, v nichž jedna nebo více hydroxyskupin jsou maskovány jako skupiny, které mohou být in vivo konvertovány na hydroxyskupiny.

Sloučeniny vzorce I mohou být získány v krystalické formě buď přímo koncentrováním z organického rozpouštědla nebo krystalizací nebo rekrystalizací z organického rozpouštědla nebo směsi uvedeného rozpouštědla a spolurozpouštědla, které může být organické nebo anorganické, jako je voda. Krystaly mohou být izolovány ve formě v podstatě prosté rozpouštědla nebo jako solvát, jako je hydrát. Vynález pokrývá všechny krystalické modifikace a formy a také jejich směsi.

Řada analogů vitaminu D byla popsána, že vykazují určitý • · · · • · • · ·· ·· ► · · • · · · stupeň selektivity ve prospěch aktivity indukující buněčnou diferenciaci / inhibující buněčnou proliferaci in vitro ve srovnání s účinky na metabolismus vápníku in vivo (měřeno ve zvýšené koncentraci vápníku v seru a/nebo zvýšeném vylučování vápníku močí), které nepříznivě omezuje dávku, která může být bezpečně podávána. Jedny z těchto prvních objevů, kalcipotriol (INN) nebo kalcipotrien (USÁN), byly vyvinuty na bázi této selektivity a nyní jsou v celém světě uznávané jako účinná a bezpečná léčiva pro topické léčení psoriasy.

Studie s dalšími analogy vybranými na této bázi podporuje názor, že systematicky podávané analogy vitaminu D mohou inhibovat buněčnou proliferaci při rakovině prsu in vivo v subtoxických dávkách (Colston, K.W. a kol., Biochem. Pharmacol, 44, 2273-2280 (1992)).

Nadějné imunosupresivní aktivity analogů vitaminu D byly zhodnoceny (Binderup, L., Biochem. Pharmacol, 43, 1885-1892 (1992)). Řada analogů 20-epi-vitaminu D byla identifikována jako potentní inhibitory aktivace T-lymfocytu in vitro (Binderup, L. a kol., Biochem. Pharmacol. 42, 1569-1575 (1991)). Dva z těchto analogů, MC 1288 a KH 1060, systematicky podávané, vykazují imunosupresivní aktivity in vivo u experimentální živočišných modelů. Aditivní nebo synergické účinky byly pozorovány v kombinaci s nízkými dávkami cyklosporinu A. KH 1060, samotný nebo v kombinaci s cyklosporinem A, rovněž byl nalezen, že brání autoimunitní destrukci transplantovaných ostrůvků u diabetické NOD myši (neobezní diabetická myš)(Bouillon,R a kol., V : Vitamin D. Proceedings of the Ninth Workshop on Vitamin D, Orlando, Florida, Walter de Gruyter, Berlin, 1994, str. 551-552). MC 1288 byla schopná prolongovat přežití srdečních a malých střevních štěpů u krys (Johnsson, C. a kol., V: Vitamin D, • · • · · ·

Proceedings od the Ninth Workshop on Vitamin D, Orlando, Florida, Walter de Gruyter, Berlin, 1994, str. 549-550). Nicméně ve všech těchto studiích indukovaly dávky analogů, které produkovaly výraznou imunosupresi, také zvýšení hladin vápníku v séru. Existuje tedy stálá potřeba nových analogů s vysokou potencí, dokládající přijatelnou kombinaci prolongované terapeutické aktivity a minimum toxických účinků.

Předložený vynález tedy poskytuje doposud nepopsanou řadu analogů vitaminu D, které jsou charakterizované přítomností dvojné vazby mezi C-17 a C-20.

Analogy 21-nor-17(20)-en vitaminu D jsou popsány v EP 0 717 034, ale pouze předtím popsané analogy vitaminu D s C-17,20 dvojnou vazbou a chráněnou C-21 methylovou skupinou jsou ty s C-22,23 trojnou vazbou (WO 94/01398). Sloučeniny z předloženého vynálezu rozšiřují rozsah typů vedlejších řetězců a obsahují úplnější výběr vedlejších řetězců, známých ze stavu techniky u analogů vitaminu D.

U těchto sloučenin bylo nalezeno, že vykazují výjimečně vysoké imunosupresivní aktivity společně s vysokou účinností inhibice buněčné proliferace tumoru.

V popisu dále jsou používány následující standardní zkratky:

18C6 =	18-Crown-6
AIBN =	2,2'-azobisisobutyronit:
b.p. =	t.t., teplota tání
Bu	n-butyl
Bu =	terc.butyl
DIBAH =	diisobutylaluminiumhydrid
DMAP =	4-dimethylaminopyridin
DMF =	N,N-dimethylformamid

• · • 9 • · • 9.

DMR =	Dess-Martin-Reagens =
1,	1,1-triacetoxy-l,1-dihydro-l,2-benz-jodoxol-
Et	ethyl
Ether =	diethylether
Fg =	funkční skupina
LDA =	diisopropylamid lithný
Lg	odstupující skupina
Me	methyl
m.p. =	teplota varu
PCC =	pyridinium chlorchromat
PDC =	pyridinium dichromat
Ph	fenyl
PPTS =	pyridinium p-toluensulfonat
Py =	pyridin
r.o.s.	= zbytek kroků postupu (rest of sequence)
TBABr =	tetra-n-butylamonium-bromid
TBAF =	tetra-n-butylamonium-fluorid
TBAOH =	tetra-n-butylamonium-hydroxid
TBAHSO.,	= tetra-n-butylamonium-hydrogensulfat
TBS =	terč.butyldimethylsilyl
Tf	trifluormethansulfonyl
TFA =	trifluoroctová kyselina
THF =	tetrahydrofuran
THP =	tetrahydro-4H-pyran-2-yl
TMS =	trimethylsilyl
Tol =	toluen
Ts =	4-toluensulfonyl

Sloučeniny vzorce I, jak jsou doloženy v tabulce 1, mohou být připraveny obecnými metodami ze schémat 1 a 3. Ve schématu 2 stavební blok aldehyd la jádra vitaminu D je konvertován na klíčový meziprodukt typu II (schéma 2) přes meziprodukty 2, 3 nebo 4.

φ φ

Schéma 1

CHO

I

CH(CH₃)

OH

I

NC—C(CH₃) (b) φφ ···· • φ φ ··· φφ φφ • φ φ » φφφφ · φ φ · · · φφφφ ·· ·· ·♦·

N

R = CHO (Ha); CH₂OH (lib); CH₂Lg (llc); CH(SeMe)₂(lld); CH₂SO₂Ph (lle) a< CN (llf)

II^(f)

N = N_e oř N_z or N_cd

TBS-O'’

N_cd = Η.β-0-TBS

O-TBS

HO

OH

00 0 0 0

0 00

0 0000 00 • 0 0000 0 0 0 0 0 0

0 0 »000 00 000 0· ··

Poznámky ke schématu 1 (a) HCN (b) 1) POC1₃ /Py Uf; 2) DIBAH -> Ila (c) W. von Daehen a kol., plakát na X. semináři Vit.D,

Strasbourg 1997; WO 98/24762 (d) NaOH, CH₂C1₂ , TBABr —> Ila (e) Cf. N. Ohmori a kol., Tetr.Lett. 1986, 27, 71 (f) Pro lib, líc, lid a Ile: Viz schéma 2 (g) Viz schéma 3, Tabulka 1, a Metody syntézy 1-7 (h) lb (N=N_CD) : B. Fernandez a kol., J.Org.Chem. 1992, 57,

3173 lb (N=N_e) : K. Hansen a kol., ve : Vitamin D: Gene

Regulation, Structure-Function Analysis and Clinical

Application; Norman, A,W., Bouillon, R., Thomasset, M.,

Eds.; De Gruyter, Berlin, 1991, str. 161-162 (i) Fernandez a kol., J. Org. Chem. 1992, 57, 3173

Ve schématu 2 je znázorněna metoda přípravy každého typu sloučeniny II, to jest Ila, lib, líc, lid a Ile ze sloučeniny 2, 3, a 4. V tabulce 2 a přípravcích 1 až 6, 10, 18, 31 a 34 jsou popsány syntézy některých sloučenin typů Ila, lib a líc podrobněji.

Schéma 2 / 3 ⁽³·......J-CHO.....^(b) > J-CH₂OH J-CH₂Lg —j-CH₂SO₂Ph -- 4

Ila lib ílc ^lle

L— J-CH(SeMe)₂ ^(f) lid ·· 99

9 9

9 99 »· 99·♦ • ·

Ň (E a /nebo Z)

N = N_e, N_z nebo N_CD.

Poznámky ke schématu 2 (a) Viz tabulka 2, přípravky 1-4, a 31 (b) NaBH„/CeCl₃ (c) Lg = odstupující skupina, jako je halogen (Cl, Br,

I) nižší alkanoat, p-toluensulfonat (tosylat), methansulfonat (mesylat) nebo trifluormethansulfonat (triflat).

(d) Sloučeniny líc jsou získány z lib standardními postupy použitím vhodných derivátů kyselin, které odpovídají požadované Lg.

(e) 1) PhS'K⁺ , 2) H₂O₂ , NaWO„ (M.J. Calverley, v : Trends in Medicinal Chemistry '90; S. Sarel a kol. Eds., Blackwell Scientific Publ., Oxford 1992, str 299-306).

(f) B(SeMe)₃ , TFA, CH₂C1₂, (WO 89/10351; M.J. Calverley, Tetr Lett. 1967, 28, 1337)

Ve schématu 3 jsou znázorněny obecně syntézy sloučenin I z klíčových meziproduktů II (a-e). Podrobnější popisy syntéz výhodných sloučenin I, uvedených v tabulce 1, jsou uvedeny v Methods of synthesis 1-7, a v dalších podrobnostech v přípravcích (tabulka 3) a příkladech (tabulka 4).

·· »· • 19

9 91

1191 99

1911 91 91 • 11 111·

9 191 1 19 1

I 9' 9 19 19 1

II 1 1111

191 1· 11 »· ····

Schéma 3 _(a._e) j._Qp._z._w j-Q-w

D-Q-CX(R¹)(R²)

I

D - D, a/nebo D_E

HO'

D₇ =

OH TBS-0

O-TBS

Sloučeniny II nejprve reagují se stavebními bloky bočního řetězce Fg-Z-W, za vzniku meziproduktů J-Q_p-Z-W. Fg je reaktivní funkční skupina, jejíž druh je označen v Methods of synthesis 1-7; Z je vazebná skupina, která spolu s Q_Ptvoří část bočního řetězce, která může být buď identická s Q ve sloučenině I, nebo alternativně to může být část, která může být konvertována na Q v jakémkoliv následném stupni syntézy; Q_P je část Q, která může být buď identická s Qa, nebo Qa, Qb, nebo Qa, Qb, Qc, v závislosti na konkrétní metodě syntézy, nebo Q_P může být podobně konvertován na Qa, nebo na Qa, Qb, nebo na Qa, Qb, Qc později v průběhu syntézy; W je buď identické se skupinou CXfldHR²) ve sloučenině I, nebo může být podobně konvertováno později během syntézy.

Zbývající kroky syntézy zahrnují dále zmíněné operace *« 0« 00 0000 00 00 000 00· 000·

000 0 * 0·· · ·· * • 0 000 0 000 00 « • ·0 00 0 0000 0000 00 0· ♦·· 00 00

1-4, v následujícím textu jsou nazývané zbytek kroků postupu, ve zkratce r.o.s; tyto operace mohou být prováděny v jakémkoliv pořadí, v souladu s požadavky syntéz každé konkrétní sloučeniny I, která se připraví:

Volitelnou konverzí skupiny Q_P-Z na Q;

Volitelnou konverzí skupiny W na CÍR¹) (R²) (X) .

Volitelnou konverzí skupiny N_E /N_CD na skupinu N_z prostřednictvím:

a tripletu senzitizovaného fotoisomerizací trienu vitaminu D (5E na 5Z) ; nebo b desilylací, oxidací na keton a Horner-kuplováním s A-kruhem stavebního bloku 5 ze schématu 3 (viz např. WO 94/14766);

Konverzí skupiny N_z na skupinu M odstraněním silylových chránících skupin z jádra vitaminu D.

** *·« · » · · » · · · «

I · « »· »« »r • · « · • « » * • · · · · • · · · *· «·

Tabulka 1_Výhodné sloučeniny I

Qa	Qb	Qc	Qd	Qe
CH2	CH2	CH2
CH2	CH2	CH2
CH	CH	CH2
CH2	0	CH2
CH(OH)	CH2	CH2
CH(OH)	CH	CH
CH	CH	CH(OH)
CH(OH)	C	C
CH(OC2H5) CH2	CH2
CH(OC2H5) CH	CH
CH(OC2H5)	c	C
C(=O)	CH2	CH2
C(=O)	CH	CH
C(=O)	C	C
CH2	CH2	CH2	CH2
CH	CH	CH2	CH2
CH	CH	CH	CH
CH	CH	C	C
CH2	0	CH2	CH2
CHOH	CH2	CH2	CH2
CH(OH)	CH2	CH2	CH2
CH(OH)	CH	CH	CH2
CH(OH)	C	C	CH2
CH(OC2H5)	CH2	CH2	CH2
CH(OC2H5)	CH	CH	CH2
CH(OC2H5)	C	C	CH2
CH(OC2H5)	C	C	CH2
C(=O)	CH2	CH2	CH2
C(=O)	CH	CH	CH2
C(=O)	C	C	CH2
CH2	CH2	CH2	CH2	CH2
CH	CH	CH2	CH2	CH2
CH	CH	CH	CH	CH2
CH2	0	CH2	CH2	CH2
CH2	0 ^:	CH2	CH2	CH2
CH	CH	CH2	0	CH2
CH(OH)	CH2	CH2	CH2	CH2
CH(OH)	CH	CH	CH2	CH2
CH(OH)	C	C	CH2	CH2
CH(C2H5)	0	CH2	CH2	CH2
CH(OC2H5)	CH2	CH2	CH2	CH2
CH(OC2H5)	CH	CH	CH2	CH2
CH(OC2H5)	C	C	CH2	CH2
C(=O)	CH2	CH2	CH2	CH2
C(=O)	CH	CH	CH2	CH2
C(=O)	C	C	CH2	CH2
CH2	0	m-C6H4
CH2	0	CH2	m-C6H4
CH2	CH2	CH2	CH2	CH2

CH2

R1/R2	X	Metew/d
Me	H	1
Me	OH	1
Et	OH	5
Et	OH	7
Me	OH	2
Me	OH	3
(CH2)2	H	5
Et	OH	4
Et	OH	2
Me	OH	3
Et	OH	4
Me	OH	2
Me	OH	3
Et	OH	4
Et	OH	1
Me	OH	5
Et	OH	6
Et	OH	5
Et	OH	7
H	H	2
Et	OH	2
Et	OH	3
Et	OH	4
Et	OH	2
Et	OH	3
Et	OH	4
Et	OTHP	4
Et	OH	2
Et	OH	3
Et	OH	4
Me	OH	1
Me	OH	5
Me	OH	6
Me	OH	7
Et	OH	7
Me	OH	5
Me	OH	2
Me	OH	3
Me	OH	4
Et	OH	7
Me	OH	2
Me	OH	3
Me	OH	4
Me	OH	2
Me	OH	3
Me	OH	4
Me	OH	7
Me	OH	* 7
Me	OH	1

·· 0« ♦· ···* * Φ * · · · • φ·· φ · ··· φ · φ > φ · · * φ Φ · Φ 4 ·

ΦΦΦΦ ΦΦ Φ· *** φφ *·

Φ · ·

Φ · · Φ

Φ II * • φ φ φ φφ *·

Poznámky k tabulce 1

Sloučeniny mohou mít buď 17(20)F nebo 17(20)Z-konfiguraci, obě konfigurace jsou zahrnuty. Pro sloučeniny s 22-OH nebo 22-OR³ substituentem jsou zahrnuty obě konfigurace 22R a 22S. Pro sloučeniny s dvojnými vazbami na C-22, C-23 nebo C-24 jsou obě konfigurace E a Z zahrnuty.

Metody syntézy: 1-7

Metody popsané v následujícím textu jsou založeny na postupech popsaných pro přípravu analogů vitamínu D, které mají 17β,20-jednoduchou vazbu s buď 20-normální nebo 20-epi konfigurací namísto 17,20-dvojné vazby ve sloučeninách z předloženého vynálezu.

Jsou uváděny odkazy na známý stav techniky, v nichž lze nalézt podrobnosti experimentů.

Jsou použity následující definice:

R³ = Cj-Ch alkyl; Y = halogen. Další symboly a zkratky mají výše uvedené významy.

Abstrakty dokumentů a plakátů, prezentovaných na Tenth Workshop on Vitamin D, Strasbourg, Francie - 24-29. květen,

1997, které jsou zmiňovány v této přihlášce, jsou zveřejněny:

a) Bretting,C a kol., str. 77-78;

b) Calverley, M a kol., str.30-31;

c) Hansen, K. a kol., str. 87-88;

d) von Daehne, W. a kol., str. 81-82 ve Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormon (Vydavatel Norman, A.W.; Bouillon, R.; Thomasset, M.), University of California, Riverside, 1997.

Metoda 1

I = D-(CH₂)₃^CR1R2X

VL WO 91/00271
YMgZW llc --	J CH₂ZW	r.o.s.
fcat. Li₂CuCI₄	—---- \|
12 WO 89/10351
1) BuLi lid --- 2) YZW	JCH(Se Me)ZW	1) SO₂ 2) Bu₃SnH - hv
	3)NaHCO₃,i/ra/<Z EtOH
r.o.s. JCH₂ZW	-*- I

1.3

WO 91/00271; WO 97/46522; M.Robins a kol., JACS 1983, 105, 4059; D. Schummer a kol., Synlett 1990, 705

YMgZW

Ha -JCHOH-ZW melo

1) SO₂ 2) Bu₃SnH (CH₃Si)₃SiH, AIBN

3) NaHCO₃, vroí/čjEtOH

Cl-CS-OPh

-* JCH(O-CS-OPh)ZW

DMAP, CH₃CN

r.o.s.

JCH₂ZW -- I

Metoda 2

I = D-C²²( H.OH / H,OR³/ O )-(CH₂)₂.₅-CRiR²-X

WO 91/00271; WO 97/46522; C.Bretting a kol., plakát na X. semináři vit.D, Strasbourg, 1997 YMg-Z-W

Ha

J-CHOH-Z-W

r.o.s.

• · ···· ·· ·· • · · · · · ···· · · · ·

Metoda 3

I = D-C²²( Η,ΟΗ / H,OR³/ O )-CH=CH-(CH₂)₀.₂-CR¹R²-X

3.1.1 WO 98/18759

CH=CH-MgY lla-—

J-CH(OTBS)-CH=CH₂

TBSOTf

J-CHOH-CH=CH₂-►

2,6 lutidin

1) SO₂ 2) O₃ 3) Ph₃P 4) EtOH, NaHCO₃, 80°

Ph₃P⁺-CH-₂-COOCH₃J-CH(OTBS)CHO —----1. R¹Li R¹MgY

J-CH(OTBS)CH=CH-COOCH₃-*J-CH(OTBS)CH=CH-CR1₂OH » I (C²²-OH; (CH₂)_o.X=OH)

3.1.2 Jako v 3.1.1., ale namísto silylace C²²OH v kroku 2 je tato skupina alkylována na C²²OR³ nebo oxidována na C²²O, jak je popsáno v poznámce (a), za vzniku výsledné sl. I (C²²-OR³ nebo C²²O; (CH₂)₀; X = OH)

3.2.

„ YMgCH=CH-Z-W r.o.s.

Ha -- J-CHOH-CH=CH-Z-W ^{a'-’

3.3

Me₃SiCN DIBAH

Ha-2-J-CH(OSiMe₃)CN - —

J-CH(OSiMe₃)-CHO

Ph₃P⁺-CH~₂-Z-W (b)

J-C(OSiMe₃)-CH=CH-Z-W (c) r.o.s.

• ·

Metoda 4

I = D-C22( η,ΟΗ / H.OR3 / O )C=C-(CH₂)₀.2-CR¹R²-X

WO 93/19044

Ha

LiC=C-Z-W

J-CHOH-CE=C-Z-W | ·· ·«

Metoda 5 = D-C²²H=CH-Z-CR¹R²-X

5.1.1 WO 87/00834

Ph₃P+-CH--CO-C(CH₂)_2? (b)

J-CH=CH-CO-CH(CH₂)₂

NaBH.

CeCk

J-CH=CH-CHOH-CH(CH₂)

2>2

r.o.s.

I = D-CH=CH-CHOH-CH(CH₂)₂

5.1.2 (»»_ř?.WO 95/02577)

Ph₃P⁺-CH--Z-W ^(b)

Ha

J-CH=CH-Z-W

r.o.s.

5.2 WO 91/00271 ,, 1) Ph-SO₂-CH₂-Z-W, LDA _{r 0 s}

Ha -- J-CH=CH-Z-W ——

2) PhCOCI, 3) Na/Hg

M.J. Calverley, :Trends in Medicinal Chemistry '90; S. Sarel * k«Í. Ed .; Blackwell Scientific Publ., Oxford 1992, 299-306.

1) LDA, 2) OHC-Z-W _ros

He->-'-- J-CH=CH-Z-W |

3) PhCOCI, 4) Na/Hg _|la YMgCH/W^ J._CHOH._CH2Z__W DehydraL J-CH=CH-Z-W —--- > |

5.5 WO 94/10139

Ha ¹ Íf^h3^p+-^c.Íjigg9^^e J-CH=CH-CH₂-QH 2) DIBAH

1) BrCH₂COO-Bu^l, KOH, TBAHSO₄

2) R¹MgY

J-CH=CH-CH₂-O-CH₂-CR1₂-OH

I = D-CH=CH-CH₂-O-CH₂-CR1₂-OH

r.o.s.

Metoda 6 >^^^/(CH₂)₀.₁-CRiR2-X 23

6.1.1 WO 91/00855

Ph₃P⁺-CH--CH=CH-COOMe lla

J-CH=CH-CH=CH-CRS-OH

- J-CH=CH-CH=CH-COOMe __RlkL

r.o.s.

I ~ D-CH=CH-CH=CH-CR¹,-OH

6.1.2 WO 91/00855 lla

1) Ph₃P⁺-CH₂*-COOMe 2) DIBAH, 3) PDC

J-CH=CH-CHO

1) PhSO₂-CH₂CH₂-CR¹R²-X, LDA 2) PhCOCI 3) Na/Hg

J-CH=CH-CH=CH-CH₂-CR1R2-X

r.o.s.

I = D-CH=CH-CH=CH-CH,-CR¹R2-X

A. Furstner, Synth. 1989, 571; Y. Shena /tf.,Tetr. Lett. 1988, 29, 6119 „ BrZnCH₂-CH=CH-COOEt, Bu₃P

Ha -έ(θ)

J-CH=CH-CH=CH-COOEt

R1 Li rn

-*- J-CH=CH-CH=CH-CR1₂-OH i = D-CH=CH-CH=CH-CR¹2-OH • · ···· ·· ··· ·· ··

Metoda 7 ' | = D-CH(H/R³)-O-Z-CR¹R2-X

7J. WO 91/15475 base llc + OH-Z-W lib + Lg-Z-W

W/r. NaH/DMF base

J-CHo-O-Z-W

r.o.s.

KOH, KOBu> or KH ' v THF (18C6)

J-CH,-O-Z-W

r.o.s.

7.2,1 G. Neef a kol., Tetr. Lett. 1991, 32, 5073; M. Calverley, dokument na X. semináři Vit. D, Strasbourg, 1997 lib

1) BrCH₂COO-Bu^l, KOH, TBAHSO₄, H₂O, Tol

2) R¹MgY

J-CH₂-O-CH₂-CR¹2-OH

r.o.s.

I = D-CH,-O-CH₂-CR¹2-OH

7.2.2 N. Kubodera Chem.Pharm.Bull. 1992, 40,1494 _11U CH,=CH,-COOEt ^llb-*- J-CH_?-O-CH,-CH,-COOEt

NaOH, TBAOH, H₂O, Tol ^{2 2} 2^^

R¹Li/R¹MgY

J-CH₂-O-(CH₂)₂-CR¹2-OH

r.o.s.

I = D-CH₂-O-(CH₂)₂-CR¹2-OH

7.3 K. Hansen a kol., plakát na X.semináři Vit.D, Strabourg, 1997 heio „ R³Li or R³MgY Met^4 7.2, 7.2.1 , · 7.2.2

Ha-J-CHR3-OH-—--->·

J-CHR³-O-Z-W *- I = D-CHR3-O-Z-CR1R2-X

r.o.s.

99 99 9999 99 99

9 9 9 9 9 9 9 9 ·

999 9 9 999 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

9999 99 99 999 99 99

Poznámky k metodám syntéz: 1-7 (a) Případná alkylace C²²-OH na C²²-OR³, např. s R³Y + KH + 18C6 jako ve WO 93/19044 nebo WO 97/46522 nebo oxidace C²²-OH na C²² =0, např. s PCC nebo DMR, jako ve WO 97/20811.

(b) Případně může být použito další reakční činidlo

Wittigova typu, jako je (EtO)₂PO-CH₂-Z-W + báze nebo Ph₂PO-CH₂-Z-W + báze.

(c) Případná desilylace C²²OSiMe₃ na C²²-OH, následovaná alkylací nebo oxidací, jak je popsáno v poznámce (a).

(d) Mohou být použity standardní metody dehydratace, jako je kysele katalyzovaná dehydratace, nebo zpracování s POC1₃/pyridinem, nebo zpracování Martin-sulfaranovým dehydratačním činidlem.

(e) Obdobně může být vyloučen tributylfosfin, mající za následek 22-ol. Ten může být dehydratován na 22,23-en v samostatném kroku standardními metodami, viz. např. M.W.Rathke, Org.React. 1975, 22, 432.

Předložené sloučeniny jsou uvažovány pro použití ve farmaceutických prostředcích, které jsou vhodné pro lokální nebo systémové léčení lidských a veterinárních poruch, jak je popsáno výše.

Předložené sloučeniny mohou být použity v kombinaci s jinými léčivy nebo léčivými formami. Při léčení psoriazy mohou být použity předložené sloučeniny v kombinaci s např. steroidy nebo s jinými typy léčení, např. světelným nebo UV-světelným léčením nebo kombinovaným PUVA-léčením. Při léčení rakoviny mohou být použity předložené sloučeniny v kombinaci s dalšími protirakovinnými léčivy nebo protirakovinným léčením, jako je léčení ozařováním. Při prevenci odmítnutí štěpu a reakce štěp versus hostitel, nebo při léčení autoimunních chorob, mohou být předložené φφ 9« ·· ΦΦΦΦ ·· ·· • φ · ΦΦΦ · · » · φφφφ Φ Φ ΦΦΦ · Φ Φ ·

Φ Φ ΦΦΦ Φ «φφφφ Φ φ φ φ Φ Φ Φ Φ ΦΦ Φ

ΦΦΦΦ ΦΦ ΦΦ ΦΦΦ Φ· ·· sloučeniny výhodně použity v kombinaci s jinými imunosupresivními / imunoregulačními léčivy nebo léčením, např. cyklosporinem A.

Požadované množství sloučeniny vzorce I (dále označované jako účinná složka) se bude pro léčebné účely samozřejmě měnit spolu s konkrétní sloučeninou, cestou podávání a léčeným savcem. Sloučeniny podle vynálezui mohou být podávány parenterální, intra-artikulární, enterální nebo topickou cestou. Při podávání enterálně jsou dobře absorbovány, a tato cesta podávání je výhodná při léčení systémových poruch. Při léčení dermatologických chorob, jako je psoriaza nebo oční choroby, se dává přednost topickým nebo enterálním formám.

Ačkoliv je možné, aby byla účinná složka podávána samotná jako surová chemikálie, je výhodné, aby byla přítomna jako farmaceutická formulace. Obvykle obsahuje účinná složka od 0,1 ppm do 0,1 % hmotnostních formulace.

Formulace, jak pro veterinární tak pro humánní medicínu, tedy obsahuje podle předloženého vynálezu účinnou složku ve spojení s jejím farmaceuticky přijatelným nosičem a popřípadě jinou léčebnou složkou (složkami). Nosič(e) musí být přijatelný ve smyslu kompatibilní s dalšími složkami formulací a nesmí být pro příjemce zdraví škodlivý.

Formulace zahrnují např. ty ve formě vhodné pro orální, oční, rektální, parenterální (včetně subkutánního, intramuskulárního a intravenozního), transdermální, intra-artikulární a topické, nasální nebo bukální podávání.

Termínem dávková jednotka se míní jednotná, tedy jediná dávka, která je schopná být podána pacientovi, a se kterou »· ·· 44 4444 ·· ··

9 4 ··· 4 · 4 · • ··· 4 9444 9 44 *

949 9 944 *9 4

44 44 4 494 4

4444 49 49 · 4 4 49 · 4 ²² lze snadno manipulovat a zabalit ji, zbývající jako fyzikálně a chemicky stabilní jednotková dávka obsahující buď aktivní materiál jako takový, nebo směs s pevnými nebo kapalnými farmaceutickými ředidly nebo nosiči.

Formulace mohou být běžně přítomny ve formě jednotkové dávky a mohou být připraveny kteroukoliv z metod dobře známých ve farmacii. Všechny metody zahrnují krok vnesení účinné složky do spojení s nosičem, který tvoří jedna nebo více průvodních složek. Obecně jsou formulace připravovány jednotně těsným vnesením účinné složky do spojení s kapalným nosičem nebo jemně děleným pevným nosičem nebo oběma, a potom, pokud je to nezbytné, tvarováním produktu do požadovaného tvaru.

Formulace podle předloženého vynálezu, vhodné pro orální podávání, mohou být ve formě diskrétních jednotek jako jsou kapsle, sáčky, tablety nebo pastilky, každá obsahující předem stanovené množství účinné složky; ve formě prášku nebo granulí; ve formě roztoku nebo suspenze ve vodné kapalině nebo nevodné kapalině; nebo ve formě emulze oleje-ve-vodě nebo emulze vody-v-oleji. Účinná složka může také být podávána ve formě pilule, lektvaru nebo pasty.

Formulace pro rektální podávání mohou být ve formě čípků tvořených účinnou složkou a nosičem, nebo ve formě výplachu.

Formulace vhodné pro parenterální podávání běžně obsahují sterilní olejový nebo vodný přípravek z účinné složky, který je přednostně isotonický s krví příjemce. Transdermální formulace mohou být ve formě náplastí.

Formulace vhodné pro intra-artikulární nebo oční

4· ··φ ·

4 '4 4

4 4 4

4 4 4 4 4 ·

4444 4 4444 4

444 4 ·44 · 4 4

4 4 44 4 4 4 ·· ···· ·· ·· ··· ·· ·· podávání mohou být ve formě sterilního vodného přípravku z účinné složky, která může být v mikrokrystalické formě, například ve formě vodné mikrokrystalické suspenze. Liposomální formulace nebo biodegradovatelné polymerní systémy mohou být rovněž použity pro přítomnost účinné složky pro intra-artikulární i oční podávání.

Formulace vhodné pro topické nebo oční podávání zahrnují kapalné nebo polokapalné přípravky, jako jsou tekuté masti, omývací prostředky, gely, aplikační prostředky, emulze olej-ve-vodě nebo voda-v-oleji jako jsou krémy, masti nebo pasty+ nebo roztoky nebo suspenze, jako jsou kapky.

Formulace vhodné pro podávání do nosu nebo ústní dutiny zahrnují práškové, samohybné a sprejové formulace, jako jsou aerosoly a atomizery.

Spolu s výše uvedenými složkami mohou zahrnovat formulace podle tohoto vynálezu jednu nebo více přídavných složek, jako jsou ředidla, pojivá, ochranné látky a podobné.

Prostředky mohou dále obsahovat další terapeuticky účinné sloučeniny obvykle aplikované při léčení výše zmiňovaných patologických stavů, jako jsou imunosupresivní látky při léčení imunologických onemocnění, nebo steroidy při léčení dermatologických chorob.

Předložený vynález se dále týká způsobu léčení pacientů trpících jedním z uvedených patologických stavů, přičemž uvedený postup sestává z podávání pacientovi, který potřebuje toto léčení, účinného množství jedné nebo více sloučenin vzorce I, samotných nebo v kombinaci s jednou nebo více dalšími terapeuticky aktivními sloučeninami, používanými obvykle při léčení uvedených patologických stavů. Léčení • φ »· φφφφ • · » φ * φ · φφ • φ φ φ φ · φφφφ φφφφ φφ ·· φφφ φφ φφ předloženými sloučeninami a/nebo s dalšími terapeuticky aktivními sloučeninami může být současné nebo s intervaly.

Při systémovém léčení jsou podávány denní dávky sloučeniny I od 0,001 -2 gg na kilogram tělesné hmotnosti, přednostně od 0,002-0,3 gg /kg tělesné hmotnosti savce, například 0,003-0,2 gg /kg; typicky to odpovídá denní dávce pro dospělého člověka od 0,2 do 15 gg. Při topickém léčení dermatologických chorob jsou podávány masti, krémy nebo oplachovací roztoky obsahující od 0,1-500 gg/g, a přednostně od 0,1 - 100 gg/g, sloučeniny vzorce I. Pro topické použití jsou podávány sloučeniny vzorce I v očních mastech, kapkách nebo gelech obsahujících od 0,1-500 gg/g, a přednostně od 0,1-100 gg/g. Orální prostředky jsou formulovány přednostně jako tablety, kapsle nebo kapky, obsahující od 0,05-50 gg, přednostně od 0,1-25 gg, sloučeniny vzorce I na dávkovou jednotku.

Vynález bude dále doložen následujícími nikoliv omezujícími obecnými postupy, přípravky a příklady.

Příklady provedení

Obecné postupy, přípravky a příklady

Příkladné sloučeniny I jsou uvedeny v tabulce 4, meziprodukty obecného vzorce II jsou uvedeny v tabulce 2, a další meziprodukty jsou uvedeny v tabulce 3.

Obecně:

THF byl sušen nad sodíkem/benzofenonem. Reakce probíhaly rutinním způsobem pod atmosférou argonu,· pokud není uvedeno j inak.

•Φ φφ φφ φφφφ φφ φφ φφφ φφφ φφφφ φφφφ φ φφφφ φ φφφ φ φ φ φ φ φ φ φφ φ φφφφ φφ φφ φφφ ·· ··

Ve standardním pracovním postupu byla organická vrstva oddělena, promyta vodou a nasycena roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku produktu, který byl purifikován chromatografií nebo krystalizací.

Pro ^XH nukleární magnetické resonanční spektrum (300 MHz) a ¹³C NMR (75,6 MHz) jsou udány chemické hodnoty posunu (δ) (v ppm), pro roztoky deuteriochloroformu vzhledem k vnitřnímu tetramethylsilanu (δ = 0,00) nebo chloroformu (δ = 7,25) nebo deuteriochloroformu (δ = 76,81 pro ¹³C NMR). Je uvedena hodnota pro multlplet, buď definovaný (doublet (č), triplet (t), kvartet (q) nebo nikoliv (m) v přibližném

středním bodě, pokuc broad, široký). Tabulka 2. Některé	l není slouč<	rozmezí udáno sninv tvou II	(s = singlet
Vzorec	N	Konfig.	Slouč.	Slouč	. Přípr.
		v 17,20	typu	č.	č.
J-CHO	Ne	Z	lla	201	1,2
J-CHO	Ne	E	Ha	202	1,2,4
j-ch₂oh	Ne	Z	lib	203	5
j-ch₂oh	Ne	E	lib	204	6
J-CH₂OOCC(CH₃)₃	Ne	Z	llc	205	10
J-CH₂OOCC(CH₃)₃	Ne	E	llc	206	18
J-CN	Ne	E	llf	211	3
J-CN	Ne	Z	llf	212	3
J-CHO	N_z	Z	lla	207	31
J-CH2CI	Ne	Z	llc	208	34

J: viz schéma 2 N (N_e/N_z) : viz schéma 1

26 Tabulka 3. Některé meziorocluktv	♦ » 90 9 · · • · 99 9 9 ' 9999 99	99 9999 • 9 · • · · · * • · « · ·· 999
Vzorec	N	Konfig. v 17(20)	Konfig. na C22 (A nebo B)	Slouč. č.	Přípr. č.
J-CHOH-C4H9	Ne	Z	A	301	7
J-CHOH-C₄H₉	Ne	Z	B	302	7
J-CHOH-C4H9	Nz	Z	A	401	8
J-CHOH-C₄H₉	Nz	z	B	402	9
J-(CH₂)₃CH(CH₃)₂	Ne	z		303	11
J-(CH₂)₃CH(CH₃)₂	Nz	z		403	12
J-CHOH-C_sC-CH₂-	Ne	z	A	304	13
C(C₂H₅)₂OTHP j-choh-c=c-ch₂-	Ne	z	B	305	13
C(C₂H₅)₂OTHP j-choh-oc-ch₂- C(C₂H₅)₂OTHP	N_Z	z	A	404	14
j-choh-c=c-ch₂-	N_Z	z	B	405	15
C(C₂H₅)₂OTHP j-choc₂h₅-c=c-	N_Z	z	A	406	16
CH₂C(C₂H₅)₂OTHP J-CHOC₂H₅-CbC- CH₂C(C₂H₅)₂OTHP	N_Z	z	B	407	17
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂-	Ng	z		308	19
OTMS
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂-	Ne	E		309	20
OTMS
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH	Ne	z		408	21
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH	Ne	E		409	22

A« ** ·Α AAA* ·· Α»

V A A A * A AAAA • AAA A F AAA A A A ♦)

A A AAAA AAA A A A • A A A · A A A A A ·Α«· »A AA AAA AA AA

Tabulka 3. pokračování

Vzorec N Konfig. Konfig. Slouč. Přípr.

na 17(20) na C22 č. č.

(A nebo B)

J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH	N_Z	Z	508	23
J-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH hoc-ch₂- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	N_z	E		509	24 25
J-CHOH-C=C-CH₂- C(C₂H₃)2^-OSiMe₃	N_E	Z	A	310	26
J-CHOH-C=C-CH₂- C(C₂H5)₂-OSiM6₃	N_e	Z	B	311	26
j-choh-c=c-ch₂- C(C₂H5)₂“OSiMe₃	Nz	z	A	410	27
J-CHOH-C=C-CH₂- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	N_Z	z	B	411	28
J-CHOEt-C=C-CH₂- C(C₂H₅)2-OSiMe₃	Nz	z	A	510	29
J-CHOEt-C=C-CH₂- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	Nz	z	B	511	30
JC²²H=CHC²⁴H=CH- COOEt, 22E.24E	Nz	z		312	32
JC²²H=CHC²⁴H=CH- CEt₂-OH, 22E.24E	Nz	z		412	33
J-CH₂O-(m)-C₆H₄- C(CH₃)₂-OH	Ne	z		313	35
J-CH₂O-(m)-C₆H₄-	Nz	z		413	36

C(CH₃)₂-OH • · ··· · · · ···· • · · · · · · · · · · · «

Vzorec	N	Konfig. na 17(20)	Konfig. na C22 (A nebo B)	Slouč. č.	Přípr. č.
J- CH₂-O-(CH₂)₃- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	Ne	Z		314	37
J- CH₂-O-(CH₂)₃- C(C₂H₅)₂-OSiMe₃	N_Z	z		414	38
J-CH₂OH-(CH₂)₃- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	Ne	z	A	315	39
J-CH₂OH-(CH₂)₃- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	Ng	z	B	316	39
J-CH₂OH-(CH₂)₃- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	N_Z	z	A	415	40
J-CH₂OH-(CH₂)₃- C(C₂H5)₂-OSiMe₃	N₂	z	B	416	41
J-CH²²=CH²³-CO- C(CH₂)₂, 22E	N_Z	z		317	42
J-CH²²=CH²³CHOH- C(CH₂)₂, 22E	N_Z	z		417	43

J: viz schéma 2

N (N_e/N_z) : viz schéma 1

Konfigurace na C22: Isomer A je, nebo je odvozený z, méně polární A isomer v N_E-stavu meziproduktu; isomer B je, nebo je odvozený z, odpovídající polárnější B isomer v N_E-stavu meziproduktu.

• · · · · · · · · · · · · · • ·· · · · 9 · · *

Tabulka 4: Příkladné sloučeniny I

Vzorec	Konfig. na C22	Slouč. č.	Příkl. č.	Obecný postup syntézy
D_z-CHOH-C₄H₉	A	101	1	2
D_z-CHOH-C₄H₉	B	102	2	2
D_z-(CH₂)₃CH(CH₃)2		103	3	1
D_z-CHOH-C=C-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	A	104	4	4
D_z-CHOH-C=C-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	B	105	5	4
D_z-CHOC₂H₅-C=C-CH₂-C(C₂H₅)₂OTHP	A	106	6	4
D_z-CHOC₂H₅-C=C-CH₂-C(C₂H₅)₂OTHP	B	107	7	4
D_z-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH		108	8	1
D_e-(CH₂)₃C(CH₃)₂OH		109	9	1
D_z-CHOC₂H₅-ChC-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	A	110	10	4
D_z-CHOC₂H₅-ChC-CH₂-C(C₂H₅)₂OH	B	111	11	4
D_z-C²²H=CHC²⁴H=CH-C(C₂H₅)₂OH,		112	12	6
22E.24E
D_z-CH₂-O-(m)C₆H₄-C(CH₃)₂OH		113	13	7
D_z-CH₂-O-(CH₂)₃-C(C₂H₅)₂OH		114	14	7
D_z-CH2OH-(CH₂)₃-C(C₂H₅)₂OH	A	115	15	2
D_z-CH₂OH-(CH₂)₃-C(C₂H₅)₂OH	B	116	16	2
D_z- CH²²=CH²³CHOH-C(CH₂)_2> 22E		117	17	5

D(D_z/D_e ): viz schéma 3

Konfigurace na C22: Isomer A je 22 isomer sloučeniny I odvozený z méně polárního A isomer v N_E-stavu meziproduktu; isomer B je 22 isomer sloučeniny I odvozený z odpovídajícího polárnější B isomeru v N_E-stavu meziproduktu (viz tabulka 3).

Obecný postup 1 Fotoisomerace

Roztok vhodné sloučeniny (N=N_E) (0,28 mmol), antracenu (0,1 g) a triethylaminu (0,20 ml, 1,4 mmol) v dichlormethanu (16 ml) byl ozařován ve 25ml Pyrexově baňce s kulatým dnem při asi 10 °C UV-světlem z vysokotlaké UV-lampy, typu TQ760Z2 (Hanau), při 700 W, po 30 minut ( 15 minut při 0,08 mmol ) za mícháni. Reakční směs byla odpařena ve vakuu, a zbytek byl zpracován s petroletherem ( 2 x 2 ml) a filtrován. Filtrát byl koncentrován a purifikován chromatografií za získání sloučeniny, kde N=N_Z.

Obměna: Obecný postup 1 a

Byl proveden obecný postup 1 s tou výjimkou, že namísto antracenu byl použit 9-acetylantracen, a namísto lampy a doby v obecném postupu 1 bylo použito 45 minut ozařování lampou TQ 150Z2 (Hanau).

Obměna: Obecný postup 1 b

Byl proveden obecný postup 1 s tou výjimkou, že namísto antracenu byl použit 9-acetylantracen (25 mg), toluen (20 ml) byl použit namísto dichlormethanu a a lampa byla použita při 500 W po 10 minut (5 minut při 0,05 mmol) namísto 700 W po 30 minut.

Obecný postup 2 Odstranění chránící skupiny s HF

Do míchaného roztoku příslušné sloučeniny s chráněnou silylovou skupinou (0,25 mmol) v ethylacetátu (1,5 ml) byl přidán acetonitril (6 ml) následovaný 5% roztokem kyseliny fluorovodíkové v acetonitrilu-H₂0 7:1 (2,0 ml). Po míchání po dalších 45-60 minut byl přidán 1 M hydrogenuhličitan draselný (10 ml) a reakční směs byla zpracována (ethylacetat). Zbytek byl purifikován chromatografií (eluens: 30% pentan v ethylacetátu) za vzniku požadované sloučeniny I.

·· ·· • · · · • · · · • · · • · · · · ·

Obecný postup 3 Odstranění chránící skupiny s TBAF

Do roztoku příslušné sloučeniny s chráněnou silylovou skupinou (0,18 mmol) v THF (4,5 ml) byl přidán TBAF trihydrat (0,29 g, 0,9 mmol), a směs byla zahřívána pod refluxem za míchání po jednu hodinu. Po přidání 0,2 M hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) byla směs zpracována (ethylacetát). Zbytek byl purifikován chromatografií (eluens: 30% pentan v ethylacetatu) za získání požadované sloučeniny I.

Obecný postup 4 Reakce sloučeniny Ha s (C.f. metoda 4) acetvlenickým vedlejším řetězcem jako stavebním blokem

Do roztoku příslušného stavebního bloku acetylenického vedlejšího řetězce (3,0 mmol) v suchém THF (5 ml), ochlazeného na -78 °C a míchaného pod argonem byl přidáván po kapkách, v průběhu 2 minut, roztok n-butyllithia (1,6 M v hexanu; 1,5 ml). Míchání pokračovalo při -78 °C po 15 minut a potom při 20 °C po dalších 15 minut. Směs byla opět ochlazena na -78 °C a během 4 minut byl přidán po kapkách roztok příslušného aldehydu, sloučeniny Ha, (1,5 mmol) v suchém THF (5 ml) a potom míchání pokračovalo při -78 °C po 30 minut. Reakční směs byla zpracována (ether) za vzniku surového produktu obsahujícího isomerní 22-hydroxysloučeniny A (méně polární) a B (více polární). Tyto byly odděleny chromatografií (směs ethylacetatu a petroletheru jako eluens) za vzniku čistých sloučenin.

Obecný postup 5 (C.f.metoda 4)

Alkvlace acetvlenické C-22-hydroxv-sloučeninv (R^3=: H) na odpovídající sloučeninu, kde R³=C,-C_?

Do roztoku příslušné 22-hydroxysloučeniny (R³= H) (0,5 mmol) v suchém THF (5 ml) byla přidána za míchání při 20 °C pod argonem 20% suspenze hydridu draselného v minerálním oleji (0,2 ml), následovaná alkylačním činidlem, R³Y (1,5 mmol).

• · φ · · φ · «φ · φφφφ φ φφφφ φ φφ · φ · φφφ φ φφφ φφφ φ φφ φ φ φ φφφφ φφφφ φφ φφ φφφ φφ φφ

Potom byl přidán roztok 18-crown-6 (0,13 g) v suchém THF (2 ml) v průběhu 5 minut. Míchání při 20 °C pokračovalo po dvě hodiny, potom byla reakční směs zpracována (ether). Surový produkt byl purifikován chromatografií (směs etheru a petroletheru jako eluens) za získání požadované alkoxysloučeniny.

Příprava 1

Sloučeniny 201 a 202

Do roztoku 1(S), 3(R)-di(terc.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7 (E),10(19),16-tetraenu (W. von Daehne a kol., plakát na X. semináři o vit.D, Strasbourg 1997,; WO 98/24762) (3; N=N_E, 20S-isomer) (2,28 g, 4 mmol) v dichlormethanu (20 ml) byl přidán za míchání TBABr (258 mg, 0,8 mmol) následovaný 2N vodným hydroxidem sodným (10 ml). Po míchání při teplotě místnosti po 40 minut byla směs zředěna dichlormethanem, (20 ml) a vodou (30 ml). Organická fáze byla oddělena a vodná vrstva byla extrahována dichlormethanem (40 ml). Spojené organické extrakty byly promyty vodou (4 x 25 ml) a solankou (25 ml), sušeny nad síranem hořečnatým a odpařeny ve vakuu za vzniku směsi sloučenin 201 (Z-forma) a 202 (E-forma) v přibližném molárním poměru 95:5. Separace obou sloučenin byla prováděna chromatografií na silikagelu (eluens: 2,5 až 5 %etheru v petroletheru) za vzniku méně polárního Z-isomeru 201 a více polárního E-isomeru 202, oba jako bezbarvé krystaly (z etheru-methanolu).

Sloučenina 201 ^XH NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,85 (s, 9H), 0,90 (s, 9H) , 0,95 (s, 3H), 1,70 (bs, 3H), 1,50-2,70 (m, 14H), 2,87 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,96 (m,lH), 4,99 (m, 1H), 5,92 (d, 1H), 6,43 (d, 1H), 10,2 (s, 1H).

Teplota tání 113-114 °C

Anal. vypočteno pro C₃₄H₅₈O₃Si₂ : C 71,52, H 10,24. Nalezeno: C • · • · • · · · · · · ·· · ···· · · · · · · ·· · ·· · · · · · · · · · · • · · · · · · · · · ···· ·· ·· ··· ·· ··

71,51, Η 10,19

UV (EtOH, nm) : Ámax 265 (ε 35900)

IR (KBr) 1665, 1620 cm^-1 .

Sloučenina 202 'H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,83 (s, 3H), 0,84 (s, 9H), 0,89 (s, 9H), 1,80 (bs, 3H), 1,50-2,00 (m, 8H), 2,23 (dd, 1H), 2,33 (m, 2H), 2,57 (dd, 1H), 2,88 (m,2H), 3,09 (dd, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,96 (m, 1H), 4,99 (m, 1H), 5,91 (d, 1H) , 6,44 (d, 1H) , 9,99 (s, 1H) .

Teplota tání 109-110 °C

EIMS vypočteno pro C₃₄H₅gO₃Si₂ + 570,3925, nalezeno: 570,39

UV (EtOH, nm) : Ámax 268 (ε 37500)

IR (KBr) 1670, 1620 cm’¹ .

Příprava 2

Sloučeniny 201 a 202

Náhradou 1(S),3(R)-di(terc.butyldimethylsilyloxy)-20(R)-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),16-tetraenu (W. von Daehne a kol., plakát na X. semináři o vit.D, Strasbourg 1997,; WO 98/24762) (3; N=N_E, 20R-isomer) za odpovídající 20S isomer v postupu přípravy 1 byla získána obdobná směs sloučenin 201 a 202 (přibližný molární poměr 95:5).

Příprava 3

Sloučeniny 211 a 212

Kyanid draselný (7,0 g) byl míchán v ledově chladném roztoku 1(S),3(R)-di(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-oxo-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19)-trienu; lb (N=N_E) ( K. Hansen a kol., ve : Vitamin D: Gene Regulation, Structure-Function Analysis and Clinical Application; Norman, A,W., Bouillon, R., Thomasset, M., Eds.; De Gruyter, Berlin, 1991, str. 161-162) (3,0 g) ve směsi s ethanolem (30 ml) a kyselinou octovou (15 ml) po 30 minut. Po míchání po 21 h při teplotě místnosti t···

4 4 · ·· 4 .-4 4 · byla směs filtrována. Do filtrátu byla přidána voda (45 ml) a sraženina byla spojena a sušena ve vakuu. Sraženina byla rozpuštěna v suchém pyridinu (5 ml) a při 0 °C byl přidán oxychlorid fosforečný (1,3 g). Po míchání po 22 h při teplotě místnosti byla reakční směs rozdělena mezi vodu (150 ml) a ether (150 ml). Organická fáze byla promyta vodou (150 ml) a solankou (100 ml), sušena nad síranem hořečnatým a odpařena do sucha ve vakuu. Chromatografie na silikagelu s methylenchloridem/petroletherem 2:1 poskytla oddělené produkty, sloučeninu 211 (E-formu) a sloučeninu 212 (Z-formu) v poměru přibližně 3:1.

Sloučenina 211 ¹³C NMR δ 169,7, 153,3, 140, 1, 136, 5, 121,0, 120, 0, 117,6,

106,7, 99,8, 69,9, 67,0, 55,9, 48,8, 43,7, 36,4, 36,2, 32,7, 28,2, 25, 6, 25, 6, 22, 9, 22,5, 18, 0, 17,9, 15, 8, 15,3, -5, 0, -5,1, -5,1.

Sloučenina 212 ¹³C NMR δ 170,4, 153, 3, 140, 6, 136,3, 121,1, 119,2, 117,3,

106,8, 97,2, 70,0, 67,0, 55,5, 48,4, 43,7, 36,5, 35,2, 30,5,

28,4, 25, 6, 25, 6, 22, 9, 22, 0, 18,0, 17, 9, 17, 8, 16, 7, -5, 0, -5,1, -5,1.

Příprava 4

Sloučenina 202

Roztok sloučeniny 211 (50 mg) v toluenu (2 ml) byl ochlazen na

-78 °C a byl přidán roztok DIBAH (83 μΐ, 20% v hexanu). Po míchání při -78 °C po 30 minut a při teplotě místnosti po 27 hodin byla směs míchána nasyceným vodným chloridem amonným (4 ml) po 30 min. Směs byla extrahována ethylacetátem (30 ml). Organická fáze byla promyta vodou (20 ml) a solankou (20 ml), sušena se síranem hořečnatým a odpařena do sucha ve vakuu. Chromatografií na silikagelu s etherem/petroletherem 1:10 se • φ φ φ » · φ φφφφ φ φ φφφφ φφφφ φ φ získala sloučenina uvedená v názvu.

¹³C NMR δ 193,4, 171,9, 153, 3, 140, 6, 136,3, 127,9, 121,1, 117,5, 106,7, 70,0, 67,0, 54,6, 49, 8, 43,7, 36,5, 36,4, 28,3, 28,2, 25, 7, 25, 6, 23,0, 18,0, 17,9, 15, 4, 10, 0, -5,0, -5, 1, -5,1.

Příprava 5

Sloučenina 203

Do míchaného roztoku sloučeniny 201 (366 mg, 0,64 mmol) v THF (3 ml) byl postupně přidáván při 0 °C 0,4M methanolický chlorid čeřitý, heptahydrat (1,6 ml), methanol (3 ml) a tetrahydroboritan sodný (60,8 mg, 1,6 mmol). Po míchání při 0 °C po 40 minut byla reakční směs zředěna ethylacetátem (40 ml) a byla přidána voda (15 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (10 ml) a solankou (10 ml), sušena nad síranem hořečnatým a odpařena ve vakuu. Zbytkový olej byl purifikován chromatografií na silikagelu (eluens: 5% ethylacetát v petroletheru) za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako bezbarvého oleje.

^XH NMR δ 0,05	(m,	12H), 0,75 (s,	3H) ,	0,85 (s, 9H), 0,89 (s,
9H), 1,69	(bs,	3H)	, 2,46-0,60 (m,	14H)	, 2,56 (dd, 1H), 2,84
(dd, 1H),	3,95	(d,	1H), 4,22 (m,	1H),	4,34 (d, 1H), 4,53 (m,
1H), 4,94	(m,	1H),	4,98 (m, 1H),	5,87	(d, 1H), 6,44 (d, 1H).

Příprava 6

Sloučenina 204

Náhradou sloučeniny 202 za sloučeninu 201 v postupu přípravy 5 byla získána isomerní sloučenina 204.

^XH NMR δ 6,44 (d, 1H), 5,86 (d, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,94 (m,

1H), 4,53 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,04 (s, 2H), 2,84 (m, 1H),

2,56 (dd, 1H), 2,60-0,60 (m, 14H), 1,79 (bs, 3H), 0,89 (s,

9H), 0,85 (s, 9H), 0,75 (s, 3H), 0,05 (m, 12H).

0

01 0 0

0 0 0 0 0 «

Příprava 7

Sloučeniny 301 a 302

Míchaný roztok sloučeniny 201 (17,1 mg, 0,03 mmol) v suchém THF (2 ml) byl ochlazen na -78 °C a stříkačkou byl přidán 1,6 M butyllithium v hexanu (0,04 mmol). Po míchání při -78 °C po dalších 20 minut byla reakční směs zchlazena několika kapkami vody a ohřátá na teplotu místnosti. Reakční směs byla zředěna etherem (20 ml), promyta vodou ( 4 x 5 ml), sušena nad síranem hořečnatým a odpařena ve vakuu za vzniku směsi sloučenin 301 (méně polární, isomer A) a 302 (více polární, isomer B) v přibližném molárním poměru 1:2. Oba isomery bylo možno oddělit chromatografií na silikagelu (eluens: 10% ether v petroletheru).

Sloučenina 301 ^XH NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,80 (s, 3H), 0,85 (s, 9H), 0,89 (s, 9H), 1,55 (bs, 3H), 2,45-0,62 (m, 23H), 2,57 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,87 (d, 1H), 6,44 (d, 1H).

Sloučenina 302 ^XH NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,73 (s, 3H), 0,85 (s, 9H), 0,89 (s,

9H), 1,55 (bs, 3H), 2,45-0,62 (m, 23H), 2,57 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,94 (m, 1H) , 4,98 (m, 1H), 5,87 (d, 1H), 6,44 (d, 1H) .

Příprava 8

Sloučenina 401

Metoda: Obecný postup 1 Výchozí materiál: Sloučenina 301

Příprava 9 Sloučenina 402

Metoda: Obecný postup 1 • 0 ·0

00«

0 4

000· 00

0 00· w V » w « 0 0 4

0 0 4 «0 4 °C, pyridinu (0,2 ml), DMAP 0,12 mmol) v suchém jediné dávce

Výchozí materiál: Sloučenina 302

Příprava 10

Sloučenina 205

Do roztoku, udržovaného při asi 5 (15 mg) a sloučeniny 203 (0,070 g, dichlormethanu (2 ml) byl přidán v pivaloylchlorid (0,060 g, 0,5 mmol). Po míchání při stejné teplotě po 1 hodinu byla reakční směs zchlazena vodou a rozdělena mezi ether a 5% roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografii na silikagelu (15 g) (eluens: 5% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako pěna.

¹³C NMR δ 178,6, 153,4 150, 4, 142,0, 135,7, 121,4, 120,3, 116, 8, 106, 5, 70, 0, 67,0, 64,8, 56,3, 47,3, 43, 8, 38,6, 38,0,

36,4, 30,1, 28,4, 27,0, 25,7, 25,6, 23,4, 22,7, 18,1, 18,1, 18,0, 17,9, -5,0, -5,1, -5,1,

Příprava 11

Sloučenina 303

Do roztoku, udržovaného při asi 5 °C, Grignardova činidla připraveného z hořčíku (1,1 atomových ekvivalentů) a bočního řetězce stavebního bloku 3-methyl-l-brombutanu (0,300 g, 2 mmol) v suchém THF (3 ml) byl stříkačkou přidán tetrachlorměďnatan lithný ( 1 ml 0,lM roztoku v suchém THF), následovaný sloučeninou 205 (0,055 g, 0,083 mmol) v suchém THF (2 ml). Po míchání při stejné teplotě po 16 hodin byla reakční směs zchlazena vodou a rozdělena mezi ether a nasycený roztok chloridu amonného. Organická vrstva byla oddělena, promyta nasyceným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Purifikací chromatografii na silikagelu (15 g)

9*

9999 • 9 9 999

9 9 9

9 99 9

9 9 9 9

9999 99 99999 (eluens: 2% ether v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako olej.

¹³C NMR δ 153,5, 142,8, 142,8, 135,3, 126,0, 121,5, 116,4,

106,4, 70,1, 67,1, 56,7, 46,9, 43,8, 39,3, 38,3, 36,4, 34,2, 29, 9, 28,6, 27,8, 26,8, 25,7, 25, 6, 23, 6, 22, 9, 22,5, 22,4,

19,8, 18,1, 17,9, 17,7, -4,9- -5,1.

Příprava 12

Sloučenina 403

Metoda: Obecný postup la

Výchozí materiál: Sloučenina 303

Eluens pro chromatografií: 2% ether v petroletheru

Příprava 13

Sloučeniny 304 a 305

Metoda: Obecný postup 4

Výchozí materiál: Sloučenina 201

Stavební blok acetylenického bočního řetězce:

3-ethyl-3-(tetrahydro-4H-pyran-2-yl-oxy)-5-hexin (WO 93/19044)

Eluens pro chromatografií: 0 % až 10 % ethylacetatu v petroletheru

Sloučenina 304 (isomer 22A)

³Η NMR δ	6,24	(d, 1	H), 5,86	(d, 1H), 5,44	(m, 1H), 4,98	(m,
1H), 4,9	4 (m,	1H) ,	4,81 (m,	1H), 4,53 (m,	1H), 4,21 (m,	1H),
3,96 (m,	1H),	3,44	(m, 1H),	2,83 (m, 1H),	2,56 (dd, 1H),	2,46
(m, 2H),	1,70	(bs,	3H), 2,42	:-1,37 (m, 24H)	, 0,89 (s, 9H)	, 0,84
(s, 9H),	0, 93-	-0,80	(t, 6H),	0,80 (s, 3H),	0,05 (m, 12H).

Sloučenina 305 (isomer 22B)

NMR δ 6,24 (d, 1H), 5,86 (d, 1H), 5,49 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,80 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,56 (dd, 1H), 2,46

(m, 2H), 1,72 (bs, 3H), 2,41-1,36 (m, 24H), 0,89 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0, 93-0, 80 (t, 6H), 0,75 (s, 3H) , 0,05 (m, 12H).

Příprava 14

Sloučenina 404

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 304

Eluens pro chromatografii: 0 % až 5 % ethylacetatu v petroletheru ¹³C NMR δ 148,1, 147,4, 139,5, 135, 4, 125, 1, 122,7, 118,3,

111	,1,	93,0,	82,4,	81,8,	79,9,	71,9,	67,3,	62,8,	61,8, 56,3
46,	9,	45,9,	44,6,	38,8,	32,0,	30,3,	28,4,	28,3,	26, 8, 25,7,
25,	6,	25,3,	23,4,	22,7,	20,1,	18,0,	17,9,	13,8,	7,7, 7,6,
-4,	9,	-5,0,	-5,3.

Příprava 15

Sloučenina 405

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 305

Eluens pro chromatografii: 0 % až 5 % ethylacetatu v petroletheru

	¹³C NMR	δ 148,	6, 148	,1,	139,5, 135,4,	124,8,	122,8	, 118,4,
111,1	, 93,0,	82,4,	81,6,	79	, 8, 72, 0, 67,3,	62,8,	61,3,	56,3,
47,0,	45,9,	44,6,	38,3,	32,	0, 30,4, 28,4,	28,3,	26,7,	25,7,
25, 6,	25, 3,	23,3,	22,7,	20,	1, 18,3, 18,0,	17,9,	14,5,	7,7,
7,6,	-4,9, -	5,0, -	5,3.

Příprava 16

Sloučenina 406

Metoda: Obecný postup 5 ^!

Výchozí materiál: Sloučenina 404 Alkylační činidlo: Ethylbromid

Eluens pro chromatografii: 0 % až 2,5 % ethylacetatu v petroletheru • · • ··· ·· ···· • · • ··· • 11 ¹³C NMR δ 148,1, 147,6, 139, 6, 135,4, 124,4, 122,8, 118,4,

111,2, 93,1, 93,0, 82,3, 80,3, 80,0, 72,0, 68,6, 67,3, 63,0, 62, 9, 56,4, 46, 9, 45, 9, 44,6, 38,9, 32, 1, 30,2, 28,5, 28,4,

28,3, 26,8, 25,7, 25,6, 25,4, 23,4, 22,7, 20,2, 20,2, 18,0,

17,9, 17,7, 15,1, 14,1, 7,7, 7,6, -4,8, -4,9, -5,0, -5,3.

Příprava 17

Sloučenina 407

Metoda: Obecný postup 5

Výchozí materiál: Sloučenina 405

Alkylační činidlo: Ethylbromid

Eluens pro chromatografií: 0 % až 2,5 % ethylacetatu v petroletheru ¹³C NMR δ 148,5, 148,1, 139,7, 135,3, 123, 9, 122,8, 118,3,

111	,2,	93,0,	82,5,	80,2,	79,9,	72,0,	67,9,	67,3,	62,9,	62,8
56,	3,	47,0,	45,9,	44,6,	38, 0,	32,0,	30,4,	28,5,	28,4,	26,7,
25,	Ί,	25,6,	25,3,	23,4,	22,7,	20,1,	18,3,	18,0,	17,9,	17,7,
15,	2,	14,9,	7,7,	7,6, -	4,9, -	5,0, -	5,3.

Příprava 18

Sloučenina 206

Náhradou sloučeniny 204 za sloučeninu 203 v postupu přípravy 10 byla získána isomerní sloučenina 206 jako pěna.

¹³C NMR δ 178,5, 153,4, 148,5, 142,1, 135, 6, 121,4, 120,2,

116,7, 106,5, 70,0, 67,2, 67,0, 55,9, 47,4, 43,8, 38,7, 37,4,

36.4, 28,7, 28,5, 27,1, 25,7, 25,6, 23,4, 22,9, 18,1, 17,9,

16.4, 15,3, -4,9, -5,0, -5,1, -5,1.

Příprava 19

Sloučenina 308

Náhradou l-brom-3-methyl-3-trimethyl-silyloxybutanu za 3-methyl-l-brombutan v postupu přípravy 11 byla získána sloučenina 308.

0000 • 00. 0 00 0 00 0

000 0 0 000 0 0 0 0 • 0 0 00 0 0 0 · 0 · 0 • 00 00 0 000 0

0000 00 00 000 00 00

Příprava 20

Sloučenina 309

Náhradou sloučeniny 206 za sloučeninu 205 v postupu přípravy 19 byla získána sloučenina 309.

Příprava 21

Sloučenina 408

Do roztoku sloučeniny 308 (1 mmol) v THF (5 ml) a ethylalkoholu (10 ml) byl přidán PPTS (30 mg) a směs byla míchána po 1 hodinu při 25 °C pod argonem. Po zpracování (ethylacetátem s další extrakcí vodným hydrogenuhličitanem sodným) byl zbytkový surový produkt purifikován chromatografií s 30 % etheru v petroletheru jako eluens za vzniku sloučeniny 408.

¹³C NMR δ 153,4, 13, 3, 142,7, 135,3, 125,5, 121,5, 116, 5,

106, 4, 70, 9, 70, 0, 67,0, 56,7, 46, 9, 44,0, 43,7, 38,3, 36, 4,

34,2, 29, 9, 29, 0, 28,9, 28,5, 25,7, 25, 6, 23, 8, 23, 6, 22,9,

19,7, 18,1, 17,9, -5,0, -5,1.

Příprava 22

Sloučenina 409

Náhradou sloučeniny 309 za sloučeninu 308 v postupu přípravy 21 byla získána sloučenina 409.

³H NMR δ 6,44 (d, 1H), 5,85 (d, 1H), 4,98 (bs, 1H), 4,93 (bs, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 2,83 (dd, 1H), 2,58 (dd, 1H), 2,4-1,10 (m, 20H), 1,68 (bs, 3H), 1,21 (bs, 6H), 0,89 (s, 9H), 0,86 (s, 9H), 0,77 (s, 3H), 0,05 (bs, 12H).

Příprava 23

Sloučenina 508

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 408 ·· φ« φφ *♦·♦ ·Φ ·« • » φ · · φ φφφφ • φφφ φ φ φφφ φ φ φ · • · φφφ φ · · · · · · .

φφφ · φ φ φφφφ ···» ·· ·· φφφ φφ ·«

Příprava 24

Sloučenina 509

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál : Sloučenina 409

Příprava 25

3-Ethvl-3-trimethvlsilyloxv-5-hexin

Do roztoku 3-ethyl-3-hydroxy-5-hexinu (12,6 g )(WO 93/19044), triethylaminu (67 ml) a DMAP (0,47 g) v dichlormethanu (150 ml) byl přidán za míchání při 0 °C trimethylchlorsilan (38 ml), v průběhu 10 minut. Míchání pokračovalo při 0 °C po 15 minut, a při 25 °C po 45 minut. Reakční směs byla zpracována a surový produkt byl purifikován destilací ve vakuu za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje, teplota varu 83-85 °C/25 mm Hg.

¹³C NMR δ 81,6, 77,9, 69,7, 31,4, 28,9, 7,9, 2,3.

Příprava 26

Sloučeniny 310 (isomer 22A) a 311 (isomer 22B)

Metoda: Obecný postup 4

Výchozí materiál: Sloučenina 201

Stavební blok acetylenického bočního řetězce:

3-ethyl-3-trimethylsilyloxy-5-hexin

Eluens pro chromatografií: 2,5% ethylacetat v petroletheru

Sloučenina 310 (isomer 22A) ¹³C NMR δ 153,4, 147,3, 141,9, 135,7, 125,2, 121,3, 116,8, 106,5, 82,6, 81,7, 78,1, 70,0, 67,0, 61,8, 56,4, 47,1, 43,7,

38,7, 36,4, 31,5, 30,3, 29,3, 28,4, 25,7, 25,6, 23,4, 22,8,

18,2, 18,1, 17,9, 13,9, 7,9, 2,3, -5,0, -5,1.

Sloučenina 311 (isomer 22B) ¹³C NMR δ 153,4, 148,5, 141,9, 135,7, 124,9, 121,3, 116, 8, ·· ·· « * » · • · · · • ♦ · β · ·· · ·

106,5,	82,5,	81,7	, 78,1,	70,0, 67,0, 61,4, 56,4, 47,1
38,2,	36,4,	31,5,	30,3,	29,3, 28,4, 25,7, 25,6, 23,4,
18,4,	18,1,	17,9,	14,5,	7,9, 2,3, -5,0, -5,1, -5,1.

Příprava 27

Sloučenina 410 (isomer 22A)

Metoda: Obecný postup lb

Výchozí materiál: Sloučenina 310

Eluens pro chromatografií: 2,5% až 5% ether v petroletheru ¹³C NMR δ 148,1, 147,5, 139, 6, 125, 4, 125, 1, 122, 8, 118,3,

111,2, 82,6, 81,8, 78,1, 72,0, 67,3, 61,9, 56,3, 47,0, 45,9, 44,6, 38,8, 31,5, 30, 3, 29,3, 28,3, 25, 7, 25, 6, 23, 4, 22, 8, 18,1, 18,0, 18,0, 13,9, 7,9, 2,3, -4,9, -5,0, -5,3.

Příprava 28

Sloučenina 411 (isomer 22B)

Metoda:Obecný postup lb

Výchozí materiál : Sloučenina 311

Eluens pro chromatografií: 0% až 10% ether v petroletheru ¹³C NMR δ 148,7, 148,1, 82, 6, 81, 6, 78,1, 71,9 38,3, 31,5, 30,4, 29,2 18,0, 17,9, 14,5, 7,9,

139,6, 135,4, 122,8, 118,3, 111,1,

67.3, 61,4, 56, 3, 47,0, 45, 9, 44,6,

28.3, 25,7, 25,6, 23,3, 22,6, 18,3,

2,3, -4,9, -5,0, -5,3.

Příprava 29

Sloučenina 510 (isomer 22A)

Metoda:Obecný postup 5

Výchozí materiál : Sloučenina 410 Alkylační činidlo: Ethylbromid

Eluens pro chromatografií: 0% až 6% ether v petroletheru
¹³C NMR	δ 148,1, 147,6, 139,7, 135,3,	124,3,	122,	8, 118,3,
111,1,	82,5, 80,4, 78,2, 72,0, 68,6,	67,6,	63,0,	56,3, 46, 9,
45, 9, 44,6, 38,9, 31,6, 31,6, 30, 1,	29,4,	28,3,	25,7, 25,6,

23,4, 22,7, 18,0, 17,9, 17,7, 15,1, 14,2, 7,9, 2,3, -4,9, ·· ·· *· ···· ·· • 9 9 · » 9 Φ ·· · • ··· · · ·** · *t >

• · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

9999 99 99 999 99 99

-5,0, -5,3.

Příprava 30

Sloučenina 511 (isomer 22B)

Metoda: Obecný postup 5

Výchozí materiál : Sloučenina 411

Alkylační činidlo: Ethylbromid

Eluens pro chromatografií: 0% až 2% ether v petroletheru ¹³C NMR δ 148,5, 148,0, 139,7, 135, 3, 123,9, 122,8, 118,3,

111.2, 82,7, 80,2, 78,2, 72,0, 68,0, 67,3, 62, 9, 56,3, 47,0, 45, 9, 44,6, 38,0, 31, 6, 30,4, 29,2, 28,3, 25,7, 25, 6, 23, 4,

22,7, 18,3, 18,0, 17,9, 15,2, 14,9, 7,9, 2,3, -4,9, -5,0, -5,3

Příprava 31

Sloučenina 207

Metoda: Obecný postup lb

Výchozí materiál : Sloučenina 201

Eluens pro chromatografií: 0%'až 10% ether v petroletheru ¹³C NMR 5 190, 9, 174,0, 148,1, 138,2, 136,2, 130,0, 122,5,

119.2, 111,1, 71,8, 67,3, 56,0, 48,8, 45,8, 44,6, 40,4, 32,4, 28,1, 25, 6, 25,6, 23,3, 22,4, 19,5, 18,0, 17,9, 11,8, -4,9, -5,0, -5,2

Příprava 32

Sloučenina 312

Roztok sloučeniny 207 (0,144 g, 0,25 mmol) a

3-(methoxykarbonyl)-2-propenyl-l-iden-trifenylfosforánu v suchém toluenu (3 ml) byl zahříván při 100 °C po 18 hodin. Po koncentrování ve vakuu byl zbytek purifikován chromatografií, eluens: 0% až 2,5% etheru v petroletheru, za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

¹³C NMR δ 167,7, 157,5, 148,1, 146,3, 140,6, 139,3, 135,6,

124.2, 122,7, 118,6, 118,0, 111,1, 71,9, 67,3, 56,3, 51,2, 48,0, 45,8, 44,6, 39,1, 31,8, 28,3, 25,7, 25,6, 23,4, 22,7,

18,0, 18,0, 15,6, -4,9, -5,0, -5,3

Příprava 33

Sloučenina 412

Do míchaného roztoku sloučeniny 312 (20 mg, 0,031 mmol) v THF (2 ml), ochlazeného na -78 °C, byl přidán čerstvě připravený 1,16M roztok ethyllithia v etheru (0,08 ml, 0,093 mmol). Míchání při -78 °C pokračovalo po jednu hodinu, potom byla přidána voda (15 ml). Reakční směs byla zpracována (etherem) za vzniku surového produktu, který byl purifikován chromatografií, eluens: 0% až 5% ether v petroletheru, za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

Ή NMR δ 6,Ol (d, 1H), 6,3-6,0 (m, 4H), 5,61 (d, 1H), 5,18 (bs, 1H), ,87 (bs,' 1H), 4,36 (m, 1H) , 4,18 (m, 1H) , 2,80 (bd, 1H), 2,5-0,9 (m, 17H), 1,72 (bs, 1H), 1,57 (bq, 4H), 0,90 (bt, 6H), 0,88 (bs, 18H), 0,83 (s, 3H), 0,06 (bs, 12H)

Příprava 34

Sloučenina 208

Do roztoku N-chlorsukcinimidu (21 mg) v suchém dichlormethanu (1,5 ml) byl přidán v průběhu 5 minut roztok dimethylsulfidu (12,2 μΐ) v suchém dichlormethanu (0,9 ml) při 0 °C za míchání. Míchání pokračovalo po 10 minut při 0 °C a po 20 minut při -20 °C. Do reakční směsi byl přidán roztek sloučeniny 203 (77 mg, 0,134 mmol) v suchém dichlormethanu (2,0 ml) v průběhu 5 minut při -20 °C. Míchání pokračovalo po 45 minut při -20 °C až -30 °C. Zpracování: Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát (20 ml) a vodu (20 ml). Vodná fáze byla extrahována dalším (15 ml) podílem ethylacetatu, a spojené organické fáze byly extrahovány vodou (20 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml), sušeny síranem sodným a odpařeny při (0-10 °C) ve vakuu; všechna zpracovatelská kapalina byla ledově chladná. Surová sloučenina 208 byla použita bez další purifikace v následujícím kroku (příprava 35).

Příprava 35

Sloučenina 313

Do roztoku 3-(2-hydroxy-2-propyl)-fenolu (46 mg, 0,30 mmol) (WO1/15475) v suchém DMF (3 ml) byla přidána 50% disperze hydridu sodného-v-oleji (15 mg), a směs byla míchána při 20 °C po 90 minut. Potom byla přidána do surové sloučeniny 208 z přípravy 34 a sěms byla míchána při 20 °C po 3 hodiny, potom byla zpracována (ethylacetatem). Purifikací chromatografií na silikagelu (eluens: 0% až 20% etheru v petroletheru) se získala sloučenina uvedená v názvu jako olej.

^XH NMR δ 159,2, 153,4, 150,7, 150,5, 142,0, 135,6, 129,0,

121,4, 121,2, 116,8, 116,5, 112,1, 111,3, 106,6, 72,4, 70,1,

68,3, 67,0, 56,2, 47,4, 43,8, 38,1, 36,4, 31,5, 30,2, 28,4,

25,7, 25,6, 23,4, 22,7, 18,6, 18,3, 18,1, 17,9, -5,0, -5,1

Příprava 36

Sloučenina 413

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 313

Eluens pro chromatografii: 0% až 10% etheru v petroletheru ^XH NMR δ 7,25 (m, 1H), 7,09 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 6,81 (m,

1H), 6,21 (d, 1H), 6,06 (d, 1H), 5,18 (bd, 1H), 4,87 (bd, 1H), 4,65 (d, 1H), 4,36 (d, 1H), 4,35 (m, 1H) , 4,19 (m, 1H), 2,78 (bd, 1H), 2,5-0,9 (m, 15H), 1,74 (bt, 3H), 1,57 (s, 6H), 0,87 (S, 18H), 0,78 (s, 3H), 0,05 (bs, 12H)

Příprava 37

Sloučenina 314

Do roztoku sloučeniny 203 (80 mg, 0,140 mmol) v suchém THF byla přidána, za míchání při 20 °C pod argonem, 20% suspenze hydridu draselného v minerálním oleji ( 54 μΐ), následovaná

6-brom-3-ethyl-3-trimethylsilyloxy-hexanem (WO 89/10351) • 4 ·· · · 4·· • « · · · · • 444 · · 4 4· ···· ·· ·· ··· (111 μΐ). Po 5 minutách byl přidán 18-crown-6 (39 mg) a míchání při 20 °C pokračovalo po jednu a půl hodiny, po níž byla reakční směs zpracována (etherem). Surový produkt byl purifikován chromatografií (0% až 5% ether v petroletheru jako eluens) za získání sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

¹³C NMR δ 153, 4, 148,5, 142,4, 135, 5, 123,0, 121,4, 116, 7, 106,5, 78,5, 70,7, 70,5, 70,0, 67,0, 56,3, 47,2, 43,8, 38,2,

36,4, 34,8, 31,2, 30,0, 28,4, 25,7, 25,6, 24,0, 23,5, 22,8,

18,2, 18,2, 18,1, 17,9, 8,0, 2,5, -5,0, -5,1

Příprava 38

Sloučenina 414

Metoda: Obecný postup 1; s tou výjimkou, že v následujícím kroku (příklad 14) byl použit surový produkt bez předchozí purifikace chromatografií

Výchozí materiál: Sloučenina 314 ³H NMR δ 6,22 (d, 1H), 6,05 (d, 1H), 5,18 (m, 1H), 4,86 (m,

1H), 4,36 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,10 (d, 1H), 3,37 (t, 2H), 2,78 (d, 1H), 2,44 (dd, 1H), 2,4-2,1 (m, 5H), 1,9-1,4 (m, 8H), 1,63 (s, 3H), 1,45 (q, 4H), 0,9-0,7 (m, 4H), 0,87 (d, 18H), 0,81 (t, 6H), 0,74 (s, 3H), 0,08 (s, 9H), 0,06 (s, 12H)

Příprava 39

Sloučenina 315 a sloučenina 316

Roztok 6-brom-3-ethyl-3-trimethylsilyloxy-hexanu (WO 89/10351) (1,375 g, 4,9 mmol) v suchém THF (5 ml) byl přidáván po kapkách, v průběhu 10 minut, do hořčíkových závitů (118 mg,' 4,9 mgAt) (předtím míchaných dosucha během 20 hodin pod argonem) spolu s etherem (1 ml) za míchání pod argonem při 20 °C. Míchání pokračovalo pod refluxem (olejová lázeň, 75 °C) po jednu a půl hodiny do vytvoření Grignardova činidla, a 1,0 ml roztoku byl odebrán pomocí stříkačky, dokud byl ještě teplý (40-50 °C). Ten byl přidán do roztoku sloučeniny 201 (171 mg, 0,30 mmol) v THF (2 ml) za míchání pod argonem při • · ···· 9 9 · 9 • · · · « · · • ···· ··· ·

0-5 °C. Míchání pokračovalo po 40 minut při 20 °C, potom byla reakční směs nalita do směsi etheru (25 ml) a vody (25 ml), obsahující chlorid amonný (2,5 g), za míchání. Reakční směs byla zpracována (etherem) za získání surového produktu obsahujícího isomerní 22-hydroxysloučeniny: A (méně polární) a B (více polární). Tyto byly odděleny chromatografií (0% až 10% ether v petroletheru jako eluens) za vzniku sloučenin uvedených v názvu.

Sloučenina 315 (isomer 22A) ¹³C NMR δ 153,5, 146, 4, 142,1, 135, 6, 128,0, 121,4

116,7, 106,5, 78,7, 70,7, 70,0, 67,0, 56, 8, 47,0, 43,8, 39, 6,

38,5, 36,4, 35,9, 31,4, 30,9, 30,4, 28,4, 25,7, 25,6, 23,5,

22, 9, 20,2, 18,4, 18,1, 17,9, 13, 0, 8,0, 2,5, -5,0, -5,1

Sloučenina 316 (isomer 22B) ¹³C NMR δ 153, 4, 148,2, 142, 1, 135,7, 127,5, 121,4

116, 9, 106, 5, 78,6, 70,0, 70, 0, 67,0, 56, 6, 46, 9, 43,8, 38,5, 36, 4, 35, 1, 31,3, 31,0, 30,3, 28,5, 25,7, 25, 6, 23,5, 22, 8,

20,3, 18,9, 18,1, 17,9, 12,9, 8,1, 8,0, 2,5, -5,0, -5,1

Příprava 40

Sloučenina 415 (isomer 22A)

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 315

Eluens pro chromatografií: 0% až 10% ether v petroletheru

Příprava 41

Sloučenina 416 (isomer 22B)

Metoda: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 316

Eluens pro chromatografií: 0% až 10% ether v petroletheru.

Příprava 42 ·· ·· ·· ···· ·· ► · · ··· * « · • · · · · · · · · · ··

Sloučenina 317

Roztok sloučeniny 207 (0,25 mmol) v cyklopropylkarbonylmethylen-trifenylfosforánu (0,5 iranol) v suchém toluenu (3 ml) byl zahříván při 100 °C po 18 hodin. Po koncentrování ve vakuu byl zbytek purifikován chromatografií, eluens: 0% až 2,5% ether v petroletheru, za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako oleje.

Příprava 43

Sloučenina 417

Do míchaného roztoku sloučeniny 317 (0,3 iranol) v THF (1 ml) byl přidán při 0 °C 0,4M methanolický chlorid čeřitý, heptahydrat (1 ml), methanol (1 ml) a tetrahydroboritan sodný (60 mg, 1,6 iranol). Po míchání při 0 °C po 40 minut byla reakční směs zředěna ethylacetátem (40 ml) a byla přidána voda (15 ml). Organická fáze byla oddělena, promyta vodou (10 ml) a solankou (10 ml), sušena nad síranem hořečnatým a odpařena ve vakuu. Zbytkový olej byl purifikován chromatografií na silikagelu (eluens: 5% ethylacetát v petroletheru) za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako směsi epimerů na boční pozici hydroxylu, která je použita jako taková v následném stupni (příklad 17).

Příklad 1: l(S),3(R)-Dihydroxv-20-(l-hvdroxv-l-pentvl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20) (Z)-tetraen, isomer 22A

Sloučenina 101

Metoda:Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 401

Příklad 2: l(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-hydroxy-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer 22B

Sloučenina 102

Metoda:Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 402 • · φ ΦΦ ·♦ ΦΦ ΦΦ • φ * φ φ » Φ t » · ♦ • φ φ φ * »φ· φ · φ φ · • •φ Φ·Φ· φ · · ·

ΦΦ ΦΦΦ φ φ * · · * φ·

Příklad 3: 1(S),3(R)-Dihydroxv-20-(4-methvl-l-pentvl)-9,10-sekopregna-5(2),7(Ε),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 103

Metoda: Obecný postup 2

Výchozí materiál: Sloučenina 403 ^!H NMR δ 6,37 (d, 1H), 6,04 (d, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,01 (bs, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 2,80 (dd, 1H), 2,61 (dd, 1H) , 1,56 (bs, 3H), 1,10-2,35 (m, 22H), 0.87 (d, 6H), 0,73 (s, 3H)

Příklad 4:

1(S), 3 (R)-Dihvdroxv-20-(1,5-dihydroxy-5-ethyl-2-heptin-l-vl)-9,10-sekopreqna-5(Z),7 (E),10(19),17(20) (Z)-tetraen, isomer

22A

Sloučenina 104

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 410

Eluens pro chromatografii: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru ¹³C NMR δ 149, 8, 147,5, 141,5, 136,2, 127,5, 124,7, 119, 6,

112,1, 83,5, 82,4, 75,3, 71,5, 67,4, 62,4, 58,0, 46,2, 43,7,

40,5, 32,0, 31,2, 29,7, 29,5, 24,8, 24,2, 18,3, 14,5, 8,1

Příklad 5:

1(S) ,3(R) -Dihvdroxy-20-(1,5-dihvdroxv-5-ethyl-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopreqna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer

22B

Sloučenina 105

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 411

Metoda purifikace: Krystalizace z etheru.

T.t. 161-175 °C ^XH NMR δ 6,34 (d, 1H), 6,05 (d, 1H), 5,51 (bs, 1H), 5,33 (bs, 1H), 4,99 (bs, 1H), 4,43 (bs, 1H), 4,22 (bs, 1H), 2,79 (d,

1H), 2,58 (dd, 1H), 2,37 (d, 2H), 2,35-1,0 (m, 17H), 1,71 (s, • · • ♦

3H), 1,55 (bq, 4H), 0,86 (bt, 6H), 0,76 (s, 3H)

Příklad 6:

1(S),3(R)-Dihvdroxy-20-(l-ethoxv-5-ethvl-5-(tetrahvdro-4H-pyran-2-yl)oxy-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna- 5(Z),7(E),~

10(19),17(20)(Z)-tetraen, Isomer 22A

Sloučenina 106

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 406

¹³C NMR δ 147	,6,	147,6,	141,9,	133,6,	124,7, 117,8, 111,9,
93,2,	82, 6,	80,	5,	80,2,	70,8,	68,8,	66,8, 63,3, 63,0, 56,6,
47,2,	45,2,	42,	9,	39,0,	32,3,	30,3,	28,7, 28,6, 27,0, 25, 6,
23,8,	23,1,	20,	3,	17,9,	15,3,	14,4,	7,9, 7,8

Příklad 7:

1(S),3(R)-Dihydroxv-20-(l-ethoxy-5-ethvl-5-(tetrahvdro-4H-pyran-2-yl)oxy-2-heptln-l-yl)-9,10-sekopregna- 5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer 22B

Sloučenina 107

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 407 ¹³C NMR δ 148,4, 147,6, 142, 0, 133, 5, 124,8, 124,3, 117,7,

111,9,	93,2,	82,5,	80,3	80,1,	70,8,	68,1,	66,8, 63,1
56,4,	47,3,	45,3,	42,9,	38,1,	32,2,	30,5,	28,7, 28,6,
25,5,	23,7,	23,0,	20,3,	18,5,	15,4,	15,1,	7,9, 7,8

Příklad 8:

1(S),3(R)-Dihydroxv-20-(4-hvdroxv-4-methyl-1-pentvl)-9,10-sekopreqna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 108

Metoda: Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 508 ¹³C NMR δ 147,6, 143,4, 142, 8, 133, 1, 125,7, 125,0, 117,3,

111,9, 70,8, 66, 9,56, 8, 47, 1, 45,3, 44,2, 42,9, 38,5, 34,4,

9 • · • · · · » · · • · ·♦ * · · · · .· · • 999

30,1, 29,3, 29,2, 28,9, 24,0, 23,9, 23,1, 19,9, 17,8

Přiklad 9:

(S),3 (R)-Dihvdroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentvl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraen

Sloučenina 109

Metoda: Obecný postup 2 nebo 3

Výchozí materiál: Sloučenina 509 ^XH NMR δ 6,37 (bd, 1H), 6,04 (bd, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,02 (bs, 1H), 4,44 (bm, 1H), 4,23 (bm, 1H), 2,80 (bd, 1H), 2,60 (m,

2H), 2,4-1,0 (m, 21H), 1,70 (bs, 3H), 1,21 (s, 6H), 0,73 (s,

3H)

Příklad 10:

1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxv-5-ethvl-5-hvdroxy-2-heptin-1-vl)-9,10-sekopreqna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer 22A

Sloučenina 110

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 510

Eluens pro chromatografií: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru.

¹³C NMR δ 148,1, 147,6, 141,8,	133,6,	124,5, 117,	8, 111,9,
82,1,	81,6, 74,0, 70,8, 68,6,	66,8,	63, 4, 56, 6,	47,2, 45, 3,
42,9,	39,1, 30,8, 30,3, 29, 9,	28,7,	23,7, 23,1,	17,9, 15,3,
14,3,	7,9

Příklad 11:

1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethvl-2-heptin-l-yl)-9,10-sekooreqna-5(Z), 7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer 22B

Sloučenina 111

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 511

Eluens pro chromatografií: 0% až 100% ethylacetatu v • · · · φ φ • · φ » ·· φ · ΦΦΦ· «·· ·· ·· petroletheru.

¹³C NMR δ 148, 8, 147,6, 141,8, 133,5, 124,7, 117,7, 111, 9,

81.9, 81,8, 74,0, 70,8, 68,0, 66,8, 63,2, 56,4, 47,3, 45,2,

42.9, 38,1, 30,8, 30,5, 29,7, 28,7, 23,7, 23,0, 18,6, 15,4,

15,1, 7,9

Přiklad 12:

1(S), 3 (R)-Dihydroxy-20-(5-ethyl-5-hydroxy-hepta-l(E),3(E)-dien

-1-vl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 112

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 412

Eluens pro chromatografií: 25% až 50% ethylacetát v petroletheru.

K NMR δ 6,81 (d, 1H),6,37 (d, 1H), 6,28 (dd, 1H), 6,12 (dd, 1H), 6,08 (bd, 1H), 5,63 (d, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,01 (bs,

1H), 4,44 (m, 1H), 4,24 (m, 1H), 2,80 (bd, 1H), 2,60 (dd, 1H), 2,5-0,90 (m, 16H), 1,74 (bs, 3H), 1,58 (bq, 4H), 0,90 (t, 6H), 0,82 (s, 3H)

Příklad 13:

1(S),3(R)-Dihvdroxv-20-/3-(2-hvdroxv-2-propyl)-fenoxvmethvl/-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 113

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 413

Eluens pro chromatografií: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru.

^XH NMR δ 7,24 (m, 1H), 7,10 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 6,80 (m,

1H), 6,39 (d, 1H), 6,06 (d, 1H), 5,34 (bs, 1H), 5,01 (bs, 1H), 4,66 (d, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,37 (d, 1H), 4,23 (m, 1H), 2,79 (bd, 1H), 2,60 (dd, 1H), 2,40-0,9 (m, 16H), 1,75 (bs, 3H)

1,58 (s, 6H, 0,80 (s, 3H).

» 9* ·

9 99

9 9 9 9 · 9 99 • 999 99 9· ··· ·· ··

Příklad 14:

1(S) ,3(R)-Dihvdroxy-20-/(3-ethyl-3-hydroxy-6-hexvl)-oxvmethyl/

-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 114

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 414

Eluens pro chromatografií: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru.

¹³C NMR δ 148,8, 147,6, 142,3, 133,4, 124,8, 122, 9, 117,6,

111, 9, 74,1, 70, 8, 70,8, 66,8, 56, 4, 47, 3, 45,3, 42, 9, 38,4, 35,4, 31,0, 30, 0, 28,8, 23, 9, 23,7, 23, 0, 18,4, 7,9

Příklad 15:

1(S) ,3(R)-Dihydroxy-20-(1,5-dihvdroxv-5-ethyl-l-heptvl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer 22A

Sloučenina 115

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 415

Eluens pro chromatografií: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru.

Příklad 16:

(S) , 3(R)-Dihydroxy-20-(l,5-dihydroxv-5-ethvl-l-heptyl)-9,10-sekopreqna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, isomer 22B

Sloučenina 116

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 416

Eluens pro chromatografií: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru.

Příklad 17:

1(S),3(R)-Dihvdroxy-20-(3-cyklopropyl-3-hydroxv-prop-l(E)-en-1-vl)-9,10-sekopreqna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

Sloučenina 117 ·

»· ·«»· ·· ·· • · « 19 1 · · 1 ·

1191 1 1111 1 11 ·

1 111 1 . lilii 1

111 11 1 1111 1111 11 91 111 ι· 11

Metoda: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 417

Eluens pro chromatografií: 50% až 100% ethylacetát v petroletheru.

Příklad 18: Kapsle obsahující sloučeninu 105

Sloučenina 105 byla rozpuštěna v arašídovém oleji na výslednou koncentraci 1 pg sloučeniny 105/ml oleje. Deset dílů hmotnostních želatiny, 5 dílů hmotnostních glycerinu, 0,08 dílů hmotnostních sorbatu draselného a 14 dílů hmotnostních destilované vody bylo smíseno dohromady za ohřívání a formováno do želatinových kapslí. Tyto byly plněny každá 100 μΐ sloučeniny 105 v olejovém roztoku, takže každá kapsle obsahovala 0,1 pg sloučeniny 105.

Příklad 19: Dermatologický krém obsahující sloučeninu 108

V 1 g mandlového oleje bylo rozpuštěno 0,05 mg sloučeniny 108. Do tohoto roztoku bylo přidáno 40 g minerálního oleje a 20 g samoemulgačního včelího vosku. Směs byla zahřáta, až zkapalnila. Po přidání 40 ml horké vody byla směs dobře promísena. Získaný krém obsahuje přibližně 0,5 pg sloučeniny 108 na gram krému.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina vzorce I kde ve vzorci

X je vodík nebo hydroxyskupina nebo chráněná hydroxyskupina;

R¹ a R^z znamená vodík, methyl nebo ethyl, nebo, pokud se vezmou dohromady s uhlíkovým atomem nesoucím skupinu X, mohou R¹ a R² tvořit C₃-C₅ karbocyklický kruh;

Q je C₃-C₆ hydrokarbylen, hydrokarbylen znamenající diradikál získaný po odstranění 2 atomů vodíku z přímého nebo větveného, nasyceného nebo nenasyceného uhlovodíku, v němž jedna z jakýchkoliv CH_Z skupin může být popřípadě nahrazena atomem kyslíku nebo karbonylovou skupinou, tak, že atom uhlíku (C-22) přímo vázaný na C-20 je sp² nebo sp³ hybridizovaný atom uhlíku, tedy je vázaný na 2 nebo 3 další atomy; a v němž jiná z CH₂ skupin může být nahrazena fenylenem, a kde Q může být popřípadě substituovaný jednou nebo více hydroxyskupinami nebo C₁-C₄-alkoxyskupinami.

·· 4· • · 4 • 4 ·· • 4 .4 4

4444 44

44 494· ·· *·

4 4 4 9 » · ·

9 4 ··· 4 4 4 4

49 4 · · · · *

4 4 · 9 4 9 *

49 499 9· ··
2. Diastereoisomer sloučeniny podle nároku 1 v čisté formě; nebo ve směsi diastereoisomerů sloučeniny podle nároku 1.
3. Sloučenina podle nároku 1, kterou je:

a) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

b) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

c) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(4-hydroxy-4-methyl-l-pentyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraen

d) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(1,5-dihydroxy-5-ethyl-2-heptin-lyl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, oba isomery

e) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(l-ethoxy-5-ethyl-5-hydroxy-2-heptin-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, oba 22-isomery

f) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(5-ethyl-5-hydroxy-hepta-l(E), 3(E) -dien-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

g) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-/3-(2-hydroxy-2-propyl)-fenoxymethyl/-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

h) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-/(3-ethyl-3-hydroxy-6-hexyl)-oxymethyl/-9,10-sekopregna-5 (Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen

i) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20-(1,5-dihydroxy-5-ethyl-l-heptyl) -9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10 (19),17(20) (Z)-tetraen, oba 22-isomery • 0 0 0 0 ·

00 ♦· • · ·

0 000

999· ··

00 000

j) 1(S), 3(R)-Dihydroxy-20-(3-cyklopropyl-3-hydroxy-prop-l(E)-en-l-yl)-9,10-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen
4. Způsob přípravy sloučeniny vzorce I podle nároku 1 vyznačující se t í m , ž e se

a) boční řetězec napojený na C-20 (nebo jeho alkoholová chráněná forma) ve sloučenině I se vypracuje z

1(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraenu, nebo z 1(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraenu, nebo jejich odpovídajících 5(Z) isomerů, buď (i) reakcí s lithnou solí stavebního bloku bočního řetězce HC^C (CH₂)_nCR₂-OPG , kde PG je chránící skupina, a kde n je 0, 1 nebo 2, R je methyl nebo ethyl a PG je trimethylsilyl nebo tetrahydropyranyl, připravenou reakcí s butyllithiem, v rozpouštědle, nebo (ii) reakcí s Grignardovým činidlem

BrMg (CH₂) _nC (R) O-Si (CH₃) ₃, kde n .= 2, 3 nebo 4 a R = methyl nebo ethyl, v rozpouštědle, a

b) sloučenina z kroku a) výše se popřípadě oddělí z diastereoisomerů, (ii) podrobí se fotoisomerizaci senzitizovaného tripletu na 5(Z)isomer , (iii) alkyluje na 22-hydroxyskupině s Ci-Cjalkylbromidem nebo jodidem za přítomnosti báze a katalyzátoru přenosu fází, v rozpouštědle, a (iv) je desilylována.
5. Způsob přípravy sloučeniny vzorce I podle nároku 1 vyznačující se t í m , ž e se φφ Φ·Φ· • · φφφ φ φ φφ • φ φ φ φ ♦ φ φφφφ φφ φφ φφφ φφ

a) boční řetězec napojený na C-20 se vypracuje z

1(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraenu, nebo z jeho odpovídajícího 17(20)(E)-isomeru, reakcí s reakčním činidlem Wittigova typu (C₆H₅) ₃P=CH-CH=CH-COOR, jde R je methyl nebo ethyl, v rozpouštědle, a

b) sloučenina z kroku a) výše reaguje s organokovovým reakčním činidlem R^xLi, kde R¹ = methyl nebo ethyl, a následuje desilylace.
6. Způsob přípravy sloučeniny vzorce I podle nároku 1 vyznačující se t í m , ž e se boční řetězec napojený na C-20 ve sloučenině I se vypracuje z 1(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraenu, nebo z 1(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraenu, nebo jejich odpovídajících 5(Z) isomerů,

a) redukcí 20-CHO skupiny na odpovídající 20-CH₂OH skupinu, a buď

b) se alkyluje 20-CH₂OH skupina stavebního bloku bočního řetězce Hal-(CH₂) _n-CR₂-OSi (CH₃) ₃ , kde Hal je Cl, Br nebo I, n je 2, 3 nebo 4 a R je methyl nebo ethyl, za přítomnosti báze a katalyzátoru přenosu fází v rozpouštědle, nebo

c) se konvertuje hydroxyskupina z 20-CH₂OH sloučeniny z kroku

a) výše na odstupující skupinu, buď (i) na nižší alkanoat, jako je pivalat, reakcí s pivaloylchloridem, pyridinem a 4-dimethylaminopyridinem v dichlormethanu; přičemž nižší alkanoat reaguje s Grignardovým činidlem HalMg (CH₂) _nCR₂X, kde Hal je chlor, brom nebo jod, n je 1, 2, 3 nebo 4, R je methyl nebo ·· ·ο ·· ···· ·* ♦* • « · ♦·· 9 · 9 ·

9 Ο 99 9 9 999 9 9 9 ·

0 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 · • 9 9 9 9 9 9 9 9 9

099999 09 909 9 9 9 9 ethyl, a X je Η nebo OSi(CH₃)₃, za přítomnosti Li₂CuCl₄, v tetrahydrofuranu; a následuje, pokud X je OSi(CH₃)₃ , odstranění silylové skupiny vedlejšího řetězce částečnou desilylací s pyridinium p-toluensulfonatem v ethanolu, nebo (ii) na chlorid nebo bromid, reakcí s N-chlorsukcinimidem nebo N-bromsukcinimidem, a dimethylsulfidem v dichlormethanu; přičemž chlorid nebo bromid reaguje s 3-(2-hydroxy-2-propyl)fenolatem sodným v N,N-dimethylformamidu, a

d) sloučenina z kroku b) nebo c) výše se (i) podrobí tripletem sinzitizované fotoisomerizaci na 5 (Z)isomer, a (ii) je desilylována tetra-n-butylamoniumfluoridem.
7. Meziprodukt pro syntézu sloučenin vzorce I a jejich analogů, kterým je

a) 1(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, a odpovídající 5(Z)isomer,

b) 1(S), 3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(E)-tetraen, a odpovídající 5(Z) isomer,

c) l(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-hydroxymethyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19),17(20)(Z)-tetraen, a odpovídající 5(Z)isomer,

d) 1(S), 3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20-hydroxy-methyl-9,10-sekopregna-5(E),7 (E),10(19),17(20) (E)-tetraenu, a odpovídající 5(Z) isomer.
8. Farmaceutický prostředek -vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství jedné nebo více sloučenin podle nároků 1 až 3 spolu s farmaceuticky přijatelnými, netoxickými nosiči a/nebo pomocnými prostředky.
9. Farmaceutický prostředek podle nároku 8 vyznačující se * tím, že je ve formě jednotkové dávky obsahující od 0,1 ppm do

0,1 % hmotnostních sloučeniny vzorce I na dávkovou jednotku.
10. Způsob léčení a/nebo profylaxe nemocí charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferaci buněk, jako je např. psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatozy spojené s HIV, léčení zranění, rakovina, včetně rakoviny kůže, a nemoci nebo nevyváženost imunitního systému, jako jsou reakce hostitel versus štěp a štěp versus hostitel a odmítnutí transplantátu, a poruchy autoimunity, jako je diskoidní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatozy autoimunního typu, jako je sklerodermie a pemfigus prostý, a zánětlivá onemocnění, jako je revmatická artritida, stejně jako řada dalších chorobných stavů včetně hyperparatyreodismu, zejména sekundární hyperparatyreodismus spojený se selháním činnosti ledvin, . kognitivní poruchy nebo senilní demence (Alzheimerova nemoc) a jiné neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, » holohlavost, kožní atrofie, jako kožní atrofie vyvolaná steroidy, stárnutí kůže, včetně fotostárnutí, a jejich použití k podporování osteogenese a léčení / prevenci osteoporosy a osteomalacie, sestávající z podávání pacientovi, který to potřebuje, farmaceutického prostředku podle nároku 8.
11. Použití sloučeniny podle některého z nároků 1 až 3 pro *· ···· • · • ··· • · »· ·» • « · · • ··· 9

9 9 9 9 9

9999 99 99 výrobu léčiva pro léčení a/nebo proxylaxi nemocí charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferací buněk, jako je např. psoriáza a jiné poruchy keratinizace, dermatozy spojené s HIV, léčení zranění, rakovina, včetně rakoviny kůže, a nemoci nebo nevyváženost imunitního systému, jako jsou reakce hostitel versus štěp a štěp versus hostitel a odmítnutí transplantátu, a poruchy autoimunity, jako je diskoldní a systémový lupus erythematodes, diabetes mellitus a chronické dermatozy autoimunního typu, jako je sklerodermie a pemfigus prostý, a zánětlivá onemocnění, jako je revmatická artritida, stejně jako řada dalších chorobných stavů včetně hyperparatyreodismu, zejména sekundární hyperparatyreodismus spojený se selháním činnosti ledvin, kognitivní poruchy nebo senilní demence (Alzheimerova nemoc) a jiné neurodegenerativní nemoci, hypertenze, akné, holohlavost, kožní atrofie, jako kožní atrofie vyvolaná steroidy, stárnutí kůže, včetně fotostárnutí, a jejich použití k podporování osteogenese a léčení / prevenci osteoporosy a osteomalacie.