CZ291994B6

CZ291994B6 - Farmaceutická kompozice k léčení účinku vlivu HIV na centrální nervový systém

Info

Publication number: CZ291994B6
Application number: CZ19981708A
Authority: CZ
Inventors: Pravin Ramsewak Chaturvedi
Original assignee: Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Priority date: 1995-12-05
Filing date: 1996-12-05
Publication date: 2003-07-16
Also published as: CA2238471A1; AU1148697A; BR9611861A; NO982556D0; NO317837B1; NZ324603A; NO982556L; HUP9903673A3; ES2231828T3; AP864A; KR19990071750A; US5646180A; EP0866696A1; JP2000501713A; ATE279922T1; CZ170898A3; HUP9903673A2; OA10691A; WO1997020554A1; PL187747B1

Abstract

Popisuje se farmaceutick kompozice pou iteln pro l en · ink HIV na centr ln nervov² syst m (CNS), zejm na demence spojen s AIDS.\

Description

Vynález se týká použití farmaceutického kompozice vhodné pro léčení účinků HIV na centrální nervový systém (CNS), zejména demence spojené s AIDS.

Dosavadní stav techniky

Lidský virus způsobující ztrátu imunity („HIV“) je příčinou syndromu získané ztráty imunity („AIDS“, což je choroba vyznačující se zničením imunitního systému, zejména CD4⁺ T-buněk, která je doprovázená choulostivostí na přizpůsobivé infekce) a jeho prekurzor s AIDS spojený komplex („ARC“) je syndrom vyznačující se symptomy jako je trvalá obecná lymfadenopatie, horečka a ztráta hmotnosti.

Stejně jako u některých dalších retrovirů, kóduje HTV produkci proteázy, která provádí posttranslační štěpení prekurzorových polypeptidů v procesu nezbytném pro tvorbu infekčních virionu (S. Crawford a další, „A Deletion Mutation in the 5' Part of the pol Gene of Moloney Murin Leukemia Virus Blocks Proteolytic Processing of the gag and pol Polyproteins“, J. Virol. 53, strana 899 (1985)). Tyto genové produkty obsahují pol, který kóduje virion-RNA-závislouDNA-poIymerázu (reverzní transkriptázu), endonukleázu, HTV proteázu a gag, který kóduje proteiny jádra virionu (H. Toh a další, „Close Structural Resemblance Between Putative Polymerase of a Drosofíla Transposable Genetic Element 17.6 a pol gene produkcí of Moloney Murin Leukemia Virus“, EMBO J. 4, strana 1267 (1985); L. H. Pearl a další, „A Structural Model for the Retroviral Proteases“, Nátuře, 329-351 (1987); M. D. Power a další, „Nucleotid Sequence of SRV-1, a Type D Simian Acquired Immune Deficiency Syndrome Retrovirus“, Science 231, strana 1567 (1986)).

S cílem působit na různá stadia replikačního cyklu viru HIV byla vytvořena řada syntetických antivirových činidel. Tato činidla obsahují látky, které blokují vazbu viru na CD4⁺ lymfocyty T (např. rozpustný CD4), a sloučeniny, které ruší virovou replikaci inhibicí virové reverzní transkriptázy (například didanosin a zidovudin (AZT)) a inhibují integraci virové DNA do buněčné DNA (M. S. Hirsh a R. T. D'Aquila, „Therapy for Human Immunodeficiency Virus Infection“, N. Eng. J. Med., 328, strana 1686 (1993)). Tyto látky, jejichž cílem jsou ranná stadia replikace viru, ale nebrání produkci infekčních virionů v chronicky infikovaných buňkách. Podávání některých těchto látek v účinném množství dále vedlo k buněčné toxicitě a nežádoucím vedlejším účinkům, jako je anémie a potlačení kostní dřeně.

Později se stalo cílem výzkumu antivirových léků vyrobit sloučeninu, která inhibuje tvorbu infekčních virionů rušením zpracování prekurzorů virových polyproteinů. Zpracování těchto proteinových prekurzorů vyžaduje působení virem kódovaných proteáz, které jsou nezbytné pro replikaci (Kohl, N. E. a další, „Active HTV Protease is Required for Viral Infectivity“ Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 85, strana 4686 (1988)). Antivirový potenciál inhibice HIV proteáz byl dokázán za použití peptidových inhibitorů. Tyto peptidové sloučeniny jsou ale typicky velké a složité molekuly, které mají tendenci vykazovat nízkou biologickou dostupnost a obecně nejsou vhodné pro perorální podávání. Proto existuje potřeba sloučenin, které by účinně inhibovaly působení virových proteáz, pro použití jako činidel pro prevenci a léčení chronických a akutních virových infekcí.

AIDS a další choroby spojené s HTV často působí na centrální nervový systém. Jedním takovým projevem je demence spojená s AIDS.

Nyní sice vzniká řada způsobů léčení HIV a s ním spojených chorob například AIDS a ARC, ale tyto způsoby mají jen malý nebo žádný účinek na poruchy centrálního nervového systému způsobené infekcí HTV.

Důvodem, že tyto způsoby léčení nejsou účinné proti poruchám centrálního nervového systému způsobených HIV je, že dosud používané farmaceutické prostředky nejsou schopné překročit bariéru mezi krví a nervovou tkání v množství dostatečném pro ovlivnění a zpomalení HIV infekce v centrálním nervovém systému.

Například při metodě AZT, což je nejznámější způsob léčení HIV, je distribuce mozek/krev pouze 0,3, a po 60 minutách se v mozkové tkáni nenachází žádný AZT. Ostatní HTV nukleosidy, ddC, DDI a d4T mají v centrálním nervovém systému distribuční profily ještě horší.

Ani inhibitory HIV proteáz nepronikají do centrálního nervového systému dostatečně. Například 15 Abbottova ABT 536 vykazuje velmi omezený průnik do centrálního nervového systému. Searlův inhibitor má distribuci mozek/krev od 0,2 do 0,3. Merckův L-535524 má distribuci téměř stejnou.

Proto mají současné způsoby léčení založené na HIV nukleosidech a proteázách nižší než 20 požadovanou účinnost proti působení HIV na centrální nervový systém.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje použití farmaceutické kompozice pro léčení vlivu HIV na centrální nervový systém, zejména demence spojené sAIDS. Farmaceutická kompozice v souladu s předkládaným vynálezem obsahuje inhibitor HTV proteázy obecného vzorce I

Sloučenina vzorce I je inhibitor HIV proteázy. Ale na rozdíl od jiných inhibitorů proteáz má distribuci mozek/krev větší než 1,0. To znamená, že je velmi účinná při překonávání bariéry krev/mozek. Ve skutečnosti je v mozku přítomna v přibližně stejné koncentraci jako v krvi. Sloučenina vzorce I má dále v mozku neočekávaně dlouhý poločas života. V důsledku obou těchto vlastností je sloučenina vzorce I neočekávaně účinná při léčení účinků HTV na centrální 35 nervový systém, zejména demence spojené s AIDS.

Sloučeninu vzorce I lze připravit z dostupných výchozích látek za použití některého ze známých syntetických postupů. Příklady takových syntéz jsou popsány v mezinárodní patentové přihlášce WO 94/05 639, která je zde uvedena jako odkaz.

Sulfonamidy vzorce I jsou obecně snadno dostupné z derivátů α-aminokyselin obecného vzorce P-N(G)-CH(D)-COOH, kde P je definováno jako THF-O-C(C)- nebo chránicí skupiny aminokyseliny, D je definováno jako benzylová skupina a G je atom vodíku nebo benzylová

-2CZ 291994 B6 skupina. Vhodné chránící skupiny aminokyselin jsou popsány v řadě prací, například T. W. Greene a P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, John Wiley a synové (1991). Příklady chránících skupin aminokyselin (které nejsou omezující) jsou Boc, Cbz nebo Alloc, nebo může být amin alternativně chráněn jako alkylový derivát jako N,N-dibenzylová skupina nebo tritylová skupina. Tyto deriváty α-aminokyselin jsou často dostupné komerčně nebo je lze snadno připravit z komerčně dostupných derivátů α-aminokyselin za použití známých technik. Přestože předkládaný vynález uvádí jako výchozí látky racemické směsi, je výhodný izolovaný S enantiomer.

Za použití známých technik lze derivát α-aminokyseliny obecného vzorce P-N(G)-CH(D)COOH snadno převést na aminoketonderivát obecného vzorce P-N(G)-CH(D)-CO-CH2-X, kde X je odstupující skupina, která aktivuje α-uhlík (to je zvyšuje citlivost methylenové skupiny k nukleofilnímu ataku). Vhodné odstupující skupiny jsou v této oblasti techniky známé a zahrnují halogenidy a sulfonáty jako methansulfonát, trifluormethansulfonát nebo 4-toluensulfonát. Skupina X může být také hydroxylová skupina, která se in šitu převede na odstupující skupinu (například reakcí s trialkylfosfinem nebo triarylfosfinem v přítomnosti dialkylazodikarboxylátu). Způsoby přípravy těchto aminoketonderivátů jsou odborníkům rovněž známé (viz. například S. J. Fittkau, J. Prakt. Chem. 315, strana 1037 (1973)). Alternativně jsou některé aminoketonderiváty komerčně dostupné (například od firmy Bachem Biosciences, lne., Filadelfie, Pensylvánie).

Aminoketonderivát lze pak redukovat na odpovídající aminoalkohol vzorce P-N(G)-CH(D)-CH(OHý-Clty-X-. Alternativně lze aminoketonderivát redukovat později. Odborníkům je známá řada metod redukce aminoketonderivátů P-N(G)-CH(D)-CO-CH2-X (Larock, R. C. „Comprehensive Organic Transformations“, strana 527-547, VCH Publishers, lne. 1989 a odkazy tam uvedené). Výhodné redukční činidlo je natriumborohydrid. Redukční reakce se provádí při teplotě -40 °C až 40 °C (s výhodou -10 °C až 20 °C) ve vhodném rozpouštědle jako je například vodný nebo čistý tetrahydrofuran nebo nižší alkohol jako methanol nebo ethanol. Ačkoli předkládaný vynález zahrnuje stereospecifické a nesterospecifické redukce aminoketonderivátu P-N(G)-CH(D)-CO-CH2-X, je výhodná stereoselektivní redukce. Stereoselektivní redukce lze provést za použití v této oblasti techniky známých chirálních činidel. V souladu s předkládaným vynálezem lze stereoselektivní redukci provést například za nechelatujících redukčních podmínek, kdy se chirální indukce nově vzniklé hydroxylové skupiny dosáhne stereochemii skupiny D (to je Felkin-Ahnova adice hydridu). Zejména výhodná je stereoselektivní redukce, kdy je výsledná hydroxylová skupina ke skupině D v postavení syn. Zjistili jsme, že pokud je hydroxylová skupina ke skupině D v postavení syn, výsledný sulfonamidový produkt je inhibitor HIV proteázy s vyšší účinností než anti diastereomer.

Hydroxylová skupina aminoalkoholu může být případně chráněna jakoukoliv známou skupinou chránící kyslíkový atom, jako je trialkylsilylová skupina, benzylová skupina nebo alkyloxymethylová skupina, za získání chráněného aminoalkoholu vzorce P-N(G)-CH(D)-C(OR⁷)-CH2X, kde R⁷ je atom vodíku nebo jiná vhodná skupina chránící hydroxylovou skupinu. Některé vhodné chránící skupiny jsou popsány v knize T. W. Greene a P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, John Wiley a synové (1991).

Tento chráněný aminoalkohol se pak může nechat reagovat s nukleofilní aminosloučeninou za vzniku intermediátu vzorce III:

D

OR

-3CZ 291994 B6 kde skupina P je definována jako THF-O-C(O)- nebo aminokyselinová chránící skupina, skupina D je benzylová skupina, skupina R⁷ je popsána výše a skupina L je buď izobutylová skupina nebo atom vodíku.

Alternativně může reagovat vhodně chráněný a aktivovaný derivát aminokyseliny s nukleofilní nitrosloučeninou (například nitromethanovým aniontem nebo jeho derivátem), kterou lze po spojení redukovat za získání intermediátu vzorce III.

V zejména výhodném syntetickém postupu se provede současná aktivace methylenové skupiny a chránění alkoholu přípravou N-chráněného aminoepoxidu (z kyslíku a jeho přilehlé methylenové skupiny) za získání intermediátu vzorce II:

P-N(G)-CH(D)—CH-CHj

O (Π) kde skupiny P, D a G jsou definovány výše. Vhodná rozpouštědla pro přípravu N-chráněného aminoepoxidu zahrnují bezvodá nebo vodná organická rozpouštědla jako ethanol, methanol, izopropanol, tetrahydrofuran, dioxan, dimethylformamid a podobně (včetně jejich směsi). Vhodné báze pro přípravu epoxidu jsou hydroxidy alkalických kovů, t-butoxid draselný, DBU a podobně. Výhodná báze je hydroxid draselný.

Sloučenina vzorce I se s výhodou připraví syntézou N-chráněného aminoepoxidu, a to reakcí dianiontu derivátu kyseliny octové, obsahujícího na α-uhlíku potenciální odstupující skupinu, s cyklickým N-karboxyanhydridem chráněné α-aminokyseliny (jako je BOC-Phe-NCA dostupný zpropeptidu) nebo jinak vhodně chráněným a aktivovaným derivátem aminokyseliny. Tento způsob zahrnuje použití halogenoctových kyselin nebo obecné heteroatomem substituovaných octových kyselin, kde lze heteroatom převést na odstupující skupinu. Výhodný dianion octové kyseliny je dianion methylthiooctové kyseliny. Vzniklý aminoketon lze pak redukovat (například natriumborohydridem). V případě, že je nukleofilem dianion methylthiooctové kyseliny, se vzniklý aminoalkohol snadno převede na aminoepoxid alkylací (například methyljodidem) následovanou uzavřením kruhu (například za použití hydridu sodného).

Reakce N-chráněného aminoepoxidu (nebo jiného vhodně aktivovaného intermediátu) s aminem se provádí v substanci, to je bez rozpouštědla, nebo v přítomnosti polárního rozpouštědla jako je nižší alkanol, voda, dimethylformamid nebo dimethylsulfoxid. Reakci lze pohodlně provádět při teplotě -30 °C až 120 °C, s výhodou -5 °C až 100 °C. Alternativně lze reakci provést v přítomnosti aktivačního činidla jako je aktivovaná alumina v inertním rozpouštědle, s výhodou v etheru jako je diethylether, tetrahydrofuran, dioxan nebo t-butylmethylether, obyčejně při teplotě místnosti až 110°C, jak je popsáno vPosner a Rogers, J. Am. Chem. Soc., 99, strana 8208 (1977)). Další aktivační činidla zahrnují nižší trialkylaluminiové sloučeniny jako triethylaluminium nebo dialkylaluminiumhalogenidy jako diethylaluminiumchlorid (Overman a Flippin, Tetrahedron Letters, strana 195 (1981)). Reakce těchto sloučenin se obyčejně provádí v inertních rozpouštědlech jako je dichlormethan, 1,2-dichlorethan, toluen nebo acetonitril při teplotě 0 °C až 100 °C. Další způsoby výměny odstupujících skupin nebo otevření epoxidů aminy nebo jejich ekvivalenty jako azidy nebo dimethylsilylkyanidy (Gassman a Guggenheim, J. Am. Chem. Soc. 104, strana 5849 (1962)) jsou známé a odborníkům v této oblasti zřejmé.

Sloučeniny vzorce II a III a jejich funkčně chráněné deriváty jsou vhodné jako intermediáty pro přípravu sloučeniny vzorce I. Pokud je skupina L izobutylová skupina, lze sloučeninu vzorce III převést na sloučeninu vzorce I reakcí se sulfonyl-aktivovanou sloučeninou za vzniku sulfonamidu. Způsoby přípravy takových sulfonyl-aktivovaných sloučenin jsou v této oblasti techniky dobře známé. Pro přípravu sulfonamidů se typicky používají sulfonylhalogenidy. Rada

-4CZ 291994 B6 sulfonylhalogenidů je komerčně dostupná; ostatní lze snadno získat za použití běžných syntetických technik (Gilbert E. E., „Recent Developments in Preparative Sulfonation a Sulfation“ Synthesis 1969: 3 (1969) a tam uvedené odkazy; Hoffman R. V. „M-Trifluormethylbenzenesulfonyl Chlorid“ Org. Synth. Coli. Vol. VII, John Wiley a synové (1990); Hartman G. D. „4-Substituted Thiofene- and Furan-2-sulfonamides as Topical Carbonic Anhydrase Inhibitors“, J. Med. Chem., 35, strana 3822 (1992) a tam uvedené odkazy.

V případě sloučenin vzorce III, kde skupina L je atom vodíku, lze známými technikami provést přeměnu vzniklého primárního aminu na sekundární amin. Tyto techniky zahrnují reakci s alkylhalogenidem nebo alkylsulfonátem nebo reduktivní alkylací aldehydem za použití například katalytické hydrogenace nebo natriumkyanoborhydridu (Borch a další, J. Am. Chem, Soc., 93, strana 2897 (1971)). Alternativně lze primární amin acylovat a pak redukovat boranem nebo jiným vhodným redukčním činidlem, jak je například popsáno v práci Cushman a další, J. Org. Chem., 56, str. 4161 (1991). Tato technika je zejména vhodná u sloučenin vzorce III, kde skupina P reprezentuje chránící skupinu jako t-butoxykarbonyl (Boc) nebo benzyloxykarbonylovou skupinu (Cbz) a skupina G je atom vodíku, nebo pokud jsou obě skupiny P a G benzylové skupiny.

D D'

I I

P-N(G)-CH—CH-CHj-N—SOp-E

OR⁶ (IV)

Pokud proměnné P a G u sloučeniny vzorce IV reprezentují odstranitelné chránící skupiny, poskytne s výhodou odstranění jedné nebo obou chránících skupin a následná reakce vzniklého aminu s vhodně aktivovaným činidlem odlišnou sloučeninu vzorce IV. Například reakcí s chlorkarbonáty nebo karbonáty esterifíkovanými odstupujícími skupinami jako je 1-hydroxybenzotriazol (HOBT) nebo HOSU nebo 4-nitrofenol (protonované sloučeniny) lze získat karbamáty. Příkladem takového karbonátu je N-sukcinimidyl-(3S)-tetrahydrofuran-3-ylkarbonát. Je zřejmé, že za účelem usnadnění specifických reakcí může být žádoucí chránění jedné nebo několika potenciálně reaktivních skupin následované postupným odstraněním chránících skupin. Taková modifikace reakčního schématu uvedeného výše je v rámci běžných znalostí stavu techniky.

Odborníkům v této oblasti je zřejmé, že výše uvedená syntetická schémata nezahrnují vyčerpávající seznam všech prostředků, kteiými lze sloučeniny popsané a nárokované v této přihlášce syntetizovat. Odborníkům v této oblasti jsou další metody zřejmé.

Sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem lze modifikovat připojením vhodných funkčních skupin pro zlepšení selektivních biologických vlastností. Tyto modifikace jsou v tomto oboru známé a zahrnují ty, které zlepšují průnik do daného biologického prostředí (například krve, lymfatického systému, centrálního nervového systému), zvyšují perorální přípustnost, zvyšují rozpustnost důležitou pro podávání v injekcích, upravují metabolismus a rychlost vylučování.

Sloučenina v souladu s předkládaným vynálezem je vynikající ligand pro aspartylproteázy, zejména HIV-1 a HIV-2 proteázy. Proto je tato sloučenina schopná zasáhnout a inhibovat pozdní stadium replikace HIV, to je zpracování virových polyproteinů HIV kódovanými proteázami. Sloučenina inhibuje proteolytické zpracování prekurzorů virových polyproteinů inhibicí aspartylproteázy. Protože je aspartylproteáza esenciální pro produkci zralých virionů, inhibice tohoto zpracování účinně blokuje šíření viru inhibicí produkce infekčních virionů, zejména v chronicky infikovaných buňkách. Sloučenina v souladu s předkládaným vynálezem s výhodou

-5CZ 291994 B6 inhibuje schopnost HIV-1 viru infikovat přeživší lidské T-buňky po dobu řádově dnů, což bylo dokázáno testováním extracelulámího p24 antigenu, což je specifický indikátor replikace viru.

Účinnost této sloučeniny potvrdily i další antivirové testy.

Sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem lze použít způsobem běžným proti virům jako jsou HIV a HTLV, které jsou v rámci svého životního cyklu zcela závislé na aspartylproteázách. Tyto metody léčení, dávkování a požadavky může odborník v této oblasti zvolit podle známých metod a technik. Sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem lze například kombinovat s farmaceuticky přijatelnou látkou usnadňující podávání pacientům s virovou infekcí 10 farmaceuticky vhodným způsobem v množství účinném proti virové infekci nebo pro zmírnění patologických účinků spojených s HTV infekcí.

Alternativně lze sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem použít pro profylaxi a ochranu jedince proti virové infekci ve specifických případech, jako je narození dítěte nebo delší časová 15 perioda. Sloučeninu lze profylakticky použít samostatně nebo spolu s dalším antiretrovirovým činidlem pro zlepšení účinnosti každého činidla. Jako takové můžou být nové proteázové inhibitory v souladu s předkládaným vynálezem podávány jako činidla pro léčení nebo prevenci HIV infekce u savců.

Sloučenina vzorce I se po perorálním podání snadno vstřebává do krve savců. Sloučenina vzorce I s molámí hmotností menší než 600 g/mol a rozpustností ve vodě větší nebo rovnou 0,1 mg/ml je vhodná pro perorální podávání. Tato překvapivě velká vhodnost pro perorální podávání tak poskytuje výbornou sloučeninu pro perorální léčení a preventivní dietu proti HIV infekci.

Kromě perorální biologické vhodnosti má sloučenina v souladu s předkládaným vynálezem velmi vysoký terapeutický index, který definuje poměr toxicity ku antivirové účinnosti. Proto je sloučenina v souladu s předkládaným vynálezem účinná při nižších dávkách než řada dříve popsaných běžných antiretrovirových činidel a postrádá řadu silných toxických účinků spojených s těmito látky. Možnost podávat tuto sloučeninu v dávkách značně převyšujících její antivirově 30 účinnou dávku je výhodná při zpomalování nebo prevenci možnosti vývoje odolných variant.

Sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem lze podávat zdravým pacientům nebo pacientům infikovaných HIV samostatně nebo v kombinaci s dalšími antivirovými činidly, která narušují replikační cyklus HIV. Podáváním sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem 35 s dalšími antivirovými činidly, která zasahují různá stadia životního cyklu viru, se terapeutický účinek těchto sloučenin zesiluje. Spolu podávaným antivirovým činidlem může například být látka, která zasahuje časná stadia životního cyklu viru, jako je vstup do buňky, reverzní transkripce a integrace virové DNA do buněčné DNA. Anti-HTV činidla zasahující tato časná stadia životního cyklu zahrnují didanosin (ddl), dideoxycytidin (ddC), d4T, zidovudin (AZT), 40 lamivudin (3TC), 935U83, 1592U89, 524W91, polysulfatované polysacharidy, sT4 (rozpustný

CD4), ganiclovir, fosfonoformát trisodný, eflomithin, ribavirin, acyklovir, alfa interferon a trimenotrexat. Pro zesílení účinku sloučenin v souladu s předkládaným vynálezem lze dále použít nenukleosidové inhibitory reverzní transkriptázy jako TIBO, delavirdin (U90) nebo nevirapin a dále virové inhibitoiy tvorby povlaku, inhibitory trans-aktivujících proteinů jako 45 tat nebo rev nebo inhibitory virové integrázy.

Kombinační látky v souladu s předkládaným vynálezem využívají při inhibici replikace HIV aditivní nebo synergický účinek, protože každá složka směsi působí na jiné místo replikace HIV. Použití takové kombinační terapie také s výhodou redukuje v porovnání s podáváním činidla při 50 monoterapii dávku daného konvenčního antiretrovirového činidla, což je žádoucí pro požadovaný terapeutický nebo profylaktický účinek. Tyto kombinace mohou redukovat nebo eliminovat vedlejší účinky konvenčních jednoduchých antiretrovirových činidel, ale přitom nenarušují antiretrovirovou aktivitu těchto činidel. Tyto kombinace také redukují potenciál odolnosti kjednoduchým činidlům a zároveň minimalizují jejich související toxicitu. Tyto kombinace 55 mohou také zvýšit účinnost běžných činidel bez zvýšení související toxicity. Zejména jsme

-6CZ 291994 B6 objevily, že v kombinaci s dalšími anti-HIV činidly působí sloučenina v souladu s předkládaným vynálezem aditivně nebo synergicky při prevenci replikace HIV v lidských buňkách T. Výhodné kombinační terapie zahrnují podávání sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem s AZT, ddl, ddC, d4T, 3TC, 93SUB3,1592U89, 524W91 nebo jejich kombinací.

Alternativně lze sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem podávat společně s dalšími inhibitory HIV proteáz jako je sachinavir (Ro 31-8959, Roche), L-735,524 (Měrek), ABT 538 (A-80538, Abbott), AG 1341 (Agouron), XM413 (DuPont Měrek), XM 450 (DuPont Měrek), BMS 186318 (BristOl-Meyers Squibb) a CPG 53,437 (Ciba Geigy) nebo proformami těchto nebo odvozených sloučenin pro zvýšení účinnosti léčení nebo profylaxe různých mutací virů nebo členů HIV kvazi druhů.

Navrhujeme podávání sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem samostatně nebo v kombinaci s inhibitory retrovirové reverzní transkriptázy, jako jsou deriváty AZT nebo další inhibitory HIV aspartylproteázy, včetně vícesložkových kombinací.obsahujících 3 až 5 činidel. Podle nás společné podávání sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem s inhibitory retrovirové reverzní transkriptázy nebo inhibitoiy HIV aspartylproteázy může znamenat zásadní aditivní nebo synergický účinek, a tak působit při prevenci, zásadní redukci nebo úplné eliminaci virové replikace nebo infekce (nebo obou) a s nimi spojených symptomů.

Sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem lze také podávat v kombinaci s imunomodulátory a imunostimulátory (například bropirimin, protilátka lidského alfa-interferonu, IL-2, GM-CSF, interfemon alfa, diethyldithiokarbamát, faktor nekrózy nádoru, naltrexon, tuscarasol a ŘEPO); a antibiotiky (například pentamidin-isethikrát) za účelem prevenci nebo boje s infekcí a chorobami spojenými s HTV infekcí jako je AIDS a ARC.

Při podávání sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem při kombinační léčbě s dalšími činidly mohou být tato podávána pacientům jako po sobě následující nebo současně. Alternativně mohou farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem obsahovat kombinaci inhibitoru aspartylproteázy v souladu s předkládaným vynálezem a dalšího terapeutického nebo profylaktického činidla.

Přestože je tento vynález zaměřen na použití zde uvedených sloučenin pro prevenci a léčení HIV infekce, sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem lze použít i jako inhibiční činidlo pro další viry, které jsou v esenciálních stadiích životního cyklu závislé na podobných aspartylproteázách. Tyto viry zahrnují další choroby podobné AIDS způsobené retroviry jako opičí virus ztráty imunity, HTLV-I a HTLV-II. Sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem lze dále použít pro inhibici dalších aspartylproteáz a zejména dalších lidských aspartylproteáz zahrnujících reninproteázy a aspartylproteázy, které zpracovávají endothelinové prekurzory.

Prostředky v souladu s předkládaným vynálezem se typicky berou perorálně a obsahují množství sloučeniny vzorce I, které je účinné při inhibici replikace HIV, a to inhibici jeho (HIV) proteázy v centrálním nervovém systému.

Sloučenina vzorce I se používá ve způsobu a prostředku v souladu s předkládaným vynálezem v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem. Typicky se také používá v kombinaci s dalšími léčbami AIDS, zejména AZT a 3TC.

Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem obsahují sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem, její farmaceuticky vhodné soli s jakýmkoliv farmaceuticky vhodným nosičem, adjuvantem nebo přísadou. Farmaceuticky vhodné nosiče, adjuvanty a přísady, které lze použít ve farmaceutických prostředcích v souladu s předkládaným vynálezem jsou (ale nejsou omezeny na) iontové měniče, alumina, stearát hlinitý, lecitin, samoemulgující systémy pro distribuci léčiv (SEDDS) jako da-tokoferolpolyethyleneglykol 1000 sukcinát, sérové proteiny jako albumin lidského séra, pufrující látky jako fosforečnany, glycin, kyselina sorbová, sorbát

-7 CZ 291994 B6 draselný, parciální glyceridové směsi nasycených rostlinných mastných kyselin, voda, soli nebo elektrolyty jako prolaminsulfát, hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidní křemelina, křemiěitan hořečnatý, polyvinylpyrrolidon, látky na bázi celulózy, polyethylenglykol, karboxymethylcelulóza sodná, polyakryláty, vosky, poly5 ethylenpolyoxypropylenové polymery, polyethylenglykol a lanolín.

Pro zlepšení distribuce sloučeniny vzorce I lze s výhodou použít také cyklodextriny jako α-, β-, a γ-cyklodextrin nebo jejich chemicky modifikované deriváty jako hydroxyalkylcyklodextriny zahrnující 2- a 3-hydroxypropyl-[3-cyklodextriny nebo další solubilizované deriváty.

Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem lze podávat perorálně, parenterálně, v inhalačním spreji, topicky, rektálně, nasálně, bukálně, vaginálně nebo přes implantát. Výhodné je perorální podávání nebo podávání injekcemi. Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem mohou obsahovat všechny běžné netoxické farmaceuticky 15 vhodné nosiče, adjuvanty nebo přísady. V některých případech lze pH prostředku upravit farmaceuticky vhodnými kyselinami, zásadami nebo pufry pro zvýšení stability sloučeniny v prostředku nebo její lékové formě. Zde použitý termín parenterální znamená injekce nebo infuze podávané podkožně, do kůže, intravenózně, intramuskulámě, do kloubů, intrasynoviálně, intrastemálně, intrathékálně, do rány a do lebky.

Farmaceutické prostředky mohou být ve formě sterilního injektovatelného prostředku například jako sterilní injektovatelná vodná nebo olejová suspenze. Takovou suspenzi lze připravit podle technik známých v této oblasti za použití vhodných dispergujících nebo zvlhčujících činidel (jako například Tween 80) a suspendujících činidel. Sterilní injektovatelné prostředky mohou být také 25 sterilní injektovatelné roztoky nebo suspenze v netoxickém parenterálně vhodném ředidle nebo rozpouštědle, například jako roztok v 1,3-butandiolu. Mezi vhodnými přísadami a rozpouštědly, která mohou být použita jsou mannitol, voda, Ringerův roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Jako rozpouštědlo nebo médium suspenze se běžně používají sterilní husté oleje. Pro tento účel lze použít jakýkoliv nedráždivý olej včetně syntetických monoglyceridů nebo 30 diglyceridů. V prostředcích pro injekce jsou vhodné mastné kyseliny jako kyselina olejová a její glyceridové deriváty, což jsou přírodní farmaceuticky přijatelné oleje jako olivový a ricinový olej zejména ve své polyoxyethylované verzi. Tyto olejové roztoky nebo suspenze mohou také obsahovat jako ředidlo alkoholy s dlouhým řetězcem nebo disperguj ící látky jako Ph. Helv. nebo podobné alkoholy.

Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem lze podávat perorálně ve všech perorálně vhodných lékových formách zahrnujících (ale neomezených na) kapsle, tablety a vodné suspenze a roztoky. V případě tablet pro perorální použití se běžně používají nosiče jako laktóza a kukuřičný škrob. Typicky se přidávají i lubrikační činidla jako stearát hořečnatý. Pro perorální 40 podávání ve formě kapslí jsou vhodná ředidla laktóza a sušený kukuřičný škrob. Pokud se perorálně podávají vodné suspenze, je aktivní složka kombinována s emulgujícími a suspendujícími činidly. V případě potřeby lze přidat určitá sladidla a/nebo příchuti a/nebo barviva.

Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem lze podávat také ve formě čípků 45 pro rektální podávání. Takové prostředky lze připravit smícháním sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem a vhodného nedráždivého excipientu, který je při teplotě místnosti pevný, ale při rektální teplotě tekutý, a proto v rektu taje za uvolnění aktivních složek. Takové látky zahrnují (ale nejsou omezeny na) kakaové máslo, včelí vosk a polyethylenglykoly.

Pokud požadovaná léčba má být směrována na místa nebo orgány snadno dostupné topickou aplikací, je zejména výhodné podávat farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem topicky. Pro topickou aplikaci na kůži se připraví farmaceutický prostředek s vhodnou mastností, který obsahuje aktivní složku suspendovanou nebo rozpuštěnou v nosiči. Nosiče pro topické podávání sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem zahrnují (ale nejsou omezeny 55 na) minerální olej, tekutou vazelínu, bílou vazelínu, propylenglykol, polyoxyethylenpolyoxy-8CZ 291994 B6 propylenové sloučeniny, emulgující vosk a vodu. Alternativně lze připravit farmaceutický prostředek jako vhodné pleťové mléko nebo krém obsahující aktivní sloučeninu suspendovanou nebo rozpuštěnou v nosiči. Vhodné nosiče zahrnují (ale nejsou omezeny na) minerální olej, sorbitan-monostearát, polysorbát 60, cetylové estery vosku, cetearylalkohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol a vodu. Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem lze také topicky aplikovat do spodního intestinálního traktu, a to rektálními čípky nebo ve vhodném klystýrovém prostředku. Předkládaný vynález zahrnuje i topické transdermální náplasti.

Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem lze podávat jako nosní aerosol nebo inhalační látku. Takové prostředky se připraví technikami v oblasti farmaceutických prostředků dobře známými a mohou být připraveny jako roztoky v šalinu za použití benzylalkoholu nebo dalších vhodných konzervačních látek, promotorů absorpce pro zvýšení biologické dostupnosti, fluoruhlovodíků a/nebo jiných solubilizujících nebo dispergujících činidel, která jsou odborníkům známá.

Při prevenci a léčení virových infekcí včetně HIV infekce jsou vhodné dávky 0,01 až 100 mg na kg tělesné hmotnosti a den, s výhodou 0,5 až 75 mg na kg tělesné hmotnosti a den aktivní složky. Farmaceutické prostředky v souladu s předkládaným vynálezem se typicky podávají jednou až pětkrát denně nebo alternativně jako kontinuální infúze. Takové podávání lze použít při chronické nebo akutní terapii. Množství aktivní složky, které lze kombinovat s nosiči za přípravy jednorázové dávky je závislé na léčené chorobě a zejména způsobu podávání. Typický prostředek obsahuje 5 % až 95 % hmotnostních aktivní sloučeniny. Tento prostředek s výhodou obsahuje 20 % až 80 % hmotnostních aktivní sloučeniny.

Po zlepšení stavu pacienta lze v případě potřeby podávat udržovací dávku sloučeniny, prostředku nebo kombinaci v souladu s předkládaným vynálezem. Následně lze dávku nebo frekvenci (nebo obojí) podávání redukovat, a to v závislosti na symptomech, až na úroveň, při které trvá zlepšený stav. Když byly symptomy zmírněny na požadovanou úroveň, léčení se zastaví. Pacienti ale mohou při opětovném výskytu symptomů choroby vyžadovat dlouhodobé občasné léčení.

Jak je odborníkům zřejmé, mohou být žádoucí i nižší nebo vyšší dávky, než jaké jsou uvedeny výše. U všech jednotlivých pacientů závisí specifická dávkovači a léčebná dieta na různých faktorech zahrnujících aktivitu použité specifické sloučeniny, věk, tělesnou hmotnost, celkový zdravotní stav, pohlaví, dietu, dobu podávání, iychlost vyměšování, kombinaci léků, závažnost a průběh infekce, dispozice pacienta k infekci a úsudek ošetřujícího lékaře.

Za účelem lepšího porozumění vynálezu jsou připojeny následující příklady, které jsou uvedeny pouze za účelem ilustrace ale v žádném případě vymezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Prekurzor A. Roztok 102 mg N-((2 syn, 3S)-2-hydroxy-4-fenyl-3-((S)-tetrahydrofúran-3-yloxykarbonylaminobutylaminu ve směsi CH₂Cl₂/nasycený vodný NaHCO₃ (4:1) se nechá postupně reagovat při teplotě místnosti v atmosféře dusíku s 65 mg p-nitrobenzensulfonylchloridu a 51 mg hydrogenuhličitanu sodného. Směs se míchá 14 hodin, zředí se dichlormethanem, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje se a zahustí ve vakuu. Zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu s eluentem 20% diethylether/dichlormethan za získání 124 mg uvedeného produktu jako bílé pevné látky. TLC: Rf = 0,36,20% diethylether/dichlormethan.

HPLC: Rt = 15,15 minuty. (’H)-NMR (CDC1₃) odpovídá struktuře.

-9CZ 291994 B6

Příklad 2

Sloučenina I. Roztok 124 mg látky získané v příkladu 1 v ethylacetátu se nechá reagovat při 5 teplotě místnosti s 13 mg 10% palladia na uhlí. Směs se 14 hodin míchá v atmosféře vodíku, zfiltruje se přes křemelinu a zahustí ve vakuu. Zbytek se podrobí preparativní HPLC za získání 82 mg uvedeného produktu jako bílé pevné látky. TLC: Rf = 0,10, 20% ether/dichlormethan.

HPLC: Rt = 13,16 minuty. ^Hj-NMR (CDC1₃) odpovídá struktuře.

Příklad 3

Tkáňová distribuce a studie rovnováhy/exkrece po orálním podání [^I4C]141W94 krysám Harlan 15 Sprague Dawley

Po orálním podání [¹⁴C]-VX-478 (141W94) krysám bylo zjištěno, že tato látka rychle proniká různými tkáněmi. Při analýze plochy pod křivkou (AUC) se ukázalo, že poměr radioaktivity v mozkových a mezenterických mízních uzlinách ku radioaktivitě v krvi je 1,62 a 10,76 (v tomto 20 pořadí). Úroveň radioaktivity v těchto tkáních se určila pomocí kapalinového scintilačního načítání po oxidaci na zařízení Packard 306 Tissue Oxidizer. Nebyly provedeny žádné korekce na příspěvek zbytkového objemu krve v tkáni k radioaktivitě.

Statistický souhrn distribuce radioaktivity v krvi, mozku a mezenterických mízních uzlinách po 25 orálním podání krysám Harlan Sprague Dawley (HSD) je uveden v tabulce 1.

Tabulka 1

Distribuce radioaktivity ve vybraných tkáních po orálním podávání [¹⁴C]141W94* krysám HSD v množství 50 mg/kg

Tkáň	Cmax (dpm/g)	Cmax (pg-eg/g)	AUC (pg.h/g)*‘
Krev	21,4±4,0	2,9±0,5	16,0
Mozek	18,3±16,2	2,5±2,2	25,9
Mezenterické mízní uzliny	516±862,0	69,7±117,0	172,0

Uvedené hladiny znamenají průměr ± směrod. odchylka pro 3 krysy (x 10 ³) ** Uvedené hladiny znamenají průměr (vyjádřený jako pg-ekvivalenty/g)

Průmyslová využitelnost

Předkládaný vynález poskytuje způsob a prostředek pro léčení vlivu HTV na centrální nervový systém, zejména demence spojené s AIDS.

Ačkoli jsme popsali řadu provedení tohoto vynálezu, je zřejmé, že náš základ lze pozměnit za získání dalších provedení, která využívají produkty a způsoby tohoto vynálezu. Proto je nutné mít 45 na vědomí, že rozsah tohoto vynálezu je definován připojenými nároky, přesněji než specifickými provedeními, která byla prezentována příklady.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použití sulfonamidu vzorce I, amprenaviru:

pro přípravu léčiva pro léčení savců trpících účinky viru, závislého v esenciálním bodě svého životního cyklu na aspartylproteáze, na centrální nervový systém.
2. Použití sulfonamidu vzorce I, amprenaviru:

pro přípravu léčiva pro inhibici produkce HIV infekčních virionů v centrálním nervovém systému savců.
3. Použití sulfonamidu vzorce I, amprenaviru:

pro přípravu léčiva pro inhibici enzymatické aktivity aspartylproteázy v centrálním nervovém systému savců.

-11 CL 291994 B6
4. Použití sulfonamidu vzorce I, amprenaviru:

pro přípravu léčiva pro redukci virové infekce v centrálním nervovém systému savců, kde uvedený virus v esenciálním bodě svého životního cyklu vyžaduje aspartylproteázu.
5. Použití podle kteréhokoliv nároku 1 až 4, kde uvedeným virem je HIV.
6. Použití podle nároku 5, kde uvedené léčivo dále obsahuje zidovudin, tedy AZT, lamivudin, tedy 3TC nebo obě tyto látky.

Konec dokumentu