CZ291190B6 - Kolagenový přípravek pro řízené uvolňování účinných látek, způsob jeho výroby a pouľití - Google Patents

Kolagenový přípravek pro řízené uvolňování účinných látek, způsob jeho výroby a pouľití Download PDF

Info

Publication number
CZ291190B6
CZ291190B6 CZ19963108A CZ310896A CZ291190B6 CZ 291190 B6 CZ291190 B6 CZ 291190B6 CZ 19963108 A CZ19963108 A CZ 19963108A CZ 310896 A CZ310896 A CZ 310896A CZ 291190 B6 CZ291190 B6 CZ 291190B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
collagen
preparation
release
molecular weight
insoluble
Prior art date
Application number
CZ19963108A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ310896A3 (en
Inventor
Michael Roreger
Original Assignee
Lts Lohmann Therapie-Systeme Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lts Lohmann Therapie-Systeme Gmbh filed Critical Lts Lohmann Therapie-Systeme Gmbh
Publication of CZ310896A3 publication Critical patent/CZ310896A3/cs
Publication of CZ291190B6 publication Critical patent/CZ291190B6/cs

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14Macromolecular materials
    • A61L27/22Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • A61L27/24Collagen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20Pills, tablets, discs, rods
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/22Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
    • A61L15/32Proteins, polypeptides; Degradation products or derivatives thereof, e.g. albumin, collagen, fibrin, gelatin
    • A61L15/325Collagen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61FFILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2310/00Prostheses classified in A61F2/28 or A61F2/30 - A61F2/44 being constructed from or coated with a particular material
    • A61F2310/00005The prosthesis being constructed from a particular material
    • A61F2310/00365Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/602Type of release, e.g. controlled, sustained, slow
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/80Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special chemical form
    • A61L2300/802Additives, excipients, e.g. cyclodextrins, fatty acids, surfactants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Je pops n kolagenov² p° pravek schopn² ° zen ho uvol ov n · inn²ch l tek v d sledku toho, e obsahuje sm si v kyselin nerozpustn²ch kolagen s rozd ln²m rozd len m molekul rn ch hmotnost , zp sob jeho v²roby a jeho pou it .\

Description

Oblast techniky
Vynález se týká kolagenového přípravku určeného pro řízené uvolňování farmakologicky nebo kosmeticky účinných látek, způsobu jeho výroby a jeho použití.
Dosavadní stav techniky
K přípravě forem podávání farmakologicky nebo kosmeticky účinných látek se používá celá řada polymerů, které mají každé příslušné formě podávání propůjčit vlastnosti žádané pro dané místo použití. Prostředky pro ošetření rány a implantabilní materiály je nutno přizpůsobit povrchu příslušného místa aplikace, a tělní buňky, jako jsou např. keratinocyty, fibroplasty a buňky endotelu, by neměly bránit jejich funkci a aktivitě. Spektrum použitelných polymerů se tudíž v těchto případech omezuje na takové, které vykazují ve styku s vazivem výtečnou kompatibilitu (snášenlivost), a obzvláště, které jsou biologicky odbouratelné.
Mezi polymery přicházejícími přitom v úvahu zaujímá již drahný čas zvláštní místo kolagen, hlavní protein vazivové tkáně, a to pro biologickou snášenlivost a odbouratelnost zněj vy robených forem podávání. Kolagenové preparáty se v převážné míře nasazují na pokrytí ran bez dalších přídavků. Ovšem nechyběly ani pokusy vložit do kolagenových matric v nejrůznější formě biologicky aktivní látky, a ovlivnit druhem, strukturou a složením matrice uvolnění takových látek, po němž zpravidla následuje rozpuštění a/nebo enzymatické odbourání kolagenové nosné matrice.
K přípravě kolagenových matric, popisovaných např. v patentech US 5 024 841, US 4 789 663, US 4 774 091, US 4 563 350, US 5 246 457 nebo EP 429 438, se zpravidla použijí roztoky v ky selině rozpustného kolagenu bez telopeptidů, a z těchto roztoků se s pomocí dialýzy, posunutím hodnoty pH nebo jiných postupů získají rekonstituované fibrily, které se zpracují potom přednostně na pórovité matrice s pomocí různých postupů. Tyto přípravky mohou sice vy kazovat výtečnou biokompatibilitu, protože se skládají z čistého kolagenu, mají však nevýhodu, že jen v omezené míře umožňují retardaci uvolňování účinné látky, což je podmíněno použitím rozpustného kolagenu.
Této retardace uvolňování je možno dosáhnout snížením rozpustnosti kolagenové matrice s použitím zesíťovacích a vázacích prostředků, popsaných např. v US 4 409 332, DE 2 843 963, WO 93/00890 nebo WO 85/04413, lakovacích prostředků popsaných vDE 38 41 397, nebo s použitím kombinace ve vodě rozpustného kolagenu s jinými polymery, přednostně s přírodními aniontovými polymery a jejich deriváty. V každém z popsaných případů je ovšem nutno v důsledku přidávání dalších komponent vzít v úvahu i další (dodatečná) toxikologická rizika, která nelze podcenit zejména při použití známých zesíťovacích prostředků pro kolagen.
Jiná možnost retardace uvolňování účinných látek je popsána v EP 518 697, při níž se vyrobí lamináty zvodorozpustného a/nebo vodonerozpustného kolagenu, které sestávající zvíce rezervních vrstev s obsahem účinné látky a z jedné vrstvy retardující uvolňování účinné látky. Takové lamináty by mohly ve srovnání s dříve jmenovanými preparáty umožnit retardaci uvolňování při minimálním toxikologickém riziku, mají však tu nevýhodu, že jsou extrémně náročné na výrobu, a že lpění vrstev na sobě lze dosáhnout pouze u „vlhkých“ filmů. Suché filmy, bezpodmínečně nutné vzhledem k náchylnosti účinných látek k rozkladu, nelze spojit na lamináty tohoto druhu.
Retardace uvolňování účinných látek nemusí být ovšem žádána v každém případě. V EP 224 453 je popsána kolagenová matrice sestávající z převážné části z vodonerozpustného retikulovaného
-1 CZ 291190 B6 kolagenu, a navíc obsahuje vodorozpustný neretikulovaný kolagen. V kosmetických přípravcích, jako jsou např. obličejové masky, funguje tento rozpustný kolagen jako aktivní látka, která se po aplikaci, v důsledku přirozené vlhkosti kůže nebo v důsledku extrémního zvlhčení přípravku vylouží a začne působit na kůži. Pro farmaceutické účely je možno do takového přípravku zapracovat účinné látky, které se po aplikaci spolu s rozpustným kolagenem velmi rychle z kolagenové matrice vylouží a uvolní. Takový kolagenový přípravek může pak být užitečný, jeli žádáno a účelné rychlé uvolňování.
Byly tedy popsány četné nejrůznější způsoby mechanismů retardování nebo urychlování uvolňování účinných látek. Avšak každý z těchto kolagenových přípravků nabízí podle stavu technik} na základě předem pevně daného složení pouze jedinou možnost ovlivnění uvolňování, a tím i jediný předem daný profil uvolňování, který je vždy přizpůsobený řešení jediného specifického problému, jednomu určitému principu terapie nebo jednomu určitému onemocnění. S žádným kolagenovým přípravkem podle stavu techniky nelze dosáhnout cíleného, a přitom mnohotvárného řízení uvolňování účinné látky, tj. variabilního a individuálního přizpůsobení kinetiky uvolňování účinných látek právě se vyskytujícím různým (odlišným) problémům, přičemž je nutno brát adekvátní ohled na faktory, jako jsou rozdílné vlastnosti účinných látek, jakož i rozdíly ve vstupu účinku a době účinku.
Podstata vynálezu
Úkolem předložené přihlášky vynálezu tudíž bylo najít takový kolagenový přípravek, který by byl nejen vhodný pro určitou účinnou látku, určitou kombinaci účinných látek nebo pro určitý profil uvolňování, nýbrž který by umožňoval v širokém rámci nejrúznějších použití bezpečné, a na příslušný problém orientované řízení uvolňování účinných látek.
Překvapivě bylo nalezeno řešení úkolu v kolagenovém přípravku k řízenému uvolňování účinných látek, který obsahuje směs v kyselině nerozpustných kolagenů s rozdílným rozdělením molekulárních hmotností.
Podrobný popis vynálezu
Jedno provedení předpokládá, že kolagenový přípravek obsahuje různé účinné látky. Může obsahovat dále i pomocné látky, jako jsou prostředky pro regulaci viskozity, pojivé prostředky, prostředky pro uchování vlhkosti, změkčovadla, urychlovače penetrace, konzervační prostředky, dezinfekční prostředky, regulátory pH, antioxidanty, stabilizátory účinných látek, oleje, tuky, vosky, stabilizátory emulzí, vonné látky, barviva a/nebo inertní plniva.
Jedno výhodné provedení předpokládá, že nerozpustný kolagen je bez telopeptidů, přírodní nezesítěný kolagen typu 1. Může jít přitom o nerozpustný kolagen, kteiý je produktem získaným alkalickým rozkladem z telecí kůže.
Dále kolagenový přípravek může být ve formě prášku, pudru, mikročástic, vláken, vloček, pěny, houby, jehliček, tyčinek, tablet, gelu (želé), krémů, včetně filmů nebo laminátů.
K. docílení žádané kinetiky uvolňování může kolagenový přípravek obsahovat také nejrůznější formy léčiv. Přednost je dávána bioadhezivnímu kolagenovému přípravku.
Postup výroby kolagenového přípravku může zahrnovat sušení rozstřikováním, mražením, povlékání nebo lité s následným sušením, postupy separace a koacervace fází, komprimování nebo plnění do nádob (schránek).
-2CZ 291190 B6
Podle postupu lze dále uvolňování účinných látek ovlivnit a/nebo řídit směsným poměrem v kyselině nerozpustných kolagenů s rozdílným rozdělením molekulárních hmotností. Dále podle použitého postupu lze uvolňování účinných látek řídit rozpouštěním nebo bobtnáním nebo erozí kolagenového přípravku. Další možností řízení uvolňování účinných látek je použití biologického odbourání kolagenového přípravku.
Použití kolagenového přípravku podle vynálezu spočívá v řízeném předání účinné látky do rány. Použití však může být také směrováno na řízené předání účinné látky na neporušenou kůži. A konečně může být kolagenový přípravek použit k implantování nebo injekčnímu vstřikování do živného organismu.
Kolagenové přípravky pro uvolňování účinných látek jsou podle stavu techniky zpravidla vyráběny z kolagenu rozpustného v kyselině, tj. z kolagenu, který se ve zředěných kyselinách i rozpustí při pH 2 na čirý roztok. Tento kolagen rozpustný ve zředěných kyselinách může být izolován nejrůznějšími postupy z celé řady tkání živočišného a rostlinného původu.
Naproti tomu v případě kolagenu použitého podle vynálezu se jedná o kolagen v kyselině nerozpustný, který (je-li ve vodné disperzi) nelze uvést do roztoku ani přídavkem koncentrované kyseliny octové. Tento nerozpustný kolagen je zejména nativní kolagen, který je v převážné části kolagenem typu I, a z menší části kolagenem typu III. Označení nativní kolagen se vztahuje na molekulu kolagenu s nezměněnou tripelhelikální (trihelikální) terciární strukturou.
Nerozpustný kolagen podle vynálezu je možno získat modifikací postupů popsaných např. v DE-OS 30 34 273, US 4 021 522 nebo DE-OS 27 16 602, a to alkalickým rozkladem biomateriálu různého původu. Jako výchozí materiál slouží přednostně kůže z telete starého 6 měsíců. Oproti obvykle používaným tkáním a částem těl hovězího dobytka, prasat a koní je tím zajištěno, že je k dispozici výchozí materiál definované stálé jakosti, což zase zajišťuje spolehlivou reprodukovatelnost jednotlivých kroků postupů, které jsou v dalším popsány a v příkladu 1 podrobně znázorněny. Telecí kůže se nej pive mechanicky zbaví chlupů a tuku. Potom se extrahují a odstraní (odhodí) rozpustné kolageny a nekolagenové rozpustné součásti vazivové tkáně. V dalším kroku se vazivová tkáň vyčiní nejprve vodným roztokem alkalického hydroxidu, s výhodou hydroxidu sodného, a alkalického sulfátu, s výhodou síranu sodného, a na to se působí vodným roztokem alkalického sulfátu kvyloučení kožního tuku a kříženému bobtnání kolagenových vláken. Při tom se odštěpí také koncové nehelikální části kolagenové molekuly, tak zvané telopeptidy, které jsou převážně odpovědné za antigenní vlastnosti xenogenních kolagenů. Dále působením roztoku alkalického hydroxidu/alk. sulfátu nebo čistého alkalického sulfátu se v závislosti na koncentraci a době působení roztoků odštěpí definovaná část intermolekulámích kolagenových vazeb z vláken nabobtnalé vazivové tkáně. Intramolekulámí vazby kolagenu nejsou narušeny, takže helikální struktura molekuly zůstává nedotčena. Rozložená vazivová tkáň se v několika stupních vodou a zředěnými kyselinami promyje, vyčistí a neutralizuje, načež se mechanicky rozmělní a disperguje ve vodě.
Rozhodujícím krokem pro izolování v kyselině nerozpustného kolagenu podle vynálezu, majícího různé (rozdílné) rozdělení molekulových hmotností, je cílené alkalické štěpení intermolekulámích vazeb kolagenu. Necháme-li např. působit vodný roztok 9,75% hydroxidu , sodného a 9,2% síranu sodného 48 hodin na nabobtnalou vazivovou tkáň, pak po dispergování ve vodě nerozpustný kolagen po vyhodnocení oproti chromatografu s kalibrovacím proteinem vykáže střední molekulární hmotnost asi 420 000 (s použitím kapalinové chromatografické analýzy: kolonový systém Biosil TSK-400 + Biosil TSK-125; eluent 0,5 m při amoniumacetátovém pufru s pH 6,7; detektor UV 275 mm, rozsah citlivosti s rozlišením 0,02). Vyčinímeli však naproti tomu nabobtnalou vazivovou tkáň pouze 12 hodin svodným roztokem pouze 5% hydroxidu sodného a 9,2% síranu sodného, pak se mezimolekulámích vazeb rozštěpí zřetelně méně, a po disperzi ve vodě získané molekulové agregáty vykáží při analýze střední molekulární hmotnost asi 2 500 000. Tyto rozdíly se projevují především na chování při tečení, a tím na zpracovatelnosti disperzí nerozpustných kolagenů. Zatím co disperze s 5 % nízkomolekulámího
-3CZ 291190 B6 nerozpustného kolagenu je vážkou, ale ještě volně tekoucí masou, u disperze vysokomolekulámího nerozpustného kolagenu je mez tečení při asi 2,5 %.
Tedy koncentrace a doba působení hydroxidu sodného jsou variabilní faktory rozkladného pochodu, jejichž měněním lze dosáhnout příslušných odlišných rozdělení molekulárních hmotností. Čím vyšší je koncentrace hydroxidu sodného a/nebo čím delší je doba jeho působení, tím menší je střední molekulární hmotnost izolovaného, v kyselině nerozpustného kolagenu, a naopak. Abychom si mohli znázornit souvislost mezi dosažitelnou molekulární hmotností a zmíněnými podmínkami rozkladu (např. ve tvaru křivky), musíme mít jeden faktor konstantní, tedy koncentraci nebo dobu působení, zatím co druhý budeme měnit. Toto je sice v podstatě možné, avšak z výrobních a provozně-technických hledisek málo účelné, protože např. volná variace doby působení není zpravidla možná. Při velmi dlouhé době působení a odpovídající nízké koncentraci hydroxidu by se např. prodloužila doba chodu strojů a nasazení personálu, což by nebylo přijatelné z hlediska provozních nákladů. Na druhé straně krátké doby působení, podmíněné nutným zvýšením koncentrace hydroxidu sodného, vedou ke zvýšenému opotřebení zařízení, jako např. systémů přívodů a filtrů, což rovněž nelze doporučit z důvodů stím spojeného zvýšení nákladů. Potřebnou dobu působení a koncentraci je nutno tudíž pro každý problém stanovit individuálně empiricky tak, aby představovala optimum jak z hlediska požadavků na formu léčiva, a zejména na kinetiku uvolňování účinných látek, tak i z ekonomických aspektů.
Rozdíly v rozdělení molekulárních hmotností nerozpustných kolagenů mají zřetelný vliv na vlastnosti kolagenových přípravků, vyrobených z nich sušením. V příkladu 2 je znázorněno, že pěny připravené sušením vymrazováním z nerozpustných kolagenů o rozdílném rozdělení molekulárních hmotností mají v závislosti na poměru míšení velmi rozdílné rozpadové vlastnosti. Zatím co pěny ze 100% nízkomolekulámího nerozpustného kolagenu v umělém výměšku zraň (sekretu) o pH6,4 jsou pro 45 minutách zcela rozpadlé, pěny ze 100% vy sokomolekulámího nerozpustného kolagenu nejsou za stejných podmínek rozpadlé ani po 10 dnech.
Příklad ukazuje, že použití vysokomolekulámích kolagenových agregátů má na pěnu zřetelně stabilizující vliv, což je vyjádřeno zřetelně zpomalenou absorpcí sekretu a bobtnáním, a velmi silně zbrzděným rozpadem. Stabilizace formy (tvaru) v důsledku vy sokého stupně přirozeného zesítění kolagenu má především z toxikologického hlediska tu rozhodující přednost, že jsou zbytečné dodatečné manipulace ke zpevnění struktury, jako je např. činění nebo zesíťování. Produkt získává stabilitu tvaru pouze tím, že zůstává dalekosáhle zachována původní kvartémí struktura kolagenu tak, jak se vyskytuje v kůži.
Kolagenové pěny, které byly kdysi připravovány zjediného základního typu nerozpustného kolagenu, vykazují také zřetelné rozdíly, a to např. ve vztahu ksekretu vycházejícímu zrány. Ovšem tyto mono-přípravky, jak bylo na počátku vysvětleno, mohou pouze ve speciálních jednotlivých případech vyhovět souhře (profilu) požadavků na kolagenový produkt, která je výsledkem jednoho určitého účelu použití. Naproti tomu předložený vynález nabízí dvojí možnost, jak vždy přesně upravit vlastnosti kolagenového přípravku podle daného profilu požadavků. První možností je nestupňovitě (plynule) a ve velmi širokém rámci měnit rozdělení molekulárních hmotností nerozpustného kolagenu cíleným řízením štěpení mezimolekulámích vazeb. Za druhé, smíšením těchto variací nerozpustného kolagenu s různým rozdělením molekulárních hmotností je možno nastavit (sestavit) požadované vlastnosti produktu. To se ozřejmí při provedení již zmíněného příkladu 2, týkajícího se rozkladu pěn vysušených mražením, při němž se před mražením vždy v různých poměrech smísí nerozpustný kolagen se střední molekulární hmotností asi 420 000 s nerozpustným kolagenem se střední molekulární hmotností cca 2 500 000. Doby rozpadu při různých hodnotách pH vykazují stupňovité zkrácení při stupňovitém zvyšování procentuálního podílu nerozpustného kolagenu s nižší střední molekulární hmotností.
-4CZ 291190 B6
Přesné nastavení vlastností produktu na terapeuticky optimální požadavkový profil má význam především v terapii s farmaceutickými účinnými látkami.
Kolagenový přípravek vyrobený podle vynálezu nalézá uplatnění přednostně na kůži, na vnějších i vnitřních ranách, jakož i na vnitřních tělesných tkáních a dutinách po implantaci nebo injekci. Proto pro vpravení do kolagenového přípravku přicházejí v úvahu účinné látky přednostně pro dermální a transdermální aplikaci, účinné látky pro ošetření ran a podporu jejich hojení, jakož i účinné látky obvykle podávané s přípravky pro implantaci nebo injekce.
K dermálnímu ošetření lokálních onemocnění kůže se používají lokální anestetika, lokální antibiotika, antiseptika, antimykotika, antihistaminika, svědění utišující léčiva, karatolytika a leptavá léčiva, virustatika, antiskabicidy, steroidy, jakož i různé látky k ošetření akné, lupénky a solární dermatitidy. K účinným látkám aplikovaným intradermálně patří např. steroidální a nesteroidální t antirevmatika, prokrvující látky nebo vasoprotektory a konstriktory k ošetření cévních onemocnění. K transdermálně aplikovatelným účinným látkám náležejí např. neuroleptika, antidepresiva, uklidňovadla, hypnotika, psychostimulanty, analgetika, svalové relaxanty, antiparkinsonové prostředky, gangliové blokátory, sympatomimetika, alfa-sympatolytika, beta-sympatolytika, antisympatotonika, antidiabetika, léčiva koronárních cév, antihypertonika, antiastmatika nebo diuretika. Kolagenový přípravek podle vynálezu je použitelný na kůži rovněž v kosmetických přípravcích, ve formě např. pěnových masek nebo filmů k ošetření např. zestárlé kůže, vrásek nebo nečisté pleti, nebo v péči o tělo, odstraňování chloupků, ke zmírnění potivosti nebo k ochraně před zářením (světlem).
K účinným látkám přicházejícím k použití v kolagenových přípravcích podle vynálezu na vnější a vnitřní rány patří přednostně látky zastavující krvácení, mezi nimiž zvláštní význam má kolagen sám, dále látky čistící rány, jako jsou např. enzymy, antiseptika, dezinfikující látky a antibiotika, jakož i účinné látky podporující léčení ran, jimiž se vybudí granulace, indukuje nové tvoření cév nebo podporuje epitelizace. Mezi účinnými látkami podporujícími léčení ran nabývají vzrůstajícího významu biologicky aktivní peptidy a proteiny, vykazující vysoké aktivity i v nepatrné koncentraci, a většinou jsou vyráběny rekombinačními technologiemi. K těmto látkám, pro něž je kolagenový přípravek podle vynálezu zvlášť vhodný nosič a předávací systém, patří tak zvané růstové faktory, jako je Platelet derived growth factor (PDGF), Epidermal growth factor (EGF), Platelet derived endothelial cell growth factor (PD-ECGF), acidic Fibroblast growth factor (aFGF), basic Fibroblast growth factor (bFGF), Transforming growth factor alpha (TGF alpha), detto beta (THF beta), Keratinocyte growth factor (KGF), Insuline-like growth factors 1 a 2 (TGF1, IGF2), jakož i Tumor necrosis factor (TNF).
K účinným látkám podávaným parenterálně prostřednictvím kolagenového přípravku podle vynálezu patří např. antibiotika, antiseptika, anestetika, analgetika různé síly, cytostatika, hormony, steroidy, cytokiny jako např. interleukiny, interferony a faktory stimulující kolonie, faktory pro uvolňování a zabraňování uvolňování hormonů, prostaglandiny, enzymy, jakož i růstové faktory, zejména osteoinduktivně účinné faktory pro růst kostí.
Jedním z nejdůležitějších požadavků na vývoj přípravků obsahujících účinné látky je nalézt takové formulace, které by uvolňovaly účinnou látku tak, že se dosáhne optimálního účinku, a tím i optimální terapie. Četné účinné látky, zejména zmíněné biologicky aktivní peptidy a proteiny, mají v těle jen krátký poločas, a proto musejí být podávány vícekrát denně.
Proto vzrůstajícího významu doznávají nosiče účinných látek, které účinnou látku brzdí nebo zcela řídí její uvolňování. Kolagenové přípravky podle předloženého vynálezu skýtají možnost s poměrně malým počtem základních formulačních prvků vyvinout takové nosné (nosičové) systémy, které jsou velmi flexibilní v možnostech použití a utváření, a které je možno velmi přesně přizpůsobit pro požadované řešení problému. Mechanismy propůjčující kinetice uvolňování účinné látky její charakteristiku, mohou být cíleně řízeny míšením nerozpustných kolagenů různé molekulární hmotnosti a tvarováním kolagenového přípravku. Těmito faktory
-5CZ 291190 B6 jsou ovlivňovány vedle struktury a hustoty polymemí kolagenové kostry také počet a rozdělení hydrofilních, hydrofobních a iontových vazebných míst podél celé kostry polymeru. Protože účinná látka může být nejen uzavřena v dutinách kolagenového přípravku podle vynálezu, nýbrž i adsorbována na povrchu kolagenové kostry, jsou síla vazby mezi kolagenem a účinnou látkou, a tím i způsob uvolňování, rozhodující měrou určovány iontovými vztahy, jakož i hydrofilním a hydrofobním vzájemným působením.
Při dermální, interdermální a transdermální aplikaci účinné látky s pomocí kolagenového přípravku podle vynálezu mají vliv na průběh uvolňování vedle struktury, hustoty a vazebné aktivity kolagenového přípravku také rozpustnost účinné látky v přípravku, stupeň nasycení, jakož i difuzní rychlost účinné látky uvnitř přípravku.
Při použití kolagenových přípravků pro předávání účinné látky na vnější nebo vnitřní rány, nebo při jejich použití k implantaci nebo injekci, přistupuje ještě jeden další faktor.
V uvedených případech použití kolagenové přípravky podle vynálezu přicházejí do styku s tělními tekutinami. Proto jako možnost řízení uvolňování, zmíněnou již v příkladu 2, je možno využít rozsahu absorpce tekutin v kolagenovém přípravku, a tím i bobtnání a rozpadu tohoto přípravku. Vedle rozpadu kolagenového přípravku jako řídicího mechanismu přicházejí pro řízení uvolňování při styku s tělní tekutinou také především v úvahu vyluhování účinné látky z kolagenového přípravku tělní tekutinou, jakož i tekutinou zprostředkovaná difúze účinné látky z jádra kolagenového přípravku na jeho povrch. Mimo to uvolňování je ovlivňování biologickým odbouráváním kolagenového přípravku, a to hydrolýzou a enzymatickým působením při styku s tělní tekutinou. Na příkladu 2 již byla znázorněna velká šíře vzájemných účinků mezi tekutinou a přípravky ze směsí nerozpustného kolagenu s různým rozdělením molekulárních hmotností. Z příkladů 3 a 4 je patrné, jak tato vzájemná působení ve spolupůsobení jednoho či více zmíněných faktorů ovlivňují kinetiku uvolňování účinné látky. Je zřejmé, že kinetiku uvolňování účinné látky význačně určuje směsný poměr nerozpustného kolagenu s rozdílným rozdělením* molekulárních hmotností. Tím je umožněno kolagenový přípravek cíleně přizpůsobit propožadované údaje při dané účinné látce a předem stanoveném uvolňování v čase, aby se docílilo terapeuticky optimálního dávkování účinné látky v předpokládaném čase použití. Má-li být účinná látka předána v době užívání 24 až 48 hodin, a to při formě léku zvolené v příkladu 3 a 4 a s přípravkem popsaným v příkladu 1 z nerozpustného kolagenu s rozdílným rozdělením molekulárních hmotností, pak poměr smísení nízkomolekulámího a vysokomolekulámího kolagenu by neměl být menší než 3:1. Má-li na druhé straně dojít k rovnoměrně udržovanému uvolňování účinné látky ze srovnatelné formy léku v době podávání 7 až 14 dnů, pak tento směsný poměr nízkomolekulámího a vysokomolekulámího nerozpustného kolagenu by neměl být větší než 1:3.
V příkladech byly zkoumány vědomě jen čisté kolagenové přípravky plus účinná látka, abychom doložili možnosti řízení přípravků ze směsí nerozpustného kolagenu s rozdílným rozdělováním molekulárních hmotností bez ovlivnění jinými pomocnými látkami. V praxi se však bez dalších ve vodě rozpustných nebo dispergovatelných aditiv vůbec neobejdeme, protože vedle nároků na uvolňování účinné látky se zpravidla kladou také nároky podle účelu použití - na vlastnosti potřebné pro manipulaci a stabilitu kolagenového přípravku s účinnou látkou.
Takovými pomocnými látkami mohou být přídavné polymery, které slouží např. jako prostředky pro regulaci viskosity v případě kapalných přípravků, nebo jako pojivá v případě pevných prostředků. Jsou jimi např. deriváty celulózy, škrobu, galaktomananu, dextrany, rostlinné polysacharidy jako algináty, pektiny, karrageenan nebo xanthan, chitosan, proteiny, glykoproteiny, proteoglykany, glukosaminglykany, polyvinylalkohol, polyvinylpyrrolidon, směsné polymerizáty vinylpyrrolidon-vinylacetát, polyetylenglykol, polyakryláty a polymetakryláty, polylaktidy a polyglykosidy, jakož i polyaminokyseliny.
-6CZ 291190 B6
Kolagenový přípravek může obsahovat také další pomocné látky:
- prostředky k udržování vlhkosti, jako jsou příkladně glycerin, sorbitol, polyetylenglykol, polypropylenglykol;
- změkčovadla, jako jsou příkladně estery kyseliny citrónové, vinné, nebo estery glycerinu;
- urychlovače penetrace, jako jsou příkladně alkylsulfáty, alkylsulfonáty, alkalická mýdla, soli mastných kyselin a vícemocných kovů, betainy, aminoxidy, estery mastných kyselin, mono-, di-, nebo triglyceridy, alkoholy s dlouhým řetězcem, sulfoxidy, estery kyseliny nikotinové, kyselina salicylová, N-methylpyrrolidon, 2-pyrrolidon nebo močovina;
- konzervační prostředky, jako jsou příkladně p-Cl-m-Kresol, fenyletylalkohol, fenoxetylalkohol, chlorbutanol, metylester kyseliny 4-hydroxybenzoové, její propylester, benzalkoniumchlorid, cetylpyridiniumchlorid, diacetát nebo diglukonát chlorhexidinu, etanol nebo propylenglykol;
- dezinfekční prostředky, jako příkladně halogeny jako polyvidon-jód, halogenované sloučeniny jako chlornan sodný nebo tosylchlorid-natrium, oxidační prostředky jako peroxid vodíku nebo permanganát draselný, sloučeniny arylrtuti jako fenylmerkuriborát nebo merbromin, sloučeniny alkylrtuti jako thiomersal, organociničité sloučeniny jako tri-n-butyl-cín-benzoan, sloučeniny stříbra jako acetylstanát stříbrný, alkoholy jako etanol, n-propanol nebo isopropanol, fenoly jako tymol, o-fenylfenol, 2-benzyl—4-chlorfenol, hexachlorofen nebo hexylresorcin nebo organické sloučeniny dusíku jako 8-hydroxychinolin, chlorguinaldol, clioquinol, ethakridin, hexetidin, chlorhexidin nebo ambazon;
- regulátory pH, jako příkladně glycinový, citrátový, boritanový, fosfátový pufr (ústojný roztok) nebo pufr s kyselinou citrónovou a fosfátem;
- antioxidanty, jako příkladně kyselina askorbová, askorbylpalmitát, tokoferolacetát, propylgalát, butylhydroxyanisol nebo butylhydroxytoluen;
- stabilizátory účinných látek jako je mannitol, glukosa, laktosa, fruktosa, sacharosa;
- emulgovatelné pomocné látky jako jsou oleje, tuky a vosky;
- vonné látky, barviva, čisticí látky, prostředky pro péči a pleť;
- stabilizátory emulzí jako např. neiontové emulgátory, amfotemí, kationaktivní a anionaktivní emulgátory;
- plniva jako např. mikrokrystalická celulosa, aluminiumoxid, oxid zinečnatý, titaničitý, mastek, oxid křemičitý, křemičitan hořečnatý, magnesium-aluminiumsilikát, kaolin, hydrofobní škroby, stearát nebo fosfát vápenatý.
Pomocné látky je možno např. ještě před procesem tváření léčiva rozpustit, dispergovat nebo emulgovat v disperzích nerozpustného kolagenu. Mohou být však také vneseny způsobem známým a obvyklým pro příslušný proces formování teprve v pozdějších stupních vytváření léčiva, a to až po ukončení jednoho z dále uvedených primárních procesů vytváření léčiva.
Formy provedení umožňující využití směsí nerozpustného kolagenu s různým rozdělením molekulárních hmotností k řízenému předávání účinných látek jsou výslovně nespočetné, a nelze je tudíž všechny popsat.
Formy provedení kolagenového přípravku podle vynálezu mohou být vyrobeny různými, pro odborníka běžnými metodami ze směsí disperzí nerozpustného kolagenu o různém rozdělení molekulárních hmotností, a to s použitím např. sušení rozprašováním, sušení vymražením, povlékání nebo odlití s následným sušením, postupů separace fází a koacervace pro částice a emulgované kapičky, sušení, komprimování, jakož i jednoduchého plnění např. do tub, a ve výsledné formě např. prášku, pudru, mikročástic, vláken, vloček, pěn, houby, jehlic, tyčinek, tablet, želé, krémů, jednovrstvých filmů a laminátů. Přednostně používanými formami provedení jsou rozstřikováním sušené mikročástice, vymražováním sušené pěny a povlékáním vyrobené filmy ve formě gelů (želé).
Vnášení účinné látky do kolagenového přípravku podle vynálezu se může provést tak, že účinná látka se rozpustí nebo disperguje v hotové směsi disperzí nerozpustného kolagenu s rozdílným rozdělením molekulárních hmotností ještě před tvářecím procesem. Má-li být zapracována více než jedna účinná látka, mohou být tyto látky odděleně rozpuštěny nebo dispergovány v jednotlivých frakcích nerozpustného kolagenu také před mísícím pochodem. Ale účinnou látku je také možno vnést do nebo nanést na přípravek až po tvářecím procesu, a to povlékáním, nastříkáním, impregnováním, ponořováním a jinými adsorpčními postupy.
Možné formy provedení, odpovídající výrobní postupy a metody vnášení účinné látky je však možno vzájemně kombinovat k docílení žádaných vlastností.
Tak např. kolagenový přípravek podle vynálezu může tvořit v tělesné tekutině rozpustné, nebo při nejmenším bobtnatelné pouzdro nerozpustného kolagenu s nižší střední molekulární hmotností ve formě houby nebo filmu, a v něm jsou dispergovány mikročástice nerozpustného kolagenu s vysokou střední molekulární hmotností. Při zapracování pouze jedné účinné látky tato vnější houbovitá nebo filmová fáze slouží k iychlému dosažení minimální potřebné koncentrace účinné látky, následovanému pomalejším rovnoměrnějším uvolňováním účinné látky z vnitřní mikročásticové fáze, čímž se udržuje potřebná koncentrace účinné látky po celý časový interval aplikace. Podobných profilů uvolňování je možno dosáhnout také jinými formami přípravku, jako např. jehlicemi v hydrogelech, houbovitými emulzemi olej-voda, směsí komprimátů pro, implantovatelné tablety, vícevrstvými filmy, kombinacemi filmů a pěn, atd.
Podobných vícefázových přípravků je také možno použít v případech, kdy se žádá uvolňování různých účinných látek v různých časových bodech a v různých dávkách uvolňování, nebo kdy jedna nebo více účinných látek se má uvolňovat fázově, tj. s intervaly bez uvolňování.
Přitom může být např. účinná látka A obsažena v lehce rozpustné, rychle uvolňující vnější fázi, zatím co látka B je obsažena v těžce rozpustné, retardující a řízeně uvolňující vnitřní fázi. Žádá-li se fázový profil uvolňování jediné účinné látky, mohou účinnou látku uvolňovat vnější a vnitřní fáze, např. se stejnou kinetikou. Vnitřní fáze bude však v tomto případě opatřena vrstvou nerozpustného kolagenu bez účinné látky, a tato vrstva po rozpuštění vnější fáze nebo vyčerpání účinné látky zní se musí sama rozpustit nebo nabobtnat, aby mohlo dojít kuvolňování účinné látky z vnitřní fáze. Tímto uspořádáním je možno dosáhnout intervalu, v němž se neuvolňuje žádná účinná látka.
Při použití kolagenového přípravku podle vynálezu k dermální, intradermální a transdermální aplikaci farmaceuticky účinných látek nebo kosmetických aktivních substancí se dává přednost plochým formám provedení, jako jsou filmy, membrány nebo tenké houby. Tyto ploché formy provedení mohou sestávat také z laminátu, které mají také oddělující vrstvy bez účinné látky, propustné oddělující vrstvy, regulující membrány a vrstvy lepidla. Do jednotlivých vrstev nebo mezi ně je možno opět vložit substruktury, jako jsou destičky, prášek, mikročástice nebo kapičky oleje, aby se dosáhlo vhodné kinetiky uvolňování jedné nebo více účinných látek. Přednostně se tyto jedno- či více vrstvé kolagenové přípravky pro zmíněná použití opatřují, např. k ochraně před vyschnutím či před vrůstáním klíčků, podle známých postupů zadní vrstvou, a na opačné straně uvolnitelnou ochrannou vrstvou, přičemž zadní i ochranná vrstva mohou sestávat
-8CZ 291190 B6 z materiálů pro odborníka běžných, jaké se používají např. při formulování náplastí a lepicích pásek.
V jednom výhodném provedení kolagenového přípravku podle vynálezu, určeného na vnější rány jakož i nitrotělně, je forma přípravku pórovitá, např. pěnovitá nebo houbovitá. Velikost pórů a struktura přípravku jsou tak uspořádány, že je umožněno vnikání buněk, např. fibroblastů nebo osteoblastů přípravku a buňkám je při tom dodávána strukturní orientace odvoditelná od uspořádání kolagenu přípravku podle vynálezu, které je podobné uspořádání vazivové tkáně. Vrůstání buněk může být nutné např. pro odbourání přípravku nebo pro předávání či ukládání látek např. potřebných pro novou tvorbu tkání, nebo pro vaskularizaci tkáně, která má nastoupit na místo kolagenového přípravku podle vynálezu.
V jiném výhodném provedení určeném pro použití na vnější rány nebo nitrotělně se kolagenový přípravek podle vynálezu přimíšením pomocných látek, jako např. karboxymetylcelulosy, kyseliny polyakrylové, tragantu, natriumalginátu nebo hydroxypropylcelulosy, upraví tak, aby byl bioadhezivní, tj. aby v důsledku povrchových sil po určitou dobu lpěl na povrchu tkáně aplikovaného místa, a tedy aby se tak zvýšila doba setrvání na místě aplikace nebo resorpce.
Příklady provedení
1. Získání nerozpustného kolagenu z telecí kůže
1.1 Vyčinění s Ca(OH)2, 1 % v H2O100 h
Vyčinění s NH4C1, 3 % v H2O1 h
Vyčinění s NaOH 5 % + Na2SO4 9,2 % v H2O12 h
Vyčinění s Na2SO4, 1 molámí roztok H2O0,5 h
Vyčinění s HC1, 1 % v H2O1,5 h
Vyčinění s H2O2, 0,5 % v H2O6 h
Po mechanickém rozmělnění a dispergování ve vodě (pH 6,0) vykazuje nerozpustný kolagen střední molekulární hmotnost asi 2 500 000. Koncentrace kolagenu činí 0,75 %.
1.2 Jako a), rozdíl:
Vyčinění s Ca(OH)2, 1 % v H2O 72 h
Vyčinění s 9,75 % NaOH + 9,2 % Na2SO4 v H2O 48 h
Po mechanickém rozmělnění a dispergování ve vodě (pH 6,0) vykazuje nerozpustný kolagen střední molekulární hmotnost asi 420 000. Koncentrace kolagenu činí 0,75 %.
2. Příprava lyofylizátů bez účinné látky ze směsí disperzí podle 1.1 a 1.2 a stanovení dob rozpadu ve směsích ústojných roztoků s rozdílnými hodnotami pH.
Byly připraveny následující směsi disperzí podle 1.1 a 1.2:
Disperze 1.1 Disperze 1.2
A 100% 0%
B 75% 25%
C 50% 50%
D 25% 75%
E 0% 100%
-9CZ 291190 B6
Hluboké výtažky rozměrů 6x 4 x 1,5 cm byly naplněny po 24 gramech směsi A až E. zmraženy šokem a v době 60 minut přivedeny na teplotu - 50 °C. Potom byly směsi vysušeny vymrazováním.
U výsledných hub (rozměrů 6 x 4 x 0,8 cm) byla za mírného míchání stanovena doba rozpadu vždy ve 100 ml následujících ústojných roztoků (pufrů):
pH3: Ústojná směs ky selina citronová/chlorid sodný/louh sodný - s přídavkem fungicidu.
pH 5: Kyselina octová (0,1 molámí) octan sodný (0,2 molámí).
pH 6,4: Umělý výměšek z rány (bez albuminu).
pH 7,5: Hydrofosforečnan draselný (kys. f.d.)/NaOH (0,1 molámí/0,1 molámí).
Výsledky:
Směs pH ústojného roztoku (pufru)
3 5 6,4 7,5
A 2 h 15 min > lOd > lOd > lOd
B 1 h 10 min 3d 3d 2d
C 1 h 24 h 24 h 6h
D 20 min 4 h 10 min 4 h 30 min 1 h 45 min
E 2 min 35 min 45 min 15 min
3. Příprava lyofilizátů s propylesterem kyseliny p-hydroxybenzoové a stanovení uvolňování.
Ve směsích A až E podle příkladu 2 bylo rozpuštěno vždy 0,275 % (vztaženo na disperzi) propylesteru kyseliny p-hydroxybenzoové. Vždy 10 g směsi bylo vloženo do hlubokých výtažků podle příkladu 2, zmraženo šokem, během 60 min vychlazeno na -50 °C, a potom vysušeno vymrazováním.
Od každého výsledného lyofilizátů (hmotnost houby asi 135 mg, teoret. obsah esteru PHB 27,5 mg) bylo vždy po asi 30 mg (teoret. obsah esteru PHB 6,1 mg) vloženo do lopatkové aparatury a mícháno v 500 ml 0,05N louhu sodného při 37 °C a 45 ot/min. Po 4 hodinách bylo odebráno vždy po 10 ml média obsahujícího uvolněnou látku. Obsah účinné látky byl stanoven uv-fotometricky při tloušťce vrstvy 1 cm oproti standardu při 294 nm.
Výsledky:
Směs A B C D E uvolněná účinná látka (mg) 2,1 2,7 3,4 3,8 X
X/ Nebylo možno stanovit, protože lyofilizát se zcela rozpadl.
4. Příprava lyofilizátů s lidokain-hydrochloridem a stanovení uvolňování
Ve směsích A až E podle příkladu 2 se rozpustí vždy 0,042 % hmotn. (vztaženo na disperzi) lidokain-hydrochloridu. Vždy 24 g směsi bylo vloženo do hluboce taženého přípravku podle příkladu 2, zmraženo šokem, během 60 min vychlazeno na - 50 °C, a potom vysušeno vymrazováním.
Každý výsledný lyofilizát (hmotnost houby asi 250 mg, teoret. obsah lidokain-hydrochloridu 10 mg) byl vložen do lopatkové aparatury a síťkou připevněn ke dnu nádoby. Do
- 10CZ 291190 B6 aparatury bylo vloženo 350 ml vody teplé 37 °C a mícháno při 45 ot/min. Po 24 hodinách byly odebrány vzorky média obsahujícího uvolněnou látku. Obsah účinné látky byl stanoven při tloušťce vrstvy 1 cm uv-fotometricky při 262,5 nm s vyhodnocením s pomocí kalibrační křivky.
Výsledky:
Směs Uvolněno účinné látky
A 1,2 mg
B 5,1 mg
C 7,4 mg
D 8,8 mg
E 10,0 mg
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (18)

15 1. Kolagenový přípravek pro řízené uvolňování účinných látek, v y z n a č u j í c í se tím, že obsahuje směs v kyselině nerozpustných kolagenů s rozdílným rozdělením molekulárních hmotností.
2. Kolagenový přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že kolagenový 20 přípravek obsahuje různé účinné látky.
3. Kolagenový přípravek podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že obsahuje pomocné látky, jako jsou prostředky pro úpravu viskosity, pojivá, prostředky pro udržení vlhkosti, změkčovadla, urychlovače penetrace, konzervační prostředky, dezinfekční prostředky,
25 regulátory pH, antioxidanty, stabilizátory účinných látek, oleje, tuky, vosky, stabilizátory emulzí, vonné látky, barviva a/nebo vnitřní plniva.
4. Kolagenový přípravek podle jednoho z nároků 1 až 3,vyznačující se tím, že nerozpustný kolagen je bez telopeptidů, přírodní, nezesítěný kolagen typu 1.
5. Kolagenový přípravek podle jednoho nebo více nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že nerozpustný kolagen je produktem získaným alkalickým rozkladem telecí kůže.
6. Kolagenový přípravek podle jednoho nebo více nároků 1 až 5, vyznačující se tím, 35 že je ve formě prášků, pudrů, mikročástic, vláken, vloček, pěn, hub, jehliček, tyčinek tablet, gelů, krémů, jednovrstvových filmů nebo laminátů.
7. Kolagenový přípravek podle nároku 6, vyznačující se tím, že kolagenový přípravek sestává z kombinace různých forem provedení k docílení žádané kinetiky uvolňování
40 účinné látky.
8. Kolagenový přípravek podle jednoho nebo více výše uvedených nároků, vyznačující se t í m , že uvolňování účinné látky je řízeno a kontrolováno směšovacím poměrem v kyselině nerozpustných kolagenů s rozdílným rozdělením molekulárních hmotností.
9. Kolagenový přípravek podle jednoho nebo více výše uvedených nároků, vyznačující se t í m, že uvolňování účinné látky je řízeno rozpouštěním nebo bobtnáním a erozí kolagenového přípravku.
-11 CZ 291190 B6
10. Kolagenový přípravek podle jednoho nebo více výše uvedených nároků, vyznačující se t í m, že uvolňování účinné látky je řízeno biologickým odbouráváním kolagenového přípravku.
5
11. Kolagenový přípravek podle jednoho nebo více výše uvedených nároků, vyznačující se t í m , že je bioadhezivní.
12. Způsob výroby kolagenového přípravku podle jednoho nebo více z výše uvedených nároků, vyznačující se tím, že se
- alkalickým rozkladem připraví v kyselině nerozpustný kolagen z telecí kůže, přičemž distribuce molekulárních hmotností kolagenů je určena koncentrací a časem působení vodných alkalických roztoků,
15 - kolagen disperguje ve vodě,
- případně smíchají stejně nebo rozdílné množství disperzí obsahujících kolageny s různou distribucí molekulárních hmotností, přičemž poměr disperzí obsahujících kolageny s různou distribucí molekulárních hmotností určuje čas rozpadu kolagenového přípravku,
- suší rozprašováním, suší vymražením, povléká nebo odlívá s následným sušením, fázově separuje a koacervuje, stlačí nebo se disperze plní do nádobek na vytváření prášků, pudrů, mikročástic, vláken, vloček, pěn, hub, jehliček, malých tyčinek, tablet, gelů, krémů, jednovrstvových filmů nebo laminátů.
13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že se ke kolagenové disperzi přidají pomocné látky jako jsou regulátory viskozity, pojivá, prostředky k udržování viskozity, změkčovadla, urychlovače, penetrace, konzervační prostředky, dezinfekční prostředky, regulátory pH, antioxidanty, stabilizátory aktivních látek, oleje, tuky, vosky, stabilizátory emulzí,
30 vonné látky, barviva a/nebo vnitřní plniva.
14. Způsob podle nároku 12 nebo 13,vyznačující se tím, že aktivní látka se vnese do kolagenového prostředku nebo různé aktivní látky se vnesou do kolagenových disperzí, které se smíchají.
15. Způsob podle nároku 12 nebo 13,vyznačující se tím, že účinná látka se vnese do nebo nanese na kolagenový přípravek po tvářícím procesu povlékáním, nastříkáním, impregnováním, ponořováním nebo jinými adsorpčními procesy.
40
16. Použití kolagenového prostředku podle jednoho nebo více z nároků 1 až 10 pro přípravu farmaceutického prostředku pro řízené uvolňování aktivních látek do rány.
17. Použití kolagenového prostředku podle jednoho nebo více z nároků 1 až 11 pro přípravu farmaceutického prostředku pro řízené uvolňování aktivních látek na neporušenou kůži.
18. Použití kolagenového prostředku podle jednoho nebo více z nároků 1 až 11 pro přípravu farmaceutického prostředku pro implantování nebo injekční vstřikování do živého organizmu.
CZ19963108A 1994-04-27 1995-04-15 Kolagenový přípravek pro řízené uvolňování účinných látek, způsob jeho výroby a pouľití CZ291190B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4414755A DE4414755C2 (de) 1994-04-27 1994-04-27 Kollagenzubereitung zur gesteuerten Abgabe von Wirkstoffen, Verfahren und Verwendung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ310896A3 CZ310896A3 (en) 1997-06-11
CZ291190B6 true CZ291190B6 (cs) 2003-01-15

Family

ID=6516606

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19963108A CZ291190B6 (cs) 1994-04-27 1995-04-15 Kolagenový přípravek pro řízené uvolňování účinných látek, způsob jeho výroby a pouľití

Country Status (21)

Country Link
US (1) US6761908B1 (cs)
EP (1) EP0804245B1 (cs)
JP (1) JP3865077B2 (cs)
KR (1) KR970702733A (cs)
AT (1) ATE180409T1 (cs)
AU (1) AU695621B2 (cs)
CZ (1) CZ291190B6 (cs)
DE (2) DE4414755C2 (cs)
DK (1) DK0804245T3 (cs)
ES (1) ES2134468T3 (cs)
FI (1) FI118415B (cs)
GR (1) GR3030955T3 (cs)
HU (1) HUT75468A (cs)
IL (1) IL113326A (cs)
MY (1) MY114090A (cs)
NO (1) NO309256B1 (cs)
NZ (1) NZ284476A (cs)
PL (1) PL179952B1 (cs)
SK (1) SK281461B6 (cs)
WO (1) WO1995028964A1 (cs)
ZA (1) ZA953410B (cs)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6440980B1 (en) * 1996-09-17 2002-08-27 Avanir Pharmaceuticals Synergistic inhibition of viral replication by long-chain hydrocarbons and nucleoside analogs
TW586934B (en) * 1997-05-19 2004-05-11 Sumitomo Pharma Immunopotentiating composition
DE19739031A1 (de) * 1997-09-05 1999-03-11 Suwelack Nachf Dr Otto Mittel zur peroralen Verabreichung, seine Herstellung und Verwendung
TR200001789T2 (tr) 1997-10-03 2000-10-23 Lavipharm Laboratories, Inc. Prolamin-bitki kutuplu lipit kompozisyonu, bunun hazırlama ve uygulama metodu
DE19856432A1 (de) * 1998-12-08 2000-06-15 Basf Ag Nanopartikuläre Kern-Schale Systeme sowie deren Verwendung in pharmazeutischen und kosmetischen Zubereitungen
DE19856668A1 (de) * 1998-12-09 2000-06-15 Aesculap Ag & Co Kg Wirkstoffmatrix in Form eines biologisch resorbierbaren porösen Vlieses, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung
IT1317832B1 (it) * 2000-02-15 2003-07-15 Eurores S R L Procedimento per la preparazione di collagene micronizzato e sueapplicazioni terapeutiche.
US6309454B1 (en) 2000-05-12 2001-10-30 Johnson & Johnson Medical Limited Freeze-dried composite materials and processes for the production thereof
FR2816847B1 (fr) * 2000-11-22 2006-07-14 Assist Publ Hopitaux De Paris Biomateriaux polymeriques poreux, procede de preparation et utilisations
WO2004000103A2 (en) 2002-06-24 2003-12-31 Noyes William R Fillers and methods for displacing tissues to improve radiological outcomes
US20050032246A1 (en) * 2002-11-14 2005-02-10 Mcmaster University Method of immobilizing membrane-associated molecules
JP2005263785A (ja) * 2004-02-18 2005-09-29 Koken Co Ltd 溶解するフェイシャルマスク
DE102004022645A1 (de) * 2004-05-07 2005-12-15 Resorba Wundversorgung Gmbh & Co. Kg Bioresorbierbares Material auf Kollagen-Basis
JP2006191455A (ja) 2005-01-07 2006-07-20 Nec Corp 無線移動通信方法、無線移動通信システム、基地局制御装置及び無線移動端末
DE102005017845A1 (de) * 2005-04-18 2006-10-19 Lohmann & Rauscher Gmbh & Co. Kg Autosterile, antiseptische Kollagenzubereitungen, ihre Verwendung und Verfahren zu ihrer Herstellung
JP4621563B2 (ja) * 2005-08-26 2011-01-26 新田ゼラチン株式会社 皮膚用保水シート
CA2559430A1 (en) * 2005-09-09 2007-03-09 Jodi Lastman Self-inflating nursing pillow and method of operating the same
CA3042067C (en) 2009-12-15 2022-10-18 Incept, Llc Implants and biodegradable fiducial markers
CA2794173A1 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Christopher J. Criscuolo Combination three-dimensional surgical implant
WO2012143324A1 (en) 2011-04-19 2012-10-26 Bioiberica, S.A. Cartilage product
AU2015256383B2 (en) * 2014-05-08 2020-05-21 Wake Forest University Health Sciences Methods of treating incontinence and other sphincter deficiency disorders
DE102014108633B9 (de) 2014-06-18 2024-07-04 Kulzer Gmbh Vorrichtung und Verfahren zur Herstellung dreidimensionaler Objekte mittels Rapid-Prototyping
WO2020043665A1 (en) 2018-08-27 2020-03-05 Claudia Eder Antiseptic gel

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT71305B (de) * 1913-05-07 1916-03-10 Morton Lewis Johnson Fernsprechsystem.
GB1347582A (en) * 1972-02-02 1974-02-27 Interprinderea Flacara Rosie Collagenic medicinal dressing
US4021522A (en) 1973-09-10 1977-05-03 Collagen Products Pty. Limited Method of forming collagen dispersions
JPS597684B2 (ja) 1976-05-20 1984-02-20 明治製菓株式会社 コラ−ゲンを用いた眼用徐放性制御医薬剤
US4164559A (en) * 1977-09-21 1979-08-14 Cornell Research Foundation, Inc. Collagen drug delivery device
DE2843963A1 (de) * 1978-10-09 1980-04-24 Merck Patent Gmbh Im koerper resorbierbare geformte masse auf basis von kollagen und ihre verwendung in der medizin
US4279812A (en) * 1979-09-12 1981-07-21 Seton Company Process for preparing macromolecular biologically active collagen
DE2943520C2 (de) * 1979-10-27 1982-05-19 Fa. Carl Freudenberg, 6940 Weinheim Verfahren zur Herstellung von Kollagenschwamm für medizinische oder kosmetische Zwecke
US4409332A (en) 1982-01-12 1983-10-11 Jefferies Steven R Collagen-enzyme conjugates that exhibit no inflammatory response and method for making the same
US4774091A (en) * 1983-10-14 1988-09-27 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Ltd. Long-term sustained-release preparation
MX163953B (es) 1984-03-27 1992-07-03 Univ New Jersey Med Procedimiento para preparar una matriz biodegradable a base de colageno
US4619913A (en) * 1984-05-29 1986-10-28 Matrix Pharmaceuticals, Inc. Treatments employing drug-containing matrices for introduction into cellular lesion areas
US4789663A (en) 1984-07-06 1988-12-06 Collagen Corporation Methods of bone repair using collagen
CA1259914A (en) 1984-07-06 1989-09-26 Donald G. Wallace Methods of bone repair using collagen
DE3429038A1 (de) 1984-08-07 1986-02-20 B. Braun Melsungen Ag, 3508 Melsungen Wirkstoff-depot
US4563350A (en) 1984-10-24 1986-01-07 Collagen Corporation Inductive collagen based bone repair preparations
US5246457A (en) 1985-03-28 1993-09-21 Collagen Corporation Xenogeneic collagen/mineral preparations in bone repair
SE462894B (sv) * 1985-10-28 1990-09-17 Biogram Ab Mikrokapslar, foerfarande foer framstaellning daerav samt anvaendning
IT1181737B (it) 1985-11-26 1987-09-30 Pierfrancesco Morganti Supproto di collagene biologicamente attivo per uso cosmetico e farmaceutico e metodo per prepararlo
EP0302953A1 (de) * 1987-08-11 1989-02-15 Deutsche Gelatine-Fabriken Stoess AG Verfahren zur Herrstellung von Formkörpern aus Kollagen und Kollagenabbauprodukten
FR2619506B1 (fr) 1987-08-17 1990-08-24 Septodont Procede de fabrication de preparations medicamenteuses solides associant du collagene et un agent anti-infectieux imidazole, ainsi que leur application au traitement d'affections du parodonte
GB8723846D0 (en) * 1987-10-10 1987-11-11 Danbiosyst Ltd Bioadhesive microsphere drug delivery system
ATE90570T1 (de) * 1988-01-29 1993-07-15 Sumitomo Pharma Verbesserte formulierungen mit kontrollierter abgabe.
US5219576A (en) * 1988-06-30 1993-06-15 Collagen Corporation Collagen wound healing matrices and process for their production
US5024841A (en) 1988-06-30 1991-06-18 Collagen Corporation Collagen wound healing matrices and process for their production
DE3841397A1 (de) 1988-12-08 1990-06-21 Melzer Wolfgang Poroeser resorbierbarer arzneistofftraeger
USRE35399E (en) * 1990-04-24 1996-12-10 Eisenberg; Mark Composite living skin equivalents
DE4028088A1 (de) * 1990-09-05 1992-04-16 Berg Ernes Elme Dipl Ing Resorbierbare kollagenimplantate
US5173298A (en) * 1990-09-27 1992-12-22 Allergan, Inc. Nonaqueous fluorinated drug delivery vehicle suspensions
IT1243390B (it) * 1990-11-22 1994-06-10 Vectorpharma Int Composizioni farmaceutiche in forma di particelle atte al rilascio controllato di sostanze farmacologicamente attive e procedimento per la loro preparazione.
DE4038887A1 (de) * 1990-12-06 1992-07-02 Lohmann Therapie Syst Lts Verfahren zur herstellung von kollagenpartikeln und ihre verwendung als wirkstofftraeger
US5206028A (en) 1991-02-11 1993-04-27 Li Shu Tung Dense collagen membrane matrices for medical uses
AU654574B2 (en) * 1991-06-14 1994-11-10 Amgen, Inc. Collagen film drug delivery for proteins
ATE164761T1 (de) * 1991-07-09 1998-04-15 Vitaphore Corp Zusammensetzungen auf der basis von collagen zur kontrollierten arzneistoffreisetzung
US5259998A (en) * 1991-10-04 1993-11-09 Chiron Ophthalmics, Inc. Method for casting dissolvable ophthalmic shields in a mold
GB9206508D0 (en) * 1992-03-25 1992-05-06 Jevco Ltd Biopolymer composites

Also Published As

Publication number Publication date
PL179952B1 (en) 2000-11-30
HUT75468A (en) 1997-05-28
GR3030955T3 (en) 1999-11-30
IL113326A (en) 2000-01-31
NZ284476A (en) 1998-08-26
AU2307895A (en) 1995-11-16
AU695621B2 (en) 1998-08-20
NO964539L (no) 1996-12-18
DE4414755A1 (de) 1996-01-11
HU9602948D0 (en) 1996-12-30
ATE180409T1 (de) 1999-06-15
CZ310896A3 (en) 1997-06-11
WO1995028964A1 (de) 1995-11-02
ES2134468T3 (es) 1999-10-01
FI118415B (fi) 2007-11-15
FI964253L (fi) 1996-10-22
SK138096A3 (en) 1997-08-06
NO964539D0 (no) 1996-10-25
DE59506057D1 (de) 1999-07-01
JPH09512257A (ja) 1997-12-09
EP0804245B1 (de) 1999-05-26
DE4414755C2 (de) 2000-11-16
FI964253A0 (fi) 1996-10-22
DK0804245T3 (da) 1999-11-29
PL316659A1 (en) 1997-02-03
JP3865077B2 (ja) 2007-01-10
KR970702733A (ko) 1997-06-10
SK281461B6 (sk) 2001-04-09
US6761908B1 (en) 2004-07-13
ZA953410B (en) 1996-04-09
NO309256B1 (no) 2001-01-08
MY114090A (en) 2002-08-30
EP0804245A1 (de) 1997-11-05
IL113326A0 (en) 1995-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ291190B6 (cs) Kolagenový přípravek pro řízené uvolňování účinných látek, způsob jeho výroby a pouľití
JP3094074B2 (ja) 多糖ゲル組成物
US6316598B1 (en) Water absorbent keratin and gel formed therefrom
US9822243B2 (en) Freeze-dried composition
DE69733889T2 (de) Lösliche oxide für biologische anwendungen
JP2002521347A (ja) 陰イオン多糖を含む徐放製剤
AU2011208709B2 (en) Hydrogel of microspheres
JP2010254688A5 (cs)
EP3865156A1 (en) Sustained-release injection formulation comprising conjugate of poly-l-lactic acid filler and hyaluronic acid filler and bioactive materials, and preparation method thereof
WO2022048682A1 (zh) 具有多层结构的涂层微针、其制备方法及包含该涂层微针的微针贴片
JP2018510883A (ja) タンパク質またはペプチド伝達用の溶解性マイクロニドル
EP4074311A2 (en) Composition for wound healing, containing metal-organic framework
HUP0202088A2 (en) Medicament form for the delivery of collagenase to wounds and process for the preparation thereof
Jose et al. Herbal extracts based scaffolds for wound healing therapy
CA2188464C (en) Collagen preparation for the controlled release of active substances
TWI767886B (zh) 蛋白質或肽傳遞用的可溶性微針及其製造方法
CZ2006409A3 (cs) Kolagenový přípravek pro zdravotnické nebo kosmetické aplikace, způsob jeho výroby a jeho použití
CN119746087A (zh) 一种α-乳清蛋白纳米粒及其制备和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20150415