CZ288629B6

CZ288629B6 - Forma B 2-n-butyl-3-[[2´-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]-1,3-diazaspiro[4.4]non-1-en-onu, způsoby její přípravy a farmaceutická kompozice tuto formu B obsahující

Info

Publication number: CZ288629B6
Application number: CZ19952710A
Authority: CZ
Inventors: Antoine Caron; Dominique Chantreux; Colette Bouloumie
Original assignee: Sanofi-Synthelabo
Priority date: 1994-10-19
Filing date: 1995-10-17
Publication date: 2001-08-15
Also published as: EP0708103A1; FR2725987B1; EP0708103B1; FI954992L; ES2155115T3; AU698041B2; KR100251222B1; DE69519788D1; CA2160725A1; PT708103E; ATE198478T1; HU226461B1; NO307516B1; ZA958850B; NO954154L; HU9503016D0; FI954992A0; IL115688A0; NZ280293A; NO954154D0

Abstract

Nov krystalick forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-1,3-diazaspiro[4.4]non-1-en-4-onu vykazuj c omezen elektrostatick vlastnosti. Zp sob p° pravy t to formy B reakc 2-n-butyl-3-[(2'-kyanobifenyl-4-yl)methyl]-1,3-diazaspiro[4.4]non-1-en-4-onu s azidem alkalick ho kovu a triethylamin-hydrochloridem, neutralizac z skan sodn soli z vodn ho prost°ed a rekrystalizac vysr en ho produktu z rozpouÜt dla obsahuj c ho 10 a 50 % obj. vody. Farmaceutick kompozice obsahuj c uvedenou formu B, pro l en vysok ho krevn ho tlaku.\

Description

Forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4onu, způsoby její přípravy a farmaceutická kompozice tuto formu B obsahující

Oblast techniky

Vynález se týká nové krystalické formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]-l,3diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu mající omezené elektrostatické vlastnosti, jakož i způsobů přípravy této formy B a farmaceutické kompozice obsahující tuto novou formu B jako účinnou látku.

Dosavadní stav techniky

2-n-butyl-4-spirocyklopentan-l-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-2-imidazolin-5-on neboli 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-2-imidazolin-5-on neboli 2-nbutyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l ,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on je účinným antagonistou receptorů angiotensinu II a připravuje se reakcí 2-n-butyl-l-[(2'-kyanobifenyl-4-yl)methyl]-4-spirocyklopentan-2-imidazolin-5-onu neboli 2-n-butyl-3-[(2'-kyanobifenyl-4-yl)methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu buď s tributylcínazidem atrifenylchlormethanem v xylenu za refluxu, odstraněním trifenylmethylové chránící skupiny a izolaci z roztoku v ethylacetátu, řádně vysušeného (EP-A-0 454 511), nebo přímo s tributylcínazidem v xylenu za refluxu a izolací v roztoku v dichlormethanu, řádně vysušeného (C.A. Bemhart a d., J. Med. Chem., 1993, 36, 3371-3380). Tak připravená sloučenina, jíž byl přisouzen vzorec A

NH

se vyskytuje ve formě stabilních nehydroskopických jehliček, které mohou být uchovávány a formulovány bez jakékoli degradace. Nicméně bylo zjištěno, že 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5yl)-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on, získaný výše uvedenými postupy, musí být formulován velmi opatrně, poněvadž prášek má v důsledku své vysoké elektrostaticity tendenci ulpívat na zařízení, například na sítech, na raznicích nebo na stěnách míchadel.

Je známo, že jiný nepeptidický antagonista angiotensinu II, losartan, tj. draselná sůl 2-n-butyl4-chlor-5-hydroxymethyl-l-[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]imidazolu, existuje ve dvou polymorfních formách, z nichž jedna (forma I) se pravidelně získává po skončení procesu přípravy a druhá (forma II) se získává zahříváním formy I na 250 °C. Forma I losartanu je stabilní při teplotě místnosti, zatímco forma II při zvýšené teplotě. V důsledku toho se forma II postupně přeměňuje na formu I, která je při teplotě místnosti termodynamicky stabilnější (K. Raghavan a d., Pharm. Res., 1993, 10, 900-904; L.S. Wu a d., Pharm. Res., 1993,10,1793-1795).

Přeměna nitrilů na tetrazoly reakcí s azidem sodným a hydrochloridem triethylaminu je popsána v literatuře.

-1 CZ 288629 B6

Tak například v článku P. R. Bemsteina a E.P.: Vaceka, Synthesis, 1987, 1133-1134, se uvádí přehled různých metod transformace nitrilu na tetrazol a jsou navrhovány zlepšené podmínky pro tuto transformaci. Zejména je v tomto článku uvedeno, že jestliže se reakce mezi azidem sodným a hydrochloridem triethylaminu provádí v dimethylformamidu, je pozorována „významná“ tvorba produktu, doprovázená výchozími produkty a produkty rozkladu. Zlepšené podmínky, navrhované autory, spočívají v použití l-methylpyrrolidin-2-onu jako rozpouštědla při teplotě kolem 150 °C, tzn. při teplotě, při níž je pozorován reflux. Za těchto podmínek jsou výsledky velmi proměnlivé podle jednotlivých produktů (60 až 98 % před a 43 až 76 % po krystalizací).

V případě přípravy 5-{4-[2-(benzyloxykarboxamino)ethyl]fenoxymethyl}-(lH)-tetrazolu, popsané vDE 3829431 se na výchozí nitril působí azidem sodným a hydrochloridem triethylaminu v l-methylpyrrolidin-2-onu při teplotě 150 °C po dobu 8 h.

Dokument GB 2184121 popisuje pět příprav tetrazolů, antagonistických leukotrienu, z odpovídajících nitrilů reakcí s azidem sodným a hydrochloridem triethylaminu v dimethylformamidu při teplotě od 130 až 135 do 160 °C. Výtěžky konečného produktu v těchto přípravách nejsou upřesněny, avšak P.R. Bemstein a E.P. Vacek ve výše citovaném článku ukázali, že výtěžky tetrazolů jsou nízké, pracuje-li se v dimethylformamidu.

Dokument EP-A-0 420 237 popisuje deriváty bifenylmethanu, které se používají jako terapeutická činidla pro léčení vysokého krevního tlaku nebo/a srdeční nedostatečnosti, přičemž jsou popsány zejména sloučeniny obecného vzorce VI:

(VI)

Tyto sloučeniny se připravují z odpovídajících kyano-derivátů zahřátím s azidem alkalického kovu v přítomnosti například triethylamin-hydrochloridu v polárním aprotickém rozpouštědle, jakým je dimethylformamid nebo N-methylpyrrolidon, na teplotu 120 až 150 °C a za míchání reakční směsi.

Dokument EP-A-0 475 898 rovněž popisuje způsob přípravy sloučenin obecného vzorce

ve kterém například R₂ znamená lH-tetrazol-5-ylovou skupinu. Při tomto způsobu se používá

2- (n-butyl-3-(2'-kyanobifenyl-4-methyl-4-oxo-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en.

Podle údajů ve všech výše uvedených dokumentech se konečný produkt izoluje odpařením z rozpouštědla a případnou krystalizaci.

Nyní bylo zjištěno, že jestliže se krystalizuje 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on v rozpouštědle více nebo méně chudém vodou, je možno získat buď 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-on v krystalické formě, odpovídající formě produktu, získaného podle C.A. Bemharta a d. nebo podle EP-A-0 454 511, citovaných výše, dále označované „forma A“, nebo 2-n-butyl-

3- [[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on v nové krystalické formě, velmi stabilní, s definovanou strukturou, dále označované „forma B“. Konkrétně bylo zjištěno, že nová krystalická forma 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3diazaspiro[4.4]non-l-en—4-onu (forma B) je alespoň stejně stabilní jako forma A, popsaná v EP-A-0 454 511 a J. Med. Chem., 1993, 36, 3371-3380, že se spontánně nepřeměňuje na dříve známou formu A a že je navíc mnoho méně elektrostatická než forma A, a může být proto snadno podrobována veškerému zpracování za obvyklých podmínek farmaceutické praxe. Rentgenovou difraktometríckou analýzou pevného monokrystalu bylo neočekávaně zjištěno, že tato nová krystalická forma 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu je tvořena trojklonnými krystaly čistého tautomeru, majícího atom vodíku tetrazolového kruhu v poloze 2 a odpovídajícího vzorci B

N--N-H

(B)

Konečně bylo zjištěno, že 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on je možno získat s výbornými výtěžky bez použití derivátů cínu

-3CZ 288629 B6 reakcí 2-n-butyl-3-[(2'-kyanobifenyl-4-yl]methyl-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en—4—onu s alkalickým azidem a hydrochloridem triethylaminu v inertním polárním aprotickém rozpouštědle a neutralizací jedné z jeho alkalických solí ve vodném prostředí s izolací buď ve formě A nebo ve formě B. Výtěžky formy A nebo formy B, čistých z alespoň 99,8%, činí totiž 80 % nebo více.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je forma B 2-n-butyl-3-[[2'-tetrazoI-5-yl)bifenyl-4-yl]methyI]-l,3ío diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu mající následující profil rentgenové difrakce prášku:

d	I/Io
11,22	100,00
7,90	12,02
7,52	13,79
7,23	18,60
6,27	20,14
6,09	6,47
5,86	7,42
5,60	98,76
5,41	19,45
5,05	24,67
4,97	20,36
4,91	12,92
4,80	27,33
4,61	15,90
4.49	14,73
4,36	9,86
4,17	62,84
4,07	15,39
3,97	30,34
3,88	14,32
3,83	13,56
3,75	37,28
3,53	26,48
3,46	12,42
3,40	27,88
3,27	11,03
3,18	10,42
3,15	7,28
3,12	6,11
3,05	15,50
3,01	9,49
2,81	7,11
2,78	9,40

Forma B podle vynálezu má zejména teplotu tání 185 až 186 °C a charakteristické IR absorpce 15 při 1537, 1200, a 745 cm^-1.

-4CZ 288629 B6

Předmětem vynálezu je také způsob přípravy uvedené formy B, jehož podstata spočívá v tom, že se

a) 2-n-butyl-3-(2'-kyanobifenyl-4-yl)methyl-l,3-<iiazaspiro[4.4]non-l-en-4-on uvede v reakcí s azidem alkalického kovu a triethylamin-hydrochloridem v inertním polárním aprotickém rozpouštědle při teplotě varu reakční směsi pod zpětným chladičem nebo při teplotě o 10 až 30 °C nižší než je teplota varu reakční směsi pod zpětným chladičem, načež se takto získaný 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl—4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4] non-l-en-4-on izoluje ve formě jeho soli s alkalickým kovem ve vodném prostředí, a

b) takto získaná sůl 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4] non-l-en-4-onu s alkalickým kovem se ve vodném prostředí neutralizuje na hodnotu pH 4,7 až 5,3, načež se

c) takto vysrážený produkt krystaluje z rozpouštědla mísitelného s vodou a obsahujícího 10 až 50% obj. vody k izolaci 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]-l,3-diazaspiro- [4.4] non-l-en-A-onu ve formě B.

Výhodně se ve stupni a) použije jako azid alkalického kovu azid sodný, jako inertní polární aprotické rozpouštědlo se výhodně použije dimethylformamid nebo l-methylpyrrolidon-2-on a výhodně se pracuje při teplotě 110 až 140 °C.

Výhodně se ve stupni c) použije k izolaci formy B směs ethanolu a vody.

Předmětem vynálezu je rovněž způsob přípravy uvedené formy B, jehož podstata spočívá v tom, že se 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en—4-on ve formě surového produktu rekrystalizuje z rozpouštědla mísitelného s vodou obsahujícího 10 až 50 % obj. nebo se jeho forma A rekrystalizuje z rozpouštědla mísitelného s vodou obsahujícího 10 až 100 % obj. vody.

Předmětem vynálezu je konečně farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá vtom, že jako účinnou látku obsahuje formu B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazoi-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu.

Podle vynálezu se přednostně používají ekvimolámí množství azidu sodného a hydrochloridu triethylaminu v poměru 1,5 až 5 mol na mol výchozího nitrilu, výhodně asi 2 až asi 4 mol na mol nitrilu. Za těchto podmínek je možno pracovat v koncentrovaném, i velmi koncentrovaném, prostředí s použitím 0,6 až 7 1 rozpouštědla na mol výchozího nitrilu.

Po 6 až 20 h zahřívání se reakce ukončí a reakční směs se zpracuje klasickými metodami. Směs se zejména neutralizuje přídavkem báze, například alkalického hydroxidu, ve vodném roztoku, přičemž vodná fáze obsahuje soli, zejména chloridy a azidy, se kanalizuje. Organická fáze se pak zpracuje vodou a organickými rozpouštědly, jako je toluen, ethylacetát, popřípadě postupně dvěma různými rozpouštědly, což umožňuje odstranit vedlejší produkty reakce.

Takto izolovaná vodná fáze, obsahující alkalickou sůl 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-

4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, se podrobí stupni (b), který spočívá v okyselení, přednostně přídavkem kyseliny chlorovodíkové do pH 4,7 až 5,3, přednostně 4,7 až 5,2, tak, aby se získal surový 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3diazaspiro[4.4]on-l-en-4-on, který má i před odstraněním rozpouštědla z produktu uspokojivý stupeň čistoty.

Celkový výtěžek, vztaženo na nitril, je velmi vysoký (až 80 až 90 % teorie).

-5CZ 288629 B6

Ve stupni c) se takto získaný produkt podrobí krystalizaci k získání 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol5-yl)-bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4 onu ve formě B.

K získání formy B se produkt získaný ve skončení stupně (b), kiystaluje za míchání z rozpouštědla mísitelného s vodou, obsahujícího množství vody, vyšší než asi 10%. Při této krystalizaci je přítomnost vody kritická. Rozpouštědly mísitelnými s vodou, která je možno použít, jsou například alkoholy, zejména methanol, ethanol a isopropanol, ketony, zejména aceton, ethery, jako je tetrahydrofuran nebo dioxan, nitrily, zejména acetonitril. Technikou, používanou k získání formy B. je rovněž technika, obvykle používaná pro krystalizační operace.

Skutečnost, že přítomnost vody a její nepřítomnost jsou kritické, zejména možnost přecházet z jedné krystalické formy do druhé překrystalováním za výše uvedených podmínek. Bylo totiž zjištěno, že forma A může být přeměněna na formu B překrystalováním například zvodně alkoholického roztoku, zatímco překrystalováním například z isopropanolu poskytuje ještě formu A, a to i při naočkování formou B. Analogicky se forma B přeměňuje na formu A překrystalováním isopropanolu.

Uvedené zjištění umožnilo vyvinout způsob přípravy formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu z formy A, získané známými postupy, popsanými například v článku C.A. Bemharta a d. a v EP-A-0 454 511, nebo z alkalických solí 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyM-yl]niethyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, zejména z draselné soli.

V dalším z aspektů je tedy předmětem vynálezu způsob přípravy formy B 2-n-butyl-3-[[2(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, jehož podstata spočívá v tom, že se 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on ve formě surového produktu nebo ve formě A překrystaluje z rozpouštědla, mísitelného s vodou, obsahujícího alespoň asi 10 % vody.

Přesněji, je-li výchozí 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4]non-l-en-4-on ve formě surového produktu, provádí se krystalizace obecně za výše popsaných podmínek, tzn. s použitím rozpouštědla, jako je alkohol, aceton, tetrahydrofuran nebo acetonitril, v přítomnosti alespoň 10% vody, výhodně alespoň 15%, přednostně 15 až 50 % vody. 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-len-4-on ve formě surového produktu, použitý jako výchozí sloučenina, může být připraven z alkalické soli 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]nonl-en-4-onu po rozpuštění ve vodě, neutralizaci kyselinou do pH 4,7 až 5,3 a odfiltrování sraženiny. Tento postup je doporučován, skladuje-li se 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on ve formě alkalické soli, přednostně draselné soli.

Jestliže je výchozí 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on ve formě A, jsou podmínky krystalizace velmi flexibilní, protože množství přítomné vody, vždy alespoň 10%, se může pohybovat od 10 do 100%. Vyplývá to ze skutečnosti, že výchozí forma A je již velmi čistá a v důsledku toho není nutné organické rozpouštědlo. Je však nutno vzít v úvahu, že pracuje-li se v samotné vodě, je přeměna velmi pomalá a je třeba ji urychlit přídavkem kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, do pH 2 až 3, tj. bez vyvolání tvorby kyselé adiční soli, jako je hydrochlorid.

Nová forma B se izoluje pouhou filtrací a vysušením.

Přestože je přítomnost vody kritická pro vznik formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, není za normálních podmínek farmaceutické

-6CZ 288629 B6 formulace pozorována žádná přeměna formy A nebo formu B. Konkrétně například při granulaci formy A mokrou cestou není pozorován vznik formy B.

Fyzikální vlastnosti a chování nové krystalické formy (formy B) 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5yl)bifenyM-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu podle vynálezu jsou zcela odlišné od formy A, popsané, jak výše uvedeno, C.A. Bemhartem a d. a EP 0 454 511, jak bylo demonstrováno zkoumáním obou forem klasickými metodami a technikami.

Přehled obrázků na výkresech

Rozdíl mezi novou krystalickou formou 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]- l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu podle vynálezu (forma B) a formou A, popsanou C.A. Bemhartem a d., citovanými výše, vyplývá ze studie obr. 1 a 2, zatímco obr. 3 až 5 uvádějí strukturu 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bienyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en4-onu k krystalech formy B. Obrázky konkrétně zobrazují:

- Obr. 1 uvádí rentgenové difrakční spektrum prášku 2-n-butyl-3-[[2‘-(tetrazol-5-yl)bifenyM—yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu ve formě B, které dokazuje maximální intenzitu při interretikulámí vzdálenosti 11,22. 1O'¹⁰ m a silné intenzity při 5,60 a 4,17. ÍO'¹⁰ m;

- Obr. 2 uvádí rentgenové difrakční spektrum prášku 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-y)bifenyl4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu ve formě A, které dokazuje maximální intenzitu při interretikulámí vzdálenosti 18,99 . 10‘¹⁰m a relativně silné intenzity při 7,13 a 4,58 . 10’¹⁰m

- Obr. 3 udává rozvinutý vzorec 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl—4-yl]methyl]-l,3diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu s číslováním atomů, je-li přítomen v krystalické formě B;

- Obr. 4 udává prostorovou konfiguraci molekuly 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu ve formě B v krystalu;

- Obr. 5 znázorňuje cyklický dimer 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]- l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu vtrojklonném krystalu formy B, tvořený vodíkovými vazbami N(25)-H...N(3); dvě molekuly 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyM-yl]methyl]- l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu jsou v krystalu formy B uspořádány tak, že tvoří „dimeiy“ (přestože je to nesprávné, poněvadž obě molekuly nejsou vázány kovalentními vazbami, používá se výraz dimer, protože obě molekuly jsou spojeny vodíkovými vazbami mezi vodíkem v poloze 2 tetrazolu a atomem dusíku v poloze 3 imidazolinonového kruhu, které stabilizují strukturu (2H)-5-tetraholyl).

Profil rentgenové difrakce prášku (difrakční úhel) byl stanoven pomocí difraktometru Siemens D500TT.

Charakteristická spektr mezi 5 a 40° (2 theta) jsou uvedena pro formu B na obr. 1 a pro formu A na obr. 2. Význačné čáry z obr. 1 jsou shrnuty v tabulce I, zatímco pro obr. 2 jsou shrnuty v tabulce I.

-7CZ 288629 B6

V tabulkách I a II znamená d interretikulámí vzdálenost v 10 ¹⁰ m a I/Io znamená relativní intenzitu, vyjádřenou v procentech nej intenzivnější čáry.

Tabulka I

-8CZ 288629 B6

Tabulka II

d	I/To
18,98	100,00
10,89	5,81
9,49	7,43
8,48	6,60
7,13	46,23
6,68	11,25
6,30	7,45
5,45	8,85
5,22	16,82
5,03	11,81
4,71	15,91
4,58	45,40
4.44	26,12
4,32	25,44
4,22	25,86
4,11	21,72
3,93	25,46
3,85	33,89
3,77	27,76
3,38	9,09
3,33	11,75
3,23	13,68
3,14	11,99
2,80	8,97
2,71	9,50

Kalorimetrická analýza (DSC) forem A a B byla provedena srovnávacím způsobem s použitím přístroje DCS7 Perkin Elmer, kalibrovaného vůči indiu a cyklohexanu.

Pro kalorimetrickou analýzu bylo použito 3 až 6 mg formy A nebo 3 až 6 mg formy A nebo 3 až 6 mg formy B, získané podle příkladu 2, v kupelce z drážkovaného a děrovaného hliníku v zóně teploty od 20 až 200 °C při rychlosti zahřívání 10°C/min. Teplota tání a entalpie tání jsou uvedeny v tabulce III. Teplota tání odpovídá charakteristické teplotě tání, získané pomocí CSC. Tato hodnota může být rovněž definována jako teplota, odpovídající průsečíku mezi základní čarou a tangentou ve stoupání píku tavení, pozorovaných při DSC.

Tabulka III

	forma A	forma B
teplota tání (°C)	182,8	185,6
entalpie tání (J/g)	92,2	115,5

Z této tabulky vyplývá, že forma B je termodynamicky stabilnější než forma A.

Rozdíl mezi novou formou B a známou formou A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu byl prokázán rovněž infračervenou spektroskopií. IR spektra s Fourierovou tranformací (FTIF) při 4000 cm’¹ byla získána s použitím spektrometru Nicolet 5PC s rozlišením 4 cm^-1. Vzorky byly připraveny smísením 2 mg formy A nebo formy B a 200 mg KBr a stlačováním směsi pod 2 tunami po dobu 2 min. Každý vzorek byl zkoumán po 32 akumulacích.

-9CZ 288629 B6

Porovnání charakteristických čar v termínech vlnové délky (v cm ’) a intenzity (v procentech transmitace) je uvedeno v tabulce IV.

Tabulka IV

	% transmitace
vlnová délka (cm ’)	forma A	forma B
745	*	2,5
758	3,7	*
781	17,8	*
959	22,7	*
1007	26,6	6,6
1177	*	7,2
1179	23,5	♦
1200	*	18,0
1238	26,1	♦
1383	20,9	*
1537	«	14,1

Z tabulky IV vyplývá, že forma B vykazuje charakteristické absorpce při 745, 1200 až 1537 cm'¹, které u formy A chybějí.

Specifická 2H-tetrazol-5-ylová struktura formy B byla prokázána rentgenovou difrakcí monokrystalu s použitím difraktometru MSC-Rigaka AFC6S a programů SHELXS-90 a SHELXS-93 na pracovní stanici SG IRIS Indigo. Poloha vodíků C-H byla generována ve vzdálenosti 95 nm.

Krystalografické údaje, zejména mezirovinné vzdálenosti (a, b, c), úhly (α, β, gamma) a objem každé základní buňky jsou uvedeny v tabulce V.

Tabulka V. Krystalografické údaje a stanovení struktury formy B

Krystalický systém prostorová skupina	trojklonný P-l
rozměry základní buňky:
a	11,170(5) 10“^iOm
b	12,181(4) 10^l0m
c	9,366 (4) 10’¹⁰ m
a	90,75(4) °
β	105,24(4)⁰
gamma	112,92(3)°
objem	1122,9(8) 10 ¹⁰ m³

Atomové souřadnice formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazo!-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu jsou uvedeny v tabulce VI, délka vazeb v tabulce VII, úhly mezi vazbami v tabulce VIII a charakteristické torsní úhly v tabulce IX.

-10CZ 288629 B6

Tabulka VI. Polohové parametry formy B

atom	X	y	z
N(l)	0,4011(2)	0,6617(2)	-0,2435(2)
C(2)	0,3178(3)	0,5684(3)	-0,3565(3)
N(3)	0,3387(2)	0,5866(2)	-0,4838(3)
C(4)	0,4491(3)	0,7065(2)	-0,4659(3)
C(5)	0,4859(3)	0,7514(2)	-0,3022(3)
C(6)	0,4051(4)	0,7912(4)	-0,5671(4)
C(7)	0,5268(5)	0,8643(4)	-0,6164(6)
C(8)	0,5872(5)	0,7781(5)	-0,6362(5)
C(9)	0,5724(3)	0,7036(3)	-0,5096(4)
C(10)	0,4094(3)	0,6654(3)	-0,0844(3)
C(ll)	0,3135(2)	0,7106(2)	-0,0433(3)
C(12)	0,2025(3)	0,6349(2)	-0,0013(3)
C(13)	0,1164(3)	0,6773(2)	0,0396(3)
C(14)	0,1380(2)	0,7977(2)	0,0394(3)
C(15)	0,2507(3)	0,8743(2)	-0,0020(3)
C(16)	0,3364(3)	0,8317(2)	-0,0424(3)
C(17)	0,0528(3)	0,8477(2)	0,0923(3)
C(18)	-0,0898(3)	0,7975(2)	0,0473(3)
C(19)	-0,1577(3)	0,8494(3)	0,1117(3)
C(20)	-0,0879(3)	0,9494(3)	0,2184(4)
C(21)	0,0507(3)	1,0006(3)	0,2599(4)
C(22)	0,1205(3)	0,9498(3)	0,1983(4)
C(23)	-0,1774(2)	0,6935(2)	-0,0688(3)
N(24)	-0,1481(2)	0,6593(2)	-0,1858(2)
N(25)	-0,2625(2)	0,5661(2)	-0,2540(2)
N(26)	-0,3573(2)	0,5423(2)	-0,1882(3)
N(27)	-0,3053(2)	0,6223(2)	-0,0681(3)
C(28)	0,2116(4)	0,4603(4)	-0,3254(4)
C(29)	0,1072(5)	0,3772(4)	-0,4633(5)
C(30)	-0,0182(4)	0,2920(5)	-0,4422(5)
C(31)	-0,1105(5)	0,2132(5)	-0,5811(6)
0(32)	0,5713(3)	0,8456(2)	-0,02336(3)

-11CZ 288629 B6

Tabulka VII. Intramoiekulámí vzdálenosti ve formě B

atom	atom	vzdálenost
N(l)	C(5)	1,370(4)
N(l)	C(2)	1,380(3)
N(l)	C(10)	1,468(3)
C(2)	N(3)	1,279(4)
C(2)	C(28)	1,484(4)
N(3)	C(4)	1,471(4)
C(4)	C(5)	1,513(4)
C(4)	C(6)	1,543(4)
C(4)	C(9)	1,549(4)
C(5)	0(32)	1,202(3)
C(6)	C(7)	1,501(6)
C(7)	C(8)	1,485(7)
C(8)	C(9)	1,507(5)
C(10)	C(ll)	1,507(3)
C(ll)	C(12)	1,384(4)
C(ll)	C(16)	1,396(4)
C(12)	C(13)	1,384(4)
C(13)	C(14)	1,390(4)
C(14)	C(15)	1,399(4)
C(14)	C(17)	1,489(4)
C(15)	C(16)	1,379(4)
C(17)	C(22)	1,395(4)
C(18)	C(18)	1,404(4)
C(18)	C(23)	1,477(4)
C(19)	C(20)	1,381(4)
C(20)	C(21)	1,364(5)
C(21)	C(22)	1,389(4)
C(23)	N(24)	1,328(3)
C(23)	N(27)	1,354(3)
N(24)	N(25)	1,324(3)
N(25)	N(26)	1,301(3)
N(26)	N(27)	1,319(3)
C(28)	C(29)	1,519(5)
C(29)	C(30)	1,448(6)
C(30)	C(31)	1,473(6)

Vzdálenosti jsou v 10¹⁰m. Průměrné odchylky, odhadnuté na poslední desetinné místo, jsou 5 v závorkách.

-12CZ 288629 B6

Tabulka VIII. Úhly mezi intramolekulámími vazbami mezi nevodíkovými atomy

atom	atom	atom	úhel	atom	atom	atom	úhel
C(5)	N(l)	C(2)	108,2(2)	C(13)	C(14)	C(15)	117,6(2)
C(5)	N(l)	C(10)	123,7(2)	C(13)	Cl(4)	C(17)	122,3(2)
C(2)	N(l)	C(10)	127,9(2)	C(15)	C(14)	C(17)	120,0(2)
N(3)	C(2)	N(l)	114,6(2)	C(16)	C(15)	C(14)	121,2(2)
N(3)	C(2)	C(28)	125,6(3)	C(15)	C(16)	C(ll)	121,0(2)
N(l)	C(2)	C(28)	119,7(3)	C(22)	C(17)	C(18)	118,0(2)
C(2)	N(3)	C(4)	107,6(2)	C(22)	C(17)	C(14)	117,0(2)
N(3)	C(4)	C(5)	103,5(2)	C(18)	C(17)	C(14)	124,9(2)
N(3)	C(4)	C(6)	112,5(3)	C(19)	C(18)	C(17)	119,2(2)
C(5)	C(4)	C(6)	111,7(3)	C(19)	C(18)	C(23)	115,6(2)
N(3)	C(4)	C(9)	113,0(2)	C(17)	C(18)	C(23)	125,1(2)
C(5)	C(4)	C(9)	111,9(2)	C(20)	C(19)	C(18)	121,6(3)
C(6)	C(4)	C(9)	104,3(3)	C(21)	C(20)	C(19)	119,6(3)
0(32)	C(5)	N(l)	125,3(3)	C(20)	C(21)	C(22)	119,9(3)
0(32)	C(5)	C(4)	128,7(3)	C(21)	C(22)	C(17)	121,7(3)
N(l)	C(5)	C(4)	106,0(2)	N(24)	C(23)	C(27)	111,5(2)
C(7)	C(6)	C(4)	105,2(3)	N(24)	C(23)	C(18)	127,3(2)
C(8)	C(7)	C(6)	103,8(3)	N(27)	C(23)	C(18)	121,2(2)
C(7)	C(8)	C(9)	105,2(3)	N(25)	N(24)	C(23)	101,8(2)
C(8)	C(9)	C(4)	106,1(3)	N(26)	N(25)	N(24)	114.4(2)
N(l)	C(IO)	C(ll)	113,9(2)	N(25)	N(26)	N(27)	106,2(2)
C(12)	C(H)	C(16)	117,8(2)	N(26)	N(27)	C(23)	106,1(2)
C(12)	C(ll)	C(10)	121,5(2)	C(2)	C(28)	C(29)	114,7(3)
C(16)	C(ll)	C(10)	120,6(2)	C(30)	C(29)	C(28)	116,3(4)
C(ll)	C(12)	C(13)	121,4(2)	C(29)	C(30)	C(31)	112.1(4)
C(12)	C(13)	C(14)	121,1(2)

Úhly jsou ve stupních. Průměrné odchylky, odhadnuté na poslední desetinné místo, jsou v závorkách.

-13CZ 288629 B6

Tabulka IX. Charakteristické konformační a torsní úhly

(1)	(2)	(3)	(4)	úhel
N(l)	C(10)	C(ll)	C(12)	110,2(3)
N(l)	C(10)	C(ll)	C(16)	-71,6(3)
N(l)	C(2)	C(28)	C(29)	167,0(4)
N(l)	C(2)	N(3)	C(4)	-0,2(3)
C(2)	C(28)	C(29)	C(30)	-162,3(5)
C(2)	N(l)	C(10)	C(ll)	-89,4(3)
C(2)	N(l)	C(5)	C(4)	-0,1(3)
C(2)	N(3)	C(4)	C(5)	0,1(3)
N(3)	C(2)	C(28)	C(29)	-10,6(6)
N(3)	C(4)	C(5)	N(l)	0,0(3)
C(4)	C(6)	C(7)	C(8)	36,6(5)
C(6)	C(4)	C(9)	C(8)	-3,3(4)
C(6)	C(7)	C(8)	C(9)	-38,9(5)
C(7)	C(8)	C(9	C(4)	25,9(5)
C(9)	C(4)	C(6)	C(7)	-20,2(4)
C(13)	C(14)	C(17)	C(18)	-40,6(4)
C(17)	C(18)	C(23)	N(24)	-28,2(4)
C(23)	N(24)	N(25)	N(26)	0,3(3)
N(24)	C(23)	N(27)	N(26)	-0,4(3)
N(24)	N(25)	N(26)	N(27)	-0,6(3)
N(25)	N(26)	N(27)	C(23)	0,6(3)
C(28)	C(29)	C(30)	C(31)	-178,2(5)

Znaménko je kladné, jestliže při pohledu od atomu 2 k atomu 3 pohybu ve smyslu hodinových ručiček atom 1 zakrývá atom 4.

Rentgenové krystalografické studie, zejména krystalografické údaje v tabulce 1, atomové souřadnice v tabulce VI, délka vazeb v tabulce VII, úhly mezi vazbami v tabulce VIII a charakteristické torsní úhly v tabulce IX, dokazují strukturu (B), navrhovanou a zobrazenou na obr. 3.

Umístění vodíku N(H) na N(25) je ověřeno těmito skutečnostmi:

- atom H blízký N(25) byl nalezen ve Fourierově mapě rozdílů,

- intramolekulámí vodíková vazba N(25)-H...N(3) [-x,l-y,-l-z] je přítomna v krystalové mřížce (obr. 5),

- ze čtyř endocyklických úhlů X-N-Y je největší úhel N(24)-N(25)-N(26) (114,3°), zatímco tři zbývající jsou menší než 110° (obr. 4); podle teorie VSEPRje odpuzování dvojice osamělých elektronů silnější než ve vazbě N-H.

V důsledku toho je forma B v pevném stavu ve formě 2H-l,2,3,4-tetrazolového tautomeru.

Dosud se nepodařilo získat monokrystal formy A, schopný rentgenové analýzy. Mikroskopickým zkoumáním bylo zjištěno, že krystaly nové formy B jsou morfologicky odlišné od formy A.

Forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en4-onu podle vynálezu je stejně účinná jako antagonista receptoru angiotensinu II a alespoň stejně tak biodisponibilní jako známá forma A. Díky své malé elektrostaticitě oproti formě A je tedy

-14CZ 288629 B6 zvlášť vhodná pro výrobu farmaceutických přípravků pro ošetřování všech nemocí, u nichž je indikován antagonista angiotensinu II, zejména hypertense.

Elektrostaticita forem A a B byla stanovena měřením triboelektrocity provedeným následujícím způsobem. Testovaná sloučenina se vystaví tření po dobu 5 minut kontaktem s kuličkami z nerezavějící ocele v bubnu otáčejícím se rychlostí 100 otáček za minutu (nerezavějící ocel je klasickým materiálem, se kterým se účinné látky dostávají do styku při výrobě galenických forem, které tyto účinné látky obsahují). Ve Faradayově kleci se potom změří náboj v nanocoulombech (nC), kteiý se akumuloval v 1 g testovaného produktu, přičemž byly pro uvedené dvě formy zjištěny následující hodnoty:

forma A: -53 plus minut 4 nC/g;

forma B: -10 plus minus 1 nC/g.

Z těchto hodnot je zřejmé, že forma A se velmi nabijí elektrostatickou elektřinou, zatímco forma B se nabijí elektrostatickou elektřinou výrazně méně.

Podle dalšího aspektu jsou tedy předmětem vynálezu farmaceutické kompozice obsahující jako účinnou složku formu B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4] non-l-en-4-onu, charakterizovanou profilem difrakce rentgenových paprsků prášku, uvedených v tabulce I.

Přednostně je forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4] non-l-en-4-onu podle vynálezu formulována do farmaceutických kompozic pro orální aplikaci, obsahující 1 až 500 mg účinné složky na dávkovou jednotku ve směsi s farmaceutickým nosičem.

Jestliže se připravuje kompozice ve formě tablet, mísí se hlavní účinná složka s farmaceutickým vehikulem, jako je želatina, škrob, laktóza, stearát hořečnatý, talek, arabská guma apod. Tablety je možno povlékat sacharózou nebo jinými vhodnými látkami neboje možno je zpracovávat tak, aby měly prolongovanou nebo retardovanou účinnost a aby uvolňovaly kontinuálním způsobem předem určené množství účinné složky.

Ve formě kapslí se získává smísením účinné složky s ředidlem a převedením získané směsi do formy měkkých nebo tvrdých kapslí.

Prášky nebo granule, dispergovatelné ve vodě, mohou obsahovat účinnou složku ve směsi s dispergačními prostředky nebo smáčedly nebo s prostředky pro vedení do suspenze, jako je polyvinylpyrrolidon, stejně jako se sladidly nebo chuťovými korigencii.

Požaduje-li se formulace účinné složky pro rektální aplikaci, používají se čípky, které se připravují s pojivý, tajícími při rektální teplotě, například kakaovým máslem nebo polyetylenglykoly.

Pro parenterální aplikaci se používají vodné suspenze, fyziologické roztoky nebo sterilní injekční roztoky, které obsahují farmakologicky kompatibilní dispergátory a/nebo smáčedla, například propylenglykol nebo butylenglykol.

Účinná složka může být rovněž formulována ve formě mikrokapslí, popřípadě s jedním nebo několika nosič nebo přísadami.

-15CZ 288629 B6

Příklady provedení vynálezu

Pro osvětlení vynálezu, avšak nikoli pro jeho omezení, jsou uvedeny příklady. Zkratka THF označuje tetrahydrofuran.

Příklad 1

a) Směs 1 kg 2-n-butyl-3-[(2'-kyanobifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4onu, 713 g hydrochloridu triethylaminu, 337 g azidu sodného ve 2 1 l-methylpyrrolidin-2-onu se za míchání 12 h zahřívá na teplotu 121 až 123 °C a pak se nechá vychladnout až na teplotu 40 až 50 °C. Za míchání se přidá 35% vodný roztok hydroxidu sodného a voda a po dobu 30 min se pokračuje v míchání při teplotě 20 až 40 °C. Míchání se zastaví, směs se nechá dekantovat, vodná fáze se odstraní a organická fáze se zpracuje směsí voda/toluen 5:2. Směs se míchá 30 min při 20 až 30 °C, pak se míchání zastaví, provede se dekantace, organická fáze se odstraní, vodná fáze se promyje přídavkem ethylacetátu za míchání a získává se vodná fáze, obsahující sodnou sůl 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu.

b) K takto získanému vodnému roztoku, majícímu pH 9 až 11, se pomalu přidá 36% kyselina chlorovodíková do dosažení pH 4,7 až 5.3. Po skončení přídavku kyseliny chlorovodíkové je dokončeno sražení 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l ,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu. Získaná suspenze se 1 h míchá pří 20 až 25 °C, získá se produkt, odvodní se při 20 až 25 °C a promyje vodou. K takto získanému produktu se přidá směs 500 ml isopropanolu a 4,5 I vody, pak se směs 1 h zahřívá na 50 až 55 °C. Ochladí se na 20 až 25 °C, po 1 h na této teplotě se produkt dobře odvodní, krystaly se promyjí vodou a vysuší při 60 °C. Při jedné přípravě bylo získáno 949 g surového 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, částečně amorfního, o čistotě 98 (výtěžek 86%).

c) K takto získanému produktu se přidá 16 1 isopropanolu a získaná směs se zahřívá za refluxu do úplného rozpuštění. Směs se ponechá navrátit na teplotu okolí, odfiltruje se krystaly, promyje se vodou a vysuší. Při stejné přípravě bylo získáno 901,6 g formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, identického s produktem, popsaným C.A. Bemhartem a d., J. Med. Chem., 1993, 36, 3371-3380. Takto získané krystaly jsou silně elektrostatické.

Příklad 2

Při jiné přípravě za podmínek, uvedených ve stupních (a) a (b) příkladu 1, bylo získáno 970 g surového 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en4-onu, částečně amorfního, o čistotě 0,8 % (výtěžek 88 %).

c) K takto získanému produktu se přidá 7,76 1 95% ethanolu a 1,94 1 vody. Směs se přivede k refluxu, zahřívá 10 min, zahřívání se přeruší a provede se očkování několika krystaly formy B. Směs se ponechá pomalu za míchání navrátit na teplotu okolí, pak se ochladí na 15 °C, promyje směsí ethanol/voda 1:4, odvodní a vysuší při 60 °C za sníženého tlaku. Při této přípravě bylo získáno 905,8 g formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4]non-l-en-4-onu s teplotou tání 185,6°C a profilem rentgenové difrakce uvedeným v tabulce I. Krystaly formy B jsou velmi málo elektrostatické.

-16CZ 288629 B6

Příklad 3

K 10 g formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl—4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non1-en^l-onu se přidá 80 ml 95% ethanolu a 20 ml vody a takto získaná směs se zahřívá 10 min k refluxu až do homogenizace roztoku. Směs se ponechá za míchání navrátit na teplotu okolí, pak se ochladí na 15 °C, promyje směsí ethanol/voda 1:4, odvodní a suší při 60 °C. Při této přípravě bylo získáno 8,9 g (89 %) formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]—1,3— diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu se stejnými charakteristikami jako v příkladu 2.

Příklad 4

Ke 3 g formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]nonl-en-4-onu se přidá 100 ml vodného roztoku o pH 2, okyseleného kyselinou chlorovodíkovou, a pak se míchá 24 h při teplotě okolí (20 až 25 °C). Krystaly se odfiltrují a vysuší za sníženého tlaku při teplotě okolí. Získá se tak forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4,4]non-l-en-4-onu, identická s produktem příkladu 3.

Příklad 5

Ke 3 g formy B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4,4]nonl-en-4-onu, získané podle příkladu 3, se přidá 45 ml isopropanolu. Směs se zahřívá 10 min k refluxu, za míchání se ponechá navrátit na teplotu okolí, pak se ochladí na 15 °C, přefiltruje, odvodní a vysuší při 60 °C za sníženého tlaku. Získá se tak forma A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu.

Příklad 6

S použitím formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4]non-l-en-4-onu se pracuje přesně, jak je uvedeno v příkladu 5, avšak po 10 min refluxu se provede naočkování několika kiystaly formy B a pokračuje se v krystalizaci, jak popsáno v uvedeném příkladu. Získá se forma A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu, obsahující stopy formy B.

Příklad 7 až 9

S použitím formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4]non-l-en-4-onu se postupem, popsaným v příkladu 3, avšak s obměnami poměru 95% ethanolu a vody, získají výsledky, uvedené v tabulce X.

Tabulka X

příklad	ethanol/voda v/v	očkování	výsledek
7	12/3	forma B	čistá forma B
8	5/1	forma B	čistá forma B
9	6, 3/5	-	čistá forma B

Pozn.: objemové poměry v/v ukazují ml rozpouštědel na g výchozí formy A.

-17CZ 288629 B6

Příklad 10

Ke 3 g formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]nonl-en—4-onu se přidá 30 ml isopropanolu a 15 ml vody a směs se zahřívá 10 min k refluxu, načež se pracuje, jak uvedeno v příkladu 3. Získá se tak forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu.

Příklad 11 až 14

S použitím formy A 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro- [4.4]non-l-en-4-onu se postupem, popsaným v příkladu 3, avšak s obměnami organického rozpouštědla a poměru v/v (ml rozpouštědel na mg výchozí formy A), získají výsledky, uvedené v tabulce XI.

Tabulka XI

příklad	rozpouštědla	v/v	očkování	výsledek
11	THF/voda	11/1,5	—	čistá forma B
12	methanol/voda	8/2	forma B	čistá forma B
13	aceton/voda	18/2	forma B	čistá forma B
14	acetonitril/voda	8/2	forma B	čistá forma B

Příklad 15

a) K roztoku 3g draselné soli 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyM-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu ve 30 ml vody se přidá roztok kyseliny chlorovodíkové do pH 4,7. Směs se míchá, pak se získá takto vysrážený surový 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on a vysuší se při 55 °C za sníženého tlaku.

b) K 1 g takto získaného produktu se přidá 24 ml 95% ethanolu a 6 ml vody a směs se zahřívá 10 min k refluxu. Postupem, popsaným v příkladu 3, se pak získá forma B 2-n-butyl-3-[[2'(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu.

Příklad 16

Farmaceutická kompozice pro orální podávání, obsahující jako účinnou složku formu B 2-nbutyl-3-[[2'-(tetrazo-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-onu.

účinná složka	25,0 mg
laktóza (Lactose Extra Fine Crystal HMS^R)	171,0 mg
kukuřičný škrob (Starch^R)	50,0 mg
talek	25,5 mg
bezvodá koloidní silika (Aerosil 200^R)	0,5 mg
stearát hořečnatý	1,0 mg

Složky se předběžně smísí a provede se předběžné prosátí, pak se směs promíchá dokonale a prosévá se dvakrát. Nakonec se takto získaná směs převede do formy kapslí o velikosti č. 0, obsahujících 273 mg výše uvedené směsi, odpovídající 25 mg účinné složky.

Claims

5 1. Forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyM-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-len^l-onu mající následující profil rentgenové difrakce prášku:

PATENTOVÉ NÁROKY

d I/I_o 11,22 100,00 7,90 12,02 7,52 13,79 7,23 18,60 6,27 20,14 6,09 6,47 5,86 7,42 5,60 98,76 5,41 19,45 5,05 24,67 4,97 20,36 4,91 12,92 4,80 27,33 4,61 15,90 4.49 14,73 4,36 9,86 4,17 62,84 4,07 15,39 3,97 30,34 3,88 14,32 3,83 13,56 3,75 37,28 3,53 26,48 3,46 12,42 3,40 27,88 3,27 11,03 3,18 10,42 3,15 7,28 3,12 6,11 3,05 15,50 3,01 9,49 2,81 7,11 2,78 9,40

10 2. Forma B 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspÍro[4.4]non-len-4-onu podle nároku 1, mající teplotu tání 185 až 186 °C a charakteristické IR absorpce při 1537, 1200 a 745 cm’¹.

3. Způsob přípravy formy B podle nároku 1 nebo 2, vyznačený tím, že se

a) 2-n-butyl-3-[(2'-kyanobifenyl-4-yl)methyl]-l ,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on uvede v reakci s azidem alkalického kovu a triethylamin-hydrochloridem v inertním polárním aprotickém rozpouštědle při teplotě varu reakční směsi pod zpětným chladičem nebo při teplotě o 10 až 30 °C nižší než je teplota varu reakční směsi pod zpětným chladičem, načež

-19CZ 288629 B6 se takto získaný 2-n-butyí-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on izoluje ve formě jeho soli s alkalickým kovem ve vodném prostředí, a

b) takto získaná sůl 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro-

5 [4.4]non-l-en-4-onu s alkalickým kovem se ve vodném prostředí neutralizuje na hodnotu pH4 ,7 až 5,3, načež se

c) takto vysrážený produkt krystaluje z rozpouštědla mísitelného s vodou a obsahujícího 10 až 50 % obj. vody k izolaci 2-n-butyl-3-[[2'-(tetrazol—yl)bifenyl-4-yl]-l,3-diazaspiro- io [4.4]non-l-en-4-onu ve formě B.

4. Způsob podle nároku 3, v y z n a č e n ý tím, že se ve stupni a) použije jako azid alkalického kovu azid sodný, jako inertní polární aprotické rozpouštědlo se použije dimethylformamid nebo l-methylpyrrolidin-2-on a pracuje se při teplotě 110 až 140 °C.

5. Způsob podle nároku 3, vyznačený tím, že se ve stupni c) použije k izolaci formy B směs ethanolu a vody.

6. Způsob přípravy formy B podle nároku 1 nebo 2, vyznačený tíná, že se 2-n-butyl-

20 3-[[2'-(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4-on ve formě surového produktu rekiystalizuje z rozpouštědla mísitelného s vodou obsahujícího 10 až 50 % obj. nebo se jeho forma A rekrystalizuje z rozpouštědla mísitelného s vodou obsahujícího 10 až 100 % obj. vody.

25 7. Farmaceutická kompozice, vyznačený tím, že jako účinnou látku obsahuje formu B

2-n-butyl-3-[[2'(tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl]methyl]-l,3-diazaspiro[4.4]non-l-en-4_onu podle nároku 1 nebo 2.