CZ286793B6

CZ286793B6 - Injikovatelná farmaceutická kompozice

Info

Publication number: CZ286793B6
Application number: CS19911816A
Authority: CZ
Inventors: Flores Josue Garza; Soto Laura P. Laiseca; Pichardo Jose Guillen; Uribe Juan Angeles
Original assignee: Aplicaciones Farmaceuticas S. A. De C. V.
Priority date: 1990-06-14
Filing date: 1991-06-13
Publication date: 2000-07-12
Also published as: NO302998B1; DK0533739T3; IL98459A0; RU2104692C1; PL290677A1; JPH05507694A; UA27043C2; UY23240A1; HUT68709A; ATE109658T1; ES2059142T3; IL98459A; DE69103419T2; BG61179B1; IE912017A1; FR2663223B1; US5360616A; WO1991019484A1; ZA914550B; PL167234B1

Abstract

Vynález se týká injekčního přípravku se zpomaleným uvolňováním účinné látky ve formě kapalné suspenze pevných částic, jehož podstata spočívá v tom, že jako pevné částice obsahuje neporézní mikrosféry, mající průměr 1 až 300 mikrometrů a obsahující alespoň 85 hmotn. % alespoň jedné farmaceuticky účinné látky, přičemž tyto mikrosféry jsou prosté farmaceuticky neúčinného vehikula. Je popsán i způsob výroby uvedeného injekčního přípravku.ŕ

Description

Injekční přípravek a způsob jeho přípravy

Oblast techniky

Vynález se týká injekčního přípravku se zpomaleným uvolňováním účinné látky ve formě kapalné suspenze pevných částic a způsobu výroby tohoto injekčního přípravku.

Dosavadní stav techniky

Biologicky účinné látky málo rozpustné ve fyziologickém prostředí již byly použity ve formě suspenze částic a v této formě podávány intramuskulámí injekcí za účelem pomalého rozpouštění účinné látky a tedy a účelem dosažení prolongovaného účinku účinné látky v lidském nebo zvířecím organismu. Tak byly například testovány směsi norethistoronu a mestranolu ve formě krystalického prášku ve vodné suspenzi a to za účelem přípravy intramuskulámě injikovatelných antikoncepčních prostředků (J. Garza Flores a kol., Contraception, květen 1988, sv. 35, č. 5, 471-481).

Pravděpodobně v důsledku nepravidelnosti v granulometrii a v nerovnoměrnosti ve tvaru částic mají tyto dosud známé kompozice obecně několik nedostatků:

- křivka uvolňování účinných látek vykazuje vysoký pík bezprostředně po injekci a křivka potom klesá, což zvyšuje celkovou dávku nezbytnou k dosažení dostatečně trvanlivého účinku;

- v suspenzi se příležitostně tvoří chuchvalce anebo vrstvy;

- je nezbytné použít hypodermické jehly s velkým průměrem, aby se vyloučilo riziko ucpání výstupu z injekční stříkačky.

V evropském patentu EP 257 368 /Američan Cyanamid Co./ se popisuje kompozice pro parenterální použití, tvořená mikrosférami z tuků a/nebo vosků přírodního nebo syntetického původu s nízkou teplotou tání /40 až asi 60 °C/, které obsahují částice polypeptidu, například růstového hormonu. V případě, že jsou tyto kompozice injikovány hovězímu dobytku, dochází v důsledku zapouzdření do vosku nebo tuku k retardovanému rozpouštění růstového hormonu, což má za následek prodloužení jeho přítomnosti v živočišném organismu a zintenzivnění růstu nebo laktace. Popsané mikrosféry však mají sklon k měknutí, deformaci, aglutinaci a koalescenci v případě, kdy dojde ke zvýšení okolní teploty, zejména v tropických krajích /40 až 60 °C/, což může způsobit problémy při manipulaci s takovými kompozicemi a při skladování takových kompozic.

Vzhledem k tomu, že množství účinného polypeptidu v částici je prakticky omezeno na 30 až 40 %, má injekce těchto částic rovněž nevýhodu spočívající v tom, že se do organismu injikuje značné množství nosiče, který je organismu cizí /včelí vosk, tuk rostlinného, minerálního nebo syntetického původu, atd./ a jehož množství tvoří asi 1,5 až 3násobek množství účinné látky.

V minulosti byly používány i další zapouzdřovací a mikrokapslové techniky, z nichž některé jsou popsány například v „Encyclopedia of Chemical Technology“, 3. vysání, sv. 15, str. 470-493 /1981/, nakl. John Wiley and Sons. Mikrokapsle, vytvořené těmito postupy, často obsahují „centrální“ částice velmi rozdílné velikosti nebo případně neobsahují tyto centrální částice vůbec.

Mikrosféry nebo mikrokapsle, spadající do dosavadního stavu techniky, umožňují zpomalené rozpouštění a tedy i globálně retardované uvolňování účinných látek. Nicméně vzhledem k tvarové a rozměrové různorodosti centrálních částic nebo ultrajemných částic v dispergovaném

-1 CZ 286793 B6 stavu, které mohou být zapouzdřené v kapslích podobných rozměrů, není rychlost uvolňování účinné látky stejnoměrná, přičemž neexistuje žádná jemná regulace uvolňování účinné látky a rovněž není dokonce možné citlivě programovat uvolňování účinné látky v závislosti na čase.

Vzhledem k tomu není reprodukovatelnost a spolehlivost takto získaných výsledků dostatečná pro některá použití odpovídajících formulací ve farmakologické oblasti, například při použití těchto formulací jako antikoncepčních prostředků, což představuje překážku pro použití takových formulací v praxi ve velkém měřítku.

Uvedené programované uvolňování účinné látky je nicméně žádoucí zejména v případě, kdy účinek biologicky účinné látky musí koincidovat s přirozeným biologickým cyklem lidského nebo zvířecího organismu (například s menstruačním cyklem), nebo kdy je důležité (například v případě analgetika, alkaloidu, tonikardiaka a pod.), aby byla regulována množství látky, uvolněná za časovou jednotku, za účelem vyvarování se časové periody, ve které by mohlo dojít k předávkování nebo poddávkování organismu v okamžiku injekce, následující po injekci předcházející.

Podstata vynálezu

Vynález se týká injekčního přípravku se zpomaleným uvolňováním účinné látky ve formě kapalné suspenze pevných částic, jehož podstata spočívá v tom, že jako pevné částice obsahuje neporézní mikrosféry, mající průměr 1 až 300 mikrometrů a obsahují alespoň 85 hmotn. % alespoň jedné farmaceuticky účinné látky, přičemž tyto mikrosféry jsou prosté farmaceuticky neúčinného vehikula.

Výhodné mají mikrosféry průměr 5 až 100 mikrometrů a teplotu tání vyšší než 60 °C. Výhodně mikrosféry dále obsahují farmaceuticky přijatelné přísady, působící jako stabilizátory nebo strukturní činidla, avšak neplnící funkci vehikula. Výhodně je farmaceuticky účinné látka zvolena z množiny, zahrnující steroidy, výhodně progesteron a 17p-estradiol. Rovněž výhodně je farmaceuticky účinná látka zvolená z množiny, zahrnující analgetika. Výhodně je farmaceuticky účinnou látkou naproxen nebo indomethacin. Výhodně se jedná o injekční přípravek, určení pro výrobu kontraceptiva, podávaného parenterální injekcí, ve kterém jsou mikrosféry tvořeny směsí mikrosfér progesteronu, majících průměr 1 až 300 mikrometrů, a mikrosfér 17P~estradiolu, majících průměr 1 až 300 mikrometrů.

Vynález se také týká způsobu výroby uvedeného injekčního přípravku, jehož podstata spočívá v tom, že zahrnuje a) roztavení alespoň jedné farmaceuticky účinné látky v inertní atmosféře, b) rozprášení alespoň jedné takto roztavené farmaceuticky účinné látky pod tlakem inertního plynu 0,05 až 0,15 MPa a mlhu kapiček, c) rychlé zmrazení získané mlhy kapiček v chladné atmosféře, mající teplotu 5 °C až -50 °C, přičemž zmrazení mlhy kapiček se provede v době nejvýše rovné 0,6 s, d) dělení takto získaných mikrosfér na granulometrické frakce, e) získané frakce mikrosfér, majících průměr 1 až 300 mikrometrů, výhodně 5 až 100 mikrometrů, f) suspendování mikrosfér, získaných ve stupni e), ve farmaceuticky přijatelném kapalném nosiči, zvoleném z množství, zahrnující vodné roztoky a oleje, a případně g) přidání do suspenze, získané ve stupni f), farmaceuticky přijatelných přísad, působících jako stabilizátory nebo strukturní činidla, avšak ne plnících funkci vehikula.

Výhodně se dělení získaných mikrosfér na granulometrické frakce ve stupni d) provádí se tak, že více než 70 % mikrosfér má průměr 70 až 130 % výše specifikovaného průměru. Výhodně je kapalným nosičem látka, ve které jsou farmaceuticky účinné látky nerozpustné.

-2CZ 286793 B6

Rychlost rozpouštění mikrosféry v daném rozpouštědlovém prostředí (předpokládané výhodné prostředí: interní fyziologické prostředí) je v podstatě funkcí poloměru mikrosféry vzhledem ke vztahům, existujícím mezi objemem, povrchem a poloměrem mikrosféry.

Skutečnost, že se používají pevné neporézní mikrosféry, umožňuje znát poměr hmotnost/povrch částic a tedy ovládat díky volně kalibru mikrosfér, tj. díky volbě poloměru a distribuce poloměrů mikrosfér, kontrolní parametr, na kterém závisí stupeň uvolňování podávané účinné látky nebo podávaných účinných látek. Táž přesnost kontroly umožňuje v rámci zabránění předávkování nebo kompenzace poddávkování omezit celkové množství biologicky aktivní látky, nebo biologicky aktivních látek, určené pro terapeutické podání, na minimální množství, nezbytné pro dosažení požadovaného terapeutického účinku; tím se u pacientů omezí riziko výskytu nežádoucích vedlejších účinků.

V případě, že jsou použity ve formě čistých účinných látek, mají mikrosféry podle vynálezu oproti zapouzdřeným nebo mikrokapslovaným částicím známého stavu techniky výhody spočívající v tom, že se při jejich použití sníží objem pevné látky, který musí být injikován živému organismu. Výhoda mikrosfér podle vynálezu je rovněž to, že do organismu nezavádějí více nebo méně degradovatelné zbytečné farmaceutické pomocné látky.

Další výhodou je to, že se v mikrosférách podle vynálezu nepoužívá pomocná látka s nízkou teplotou tání (nižší než 60 °C), která má tendenci k tomu, že jednotlivé mikrosféry vzájemné aglutinutí, což může vyvolat nežádoucí jev v okamžiku injekce.

V mikrosférách mohou být rovněž obsaženy přísady, které nejsou přímo farmakologicky účinné na příjemcův organismus alespoň v požadovaném terapeutickém smyslu a které netvoří základ sférické struktury. Tyto přísady mohou zahrnovat různé farmaceuticky přijatelné prostředky, zlepšující stabilitu nebo chemickou integritu látek nebo celku struktury. Mezi tyto látky patří například povrchově aktivní látky, antioxidační přísady, antimikrobiální prostředky a pufry. Obzvláště užitečným se ukázalo snížení teploty tání nebo zabránění rozkladné reakce v průběhu přípravy /například roztavením-zmrazením/ mikrosfér.

Ve srovnání se suspenzemi čistých účinných látek ve formě částic nepravidelných tvarů, zahrnutých do známého stavu techniky, spočívá výhoda mikrosfér podle vynálezu v tom, že mají menší sklon k aglutinaci a že plynuleji prochází hypodermickou jehlou. Kromě toho mikrosféry mohou být jemněji a spolehlivěji tříděny a rozdělovány podle jejich velikosti než obdobné části, které však mají nepravidelný tvar.

Galenická formulace podle vynálezu může mít formu mikrosférového prášku v lékovce, připraveného k suspendování, nebo formu již připravené suspenze vampuli nebo přímo v injekční stříkačce, připravené k podání v rámci humánní nebo veterinární terapie. Suspendačním prostředí může být véda, fyziologický roztok, olej obsahující pufiy, povrchově aktivní látky a konzervační prostředky, které se obvykle používají v injikovatelných suspenzích, nebo jakákoliv látka nebo kombinace látek, která neohrožuje fyzikální a chemickou integritu suspendovaných látek a je přijatelná pro příjemcův organismus. V případě, že je žádoucí vyvarovat se počátečního prudkého zvýšení koncentrace účinné látky v interním prostředí příjemcova organismu, potom je výhodné v případě suspenzí, připravených k použití, použít kapalný nosič, ve kterém jsou účinné látky prakticky nerozpustné. V případě účinných látek, které jsou částečně rozpustné ve vlažném kapalném nosiči, však nerozpustné v chladném kapalném nosiči, je výhodné vyvarovat se tvorby sraženin tím, že se připraví formulace, ve které jsou mikrosféry v prášku a kapalný nosič vzájemně odděleny a smísí se teprve bezprostředně před podáním uvedené formulace.

Při veterinárních aplikacích, kdy požadovaná doba účinku může být velmi dlouhý /například období laktace u dospělé samice/, je možné použít průměry několika stovek mikrometrů. Jestliže

-3CZ 286793 B6 je žádoucí zmenšit průměr jehly injekční stříkačky za účelem pohodlí pacienta, potom je dobré omezit průměr mikrosfér na 300 mikrometrů, výhodně na 100 mikrometrů. Naopak pro velmi krátké doby účinku (například při denním cyklu) může být průměr mikrosfér snížen na 1 mikrometr.

Pro většinu aplikací v humánní medicíně /doba účinku odpovídající nejvýše měsíčnímu cyklu/ je výhodné použít mikrosféiy, jejichž průměr je roven 5 až 100 mikrometrům, a to podle dané účinné látky.

Základní podmínkou pro přípravu galenické formy podle vynálezu je mít k dispozici šarže kalibrovaných mikrosfér, tj. soubory mikrosfér se stejnorodými průměry.

Třídění mikrosfér podle jejich průměru může být provedeno v průběhu jejich přípravy známými způsoby; je například možné použít cyklonové třídiče, sítové třídiče s odsáváním vzduchu nebo třídění na sítech ve vodném prostředí. V praxi je dostatečné, jestliže více než 70 % mikrosfér má průměry mezi 70 a 130 % specifikovaného průměru. V případě potřeby se lze přiblížit ideální rozpouštěcí křivce, stanovené pro zamýšlenou aplikaci, tím, že se smísí šarže, mající různé vhodné průměry. Kromě toho částice, neodpovídající daným požadavkům, mohou být recyklovány.

Způsoby převedení pevného produktu do formy mikrosfér mechanickou abrazí jsou známé. Ostatní způsoby používají například suspendování roztaveného produktu ve formě mikrokapiček za míchání v kapalném nosiči, se kterým není uvedený produkt mísitelný, a následné ztuhnutí uvedeného produktu.

V patrném spisu WO 90/13285 je popsán způsob přípravy porézních mikrosfér, získaných rozprášením zmrazením a lyofilizací v chladném plynu látek, které byly předběžně rozpuštěny v adekvátním rozpouštědle. Za účelem přípravy pevných a neporézních mikrosfér podle vynálezu se ukázalo výhodným vyvinout pro látky, které mohou být udržovány v chemicky stabilním stavu při teplotě, která je vyšší než jejich teplota tání, způsob, jehož podstata spočívá v tom, že se účinná látka, popřípadě smíšená s přísadami, v roztaveném stavu rozpráší pod tlakem a/nebo pomocí teplého plynu, načež se takto vytvořená mlha kapiček lychle zmrazí v chladném plynu.

Vzhledem k podmínkám použití ve farmakologické oblasti jsou formulace podle vynálezu obzvláště vhodné pro látky, jejichž teplota tání je vyšší než 60 °C a které jsou tepelně stabilní při teplotách vyšších, než je jejich teplota tání (nebo které mohou být učiněny tepelně stabilními pomocí přísad), aby byly schopné zpracování způsobem podle vynálezu. Rovněž může být použita přísada, která potlačuje fázový přechod, tj. přechod z pevné fáze do jiné pevné fáze, která by mohla učinit strukturu sféry křehkou. Způsob podle vynálezu je rovněž vhodný pro směsi účinných látek, tvořené pevnými roztoky jedné pevné látky v druhé.

Stručný popis obrázků

Na připojených výkresech:

- obrázek 1 znázorňuje schéma přípravy mikrosfér podle vynálezu,

- obrázek 2 ukazuje mikrosféry progesteronu (střední průměr 50 až 100 pm),

- obrázek 3 ukazuje mikrosféry 17-p-estradiolu,

- obrázek 4 ukazuje granulometrické rozdělení frakce (střední průměr 25 pm) sfér cholesterolu,

- obrázek 5 znázorňuje experimentální uspořádání pro stanovení rychlosti rozpouštění mikrosfér,

-4CZ 286793 B6

- obrázek 6 ukazuje srovnání rozpouštěcích profilů mikrosfér a krystalů progesteronu (50 až 125 pm),

- obrázek 7 ukazuje srovnání rozpouštěcích rychlostí mikrosfér a krystalů progesteronu ve formě derivace optické absorbance v závislosti na čase,

- obrázek 8 a 9 ukazují srovnání rozpouštěcích profilů mikrosfér a krystalů 17-P~-estradiolu (50 až 100 pm),

- obrázky 10 a 11 ukazují srovnání rozpouštěcích profilů mikrosfér a krystalů progeseronu (50 až 100 pm),

- obrázky 12 a 13 ukazují srovnání rozpouštěcích profilů mikrosfér a krystalů naproxenu,

- obrázky 14, 15 a 16 ukazují hladiny progesteronu v plazmě (králíka), získané injekcí olejového roztoku krystalů progesteronu s velikostí částic 44 pm a mikrosfér progesteronu s velikostí částic 44 pm,

- obrázky 17, 18 a 19 ukazují hladiny 17-|3-estradiolu v plazmě (králíka), dosažené injekcí olejového roztoku krystalů 17-p-estradiolu a mikrosfér 17-|3-estradiolu,

- obrázek 20 ukazuje hladiny naproxenu v plazmě (králíka), dosažené injekcí roztoku naproxenu (křivka 0), krystalů naproxenu (křivka 1) a mikrosfér naproxenu (křivka 2),

- obrázky 21 a 22 ukazují srovnání rozpouštěcích profilů mikrosfér a krystalů indomethacinu (50 až 100 pm).

V obrázcích 6 až 13 a 20 až 22 jsou údaje na ose úseček uvedeny v hodinách pro injekci, zatímco na obrázcích 14 až 19 jsou údaje, uvedené na ose úseček, uvedeny ve dnech po injekci.

V následující části popisu bude vynález blíže objasněn pomocí konkrétních příkladů jeho provedení. Tyto příklady mají pouze ilustrační charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen formulací patentových nároků.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava mikrosfér progesteronu

Jak je to patrné z obr. 1, vstupním vedením Al rozprašovacího zařízení se zavádí pod tlakem předehřátý dusík; tento dusík prochází potom teplotně regulovanou ohřívací zónou B, ve které se zahřeje na teplotu 125 až 130 °C, a to ještě předtím, než je zaveden do rozprašovače D. Rozprašovač D je spojen s hrdlem vyhřívané nádobky C, ve které je cholesterol udržován v roztaveném stavu /teplota = 130 °C/ a pod tlakem dusíku, přiváděným vstupem A2.

Cholesterol je strháván a unášen proudem dusíku, se kterým se mísí a vytváří ve výstupní trysce rozprašovače D mlhu, která proniká do rozprašovací-zmrazovací komory F. V zásobníku E je obsažen kapalný dusík, který se odpařuje a proniká jako velmi chladný plyn s velkou rychlostí několika trubkami do rozprašovací-zmrazovací komory F, ve které přichází do styku s uvedeno mlhou cholesterolu. Kapičky cholesterolu ihned po jejich vytvoření rozprašovačem jsou obklopeny proudem ledového plynu, který způsobí jejich krystalizací do tvaru mikrosfér a který jim takto zabrání dosáhnout stěn komory dříve než došlo k jejich úplnému ztuhnutí. Teplota na výstupu z rozprašovací-zmrazovací komory je -15 až -50 °C. Veškeré mikrosféry, vyrobené pomocí této komory F, mají dokonalou sférickou formu.

Na výstupu z rozprašovací-zmrazovací komory F se nachází dva cyklonové separátory GI a G2, uspořádané do série. Odtříděné mikrosféry se potom jímají v zásobnících H1 a H2; Nosný plyn prochází na výstupu zcyklonových separátorů dekontaminačním filtrem I, ve kterém panuje

-5CZ 286793 B6 mírný podtlak vzhledem k tlaku, panujícímu v prvním cyklonovém separátoru; tento podtlak se udržuje pomocí čerpadla. Získaná frakce cholesterolových mikrosfér je zobrazen na obr. 2, představujícím mikrofotografii těchto mikrosfér, získanou v elektronovém mikroskopu (střední průměr = 50 až 100 pm). Za účelem jemnější frakcionace mikrosfér může být počet cyklonových separátorů zvýšen.

Příklad 2

Při přípravě mikrosfér 17-fJ-estradiolu se použijí stejné pracovní podmínky (kromě TF = 185 °C) jako v předcházejícím příkladu 1, přičemž se dosáhne stejných výsledků.

Obrázek 3 ukazuje mikrofotografii frakce těchto mikrosfér se středním průměrem 100 pm.

Příklad 3

Granulometrické rozdělení

Mikrosféry cholesterolu se připraví stejným postupem, jako v příkladu 1, přičemž frakce se středním průměrem částic 25 pm vykazují granulopietrickou distribuci, která je ilustrována na obrázku 4.

Příklad 4

Příprava mikrosfér naproxenu

Použije se postup podle příkladu 1.

roztavení: při teplotě 160 °C v atmosféře dusíku, rozprášení: ventilem pří tlaku vzduchu 0,014 MPa, zmražení: vzduchem při teplotě -20 °C pod tlakem 0,4 MPa, izolace: v cyklonech, třídění: ve vodném prostředí na sítech podle granulometrie.

Příklad 5

Mikrosféry progesteronu

Použije se postup podle příkladu 1.

Pracovní podmínky:

roztavení: při teplotě 130 °C pod atmosférou dusíku, rozprášení: ventilem při tlaku vzduchu 7 kPa, zmrazení: vzduchem při teplotě -20 °C pod tlakem 0,4 MPa, izolace: v cyklonech, třídění: ve vodném prostředí na sítech podle granulometrie.

-6CZ 286793 B6

Příklad 6

Mikrosféry 17-[3-estradiolu

Použije se postup podle příkladu 1.

Pracovní podmínky:

roztavení: při teplotě 185 °C pod atmosférou dusíku, rozprášení: ventilem při tlaku vzduchu 0,014 MPa, zmrazení: vzduchem při teplotě -10 °C pod tlakem 0,3 MPa, izolace: v cyklonech, selekce: ve vodném prostředí na sítech podle granulometrie.

Příklad 7

Mikrosféry indomethacinu

Použije se postup podle příkladu 1.

Pracovní podmínky:

roztavení: při teplotě 165 °C v atmosféře dusíku, rozprášení: ventilem při tlaku vzduchu 0,011 MPa, zmrazení: vzduchem při teplotě -20 °C pod tlakem 0,4 MPa, izolace: v cyklonech, selekce, ve vodném prostředí na sítech podle granulometrie.

Srovnávací UV- a IR-spektrofotometrické analýzy před a po tvorbě mikrosfér

Ukazuje se nezbytným ověřit, že v průběhu procesu roztavení-zmrazení nedochází k chemické degradaci použitých látek, což by v případě, že k takové degradaci dochází, mohlo modifikovat terapeutický účinek použitých látek. Srovnávají se výchozí látka ve formě krystalů a mikrosféry, získané procesem rozprášení-zmražení. Toto srovnání se provádí spektrofotometrickou analýzou v UV- a IR-světle. Gryfy „před“ a „po“ musí být vždy v UV- a IR-oblasti superponovatelné. V případě, že se v infračervené oblasti zjistí nějaké rozdíly v získaných křivkách, potom je vhodné ověřit, zda tyto rozdíly nebyly způsobeny polymorfním jevem, pomocí kapalinové chromatografie s vysokou rozlišovací schopností s uspořádáním diod. Rovněž je vhodné použití k tomuto účelu termografii, a to nejen za účelem přesného stanovení teplot tání, nýbrž také za účelem stanovení, zda nedochází k endotermi nebo exotermii, které by mohly odrážet strukturní modifikace nebo polymorfismus, které by mohly mít vliv na proces tvorby mikrosfér, a chemické degradace, způsobené roztavením.

Zařízení použité pro spektrografii v ultrafialovém světle: Hewlett Packard model 8452A s uspořádáním fotodiod s křemennou fotonkou se svazkem 0,1 cm.

Rozpouštědla: ethanol pro 17-beta-estradiol, progesteron a cholesterol; 0,lN kyselina chlorovodíková pro naproxen, 0,lN hydroxid sodný pro indomethacin.

Získané výsledky neukazují ani stopy degradace použitých látek.

Zařízení použité pro spektrografii v ultrafialovém světle:

-7CZ 286793 B6

Beckmann Acculab 10. Dispergační prostředí: bromid draselný.

Kapalinová chromatografie s vysokou rozlišovací schopností s uspořádáním diod: značka Waters s fotodiodou /array detector/ mod. Waters a N.E.C. Powermate 2 workstation.

Získané výsledky neukazují žádné zhoršení kvality indomethacinu, progesteronu, 17-betaestradiolu a naproxenu po jejich převedení do formy mikrosfér.

Termograf: Shimadzu DSC-50 Calormeter a CR4A workstation.

Teploty tání, stanovené pomocí diferenčních termogramů, ukazují, že nedošlo k chemické změně látek (příklad: teplota tání krystalů progesteronu: 130 °C; teplota tání mikrosfér progesteronu: 129 °C. Termogramy progesteronu a 17-[3-estradiolu ukazují pouze morfologickou modifikaci pevných krystalických fází.

Příklad 8

Rozpouštěcí křivky mikrosfér progesteronu

Teploty mohou být provedeny buď v čisté vodě nebo za účelem urychlení rozpouštění v prostředí, tvořeném směsí vody a polypropylenglykolu v poměru 1:1. Experimentrání uspořádání, použité při tomto testu, je zobrazeno na obrázku 5. Perfuzní buňka 1, obsahující testovaný vzorek, je zásobována rozpouštěcím prostředím z míchaného zásobníku 2; jak perfuzní buňka 1, tak i zásobník 2 jsou ponořeny do vodní lázně 3. Optická hustota rozpouštěcího prostředí se měří spektrofotometrem 4 a změřené rozpouštěcí prostředí se potom odvádí do zásobníku. Obvod doplňuje lapač bublin 5 a peristaltické čerpadlo 6.

Obrázek 6 ukazuje srovnání rozpouštěcích profilů mikrosfér (křivka 2) a krystalů (křivka 1) s granulometrií v rozmezí 50 až 125 pm, měřených změnou optické absorbance v závislosti na čase. Tento test se provádí v prostředí voda/PPG v poměru 50:50. Bylo zjištěno, že rozpouštění účinné látky je retardováno převedením účinné látky do formy mikrosfér.

Příklad 9

Opakuje se stejný postup jako v příkladu 8, avšak za použití 17-beta-estradiolu. Rozpouštěcí křivky jsou zobrazeny na obr. 7 (krystaly: 1, mikrosféry: 2).

Následující příklady ukazují srovnání reprodukovatelnosti výchozích částí rozpouštěcích křivek krystalů a mikrosfér stejného produktu se srovnatelnou granulometrií. Použitým přístrojem je přístroj, zobrazený na obrázku 5. Několik (3 až 6) měřicích obvodů (rozpouštěcí buňky a vedení), obsahujících identické vzorky, se paralelně připojí ktéže peristaltické pumpě a měření v těchto obvodech se provádí současně.

Soubor křivek ukazuje, že reprodukovatelnost výsledků a pravidelnost profilů rozpouštění jsou lepší v případě šarží mikrosfér než v případě šarží krystalů.

-8CZ 286793 B6

Příklad 10

Rozpouštění krystalů progesteronu (obrázek 11) a mikrosfér progesteronu (obrázek 10).

Rozpouštěcí prostředí: H₂O kvality HPLC s 0,01 % Tweenu 80, vzorek: 50 mg, granulometrie: 50 až 100 mikrometrů, intervaly měření: 0, 2, 4, 8, 14 a 20 hodin, vlnová délka spektrofotometrického měření: 240 nm.

Příklad 11

Rozpouštění mikrosfér naproxenu (obrázek 12) a krystalů naproxenu (obrázek 13). Použité zařízení je zobrazené na obrázku 5.

Rozpouštěcí prostředí: H₂O kvality HPLC s 0,01 % Tweenu 80, vzorek: 50 mg, granulometrie: 50 až 100 mikrometrů, intervaly měření: 0, 1,3, 6, 9, 12 a 24, vlnová délka spektrofotometrického měření: 232 nm.

Příklad 12

Rozpouštění mikrosfér 17-beta-estradiolu (obrázek 9) a krystalů 17-beta-estradiolu (obrázek 8). Použité zařízení je zobrazeno na obrázku 5.

Rozpouštěcí prostředí: H₂O kvality HPLC s 0,01 % Tweenu 80, vzorek: 50 mg, granulometrie: 50 až 100 mikrometrů, intervaly měření: 0,2,4 a 18 hodin, vlnová délka spektroskopického měření: 282 nm.

Souhrn křivek ukazuje, že reprodukovatelnost výsledků a pravidelnost rozpouštěcích profilů je lepší v případě mikrosfér než v případě krystalů v počáteční fázi rozpouštění (což je nekritičtější perioda).

Příklad 13

Injikovatelné formulace

Formulace č. 1

Mikrosféry progesteronu75 mg

Polyethylenglykol 80020 mg

Natriumkarboxymethylcelulóza 1,66mg

Polysorbát 80 2,0mg

Propylparaben 0,14mg

Chlorid sodný 1,2mg

H₂O cbp 1ml

-9CZ 286793 B6

Formulace č. 2

Mikrosféry 17-beta-estradiolu

Polyethylenglykol 800

Natriumkarboxymethylcelulóza

Polysorbát 800

Propylparaben

Chlorid sodný

H₂O cbp

Formulace č. 3

Mikrosféry naproxenu

Natriumkarboxymethylcelulóza

2,5 mg mg

1,66 mg

2,0 mg

0,14 mg

1,2 mg ml

100 mg

5,0 mg

4,0 mg

9,0 mg

9,0 mg ml

Polysorbát 80 Chlorid sodný Benzylalkohol H₂O cbp

Příklad 14

Studium hladiny progesteronu v plazmě králíka (obr. 14,15 a 16)

Tato studie zahrnuje srovnání účinků na hladinu progesteronu v plazmě králíka, dosažených parenterálním podáním progesteronu ve formě olejového roztoku (0), vodné suspenze krystalů (1) a vodné suspenze mikrosfér (2) (formulace č. 1, střední granulometrie: 44 pm).

Skupině 10 králičích samečků rasy Nový Zéland se střední hmotností 3,5 kg se podá jediná intramuskulámí dávka 150 mg progesteronu (2 ml).

Intervaly měření jsou: 1, 2, 4 a 24 hodiny v průběhu 20 dnů a potom další tři dny až k dosažení 30 dnů. Punkcí do žíly se odebírají 2ml vzorky, které se odstředí a uchovávají až do okamžiku radioimunoanalýzy při teplotě -20 °C.

Příklad 15

Studium hladiny estradiolu v králičí plazmě.

Tato studie zahrnuje srovnání účinků na hladinu estradiolu v králičí plazmě, dosažených parenterálních podáním estradiolu ve formě olejového roztoku (0), vodné suspenze krystalů (1) a vodné suspenze mikrosfér estradiolu (2) (formulace č. 2, granulometrie 50 až 100 pm).

Skupině osmi králičích samečků rasy Nový Zéland se střední hmotností 3,5 kg se podá jediná dávka (intramuskulámě), obsahující 5 mg estradiolu (2 ml).

Intervaly měření jsou 1, 2, 4 a 24 hodin během 20 dnů a potom každé tři dny až k dosažení 30 dnů. Punkcí do žíly se odebírají 2 ml vzorky, které se odstředí a potom uchovávají až do okamžiku radioimunoanalýzy při teplotě -20 °C.

-10CZ 286793 B6

Příklad 16

Srovnávací vývoj hladin naproxenu v plazmě (olejový vzorek a suspenze mikrosfér)

Pokusnými zvířaty při tomto testu jsou králíci rasy Nový Zéland, mající stáří asi 5 měsíců a střední tělesnou hmotnost 3,7 kg.

Jako referenční vzorek se srdeční punkcí odebere 5 ml krve, načež se králíkům intramuskulámě do pravého zadního běhu podají 2 ml testované formulace (formulace 3). Vzorky pro analýzu se odebírají ve 30minutových intervalech v průběhu dvou hodin a potom v 60minutových intervalech až k dovršení 6 dnů. Při některých testech (v závislosti na kinetických charakteristikách léčiva) se odebírají ještě dodatečně vzorky. 2ml vzorky k analýze, které byly rovněž odebrány srdeční punkcí, se zavedou do kyvet s obsahem heparinu a odstředí při 3000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut, načež se plazma oddělí a zmrazí v kryokyvetách při teplotě -20 °C až do okamžiku analýzy.

Obrázek 20 ukazuje, že změna plazmatické hladiny, dosažená pro injekci mikrosfér, je mnohem pravidelnější než změna, dosažená pro injekci částic libovolné formy (50 až 100 pm).

Veškeré výše uvedené výsledky ukazují, že v úvodní rozpouštěcí fázi vykazují farmaceuticky účinné látky reprodukovatelnější číselné hodnoty a pravidelnější profil rozpouštění v případě, že tyto účinné látky mají formu kalibrovaných mikrosfér, ve srovnání s nepravidelnou formou částic. To umožňuje přesněji vypočítat účinnou farmaceutickou dávku. Kromě toho zmizení nebo alespoň silné potlačení uvedeného počátečního rozpouštěcího píku /ve srovnání s krystaly nebo libovolnými částicemi/, stejně jako zpomalení a globální prolongování rozpouštěcího procesu umožňuje vypočítat větší unitární dávky, určené pro podání v mnohem delších časových intervalech.

Kromě toho výše uvedené výsledky ukazují, že použití tohoto typu struktury je vhodné jak pro výrobu léčiv, jejichž doba účinku má být relativně krátká, tj. několik hodin až několik dnů /například v případě analgetik/, tak i pro výrobu léčiv s plánovanou dobou účinku několika týdnů. Jakožto příklady posledně uvedených léčiv a přípravků je možné uvést zejména použití pohlavních hormonů /progesteron a 17-beta-estradiol/ pro výrobu antikoncepčních prostředků, určených pro měsíční injekce, nebo pro výrobu antikoncepčních prostředků, určených zejména pro ženy po porodu, anebo také pro výrobu léčiv s dlouhou dobou účinku, které jsou injikovatelné a určené pro prevenci osteoporózy u žen v období po skončení přechodu.

Výše popsaný způsob výroby mikrosfér, sférické struktury a získané formulace a jejich použití parenterálním injekčním podáním nejsou samozřejmě omezené na látky, uvedené zde formou příkladů, nýbrž jsou aplikovatelné na všechny farmakologicky účinné látky, které jsou chemicky stabilní při jejich převedení do formy mikrosfér, s podmínkou, že farmakokinetické modifikace, které umožňují mikrosféry /krátká nebo dlouhá doba účinku podle průměru mikrosfér, možnost regulace profilu účinné látky v plazmě/, představují terapeutickou výhodu nebo zvýšené pohodlí pacienta a že dávky určené k podání nepřekračují rozumný objem. Podle zamýšlené aplikace lze zvolit následující způsoby podání: hypodermická injekce, subkutánní injekce, intramuskulámí injekce, intraartikulámí injekce a nitropáteřní injekce.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Injekční přípravek se zpomaleným uvolňováním účinné látky ve formě kapalné suspenze pevných částic, vyznačený tím, že jako pevné částice obsahuje neporézní mikrosféry, mající průměr 1 až 300 mikrometrů a obsahující alespoň 85 hmotn. % alespoň jedné farmaceuticky účinné látky, přičemž tyto mikrosféry jsou prosté farmaceuticky neúčinného vehikula.
2. Injekční přípravek podle nároku 1, vyznačený tím, že mikrosféry mají průměr 5 až 100 mikrometrů.
3. Injekční přípravek podle nároku 1 nebo 2, vyznačený tím, že mikrosféry mají teplotu tání vyšší než 60 °C.
4. Injekční přípravek podle nároku 1 nebo 2, vyznačený tím, že mikrosféry dále obsahují farmaceuticky přijatelné přísady, působící jako stabilizátory nebo strukturní činidla, avšak neplnící funkci vehikula.
5. Injekční přípravek podle některého z nároků 1 až 4, vyznačený tím, že farmaceuticky účinná látka je zvolena z množiny, zahrnující steroidy.
6. Injekční přípravek podle nároku 5, vyznačený tím, že farmaceuticky účinnou látkou je progesteron.
7. Injekční přípravek podle nároku 5, vyznačený tím, že farmaceuticky účinnou látkou je 17|3-estradiol.
8. Injekční přípravek podle některého z nároků 1 až 4, vyznačený tím, že farmaceuticky účinná látka je zvolena z množiny, zahrnující analgetika.
9. Injekční přípravek podle nároku 8, vyznačený tím, že farmaceuticky účinnou látkou je naproxen.
10. Injekční přípravek podle nároku 8, vyznačený tím, že farmaceuticky účinnou látkou je indomethacin.
11. Injekční přípravek podle některého z nároků 1 až 4, určený pro výrobu kontraceptiva, podávaného parenterální injekcí, vyznačený tím, že mikrosféry jsou tvořeny směsí mikrosfér progesteronu, majících průměr 1 až 300 mikrometrů, a mikrosfér 17p-estradiolu, majících průměr 1 až 300 mikrometrů.
12. Způsob výroby injekčního přípravku podle některého z nároků 1 až 11, vyznačený tím, že zahrnuje a) roztavení alespoň jedné farmaceuticky účinné látky v inertní atmosféře, b) rozprášení alespoň jedné takto roztavené farmaceuticky účinné látky pod tlakem inertního plynu 0,05 až 0,15 MPa na mlhu kapiček, c) rychlé zmrazení získané mlhy kapiček v chladné atmosféře, mající teplotu 5 °C až -50 °C, přičemž zmrazení mlhy kapiček se provede v době nejvýše rovné 0,6 s, d) dělení takto získaných mikrosfér na granulometrické frakce, e) získání frakce mikrosfér, majících průměr 1 až 300 mikrometrů, výhodně 5 až 100 mikrometrů, f) suspendování mikrosfér, získaných ve stupni e), ve farmaceuticky přijatelném kapalném nosiči, zvoleném z množiny, zahrnující vodné roztoky a oleje, a případně g) přidání do suspenze,

-12CZ 286793 B6 získané ve stupni f), farmaceuticky přijatelných přísad, působících jako stabilizátory nebo strukturní činidla, avšak neplnících funkci vehikula.
13. Způsob podle nároku 12, vyznačený tím, že dělení získaných mikrosfér na 5 granulometrické frakce ve stupni d) se provádí tak, že více než 70 % mikrosfér má průměr 70 až

130 % průměru, specifikovaného v nároku 1.
14. Způsob podle nároku 12, vyznačený tím, že kapalným nosičem je látka, ve které jsou farmaceuticky účinné látky nerozpustné.