CZ282098B6 - Mikroorganismy rodu Klebsiela a způsob mikrobiologické výroby S-alfa-aminokarboxylových kyselin a amidů R-alfa-aminokarboxylových kyselin - Google Patents
Mikroorganismy rodu Klebsiela a způsob mikrobiologické výroby S-alfa-aminokarboxylových kyselin a amidů R-alfa-aminokarboxylových kyselin Download PDFInfo
- Publication number
- CZ282098B6 CZ282098B6 CZ951507A CZ150795A CZ282098B6 CZ 282098 B6 CZ282098 B6 CZ 282098B6 CZ 951507 A CZ951507 A CZ 951507A CZ 150795 A CZ150795 A CZ 150795A CZ 282098 B6 CZ282098 B6 CZ 282098B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- alpha
- formula
- microorganisms
- aminocarboxylic acid
- dsm
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 38
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 11
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title claims description 9
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 title claims description 6
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title claims description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 title description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- IVXQBCUBSIPQGU-UHFFFAOYSA-N piperazine-1-carboxamide Chemical compound NC(=O)N1CCNCC1 IVXQBCUBSIPQGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 claims description 9
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 claims description 8
- XIMBESZRBTVIOD-UHFFFAOYSA-N piperidine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1CCCCN1 XIMBESZRBTVIOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241000284708 Sarcophaga alpha Species 0.000 claims description 7
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 7
- 241000588756 Raoultella terrigena Species 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- RIOBEGOHZRAHCD-NTSWFWBYSA-N (2R,4S)-4-methylpiperidine-2-carboxamide Chemical compound C[C@H]1CCN[C@H](C1)C(N)=O RIOBEGOHZRAHCD-NTSWFWBYSA-N 0.000 claims 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical compound NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 abstract 6
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 12
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N d-xylitol Chemical compound OC[C@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N 0.000 description 6
- 108090000531 Amidohydrolases Proteins 0.000 description 5
- 102000004092 Amidohydrolases Human genes 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 2-nitrophenyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 0.000 description 4
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 4
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 4
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- VLJNHYLEOZPXFW-SCSAIBSYSA-N (2r)-pyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)[C@H]1CCCN1 VLJNHYLEOZPXFW-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 3
- RIOBEGOHZRAHCD-UHFFFAOYSA-N 4-methylpiperidine-2-carboxamide Chemical compound CC1CCNC(C(N)=O)C1 RIOBEGOHZRAHCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 3
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 3
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 3
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 3
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N L-Fucose Natural products C[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001334141 Rugopharynx alpha Species 0.000 description 3
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical class NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 3
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 3
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HOVAGTYPODGVJG-ZFYZTMLRSA-N methyl alpha-D-glucopyranoside Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HOVAGTYPODGVJG-ZFYZTMLRSA-N 0.000 description 3
- 108010078226 phenylalanine oxidase Proteins 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N pipecolic acid Chemical class OC(=O)C1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- PJVXUVWGSCCGHT-ZPYZYFCMSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;(3s,4r,5r)-1,3,4,5,6-pentahydroxyhexan-2-one Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO PJVXUVWGSCCGHT-ZPYZYFCMSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLJNHYLEOZPXFW-BYPYZUCNSA-N L-prolinamide Chemical class NC(=O)[C@@H]1CCCN1 VLJNHYLEOZPXFW-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 150000001122 L-sorboses Chemical class 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 2
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 description 2
- 230000009604 anaerobic growth Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 235000019534 high fructose corn syrup Nutrition 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 piperazinecarboxylic piperazinecarboxamide Chemical compound 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- YAHHFDSODKFKOV-ULDVYXPFSA-N (2s,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;(2r,3r,4s,5s)-2,3,4,5-tetrahydroxyhexanal Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O YAHHFDSODKFKOV-ULDVYXPFSA-N 0.000 description 1
- BRAOKWOECXLZDC-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-decahydroisoquinoline-1-carboxamide Chemical compound C1CCCC2C(C(=O)N)NCCC21 BRAOKWOECXLZDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNPTUOFTDDDSOA-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-decahydroquinoline-2-carboxamide Chemical compound C1CCCC2NC(C(=O)N)CCC21 SNPTUOFTDDDSOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZJHKKSBOGBKRL-UHFFFAOYSA-N 1,2-oxazolidine-2-carboxamide Chemical class NC(=O)N1CCCO1 PZJHKKSBOGBKRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTAPDLRVRYASRX-UHFFFAOYSA-N 1,3-oxazolidine-2-carboxamide Chemical class NC(=O)C1NCCO1 FTAPDLRVRYASRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDGXLVKDGGLWPF-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazolidine-2-carboxamide Chemical class NC(=O)C1NCCS1 YDGXLVKDGGLWPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GEJXSVNGWOSZPC-UHFFFAOYSA-N 1-piperideine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=NCCCC1 GEJXSVNGWOSZPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFLWZAHKUJNRML-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydroindole-1-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2N(C(=O)N)CCC2=C1 OFLWZAHKUJNRML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USWINTIHFQKJTR-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C1=C(S(O)(=O)=O)C=C2C=C(S(O)(=O)=O)C(O)=CC2=C1 USWINTIHFQKJTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQGQPWGMVBVZBE-UHFFFAOYSA-N 4-(aminomethyl)piperidine-2-carboxamide Chemical compound NCC1CCNC(C(N)=O)C1 PQGQPWGMVBVZBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRDIEHDJWYRVPT-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-hydroxynaphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC(O)=C2C(N)=CC=C(S(O)(=O)=O)C2=C1 LRDIEHDJWYRVPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWDNLIILAGRFEB-UHFFFAOYSA-N 4-cyanopiperidine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1CC(C#N)CCN1 ZWDNLIILAGRFEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IZSRJDGCGRAUAR-MROZADKFSA-M 5-dehydro-D-gluconate Chemical compound OCC(=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O IZSRJDGCGRAUAR-MROZADKFSA-M 0.000 description 1
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021591 Copper(I) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N D-pipecolic acid Chemical class OC(=O)[C@H]1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KLBQZWRITKRQQV-UHFFFAOYSA-N Thioridazine Chemical compound C12=CC(SC)=CC=C2SC2=CC=CC=C2N1CCC1CCCCN1C KLBQZWRITKRQQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008430 aromatic amides Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 150000001773 cellobioses Chemical class 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M copper(I) chloride Chemical compound [Cu]Cl OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- NTFOMPCTOJCWEK-UHFFFAOYSA-N imidazolidine-1-carboxamide Chemical class NC(=O)N1CCNC1 NTFOMPCTOJCWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 150000002692 maltoses Chemical class 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000006151 minimal media Substances 0.000 description 1
- ZKWFSTHEYLJLEL-UHFFFAOYSA-N morpholine-4-carboxamide Chemical compound NC(=O)N1CCOCC1 ZKWFSTHEYLJLEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 150000002972 pentoses Chemical class 0.000 description 1
- XSWHNYGMWWVAIE-UHFFFAOYSA-N pipradrol Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(O)C1CCCCN1 XSWHNYGMWWVAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000753 pipradrol Drugs 0.000 description 1
- LXWHOYSOMNNXRS-UHFFFAOYSA-N pyrazolidine-1-carboxamide Chemical class NC(=O)N1CCCN1 LXWHOYSOMNNXRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229960002784 thioridazine Drugs 0.000 description 1
- 150000003628 tricarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/006—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by reactions involving C-N bonds, e.g. nitriles, amides, hydantoins, carbamates, lactames, transamination reactions, or keto group formation from racemic mixtures
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/22—Klebsiella
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/38—Pseudomonas
- C12R2001/39—Pseudomonas fluorescens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/38—Pseudomonas
- C12R2001/40—Pseudomonas putida
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/852—Klebsiella
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/874—Pseudomonas
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/874—Pseudomonas
- Y10S435/876—Pseudomonas fluorescens
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/874—Pseudomonas
- Y10S435/877—Pseudomonas putida
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/878—Rhizobium
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Popsány jsou nové mikroorganismy rodu Klebsiella, které jsou schopné amidy .alfa.-aminokarboxylových kyslin, ve formě racemátu nebo jeho opticky aktivních isomerů, obecného vzorce I, kde A spolu s -NH- a -CH- znamená popřípadě substituovaný pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, zužitkovat jako jediný zdroj dusíku a amidy (RS)-.alfa.-aminokarboxylových kyselin shora definovaného vzorce I převést na kyselinu S-.alfa.-aminokarboxylovou obecného vzorce II, kde A má uvedený význam.ŕ
Description
(57) Anotace:
Popsány Jsou nové mikroorganismy rodu Klebsiella. které Jsou schopné amidy <i-aminokarboxylových kyselin, ve formě racemátu nebo jeho opticky aktivních isomerů, obecného vzorce I, kde A spolu s -NH- a -CHznamená popřípadě substituovaný pétičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, zužitkovat Jako Jediný zdroj dusíku a amidy (RS)-u-aminokarboxylových kyselin shora definovaného vzorce I převést na kyselinu S-u-aminokarboxylovou obecného vzorce II, kde A má uvedený význam.
O
< [)
Cti)
Mikroorganismy rodu Klebsiella a způsob mikrobiologické výroby S-a-aminokarboxylových kyselin a amidů R-a-aminokarboxylových kyselin
Oblast techniky
Vynález se týká nových mikroorganismů, které jsou schopné zužitkovat amid a-aminokarboxylové kyseliny ve formě racemátu nebo jeho opticky aktivních izomerů, obecného vzorce I
O (I).
ve kterém A spolu s -NH- a -CH- znamená popřípadě substituovaný pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, jako jediný zdroj dusíku a převést amid (RS)-a-aminokarboxylové kyseliny již definovaného vzorce lna S-a-aminokarboxylovou kyselinu obecného vzorce II
(Π), ve kterém A má jmenovaný význam. Tyto mikroorganismy, popřípadě jejich bezbuněčné enzymy, se používají pro nový způsob přípravy S-a-aminokarboxylových kyselin (vzorec II) a/nebo pro přípravu amidů R-a-aminokarboxylových kyselin obecného vzorce III
(III), kde A má jmenovaný význam.
S-a-aminokarboxylové kyseliny vzorce II, jako například kyselina S-a-pipekolinová, jsou důležité meziprodukty pro výrobu mnoha bioaktivních sloučenin, jako například pro Thioridazin nebo Pipradol (Ng-Youn-Chen a spol., J. Org. Chem., sv. 59, č. 8, 1994).
Dosavadní stav techniky
Vedle množství chemických štěpení racemátu kyseliny (RS)-pipekolinové, popřípadě jejích derivátů, jsou známé také biotechnologická štěpení racemátů. Tak popisuje například Huh a spol.
- 1 CZ 282098 B6 (Biosci. Biotech. Biochem., 56 (12), 2081-2082) štěpení racemátu kyseliny (RS)-pipekolinové pomocí R-aminokyselinové oxydázy. Přitom se specificky oxiduje R-izomer na kyselinu l-piperidein-2-karboxylovou. přičemž vznikne kyselina S-pipekolinová. Po chemické redukci kyseliny l-piperidein-2-karboxylové na kyselinu (RS)-pipekolinovou vznikne pak vlivem R-aminokyselinové oxidázy opět kyselina S-pipekolinová. Přitom stále více ubývá kyseliny Rpipekolinové. Analogický způsob přípravy S-prolinu je popsán v J. Ferm. Bioeng., 74, 189-190, 1992. Oba tyto způsoby jsou však nevýhodné v tom, že nejsou schůdné pro velkovýrobu. Dalším nedostatkem je, že se musí použít čištěná R-aminokyselinová oxidáza.
Dále je známo, že racemické estery kyseliny pipekolinové za působení lipázy z Aspergillus niger se přeměňují na kyselinu S-pipekolinovou a estery kyseliny R-pipekolinové (Ng-Youn-Chen a spol., 1994, ibid). Tento způsob má však ten nedostatek, že se kyselina S-pipekolinová získá s enantiomemí čistotou ee = 93 %.
Podstata vynálezu
Úkolem předloženého vy nálezu je poskytnout jednoduchý a technicky schůdný biotechnologický způsob výroby cyklických S-cc-aminokarboxylových kyselin, které se mohou izolovat s dobrou enantiomemí čistotou.
Tento úkol se řeší pomocí mikroorganismů podle nároku 1 a způsobem podle nároku 3.
Mikroorganismy podle vy nálezu se mohou izolovat ze vzorků půdy, kalu nebo odpadní vody za pomoci obvyklých mikrobiologických postupů. Podle vynálezu se izolace těchto mikroorganismů uskuteční tak, že se
a) obvyklým způsobem pěstují v médiu s amidem α-aminokarboxylové kyseliny (vzorec I) ve formě racemátu nebo jeho opticky aktivních izomerů jako jediným zdrojem dusíku a s vhodným zdrojem uhlíku
b) z kultury, získané pěstováním, se pak izolují takové, které jsou stabilní a jsou schopné přeměnit amid (RS)-ct-aminokarboxylové kyseliny (vzorec I) na S-a-aminokarboxylovou kyselinu (vzorec II).
K. tomu se mohou použít všechny mikroorganismy, které specificky obsahují tyto S-aminokyselinové amidázy. Účelně se podrobí selekci ty mikroorganismy, které zužitkují piperazinkarboxamid nebo pipekolinamid ve formě racemátu nebo opticky aktivních izomerů jako jediný zdroj dusíku. Výhodně se podrobí selekci ty mikroorganismy, které zužitkují piperazinkarboxamid nebo pipekolinamid jako jediný zdroj dusíku.
Jako zdroj uhlíku mohou mikroorganismy užít například cukry, alkoholické cukry, karboxylové kyseliny nebo alkoholy jako růstový substrát. Jako cukry se mohou použít hexózy, jako například glukóza nebo pentózy. Jako karboxylové kyseliny se mohou použít dikarboxylové kyseliny nebo trikarboxylové kyseliny, popřípadě jejich soli, jako například kyselina citrónová nebo sukcinát. Jako alkohol se může použít trojmocný alkohol, jako například glycerin. Výhodně se jako zdroj uhlíku používá trojmocný alkohol, jako glycerin.
Jako selekční a růstová média se mohou použít běžná média, používaná v oboru, jako například médium, obsahující minerální soli podle Kulla a spol., (Arch. Microbiol., 135, 1-7, 1983), nebo médium, popsané v tabulce 1. Výhodně se používá médium, popsané v tabulce 1.
-2 CZ 282098 B6
Během pěstování a selekce se účelně indukují účinné enzymy mikroorganismu. Jako enzymový induktor se může například použít piperazinkarboxamid, pipekolinamid nebo acetamid.
Účelně se pěstování a selekce uskutečňuje při teplotě od 15 do 50 °C, výhodně od 20 do 45 °C a při hodnotě pH mezi pH 5 a pH 10, výhodně mezi pH 6 a pH 9.
Výhodné mikroorganismy se specifickou aktivitou S-aminokyselinové amidázy jsou mikroorganismy, zužitkující piperazinkarboxamid rodu Klebsiella, zejména druhu Klebsiella pneumoniae s označením DSM 9175 a DSM 9176, nebo druhu Klebsiella terrigena s označením DSM 9174, jakož i jejich funkčně ekvivalentní varianty a mutanty. Tyto mikroorganismy byly uloženy 25. 04. 1994 u Německé sbírky mikroorganismů a buněčných kultur GmbH,
Mascheroderweg lb, D-38124 Braunschweig, podle Budapešťské úmluvy.
Pod pojmem funkčně ekvivalentní varianty a mutanty se rozumějí mikroorganismy, které mají v podstatě stejné vlastnosti a funkce jako původní mikroorganismy. Takové varianty a mutanty mohou náhodně vzniknout, například UV-ozářením.
Vědecký popis mikroorganismu DSM 9175, identifikovaný jako Klebsiella pneumoniae
Vlastnosti kmene buněčná forma šířka pm délka pm tyčinky
0,8-1,0
1,0-3,0 pohyblivost
Gram-reakce lyže 3 %ním KOH aminopeptidáza (Cemy) spory oxidáza kataláza růst anaerobní kyselina z (OF-test) glukózy aerobně glukózy anaerobně plyn z glukózy kyselina z (ASS) glukózy fruktózy xylózy erythritolu adonitu D-manózy
| L-rhamnózy | + | ||
| dulcitu | - | ||
| inositu | + | ||
| sorbitu | + | ||
| 5 | a-methyl-D-glukosidu | + | |
| cellobiózy | + | ||
| maltózy | + | ||
| laktózy | + | ||
| L-sorbózy | + | ||
| 10 | L-fukózy | - | |
| D-arabitolu | + | ||
| ONPG | + | ||
| 15 | ADH | - | |
| LDC | + | ||
| ODC | - | ||
| 20 | VP | + | |
| indol | - | ||
| 25 | tvorba H2S | - | |
| Simmonův citrát | + | ||
| fenylalanindesamináza | - | Zkratky: | |
| 30 | ureáza | - | ASS = kys. acetylsalicylová OF = oxidace-fermentace |
| hydro lýza | ONPG = O-nitrofenylgalaktosidáza | ||
| 35 | želatiny | - | ADH = alkoholdehydrogenáza |
| DNA | - | VP = Voges Proskauer |
Vědecký popis mikroorganismu DSM 9176, identifikovaný jako Klebsiella pneumoniae
Vlastnosti kmene buněčná forma šířka pm délka pm tyčinky
0,8-1,0
1,0-3,0 pohyblivost
Gram-reakce lyže 3 %ním K.OH + aminopeptidáza (Cemy) + spory
| CZ 282098 B6 |
| oxidáza | - |
| kataláza | + |
| růst anaerobní | + |
| kyselina z (OF-test) glukózy aerobně glukózy anaerobně | + + |
| plyn z glukózy | + |
| kyselina z (ASS) glukózy fruktózy xylózy erythritolu adonitu D-manózy L-rhamnózy dulcitu inositu sorbitu a-methyl-D-glukosidu cellobiózy maltózy laktózy L-sorbózy L-fukózy D-arabitolu | + + + + + + + + + + + + + + |
| ONPG | + |
| ADH | - |
| LDC | + |
| ODC | - |
| VP | + |
| indol | - |
| tvorba H?S | - |
| Simmonův citrát | + |
| fenylalanindesamináza | - |
| ureáza | - |
hydrolýza
-5CZ 282098 B6 želatiny
DNA
Vědecký popis mikroorganismu DSM 9174, identifikovaný jako Klebsiella terrigena
Vlastnosti kmene buněčná forma šířka pm délka pm tyčinky
0,8-1,0
1,0-2,0 pohyblivost
Gram-reakce lyže 3 %ním KOH + aminopeptidáza (Cemy) + spory oxidáza kataláza růst anaerobní+ kyselina z (OF-test) glukózy aerobně+ glukózy anaerobně+ plyn z glukózy+ kyselina z (ASS) glukózy+ fruktózy+ xylózy+ erythritolu adonitu+
D-manózy+
L-rhamnózy+ dulcitu inositu+ sorbitu+ α-methyl-D-glukosidu+ cellobiózy+ maltózy+ laktózy+
L-sorbózy+
L-fukózy+
D-arabitolu+
5-ketoglukonátu+
-6CZ 282098 B6
ONPG+
ADH
LDC+
ODC+
VP+ indol tvorba H2S
Simmonův citrát+ fenylalanindesamináza ureáza hydro lýza želatiny
DNA
Způsob přípravy S-a-aminokarboxylových kyselin obecného vzorce II
(II).
ve kterém A má jmenovaný význam, a/nebo amidů R-a-aminokarboxylových kyselin obecného vzorce III
(III).
NH O ve kterém A má jmenovaný význam, spočívá podle vynálezu v tom, že se v amidu (RS)-a-aminokarboxylové kyseliny obecného vzorce I
(I).
ve kterém A má jmenovaný význam, amid S-cc-aminokarboxylové kyseliny přemění pomocí specifických již popsaných mikroorganismů nebo pomocí bezbuněčných enzymů z těchto mikroorganismů na S-cc-aminokarboxylovou kyselinu a ta se izoluje, přičemž při biotransformaci vedle S-cc-aminokarboxylové kyseliny vzniká amid R-a-aminokarboxylové kyseliny, který se případně izoluje.
Edukty, amidy (RS)-a-aminokarboxylových kyselin obecného vzorce I
O
NH
(I), ve kterém A spolu s -NH- a -CH- znamená pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný, mohou být získány z odpovídajících aromatických amidů v oboru obvyklou hydrogenací.
Jako amidy aminokarboxy lových kyselin vzorce I s pětičlenným nasyceným heterocyklickým kruhem se mohou použít popřípadě substituovaný prolinamid, pyrazolidinkarboxamid, imidazolidinkarboxamid, oxazolidinkarboxamid, isoxazolidinkarboxamid, thiazolidinkarboxamid nebo triazolidinkarboxamid. Jako substituovaný prolinamid se může například použít indolinamid.
Jako amidy aminokarboxy lových kyselin vzorce I se šestičlenným nasyceným heterocyklickým kruhem se mohou použít piperazinkarboxamid, pipekolinamid, morfolinkarboxamid, perhydrochinolinkarboxamid (chinolinankarboxamid), perhydroisochinolinkarboxamid (isochinolinankarboxamid), perhydrochinoxalinkarboxamid (chinoxalinankarboxamid), které jsou rovněž popřípadě substituované. Zástupci amidů aminokarboxylových kyselin se substituovaným šestičlenným nasyceným heterocyklickým kruhem mohou být Ci-C4-alkyl-substituované, jako například 4-methylpipekolinamid, H2N-CH2-substituované, jako například 4-aminomethylpipekolinamid, nebo CN-substituované, jako například 4-kyanpipekolinamid. Výhodně se používá piperazinkarboxamid, pipekolinamid nebo 4-methylpipekolinamid.
Enzymy pro bezbuněčný systém lze získat v oboru běžným způsobem rozbitím mikroorganismů. Například lze pro tento postup použít ultrazvuk, Frenchovo tlakové zařízení nebo metodu s lysozymy. Tyto bezbuněčné enzymy se mohou také imobilizovat na vhodném nosiči.
Pro způsob jsou zvláště vhodné výše popsané specifické mikroorganismy druhu Klebsiella terrigena DSM 9174, Klebsiella pneumoniae DSM 9175 a DSM 9176, jakož i jejich bezbuněčné enzymy. Stejně vhodné jsou funkčně ekvivalentní varianty a mutanty popsaných mikroorganismů.
Biotransformace se může provádět po obvyklém napěstování mikroorganismů s buňkami v klidu (nerostoucí buňky, které již nepotřebují žádný zdroj uhlíku a energie) nebo s rostoucími buňkami.
Jako média pro postup s buňkami v klidu mohou sloužit v oboru běžná média, jako například předtím popsané médium s minerálními solemi podle Kulla a spol., 1983 (ibid), nízkomolekulámí fosfátové pufry, HEPPES-pufř, nebo médium, popsané v tabulce 1. Pro postup s rostoucími buňkami se obvykle používá médium, které obsahuje zdroj uhlíku a dusíku, jako
-8CZ 282098 B6 například komerčně běžná média nebo médium podle tabulky 1. Výhodně se při postupu použije médium podle tabulky 1.
Účelně se biotransformace provádí za jednorázového nebo kontinuálního přidávání amidu (RS)α-aminokarboxylové kyseliny tak, že koncentrace amidu (RS)-cc-aminokarboxylové kyseliny nepřesáhne 20 % hmotnostních, výhodně 10 % hmotnostních.
Hodnota pH média může být v rozmezí od pH 5 do pH 11, výhodně od pH 7 do pH 10.
Účelně se biotransformace provádí při teplotě od 25 do 65 °C, výhodně od 30 do 60 °C.
Po obvyklé reakční době od 1 do 100 hod je amid S-cc-aminokarboxylové kyseliny vzorce I úplně přeměněn na S-a-aminokarboxylovou kyselinu, přičemž vzniká také amid R-a-aminokarboxylové kyseliny.
Tímto způsobem získané S-a-aminokarboxylová kyselina a/nebo amid R-a-aminokarboxylové kyseliny lze izolovat obvyklými postupy zpracování, jako například okyselením, chromatografií nebo extrakcí.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
a) Izolace mikroorganismů, které jsou schopné zužitkovat racemický piperazinkarboxamid jako jediný zdroj dusíku:
Pro izolaci mikroorganismů, které jsou schopné zužitkovat racemický piperazinkarboxamid jako jediný zdroj dusíku, se použilo A-médium, jehož složení je uvedeno v tabulce 1. 100 ml tohoto média se dalo do 300 ml Erlenmeyerovy baňky a smíchalo s různými vzorky půdy (2 g) z provozního areálu firmy LONZA AG ve Visp. Švýcarsku. Baňky byly inkubovány v klidu při 30 °C po dobu 5 dnů. Pak se použil 1 ml tohoto A-média, aby se naočkovala čerstvá baňka se stejným médiem. Tato baňka byla opět inkubována za stejných podmínek. Celkově se tento obohacovací cyklus opakoval 5-krát. Potom byly tyto obohacené kultury rozetřeny na agarové médium (A-médium s 16 gf1 agaru) jako jednotlivé kolonie. Izolované mikroorganismy byly testovány následujícím kvalitativním testovacím systémem na stereoselektivní amidázy. Použily se jednotlivé kolonie pro naočkování 100 ml A-média do 300 ml Erlenmeyerových baněk. Tyto baňky byly tři dny inkubovány na třepačce při 30 °C, přičemž byly kultury již po jednom dni vymyty. Pak byly bezbuněčné supematanty kultur testovány na obsah kyseliny piperazinkarboxylové a piperazinkarboxamid pomocí tenkovrstevné chromatografie (silikagel, vyvíjecí rozpouštědlo: 11 dílů ethanolu, 6 dílů CHC13, 6 dílů NH4OH (25 %), důkaz pomocí ninhydrinu). Mikroorganismy, které přeměnily asi polovinu vneseného množství (RS)-piperazinkarboxamidu, byly použity pro biochemické testy ke zjištění, které kmeny obsahovaly S-specifické amidázy.
b) Biochemické testy pro indetifikaci mikroorganismů s S-specifickými amidázami:
Pro přípravu proteinového surového extraktu byly buňky kultivovány v 1 litru A-média při 30 °C a pak byly sebrány apromyty. 5 g buněk (mokrá váha) bylo resuspendováno v 10 ml 69 mMol fosfátového pufru, pH 7,0, a pomocí FRENCHR-tlakového zařízení byly buňky rozbity. Surové extrakty po odstředění 2 hodiny při 40 000 x g byly v porcích zmraženy při -20 °C. Pro určení stereoselektivity byly porovnávány hydrolyzáty R-prolinamidu a S-prolinamidu. K. tomu byl
-9CZ 282098 B6 použit následující enzymový test: objem assaye 1 ml, obsahující 69 mMol fosfátového pufru. pH 7.0. 100 - 800 pg proteinového surového extraktu, 2 mg S-prolinamid.HCl respektive R-prolinamid.HCI. doba inkubace 1 - 24 hodin, teplota inkubace 30 °C, detekce pomocí ninhydrinu po chromatografii na tenké vrstvě (viz nahoře). Amidázy kmenů DSM 9174, DSM 9175 a DSM 9176 ukázaly velmi pomalou hydrolýzu R-prolinamidu. Tyto kmeny byly použity pro přípravu opticky aktivních cyklických derivátů a-aminokyselin.
Surové extrakty kmenů DSM 9175 a DSM 9176 ukázaly při stejných podmínkách hydrolýzu (RS)-piperazinkarboxamidu a (RS)-pipekolinamidu. Změnou inkubační teploty a hodnoty pH roztoku assaye bylo zjištěno, že specifická aktivita amidáz byla nej vyšší mezi teplotou od 30 - 60 °C a hodnotou pH od 7 - 10.
Tabulka 1
A-médium:
Pro přípravu tohoto média bylo k dále popsanému minimálnímu médiu přidáno 2 gl'1 (RS)-piperazinkarboxamidu a 10 gl’1 glycerinu.
Minimální médium:
Koncentrace (mg/1)
Složení
| extrakt droždí | 500 |
| Na2SO4 | 100 |
| Na2HPO4 | 2000 |
| KH2PO4 | 1000 |
| NaČl | 3000 |
| MgCl2 x 6H2O | 400 |
| CaCl2 x 2H,O | 14,5 |
| FeCl3 x 6H2O | 0,8 |
| ZnSO4 x 7H2O | 100 x 10’3 |
| MnCl2 x 4H2O | 90 x 10’3 |
| H3BO3 | 300 x 10’3 |
| CoCl2 x 6H2O | 200 x 10’3 |
| CuC12 x 2H2O | ΙΟχ 10'3 |
| NíC12 x 6H2O | 20 x 10'3 |
| Na2MoO4 x 2H2O | 30 x 10’3 |
| EDTANa, x 2H2O | 5 |
| FeSO4 x 7H,0 | 2 |
Příklady 2-4
Příprava kyseliny S-piperazinkarboxylové
Pro přípravu kyseliny S-piperazinkarboxylové pomocí kmenů DSM 9174, DSM 9175 a DSM 9176 byly zvoleny následující podmínky. Pro biotransformaci byl použit 1,5 1 fermentor, vybavený řízením pH, o pracovním objemu 1 1. Pro fermentace bylo v A-médiu zvýšeno množství glycerinu na 30 gl'1 a množství (RS)-piperazinkarboxamidu na 20 gl·1. Buňky byly kultivovány při pH 7,0, teplotě 30 °C a provětrávání 0,5 lmin1. V jednom případě (příklad 4) byly buňky nejdříve kultivovány 16 hodin za těchto podmínek, pak byla teplota zvýšena na 40 °C a pH média bylo zvýšeno na 8,0. Po určitých časových intervalech bylo stanoveno množství
- 10CZ 282098 B6 vytvořené kyseliny S-piperazinkarboxylové pomocí chromatografie na tenké vrstvě a fermentace byla přerušena po 36 - 72 hodinách, kdy byla přibližně polovina použitého piperazinkarboxamidu přeměněna. K tomuto okamžiku byly optické hustoty buněčné suspenze při 650 nm mezi 6 a 10. Pro izolaci kyseliny S-piperazinkarboxylové byl bezbuněčný roztok zahuštěn za sníženého tlaku na 100 ml. Roztok byl okyselen koncentrovanou HCl na pH 1.0, aby kyselina vypadla jako dihydrochlorid. Izolovaná kyselina byla pře krystalizována v 0,1 m HCl a sušena. Pro stanovení ee-hodnoty (enantiomeric excess - enantiomemí přebytek) vytvořené kyseliny byla nejprve kyselina převedena na deriváty pomocí 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-(3-D-glukopyranosylisothiokyanátu a analyzována pomocí kapilární elektroforézy (podmínky kapilární elektroforézy jsou uvedeny v tabulce 2). Výsledky jsou popsány v tabulce 3.
Tabulka 2
Podmínky kapilární elektroforézy
| CE zařízení: Detektor: Pufe. | Hewlett-Packard HP3DCE Detektor Hewlett-Packard s diodovou řadou 10 mM Di-natriumhydrogenfosfátu, 10 mM kyselina borová, 150 mM Natriumdodecylsulfátu, pH 9,0 |
| Elektrolyt: | 900 ml pufru plus 100 ml methanolu |
| Kapilára: | HP G1600-61211 |
| Elektrické pole: | 20 kV |
| Proud: | ca. 24 - 30 μΑ |
| Teplota ohřívače: | 20 °C |
| Nastavení detektoru: | 210 nm (šířka svazku 5 nm) |
| Doba migrace: | ca. 17,1 min. (S-kyselina) ca. 17,7 min. (R-kyselina) |
Tabulka 3
| Příklad Kmen | Surový produkt | Překrystalizováno | Výtěžek | ee-hodnota |
| č. 2 DSM 9175 | 12,82 g | 10,74 g | 68,3 % | 99,6 |
| č. 3 DSM 9174 | 15,53 g | 13,1 g | 83,3 % | 99,4 |
| č. 4 DSM 9176 | 21,23 g | 11,32 g | 72,0 % | 99,6 |
Příklad 5
Příprava kyseliny S-pipekolinové pomocí Klebsiella:
Buňky v klidu kmenů Klebsiella pneumoniae DSM 9175 a DSM 9176 přeměnily 20 gl'1 (RS)pipekolinamidu při 47 °C a hodnotě pH 8,0 během 6 hodin na (S)-kyselinu.
Když se tato přeměna prováděla s Klebsiella pneumoniae DSM 9175, získala se kyselina S-pipekolinová s ee-hodnotou 96,5 %.
- 11 CZ 282098 B6
Příklad 6
Příprava kyseliny S-4-methylpipekolinové
Pro tuto reakci byl přeměněn racemický 4-methylpipekolinamid (substrát) proteinovým surovým extraktem z Klebsiella pneumoniae DSM 9175 nebo Klebsiella terrigena DSM 9174 podobně jako v příkladu lb. Po inkubaci 24 hodin při pH 8,0 a 47 °C bylo z 0,2%ního roztoku substrátu přeměněno ca. 50 % vneseného amidu (měřeno analýzou pomocí chromatografie na tenké vrstvě).
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (7)
1. Mikroorganismy druhu Klebsiella terrigena DSM 9174 nebo druhu Klebsiella pneumoniae DSM 9175 a DSM 9176, které jsou schopné zužitkovat amidy cc-aminokarboxylových kyselin, ve formě racemátu nebo jeho opticky aktivních isomerů, obecného vzorce I (I).
kde A spolu s -NH a -CH znamená popřípadě substituovaný pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, ve kterém je heteroatom vybrán z kyslíku, dusíku nebo síry, jako jediný zdroj dusíku a převést amidy (RS)-cc-aminokarboxylových kyselin shora definovaného vzorce I na kyselinu S-a-aminokarboxylovou obecného vzorce II (Π), kde A má uvedený význam.
2. Mikroorganismy podle nároku 1, které jsou schopné zužitkovat pipekolinamid nebo piperazinkarboxamid ve formě racemátu nebo jeho opticky aktivních isomerů jako jediný zdroj dusíku.
3. Způsob mikrobiologické výroby kyselin S-a-aminokarboxylových obecného vzorce II
-12CZ 282098 B6 (Π), kde A má uvedený význam a/nebo amidů R-a-aminokarboxylových kyselin obecného vzorce III (III), kde A má uvedený význam, vyznačující se tím, že se v amidu (R,S)-a-aminokarboxylové kyseliny obecného vzorce I
O (I), kde A má uvedený význam, převede amid S-a-aminokarboxylové kyseliny pomocí mikroorganismů rodu Klebsiella nebo pomocí bezbuněčných enzy mů z těchto mikroorganismů na kyselinu S-a-aminokarboxylovou a izoluje se, přičemž při biotransformaci vznikne vedle kyseliny S-a-aminokarboxylové amid kyseliny R-a-aminokarboxylové, který se popřípadě izoluje.
4. Způsob podle nároku 3, vyznačující se tím, že se biotransformace provádí pomocí mikroorganismů druhu Klebsiella terrigena DSM 9174 nebo druhu Klebsiella pneumoniae DSM 9175 a DSM 9176 nebo s jejich funkčně ekvivalentními variantami a mutanty, nebo s bezbuněčnými enzymy z těchto mikroorganismů.
5. Způsob podle nároku 3 nebo 4, vyznačující se tím, že se jako amid (R,S)-aaminokarboxylové kyseliny použije (R,S)-pipekolinamid, (R,S)-piperazinkarboxamid, (R,S)-4methylpipekolinamid nebo (R,S)-prolinamid.
6. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 3 až 5, vyznačující se tím, že se biotransformace provádí za jednorázového nebo kontinuálního přidání amidu (R,S)-a-aminokarboxylové kyseliny tak, aby koncentrace amidu (R,S)-a-aminokarboxylové kyseliny v kultivačním médiu nepřesáhla 20 % hmotnostních.
- 13CZ 282098 B6
7. Způsob podle alespoň jednoho z nároků 3 až 6, vyznačující se tím. biotransformace provádí při hodnotě pH od 7 do 10 a při teplotě od 30 do 60 °C.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH181394 | 1994-06-09 | ||
| CH223194 | 1994-07-13 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ150795A3 CZ150795A3 (en) | 1996-05-15 |
| CZ282098B6 true CZ282098B6 (cs) | 1997-05-14 |
Family
ID=25688747
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ951507A CZ282098B6 (cs) | 1994-06-09 | 1995-06-08 | Mikroorganismy rodu Klebsiela a způsob mikrobiologické výroby S-alfa-aminokarboxylových kyselin a amidů R-alfa-aminokarboxylových kyselin |
| CZ96668A CZ282337B6 (cs) | 1994-06-09 | 1995-06-08 | Mikroorganismy rodu Pseudomonas a způsob mikrobiologické výroby S-alfa-aminokarboxylových kyselin a amidů R-alfa-aminokarboxylových kyselin |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ96668A CZ282337B6 (cs) | 1994-06-09 | 1995-06-08 | Mikroorganismy rodu Pseudomonas a způsob mikrobiologické výroby S-alfa-aminokarboxylových kyselin a amidů R-alfa-aminokarboxylových kyselin |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5622846A (cs) |
| EP (1) | EP0686698B1 (cs) |
| JP (1) | JP3694065B2 (cs) |
| AT (1) | ATE199743T1 (cs) |
| CA (1) | CA2150526C (cs) |
| CZ (2) | CZ282098B6 (cs) |
| DE (1) | DE59509085D1 (cs) |
| DK (1) | DK0686698T3 (cs) |
| ES (1) | ES2155104T3 (cs) |
| PT (1) | PT686698E (cs) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ213199A3 (cs) * | 1996-12-16 | 1999-11-17 | Lonza Ag | Mikroorganismy, enzymy a způsob výroby derivátů D-prolinu |
| CA2299324A1 (en) * | 1997-08-11 | 1999-02-18 | Lonza Ag | Method for producing cyclic .alpha.-amino acids free from enantiomers or their n-protected derivatives by means of a d-specific aminoacylase |
| CA2341554A1 (en) * | 1998-08-26 | 2000-03-09 | Klaus Heinzmann | Process for the preparation of (2r)-piperidine derivatives |
| US9453251B2 (en) | 2002-10-08 | 2016-09-27 | Pfenex Inc. | Expression of mammalian proteins in Pseudomonas fluorescens |
| JP5602336B2 (ja) | 2004-01-16 | 2014-10-08 | フェネックス インコーポレイテッド | シュードモナス・フルオレッセンスにおける哺乳動物タンパク質の発現 |
| CN101031655A (zh) | 2004-07-26 | 2007-09-05 | 陶氏环球技术公司 | 通过株工程改进蛋白表达的方法 |
| US8338142B2 (en) | 2007-02-19 | 2012-12-25 | Kaneka Corporation | Method for producing optically active 3-aminopiperidine or salt thereof |
| US8367412B2 (en) * | 2007-02-23 | 2013-02-05 | Kwansei Gakuin Educational Foundation | Protein crystallizing agent and method of crystallizing protein therewith |
| CA2964910C (en) | 2007-04-27 | 2018-01-09 | Pfenex Inc. | Method for rapidly screening microbial hosts to identify certain strains with improved yield and/or quality in the expression of heterologous proteins |
| US9580719B2 (en) | 2007-04-27 | 2017-02-28 | Pfenex, Inc. | Method for rapidly screening microbial hosts to identify certain strains with improved yield and/or quality in the expression of heterologous proteins |
| CA2865237C (en) | 2012-02-28 | 2017-08-15 | Marrone Bio Innovations, Inc. | Control of phytopathogenic microorganisms with pseudomonas sp. and substances and compositions derived therefrom |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LU74142A1 (cs) * | 1976-01-08 | 1977-07-22 | ||
| JPS6387998A (ja) * | 1986-09-30 | 1988-04-19 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | Ｄ−α−アミノ酸の製造法 |
| ES2051892T3 (es) * | 1987-08-17 | 1994-07-01 | Novo Industri As | Procedimiento para preparar productos quimicos organicos. |
| JPH01215297A (ja) * | 1988-02-23 | 1989-08-29 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | Ｌ−α−アミノ酸の製造法 |
| DK314989A (da) * | 1988-06-27 | 1989-12-28 | Asahi Chemical Ind | Fremgangsmaade til fremstilling af optisk aktive alfa-substituerede organiske syrer, samt mikroorganismer og enzymer anvendelige ved fremgangsmaaden |
| EP0383403A1 (en) * | 1989-02-16 | 1990-08-22 | Stamicarbon B.V. | Process for preparation of organic chemicals |
| NL9100038A (nl) * | 1991-01-11 | 1992-08-03 | Stamicarbon | Enzym-gekatalyseerde bereiding van optisch aktieve carbonzuren. |
-
1995
- 1995-05-30 CA CA002150526A patent/CA2150526C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-07 DE DE59509085T patent/DE59509085D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-07 PT PT95108740T patent/PT686698E/pt unknown
- 1995-06-07 JP JP14068495A patent/JP3694065B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-07 ES ES95108740T patent/ES2155104T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-07 DK DK95108740T patent/DK0686698T3/da active
- 1995-06-07 EP EP95108740A patent/EP0686698B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-07 US US08/478,960 patent/US5622846A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-07 AT AT95108740T patent/ATE199743T1/de active
- 1995-06-08 CZ CZ951507A patent/CZ282098B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-06-08 CZ CZ96668A patent/CZ282337B6/cs not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-03-12 US US08/614,345 patent/US5766893A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3694065B2 (ja) | 2005-09-14 |
| DE59509085D1 (de) | 2001-04-19 |
| CA2150526A1 (en) | 1995-12-10 |
| JPH0856652A (ja) | 1996-03-05 |
| ATE199743T1 (de) | 2001-03-15 |
| US5766893A (en) | 1998-06-16 |
| PT686698E (pt) | 2001-08-30 |
| CZ282337B6 (cs) | 1997-06-11 |
| EP0686698A2 (de) | 1995-12-13 |
| EP0686698B1 (de) | 2001-03-14 |
| CA2150526C (en) | 2005-11-15 |
| CZ66896A3 (en) | 1996-12-11 |
| DK0686698T3 (da) | 2001-04-17 |
| EP0686698A3 (de) | 1997-05-02 |
| CZ150795A3 (en) | 1996-05-15 |
| US5622846A (en) | 1997-04-22 |
| ES2155104T3 (es) | 2001-05-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS224624B2 (en) | Method for producing 2,5-diketo-d-gluconic acid or its salts | |
| CZ282098B6 (cs) | Mikroorganismy rodu Klebsiela a způsob mikrobiologické výroby S-alfa-aminokarboxylových kyselin a amidů R-alfa-aminokarboxylových kyselin | |
| Tang et al. | Biocatalytic preparation of (S)-phenyl glycidyl ether using newly isolated Bacillus megaterium ECU1001 | |
| Asano et al. | Microbial production of D-malate from maleate | |
| CA2062281C (en) | Biotechnological process for the production of s-(+)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide | |
| CZ296447B6 (cs) | Mikroorganismy, enzym nebo enzymový extrakt a zpusob výroby derivátu cyklopentenu | |
| DE69738080T2 (de) | Biokatalysatoren mit amin-acylase aktivität | |
| CZ297894B6 (cs) | Zpusob výroby (1S,4R)- nebo (1R,4S)-4-(2-amino-6-chlor-9-H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanolu | |
| US5108914A (en) | Process for the synthesis of l-alpha-amino acids | |
| US6214604B1 (en) | Biotechnical production process of piperazine R-α-carboxylic acids and piperazine S-α-carboxylic acid amide | |
| Wu et al. | Enzymatic production of Dp-hydroxyphenylglycine from DL-5-p-hydroxyphenylhydantoin by Sinorhizobium morelens S-5 | |
| CA1336414C (en) | D-amidase and process for producing d--alanine and/or l--alanineamide | |
| SK278514B6 (en) | Rhodococcus erythropolis microorganism and a method for producing hydroxylated pyrazines and quinoxalines | |
| EP0723586B1 (en) | Enzyme and its use in preparing (s)-pipecolic acid | |
| KR19990087341A (ko) | N－보호한 d－프롤린 유도체 제조 방법 | |
| MXPA00000440A (es) | Procedimiento para la preparacion de amidas | |
| KR100229285B1 (ko) | 신규 고온성 바실러스 속 kls-01 및 이로부터 생산되는 내열성 d-알라닌 아미노트랜스퍼라아제, l-아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제 및 알라닌라세마아제 | |
| US6465228B1 (en) | Levodione reductase | |
| JPH08507683A (ja) | エステラーゼおよびバイオトランスフォーメーションにこれを使用する方法 | |
| KR100229287B1 (ko) | 신규 고온성 바실러스 속 미생물 및 이로부터 생산되는 내열성 l-아스파테이트 아미노트랜스퍼라아제, 알라닌 라세마아제 및 글루타메이트 라세마아제 | |
| Ogawa et al. | Enzymatic asymmetric synthesis of α-methyl arylalkylamines and α-methyl arylalkylalcohols by arylalkyl acylamidases | |
| Cha | Biological production of optically active muconolactones by Rhodococcus rhodochrous | |
| CZ279298B6 (cs) | Mikroorganismy Alcaligenes faecalis DSM 6335 a způsob mikrobiologické výroby kyseliny 6-hydroxypikolinové | |
| CA2257542A1 (en) | Process for preparation of d-proline derivatives by means of micro-organisms | |
| HK1072933A (en) | Process for the preparation of 1-amino-4-(hydroxymethyl)-2-cyclopentene derivatives |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20120608 |