CZ2014875A3 - 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití - Google Patents

6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití Download PDF

Info

Publication number
CZ2014875A3
CZ2014875A3 CZ2014-875A CZ2014875A CZ2014875A3 CZ 2014875 A3 CZ2014875 A3 CZ 2014875A3 CZ 2014875 A CZ2014875 A CZ 2014875A CZ 2014875 A3 CZ2014875 A3 CZ 2014875A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
arabinofuranosylpurine
deoxyribofuranosylpurine
hydroxy
darabinofuranosylpurine
methoxybenzylamino
Prior art date
Application number
CZ2014-875A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ308881B6 (cs
Inventor
Karel DoleĹľal
Lucie Plíhalová
Hana Vylíčilová
Marek Zatloukal
Ondřej Plíhal
Jiří Voller
Miroslav Strnad
Original Assignee
Univerzita Palackého v Olomouci
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univerzita Palackého v Olomouci filed Critical Univerzita Palackého v Olomouci
Priority to CZ2014875A priority Critical patent/CZ308881B6/cs
Priority to EP15774847.6A priority patent/EP3229771B1/en
Priority to PCT/CZ2015/050005 priority patent/WO2016091235A1/en
Priority to SG11201704019TA priority patent/SG11201704019TA/en
Priority to US15/527,613 priority patent/US10100077B2/en
Priority to PCT/CZ2015/050013 priority patent/WO2016091236A1/en
Priority to EP15816356.8A priority patent/EP3229772B1/en
Priority to PL15816356T priority patent/PL3229772T3/pl
Priority to US15/528,056 priority patent/US10550144B2/en
Publication of CZ2014875A3 publication Critical patent/CZ2014875A3/cs
Publication of CZ308881B6 publication Critical patent/CZ308881B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/606—Nucleosides; Nucleotides; Nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/173—Purine radicals with 2-deoxyribosyl as the saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/19—Purine radicals with arabinosyl as the saccharide radical
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Předkládané řešení poskytuje 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli s alkalickými kovy, amoniakem, aminy, nebo adiční soli s kyselinami, kde Gly znamená .beta.-D-arabinofuranosyl nebo .beta.-D-2´-deoxyribofuranosyl, Ar znamená benzyl nebo furfuryl, které mohou být nesubstituované nebo substituované jedním nebo více, s výhodou jedním až třemi, substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxyl, alkyl, halogen, alkoxy, amino, merkapto, karboxyl, kyano, amido, sulfo, sulfamido, acyl, acylamino, acyloxy, alkylamino, dialkylamino, alkylmerkapto, trifluormethyl, trifluormethoxy, a jejich použití jako regulátorů růstu, vývoje a stárnutí živočichů, rostlin a mikroorganismů.

Description

Oblast techniky
Vynález se týká 6-(benzylamino/furfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurinu nebo -β-ϋ-2'deoxyribofuranosylpurinu, které zpomalují stárnutí rostlinných, živočišných i lidských buňek.
Dosavadní stav techniky
Substituované deriváty adeninu jsou známy jako fytohormony. Škála jejich vlastností je poměrně široká, zejména je známa jejich protinádorová a proapoptotická aktivita, tedy aktivity související zejména se snížením a omezením růstu nádorových buněk. Byly připraveny některé glykosylované deriváty, zejména ribosylované. Z arabinosylových derivátů byl připraven 6-benzylamino-9-arabinosylpurin a publikován jako látka uplatňující se při inhibici replikace viru tabákové mozaiky v uříznutých listech Nicotiana glutinosa (Barai et al. Vestsi Akademii Nauk Belarusi 1: 18-22, 1992). 6-chlorpurinarabinosid byl připraven z 6chlorpurinribosidu a byla zkoumána jeho antivirová aktivita (Maruyama et al. Chem. Pharm. Bull. 44: 2331-2334, 1996). Z důvodů protivirového testování byly také připraveny některé methylované deriváty 6-(benzylamino)-9-p-D-arabinoíuranosylpurinu a byla testována jejich protivirová aktivita na potírání virů Vaccinia virus a virus Herpes simplex. U benzylaminového derivátu nebyl pozorován žádný efekt a stejně tak ani u připravených 2methylbenzyl, 3-methylbenzyl, 2,3-dimethylbenzyl, 2,6-dimethylbenzyl, 3,4-dimethylbenzyl derivátů. Slabá aktivita proti viru Vaccinia virus, kmen IHD byla pozorována u 2,4dimethylbenzyl a 2,5-dimethylbenzyl substituentů (Masakatsu et al. Chem. Pharm. Bull. 25: 2482-2489, 1977). Určité N6-substituované deriváty adenin arabinosidu byly připraveny jako selektivní inhibitory varicella-zoster viru a byly to substituenty 6-methylamino, 6dimethylamino-, 6-ethylamino-, 6-N-ethylmethylamino-, NN- diethylamino-, 6-npropylamino-, 6-isopropylamino-, 6-n-hexylamino-, 6-cyklohexylamino-, 6-anilino (Koszalka et al. Antimicrob. Agents Chemother. 35: 1437-1443, 1991).
Předmětem tohoto vynálezu jsou glykosylované deriváty adeninu s antisenescenčními vlastnostmi, které jsou málo anebo vůbec toxické a přitom vysoce účinné v procesech stárnutí, buněčného dělení a diferenciace.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce I
I a jejich farmaceuticky přijatelné soli s alkalickými kovy, amoniakem, aminy, nebo adiční soli s kyselinami, kde
Gly znamená β-D-arabinofuranosyl nebo P-D-2'-deoxyribofuranosyl,
Ar znamená benzyl nebo furfuryl, které mohou být nesubstituované nebo substituované jedním nebo více, s výhodou jedním až třemi, substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxyl, alkyl, halogen, alkoxy, amino, merkapto, karboxyl, kyano, amido, sulfo, sulfamido, acyl, acylamino, acyloxy, alkylamino, dialkylamino, alkylmerkapto, trifluormethyl, trifluormethoxy, pro použití jako regulátory růstu, vývoje a stárnutí živočichů, zejména savců.
Dále je předmětem vynálezu způsob regulace růstu, vývoje a stárnutí rostlin in vivo, nebo mikroorganismů, rostlinných a živočišných buněk in vitro, při němž se aplikuje látka obecného vzorce I.
Není-li uvedeno jinak, pak:
alkyl znamená přímý nebo rozvětvený C1-C6, s výhodou C1-C4, alkylový řetězec, acyl znamená acylovou skupinu s počtem uhlíků 2 až 6 halogen znamená atom halogenu vybraný ze skupiny zahrnující atom fluoru, atom bromu, atom chloru a atom jodu, sulfo znamená -SC^Rc, ve které Re znamená atom vodíku, přímou nebo rozvětvenou alkylovou, alkenylovou nebo alkynylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, sulfoamido znamená -NHSO3Rd, kde Rd znamená atom vodíku, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů,
Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou substituované heterocyklické sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující: 6-furfurylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-methylfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-methylfurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-methylfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluorofurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluorofurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-fluorfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-chlorfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-chlorfurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-chlorfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-bromfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-bromfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-bromfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(3hydroxyfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxyfurfurylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-hydroxyfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(3methoxyfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-methoxyfurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-methoxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-( 6-(2fluorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluorbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-fluorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(2brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-brombenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-brombenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(2jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-jodbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-jodbenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin,6-(2chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(4chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-acetylbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-acetylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4acetylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-karboxybenzylamino)-9-p-D4
6-(6-chlor-2-fluor-3-methylbenzylamino)-9-3-D6-(3-chlor-2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D6-(3-chlor-2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-karboxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2acetoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofůranosylpurin, 6-(3-acetoxybenzylamino)-9-[3-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-acetoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(2sulfobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-sulfobenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-sulfobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2kyanobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-kyanobenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-kyanobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-methoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(2hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(4hexylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-6-fluor-3-methylbenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, arabinofuranosylpurin, arabinofuranosylpurin, arabinofuranosylpurin, 6-(2,3-difluor-4-methylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,6-difluor-3-methylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-fluor-6(trifluormethyl)benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor-2,6difluorbcnzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethylthio)benzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluor-4-methyl benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-fluor-2methylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)-9-PD-arabinofuranosylpurin, 6-(4-(trifluormethylthio)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-4fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-(trifluormethoxy)benzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethyl)benzylamino)-9-p-D-arabinofiwanosylpurin, 6-(2(trifluormethyl)benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethyl)benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-chlor-3-(trifluormethyl) benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethoxy)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(45 (trifluormethyl)benzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-diethylaminobenzylamino)9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6(3,5-dihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4-dihydroxybenzylamino)purin, 6-(2,5dihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,6-dihydroxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,5-dimethoxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(2,3-dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,5-dimethoxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(2,6-dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-3-methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-methoxybenzylamino)9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-methoxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-2-methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin,
6-(3-hydroxy-4-methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-5methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-6-methoxybenzylamino)9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-2-methoxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-5-methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-6methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4-trimethoxybenzylarnino)-9^D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,5-trimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-9^D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,4,6-trihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4trihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)-9^D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4chlorbenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)-9^-D6-(3,4,56-(2-hydroxy-3,4,56-(2-hydroxy-3,4,66-(2-hydroxy-4,5,66 arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-3-jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin,
6-(2-hydroxy-6-jodbenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-3brombenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-brombenzylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-6-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-3fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-fluorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3methylfurfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-methylfurfurylamino)-9-P-D2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-methylfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-fluor-furfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-fluorfurfurylamino)- 9-βD-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-fluorfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-chlor-furfurylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-chlorfurfurylamino)- 9-βD-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-chlorfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-brom-furfurylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-bromfurfurylamino)-9^D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-bromfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-hydroxyfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-hydroxyfurfurylamino)9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-hydroxyfurfurylamino)- 9-β-Π-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-methoxyfurfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(4-methoxyfurfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-methoxyfurfurylamino)-9β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-( 6-(2-fluorbenzylamino)- 9-β-ϋ-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-fluorbenzylamino)- 9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4fluorbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-brombenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-brombenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4brombenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-jodbenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-jodbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4jodbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3chlorbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-chlorbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-acetylbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3acetylbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-acetylbenzylamino)-9^-D-2'7 deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-karboxybenzylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4karboxybenzylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-acetoxybenzylamino)-9-p-D2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-acetoxybenzylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(4-acetoxybenzylamino)-9-p-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-sulfobenzylamino)-9-P-D2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-sulfobcnzylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4sulfobenzylamino)-9-P-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-kyanobenzylamino)-9-P-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-kyanobenzylamino)-9-p-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4kyanobenzylamino)-9-P-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-methoxybenzylamino)-9-P-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-methoxybenzylamino)-9-p-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(4-methoxybenzylamino)-9-p-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-hydroxybenzylamino)- 9-βD-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-hydroxybenzylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-hydroxybenzylamino)-9-p-D-2'-deoxyribofuranosylpurin.
Zejména jsou 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce I vhodné pro použití jako růstové regulátory rostlin, savců, mikroorganismů, včetně kvasinek a hub. Růstovou regulací je zde zejména indukce růstu.
Předmětem vynálezu je rovněž použití 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce I jako kosmetických přípravků pro zpomalení stárnutí rostlin, savců, nebo pro zpomalení stárnutí buněk rostlin či savců, například keratinocytů a fibroblastů.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce la
Ar
NH
Gly la a jejich farmaceuticky přijatelné soli s alkalickými kovy, amoniakem, aminy, nebo adiční soli s kyselinami, kde
Gly znamená β-D-arabinofuranosyl nebo β-Ο-2'-ά6θχγπόοίιΐΓηηο3γΙ,
Ar znamená benzyl nebo furfuryl, které jsou substituované jedním nebo více, s výhodou jedním až třemi, substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxyl, halogen, alkoxy, amino, merkapto, karboxyl, kyano, amido, sulfo, sulfamido, acyl, acylamino, acyloxy, alkylamino, dialkylamino, alkylmerkapto, trifluormethyl, trifluormethoxy.
Dále jsou předmětem předkládaného vynálezu kosmetické a/nebo tkáňové a/nebo růstověregulační přípravky obsahující jako účinnou látku alespoň jednu sloučeninu vzorce la. Tkáňové přípravky jsou zejména použitelné v biotechnologiích, zejména v tkáňových kulturách pro mikropropagaci rostlin. Růstové regulátory jsou určené pro využití v zemědělství, zejména pro zvýšení výnosu a kvality zemědělských produktů.
KOSMETICKÁ APLIKACE
Vhodné podání pro kosmetickou aplikaci je lokální, topické. Kosmetický přípravek zpravidla obsahuje od 0,1 do 95 hmotn. % aktivní látky, přičemž jednorázové dávky obsahují přednostně od 10 do 90 hmotn. % aktivní látky a při způsobech aplikace, které nejsou jednorázové, obsahují přednostně od 1 do 10 hmotn. % aktivní látky. Formy aplikace jsou např. masti, krémy, pasty, pěny, tinktury, rtěnky, kapky, spreje, disperze atd. Přípravky jsou připravovány známým způsobem, např. běžným mícháním, rozpouštěcími nebo lyofilizačními procesy.
Roztoky aktivních látek, suspenze nebo disperze, obzvláště izotonické vodné roztoky, suspenze a disperze, mohou být připraveny před použitím, např. v případě lyofilizovaných preparátů obsahujících aktivní látku samotnou nebo s nosičem jako je například mannitol.
Olejové suspenze obsahují jako olejovou složku rostlinné, syntetické nebo semisyntetické oleje. Oleje, které zde mohou být zmíněny, jsou obzvláště kapalné estery mastných kyselin, které obsahují jako kyselou složku mastnou kyselinu s dlouhým řetězcem majícím 8-22, s výhodou pak 12-22 uhlíkových atomů, např. kyselinu laurovou, tridekanovou, myristovou, pentadekanovou, palmitovou, margarovou, stearovou, arachidonovou a behenovou, nebo odpovídající nenasycené kyseliny, např. kyselinu olejovou, alaidikovou, eurikovou, brasidovou a linoleovou, případně s přídavkem antioxidantů, např. vitaminu E, β-karotenu nebo 3,5-di-íerAbutyl-4-hydroxytoluenu. Alkoholová složka těchto esterů mastných kyselin nemá více než 6 uhlíkových atomů a je mono- nebo polyhydrická, např. mono-, di- nebo trihydrické alkoholy jako metanol, etanol, propanol, butanol nebo pentanol a jejich isomery, ale hlavně glykol a glycerol. Estery mastných kyselin jsou s výhodou např. ethyl oleát, isopropyl myristát, isopropyl palmitát, „Labrafil M 2375“ (polyoxyethylen glycerol trioleát, Gattefoseé, Paříž), „Labrafil M 1944 CS“ (nenasycené polyglykolované glyceridy připravené alkoholýzou oleje z meruňkových jader a složený z glyceridů a esterů polyethylen glykolu; Gattefoseé, Paříž), „Labrasol“ (nasycené polyglykolované glyceridy připravené alkoholýzou TCM a složené z glyceridů a esterů polyethylen glykolu; Gattefoseé, Paříž), „Miglyol 812“ (triglycerid nasycených mastných kyselin s délkou řetězce C8 až C12 od Húls AG, Německo) a zvláště rostlinné oleje jako bavlníkový olej, mandlový olej, olivový olej, ricinový olej, sesamový olej, sójový olej a olej z podzemnice olejně.
Masti jsou emulze oleje ve vodě, které obsahují ne více než 70%, ale přednostně 20 až 50% vody nebo vodné fáze. Tukovou fázi tvoří uhlovodíky, např. vazelína, parafínový olej nebo tvrdé parafiny, které přednostně obsahují vhodné hydroxysloučeniny jako mastné alkoholy a jejich estery, např. cetyl alkohol, nebo alkoholy lanolinu, s výhodou lanolin pro zlepšení kapacity pro vázání vody. Emulgátory jsou odpovídající lipofilní sloučeniny jako sorbitanové estery mastných kyselin (Spaný), s výhodou sorbitan oleát nebo sorbitan isostearát. Aditiva k vodné fázi jsou např. smáčedla jako polyalkoholy, např. glycerol, propylén glykol, sorbitol a polyethylen glykol, nebo konzervační prostředky či příjemně vonící látky.
Mastné masti jsou nevodné a obsahují jako bázi hlavně uhlovodíky, např. parafin, vazelínu nebo parafínový olej, a dále přírodní nebo semisyntetické tuky, např. hydrogenované kokosové triglyceridy mastných kyselin nebo hydrogenované oleje, např. hydrogenovaný ricínový olej nebo z podzemnice olejně, a dále částečné glycerolové estery mastných kyselin, např. glycerol mono- a distearát. Dále obsahují např. mastné alkoholy, emulgátory a aditiva zmíněná v souvislosti s mastmi, která zvyšují příjem vody.
Krémy jsou emulze oleje ve vodě, které obsahují více než 50% vody. Používané olejové báze jsou mastné alkoholy, např. isopropyl myristát, lanolin, včelí vosk, nebo uhlovodíky, s výhodou vazelína (petrolátum) a parafínový olej. Emulgátory jsou povrchově aktivní sloučeniny s převážně hydrofílními vlastnostmi, jako jsou odpovídající neiontové emulgátory, např. estery mastných kyselin polyalkoholů nebo jejich ethylenoxy adukty, např.
polyglycerických mastných kyselin nebo polyethylen sorbitanové estery či kyselé estery polyglicerických mastných kyselin (Tween), dále polyoxyethylenové etery mastných alkoholů nebo polyoxyethylenové estery mastných kyselin, nebo odpovídající iontové emulgátory, jako alkalické soli sulfátů mastných alkoholů, s výhodou laurylsulfát sodný, cetylsulfát sodný nebo stearylsulfát sodný, které jsou obvykle používány v přítomnosti mastných alkoholů, např. cetyl stearyl alkoholu nebo stearyl alkoholu. Aditiva k vodné fázi jsou mimo jiné činidla, která chrání krémy před vyschnutím, např. polyalkoholy jako glycerol, sorbitol, propylen glykol a polyethylen glykol, a dále konzervační činidla a příjemně vonící látky.
Pasty jsou krémy nebo masti obsahující práškové složky absorbující sekreci jako jsou oxidy kovů, např. oxidy titanu nebo oxid zinečnatý, a dále talek či silikáty hliníku, které mají za úkol vázat přítomnou vlhkost nebo sekreci.
Pěny jsou aplikovány z tlakových nádob a jsou to kapalné emulze oleje ve vodě v aerosolové formě, přičemž jako hnací plyny jsou používány halogenované uhlovodíky, jako chlor-fluor nižší alkany, např. dichlorfluormethan a dichlortetrafluorethan, nebo přednostně nehalogenované plynné uhlovodíky, vzduch, N2O či oxid uhličitý. Používané olejové fáze jsou stejné jako pro masti a také jsou používána aditiva tam zmíněná.
Tinktury a roztoky obvykle obsahují vodně-etanolickou bázi, ke které jsou přimíchány zvlhčovadla pro snížení odpařování, jako jsou polyalkoholy, např. glycerol, glykoly a polyethylen glykol, dále promazávadla jako estery mastných kyselin a nižších polyethylen glykolů, tj. lipofilní látky rozpustné ve vodné směsi nahrazující tukové látky odstraněné z kůže etanolem, a pokud je to nutné i ostatní neutrální látky a aditiva.
Vynález je dále objasněn s pomocí příkladů, které ale jeho rozsah neomezují.
Přehled vyobrazení
Obr. 1: Růstová křivka pro sloučeninu 6-benzylamino-9-3-D-arabinofuranosylpurin (Příklad 12).
Obr. 2: Účinek 6-furfurylamino-9-3-D-arabinofuranosylpurinu (2212) a 3-fluorbenzylamino9-P-D-arabinofuranosylpurinu (2213) na retenci chlorfylu v extirpovaných listových segmentech pšenice (Příklad 15).
Příklady provedení vynálezu
PŘÍKLAD 1: Příprava 6-(3-methoxybenzylamino)-9-/LD-arabinofuranosylpurinu
K roztoku 9-(/?-D-arabinofuranosyl) hypoxantinu (100 mg, 0,37 mmol) a (benzotriazol-1yloxy)tris(dimethylamino)fosfonium hexafluorfbsfát (BOP) (196 mg, 0,44 mmol) v dimethylformamidu (DMF) (1,86 ml) byla přidána DIPEA (ΑζΧ-diisopropylethylamin) (97 μΐ, 0,56 mmol), následně byl přidán 3-methoxybenzylamin (56 μΐ, 0,56 mmol). Výchozí látka 9-(/?-D-arabinofuranosyl) hypoxantin je komerčně dostupný (Jena Bioscience, N-1002) nebo se dá připravit z 9-(/?-D-arabinofuranosyl) adeninu. Reakční směs byla za laboratorní teploty míchána pod argonem přes noc (16 hodin). Reakční směs byla zahuštěna na vakuové rotační odparce a poté byla reakční směs dále zpracována jedním ze dvou následně uvedených postupů. Buď byla reakční směs po odpaření přečištěna sloupcovou kapalinovou chromatografií (mobilní fáze chlorform-methanol 19/1) nebo byla po odpaření k odparku přilita po částech vychlazená voda (15 ml) a krátce vortexována, pochvíli se začala postupně uvolňovat nažloutlá látka. Reakční směs byla vložena do lednice přes noc. Produkt byl zfiltrován a jednou rekrystalizován z isopropanolu a dvakrát z ethanolu. Produktem je bílá krystalická látka. V obou případech izolace činil výtěžek reakce 40%, TLC (chlorformimetanol (90:10 (v:v)): jedna skvrna; HPLC: čistota > 98%. [M+H+]388, *H(DMSO-íZ6, 300 MHz) δ ppm: 3.65-3.66 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.78 (d, J= 3,7 Hz), 4.14 (s, 2H), 4.67 (bs, 2H), 5.09 (t, J= 5,3 Hz), 5.52 (d, J= 3,8 Hz), 5.61 (d, J= 4,5 Hz), 6.27 (d,
3,9 Hz), 6.77 (d, J= 7,1 Hz), 6.89 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 7.20 (t, J = 7,6 Hz), 8.19 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.34 (bs, 1H).MS:
PŘÍKLAD 2: Příprava 6-(3-hydroxybenzylamino)-9-/?-D-arabinofuranosylpurinu
K roztoku 9-(/?-D-arabinofuranosyl) hypoxantinu (100 mg, 0,37 mmol) a BOP (196 mg, 0,44 mmol) v DMF (1,86 ml) byla přidána DIPEA (ACV-diisopropylethylamin) (97 μΐ, 0,56 mmol) následně byl přidán 3-hydroxybenzylamin (50 μΐ, 0,50 mmol). Výchozí látka 9-(β-τ>arabinofuranosyl) hypoxantin je komerčně dostupný (Jena Bioscience, N-1002). Reakční směs byla za laboratorní teploty míchána pod argonem přes noc (10 hodin). Reakční směs byla zahuštěna na vakuové rotační odparce a přečištěna sloupcovou kapalinovou chromatografií (mobilní fáze chlorform-methanol 19/1). Produktem byla bílá krystalická látka. Výtěžek reakce činil 35%, TLC (chlorform:metanol (90:10 (v:v)): jedna skvrna; HPLC: čistota > 98%, [M+H+]374, NMR: ^(DMSO-í/é, 300 MHz) δ ppm: 3.66 (s, 2H), 3.78 (s, 1H), 4.15 (s, 2H), 4.63 (bs 2H), 5.12 (s, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.64 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 6.58 (d, J = 7,5 Hz), 6.73 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 7.07 (t, 7,5 Hz), 8.19 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 9.27 (bs , 1H)
PŘÍKLAD 3: Příprava 6-(3-fluorbenzylamino)-9-/LD-arabinofuranosylpurinu
K roztoku 9-(/?-D-arabinofuranosyl) hypoxantinu (100 mg, 0,37 mmol) a BOP (196 mg, 0,44 mmol) v DMF (1,86 ml) byla přidána DIPEA (ΛζΑ-diisopropylethylamin) (97 μΐ, 0,56 mmol) následně byl přidán 3-fluorbenzylamin (70 μΐ, 0,76 mmol). Výchozí látka 9-(β-οarabinofuranosyl) hypoxantin byl připraven z 9-(/?-D-arabinofuranosyl) adeninu. Reakční směs byla za laboratorní teploty míchána pod argonem 24 h. Reakční směs byla zahuštěna na vakuové rotační odparce a poté byla reakční směs dále po odpaření k odparku přilita po částech vychlazená voda (15 ml) a krátce vortexována, pochvíli se začala postupně uvolňovat nažloutlá látka. Reakční směs byla vložena do lednice na 10 h. Produkt byl zfíltrován a jednou rekrystalizován z isopropanolu a dvakrát z ethanolu. Produktem je bílá krystalická látka. V obou případech izolace činil výtěžek reakce 70%, TLC (chlorfomrmetanol (90:10 (v:v)): jedna skvrna; HPLC: čistota > 98%. [M+H+] 376, NMR: ’HÍDMSO-^, 300 MHz) δ ppm: 3.66 (s, 2H), 3.79 (s, 1H), 4.14 (s, 2H), 4.74 (bs, 2H), 5.09 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.60 (s, 1H), 6.29 (s, 1H), 7.17 (s, 4H), 8.22 (s, 2H), 8.37 (bs, 1H).
PŘÍKLAD 4: Příprava 6-furfurylamino-9-//-D-arabinofuranosylpurinu
Do reakční nádoby (10 ml) mikrovlnného reaktoru CEM SP byl předložen 6-chlorpurin tetraacetylarabinopyranosidu (100 mg, 0,242 mmol) v methanolu (3 ml), poté byl přidán furfurylamin ( 26,8 μΐ, 0,291 mmol) s triethylaminem (151 μΐ, 1,09 mmol). Reakční směs byla vložena do mikrovlnného reaktoru CEM Discover SP a reakční podmínky byly nastaveny následovně: dynamická metoda, tzn. nastaven reakční čas na 3 hod, teplota na 100°C, výkonná 50 wattů a tlak 100 psi. Reakční směs byla zahuštěna na vakuové odparce a přečištěna pomocí sloupcové kapalinové chromatografie (mobilní fáze: chlorform-methanol 9/1) Produktem je bílá látka: kinetin arabinopyranosid směs a a β anomeru 5/1. Jednotlivé isomery byly od sebe zcela separovány. Výtěžek: 30% a anomeru a 10% β anomeru. Výchozí látka 6chlorpurin tetraacetylarabinopyranosidu byl připraven tak, že do vysušené baňky byl předložen 6-chlorpurin (0,412 g, 2,66 mmol) a jehlou přes septum byla přidána tetraacetylarabinosa (0,771g 2,42 mmol) rozpuštěná v suchém acetonitrilu (15ml). Poté byl postupně jehlou přikapáván chlorid ciničitý (5,6 mmol 0,6 ml). Reakční směs byla míchána za laboratorní teploty přes noc pod argonem. Směs byla zahuštěna na vakuové rotační odparce a poté byl přilit ethylacetát (25 ml). Organický podíl byl extrahován hydrogenuhličitanem sodným (30 ml) a vodou (2x30 ml) a poté byla organická frakce vysušena síranem sodným a zahuštěna na vakuové rotační odparce. Produkt byl přečištěn sloupcovou kapalinovou chromatografň, mobilní fáze dichlormethan-aceton 9/1. Odpařením čistých frakcí vznikl čirý gelovitý odparek, který byl pomocí diethyletheru převeden na pěnovitý bílý produkt (6chlorpurin tetraacetylarabinopyranosid), který byl směsí a a β anomeru. Výtěžek: 50 %, HPLC čistota: 98%, [M+H+] 348, NMR: 'H(DMSO-í/6, 300 MHz) δ ppm: 3.61-3.72 (m, 2H), 3.78 (d, J= 3,9 Hz), 4.14 (s, 2H), 4.69 (bs, 2H), 5.11 (t, J= 5,4 Hz), 5.54 (d, J= 3,9 Hz), 5.62 (d, J = 4,8 Hz), 6.22 (d, J= 2,7 Hz), 6.27 (d, J= 4,2 Hz), 6.36 (t, J= 3,0 Hz), 7.54 (s, 1H), 8.21 (s, 3H)
Tabulka 1 Látky připravené metodou podle Příkladů 1-4 a elementární analýza připravených látek
Substituent Elementární analýza vypočteno/nalezeno
%C %H %N ES-MS [M+H+]
Furfurylamino 51,9/51,6 4,9/4,8 20,2/20,2 348
2-fluorbenzylamino 54,4/54,1 4,8/4,8 18,7/18,4 376
3 -fluorbenzylamino 54,4/53,9 4,8/4,7 18,7/18,2 376
4-fluorbenzylamino 54,4/54,3 4,8/4,8 18,7/18,3 376
2-chlorbenzylamino 52,1/52,0 4,6/4,7 17,9/17,5 392
3 -chlorbenzylamino 52,1/51,9 4,6/4,6 17,9/17,3 392
4-chlorbenzylamino 52,1/51,8 4,6/4,5 17,9/17,1 392
2-brombenzylamino 46,8/46,3 4,2/4,1 16,1/15,5 437
3 -brombenzy lamino 46,8/47,8 4,2/4,5 16,1/15,6 437
4-brombenzylamino 46,8/46,9 4,2/4,3 16,1/15,4 437
3 -j odobenzylamino 42,3/42,4 3,8/3,9 14,5/14,6 484
2-methoxybenzylamino 55,8/55,9 5,5/5,3 18,1/17,9 388
3 -methoxybenzylamino 55,8/55,5 5,5/5,7 18,1/18,0 388
4-methoxybenzylamino 55,8/55,6 5,5/5,5 18,1/18,1 388
2-hydroxybenzylamino 54,7/54,6 5,1/5,0 18,8/18,8 374
3 -hydroxybenzylamino 54,7/54,5 5,1/5,1 18,8/18,5 374
4-hydroxybenzylamino 54,7/54,6 5,1/4,9 18,8/18,6 374
2,4-dichlorbenzylamino 47,9/47,8 4,0/4,1 16,4/16,5 427
3,4-dichlorbenzylamino 47,9/47,9 4,0/4,2 16,4/16,5 427
2,3 -dihydroxybenzylamino 52,4/52,5 4,9/4,8 18,0/18,1 390
3,5 -dihydroxybenzylamino 52,4/52,6 4,9/4,9 18,0/18,3 390
2-hydroxy-3methoxybenzylamino 53,6/53,4 5,2/5,1 17,4/17,5 404
3-hydroxy-4methoxybenzylamino 53,6/53,5 5,2/5,0 17,4/17,6 404
2,3 -dimethoxybenzylamino 54,7/54,8 5,6/5,7 16,8/16,7 418
2,4-dimethoxybenzylamino 54,7/54,6 5,6/5,5 16,8/16,6 418
3,4-dimethoxybenzylamino 54,7/54,8 5,6/5,6 16,8/16,5 418
3,5-dimethoxybenzylamino 54,7/54,6 5,6/5,7 16,8/16,9 418
PŘIKLAD 5: Příprava látky 6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurinu ve čtvrtprovozním měřítku
Vstupní suroviny: 9-β-ϋ-Arabinofuranosyl-hypoxanthin (1072 g ,4 mol), (Benzotriazol-l-yloxy)tris(dimethylamino)fosfonium hexaíluorfosfát (BOP) v možství 2124 g (4.8 mol), dimethylformamid (DMF) v množství 20 L, N,N-Diisopropyl-N-ethylamin (DIPEA) v množství 1045 mL (6 mol), 3-Methoxybenzylamin v množství658 g (4.8 mol), demi voda 40 L, 2-propanol 30 L.
Postup:
Do 50 L skleněného dupliko váného reaktoru Al, opatřeného teploměrem (PT100) a zpětným chladičem, se předloží dimethylformamid 20 L. Reaktor se řádně naplní inertní atmosférou (dusík). Je zapnut spínač míchání a násypným otvorem. Za použití respirátoru se nasype do reaktoru 9-P-D-arabinofuranosyl-hypoxanthin a BOP (2124 g). Jakmile dojde k rozpuštění pevné fáze, přidá se DIPEA (1045 mL) a 3-methoxybenzylamin báze (658 g), přičemž je reaktor pod neustálým mírným proudem dusíku. Poté se reakční směs vyhřeje pomocí duplikace na teplotu 50 °C, při níž se míchá po dobu 20 hodin. MOK: po 12 hod reakce vzorek na TLC: 1 mL aliquot se zředí 4 mL methanolu a roztok se nanese vedle všech výchozích látek a standardu produktu na TLC destičku, která se nechá vyvíjet v mobilní fázi: chlorform - methanol - vodný amoniak; 4:1:0.05). Pokud nedochází k úplnému doreagování, pokračuje se dále v míchání při 50 °C, resp. je možné přistoupit i k přidání dalšího podílu
BOP (200 g). Pokud dojde k uspokojivé konverzi (> 90 %), reakční směs se vychladí pomocí duplikace na teplotu 20-25 °C a poté se vypustí do transportní nádoby. Reaktor se následně vypláchne malým množstvím methanolu (3x1 L), přičemž methanolické oplachy se spojí s reakční směsí). Reakční směs se zahustí na cirkulační odparce pomocí vakua vodokružné vývěvy; parametry tlak/teplota dle pokynů technologa. Destilační zbytek se za horka vypustí do transportní nádoby. Proplach odparky se provede opět horkým methanolem - zpracuje se zvlášť na rotační vakuové odparce. Do reaktoru Al se předloží demi voda (40 L), zapne se míchání a chlazení v duplikaci. Obsah reaktoru se ochladí na 10 °C a pozvolna se začne dávkovat destilační zbytek reakční směsi (viz shora uvedený text). Transportní nádoba se vypláchne methanolem (3 x 250 mL) a methanolický oplach se rovněž nalije do reaktoru. Obsah reaktoru se míchá 3 hodiny při teplotě 10 - 15 °C. Vyloučený precipitát se odsaje na velké Buchnerově nálevce a promyje se vychlazenou (+5 °C) vodou (4x1 L). Surový produkt se suší v horkovzdušné sušárně při 80 °C do konstantní hmotnosti. Výtěžek: 1200 - 1250 g. Krystalizace
Násada pro 6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin Surový produkt: 1000 g, 2-propanol: 18 L, aktivní uhlí CXV 50 g.
Postup: Do reaktoru Al se předloží 2-propanol (15 L), zapne se míchání a násypným otvorem se přidá surový 6-(3-methoxybenzylamino)- 9-P-D-arabinofuranosylpurin (1000 g). Obsah reaktoru se vyhřeje pomocí duplikace na 80 °C, přičemž by mělo dojít k rozpuštění surového produktu. Pokud nedojde k rozpuštění, pokračuje se v míchání při 80 °C, resp. se přidá další podíl 2-propanolu. Jakmile je veškerá pevná fáze v roztoku, opatrně se přidá aktivní uhlí (50 g; pozor na utajený var!). Po přidání uhlí se pokračuje v míchání při 80 °C po dobu 15 minut a poté se provede karbofiltrace pomocí důkladně nahřáté Buchnerovy nálevky (horkovzdušná sušárna, 110 °C). Kotel se vypláchne 2-propanolem (2 x 1 L) a tímto 2-propanolem se prolije filtračním koláč v Buchnerově nálevce. Filtrát a proplach se spojí a umístí do transportní nádoby ke krystalizací. Produkt se nechá krystalovat při teplotě +5 - +10 °C (chladovka) po dobu 12 hodin, poté se odfiltruje, promyje vychlazeným (+5 °C) 2-propanolem (3 x 500 mL) a suší se v horkovzdušné sušárně při 70 °C do konstantní hmotnosti, Výtěžek: 750 - 800 g, Čistota HPLC: > 98 %.
PŘÍKLAD 6: Příprava 6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-D-2'-deoxyribosidu
K roztoku 2'-deoxyinosinu (252 mg) a BOP (531 mg) v suchém DMF (5 ml) se za laboratorní teploty pod atmosférou dusíku nebo argonu přidá DIPEA (261 μΐ) a 3methoxybenzylamin (167 μΐ). Reakční směs se poté míchá za lab. teploty 16 hodin. Poté se provede kontrola průběhu reakce pomocí TLC (mobilní fáze: chlorform-methanol-25% vodný amoniak; 4:1: 0.05). Pokud není konverze úplná, přidá se další podíl BOP (354 mg; 0.8 mmol), reakční směs se vyhřeje na teplotu 60 °C a při ní se dále míchá 6 hodin. Pokud již není přítomna skvrna výchozího 2'-deoxyinosinu, reakční směs se zahustí na rotační vakuové odparce (teplota lázně max. 55 °C). Odparek (cca 1.5 g ) se vyčistí chromatografícky na silikagelu (150 g); mobilní fáze: 0-20 % methanolu v dichlormethanu. Výtěžek: 270 mg (79 %), Čistota HPLC-MS: 98+%, [M+H+] 372, mp 165-170 °C, C/H/N: 58,2/58,1; 5,7/5,7; 18,9/18,8; ^(DMSO-t/é, 300 MHz) δ ppm: 2.252.37 (m, 1H), 2.45-2.64 (m, 1H), 3.50-3.68 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.85-3.90 (m, 1H), 4.334.45(m, 1H), 4.67 (bs, 2H), 4.85 (t, 1H), 5.10 (d, J= 4.0 Hz), 6.30 (t, ./= 6.9 Hz), 6.77 (d, J= 7.1 Hz), 6.89 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 7.20 (t, J= 7.6 Hz), 8.19 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.34 (bs, 1H).
PŘÍKLAD 7: Příprava 6-(2-hydroxybenzylamino)- 9-P-D-2'-deoxyribosidu
K roztoku 2'-deoxyinosinu (252 mg) a BOP (664 mg) v suchém DMF (8 ml) se za laboratorní teploty pod atmosférou argonu byl přidán DIPEA (348 μΐ) a 2-hydroxybenzylaminu (131 μΐ). Reakční směs se poté míchá za teploty 50°C 20 hodin. Poté se provede kontrola průběhu reakce pomocí TLC (mobilní fáze: chlorform-methanol-25% vodný amoniak; 4:1: 0.05). Pokud není konverze úplná, přidá se další podíl BOP (354 mg; 0.8 mmol), reakční směs se vyhřeje na teplotu 60 °C a při ní se dále míchá 10 hodin. Pokud již není přítomna skvrna výchozího 2'-deoxyinosinu, reakční směs se zahustí na rotační vakuové odparce (teplota lázně max. 55 °C). Odparek (cca 1.5 g ) se vyčistí chromatografícky na silikagelu (150 g); mobilní fáze: 0-20 % methanolu v dichlormethanu. Výtěžek: 250 mg (70 %), Čistota HPLC-MS: 98+%, [M+H+] 358, mp 172-175 °C, C/H/N: 57,1/57,2; 5,3/5,4; 19,6/19,2; ‘H(DMSO-í/6, 300 MHz) δ ppm: 3.66 (s, 2H), 3.78 (s, 1H), 4.15 (s, 2H), 4.63 (bs 2H), 5.12 (s, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.64 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 6.58 (d, J= 7.5 Hz), 6.73 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 7.07 (t, J= 7.5 Hz), 8.19 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 9.27 (bs , 1H).
PŘÍKLAD 8: Příprava 6-(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)- 9-P-D-2'-deoxyribosidu
K roztoku 2'-deoxyinosinu (252 mg) a BOP (664 mg) v suchém DMF (10 ml) se za teploty 50 °C pod atmosférou argonu přidá DIPEA (348 μΐ) a 2-hydroxy-3methoxybenzylamin (165 μΐ). Reakční směs se poté míchá za teploty 50 °C nejméně 20 hodin. Poté se provede kontrola průběhu reakce pomocí TLC (mobilní fáze: chlorformmethanol-25% vodný amoniak; 4:1: 0.05). Pokud není konverze úplná, přidá se další podíl BOP (354 mg; 0.8 mmol), reakční směs se vyhřeje na teplotu 70 °C a při ní se dále míchá 6 hodin. Pokud již není přítomna skvrna výchozího 2'-deoxyinosinu, reakční směs se zahustí na rotační vakuové odparce (teplota lázně max. 55 °C). Odparek (cca 1.5 g ) se vyčistí chromatograficky na silikagelu (150 g); mobilní fáze: 0-20 % methanolu v dichlormethanu. Výtěžek: 270 mg (79 %), Čistota HPLC-MS: 98+%, mp 174-178 °C, [M+H+] 388, C/H/N: 55,8/55,3; 5,5/5,6; 18,1/18,2; ‘H(DMSO-í/6, 300 MHz) δ ppm: 2.25-2.37 (m, 1H), 2.45-2.64 (m, 1H), 3.50-3.68 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.85-3.90 (m, 1H), 4.33-4.45(m, 1H), 4.67 (bs, 2H), 4.85 (t, 1H), 5.10 (d, J= 4.0 Hz), 5.39 (d, J = 6.0 Hz), 6.30 (t, J= 6.9 Hz), 6.77 (d, J= 7.1 Hz), 6.89 (s, 1H), 7.20 (t, J= 7.6 Hz), 8.19 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.34 (bs, 1H).
PŘÍKLAD 9: Příprava 6-(furfurylamino)- 9-P-D-2'-deoxyribosidu
K roztoku 2'-deoxyinosinu (252 mg) a BOP (670 mg) v suchém DMF (10 ml) se za teploty 50 °C pod atmosférou argonu přidá DIPEA (350 μΐ) a furfurylamin (150 μΐ). Reakční směs se poté míchá za teploty 60 °C nejméně 10 hodin. Poté se provede kontrola průběhu reakce pomocí TLC (mobilní fáze: chlorform-methanol-25). Pokud není konverze úplná, přidá se další podíl BOP (354 mg; 0.8 mmol), reakční směs se vyhřeje na teplotu 70 °C a při ní se dále míchá 6 hodin. Pokud již není přítomna skvrna výchozího 2'-deoxyinosinu, reakční směs se zahustí na rotační vakuové odparce (teplota lázně max. 55 °C). Odparek (cca 1.5 g) se vyčistí chromatograficky na silikagelu (150 g); mobilní fáze: 0-20 % methanolu v dichlormethanu. Výtěžek: 300 mg (82 %), Čistota HPLC-MS: 98+%, [M+H+] 332, C/H/N: 54,4/54,3; 5,2/5,2; 19,3/19,5^(DMSO-íZí, 300 MHz) δ ppm: 3.61-3.72 (m, 2H), 3.78 (d, J= 3.9 Hz), 4.14 (s, 2H), 4.69 (bs, 2H), 5.11 (t, J = 5.4 Hz), 5.54 (d, J= 3.9 Hz), 5.62 (d, J= 4.8 Hz), 6.22 (d, J=
2.7 Hz), 6.27 (d, J = 4.2 Hz), 6.36 (t, J = 3.0 Hz), 7.54 (s, 1H), 8.21 (s, 3H).
Tab. 2: Látky připravené podle příkladů 6-9
Substituent N6 Elementární analýza vypočteno/nalezeno
%C %H %N ES-MS [M+H+]
4-methylfurfurylamino 55,6/55,5 5,5/5,6 18,5/18,4 346
5 -methylfurfurylamino 55,6/55,4 5,5/5,6 18,5/18,3 346
4-hydroxyfurfurylamino 51,9/51,8 4,9/5,0 20,2/20,1 348
5 -hydroxy furfurylamino 51,9/52,0 4,9/4,8 20,2/20,2 348
3 -chlorbenzylamino 54,3/54,2 4,8/4,8 18,6/18,6 376
4-chlorbenzylamino 54,3/54,3 4,8/4,9 18,6/18,5 376
2-brombenzylamino 48,6/48,7 4,3/4,4 16,7/16,7 421
3 -brombenzylamino 48,6/48,6 4,3/4,5 16,7/16,8 421
4-brombenzylamino 48,6/48,3 4,3/4,3 16,7/16,9 421
2-methoxybenzylamino 58,2/58,3 5,7/5,5 18,9/18,6 372
3 -methoxybenzylamino 58,2/58,1 5,7/5,9 18,9/18,7 372
2-hydroxybenzylamino 57,1/57,2 5,4/5,3 19,6/19,8 358
3 -hydroxybenzylamino 57,1/57,3 5,4/5,3 19,6/19,5 358
4-hydroxybenzylamino 57,1/57,1 5,4/5,2 19,6/19,5 358
2,3-dihydroxybenzylamino 54,7/54,5 5,1/5,2 18,8/18,7 374
3,5 -dihydroxybenzyl amino 54,7/54,8 5,1/5,3 18,8/18,6 374
2-hydroxy-3methoxybenzylamino 55,8/55,7 5,5/5,6 18,1/18,2 388
3-hydroxy-4methoxybenzylamino 55,8/55,6 5,5/5,7 18,1/18,3 388
2,3 -dimethoxybenzylamino 56,9/56,8 5,8/5,7 17,5/17,4 402
2,4-dimethoxybenzylamino 56,9/56,9 5,8/5,6 17,5/17,5 402
3,4-dimethoxybenzylamino 56,9/56,8 5,8/5,9 17,5/17,7 402
3,5-dimethoxybenzylamino 56,9/56,9 5,8/5,9 17,5/17,8 402
PŘÍKLAD 10: Cytotoxicita nových derivátů pro kožní buňky stanovená MTT in vitro testem
MTT test je standardní test toxicity založený na fotometrickém měření schopnosti metabolicky aktivních buněk redukovat MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazolium bromid) na formazan. V testu byl sledován vliv 72 hodinového působení několika koncentrací látek (šestinásobná ředící řada, maximální koncentrace = 50 mikroM) na viabilitu kožních fibroblastů BJ a keratinocytů HaCaT. 5000 buněk bylo vyseto do jednotlivých jamek 96 jamkové mikrotitrační destičky 24 hodin před přidáním testovaných látek. Jako negativní kontrola bylo použito DMSO vehiculum. Po 72 hodinovém působení bylo přidáno nové médium s MTT (Sigma, M2128) do konečné koncentrace 0.5 mg/ml. Po třech hodinách bylo médium odstraněno a formazan obsažený v buňkách rozpuštěn v DMSO. Absorbance byla změřena při 570 nm (640 nm referenční vlnová délka). Hodnoty IC50 byly vypočteny z dávkových křivek. 6-Benzylaminopurin ribosid a 6-furfurylaminopurin ribosid byly použity jako pozitivní kontroly - jsou v testu MTT hodnoceny jako toxické. Absorbance byla měřena při 570 nm (640 nm referenční vlnová délka). Hodnoty IC50 byly vypočteny z koncentračně závislých křivek. Byly obdrženy následující výsledky:
IC50 ( μΜ)
dimethylsulfoxid >50
6-benzylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-furfurylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(2-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(3-hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(3-chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(2,3-dimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin 49
6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin 48
6-benzylaminopurin9-ribosylpurin (srovnávací látka) <3
6-furfurylamino-9-ribosylpurin (srovnávací látka) <3
PŘÍKLAD 11: SRB in vitro test cytotoxicity
SRB test je standardní test toxicity založený na fotometrickém měření obsahu buněčného proteinu po obarvení sulforhodaminem B. Sledovali jsme v něm přežití kožních fibroblastů BJ a keratinocytů HaCaT po 72 hodinovém působení několika koncentrací (šestinásobná ředící řada, maximální koncentrace = 50 mikroM) zkoumaných látek. Přibližně 5000 buněk bylo vyseto do jednotlivých jamek 96-jamkové mikrotitrační destičky 24 h před přidáním testovaných látek. DMSO vehiculum bylo použit jako netoxická, negativní kontrola. N6benzylaminopurin ribosid a kinetin ribosid byly použity jako pozitivní, toxická kontrola. Po třech dnech bylo médium odstraněno a buňky byly zafixovány 10% (wt/vol) trichloroctovou kyselinou. Po intenzivním propláchnutí destilovanou vodou byl přidán 0.4% (wt/vol) roztok SRB v kyselině octové a fixované buňky byly barveny 30 minut. Nenavázané barvivo bylo odmyto destilovanou vodou a navázaný SRB byl rozpuštěn v nepufrované 10 mM Tris bázi. Absorbance byla měřena při 564 nm. Hodnoty IC50 byly vypočteny z dávkových křivek.
IC 50 (microM)
dimethylsulfoxid >50
6-benzylaminopurine-9-3-D-arabinofuranosylpurin >50
6-furfurylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(3-methoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(2-chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(3-hydroxybenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(3-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin 48
6-(2,3-dimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin >50
6-furfurylamino-9-ribosylpurin (srovnávací látka) <3
PŘÍKLAD 12: Růstová křivka pro látku 6-(benzylamino)purin-9-P-D-arabinofuranosylpurin
Experimenty byly provedeny s BJ kožními fibroblasty na 24-jamkových destičkách na tkáňové kulturyPřibližně 10000 buněk bylo umístěno do jednotlivých jamek. Buňky byly ponechány v médiu obsahujícímu DMEM s 10 % FBS po dobu 24 h. Testovaná sloučenina byla přidána k finální koncentraci pohybující se mezi 12,5 a 100 μΜ. DMSO rozpouštědlo bylo také testováno jako kontrola variability ve dvou sloupcích destičky a to A a D. Tkáňové médium s testovanou látkou nebo DMSO bylo vyměněno dvakrát týdně. Po následné tryptinizaci byly spočteny buňky ve čtyřech jamkách pro každou koncentraci na přístroji Coulter Z2 Beckman po 7 a 14 dnech. Výsledky jsou znázorněny na Obr. 1 - testovaná sloučenina neovliňuje negativně viabilitu buněk.
PŘÍKLAD 13: In vitro test podráždění kůže na modelu EpiDERM™
EpiDERM ™ je3D model epidermis vyráběný firmou Mattek, vliv testovaných látek na tkáň se hodnotí pomocí testu MTT. Testovány byly dva roztoky (dvě aplikační formy) látek 6furfurylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurin a 6-(3 -methoxybenzylamino)-9-P-Darabinofúranosylpurin o koncentracích 1 mM a 200 mikromolámí v 0,5% DMSO/99,5% PBS, přičemž byl použit standardní protokol nazvaný INVITRO EpiDermTM SKIN IRRITATION TEST Po pre-inkubaci tkání bylo na jejich povrch naneseno 30 mikrolitrů aplikační formyroztoku. Délka expozice byla 60 min. Pro každou koncentraci a kontrolu byly použity tři tkáně. Po opláchnutí aplikovaného roztoku byly tkáně inkubovány po dobu 42 h, aby byla možná reparace případného poškození. Pak byla tkáň inkubována po dobu tří hodin s MTT vzniklý formazan byl vyextrahován do izopropanolu. Relativní viabilita buněk byla vypočtěna z každé tkáně jako úměrné procento průměru viabilit negativních kontrol. V takto nastaveném experimentu byla průměrná viabilita tkání ošetřených 1 mM roztokem testované substance 99,3% u látky 6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin a 98% u látky 6(furfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin vztažené k 100% viability z průměrných hodnot spočtených podle tkání ošetřených jen solventem. Viabilita při použití roztoku 200 μΜ činila 105,7% u látky 6-(3-methoxybenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin a 98,6 % u látky 6(furfurylamino)-9-3-D-arabinosylpurin. Žádná z uvedených testovaných látek ani koncentrací obou aplikačních forem nezpůsobovala žádné poškození tkáně. Látka byla vyhodnocena v daných koncentracích jako neiritující kůži, tzn. tento výsledek je příznivý pro použití látky v kosmetice
PŘÍKLAD 14: Hodnocení oční dráždivosti v testu EpiOcular™
EpiOcular je model epitelu rohovky vyráběný firmou Mattek, vliv testovaných látek na tkáň se hodnotí pomocí testu MTT. Látka je považována za dráždivou/korozivní pokud je absorbance formazanu vzniklého redukcí MTT nižší než 60 procent hodnot negativní kontroly. Testovány byly roztoky látek 6-benzylamino-9-p-D-arabinofuranosylpurin 6-furfurylamino-9-p-Darabinofuranosylpurin a 6-(3-methoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin v médiu dodávaném v kitu v koncentraci 250 a 500 microM (duplikát), médium bylo použito jako negativní kontrola. Test byl proveden podle protokolu výrobce, části pro testování tekutých aplikačních forem. Pouze inkubační doba byla prodloužena z 30 minut na 18 hodin. Postup shrnut níže. Po dodání byly tkáně ponechány 15 min při teplotě laboratoře. Po kontrole integrity a po odstranění agarózy byly tkáně přeneseny do jamek 6-ti jamkových desek obsahuj ích 1 ml kultivačního média. Po 1 h bylo médium vyměněno a tkáně kultivovány 18 h. Poté bylo na tkáně aplikováno 20 mikrolitrů DPBS bez Ca2+ a Mg2+ iontů (součást kitu) a po 30 minutové inkubaci 50 mikrolitrů testovaných roztoků. Po ukončení 18 h inkubace byly tkáně vyjmuty z kultivační desky a opakovaně promyty v nadbytku DPBS bez Ca2+ a Mg2+ iontů (3 kádinky po 100 ml pro každou testovanou látku). Následně byly tkáně přeneseny do jamek 12 jamkové desky s 5 ml temperovaného média a inkubovány 12 minut. Poté byly tkáně přeneseny do jamek 6 jamkové desky s 1 ml média a inkubovány 2h. Tříhodinová inkubace s MTT (1 mg/ml) proběhla ve 24 jamkových deskách (0,3 ml média na jamku). Tkáně byly přeneseny do nové 24 jamkové desky s 2 ml isopropanolu na jamku do kterého se během 3 hodin za mírného třepání vyextrahoval vzniklý formazan. 200 mikrolitrů extraktu bylo přeneseno do jamek 96-jamkové desky. Absorbance byla změřena pří 570 nm a vztažena k negativní kontrole. Veškerá manipulace před extrakčním krokem byla prováděna ve sterilních podmínkách. Kultivace probíhala ve standardních kultivačních podmínkách (koncentrace CO2 5,5 procenta, 37°C). Médium a DPBS bez Ca2+ a Mg2+ iontů bylo temperováno na 37°C. Závěr: Relativní viabilita tkání ošetřených testovanými látkami se pohybovala v rozmezí 98-103 %. Látky jsou tedy v testovaném koncentračním rozmezí nedráždivé a jejich použití v kosmetice je tudíž příznivé a to i do přípravků, které je možné použít na obličej a v očním okolí.
PŘÍKLAD 15: Zpomalení stárnutí listů pšenice a zpomalení degradace chlorfylu při testování nových derivátů v senescenčním biotestu
Nádoby se semeny ozimé pšenice Tritium aestivum cv Hereward vyseté do vermikulity nasyceného Knopovým živným roztokem byl umístěny do klimatizované růstové komory s 16/8 hodinovou světelnou perjodu (světelná intenzita 50 mmol.mÁs'1) a teplotou 15 °C. Po 7 dnech měly semenáčky vyvinutý první praporcový list a druhý list začínal prorůstat. Z prvních listů vždy od 10 rostlin byly odebrány vrcholové sekce dlouhé přibližně 35 mm, které byly zkráceny tak aby jejich váha byla přesně 100 mg. Bazální konce těchto 10 listových segmentů byly umístěny do jamek mikrotitračních polystyrénových destiček obsahujících 150 ml roztoku testovaného derivátu. Destičky byly umístěny do plastického boxu vystlaného filtračním papírem, který byl nasycen vodou za účelem maximální vzdušné vlhkosti. Po 96 hodinách inkubace ve tmě při 25°C byly listové sekce vyjmuty a chlorfyl extrahován v 5 ml 80% ethanolu zahřátím při 80°C po dobu 10 min. Objem vzorku byl poté doplněn na 5 ml přidáním 80% ethanolu. Absorbance extraktů byla měřena při 665 nm. Jako kontroly byly měřeny rovněž chlorofylové extrakty z listů a listových vrcholů inkubované v deionizované vodě. Vypočtené hodnoty jsou průměrem z 10 opakování a celý experiment byl zopakován minimálně 3-krát. Výsledky těchto experimentů byly vyneseny ve formě grafů závislosti obsahu chlorfylu v senescenčních listech v závislosti na koncentraci. V každém experimentu byla použita jako pozitivní kontrolní látka 6-benzylaminopurin, který je znám velmi vysokou cytokininovou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na ΙΟ'3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 10'8 až 10'4 M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0.2% a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu. Ze získaných dat byla vypočítána maximální účinná koncentrace testované látky a její relativní účinnost v této koncentraci (Tab. 3, Obr. 2). 10‘4 M koncentrace BAP byla postulována jako 100% biologické aktivity. Výsledky známých látek a to 6-benzylaminopurine-9-P-Darabinofuranosylpurinu, 2-methylbenzylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurinu, 3methylbenzylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurinu a 4-methylbenzylamino-9-P-Darabinofuranosylpurinu byly také změřeny pro srovnání s nově připravenými látkami. Nově připravené látky jsou až dvakrát účinnější než známá látka 6-benzylamino-9-P-Darabinofuranosylpurin a převyšují zpravidla účinnost BAP standardu v rozmezí o 18 - 98%. Nově vyvinuté látky mají velmi silné antisenescenční účinky. Některé z nich vyvolávají až 200% nárůst obsahu chlorfylu v extirpovaných listech pšenice oproti kontrole BAP.
Tab. 3: Účinek nových cytokinů na retenci chlorfylu v extirpovaných listových segmentech pšenice. Hodnoty v tabulce jsou vyjádřeny v % výchozího obsahu chlorfylu v čerstvých listech před inkubací.
Látka maximální účinná koncentrace (mol.F1) účinnost (%) [lO'Wr1 bap = 100%]
6-furfurylamino-9-P-D-arabinofuranosylpurin 10'4 193±1
6-(3-methoxybenzylamino)-9-p-D- arabinofuranosylpurin 10'4 118±2
6-benzylaminopurine-9 β-Ddeoxyribosylpurin 10’4 178±9
3-chlorbenzylamino-9^-Darabinoforanosylpurin 10‘4 172±8
3-fluorbenzylamino-9^-Darabinofurano sylpurin 10'4 195±6
2-brombenzylamino-9-^-Darabinofuranosylpurin 10'5 186±19
3-brombenzylamino-9^-Darabinofuranosylpurin 10’4 198±10
4-brombenzylamino-9-^-Darabinofuranosylpurin 10-4 176±11
3-jodobenzylamino-9-P-Darabinofuranosylpurin 10’4 198±4
3,4-dimethoxylbenzylamino-9^-D- arabinofuranosylpurin 10'4 147±6
PŘÍKLAD 16: In vitro cytotoxická aktivita nových derivátů na nádorových buněčných liniích
Jedním z parametrů používaných jako základ pro cytotoxickou analýzu je metabolická aktivita životaschopných buněk. Například mikrotitrační analýza, kde se používá Calcein AM, je dnes rozšířena jako metoda kvantifikace buněčné proliferace a cytotoxicity. Množství zredukovaného Calceinu AM odpovídá počtu životaschopných buněk v kultuře.
Buněčné linie prsního karcinomu MCF-7, myší fibroblasty NIH3T3, lidská erythroleukemie K562, byly použity pro rutinní screening cytotoxicity sloučenin. Buňky byly udržovány v Nunc/Coming 80 cm2 plastikových lahvích a pěstovány v mediu pro buněčné kultury (DMEM obsahující 5g/l glukózy, 2mM glutaminu, 100 U/ml penicilinu, 100 pg/ml streptomycinu, 10% fetálního telecího séra a hydrogenuhličitan sodný). Buněčné suspenze byly připraveny a naředěny podle typu buněk a podle očekávané konečné hustoty buněk (104 buněk na jamku na základě charakteristik buněčného růstu), pipetovalo se 80 μί buněčné suspenze na 96-jamkové mikrotitrační destičky. Inokuláty byly stabilizovány 24 hodinovou preinkubací při 37°C v atmosféře CO2. Jednotlivé koncetrace testovaných látek byly přidány v čase nula jako 20 μί alikvotní podíl do jamek mikrotitračních destiček. Obvykle se sloučeniny ředily do šesti koncentrací v čtyřnásobné ředící řadě. Při rutinním testování byla nej vyšší koncentrace v jamce 166.7 μΜ, změny této koncentrace závisí na dané látce. Všechny koncentrace byly testovány v dubletu. Inkubace buněk s testovanými deriváty trvala 72 hodin při 37°C, 100 % vlhkosti a v atmosféře CO2 . Na konci inkubační periody byly buňky analyzovány po přidání roztoku Calceinu AM (Molecular Probes) a inkubace probíhala další 1 hodinu. Fluorescence (FD) byla měřena pomocí Labsystem FIA readeru Fluorskan Ascent (Microsystems). Přežití nádorových buněk (The tumor cell survival-TCS) bylo Spočítáno podle následujícího vztahu: Gl50=(FDjamka s derivátem /FDkontrolní jamka ) x 100 %. Hodnota GI5o , která odpovídá koncentraci látky, kdy je usmrceno 50 % nádorových buněk, byla vypočtena ze získaných dávkových křivek.
Pro vyhodnocení protinádorové aktivity byla testována toxicita nových derivátů na panelech obsahujících buněčné linie rozdílného histogenetického a druhového původu (Tab. 7, GI50 koncentrace uváděny v μΜ). Ukázalo se, že pro všechny testované nádorové linie i pro nemaligní buněčnou linii NIH3T3 bylo působení nových sloučenin netoxické. Účinné deriváty zabíjí nádorové buňky při koncentracích blízkých 0,1 až 50 μΜ.
Tab. 4. Cytotoxicita nově připravených látek pro různé nádorové buňky
Látka MCF- 7 K562 NIH3 T3
6-benzylamino-9-ribosylpurin >100 >100 >100
6-benzyl-9-p-D-arabinofuranosylpurin >100 >100 >100
6-furfuryl-9-P-D-arabinofuranosylpurin >100 >100 >100
6(3-methoxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin >100 >100 >100
6-benzylamino-9-P-Ddeoxyribosylpurin >100 >100 >100
3-methylbenzylamino-9-p-Darabinofuranosylpurin >100 >100 >100
4-metylbenzylamino-9-p-Darabinofurano sylpurin 95 >100 >100
2-methylbenzylamino-9-P-Darabinofuranosylpurin >100 >100 >100
3-fluorbenzylamino-9-P-Darabinofuranosylpurin >100 >100 >100
4-chlorbenzylamino-9-p-Darabinofuranosylpurin >100 >100 >100
2-fluorbenzylamino-9-P-Darabinofuranosylpurin 87 >100 >100
3 -chlorbenzylamino-9-3-Darabinofurano sylpurin >100 >100 >100
4-hydroxybenzylamino-9-p-Darabinofuranosylpurin >100 >100 87
3-flurorobenzylamino-9-P-D-2'- deoxyribosylpurin >100 >100 >100
3-chlorbenzylamino-9-P-D-2'deoxyribosylpurin >100 >100 >100
3-hydroxybenzylamino-9-p-D-2 deoxyribo sylpur in >100 >100 >100
2,4-dimethoxybenzylamino-9-p-Darabinofuranosylpurin 98 >100 >100
2-chlor-4-fluorbenzylamino-9-P-D- arabinofuranosylpurin >100 >100 >100
3-chlor-4-fluorbenzylamino-9-3-D- arabinofuranosylpurin >100 >100 >100

Claims (7)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce I
    I a jejich farmaceuticky přijatelné soli s alkalickými kovy, amoniakem, aminy, nebo adiční soli s kyselinami, kde
    Gly znamená β-D-arabinofuranosyl nebo P-D-2'-deoxyribofuranosyl,
    Ar znamená benzyl nebo furfuryl, které mohou být nesubstituované nebo substituované jedním nebo více, s výhodou jedním až třemi, substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxyl, alkyl, halogen, alkoxy, amino, merkapto, karboxyl, kyano, amido, sulfo, sulfamido, acyl, acylamino, acyloxy, alkylamino, dialkylamino, alkylmerkapto, trifluormethyl, trifluormethoxy, pro použití jako regulátory růstu, vývoje a stárnutí živočichů, zejména savců.
  2. 2. Způsob regulace růstu, vývoje a stárnutí rostlin in vivo, nebo mikroorganismů, rostlinných a živočišných buněk in vitro, vyznačený tím, že se aplikuje látka obecného vzorce I definovaného v nároku 1.
  3. 3. 6-aryl-9-glykosidpuriny pro použití podle nároku 1 nebo způsob podle nároku 2, kde látky obecného vzorce I jsou vybrané ze skupiny zahrnující: 6-furfurylamino-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-methylfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4methylfurfurylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-methylfurfurylamino)-9-P-D- arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluoro-furfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(4fluorofurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-fluorfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor-furfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(4chlorfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-chlorfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-brom-furfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(4bromfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-bromfurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(4hydroxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-hydroxyfurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-methoxyfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(4methoxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-methoxyfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-( 6-(2-fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3fluorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluorbenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(3brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-brombenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(3jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-jodbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-chlorbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(2acetylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-acetylbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-acetylbenzylamino)-9-P-D-arabinoíuranosylpurin, 6-(3karboxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-karboxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-acetoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(3acetoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-acetoxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-sulfobenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(3sulfobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-sulfobenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-kyanobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3 kyanobenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-kyanobenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-methoxybenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin,6-(3methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-methoxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(3hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxybenzylamino)-9-P-D29
    6-(6-chlor-2-fluor-3 6-(3-chlor-2-fluor-56-(3 -chlor-2-fluor-66-(2,3-difluor-4arabinofuranosylpurin, 6-(4-hexylbenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-6fluor-3-methylbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, methylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, (trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, (trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, methylbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,6-difluor-3-methylbenzylamino)-9-PD-arabinofuranosylpurin, 6-(2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor-2,6-difluorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6(3-(trifluormethylthio)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)-9-[3-D-arabinofuranosylpurin, methylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)-9-p6-(3-fluor-4-methyl
    6-(5-fluor-2D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-(trifluormethylthio)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,
    6-(3-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-4fluorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-(trifluormethoxy)benzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-chlor-3-(trifluormethyl) benzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-íluor-3-(trifluormcthyl)benzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,
    6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethoxy)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-diethylaminobenzylamino)9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)-9-[3-D-arabinofuranosylpurin, 6(3,5-dihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4-dihydroxybcnzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,5-dihydroxybenzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,6-dihydroxybenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 6(3,4-dimethoxybenzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,5-dimethoxybenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3-dimethoxybenzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,4-dimethoxybenzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,5-dimethoxybenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,6-dimethoxybenzylamino)-9T-D-arabinofuranosylpurin, 630
    6-(3,4,56-(2-hydroxy-3,4,56-(2-hydroxy-3,4,66-(2-hydroxy-4,5,6(2-hydroxy-3-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-methoxybenzylamino)9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-methoxybenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-2-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-4-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-5methoxybenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-6-methoxybenzylamino)9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-2-methoxybenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-5-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-6methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)-9-PD-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,5-trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofiiranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-9-PD-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,4,6-trihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4trihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)-9-pD-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-3-jodbenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-3brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-brombenzylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-6-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-3fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3methylfurfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-methylfurfurylamino)-9-3-D31
    2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-methylfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-fluor-furfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-fluorfurfurylamino)- 9-βD-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-fluorfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-chlor-furfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-chlorfurfurylamino)- 9-βD-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-chlorfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-brom-furfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-bromfurfurylamino)-9^D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-bromfurfurylamino)- 9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-hydroxyfurfurylamino)- 9-β-Ο-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-hydroxyfurfurylamino)9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-hydroxyfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-methoxyfurfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(4-methoxyfurfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-methoxyfurfurylamino)-9β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-( 6-(2-fluorbenzylamino)- 9-β-ϋ-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-fluorbenzylamino)- 9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4fluorbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-brombenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-brombenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4brombenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-jodbenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-jodbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4jodbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3chlorbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-chlorbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-acetylbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3acetylbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-acetylbenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-karboxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4karboxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-acetoxybenzylamino)-9^-D2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-acetoxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(4-acetoxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-sulfobenzylamino)-9^-D2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-sulfobenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4sulfobenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-kyanobenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-kyanobenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4kyanobenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-methoxybenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-mcthoxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(4-methoxybenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-hydroxybenzylamino)- 9-β32
    D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-hydroxybenzylamino)-9-p-D-2'-deoxyribofuranosylpurin,
    6-(4-hydroxybenzylamino)-9-3-D-2'-deoxyribofuranosylpurin.
  4. 4. Použití 6-aryl-9-glykosidpurinů obecného vzorce I definovného v nároku 1 jako kosmetických přípravků pro zpomalení stárnutí rostlin, savců, nebo pro zpomalení stárnutí buněk rostlin či savců, například keratinocytů a fibroblastů.
  5. 5. 6-aryl-9-glykosidpuriny obecného vzorce ía
    ía a jejich farmaceuticky přijatelné soli s alkalickými kovy, amoniakem, aminy, nebo adiční soli s kyselinami, kde
    Gly znamená β-D-arabinofuranosyl nebo β-Ο-ζ'^εοχγτώοϋπηηοΒγΙ,
    Ar znamená benzyl nebo furfuryl, které jsou substituované jedním nebo více, s výhodou jedním až třemi, substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxyl, halogen, alkoxy, amino, merkapto, karboxyl, kyano, amido, sulfo, sulfamido, acyl, acylamino, acyloxy, alkylamino, dialkylamino, alkylmerkapto, trifluormethyl, trifluormethoxy, nebo je Ar nesubstituovaný furfuryl.
  6. 6. 6-aryl-9-glykosidpuriny podle nároku 5, vybrané ze skupiny zahrnující 6-(3methylfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-methylfurfurylamino)-9-P-D- arabinofuranosylpurin, 6-(5-methylfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluorofurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluorofurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-fluorfurfurylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor33 furfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-chlorfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-chlorfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-bromfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-bromfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-bromfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(3hydroxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxyfurfurylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-hydroxyfurfurylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(3methoxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-methoxyfurfurylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(5-methoxyfurfurylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluorbenzylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-brombenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-jodbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-j odbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-chlorbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(4chlorbenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-acetylbenzylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-acetylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(4acetylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-karboxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-karboxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin,6-(2acetoxybenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-acetoxybenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-acetoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2sulfobenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-sulfobenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-sulfobenzylamino)-9-3-D-arabinofuranosylpurin,6-(2kyanobenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpiirin, 6-(3-kyanobenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-kyanobenzylamino)-9-P-D-arabinoíúranosylpurin,6-(2methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-methoxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(2hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxybenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,6-(4hexylbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-6-fluor-3-methylbenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(6-chlor-2-fluor-3-methylbenzylamino)-9-P-D34 arabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor-2-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor-2-fluor-6-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2,3-difluor-4-methylbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,6-difluor-3-methylbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-fluor-6(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-chlor-2,6difluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethylthio)benzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluor-4-methyl benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluor-3-methylbenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(5-fluor-2methylbenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-3,6-difluorbenzylamino)-9-pD-arabinofuranosylpurin, 6-(4-(trifluormethylthio)benzylarnino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-fluor-5-(trifluormethyl)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-chlor-4fluorbenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-(trifluormethoxy)benzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethyl)benzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2(trifluormethyl)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethyl)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-chlor-3-(trifluormethyl) benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(3,5-bis(trifluormethyl)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-(trifluormethoxy)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethoxy)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4(trifluormethyl)benzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-diethylaminobenzylamino)9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6(3,5-dihydroxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dihydroxybenzylamino)-9β-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4-dihydroxybenzylamino)purin, 6-(2,5dihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,6-dihydroxybenzylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(3,4-dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,5-dimethoxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(2,3-dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,5-dimethoxybenzylamino)-9^-Darabinofuranosylpurin, 6-(2,6-dimethoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-3-methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4methoxybenzylamino)-9^-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-methoxybenzylamino)9-β-Ο-ΒΓΒ6ΐηοήΐΓΒηο8γ1ρηπη, 6-(2-hydroxy-6-methoxybenzylamino)-9^-D35 arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-2-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin,
    6-(3-hydroxy-4-methoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-5methoxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3-hydroxy-6-methoxybenzylamino)9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-2-mcthoxybenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-3-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-5-methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(4-hydroxy-6methoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4-trimethoxybenzylamino)-9-3D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,5-trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, trimethoxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,6-trimethoxybenzylamino)-9-3D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4-trihydroxybenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 66-(3,4,56-(2-hydroxy-3,4,56-(2-hydroxy-3,4,66-(2-hydroxy-4,5,6(2,4,6-trihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2,3,4trihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3,4,5-trihydroxybenzylamino)-9-pD-arabinofuranosylpurin, 6-(2,4,6-trihydroxybenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6(2-hydroxy-3-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4chlorbenzylarnino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-chlorbenzylamino)-9-P-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-chlorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-3-jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofiiranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-jodbenzylamino)9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-jodbenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-6-jodbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-3brombenzylamino)-9-p-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-brombenzylamino)-9-p-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2hydroxy-6-brombenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-3fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-4-fluorbenzylamino)-9-3-Darabinofuranosylpurin, 6-(2-hydroxy-5-fluorbenzylamino)-9-P-D-arabinofuranosylpurin, 6-(3methylfurfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 66-(3-fluor-furfurylamino)-9-P-D2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-fluorfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(5-fluorfurfurylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-chlor-fiufurylamino)-9^-D2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-chlorfurfurylamino)-9-p-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 636 (5-chlorfurfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-brom-furfurylamino)-9^-D2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-bromfurfurylamino)-9-p-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6(5-bromfurfurylamino)- 9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-hydroxyfurfurylamino)-9-pD-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-hydroxyfurfurylamino)-9-P-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-hydroxyfurfurylamino)- 9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(3-methoxyfurfurylamino)-9-P-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-methoxyfurfurylamino)-9β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(5-methoxyfurfurylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-fluorbenzylamino)- 9-β-ϋ-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3fluorbenzylamino)- 9-β-ϋ-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-fluorbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-brombenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3brombenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-brombenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-jodbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3jodbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-jodbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-chlorbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2chlorbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-chlorbenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-chlorbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2acetylbenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-acetylbenzylamino)-9^-D-2 'deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-acetylbenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3karboxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-karboxybenzylamino)-9^-D2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-acetoxybenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6(3-acetoxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-acetoxybenzylamino)-9^D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-sulfobenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6(3-sulfobenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-sulfobenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-kyanobenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(3kyanobenzylamino)-9^-D-2 '-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-kyanobenzylamino)-9^-D-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-methoxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6(3-methoxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4-methoxybenzylamino)-9^D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(2-hydroxybenzylamino)- 9-β-ϋ-2'deoxyribofuranosylpurin, 6-(3-hydroxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin, 6-(4hydroxybenzylamino)-9^-D-2'-deoxyribofuranosylpurin.
  7. 7. Kosmetické a/nebo tkáňové a/nebo růstově-regulační přípravky, vyznačené tím, že obsahují jako účinnou látku alespoň jednu sloučeninu vzorce la podle nároku 5 nebo 6.
CZ2014875A 2014-12-09 2014-12-09 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití CZ308881B6 (cs)

Priority Applications (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2014875A CZ308881B6 (cs) 2014-12-09 2014-12-09 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití
EP15774847.6A EP3229771B1 (en) 2014-12-09 2015-09-14 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof
PCT/CZ2015/050005 WO2016091235A1 (en) 2014-12-09 2015-09-14 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof
SG11201704019TA SG11201704019TA (en) 2014-12-09 2015-09-14 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof
US15/527,613 US10100077B2 (en) 2014-12-09 2015-09-14 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof
PCT/CZ2015/050013 WO2016091236A1 (en) 2014-12-09 2015-12-02 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof
EP15816356.8A EP3229772B1 (en) 2014-12-09 2015-12-02 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof
PL15816356T PL3229772T3 (pl) 2014-12-09 2015-12-02 6-arylo-9-glikozylopuryny i ich zastosowanie
US15/528,056 US10550144B2 (en) 2014-12-09 2015-12-02 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2014875A CZ308881B6 (cs) 2014-12-09 2014-12-09 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2014875A3 true CZ2014875A3 (cs) 2016-06-22
CZ308881B6 CZ308881B6 (cs) 2021-08-04

Family

ID=54251269

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2014875A CZ308881B6 (cs) 2014-12-09 2014-12-09 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití

Country Status (6)

Country Link
US (2) US10100077B2 (cs)
EP (2) EP3229771B1 (cs)
CZ (1) CZ308881B6 (cs)
PL (1) PL3229772T3 (cs)
SG (1) SG11201704019TA (cs)
WO (2) WO2016091235A1 (cs)

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1063952A (en) * 1964-03-17 1967-04-05 Takeda Chemical Industries Ltd A process for producing purine-ribosides
CA989341A (en) * 1971-02-26 1976-05-18 Kyowa Hakko Kogyo Co. Process for producing ribosides of heterocyclic organic bases by fermentation
EP0888057B1 (en) 1996-03-15 2001-09-05 Syngenta Participations AG Herbicidal synergistic composition and method of weed control
US6294522B1 (en) 1999-12-03 2001-09-25 Cv Therapeutics, Inc. N6 heterocyclic 8-modified adenosine derivatives
CZ294538B6 (cs) * 2002-12-30 2005-01-12 Ústav Experimentální Botaniky Akademie Vědčeské Re Substituční deriváty N6-benzyladenosinu, způsob jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující
ATE547150T1 (de) * 2003-09-30 2012-03-15 Lion Corp Haarwuchsmittel-zusammensetzung
US7893227B2 (en) 2006-12-05 2011-02-22 Lasergen, Inc. 3′-OH unblocked nucleotides and nucleosides base modified with non-cleavable, terminating groups and methods for their use in DNA sequencing
CZ2009298A3 (cs) * 2009-05-14 2010-11-24 Univerzita Palackého v Olomouci Substituované 6-benzylaminopurin ribosidy, jejich použití a farmaceutický prípravek tyto slouceniny obsahující
EP2511283A4 (en) * 2009-12-10 2013-07-03 Inst Materia Medica Cams N6-SUBSTITUTED ADENOSINE DERIVATIVES, N6-SUBSTITUTED ADENINE DERIVATIVES AND THEIR USE
US9096632B2 (en) 2010-10-27 2015-08-04 Public University Corporation Yokohama City University Modulator of activity of adenylate cyclase
US20120164641A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Roche Molecular Systems, Inc. Methods and Compositions for Detecting Mutation in the Human Epidermal Growth Factor Receptor Gene

Also Published As

Publication number Publication date
EP3229771B1 (en) 2024-04-03
US20170326168A1 (en) 2017-11-16
US10550144B2 (en) 2020-02-04
US20170334943A1 (en) 2017-11-23
WO2016091236A1 (en) 2016-06-16
EP3229771A1 (en) 2017-10-18
SG11201704019TA (en) 2017-06-29
EP3229772B1 (en) 2020-04-29
CZ308881B6 (cs) 2021-08-04
US10100077B2 (en) 2018-10-16
EP3229772A1 (en) 2017-10-18
WO2016091235A1 (en) 2016-06-16
PL3229772T3 (pl) 2020-11-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2002363362B2 (en) Heterocyclic compound based on N6-substituted adenine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
US8119614B2 (en) Substitution derivatives of N6-benzyladenosine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
US8575182B2 (en) 6, 9-disubstituted purine derivatives and their use as cosmetics and cosmetic compositions
AU2002363362A1 (en) Heterocyclic compound based on N6-substituted adenine, methods of their preparation, their use for preparation of drugs, cosmetic preparations and growth regulators, pharmaceutical preparations, cosmetic preparations and growth regulators containing these compounds
CZ2014908A3 (cs) 6,8-Disubstituované-9-(heterocyklyl)puriny, přípravky obsahující tyto deriváty a jejich použití v kosmetických a medicínských aplikacích
BRPI0812865B1 (pt) derivados de 6-anilinopurina substituída
CZ307722B6 (cs) Adeninové deriváty a jejich použití
US20130072506A1 (en) 6,8-disubstituted purine compositions
CZ2017237A3 (cs) Deriváty 9-(2-oxacykloalkyl)-9H-purin-2,6-diaminu, přípravky obsahující tyto deriváty a jejich použití
CZ2014875A3 (cs) 6-aryl-9-glykosylpuriny a jejich použití
NZ538596A (en) Heterocyclic compound based on N6-substituted adenine, methods of their preparation, their use for preparation of cosmetic, cosmetic preparations containing these compounds