CZ2007441A3 - Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výrobya jejich použití - Google Patents
Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výrobya jejich použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2007441A3 CZ2007441A3 CZ20070441A CZ2007441A CZ2007441A3 CZ 2007441 A3 CZ2007441 A3 CZ 2007441A3 CZ 20070441 A CZ20070441 A CZ 20070441A CZ 2007441 A CZ2007441 A CZ 2007441A CZ 2007441 A3 CZ2007441 A3 CZ 2007441A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- paclitaxel
- succinyl
- targeted
- gnrh
- derivative
- Prior art date
Links
- 150000004579 taxol derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical class O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims abstract description 25
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 claims abstract description 4
- 125000004080 3-carboxypropanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C(O[H])=O 0.000 claims abstract description 3
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 claims abstract description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 42
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 24
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 6
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 5
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 3
- XOOFLVNFEPIPIW-KQQUZDAGSA-N (1e,4e)-1,5-bis(furan-2-yl)penta-1,4-dien-3-one Chemical compound C=1C=COC=1\C=C\C(=O)\C=C\C1=CC=CO1 XOOFLVNFEPIPIW-KQQUZDAGSA-N 0.000 description 2
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNVPNXKRAUBJGW-UHFFFAOYSA-N (2-chloroacetyl) 2-chloroacetate Chemical compound ClCC(=O)OC(=O)CCl PNVPNXKRAUBJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SCCCIUGOOQLDGW-UHFFFAOYSA-N 1,1-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1N(C(=O)N)C1CCCCC1 SCCCIUGOOQLDGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- 240000005369 Alstonia scholaris Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 101000573199 Homo sapiens Protein PML Proteins 0.000 description 1
- 102000008238 LHRH Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010021290 LHRH Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000007093 Leukemia L1210 Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101001136140 Pinus strobus Putative oxygen-evolving enhancer protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- FOCAUTSVDIKZOP-UHFFFAOYSA-N chloroacetic acid Chemical compound OC(=O)CCl FOCAUTSVDIKZOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940106681 chloroacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000039 congener Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 1
- 102000054896 human PML Human genes 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004922 lacquer Substances 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1.CN(C)C1=CC=NC=C1 PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N triethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCO ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Cílený derivát paclitaxelu obecného vzorce II, v nemž R.sup.1.n. znamená sukcinyl, sukcinyl-triethylenglykol, sukcinyl-Phe-Phe-OH, chloracetyl, acetyl-S-Cys-OH nebo N-maleimidobutyryl a R.sup.2.n. znamená fragment molekuly GnRH. Zpusob výroby uvedeného cíleného derivátu, podle kterého se k molekulepaclitaxelu naváže pres vhodný mustek peptidový hormon ci jeho derivát. Toto navázání se provede vedvou krocích, kdy se v prvním kroku na paclitaxelnaváže raménko a ve druhém kroku je na volné koncové skupiny ramének navázán takový fragment GnRH, který odpovídá typu skupiny raménka, na kterou se váže. Uvedený cílený derivát paclitaxelu se muže používat jako cytostatické cinidlo.
Description
Oblast techniky
Předložený vynález se týká cílených derivátů paclitaxelu, způsobu jejich výroby a jejich použití,
Dosavadní stav techniky
PaclitaxeJ vzorce I
je přírodní produkt, který byl poprvé popsán Wanim v roce 1971 (.). Amer. Chem,Soc. 93. 2325-2327). Paclitaxel je s úspčehem používán při léčbě rakoviny vaječníků, prsu a plic. Jeho cylostatická aktivita je spojena se stabilizací mikrotubulů a následným ukončením proliferace buňky (Suffnes M. CRC Press lne., Paclitaxel-science and aplications, 1995,).
Cílený derivát cytostatika jc molekula skládající se zdaného cytostatika, biologicky aktivní látky a raménka, které obě části spojuje.
Biologicky aktivní látka hraje roli navigátora dané molekuly k rcceptorům látce vlastním. Na těchto specifických reccptorech je molekula cíleného cytostatika zachycena a koncentrována. Díky tomuto efektu dochází ke snížení dávky léku pacientovi a minimalizaci negativních vedlejších účinků cytostatika na ostatní buňky.
Cílený derivát cytostatika se do buňky dostává receptovém zprostředkovanou endocytózou ( Harrison G S, Wierman Μ E. Nctt T M and Glode E M, (jonadolropinreleasing hormone and its receptor in normál and malignant celíš, Endocrine-Relaled Cancer (2004) 11 725-748.).
Předmětem vynálezu jsou cílené deriváty paclitaxelu obecného vzorce 11
Podstata vynálezu
(II), v němž
R1 znamená sukcinyl. sukcinyl-triethvlenglykol. sukcinyl-Phe-Phc-OH. chloracetyl, aeetyl-S-Cys-OII nebo N-maleimidobutyryl a η
znamená fragment molekuly GnRH.
Dále se předložený vynález týká způsobu výroby sloučenin obecného vzorce 11 a jejich použití.
V našem případě byla biologicky aktivní látkou zvolena molekula hormonu GnRH a její analogy. GnRH je hypotalamieký peptidový hormon ovlivňující funkci vypouštění hormonů PSll a LU z hypofýzi. GnRH, a tedy i jeho receptory, se nacházejí nejen v hypofýze. ale i v endometriu, placentě, prsu. vajcčnícíeh, prostatě a varlatech (Clayton and Catt 1981, Wierman 1996,1 luirne and Lambalk 2001, Limonta et al. 2003.). Důležitým faktem je. žc GnRH receptory byly ve zvýšeném množství objeveny na nádorových buňkách hormonálně responsibilních nádorů (Kang et al. 2000, Bcdecarrats and Kaiser 2003). Při syntéze nebyla ze sterických důvodů použita celá molekula GnRH, ale pouze biologicky aktivní fragment.
Deriváty paclitaxelu jsou připravovány modifikací hydroxylové skupiny na 2' uhlíku postranního řetězce.Tato hydroxylová skupina jc vybrána ze dvou důvodů
a) vykazuje nejvyšší reaktivnost ze všech tří volných ΟΙ 1 skupin na molekule paclitaxelu a • ··*
b) je využívána pro tvorbu tzv.“prodrug“. Tato prodrug paclitaxelu jsou založena na faktu, že hydroxylová skupina na 2' uhlíku postranního řetězec paclitaxelu je důležitá pro vazbu této molekuly na mikrolubuly. Pokud tedy dojde k navázání raménka právě přes tuto skupinu, dochází k inaktivaci paclitaxelu. Ke zpětné aktivací cytostalické funkce paclitaxelu dochází po vstupu prodrug do buňky, kde dojde k jejich rozpadu na volný paclitaxel a ostatní doprovodné připojené látky. Na rozpadu prodrug a uvolnění paclitaxelu se podílí pH a enzymy nacházející sc v buňce ( Cavallaro G, Liccíardi M, Caliceti P, Salniaso S and Gíammona G, Europcan Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 58 (2004) 151-159.).
Syntéza cíleného derivátu paclitaxelu obecného vzorce II se skládá zc dvou stupňů:
A) v prvním kroku je na paclitaxel navázáno raménko. Volba vhodného raménka je založena na faktu, žc na straně, kde sc raménko váže přes 011 skupinu paclitaxelu, musí být volná karboxyskupina pro tvorbu esterové vazby a na druhé straně raménka ntusí být laková skupina, která umožní následné napojení fragmentu GnRH. Tato skutečnost dává možnost přípravy mnoha druhů ramének a jejich napojení.
Tak 2'-O-sukcinyl-pacli(axel byl připraven navázáním kyseliny jantarové na hydroxylovou skupinu na 2’ uhlíku postranního řetězce paclitaxelu. toto ranténko končí volnou karboxylovou skupinou.
Trielhy!englykol-2'-O-sukcinyl-paditaxel byl připraven prodloužením molekuly 2'-Osukcinyl-paclitaxeiu o molekulu triethylenglykolu. Toto raménko končí volnou OH skupinou.* rhe-Phe-2’-O-sukciml-pacliULxel vznikl spojením volné karboxyskupiny sukcinátu a aminové skupiny dipeptidu Phe-Phe. Toto raménko vlastní volnou karboxylovou skupinu na a uhlíku dané aminokyseliny.*
2’-()-cMot‘(icelyl-pacÍitaxeÍ byl připraven navázáním chloroctové kyseliny na hydroxylovou skupinu na 2’ uhlíku postranního řetězce paclitaxelu, toto raménko končí volným Cl.*
Cys(OH)-S-2'-()-cicetyl-pciclilaxel vznikl reakcí volné skupiny Cl na 2'-()-chlfíracetyjpadilaxelu a Sil skupiny na cysteinu. Toto raménko obsahuje volnou karboxyskupinu, NH? skupina je chráněna.* ··* • « · · · · * · · • · · · · · · »··* · *· ·· ··
2'-()-(N-maleimiciobutyryl) paclitaxel byl připraven vazbou N-maleimidomáselné kyseliny na hydroxylovou skupinu na 2' uhlíku postranního řetězce paclitaxelu; loto raménko končí volnou maleimidovou skupinou.* *Tato raménka jsou připravována z části podle všeobecných pravidel organických syntéz a z části je čerpáno z literatury, V následujících přesných popisech syntéz bude vždy uveden zdroj informací.
Β) V druhém kroku je na volné koncové skupiny ramének vázán takový fragment GnRH, který odpovídá typu skupiny raménka, na kterou sc váže. Tak byly připraveny fragmenty GnRH svolnou karboxyskupinou (pGlu-llis-Trp-Ser-tyr-Gly-LxuOII), svolnou NIT skupinou (H-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNFb) a fragmenty GnRH prodloužené na C-konci o cystein s volnou SH skupinou ( pHis-Trp-Ser-Tyr-Gly-Lcu-Arg-Pro-CysNII?).
Cylostatické účinky byly měřeny nejen u cílených molekul, ale také u molekul vzniklých napojením raménka na paclitaxel. Měření byla prováděna na buněčných liniích: cervikálního karcinomu IleLa S3 [Human cervix carcinoma IleLa S3 cells (ATCC CCL 2.2)], lidských T-lymfoblastoidech CCRF-CEM [ CCRF/CEM T lymphoblastoid cells (ATCC CCT 119)], myších leukemických buňkách L1210 [Mouše leukcmia T 1210 cells (ATCC CCL 219)] a IIL-60 lidských promyelocytickýeh buňkách leukémie.
. Testy byly prováděny v CCA inkubátoru při 37 ňC (72 h) a vyhodnoceny konvenčními technikami (na počítači buněk Serono 150+, barvením methylenovou modří a buněčným testem viabilily XTT), Cytostatická účinnost (hodnoty ICso) jednotlivých sloučenin byla posouzena podle jejich schopnosti inhibovat růst uvedených buněčných kultur.
Příklady provedení vynálezu
V dalším textu budou používány následující zkratky:
| DCC | N,N’-dicyklohexylkarbodiimid |
| DITA | diisopropylcthylamin |
| Dl PC | A, A-diisopropylkarbodiimid |
| DMAP | 4-(dimethylamino)pyridin |
| DMF | dimethylformamid |
| GnRH | gonadotropiny uvolňující hormon |
• « • · · »
NHS N-hydroxysukcinimid
TBTIJ ()-(benzotriazol-I-yl)-N,N,N',N'-tetramcthyluronium-tetrafluoroborát ΓΕΛ triethylamin
Příklad 1
Příprava 2 '-O-sukcinyl-pacliíaxelu
Bylo postupováno analogicky podle Deutsch Η M and Zalkow L H. Synthesis of congeners and prodrugs. 3. Watcr-soluble prodrugs of paclitaxel with potent antitumor actívity, J, Med. Chem. 32 (1989). str. 788 792.
450 mg (4,5rnmol) anhydridu kyseliny jantarové a 250 mg (0,29ntmol) paclitaxelu bylo rozpuštěno v 10 ml suchého pyridinu. Po 3 hodinách mícháni za laboratorní teploty a kontroly stavu syntézy na HPLC bylo rozpouštědlo odstraněno na vakuové odparce. Ke zbytku bylo přidáno 8 ml destilované vody, směs byla míchána 20 minut a filtrována. Precipitát byl rozpuštěn v acetonu do něhož byla pomalu přidávána destilovaná voda. Vzniklá bílá sraženina byla zfíltrována. Molekulová hmotnost 953, MS (ESI+) analýza potvrdila výslednou látku 2'-O-sukcinyl-pac!itaxel (viz obrázek 1),
Příklad 2
Příprava triethyienylykol-2 '-O-sukcinyl-pacl itaxelu
Kombinace kondenzačního činidla a báze byla vybrána podle Grccnwald R R, Gilbert C W, Pendri A, Conover C 9, Xia J, Martínez A, Journal ofMedicinal Chemistry 39 (2): 424431 JAN 19 1996.
Tricthylenglykol (10 μΐ, 0,07 mmol) byl za laboratorní teploty rozpuštěn v 0,5 ml bezvodého dichlormethanu. Tato směs byla vychlazena na 0 °C, poté byly přidány kondenzační činidlo DIPC (2 μΙ, 0,01 mmol), 2 '-O-sukcinyl-paclitaxel (10 mg. 0,01 mmol) a báze DMAP (5 mg, 0,04 mmol). Směs byla míchána 16 hodin při laboratorní teplotě a poté bylo rozpouštědlo odpařeno na rotační vakuové odparce. Byla provedena IIPLC analýza konečné směsi. Látka byla identifikována na základě MS (LSI +) analýzy, frakce s očekávanou hmotností 1085,6 byla izolována na preparát i vní HPLC. Molekulární hmotnost • ·«· • · 0 · * * ·
0 ·0·0
0000 0 «« · analogu je 1085,6. V hmotnostním spektru je hlavním maximem molekulární adukt (M+Nafo hmotností 1108,4 (viz. obrázek 2).
Příklad 3
Příprava Phe-Phe-2 '-O-sukcinyl-pacliiaxclu
Aktivace karboxylové skupiny pomocí NHS: 10 mg (0.01 mmol) 2'-O-sukcinylpaclitaxelu. 2.4 mg (0,02mmol) NHS a 4,3 mg (0,02mmol) DCC bylo rozpuštěno v 0.5 ml dichlormethanu. Poté byly přidány 4 μΐ (0,02mmol) DIEA. Směs byla míchána za laboratorní teploty. Po 19 hodinách bylo rozpouštědlo odpařeno na vakuové odparce.
mg (0,0()5mmo!) aktivovaného 2'-O-sukcinyl-paclitaxelu a 2 mg (O.OOómmol) dipeptidu Phe-Phe bylo rozpuštěno v 0,5 ml DMF. Směs byla míchána za laboratorní teploty 6 hodin. Poté byla směs lyofdizována a podrobena analýze na MS(ESI+). Molekulová hmotnost derivátu jc 1247. V hmotnostním spektru je hlavním maximem molekulární adukt (M i Na)4 o odpovídající hmotnosti 1270,3 (viz obrázek 3).
Příklad 4
Příprava 2 '-()-chloraceíyl-padilaxelii mg (O.OlSmmol) paclitaxclu bylo rozpuštěno v 0,5 ml dichlormethanu pod ochrannou atmosférou argonu. Směs byla vychlazena na 0 °C. Bylo přidáno 3,3 mg (0.0I9mmol) anhydridu kyseliny chloroctové a 3 μΐ (0,0l5mmol)DiEA. Směs byla míchána za laboratorní teploty a tmy 15 hodin. Průběh reakce byl sledován HPI.C. Látka byla čištěna pomocí preparativní TLC a analyzována MS(ESI+). Molekulová hmotnost 929,5. V hmotnostním spektru je hlavním maximem adukt (Mi-Na)+o odpovídající hmotnosti 952,1 (viz obrázek 4).
• · « · · · • · « · · * · * · • I · · · »· «· ·*
Příklad 5
Příprava Cys(()lí)-S-2 '-()-acetyl-paclitaxelu mg (0,01 mmol) 2'O-chloracelyl-paclilaxelu a 5 mg (0,02mmol) N-Boc-Cys-OH bylo rozpuštěno v 0,5 ml DMF. Poté byly přidány 3 μ| (0.015mmol) DIFA. Směs byla míchána ve tmě a v ochranné atmosféře argonu po dobu 18 hodin. Směs byla lyofilizovárta a podrobena analýze MS(FSI+). V hmotnostním spektru jc hlavním maximem adukt (M+Na)' o odpovídající hmotnosti 1137,2 (viz obrázek 5).
Příklad 6
Příprava 2'-() -(N-maleimidobulyryl) -paclilaxelu
Příprava anhydridů N-malcímidomáselné kyseliny: lOrng (0,05mmol) Nmaleimidomáselné kyseliny bylo rozpuštěno v 0,5 ml dichlormethanu. Do roztoku přidáváme po kapkách TL:A, dokud se N-maleimidomásclná kyselina všechna nerozpustí. Poté bylo přidáno 5 mg (0,02mmol) DCC. Směs byla míchána za teploty 10 °C’ a za tmy 5 hodin. Po 5 hodinách došlo k vysrážení N,/Cdicyklohexylmočovíny, která byla odstraněna odstřeďováním a filtrací přes míkrofiltr. Poté bylo odstraněno rozpouštědlo na vakuové odparce.
Směs byla rozpuštěna v 0,5 ml dichlormethanu, bylo přidáno 10 mg (0,01 mmol) paclitaxehi a 5 μΐ pyridinu. Směs byla míchána za laboratorní teploty po dobu 15 hodin. Poté bylo rozpouštědlo odpařeno na vakuové odparce. Směs byla čištěna na HPLC' a analyzována na MS(ESD). V hmotnostním spektru je hlavním maximem adukt (M+Na)' o odpovídající hmotnosti 1141,2 (viz obrázek ó).
Příklad 7
Příprava cíleného derivátu (JnRH-2'-()-sukciny!-paclitaxelu (1. způsob)
85,8 mg (0,09mmol) 2 -O-sukcinyl-paclitaxelu a 28,9 mg (0,09mmol) TBTU bylo rozpuštěno v 10 ml bezvodého DMF. Do směsi bylo přidáno 31 μΐ (0,18mmol) DIFA. Po 2 minutách míchání za laboratorní teploty bylo přidáno 59,4 mg (0,09mmol) fragmentu GnRH • · · · « » * * · •· * ·* · (H-Tyr-Gly-Leii-Arg-Pro-GlyNlb). Směs byia míchána za laboratorní teploty 2 hodiny. Poté byla směs lyoftlizována. Výsledná látka paclÍtaxel-sukcinát-GnRH byla čištěna HPLC a analyzována MS(ESI+) (viz obrázek 7).
Příklad 8
Příprava cíleného derivátu GnRII-2'-()-siikciny]-paclilaxelu (2. způsob)
Aktivace karboxylové skupiny 2'-O-sukcinyl-paclitaxelu pomocí NHS: 10 mg (0,01 mmol) 2-O-sukcinyl-paclilaxelu, 2,4 mg (0.02mmol) NHS a 4,3 mg (0.02mmol)DCC bylo rozpuštěno v 0,5 ml dichlormethanu. Pote byly přidány 4 μΙ (0,02mmol) DÍLA. Směs byla míchána za laboratorní teploty. Po 19 hodinách bylo rozpouštědlo odpařeno na vakuové odparce.
mg aktivovaného 2-O-sukcinyl-paclitaxelu a 3 mg (0,005mmol) fragmentu GnRII (H-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNHj) bylo rozpuštěno v 0,5 ml DMF. Směs byla míchána za laboratorní teploty po dobu 6 hodin. Poté byla směs lyofílizována, výsledná látka paclitaxelsukcinát-GnRH byla čištěna HPLC a analyzována MS(ES1+).
Příklad 8
Cytoslatická aktivita
Cytostatická aktivita jednotlivých derivátů paclitaxclu byla měřena na rakovinných buňkách IleLa S3 [Human cervix carcinoma Hel,a S3 cells (AICC CCL 2.2)], IIL-60 lidských promyclocytických buňkách leukémie, myších leukemických buňkách L1210 (Mouše leukemia L 1210 cells (ATCC CCL 219)] a lidských T-lymfoblastoidech C.CRFCEM [ CCRF/CEM T lymphoblastoid cells (ATCC CCL 119)]. Hodnota cytostatické aktivity jc vyjádřena jako hodnota ICTov následující tabulce.
« 9 9 9 9 ·· · 9 9 99« 9 9 • · · 9 99 999 99
9 9999 999
999·· ·· ·9 ·* *
| ICso | (nmol.l'1) | |||
| L1210 | HL-60 | HeLa S3 | CG?/· (. .01/ | |
| GnRl 1-2 '-O-sukcinyl-paclitaxel | 220 | 18 | 7 600 | 24 |
| triethylenglykol-2'-()-sukcinyl-paclitaxel | 381 | 110 | 133 | 40 |
| Cys(OH)-S-2 '-O-acetyl-paclitaxel | 81.6 | 21.6 | > 1000 | 20 |
| Phc-Phe-2'-O-sukcinyl-paelitaxel | 315 | 73.3 | > 1000 | 73.9 |
| paclitaxel | 94 | 20 | 35 | 16 |
Průmyslová využitelnost
Cílené deriváty paclitaxelu podle vynálezu může být využit ve zdravotnictví a farmaceutickém průmyslu.
• 4 4
4 444
7?V
4 · 44 44 4·4 4« • · · 4 4 4 «4*
4*<44 44 ·· · ♦ 4
Claims (7)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Cílený derivát paclitaxelu obecného vzorce II (Π), v němžR1 znamená sukcinyl, sukcinyl-triethylenglykol, sukcinyl-Phe-Phe-ΟΠ. chloracetyl, acelyl-S-Cys-01I nebo N-maleimidobutyryl a ηR znamená fragment molekuly GnRH,
- 2. Cílený derivát paclitaxelu podle nároku 1, v němž sc jako můstek využije sukcinál.
- 3. Cílený derivát paclitaxelu podle nároku 1 nebo 2, v němž se jako peptidový hormon použije GnRH a jeho analoga a deriváty
- 4. /působ výroby cíleného derivátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že se k molekule paclitaxelu naváže přes vhodný můstek peptidový hormon či jeho derivát.
- 5. Způsob výroby podle nároku 4. v y z n a č uj í c í se t i m, že se provádí ve dvou krocích, kdy se v prvním kroku na paclitaxel naváže raménko a ve druhém krokuje na volné koncové skupiny ramének navázán takový fragment GnRH, který odpov ídá typu skupiny ramenka. na kterou se váže.
- 6. Způsob výroby podle nároku 4 nebo 5. v y z n a č u j í c í se t í m, že sc vyrobí 2'O-sukcinyl-paclitaxel, triethylcnglykol-2'-O-sukcÍnyl-paclilaxel, Phe-Phc-2'-O* « 11» ♦ «···« · » · • « · » v * · · ·· • » » » · ··· » · · »1 »* · sukcínyl-paclítaxel. 2 -O-chloracetyl-paclitaxeL Cys(0H)-S-2'-0-acctyl-pacIilaxel nebo 2 -O-(N-nialeimidobutyryl)-paclitaxel,
- 7. Použití cíleného derivátu paclitaxelu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 jako cytostatického činidla.• · * • · · ♦ « « · · « / / í /7 /Obrázek 1. MS (IISI+) 2'-0-sukcinyl-pacliiaxeluJ OA|A ιΰ·Κ?Λι·Α·’’45|ηιί·I e??a;CC5 OJ V -Π PM3246οπΛ1 #U65-1493_Ri 31 05-31,56_AV ’23SU >S 30 41 30 85_NL»L« T . č PS ι-lil! mi, [50 00-2000 OO]
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20070441A CZ301004B6 (cs) | 2007-06-27 | 2007-06-27 | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20070441A CZ301004B6 (cs) | 2007-06-27 | 2007-06-27 | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2007441A3 true CZ2007441A3 (cs) | 2009-01-07 |
| CZ301004B6 CZ301004B6 (cs) | 2009-10-07 |
Family
ID=40175543
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20070441A CZ301004B6 (cs) | 2007-06-27 | 2007-06-27 | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ301004B6 (cs) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ303072B6 (cs) * | 2009-02-13 | 2012-03-21 | Zentiva, K.S. | Polymerní konjugáty paclitaxelu a docetaxelu s pH rízeným uvolnováním kancerostatika |
| CZ2015765A3 (cs) * | 2015-10-30 | 2017-04-19 | Ústav experimentální botaniky AV ČR, v. v. i. | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
| GB201805455D0 (en) * | 2018-04-03 | 2018-05-16 | Univ Of Portsmouth Higher Education Corporation | Peptide nanofibers |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010041189A1 (en) * | 1999-04-13 | 2001-11-15 | Jingya Xu | Poly(dipeptide) as a drug carrier |
| US6380161B1 (en) * | 1999-06-21 | 2002-04-30 | Inkine Pharmaceutical Company, Inc. | Compositions for treating chemotherapy-resistant tumor cells and targeted chemotherapy compositions |
-
2007
- 2007-06-27 CZ CZ20070441A patent/CZ301004B6/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ301004B6 (cs) | 2009-10-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3218392B1 (en) | Macrocyclic peptides useful as immunomodulators | |
| JP7403507B2 (ja) | 薬物としてアマトキシンの誘導体を有する抗体薬物コンジュゲート | |
| DK2678037T3 (en) | Branched linker for protein pharmaceutical conjugates | |
| CA2238574C (en) | Targeted cytotoxic anthracycline analogs | |
| KR100325972B1 (ko) | 치료성펩타이드유도체 | |
| EP2970390B1 (en) | Macrocyclic inhibitors of the pd-1/pd-l1 and cd80(b7-1)/pd-l1 protein/protein interactions | |
| ES2882634T3 (es) | Compuestos peptídicos y conjugados con péptidos para el tratamiento del cáncer mediante quimioterapia mediada por receptores | |
| Szabó et al. | Development of an oxime bond containing daunorubicin-gonadotropin-releasing hormone-III conjugate as a potential anticancer drug | |
| WO2015106599A1 (en) | Conjugates and compositions for drug delivery | |
| WO2005035003A9 (en) | Compositions and methods for increasing drug efficiency | |
| KR20160060537A (ko) | 유도형질로 활성화되는 다기능성 항암제 전구체, 이의 제조방법 및 이의 용도 | |
| EP3915973A1 (en) | Compound for preparation of antibody-payload conjugate and use thereof | |
| EP1118336A2 (en) | Somatostatin analogs to specific delivery of anti-tumor drugs into tumor cells | |
| Gao et al. | Preparation, characterization and in vitro activity of a docetaxel–albumin conjugate | |
| AU2018255458B2 (en) | Multi-arm targeted anti-cancer conjugate | |
| JP2004504358A (ja) | 抗腫瘍薬のポリマー複合体 | |
| CZ2007441A3 (cs) | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výrobya jejich použití | |
| CN109922834A (zh) | 用于治疗癌症的卟啉化合物和组合物 | |
| EP3928797B1 (en) | Cd44 targeted multi-arm conjugate | |
| CZ301626B6 (cs) | Kondenzacní deriváty thiokolchicinu a baccatinu | |
| EP2405944B1 (en) | Prodrugs | |
| HK40044642A (en) | Macrocyclic peptides useful as immunomodulators | |
| WO2025047686A1 (ja) | 標的化薬物複合体及びこれを含む医薬、並びに、化合物 | |
| CZ200132A3 (cs) | Podávači systém | |
| CA2416608A1 (en) | Pharmaceutically active compound |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20160627 |