CZ2015765A3 - Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití - Google Patents
Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2015765A3 CZ2015765A3 CZ2015-765A CZ2015765A CZ2015765A3 CZ 2015765 A3 CZ2015765 A3 CZ 2015765A3 CZ 2015765 A CZ2015765 A CZ 2015765A CZ 2015765 A3 CZ2015765 A3 CZ 2015765A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- paclitaxel
- maleimidobutyryl
- cells
- mixture
- production
- Prior art date
Links
- 150000004579 taxol derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 claims description 4
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002381 testicular Effects 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 20
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 4
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 2
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MEZJQXVOMGUAMP-UHFFFAOYSA-N 1-(2-methylnaphthalen-1-yl)pyrrole-2,5-dione Chemical compound CC1=CC=C2C=CC=CC2=C1N1C(=O)C=CC1=O MEZJQXVOMGUAMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate Chemical compound 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000007257 deesterification reaction Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1.CN(C)C1=CC=NC=C1 PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000012106 negative regulation of microtubule depolymerization Effects 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Řešení se týká derivátu paclitaxelu obecného vzorce II, v němž R.sup.1.n.znamená dvouvazný N-maleimidobutyryl a R.sup.2.n.znamená vodík. Derivát je vhodný pro použití jako léčivo, zejména pro léčbu nádorových onemocnění.
Description
Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití
Oblast techniky _____ - Předložený vynález se týká derivátů paclitaxelu, způsobu jejich výroby a jejich použití.
Dosavadní stav techniky
Paclitaxel vzorce I
je přírodní produkt, který byl poprvé popsán Wanim v roce 1971 (J. Amer. Chem.Soc. 93, 2325-2327). Paclitaxel je s úspěchem používán při léčbě rakoviny vaječníků, prsu a plic. Jeho cytotoxická aktivita je spojena se stabilizací mikrotubulů a následným ukončením proliferace buňky (Suffnes M, CRC Press lne., Paclitaxel-science and aplications, 1995.).
Paclitaxel však jeví mnoho nežádoucích vedlejších účinků plynoucích z jeho cytotoxicity vůči zdravým buňkám, to také omezuje jeho dávkování. Je tedy stále potřeba hledat jeho deriváty, které by měly lepší terapeutický index, tedy byly významněji více toxické pro nádorové buňky než pro zdravé buňky.
Podstata vynálezu
Předmětný vynález se týká derivátu paclitaxelu obecného vzorce II
v němž R1 znamená dvouvazný iV-maleimidobutyryl a R2 znamená vodík, pro použití jako léčiva.
Derivát paclitaxelu podle předkládaného vynálezu je připravován modifikací hydroxylové skupiny na 2’ uhlíku postranního řetězce. Tato hydroxylová skupina je vybrána ze dvou důvodů a) vykazuje nej vyšší reaktivnost ze všech tří volných OH skupin na molekule paclitaxelu a b) je využívána pro tvorbu proléčiva (prodrug). Tato proléčiva paclitaxelu jsou založena na faktu, že hydroxylová skupina na 2’ uhlíku postranního řetězce paclitaxelu je důležitá pro vazbu této molekuly na mikrotubuly. Pokud tedy dojde k navázání raménka právě přes tuto skupinu, dochází k inaktivaci paclitaxelu. Ke zpětné aktivaci cytotoxické funkce paclitaxelu dochází po vstupu prodrug do buňky, kde dojde k jejich rozpadu na volný paclitaxel a ostatní doprovodné připojené látky. Na rozpadu proléčiva a uvolnění paclitaxelu se podílí pH a enzymy nacházející se v buňce.
Syntéza derivátu paclitaxelu obecného vzorce II spočívá v tom, že se na paclitaxel naváže raménko. 2'-0-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxel byl připraven vazbou N-maleimidomáselné kyseliny na hydroxylovou skupinu na 2’ uhlíku postranního řetězce paclitaxelu; toto raménko končí volnou maleimidovou skupinou.
Derivát paclitaxelu podle předkládaného vynálezu je určen pro léčbu rakoviny vaječníků, děložního čípku, prsu, plic, Vaječníkůi, prostaty, varlat, a leukémií. /
Objasnění výkresů
Obrázek 1. MS(ESI+) 2'-0-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu
Obrázek 2. HRMS (MALDI) GnRH-2'-0-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu Příklady provedení vynálezu V dalším textu budou používány následující zkratky: DCC N,N'-dicyklohexylkarbodiimid DIEA diisopropylethylamin DIPC Α,Α'-diisopropylkarbodiimid DMAP 4-(dimethylamino)pyridin DMF dimethylformamid
GnRH gonadotropiny uvolňující hormon NHS N-hydroxysukcinimid TBTU 0-(benzotriazol-1 -yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium-tetrafluoroborát TEA triethylamin Příklad 1 Příprava 2 '-0-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu Příprava anhydridu A-maleimidomáselné kyseliny: lOmg (50,0 pmol) A-maleimidomáselné kyseliny bylo rozpuštěno v 0,5 ml dichlormethanu. Do roztoku pMlvám^ po kapkách TEA, dokud se vV-maleimidomáselná kyselina všechna nerozpustí. Poté bylo přidáno 5 mg (20,0 pmol) DCC. Směs byla míchána za teploty 10 °C a za tmy 5 hodin. Po 5 hodinách došlo k vysrážení Α,Α'-dicyklohexylmočoviny, která byla odstraněna odstřeďováním a filtrací přes mikrofiltr. Poté bylo odstraněno rozpouštědlo na vakuové odparce.
Směs byla rozpuštěna v 0,5 ml dichlormethanu, bylo přidáno 10 mg (10,0 pmol) paclitaxelu a 5 μΐ pyridinu. Směs byla míchána za laboratorní teploty po dobu 15 hodin. Poté bylo rozpouštědlo odpařeno na vakuové odparce. Směs byla čištěna na HPLC a analyzována na MS(ESI+). V hmotnostním spektru jsou hlavními maximy adukty (1041,6 (M+H)+ a 1073,7 (M+Na)+, viz obrázek fj). Příklad 2 - srovnávací příklad Příprava cíleného derivátu GnRH-2O-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu-1 50.0 mg (49,0 pmol) 2'-0-(/V-maleimidobutyryl)-paclitaxelu bylo rozpuštěno ve 2 ml bezvodého DMF. Do směsi byle za laboratorní teploty po částech přidáváno 42,3 mg (49,0 pmol) fragmentu GnRH (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Cys-Gly-NH2). Směs byla míchána za laboratorní teploty 4 dny. Poté byla směs lyofilizována. Výsledná látka GnRH-2 ’-0-(N- -maleimidobutyryl)-paclitaxelu-1 byla čištěna HPLC a analyzována MALDI hmotnostní spektrometrií (viz obrázek/^). Příklad 3 - srovnávací příklad Příprava cíleného derivátu GnRH-2 ’-0-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu-2 52.0 mg (51,0 pmol) 2'-0-(Ar-maleimidobutyryl)-paclitaxelu bylo rozpuštěno ve 2 ml bezvodého DMF. Do směsi byb za laboratorní teploty po částech přidáváno 46,9 mg (51,0 pmol) fragmentu GnRH (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Cys-Leu-NH2). Směs byla míchána za laboratorní teploty 4 dny. Poté byla směs lyofilizována. Výsledná látka GnRH-2’-0-(N-~maleimidobutyryl)-paclitaxelu-2 byla čištěna HPLC. Příklad 4
Cytotoxická aktivita
Cytotoxická aktivita jednotlivých derivátů paclitaxelu byla měřena na rakovinných buňkách cervikálního karcinomu HeLa S3 [Human cervix carcinoma HeLa S3 cells (ATCC CCL-2.2)], lidských T-lymfoblastoidech CCRF-CEM [CCRF/CEM T lymphoblastoid cells (ATCC CCL-119)], lidských buňkách rakoviny prsu MCF7 [MCF7 human breast adenocarcinoma cells (ATCC HTB-22)], a lidských fibroblastech BJ [BJ human skin fíbroblast cells (ATCC CRL-2522)].
Testy byly prováděny v C02 inkubátoru při 37 °C (72 h) a vyhodnoceny konvenčními technikami (pomocí fluorescenčního readeru Fluoroskan, stanovení cytotoxicity barvením Calceinem AM, který prostupuje pouze do živých buněk, kde se z nefluorescenčního Calceinu AM stává fluorescenční Calcein odštěpením esteru). Cytotoxická účinnost (hodnoty IC50) jednotlivých sloučenin byla posouzena podle jejich schopnosti inhibovat růst uvedených buněčných kultur. IC50 je koncentrace inhibující růst 50 % buněk.
Hodnota cytotoxické aktivity je vyjádřena jako hodnota IC50 v [pmol/l] v následující tabulce.
Hodnoty v tabulce ukazují, že deriváty paclitaxelu podle předkládaného vynálezu jsou podstatně méně cytotoxické pro normální buňky BJ než paclitaxel, a mají i lepší terapeutický index, tj. poměr cytotoxicity proti nádorovým liniím vůči cytotoxicitě proti normálním buňkám.
Claims (1)
- PATENTOVÁ NÁROK'/Derivát paclitaxelu obecného vzorce IIv němž R1 znamená dvouvazný jV-maleimidobutyryl a R znamená vodík, pro použití pro léčbu rakoviny vaječníků, děložního čípku, prsu, plic, ýajeěmkd, prostaty, varlat, a leukémií.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2015-765A CZ2015765A3 (cs) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2015-765A CZ2015765A3 (cs) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ306653B6 CZ306653B6 (cs) | 2017-04-19 |
| CZ2015765A3 true CZ2015765A3 (cs) | 2017-04-19 |
Family
ID=58699433
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2015-765A CZ2015765A3 (cs) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ2015765A3 (cs) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ301004B6 (cs) * | 2007-06-27 | 2009-10-07 | Ústav experimentální botaniky AV CR v. v. i. | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
-
2015
- 2015-10-30 CZ CZ2015-765A patent/CZ2015765A3/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ306653B6 (cs) | 2017-04-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8470984B2 (en) | Process for the preparation of morpholinyl anthracycline derivatives | |
| CN106177977B (zh) | 一种抗肿瘤药物三元偶联物及合成和应用 | |
| CN104370862B (zh) | 水溶性抗肿瘤化合物 | |
| EP3613792B1 (en) | Multi-arm targeted anti-cancer conjugate | |
| CN105601903B (zh) | 一种具有抗癌活性的高分子化合物、其制备方法和应用 | |
| CN107955059B (zh) | 沙蟾毒精衍生物及其制备方法与应用 | |
| WO2017101789A1 (zh) | 一种具有抗癌作用的化合物及其制备方法和应用 | |
| CZ2015765A3 (cs) | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití | |
| US11963978B2 (en) | Method for preparing cell extract component or composition having cytocidal activity | |
| CN113713117B (zh) | 一种白蛋白结合型肿瘤环境响应型抗肿瘤前体药物及其制备方法和应用 | |
| CZ301004B6 (cs) | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití | |
| CN109280073A (zh) | Nannocystins衍生物及其用途 | |
| CN112500340A (zh) | 一种具有抗前列腺癌活性的四氢喹啉生物碱及其制备方法和应用 | |
| EP3928797A1 (en) | Cd44 targeted multi-arm conjugate | |
| CN116239610B (zh) | 一种嘧啶衍生物及其制备方法与在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN112545989B (zh) | 一种甘氨双唑钠聚乙二醇聚天冬氨酸聚合物的应用 | |
| CN110551206B (zh) | 特异性识别md-2的紫杉醇结合域的dna适配子及其应用 | |
| EP4414373A1 (en) | Glucose derivatives and anticancer agent using same | |
| CN1156481C (zh) | 含替加氟的卵磷脂类化合物及其合成 | |
| CN115089567A (zh) | 一种姜黄素类衍生物在制备治疗人乳腺癌药物中的应用 | |
| CN103819457A (zh) | 一类能够抑制去势抵抗性前列腺癌和成骨转移的格尔德霉素衍生物及其应用 | |
| CN101492473A (zh) | 一种具有靶向和增效的氟尿嘧啶前药及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20231030 |