CZ306653B6 - Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití - Google Patents
Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ306653B6 CZ306653B6 CZ2015-765A CZ2015765A CZ306653B6 CZ 306653 B6 CZ306653 B6 CZ 306653B6 CZ 2015765 A CZ2015765 A CZ 2015765A CZ 306653 B6 CZ306653 B6 CZ 306653B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- paclitaxel
- maleimidobutyryl
- mixture
- pmol
- production
- Prior art date
Links
- 150000004579 taxol derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 claims description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002381 testicular Effects 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 18
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 12
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 4
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical group C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 benzotriazol-1-yl Chemical group 0.000 description 2
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 1
- 101000978392 Homo sapiens Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000007257 deesterification reaction Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1.CN(C)C1=CC=NC=C1 PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Řešení se týká derivátu paclitaxelu obecného vzorce II, v němž R.sup.1.n. znamená dvouvazný N-maleimidobutyryl a R.sup.2.n. znamená vodík. Derivát je vhodný pro použití jako léčivo, zejména pro léčbu nádorových onemocnění.
Description
Derivát paclitaxelu podle předkládaného vynálezu je připravován modifikací hydroxylové skupiny na 2' uhlíku postranního řetězce. Tato hydroxylová skupina je vybrána ze dvou důvodů
a) vykazuje nejvyšší reaktivnost ze všech tří volných OH skupin na molekule paclitaxelu a
b) je využívána pro tvorbu proléčiva (prodrug). Tato proléčiva paclitaxelu jsou založena na faktu, že hydroxylová skupina na 2' uhlíku postranního řetězce paclitaxelu je důležitá pro vazbu této molekuly na mikrotubuly. Pokud tedy dojde k navázání raménka právě přes tuto skupinu, dochází k inaktivaci paclitaxelu. Ke zpětné aktivaci cytotoxické funkce paclitaxelu dochází po vstupu prodrug do buňky, kde dojde kjejich rozpadu na volný paclitaxel a ostatní doprovodné připojené látky. Na rozpadu proléčiva a uvolnění paclitaxelu se podílí pH a enzymy nacházející se v buňce.
Syntéza derivátu paclitaxelu obecného vzorce II spočívá v tom, že se na paclitaxel naváže raménko. 2'-O-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxel byl připraven vazbou N-maleimidomáselné kyseliny na hydroxylovou skupinu na 2' uhlíku postranního řetězce paclitaxelu; toto raménko končí volnou maleimidovou skupinou.
Derivát paclitaxelu podle předkládaného vynálezu je určen pro léčbu rakoviny vaječníků, děložního čípku, prsu, plic, prostaty, varlat, a leukémií.
Objasnění výkresů
Obrázek 1. MS(ESI+) 2'-O-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu
Obrázek 2. HRMS (MALDI) GnRH-2'-O-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu
Příklady uskutečnění vynálezu
V dalším textu budou používány následující zkratky:
DCC N,N'-dicyklohexylkarbodiimid
D1EA diisopropylethylamin
DIPC A/A-diisopropylkarbodiimid
DMAP 4-(dimethylamino)pyridin
DMF dimethylformamid
GnRH gonadotropiny uvolňující hormon
NHS N-hydroxysukcinimid
TBTU O-(benzotriazoll-yl)-N.N.N'.N'-tetramethyluronium-tetrafluoroborát
TEA triethylamin
Příklad I
Příprava 2 ’-O-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu
Příprava anhydridu A-maleimidomáselné kyseliny: lOmg (50,0 pmol) TV-maleimidomáselné kyseliny bylo rozpuštěno v 0,5 ml dichlormethanu. Do roztoku byl přidáván po kapkách TEA, dokud se A-maleimidomáselná kyselina všechna nerozpustí. Poté bylo přidáno 5 mg (20,0 pmol) DCC. Směs byla míchána za teploty 10 °C a za tmy 5 hodin. Po 5 hodinách došlo k vysrážení A\A'-dicyklohexylmočoviny, která byla odstraněna odstřeďováním a filtrací přes mikrofiltr. Poté bylo odstraněno rozpouštědlo na vakuové odparce.
-2CZ 306653 B6
Směs byla rozpuštěna v 0,5 ml dichlormethanu, bylo přidáno 10 mg (10,0 pmol) paclitaxelu a 5 μΐ pyridinu. Směs byla míchána za laboratorní teploty po dobu 15 hodin. Poté bylo rozpouštědlo odpařeno na vakuové odparce. Směs byla čištěna na HPLC a analyzována na MS(ESI+). V hmotnostním spektru jsou hlavními maximy adukty (1041,6 (M+H)+ a 1073,7 (M+Na)+, viz obrázek 1).
Příklad 2 - srovnávací příklad
Příprava cíleného derivátu GnRH-2 -O-(N-maleimidobutyryl)-paclitaxelu-l
50,0 mg (49,0 μιηοΐ) 2'-O-(/V-maleimidobutyryl)-paclitaxelu bylo rozpuštěno ve 2 ml bezvodého DMF. Do směsi bylo za laboratorní teploty po částech přidáváno 42,3 mg (49,0 pmol) fragmentu GnRH (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Cys-Gly-NH2). Směs byla míchána za laboratorní teploty 4 dny. Poté byla směs lyofilizována. Výsledná látka GnRH-2 'O fiš-maleimidobutyryl)paclitaxelu-1 byla čištěna HPLC a analyzována MALDI hmotnostní spektrometrií (viz obrázek 2).
Příklad 3 - srovnávací příklad
Příprava cíleného derivátu GnRH-2-O -(N--maleimidobutyryl)-paclitaxelu-2
52,0 mg (51,0 pmol) 2'-O-(V-maleimidobutyryl)-paclitaxelu bylo rozpuštěno ve 2 ml bezvodého DMF. Do směsi bylo za laboratorní teploty po částech přidáváno 46,9 mg (51,0 μmol) fragmentu GnRH (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Cys-Leu-NH2). Směs byla míchána za laboratorní teploty 4 dny. Poté byla směs lyofilizována. Výsledná látka GnRH-2'-O-(ř)-maleimidobutyryl)paclitaxelu-2 byla čištěna HPLC.
Příklad 4
Cytotoxická aktivita
Cytotoxická aktivita jednotlivých derivátů paclitaxelu byla měřena na rakovinných buňkách cervikálního karcinomu HeLa S3 [Human cervix carcinoma HeLa S3 cells (ATCC CCL-2.2)], lidských T-lymfoblastoidech CCRF-CEM [CCRF/CEM T lymphoblastoid cells (ATCC CCL119)], lidských buňkách rakoviny prsu MCF7 [MCF7 human breast adenocarcinoma cells (ATCC HTB-22)], a lidských fibroblastech BJ [BJ human skin fibroblast cells (ATCC CRL2522)].
Testy byly prováděny v CO2 inkubátoru při 37 °C (72 h) a vyhodnoceny konvenčními technikami (pomocí fluorescenčního readeru Fluoroskan, stanovení cytotoxicity barvením Calceinem AM, který prostupuje pouze do živých buněk, kde se z nefluorescenčního Calceinu AM stává fluorescenční Calcein odštěpením esteru). Cytotoxická účinnost (hodnoty IC50) jednotlivých sloučenin byla posouzena podle jejich schopnosti inhibovat růst uvedených buněčných kultur. IC50 je koncentrace inhibující růst 50 % buněk.
Hodnota cytotoxické aktivity je vyjádřena jako hodnota IC50 v [μιηοΙ/Ι] v následující tabulce.
-3 CZ 306653 B6
| Látka | molární hmotnost [g/mol] | IC50CEM [pmol/l] | ICS0MCF7 [pmol/l] | IC50 HeLa [pmol/l] | ic50bj [pmol/l] |
| Látka podle příkladu 2 | 1880,977 | 0,27±0,01 | 0,22±0,2 | 0,26±0,03 | 0,3310,11 |
| Látka podle příkladu 3 | 1937,083 | 0,15±0,01 | 0,22±0,05 | 0,16±0,01 | 0,2110,01 |
| Látka podle příkladu 1 | 1019,052 | 0,12±0,01 | 0,18±0,03 | 0,17±0,04 | 0,92+0,0 |
| Paclitaxel | 853,906 | 0,2±0,00 | 0,l±0,0 | 0,02610,006 | 0,0310,01 |
Hodnoty v tabulce ukazují, že deriváty paclitaxelu podle předkládaného vynálezu jsou podstatně méně cytotoxické pro normální buňky BJ než paclitaxel, a mají i lepší terapeutický index, tj. poměr cytotoxicity proti nádorovým liniím vůči cytotoxicitě proti normálním buňkám.
Claims (1)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Derivát paclitaxelu obecného vzorce IIv němžR1 znamená dvouvazný jV-maleimidobutyryl aR2 znamená vodík, pro použití pro léčbu rakoviny vaječníků, děložního čípku, prsu, plic, prostaty, varlat, a leukémií.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2015-765A CZ2015765A3 (cs) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2015-765A CZ2015765A3 (cs) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ306653B6 true CZ306653B6 (cs) | 2017-04-19 |
| CZ2015765A3 CZ2015765A3 (cs) | 2017-04-19 |
Family
ID=58699433
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2015-765A CZ2015765A3 (cs) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ2015765A3 (cs) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ301004B6 (cs) * | 2007-06-27 | 2009-10-07 | Ústav experimentální botaniky AV CR v. v. i. | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
-
2015
- 2015-10-30 CZ CZ2015-765A patent/CZ2015765A3/cs not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ301004B6 (cs) * | 2007-06-27 | 2009-10-07 | Ústav experimentální botaniky AV CR v. v. i. | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Chem. Biol. 2000 Jul. 7, (7), pp 453-461 * |
| Chem. Listy 104, (2010), pp1023-1028 * |
| International Journal of Pharmaceutics, 415 (2011), pp175-180 * |
| International Journal of Pharmaceutics, 486 (2015), 356-366 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2015765A3 (cs) | 2017-04-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11413281B2 (en) | Ternary conjugate of antitumor drug, and synthesis and application | |
| KR101897307B1 (ko) | 모르폴리닐 안트라사이클린 유도체의 제조 방법 | |
| Wang et al. | Design, synthesis and biological evaluation of a novel series of glycosylated platinum (iv) complexes as antitumor agents | |
| EP3001813B1 (en) | Pharmaceutical composition comprising modified hemoglobin- based therapeutic agent for cancer targeting treatment and diagnostic imaging | |
| ES2882634T3 (es) | Compuestos peptídicos y conjugados con péptidos para el tratamiento del cáncer mediante quimioterapia mediada por receptores | |
| CN104370862A (zh) | 水溶性抗肿瘤化合物 | |
| AU2018255458B2 (en) | Multi-arm targeted anti-cancer conjugate | |
| Magoulas et al. | Synthesis of nοvel artemisinin dimers with polyamine linkers and evaluation of their potential as anticancer agents | |
| US9670242B2 (en) | Tetracyclic anthraquinone derivatives | |
| CN107556361A (zh) | 裂环羽扇豆烷衍生物及其抗肿瘤用途 | |
| CZ306653B6 (cs) | Deriváty paclitaxelu, způsob výroby a použití | |
| EP3928797B1 (en) | Cd44 targeted multi-arm conjugate | |
| CZ301004B6 (cs) | Cílené deriváty paclitaxelu, jejich zpusob výroby a jejich použití | |
| US20210401882A1 (en) | Method for preparing cell extract component or composition having cytocidal activity | |
| CN103351397B (zh) | 一种藤黄酸类衍生物及其制备方法和用途 | |
| US11464864B2 (en) | Drug-bound compound and use thereof | |
| US20240327450A1 (en) | Glucose derivatives and anticancer agent using same | |
| CN115252616A (zh) | 一种自激活血管阻断剂前药及其制备方法和应用 | |
| KR100638706B1 (ko) | 밀배아 응집소와 프라에콕신 a의 결합체 제조방법 | |
| JP2006282653A (ja) | 標的部位で選択的に活性化される新規化合物およびその利用 | |
| US20180326101A1 (en) | Compound and pharmaceutical composition for targeted drug delivery | |
| CN119954885A (zh) | 一种羽扇豆醇衍生物及其制备方法和应用 | |
| HK1223037B (en) | Pharmaceutical composition comprising modified hemoglobin- based therapeutic agent for cancer targeting treatment and diagnostic imaging | |
| CN108530460A (zh) | 鬼臼毒素-氯尼达明缀合物及其合成方法和医药用途 | |
| Ma | Synthesis and biological properties of cytotoxic lectin conjugates |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20231030 |