CZ2001960A3 - Pyrrolopyrimidiny jako inhibitory protein kinasy - Google Patents

Pyrrolopyrimidiny jako inhibitory protein kinasy Download PDF

Info

Publication number
CZ2001960A3
CZ2001960A3 CZ2001960A CZ2001960A CZ2001960A3 CZ 2001960 A3 CZ2001960 A3 CZ 2001960A3 CZ 2001960 A CZ2001960 A CZ 2001960A CZ 2001960 A CZ2001960 A CZ 2001960A CZ 2001960 A3 CZ2001960 A3 CZ 2001960A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
substituted
unsubstituted
group
pyrrolo
amino
Prior art date
Application number
CZ2001960A
Other languages
English (en)
Inventor
Gavin C. Hirst
David Calderwood
Rainer Munschauer
Lee D. Arnold
David N. Johnston
Paul Fafferty
Original Assignee
Basf Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Aktiengesellschaft filed Critical Basf Aktiengesellschaft
Publication of CZ2001960A3 publication Critical patent/CZ2001960A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6564—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms
    • C07F9/6581—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms having phosphorus and nitrogen atoms with or without oxygen or sulfur atoms, as ring hetero atoms
    • C07F9/6584—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms having phosphorus and nitrogen atoms with or without oxygen or sulfur atoms, as ring hetero atoms having one phosphorus atom as ring hetero atom
    • C07F9/65842—Cyclic amide derivatives of acids of phosphorus, in which one nitrogen atom belongs to the ring

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)

Description

(57) Anotace:
Chemické sloučeniny obecného strukturního vzorce I a jejich fyziologicky přijatelné soli ametabolityjsou inhibitory aktivity serin/threonin a tyrosin kinasy. Řada těchto kinas, jejichž aktivita se inhibuje těmito chemickými sloučeninami, se zúčastní při imunitních, hyperproliferačních a angiogenních procesech. Proto mohou tyto sloučeniny zlepšovat chorobné stavy, při kterých hraje roli angiogenese či hyperproliferace buněk endothelu. Tyto sloučeniny lze použít pro léčení rakoviny a hyperproliferačních poruch, revmatické arthritidy, poruch imunitního systému, odmítnutí implantátu a zánětlivých poruch.
R;
*1 • · · ·
Pyrrolopyrimidiny jako inhibitory protein kinasy
Oblast techniky
Tato patentová přihláška nárokuje výsadu prozatímních US patentové přihlášky č. 60/100 832, podané 18. září 1998, 60/100 833, podané 18. září 1998, 60/100 834, podané 18. září 1998 a 60/100 946, podané 18. září 1998. Popisy všech těchto citovaných patentových přihlášek se zde výslovně zahrnují v plném znění formou odkazu.
Dosavadní stav techniky
Existuje alespoň 400 enzymů identifikovaných jako protein kinasy. Tyto enzymy katalyzují fosforylaci cílových proteinových substrátů. Fosforylace obvykle představuje reakci přenosu fosfátové skupiny z ATP na proteinový substrát. Specifická struktura v proteinovém substrátu, na který se přenáší fosfát, je tyrosinový, serinový nebo threoninový zbytek. Jelikož tyto aminokyselinové zbytky jsou cílovými strukturami pro přenos fosforylu, citují se obvykle tyto protein kinasové enzymy jako tyrosin kinasy nebo serin/threonin kinasy.
Fosforylační reakce a fosfatasové reakce probíhající v opačném směru na cytosinových, serinových a threoninových zbytcích se účastní nesčetných buněčných procesů tvořících podklady různých intracelulárních signálů (obvykle zprostředkovaných buněčnými receptory), regulace buněčných funkcí a aktivace nebo deaktivace buněčných procesů. V intracelulárním převodu signálů se často účastní některá kaskáda proteinových kinas, které jsou nezbytné pro uskutečnění těchto buněčných procesů.Vzhledem k jejich všudypřítomnosti v těch • · · · to procesech lze proteinové kinasy nalézat jako nedílnou část plasmatické membrány nebo jako cytoplasmatické enzymy či enzymy lokalizované v jádru, často jako složky enzymových komplexů. V mnoha případech jsou tyto protein kinasy nezbytným elementem enzymových a strukturních proteinových komplexů, které určují, zda a kdy nastanou určité buněčné procesy v určité buňce.
Protein tyrosin kinasy
Protein tyrosin kinasy (PTK) jsou enzymy, které katalyzují fosforylaci specifických tyrosinových zbytků v buněčných proteinech. Tato posttranslační modifikace těchto substrátových proteinů, často samotných enzymů, působí jako molekulový spouštěč regulující buněčnou proliferaci, aktivaci či diferenciaci [přehledné pojednání viz Schlessinger a Ulrich, Neuron, 9, 383-391 (1992)]. Aberantní či nadměrnou aktivitu PTK lze pozorovat u řady chorobných stavů včetně benigních i maligních proliferačních poruch, stejně tak jako při onemocněních vyplývajících z nepřiměřené aktivace imunitního systému (například autoimunitní poruchy), při odmítnutí aloimplantátu a při onemocnění na základě reakce mezi implantátem a příjemcem. Navíc receptorové PTK specifické pro buňky endothelu, jako jsou KDR a Tie-2, zprostředkovávají angiogenní proces a proto se účastní podpory progrese nádorů a dalších onemocnění zahrnujících nepřiměřenou vaskularizaci (jako jsou diabetická retinopathie, choroidální neovaskularizace následkem makulární degenerace spojené s věkem, psoriása, arthritida, retinopathie v dospívání, infantilní hemangiomy).
Tyrosin kinasy mohou být receptorového typu (mají extracelulární, transmembránové a intracelulární domény) nebo • · nereceptorového typu (jsou plně intracelulární).
Receptorové tyrosin kinasy (RTK)
RTK tvoří velkou skupinu transmembránových receptorů s rozmanitými biologickými aktivitami. Do současné doby bylo identifikováno alespoň 19 odlišných podskupin RTK. Skupina receptorových tyrosinových kinas (RTK) zahrnuje receptory, které mají zásadní důležitost pro růst a diferenciaci řady buněčných typů [Yarden a Ullrich, Ann. Rev. Biochem., 57 , 433-478 (1988), Ullrich a Schlessinger, Cell, 61, 243-254 (1990)]. Vlastní funkce RTK se aktivuje vazbou ligandů, která způsobuje fosforylaci receptorů a vícečetných buněčných substrátů a následně řadu různých buněčných odpovědí [Ullrich & Schlessinger, Cell, 61, 203-212 (1990)]. Převod signálu zprostředkovaný receptorovou tyrosin kinasou se tedy spouští extracelulární interakcí se specifickým růstovým faktorem (ligandem), obvykle s následující dimerizací receptoru, stimulací vlastní aktivity protein tyrosin kinasy a transfosforylací receptorů. Vytvářejí se tak vazebná místa pro molekuly intracelulárního převodu signálu, což vede k vytváření komplexů se spektrem cytoplasmatických signálních molekul, které umožňují příslušnou buněčnou odpověď (například buněčné dělení, diferenciaci, metabolické účinky, změny v extracelulárním mikroprostředí), viz Schlessinger a Ullrich, Neuron, 9, 1-20 (1992).
Proteiny s doménou SH2 (src homologie 2) nebo s fosfotyrosinovou vazebnou doménou (PTB) váží aktivované tyrosinové kinasové receptory a jejich substráty s vysokou afinitou k šíření signálů do buňky. Obě tyto domény rozpoznávají fosfotyrosin [Fantl a kol., Cell, 69, 413-423 (1992), Songyang a kol., Mol. Cell. Biol., 14, 2777-2785 (1994), Songyang • · · · a kol., Cell, 72, 767-778 (1993), Koch a kol., Science, 252, 668-678 (1991), Shoelson, Curr. Opin. Chem. Biol., 1(2), 227-234 (1997), Cowburn, Curr. Opin. Struct. Biol., 7(6), 835-838 (1997)]. Bylo identifikováno několik intracelulárních substrátových proteinů, které se připojují k receptorovým tyrosinovým kinasam (RTK). Lze je rozdělit do dvou základních skupin: (1) substráty s katalytickou doménou a (2) substráty postrádající tuto doménu avšak sloužící jako adaptory a spojující se s katalyticky aktivními molekulami [Songyang a kol., Cell, 72, 767-778 (1993)]. Specifičnost interakcí mezi receptory či proteiny a doménami SH2 nebo PTB jejich substrátů se určuje aminokyselinovými zbytky přímo obklopujícími fosforylovaný tyrosinový zbytek. Například rozdíly ve vazebných afinitách mezi doménami SH2 a aminokyselinovými sekvencemi obklopujícími fosfotyrosinové zbytky na konkrétních receptorech korelují s pozorovanými rozdíly v jejich profilech fosforylace substrátů [Songyang a kol., Cell, 72, 767-778 (1993)]. Pozorování ukazují, že funkce každé receptorové tyrosin kinasy se určuje nejen jejím typem exprese a dostupností ligandu, avšak též uspořádáním sestupných cest převodu signálu, které se aktivují daným receptorem stejně tak jako časováním a trváním těchto podnětů. Fosforylace tedy poskytuje důležitý regulační krok určující selektivitu signálních cest vyvolávaných specifickými receptory růstových faktorů, jako jsou receptory diferenciačních faktorů.
Uvažuje se, že několik receptorových tyrosinových kinas, jako je FGFR-1, PDGFR, TIE-2 a c-Met, a růstových faktorů, které se s nimi váží, hrají úlohu v angiogenesi, i když některé mohou angiogenesi podporovat nepřímo [Mustonen a Alitalo, J. Cell Biol., 129. 895-898 (1995)]. Jedna taková receptorová tyrosinová kinasa známá jako fetální ja-
terní kinasa 1 (FLK-1) je členem typu III podtřídy RTK. Alternativním označením lidské FLK-1 je kinase insert domaincontaining receptor (KDR) [Terman a kol., Oncogene, 6, 1677-1683 (1991)]. Dalším alternativním označením FLK-l/KDR je receptor 2 vaskulárního endotheliálního buněčného růstového faktoru (VEGFR-2), neboť se váže s vysokou afinitou na VEGF. Myší verze FLK-l/VEGFR-2 se též nazývá NYK [Oelrichs a kol., Oncogene, 8(1), 11-15 (1993)]. Podařilo se izolovat DNA kódující myší, potkaní a lidský FLK-1 a popisují se nukleotidové a kódované aminokyselinové sekvence [Matthews a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA, £38., 9026-9030 (1991), Terman a kol., 1991, výše, Terman a kol., Biochem. Biophys. Res. Comm., 187, 1579-1586 (1992), Sarzani a kol., výše, a Millauer a kol., Cell, 72, 835-846 (1993)]. Četné studie, jako jsou ty, které popisuje Millauer a kol., výše, uvažují, že VEGF a FLK-l/KDR/VEGFR-2 jsou párem ligand-receptor, který hraje důležitou úlohu při proliferaci buněk cévního endothelu a vytváření cév a tyto procesy se nazývají vaskulogenese respektive angiogenese.
Další typ podtřídy III RTK označovaný tyrosin kinasa-1 podobná fms (Flt-1) se vztahuje k FLK-l/KDR [DeVries a kol., Science, 255, 989-991 (1992), Shibuya a kol., Oncogene, 5, 519-524 (1990)]. Alternativním označením Flt-1 je receptor 1 vaskulárního endotheliálního růstového faktoru buněk (VEGFR-1). Dosud se členové podskupin FLK-l/KDR/ /VEGFR-2 a Flt-l/VEGFR-1 nacházejí primárně exprimované na endotheliálních buňkách. Členové této podtřídy se specificky stimulují členy skupiny ligandů vaskulárního endotheliálního růstového faktoru buněk (VEGF) [Klagsburn a D'Amore, Cytokine & Growth Factor Reviews, 7, 259-270 (1996)]. Vaskulární endotheliální růstový faktor buněk (VEGF) se váže na Flt-1 s vyšší afinitou než na FLK-l/KDR a je mitogenní vůči vasku• · * ·
lárním endotheliálním buňkám (Terman a kol., 1992, výše, Mustonen a kol., výše, DeVries a kol., výše). Uvažuje se, že Flt-1 má zásadní důležitost pro organizaci endothelu v průběhu vývoje cév. Exprese Flt-1 se spojuje s časným vaskulárním rozvojem u myších embryí a s neovaskularizací v průběhu hojení ran (Mustonen a Alitalo, výše). Exprese Flt-1 v monocytech, osteoklastech a osteoblastech, stejně tak jako v dospělých tkáních, jako jsou glomeruly ledvin, ukazuje na přídavnou funkci tohoto receptoru, která se netýká růstu buněk (Mustonen a Alitalo, výše).
Jak se uvádí výše, nedávné průkazy ukazují, že VEGF hraje úlohu při stimulaci normální a patologické angiogenese [Jakeman a kol., Endocrinology, 133. 848-859 (1993), Kolch a kol., Breast Cancer Research and Treatment, 36., 139-155 (1995), Ferrara a kol., Endocrine Reviews, 18.(1), 4-25 (1997), Ferrara a kol., Regulation of Angiogenesis (red. L. D. Goldberg a E. M. Rosen), 209-232, 1997].Navíc se VEGF uplatňuje při řízení a zvyšování vaskulární permeability [Connolly a kol., J. Biol. Chem., 264, 20017-20024 (1989), Brown a kol., Regulation of Angiogenesis (red. L. D. Goldberg a E. M. Rosen), 233-269, 1997]. Uvádějí se různé formy VEGF vznikající z alternativního spojování mRNA včetně čtyř druhů popsaných Ferrarou akol., J. Cell. Biochem., 47, 211-218 (1991). Oba druhy VEGF, vylučované i převážně spojené s buňkami, identifikovali Ferrara a kol., výše, a je známo, že tento protein existuje ve formě dimerů spojovaných disulfidovými můstky.
Nedávno bylo identifikováno několik příbuzných homologů VEGF. Avšak jejich úlohy v normálních fyziologických a chorobných procesech dosud nebyly objasněny. Navíc jsou členové skupiny VEGF často koexprimované s VEGF v řadě tkání • · · · · · a jsou obecně schopné vytvářet s VEGF heterodimery. Tato vlastnost pravděpodobně pozměňuje specifičnost receptoru a biologické účinky heterodimerů a dále komplikuje vysvětlení jejich specifických funkcí, jak se znázorňuje níže (Korpelainen a Alitalo, Curr. Opin. Cell Biol., 1998, 159-164 a odkazy, které jsou v této práci citované).
Faktor růstu placenty (P1GF) má aminokyselinovou sekvenci, která vykazuje významnou homologii se sekvencí VEGF [Park a kol., J. Biol. Chem., 269, 25646-25654 (1994), Maglione a kol., Oncogene, 8, 925-931 (1993)]. Podobně jako u VEGF, vznikají různé druhy P1GF z alternativního spojování mRNA a protein existuje v dimerní formě (Park a kol., výše). P1GF-1 a P1GF-2 se váží na Flt-1 s vysokou afinitou a P1GF-2 se též silně váže na neuropilin-1 [Migdal a kol., J. Biol. Chem., 273(35) . 22272-22278], avšak žádný z nich se neváže na FLK-l/KDR (Park a kol., výše). Uvádí se, že P1GF zvyšuje vaskulární permeabilitu a mitogenní účinek VEGF na endotheliální buňky při přítomnosti VEGF v nízkých koncentracích (údajně následkem tvorby heterodimerů) (Park a kol., výše).
VEGF-B se tvoří ve dvou isoformách (167 a 185 zbytků), které se též váží na Flt-l/VEGFR-1. Může hrát úlohu při regulaci degradace extracelulární matrice, adhese buněk a migrace modulací exprese a aktivity plasminogenového aktivátoru urokinasového typu a inhibitoru plasminogenového aktivátoru 1 [Pepper a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 95(20), 11709-11714 (1998)].
VEGF-C se původně klonoval jako ligand pro VEGFR-3/ /Flt-4, který se primárně exprimuje lymfatickými endotheliálními buňkami. Ve své plně zpracované formě se VEGF-C může • » též vázat na KDR/VEGFR-2 a stimulovat proliferaci a migraci buněk endothelu in vitro a angiogenesi v modelech in vivo [Lymboussaki a kol., Am. J. Pathol., 153(2}, 395-403 (1998), Witzenbichler a kol., Am. J. Pathol., 153(2) . 381-394 (1998)]. Transgenní nadměrná exprese VEGF-C způsobuje proliferaci a zvětšení pouze lymfatických cév, zatímco krevní cévy zůstávají neovlivněné. Na rozdíl od VEGF se exprese VEGF-C neindukuje hypoxií [Ristimaki a kol., J. Biol. Chem., 273(14), 8413-8418 (1998)].
Posledně objevený VEGF-D je strukturně velice podobný VEGF-C. Uvádí se, že VEGF-D váže a aktivuje alespoň dva VEGFR, VEGFR—3/Flt—4 a KDR/VEGFR-2. Původně se klonuje jako c-fos induktibilní mitogen pro fibroblasty a exprimuje se nejvýznačněji v mesenchymálních buňkách plic a kůže [Achen a kol., Proč. Nati. Acad. Sci, USA, 95(2), 548-553 (1998) a odkazy citované v této práci].
Podobně jako v případě VEGF se pro VEGF-C a VEGF-D uvádí, že indukují vzrůsty vaskulární permeability in vivo v Milesově rozboru při podání do kožní tkáně (PCT/US97/ /14696, WO98/07832, Witzenbichler a kol., výše). Fyziologická úloha a význam těchto ligandů při pozměňování vaskulární hyperpermeability a endotheliálních odpovědí ve tkáních, ve kterých se exprimují, zůstává nejistá.
Nedávno byl uveden virově kódovaný nový typ vaskulárního endotheliálního růstového faktoru VEGF-E (NZ-7 VEGF), který přednostně využívá receptor KDR/Flk-1 a nese mohutnou mitotickou aktivitu bez domény pro vazbu heparinu [Meyer a kol., EMBO J., 18(2), 363-374 (1999), Ogawa a kol., J. Biol. Chem., 273(47). 31273-31282 (1998)]. Sekvence VEGF-E vykazují 25% homologii se savčím VEGF a jsou kódované para ·
• ·4 * * <
* < · • « poxvirem Orf virus (OV). Tento parapoxvirus působící na ovce a kozy příležitostně vytváří u lidí léze s angiogenesí.
VEGF-E je dimer o zhruba 20 kDa bez bázické domény či afinity pro heparin, avšak má charakteristický cysteinový uzlový motiv ve všech savčích VEGFs a překvapivě se zjišťuje, že vykazuje schopnost a bioaktivity podobné isoformě VEGF-A vážící heparin VEGF165, to jest oba faktory stimulují uvolňování tkáňového faktoru (TF), proliferaci, chemotaxi a vyrůstání pěstovaných vaskulárních endotheliálních buněk in vitro a angiogenesí in vivo. Podobně jako VEGF165, VEGF-E se váže s vysokou afinitou na receptor-2 VEGF (KDR), což vede k autofosforylaci receptoru a dvoufázovému vzrůstu koncentrací volných intracelulárních vápenatých iontů, zatímco oproti VEGF165 se VEGF-E neváže na receptor-1 VEGF (Flt-1).
Na základě objevu jiných homologů VEGF a VEGFR a precedentů pro heterodimerizaci ligandů a receptorů mohou působení těchto homologů VEGF zahrnovat tvorbu heterodimerů ligandu VEGF a/nebo heterodimerizaci receptorů či vazbu na dosud neobjevený VEGFR (Witzenbichler a kol., výše). Nedávné výsledky též ukazují, že neuropilin-1 (Migdal a kol., výše) neb VEGFR-3/Flt-4 (Witzenbichler a kol., výše) nebo receptory jiné než KDR/VEGFR-2 se mohou účastnit při indukci vaskulární permeability [Stacker, S. A., Vitali, A., Domagala, T., Nice, E. a Wilks, A. F., Angiogenesis and Cancer Conference, Amer. Assoc. Cancer Res., Jan. 1998, Orlando, FL, Williams, Diabetelogia, 40, 118-120 (1997)].
Tie-2 (TEK) je členem nedávno objevené skupiny specifických receptorových tyrosinových kinas endotheliálních buněk, který se účastní kritických angiogenních procesů, jako je větvení buněk, narůstání, přetváření, dospívání a stabilizace. Tie-2 je první savčí receptorová tyrosinová kinasa, « · ♦ · ♦ ·« ···« pro kterou ligand (ligandy) agonisty [například Angiopoe/ tinl (Angl), který stimuluje receptorovou autofosforylaci a signální převod] a lignad (ligandy) antagonisty [například Angiopoetin2 (Ang2)] byly identifikovány. Vypuzení a transgenní manipulace exprese Tie-2 a jeho ligandů ukazuje na těsnou prostorovou a časovou kontrolu signalizace Tie-2, která je podstatná pro správný rozvoj nové vaskulatury. Současný model uvažuje, že se stimulace Tie-2 kinasy ligandem Angl přímo uplatňuje při větvení a vyrůstání nových cév a při nástupu a interakci periendotheliálních nosných buněk důležitých při udržování integrity cév a udržování klidového stavu. Nepřítomnost stimulace Tie-2 prostřednictvím Angl nebo inhibice fosforylace Tie-2 prostřednictvím Ang2, které se vytvářejí při vysokých hladinách v místech vaskulární regrese, může způsobit ztrátu vaskulární struktury a kontaktů matrice s následnou smrtí endotheliálních buněk, zejména v nepřítomnosti stimulů růstu/přežívání. Situace je však složitější, neboť nedávno byly zjištěny dva další ligandy Tie-2 (Ang3 a Ang4) a schopnost různých agonistických a antagonistických angiopoetinů k heterooligomerizaci, která modifikuje jejich aktivitu. Proto je zasahování interakcí ligand Tie-2 - receptor jako antiangiogenický terapeutický přístup méně oblíbené a dává se přednost strategii kinasové inhibici.
Rozpustná extracelulární doména Tie-2 (ExTek) může působit přerušení tvorby vaskulartury tumoru v modelech xenograftu tumoru mamy a plicních metastás a při oční neovaskularizaci zprostředkované tumorovými buňkami. Adenovirovou infekcí lze dosáhnout tvrobu in vivo ExTek u hlodavců při hladinách mg/ml po dobu 7 až 10 dnů bez nepříznivých vedlejších účinků. Tyto výsledky ukazují, že přerušení signálních cest u normálních zdravých zvířat se může dobře tolerovat.
• · · · • · · · • ·
Tyto inhibiční odpovědi Tie-2 na ExTek mohou být následkem sekvestrace ligandu (ligandů) a/nebo tvorby neprodukčního heterodimeru o plné délce Tie-2.
Nedávno se zjistila významná vzestupná regulace exprese Tie-2 v rámci vaskulárního synoviálního panu arthritických kloubů u lidí konsistentní s úlohou nepřiměřené neovaskularizace. Tento nález ukazuje, že Tie-2 hraje svou úlohu při progresi revmatické arthritidy. Bodové mutace poskytující konstitučně aktivované formy Tie-2 se vyskytují v souvislosti s lidskými venózními malformačními poruchami. Tie-2 inhibitory jsou tedy použitelné při léčení takových poruch a při dalších situacích nepřiměřené neovaskularizace. Nereceptorové tyrosinové kinasy
Nereceptorové tyrosinové kinasy představují soubor buněčných enzymů postrádajících extracelulární a transmembránové sekvence. V současné době známe 24 jednotlivých identifikovaných nereceptorových tyrosinových kinas zahrnujících 11 podskupin (Src, Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes/Fps, Fak, Jak, Ack a LIMK). Podskupina Src nereceptorových tyrosinových kinas sestává z většího počtu PTK a zahrnuje Src, Yes, Fyn, Lyn, Blk, Hek, Fgr a Yrk. Podskupina Src enzymů se spojuje s onkogenesí a imunitní odpovědí. Podrobnější diskusi nereceptorových tyrosinových kinas poskytuje Bohlen, Oncogene, 8, 2025-2031 (1993) a tato práce se zde zahrnuje formou odkazu.
Mnohé tyrosinové kinasy, buď RTK nebo nereceptorové tyrosinové kinasy, se účastní buněčných signalizačních cest, které působí v řadě patogenních stavů včetně nádoru, psoriásy a ostatních hyperproliferačních poruch nebo hyperimunit • · · · • · · · nich odpovědí.
Vývoj sloučenin pro pozměňování PTK
Vzhledem k výše popsané důležitosti PTK pro kontrolu, regulaci a pozměňování buněčné proliferace, chorob a poruch spojených s abnormální buněčnou proliferací, je snaha identifikovat receptorové a nereceptorové inhibitory tyrosin kinasy s použitím řady přístupů včetně mutantních ligandů (US patentová přihláška č. 4 966 849), rozpustných receptorů a protilátek (přihláška č. WO 94/10202, Kendall & Thomas, Proč.. Nati. Acad. Sci., 90, 10705-10709 (1994), Kim a kol., Nátuře, 362, 841-844 (1993), RNA ligandů [Jellinek, a kol., Biochemistry, 33., 10450-10456, Takano a kol., Mol. Biol. Cell, 4, 358A (1993), Kinsella a kol., Exp. Cell Res., 199, 56-62 (1992), Wright a kol., J. Cellular Phys., 152, 448-457 (1992)] a tyrosin kinasových inhibitorů [WO 94/03427, WO 92/21660, WO 91/15495, WO 94/14808, US patent č. 5 330 992, Mariani a kol., Proč. Am. Assoc. Cancer Res., 35, 2268 (1994)].
Nedávno se různí autoři pokusili identifikovat malé molekuly působící jako inhibitory tyrosinové kinasy. Například bis monocyklické, bicyklické nebo heterocyklické arylové sloučeniny (PCT WO 92/20642) a vinylen-azaindolové deriváty (PCT WO 94/14808) se obecně popisují jako inhibitory tyrosinové kinasy. Styrylové sloučeniny (US patent č.
217 999), styryl-substituované pyridylové sloučeniny (US patent č. 5 302 606), určité chinazolinové deriváty (přihláška EP č. 0 566 266 AI, Expert Opin. Ther. Pat., 8(4), 475-478 (1998), selenoindoly a selenidy (PCT WO 94/03427), tricyklické polyhydroxylové sloučeniny (PCT WO 92/21660) a sloučeniny kyseliny benzylfosfonové (PCT WO 91/15495) se popisují jako sloučeniny pro použití jako inhibitory tyrosinové kinasy při léčení rakoviny. Anilincinnoliny (PCT WO 97/34876) a chinazolinové deriváty (PCT WO 97/22596, PCT WO 97/42187) se popisují jako inhibitory angiogenese a vaskulární permeability.
Navíc existují snahy identifikovat malé molekuly působící jako serin/threonin kinasové inhibitory. Například bis(indolylmaleinimidové sloučeniny se popisují jako látky inhibující určité isoformy PKC serin/threonin kinasy, jejichž převodová funkce se spojuje s pozměněnou vaskulární permeabilitou v onemocněních souvisejících s VEGF (PCT WO 97/40830, PCT WO 97/40831).
Inhibitory kinasy Plk-1
Plk-1 je serin/threonin kinasa, která je důležitým regulátorem progrese buněčného cyklu. Hraje kritickou úlohu při uspořádání a dynamické funkci aparátu mitotického vřetena. Plk-1 a příbuzné kinasy se též účastní aktivace a inaktivace dalších regulátorů buněčného cyklu, jako například cyklin-dependentní kinasy. Vysoké hladiny exprese Plk-1 souvisejí s buněčnými proliferačními aktivitami. Často se nalézají v maligních tumorech různého původu. Předpokládá se, že inhibitory Plk-1 blokují proliferaci nádorových buněk přerušováním procesů zahrnujících mitotická vřetena a nepřiměřeně aktivované cyklin-dependentní kinasy.
Kinasové inhibitory Cdc2/cyklin B (Cdc2 se též uvádí jako cdkl)
Cdc2/cyklin B je dalším serin/threonin kinasovým enzymem, který patří do skupiny cyklin-dependentních kinas • · « · (cdk). Tyto enzymy se účastní kritického přechodu mezi různými fázemi progrese buněčného cyklu. Uvažuje se, že nekontrolovaná buněčné proliferace, která je charakteristická pro karcinom, závisí na zvýšených aktivitách cdk v těchto buňkách. Inhibice zvýšených aktivit cdk v buňkách karcinomu cdc2/cyklin B kinasovými inhibitory by mohla potlačovat proliferaci a obnovovat normální kontrolu progrese buněčného cyklu.
Regulace aktivace CDK je složitá, avšak vyžaduje spojení CDK s členem cyklinové skupiny regulačních podjednotek [Draetta, Trends in Cell Biology, 3, 287-289 (1993), Murray a Kirschner, Nátuře, 339, 275-280 (1989), Solomon a kol., Molecular Biology of the Cell, 3., 13-27 (1992)]. Další hladina regulace probíhá aktivací a inaktivací fosforylací podjednotky CDK [Draetta, Trends in Cell Biology, 3, 287-289 (1993), Murray a Kirschner, Nátuře, 339, 275-280 (1989), Solomon a kol., Molecular Biology of the Cell, 3, 13-27 (1992), Ducommun a kol., EMBO Journal, 10., 3311-3319 (1991), Gautier a kol., Nátuře, 339, 626-629 (1989), Gould a Nurse, Nátuře, 342, 39-45 (1989), Krek a Nigg, EMBO Journal, 10, 3331-3341 (1991), Solomon a kol., Cell, 63, 1013-1024 (1990)]. Koordinovaná aktivace a inaktivace různých komplexů cyklin/CDK je nezbytná pro normální progresi buněčného cyklu [Pines, Trends in Biochemical Sciences, 18, 195-197 (1993), Sherr, Cell, 73, 1059-1065 (1993)]. Oba kritické přechody Gl-S a G2-M se kontrolují aktivací různých aktivit cyklin/CDK. Při G1 se uvažuje, že cyklin D/CDK4 i cyklin E/CDK2 zprostředkovávají nástup S-fáze [Matsushima a kol., Molecular & Cellular Biology, 14, 2066-2076 (1994), Ohtsubo a Roberts, Science, 259, 1908-1912 (1993), Quelle a kol., Genes & Development, 7, 1559-1571 (1993), Resnitzky a kol., Molecular & Cellular Biology, 14., 1669-1679 (1994)]. Postup S-fází požaduje aktivitu cyklin A/CDK2 [Girard a kol., Cell, 67. 1169-1179 (1991), Pagano a kol., EMBO Journal, 11, 961-971 (1992), Rosenblatt a kol., Proceedings of the National Academy of Science, USA, 89, 2824-2828 (1992), Walker a Maller, Nátuře, 354, 314-317 (1991), Zindy a kol., Biochemical & Biophysical Research Communications, 182, 1144-1154 (1992)], zatímco aktivace cyklin A/cdc2 (CDK1) a cyklin B/cdc2 se požaduje pro nástup metafáze [Draetta, Trends in Cell Biology, 3, 287-289 (1993), Murray a Kirschner, Nátuře, 339, 275-280 (1989), Solomon a kol., Molecular Biology of the Cell, 13-27 (1992), Girard a kol., Cell, 67, 1169-1179 (1991), Pagano a kol., EMBO Journal, 11, 961-971 (1992), Rosenblatt a kol., Proceedings of the National Academy of Science, USA, 89, 2824-2828 (1992), Walker a Maller, Nátuře, 354, 314-317 (1991), Zindy a kol., Biochemical & Biophysical Research Communications, 182, 1144-1154 (1992)]. Proto není překvapivé, že ztráta kontroly regulace CDK je častou událostí při hyperproliferačních onemocněních a rakovině [Pines, Current Opinion in Cell Biology, 4, 144-148 (1992), Lees, Current Opinion in Cell Biology, 7, 773-780 (1995), Hunter a Pines, Cell, 79, 573-582 (1994)].
Inhibitory kinas účastnících se udržování chorobných stavů představují těchto poruch. Příklady takových kinas inhibici c-Src [Brickell, 3, 401-406
5, ,
(CDK) 1,2 a
Biology, 4,
Biology, 7, či omezení na tyto případy (1) cal Reviews in Oncogenesis, Seminars in Cancer Biology, Pharmacology & Therapeutics, -dependentních kinas rent Opinion in Cell rent Opinion in Cell zprostředkování nové způsoby léčení zahrnují, avšak bez
Criti(1992), Courtneidge, (1994)], raf [Powis,
236-246
57-95 (1994)] a cyklin4 v karcinomu [Pines, Cur144-148 (1992), Lees, Cur773-780 (1995), Hunter • ·
a Pines, Cell, 79, 573-582 (1994)], (2) inhibíci CDK2 nebo PDGF-R kinasy při restenose [Buchdunger a kol., Proceedings of the Natinal Academy of Science, USA, 92., 2258-2262 (1995)], (3) inhibici CDK5 a GSK3 kinas při Alzheimerově chorobě [Hosoi a kol., Journal of Biochemistry (Tokyo), 117. 741-749 (1995), Aplin a kol., Journal of Neurochemistry, 67, 699-707 (1996)], (4) inhibici c-Src kinasy při osteoporose [Tanaka a kol., Nátuře, 383. 528-531 (1996)], (5) inhibici GSK-3 kinasy při diabetů typu 2 [Borthwick a kol., Biochemical & Biophysical Research Communications, 210, 738-745 (1995)], (6) inhibici p38 kinasy při zánětu [Badger a kol., The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 279, 1453-1461 (1996)], (7) inhibici VEGF-R 1-3 a TIE-1 a 2 kinas při chorobách ovlivňující angiogenesi [Shawyer akol., Drug Discovery Today, 2, 50-63 (1997)], (8) inhibici UL97 kinasy při virových infekcích [He a kol., Journal of Virology, 71, 405-411 (1997)], (9) inhibici CSF-1R kinasy při onemocněních kostí a krvetvorby [Myers a kol., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 7, 421-424 (1997)] a (10) inhibici Lek kinasy při autoimunitních onemocněních a odmítnutí implantátu [Myers a kol., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 7, 417-420 (1997)].
Navíc mohou být inhibitory určitých kinas použitelné při léčení onemocnění, při kterých nenastává špatná regulace kinas, avšak ta je nicméně zásadní pro udržování chorobného stavu. V tomto případě by inhibice aktivity kinasy působila buď jako terapeutická nebo jako paliativní léčba těchto chorob. Například mnohé viry, jako je virus lidského papilomu, přerušují buněčný cyklus a posunují buňky do S-fáze buněčného cyklu [Vousden, FASEB Journal. 7, 8720879 (1993)]. Zabránění tomu, aby buňky vstoupily do DNA synthesy po virové infekci inhibici esenciální S-fáze spouštějící aktivity, jako • · · ·
je CDK2, může přerušovat životní cyklus viru zabráněním replikace viru. Tentýž princip lze použít pro ochranu normálních buněk těla před toxicitou cyklus-specifických chemoterapeutických prostředků [Stone a kol., Cancer Research, 56, 3199-3202 (1996), Kohn a kol., Journal of Cellular Biochemistry, 54., 44-452 (1994)]. Inhibice CDK 2 nebo 4 bude bránit postupu do cyklu v normálních buňkách a omezovat toxicitu cytotoxických látek, které působí v S-fázi, G2 nebo mitose. Dále se ukazuje, že aktivita CDK2/cyklin E reguluje NF-kB. Inhibice aktivity CDK2 stimuluje NF-kB-dependentní expresi genu, děj zprostředkovaný interakcemi s koaktivátorem p300 [Perkins a kol., Science, 275. 523-527 (1997)]. NF-kB reguluje geny, které se účastní zánětlivých odpovědí (jako jsou hemopoetické růstové faktory, chemokiny a molekuly pro adhesi leukocytů) [Baeuerle a Henkel, Annual Review of Immunology, 12., 141-179 (1994)] a může se účastnit potlačení apoptických signálů v buňce [Beg a Baltimore, Science, 274, 782-784 (1996), Wang a kol., science, 274, 784-787 (1996), Van Antwerp a kol., Science, 274, 787-789 (1996)]. Inhibice CDK2 může tedy potlačovat apoptosu vyvolanou cytotoxickými léky mechnismem, který zahrnuje NF-kB. To tedy ukazuje, že inhibice aktivity CDK2 může být též použitelná v dalších případech, ve kterých hraje NF-kB úlohu v etiologii onemocnění. Další příklady lze uvažovat u mykotických onemocnění: aspergilosa je běžnou infekcí u pacientů s ohroženou imunitou [Armstrong, Clinical Infectious Diseases, 16, 1-7 (1993)]. Inhibice kinas Aspergillus Cdc2/CDC28 nebo Nim A [Osmani a kol., EMBO Journal, 10, 2669-2679 (1991), Osmani a kol., Cell, 67, 283-291 (1991)] může způsobovat zastavení růstu či zánik těchto organismů a zlepšit terapeutický výsledek u pacientů s těmito infekcemi.
Identifikace účinných sloučenin s malou molekulou, * · • · · · které specificky inhibují převod signálu a buněčnou proliferaci pozměněním aktivity receptorových a nereceptorových tyrosin a serin/threonin kinas s regulací a pozměněním abnormální a nepřiměřené buněčné proliferace, diferenciace či metabolismu, je proto žádoucí. Zejména identifikace způsobů a sloučenin, které specificky inhibují funkci tyrosin kinasy, která je esenciální pro angiogenní procesy nebo tvorbu vaskulární hyperpermeability vedoucí k otoku, ascitům, efusím, exudátům a makromolekulární extravasaci a usazování matrice, stejně tak jako pro přidružené poruchy, by představovala přínos.
Podstata vynálezu
Tento vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I
(I) a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
V obecném vzorci I je kruh A šestičlenným aromatickým kruhem nebo pětičlenným či šestičlenným heteroaromatickým kruhem. Kruh A může být případně substituovaný jedním či více z následujících substituentů: substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, atom halogenu, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, kyanoskupina, nitroskupina, skupina -NR^Rs, skupina -C(O)2H, hydroxylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, -C(0)^-haloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylthioetherová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfoxidová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfonová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylthioetherová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylsulfoxidová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylsulfonová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina, -C(0)-haloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alifatická etherová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická etherová skupina, karboxamidoskupina, tetrazolylová skupina, trifluormethylsulfonamidoskupina, trifluormethylkarbonylaminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná alkinylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná styrylová skupina a substituovaná či nesubstituovaná aralkylamidoskupina.
• · * · • · · · • ·
L je jedna z následujících spojovacích skupin: -0-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -N(R)-, N(C(O)OR)~, N(C(0)R)-, -N(SO2R)-, -CH2O-, -CH2S-, -CH2N(R)~, -CH(NR)-, -CH2N(C(O)R)-, -CH2N(C(O)OR)-, -CH2N(SO2R)-, -CH(NHR)-, -CH(NHC(O)R)-, -CH(NHSO2R)-, -CH(NHC(O)OR)-, -CH(OC(O)R), -CH(OC(O)NHR)-, -CH=CH-, -C(=N0R)-, -C(0)-, -CH(OR)-, -C(O)N(R)~, -N(R)C(O)-, -N(R)S(O)-, -N(R)S(O)2-, -OC(O)N(R)-, -N(R)C(O)N(R)-, -NRC(O)O-, -S(O)N(R)-, -S(O)2N(R)-, -N(C(O)R)S(O)-, -N(C(O)R)S(O)2-, -N(R)S(O)N(R)-, -N(R)S(O)2N(R)-, -C(O)N(R)C(O)-, -S(O)N(R)C(O)-, -S(O)2N(R)C(O)-, -OS(O)N(R)~, -OS(O)2N(R)-, -N(R)S(O)O-, -N(R)S(O)2O-, -N(R)S(O)C(O)-, -N(R)S(O)2C(O)-, -SON(C(O)R)-, -SOaN(C(O)R)-, -N(R)SON(R)-, -N(R)SO2N(R)-, -C(O)O-, -N(R)P(OR')O-, -N(R)P(OR')-, -N(R)P(O)(OR’)O-, -N(R)P(O)(OR’)-, -N(C(O)R)P(OR')O-, -N(C(O)R)P(OR)-, -N(C(O)R)P(O)(OR')0nebo -N(C(O)R)P(OR·)-. R a R’ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, acylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina.
Alternativně je L -RfaN(R)S(O)-RfaN(R)P(O)- nebo -RfaN(R)P(O)O-. R^ je alkylenová skupina, která spolu se sulfonamidovou, fosfinamidovou nebo fosfonamidovou skupinou, ke které se připojuje, vytváří pětičlenný nebo šestičlenný kruh kondenzovaný ke kruhu A.
Alternativně je L skupina, kterou lze znázornit jedním z následujících strukturních vzorců • · · ·
nebo
Ras spolu s fosfinamidovou nebo fosfonamidovou skupinou vytváří pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný aromatický, heteroaromatický nebo heterocykloalkylový kruhový systém.
V obecném vzorci I je R substituovaná alifatická skupina, substituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná bicykloalkylová skupina, substituovaná cykloalkenylová skupina, případně substituovaná aromatická skupina, případně substituovaná heteroaromatická skupina, případně substituovaná heteroaralyklová skupina, případně substituovaná heterocykloalkylová skupina, případně substituovaná heterobicykloalkylová skupina, případně substituovaná alkylamidoskupi***-**22 -*··’ * na, případně substituovaná arylamidoskupina, případně substituovaná -S(O)2-alkylová skupina nebo případně substituovaná —S(O)^-cykloalkylová skupina, -C(0)-alkylová skupina nebo případně substituovaná -C(0)-alkylová skupina.
R může být substituovaný jedním či více substituenty. Přednostně je R substituovaný substituovanou či nesubstituovanou alifatickou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou aromatickou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinou,substituovanou či nesubstituovanou aralkylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou heteroaralkylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou cykloalkylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou aromatickou etherovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou alifatickou etherovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou alkoxykarbonylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou alkylkarbonylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou arylkarbonylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylkarbonylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou aryloxykarbonylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou aminokarbonylovou skupinou, skupinou oximu, substituovanou či nesubstituovanou azabicykloalkylovou skupinou, heterocykloalkylovou skupinou, oxoskupinou, skupinou aldehydu, substituovanou či nesubstituovanou alkylsulfonamidoskupinou, substituovanou či nesubstituovanou arylsulfonamidoskupinou, substituovanou či nesubstituovanou bicykloalkylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinou, kyanoskupinou, aminoskupinou, alkylaminoskupinou, ureidoskupinou, thioureidoskupinou a skupinou -B-E.
·· ··<· «· ···· ·· • · · · · ··«· • ····· ··· ···*- *23 - ·· · ·· ·
B je substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, alkylenová skupina, aminoalkylová skupina, alkylenkarbonylová skupina nebo aminoalkylkarbonylová skupina.
E je substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylové skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfonamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylsulfonamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná bicykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná ureidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná thioureidoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina.
Avšak jestliže R je alifatická skupina nebo cykloalkylová skupina, není exkluzivně substituovaná jedním či více substituenty zvolenými z hydroxylové skupiny a nižších alkylových etherů. Navíc heterocykloalkylová skupina není 2-fenyl-l,3-dioxan-5-ylová skupina a alifatická skupina není substituovaná exkluzivně jednou či více alifatickými skupinami .
V obecném vzorci I je R atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, substituovaná či ne• · · ·· · »··« • a «·· ··· • « · · · · · · · · ···_! *2*4 -*··’ ‘ ’··* ··· substituovaná cykloalkylová skupina, atom halogenu, hydroxylová skupina, kyanoskupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, skupina -NR^Rs nebo -C(O)NR4Rs·
V obecném vzorci I je R substituovaná či nesubstituováná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina.
V obecném vzorci I tvoří R^, Rs a atom dusíku společně tříčlenný, čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný substituovaný či nesubstituovaný heterocykloalkylový kruh, substituovaný či nesubstituovaný heterobicykloalkylový kruh nebo substituovaný či nesubstituovaný heteroaromatický kruh.
Alternativně jsou R a R nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, nebo skupina Y-Z.
V se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH ) -,
JO -S(0)2-, -0(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CH^)^NH-, -(CHJ^S-, -(0^)^(0)- a -(CH2)e>S(O)2-.
p je celé číslo od 0 do zhruba 6.
Z je substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupi·· V ««· ·1 tM J *« • 4 » ♦ · ·«·· • · · * ·· · · k ··«··« <4 · »· 4
- 25 na, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina.
j je celé číslo od 0 do 6.
Avšak pokud L je -CH^NR-, -C(O)NR- nebo -NRC(O)- a Ra azacykloalkylová skupina nebo azaheteroarylová skupina, je j 0. Navíc, pokud L je -0- a R3 je fenylová skupina, je j 0.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou použitelné jako inhibitory serin/threonin a tyrosin kinas. Konkrétně jsou sloučeniny podle tohoto vynálezu použitelné jako inhibitory tyrosin kinas, které jsou důležité v hyperproliferačních onemocněních, zejména při karcinomu a procesu angiogenese. Například určité tyto sloučeniny jsou inhibitory takových receptorových kinas, jako je KDR, Flt-1, FGFR, PDGFR, c-Met, TIE-2 nebo IGF-l-R. Jelikož některé z těchto sloučenin jsou antiangiogenní, jsou důležitými látkami pro inhibici progrese chorobných stavů, při kterých je důležitou složkou angiogenese. Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou účinné jako inhibitory takových serin/threonin kinas, jako jsou PKC, erk, MAP kinasy, kinasy MAP kinasy, kinasy kinasy MAP kinasy, cdk, Plk-1 nebo Raf-1. Tyto sloučeniny jsou použitelné při léčení karcinomu a hyperproliferačních poruch. Navíc jsou některé sloučeniny účinnými inhibitory nereceptorových kinas, jako jsou skupiny Src (například lek, blk a lyn), Tec, Csk, Jak, Map, Nik a Syk. Tyto sloučeniny jsou použitelné při léčení karcinomu hyperproliferativních poruch a imunologických onemocnění.
Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou selek·· ·-··· ·« ·Μ»·« • ♦ * · * · · · · • ř · · · 4 ···* ♦ ·»··· · · · *··-· 2t5 - ·· · ····· tivními inhibitory TIE-2 kinasy, které mohou být antiangiogenní (zejména v kombinaci s jedním či více inhibitory VEGFR) nebo proangiogenní, pokud se používají za přítomnosti nebo ve spojení se stimulem vztahujícím se k VEGF. Tímto způsobem lze použít tyto inhibitory pro podporu terapeutické angiogenese pro léčení například ischemie, infarktu nebo okluze nebo pro podporu hojení ran.
Tento vynález poskytuje způsob inhibice kinasové aktivity tyrosin kinas a serin/threonin kinas zahrnující podávání sloučeniny obecného vzorce I k dané kinase v dostatečné koncentraci pro inhibici enzymatické aktivity této kinasy.
Tento vynález dále zahrnuje použití těchto sloučenin ve farmaceutických prostředcích s farmaceuticky účinným množstvím výše popsaných sloučenin a farmaceuticky přijatelnou nosnou nebo pomocnou látkou. Tyto farmaceutické prostředky lze podávat osobám pro zpomalení nebo zadržení procesu angiogenese při onemocněních podporovaných angiogenesí nebo pro léčení edemu efusí exsudátů či ascitů a dalších stavů spojených s vaskulární hyperpermeabilitou. Určité farmaceutické prostředky lze podávat jednotlivcům pro léčení karcinomu a hyperproliferativních poruch inhibici serin/threonin kinas, jako je cdk, Plk-1, erk atd.
Následuje podrobný popis vynálezu.
Hodnoty substituentů v první preferované skupině sloučenin obecného vzorce I se popisují níže.
L je přednostně -N(R)S(O)2-, -S(O)2N(R)-, -N(R)C(O)-,
-C(O)N(R)- nebo -0-.
• · • · • ·
R3 je přednostně substituovaná či nesubstituovaná fenylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná naftylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná pyridylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná thienylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzotriazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná tetrahydropyranylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná tetrahydrofuranylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná dioxanová skupina, substituovaná či nesubstituovaná dioxolanová skupina, substituovaná či nesubstituovaná chinolinová skupina, substituovaná či nesubstituovaná thiazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná isoxazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná cyklopentanylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzofuranová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzothiofenová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzisoxazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzisothiazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzothiazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzoxazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzimidazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzoxadiazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzothiadiazolová skupina, substituovaná či nesubstituovaná isochinolinová skupina, substituovaná či nesubstituovaná chinoxalinová skupina, substituovaná či nesubstituovaná indolová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná pyrazolová skupina. Alternativně může být R3 substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkenylová skupina s podmínkou, že L je -SN(R)-, -S(O)N(R)-, -S(O)aN(R)-, -N(R)S-, -N(R)S(O)-, -N(R)S(O)2-, -N(R)SN(R')-, -N(R)S(O)N(R')- nebo -N(R)S(O)2N(R')-.
V jednom ztělesnění je R3 substituovaná či nesubsti28 • · · ·
tuovaná fenylová skupina.
Skupina R3 může být substituovaná jedním substituentem či více substituenty. Preferované substituenty R3 jsou atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, methylová skupina, nitroskupina, skupina OCF3, skupina OCH3, kyanoskupina, skupina CO2CH3, CF3, terč.butylová skupina, pyridylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná oxazolylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzensulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná fenoxyskupina, substituovaná či nesubstituovaná fenylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, karboxylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná tetrazolylová skupina, styrylová skupina, -S-(substituovaná či nesubstituovaná arylová) skupina, -S-(substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová) skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, alkinylová skupina, skupina -C(0)NR^R^, Rc, CH^OR^.
Rf, R^ a atom dusíku vytvářejí společně tříčlenný, čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný substituovaný či nesubstituovaný heterocykloalkylový kruh, substituovaný či nesubstituovaný heterobicykloalkylový kruh nebo substituovaný či nesubstituovaný heteroaromatický kruh.
Alternativně jsou R a R nezávisle na sobě substituováná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina.
R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituováná alkylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, skupina -W-(CH ) -NR R , -W-(CH ) -O-alky2 ti cl θ 2 t • · · ·
lová skupina, -W-(CH^)^-S-alkylová skupina nebo -W-(CH ) -OH.
t je celé číslo od 0 do zhruba 6.
W je vazba nebo -0-, -S-, -S(0)-, -S(0) - nebo -NR^-.
Rr je atom vodíku nebo alkylová skupina.
R , R a atom dusíku, ke kterému se připojují, vytvářejí společně tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicyklickou skupinu.
Alternativně je R a R , navzájem nezávisle, atom vodíku, alkylová skupina, alkanoylová skupina nebo skupina -K-D.
K je -S(0)2-, -C(0)-, -C(O)NH-, -C(0)2~ nebo přímá vazba.
D je H substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina , substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminocykloalkylová skupina, skupina COOR^ nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina.
• · · ·
R je substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina.
Preferovanějšími substituenty R3 jsou atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, kyanoskupina, nitroskupina, skupina OCF3, methylová skupina a skupina CF3.
Přednostně je kruh A substituovanou či nesubstituovanou fenylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou naftylovou skupinou, substituovanou či nesubstituovanou pyridylovou skupinou nebo substituovanou či nesubstituovanou indolovou skupinou. V jednom ztělesnění je kruh A substituovanou či nesubstituovanou fenylovou skupinou.
Kruh A může být substituovaný jedním či více substituenty. Preferované substituenty kruhu A jsou atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, methylová skupina, nitroskupina, skupina OCF3, skupina OCH3, kyanoskupina, skupina CO2CH3, skupina CF3, terc.butylová skupina, pyridylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná oxazolylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná benzensulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná fenoxyskupina, substituovaná či nesubstituovaná fenylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, karboxylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná tetrazolylová skupina, styrylová skupina, —S—(substituovaná či nesubstituovaná arylová) skupina, -S-(substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová) skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, alkinylová skupina, skupina C(O)NR^R^, R^ a skupina CH^OR^.
• ·
R£, Rg a Re se definují jako výše.
Přednostněji je kruh A substituovaný atomem fluoru, atomem chloru a nitroskupinou.
R2 je přednostně atom vodíku.
V jednom ztělesnění má R obecný vzorec
0>I(a) m je celé číslo od 0 do zhruba 3.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
O (CH2)t
NR8Rg
I(b)
m, t se definují jako výše, Rs, Rg a atom dusíku společně vytvářejí tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicyklikalkylovou skupinu. Alternativně jsou Rq a Rg nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y_,-Z2 · Y2 je skupina -C(0)-, -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-,
-(CH ) 0-, -(CH ) NH-, -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- nebo
CJ 2 C£ 2 C[ 2 C£
-(CH2) S(0)2~. q je celé číslo od 0 do 6. Z2 je substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
I(c) m, t, Rg a Rg se definují jako výše, s je celé číslo od 0 do
6. q je celé číslo od 0 do zhruba 6. R?? je skupina -0R_,e • · · · nebo -NR R . R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina. R , R a atom dusíku společně tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu nebo substituovanou heterobicykloalkylovou skupinu. Rvg a Rao jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina-Y3~Z3. Y3 se volí z případů skupina -C(0)-, -(CHJ^-, -S(0)a-, -C(0)0-, -SO.NH-, -CONH-, -(CH ) 0-, -(CH ) NH-, -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- a -(CH ) S(0) -. Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
I(d) ve kterém v je celé číslo od 1 do zhruba 3. R je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo Y^-Z^. Y__ a Z? jsou podle definice popsané výše.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
I(e) m a R jsou podle definice popsané výše. Rix představuje jeden či více substituentů nezávisle zvolených z následujících případů: atom vodíku, hydroxylová skupina, oxoskupina, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aIkoxyalkýlová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoalkylová skupina a substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina s podmínkou, že atomy uhlíku přiléhající k atomu dusíku nejsou substituované hydroxylovou skupinou.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
I(f)
R se definuje stejně jako výše.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
Ra i(g) r je celé číslo od 1 do zhruba 6. Rg a Rg se definují stejně jako výše.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
I(h)
Ra, Rg a t se definují stejně jako výše, w je celé číslo od 0 do zhruba 4. u je 0 nebo 1. R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
Rl2
· · • · • · ~ ~ * * * — 3/ ··♦·· ·· • · · ·
w, t, R1O, R se definují stejně jako výše.
V dalším ztělesnění, pokud R je I(g) nebo I(h), vytvářejí Ra, Rq a atom dusíku společně heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce
R187\
Rl7
u se definuje stejně jako výše. R , R14, R1S, R ieř Ri·?' R , R a R jsou nezávisle na sobě nižší alkylová skupina nebo atom vodíku. Alternativně alespoň jeden z párů R a R , R aR,R aR, nebo R a R spolu představu1 4 ' 15 16 17 1 © ' 19 2 0 jí atom kyslíku. Alternativně je alespoň jeden z Ri3 a R kyanoskupina, skupina CONHR , COOR , CH OR nebo CH NR (R ). R , R a atom dusíku vytvářejí společně tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou a sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu nebo substituovanou či heterobicykloalkylovou skupinu. Alternativně je R a R nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3~Z3, Y3 a Z3 se definují stejně jako výše. X je -0-, -S-, —SO—, -SO -, -CH -, -CH(OR )- nebo NR . R je
atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina , substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, skupina -C(NH)NH2, -C(O)R24 nebo -C(0)OR24· R24 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
V dalším ztělesnění tvoří R , Rq a atom dusíku společně heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce
t, R a R se definují stejně jako výše. R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo nižší alkylová skupina. Alternativně tvoří R a R společně atom kyslíku, i je
5 2 6 celé číslo od 1 do zhruba 6.
V dalším ztělesnění tvoří R , R a atom dusíku spoQ ř &
léčně heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce • ·
i se definuje stejně jako výše. R27 je skupina CH2OH, C(O)NR R nebo COOR . R a R se definují stejně jako výše.
V dalším ztělesnění vytvářejí R , Rg a atom dusíku společně heteroaromatickou skupinu obecného vzorce
R2s je substituovaná či nesubstituované alkylová skupina, substituovaná či nesubstituované arylová skupina nebo substituovaná či nesubstituované aralkylová skupina, karboxylová skupina, kyanoskupina, skupina C(0)0R3o, CH2OR3o, CH NR R nebo C(O)NR R . R je substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituova• · ná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina nebo heterocykloarylová skupina. R a R22 se definují stejně jako výše.
V dalším ztělesnění má alespoň jeden z Rq a Rg obecný vzorec Y -D, kde D má obecný vzorec _ Γ~\
Y se definuje stejně jako výše, x je 0, 1 nebo 2. T je -0-, -C(0)-, -S-, -S0-, -S02-, -CH2-, -CH(0R24)- nebo -N(R24)-. R24 se definuje stejně jako výše.
V dalším ztělesnění má alespoň jeden z Rg a Rg obecný vzorec Y -N(R ), Y3 se definuje stejně jako výše. R3i a R jsou nezávisle na sobě substituovaná či nesubstituovaná karboxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxylakylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná kyanoalkylová skupina. Alternativně tvoří R3i a R32 společně s atomem dusíku pětičlennou či šestičlennou heterocykloalkylovou skupinu substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu.
• · · · • ·
V dalším ztělesnění, pokud R je I(e), má Z_, vzorec N(R )R . R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina, alkoxykarbonylová skupina, alkoxyalkylová skupina, hydroxylakylová skupina, aminokarbonylová skupina, kyanoskupina, alkylkarbonylová skupina nebo aralkylová skupina .
V dalším ztělesnění, pokud R je I(e), Z2 má obecný vzorec
Každý X je nezávisle na sobě skupina CH nebo atom dusíku. R37 je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
V dalším ztělesnění, pokud R je I(e), má Z^ obecný vzorec ♦ « · • · 4
g je celé číslo od 0 do zhruba 3. T se definuje stejně jako výše. R37 je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
V dalším ztělesnění, pokud R je I(e), má Z_, obecný vzorec
g a R37 se definují výše jako nesubstituovaná aralkylová skupina.
» 4 « « · • · · ·
V dalším ztělesnění, pokud je I(e), má Z__ obecný vzorec
T, g a R37 se definují stejně jako výše.
V dalším ztělesnění, pokud R je I(e), má Z2 obecný vzorec
R3v se definuje stejně jako výše. Raa je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, perhaloalky·· t··* ·· *·*« lová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkenylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec
u se definuje stejně jako výše. R , R , R , R , R , R44, R45 a R46 jsou nezávisle na sobě methylová skupina nebo atom vodíku. Alternativně představuje alespoň jeden pár substituentů R a R , R a R , R aR společně atom kyslíku. Alternativně představují R4q a R společně atom kyslíku. R4? je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y2-Z2· Y2 a Z2 se definují stejně jako výše. Alternativně má R4? obecný vzorec ··
• ·
R52 “R53 y
R56
a R jsou «=ς J nezávisle na sobě methylová skupina nebo atom vodíku. Alternativně alespoň jeden pár substituentů R a R , R a R , R a R nebo R a R spolu představuje atom kyslíku. R56 je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3~Z3· Y3 a Z3 se definují stejně jako výše.
V dalším ztělesnění má R obecný vzorec \ R59
R67 e, f, h, u a y jsou nezávisle na sobě O nebo 1.
S> ' 60 ' 61 Z 62Z 63 6 4 '
R a R jsou nezávisle na so6 5 6 6 bě methylová skupina nebo atom vodíku. Alternativně alespoň jeden pár substituentú R aR,R aR,R aR nebo Re3 a R64 společně představuje atom kyslíku. Rev je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y -Z . Y2 a Z^ se definují stejně jako výše. Alternativně má Rg? obecný vzorec d je O nebo 1. R J 6
9 ' 7 O ' 7 1' 7 Z 1
R , R a R jsou
3' 7 4 7 5 nezávisle na sobě nižší alkylová skupina nebo atom vodíku. Alternativně je alespoň jeden pár substituentú Res a R6g, R a R , R a R , R aR společně představuje atom
71ř 72 73*74 75^ kyslíku. R?e je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, hePojem aromatické skupiny, jak se zde používá, zahrnuje karbocyklické kruhové systémy (například benzylovou a cinnamylovou skupinu) a kondenzované polycyklické aromaterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3-Z3. Y3 a Z3 se definují stejně jako výše.
• · · · tické kruhové systémy (například naftylovou skupinu a 1,2,3,4-tetrahydronaftylovou skupinu). Aromatické skupiny se zde též nazývají arylové skupiny.
Pojem heteroaromatické skupiny, jak se zde používá, zahrnuje heteroarylové kruhové systémy (například thienyl, pyridyl, pyrazol, isoxazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, indazolyl, furany, pyrroly, imidazoly, pyrazoly, triazoly, pyrimidiny, pyraziny, thiazoly, isoxazoly, isothiazoly, tetrazoly nebo oxadiazoly) a heteroarylové kruhové systémy, ve kterých je karboxylový aromatický kruh, karbocyklický nearomatický kruh nebo heteroarylový kruh kondenzovaný s jedním či více heteroarylovými kruhy (například benzo(b)thienyl, benzimidazol, indol, tetrahydroindol, azaindol, indazol, chinolin, imidazopyridin, purin, pyrrolo[2,3-d]pyrimidin, pyrazolo[3,4-d]pyrimidin) a jejich N-oxidy.
Pojem aralkylová skupina, jak se zde používá, je aromatický substituent, který je připojený na sloučeninu alifatickou skupinou mající od jednoho do zhruba šesti atomů uhlíku.
Pojem heteroaralkylová skupina, jak se zde používá, je heteroaromatický substituent, který je připojený na sloučeninu alifatickou skupinou mající od jednoho do zhruba šesti atomů uhlíku.
Pojem heterocykloalkylová skupina, jak se zde používá, je nearomatický kruhový systém mající tři až osm atomů a zahrnující alespoň jeden heteroatom, jako je atom dusíku, kyslíku či síry.
Pojem acylová skupina, jak se zde používá, je skupina • · • · · · • · · ·
-C(O)NR R , - C(O)OR , -C(O)R , ve které R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina.
Pojem alifatické skupiny, jak se zde používá, zahrnuje uhlovodíky o jednom až osmi atomech uhlíku s přímým, rozvětveným či cyklickým řetězcem, které jsou úplně nasycené, nebo které obsahují jednu či dvě nenasycené jednotky. Pojem nižší alkylová skupina je nasycená alifatická skupina mající od 1 do 6 atomů uhlíku.
Sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat jako soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami. Tento vynález zahrnuje tyto soli. Příklady těchto solí zahrnují hydrochloridy, hydrobromidy, sulfáty, methansulfonaty, nitráty, maleaty, acetaty, citráty, fumaraty, tartaraty [například (+)-tartaraty, (-)-tartaraty nebo jejich směsi včetně racemických směsí], sukcinaty, benzoaty a soli s aminokyselinami, jako je kyselina glutamová. Tyto soli lze připravit způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru.
Určité sloučeniny obecného vzorce I mající kyselé substituenty mohou existovat jako soli s farmaceuticky přijatelnými bázemi. Tento vynález zahrnuje tyto soli. Příklady těchto solí zahrnují sodné soli, draselné soli, lysinové soli a argininové soli. Tyto soli lze připravit způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru.
Určité sloučeniny obecného vzorce I a jejich soli mohou existovat ve více než jedné krystalové formě a tento vynález zahrnuje všechny krystalové formy a jejich směsi.
·· ···· ·· ··*· ·· · • · · · ♦ · ···· • · ··· ··· • · · · · · ··· · • · · · · · ··· _ · £· O -·-· · · · ·· ···
Určité sloučeniny obecného vzorce I a jejich soli mohou existovat ve formě solvátů, například hydrátů, a tento vynález zahrnuje všechny solváty a jejich směsi.
Určité sloučeniny obecného vzorce I mohou obsahovat jedno či více chirálních center a existují v různých opticky aktivních formách. Pokud sloučeniny obecného vzorce I obsahují jedno chirální centrum, existují sloučeniny ve dvou enantiomerních formách a tento vynález zahrnuje oba enantiomery a směsi enantiomerů, jako jsou racemické směsi. Enantiomery se mohou rozlišovat způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru, například tvorbu diastereoisomerních solí, které lze separovat, například krystalizací, tvorbou diastereoisomerních derivátů nebo komplexů, které lze separovat, například krystalizací, plynovou-kapalínovou nebo kapalinovou chromatografií, selektivní reakcí jednoho enantiomerů s činidlem specifickým pro enantiomer, například enzymatickou esterifikací nebo plynovou-kapalinovou či kapalinovou chromatografií v chirálním prostředí, například na chirálním nosiči, například silikagelu, s navázaným chirálním ligandem nebo za přítomnosti chirálního rozpouštědla. Je třeba si uvědomit, že pokud se žádaný enantiomer převádí na jinou chemickou složku jedním z výše popsaných separačních způsobů, požaduje se další krok pro uvolnění požadované enantiomerní formy. Alternativně lze specifické enantiomery připravovat asymetrickou syntézou s použitím opticky aktivních činidel, substrátů, katalyzátorů či rozpouštědel nebo převedením jednoho enantiomerů na druhý asymetrickou transformací.
Pokud sloučenina obecného vzorce I obsahuje více než jedno chirální centrum, může existovat v diastereoisomerních formách. Diastereoisomerní páry lze oddělovat způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru, například chromatografií
- *5V nebo krystalizací, a jednotlivé enantiomery v rámci každého páru lze oddělit, jak se popisuje výše. Tento vynález zahrnuje všechny diastereoisomery sloučenin obecného vzorce
I a jejich směsi.
Určité sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat v různých tautomerních formách nebo jako různé geometrické isomery a tento vynález zahrnuje všechny tautomery a/nebo geometrické isomery sloučenin obecného vzorce I a jejich směsi.
Určité sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat v různých stabilních konformačních formách, které lze separovat. Torsní asymetrie následkem omezené rotace okolo asymetrické jednoduché vazby, například vzhledem ke sférické zábraně nebo napětí kruhu, může umožňovat separaci různých konformačních složek. Tento vynález zahrnuje všechny konformační isomery sloučenin obecného vzorce I a jejich směsi.
Určité sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat ve formě zwitterionů a tento vynález zahrnuje každou obecnou formu zwitterionů sloučenin obecného vzorce I a jejich směsi .
Preferovaná skupina sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnuje látky podle následujícího seznamu:
cis-5-(4—fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin • · cis-5-(4—fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminhydrochlorid trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin trans-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin cis-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid
5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid cis-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin trans-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin cis-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin trans-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl} -5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin cis-7-[4-(4-ethylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin ·· ··<· ·· ···· ·· · ·· · ·· ····· ·· ······ • ····· ··· · —•*52 ·~* *· · ····· trans-7-[4-(4-ethylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin cis-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propyl]amino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propyl]amino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-[(4-dimethylamino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydro-lH-l-pyrrolocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat • · · · ♦ · • · · · • ·
trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[ 2 ,3-d]pyrimidin-4-amin trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trihydrochlorid cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trihydrochlorid trans-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleat trans-benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleat trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]• · • · « · • · • · t
-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)benzamid trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenylJbenzamid-trismaleat cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid cis-Nl-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid-trismaleat trans-Nl-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid-trismaleat cis-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(3-methoxypropyl)amino]benzonitril-trismaleat trans-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(3-methoxypropyl)amino]benzonitril-trismaleat cis-2-amino-6-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[ 2 , 3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)benzonitril-trismaleat « « · · · · · * < · « * · * • · · » » ·«·· — *5^ ·** ·* · ·· ··· trans-2-amino-6-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[ 2 ,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)benzonitril-trismaleat cis-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(4-methylfenyl)sulfanyl]benzonitril-trismaleat trans-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(4-methylfenyl)sulfanylJbenzonitril-trismaleat cis-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-(2-pyridylsulfanyl)benzonitril-trismaleat trans-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-(2-pyridylsulfanyl)benzonitril-trismaleat cis-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1• ··· w
-benzensulfonamid-trismaleat
NI-(4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid
NI-(4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid
Nl-(4-[4-amino-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid
NI-(4-[4-amino-7-(1-formyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid
Nl-[4-[4-amino-7-l-[(l-methyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl ] -4-f luor-l-benzensulf onamid-bismaleat
NI-[4-[4-amino-7-l-[(1,2-dimethyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-ben zensulfonamid
Nl-[4-[4-amino-7-l-[(1,2-dimethyl-lH-5-pyrazolylJkarbonyl]-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl ] -4-f luor-l-benzensulf onamid
NI-(4-{4-amino-7-[(1-(2-pyridylkarbonyl)-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid
Nl-4-(4-amino-7-{4-[1-(l-methylpiperid-4-yl)piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-(trifluormethoxy)-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-chlor-2-thiofensulfonamid-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-fluor-2-benzensulfonamid-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-fluorfenyl)-2,5-difluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,6-difluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzothiadiazol-4-sulfonamid-trismaleat • « ···· ·· ···· ·· • ····« ··· · · · ·· ·· · ·· · · · trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trifluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2-nitro-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4,6-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,6-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-fluor-1-benzensulfonamid-bismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-chlor-2-thiofensulfonamid-bismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]• · • · · · • · · ·
-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis—N—1—(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-jod-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-(trifluormethoxy)-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-6-methyl-1-ben zensulfonamid-tri srnaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-kyano-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trifluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3,460
-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-brom-2-thiofensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-tri chlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-brom-5-chlor-2-thiofensulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzothiadiazol-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzoxadiazol-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dichlor-l-thiofensulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-chlor-2,1,3-benzoxadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(5-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(5-chlor-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-2-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-brom-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dibrom-3,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-1-benzensulfonamid-trismaleat • · · · cis-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-(2-nitrofenyl)methansulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2-nitro-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4,6-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,6-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-fluor-1-benzensulfonamid-bismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2,5-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]• · · · « · · ·
Jt · · ·
-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-jod-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-6-methyl-1-ben zensulfonamid-tri srnaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-kyano-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3,4-difluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-brom-2-thiofensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4-di• · · « · chlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2,3,4-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-brom-5-chlor-2-thiofensulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzoxadiazol-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dichlor-l-thiofensulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-chlor-2,1,3-benzoxadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(5-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)(5-chlor-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat • · · · • · · ·
trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-2-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-brom-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dibrom-3,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-(2-nitrofenyl)methansulfonamid-trismaleat.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mají antiangiogenní vlastnosti. Tyto antiangiogenní vlastnosti jsou částečně způsobené inhibicí protein tyrosin kinas esenciálních pro angiogenní procesy. Z tohoto důvodu lze použít tyto sloučeniny jako aktivní prostředky proti chorobným stavům, jako je arthritida, atherosklerosa, restenosa, psoriasa, hemangiomy, myokardiální angiogense, koronární a cerebrální kolaterální spojky, angiogenese ischemických končetin, ischemie/reperfusní poškození, hojení ran, peptické vředové onemocnění související s Helicobacterem, angiogenní poruchy vyvolané viry, fraktury, Crow-Fukasův syndrom (POEMS), preklampsie, menometrorhagie, ”cat scratch fever, rubeosa, neovaskulární glaukom a retinopathie, jako jsou ty, které souvisí s diabetickou retinopathií, retinopathií v dospívání nebo s makulární degenerací ve stáří. Navíc lze některé z těchto sloučenin použít jako aktivní prostředky proti solidním tumorům, • · · · ·· ···· ·· • · · · · · · —· · ·.
maligním ascitům, von Hippel Lindauově chorobě, hemopoetickým nádorům a hyperproliferačním poruchám, jako je thyroidní hyperplasie (zejména Graveho choroba) a cysty [jako je hypervaskularita stromatu vaječníků charakteristická pro polycystický syndrom vaječníků (Steinův-Leventhalův syndrom)] a polycystická choroba ledvin, neboť tyto choroby vyžadují proliferaci buněk cév pro svůj růst a/nebo tvorbu metastas.
Dále lze některé z těchto sloučenin použít jako aktivní prostředky proti popáleninám, chronickému onemocnění plic, mrtvici, polypům, anafylaktickým reakcím, chronickému a alergickému zánětu, přecitlivělosti zpožděného typu, syndromu hyperstimulace vaječníků, edemu souvisejícímu s mozkovým tumorem, onemocnění ve vysokých nadmořských výškách, traumatu nebo cerebrálnímu či plicnímu edemu vyvolanému hypoxií, očnímu a makulárnímu edemu, ascitům, glomerulonefritidě a dalším chorobám, při kterých jsou projevem nemoci hypermeabilita, efuse, exsudáty, proteinová extravasace či edem. Tyto sloučeniny lze též použít při léčení poruch, při kterých proteinová extravasace vede k ukládání fibrinu a extracelulární matrice podporující stromální proliferaci (například keloidní fibrosa, cirhosa a syndrom karpálního tunelu) . Zvýšená tvorba VEGF podporuje zánětlivé procesy, jako je nástup a aktivace monocytů. Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze též použít při léčení zánětlivých poruch, jako je zánětlivé střevní onemocnění (IBD) a Crohnova choroba.
VEGF jsou jedinečné v tom smyslu, že jsou jedinými angiogenními růstovými faktory, které přispívají k vaskulární hypermeabilitě a tvorbě edemu. Skutečně se objevuje, že vaskulární hyperpermeabilita a edem spojené s expresí či podáním mnohých růstových faktorů jsou zprostředkované tvorbou VEGF. Zánětlivé cytokiny stimulují tvorbu VEGF. Hypoxie vede • · · · · · · · ···· ·· • · · ·· · ··· • ·«··· ··· — 67 —···· ·· «· · .. · k význačné vzestupné regulaci VEGF v četných tkáních, takže situace zahrnující infarkt, oklusi, ischemii, anemii či cirkulační zhoršení obvykle vyvolávají odpovědi zprostředkované VEGF/VPF. Vaskulární hyperpermeabilita, přidružený edem, pozměněná transendotheliální výměna a makromolekulární extravasace, často doprovázená diapedesou, může vést k nadměrnému ukládání matrice, aberantní proliferaci stromatu, fibrose atd. Proto může hyperpermeabilita zprostředkovaná VEGF významně přispívat k poruchám s těmito etiologickými rysy.
Jelikož uhnízdění blastocytu, vývoj placenty a embryogenese jsou závislé na angiogenesi, lze určité sloučeniny podle tohoto vynálezu použít jako antikoncepční prostředky a prostředky proti fertilitě.
Uvažuje se, že poruchy popsané výše jsou značnou měrou zprostředkované aktivitou protein tyrosin kinasy zahrnující KDR/VEGFR-2 a/nebo Flt-l/VEGFR-1 a/nebo TIE-2 tyrosinové kinasy. Inhibicí aktivity těchto tyrosinových kinas se inhibuje progrese těchto popsaných poruch, neboť angiogenní a vaskulární hyperpermeabilita je jako složka tohoto chorobného stavu podstatně omezena. Působení určitých sloučenin podle tohoto vynálezu díky jejich selektivitě vůči specifickým tyrosinovým kinasam vede k minimalizaci vedlejších účinků, které by nastaly, kdyby se použily méně selektivní tyrosin kinasové inhibitory. Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou též účinnými inhibitory FGFR, PDGFR, c-Met a IGF-l-R. Tyto receptorové kinasy mohou přímo či nepřímo potenciovat angiogenní a hyperproliferační odpovědi při různých chorobách, takže jejich inhibice může brzdit rozvoj onemocnění.
·· · ·· · ··· • · · · · · ·
Sloučeniny podle tohoto vynálezu vykazují inhibiční aktivitu proti proteinovým kinasam. To znamená, že tyto sloučeniny pozměňují převod signálu proteinovými kinasami. Sloučeniny podle tohoto vynálezu inhibují protein kinasy z tříd serin/threonin a tyrosin kinas. Tyto sloučeniny zejména selektivně inhibují aktivitu tyrosinových kinas KDR/FLK-l/VEGFR-2. Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu též inhibují aktivitu dalších tyrosinových kinas, jako jsou kinasy podskupiny Flt-l/VEGFR-1, Tie-2, FGFR, PDGFR, IGF-1R, c-Met, Src, jako je Lek, Src, fyn, yes atd. Navíc některé sloučeniny podle tohoto vynálezu významně inhibují serin/threonin kinasy, jako jsou kinasy PKC, MAP, erk, CDK, Plk-1 nebo Raf-1, které hrají podstatnou roli při buněčné proliferaci a progresi buněčného cyklu. Schopnost a specifičnost generických sloučenin podle tohoto vynálezu vůči konkrétní proteinové kinase lze často pozměňovat a optimalizovat změnami povahy počtu a uspořádání substituentů (to jest R , R^, R3, A a kruhu 1) a konformačním omezením. Navíc metabolity určitých sloučenin mohou též vykazovat významnou inhibiční aktivitu proteinových kinas.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu při podání jednotlivcům, kteří potřebují tyto sloučeniny, inhibují vaskulární hyperpermeabilitu a tvorbu edemu u těchto jednotlivců. Lze uvažovat, že tyto sloučeniny působí inhibicí aktivity KDR tyrosin kinasy, která se účastní procesu vaskulární hyperpermeability a tvorby edemu. KDR tyrosin kinasa se též nazývá FLK-1 tyrosin kinasa, NYK tyrosin kinasa nebo VEGFR-2 tyrosin kinasa. Tyrosin kinasa KDR se aktivuje při připojení vaskulárního endotheliálního faktoru růstu buněk (VEGF) nebo jiného aktivačního ligandu (jako je VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E nebo HIV Tat protein) na receptor tyrosinové kinasy KDR, který je na povrchu vaskulárních endotheliálních • · · · · · «· ··«· · · «· · ·· · ··· buněk. Po této aktivaci tyrosin kinasy KDR nastává hyperpermeabilita cév a tekutina proudí z krve stěnou cévy do intersticiálních prostorů s vytvořením oblasti edemu. Tuto odpověď též často doprovází diapedesa. Podobně může nadměrná vaskulární hyperpermeabilita narušit normální molekulovou výměnu endothelem u kritických tkání a orgánů (například plíce a ledvina), čímž způsobuje makromolekulám! extravasaci a ukládání. Po této akutní odpovědi na stimulaci KDR, o které lze uvažovat, že umožňuje následný angiogenní proces, vede prodloužená stimulace tyrosin kinasy KDR k proliferaci a chemotaxi vaskulárních endotheliálních buněk a k tvorbě nových cév. Inhibicí aktivity tyrosin kinasy KDR buď blokováním tvorby aktivačního ligandu, blokováním vazby aktivačního ligandu k receptoru tyrosin kinasy KDR, prevencí dimerizace receptoru a transfosforylace, inhibicí enzymatické aktivity tyrosin kinasy KDR (inhibice fosforylační funkce enzymu) nebo některým jiným mechnismem, který přerušuje sestupné vedení signálu [D. Mukhopedhyay a kol., Cancer Res., 58, 1278-1284 (1998) a odkazy, které se uvádějí v této práci] lze inhibovat a minimalizovat hyperpermeabilitu stejně tak jako související extravasaci, následnou tvorbu edemu a ukládání matrice a angiogenní odpovědi.
Jedna ze skupin preferovaných sloučenin podle tohoto vynálezu vykazuje inhibici aktivity tyrosin kinasy KDR bez významné inhibice aktivity tyrosin kinasy Flt-1 (tyrosin kinasa Flt-1 se též uvádí jako tyrosin kinasa VEGFR-1). Obě tyrosinové kinasy KDR a Flt-1 se aktivují vazbou VEGF na receptory tyrosinové kinasy KDR respektive Flt-1. Určité preferované sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou jedinečné v tom, že inhibují aktivitu VEGF-receptorové tyrosinové kinasy (KDR), která se aktivuje aktivací ligandů, avšak neinhibuje jiné receptorové tyrosinové kinasy, jako je Flt-1, které se též aktivují určitými aktivačními ligandy. Tímto způsobem jsou určité preferované sloučeniny podle tohoto vynálezu selektivní ve své aktivitě při inhibici tyrosin kinas .
Jedno ztělesnění tohoto vynálezu poskytuje způsob léčení stavu zprostředkovaného protein kinasou u pacienta spočívající v podávání tomuto pacientovi terapeuticky nebo profylakticky účinného množství jedné či více sloučenin obecného vzorce 1.
'•Stav zprostředkovaný proteinovou kinasou” je zdravotní stav, jako je onemocnění či jiný nežádoucí fyzický stav, jehož původ či postup závisí alespoň částečně na aktivitě alespoň jedné proteinové kinasy. Touto proteinovou kinasou může být například některá protein tyrosin kinasa nebo protein serin/threonin kinasa.
Pacient, který se má léčit, může být živočich, přednostně savec, jako je domestikované či hospodářské zvíře. Přednostněji je tímto pacientem člověk.
Terapeuticky účinné množství je množství sloučeniny obecného vzorce I nebo kombinace dvou či více takových sloučenin, které inhibují zcela nebo částečně progresi stavu nebo ulehčují alespoň částečně jeden či více symptomů tohoto stavu. Terapeuticky účinným množstvím může být též množství, které je účinné preventivně. Množství, které je terapeuticky účinné, bude záviset na velikost a pohlaví pacienta, na léčeném stavu, na závažnosti tohoto stavu a na požadovaném výsledku. Pro daného pacienta lze terapeuticky účinné množství stanovit způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v obo ru.
• · · · · · • · · ·· · · ·
Způsob podle tohoto vynálezu je použitelný při léčení stavů zprostředkovaných proteinovými kinasami, jako jsou stavy popsané výše. V jednom ztělesnění se stav zprostředkovaný proteinovými kinasami charakterizuje nežádoucí angiogenesí, edemem nebo ukládáním stromatu. V tomto stavu může být například jeden nebo více vředů způsobených bakteriální či mykotickou infekcí, Moorenovy vředy a ulcerativní kolitida. Tento stav může též vyplývat z mikrobiální infekce, jako je Lymeho choroba, sepse, septický šok nebo infekce Herpes simplex, Herpes Zoster, virem lidské iminitní nedostatečnosti, prvoky, toxoplasmosou nebo parapoxvirem, následkem angiogenních poruch, jako je von Hippel Lindauova choroba, polycystické onemocnění ledvin, pemphigoid, Pagetova choroba a psoriasa, následkem reprodukčního stavu, jako je endometriosa, syndrom hyperstimualce ovarií, preklampsie nebo menometrorrhagie, následkem fibrotických a edemových stavů, jako je sarkoidosa, fibrosa, cirhosa, thyroiditida, systémový syndrom hyperviskozity, Oslerova-Weberova-Renduho choroba, chronické okluzivní pulmonární onemocnění, astma a edem po popáleninách, traumatu, ozáření, mrtvici, hypoxii či ischemii, nebo následkem zánětlivého/imunologického stavu, jako je systémový lupus, chronický zánět, glomerulonefritida, synovitida, zánětlivé onemocnění střev, Crohnova choroba, revmatická arthritida, osteoarthritida, mnohočetná sklerosa a odmítnutí implantátu. Vhodné stavy způsobené protein kinasou též zahrnují srpkovitost, osteoporosu, osteopetrosu, hyperkalcemii vyvolanou tumorem a kostní metastasi. Další stavy zprostředkované protein kinasami, které lze léčit způsobem podle tohoto vynálezu, zahrnují oční stavy, jako je oční a makulární edem, oční neovaskulární onemocnění, skleritida, radiální keratotomie, uveitida, vitritida, myopie, optické jamky, chronické odchlípení sítnice, komplikace po aplika72 • * ·♦«♦ · ♦ · · » · · · • · · · · · ♦ · · cích laseru, konjuktivitida, Stargardtova choroba a Ealesova choroba navíc k retinopatii a makulární degeneraci.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou též použitelné při léčení kardiovaskulárních stavů, jako je atherosklerosa, restnosa, vaskulární okluse a obstrukční onemocnění karotidy.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou též použitelné při léčení indikací souvisejících s rakovinou, jako jsou solidní tumory, sarkomy (zejména Ewingův sarkom a osteosarkom), retinoblastom, rhabdomyosarkomy, neuroblastom, maligní onemocnění krvetvorby včetně leukemie a lymfomu, pleurální či perikardiální efuse vyvolané tumorem a maligní ascity.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou též použitelné při léčení Crowova-Fukaseho syndromu (POEMS) a diabetických stavů, jako je glaukom, diabetická retinopatie a mikroangiopatie.
Kinasy skupin Src, Tec, Jak, Map, Csk, NFkB a Syk hrají klíčovou úlohu při regulaci imunitní funkce. Skupina Src v současné době zahrnuje Fyn, Lek, Fgr, Fes, Lyn, Src, Yrk, Fyk, Yes, Hek a Blk. Skupina Syk podle současné znalosti zahrnuje pouze Zap a Syk. Skupina TEC zahrnuje Tec, Btk, Rlk a Itk. Janusova skupina kinas se účastní převodu signálů růstových faktorů a prozánětlivých cytokinů prostřednictvím řady receptorů. I když BTK a ITK, členové skupiny kinas Tec, hrají méně prostudovanou úlohu v imunologii, jejich modulace inhibitorem může přinést terapeutický prospěch. V současné době se uvažuje, že skupina Csk zahrnuje Csk a Chk. Kinasy RIP, IRAK-1, IRAK-2, NIK, p38 MAP, Jnk, IKK-1 a IKK-2 se účastní cest převodu signálu pro klíčové prozánětlivé cyto• ♦ · ♦ · · · · ·ΙΜ·· • » · · ·· « · • · · ·· · * • 4 · · · «···
3 ·····« · · ·· kiny, jako je TNF a IL-1. Sloučeniny obecného vzorce I díky své schopnosti inhibovat jednu či více z těchto kinas mohou fungovat jako imunomodulační prostředky použitelné pro udržování aloštěpů, pro léčení autoimunitních poruch a léčení sepse a septického šoku. Svou schopností regulovat migraci či aktivaci T buněk, B-buněk, žírných buněk, monocytů a neutrofilů by tyto sloučeniny mohly být použitelné pro léčení těchto autoimunitních onemocnění a sepse. Prevence odmítnutí implantátu, buď v případech hostitel proti implantátu solidních orgánů nebo hostitel proti kostní dřeni, je omezená toxicitou současně dostupných imunosupresivních prostředků a účinný lék se zlepšeným terapeutickým indexem by přinesl prospěch. Pokusy cílené na geny prokázaly esenciální úlohu Src v biologii osteoklastů, buněk odpovědných za kostní resorpci. Sloučeniny obecného vzorce I díky své schopnosti regulovat Src mohou být též použitelné při léčení osteoporosy, osteopetrosy, Pagetovy choroby, hyperkalcemie vyvolané tumorem a při léčení kostních metastas.
Řada proteinových kinas prokazatelně působí jako protoonkogeny. Chromosomový zlom (v bodu zlomu kinasy ltk na chromosomu 5), translokace, jako je tomu v případu genu Abl s BCR (chromosom Philadelphia), omezení v případech, jako je c-Kit nebo EGFR, nebo mutace (například Met) vede k vytvoření dysregulovaných proteinů s jejich přeměnou z protoonkogenu na onkogen. V ostatních tumorech je onkogenese řízená autokrinními či parakrinními interakcemi mezi receptory ligandu/růstového faktoru. Členové skupiny kinas src se obvykle účastní sestupného převodu signálu, čímž podporují onkogenesi a samy se mohou stát onkogenními nadměrnou expresí či mutací. Inhibicí protein kinasové aktivity těchto proteinů lze přerušit tento chorobný proces. Vaskulární restenosa může ovlivňovat proliferaci buněk hladkého svalstva a endo74
• · · · « · • · · « · ♦ » *·* · • · « • · · ·» · • · ·« « · ·
• · · · · · · • · · · ·
thelu FGF a/nebo PDGF. Ligandová stimulace FGFR, PDGFR, IGF1-R a c-Met in vivo je proangiogenní a podporuje poruchy závislé na angiogenesi. Inhibice aktivit kinas FGFR, PDGFR, c-Met nebo IGF1-R, jednotlivě či v kombinaci, může představovat účinnou strategii inhibice těchto jevů. Proto sloučeniny obecného vzorce I inhibující kinasovou aktivitu normálních nebo aberantních členů skupiny c-kit, c-met, c-fms, src, EGFr, erbB2, erbB4, BCR-Abl, PDGFr, FGFr, IGF1-R a dalších receptorových či cytosolových tyrosinových kinas může být přínosem při léčení benigních a neoplastických proliferačních onemocnění.
Při mnoha patologických stavech (například při solidních primárních tumorech a metastasách, Kaposiho sarkomu, revmatické arthritidě, slepnutí následkem nevhodné oční neovaskularizace, psoriasy a aterosklerosy) je progrese onemocnění závislá na přetrvávající angiogenesi. Polypeptidové růstové faktory, které se často vytvářejí chorobnou tkání nebo přidruženými zánětlivými buňkami, a jejich odpovídající specifické receptorové tyrosinové kinasy buněk endothelu (například KDR/VEGFR-2, Flt-l/VEGFR-1, Tie-2/Tek a Tie) mají zásadní důležitost pro stimulaci růstu buněk endothelu, migraci, organizaci, diferenciaci a založení nové funkční vaskulatury. Vzhledem k působení faktoru vaskulární permeability VEGF při zprostředkování vaskulární hyperpermeabílity se též uvažuje, že stimulace VEGF kinasy VEGFR hraje důležitou úlohu při vytváření tumorových ascitů, mozkového a plicního edemu, pleurálních a perikardiálních efusí, reakcí z přecitlivělosti opožděného typu, tkáňového edemu a dysfunkce orgánů po traumatu, popálenin, ischemie, diabetických komplikací, endometriosy, respirační tísně dospělých (ARDS), post-kardiopulmonálního bypasu spojeného s hypotensí a hyperpermeabilitou a očního edemu vedoucího ke glaukomu nebo • · « r « · ·· ···· slepnutí následkem nevhodné neovaskularizace. Navíc k VEGF nedávno identifikovaný VEGF-C a VEGF-D a virálně kódovaný VEGF-E nebo HIV-Tat protein mohou též způsobovat vaskulární hyperpermeabilitní odpověď stimulací kinasy VEGFR. KDR/VEGFR-2 a/nebo Tie-2 se též exprimují ve zvolené populaci hempoetických kmenových buněk. Určití členové této populace jsou pluripotentní ve své povaze a mohou se stimulovat růstovými faktory k diferenciaci na buňky endothelu a participovat při vaskulogenních angiogenních procesech. Z tohoto důvodu se tyto buňky nazývají endotheliální progenitorové buňky (EPC) [J. Clin. Investig., 103, 1231-1236 (1999)]. V některých progenitorech může Tie-2 hrát úlohu v jejich nástupu, adhesi, regulaci a diferenciaci [Blood, 4317-4326 (1997)]. Určité prostředky podle obecného vzorce I schopné blokovat kinasovou aktivitu specifických kinas buněk endothelu by proto inhibovaly progresi choroby zahrnující tyto situace.
Uvažuje se, že vaskulární destabilizace antagonistického ligandů Tie-2 (Ang2) indukuje nestabilní plastický stav endothelu. Za přítomnosti vysokých hlaldin VEGF může dojít k robustní angiogenní odpovědi, avšak v nepřítomnosti VEGF nebo podnětu vztahujícího se k VEGF může nastat prostá regrese cévy a apoptosa endothelu [Genes and Devel., 13, 1055-1066 (1999)]. Analogicky může být inhibitor kinasy Tie-2 proangiogenní nebo antiangiogenní za přítomnosti či nepřítomnosti podnětu vztahujícího se k VEGF. Proto lze použít inhibitory Tie-2 s příslušnými proangiogenními podněty, jako je VEGF, pro podporu terapeutické angiogenese v situacích, jako je hojení rány, infarkt a ischemie.
Sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich soli či farmaceutické prostředky obsahující terapeuticky účinná množst76 ·· ···· • · · • · · ·· • · · • · • · · ··»·· ·· ví těchto sloučenin lze použít při léčení stavů zprostředkovaných protein kinasami, jako jsou benigní a neoplastická proliferativní onemocnění a poruchy imunitního systému, jak se popisuje výše. Taková onemocnění například zahrnují autoimunitní choroby, jako je revmatická arthritida, thyroiditida, diabetes typu 1, mnohočetná sklerosa, sarkoidosa, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnova choroba, myasthenia gravis a systémový lupus erythematosus, psoriasa, odmítnutí orgánového implantátu (například odmítnutí ledviny, choroba z reakce implantátu proti hostiteli), benigní a neoplastická proliferativní onemocnění, lidské nádory, jako jsou nádory plic, prsu, žaludku, močového měchýře, tlustého střeva, pankreasu, vaječníků, prostaty a rekta a hemopoetické maligní choroby (leukémie a lymfom) a choroby zahrnující nepřiměřenou vaskularizaci, například diabetickou retinopatii, retinopatii v dospívání, choroidální neovaskularizaci následkem makulární degenerace spojené s věkem a infantilní hemangiomy u lidí. Navíc lze tyto inhibitory použít při léčení poruch zahrnujících edém zprostředkovaný VEGF, ascity, efuse a exsudáty včetně například makulárního edemu, mozkového edemu, akutního plicního poranění a syndromu respirační tísně dospělých (ARDS).
Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze též použít při prevenci těchto onemocnění.
Uvažuje se, že poruchy popsané výše jsou značnou měrou zprostředkované aktivitou protein tyrosin kinasy za účasti VEGF receptorů (například KDR, Flt-1 a/nebo Tie-2). Inhibicí aktivity těchto receptorových tyrosinových kinas se inhibuje postup popisovaných poruch, nebot se značně omezuje angiogenní složka chorobného stavu. Působení sloučenin podle tohoto vynálezu jejich selektivitou vůči specifickým tyrosin • · · · • · · · · · · • · · · · · • «···· ·· ······ · ···· · · ·· · kinasám vede k minimalizaci vedlejších účinků, které by nastaly v případě použití méně selektivních tyrosin kinasových inhibitorů.
V jiném aspektu tento vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I, jak se definují na počátku výše pro použití jako léky, zejména jako inhibitory aktivity protein kinasy, například aktivity tyrosin kinasy, aktivity serin kinasy a aktivity threonin kinasy. V dalším aspektu tento vynález poskytuje použití sloučenin obecného vzorce I, jak se definují na počátku výše, při výrobě léku pro použití při inhibici protein kinasové aktivity.
V tomto vynálezu se používají následující definice.
Pojem fyziologicky přijatelné soli se týká těch solí, které zachovávají biologickou účinnost a vlastnosti volných bází a které se obdrží reakcí s anorganickými kyselinami, jako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina fosforečná nebo s organickými kyselinami, jako je kyselina sulfonová, karboxylová kyselina, organická fosforečná kyselina, kyselina methansulfonová, kyselina ethansulfonová, kyselina p-toluensulfonová, kyselina salicylová, kyselina mléčná, kyselina vinná a podobně.
Pojem alkylová skupina se týká nasyceného alifatického uhlovodíku včetně skupin s přímým řetězcem a s rozvětveným řetězcem o 1 až 6 atomech uhlíku nebo cyklických uhlovodíků o 3 až 6 atomech uhlíku.
Pojem alkoxyskupina se týká O-alkylové skupiny, kde alkylová skupina se definuje podle popisu výše.
• · • · · · • · • · · · · • · · · · * • · · · · · ···· · · ·· ·
Farmaceutické prostředky
Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze podávat člověku samotné nebo ve farmaceutických prostředcích, ve kterých se mísí s vhodnými nosnými či pomocnými látkami při dávkách pro léčení či zlepšení vaskulární hyperpermeability, edému a přidružených poruch. Směsi těchto sloučenin lze též podávat pacientovi jako jednoduchou směs nebo ve vhodně formulovaných farmaceutických prostředcích. Terapeuticky účinná dávka se dále týká množství sloučeniny nebo sloučenin dostatečného k poskytnutí prevence či oslabení nepřiměřené neovaskularizace, progrese hyperproliferačních poruch, edému, hyperpermeability související s VEGF a/nebo hypotense související s VEGF. Způsoby formulace a podávání sloučenin podle této přihlášky lze nalézt v Remington1s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, poslední vydání.
Cesty podávání
Vhodné cesty podávání mohou například zahrnovat perorální podávání, podávání očních kapek, rektální podávání, transmukosální podávání, lokální podávání nebo střevní podávání, parenterální podávání včetně intramuskulárních, subkutánních, intramedulárních injekcí, stejně tak jako intrathekální, přímé intraventrikulární, intravenósní, intraperitoneální, intranasální nebo intraokulární injekce.
Alternativně lze sloučeninu podávat spíše lokálním nesystémovým způsobem, například injekcí sloučeniny přímo do místa otoku, často v depótní formě nebo ve formě prostředku s pozdrženým uvolňováním.
• · • · · · • · · · • ·
Dále lze lék podávat v systému cílené dodávky léku, například ve formě liposomu potaženého protilátkou specifickou pro endotheliální buňky.
Přípravek/formulace
Farmaceutické přípravky podle tohoto vynálezu lze obdržet známým způsobem, například konvenčním míšením, rozpouštěním, granulací, přípravou dražé, rozmělňováním, emulgací, plněním do tobolek, zachycením nebo lyofilizací.
Farmaceutické prostředky pro použití v souladu s tímto vynálezem lze tedy formulovat konvenčním způsobem s použitím jednoho či více fyziologicky přijatelných nosičů zahrnujících pomocné látky, které usnadňují zpracování účinných složek do přípravků, které lze farmaceuticky použít. Správná formulace závisí na zvolené cestě podávání.
Pro injekce lze prostředky podle tohoto vynálezu formulovat ve vodných roztocích, přednostně ve fyziologicky kompatibilních pufrech, jako je Hankův roztok, Ringerův roztok nebo pufrovaný fyziologický roztok. Pro transmukosální podávání se používají penetrační prostředky vhodné pro bariéru, kterou má účinná látka procházet. Takové penetrační prostředky jsou v oboru obecně známy.
Pro perorální podávání lze sloučeniny formulovat přímo kombinací účinných složek s farmaceuticky přijatelnými nosnými látkami dobře známými v oboru. Takové nosné látky umožňují formulaci sloučenin podle tohoto vynálezu do tablet, pilulek, dražé, tobolek, kapalin, gelů, sirupů, suspensí a podobně pro perorální požití pacientem, který se má léčit. Farmaceutické prostředky pro perorální podání lze • · • · · · • · · · • · obdržet kombinací účinné složky s tuhou pomocnou látkou, případné drcení výsledné směsi a zpracování směsi granulí po přidání vhodných pomocných látek v případě požadavku s obdržením tablet či jader dražé. Vhodné pomocné látky jsou zejména plnidla, jako jsou cukry, včetně laktosy, sacharosy, mannitolu nebo sorbitolu, celulosové přípravky, jako je například kukuřičný škrob, pšeničný škrob, rýžový škrob, bramborový škrob, želatina, tragakantová klovatina, methylcelulosa, hydroxypropylmethylcelulosa, sodná sůl karboxymethylcelulosy a polyvinylpyrrolidon (PVP). V případě požadavku lze přidávat rozvolňovadla, jako je polyvinylpyrrolidon s příčnými vazbami, agar nebo kyselina alginová, nebo jejich soli, jako je alginat sodný.
Jádra dražé se opatřují vhodnými potahy. K tomuto účelu lze použít koncentrované cukerné roztoky, které mohou případně obsahovat arabskou klovatinu, mastek, polyvinylpyrrolidon, karbopolový gel, polyethylenglykol a/nebo oxid titaničitý, roztoky laků a vhodných organických rozpouštědel nebo rozpouštědlových směsí. K tabletám či potahům dražé lze přidávat barviva či pigmenty pro identifikaci či charakterizaci různých kombiancí dávek účinné látky.
Farmaceutické prostředky, které lze užívat perorálně, zahrnují lisování želatinové tobolky stejně tak jako měkké uzavřené tobolky zhotovené z želatiny a plastifikátoru, jako je glycerol nebo sorbitol. Lisované tobolky mohou obsahovat účinné složky ve směsi s plnidlem, jako je laktosa, pojivý, jako jsou škroby, a/nebo mazivy, jako je mastek či stearat hořečnatý, a případně stabilizátory. V měkkých tobolkách se může účinná složka rozpustit a suspendovat ve vhodných kapalinách, jako jsou mastné oleje, kapalný parafin nebo kapalné polyethylenglykoly. Navíc lze přidat stabilizátory. Veškeré ······ · ····· ·· · ·· formulace pro perorální podávání by měly být v dávkách vhodných pro takové podávání.
Pro bukální podávání mohou být prostředky ve formě tablet nebo pastilek formulovaných konvenčním způsobem.
Pro podávání inhalací se sloučeniny pro použití podle tohoto vynálezu vhodným způsobem dodávají ve formě aerosolového spreje v tlakovém balení či nebulizačním zařízení s použitím vhodného hnacího plynu, například dichlordifluormethanu, trichlorfluormethanu, dichloretrafluorethanu, oxidu uhličitého či jiného vhodného plynu. V případě tlakového aerosolu lze dávkovou jednotku stanovit zajištěním ventilu pro dodávání odměřeného množství. Tobolky a kartridže, například z želatiny, pro použití v inhalačním či insuflačním zařízení lze formulovat s obsahem práškové směsi sloučeniny a vhodné práškové báze, jako je laktosa nebo škrob.
Sloučeniny lze formulovat pro parenterální podávání injekcí, například injekcí bolusu nebo kontinuální infusí. Prostředky pro injekce se mohou poskytovat v dávkové jednotkové formě, například v ampulích nebo vícedávkových nádobkách s přidaným konzervačním prostředkem. Přípravky mohou být ve formě suspensí, roztoků nebo emulsí v olejových či vodných prostředích a mohou obsahovat prostředky jako jsou suspensační, stabilisační a/nebo dispergační prostředky.
Farmaceutické prostředky pro parenterální podávání zahrnují vodné roztoky účinných složek ve formě rozpustné ve vodě. Navíc lze suspense účinných složek připravit jako příslušné injekční suspense v oleji. Vhodná lipofilní rozpouštědla nebo vehikula zahrnují mastné oleje, jako je sezamový olej, nebo syntetické estery mastných kyselin, jako je ethyloleat, nebo triglyceridy či liposomy. Vodné injekční suspense mohou obsahovat látky zvyšující viskositu suspense, jako je sodná sůl karboxymethylcelulosy, sorbitol či dextran. Případně mohou suspense též obsahovat stabilizátory či prostředky zvyšující rozpustnost sloučenin umožňující přípravu roztoků o vysokých koncentracích.
Alternativně může být účinná složka ve formě prášku pro konstituci s vhodným vehikulem, například sterilní nepyrogenní vodou před použitím.
Sloučeniny lze též formulovat v rektálních prostředcích, jako jsou čípky nebo retenční střevní nálevy, obsahující například konvenční čípkové báze, jako je kakaové máslo či jiné glyceridy.
Navíc k výše popsaným přípravkům lze sloučeniny též formulovat ve formě depotních přípravků. Tyto přípravky s dlouhou dobou působení lze podávat implantací (například subkutánně nebo intramuskulárně nebo intramuskulární injekcí). Proto lze sloučeniny například formulovat spolu s vhodnými polymerními či hydrofobními materiály (například jako emulse v přijatelném oleji) nebo iontoměničové pryskyřice nebo jako málo rozpustné deriváty, například jako málo rozpustné soli.
Příkladem farmaceutického nosiče pro hydrofobní sloučeniny podle tohoto vynálezu je systém s pomocným rozpouštědlem zahrnující benzylalkohol, nepolární povrchově aktivní látku, organický polymer mísitelný s vodou a vodnou fázi. Systém s pomocným rozpouštědlem může být systém VPD. VPD je roztok 3% benzylalkoholu (hmotnost/objemem), 8% (hmotnost/objemem) nepolárního povrchově aktivního polysor83 ·· ···· · · · · · · ·· • · · · · ♦ · • · · · · · • ··· · · ♦ · ····*· ·· · ·· bátu 80 a 65% (hmotnost/objemem) polyethylenglykolu 300 s doplněním objemu absolutním ethanolem. Systém s pomocným rozpouštědlem VPD (VPD:5W) obsahuje VPD zředěný 1:1 5% vodným roztokem dextrosy. Tento systém s pomocným rozpouštědlem rozpouští dobře hydrofobní sloučeniny a sám poskytuje nízkou toxicitu při systémovém podávání. Podíly systému s pomocným rozpouštědlem se ovšem mohou zřetelně měnit bez porušení rozpustnosti a bez toxicity. Dále se může měnit identita pomocných rozpouštědlových složek: například lze místo polysorbátu 80 použít jiné nepolární povrchově aktivní látky o nízké toxicitě, lze měnit rozměr frakce polyethylenglykolu, polyethylenglykol lze nahradit jinými biokompatibilními polymery, například polyvinylpyrrolidonem a dextrosu lze nahradit jinými cukry či polysacharidy.
Alternativně lze použít pro hydrofobní farmaceutické sloučeniny jiné systémy dodávky. Liposomy a emulze jsou dobře známými příklady prostředí dodávky či nosičů pro hydrofobní léky. Lze též použít určitá organická rozpouštědla, jako je dimethylsulfoxid, i když je tomu tak za cenu vyšší toxicity. Navíc lze sloučeniny dodávat s použitím systému s pozdrženým uvolňováním, jako jsou semipermeabilní matrice tuhých hydrofobních polymerů obsahujících terapeutický prostředek. V literatuře jsou uveřejněné různé látky s pozdrženým uvolňováním a jsou dobře známé tomu, kdo má zkušenost v oboru. Tobolky s pozdrženým uvolňováním mohou v závislosti na své chemické povaze uvolňovat sloučeninu po dobu několika týdnů až více než 100 d. V závislosti na chemické povaze a biologické stabilitě terapeutického prostředku lze použít další způsoby stabilizace proteinu.
Farmaceutické prostředky mohou též zahrnovat vhodné nosiče či pomocné látky ve formě tuhé látky či gelu. Příkla84 dy těchto nosných látek či pomocných látek zahrnují bez omezení uhličitan vápenatý, fosforečnan vápenatý, různé cukry, škroby, deriváty celulosy, želatinu a polymery, jako jsou polyethylenglykoly.
Mnohé ze sloučenin podle tohoto vynálezu lze poskytovat ve formě solí s farmaceuticky přijatelnými iontovými protějšky. Farmaceutiky přijatelné soli lze tvořit s mnoha kyselinami včetně, avšak bez omezení, kyseliny chlorovodíkové, kyseliny sírové, kyseliny octové, kyseliny mléčné, kyseliny vinné, kyseliny jablečné, kyseliny jantarové atd. Soli mají tendenci k vyšší rozpustnosti ve vodných či jiných protonových rozpouštědlech než odpovídající formy volné báze.
Účinné dávkování
Farmaceutické prostředky vhodné pro použití v tomto vynálezu zahrnují ty prostředky, ve kterých jsou účinné složky přítomny v účinném množství pro dosažení zamýšleného cíle. Konkrétněji terapeuticky účinné množství znamená množství účinné pro zabránění rozvoje nebo pro ulehčení existujících symptomů u léčeného subjektu. Stanovení účinných množství spadá do rámce možností toho, kdo má zkušenost v oboru.
Pro kteroukoliv sloučeninu použitou ve způsobu podle tohoto vynálezu lze účinnou dávku nejprve stanovit na základě rozborů provedených na buňkách. Například lze dávku formulovat u buněčných a zvířecích modelů pro dosažení koncentračního rozmezí v oběhu, který zahrnuje IC , jak se stanoví při studích na buňkách (to jest koncentrace zkoušené látky, která dosahuje poloviny maximální inhibice dané aktivity protein kinasy) V některých případech je vhodné stanovit
ICso za přítomnosti 3% až 5% serumalbuminu, neboť takové stanovení poskytuje přiblížení vazebným účinkům plasmatického proteinu na sloučeninu. Tyto informace lze použít k přesnějšímu stanovení dávek použitelných u lidí. Dále nejpreferovanější sloučeniny pro systémové podávání účinně inhibují protein kinasovou signalizaci v intaktních buňkách při hladinách, které lze bezpečně dosáhnout v krevní plasmě.
Terapeuticky účinná dávka se týká toho množství sloučeniny, které vede ke zlepšení symptomů u pacienta. Toxicitu a terapeutickou účinnost těchto látek lze stanovit standardními farmaceutickými postupy v buněčných kulturách či u experimentálních zvířat, například pro stanovení maximální tolerované dávky (MTD) a EDso (účinná dávka pro 50% odpověď). Dávkový poměr mezi toxickými a terapeutickými účinky je terapeutický index a ten se může vyjádřit jako poměr mezi MTD a EDsq. Sloučeniny vykazující vysoké terapeutické indexy se preferují. Údaje obdržené z těchto studií na buněčných kulturách a ze studií na zvířatech lze použít při formulaci dávkového rozmezí pro použití u lidí. Dávkování těchto sloučenin leží přednostně v rozmezí koncentrací v krevním oběhu, které zahrnuje EDso s nízkou toxicitou či bez toxicity. Dávkování se může v tomto rozmezí měnit v závislosti na použité dávkové formě a cestě použitého podávání. Přesná formulace, cesta podávání a dávkování se mohou zvolit na základě uvážení lékaře vzhledem ke stavu pacienta (viz například Fingl a kol., 1975, v The Pharmacological Basis of Therapeutics, Kapitola 1, str. 1). Při léčení krizí lze požadovat podání akutního bolusu či infuse s přiblížením k MTD pro dosažení rychlé odpovědi.
Dávkové množství a interval lze upravovat individuálně pro zajištění plasmatických hladin účinného zbytku, které • ····· ··· · • · · ··· · · · ···· ·· · · · ·· ··· jsou dostatečné pro udržování účinků modulace kinasy nebo minimální účinné koncentrace (MEC). MEC se bude měnit pro jednotlivé sloučeniny a může se stanovit z údajů in vitro, například jako koncentrace nezbytná pro dosažení 50% až 90% inhibice proteinové kinasy při použití zkoušek, které se zde popisují. Dávky nezbytné pro dosažení MEC závisí na jednotlivých vlastnostech a na cestě podávání. Avšak analýzy pomocí vysokovýkonné kapalinové chromátografie nebo biologické zkoušky lze použít pro stanovení koncentrací v krevní plasmě.
Dávkové intervaly lze též stanovit s použitím hodnoty MEC. Sloučeniny by se měly podávat s použitím režimu, který udržuje plasmatické hladiny nad MEC po 10 % až 90 % času, přednostně mezi 30 % a 90 % a nejlépe mezi 50 % až 90 % do dosažení požadovaného zlepšení symptomů. V případech lokálního podání nebo selektivního vychytávání nemusí být účinná lokální koncentrace léku ve vztahu ke koncentraci v krevní plasmě.
Množství podávaného prostředku bude ovšem závislé na léčeném subjektu, na jeho hmotnosti, na závažnosti postižení, na způsobu podávání a na posouzení předpisujícího lékaře.
Balení
Prostředky mohou být v případě požadavku ve formě balení nebo dávkovacího zařízení obsahujícího jednu či více jednotkových dávkových forem obsahujících účinnou složku. Balení může například zahrnovat kovovou či plastovou folii, jako je balení blistr. Balení nebo dávkovači zařízení může být doprovázeno návody pro podávání. Prostředky zahrnující • · · ·
sloučeninu podle tohoto vynálezu formulované v kompatibilním farmaceutickém nosiči se mohou též připravit, umístit do vhodného obalu a označit pro léčení indikovaného stavu.
U některých formulací může být prospěšné použití sloučenin podle tohoto vynálezu ve formě velmi malých částic, obdržených například fluidním mletím.
Použití sloučenin podle tohoto vynálezu při přípravě farmaceutických přípravků znázorňuje následující popis. V tomto popisu pojem účinná složka označuje jakoukoliv sloučeninu podle tohoto vynálezu, avšak zejména kteroukoliv sloučeninu, která je produktem jednoho z předchozích příkladů.
a) Tobolky
Při přípravě tobolek se smísí 10 hmotnostních dílů účinné látky a 240 hmotnostních dílů laktosy po rozmělnění. Směs se plní do tvrdých želatinových tobolek, kde každá tobolka obsahuje jednotkovou dávku nebo část jednotkové dávky účinné složky.
b) Tablety
Tablety lze připravit z následujících složek.
Hmotnostních dílů
Účinná složka 10 Laktosa 190 Kukuřičný škrob 22 Polyvinylpyrrolidon 10 Stearat hořečnatý 3
Účinnou látku, laktosu a malé množství škrobu lze rozmělnit, smísit a výslednou směs lze granulovat s roztokem polyvinylpyrrolidonu v ethanolu. Suchý granulát lze smísit se stearatem horečnatým a se zbytkem škrobu. Směs se poté lisuje na tabletovacím stroji s obdržením tablet, z nichž každá obsahuje jednotkovou dávku nebo část jednotkové dávky účinné sloučeniny.
c) Enterické potahované tablety
Tablety lze připravovat způsobem popsaným v části (b) výše. Tablety mohou být opatřené enterickým potahem konvenčním způsobem s použitím roztoku 20% acetatftalatu celulosy a 3% diethylftalatu ve směsi ethanolzdichlormethan (1:1).
d) Čípky
Při přípravě čípků se smísí 100 hmotnostních dílů účinné složky s 1300 hmotnostními díly triglyceridové čípkové báze a směs se tvaruje do čípků takovým způsobem, že každý obsahuje terapeuticky účinné množství účinné složky.
V prostředcích podle tohoto vynálezu může být účinná složka v případě požadavku spojená s jinými kompatibilními farmakologicky účinnými složkami. Například lze sloučeniny podle tohoto vynálezu podávat v kombinaci s jedním či více dalšími farmaceutickými prostředky, které inhibují tvorbu nebo brání tvorbě VEGF nebo angiopoetinů, zeslabují intracelulární odpovědi na VEGF nebo angiopoetiny, blokují intracelulární převod signálu, inhibují vaskulární hyperpermeabilitu, snižují zánět nebo inhibují či brání tvorbě edemu či neovaskularizace. Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze podávat
• · ·· · · «·«· * · • * · » · · • · · · · · před podáním přídavného farmaceutického prostředku, po něm nebo současně s ním podle toho, který způsob podávání je vhodný. Tyto přídavné farmaceutické prostředky zahrnují, avšak bez omezení, steroidy proti otoku, NSAIDS, inhibitory ras, prostředky proti TNF, prostředky proti IL1, antihistaminika, antagonisty PAF, inhibitry COX-1, inhibitory COX-2, inhibitory NO synthasy, inhibitory Akt/PTB, inhibitory IGF-1R, inhibitory PKC a inhibitory kinasy PI3. Sloučeniny podle tohoto vynálezu a přídavné farmaceutické prostředky působí buď aditivně nebo synergicky. Proto podávání takové kombinace látek, která inhibuje angiogenesi, vaskulární permeabilitu a/nebo inhibuje tvorbu otoku, může zajistit větší ulehčení nepříznivých účinků hyperproliferačních poruch, angiogenese, vaskulární hyperpermeability či otoku než podávání kterékoliv látky samotné. Při léčení maligních poruch lze předpokládat kombinaci s antiproliferační či cytotoxickou chemoterapií·
Tento vynález též zahrnuje použití sloučeniny obecného vzorce I jako léku.
Další aspekt tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli při výrobě léku pro léčení vaskulární hyperpermeability, poruch závislých na angiogenesi, proliferačních chorob a/nebo poruch imunitního systému u savců, zejména u lidí.
Tento vynález též poskytuje způsob léčení vaskulární hyperpermeability, nepřiměřené neovaskularizace, proliferačních chorob a/nebo poruch imunitního systému zahrnující podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I savci, zejména člověku, který toto léčení potřebuje90
Schopnost sloučenin in vitro při inhibici těchto proteinových kinas lze stanovit způsoby, které se podrobně popisují níže.
Schopnost sloučenin lze stanovit mírou inhibice fosforylace exogenního substrátu, například syntetického peptidu (Z. Songyang a kol., Nátuře, 373, 536-539) zkoušenou látkou ve srovnání s kontrolou.
Tvorba tyrosin kinasy KDR s použitím bakulovirového systému
Kódovací sekvence pro lidskou intracelulární doménu KDR (aa789-1354) se generuje prostřednictvím PCR s použitím cDNA izolované z buněk HUVEC. Sekvence poly-His6 se uvádí též na konci N tohoto proteinu. Tento fragment se klonuje do transfekčního vektoru pVL1393 na místech Xba 1 a Not. Rekombinantní bakulovirus (BV) se tvoří současnou transfekcí s použitím prostředku BaculoGold Transfection (PharMingen). Rekombinantní BV se podrobí plakové purifikaci a ověří Westernovou analýzou. Pro tvorbu proteinu se buňky SF-9 pěstují v mediu SF-900-II při koncentraci 2 x 106/ml a infikují při 0,5 jednotek tvořících plak na buňku (MOI). Buňky se sbírají 48 h po infekci.
Purifikace KDR
Buňky SF-9 exprimující (His)eKDR(aa789-1354) se lýzují přídavkem 50 ml pufru pro lýzu Triton X-100 (koncentrace 20 mM Tris, pH 8,0, 137 mM chloridu sodného, 10 % glycerolu, 1 % Tritonu X-100, 1 mM PMSF, 10 Mg/ml aprotininu, 1 μg/ml leupeptinu) k peletě buněk z 1 litru buněčné kultury. Lyzát se centrifuguje při frekvenci otáčení 19000 min-1 v rotoru
Sorval SS-34 po dobu 30 min při teplotě 4 °C. Tento buněčný lyzát se aplikuje na chelační sefarosovou kolonu s NiCla 5 ml, ekvilibruje se s 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,3 M chloridu sodného. KDR se eluuje s použitím téhož pufru o koncentraci 0,25 M imidazolu. Frakce ze sloupce se analyzují způsoby SDS-PAGE a ELISA (níže) pro měření kinasové aktivity. Purifikovaná KDR se převede do 25 mM HEPES, pH 7,5, 25 mM chloridu sodného, 5 mM pufru DTT a ukládá při -80 °C.
Příprava a purifikace lidské kinasy Tie-2
Kódovací sekvence pro lidskou intracelulární doménu Tie-2 (aa775-1124) se vytváří prostřednictvím PCR s použitím cDNA izolované z lidské placenty jako templátu. Sekvence Poly-Hise se uvede na konec N a tento fragment se klonuje do transfekčního vektoru pVL 1939 v místech Xba 1 a Not 1. Rekombinantní BV se vytváří současným přenesením s použitím prostředku BakuloGold (PharMingen). Rekombinantní BV se podrobí plakové purifikaci a ověří Westernovou analýzou. Pro tvorbu proteinu se ponechají hmyzí buňky SF-9 růst v mediu SF-900-II při koncentraci 2 x 106/ml a infikují při MOI 0,5. Purifikace kinasy značené His použité při screeningu jsou analogické způsobům popsaným pro KDR.
Příprava a purifikace lidské tyrosin kinasy Flt-1
Použije se vektor bakulovirové exprese pVL1393 (Phar Mingen, Los Angeles, CA). Nukleotidová sekvence kódující poly-His6 se umístí do nukleotidové oblasti 5' kódující celou intracelulární kinasovou doménu lidské Flt-1 (aminokyseliny 786-1338). Nukleotidová sekvence kódující tuto kinasovou doménu se tvoří prostřednictvím PCR s použitím knihoven cDNA izolovaných z buněk HUVEC. Histidinové zbytky umožňují • » • · · afinitní purifikaci proteinu jako způsob analogický způsobům pro KDR a ZAP70. Hmyzí buňky SF-9 se infikují při multiplicitě 0,5 a sbírají 48 h po infekci.
Zdroj tyrosinové kinasy EGFR
EGFR pochází od Sigma (Cat # E-3641, 500 jednotek/50 μΐ) a ligand EGF pochází od Oncogene Research Products/Calbiochem (Cat # PF011-100).
Exprese ZAP70
Použitý vektor bakulovirové exprese je pVL1393 (Pharmingen, Los Angeles, Ca.). Aminokyseliny kódující nukleotidovou sekvenci M(H)6LVPR9S se umístí do místa 5' do oblasti kódující celek ZAP70 (aminokyseliny 1 až 619). Nukleotidová sekvence kódující kódovací oblast ZAP70 se vytváří prostřednictvím PCR s použitím knihoven cDNA izolovaných z Jurkatových immortalizovaných T-buněk. Histidinové zbytky umožňují afinitní purifikaci proteinu (viz níže). Můstek LVPR9S tvoří rozpoznávací sekvenci pro proteolytické štěpení thrombinem umožňující odstranění afinitní značky z enzymu. Hmyzí buňky SF-9 se infikují při multiplicitě infekce 0,5 a sbírají 48 h po infekci.
Extrakce a purifikace ZAP70
Buňky SF-9 se lýzují v pufru o koncentracích 20 mM Tris, pH 8,0, 137 mM chloridu sodného, 10 % glycerolu, 1 % Tritonu X—100, 1 mM PMFS, 1 Mg/ml leupeptinu, 1% Mg/ml aprotininu a 1 mM orthovanadičnanu sodného. Rozpustný lyzát se aplikuje na chelační sefarosovou kolonu HiTrap (Pharmacia) ekvilibrovanou v 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,3 M chloridu sodné···· ·· · · · · · · q 2 · — · · · · ·· ho. Fúsní protein se eluuje 250 mM imidazolem. Enzym se ukládá v pufru o koncentracích 50 mM HEPES, pH 7,5, 50 mM chloridu sodného a 5 mM DTT.
Zdroj proteinové kinasy
Lek, Fyn, Src, Blk, CSk a Lyn a jejich omezené formy lze komerčně obdržet (například od Upstate Biotechnology lne., Saranac Lake, N.Y. a Santa Cruz Biotechnology lne., Santa Cruz, Ca.) nebo se čistí ze známých přirozených a rekombinantních zdrojů s použitím konvenčních způsobů.
Stanovení PTK způsobem ELISA
Způsoby ELISA se používají pro detekci a měření přítomnosti tyrosin kinasové aktivity. Rozbor ELISA se provádí podle známých způsobů popsaných například ve Voliér a kol., 1980, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, v: Manual of Clinical Immunology, 2. vydání, redakce Rose a Friedman, s. 359-371, Am. Soc. of Microbiology, Washington, D.C.
Tento uveřejněný způsob se přizpůsobuje pro stanovení aktivity vzhledem ke konkrétní PTK. Například preferované způsoby pro provedení experimentů ELISA se poskytují výše. Přizpůsobení těchto způsobů pro stanovení aktivity sloučeniny pro jiné členy skupiny PTK stejně tak jako pro nereceptorové tyrosin kinasy jsou v rámci možností daných v oboru. Pro účely stanovení selektivity inhibitoru se používá universální substrát PTK [například náhodný kopolymer póly(Glu^Tyr), mol. hm. 20000-50000] spolu s ATP (obvykle 5 mM) při koncentracích zhruba o dvojnásobku zdánlivé Km v rozboru.
Pro stanovení inhibičního účinku sloučenin podle tohoto vynálezu na KDR, Flt-1, Tie-2, EGFR, FGFR, PDGFR, IGF-l-R, c-Met, Lek, Blk, Csk, Src, Lyn, Fyn a ZAP70 tyrosin kinasovou aktivitu se použijí následující způsoby.
Pufry a roztoky
PGTPoly (Glu, Tyr) 4:1 Prášek se ukládá při -20 °C. Rozpouští se ve fyziologickém roztoku pufrovaném fosfátem (PBS) se získáním roztoku 50 mg/ml. Alikvoty 1 ml se ukládají při -20 °C. Při přípravě desek se ředí na 250 μg/ml Gibco PBS.
Reakční pufr: 100 mM Hepes, 20 mM chloridu hořečnatého, 4 mM chloridu manganatého, 5 mM DTT, 0,02 % BSA, 200 μΜ vanadičnanu sodného, pH 7,10.
ATP: alikvoty 100 mM se ukládají při -20 °C. Ředí se na 20 μΜ vodou.
Promývací pufr: PBS s 0,1 % Tween 20.
Pufr pro zředění protilátek: 0,1% bovinní serumalbumin (BSA) v PBS.
Substrát TMB: roztoky substrátu TMB a Peroxidu 9:1 se smísí bezprostředně před použitím, nebo se použije substrát K-Blue od Neogen.
Přerušovací roztok: 1M roztok kyseliny fosforečné.
Způsob provedení
1. Příprava desek
Stok PGT (50 mg/ml, zmražený) v PBS se zředí na 250 μg/ml. Přidá se 125 μΐ na jamku Corningových modifikovaných vysokoafinitních misek ELISA (Corning #25805-96). Do jamek pro blank se přidá 125 μΐ PBS. Misky se uzavřou páskou a in kubují přes noc po dobu 37 °C. Promyjí se lx promývacím pufrem a suší po dobu 2 h při teplotě 37 °C v suchém inkubátoru. Potažené misky se ukládají v zataveném sáčku při teplotě 4 °C do použití.
2. Tyrosin kinasová reakce
- Inhibiční roztoky se připraví v koncentraci 4x v 20% roztoku dimethylsulfoxidu ve vodě.
- Připraví se reakční pufr.
- Připraví se roztok enzymu tak, že žádané jednotky činí 50 μΐ, například pro KDR 1 ng/μΐ pro celkové množství 50 ng/jamku v reakcích. Uloží se na ledu.
- Připraví se 4x roztok ATP 20 μΜ z 100 μΜ stoku ve vodě. Ukládá se na ledu.
- Přidá se 50 μΐ roztoku enzymu na jamku (obvykle 5 až 50 ng enzymu na jamku v závislosti na specifické aktivitě kinasy).
- Přidá se 25 μΐ inhibitoru 4x.
- Přidá se 25 μΐ ATP 4x pro analýzu inhibitoru.
- Inkubuje se po dobu 10 min při teplotě místnosti.
- Reakce se zastaví přídavkem 50 μΐ 0,05 N roztoku kyseliny chlorovodíkové na jamku.
- Misky se promyjí.
**Konečné koncentrace pro reakci: 5 μΜ ATP, 5% dimethylsulfoxid
3. Vazba protilátky
- Alikvot protilátky PY20-HRP (Pierce) 1 mg/ml (fosfotyrosinová protilátka) se zředí na 50 ng/ml v 0,1% roztoku bovinního serumalbuminu v PBS ve 2 krocích (100X a poté 200x).
- Přidá se 100 μΐ Ab na jamku. Inkubuje se po dobu 1 h při teplotě místnosti. Inkubuje se po dobu 1 h při teplotě 4 °C.
- Miska se 4x promyje.
4. Barevná reakce
- Připraví se substrát TMB a přidá se 100 μΐ na jamku.
- Monitoruje se optická hustota při 650 nm do dosažení 0,6.
- Reakce se zastaví 1M roztokem kyseliny fosforečné. Třepe se na zařízení pro hodnocení misek.
- Optická hustota se ihned odečítá při 450 nm.
Optimální doby inkubace a podmínky enzymatické reakce se mírně mění pro jednotlivé enzymatické preparáty a stanoví se pro každý případ empiricky.
Pro Lek je reakční pufr 100 mM MOPSO, pH 6,5, 4 mM chloridu manganatého, 20 mM chloridu hořečnatého, 5 mM DTT, 0,2 % bovinního serumalbuminu, 200 mM vanadičnanu sodného za analogických podmínek rozboru.
Sloučeniny obecného vzorce I mají terapeutickou použitelnost při léčení chorob zahrnujících i ty, které se zde nepopisují, a dosud neidentifikované protein tyrosin kinasy, které se inhibuji sloučeninami obecného vzorce I. Veškeré sloučeniny popisované zde jako příklady významně inhibuji FGFR, PDGFR, KDR, Tie-2, Lek, Fyn, Blk, Lyn nebo Src při koncentracích 50 μΜ nebo nižších. Některé sloučeniny podle tohoto vynálezu též významně inhibuji další tyrosin nebo serin/threonin kinasy, jako je cdc2 (cdkl) při koncentracích 50 μΜ nebo nižších.
Zdroj Cdc2
Lidský rekombinantní enzym a pufr pro rozbor lze obdržet komerčně (New England Biolabs, Beverly, MA, USA) nebo čištěním ze známých přirozených či rekombinantních zdrojů s použitím konvenčních způsobů.
Zdroj Cdc2
Používá se návod dodávaný se zakoupenými činidly s malými modifikacemi. Ve stručnosti se reakce provede v pufru o koncentracích 50 mM Tris pH 7,5, 100 mM chloridu sodného, 1 mM EGTA, 2 mM DTT, 0,01 % Brij, 5 % dimethylsulfoxidu a 10 mM chloridu hořečnatého (komerční pufr) s přídavkem čerstvého 300 μΜ ATP (31 μθϊ/ιπ1) a 30 μg/ml histonu typu IIIss. Reakce objemu 80 μΐ obsahujícího jednotky enzymu se provede v průběhu 20 min při teplotě 25 °C za přítomnosti či bez přítomnosti inhibitoru. Reakce se ukončí přídavkem 100 μΐ 10% kyseliny octové. Substrát se oddělí od neinkorporované značky nanesením směsi na fosfocelulosový papír s následujícím promytím 3x po dobu 5 min 75 mM roztokem kyseliny fosforečné. Četnost impulsů se měří čítačem beta za přítomnosti kapalného scintilátoru.
Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu významně inhibují cdc2 při koncentracích nižších než 50 μΜ.
Zdroj kinasy PKC
Katalytickou jednotku PKC lze obdržet komerčně (Calbiochem).
Stanovení kinasy PKC • · · · · · «· ···· ·· ·— «QQ · · · ··· “K u · · · · · ·
Radioaktivní kinasová analýza se provede podle publikovaného způsobu [I. Yasuda, A. Kirshimoto, S. Tanaka., M. Tominaga, A. Sakurai, Y. Nishizuka, Biochemical and Biophysical Research Communication, 3_, 166, 1220-1227 (1990)]. Ve stručnosti se veškeré reakce provedou v kinasovém pufru o koncentracích 50 mM Tris HC1 pH 7,5, 10 mM chloridu horečnatého, 2 mM DTT, 1 mM EGTA, 100 μΜ ATP, 8 μΜ peptidu, 5 % dimethylsulfoxidu a 33P ATP (8 Ci/mM)· Sloučenina a enzym se smísí v reakční nádobě a reakce se zahájí přídavkem směsi ATP a substrátu. Po ukončení reakce přídavkem 10 μΐ se přidá přerušovací pufr (5 mM ATP v 75 mM roztoku kyseliny fosforečné) a část směsi se nanese na fosfocelulosové filtry. Skvrny vzorků se promyjí 3x 75 mM roztokem kyseliny fosforečné při teplotě místnosti v průběhu 5 až 15 min. Inkorporace radioaktivní značky se vyjádří kvantitativně měřením s použitím kapalného scintilátoru.
Zdroj enzymu Erk2
Rekombinantní myší enzym a pufr pro rozbor lze obdržet komerčně (New England Biolabs, Beverly MA, USA) nebo získat čištěním ze známých či rekombinantních zdrojů s použitím konvenčních způsobů.
Stanovení enzymu Erk2
Ve stručnosti se reakce provede v pufru o koncentracích 50 mM Tris pH 7,5, 1 mM EGTA, 2 mM DTT, 0,01 % Brij, 5 % dimethylsulfoxidu a 10 mM chloridu hořečnatého (komerční pufr) s přídavkem čerstvého 100 μΜ roztoku ATP (31 μΟί/πιΙ) a 30 μΜ myelinového bázického proteinu za podmínek doporučených dodavatelem. Reakční objemy a způsob rozboru inkorporo• · · · · ·
- Í99·*• · váné aktivity se popisuje pro rozbor PKC (viz výše).
Modely in vitro pro aktivaci T-buněk
Při aktivaci mitogenu či antigenu se v T-buňkách indukuje sekrece IL-2, růstového faktoru, který podporuje jejich následnou proliferační fázi. Proto lze měřit buď tvorbu IL-2 nebo buněčnou proliferaci primárních T-buněk nebo příslušných linií T-buněk pro posouzení aktivace T-buněk. Oba tyto rozbory se dostatečně popisují v literatuře a jejich parametry jsou dobře dokumentované (v Current Protocols in Immunology, 2, 7.10.1-7.11.2).
Ve stručnosti lze T-buňky aktivovat společným pěstováním s alogenními stimulátorovými buňkami - způsob nazývaný jednocestná směsná lymfocytová reakce. Responderové a stimulátorové mononukleární buňky periferní krve se purifikují gradientem Ficoll-Hypaque (Pharmacia) podle návodů výrobce. Stimulátorové buňky se mitoticky inaktivují zpracováním mitomycinem C (Sigma) nebo zářením gama. Respondorové a stimulátorové buňky se společně pěstují při poměru dva ku jedné za přítomnosti a v nepřítomnosti zkoušené látky. Obvykle se smísí 105 responderů s 5 x 104 stimulátorů a nanese na medium (200 μΐ objemu) v mikrotitrační misce se dnem U (Costar Scientific). Buňky se pěstují v RPMI 1640 obohaceném buď tepelně inaktivovaným fetálním bovinním šerem (Hyclone Laboratories) nebo spojeným lidským AB šerem od mužských dárců, 5 x 10~5 M merkaptoethanolu a 0.5 % dimethylsulfoxidu. Ke kulturám se dodá 0,5 μθί 3H thymidinu (Amersham) jeden den před sběrem (obvykle den tři). Kultury se sbírají (Betaplate harvester, Wallac) a vychytávání isotopu se vyhodnotí pomocí kapalného scintilátoru (Betaplate, Wallac).
7.1.QQ. - ..
Stejný systém kultur lze použít pro vyhodnocení aktivace T-buněk měřením tvorby IL-2. Osmnáct až dvacetčtyři h po zahájení pěstování se supernatanty odstraní a koncentrace IL-2 se měří způsobem ELISA (systémy R a D) podle návodů výrobce.
Modely aktivace T-buněk in vivo
Účinnost sloučenin in vivo lze testovat na zvířecích modelech, o kterých je známo, že přímo měří aktivaci T-buněk, nebo ve kterých T-buňky působí jako efektory. T-buňky lze aktivovat in vivo ligací konstantního podílu receptoru T-buněk s monoklonální protilátkou proti CD3 (Ab). V tomto modelu dostávají myši BALB/c 10 pg protilátky proti CD3 Ab intraperitoneálně 2 h před exsankvinací. Zvířata dostávají testovanou látku a jsou předem léčena jednotlivou dávkou sloučeniny 1 h před podáním protilátky proti CD3 Ab. Hladiny proinflamačních cytokinů interferonu gama (IFN-gama) a faktoru nekrosy tumoru a (TNF-α), indikátorů aktivace T-buněk v krevním seru, se měří způsobem ELISA. Podobný model používá zpracování T-buněk specifickým antigenem, jako je keyhole limpet hemocyenin (KLH) s následným působením in vitro téhož antigenu na buňky lymfatických uzlin. Stejně jako výše se použije měření tvorby cytokinů pro hodnocení stavu aktivace pěstovaných buněk. Ve stručnosti se myši C57BL/6 imunizují subkutánně 100 μg KLH emulgované v úplném Freundově adjuvantu (CFA) v den nula. Zvířata se předem ošetří sloučeninou jeden d před imunizací a poté v den jedna, dva a tři po imunizaci. Lymfatické uzliny se odeberou v den 4 a jejich buňky se pěstují při 6 x 106 na ml v mediu pro tkáňovou kulturu [RPMI 1640 s přídavkem tepelně aktivovaného fetálního bovinního sera (Hyclone Laboratories), 5 x 10~5 M 2-merkaptoethanolu a 0,5 % dimethylsulfo-
• · ···· · · • · · · · · • · · · · xidu] v průběhu 24 a 48 h. Supernatanty kultur se poté vyhodnotí pro stanovení hladin T-buněčného růstového faktoru Interleukinu-2 (IL-2) a/nebo IFN-gama způsobem ELISA.
Sloučeniny lze též testovat na zvířecích modelech humánních chorob. Příkladem jsou experimentální encefalomyelitida (EAE) a arthritida indukovaná kolagenem (CIA). Modely EAE s mimickými aspekty lidské roztroušené sklerosy se popisují u potkanů i myší [přehled v FASEB J. , 5, 2560-2566 (1991), myší model: Lab. Invest., 4(3), 278, 1981, model na hlodavcích J. Immunol., 146(4), 1163-1168 (1991)]. Ve stručnosti se myši či potkani imunizují emulsí myelinového bázického proteinu (MBP) nebo jeho neurogenních peptidových derivátů a CFA. Akutní onemocnění lze vyvolat přídavkem bakteriálních toxinů, jako je Bordetella pertusis. Choroba ve stavu relapsu či remise se indukuje adoptivním přenosem T-buněk z živočichů imunizovaných MBP/peptidem.
CIA lze indukovat u myší DBA/1 imunizací kolagenem typu II [J. Immunol., 142(7), 2237-2243]. U myší se vyvíjejí známky arthritidy již 10 d po působení antigenu a mohou se hodnotit až po dobu 90 d po imunizaci. U modelů EAE i CIA lze sloučeninu podávat buď preventivně nebo v době nástupu nemoci. Účinné léky by měly snížit závažnost a/nebo výskyt.
Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu inhibující jeden či více angiogenních receptorových PTK a/nebo proteinovou kinasu, jako je lek účastnící se zprostředkování zánětlivých odpovědí, mohou snižovat závažnost a výskyt arthritidy u těchto modelů.
Sloučeniny lze též testovat na modelech myších aloimplantátů, buď kůže [přehled v Ann. Rev. Immunol., 10,
333-358 (1992), Transplantation, 57(12), 1701-17D6 (1994)] nebo srdce [Am. J. Anat., 113, 273 (1963)]. Ve stručnosti se kožní implantáty plné tloušťky transplantují z myši C57BL/6 na myš BALB/c. Tyto implantáty lze vyšetřovat denně počínaje v den 6 ohledně známky odmítnutí. U myšího nonatálního modelu transplantace srdce se transplantují neonatální srdce ektopicky z myši C57BL/6 do ušního boltce dospělé myši CBA/J. Srdce začínají bít v den 4 až 7 po implantaci a odmítnutí lze hodnotit vizuálně s použitím pitevního mikroskopu pro pozorování vymizení srdeční činnosti.
Stanovení buněčné receptorové PTK
Následující stanovení v buňkách se používá pro určení hladiny aktivity a účinků různých sloučenin podle tohoto vynálezu na KDR/VEGFR2. Podobné zkoušky receptorové PTK využívající specifický ligandový podnět lze provádět ve stejných řadách pro další tyrosinové kinasy s použitím způsobů dobře známých v oboru.
Fosforylace KDR indukovaná VEGF v lidských buňkách endothelu umbilikální vény (HUVEC) měřená Westernovým blotováním
1. Buňky HUVEC (spojené od dárců) se obdrží od Clonetics (San Diego, CA) a pěstují podle návodů výrobce. V tomto rozboru se používají pouze časné pasáže (3 až 8). Buňky se pěstují na miskách 100 mm (Falcon pro tkáňové kultury, Becton Dickinson, Plymouth, Anglie) s použitím úplného media EBM (Clonetics).
2. Pro vyhodnocení inhibiční aktivity sloučeniny se buňky trypsinují a nanášejí při 0,5 až 1,0 x 105 buněk/jamka do každé jamky 6-jamkových klusterových misek ·· · · ·· ·· ···· ··
- 5.03’ -: : .· : : · • ·«··· ··· (Costar, Cambridge, MA) .
3. 3 až 4 d po nanesení dochází ke splynutí 90 až 100 %. Medium se z jamek odstraní, buňky se promyjí 5 až 10 ml PBS a inkubují po dobu 18 až 24 h s 5 ml media báze EBM bez přidání doplňků (to jest za podmínek hladovění po seru).
4. Přidají se sérová zředění inhibitorů v 1 ml media EBM (konečné koncentrace 25 μΜ, 5 μΜ nebo 1 μΜ) k buňkám a buňky se inkubují po dobu 1 h při teplotě 37 °C. Přidá se lidský rekombinantní VEGFi65 (R & D Systems) ke všem jamkám ve 2 ml media EBM při konečné koncentraci 50 ng/ml a provede se inkubace při teplotě 37 °C po dobu 10 min. Použijí se kontrolní buňky nezpracované nebo zpracované pouze VEGF pro získání fosforylace pozadí a indukce fosforylace VEGF.
Veškeré jamky se poté promyjí 5 až 10 ml chladného PBS obsahujícího koncentraci 1 mM orthovanadičnanu sodného (Sigma) a buňky se lýzují a přenesou do 200 μΐ pufru RIPA (50 mM Tris HC1) pH 7, o koncentracích 150 mM chloridu sodného, 1 % NP-40, 0,25 % deoxycholatu sodného a 1 mM EDTA obsahujícího inhibitory proteasy (koncentrace PMSF 1 mM, aprotininu 1 μg/ml, pepstatinu 1 μg/ml, leupeptinu 1 μg/ml, orthovanadičnanu sodného 1 mM, fluoridu sodného 1 mM) a 1 μg/ml Dnasy (veškeré chemikálie od Sigma Chemical Company, St. Louis, MO). Lysát se centrifuguje při frekvenci otáčení 14000 min-1 po dobu 30 min pro odstranění jader.
Stejná množství proteinů se poté sráží přídavkem chladného (-20 °C) ethanolu (2 objemy) nejméně po dobu lha maximálně přes noc. Pelety se rekonstituují v Laemliho pufru vzorku obsahujícího 5 % merkaptoethanolu (BioRad, Hercules, CA) a vaří po dobu 5 min. Proteiny se rozlišují póly akrylamidovou gelovou elektroforesou (6% 1,5 mm Novex, San Diego, CA) a přenášejí na nitrocelulosovou membránu s použitím systému Novex. Po blokování bovinním serumalbuminem (3%) se proteiny ponechají přes noc s polyklonální protilátkou proti KDR (C20, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) nebo s monoklonální protilátkou proti fosfotyrosinu (4G10, Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY) při 4 °C. Po promytí a inkubaci po dobu 1 h s F(ab)z inkubovanou s HRP kozího protikráličího nebo kozího protimyšího imunoglobulinu se pásy visualizují s použitím emisního chemiluminiscenčního (ECL) systému (Amersham Life Sciences, Arlington Height, IL). Určité vzorky podle tohoto vynálezu významně inhibují buněčnou fosforylaci tyrosinové kinasy KDR indukovanou VEGF při koncentracích nižších než 50 μΜ.
Model edemu uteru in vivo
Toto stanovení měří schopnost sloučenin inhibovat akutní vzrůst hmotnosti uteru u myší, který nastává během několika prvních hodin po stimulaci estrogenem. Tento časný nástup zvýšení hmotnosti dělohy je daný edemem způsobeným zvýšenou permeabilitou cév dělohy. Cullinan-Bove a Koss [Endocrinology, 133, 829-837 (1993)] prokázali těsný časový vztah edemu dělohy stimulovaného estrogenem se zvýšenou expresí VEGF mRNA v uteru. Tyto výsledky byly ověřeny použitím neutralizační monoklonální protilátky pro VEGF, která významně snížila akutní vzrůst hmotnosti uteru po stimulaci estrogenem (WO 97/42187). Proto může tento systém sloužit jako model pro inhibici signalizace VEGF in vivo a přidružené hyperpermeability a edemu.
Materiály • — · ί η« — · · · · ·· • -1- ''Λ'-' · > ♦ > *
Veškeré hormony pocházejí od Sigma (St. Louis, MO) nebo Cal Biochem (La Jolla, CA) jako lyofilizované prášky a připravují se podle instrukcí dodavatele.
Komponenty vehikula (dimethylsulfoxid, Cremaphor EL) pocházejí od Sigma (St. Louis, MO).
Myši (Balb/c, stáří 8 až 12 týdnů) pocházejí od Taconic (Germantown, NY) a udržují se ve zvěřinci prostém patogenů v souladu s institucionálními vodítky Výboru pro péči o zvířata a použití zvířat.
Způsob provedení
Den 1: Myši Balb/c dostávají intraperitoneální injekci 12,5 jednotek sérového gonadotropinu gravidních samic (PMSG).
Den 3: Myši dostávají 15 jednotek lidského chorionového gonadotropinu (hCG) intraperitoneálně.
Den 4: Myši se randomizují a dělí do skupin po 5 až zvířatech. Zkoušené látky se podávají intraperitoneálně, intravenosně nebo perorálně, v závislosti na rozpustnosti a vehikulu, v dávkách od 1 do 100 mg/kg. Kontrolní skupina vehikula dostává pouze vehikulum a dvě skupiny se ponechávají neošetřené.
O 30 min později dostávají experimentální skupiny, skupiny s vehikulem a 1 neléčená skupina intraperitoneálně injekci 17-estradiolu (500 μg/kg). Po 2 až 3 h se zvířata utratí inhalací oxidu uhličitého. Po incisi podél středové čáry se oddělí každý uterus a odstraní vyříznutím pod krčkem • · · · · · «· v···4« • * · · ♦ · *· V • « « ♦ W ♦» • «4»·* n «* ··♦··» 4· «·«
- 106 a při spojích uteru a vejcovodů. Tuková a pojivová tkáň se pečlivě odstraní bez porušení integrity uteru před vážením (vážení za vlhka). Z dělohy se odstraňuje kapalina stlačením mezi dvěma listy filtračního papíru se zatížením jednolitrovou sklenicí naplněnou vodou. Utery se poté zváží (blotovaná hmotnost). Rozdíl mezi vlhkou a blotovanou hmotností se bere jako obsah tekutiny uteru. Střední obsah tekutiny ošetřovaných skupin se srovnává s neošetřovanou skupinou nebo skupinou ošetřenou vehikulem. Významnost se určuje Studentovým testem. Nestimulovaná kontrolní skupina se používá pro monitorování estradiolové odpovědi.
Výsledky prokazují, že určité sloučeniny podle tohoto vynálezu inhibují vytvoření edemu při systémovém podání různými cestami.
Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu, které jsou inhibitory angiogenních receptorových tyrosinových kinas, jsou též aktivní v Matrigelově implantačním modelu neovaskularizace. Matrigelův neovaskularizační model zahrnuje vytvoření nových cév s čistým mramorováním'’ extracelulární matrice implantované subkutánně, které se indukuje přítomností proangiogenního faktoru tvořícího tumorové buňky [viz například A. Passaniti a kol., Lab. Investig., 67(4)r 519-528 (1992), Anat. Rec., 249(1), 63-73 (1997), Int. J. Cancer, 63(5), 694-701 (1995), Vasc. Biol., 15(11), 1856-1857 (1995)]. Tento model se přednostně provádí v průběhu 3 až 4 d a na jeho konci se provede makroskopické visuální/obrazové hodnocení neovaskularizace, stanovení hustoty mikrocév mikroskopickou metodou a vyhodnocení hemoglobinu (Drabkinovou metodou) po odstranění implantátu ve srovnání s kontrolami od zvířat neošetřených inhibitory. Tento model může alternativně používat bFGF nebo HGF jako stimulační látku.
·· • ·
- 107 Určité sloučeniny podle tohoto vynálezu, které inhibují jednu či více onkogenních protonkogenních nebo proliferačně-dependentních protein kinas nebo angiogenní receptorovou PTK, též inhibují růst primárních myších, krysích či lidských tumorových xenoimplantátů u myši nebo inhibují metastasy u myších modelů.
Příklady použití vynálezu
Dále se popisují způsoby přípravy sloučenin obecného vzorce I. Tyto způsoby tvoří další aspekt tohoto vynálezu. Tyto způsoby se přednostně provádějí při atmosférickém tlaku.
Sloučeniny obecného vzorce I lze připravit kondensací sloučeniny obecného vzorce II
ve kterém (II) • 4 · ·· ·
R , R , R3, L a kruh A se definují stejně jako výše, s formamidem při teplotě v rozmezí 50 až 250 °C, případně za přítomnosti katalyzátoru, například 4-dimethylaminopyridinu.
Sloučeniny obecného vzorce I lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce III
(III) ve kterém
R^ je atom bromu nebo atom jodu, s jednou z následujících sloučenin: R3B(OH3)3, R3Sn(CH3)3 nebo se sloučeninou obecného vzorce IV • · • · · ·
nebo
(IV) ve kterém se definuje stejně jako výše, za přítomnosti katalyzátoru, například palladiových sloučenin, jako je Pd(PPh3)4·
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R^ představuje alkylovou skupinu nebo aralkylovou skupinu, lze připravit alkylací sloučeniny obecného vzorce V
(V) ve kterém
R2 a R3 se definují stejně jako výše, se sloučeninou obecného vzorce R^X', kde R^ představuje alkylovou skupinu nebo aralkylovou skupinu a X’ představuje odstupující skupinu, například atom halogenu, mesyloxyskupinu nebo tosyloxyskupinu.
Sloučenina obecného vzorce I, ve které R představuje případně substituovaný cyklický ether, jako je tetrahydrofurylová skupina nebo tetrahydropyranylová skupina, se může připravit alkylací sloučeniny obecného vzorce VI • · · · • · · · • ·
(VI) ve kterém
R2 a R3 se definují stejně jako výše, se sloučeninou obecného vzorce R X', ve kterém X’ se definu1 9 je stejně jako výše a R^ je případně substituovaný cyklický ether.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R představuje cyklický ether, jako je tetrahydrofurylová skupina nebo tetrahydropyranylová skupina, případně substituovaná formylovou skupinou, se mohou připravit alkylací sloučeniny obecného vzorce VI se sloučeninou R^X, ve které R^ představuje cyklický ether substituovaný formylovou skupinou, která se chrání způsobem známým tomu, kdo má zkušenost v oboru, například pomocí acetalu [viz například Tet. Letts., 30(46), 6259-6262 (1989)] s následným odstraněním chránící skupiny. Sloučeniny, ve kterých R představuje cyklický ether, jako
- ιι£.-·..: ’ :
jsou tetrahydrofurylová skupina nebo tetrahydropyranylová skupina substituované methylovou skupinou, která je případně substituovaná aminoskupinou, lze připravit redukční aminací sloučeniny, ve které R^ představuje cyklický ether substituovaný formylovou skupinou.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R představuje případně substituovanou furylovou skupinu, thienylovou skupinu nebo pyrrolylovou skupinu, lze připravit reakcí 4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu s příslušnou heteroarylboronovou kyselinou za přítomnosti měďnaté soli jako katalyzátoru, například octanu měďnatého, za přítomnosti rozpouštědla pro reakční složky, například halogenového rozpouštědla, například dichlormethanu, za přítomnosti vysoušecího prostředku, například molekulárních sít 0,4 nm, za přítomnosti organické báze, například triethylaminu nebo pyridinu při teplotě v rozmezí 0 až 50 °C, přednostně při teplotě okolí [ohledně podmínek viz Tet. Letts., 39, 2942-2944 (1998) a odkazy, které se zde popisují]. Tato práce se zde zahrnuje formou odkazu. Tyto sloučeniny lze připravovat způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru, s obdržením sloučenin, ve kterých R představuje furylovou skupinu, thienylovou skupinu nebo pyrrolylovou skupinu substituovanou formylovou skupinou. Formylová skupina může být v těchto sloučeninách aminovaná způsoby známými těm, kteří mají zkušenost v oboru, s obdržením sloučenin, ve kterých Rx představuje furylovou skupinu, thienylovou skupinu nebo pyrrolylovou skupinu substituovanou aminomethylovými skupinami. Alternativně lze meziprodukty, ve kterých Rx představuje furylovou skupinu, thienylovou skupinu nebo pyrrolylovou skupinu, podrobit Mannichově reakci s obdržením meziproduktů, ve kterých R představuje furylovou skupinu, thienylovou skupinu nebo pyrrolylovou skupinu substituovanou některou
aminomethylovou skupinou.
Sloučeniny obecného vzorce I lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce VII
(VII) ve kterém
R , R2, R3, L a kruh A jsou podle definice popsané výše a R v popisuje odstupující skupinu, například atom halogenu nebo fenoxyskupinu, s amoniakem nebo amonnou solí, například s octanem amonným při teplotě v rozmezí 15 až 250 °C, přednostně v tlakové nádobě.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých představuje atom chloru, atom bromu nebo atom jodu, lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce VIII • · · ·
(VIII) ve kterém
R , R3, L a kruh A se definují stejně jako se popisuje výše, s halogenačním prostředkem, například jodačním prostředkem, například N-jodsukcinimidem nebo bromačním prostředkem, například N-bromsukcinimidem nebo chloračním prostředkem, například N-chlorsukcinimidem.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých -L-R3 představuje -NHC(O)R3, lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce IX
(ix) ve kterém
R , a kruh A se definují výše a
Y představuje chráněný amin, se sloučeninou obecného vzorce R^COR^, ve kterém Rx představuje odstupující skupinu, například atom chloru. Alternativně mohou sloučeniny IX, ve kterých Y představuje atom halogenu, například atom chloru, reagovat se sloučeninou obecného vzorce R^COR^ a produkt poté reaguje s amoniakem s obdržením sloučeniny obecného vzorce I. Analogické způsoby lze použít pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterých -L-R3 je NRSO_R3. Analogické způsoby lze použít pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých -L-R3 je -NRCO2-R3 nebo -NRCONR’. R a R' jsou podle definic popsaných výše.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých -L-R je -OSO -, lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce X • · · ♦ · · · · ···· ·· • · · · · ····
* ·
(X) ve kterém
R , a kruh A odpovídají definicím popsaným výše, se sloučeninou obecného vzorce R SO R .
2 X
Sloučeniny obecného vzorce I lze poté připravit z těchto meziproduktů podle schématu 2 nebo podle alternativy schématu 2, která se popisuje dále.
Sloučeniny obecného vzorce II lze připravit, jak ukazuje schéma 1, ve kterém IPA představuje propan-2-ol.
Schéma 1
R3-----(H2C)j
1) H2NRj,IPA neboCH 3CN
2) HCHPA
HC1
NHR,
1) NaOCH2CH3/CH3CH2OH
2) NCCH2CN/NaOCH2CH3, CH3CHjOH, 5CPC
118··-* ·· • ♦ ···· · · ···· • ♦ · · · · ♦ « · · ·
Ten, kdo má zkušenost v oboru, si uvědomí, že sloučeniny obecného vzorce I lze převést na jiné sloučeniny obecného vzorce I známými chemickými reakcemi. Například alkoxyskupinu lze štěpit s obdržením hydroxyskupiny, nitroskupinu lze redukovat na aminy, aminy lze acylovat nebo sulfonylovat a N-acylové sloučeniny lze hydrolyzovat na aminy. Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých -L- je S, lze oxidovat s obdržením sloučenin obecného vzorce I, ve kterých -L- představuje SO a S0_,, způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru.
Sloučeniny obecného vzorce III jsou komerčně dostupné, nebo je lze připravit způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru.
Sloučeniny obecného vzorce V, ve kterých Ra představuje atom vodíku, lze připravit tak, jak ukazuje schéma 2. Aminoskupina se může před konečným krokem chránit a poté odstranit chránící skupinu po konečném kroku schématu 2 způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru. Sloučeniny obecného vzorce V, ve kterých Ra je jiná skupina než atom vodíku, lze připravit analogickými způsoby [viz J. Med. Chem., 33, 1984 (1990)].
119’
Schéma 2
Alternativně lze nejprve před aminací připojit (kruh A)-L-R3. Alternativně může být před provedením kteréhokoliv z postupů přítomen substituent R , který se popisuje výše.
Sloučeniny obecného vzorce Vil, ve kterých Ry je -Cl, lze připravit, jak ukazuje schéma 3.
• · · « · · • · ·
- 120··*- ·♦
Schéma 3
Sloučeniny bez přítomnosti skupiny (kruh A)-L-R3 lze připravit podle schématu 4, jak se popisuje v J. Med. Chem., 31, 390 (1988) a v citacích v této práci. Sloučeniny, ve kterých skupina (kruh A)-L-R3 je jiná než atom vodíku, lze připravit analogickými způsoby.
• · 4 * • ♦ v · « · « · 4 « « ·
Schéma 4
NH3, ch3oh zvýšený tlak
Sloučeniny obecného vzorce VII lze připravit spojením 5-jodované sloučeniny způsobem analogickým způsobu popsanému pro přípravu sloučenin obecného vzorce V.
R lze modifikovat způsobem znázorněným ve schématech 5 a 6. Ve schématech 5 a 6 představuje P chránící skupinu.
·· ·«··
Schéma 5
122···*-
Na(OAc)3BH, HoAc
C1CH2CH2C1
O • · ···· ·· ···· ·· • · · · · · ·
Schéma 6
Na(OAc)3BH, HoAc αα^ατ,α
• · · · • · · · · • · · · • · · · · · • · · · · · • ·♦· 1*2 4 — · · ·
Ti, kteří mají zkušenost v oboru, si uvědomí, že v případech, ve kterých je substituent identický nebo podobný funkční skupině, která se modifikuje v jednom z výše popsaných způsobů, budou tyto substituenty vyžadovat ochranu před provedením procesu s následujícím odstraněním chránící skupiny po skončení procesu. Jinak by došlo ke konkurenčním vedlejším reakcím. Alternativně lze použít jiné výše popsané procesy, ve kterých substituent neinterferuje. Příklady vhodných chránících skupin a způsoby jejich zavedení a odstranění lze nalézt v příručce Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Green, John Wiley and Sons, 1981. Například vhodné chránící skupiny pro aminy jsou formylová skupina nebo acetylová skupina.
Následující příklady synthesy se provádějí s použitím obecných preparačních způsobů popsaných výše.
Příklad 1
Benzyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)karbamat
a) Tetrahydro-2H-4-pyranyltrifluormethansulfonat
Pyridin (1,7 ml, 20,97 mmol) se přidá k roztoku tetrahydro-2H-4-pyranolu (2 ml, 20,97 mmol) v dichlormethanu (16 ml). Baňka se ponoří do ledové vodní lázně a po kapkách se v průběhu 10 min přidává anhydrid kyseliny trifluormethansulfonové (3,6 ml, 20,97 mmol) v dichlormethanu (7 ml). Po 20 min se reakční směs zfiltruje a tuhá látka se promyje minimálním množstvím dichlormethanu. Spojený filtrát se promyje vodou, 1,0 N roztokem kyseliny chlorovodíkové a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se
1·2*5
vysuší síranem horečnatým a zfiltruje. Rozpouštědlo se odpaří s obdržením tetrahydro-2H-4-pyranyltrifluormethansulfonatu.
ΧΗ NMR (CDC13) 5 1,99 (m, 2H), 2,11 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 3,96 (m, 2H), 5,17 (m, 1H).
b) 4-Chlor-5-jod-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin
4-Chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (3,0 g, 10,73 mmol) se přidává po malých dílech k roztoku hydridu sodného (0,891 g, 22,2 mmol) v N,N-dimethylformamidu (40 ml) při teplotě 0 °C. Po skončení přidávání se ledová vodní lázeň odstraní a výsledná směs se míchá po dobu 30 min. Po kapkách se přidává tetrahydro-2H-4-pyranyltrifluormethansulfonat a reakční směs se míchá při teplotě okolí po dobu 24 h. Směs se vylije do ledové vody (100 ml) a tuhá fáze se získává filtrací a čistí překrystalováním s obdržením 4-chlor-5-jod-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu.
XH NMR (CDC13) 6 2,06 (m, 2H), 3,63 (m, 2H), 4,16 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 7,45 (s, 1H), 8,61 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH+ = 364).
c) terč.Butyl-N-(4-(4-chlor-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat terč.Butyl-N-[2-methoxy-4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl]karbamat (1,66 g, 4,75 mmol) ve vodě se zbaví vzduchu působením ultrazvuku ve vakuu po ··*-· 1’26 - ·· · dobu 1 min. K této vodní směsi se přidá 4-chlor-5-jod-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (1,1 g, 3,17 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)palladium(O) (0,22 g, 0,19 mmol), uhličitan sodný (0,8 g, 7,60 mmol) a 1,2-dimethoxyethan (30 ml). Výsledná suspense se opět zbavuje vzduchu v průběhu 2 min a zahřívá na 85 °C po dobu 24 h. Reakční směs se ochladí na teplotu okolí a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetatu. Organická vrstva se promyje a vysuší síranem hořečnatým. Tuhá látka se vyčistí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s použitím směsi heptan/ethylacetat (7:3) jako mobilní fáze s obdržením terč.butyl-N-(4-(4-chlor-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamatu.
XH NMR (CDC1 ) δ 1,55 (s, 9H), 2,10 (m, 4H), 3,66 (m,
2H) , 3,92 (S, 3H), 4,16 (m, 2H), 5,05 (m, 1H), 7,06 (m,
2H) , 7,14 (s, 1H), 7,32 (s, 1H) , 8,13 (široký d, J - 8 Hz,
1H), 8,64 (s, 1H) .
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH-1“ = 459).
d) 4-(4-Chlor-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyanilin
10% roztok kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu (50 ml) se přidá k terc.butyl-N-(4-(4-chlor-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamatu při teplotě 0 °C. Po 20 min se ledová vodní lázeň odstraní a výsledný roztok se míchá při teplotě okolí po dobu 4 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyjme dichlormethanem. Přidá se nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného a vrstvy se oddělí. Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem horečnatým, zfiltrují a odpaří. Tuhá látka se vyčistí průchodem silikagelem s použitím směsi heptan/ethylacetat (3:2) jako mobilní fáze s obdržením 4-(4-chlor-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyanilinu.
-..1.27
XH NMR (CDC1 ) 5 3 ' 2,09 (m, 4H), , 2,51 (široký S, NH
3,66 (m, 2H), 3,91 (S, 3H), 4,16 (m, 2H), 5,05 (m, 1H) ,
6,79 (d, J = 8 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8 Hz, 1H), 6, 98 (s,
1H), 7,28 (s, 1H), 8,63 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ = 359).
e) 5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
Hydroxid amonný (25 ml) se přidá k roztoku 4-(4-chlor-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyanilinu (0,73 g, 2,03 mmol) v dioxanu (25 ml) v tlakové trubici. Tlaková trubice se zataví a zahřívá na teplotu 122 °C po dobu 2 d. Trubice se ochladí na teplotu okolí a rozpouštědlo se odpaří. Přidá se ethylacetat a organická vrstva se promyje, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří s obdržením 5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu.
XH NMR (DMSO-de) δ 1,87 (m, 2H), 2,11 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 3,79 (S, 3H), 3,99 (m, 2H), 4,87 (m, 3H), 6,02 (široký s, NHa), 6,73 (d, J = 8 Hz, 2H), 6,77 (d, J = 8 Hz,
1H), 6,88 (Ξ, 1H), 7,33 (s, 1H), 8,10 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ = 340).
.··- »i&8 -·.....
• · · · · · • · · · · • · · · ·· ·· ·
f) Benzyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
Benzylchlorformiat (16 μΐ, 0,110 mmol) se přidává po kapkách k míchanému roztoku 5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (25 mg, 0,074 mmol) v pyridinu (0,7 ml) a dichlormethanu (0,7 ml) pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C. Po 10 min se ledová vodní lázeň odstraní a výsledná směs se míchá po dobu 4 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní chromatografií na tenké vrstvě s použitím směsi dichlormethan/methanol (95:5) jako mobilní fáze s obdržením benzyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamatu.
1H NMR (CDC13) δ 2,07 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,9(s,
3H), 4,13 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,23 (s, 2H), 6,96(s,
1H), 7,03 (s, 1H), 7,08 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,42 (m,6H),
8,20 (široký s, J = 8 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (ΜΗ4- = 474).
Příklad 2
Neopentyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
Neopentylchlorformiat (13 μΐ, 0,110 mmol) se přidává po kapkách k míchanému roztoku 5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (25 mg, 0,074 mmol) v pyridinu (0,7 ml) a dichlormethanu (0,7 ml) pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C. Po 10 min
• ·
se ledová vodní lázeň odstraní a výsledná směs se míchá po dobu 4 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní chromatografií na tenké vrstvě s použitím směsi dichlormethan/methanol (95:5) jako mobilní fáze s obdržením neopentyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamatu.
2H), 3,91
1H), 5,18
J = 8 Hz,
8,33 (s,
NMR (CDC13) δ (s, 2H), 3,94 (s, 2H), 6,97
1H), 7,25 (Ξ,
1H) .
1,00 (s, (s, 3H), (s, 1H),
1H), 8,19 (široký s, J
3H), 2,07 (m,
4,13 (m, 2H),
7,03 (s, 1H),
4H), 3,65 (m,
4,97 (m,
7,07 (d, = 8 HZ, 1H),
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 454).
Příklad 3
Fenyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (100 mg, 0,294 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2 ml). Přidá se pyridin (2 ml) a poté fenylchlorformiat (44 μΐ, 0,353 mmol). Po míchání po dobu 3 h se přidají další 44 μΐ fenylmethansulfonylchloridu a reakční směs se míchá přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s obdržením fenyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamatu (52 mg, 0,113 mmol).
ΧΗ NMR (CDCl3-d) δ 2,09 (m, 4H), 3,66 (m, 2H), 3,98 (S, 3H), 4,16 (m, 2H), 4,98 (m, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,09 (m, ·* .. ··.· • * · r « · • · · · « * · ♦ · * « • · · ♦ · « • *4 · ·· · · «
3H), 7,23 (m, 4H), 7,41 (m, 2H), 7,62 (s, 1H), 8,20 (široký d, J = 7,80 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH“1- = 460).
Příklad 4
Tetrahydro-2H-4-pyranyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat-4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonat
Tetrahydro-2H-4-pyranol (1,0 ml, 10,5 mmol) se smísí nse 4-methylmorfolinem (2,0 ml) v dichlormethanu (20 ml). K reakční směsi se pomalu přidává 4-nitrochlorformiat (1,98 g, 9,82 mmol). Po míchání po dobu 5 h se reakční směs zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou, 1,0 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Surový produkt se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím směsi ethylacetat/heptan (4:1) jako mobilní fáze s obdržením 4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonatu (1,5 g, 5,62 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) S 1,87 (m, 2H), 2,06 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 3,98 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 7,40 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 9,0 Hz, 2H).
a) Tetrahydro-2H-4-pyranyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
5-(4-Ami no-3-methoxyfeny1)-7-tetrahydro-2H-4-pyrany1*·· 1
c * · · • · · • · > · • · v t · · 4 ·
-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (57 mg, 0,168 mmol) a 4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonat (90 mg, 0,336 mmol) se smísí v pyridinu (1 ml). Po míchání po dobu 5 h se přidá dalších 90 mg 4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonatu a reakční směs se míchá po dobu 2 d. Poté se reakční směs zahřívá na teplotu 70 °C po dobu 2 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní chromatografií na tenké vrstvě s obdržením tetrahydro-2H-4-pyranyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (30 mg, 0,064 mmol).
ΧΗ NMR (CDCl3-d) δ 1,78 (m, 4H) , 2,08 (m, 4H) , 3,60 (m, 4H), 3,94 (s, 3H), 3,97 (m, 2H), 4,15 (m, 2H), 4,98 (m, 2H), 5,23 (s, 2H), 6,78 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,07 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,16 (široký d, J = 7,90 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H) .
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ - 468).
Příklad 5
3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochlorid
a) 4-Nitrofenyl(3-pyridylmethyl)karbamat
4-Nitrochlorformiat (2,49 g, 12,3 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se ochladí na ledové vodní lázni. Pomalu se přidává 3-pyridylmethanol (1,0 ml, 10,3 mmol) a 4-methylmorfolin (2,0 ml, 18,5 mmol). Po 20 min se ledová vodní lázeň odstraní a reakční směs se ponechá ohřát na teplotu místnosti. Po dalších 30 min se přidá ethylacetat a reakční směs se zfiltruje. Filtrát se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří s obdržením tmavě hnědé tuhé látky, která se překrystaluje ze směsi ethylacetat/heptan s obdržením 4-nitrofenyl(3-pyridylmethyl)karbonátu (1,52 g, 5,54 mmol).
XH NMR (CDCl-d) δ 7,38 (m, 3H), 7,79 (m, 1H), 8,28 (d, J = 9,09 Hz, 2H), 8,65 (m, 1H), 8,72 (s, 1H).
b) 3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (25 mg, 0,074 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (0,7 ml). Přidá se pyridin (0,7 ml) a poté 4-nitrofenyl(3-pyridylmethyl)karbonát (30 mg, 0,110 mmol). Po zahřívání na teplotu 100 °C přes noc se rozpouštědlo odpaří a zbytek se purifikuje preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s obdržením 3-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamatu (12 mg, 0,025 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) 6 2,08 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,15 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,54 (široký s, 2H), 6,97 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,79 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,15 (m, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,71 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ = 475).
c) 3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochlorid
3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (12 mg, 0,025 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,0 ml). Pomalu se přidává 1,0 N roztok kyseliny chlorovodíkové v etheru (1 ml). Sraženina se sbírá filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 3-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochloridu (13 mg, 0,25 mmol).
XH NMR (DMSO-de) δ 1,91 (m, 2H), 2,17 (m, 2H), 3,54 (m, 2H), 3,87 (S, 3H), 4,03 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,23 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,95 (m, 1H), 8,42 (S, 1H), 8,60 (S, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,82 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 475).
Příklad 6
2-Morfolinoethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochlorid
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (25 mg, 0,054 mmol) se smíchá s 2-morfolino-l-ethanolem (0,1 ml) v pyridinu (0,7 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s revesními fázemi s obdržením 2-morfolinoethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (24 mg, 0,048 mmol). Tuhá látka se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a pomalu se přidává 1,0 N roztok kyseliny chlorovodíkové v etheru (0,2 ml). Sraženina se získá filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 2-morfolinoethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochloridu (24 mg, 0,045 mmol).
XH NMR (DMSO-de S 1,88 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 3,55 (m, 8H), 3,90 (S, 3H), 4,03 (m, 4H), 4,49 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,65 (široký s, 2H), 7,84 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 10,95 (široký s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ = 497).
Příklad 7 (4-Brom-l,3-thiazol-5-yl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
a) 2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-karbaldehyd
1,3-Thiazolan-2,4-dion (3,52 g, 30 mmol) a oxybromid fosforečný (43 g, 150 mmol) se smísí s dimethylformamidem (2,56 ml, 34 mmol). Směs se poté zahřívá na teplotu 75 °C po dobu 1 h a na teplotu 100 °C po dobu 5 h. Po ochlazení na teplotu místnosti se směs přidá do ledové vody (500 ml) a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným hydrogenuhličitanem sod ným, vysuší síranem horečnatým, zfiltrují a odpaří s obdržením hnědé tuhé látky, která se promyje petroletherem. Odpaření rozpouštědla poskytuje 2,4-dibrom-l,3-thiazol-5-karbaldehyd (1,74 g, 6,42 mmol).
ΧΗ NMR (CDCl3-d) 6 9,90 (s, 1H).
b) (2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-yl)methanol
2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-karbaldehyd (1,74 g, 6,42 mmol) se rozpustí v methanolu (70 ml) při teplotě 0 °C. Po malých částech se přidá natrium-borohydrid (0,244 g, 6,42 mmol). Po 10 min se ledová vodní lázeň odstraní a reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a přidá se nasycený roztok chloridu amonného. Přidá se 1,0 N roztok hydroxidu sdoného pro úpravu pH na 10. Vodná vrstva se extrahuje ethylacetatem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří. Roztok se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s obdržením (2,4-dibrom-l,3-thiazol-5-yl)methanolu (0,946 g, 3,47 mmol).
H NMR (CDCl3-d) δ 2,11 (široký s, 1H), 6 4,79 (s, 2H) .
c) (4-Brom-l,3-thiazol-5-yl)methanol (2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-yl)methanol (0,94 g, 3,44 mmol), trihydrát uhličitanu sodného (1,34 g) a palladium na uhlíku (10%, 0,07 g) se smísí v methanolu (33 ml). Výsledná směs se hydrogenuje při tlaku 414 kPa po dobu 2 d. Tuhá látka se odfiltruje celitem. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s obdržením
- 1·3 6..τ • ·
(4-brom-l,3-thiazol-5-yl)methanolu (0,32 g, 2,78 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,29 (široký s, 1H), δ 4,86 (s, 2H), 8,72 (s, 1H).
d) (4-Brom-l,3-thiazol-5-yl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (28 mg, 0,061 mmol) se smísí se (4-brom-l,3-thiazol-5-yl)methanolem (50 mg, 0,434 mmol) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se purifikuje preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s reversními fázemi s obdržením (4-brom-1,3-thiazol-5-yl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu.
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,07 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,98 (m, 1H), 5,35 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 6,97 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,09 (m, 1H), 7,35 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,78 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (ΜΗ-*· - 481).
Příklad 8
Tetrahydro-3-furanyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-
-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s tetrahydro-3-furanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá při teplotě 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi s obdržením tetrahydro-3-furanyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (14 mg, 0,031 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,07 (m, 6H), 3,66 (m, 2H), 3,96 (m, 7H), 4,13 (m, 2H), 4,98 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,40 (m, 1H), 6,97 (S, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,08 (d, J - 8,2 Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,32 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH+ = 455).
Příklady 9 a 10
1.3- Dioxan-5-yl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamat
1.3- Dioxolan-4-ylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s glycerolformalem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi s obdržením tetrahydro-3-furanyl-N-[4-(4-amino-7-
-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (2 mg, 0,004 mmol).
TH NMR (CDCŮ-d) S 2,06 (m, 4H), 3,66 (m, 2H), 3,93 (m, 3H), 4,07 (m, 6H), 4,79 (m, 1H), 4,83 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 4,96 (m, 1H), 5,04 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,15 (velmi široký S, 2H), 6,96 (s, 1H), 7,05 (m, 2H), 7,53 (s, 1H), 8,15 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (ΜΗ* = 471).
Dále se získá 1,3-dioxolan-4-ylmethyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat (6,0 mg, 0,013 mmol).
XH NMR (CDCl-d) δ 2,06 (m, 4H), 3,66 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,92 (m, 3H), 4,03 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 4,34 (m, 2H), 4,94 (s, 1H), 4,97 (m, 1H), 5,10 (s, 1H), 5,32 (široký s, 2H), 6,97 (s, 1H), 7,03 (m, 2H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 8,15 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 471).
Příklad 11
2-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochlorid
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s 2-pyridylmethanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá při teplotě 100
°C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s reversními fázemi s obdržením 2-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (11 mg, 0,023 mmol). Získaná tuhá látka se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a pomalu se přidává 1,0 N roztok kyseliny chlorovodíkové v etheru (0,1 ml). Sraženina se sbírá filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 2-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochloridu (12 mg, 0,023 mmol).
XH NMR (DMSO-de) δ 1,92 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 4,02 (m, 2H), 4,91 (m, 1H), 5,23 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,37 (m, 1H), 7,53 (d, J - 7,8 Hz, 1H), 7,87 (m, 3H), 8,42 (s, 1H), 8,57 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 8,85 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 475).
Příklad 12
4-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-methoxyfenyl]karbamathydrochlorid
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí se 4-pyridylmethanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s reversními fázemi s obdržením 2-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfe1»4 O · · · ·
• · ···· ·· • · · · · · • · · · · • · · · · • · · · · · nyl]karbamatu (11 mg, 0,023 mmol). Získaná tuhá látka se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a pomalu se přidává 1,0 N roztok kyseliny chlorovodíkové v etheru (0,1 ml). Sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 4-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochloridu (12 mg, 0,023 mmol).
XH NMR (DMSO-d6) S 1,91 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,90 (S, 3H), 4,03 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,16 (s, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,76 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 9,05 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS: (MH*~ = 475).
Příklad 13 (5-Methyl-3-isoxyzolyl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s (5-methyl-3-isoxazolylJmethanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s reversními fázemi s obdržením (5-methyl-3-isoxazolyl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (18 mg, 0,038 mmol).
• ·
ΧΗ NMR (CDCl3-d) δ 2,06 (m, 4H), 2,44 (s, 3H), 3,64 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 5,26 (s,
2H), 6,12 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,06 (m, 2H), 7,39 (s,
1H), 8,17 (široký s, 1H), 8,21 (s, 1H) .
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH+ = 479).
Příklad 14 [ (2S)-5-Oxotetrahydro-lH-2-pyrrolyl]methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolof2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s (2S)-5-(hydroxymethyl)tetrahydro-ΙΗ-2-pyrrolyl]-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-lH-2-pyrrolonem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní hmotnostní spektrometrií LC/MS s reversními fázemi s obdržením [(2S)-5-oxotetrahydro-lH-2-pyrrolyl]methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfeny1]karbamatu (10 mg, 0,021 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 1, ,90 (m, 1H), 2, ,06 (m, 4H), 2,34
(m, 1H) , 2,41 (m, 3H), 3 ,64 (m, 2H) , 3,94 (s, 3H), 4,04 (m,
2H), 4, 14 (m, 2H), 4,98 (m, 1H) , 5, 3 3 (m, 3H) , 6,10 (s,
1H), 6, 98 (S, 1H), 7,04 (s, 1H) , 7, 09 (m, 1H) , 7,31 (s,
1H), 8, 11 (široký s, 1H) , 8( ,32 (s, 1H) .
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH-*' = 481).
Příklad 15
4-Aminobenzyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
a) terč.Butyl-N(4-(hydroxymethyl)fenyl)karbamat
4-Aminofenylmethanol (1,23 g, 10 mmol) a diisopropylethylamin (2,6 ml, 15 mmol) se smísí s di(terč.butyl)dikarbonatem (2,62 g, 12 mmol) v dichlormethanu (50 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se ethylacetat a organická vrstva se promyje vodou, 1,0 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem uhličitanu sodného, vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem horečnatým, zfiltruje a odpaří. Surový produkt se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií směsí ethylacetat/heptan (2:3) s obdržením terc.butyl-N-(4-(hydroxymethyl)fenyl)karbamatu (2,16 g, 9,67 mmol).
XH NMR (CDCl-d) δ 1,52 (s, 9H), 4,63 (s, 2H), 6,47 (široký s, 1H), 7,30 (d, 8,5 Hz, 2H), 7,36 (d, 8,5 Hz, 2H).
b) 4-Aminobenzyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
Fenyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat (51 mg, 0,111 mmol) se smísí s terc.butyl-N-(4-(hydroxymethyl)fenyl)karbamatem (119 mg, 0,533 mmol) v pyridinu (0,8 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením 4-aminobenzyl-N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamatu (9 mg, 0,015 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) ó 1,52 (s, 1H), 2,08 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 4,14 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,17 (s, 2H), 5,37 (široký s, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,06 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,38 (m, 3H), 8,16 (široký s, 1H), 8,30 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ = 589).
Příklad 16
NI-[4-(4-Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyljbenzamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (80 mg, 0,236 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2,0 ml). Přidá se pyridin (2,0 ml) a poté benzoylchlorid (41 μΐ, 0,353 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Získaná tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením NI-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]benzamidu (64 mg, 0,144 mmol).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 444).
XH NMR (CDCla-d) δ 2,12 (m, 4H), 3,67 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 4,17 (m, 2H), 4,99 (m, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,04 (s,
1H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,53 (m, 3H), 7,94 (d, J =
7,8 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,63 (d, J = 8,2
Hz, 1H).
·· η··4
Příklad 17
N2-[4-(4-Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-2-pyridinkarboxamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (80 mg, 0,236 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2,0 ml). Přidá se pyridin (2,0 ml) a poté 2-pyridinkarbonylchloridhydrochlorid (63 mg, 0,353 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odstraní a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Získaná tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením NI-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]benzamidu (84 mg, 0,189 mmol).
TH NMR (CDCla-d) δ 2,12 (m, 4H), 3,67 (m, 2H), 4,03 (s, 3H), 4,14 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 5,37 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,145 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H), 7,92 (m, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,70 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 10,62 (s, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 445).
Příklad 18
N5-[4—(4-Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-1,3-dimethyl-lH-5-pyrazolkarboxamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-
-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrímidin-4-amin (80 mg, 0,236 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2,0 ml). Přidá se pyridin (2,0 ml) a poté 2-pyridinkarbonylchloridhydrochlorid (63 mg, 0,353 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odstraní a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Získaná tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením N5-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-l,3-dimethyl-lH-5-pyrazolkarboxamidu (30 mg, 0,065 mmol).
ΧΗ NMR (CDCl3-d) <5 2,11 (m, 4H) , 2,32 (s, 3H) , 3,66 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,17 (s, 3H), 4,99 (m, 1H), 5,22 (široký Ξ, 2H), 6,46 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 7,12 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,33 (2, 2H), 8,49 (d, J = 8,2 Hz, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH^ = 462).
Příklad 19
Nl-[4-(4-Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-2,2-dimethylpropanamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (50 mg, 0,147 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (1,5 ml). Přidá se pyridin (1,5 ml) a poté 2,2-dimethylpropanoylchlorid (31 mg, 0,221 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odstraní a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se
- 146 • · ···· · · ···· ·· • · · · · · ··· sraženina. Získaná tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením
Nl-[4—(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-2,2-dimethylpropanamidu (27 mg, 0,064 mmol).
^H NMR (CDCl3-d) 6 1,35 (s, 9H) , 2,09 (m, 4H) , 3,66 (m, 2H), 3,96 (S, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,46 (široký s, 2H), 6,98 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,07 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,49 (d, J = 8,2 Hz, 1H) .
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (ΜΗ* = 424).
Příklad 20
NI-[4-(4-Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-l-cyklopentankarboxamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (50 mg, 0,147 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (1,5 ml). Přidá se pyridin (1,5 ml) a poté 1-cyklopentankarbonylchlorid (31 mg, 0,221 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odstraní a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Získaná tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením NI-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-2,2-dimethylpropanamidu (33 mg, 0,076 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 1,66 (m, 2H) , 1,81 (m, 2H) , 1,95 (m, 4H), 2,06 (m, 4H), 2,77 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,94 (s,
• · · · ·· ·· ·
3H) , 4,15 (m, 2H) , 4,96 (m, 1H), 5,37 (široký s,
(s, 1H), 7,03 (S, 1H), 7,07 (d, J = 8, 2 Hz, 1H),
1H) , 8,30 (Ξ, 1H) , 8,49 (d, J = 8,2 Hz , 1H).
2H), 6,98
7,84 (s,
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH+ = 437).
Příklad 21
NI-[4-(4-Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-3-fenylpropanamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (50 mg, 0,147 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (1,5 ml). Přidá se pyridin (1,5 ml) a poté 3-fenylpropanoylchlorid (37 mg, 0,221 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Získaná tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením NI-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-2,2-dimethylpropanamidu (7 mg, 0,015 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,07 (m, 4H), 2,75 (m, 2H), 3,09 (m, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,88 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 5,97 (široký s, 2H), 6,93 (s, 1H), 7,05 (m, 2H), 7,26 (m, 5H), 7,70 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,46 (d, J = 8,2 Hz, 1H).
Hmotnostní spektrometrie LC/MS (MH* = 472).
Příklad 22 ~ · .148. ·—
5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
a) Tosylchlorid (12,0 g) se přidává po částech ke směsi 3-hydroxytetrahydrofuranu (5,0 g) v pyridinu (100 ml) při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku za míchání. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 2 h a poté se ponechá ohřát na teplotu místnosti. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 72 h. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se 5 M roztok kyseliny chlorovodíkové (200 ml). Směs se extrahuje ethylacetatem a spojené ethylacetatové extrakty se promyjí 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové a poté nasyceným roztokem chloridu sodného, dále se vysuší, zfiltrují a odpaří s obdržením 3-tosyloxytetrahydrofuranu ve formě olejovité kapaliny.
b) Hydrid sodný (120 mg, 60% disperse v minerálním oleji) se přidá k roztoku 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (906 mg) a dimethylformamidu (30 ml) za míchání pod atmosférou dusíku. Směs se míchá po dobu 30 min a poté se přidá roztok 3-(tosyloxy)tetrahydrofuranu (750 mg) v dimethylformamidu (10 ml) za míchání. Směs se míchá a zahřívá na teplotu 95 °C po dobu 18 h a poté se odpaří ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetat a vodu. Ethylacetatová vrstva se oddělí, vysuší a odpaří s obdržením zbývající kaučukovité tuhé látky, která se trituruje s etherem a zfiltruje s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 196 až 196,5 aC.
Příklad 23
• · · · • · • ·
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Způsobem podobným příkladu 1 reaguje l,4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin se 4-tosyloxytetrahydropyranem s obdržením po vyčistění mžikovou sloupcovou chromatografií 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydropyranyl )-7H-pyrrolo[ 2, 3-d] pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 193 až 193,5 °C.
Příklad 24
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-[4-(N-terc.butoxykarbonyl)tetrahydroisoxazolyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
a) Di(terc.butyl)dikarbonat (4,56 g) se přidá k roztoku 4-hydroxytetrahydroisoxazolu (2,4 g) a triethylaminu (4,2 g) v tetrahydrofuranu (100 ml) za míchání při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku. Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 72 h a poté se zfiltruje. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku s obdržením
N-(terč.butoxykarbonyl)-4-hydroxytetrahydroisoxazolu ve formě olejovíté kapaliny, která se přímo použije v další části tohoto příkladu.
b) Produkt z odstavce a) výše (3,6 g) se míchá v pyridinu (50 ml) při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku a poté se přidá po částech tosylchlorid (3,62 g) při teplotě 0 °C za míchání. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu lha poté se ponechá ohřát na teplotu místnosti v průběhu 18 h. Pyridin se odstraní za sníženého tlaku a přidá se ethylacetat (50 ml) a kyselina citrónová (50 ml 1M roztoku ve vodě). Organická vrstva se oddělí a promyje 1M roztokem kyseliny citrónové a poté nasyceným roztokem chloridu sodného, dále se vysuší, zfiltruje a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím petroletheru o teplotě varu 40 až 60 °C obsahujícího 20 až 30 % ethylacetatu jako mobilní fáze. Příslušné frakce se sbírají a spojí s obdržením N-(terc.butoxykarbonyl)-4-tosyloxytetrahydroisoxazolu o teplotě tání 63 až 65 °C.
c) Roztok 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]- pyrimidinu (1,0 g) v dimethylformamidu (40 ml) se přidává po kapkách za míchání k suspenzi hydridu sodného (145 g, 60% disperse v minerálním oleji) v dimethylformamidu (60 ml) za míchání pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu lha poté se přidá produkt z odstavce b) (1,25 g). Směs se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 3 h a poté se ochladí na teplotu místnosti, přidá se voda a směs se extrahuje ethylacetatem s obdržením olejovité kapaliny. Tato olejovitá kapalina se trituruje ethylacetatem a obdržená tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-[4-(N-terc.butoxykarbonyl)tetrahydroisoxazolyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 162 až 163 °C.
Příklad 25
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydroisoxazolyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid
Produkt z příkladu 3 (0,29 g) se rozpustí v dichlormethanu (8 ml) a poté se míchá při teplotě 0 °C a přidá se kyselina trifluoroctová (2,0 ml). Směs se ponechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se při teplotě místnosti po dobu 2 h. Směs se zalkalizuje roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje dichlormethanem s obdržením olejovité kapaliny, která se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím ethylacetatu a poté směsí ethylacetat/methanol (9:1) jako mobilní fáze. Příslušné frakce se sbírají a spojí, poté se odpaří s obdržením tuhé látky, která se rozpustí v ethylacetatu a poté se zpracuje etherickým roztokem chlorovodíku (3,0 ml, 1M roztoku). Obdržená tuhá látka se oddělí filtrací, promyje etherem a vysuší ve vakuu při teplotě 45 °C v průběhu 2 h s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydroisoxazolyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochloridu o teplotě tání 208 °C (s rozkladem).
Příklad 26
4-Chlor-5-jod-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
a) 4-Chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (5,0 g) se přidává ke směsi hydridu sodného (0,79 g, 60% disperse v minerálním oleji) v dimethylformamidu (100 ml) za míchání pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C. Směs se míchá do skončení vyvíjení vodíku. Přidá se 3-tosyloxytetrahydrofuran (4,65 g) při teplotě 0 °C a poté se směs ohřeje na 90 °C. Směs se míchá při této teplotě po dobu 2 h a poté přes noc při teplotě místnosti. Přidá se opatrně voda (100 ml) a směs se extrahuje ethylacetatem s obdržením 4-chlor-5-jod-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu o teplotě tání 184 až 186 °C.
b) Směs 4-jodfenolu (25,0 g) , 2-fluorbenzaldehydu (14,14 g), uhličitanu draselného (31,5 g) a dimethylformamidu (500 ml) se zahřívá na teplotu 120 °C pod atmosférou dusíku za míchání po dobu 15 h. Výsledná směs se ochladí na teplotu okolí a zfiltruje. K filtrátu se přidá voda (500 ml) a směs se extrahuje ethylacetatem s obdržením tuhé látky, která se trituruje horkým hexanem (500 ml). Supernatant se dekantuje ze zbývající kaučukovíté látky a ochladí. Vysrážená tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením
2-(4-jodfenoxy)benzaldehydu o teplotě tání 84,5 až °C.
c) Toluen (250 ml) se deoxygenuje a poté nitrogenuje po dobu 30 min. K toluenu se přidá 2-(4-jodfenoxy)benzaldehyd (6,46 g), hexamethylditin (10,0 g) a tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (1,4 g). Směs se vaří pod zpětným chladičem pod atmosférou dusíku za míchání po dobu 7 h. Poté se ochladí na teplotu místnosti a zfiltruje. Filtrát se odpaří a zbytek se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím 3% ethylacetatu v petroletheru o teplotě varu 40 až 60 °C jako mobilní fáze s obdržením 2-(4-trimethylstannylfenoxy)benzaldehydu jako olejovíté kapaliny.
d) Směs produktu z odstavce c) (1,80 g) , produktu z odstavce b) (1,76 g), tris(dibenzylidenaceton)dipalladia (228 mg), trifenylarsinu (383 mg) a dimethylformamidu (75 ml) se zahřívá na teplotu 65 °C pod atmosférou dusíku za míchání po dobu 70 h. Směs se ochladí na teplotu okolí a přidá se voda. Směs se
- Λ5λ*τ extrahuje ethylacetatem s obdržením zbytku, který se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím zvyšujícího se množství ethylacetatu od 30 do 50 % v petroletheru o teplotě varu 40 až 60 °C jako mobilní fáze s obdržením tuhé látky, která se trituruje diethyletherem a filtruje s obdržením 2-[(4-(4-chlor-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]benzaldehydu ve formě tuhé látky.
e) Produkt z odstavce d) (360 mg) se rozpustí v methanolu (5 ml) a přidá se natrium-borohydrid (65 mg) při teplotě 0 °C za míchání. Směs se ohřeje na teplotu okolí a míchá se při této teplotě po dobu 1 h. Do směsi se přidá zředěný roztok hydroxidu sodného a směs se odpaří za sníženého tlaku s obdržením zbytku, který se extrahuje ethylacetatem s obdržením 2-[(4-(4-chlor-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy]benzylalkoholu.
f) Směs produktu z odstavce e) (280 mg), 1,4-dioxanu (15 ml) a koncentrovaného vodného roztoku hydroxidu amonného (15 ml, hustota 0,88 g/cm3) se ohřívá při teplotě 120 °C v tlakové nádobě po dobu 20 h. Směs se ochladí na teplotu okolí a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se vyjme ethylacetatem, promyje vodou, poté se vysuší, zfiltruje a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi ethylacetat/methanol (9:1) jako mobilní fáze s obdržením 2-[(4-(4-amino-7-(3-tetrahydrof uryl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5yl)fenoxy]benzoylalkoholu ve formě sklovité tuhé látky o teplo·15Α»··~ ·· ···· ·· • · · « · · · • ····· ··· ·»· · · · ·· ······ ·· · ·· tě tání 92 až 96 °C.
Příklad 27
2-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-N,N-diethylbenzylamin
a) Natrium-triacetoxyborohydrid (264 mg) se přidá ke směsi 2-[(4-(4-chlor-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyJbenzaldehydu (330 mg) a diethylaminu (121 mg) v 1,2-dichlorethanu v lahvičce (5 ml) a lahvička se uzavře. Směs se třepe při teplotě okolí po dobu 20 h a poté se přidá nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (5 ml). Směs se extrahuje ethylacetatem s obdržením 2—[4—(4— -chlor-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-N,N-diethylbenzylaminu.
b) Směs produktu z odstavce a) (280 mg), koncentrovaný vodný roztok hydroxidu amonného (10 ml, hustota 0,88 g/cm3) a 1,4-dioxanu (10 ml) se zahřívá v tlakové nádobě po dobu 16 h při teplotě 120 °C. Směs se ochladí a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se vyjme ethylacetatem, promyje vodou, vysuší, zfiltruje a odpaří s obdržením olejovíté kapaliny, která se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím směsi ethylacetat/methanol jako mobilní fáze s obdržením 2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-N,N-diethylbenzylaminu o teplotě tání 107 až 110 °C.
Příklad 28
2-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyJbenzonitril
a) Směs 2-fluorbenzonitrilu (28,8 g), 4-bromfenolu (36,9 g), uhličitanu draselného (58,9 g) a dimethylformamidu (30 ml) se zahřívá za míchání pod atmosférou dusíku při teplotě 120% °C po dobu 5 h. Směs se ponechá stát přes noc při teplotě místnosti a poté se rozdělí mezi ethylacetat a vodu. Organická vrstva se oddělí, promyje, vysuší a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která stáním tuhne. Tato tuhá látka se trituruje petroletherem o teplotě varu 40 až 60 °C a zfiltruje s obdržením 2-(4-bromfenoxy)benzonitrilu.
b) Směs produktu z odstavce a) (5,57 g), hexamethylditinu (10,0 g), tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) (1,4 g) a toluenu zbaveného vzduchu (250 ml) se zahřívá na teplotu 110 °C za míchání pod atmosférou dusíku po dobu 4,5 h. Směs se ponechá stát po dobu 18 h při teplotě okolí a poté se zfiltruje silikagelem. Silikagel se promyje ethylacetatem a spojené filtráty a promývací podíly se odpaří do sucha. Zbytek se promyje mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím petroletheru o teplotě varu 40 až 60 °C a diethyletheru (2 % se zvyšováním na 5 %) jako mobilní fáze. Příslušné frakce se sbírají, spojují a odpařují s obdržením 2-(4-triemthylstannylfenoxy )benzonitrilu.
c) Směs 4-chlor-5-jod-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (1,8 g, připraveného podle popisu v příkladu 5) a produktu z odstavce b) (1,23 g) se
• · · · · · • · · · · ponechá reagovat a zpracuje se podobným způsobem jako v příkladu 5d) s obdržením 2-[4-(4-chlor-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]benzonitrilu.
d) Směs produktu z odstavce c) (470 mg), koncentrovaného vodného roztoku hydroxidu amonného (33 ml, hustota 0,880 g/cm3) a 1,4-dioxanu (33 ml) se zahřívá v tlakové nádobě při teplotě 120 °C po dobu 18 h a poté se zpracuje způsobem podobným způsobu příkladu 5 s obdržením 2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyJbenzonitrilu o teplotě tání 201 až 203 °C.
Příklad 29
2-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]benzaldehyd
a) Způsobem podobným způsobu příkladu 2 reaguje
3-tosyloxytetrahydrofuran (1,84 g) s 5-(4-benzyloxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)aminem (2,9 g) s použitím hydridu sodného (0,30 g, 60% disperse v minerálním oleji) a dimethylformamidu (40 ml) s tím rozdílem, že se směs zahřívá po dobu 4,5 h při teplotě 90 °C s obdržením 5-(4-benzyloxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu jako tuhé látky.
b) Směs produktu z odstavce a) (6,0 g), 10% palladia na aktivním uhlí (3,0 g), mravenčanu amonného (4,9 g) a ethanolu (500 ml) se zahřívá na parní lázni za míchání pod atmosférou dusíku po dobu 2 h. Směs se ochladí a zfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Filtrát se odpaří na poloviční objem a zfiltruje s obdržením tuhé látky identifikované jako 4-[4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenol o teplotě tání 257 až 259 °C.
c) Směs 4-[4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenolu (2,55 g), 2-fluorbenzaldehydu (1,07 g), uhličitanu draselného (2,13 g) a dimethylformamidu (80 ml) se zahřívá při teplotě 120 °C za míchání pod atmosférou dusíku po dobu 5 h.
Směs se ochladí na teplotu místnosti, přidá se voda a extrahuje se ethylacetatem s obdržením 2-(4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenoxyJbenzaldehydu teplotě tání 185 až 187 °C.
Příklad 30
4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]tetrahydrofuran-3-ol
Hydrid sodný (120 mg 60% disperse v minerálním oleji) se přidá k roztoku 4-amino-5-(fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (902 mg) a dimethylformamidu (30 ml) za míchání pod atmosférou dusíku. Směs se míchá po dobu 30 min a poté se přidá 3,6-dioxabicyklo[3.1.0]hexan (300 mg) a směs se ohřívá na 80 °C. Poté se směs ponechá stát po dobu 64 h a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se trituruje vodou se vznikem olejovíté kaučukovité látky. Přidá se ether a směs se rychle míchá po dobu 30 min s obdržením tuhé látky, která se oddělí filtrací a promyje methanolem. Tuhá látka se odloží do odpadu. Filtrát poskytuje druhou část tuhé látky, která se překrystaluje s ethanolu s obdržením 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]tetra• ·« «
- 158 hydrofuran-3-olu o teplotě tání 234,5 až 235,5 °C.
Příklad 31
5-[4-(2-Morfolinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Směs 2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyJbenzaldehydu (0,15 g), morfolinu (64 mg), natrium-triacetoxiborohydridu (117 mg) a 1,2-dichlorethanu (5 ml) se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h. Přidá se nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a směs se zfiltruje kartridží EMPORER. Filtrát se odpaří a zbytek se rozpustí v dichlormethanu (5 ml) a poté se přidá tris(2-aminoethyl)amin vázaný na polymer (0,3 g) a 2 kapky ledové kyseliny octové a směs se míchá při teplotě okolí přes noc. Polymer se odstraní filtrací a promyje dichlormethanem a poté methanolem. Spojené promývací podíly a filtrát se odpaří za sníženého tlaku s obdržením olejovité kapaliny, která se trituruje směsí diethylether/ethylacetat se zahřátím pro rozpuštění tuhé látky a roztok se ochladí ledem a zfiltruje s obdržením 5-[4-(2-morfolinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 169 až 171 °C.
Příklad 32
5-[4-(2-Piperidinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Způsobem podobným způsobu příkladu 10 reaguje
2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]benzaldehyd (0,15 g) s piperidinem (63 mg)
-·1·39··- ........
s obdržením 5-[4-(2-piperidinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4ylaminu o teplotě tání 76 až 78 °C (sklovitá pěna).
Příklad 33
5-{4-[2-(2-Methoxyethyl)ami nomethy1fenoxy]fenyl} - 7 - (3 -tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4ylamin
Způsobem podobným způsobu příkladu 10 reaguje
2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]benzaldehyd (0,15 g) s 2-methoxyethylaminem (56 mg) s obdržením 5-{4-[2-(2-methoxyethyl)aminomethylfenoxy]fenyl}-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-4ylaminu o teplotě tání 66 až 68 °C (sklovitá pěna).
Příklad 34
4-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]benzylalkohol
a) Způsobem podobným způsobu příkladu 9 reaguje 4-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenol se 4-fluorbenzaldehydem s obdržením 4-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyjbenzaldehydu.
b) Produkt z odstavce a) (0,35 g) se rozpustí v methanolu (10 ml) a k tomuto roztoku se přidá natrium-borohydrid (32 mg) při teplotě 0 °C. Směs se zahřívá při teplotě okolí a míchá se při této teplotě po dobu 10 min. Přidá se 1,2-dichlorethan (4 ml) pro • 4 «<«· ♦*. 4 · · ··» t · v « · ··»
4 W *· f
-•VéO’·zlepšení rozpustnosti. Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h a poté se přidá ledová kyselina octová (1 ml) a směs se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetat a nasycený vodný roztok uhličitanu sodného. Ethylacetat se oddělí, vysuší, zfiltruje a odpaří s obdržením 4-[(4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyJbenzylalkoholu o teplotě tání 92 až 95 °C.
Příklad 35
5-[(4-(4-Fluorfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylamin
Směs 4-[4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenolu (0,59 g), kyseliny 4-fluorfenylboronové (0,56 g), octanu měďnatého (0,36 g), triethylaminu (1,01 g), dichlormethanu (20 ml) a aktivovaných rozdrcených 4 molekulárních sít (0,5 g) se míchá pod suchou atmosférou dusíku po dobu 64 h. Reakční směs se zfiltruje předem promytým silikagelem a eluuje dichlormethanem (200 ml) poté ethylacetatem (250 ml) a konečně směsí ethylacetat/methanol (9:1) (250 ml). Dichlormethanové a ethylacetatové frakce se spojí a purifikují mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi ethylacetat/ /methanol jako mobilní fáze s obdržením 5-[4-(4-fluorfenoxy )fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 198 až 199 °C.
Příklad 36
5-[4-(4-Morfolinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)·· ···· ·· ···· »· ·· ·«* · · t 9
9 9
99 9
-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Způsobem podobným způsobu příkladu 10 reaguje směs
4- [4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)fenoxyJbenzaldehydu (336 mg) a morfolinu (146 mg) s obdržením 5-[4-(4-morfolinomethylfenoxy)feny1]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 142 až 144 °C.
Příklad 37
5- [4-(3-Morfolinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
a) 4-[4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenol (0,297 g) reaguje s kyselinou
3-formylfenylboronovou způsobem podobným způsobu příkladu 14 s obdržením 3-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy ]ben zaldehydu.
b) Produkt z odstavce a) (100 mg) a morfolin (44 mg) spolu reagují s použitím podobných činidel a podmínek, jak se popisují v příkladu 10, s obdržením 5—[4—(3-morfolinomethylfenoxy)fenyl]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 83 až 85 °C.
Příklad 38
2-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(2-(4-pyridyl)ethylamino)benzonitril • · · · • · • · · · • · • · · ·· · ··· • · · · · · · • · · · · · ··· ··· · · · ·· — ··♦ ·· · ·· ·
Směs 4-[4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenolu (0,517 g), 2-fluor-6-(2-(4-pyridinyl)ethylamino)benzonitrilu (0,42 g), uhličitanu draselného (0,48 g) a dimethylformamidu (20 ml) se zahřívá při teplotě 120 °C pod atmosférou dusíku po dobu 8 h. Směs se ponechá ochladit, zředí se vodou a poté se extrahuje ethylacetatem s obdržením tuhé látky, která se překrystaluje z ethylacetatu s obdržením tuhé látky, která se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím ethylacetatu a směsi ethylacetat/methanol (9:1, 8:1, 4:1) s obdržením 2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(2-(4-pyridyl)ethylamino)benzonitrilu o teplotě tání 212 až 213 °C.
Příklad 39
2-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(3-imidazol-l-yl)propylaminobenzonitril
4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenol (0,49 g), 2-fluor-6-(3-imidazol-l-yl)propylaminobenzonitril, uhličitan draselný (0,45 g) a dimethylformamid spolu reagují způsobem podobným způsobu příkladu 17 s obdržením 2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(3-imidazol-l-yl)propylaminobenzonitrilu o teplotě tání 110 °C (sklovitá pěna).
Příklad 40
4-Amino-6-brom-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-tetrahydrofuryl)• ·
-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
a) 4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (302 mg) se rozpustí v dimethylacetamidu (10 ml) a dichlormethanu (50 ml) a poté se zpracuje N-bromsukcinimidem (178 mg) v dichlormethanu (10 ml). Směs se ponechá míchat při teplotě okolí po dobu 16 h. Poté se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se trituruje vodou s obdržením tuhé látky, která se filtruje a suší s obdržením 4-amino-6-brom-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu o teplotě tání 282 až 283 °C.
b) Směs produktu z odstavce a) (1,14 g) v suchém dimethylformamidu (30 ml) se míchá pod atmosférou dusíku a přidá se hydrid sodný (120 mg 60% disperse v minerálním oleji). Následuje přidání
3- tosyloxytetrahydrofuranu (0,8 g) v dimethylformamidu (10 ml). Směs se zahřívá při teplotě 90 °C přes noc. Získaná směs se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se trituruje vodou s obdržením tuhé látky, která se sbírá filtrací a suší s obdržením tuhé látky, která se purifikuje rozpuštěním v ethanolu, přídavkem vody do bodu zákalu a filtrací. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku s obdržením zbytku, který se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s obdržením
4- amino-6-brom-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu o teplotě tání 205 až 206 °C.
Příklad 41 • · • · · · · ·
- 16-4 « ·· ·
2-[4-(4-Amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(3-methoxypropylamino)benzonitril
Způsobem podobným způsobu příkladu 17 se 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (0,65 g), 2-fluor-6-(3-methoxypropylamino)benzonitril (0,46 g), uhličitan draselný (0,61 g) a dimethylformamid (40 ml) zahřívá pod atmosférou dusíku při teplotě 120 °C po dobu 8 h s poskytnutím po zpracování 2-[4-(4-amino-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(3-methoxypropylamino)benzonitrilu o teplotě tání 183 až 184 °C.
Příklad 42
2-[4-(4-Amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxyJbenzonitril
a) Směs 5-(4-benzyloxyfenyl)-7-(tetrahydropyran-4-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (2,83 g), 10% palladia na uhlíku (1,41 g), mravenčanu amonného (2,31 g) a ethanolu (250 ml) se vaří pod zpětným chladičem pod atmosférou dusíku za míchání po dobu 1,5 h. Směs se ochladí na teplotu okolí, zfiltruje a poté se filtrát ochladí a zfiltruje. Filtrát se odpaří s obdržením tuhého 4-[4-amino-7-(4-tetrahydropyranyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenolu.
b) Teplý roztok 4-[4-amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenolu (0,082 g) v dimethylformamidu (3,4 ml) se přidá ke směsi
2-fluorbenzonitrilu (80 mg) a uhličitanu draselného • · · · • ·
(76 mg) v lahvičce. Lahvička se promyje proudem dusíku a uzavře. Směs se třepe při teplotě 120 °C po dobu 6 h a poté se ponechá ochladit na teplotu okolí v průběhu 16 h. Směs se zředí vodou (11 ml) a poté se extrahuje ethylacetatem s obdržením 2-[4-(4-amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenoxy]benzonitrilu o teplotě tání 125 °C (s měknutím).
Příklady 43 až 48 se provedou způsobem podobným předchozímu příkladu reakcí 4-[4-amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolof2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenolu s příslušným nitrilem s tím rozdílem, že se směsi třepou až po dobu 48 h. Reakce se sledují ohledně vymizení výchozí látky a zahřívají se po příslušnou dobu.
Příklad 49
2-[4-(4-Amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]fenoxy]-6-(3-imidazol-l-yl)propylaminobenzonitril z 2-fluor-6-(3-(imidazol-l-yl)propylamino)benzonitrilu.
Příklad 50
2-[4-(4-Amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(2-morfolinoethoxy)benzonitril, teplota tání 110 °C (sklovitý), z 2-fluorbenzonitrilu.
Příklad 51
2-[4-(4-Amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(2-(4-pyridyl)ethylamino)• · · · • · · ·
benzonitril, teplota tání 120 až 123 °C (sklovitý), z 2-fluor-6-(2-(4-pyridyl)ethylamino)benzonitrilu.
Příklad 52
2-[4-(4-Amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-6-(3-methoxypropylamino)benzonitril, teplota tání 205 až 207 °C, z 2-fluor-6-(3-methoxypropylamino)benzonitrilu.
Příklad 53
2-[4-(4-Amino-7-(4-tetrahydropyranyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenoxy]-5-fluorbenzonitril, teplota tání 216 až 217 °C, z 2,5-difluorbenzonitrilu.
Příklady 54 až 101
Obecný způsob přípravy
Podíly aminů podle seznamu v tabulce 1 (9 molárních ekvivalentů vzhledem k použitému esteru, hmotnosti od 47,5 mg do 184,5 mg) se naváží do jednotlivých lahviček a do každé lahvičky se přidá methanol (1 ml). Přidá se roztok ethylesteru kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]octové (1 molární ekvivalent) ve směsi methanolu a triethylaminu (4 ml, objemový poměr methanolu k triethylaminu je 23,2:1). Reakčni směsi se třepou při teplotě 60 až 65 °C po dobu 36 h. Methanol a triethylamin se odpaří za sníženého tlaku při teplotě 50 °C v průběhu 3 h a do každé lahvičky se přidá voda (3 ml) a poté dichlormethan (3 ml). Lahvičky se třepou po dobu 15 s a poté se ponechají stát po dobu 18 h. Směsi se vylijí na • · • · · · • · • · ]*á í7· *-» · *
extrakční kotoučové kartridže EMPOREn (10 mm/6 ml) a dichlormethanové fáze se sbírají a odpařují při teplotě 50 °C v průběhu 3 h. Během zpracování lze pozorovat, že se v lahvičkách stáním odděluje tuhá fáze v průběhu 18 h. Vodná vrstva v každé kartridži se protlačuje stlačeným vzduchem. Do každé extrakční kartridže se přidá dichlormethan (4 ml). Každý filtrát se odpaří za sníženého tlaku při teplotě 50 °C v průběhu 3 h. Žádané produkty jsou buď v původním dichlormethanovém extraktu, takže jsou přítomné v kapalině, nebo v nerozpustné tuhé látce při přepracování a potom se nalézají v tuhé látce. Určité produkty lze nalézt v obou fázích. Tyto fáze ukazuje tabulka 1
Každý vzorek se analyzuje způsobem LCMS a v každém případě se nalézá terčový ion. Tabulka 1 udává retenční čas každého produktu. Použité podmínky se popisují níže.
Sloupec: Mobilní fáze: 5μιη hypersil BDS C18 (100 x 2,1 mm). 0,1 M NH^OAc [pH 4,55]: acetonitril (gradient - viz níže).
Podmínky: 10 až 100 % acetonitrilu během 8 min
(Gradient) 100 % acetonitrilu po dobu 1 min. 100 až 10 % acetonitrilu během 2 min (Celková doba analýzy 11 min).
Průtok: 1 ml/min (bez štěpení v hmotnostním spektru).
Rozmezí vlnové délky: 250 až 320 nm
Injekční objem: 20 μΐ
Hmotnostní spektrometrie
Způsob: Ionizace: APCI11H. APcI +ve/-ve.
Hmotnostní rozmezí: 100 až 700 m/z.
Napětí kužele: 20.
• · ♦ · • · · ·
Způsobem podobným příkladům 54 až 101 reagují aminy popsané v tabulce 2 s ethylesterem kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]propionové s obdržením produktů popsaných v příkladech 102 až 146. Zpracování a podmínky analýzy jsou stejné jako v příkladech 54 až 101. V každém případě byl terčový ion nalezen způsobem LCMS.
Tabulka 1
Číslo aminu Název Fáze Ret. čas (min)
54 Ethanolamin tuhá 3,44
55 dl-2-Amino-l-propanol tuhá 3,58
56 1-Ami no-2-propanol tuhá 3,56
57 2-Methoxyethylami n kapalná 3,78
58 3-Ami no-1-propanol obě 3,50
59 (S)-(+)-2-Amino-l-propanol obě 3,58
60 (R)-(-)-l-Amino-2-propanol obě 3,56
61 N,N-Dimethylethylendiamin obě 3,31
62 (+/-)-2-Amino-l-butanol tuhá 3,77
63 l-Amino-2-butanol obě 3,77
64 3-Amino-l,2-propandiol tuhá 3,32
65 (S)-3-Amino-l,2-propandiol tuhá 3,32
66 (R)-3-Amino-l,2-propandiol tuhá 3,32
67 1-Methylpipera z in obě 3,28
68 N,N-Dimethyl-1,3-propandiamin kapalná 3,29
69 N2,N2-Dimethyl-1,2-propandiamin obě 3,37
70 l-Dimethylamino-2-propylamin kapalná 3,44
71 d1-2-Amino-3-methy1-1-butano1 tuhá 3,98
72 N-{2-[1-(N-Morfolin)-1-oxo]ethyl}
• · · · • · · ·
piperazin kapalná 3,56
73 2-Amino-2-methyl-1-propano1 obě 3,89
74 2-Amino-2-methyl-l,3-propandiol obě 3,49
75 2-(2-Aminoethoxy)ethanol obě 3,47
76 1-(2-Aminoethyl)pyrrolidin kapalná 3,40
77 N-Methylhomopiperazin kapalná 3,32
Připravené sloučeniny se popisují níže.
Číslo Název aminu
Fáze Ret. čas (min)
78 l-Amino-1-cyklopentanmethanol obě 4,16
79 2-Aminocyklohexanol tuhá 3,98
80 N,N-Diethylethylendiamin kapalná 3,44
81 N-(3-HydroxypropylJethylendiamin obě 3,24
82 2-((2-Aminoethyl)thio)ethanol obě 3,69
83 2—(2-Aminoethyl)pyridin kapalná 3,89
84 3-(2-Aminoethyl)pyridin kapalná 3,79
85 N-(3-Aminopropyl)imidazol kapalná 3,37
86 1-[2-(N-Morfolin)ethyl]piperazin kapalná 3,39
87 2-(Aminomethyl)-1-ethylpyrrolidin obě 3,48
88 1-(2-Aminoethyl)piperidin obě 3,49
89 1-Pyrrolidinpropanamin kapalná 3,37
90 (R)-(+)-2-Aminomethyl-1-ethylpyrrolidin obě 3,48
91 4-(2-AminoethylJmorfolin obě 3,39
92 3-Diethylaminopropylamin obě 3,43
93 N,N-Dimethylneopentandiamin obě 3,47
94 Ethyl-1-pipera z inkarboxy1at kapalná 4,34
95 2-(Aminomethyl)-2-ethyl-l,3-
• ·
1·£θ· -»·
-propandiol obě 3,69
96 1-(3-Aminopropyl)-2-pyrrolidinon obě 3,68
97 1-Piperidinpropylamin kapalná 3,46
98 4-(3-Aminopropyl)morfolin kapalná 3,33
99 N,N-Diisopropylethylendiamin kapalná 3,59
100 N,N-Bi s(3-aminopropy1)methylami n kapalná 3,03
101 Tris(2-aminoethyl)amin kapalná 3,01
Připravené sloučeniny se popisují níže.
Příklad 54
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-hydroxyethy1)acetamid
Příklad 55
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-hydroxyprop-2-yl)acetamid
Příklad 56
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-hydroxypropyl)acetamid
Příklad 57
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-methoxyethyl)acetamid
Příklad 58 • · · ·
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(3-hydroxypropy1)acetamid
Příklad 59 (S)-4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(l-hydroxyprop-2-yl)acetamid
Příklad 60 (R)-4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-hydroxypropyl)acetamid
Příklad 61
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2-(N,N-dimethylamino)ethyl]acetamid
Příklad 62
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(l-hydroxybut-2-yl)acetamid
Příklad 63
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-hydroxybuty1)acetamid
Příklad 64
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2,3-dihydroxypropyl)acetamid
1·7>2
Příklad 65 (S)-4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2,3-dihydroxypropyl)acetamid
Příklad 66 (R)-4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2,3-dihydroxypropyl)acetamid
Příklad 67
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N,N-(3-azapentamethylen)acetamid
Příklad 68
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-[3-(N,N-dimethylamino)propyl]acetamid
Příklad 69
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-[l-(N,N-dimethylamino)prop-2-yl]acetamid
Příklad 70
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-[2—(N,N-dimethylamino)propyl]acetamid
Příklad 71
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7• · · · • · 4 « ♦ ·
1ÍÍ3.
-yl-(l-hydroxy-3-methylbut-2-yl)acetamid
Příklad 72
7—{2—[4—(2-Morfolino-2-oxoethyl)piperazin-l-yl]-2-oxoethyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Příklad 73
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(l-hydroxy-3-methylprop-2-yl)acetamid
Příklad 74
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(1,3-dihydroxy-2-methylprop-2-yl)acetamid
Příklad 75
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2—(2-hydroxyethoxy)ethyl]acetamid
Příklad 76
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2-(pyrrolidin-l-yl)ethyl]acetamid
Příklad 77
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N,N-(3-azahexamethylen)acetamid ·*·· • « * • «
- 1Í44
Příklad 78
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[1-(hydroxymethyl)cyklopentyl]acetamid
Příklad 79
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-hydroxycyklohexyl)acetamid
Příklad 80
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2-(N,N-diethylamino)ethyl]acetamid
Příklad 81
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2-(3-hydroxypropylamino)ethyl]acetamid
Příklad 82
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2-(2-hydroxyethylthio)ethyl]acetamid
Příklad 83
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2-(pyrid-2-yl)ethyl]acetamid
Příklad 84
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7175
-yl-N-[2-(pyrid-3-yl)ethylJacetamid
Příklad 85
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d Jpyrimidin-7-yl-N-[3-(imidazol-l-yl)propylJacetamid
Příklad 86
7-{2-[4-(2-Morfolinoethyl)piperazin-l-ylJ-2-oxo-ethyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Příklad 87
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-7-y1-N-[N-ethylpyrrolidin-2-y1)methylacetamid
Příklad 88
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-7-yl-N-(2-piperidinoethyl)acetamid
Příklad 89
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-7-yl-N-[3-(pyrrolidin-l-yl)propylJacetamid
Příklad 90 (R)-4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-7-yl-N-(N-ethylpyrrolidin-2-yl)methylacetamid
Příklad 91
175' ·_···· ·· ···· ·· • · · · · · ·
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(2-morfolinoethyljacetamid
Příklad 92
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[3-(Ν,Ν-diethylamino)propyljacetamid
Příklad 93
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d jpyrimidin-7-yl-N-[3-(N,N-dimethylamino)-2,2-dimethylpropyl]acetamid
Příklad 94
7-[2-(4-Ethoxykarbonylpiperazin-l-yl)-2-oxoethyl] -5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-djpyrimidin-4-ylamin
Příklad 95
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[2,2-bis(hydroxymethyl)butyljacetamid
Příklad 96
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-djpyrimidin-7-yl-N-[3-(2-pyrrolidinon-l-yl)propyljacetamid
Příklad 97
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-djpyrimidin-7-yl-N-(3-piperidinopropyljacetamid
Příklad 98
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(3-morfolinopropyl)acetamid
Příklad 99
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-(3-hydroxy-l-methylprop-2-yl)acetamid
Příklad 100
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[3-(N-3-aminopropyl,N-methyl)aminopropyl]acetamid
Příklad 101
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-N-[N-bis(2-aminoethyl)aminoethyl]acetamid
178*.• · · ·
Tabulka 2
Číslo aminu Název Fáze Ret. čas (min)
102 Ethanolamin obě 3,68
103 dl-2-Amino-l-propanol obě 3,78
104 1-Amino-2-propanol obě 3,81
105 2-Methoxyethylamin obě 4,08
106 3-Amino-l-propanol obě 3,73
107 (S)-(+)-2-Amino-l-propanol obě 3,78
108 (R)-(-)-l-Amino-2-propanol kapalná 3,81
109 N,N-Dimethylethylendiamin kapalná 3,50
110 (+/“)-2-Amino-l-butanol obě 3,96
111 l-Amino-2-butanol obě 4,06
112 3-Amino-l,2-propandiol obě 3,52
113 (S)-3-Amino-l,2-propandiol obě 3,53
114 (R)-3-Amino-l,2-propandiol obě 3,53
115 N,N-Dimethyl-1,3-propandiamin kapalná 3,47
116 N2,N2-Dimethyl-1,2-propandiamin kapalná 3,57
117 l-Dimethylamino-2-propylamin kapalná 3,67
118 D1-2-Amino-3-methyl-1-butano1 obě 4,15
119 2-(2-Aminoethylamino)ethanol kapalná 3,40
120 2-Amino-2-methyl-l-propanol obě 4,17
121 2-Amino-2-methyl-l,3-propandiol obě 3,76
122 2-(2-Aminoethoxy)ethanol kapalná 3,71
123 l-(2-Aminoethyl)pyrrolidin obě 3,61
124 1-Amino-l-cyklopentanmethanol obě 4,48
125 2-Aminocyklohexanol obě 4,19
126 N rN-Diethylethylendiamin obě 3,68
127 N-(3-Hydroxypropyl)ethylendiamin obě 3,42
128 2-((2-Aminoethy1)thi o)ethanol kapalná 3,94
129 2-(2-Aminoethyl)pyridin kapalná 4,13
130 3-(2-Aminoethyl)pyridin obě 4,05
131 N—(3-Aminopropyl)imidazol kapalná 3,58
132 2-(2-Aminoethylamino)-1-methylpyrrolidin obě 3,56
133 2-(Aminomethyl)-1-ethylpyrrolidin obě 3,70
134 1-(2-Aminoethyl)piperidin obě 3,70
135 1-Pyrrolidinpropanamin obě 3,60
136 (R)-(+)-2-Aminomethy1-1-ethylpyrrolidin obě 3,70
137 4-(2-Aminoethyl)morfolin obě 3,63
138 3-Di ethylami nopropy1ami n obě 3,64
139 N,N-Dimethylneopentandiamin obě 3,68
140 2-(Aminomethyl)-2-ethyl-1,3-propandiol obě 3,94
141 1-(3-Aminopropyl)-2-pyrrolidinon kapalná 3,91
142 1-Piperidinpropylamin obě 3,70
143 4—(3-Aminopropyl)morfolin kapalná 3,53
144 N,N-Diisopropylethylendiamin kapalná 3,86
145 N,N-Bis(3-aminopropyl)methylamin tuhá 3,21
146 Tris(2-aminoethyl)amin obě 3,17
Příklad 102
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-hydroxyethyl)propanamid
Příklad 103 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(l-hydroxyprop-2-yl)propanamid
Příklad 104
18Q l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-7-yl]-N-(2-hydroxypropyl)propanamid
Příklad 105
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-methoxyethyl)propanamid
Příklad 106
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-y1]—N—(3-hydroxypropyl)propanamid
Příklad 107 (S)-1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(l-hydroxyprop-2-yl)propanamid
Příklad 108 (R)-1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-hydroxypropyl)propanamid
Příklad 109 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-N,N-dimethylamino)ethyl]propanamid
Příklad 110
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(l-hydroxybut-2-yl)propanamid
• ♦ · · · · • · · • · ·
Příklad 111 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-hydroxybutyl)propanamíd
Příklad 112
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2,3-dihydroxypropyl)propanamíd
Příklad 113 (S)-1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2,3-dihydroxypropyl)propanamid
Příklad 114 (R)-1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d Jpyrimidin-7-yl]-N-(2,3-dihydroxypropyl)propanamíd
Příklad 115 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-y1]-N-[3-(N,N-dimethylamino)propyl]propanamíd
Příklad 116 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(N,N-dimethylamino)propyl]propanamíd
Příklad 117 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin182 • · 4 · · · · · · « · * « • · · · ···«
-7-yl] —N— [l-(NřN-dimethylamino)prop-2-yl]propanamid
Příklad 118 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(1-hydroxy-3-methylbut-2-y1]propanamid
Příklad 119 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(2-hydroxyethylamino)ethyl]propanamid
Příklad 120
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(l-hydroxy-2-methylprop-2-yl)propanamid
Příklad 121
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(1,3-dihydroxy-2-methylprop-2-yl)propanamid
Příklad 122
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(2-hydroxyethoxy)ethyl]propanamid
Příklad 123
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d Jpyrimidin-7-yl]-N-[2-(pyrrolidin-l-yl)ethyl]propanamid
Příklad 124
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[1-(hydroxymethyl)cyklopentyl]propanamid
Příklad 125
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-hydroxycyklohexyl)propanamid
Příklad 126 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(N,N-diethylamino)ethyl]propanamid
Příklad 127
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(3-hydroxypropylamino)ethyl]propanamid
Příklad 128 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(2-hydroxyethylthio)ethyl]propanamid
Příklad 129 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(pyrid-2-yl)ethyl]propanamid
Příklad 130 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(pyrid-3-yl)ethyl]propanamid
18wf • * ♦ · ·· «··· ·· • · · · · « v ·
Příklad 131
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[3-(imidazol-l-yl)propyl]propanamid
Příklad 132 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(N-methylpyrrolidin-2-yl)ethyl]propanamid
Příklad 133 l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]—N—[(N-ethylpyrrolidin-2-yl)methyl]propanamid
Příklad 134
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-piperidinoethyl)propanamid
Příklad 135
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[3-(pyrrolidin-l-yl)propyl]propanamid
Příklad 136 (R)—1—[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[(N-ethylpyrrolidin-2-yl)methyl]propanamid
Příklad 137 • 4 • · · « • · * · · • · · 4 · »
l-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-morfolinoethyl)propanamid
Příklad 138
1—[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[3-(N,N-diethylamino)propyl]propanamid
Příklad 139
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]—N—[3-(N,N-dimethylamino)-2,2-dimethylpropyl]propanamid
Příklad 140
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2,2-bis(hydroxymethyl)butyl]propanamid
Příklad 141
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[3-(2-pyrrolidinon-l-yl)propyl]propanamid
Příklad 142
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(3-piperidinopropyl)propanamid
Příklad 143
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(3-morfolinopropyl)propanamid
186· ·— · ·· 9 ♦* ·♦··
Příklad 144
1-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[2-(N rN-di isopropylamino)ethylJpropanamid
Příklad 145
1-[Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[3-(N-3-aminopropyl,N-methyl)aminopropyl]propanamid
Příklad 146
1- [4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[N-bis(2-aminoethyl)aminoethyl]propanamid
Příklad 147
2— [4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-butyrolakton
a) 4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (1,0 g) se přidá ke směsi hydridu sodného (0,158 g 60% disperse v minerálním oleji) v dimethylformamidu (70 ml) za míchání pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 1 h a poté se po kapkách za míchání při teplotě 0 °C přidává a-brom-gama-butyrolakton (0,60 g) v dimethylformamidu (6 ml). Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h a poté se přidá voda (100 ml). Směs se extrahuje ethylacetatem. Spojené extrakty se vysuší a odpaří s obdržením 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJbutyrolaktonu ve
1δ7 .* ·
formě olejovité kapaliny, která se používá přímo v odstavci b).
b) N,N-Dimethylethylendiamin (5,0 ml) se přidá ke směsi produktu z a) (1,2 g) a pyridin-2-onu (50 mg) v toluenu (100 ml). Směs se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 2 h a poté se odpaří do sucha za sníženého tlaku. Zbytek se suspenduje v ethylacetatu a promyje vodou. Organické extrakty se poté extrahují 5M roztokem kyseliny chlorovodíkové (3 x 50 ml) a kyselé extrakty se promyjí ethylacetatem, poté se zalkalizují 6M roztokem hydroxidu sodného při teplotě 0 °C, poté se extrahují zpět ethylacetatem a poté dichlormethanem.
Spojené organické extrakty se vysuší, zfiltrují a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která krystaluje ze směsi ethylacetat/ether s obdržením 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-4-hydroxy-N-[2-(dimethylamino)ethyl]butyramidu o teplotě tání 178 až 179 °C.
Příklad 148
Ethylester kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]propionové
Hydrid sodný (120 mg, 60% disperse v minerálním oleji) se přidá ke směsi 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (906 mg) v suchém dimethylformamidu (30 ml) a směs se míchá pod atmosférou dusíku po dobu 30 min při teplotě okolí. Po kapkách se přidává injekční stříkačkou v průběhu 10 min roztok ethylesteru kyseliny 2-brompropionové (543 mg) v suchém dimethylformamidu (10 ml). Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 2 h a poté se
-.T88 • · · ·
ponechá stát po dobu 18 h. Směs se odpaří ve vakuu a zbytek se promyje vodou s obdržením tuhé látky, která se trituruje etherem a zfiltruje s obdržením ethylesteru kyseliny
2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJpropionové o teplotě tání 139 až 140 °C.
Příklad 149
N-(2-Dimethylaminoethyl)-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]propionamid
Směs ethylesteru kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yljpropionové (425 mg), Ν,Ν-dimethylethylendiaminu (2 ml) a methanolu (20 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 18 h s vyloučením přítomnosti oxidu uhličitého. Směs se chladí a filtruje, filtrát se zředí vodou (50 ml) a míchá s etherem. Směs se ponechá stát po dobu 18 h a vysrážená tuhá látka se získává filtrací, promyje se vodou a potom etherem a suší s obdržením N-(2-dimethylaminoethyl)-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]propionamidu o teplotě tání 163 až 164 °C.
Příklad 150
Ethylester kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]octové
Směs 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (906 mg), hydridu sodného (120 mg, 60% disperse v minerálním oleji) a suchého dimethylformamidu (30 ml) se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 30 min. Přidá se ethylester kyseliny bromoctové (0,5 g) v di• · · · · · *189 γ* • · • · · • · · · · ·
• · · ·
methylformamidu (10 ml) v průběhu 5 min při teplotě 0 až 5 °C za míchání. Směs se míchá po dobu 30 min při teplotě okolí a poté se ponechá stát po dobu 18 h. Směs se odpaří ve vakuu a zbytek se trituruje vodou a etherem. Obdržená tuhá látka se získává filtrací, promyje se vodou a poté etherem se získáním ethylesteru kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[ 2, 3-d] pyrimidin-7-yl] octové o teplotě tání 161 až 161,3 °C.
Příklady 151 až 156
Obecný způsob
Ethylester kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]octové (194 mg) se zahřívá na teplotu 62 °C a míchá s 10 molárními ekvivalenty příslušného aminu, jak se popisuje níže, v methanolu (12 ml) po dobu 18 h s obdržením následujících sloučenin.
Příklad 151
N-[2-Hydroxyethyl-l,1-di(hydroxymethy1)]—2—[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid, teplota tání 222 až 223 °C s rozkladem, z 2-hydroxyethyl-1,1-di(hydroxymethyl)ethylaminu.
Příklad 152
N-[2-Piperazin-l-yl)ethyl]-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid, teplota tání 138 až 140 °C z 2-(piperazin-l-yl)ethylaminu.
Příklad 153 • ·
N-(2-Morfolinoethyl)-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJacetamid, teplota tání 164 až 165 °C z 2-morfolinoethylaminu.
Příklad 154
N-[3-(1-Imidazol)propyl]-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid, teplota tání 170 až 171 °C z 3-(1-imidazolyl)propylaminu.
Příklad 155
N-(N-Ethylpyrrolidin-2-ylmethyl)-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid, teplota tání 122 až 122,5 °C z l-(N-ethylpyrrolidin-2-yl)methylaminu.
Příklad 156
N-[2-(2-Hydroxyethoxy)ethyl]-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid, teplota tání 145 až 147 °C z 2-(2-hydroxyethoxy)ethylaminu.
Příklad 157
Kyselina 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJpropionová
Směs ethylesteru kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]propionové (201 mg), vodného roztoku hydroxidu draselného (4 ml, 2 M roztoku) a methanolu (20 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 1 h.
• · · ·
Směs se odpaří za sníženého tlaku zhruba na 5 ml a poté se zředí vodou (30 ml). Směs se zfiltruje za horka a filtrát se ochladí a poté se okyseluje zředěnou kyselinou octovou tak dlouho, až se již netvoří další sraženina. Směs se zahřívá na vařiči tak dlouho, až se získaný gel přemění na jemně rozdělenou tuhou látku. Tato tuhá látka se sbírá filtrací s obdržením kyseliny 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidín-7-yl]propionové o teplotě tání 239,5 až 241 °C.
Příklad 158
Ethylester kyseliny 4-[4-amido-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]máselné
Směs 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (1,5 g) se rozpustí v dimethylformamidu (30 ml) a zpracuje hydridem sodným (0,22 g, 60% disperse v minerálním oleji) a poté ethylesterem kyseliny 4-brommáselné (1,08 g) v dimethylformamidu (15 ml) způsobem podobným způsobu příkladu 95 s obdržením ethylesteru kyseliny 4-[4-amido-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]máselné o teplotě tání 104 až 108 °C.
Příklad 159
Ethyl-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJkarboxamid
Způsobem podobným způsobu v příkladu 97 spolu reagují 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylamin (1,0 g), hydrid sodný (1,032 g, 60% disperse v minerálním oleji), 2-bromacetamid (0,55 g) a dimethylformamid (50 ml) s obdrže ním tuhé látky, která se překrystaluje z isopropanolu s obdržením ethyl-2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]karboxamidu o teplotě tání 232 až 233 °C.
Příklad 160
2-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methylpropionamid
4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (200 mg) se rozpustí v 1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2-(lH)-pyrimidinonu (1,5 ml) za míchání a přidá se hydroxid sodný (0,158 g) při teplotě okolí a směs se míchá po dobu 15 min. Přidá se 2-brom-2-methylpropanamid (0,5 g) a směs se míchá energicky po dobu 18 h při teplotě okolí pod atmosférou prostou vodních par a poté se přidá další 2-brom-2-methylpropanamid (0,15 g) a směs se míchá po dobu dalších 24 h. K reakční směsi se přidá voda (3 ml) spolu se zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (5M) pro úpravu pH na 0. Suspenze se přidá do vody (60 ml) a směs se ponechá stát po dobu 18 h při teplotě okolí. Tuhá látka se sbírá filtrací, promyje se dobře vodou a suší pod vysokým vakuem při teplotě 50 °C. Tuhá látka se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi. Příslušné frakce se sbírají a spojují a extrahují dichlormethanem. Odpaření dichlormethanu poskytuje 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methylpropionamid o teplotě tání 227 až 228 °C.
Příklad 161
4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-dimethylaminoethyl)butyramid
Směs ethylesteru kyseliny 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]máselné (100 mg) ve 30 ml methanolu se zahřívá pod zpětným chladičem s 0,6 ml 2-dimethylaminoethylaminu po dobu 18 h. Směs se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se zahřívá s 2-dimethylaminoethylaminem (10 ml) na parní lázni po dobu 18 h. Přebytečný amin se odstraní za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá voda a směs se zfiltruje s obdržením 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-dimethylaminoethyl)butyramidu.
Příklady 162, 163 a 164 se provedou způsobem podobným příkladu 108 reakcí téhož esteru s příslušným aminem.
Příklad 165
4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-[3-(l-imidazolyl)propyl]butyramid z 3-(1-imidazolyl)propylaminu.
Příklad 166
4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(2-morfolinoethyl)butyramid z 2-morfolinoethylaminu.
Příklad 167
4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N-(3-morfolinopropyl)butyramid z 3-morfolinoethylaminu.
Příprava výchozích látek • ·
• · · · ·
a) terč.Butylamin (15 ml) se přidá za míchání k roztoku 2-brom-4'-fenoxyacetofenonu [12,7 g připraveného bromací 4'-fenoxyacetofenonu podle Tetrahedron Letters, 34., 3177 (1993)] v propan-2-olu a směs se zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 3 h. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se koncentrovaná kyselina chlorovodíková (10 ml). Suspense se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h a tuhá látka se sbírá filtrací s obdržením 4'-fenoxy-2-(terč.butylamino)acetofenonhydrochloridu (3,75 g) o teplotě tání 210 až 212 °C.
1) 4'-Fenoxy-2-(terč.butylamino)acetofenonhydrochlorid (3,75 g) se přidá najednou k natrium-ethoxidu [připravenému rozpuštěním sodíku (93 mg) v ethanolu (50 ml)] a směs se míchá při teplotě 40 °C po dobu 30 min pod atmosférou dusíku.
2) V oddělené baňce se rozpustí sodík (331 mg) v ethanolu (50 ml) a přidá se malononitril (858 mg). Roztok se míchá při teplotě okolí po dobu 5 min a poté se k tomuto roztoku přidá roztok
4'-fenoxy-2-(terč.butylamino)acetofenonu obdržený v části (1), najednou, s vyloučením sraženiny chloridu sodného. Výsledná směs se zahřívá na teplotu 50 °C po dobu 3 h a poté na teplotu 80 °C po dobu 2 h. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a výsledná olejovitá kapalina se rozdělí mezi vodu a ethylacetat. Organická fáze se oddělí, vysuší a odpaří s obdržením černé tuhé látky. Tato tuhá látka se rozpustí v horkém ethanolu a trituruje s vodou, filtruje a suší s obdržením 2-amino-3-kyano-4-(4-fenoxyfenyl)-1-(terč.bu• · « ·
tyl)pyrrolu.
b) Směs 2-amino-3-kyano-4-(4-fenoxyfenyl)-1-(terč.butyljpyrrolu (1,9 g), formamidu (30 ml) a 4-dimethylaminopyridinu (10 mg) se zahřívá na teplotu 180 °C po dobu 6 h. Směs se ochladí na teplotu okolí a přidá se voda pro vysrážení tmavé tuhé látky. Tato tuhá látka se sbírá filtrací, promývá vodou, povaří v ethanolu a nerozpustná látka se získává filtrací za horka a suší. Tuhá látka se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi dichlormethan/propan-2-ol/ethanol, 98:1:1, jako mobilní fáze s obdržením 7-terc.butyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(terc.butyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu) o teplotě tání 157 až 158 °C.
XH NMR (d6 DMSO) δ 8,15 (1H, s), 7,50-7,35 (4H, m), 7,30 (1H, s), 7,15 (1H, t), 7,10 (4H, m), 6,05 (2H, široký s), 1,75 (9H, s).
c) Směs 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(terč.butyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (5,8 g),ledové kyseliny octové (55 ml) a kyseliny bromovodíkové (55 ml 48% roztoku) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 18 h pod atmosférou dusíku. Směs se ponechá vychladit a tuhá látka se oddělí filtrací. Tato tuhá látka se promyje methanolem a poté etherem s obdržením 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinhydrobromidu o teplotě tání 288 až 292 °C. Hydrobromidová sůl se převede na volnou bázi zahříváním se zředěným roztokem hydroxidu sodného (100 ml 5% rozto-
ku hmotnost/objemem) a ethanolu (60 ml) za míchání s odstraněním ethanolu destilací. Směs se vychladí a tuhá látka se sbírá filtrací a dobře promyje vodou s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 272 °C.
Příklad 168
7-Cyklopentansulfonyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Hydrid sodný (0,132 g 60% disperse v minerálním oleji) se přidá k roztoku 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (1,0 g) v suchém dimethylformamidu (30 ml) za míchání pod atmosférou dusíku. Směs se míchá po dobu 30 min a poté se po kapkách přidává cyklopentansulfonylchlorid [0,558 g,připravený podle popisu v J.O.C., 17, 1529-1533 (1952)] v suchém dimethylformamidu (5 ml). Směs se ponechá stát po dobu 72 h a poté se odpaří ve vakuu. Zbytek se trituruje vodou a zfiltruje s obdržením tuhé látky, která se dobře promyje vodou, poté se míchá s ethylacetatem a zfiltruje. Filtrát se purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím ethylacetatu jako mobilní fáze. Příslušné frakce se sbírají a odpaří s obdržením 7-cyklopentansulfonyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 188 až 188,5 °C.
Příklad 169
5-(4-fenoxyfenyl)-7-(8-ftalimidooktyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Hydrid sodný (120 mg, 60% disperse v minerálním • · · ·
oleji) se přidává k roztoku 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaininu (906 mg) v dimethylformamidu (30 ml) za míchání pod atmosférou dusíku. Tato směs se míchá po dobu 30 min pod atmosférou dusíku a poté se přidá N-(8-bromoktyl)ftalimid (1,4 g) v dimethylformamidu (5 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 18 h pod atmosférou dusíku a poté se rozdělí mezi vodu a ethylacetat. Ethylacetatová vrstva se oddělí a purifikuje mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím ethylacetatu jako mobilní fáze s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(8-ftalimidooktyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 85 až 86 °C.
Příklad 170
Dihydrát 7-(8-aminooktyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochloridu
Směs 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(8-ftalimidooktyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (1,0 g), hydrazinhydrátu (1,0 ml) a ethanolu (40 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 2 h s vyvíjením oxidu uhličitého. Směs se ochlazuje v průběhu 18 h a vysrážená tuhá látka se oddělí filtrací a odloží do odpadu. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v ethylacetatu, vysuší a zpracuje koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou v isopropanolu, která se přidává po kapkách tak dlouho, až nenastává další srážení. Směs se ponechá stát přes noc, poté se supernatant oddělí dekantací a polotuhý zbytek se trituruje ethylacetatem s obdržením dihydrátu 7-(8-aminooktyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochloridu o teplotě tání 120 °C.
• · • · · · • · · ·
Příklad 171
N-{2-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]ethyl}ftalimid
Způsobem podobným příkladu 468, avšak s dalším zahříváním při teplotě 90 °C po dobu 3 h reaguje 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin s
2-bromethylftalimidem s obdržením N-{2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]ethyl}ftalimidu o teplotě tání 111 až 112 °C.
Příklad 172
7-(2-Aminoethyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminhydrochlorid
Způsobem podobným příkladu 469 se produkt z předchozího příkladu zpracuje hydrazinhydrátem s obdržením 7-(2-aminoethyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminhydrochloridu o teplotě tání 284 až 285 °C.
Příklad 173
7-Isobutyryl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Isobutyrylchlorid (1,8 g) se přidává po kapkách ke směsi 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (4,32 g), suchého dimethylformamidu (200 ml) a suchého pyridinu (2 ml) za míchání pod atmosférou dusíku při teplotě 20 °C. Směs se míchá při teplotě okolí po dobu lha odpaří se ve vakuu. Zbytek se rozdělí, vysuší a odpaří a obdržený zbytek se překrystaluje s toluenem s poskytnutím 7-isobutyryl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 160,5 až 161 °C.
Příklad 174
5-(4-fenoxyfenyl)-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dekan-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Hydrid sodný (0,26 g, 60% disperse v minerálním oleji) se přidá ke směsi 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (1,94 g) v dimethylformamidu (50 ml) při teplotě okolí za míchání. Směs se míchá do skončení vyvíjení vodíku a poté se přidá 8-tosyloxy-l,4-dioxaspirol[4,5]dekan [2,0 g, připravený podle popisu v US patentu č. 4 360 531 z l,4-dioxaspirol[4,5]dekan-8-onu (který se připraví podle J. Med. Chem., 1992. 2246)]. Směs se zahřívá na teplotu 120 °C po dobu 5 h pod atmosférou dusíku, ochladí na teplotu okolí, přidá se voda a extrahuje se ethylacetatem s obdržením zbytku, který se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím ethylacetatu a poté ethylacetatu obsahujícího zvyšující se množství methanolu až do 6 % s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(l,4-dioxaspiro[4,5]dekan-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 193 až 194 °C.
Příklad 175
4— [ 4-amino-5- (4-f enoxyfenyl) -7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-7.-yl]cyklohexanon
Produkt z předchozího příkladu (500 mg), aceton (20 • · « «» «
20Í) • « ♦ · * • » · ·* »
ml) a 3M roztok kyseliny chlorovodíkové (10 ml) se míchá pod atmosférou dusíku při teplotě okolí po dobu 20 min. Směs se poté zahřívá na 60 °C po dobu lha poté se aceton odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se zalkalizuje vodným 5M roztokem hydroxidu sodného a poté se extrahuje ethylacetatem s obdržením tuhé látky, která se trituruje diethyletherem a filtruje s obdržením 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexanonu o teplotě tání 252 až 254 °C.
Příklad 176 a 177 cis-5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(4-morfolinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin a trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-morfolinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Natrium-triacetoxyborohydrid (42 mg) a ledová kyselina octová (18 mg) se přidají k produktu z předchozího příkladu (120 mg) a morfolinu (31 mg) v 1,2-dichlorethanu. Směs se míchá při teplotě 40 °C po dobu 2 h a poté se přidá další podíl morfolinu (0,15 g) a natrium-triacetoxyborohydridu (0,21 g). Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 20 h a poté se přidá nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Směs se zfiltruje kartridží EMPOREK a filtrát se extrahuje 3M roztokem kyseliny chlorovodíkové. Kyselé extrakty se zalkalizují 5M roztokem hydroxidu sodného a extrahují dichlormethanem s obdržením zbytku, který se čistí chromatografií na silikagelu s obdržením cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-morfolinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu a trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-morfolinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu.
·· ··<««
Příklad 178 a 179 cis-7-(4-N-Ethoxykarbonyl)piperazin-l-ylcyklohexyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin a trans7-(4-N-ethoxykarbonyl)piperazin-l-ylcyklohexyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Způsobem podobným předchozímu příkladu reaguje
4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexanon (0,4 g z 1,0 g látky o čistotě 40 %) a
1- ethoxykarbonylpiperidin (158 mg) spolu za přítomnosti natrium-triacetoxyborohydridu (296 mg) v dichlormethanu (15 ml) obsahujícím ledovou kyselinu octovou (60 mg) s obdržením po zpracování a chromatografii cis-7-(4-N-ethoxykarbonyl)piperazin-l-ylcyklohexyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu a trans-7-(4-N-ethoxykarbonyl)piperazin-l-ylcyklohexyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu.
Příklad 180
2- [4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]pyridin-3-karbonitril
5-(4-Fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin (906 mg) reaguje s 2-chlornikotinonitrilem (510 mg) za přítomnosti hydridu sodného (150 mg) v dimethylformamidu (30 ml) při teplotě 100 °C v průběhu 5 h s obdržením 2-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]pyridin-3-karbonitrilu o teplotě tání 242 až 242,5 °C po zpracování.
Příklad 181
Mj A · ·“· • · · · · · • · ·
• · · · · · • · · • · • ·
7-[3-(Aminomethyl)pyrid-2-yl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-yl ]amindimaleat
Produkt z předchozího příkladu (468 mg), ethanol nasycený amoniakem (200 ml) a Raneyův1* nikl (2 ml) se třepe pod atomosférou vodíku při tlaku 2,6 MPa a teplotě 80 °C po dobu 6 h a poté se ponechá stát při teplotě okolí po dobu 68 h. Směs se zfiltruje a zbytek se dobře promyje ethanolem. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyjme ethylacetatem a zfiltruje. Po dílech se k filtrátu přidává kyselina maleinová (135 mg) rozpuštěná v ethylacetatu (20 ml) tak dlouho, až se již neobjevuje další sraženina. Směs se ohřeje a dekantuje z malého zbytkového množství kaučukovité hmoty. Tato hmota se dále zahřívá s ethylacetatem a dekantuje. Spojené ethylacetatové extrakty se sbírají a vysrážená tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením 7-[3-(aminomethyl)pyrid-2-yl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindimaleatu o teplotě tání 131 až 134 °C.
Příklad 182
3-[4-(Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-8-methyl-8-azabicyklo[3.2.1]oktan
Hydrid sodný (168 mg, 60% disperse v minerálním oleji) se přidá ke směsi 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (770 mg) v dimethylformamidu (30 ml). Za míchání se přidává 3-mesyloxy-8-methyl-8-azabicyklo- [3.2.1]oktan [900 mg připravený podle popisu v J.A.C.S., 80, 4679 (1958)] v dimethylformamidu (10 ml) pod atmosférou dusíku. Směs se zahřívá na teplotu 75 °C po dobu • · · · • · · ·
?í>.3. -7.· • · · • · · ·
h (a ponechá se stát při teplotě okolí po dobu 7 d) · Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá voda a směs se extrahuje ethylacetatem s obdržením zbytku, který se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi ethylacetat/methanol (50:50) jako mobilní fáze pro odstranění výchozích látek a poté směsí ethylacetat/methanol/triethylamin (5:5:1) jako mobilní fáze pro eluci produktu. Příslušné frakce se spojí a odpaří s obdržením tuhé látky, která se trituruje s etherem a filtruje s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-8-methyl-8-azabicyklo[3.2.1Joktanu o teplotě tání 238 až 250 °C.
Příklady 183 a 184 cis-7-(N-Methylhomopiperazin-1-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin a trans7-(4-N-methylhomopiperazin-l-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Způsobem podobným příkladům 176 a 177 spolu reagují
4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexanon (0,4 g z 1,0 g látky o čistotě 40 %), N-methylhomopiperazin (114 mg), natrium-triacetoxyborohydrid (296 mg), ledová kyselina octová (60 mg) a 1,2-dichlorethan (15 ml). Po filtraci se filtrát odpaří a zbytek se čistí chromatografií na silikaglu s obdržením cis-7-(N-methylhomopiperazin-l-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu a trans-7-(4-N-methylhomopiperazin-l-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu.
Příklady 185 a 186 • · · ·
cis-7-(N-Methylpiperazin-1-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin a trans-7-(4-N-methylpiperazin-l-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Způsobem podobným předchozímu příkladu reaguje N-methylpiperazin (100 mg) se stejnými množstvími cyklohexanonového derivátu a dalšími činidly s obdržením cis-7-(N-methylpiperazin-1-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu a trans-7-(4-N-methylpiperazin-l-ylcyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu
Příklad 187
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d Jpyrimidin-7-yl]cyklopentan-l-on
Směs 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentan-l-olu (100 mg), aktivovaného oxidu manganičitého (500 mg) a dichlormethanu (100 ml) se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h s obdržením po filtraci roztoku 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentan-l-onu v dichlormethanu, který se použije v následujícím příkladu.
Příklad 188 cis-7-(3-Morfolinocyklopent-l-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin a trans-7-(3-morfolinocyklopent-l-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin • · ···· ·· · · · ·
Morfolin (45 mg) se přidá k roztoku obdrženému v předchozím příkladu s následným přidáním natrium-triacetoxyborohydridu (151 mg) a ledové kyseliny octové (47 mg). Směs se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 18 h a v průběhu této doby se odpaří dichlormethan. Přidá se tetrahydrofuran (100 ml) a směs se míchá po dobu dalších 8 h. Směs se zpracuje s obdržením cis-7-(3-morfolinocyklopent-l-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu a trans-7-(3-morfolinocyklopent-l-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu
Příklad 189
3-(4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamathydrochlorid
a) K roztoku 3-(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-7-yl)cyklopentanolu (20 mg) v dichlormethanu (1 ml) se při teplotě 0 °C přidá N-methylmorfolin (7 ml) a směs se míchá po dobu 20 min. Odstraní se chladící lázeň a přidá se
4-nitrofenyl- chlorformiat (12,5 mg) a výsledná směs se míchá přes noc při teplotě okolí. Směs se zředí dichlormethanem, promyje vodou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický roztok se vysuší síranem horečnatým a odpaří s obdržením surového produktu.
b) Surový produkt z odstavce a) v dichlormethanu (2 ml) se přidá k 2-morfolinoethylaminu (0,2 ml) a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Směs se zředí • · 4 4 4 4 ·
2£6.
ethylacetatem a promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organické vrstvy se vysuší, zfiltrují a odpaří s obdržením surového produktu, který se čistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatograf ií s obdržením 3-(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamatu.
c) Produkt z odstavce b) se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a roztokem se probublává plynný chlorovodík po dobu 2 min. Sraženina se vytváří za míchání po dobu dalších 10 min. Rozpouštědlo se odpaří a přidá se voda pro rozpuštění tuhé látky. Lyofilizace poskytuje 3-(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamathydrochlorid ve formě tuhé látky.
Příklad 190
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)cyklopentyl-2-aminoacetathydrochlorid
a) 3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]- pyrimidin-7-yl]cyklopentanol (50 mg, 0,129 mmol) a N-terc.butoxykarbonylglycin (34 mg, 0,194 mmol) se smísí s Ν,Ν-dimethylformamidem (1 ml). Přidá se l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarboimidhydrochlorid (31 mg, 0,155 mmol) a 4-dimethylaminopyridin (16 mg, 0,129 mmol). Výsledná směs se míchá pod atmosférou dusíku při teplotě okolí po dobu 24 h. Reakční směs se vylije do ledové vody a extrahuje ethylacetatem. Organické extrakty se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořeč·♦ ·*·· «· ·««· ·4 • Í
2.Q7.
natým, zfiltrují a odpaří. Tuhá látka se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím ethylacetatu jako mobilní fáze s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-2-[(terč.butoxykarbonyl)amino]acetatu. Struktura se ověří prostřednictvím XH NMR.
b) 3—[4—Amino—5—(4-fenoxyfenyl)—7H—pyrrolo[2,3—djpyrimi— din-7-yl]cyklopentyl-2-[(terč.butoxykarbonyl)amino]acetat (39 mg, 0,072 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,5 ml). Směsí se ponechá procházet plynný chlorovodík po dobu 1 min. Baňka se uzavře a roztok se míchá po dobu dalších 30 min. Přidá se diethylether a vytvoří se sraženina. Tuhá látka se sbírá filtrací s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-2-aminoacetathydrochloridu. Struktura se ověří pomocí XH NMR a LC/MS (MH+ = 444).
Příklad 191
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-(2S)-2-amino-3-methylbutanoathydrochlorid
a) Anhydrid kyseliny (2S)-l-[(terč.butoxykarbonyl)- amino]-2-methylbutanové a 2,5-dioxo-2,5-dihydro-ΙΗ-1-pyrrolkarboxylové (114 mg, 0,362 mmol) se přidá k roztoku 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentanolu (66 mg, 0,171 mmol) v dichlormethanu (1 ml). Výsledná směs se míchá pod atmosférou dusíku při teplotě okolí po dobu 24 h. Reakční směs se zředí ethylacetatem a promyje, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Tuhá látka se vyčistí mžikovou sloupcovou • * ♦ · w · · «· • « · · « » · • · · · · ···« — 2€?8·-··* *··* · ’»·’· chromatografií na silikagelu s použitím ethylacetatu jako mobilní fáze s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-(2S)-2-[(terč.butoxykarbonyl)amino]-3-methylbutanoatu. Struktura se ověří pomocí XH NMR a LC/MS (MH+ = 586).
b) 3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyri- midin-7-yl]cyklopentyl-(2S)-2-[(terč.butoxykarbonyl ) amino ]-3-methylbutanoat (35 mg, 0,060 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,5 ml). Roztokem se ponechá procházet plynný chlorovodík v průběhu 5 min. Baňka se uzavře a roztok se míchá po dobu dalších 30 min. Přidá se diethylether a vytvoří se sraženina.
Tuhá látka se sbírá filtrací s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-(2S)-2-amino-3-methylbutanoathydrochloridu. Struktura se ověří pomocí XH NMR a LC/MS (ΜΗ1· = 486) .
Příklad 192
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-N-(2-morfolinoethylJkarbamathydrochlorid
a) N-Methylmorfolin (0,007 ml, 0,062 mmol) se přidává po kapkách k roztoku 4-nitrofenylchlorformiatu (12,5 mg, 0,062 mmol) v dichlormethanu (1 ml) za míchání pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C. Po 20 min se odstraní ledová vodní lázeň a směs se ponechá ohřívat na teplotu okolí. Přidá se 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentanol (20 mg, 0,052 mmol) a výsledný roztok se míchá po
209.« • ·· · · • · ·· ·· ···· • · · · · • · · · ·
dobu 24 h. Reakční směs se zředí dichlormethanem a promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-(4-nitrofenyl)karbonátu. Struktura se ověří pomocí XH NM.
b) 3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-(4-nitrofenyl)karbonat (0,052 mmol) v dichlormethanu (1 ml) se přidá k 2-morfolinoethylaminu (0,2 ml). Výsledná směs se míchá pod atmosférou dusíku při teplotě okolí po dobu 24 h. Reakční směs se zředí ethylacetatem a promyje, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Tuhá látka se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-N-
-(2-morfolinoethyl)karbamatu. Struktura se ověří pomocí ΧΗ NMR a LC/MS (MH* = 543).
c) 3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamat (10 mg, 0,018 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,5 ml). Ponechá se procházet plynný chlorovodík po dobu 2 min a vytváří se sraženina. Baňka se uzavře a roztok se míchá po dobu dalších 10 min. Tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyf enyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-N- (2-morfolinoethyl)karbamathydrochloridu.
Struktura se ověří pomocí 1H NMR a LC/MS (MH* = 543).
Příprava výchozích látek • · • · · · * ·
- 2ΐσ·**.....
a) terc.Butylamin (15 ml) se přidává za míchání k roztoku 2-brom-4'-fenoxyacetofenonu (12,7 g), připravenému bromací 4’-fenoxyacetofenonu podle Tetrahedron Letters, 34, 3177 (1993) v propan-2-olu a směs se zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 3 h. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se koncentrovaná kyselina chlorovodíková (10 ml). Suspense se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h a tuhá látka se sbírá filtrací s obdržením 4’-fenoxy-2-(terc.butylamino)acetofenonhydrochloridu (3,75 g) o teplotě tání 210 až 212 °C.
b) (1) 4’-Fenoxy-2-(terc.butylamino)acetofenonhydro- chlorid (3,75 g) se přidá najednou k natrium-ethoxidu připravenému rozpuštěním sodíku (93 mg) v ethanolu (50 ml) a směs se míchá při teplotě 40 °C po dobu 30 min pod atmosférou dusíku.
(2) Ve zvláštní baňce se rozpustí sodík (331 mg) v ethanolu (50 ml) a přidá se malononitril (858 mg). Roztok se míchá při teplotě okolí po dobu 5 min a poté se k němu přidá roztok 4'-fenoxy-2-(terc.butylamino)acetofenonu obdržený v části (1) najednou a přitom se vylučuje vysrážený chlorid sodný. Výsledná směs se zahřívá na teplotu 50 °C po dobu 3 h a poté na 80 °C po dobu 2 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a výsledná olejovitá kapalina se rozdělí mezi vodu a ethylacetat. Organická fáze se oddělí, vysuší a odpaří s obdržením černé tuhé látky. Tato tuhá látka se rozpustí v horkém ethanolu a trituruje se vodou, zfiltruje a vysuší s obdržením 2-ami• · · · · · ···· ·· • · · · ···· • · · · · · ·
211.ίτ ··· · · · ·· ··· no-3-kyano-4-(4-fenoxyfenyl)-1-(terč.butyl)pyrrolu.
c) Směs 2-amino-3-kyano-4-(4-fenoxyfenyl)-1-(terč.butyl)pyrrolu (1,9 g), formamidu (30 ml) a 4-dimethylaminopyridinu (10 mg) se zahřívá na teplotu 180 °C po dobu 6 h. Směs se ochladí na teplotu okolí a přidá se voda s vysrážením tmavé tuhé látky. Tato tuhá látka se sbírá filtrací, promývá vodou, vaří v ethanolu a nerozpustný materiál se sbírá filtrací za horka a suší. Tato tuhá látka se čistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií na sloupci silikagelu s použitím směsi dichlormethan/propan-2-ol/ethanol, 98:1:1 jako mobilní fáze s obdržením 7-terc.butyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu o teplotě tání 157 až 158 °C.
XH NMR (d6 DMSO) 5 8,15 (1H, s), 7,50-7,35 (4H, m), 7,30 (1H, s), 7,15 (1H, t), 7,10 (4H, m), 6,05 (2H, široký s), 1,75 (9H, s).
d) Směs 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(terc.butyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (5,8 g), ledové kyseliny octové (55ml) a kyseliny bromovodíkové (55 ml 48% roztoku) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 18 h pod atmosférou dusíku. Směs se ponechá vychladnout a tuhá látka se sbírá filtrací. Tato tuhá látka se promyje methanolem a poté etherem s obdržením 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinhydrobromidu o teplotě tání 288 až 292 °C. Tento hydrobromid se převede na volnou bázi zahříváním se zředěným roztokem hydroxidu sodného (100 ml 5% roztoku, hm./obj.) a s ethanolem (60 ml) za míchání a oddestilování et • · • · · · hanolu. Směs se ochladí a tuhá látka se sbírá filtrací a dobře promývá vodou s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu.
e) Směs 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (600 mg), a tetrakis(trifenylfosfin)palladia (40 ml) a suchého dimethylsulfoxidu (30 ml) se míchá pod atmosférou dusíku v ledové/vodní lázni a poté se přidává injekční stříkačkou pod atmosférou dusíku při teplotě 0 °C roztok cyklopentadienmonoepoxidu (200 mg) v tetrahydrofuranu (10 ml). Směs se míchá při teplotě okolí (za nepřístupu světla) po dobu 66 h a poté se tetrahydrofuran odstraní za sníženého tlaku a ke zbytku se přidá voda. Směs se ponechá stát po dobu 18 h a poté se extrahuje ethylacetatem s obdržením zbytku, který se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi ethylacetat/průmyslový methylovaný alkohol 9:1 jako mobilní fáze s obdržením 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopent-2-enolu jako olejovité kapaliny. Struktura se ověří pomocí XH NMR a hmotnostních spekter.
f) 4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopent-2-enol (110 mg) se hydrogenuje v ethanolu (20 ml) plynným vodíkem za atmosférického tlaku s použitím 10% palladia na aktivním uhlí (50 mg) jako katalyzátoru. Katalyzátor se odstraní filtrací a filtrát se odpaří s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentanolu jako olejovité kapaliny. Struktura se ověří pomocí NMR a hmotnostního spektra.
213··*·
Příklad 193
Cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
K míchané suspensi 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinyl-7-yl]cyklohexanonu (2,34 g, 5,9 mmol) v 1,2-dichlorethanu (250 ml) se přidá pod atmosférou dusíku pyrrolidin (1,25 g, 17,6 mmol) a ledová kyselina octová (1,00 ml, 17,6 mmol) a výsledná směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min. Najednou se přidá natrium-triacetoxyborohydrid (1,87 g, 8,8 mmol) a výsledná směs se míchá po dobu 70 h. Směs se extrahuje 2M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové (2 x 200 ml). Spojené extrakty se promyjí dichlormethanem (300 ml), zalkalizují 12,5M vodným roztokem hydroxidu sodného a extrahují dichlormethanem (3 x 200 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a vyčistí chromatografií na koloně Biotage 40S s použitím směsi ethylacetat/triethylamin (95:5) a ethylacétat/triethylamin/methanol (85:10:5) jako mobilní fáze pro získání cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu jako bělavé látky (0,65 g, 1,4 mmol) o teplotě tání 101 až 104 °C, LC/MS Hypersil BDS cl8 (100 x 2,1 mm) 0,1M octan amonný/acetonitril, 10 až 100 % acetonitrilu v průběhu 8 min, MH* 454, tr = 3,56 min a trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl- aminu ve formě bělavé látky (0,93 g, 2,1 mmol), teplota tání 183 až 185 °C, LC/MS [Hypersil BDS C18 (100 x 2,1 mm) 0,lM ammoniumacetat/acetonitril, 10 až 100 % acetonitrilu v prů• ··· · · ···· ·· • · · · · · ·
214··»·' běhu 8 min], ΜΗ-*· 454, t = 3,68 min.
Příklad 194
Cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminhydrochlorid
Trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
K míchané suspensi 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJcyklohexanonu (2,34 g, 5,9 mmol) v 1,2-dichlorethanu (250 ml) se pod atmosférou dusíku přidá piperidin (1,50 g, 17,6 mmol) a ledová kyselina octová (1,00 ml, 17,6 mmol) a výsledná směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min. Přidá se najednou natrium-triacetoxyborohydrid (1,87 g, 8,8 mmol) a výsledná směs se míchá po dobu 70 h. Směs se extrahuje 2M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové (2 x 200 ml). Spojené extrakty se promyjí dichlormethanem (300 ml), zalkalizují 12,5M vodným roztokem hydroxidu sodného a extrahují dichlormethanem (3 x 200 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a vyčistí chromatografií na sloupci Biotage 40S s použitím směsi ethylacetat/triethylamin (95:5) jako mobilní fáze s obdržením cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (0,23 g) ve formě čiré olejovité kapaliny, LC/MS: Hypersil BDS cl8 (100 x 2,1 mm) 0,lM octan amonný/acetonitril, 10 až 100% acetonitrilu v průběhu 8 min, ΜΗ* 468, t = 3,67 min a trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu ve formě bělavé tuhé látky (193 mg, 0,4 mmol), teplota tání 192 až 195 °C, LC/MS: Hypersil BDS cl8 (100 x 2,1 mm) 0,lM octan amonný/ • · «
215.^-.
• ·
• *
/acetonitril, 10 až 100% acetonitrilu v průběhu 8 min, MH* 468, t =3,71 min.
Příklad 195
Cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin se rozpustí v ethylacetatu (50 ml), zředí diethyletherem (50 ml) a zpracuje 1M roztokem chlorovodíku v diethyletheru, který se přidává tak dlouho až se již neobjevuje další sraženina. Výsledná tuhá látka se oddělí a překrystaluje z absolutního ethanolu s obdržením cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminhydrochloridu ve formě bezbarvé kapaliny (75 mg, 0,2 mmol) o teplotě tání 185 až 189 °C
Příklad 196
Trans-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
Cis-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
K míchanému roztoku 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexanonu (3,24 g, 8,1 mmol) v dichlormethanu (1000 ml) se pod atmosférou dusíku přidá N-methylpiperazin (1,20 g, 12,0 mmol) a ledová kyselina octová (0,69 ml, 12,0 mmol) a výsledný roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 min. Najednou se přidá natrium-triacetoxyborohydrid (1,70 g, 8,0 mmol) a výsledný roztok se míchá po dobu 6 h. Přidávání se opakuje stejným způsobem a výsledný roztok se míchá po dobu 70 h. Tento roz-
tok se extrahuje 2M vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové (2 x 300 ml). Spojené extrakty se promyjí dichlormethanem (300 ml), zalkalizují se vodným roztokem hydroxidu amonného (0,880 g/cm3) a extrahují ethylacetatem (3 x 250 ml). Spojené extrakty se promyjí nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a vyčistí chromatografií na sloupci Biotage 40M s použitím směsi ethylacetat/methanol/triethyl- amin (8:1:1) jako mobilní fáze s obdržením cis-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]- pyrimidin-4-ylaminu jako bělavé tuhé látky (220 mg, 0,5 mmol), teplota tání 180 až 182 °C, LC/MS: Hypersil BDS cl8 (100 x 2,1 mm) 0,lM octan amonný/acetonitril, 10 až 100% acetonitrilu v průběhu 8 min, ΜΗ-1· 428, t = 3,43 min.
Kolona se promyje směsí ethylacetat/methanol/triethylamin (4:1:1, 500 ml) a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu (200 ml) a vyčistí se chromatografií na sloupci Biotage 40M s použitím směsi dichlormethan/methanol (9:1 až 7:3) s obdržením trans-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu ve formě bělavé tuhé látky (320 mg, 0,75 mmol), teplota tání 207,5 až 210 °C, LC/MS: Hypersil BDS cl8 (100 x 2,1 mm) 0,lM octan amonný/ /acetonitril, 10 až 100% acetonitrilu v průběhu 8 min, MH* 428, t =3,48 min.
x~
R-(+)-4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)]-7-(3-tetrahydrofuryl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin.
Příklad 197 • 4 «···
λ
4-{(S)-Tetrahydrofuran-3-yl}toluensulfonat
K roztoku 4-(S)-hydroxytetrahydrofuranu (2,0 g, 23 mmol) v pyridinu (40 ml) se při teplotě 0 °C přidává po částech tosylchlorid (4,8 g, 25 mmol). Roztok se míchá při teplotě 0 °C po dobu lha poté při teplotě místnosti přes noc. Pyridin se odpaří ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetat a nasycený vodný roztok kyseliny citrónové (200 ml každého prostředí). Vodná vrstva se extrahuje ethylacetatem (2 x 200 ml) a spojené organické podíly se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří se získáním olejovité kapaliny (4,5 g, 85 %).
XH NMR (CDC13, 250 MHz): 7,78 (2H, d), 7,35 (2H, d), 5,12 (1H, m), 3,76-3,93 (4H, m), 2,45 (3H, s), 2,01-2,20 (2H, m).
K míchané suspenzi 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (4,83 g, 16 mmol) v N,N-dimethylformamidu (80 ml) pod atmosférou dusíku se přidá 60% hydrid sodný v minerálním oleji (0,75 g, 10 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min. Výsledný tmavý roztok se zpracuje roztokem 4-{(S)-tetrahydrofuran-3-yl·}toluensulfonatu (4,20 g, 18 mmol) v N,N-dimethylformamidu (20 ml) v alikvotech po 2 ml. Výsledný roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min, poté při teplotě 95 °C po dobu 18 h. Roztok se ponechá ochladit na teplotu okolí a poté se vylije na led s vodou (200 ml). Vodná fáze se extrahuje ethylacetatem (3 x 200 ml). Spojené organické extrakty se promyjí vodou (4 x 150 ml), vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se zahřívá s dichlormethanem (1000 ml) do rozpuštění, ochladí na teplotu okolí a vyčistí chromatografií na sloupci Biotage 40M • · · · • · • · • · · · • ·
s použitím směsi ethylacetat/triethylamin 95:5 a poté ethylacetat/triethylamin/methanol (90:5:5) jako mobilní fáze s obdržením R-(+)-4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-tetrahydrofuryl)]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu ve formě bělavé tuhé látky (4,35 g, 12 mmol) o teplotě tání 165 až 166 °C, LC/MS: Hypersil BDS C18 (100 x 2,1 mm), 0,1M octan amonný/ /acetonitril, 10 až 100% acetonitrilu v průběhu 8 min, MH* 373, t. = 4,44 min, []d + 20,5 ± 0,6 (dichlormethan, 22,6 °C) .
Příklad 198
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
N-terc.Butoxykarbonylpiperidinol
K roztoku N-terc.butoxykarbonylpiperidonu (10,0 g, 50 mmol) v methanolu (100 ml) se při teplotě 0 °C přidává natrium-borohydrid (1,9 g, 50 mmol) po částech. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu lha poté při teplotě místnosti po dobu 20 h. Přidá se 2N roztok hydroxidu sodného (20 ml), rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi ethylacetat a vodu (100 ml každého prostředí). Vodný roztok se extrahuje ethylacetatem (3 x 100 ml) a spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného a vodou (1 x 100 ml každého prostředí). Vysuší se síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením N-terc.butoxykarbonylpiperidinolu ve formě bezbarvé olejovíté kapaliny (10,5 g, 100 %), Rf v 20% směsi ethylacetat/hexan = 0,05 (detekce manganistanem draselným).
Infračervená spektrometrie (tenký film): 3428, 2939,
1693 cm ~τ.
Příklad 199 terč.Butyl-4[(4-methylfenyl)sulfonyl]oxy-l-piperidinkarboxylat
K roztoku N-terc.butoxykarbonylpiperidinolu (10,5 g, 0,052 mol) v pyridinu (150 ml) se při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku přidává po částech tosylchlorid (9,94 g, 0,052 mol). Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 2 h. Zahřívá se na teplotu místnosti a míchá se při teplotě místnosti přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi roztok kysleiny citrónové (1M, 100 ml) a ethylacetat (200 ml). Kyselá vrstva se extrahuje ethylacetatem (1 x 100 ml) a spojené organické fáze se promyjí roztokem kyseliny citrónové (1M, 2 x 100 ml), nasyceným roztokem chloridu sodného (100 ml) a vodou (100 ml). Vysuší se síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která se vyčistí mžikovou sloupcovou chromátografií s použitím 10% směsi ethylacetat/cyklohexan a poté 15% směsí ethylacetat/ /cyklohexan s obdržením ve frakcích F 30 až 68 terc.butyl-4-[(4-methylfenyl)sulfonyl]oxy-l-piperidinkarboxylatu ve formě bílé tuhé látky (11,0 g, 60 %), Rf ve 20% směsi ethylacetat/cyklohexan = 0,17.
ΧΗ NMR (CDC13, 250 MHz): δ 7,79 (2H, d), 7,34 (2H, d), 4,67 (1H, m), 3,58 (2H, m), 3,27 (2H, m), 2,45 (3H, s), 1,59-1,83 (4H, m), 1,43 (9H, s).
Příklad 200 terč.Butyl-4-[(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]• · · · • · • · · · • · .220 pyrimidin-7-yl]-1-piperidinkarboxylat
K roztoku 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (2,0 g, 6,6 mmol) v suchém dimethylformamidu (100 ml) se pod atmosférou dusíku přidá při teplotě 0 °C hydrid sodný (0,264 g, 60% disperse, 6,6 mmol) a reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti a míchá po dobu 1 h. Přidá se terč.butyl-4-[(4-methylfenyl)sulfonyl]oxy-l-piperidinkarboxylat (2,34 g, 6,6 mmol) a výsledný roztok se zahřívá na teplotu 95 °C po dobu 72 h. K reakční směsi se opatrně přidá voda (150 ml). Extrahuje se ethylacetatem (3 x 100 ml) a promyje vodou (4 x 100 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (2 x 100 ml). Organický roztok se vysuší síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením tuhé látky, která se adsorbuje na silikagelu a čistí mžikovou silikagelovou sloupcovou chromatografií s použitím ethylacetatu a poté 5% směsí methanol/ethylacetat jako elučního prostředku se získáním v F 13 až 22 terč.butyl-4-[(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d-pyrimidin-7-yl]-1-piperidinkarboxylatu (1,0 g, 31 %) ve formě tuhé látky o teplotě tání 168,5 až 169,5 °C, v 10% směsi ethylacetat/methanol = 0,4.
XH NMR (d6 DMSO, 250 MHz): δ 8,14 (1H, s), 7,38-7,49 (5H, m) , 7,07-7,23 (5H, m), 6,14 (2H, široký s), 4,76 (1H, m), 4,11 (2H, m), 2,93 (2H, m), 1,92-2,02 (4H, m), 1,43 (9H, s) .
Hmotnostní spektrometrie C Η O N (485,2430).
Infračervená spektrometrie (disk KBr): 3059, 1695, 1588, 1235 cm1.
• · • · · · • ·
221.
Příklad 201
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pirimidin-4-ylamin
K roztoku terč.butyl-4-[(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-piperidinkarboxylatu (0,69 g, 1,4 mmol) v suchém dichlormethanu (25 ml) se při teplotě 0 °C se přidá kyselina trifluoroctová (5 ml). Roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 20 h a rozpouštědlo se odpaří. Přidá se roztok hydroxidu sodného (5N, 10 ml) a výsledná suspense se extrahuje ethylacetatem (3 x 50 ml). Provede se promytí chloridem sodným (1 x 50 ml), vysušení, filtrace a odpaření s obdržením tuhé látky, která se trituruje diethyletherem a zfiltruje s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (433258) ve formě bílé tuhé látky (500 mg, 91 %) o teplotě tání 209 až 211 °C, Rf ve směsi ethylacetat/methanol 1:1 = 0,1.
ΧΗ NMR (d6 DMSO, 250 MHz) 6 8,13 (1H, s), 7,36-7,48 (4H, m), 7,29 (1H, s), 7,04-7,16 (5H, m), 5,80 (2H, široký s,), 4,64 (1H, m), 3,10 (2H, m), 2,80 (1H, široký s), 2,67 (2H, m), 1,94 (4H, m).
Hmotnostní spektrometrie C23H23ON (385,1902),
Infračervená spektrometrie (disk KBr): 3278, 1620, 1585, 1490, 1245 cm“1.
Příklad 202
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]-
pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid
K 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamiu (433258) (200 mg) ve směsi ethylacetat/methanol (15 ml, 1:1) se přidá roztok chlorovodíku v etheru (1,0 M, 3 ml). Výsledná bílá sraženina se zfiltruje pod proudem dusíku a vysuší ve vakuu v průběhu 6 h s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochloridu (hydrát 1,4) ve formě bílé tuhé látky (120 mg) o teplotě tání 304 °C (s rozkladem).
XH NMR (D20, 250 MHz) δ 8,48 (1H, s), 7,69 (1H, s), 7,50-7,58 (4H, m) , 7,18-7,34 (5H, m), 5,16 (1H, m), 3,81 (2H, d), 3,46 (2H, m), 2,49 (4H, m).
Infračervená spektrometrie (disk bromidu draselného): 3937, 1657, 1231 cm“1.
Příklad 203 terč.Butyl-3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-pyrrolidinkarboxalat
K roztoku pyrrolidin-3-olu (10,0 g, 0,11 mol) v dichlormethanu (200 ml) se přidá triethylamin (22,2 g, 30,5 ml, 0,22 mol) a poté di(terč.butyl)dikarbonat (28,8 g, 0,13 mol) při teplotě 0 °C. Směs se ohřeje na teplotu místnosti a míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se vodný nasycený roztok kyseliny citrónové (150 ml) a organická vrstva se promyje vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného a opět vodou (vždy 100 ml). Organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením N-terc.butoxykarbonyl• · • 4 • ·
- ^23 -í • · · · · *
pyrrolidin-3-olu (2,0 g, 93 % surové látky) ve formě zlatě zbarvené olejovíté kapaliny.
Příklad 204 terč.Butyl-3-[(4-methylfenyl)sulfonyl]oxy-l-pyrrolidinkarboxylat • K roztoku N-terc.butoxykarbonylpyrrolidin-3-olu (19,8 g, 0,106 mol) v pyridinu (200 ml) při teplotě 0 °C se přidává tosylchlorid (22,3 g, 0,117 mol) po částech pod atmosférou dusíku. Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 2 h, zahřívá na teplotu místnosti a míchá se při teplotě místnosti přes noc. Pyridin se odpaří ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetat a nasycený vodný roztok kyseliny citrónové (200 ml každého prostředí). Vodná vrstva se extrahuje ethylacetatem (2 x 200 ml) a spojené organické fáze se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím 10% směsi ethylacetat/cyklohexan s obdržením olejovité kapaliny ve frakcích F40 až 85. Tato olejovitá kapalina se rozpustí v malém objemu směsi cyklohexan/diethylether (5:1, 50 ml), ochladí a škrábáním špachtličkou se vyvolává krystalizace. Výsledná tuhá látka se zfiltruje s obdržením terč.butyl-3-[(4-methylfenyl)sulfonyl ]oxy-l-pyrrolidinkarboxylatu (10,5 g, 29 %) ve formě bílé tuhé látky. R ve směsi ethylacetat/cyklohexan = 0,13.
’-Η NMR (CDC13, 250 MHz): δ 7,79 (2H, d) , 7,35 (2H,
d), 5,04 (1H, m), 3,43 (4H, m), 2,46 (3H, s), 2,03-2,20 (2H, široký m), 1,43 (9H, s).
K roztoku 4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo• ·
[2,3-d]pyrimidinu (2,0 g, 6,6 mmol) v suchém dimethylformamidu (120 ml) se při tpelotě 0 °C přidává pod atmosférou dusíku hydrid sodný (0,264 g, 60% disperse, 6,6 mmol) a poté se reakční směs zahřívá na teplotu místnosti a míchá po dobu 1 h. Po částech se přidává terc.butyl-3-[(4-methylfenyl)sulfonyl]oxy-l-pyrrolidinkarboxylat (2,25 g, 6,6 mmol) a směs se zahřívá na 95 °C po dobu 72 h. Přidá se voda a směs se extrahuje ethylacetatem (4 x 100 ml). Spojené organické fáze se promyjí vodou (4 x 100 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (2 x 100 ml). Organické fáze se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením tuhé látky, která se rozpustí ve směsi ethylacetat/methanol a adsorbuje na silikagelu. Purifikace s použitím mžikové chromatografie na sloupci silikagelu 5% směsí methanol/ethylacetat jako elučního činidla poskytuje ve frakcích F17 až 25 terč.butyl-3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-pyrrolidinkarboxylat (1,0 g, 32 %) ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 168 až 170 °C. R ve směsi ethylacetatrmethanol 9:1 = 0,46.
XH NMR (d6 DMSO, 250 MHz): <5 8,17 (1H, s), 7,38-7,50 (5H, m), 6,19 (2H, široký s), 5,31 (1H, m), 3,77 (1H, m), 3,42-3,60 (3H, m), 2,38 (2H, m), 1,40 (9H, s).
Hmotnostní spektrometrie 471,2250 (C H ON).
Infračervená spektrometrie (disk KBr): 3130, 1683, 1585, 1404, 1245 cm-1.
Příklad 205
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
2.23..-
K roztoku terč.butyl-3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-pyrrolidinkarboxylatu (0,8 g, 1,7 mmol) v dichlormethanu (25 ml) se při teplotě 0 °C přidává kyselina trifluoroctová (5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu místnosti a míchá se při teplotě místnosti po dobu 20 h. Rozpouštědlo se odpaří a přidá se zředěný roztok hydroxidu sodného (5N, 10 ml). Výsledný roztok se extrahuje ethylacetatem (3 x 50 ml) a spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného (1 x 75 ml). Organický roztok se vysuší síranem sodným, zfiltruje a odpaří ve vakuu s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu ve formě bílé tuhé látky (0,5 g, 79 %) o teplotě tání 182 až 184 °C. Rf ve směsi ethylacetat/methanol 1:1 = 0,15.
ΧΗ NMR (d6 DMSO, 250 MHz): δ 8,14 (1H, s), 7,37-7,50 (5H, m), 7,05-7,18 (5H, m), 6,14 (2H, široký s), 5,23 (1H, m), 3,09-3,27 (2H, m), 2,83-2,98 (2H, m), 2,19-2,33 (1H, m), 1,88-2,01 (1H, m).
Infračervená spektrometrie (disk KBr): 3106, 1585, 1489, 1232 cm-1.
Hmotnostní spektrometrie 371,1758 (c22H2i0N5).
Příklad 206
5-(4-Fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid
K 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu (200 mg) ve směsi ethylacetat/
• · • · · ~··2·2β· /methanol (2:1, 20 ml) se přidá roztok chlorovodíku v etheru (1,0 M, 3 ml) a vzniklá sraženina se zfiltruje pod atmosférou dusíku s obdržením 5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochloridu (hydrát 0,4) ve formě bílé tuhé látky (190 mg) o teplotě tání 298 °C (s rozkladem).
Infračervená spektrometrie (disk KBr): 2909, 1658, 1249 cm“1.
Příklad 207
7-Perhydro-l-pyrrolizinyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid
a) Perhydro-l-pyrrolizinol
Připraví se, jak popisuje J. Schnekenburger a E. Briet, Arch. Pharm. (Wienheim), 310, 152-160 (1977).
b) Perhydro-l-pyrrolizinylmethansulfonat
Směs perhydro-l-pyrrolizinolu (0,5 g, 3,94 mmol) a triethylaminu (0,60 g, 5,91 mmol) v dichlormethanu (10 ml) se míchá při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku. Přidá se methansulfonylchlorid (0,68 g, 5,91 mmol) a směs se ponechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se po dobu 8 h. Přidá se nasycený vodný roztok chloridu amonného (10 ml), dichlormethanu (25 ml) a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (10 ml). Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku s obdržením zbytku. Čištění získané látky mžikovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi heptan/ethylacetat (1:3) jako • · · · • · —· · 2<2*Λ ·
elučního činidla poskytuje perhydro-l-pyrrolizinylmethansulfonat (0,54 g).
XH NMR (DMS0-de, 400 MHz) δ 4,96 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 2,9-3,3 (m, 6H), 2,35 (m, 1H), 1,55-2,25 (m, 6H) .
c) 7-Perhydro-l-pyrrolizinyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindihydrochlorid
Směs 5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (0,49 g, 1,62 mmol) a 60% hydridu sodného v oleji (100 mg, 2,43 mmol) v diethylformamidu se míchá při teplotě okolí po dobu 15 min pod atmosférou dusíku. Směs se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 18 h a poté se ochladí na teplotu okolí. Přidá se další 60% hydrid sodný v oleji (100 mg, 2,43 mmol) a zahřívání pokračuje po dobu dalších 2 h. Směs se ochladí na teplotu okolí a rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (10 ml) a dichlormethan (30 ml). Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu za sníženého tlaku. Výsledný zbytek se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi C-18 s obdržením 150 mg bílé tuhé látky, která se rozpustí v ethylacetatu (10 ml) a zpracuje IN roztokem chlorovodíku v diethyletheru s obdržením 7-perhydro-l-pyrrolizinyl-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindihydrochloridu ve formě bílé tuhé látky.
^H NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,52 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,02-7,58 (m, 1H), 5,38 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 1,9-3,9 (m, 10H).
Retenční čas t = 7,62 min (Hypersil HS C - 18,5 μιη, • ·
2.2^. :.· nm, 250 χ 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M octan amonný v průběhu 10 min, 1 ml/min).
Hmotnostní spektrometrie: MH* 412.
Příklad 208
7-(2-Methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindihydrochlorid
a) 2-Methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-ol
Připraví se, jak popisuje H. Bohme a G. Setiz, Arch. Pharm. (Wienheim), 301. 341 (1968).
b) 4-Chlor-5-jod-7-(2-methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin
Směs 4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (0,38 g, 1,36 mmol), 2-methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-olu (0,23 g, 1,63 mmol) a trifenylfosfinu (0,71 g, 2,72 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) se zpracuje diethylazodikarboxylatem (0,474 g, 2,72 mmol) a míchá se po dobu 2 h při teplo tě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (30 ml) a vodu (10 ml). Organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml) a poté se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku s obdržením zbytku. Tento zbytek se vyčistí mžikovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol (8:2) jako mobilní fáze s obdržením 4-chlor-5-jod-7-(2-methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (0,25 g).
• · • · · · · * · · « · · · • · · · · · — Ά??*·~* *..* :
ΧΗ NMR (DMSO-dg, 400 MHz) δ 8,62 (s, 1Η), 7,44 (s,
1Η), 7,26 (s, 2H), 5,36 (m, 1H), 2,88 (m, 2H), 2,68 (m, 2H),
2,43 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,06-2,02 (m, 4H) .
R = 0,29 (dichlormethan/methanol 8:2), retenční čas t = 6,40 min při vysokovýkonné kapalinové chromatografii s reversními fázemi (Hypersil HS C18, 5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M octan amonný v průběhu 10 min, 1 ml/min).
Hmotnostní spektrometrie: MH^ 403.
c) 7-(2-Methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-5-(4-fenoxyf enyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindihydrochlorid
Směs 4-chlor-5-jod-7-(2-methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (0,25 g, 0,622 mmol), kyseliny 4-fenoxyfenylboronové (0,16 g, 0,746 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)palladia (0,043 g, 0,037 mmol) a uhličitanu sodného (0,172 g, 1,62 mmol) se zahřívá ve směsi ethylenglykoldimethyletheru (8 ml) a vody (4 ml) při teplotě 90 °C po dobu 18 h pod atmosférou dusíku. Směs se ponechá ochladit na teplotu okolí a rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (10 ml) a dichlormethan (30 ml). Vrstvy se oddělí a organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a filtrát se odpaří s obdržením zbytku za sníženého tlaku (0,354 g). Tento zbytek se rozpustí v 1,4-dioxanu (10 ml) a odpaří a přidá se 28% hydroxid amonný (10 ml). Směs se zahřívá v zatavené trubici při teplotě 120 °C po dobu 20 h, poté se ochladí na teplotu okolí. Rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku a poté se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu •2t?0 ·«s použitím směsi dichlormethan/methanol 7:3 jako elučního činidla s obdržením 7-(2-methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (0,05 g).
XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) vykazuje dvě skupiny píků vzhledem k přítomnosti isomerů cis a trans žádané sloučeniny δ 10,6-10,8 (široký s, 1H), 8,49 (s, 1H), 6,99-7,98 (m, 1H), 5,39 a 5,48 (m, 1H), 2-3,8 (m, 10H).
PH 454098: retenční čas t = 7,53 min, vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Hypersil HS C18, 5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25-100 % acetonitrilu - 0,1 M octan amonný v průběhu 10 min, 1 ml/min).
Hmotnostní spektrometrie MH* 426.
Dihydrochlorid 7-(2-methylperhydrocyklopenta[c]pyrrol-5-yl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu se připraví rozpuštěním voné báze v 10 ml kyseliny chlorovodíkové a lyofilizací.
Příklad 209
Cis a trans-7-[4-(N-terc.butoxykarbonyl-lS, 4S-2,5-diaza[2.2.1]heptanyl)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
Suspense 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (0,67 g, 1,68 mmol) v dichlorethanu (40 ml) se zpracuje terc.butyl-(lS, 4S)-(-)-2,5-diazabicyklo[2.2.1]heptan-2-karboxylatem (1,0 g, 5,04 mmol) a ledovou kyselinou octovou (0,30 g, 5,04 mmol) při • · « ·
teplotě místnosti během 1 h. Následně se přidá natrium-triacetoxyborohydrid (0,46 g, 2,17 mmol) a směs se míchá po dobu 8 d při teplotě 80 °C. K ochlazené reakční směsi se přidá roztok hydrogenuhličitanu sodného (0,377 g, 10,08 mmol) ve vodě (15 ml) a směs se míchá po dobu 15 min. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje vodou a nasyceným roztokem kuchyňské soli (3 x 100 ml v oboru případech). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem, organické vrstvy se spojí, vysuší síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří. Tuhá látka se vyčistí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu (2 litry 6% methanolu v dichlormethanu, poté 2 litry 10% methanolu/5% hydroxidu amonného v dichlormethanu) s obdržením následujících sloučenin.
Příklad 210
Cis-7-[4-(N-terc.butoxykarbonyl-lS, 4S-2,5-diaza[2.2.1]— -heptanyl)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (605 mg, 64 %) 1H NMR (d6 DMSO, 400 MHz): 6 8,13 (1H, s), 7,39-7,49
(4H, m) , 7,32 (1H, m) , 7,07- 7, 17 (5H, m) , 6,09 (2H, široký
s) , 4,63 (1H, m), i 1,15 (1H, m) , 3,30-( J,70 (2H, m), 3,03-3,
(2H, m) , 2,80- -2,90 (1H, m), 2, 70-2,75 (1H, m), 2,29-2,35
(1H, m) , 2,09- -2,21 (1H, m), 1, 81-1,93 (4H, m), 1,60-1,80
(4H, m) , 1,39 (9H, m) .
HPLC/MS: Perkin Elmer Pecosphere C18, 3 μΜ, 33 x 4,6, 3,5 ml/min, 100 % 50 mM octanu amonného až 100 % acetonitrilu v průběhu 4,5 min, c3eH44N 6°3 (581,2), 95 %.
Příklad 211 • · • ♦ « · »4 · · · · • ·
Trans-7-[4-(N-terc.butoxykarbonyl-lS, 4S-2,5-diaza[2.2.1]-heptanyl)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (183 mg, 20 %) XH NMR (de DMSO, 400 MHz): δ 8,13 (1H, s), 7,39-7,47 (5H, m), 7,15-7,17 (1H, m), 7,07-7,11 (4H, m), 6,10 (2H, široký s), 4,62 (1H, m), 4,1-4,2 (1H, m), 3,71 (1H, široký s), 3,03 (2H, m), 2,35 (2H, m), 1,93-2,01 (6H, m), 1,60-1,68 (2H, m), 1,40 (9H, s).
HPLC/MS: Perkin Elmer Pecosphere C18, 3 μΜ, 33 x 4,6,
3,5 ml/min, 100 % 50 mM octanu amonného až 100 % acetonitrilu v průběhu 4,5 min, c3OH36N e° (581,2), 99 %·
Příklad 212
Cis-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl)-NI,N2,N2-trimethyl-l,2-ethandiamin-trismaleat
Trans-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl)-NI,N2,N2-trimethyl-l,2-ethandiamin-trismaleat
Směs 4—[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (1,0 g, 2,51 mmol), Ν,Ν,Ν’-trimethylethylendiaminu (0,77 g, 7,54 mmol) a kyseliny octové (0,45 g, 7,54 mmol) v 1,2-dichlorethanu (50 ml) se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 30 min. Přidá se natrium-triacetoxyborohydrid (0,69 g, 3,26 mmol) a směs se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h. Přidá se voda (20 ml) a hydrogenuhličitan sodný (1,26 g, 15,1 mmol), směs se míchá po dobu 1 h, zfiltruje celitem a promy-
je dichlormethanem (75 ml). Filtrát se přenese do dělící nálevky a vrstvy se oddělí. Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a fitrát se odpaří za sníženého tlaku. Isomery cis a trans se čistí mžikovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol (7:3) jako elučního činidla pro obdržení cis-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-NI,N2,N2-trimethyl-l,2-ethandiaminu (0,442 g) a trans-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-NI,N2,N2-trimethyl-1,2-ethandiaminu (0,336 g). Cis-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-NI,N2,N2-trimethyl-1,2-ethandiamin (0,44 g, 0,909 mmol) se rozpustí v teplém ethylacetatu (100 ml) a poté se přidá kyselina maleinová (0,32 g, 2,73 mmol) v ethylacetatu (30 ml). Výsledná vytvořená sůl představuje olejovitý zbytek na dně a stěnách baňky. Supernatant se vylije a zbytek se rozpustí ve vodě a lyofilizuje s obdržením cis-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-Nl,N2,N2-trimethyl-1,2-ethandiamin-trismaleatu (0,55 g).
XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,22 (s, 1H), 7,41-7,50 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,5 (široký s, 2H), 6,15 (s, 6H), 4,78 (m, 1H), 3,28 (m, 2H), 3,00 (m, 2H), 2,80 (m, 1H), 2,79 (s, 6H), 2,50 (s, 3H), 2,19 (m, 2H), 1,99 (m, 2H), 1,78 (m, 4H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Hypersil CPS, 5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M octan amonný v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 9,27 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH* 485.
99 99 9 i ·Ι·ν ·« • * t · a ·*«·
- ·2ί?4 ·*“
Trans-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-Nl,N2,N2-trimethyl-1,2-ethandiamin se připraví z volné báze stejným způsobem.
XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,20 (s, 1H), 7,41-7,48 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,45 (Široký S, 2H), 6,15 (S, 6H), 4,62 (m, 1H), 2,9-3,3 (m, 5H), 2,74 (s, 6H), 2,56 (s, 3H), 1,9-2,2 (m, 6H), 1,73 (m, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (Hypersil CPS, 5 μιη, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M octan amonný v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t =8,17 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH* 485.
Následující sloučeniny se připraví podobným způsobem z cis-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-Nl,N2,N2-trimethyl-l,2-ethandiaminu.
Příklad 214
Cis-7-[4—(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin XH NMR (de DMSO, 400 MHz: δ 8,13 (1H, s), 7,39-7,50 (4H, m), 7,28 (1H, s), 7,07-7,16 (5H, m), 6,08 (2H, široký S), 4,67 (1H, m), 2,49-2,67 (9H, m) , 2,06-2,16 (5H, m), 1,70-1,72 (2H, m), 1,53-1,59 (2H, m), 0,97 (d, J = 6,5 Hz, 6H) .
·· 4·»· ···* • · « · · · • · · · · • 9 • · * • · •
• · · • · • t • • • · ·
Hmotnostní spektrometrie C31H3SN 6° (511,2).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 Mm, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu
- 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,817 min, 99 %.
Chromatografie na tenké vrstvě: Rf v 90% směsi dichlormethan/methanol = 0,30 (visualizace ultrafialovým zářením).
Příklad 215
Trans-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin ΧΗ NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 8,13 (1H, s), 7,40-7,47 (5H, m), 7,08-7,18 (5H, m), 6,08 (2H, Široký s), 4,53 (1H, m), 2,45-2,55 (9H, m) , 2,17-2,20 (1H, m), 1,86-1,96 (6H, m), 1,44-1,49 (2H, m), 0,97 (d, J = 5,5 Hz, 6H).
Hmotnostní spektrometrie c31H3aN 6° (511,2).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 Mm, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu
- 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,367 min, 91 %.
Chromatografie na tenké vrstvě: R v 90% směsi dichlormethan/methanol = 0,21 (visualizace ultrafialovým zářením).
Příklad 216 • ·
Cis-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl} -5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 8,13 (1H, s), 7,39-7,50 (4H, m) , 7,27 (1H, s), 7,07-7,11 (5H, m), 6,09 (2H, široký S), 4,68 (1H, m), 3,42 (2H, t, J = 5,9 Hz), 3,22 (3H, s), 2,43-2,55 (9H, m) , 2,03-2,16 (6H, m) , 1,60-1,71 (2H, m) , 1,52-1,59 (2H, m).
Hmotnostní spektrometrie C Η N 0 (527,2).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 Mm, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,317 min, 95 %.
Chromátografie na tenké vrstvě: Rf v 90% směsi dichlormethan/methanol = 0,22 (visualizace ultrafialovým zářením).
Příklad 217
Trans-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
Hmotnostní spektrometrie C Η N 0 (527,2).
313862 XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 8,13 (1H, s), 7,39-7,47 (5H, m), 7,07-7,16 (5H, m), 6,09 (2H, široký s), 4,55 (1H,
m), 3,36-3,42 (2H, m), 3,23 (3H, s), 2,33-2,55 (11H, m),
1,90-1,96 (6H, m), 1,44-1,47 (2H, m) .
• · · · • ·
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,200 min, 95 %.
x~
Chromatografie na tenké vrstvě: Rf v 90% směsi dichlormethan/methanol = 0,31 (visualizace ultrafialovým zářením).
Příklad 218
Cis-7-[4-(4-ethylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin ΧΗ NMR (d6 DMSO, 400 MHZ): 8 8,23 (1H, s), 7,41-7,49 (4H, m), 7,07-7,17 (6H, m), 6,57 (2H, široký s), 6,20 (5H, s), 4,77 (1H, m), 2,04-2,13 (8H, m) , 1,62-1,77 (5H, m), 1,21 (3H, t).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Waters delta pack C18, 150 x 3,9 mm, 5 až 95 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 30 min, 1 ml/min), retenční čas t = 13,851 min, 100 %.
Trans-7-[4-(4-ethylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): 8 8,19 (1H, s), 7,40-7,47 (4H, m), 7,19 (1H, m), 7,08-7,19 (5H, m), 6,40 (2H, široký s), 6,18 (6H, s), 4,95 (1H, m), 3,17 (2H, široký s), 2,98 (2H, široký s), 2,69 (2H, široký s), 1,94-2,01 (8H, m), 1,54-1,57 (2H, d, J = 7,5 Hz), 1,17 (3H, t), • · r·· 3 Β
Vysokovýkonná kapalinová chromátografie: (Waters delta pack C18, 150 x 3,9 mm, 5 až 95 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 30 min, 1 ml/min), retenční čas t^ = 13,701 min, 96 %.
Následující sloučeniny se připraví jako soli způsobem podobným přípravě trans-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl)-NI,N2,N2-trimethyl-1,2-ethandiamin-trismaleatu.
Příklad 219
Cis-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat XH NMR (de DMSO, 400 MHz): δ 8,23 (1H, S), 7,40-7,49 (5H, m), 7,07-7,19 (5H, m), 6,55 (2H, Široký S), 6,16 (6H, s), 4,74 (1H, m), 3,26 (6H, široký s), 2,04-2,49 (13H, m), 1,63-1,75 (5H, m), 1,25 (d, J = 6,6 Hz, 6H).
Hmotnostní spektrometrie C3;LH3SN 6 0 (511,1).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 μτα, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t - 7,967 min, 99 %.
Příklad 220
Trans-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat • ··· · · ···· · · • · · · · · · • · · · · ·
Z39 -·· · XH NMR (de DMSO, 400 MHz): 6 8,20 (1H, s), 7,40-7,65 (5H, m), 7,08-7,19 (5H, m), 6,46 (2H, široký s), 6,14 (6H, s), 4,60 (1H, m), 2,50-3,45 (17H, m) , 1,95-2,02 (5H, m) , 1,56-1,59 (2H, m), 1,20 (d, J = 6,5 Hz, 6H).
Hmotnostní spektrometrie c31H3SN e° (511,2).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu
- 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,733 min, 90 %.
Příklad 221
Cis-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): <5 8,23 (1H, s) , 7,41-7,49 (5H, m), 7,07-7,19 (5H, m), 6,55 (2H, široký s), 6,16 (6H, s), 4,75 (1H, m), 3,62 (2H, m), 3,30 (3H, s), 3,17 (6H, široký s), 2,50 (9H, m), 2,02-2,16 (5H, m), 1,74 (5H, m).
Hmotnostní spektrometrie C Η N 0 (527,2).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu
- 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,750 min, 99 %.
Příklad 222
Trans-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
1H NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 8,21 (1H, s), 7,41-7,48 (5H, m), 7,08-7,17 (5H, m), 6,53 (2H, široký s), 6,17 (6H, s), 4,61 (1H, m) , 3,45 (3H, s), 2,50-3,56 (19H, m), 1,99-2,08 (6H, m), 1,64 (2H, m) .
Hmotnostní spektrometrie C Η N 0 (527,2).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (Hypersil HS C - 18,5 Mm, 254 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,383 min, 99 %.
Příklad 223
Cis-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-N2,N2-dimethyl-l,2-ethanůiamin-trismaleat
Trans-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-ů Jpyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-N2,N2-dimethyl-l,2-ethandiamin-monomaleat
Cis-Nl-{4—[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-N2,N2-dimethyl-l,2-ethandiamin-trismaleat:
XH NMR (d DMSO, 400 MHz): δ 8,19 (s, 1H) , 7,40-7,49 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,35 (široký s, 2H), 6,13 (s, • · · · « ·
• · · · · · · · ·····♦ ·· · ··
- 241 6H), 4,78 (m, 1H), 3,15-3,45 (m, 5H), 2,74 (s, 6H) ,
1,8-2,25 (m, 8H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil CPS - 5 Mm, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas tr = 8,90 min, 99 %.
Hmotnostní spektrometrie: ΜΗ* 471.
Příklad 224
Trans-Nl-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJcyklohexyl}-N2,N2-dimethyl-l,2-ethandiamin-monomaleat XH NMR (ds DMSO, 400 MHz): S 9,5 (široký s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,41-7,55 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,7 (široký s, 2H), 6,16 (s, 2H), 4,63 (m, 1H), 3,12-3,55 (m, 5H), 2,85 (s, 3H), 2,27 (m, 2H), 1,99-2,05 (m, 4H), 1,67-1,75 (m, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie RP: (Hypersil
CPS - 5 Mm, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t =8,6 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH* 471.
Příklad 225
Cis-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propyl]amino)cyklohexyl)-5-(49 4 · · * ♦ · · « « ·
- 242 -fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
Trans-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propyl]amino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat
Příklad 227
Cis-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propyl]amino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat ΧΗ NMR (de DMSO, 400 MHz): δ 8,78 (široký s, 1H), 8,48 (široký s, 2H), 8,18 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,41-7,49 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,33 (široký s, 2H), 6,12 (S, 6H), 4,78 (m, 1H), 4,27 (t, 2H), 2,99 (m, 3H), 1,8-2,25 (m, 10H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil CPS - 5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 9,07 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH+ 508.
Příklad 228
Trans-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propyl]amino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat ΧΗ NMR (de DMSO, 400 MHz): δ 8,76 (široký s, 1H), ·· ···· ·« ··*· •9 9 « 9 < « » · 4 ·~ «24ί3 — · · « · * ·»···» ·» · 11 >«·
8,51 (široký s, 2H), 8,18 (s, 1H), 7,66 (S, 1H), 7,55 (s,
1H), 7,40-7,47 (m, 5H), 7,08-7,21 (m, 5H), 6,3 (široký s,
2H), 6,11 (s, 4H), 4,60 (m, 1H), 4,26 (t, 2H), 3,14 (m, 1H),
2,97 (m, 2H), 1,9-2,25 (m, 8H), 1,53-1,61 (m, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil CPS - 5 Mm, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t^ = 8,72 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH+ 508.
Příklad 229
Cis-7-[4-(dimethylamino)cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 9,06 (široký s, 1H),
8,2 (s, 1H), 7,41-7,50 (m, 5H) , 7,08-7,19 (m, 5H), 6,4 (široký s, 2H), 6,13 (S, 4H), 4,83 (m, 1H), 3,34 (m, 1H), 2,88 (s, 6H), 2,10-2,17 (m, 4H), 1,88-1,99 (m, 4H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 Mmr 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,38 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH* 428.
Příklad 230
Trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohexyl)-7H·· ···· ·· ···· ·· ·· · · · · · · ·
-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat ΧΗ NMR (d DMSO, 400 MHz): δ 8,92 (široký s, 1H), ¢5
8,18 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,3 (široký S, 2H), 6,13 (s, 4H), 4,63 (m, 1H), 3,15-3,5 (m, 3H),
2,9-3,1 (m, 2H), 1,16-2,18 (m, 14H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,98 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH+ 468.
Trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydro-lH-l-pyrrolylcyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 9,54 (široký s, 1H),
8,18 (s, 1H), 7,40-7,47 (m, 5H), 7,08-7,18 (m, 5H), 6,3 (široký s, 1H), 6,12 (s, 4H), 4,63 (m, 1H), 3,1-3,55 (m, 5H), 2,24 (m, 2H), 2,00 (m, 6H), 1,86 (m, 2H), 1,67 (m, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,82 min.
Hmotnostní spektrometrie: ΜΗ-4- 454.
Příklad 231
Cis-7-[4—(4-methyl-l,4-diazepan-l-yl)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindihydro-
• · chlorid
Trans-7-[4-(4-methyl-l,4-diazepan-l-yl)cyklohexyl]-5-(4-f enoxyf enyl) -7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amindihydrochlorid
Cis-7-[4-(4-methyl-l,4-diazepan-l-yl)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindihydrochlorid:
XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz): δ 11,7 (d, 1H) , 11,38 (d, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,42-7,51 (m, 4H), 7,03-7,20 (m, 5H), 4,93 (m, 1H), 4,7 (široký s, 2H), 3,4-3,99 (m, 9H), 2,8 (s, 3H), 1,86-2,57 (10H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 Mm, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 7,67 min.
Hmotnostní spektrometrie: ΜΗ1· 497.
Trans-7-[4-(4-methyl-l,4-diazepan-l-yl)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amindidihydrochlorid:
XH NMR (DMSO-de, 400 Mhz) δ 11,94 (d, 1H), 11,52 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,8 (s, 1H), 7,42-7,51 (m, 4H),
7,10-7,20 (m, 5H), 4,76 (1H, m), 3,2-4,0 (m, 9H), 2,80 (s, 3H), 1,78-2,4 (m, 10H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 Mm, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až • · · · • · • · · ·
• · · • · · ·
100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t - 7,42 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH+ 497.
Příklad 232
Cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
Trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
a) Cis- a trans-terc.butyl-4-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7yl]cyklohexyl}-l-piperazinkarboxylat
Příklad 233
Cis-terc.butyl-4-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7yl]cyklohexyl}-l-piperazinkarboxylat XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,14 (S, 1H), 7,3-7,5 (m, 6H), 7,07-7,16 (m, 5H), 6,1 (široký s, 2H), 4,69 (m, 1H), 3,2-3,4 (4H, m), 2,38 (m, 4H), 2,0-2,25 (m, 5H), 1,5-1,8 (m, 4H), 1,41 (s, 9H).
Trans-terc.butyl-4-(4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7yl]cyklohexyl}-l-piperazinkarboxylat TH NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,13 (s, 1H), 7,40-7,47 (m, 6H), 7,08-7,16 (m, 5H), 6,1 (široký s, 2H), 4,55 (m, • · ···· · · ···· ··
1H), 3,34 (m, 4H), 2,35-2,51 (m, 3H) , 1,89-1,99 (m, 6H), 1,38-1,49 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t^ = 10,40 min.
b) Cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
Cis-terc.butyl-4-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-l-piperazinkarboxylat (1,82 g, 3,27 mmol) se zpracuje 20% roztokem kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu (60 ml) a míchá se po dobu 30 min při teplotě okolí. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi dichlormethan (200 ml) a vodný nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (30 ml). Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a filtrát se odpaří s obdržením zbytku (1,55 g). Část této látky (1,0 g, 2,15 mmol) se rozpustí v teplém ethylacetatu (220 ml) a poté se zpracuje kyselinou maleinovou (0,75 g, 0,44 mmol) v teplém ethylacetatu (75 ml). Směs se ochladí na tpelotu okolí a tuhá látka se oddělí filtrací a vysuší s obdržením cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleatu (1,15 g) ve formě bílé tuhé látky.
XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,5 (široký s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,41-7,51 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,65 (široký s, 2H), 6,16 (S, 6H), 4,74 (m, 1H), 1,16-3,2 (m, 17H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními
- ·Ζ4«* fázemi: (Hypersil CPS - 5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitřilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 8,63 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH* 469.
c) Trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,22 (s, 1H), 7,41-7,51 (m, 5H), 7,08-7,19 (m, 5H), 6,6 (široký s, 2H), 6,16 (s, 6H), 4,58 (m, 1H), 1,4-3,2 (m, 17H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Hypersil HS C - 18,5 μπι, 10 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitřilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 10 min, 1 ml/min), retenční čas t = 8,08 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH^ 469.
Příklad 234
7-[3-(4-Methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentan-l-ol 2,14 g, 0,0055 mol) v 1 litru dichlormethanu se míchá s 12 g oxidu manganičitého po dobu 5 h, zfiltruje a k filtrátu se přidá čerstvý oxid manganičitý (8 g). Po míchání po dobu dalších 17 h se směs zfiltruje a přímo použije. Vysokovýkonná kapalinová chromatografie/ /hmotnostní spektrometrie ukazuje na výchozí látku a 3—[4— -amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] cyklopentanon, 62,7 %, t = 4,38 min. Dichlormethanový roztok se míchá s 1,0 g N-methylpiperazinu (0,01 mol) a kyselinou octovou (0,6 g, 0,01 mol) po dobu 15 min a poté se přidá natrium-triacetoxyborohydrid (0,89 g, 0,0042 mol). Po 2 h se přidá 1,0 g N-methylpiperazinu, 0,6 g kyseliny octové a 0,89 g natrium-triacetoxyborohydridu a směs se míchá po dobu 17 h. Další přídavek 2,0 g N-methylpiperazinu, 1,2 g kyseliny octové a 1,2 g natrium-triacetoxyborohydridu a míchání po dobu 3 d poskytuje směs, která se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se zpracuje vodou (200 ml) a 6M roztokem kyseliny chlorovodíkové (50 ml), poté se promyje ethylacetatem a zalkalizuje přebytkem roztoku hydroxidu amonného. Směs se extrahuje ethylacetatem a extrakt se vysuší síranem sodným a poté se vyčistí mžikovou chromatografií směsí ethylacetat/ethanol 9:1 pro odstranění nečistot a poté směsí ethylacetat/ethanol/triethylamin 8:1:1 pro eluci produktu. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, zbytek se rozpustí v ethylacetatu a zpracuje roztokem kyseliny maleinové v ethylacetatu s obdržením 7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleatu (444395) ve formě solvátu 1,4 s ethylacetatem po vysušení při teplotě 80 °C za sníženého tlaku (0,95 g, 0,001 mol) o teplotě tání 168 až 170 °C (s rozkladem) .
Příklad 235 [4-(4-Amino-7-cyklopentyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenyl](fenyl)methanol
Natrium-borohydrid (0,052 g, 0,0013 mol) se přidá k roztoku [4-(4-Amino-7-cyklopentyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimi din-5-yl)fenyl](fenyl)methanonu (0,1 g, 0,00026 mol) v tetrahydrofuranu (4 ml) s následujícím přídavkem Amberlystu-15 H*. Směs se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 15 min, zfiltruje celitem a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi (Rainin, Hypersil C - 18,5 μπι, 10 nm, 25 cm, 5 až 85% acetonitrilu - 0,1% roztok octanu amonného v průběhu 20 min, 21 ml/min) s obdržením [4-(4-amino-7-cyklopentyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)fenyl](fenyl)methanolu (0,005 g, 0,000013 mol).
XH NMR (DMSO-de, 400 MHz) 8 8,12 (s, 1H), 7,31 (m, 10H), 6,01 (široký s, 2H), 5,91 (d, 1H), 5,75 (d, 1H), 5,06 (m, 1H), 2,10 (široký s, 2H), 1,88 (široký s, 4H), 1,67 široký s, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi: (Delta Pak C18 - 5 μπι, 300 nm, 15 cm, 5-85 % acetonitrilu - 0,1 M roztok octanu amonného v průběhu 20 min, 1 ml/min), retenční čas t = 16,74 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH^ 385.
Příklad 236
Trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
Trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[ 2, 3-d]pyrimidin-4-amin (1,30 g, 0,0027 mol) ve 300 ml teplého ethylacetatu se zpracuje roztokem kyseliny maleinové (0,94 g, 0,0081 mol) ve 100 ml ethylacetatu a ponechá se ochladit. Bezbarvá tuhá látka se sbírá, promývá • · · ·
251 ethylacetatem a suší do konstantní hmotnosti při teplotě 90 °C/tlaku 0,3 kPa s obdržením 1,85 g (0,0022 mol) trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleatu solvatovaného s 0,18 mol ethylacetatu o teplotě tání 189 °C (s rozkladem).
Příklad 237
Trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amintrihydrochlorid
Trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (0,36 g, 0,00075 mol) ve 25 ml teplého isopropanolu se zpracuje 0,225 ml 12M roztoku kyseliny chlorovodíkové (0,0027 mol) ve 2 ml isopropanolu a suspense se krátce zahřeje k varu a poté se těkavá látka odpaří za sníženého tlaku. Výsledná bezbarvá tuhá látka se vysuší do konstantní hmotnosti při teplotě 84 °C a tlaku 0,5 kPa s obdržením trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amintrihydrochloridu (444626) solvatovaného s 1 molem vody a 0,25 molu isopropanolu (0,25 g, 0,0004 mol) o teplotě tání 304 až 306 °C (s rozkladem).
Příklad 238
Cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
Cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (1,45 g, 0,0030 mol) v ethylacetatu s 1,05 g (0,0091 mol) kyseliny maleinové poskytuje ve formě tuhé látky po vysušení do • ·
• · konstantní hmotnosti při teplotě 90 °C a tlaku 0,3 kPa 2,15 g cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleatu solvatovaného s 0,14 molu ethylacetatu a 0,5 molu vody (0,0025 mol) o teplotě tání 186 °C (s rozkladem).
Příklad 239
Cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amintrihydrochlorid
Cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (0,80 g, 0,0017 mol) v isopropanolu se zpracuje 0,5 ml 12M roztoku kyseliny chlorovodíkové (0,006 mol). Výsledná tuhá látka se zfiltruje s obdržením cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ] -5- ( 4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amintrihydrochloridu ve formě hygroskopické tuhé látky vysušené při teplotě 80 °C a tlaku 0,3 kPa do konstantní hmotnosti (0,75 g, 0,0011 mol) o teplotě tání 224,5 až 226,5 °C (s rozkladem).
Příklad 240
Trans-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
Směs 3-fenoxytoluenu (2,5 g, 0,0136 mol) a N-bromsukcinimidu (2,54 g, 0,0142 mol) se míchá v acetonitrilu (20 ml) po dobu 2,5 h pod atmosférou dusíku. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá tetrachlormethan a výsledná tuhá látka se oddělí filtrací. Filtrát se odpaří s obdržením 4-brom-3-(methylfenyl)fenyletheru • · · · ···· • · · · ·· · • · · · · ····
- 255··-·· *··* ·*··* ve formě žluté olejovité kapaliny (3,5 g, 0,0133 mol).
XH NMR (chloroform-d, 400 MHz) 6 7,45 (d, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,12 (t, 1H), 7,00 (d, 2H), 6,89 (s, 1H), 6,71 (d, 1H), 2,34 (s, 3H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s revesrními fázemi (Hypersil C18, 5 Mm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu v průběhu 23 min s 0,1 M octanem amonným, 1 ml/min, t = 14,72 min.
Směs 4-brom-3-methylfenyl(fenyl)etheru (1,7 g,
0,00646 mol), diboronpinakolesteru (2,0 g, 0,00775 mol), [1,1’-bis(difenylfosfino)ferrocen Jdichlorpalladnatého komplexu s dichlormethanem (1:1) (0,16 g, 0,00019 mol) a octanu draselného (1,9 g, 0,01938 mol) v N,N-dimethylformamidu (65 ml) se zahřívá při teplotě 80 °C pod atmosférou dusíku po dobu 22 h. Směs se ponechá ochladit na teplotu okolí a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá dichlormethan a výsledná tuhá látka se odstraní filtrací celitem. Filtrát se odpaří na černou směs, která se čistí mžikovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi ethylacetat/n-heptan (3:97) jako mobilní fáze s obdržením 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl(fenyl)etheru (1,05 g, 0,00338 mol).
XH NMR (chloroform-d, 400 MHz) δ 7,73 (d, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,08 (t, 1H), 7,01 (d, 2H), 6,79 (d, 2H), 2,51 (s, 3H), 1,34 (s, 12H).
Chromatografie na tenké vrstvě: (ethylacetat/n-heptan
3:97), Rf = 0,28.
• · ·· · ·· ·» » t « · • · · · ····
25?
Směs 4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (20 g, 47,7 mmol) a 6N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové (60 ml, 360 mmol) v tetrahydrofuranu (120 ml) a acetonu (600 ml) se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 17 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a ke směsi se přidá 6N vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (20 ml), tetrahydrofuran (60 ml) a aceton (300 ml). Směs se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 4,5 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a žlutě zbarvený zbytek se promyje vodou s obdržením 4-(4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-1-cyklohexanonu (12,3 g, 32,7 mmol).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Hypersil C18, 5 μπι, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu v průběhu 15 min s 0,05 M octanem amonným, 1 ml/min), t = 10,20 min.
Směs 4-(4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-1-cyklohexanonu (5,6 g, 14,9 mmol), N-methylpiperazinu (3,3 ml, 29,8 mmol), kyseliny octové (2,6 ml, 44,7 mmol) a trimethylorthoformiatu (9,9 ml, 89,4 mmol) v dichlorethanu (100 ml) se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 1 h. Do směsi se přidá natrium-triacetoxyborohydrid (14,2 g, 67,05 mmol) a směs se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 18 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a ethylacetat. Vodná fáze se dále extrahuje ethylacetatem a spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se čistí mžikovou chromátografií na silikagelu s použitím směsi triethylamin/dichlormetahn (2:98) a poté směsí methanol/triethylamin/di-
chlormethan (2:3:95) jako mobilní fáze s obdržením trans-4-chlor-5-jod-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H- pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (1,7 g, 3,7 mmol).
XH NMR (DMSO-dg, 400 MHz) δ 8,63 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 4,63 (široký s, 1H), 2,15 (s, 3H), 1,94 (široký s, 6H), 1,45 (široký s, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Hypersil C18, 5 Mm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu v průběhu 15 min s 0,05 M octanem amonným, 1 ml/min), t = 6,17 min.
Trans-4-chlor-5-jod-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[ 2 , 3-d]pyrimidin (0,89 g, 1,9 mmol) v koncentrovaném roztoku hydroxidu amonného (40 ml) a dioxanu (40 ml) se zahřívá při teplotě 120 °C v tlakové nádobě po dobu 18 h. Směs se ponechá vychladnout na teplotu okolí a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a ethylacetat. Vodná fáze se dále extrahuje ethylacetatem a spojené organické extrakty se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku s obdržením 5-jod-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (0,35 g, 0,8 mmol).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Hypersil C18, 5 μιη, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu v průběhu 15 min s 0,05 M octanem amonným, 1 ml/min) t = 4,01 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH
441.
• · · ♦ · · «V «*·« · · • · · · · · «
255··-··
Směs trans-5-jod-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[ 2, 3-d ]pyrimidin-4-aminu (0,347 g, 0,000788 mol) 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl(fenyl)etheru (0,27 g, 0,000867 mol), tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) (0,054 g, 0,000047 mmol) a uhličitanu sodného (0,209 g, 0,00197 mol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml) a vodě (10 ml) se zahřívá na teplotu 80 °C pod atmosférou dusíku po dobu 16 h. Směs se ponechá ochladit na teplotu okolí a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a ethylacetat. Vodná fáze se dále extrahuje ethylacetatem a spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se vyčistí mžikovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi triethylamin/dichlormethan (5:95) a poté směsi methanol/triethylamin/dichlormethan (3:5:92) jako mobilní fáze s obdržením trans-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d jpyrimidin-4-aminu (0,376 g, 0,000757 mol). Trans-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (0,376 g, 0,000757 mol) se rozpustí v ethanolu, který se vaří pod zpětným chladičem (10 ml) a přidá se předehřátý roztok kyseliny maleinové (0,264 g, 0,00227 mol) v ethanolu (5 ml). Směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 15 min, ochladí se na teplotu okolí a sraženina se oddělí filtrací, promyje chladným ethanolem a vysuší s obdržením 5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7[4—(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleatu (0,153 g, 0,000181 mol).
1H NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 8,22 (s, 1H), 7,42 (m, 3H), 7,25 (d, 1H), 7,17 (t, 1H), 7,09 (d, 2H), 7,02 (s, 1H), • · · · · · * t· • · » · · ·· • · · · a · φ ·· — 25^»·-*· ·· · ···
6,89 (d, 1H), 6,16 (s, 6H), 4,58 (m, 1H), 3,3 (široký, 9H),
2,68 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,01 (široký, 6H), 1,57 (široký,
2H) .
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Hypersil C18, 5 Mm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu v průběhu 23 min s 0,1 M octanem amonným, 1 ml/min), t - 7,30 min.
Hmotnostní spektrometrie: MH* = 497.
Příklad 241
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-2-aminioacetathydrochlorid
Směs 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentanolu (50 mg, 0,129 mmol), kyseliny
2-[(terč.butoxykarbonyl)amino]octové (34 mg, 0,194 mmol),
1-[3-(dimethylamino)propyl]-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu (31 mg, 0,155 mmol) a 4-(dimethylamino)pyridinu (16 mg, 0,129 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se míchá pod atmosférou dusíku po dobu 24 h. Směs se vylije na led s vodou. Vodná vrstva se extrahuje 3x ethylacetatem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří. Zbytek se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím ethylacetatu jako mobilní fáze s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-2-[(terč.butoxykarbonyl)aminoJacetatu (39 mg, 0,072 mmol).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: t = 19,22 •· ·«*· • · · · · • · · · « 1» · <
min (Delta-Pack, C-18, 5 μτα., 30 nm, 3,9 x 150 mm, 5 až 85 % acetonitrilu v průběhu 23 min s 0,1 M octanem amonným, 1 ml/min).
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-2-[(terč.butoxykarbonyl)amino]acetat (39 mg, 0,072 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,5 ml). Do roztoku se zavádí plynný chlorovodík po dobu 3 min. Reakční směs se míchá po dobu dalších 30 min. Přidá se ether a sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-2-aminoacetathydrochloridu (39 mg) ve formě bílé tuhé látky.
XH NMR (DMSO-de) δ 2,20 (m, 5H), 2,67 (m, 1H), 3,83 (s, 2H), 5,25 (m, 1H), 5,31 (m, 1H), 7,14 (m, 2H), 7,43 (m, 1H), 7,50 (m, 1H), 7,68 (m, 1H), 8,26 (široký s, 2H), 8,40 (s, 1H).
LC/MS: MH^ = 444, t^ = 2,25 min (Pecospher, 3C-18,
Mm, 4,6 x 33 mm, 0 až 100 % acetonitrilu v průběhu 5 min s 0,1 M octanem amonným, 3,5 ml/min).
Příklad 242
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamathydrochlorid
4-Nitrochlorformiat (12,5 mg, 0,062 mmol) v dichlormethanu (1 ml) se ochladí na ledové-vodní lázni. Pomalu se přidává 4-methylmorfolin (7 μΐ, 0,062 mmol). Po 20 min se lázeň ledu s vodou odstraní a reakční směs se ponechá ohřát • · · ·
na teplotu místnosti. Přidá se 3-(4-amino-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[ 2 ,3-d]pyrimidin-7-yl)-l-cyklopentanol (20 mg, 0,052 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 4 d. Poté se zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří s obdržením žluté tuhé látky. Roztok této žluté tuhé látky v dichlormethanu (1 ml) se přidá k
2-morfolino-l-ethanaminu (0,2 ml). Po míchání při teplotě místnosti přes noc se reakční směs zředí ethylacetatem. Organická vrstva se promyje vodou (3x), nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Surový produkt se vyčistí vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-cyklopentyl-N-(2-morfΟΙ i noethyl ) karbamatu (17 mg, 0,031 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,08 (m, 4H), 2,43 (m, 7H), 2,73 (m, 1H), 3,29 (m, 2H), 3,67 (m, 4H), 5,289 (m, 5H), 7,09 (m, 6H), 7,40 (m, 4H), 8,30 (s, 1H).
LC/MS: MH* = 543, t = 2,13 min (Pecospher, 3C-18, μιη, 4,6 x 33 mm, 0 až 100 % acetonitrilu v průběhu 5 min s 0,1 M octanem amonným, 3,5 ml/min).
3-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamat (10 mg, 0,0184 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,5 ml). Do roztoku se zavádí plynný chlorovodík po dobu 3 min. Reakční směs se míchá po dobu dalších 10 min. Sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 3-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklopentyl-N-(2-morfolinoethyl)karbamathydrochloridu ve formě bílé • · · ·
tuhé látky.
XH NMR (DMSO-d6) δ 1,99 (m, 4H), 2,55 (m, 2H), 3,32 (m, 12H), 5,08 (m, 1/2H), 5,19 (m, 1/2H), 7,16 (m, 5H), 7,45 (m, 5H), 8,26 (s, 1H).
LC/MS: MH* = 543, t^ = 2,16 min (Pecospher, 3C-18, 3 Mm, 4,6 x 33 mm, 0 až 100 % acetonitrilu v průběhu 5 min s 0,1 M octanem amonným, 3,5 ml/min).
Příklad 243
4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-ylJcyklohexanol
Natrium-borohydrid (500 mg, 13 mmol) se přidá najednou k míchanému roztoku 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexan-l-onu (780 mg, 2,0 mmol) v methanolu (500 ml) a směs se míchá pod atmosférou dusíku po dobu lha poté se ponechá stát přes noc. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi 2M vodný roztok hydroxidu sodného (100 ml) a dichlormethan (100 ml). Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se dále extrahuje dichlormethanem (2 x 100 ml). Spojené organické extrakty se promyjí vodou (150 ml), vysuší uhličitanem draselným a vyčistí chromatografií na sloupci Biotage 40S s použitím směsi ethylacetat/triethylamin (98:2 až 95:5) a ethylacetat/ethanol (95:5) jako mobilní fáze s obdržením
4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexanolu ve formě bílé tuhé látky (750 mg, 1,9 mmol) o teplotě tání 199 až 200 °C.
LC/MS: Hypersil BDS C18 (100 x 2,1 mm) 0,1 M octan
™.2Γβ1’ amonný/acetonitril, 10 až 100 % acetonitrilu v průběhu 8 min), t = 4,12 min.
rHmotnostní spektrometrie: MH- = 401.
Příklad 244
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
4-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (100 mg, 0,294 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2 ml). Přidá se pyridin (2 ml) a poté fenylchlorformiat (44 μΐ, 0,353 mmol). Po míchání po dobu 3 h se přidá dalších 44 μΐ fenylmethansulfonylchloridu a reakční směs se míchá přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se purifikuje preparativní LC/MS s obdržením fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (52 mg, 0,113 mmol).
ΧΗ NMR (CDCla-d) δ 2,09 (m, 4H), 3,66 (m, 2H), 3,98 (S, 3H), 4,16 (m, 2H), 4,98 (m, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,09 (m, 3H), 7,23 (m, 4H), 7,41 (m, 2H), 7,62 (s, 1H), 8,20 (široký d, J = 7,80 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H).
LC/MS: MH- = 460.
Příklad 245
Tetrahydro-2H-4-pyranyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl] karbamat-4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonat
Tetrahydro-2H-4-pyranol (1,0 ml, 10,5 mmol) se smísí se 4-methylmorfolinem (2,0 ml) v dichlormethanu (20 ml). Do reakční směsi se pomalu přidává 4-nitrochlorformiat (1,98 g, 9,82 mmol). Po míchání po dobu 5 h se reakční směs zředí dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou, 1,0 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Surový produkt se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií s použitím směsi ethylacetat/heptan (4:1) jako mobilní fáze s obdržením 4-nitrofenyl-tetrahydro-2H-4-pyranalkarbonatu (1,5 g, 5,62 mmol).
XH NMR (CDC13-d) δ 1,87 (m, 2H), 2,06 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 3,98 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 7,40 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 9,0 Hz, 2H).
a) Tetrahydro-2H-4-pyranyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat —(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (57 mg, 0,168 mmol) a 4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonat (90 mg, 0,336 mmol) se smísí v pyridinu (1 ml). Po míchání po dobu 5 h se přidá dalších 90 mg 4-nitrofenyltetrahydro-2H-4-pyranylkarbonatu a reakční směs se míchá po dobu 2 d. Poté se reakční směs zahřívá na teplotu 70 °C po dobu 2 h. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě s obdržením tetrahydro-2H-4-pyranyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (30 mg, 0,064 mmol).
1H NMR (CDCl3-d) 6 1,78 (m, 4H), 2,08 (m, 4H), 3,60 (m, 4H), 3,94 (s, 3H), 3,97 (m, 2H), 4,15 (m, 2H), 4,98 (m, 2H), 5,23 (s, 2H), 6,78 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,07 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,16 (široký d, J = 7,90 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H) .
LC/MS: MH* = 468.
Příklad 246
3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochlorid
a) 4-Nitrofenyl(3-pyridylmethyl)karbonát
4-Nitrochlorformiat (2,49, 12,3 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se ochladí na ledové-vodní lázni. Pomalu se přidává 3-pyridylmethanol (1,0 ml, 10,3 mmol) a 4-methylmorfolin (2,0 ml, 18,5 mmol). Po 20 min se lázeň ledu s vodou odstraní a reakční směs se ponechá ohřát na teplotu místnosti. O 30 min později se přidá ethylacetat a reakční směs se zfiltruje. Filtrát se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří s obdržením tmavě hnědé tuhé látky, která se překrystaluje ze směsi ethylacetat/heptan s obdržením 4-nitrofenyl(3-pyridylmethyl)karbonátu (1,52 g, 5,54 mmol).
1H NMR (CDCl3-d) δ 7,38 (m, 3H), 7,79 (m, 1H), 8,28 • · «
(d, J = 9,09 Hz, 2H), 8,65 (m, 1H), 8,72 (s, 1H).
b) 3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (25 mg, 0,074 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (0,7 ml). Přidá se pyridin (0,7 ml) a poté 4-nitrofenyl(3-pyridylmethyl)karbonát (30 mg, 0,110 mmol). Po zahřátí na teplotu 100 °C přes noc se rozpouštědlo odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s obdržením 3-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfe-
nyl]karbamatu (12 mg, 0,025 mmo i).
1H NMR (CD< 213-d) δ 2, ,08 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,92
(s, 3H), 4,15 (m, 2H), 4,96 (m, 1H) , 5,26 (s, 2H), 5, 54 (ši-
roký s, 2H), 6 ,97 (s, 1H), ' 7,04 (s, 1H), 7,08 (d, J = 8,2
Hz, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,79 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,15 (m,
1H), 8,29 (s, 1H) , 8,61 (s, 1H) , 8, 71 (s, 1H).
LC/MS: MH* = 475.
b) 3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochlorid
3-Pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (12 mg, 0,025 mmol) se rozpustí v ethylacetatu (2,0 ml). Pomalu se přidává 1,0 N roztok kyseliny chlorovodíkové v etheru (1 ml). Sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 3-pyridylmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetra-
« · • · ♦ « 4 * « • 4
J · Ό fW - ·· 4 • · 4 4
hydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochloridu (13 mg, 0,25 mmol).
XH NMR (DMSO-de) δ 1,91 (m, 2H), 2,17 (m, 2H), 3,54 (m, 2H), 3,87 (S, 3H), 4,03 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,23 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,95 (m, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,82 (s, 1H).
LC/MS: MH^ = 475.
Příklad 247
2-Morfolinoethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochlorid
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (25 mg, 0,054 mmol) se smísí s 2-morfolino-l-ethanolem (0,1 ml) v pyridinu (0,7 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi s obdržením 2-morfolinoethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (24 mg, 0,048 mmol). Tuhá látka se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a pomalu se přidává 1,0 N roztok chlorovodíku v etheru (0,2 ml). Sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 2-morfolinoethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochloridu (24 mg, 0,045 mmol).
• · · · • · · ·’- 266 ΧΗ NMR (DMSO-de) δ 1,88 (m, 2Η), 2,16 (m, 2Η), 3,55 (m, 8Η), 3,90 (s, 3H), 4,03 (m, 4H), 4,49 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,65 (široký s, 2H), 7,84 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 10,95 (široký s, 1H).
LC/MS: MET = 497.
Příklad 248 (4-Brom-l,3-thiazol-5-yl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
a) 2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-karbaldehyd
1.3- Thiazolan-2,4-dion (3,52 g, 30 mmol) a oxybromid fosforečný (43 g, 150 mmol) se smísí s dimethylformamidem (2,56 ml, 34 mmol). Směs se poté zahřívá na teplotu 75 °C po dobu 1 h a na teplotu 100 °C po dobu 5 h. Po ochlazení na teplotu místnosti se směs nalije na led s vodou (500 ml) a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným oztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří s obdržením hnědé tuhé látky, která se promyje petroletherem. Odpaření rozpouštědla poskytuje 2,4-dibrom-l,3-thiazol-5-karbaldehyd (1,74 g, 6,42 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 9,90 (s, 1H).
b) (2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-ylJmethanol
2.4- Dibrom-l,3-thiazol-5-karbaldehyd (1,74 g, 6,42 mmol) se rozpustí v methanolu (70 ml) při teplotě 0 °C. Po • · · · * · • ·
malých částech se přidá natrium-borohydrid (0,244 g, 6,42 mmol). Ledová vodní lázeň se po 10 min odstraní a reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a přidá se nasycený roztok chloridu amonného. Přidá se 1,0 N roztok hydroxidu sodného pro upravení pH na 10. Vodná vrstva se extrahuje ethylacetatem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří. Zbytek se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií s obdržením (2,4-dibrom-l,3-thiazol-5-yl)methanolu (0,946 g, 3,47 mmol).
TH NMR (CDCl3-d) <5 2,11 (široký s, 1H) , 4,79 (s, 2H) .
c) (4-Brom-l,3-thiazol-5-yl)methanol (2,4-Dibrom-l,3-thiazol-5-yl)methanol (0,94 g, 3,44 mmol), trihydrát uhličitanu sodného (1,34 g) a palladium na uhlíku (10%, 0,07 g) se smísí v methanolu (33 ml). Výsledná směs se hydrogenuje při tlaku 414 kPa po dobu 2 d. Tuhá látka se zfiltruje celitem. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií s obdržením (4-brom-l,3-thiazol-5-yl)methanolu (0,32 g, 2,78 mmol).
1H NMR (CDCl3-d) δ 2,29 (široký s, 1H), 4,86 (s, 2H), 8,72 (s, 1H).
d) (4-Brom-l,3-thiazol-5-yl)methyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylkarbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylkarbamat (28 • · · · ·· ···· ·· • · · · · · • · · · · • · · · · · • · — ·θ íC Ο -Λ· ··· — Zj V
TuCj f 0,061 ϊπιποί) so siui s i Ξ (4 íditom 1,3 “ th i s z o 15-y 1) luGths. — nolem (50 mg, 0,434 mmol) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením (4-brom=l,3=thiazol=5=yl)methyl-N= [4-(4-amino-7-tetrahydro-2H=4-pyranyl=7H=pyrrolo[2,3=d] = pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu.
κττνπη ÍMIUXX (CDC1 -d) x 3 7 r n u ,07 Z™ Λ U X -tli / f O ,65 (m, nu x n 92
V z -'“J z -* ,13 / -m HLT X Λ l f ** ,98 (m, 1H) , 5, 35 (s, 1H) cz λ n f (Ξ
OU \ C. ď7 611 ) f O , l ( s t 1H), 7,04 (S, 1H) , 7, 09 ( •m Ul, 1H) *7 f ' r n r t a O f
1H), 8,17 (s, 1H), 8,32 (S, 1H) , 8, 78 ( <· ° f 1 U X Xll ) •
LC/MS: MH* = 481.
Příklad 249
Tetrahydro-3-furanyl-N-[4-(4=amino=7-tetrahydro-2H=4=pyra= nyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
Fenyl-N=[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s tetrahydro-3-furanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi s obdržením tetrahydro-3-furanyl-N-[4=(4-amino-7-tetrahydro-2H=4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (14 mg, 0,03 mmol).
ΧΗ NMR (CDCl3-d) δ 2,07 (m, 6H), 3,66 (m, 2H), 3,96 (m, 7H), 4,13 (m, 2H), 4,98 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,40 (m, 1H), 6,97 (S, 1H), 7,04 (S, 1H), 7,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), • 9 · ·
9 9
9999 99
9 9999 99
9 9 9 9
9 9 9 9
7,26 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,32 (s, 1H) .
LC/MS: MH* = 455.
-í Ir 1 <5 O K/3 rLXJYJ-ČlU
1,3 Dioxcl·an—5 — y 1 N— [ 4 (4—ammo—7—t etrahydr o—2H—4—pyrany 1 ~ =7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin=5=yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
1,3-Dioxan-4ylmethyl-N-[4=(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat
Fenyl-N-[4-(4-amino-7=tetrahydro=2H-4=pyranyl=7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s glycerolformalem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi s obdržením tetrahydro-3-furanyl-N-[4=(4-amino-7-tetrahydro-2H-4=pyranyl-7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamatu (2 mg, 0,004 mmol), ΧΗ NMR (CDCl3-d) δ 2,06 (m, 4H), 3,66 (m, 2H), 3,92 (m, 3H), 4,07 (m, 6H), 4,79 (m, 1H), 4,83 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 4,96 (m, 1H), 5,04 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,15 (velmi široký s, 2H), 6,96 (s, 1H), 7,05 (m, 2H), 7,53 (s, 1H), 8,15 (d, J = 8,2 HZ, 1H), 8,22 (s, 1H),
LC/MS: MH* = 471, a 1,3-dioxolan-4-ylmethyl-N-[4=(4-amino-7-tetrahydro-2H= -4-pyranyl-7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl(Jkarbamatu (6,0 mg, 0,013 mmol).
• · • · · · • · · · • · • · · • · — ·η η η i \J
3-U 11 NMR Cl - 3 d) δ 2 ,06 (m, 4H), 3,65 (m, 2H) , 3,75
Ί U X -Lil/ , 3 ,92 (m, 3H) Λ r -* ,03 (m, 1H), 4,13 (m, 1H) , 4 ,34 (m,
nu x £11 ) Λ f r 94 (s > 1H) r 4 , 97 (m, 1H) , 5,10 (s, 1H) , 5, 32 (široký
S , nu x ) r 6, 97 ( . s r 1H), 7, 03 (m, 2H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz,
Ί U X Uli ) n r ‘ t 38 f r* \ a r 1H) , 8, 15 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,31 (S , 1H).
LC/MS: ΜΗ = 471. ir J_ jl jx _ι_ α. κχ £, J χ 2-Pyridylmethyl-N=[4-(4=amino=7-tetrahydro-2H=4=pyranyl= -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochlorid
Fenyl-N= [ 4- (4-amino-7-tetrahydro=2H-4=pyranyl=7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin=5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s 2=pyridylmethanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením 2=pyri= dylmethyl-N- [ 4= (4-amino-7-tetrahydro=2H-4=pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin=5-yl)=2-methoxyfenylJkarbamatu (11 mg, 0,023 mmol). Tuhá látka se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a pomalu se přidává 1,0 N roztok chlorovodíku v etheru (0,1 ml). Sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 2-pyridylmethyl=N-[4=(4-amino=7-tetrahydro-2H-4-pyranyl=7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochloridu (12 mg, 0,023 mmol).
XH NMR (DMSO-de) δ 1,92 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 4,02 (m, 2H), 4,91 (m, 1H), 5,23 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,37 (m, 1H),
7 R 7 z f (d, 7,8 Hz, 1H), 7,87 (m, 3H), 8,42 (s, 1H), 8,57 (d, J
= 4,2 Liry 1 XI \ O QK / C Ί XI \ IIZJ f J.LÍ J f CJ f O O f ±Π j · T Γ» /MC · MP+ “ λ 7 R xj<- / i'iu? · ΠΠ — ** / ·
Příkl o c n O. IX
2=Pyridylmethyl-N-[4»(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5=yl)-2-methoxyfenyl]karbamathydrochlorid
Fenyl-N=[4=(4-amino-7-tetrahydro-2H-4=pyranyl=7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí se 4-pyridylmethanolem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením 2-pyridylmethyl-N-[4=(4-amino-7=tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H=pyrrolo= [2,3-d]pyrimidin-5=yl)=2-methoxyfenyl]karbamatu (11 mg, 0,023 mmol). Tuhá látka se rozpustí v ethylacetatu (2 ml) a pomalu se přidává 1,0 N roztok chlorovodíku v etheru (0,1 ml). Sraženina se oddělí filtrací pod atmosférou dusíku s obdržením 4-pyridylmethyl-N-[4=(4-amino-7=tetrahydro=2H-4=pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJkarbamathydrochloridu (12 mg, 0,023 mmol).
XH NMR (DMSO-de) δ 1,91 (m, 2H) , 2,16 (m, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 4,03 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,16 (s, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,76 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 9,05 (S, 1H).
LC/MS: MH
475.
• · • • · · · · · • · · • · • · • ·
• • · · • ·
• • θ'7 9 • ·
Pí* < V 1 ΟΚΟ x±j\.±au &D.J (5=Methyl=3=isoxazolyl)methyl=N=[4=(4=amino=7=tetrahydro=2H= =4=pyranyl=7H=pyrrolo[2,3=d]pyrimidin=5=yl)-2=methoxyfeny 1]karbamat
Fenyl=N=[4=(4=amino=7=tetrahydro=2H=4=pyranyl=7H= =pyrrolo[2,3=d]pyrimidin=5=yl)=2=methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s (5=methyl=3=isoxazolyl)methano= lem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením (5=methyl=3=isoxazolyl)methyl=N=[4=(4=amino=7=tetra= hydro=2H=4=pyranyl=7H=pyrrolo[2,3=d]pyrimidin=5=yl)=2= -methoxyfenyl]karbamatu (18 mg, 0,038 mmol).
XH NMR (CDCl3=d) δ 2,06 (m, 4H), 2,44 (s, 3H), 3,64 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 6,12 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,06 (m, 2H), 7,39 (s, 1H), 8,17 (široký Ξ, 1H), 8,21 (s, 1H).
LC/MS: MH^ = 479.
Příklad 254 [(2S)=5=Oxotetrahydro=lH=2=pyrrolyl]methyl-N-[ 4= (4=amino= =7-tetrahydro=2H-4=pyranyl=7H-pyrrolo[2,3=d]pyrimidin=5= =yl)=2=methoxyfenyljkarbamat
Fenyl-N=[4=(4-amino=7-tetrahydro-2H-4=pyranyl-7H=pyrrolo[2,3=d]pyrimidin=5=yl)=2=methoxyfenyl]karbamat (30 mg, 0,065 mmol) se smísí s (5S)=5=(hydroxymethyl)tetra=
hydro=lH=2=pyrrolonem (0,05 ml) v pyridinu (0,5 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením [(2S)-5-oxotetrahydro-lH-2=pyrrolylJmethyl-N-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H”pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5=yl)-2-methoxyfenyl]karbamatu (10 mg, 0,021 mmol).
NMR (CDCl3-d) 5 1, rso (m, Ί U \ -Lil J , 2, ,06 (m, 4H) , 2,34
( τη Ί XJ λ Xll/ , 2 ,41 (m, 2H), 3 ,64 (m, 2H) , 3 ,94 (s, 3H), 4 ,04 (m,
OU \ Λ ) f r 14 (m, nu\ λ ao ώΐΐ } f f (m, 1H) K f f 33 (m, 3H) , 6,10 (s,
1H), 6, 98 Z v ° , 1H), 7,04 (s, 1H) Ί F · F 09 (m, 1H) , 7,31 (s,
1 U) o ·»·“)/ U f 11 (široký s, 1H) , ° i ,32 f e·* F In; •
LC/MS: MH* = 481.
Příklad 255
4-Aminobenzyl-N- (4= (4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
a) terč.Butyl-N-(4=(hydroxymethyl)fenyl)karbamat (4-Aminofenyl)methanol (1,23 g, 10 mmol) a diisopropylethylamin (2,6 ml, 15 mmol) se smísí s di(terc.butyl)dikarbonatem (2,62 g, 12 mmol) v dichlormethanu (50 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se ethylacetat a organická vrstva se promyje vodou, 1,0 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem uhličitanu sodného, vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří. Surový produkt se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií směsí ethylacetat/heptan (2:3) s obdržením terc.butyl-N=(4-(hydroxymethyl)fenyl)karbamatu (2,16 g, 9,67 mmol).
1H NMR (CDCl3=d) δ 1,52 (s, 9H) , 4,63 (s, 2H) , 6,47 (široký s, 1H), 7,30 (d, 8,5 Hz, 2H), 7,36 (d, 8,5 Hz, 2H).
b) 4-Aminobenzyl=N-(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamat
Fenyl-N-[4=(4-amino-7=tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H= -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyljkarbamat (51 mg, 0,111 mmol) se smísí s terč.butyl-N-(4-(hydroxymethyl)= fenyl)karbamatem (119 mg, 0,533 mmol) v pyridinu (0,8 ml). Reakční směs se zahřívá na teplotu 100 °C přes noc. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se vyčistí preparativní LC/MS s reversními fázemi s obdržením 4-aminobenzyl=N=(4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl=7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl)karbamatu (9 mg, 0,015 mmol).
XH NMR (CDCl3=d) δ 1,52 (s, 1H), 2,08 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 3,90 (S, 3H), 4,14 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,17 (s, 2H), 5,37 (široký s, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,06 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,38 (m, 3H), 8,16 (široký S, 1H), 8,30 (s, 1H).
LC/MS: MH* = 589.
Příklad 256
Nl-[4-(4=Amino=7-tetrahydro=2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]benzamid
5-(4-Amino-3=methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (80 mg, 0,236 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2,0 ml). Přidá se pyridin (2,0
ml) a poté benzoylchlorid (41 μΐ, 0,353 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením Nl=[4-(4-amino-7-tetrahydro=2H-4=pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5=yl)-2-methoxyfenylJbenzamidu (64 mg, 0,144 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,12 (m, 4H), 3,67 (m, 2H), 3,39 (s, 3H), 4,17 (m, 2H), 4,99 (m, 1H), 7,03 (s, 1H) , 7,04 (s, 1H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,53 (m, 3H), 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,63 (d, J = 8,2 Liry 1 U λ no f xii) ·
LC/MS: MH* = 444.
Příklad 257
N2-[4-(4-Amino=7=tetrahydro-2H-4-pyranyl=7H—pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5=yl)-2-methoxyfenylJ-2-pyridinkarboxamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7=tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin (80 mg, 0,236 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2,0 ml). Přidá se pyridin (2,0 ml) a poté 2=pyridinkarbonylchloridhydrochlorid (63 mg, 0,353 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením Nl-[4-(4-amino-7-tetrahydro-2H=4-pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenylJbenzamidu (84 mg, 0,189 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,12 (m, 4H), 3,67 (m, 2H), 4,03 ♦ ♦ * · · ·
(s / 3H), 4,14 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 5,37 (s , 1H), 7,04 (Ξ,
1H), 7,09 (S, 1H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H),
7,92 (m, 1H), o o o f □ (s, 1H), 8,70 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 10,62
(3 f
ΛΑΚ
ΟΚΟ
£, ο
Ν5-[4-(4=Amino-7-tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin”5™yl)-2-methoxyfenyl]-l,3=dimethyl-lH=5-pyrazolkarboxamid
5=(4Amino=3-methoxyfenyl)-7=tetrahydro=2H-4-pyranyl=7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin”4=amin (80 mg, 0,236 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (2,0 ml). Přidá se pyridin (2,0 ml) a poté 2=pyridinkarbonylchloridhydrochlorid (63 mg, 0,353 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Tu= há látka se oddělí filtrací s obdržením N5=[4-(4-amino=7=tetrahydro=2H=4=pyranyl-7H=pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin=5-yl )= =2-methoxyfenyl]=1,3-dimethyl-lH=5-pyrazolkarboxamidu (30 mg, 0,065 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 2,11 (m, 4H), 2,32 (s, 3H) , 3,66 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,17 (s, 3H), 4,99 (m, 1H), 5,22 (široký s, 2H), 6,46 (s, 1H), 7,03 (s, 1H) , 7,07 (s, 1H), 7,12 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,33 (d, 2H), 8,49 (d, J = 8,2 HZ, 1H).
LC/MS: MH
462.
• · * · • ·
Λ» i f
OKO
XTLXJYÍŮU
Nl-[4-(4=Amino-7-tetrahydro=2H-4=pyranyl-7H=pyrrolo= [ 2,3=d]pyrimidin=5=yl)-2-methoxyfenyl]-2,2-dimethylpropanamid
5=(4-Amine-3-methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H-4=pyra= nyl=7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4=amin (50 mg, 0,147 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (1,5 ml). Přidá se pyridin (1,5 ml) a poté 2,2=dimethylpropanoylchlorid (31 mg, 0,221 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením Nl-[4-(4-amino-7=tetrahydro-2H=4=pyranyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-2,2=dimethylpropanamidu (27 mg, 0,064 mmol).
XH NMR (CDCl3-d) δ 1,35 (s, 9H), 2,09 (m, 4H), 3,66 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 5,46 (široký s, 2H), 6,98 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,07 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,49 (d, J = 8,2 Hz, 1H) .
LC(MS: MH* = 424.
Příklad 260
Nl=[4-(4=Amino-7=tetrahydro=2H=4-pyranyl-7H-pyrrolo= [2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-1-cyklopentankarboxamid
5-(4-Amino-3=methoxyfenyl)-7-tetrahydro-2H=4-pyra= nyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin=4-amin (50 mg, 0,147 mmol) • · • · • 4 » · • · · · 1 · · · «« · · se rozpustí v dichlormethanu (1,5 ml). Přidá se pyridin (1,5 ml) a poté l=cyklopsntankarbonylchlorid (31 mg, 0,221 mmol). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Tuhá látka se oddělí filtrací s obdržením Nl-[ 4-(4-amino-7-tetrahydro-2H-4= -pyranyl-7H=pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-5-yl )-2-methoxyfenyl ]-
r 9 1 γν» 4” V·* x r Ί v-*-»*· λts-ξι o vn i 11 ί / O O —k-c iiuc u-liy xj^/x w£^caxxcixux\xU. x u xxixj , 0,076 mmol).
1 ti MMD XI X^X-XXTk (CDC X “XU. i U X f Ό XJ (m, 2H), 1,81 (m, 2H), 1,95
< m \ 111 r A u \ η H C. *i ki j j £, f U XJ (1111 4U\ O OO f η» •txx j f f t i xU ř 1U\ O ί τη OUX O O A / & XXX y f X j O -X XLl f CkJ. ) f 3 f Z? “± O f
3H) Λ i κ f ** f \ f ou \ Zxx; , A Cl/Z / -m Ί U \ f V 111 f Χ1χ } , 5,37 (široký s, 2H), 6,98
(S, Ί II \ Ί no XXX ) f / fKJJ (s, iu\ o no (A f / ryJ / J = 8,2 HZ, 1H), 7,84 (S,
1H) o on f <-* f « f k <=> z 1H), O Λ O f T — U , XX f U — 8,2 HZ, 1H).
τ r* /iutq · / no · MH* —- A O O — T □ l ·
Příklad 261
NI-[4=(4-Amino=7=tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H-pyrrolo= [2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-methoxyfenyl]-3-fenylpropanamid
5-(4-Amino-3-methoxyfenyl)-7=tetrahydro-2H-4-pyranyl-7H=pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4=amin (50 mg, 0,147 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (1,5 ml). Přidá se pyridin (1,5 ml) a poté 3=fenylpropanoylchlorid (37 mg, 0,221 mmol).
Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se rozpustí v 1 ml dimethylsulfoxidu, přidá se methanol (1 ml) a vytvoří se sraženina. Tuhá látka se od” dělí filtrací s obdržením Nl-[4=(4-amino-7-tetrahydro-2H-4=pyranyl-7H”pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)=2-methoxyfenyl]—2,2-dimethylpropanamidu (7 mg, 0,015 mmol).
• · • » ·«·* • » * · # ·· v • · · ·· • · · «« • · « ·· ’·-= 279 -*·
XH NMR f _/Ί x r n uuul — vt f 0 f 07 (m, 4H), 2, ,75 (m, 2H) n na t J f v
(m, nu x Ί fiK £,lt ) r u f ( lít ! nux n o o ΔΠ. ) f f u o / i o / 3H) , 4,13 (m, nu x /5X1 ) Λ Z ** ,96 (m
1H) f -J i y ! C3_LJ_ í- nu X < “ f ! v f 93 (s > 1H), 7, ,05 (m, 2H) η n c. t i f
(m, 5H), 7,70 ( S t 1H), 8,24 ( 3 Z . 1H) , 8,46 (uz J = O u f n Ur» ZL· X1ZJ f
mru-*1’1X1 τ r» /mro / nu /79
-i ! ·
a)
Směs cis-5-( 4-amino=3-methoxyfenyl )-7-[ 4=( 4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)= -4-aminu (0,25 g, 0,575 mmol), pyridinu (2,5ml) a dichlormethanu (2,5 ml) se zpracuje příslušným chloridem kyseliny (0,862 mmol) a poté se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 1 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se vyčistí preparativní chromátografií s reversními fázemi. Sloučenina (280 mg, 0,460 mmol) se rozpustí v horkém ethylacetatu (25 ml), poté se zpracuje kyselinou maleinovou (160 mg, 1,38 mmol), rozpustí v ethylacetatu (10 ml), směs se ponechá ochladit na teplotu okolí a poté se míchá po dobu 1 h. Tuhá látka se oddělí filtrací a vysuší s obdržením sloučeniny ve formě trismaleatu (370 mg).
Analytické výsledky vysokovýkonné kapalinové chromatografie s reversními fázemi shrnuté v tabulce se obdrží na sloupci Hypersil HS C18 [(5 μτη, 10 nm) 250 x 4,6 mm] s použitím lineárního gradientu 25 až 100 % acetonitrilu/0,1 M octan amonný v průběhu 10 min při 1 ml/min. Čas retence se • '5 <··♦ •· «· •· ~· · označuje RT.
Molekulové hmotnosti hmotnostního spektra se označují MH*.
Příklad 262
RT 6,62
MH* 576,3
Gradient a • * dS *L ·· ······ • · · · · · « ·· • · · · · ·· ···· «· ··
Příklad 263
RT 7,7
MH- 608,2
Gradient a
Příklad 264
RT 14,23
MH- 588,3
Gradient b dS2 • ·
Příklad 265
RT 6,85
MH* 540,2
Gradient a
Příklad 266
RT 8,15
MH* 608,2
Gradient a
Příklad 267
RT 8,15
MH* 642,3
Obecný způsob přípravy soli
Trans-benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpipera= zino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3=d]pyrimidin-5=yl }-2-methoxyfenyl)karbamat se rozpustí v ethylacetatu a zpracuje kyselinou maleinovou (280 mg) v ethylacetatu. Výsledná tuhá látka se zfiltruje pod proudem dusíku a vysuší ve vakuu v průběhu 4 h s obdržením cis-benzyl-N-(4-{4-amino=7-[4= -(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H=pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleatu (580 mg) jako krémově žluté látky o teplotě tání 158 °C (s rozkladem).
2Η NMR (d6 DMSO, 400 MHz) S 8,74 (1H, s), 8,27 (1H,
S), 7,78 (1H, d), 7,35-7,77 (5H, m), 7,10 (1H, s), 7,04 (1H, s), 6,16 (6H, s), 5,17 (2H, s), 4,74 (1H, m), 3,82 (3H, s), 3,23 (5Η, m), 2,78 (3Η, s), 2,51 (3Η, m), 2,41 (1H, s), 2,09 (4H, m), 1,70 (4H, m) .
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie: (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N octanu ammoném v průběhu 20 min), retenční čas t =13,30 min, 94 %.
Následující soli se připraví podobným způsobem. Podmínky LCMS se popisují níže.
Údaje LCMS:
Perkin Elmer Pecosphere C18, /im, 33 x 4,6, 3,5 ml /min 100 % 50 mM octanu amonného až 100 % acetonitrilu v průběhu 4,5 min
Struktura
Ret. čas
MH*
2.92 497.1
3.02 497.2
2.64 481.2
2.7 481.2
Cis- a trans-Nl-(4-4-amino=7=(4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo(2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)=3-fenylpropanamid
Ke 4 = ( 4-amino-5- (4-amino=3-methoxyfenyl) -7H-pyrrolo(2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (0,8 g, 2,3 mmol) ve směsi pyridin/dichlormethan (1:2,5, 45 ml) se přidá hydrocinnamylchlorid (0,57 g, 3,4 mmol) v dichlormethanu (2 ml) při teplotě 0 °C pod proudem dusíku. Roztok se míchá při teplotě 0 °C po dobu 2 h. Přidá se nasycený vodný roztok kyseliny citrónové (50 ml) a organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem kyseliny citrónové (2 x 50 ml). Vysuší se, zfiltruje a odpaří s obdržením hnědé pěny (1,0 g). Ta se rozpustí v dichlorethanu (100 ml) a N-methylpiperazinu (0,63 g, 6,3 mmol) a přidá se kyselina octová (0,38 g, 6,3 mmol). Přidává se po částech pod atmosférou dusíku natrium-tri- acetoxyborohydrid (0,67 g, 3,15 mmol) a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Přidá se nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a směs se extrahuje dichlormethanem (3 x 100 ml). Spojené organické fáze se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením suspense, která se čistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol (100/0 až 50/50 s přírůstky po 5 %). Frakce odpovídající pohyblivější látce se spojí s obdržením cis-Nl-(4-4-amino-7=(4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H=pyrrolo(2,3-dJpyrimidin- -5-yl-2=methoxyfenyl)-3-fenylpropanamidu (0,26 g) ve formě sklovité látky. Ta se rozpustí v ethylacetatu (5 ml) a přidá se kyselina maleinová (160 mg) v ethylacetatu (2 ml). Výsledná tuhá látka se zfiltruje s obdržením _ nor _ ·· 4»4-bW ·· ···· ·· • · · ·· · ··· • · · · · · · cis-Nl-(4-4-amino-7-[4=(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolof 2,3-d ]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid-trismaleatu (260 mg) ve formě bílé tuhé látky.
Analytické podmínky LC/MS: sloupec: Pecosphere, C18, fd>iu f 3 3 x 4,6 mm v prubehu 4,5 min
Eluční činidlo: 0 % B/A až 100 % B/A (B: acetonitril, A: 50 mM pufr octanu amonného, pH 4,5), 3,5 ml/min, (retenční čas rt = 2,86 min, 568,4).
Frakce odpovídající méně pohyblivé látce se spojí s
obdržením trans-Nl-(4-4-amino-7-[4=(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin=5-yl-2-methoxyfe=
nyl)-3-fenylpi ropanamidu (0,11 g) ve formě sklovité látky. Ta
se rozpustí v ethylacetatu (5 ml) a zpracuje roztokem
kyseliny malei Lnové (68 mg) v ethylacetatu (2 ml). Výsledná
tuhá látka se zfiltruje s obdržením trans-NI-(4-4-amino-
-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d] = pyrimidin-5-yl-2=methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid-trismaleatu (94 mg) ve formě bílé tuhé látky.
Analytické podmínky LC/MS: sloupec: Pecosphere, C18, 3 μη, 33 x 4,6 mm. Elucm činidlo: 0 o B/A az 100 o B/A v průběhu 4,5 min (B: acetonitril, A: 50 mM pufr octanu amonného, pH 4,5), 3,5 ml/min, (retenční čas r = 2,68 min, C C. ρ Ό \
M O f ) ·
[2,3 d]pyrimidin 7 yl]~1~cyklohexanon
V>, .r>4-.T*A Z Ί
Pk2OíS±±lId \JL-U\JV Cl J.
i n c; _L f
ΎΤ»ΤΜ Λ Ί
J.ILLLLX-/ _i_ (200 ml ) . Po (2,07 g přes noc.
částech se přidává natrium=triacetoxyborohydrid
9,75 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3 . Spojené organické fáze se promyjí vodou, vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením polotuhé látky, která se čistí mžikovou chromatografií na sloupci šilikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol (0 % methanoPřidá se (150 ml) lu až 50 % methanolu v přírůstcích po 5 %). Frakce odpovídající pohyblivější látce se spojí a odpaří s obdržením cis=5=(4=amino=3=methoxyfenyl)=7=(4=(4-methylpiperazino)= cyklohexyl]=7H=pyrrolo[2,3=d]pyrimidin=4=aminu (1,2 g, 43 %) ve formě krémově tuhé látky.
XH KTMp AT αίχχ (d -DMSO) x G ' c o u o ,1 (1H, s), 7,11 (1H, s), 6,87
f Ί U Ο X KΞi f a na KJ f i z/ f Ί U z3 X v ±ιχζ i c. ne (2H, široký s), 4,80 (2H, šir<
s ) z 4,64 (1H, iu) f 4,08 (1H, m), 3,82 (3H, s), 3,17 (2H, m
n 07 / ru £. f i kJ AI r m) , 2,21 (3H, Z’ X =! ř 2,08 (4H, m), 1,70 (2H, m),
π c: n f nu j_ , .j £,n f •m X AU j ·
Χ7τ ro ζτ V rVrl/· v»t> o v y bsjj\v vyjs.\^iiiici (retenční čas kapalinová chromatografie = 11,24 min, 97,6 %) .
fv\*5 γ· n z·» v· ří <^ »·» τ’ m +· v»s v» z-* —. K «« / A —— -a w T — 7 — >» t r 1 X -_ *7—.ΪΛ —
Uupai -L £3 VJAJU-L Zj<=ÍT JL1LL U-LCU1O“J “í — CUuliiU j ALH= Leny i ý l L
0 —1 7V· 1 Ί Ί r»_.
f U — <U. j y X. XlLl-LkX-LAA =(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[
— A — «3» W T VM Ί / O A ”·* CIAU-LAAU. \ V f g, 14 %) ve f ormě bílé látky.
1 U ΆΤΛΛΌ 11 ΑΤΑΆΧΧ í zq _ΠΜθη X t XX JL/l-A U? W 1 '6 ' 5 8 ,10 (1H s) t 7 OC / 1 U zm\ C ΌΠ 1 f í f \ J.11 , O } , XJ f XJ t
(1H, Ξ), 6,77 / Ί U ζ4 X ^-Lll, xx/ , C. 71 V , / -L f i u z? \ ( ±11 , xx ; , fZ fX CZ f TJ Λ i v z> Tz λτ f· \ Uf V -X ZúAA , G>±A. wivy O J ,
λ Ία , l t nu X t s), a c: n /nu T J-Π , m) , 3,81 (3H, s) , 3,35 (1H, m),
2,50 (5H, m), n m / cu zO , -f -L \ ->AA , m) n 1 A ( 1 LT , z> , in, τη X Ί Ω7 1U ) f X , > i / <U X f m),
1,45 f nu ς ^11 , m).
Vysokovýkonná ka 1 £JC1 J- inová chromatografie (retenční čas
t 10 ir ,13 min, 97,9 %).
K roztoku
A _ O TH T » Z“1_ Q — TV» /~\4“ Vt zs t -^zt rl X _ *~7 — Γ *í ~ciiuxiit/ — u mcl.xlvAy L t=Xiy J- f f [
-4-aminu (30 mg, 0,069 mmol) v pyridinu (0,5 ml) se přidá prislusny chlorid kyseliny (2 ekvivalenty, 0,138 mmol)·
Lahvičky se zazátkují a třepou přes noc na oběžné třepačce. Přidají se další dva ekvivalenty chloridů kyseliny (0,138 mmol) ve dvou dílech (každý díl 1 ekvivalent) a výsledné směsi se opět třepou přes noc. LCMS (hmotnostní mikrokolona: Pecosphere C18, 3 Mm, 33 x 4,6 mm. Eluční činidlo: 0 % B/A až 100 % B/A v průběhu 4,5 min (B: acetonitril, A: 50 mM
pufr octanu amonného, pH 4,5, vykazuje přítomnost produktu odpaří do sucha a výsledné objemu dimethylformamidu a kapalinovou chromatografií popisují níže spolu s příslušnými údaji LCMS.
,5 ml/min) výsledných směsí všech případech. Roztoky se zbytky se znovu rozpustí v malém čistí preparativní vysokovýkonnou s reversními fázemi. Struktury se .J ve
Příklady 269 až 293 se provedou způsoby analogickými příkladu 268.
nříi^l nzrn
RT 2,61
ΜΗ* 576,3
C»*
Příklad 270 doi -> η π
XX X , U X.
MH* 570,3
Příklad 271
RT 2,61
MH* 600,3
CH,
Příklad 272
RT 3,26
MH* 608, 3
Příklad 274
RT 2,73
MTJ-·- K C O Λ ríLL c, , • 99
9 9
Τ') ν'< VÍ -s/4 07c
X* X X JTV-L Cl VI £1 t ~~J
RT 3,00
MH* 574,3
Příklad 276
RT 2,76 MH·*· 570,
O .J _ ίοί
Příklad 278
RT 2,94
ΜΗ* 570,3 ··· · · « · » »· ♦· · «W «··♦ t * >
• · ·
Q Ί Q t _u -f
MH* 604,3
Příklad 280
RT 3,16
Μυ1· R Q η O
1’111 —* CJ U f ~J
CH»
O c. o £j f \J KJ
·· r··£9G ·*” ···· ·· • · · · · · ··· ···· · · ·· * ·· ···
Příklad 283
RT 2,84
MH* 585,3
Příklad 284
RT 2,90
MU-·- tJ7C Ί
1’111 _> í VI f ·· »-· · 2 9 V •ν'- ···· ·· • · ··· · · · · • · · · · · · ···· ·· ·· · ·· ···
Příklad 285
RT 2,90
MH- 584,4
Příklad 286
RT 2,74
1AXJ“·- C ZZ
1*111 u O f Ό
·· *=*·200·«“ ···· ·· ·· ··· · · ♦ · • · · · · · · ···· · ♦ ·· * ·· ···
Příklad 292
Drn o O d xx ± x. t w κ o o o
1'11 L UOJfJ
Způsob A y1]—1—cyklohexanonu (2,53 mmol) a ledove kyseliny octové (7,60 mmol) v
V-l Λ ť* 4— 1 111-/O U-L po dobu mmol) a h Přidá se 1 ·
g hydrogenuhličitanu sodného v 50 ml vody se odzfiltruj a filtrát se od
Vyčistění ί Ιτ/Λ — £j IRv-
Γ Π O — Η Ί ν'i τ v- i w ί i v. Λ τη τ V»» r
L j P J -L J-111J-V4X*, — *r — αιιιχιιγ ·
Způsob B
Směs příslušného pyrrolidinu (7,53 mmol), 4-[4-amino= —5—(4—fenoxyfenyl)—7H—pyrrolo[2,3-d]pyrimidin=7yl-l-cyklohexa- nonu (2,51 mmol) a ledové kyseliny octové (7,35 mmol) ve 45 ml dichlorethanu se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min. Přidá se natrium-triacetoxyborohydrid (3,26 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 22 h. Přidá se roztok 1,35 g hydrogenuhličitanu sodného v 50 ml vody a reakční směs se míchá po dobu 1 h. Organický podíl se oddělí, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a filtrát se odpaří s obdržením hnědé olejovité kapaliny.
Vyčištění mžikovou chromatografií na silikagelu poskytuje cis- a trans-7
-[(4-pirrolidino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin=4-aminy.
Příprava soli
K teplému roztoku pyrrolopyrimidinu (2,48 mmol ze způsobu A nebo B výše) se přidá ethanol a roztok kyseliny maleinové (7,28 mmol) v ethanolu. Při chladnutí roztoku na teplotu okolí se vylučuje bílá sraženina. Výsledná tuhá látka se izoluje filtrací a suší ve vakuu s obdržením žádaného trismaleatu. Analytické výsledky retenčních časů při vysokovýkonné kapalinové chromatografii s reversními fázemi shrnuté v tabulce se obdrží na sloupci Hypersil HyPurity Elitě C18 [(5 μΜ, 20 nm) 250 x 4,6 mm] s použitím lineárního gradientu 25 až 100 % acetonitrilu v 0,1 M octani amonném v průběhu 10 min (gradient a) nebo 25 min (gradient b) při průtoku 1 ml/min.
♦ · -<··303 ·-* ···· • · · · · · • · · · ·
• ··· ·· ·· «
Příklad 294
RT 7,967
ΜΗ* 511,1 Gradient a
Příklad 295
RT 7,383
MH* 527,2 Gradient a • · —»· 24) 4 ·· ··.· ·· • · · · · · · · · • · · · · 9 9 ······ ·· · ·· ·
Příklad 296
RT 13,941
ΜΗ* 497,1
Gradient b
Příklad 297
RT 7,733
MH* 511,2
Gradient a ·· -·*3Ο5 *· ··.·
Příklad 298
RT 14,067
ΜΗ* 497,1 Gradient b
Příklad 299
RT 13,891
MH* 497,1
Gradient b
Příklad 300
RT 14,076
ΜΗ* 497,1
Gradient b
Příklad 301
RT 7,750
MH* 527,2
Gradient a > · ·3·0 7 η · · · ·
Příklad 302
Cis- a trans-4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-hydroxycyklohexylmethylkyanid
Roztok diisopropylaminu (0,649 g, 0,0050 mol) v tetrahydrofuranu (10 ml) se ochladí na 0 °C. Po kapkách se přidává 1,6 M roztok n-butyllithia (3,14 ml, 0,0050 mol) v hexanu při udržování teploty nižší než 5 °C. Po dokončení přidávání se směs míchá po dobu 20 min při teplotě 0 °C. Směs se ochladí na -78 °C a přidá se suchý acetonitril (0,175 g, 0,0043 mol) při udržování teploty nižší než -70 °C. Po dokončení přidávání se směs míchá po dobu 20 min při teplotě -78 °C a přidává se směs 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (1,000 g, 0,0025 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) a hexamethylfosforamidu (10 ml) s udržováním teploty nižší než -70 °C. Po skončení přidávání se směs míchá po dobu 30 min při teplotě -78 °C, poté se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h. Směs se rozdělí mezi dichlormethan a nasycený vodný roztok chloridu amonného. Organická fáze se promyje vodou a nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a isomery cis a trans se oddělí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol (95:5) jako elučního činidla s obdržením méně polárního 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-hydroxycyklohexylmethylkyanidu (0,120 g, 0,00027 mol) a polárnějšího 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-hydroxycyklohexylmethylkyanidu (0,170 g, 0,00038 mol).
• · • · ♦ • · · ·
Méně polární složka TH NMR (DMSO-de, 400 MHz) 8 8,13 (s, 1H), 7,48 (d, 2H), 7,41 (t, 2H), 7,37 (s, 1H), 7,15 (t, 1H), 7,093 (d, 2H), 7,088 (d, 2H), 6,11 (b, 2H), 5,05 (s, 1H), 4,53-4,61 (m, 1H), 2,66 (s, 2H), 2,18 (q, 2H), 1,80 (t, 4H), 1,66 (t, 2H) .
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Delta Pak C18, 5 μπι, 30 nm, 15 cm, 5 až 85 % acetonitrilu v 0,1 M octanu amonném v průběhu 20 min, 1 ml/min), t = 15,90.
xr
MH* = 440.
Polárnější složka (pravděpodobně trans, aryl-axiální, OH-axiální)
XH NMR (DMSO-d , 400 MHz) 8 8,13 (s, 1H), 7,63 (s,
1H), 7,48 (d, 2H), 7,41 (t, 2H) , 7,15 (t, 1H), 7,11 (d, 2H),
7,08 (d, 2H), 6,11 (b, 2H) , 5,22 (s, 1H), 4,62-4,67 (m, 1H),
2,98 (S, 2H), 1,82-1,99 (m, 6H), 1,65-1,73 (m, 2H).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (Delta Pak C18, 5 μπι, 30 nm, 15 cm, 5 až 85 % acetonitrilu v 0,1 M octanu amonném v průběhu 20 min, 1 ml/min), t = 15,88.
x- *
MH* = 440.
Příklad 303 • «••309 * * · · · · · · • · · · · · · · · • c « · · t ·
Cis- a trans-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-[4-4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
a) terč.Butyl-N-(4-brom-2-fluorfenyl)karbamat
Roztok natrium-bis(trimethylsilyl)amidu (1,0 M roztok v tetrahydrofuranu, 2,05 ekvivalentů, 270 mmol) se přidává po kapkách k roztoku 4-brom-2-fluoranilinu (24,78 g, 130,4 mmol) v tetrahydrofuranu (250 ml) v průběhu 15 min pod atmosférou dusíku. Po dalších 15 min se po částech přidává di(terc.butyl)dikarbonat (1,2 ekvivalentu, 34,12 g, 156,3 mmol) (lze pozorovat slabě exothermní reakci). Reakční směs se stává značně viskosní a ukončení reakce se dosahuje po 4 h (analýza chromatografií na tenké vrstvě s použitím směsi ethylacetat/heptan 1:9 jako elučního činidla). Reakční směs se odpaří ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetat (300 ml) a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (150 ml). Vodná vrstva se dále extrahuje ethylacetatem (2 x 200 ml) a spojené organické vrstvy se vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Čištění sloupcovou chromatografií s použitím gradientu 10 až 15 % ethylacetatu v heptanu poskytuje terč.butyl-N-(4-brom-2-fluorfenyl)karbamat ve formě světle žluté voskovíté tuhé látky (30,0 g, 79 %).
ΧΗ NMR (400 MHz, CDC1J δ 1,51 (9H, s), 7,22 (1H, m) a 7,24 (2H, m).
b) terč.Butyl-N-[2-fluor-4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenylJkarbamat
Roztok terč.butyl-N-(4-brom-2-fluorfenyl)karbamatu (54,0 g, 0,186 mmol), bispinakolatodiboranu (1,2 ekvivalen4
-,.Λίο • · 4 * · · ·· · 4 ♦♦ ·* · tu, 56,8 g, 223,3 mmol), octanu draselného (3,0 ekvivalentu, 54,7 g, 558 mmol) a chloridu palladnatého (dppf) (0,03 ekvivalentu, 4,65 g, 5,58 mmol) v dimethylformamidu zbaveném vzduchu (1 litr) se zahřívá na teplotu 80 °C pod atmosférou dusíku po dobu 16 h. Dimethylformamid se odpaří za sníženého tlaku a výsledná hnědá tuhá látka se rozpustí v dichlormethanu (500 ml). Anorganické zbytky se oddělí filtrací silikagelem a filtrát se vyčistí sloupcovou chromatografií s použitím gradientu 10 až 15 % ethylacetatu v heptanu s obdržením produktu ve formě žluté viskosní olejovité kapaliny, která stáním krystaluje s poskytnutím terč.butyl-N-[2-fluor-4-(4,4,5,5-tetraměthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl]karbamatu (56,5 g, 92 %).
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 1,33 (12H, s), 1,53 (9H, s), 6,82 (1H, široký s), 7,46 (1H, d, J = 11 Hz), 7,55 (1H, široký d) a 8,12 (1H, široký t).
Hmotnostní spektrometrie: m/z = 337,2.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (5 až 100 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 15 min při 1 ml/min s použitím sloupce Hypersil HyPurity Elitě C18, 5 Mm, 20 nm, 250 x 4,6 mm), retenční čas t =10,16 min, 90 %.
c) terč.Butyl-N-4-[4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenylkarbamat
Suspense 4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (31,18 g, 74,41 mmol), terč.butyl-N-[2-fluor-4-(4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl]karbamatu (1,5 ekvivalentu, 37,6 g, ·· τ· ······ • 3 · < · · · ·· « · · · · · · · · · «··««·· β · ···· ·· ·* * 4····
111,6 mmol), uhličitanu sodného (2,5 ekvivalentu, 19,72 g, 186 mmol) a trifenylfosfinpalladia (4 molární %, 3,44 g, 2,98 mmol) v dimethyletheru (1,2 litru) a vodě zbavené vzduchu (230 ml) se zahřívá pod atmosférou dusíku po dobu 17 h. Přidá se další palladiový katalyzátor (1 molární %, 0,86 g, 0,74 mmol) a reakce pokračuje zahříváním při 80 °C po dobu dalších 24 h a po této době se dosáhne ukončení reakce (analýza chromátografií na tenké vrstvě s použitím směsi ethylacetat/heptan 3:7 jako elučního činidla, Rf = 0,7). Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v ethylacetatu (500 ml) a anorganické složky se odstraní filtrací celitem. Filtrát se promyje 10% vodným roztokem uhličitanu sodného (200 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (200 ml), vysuší se síranem hořečnatým a odpaří ve vakuu. Čištění chromatografií na sloupci silikagelu s použitím směsi ethylacetat/heptan 1:2 poskytuje terc.butyl-N-4-[4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenylkarbamat ve formě bělavé tuhé látky (21,0 g, 56 %).
XH NMR (400 MHz, CDC1.J δ 1,55 (9H, s), 1,89 (4H, m) , 2,07 (4H, m), 4,01 (4H, s), 4,89 (1H, m), 6,75 (1H, Široký s), 7,23 (1H, široký s), 7,25 (1H, široký s), 7,34 (1H, široký s), 8,14 (1H, široký t) a 8,64 (1H, s).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (5 až 100 % acetonitrilu v 0,1 N octanu amonném v průběhu 15 min při 1 ml/min s použitím sloupce Hypersil HyPurity Elitě C18, 5 μπι, 20 nm, 250 x 4,6 mm), retenční čas t = 10,48 min, 100 %.
rd) 5-(4-Amino-3-fluorfenyl)-7-(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
-·.
Zakalená směs terc.butyl-N-4-[4-chlor-7-(l,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenylkarbamatu (10,5 g, 20,92 mmol), vodného roztoku hydroxidu amonného (28 až 30 %, 100 ml) a dioxanu (100 ml) se umístí do uzavřené nádoby při teplotě okolí a poté se zahřívá na 120 °C za míchání po dobu 24 h (analýza chromatografií na tenké vrstvě s použitím směsi ethylacetat/heptan 9:1 jako elučního činidla). Reakční směs se odpaří ve vakuu, zředí ethylacetatem (100 ml) promyje nasyceným roztokem chloridu sodného (2 x 150 ml), vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku a opatrně vysuší s obdržením 5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-(1,4-dioxaspiro[4.5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu ve formě žluté tuhé látky (7,93 g, 99 %).
XH NMR (400 MHz, de-DMSO) 8 1,74 (4H, m), 1,90 (2H, m), 2,06 (2H, m), 3,90 (4H, m), 4,64 (1H, m), 5,18 (2H, široký s), 6,02 (2H, široký s), 6,84 (1H, t), 6,97 (1H, d), 7,08 (1H, d), 7,26 (1H, s) a 8,10 (1H, s).
Hmotnostní spektrometrie: m/z 384,2 (MH1-) .
e) 4-[4-Amino-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanon
5M roztok kyseliny chlorovodíkové (300 ml) se pomalu přidává k roztoku 5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (18,49 g, 48,28 mmol) v acetonu (800 ml) při teplotě 0 °C a výsledný tmavě oranžovohnědý roztok se zahřívá při teplotě 60 °C po dobu 4 h (analýza chormatografií na tenké vrstvě s použitím 10% methanolu v dichlormethanu). Aceton se odpaří
za sníženého tlaku a kyselá vrstva se zalkalizuje zhruba na pH 8 s použitím nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a opatrně vysuší s obdržením 4-[4-amino-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (12,67 g, 77 %). Druhý podíl se též obdrží stáním matečného louhu (2,01 g, 12 %).
XH NMR (400 MHz, d6~DMSO) δ 2,27 (2H, m), 2,30 (4H, široký d), 2,73 (2H, m), 5,14 (1H, m), 5,20 (2H, široký s), 6,05 (2H, široký s), 6,85 (1H, t), 6,97 (1H, dd), 7,06 (1H, dd), 7,35 (1H, s) a 8,12 (1H, s).
Hmotnostní spektrometrie: m/z = 340,1 (MH-4-).
Cis- a trans-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
Příklad 304
Cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat
K roztoku 4-[4-amino-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (1,0 g, 2,95 mmol), N-methylpiperazinu (3 ekvivalenty, 0,885 g, 8,85 mmol, 0,98 ml) a ledové kyseliny octové (3 ekvivalenty, 0,51 ml, 8,85 mmol) v dichlormethanu (50 ml) se pod atmosférou dusíku přidá natrium-triacetoxyborohydrid (1,3 ekvivalenty, 0,81 g, 3,84 mmol). Roztok se míchá po dobu 18 h, poté se přidá další natrium-triacetoxyborohydrid (0,40 g, 1,9 mmol) a reakce pokračuje po dobu dalších 48 h. Reakční směs • · • · · ·
se odpaří ve vakuu, rozdělí mezi dichlormethan (100 ml) a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Vodná vrstva se dále extrahuje dichlormethanem (4 x 100 ml) a spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým a odpaří do sucha s obdržením žluté pěny (0,95 g). Čištění chromatografií na sloupci silikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol (9:1 až 5:1) poskytuje cis-5-[4-amino-3-fluorfenyl)-7-(4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin jako pohyblivější složku ve formě krémové tuhé látky (400 mg, 32 %).
XH NMR (de DMSO, 400 MHz) <5 1,56 (3H, široký t) , 1,68 (2H, široký d), 1,99 (5H, m), 2,20 (3H, s), 2,43 (7H, široký m), 4,65 (1H, m), 5,20 (2H, s), 6,01 (2H, široký s), 6,85 (1H, t, J = 9,6 Hz), 6,98 (1H, dd, J = 8,0 a 1,6 Hz), 7,10 (1H, dd, J = 12,4 a 1,6 Hz), 7,12 (1H, s) a 8,10 (1H, s).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (10 až 90 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 12 min při 2 ml/min s použitím sloupce Waters Symmetry C18, 250 x 4,6 mm), retenční čas t = 8,619 min, 96 %.
Obdržené směsné frakce obsahují isomery cis- i trans(440 mg, směs 50:50) a navíc méně pohyblivou frakci obsahující trans-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-(4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin ve formě žluté tuhé látky (110 mg, 9 %).
XH NMR (de DMSO, 400 MHz) δ 1,94 (6H, m), 2,17 (3H, s), 2,33 (7H, širokým), 2,51 (3H, m), 3,28 (1H, m), 4,51 (1H, m), 5,18 (2H, s), 6,01 (2H, široký S), 6,84 (1H, t), 6,96 (1H, dd), 7,04 (1H, dd), 7,30 (1H, s) a 8,08 (1H, s).
• · • · « ·
• · * • · • · • ·-· · 31·5
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (10 až 40 % acetonitrilu v 0,1 N octanu amonném v průběhu 15 min při 2 ml/min s použitím sloupce Hypersil HyPurity Elitě C18, 250 x 4,6 mm), retenční čas tr = 7,595 min, 97 %.
Příklad 305
Trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat
4-Fluorbenzensulfonylchlorid (45,9 mg, 0,236 mmol) se přidá k roztoku trans-5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (100 mg, 0,236 mmol) v pyridinu (2 ml) při teplotě 40 °C. Reakce se dokončí po 27 h při teplotě 40 °C a směs se odpaří ve vakuu. Vyčištění slupcovou chromatografií na silikagelu s použitím gradientu 10 až 50 % methanolu v dichlormethanu poskytuje bezbarvou olejovitou kapalinu (0,78 mmol). Produkt se rozpustí v ethanolu a přidá se kyselina maleinová (3 ekvivalenty, 27 mg, 0,233 mmol). Směs se zahřívá tak dlouho, aby byla homogenní, a trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat při chladnutí krystaluje ve formě světle hnědé tuhé látky (37 mg, 17 %).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (10 až 40 % acetonitrilu v 0,1 N octanu amonném v průběhu 12 min při 2 ml/min s použitím sloupce Waters Symmetry C18, 250 x 4,6 mm), retenční čas t^_ = 14,528 min, • · « «4 ·
%.
Hmotnostní spektrometrie: m/z = 582,0 (MH-*-) .
Příklad 306
Cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid
Cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[ 2 ,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid se připraví způsobem popsaným pro volnou bázi trans-Nl-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamidu, avšak v měřítku 3,36 mmol (400 mg, 32 %).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (10 až 40 % acetonitrilu v 0,1 N octanu amonném v průběhu 12 min při 2 ml/min s použitím sloupce Waters Symmetry C18, 250 x 4,6 mm), retenční čas tr = 15,232 min, 94 %.
Hmotnostní spektrometrie: m/z = 582,1 (MH*).
Příklad 307
5-(4-Amino-3-fluorfenyl)-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
a) 7-(l-benzyl-4-piperidyl)-4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin
Diethyldiazodikarboxylat (2,0 ekvivalentu, 18,19 g, 41,2 ml, 104,8 mmol) se přidává po kapkách zhruba v průběhu 1 h k roztoku 4-chlor-3-jodpyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (14,55 g, 52,4 mmol), l-benzyl-4-hydroxypiperidinu (3,0 ekvivalenty, 30,06 g, 157,16 mmol) a trifenylfosfinu (2,0 ekvivalenty, 27,51 g, 104,8 mmol) v tetrahydrofuranu (730 ml) při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku. Reakce se ukončí po 72 h (analýza chromatografií na tenké vrstvě s použitím směsi ethylacetat/heptan 1:1 jako elučního činidla, Rf = 0,2). Reakční směs se odpaří ve vakuu a přidá se směs ethylacetat/heptan 1:4 v takovém množství, aby se v čirém roztoku objevila sraženina. Tato sraženina se oddělí filtrací (Ph3PO) a filtrát se odpaří, rozpustí v ethylacetatu (500 ml) a extrahuje vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové (1M, 3 x 200 ml). Spojené kyselé vrstvy se zalkalizují vodným roztokem hydroxidu sodného (4N) na pH 12 a poté se extrahují do ethylacetatu (3 x 300 ml), vysuší síranem hořečnatým a odpaří ve vakuu. Purifikace sloupcovou chromatografií s použitím směsi petrolether/ethylacetat 5:4 při 30 až 60 °C na silikagelu poskytuje dvě hlavní frakce, z nichž první obsahuje produkt ve formě světle žluté krystalické tuhé látky, která se překrystaluje z ethylacetatu s obdržením 7-(l-benzyl-4-piperidyl)-4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu ve formě krémové krystalické tuhé látky (5,7 g, 24 %) .
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 2,02 (4H, m), 2,24 (2H, m),
3,06 (2H, široký d), 3,58 (2H, s), 4,76 (1H, m), 7,27 (2H,
m), 7,32 (3H, m), 7,49 (1H, s) a 8,60 (1H, s).
Hmotnostní spektrometrie: m/z = 452,8 (ΜΗ-*·).
• · • · · · • ·
• · ·
b) terč. Butyl-N-4- [ 7- (l-benzyl-4-piperidyl) -4-chlor-7H~ -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenylkarbamat
Suspense 7-(l-benzyl-4-piperidyl)-4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (5,7 g, 12,6 mmol), terc.butyl-N-[2-fluor-4-(4,4,5,5-tetraměthyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl]karbamatu (1,5 ekvivalentu, 18,9 g, 6,38 mmol), uhličitanu sodného (2,5 ekvivalentu, 3,34 g, 31,5 mmol) a trifenylfosfinarsinu (4 molárni %, 0,58 g, 0,5 mmol) v dimethyletheru (210 ml) a vodě zbavené vzduchu (37 ml) se zahřívá při teplotě 80 °C pod atmosférou dusíku po dobu 17 h (chromatografie na tenké vrstvě s použitím směsi ethylacetat/ /heptan 1:1 jako elučního činidla). Reakční směs se odpaří ve vakuu, rozpustí v ethylacetatu (400 ml) a promyje 10% vodným roztokem uhličitanu sodného (3 x 200 ml). Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým, odpaří a vyčistí sloupcovou chromatografií s použitím směsi ethylacetat/heptan 1:1 jako elučního činidla s obdržením terč.butyl-N-4-[7-(l-benzyl-4-piperidyl)-4-chlor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenylkarbamatu ve formě bílé krystalické tuhé látky (5,2 g, 9,7 mmol, 77 %).
XH NMR (400 MHz, CDC1.J δ 1,55 (9H, s), 2,05 (4H, m), 2,24 (2H, m), 3,06 (2H, Široký d), 3,60 (2H, s), 4,83 (1H, m), 7,25 (2H, m), 7,29 (1H, m), 7,33 (6H, m), 8,12 (1H, široký t) a 8,64 (1H, s).
c) 5-(4-Amino-3-fluorfenyl)-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin
Směs terč.butyl-N-4-[7-(l-benzyl-4-piperidyl)-4-chlor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenylkarbamatu (5,2 g, 9,7 mmol), vodného roztoku hydroxidu amonného • · · · • · · ·
3X9 ·..* • · · • · · ·
(28 až 30 %, 100 ml) a 1,4-dioxanu (100 ml) se umístí do uzavřené nádoby při teplotě místnosti a poté se zahřívá na teplotu 120 °C za míchání po dobu 16 h (analýza chromatografií na tenké vrstvě s použitím ethylacetatu jako elučního činidla). Reakční směs se odpaří ve vakuu, zředí ethylacetatem (300 ml), promyje nasyceným roztokem chloridu sodného (2 x 200 ml), vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku s obdržením hnědé tuhé látky, která se trituruje etherem (zhruba 50 ml) s obdržením 5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu ve formě krémové tuhé látky o teplotě tání 141 až 142 °C (3,0 g, 74 %).
XH NMR (400 MHz, CDC1 ) δ 2,06 (4H, : m) , 2,27 (2H, m),
3,06 (2H, m) , 3,59 (2H, široký s), 3, 70 (2H , široký s) ,
4,73 (1H, m) , 5,12 (2H, s), 6,85 (1H, t), 7 ,01 (1H, s) ,
7,06 (1H, dd) , 7,10 (1H , dd), 7,28 (2 H, m), 7,34 (3H, m)
a 8,: JI (1H, s) •
Příklad 308
Nl-4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamid
NI—4—[4—amino—7—(1—benzyl—4—piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamid (470981) se připraví s použitím způsobu popsaného podrobně pro trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl )-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat, avšak v měřítku 6,96 mmol. Nl-4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulf onamid se obdrží ve formě krémové tuhé látky (3,2 g, • · • ·
320
• · · · • • • · · · · · • · · • · · • · · • · · · • · ·
·· • · · • · · ·
%) o teplotě tání 265 až 266 °C.
Hmotnostní spektrometrie m/z 575 (MH*).
Příklad 309
Nl-4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid
Nl-4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid se připraví způsobem, který se podrobně popisuje výše, v měřítku 5,04 mmol. Výsledný Nl-4-[4-amino-7-(1-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-l-benzensulfonamid se obdrží ve formě hnědé tuhé látky (1,0 g, 32 %).
Hmotnostní spektrometrie m/z 625 (MH*).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (5 až 85 % acetonitřilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min při 1 ml/min s použitím kolony Waters Delta pack 5 cm C18, 30 nm, 150 x 3,9 mm), retenční čas t = 14,963 min, 95 %.
Příklad 310
Nl-4-[4-amino-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamid
Směs obsahující Nl-4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamid (2,40 g, 4,18 mmol), mravenčan ·· ···· ·· ···· ·· · • · · ·· · ···· ·· ··· ··· amonný (10 ekvivalentů, 41,8 mmol, 2,62 g), palladium na uhlíku (10%, 1,2 g) a ethanol (100 ml) se vaří pod zpětným chladičem za energického míchání po dobu 6 h, zfiltruje a odpaří ve vakuu. Tuhá látka se rozdělí mezi dichlormethan (50 ml) a vodu (50 ml). Hnědá tuhá látka, která se tvoří na fázovém rozhraní, se sbírá a analyzuje pro stanovení Nl-4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H~pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamidu (0,33 g) o teplotě tání 238 až 239 °C (s rozkladem).
Hmotnostní spektrometrie m/z 485 (MH^).
Příklad 311
Nl—4—[4-amino-7-(l-formyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamid
Způsob popsaný podrobně pro přípravu Nl-4-[4-amino-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamidu se provede v menším měřítku (0,35 mmol), spojené organické vrstvy ze zpracování se oddělí, vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku s obdržením bílé olejovité kapaliny, která se vyčistí preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatograf ií (100 % 50 mM roztoku octanu amonného o pH 4,5 až 100 % acetonitrilu v průběhu 8,5 min se zadržením 1,5 min při 25 ml/min s použitím sloupce Hypersil 5 cm BDS C18, 100 x 21,2 mm) s obdržením Nl-4-[4-amino-7-(1-formyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamidu ve formě bílé tuhé látky (50 mg, 27 %) .
Hmotnostní spektrometrie m/z = 512,9 (MH+).
- 3ώ ’τ.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (5 až 85 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min při 1 ml/min s použitím kolony Waters Delta pack 5 cm C18, 30 nm, 150 x 3,9 mm), retenční čas t = 13,091 min, 95 %.
Příklad 312
NI-[4-(4-amino-7-l-[(l-methyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid-bismaleat l-Methylimidazol-4-ylsulfonylchlorid (1,1 ekvivalentu, 0,068 mmol, 12,3 mg) se přidá k suspensi 5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-4-aminu (30 mg, 0,062 mmol) a triethylaminu (3 ekvivalenty, 0,186 mmol, 26 litrů) v dichlormethanu (1 ml) a míchá se při teplotě okolí po dobu 24 h. Reakční směs se odpaří ve vakuu, rozdělí mezi dichlormethan (100 ml) a vodu (50 ml) a vodná vrstva se dále extrahuje dichlormethanem (3 x 100 ml). Spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým a odpaří ve vakuu. Vyčištění na sloupci silikagelu s použitím 10 % methanolu v dichlormethanu poskytuje bílou tuhou látku (10 mg). K produktu se přidá kyselina maleinová (2 ekvivalenty, 4 mg) v horkém methanolu a Nl-[4-(4-amino-7-1-[(l-methyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-1-benzensulfonamid-bismaleat krystaluje při chladnutí (10 mg) .
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (5 až 85 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu
* · amonného v průběhu 20 min při 1 ml/min s použitím kolony Waters Delta pack 5 cm C18, 30 nm, 150 x 3,9 mm), retenční čas = 14,186 min, 100 %.
Hmotnostní spektrometrie m/z = 629 (MH*).
Příklad 313
NI-[4-(4-amino-7-l-[(1,2-dimethyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid
S použitím způsobu popsaného podrobně pro přípravu volné báze pro Nl-[4-(4-amino-7-l-[(l-methyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid-bismaleat se připraví NI-[4-(4-amino-7-l-[(1,2-dimethyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid ve formě krémové tuhé látky (9 mg) o teplotě tání 217 až 218 °C.
Hmotnostní spektrometrie m/z = 643,2 (MH-1-).
Příklad 314
Nl-[4-(4-amino-7-l-[(1,3-dimethyl-lH-5-pyrazolyl)karbonyl]-4-piperidyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid
1,3-Dimethylpyrazol-5-karbonylchlorid (1,5 ekvialentu, 14,8 mg, 0,093 mmol) se přidává k míchané suspensi 5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu (30 mg, 0,062 mmol) a uhličitanu draselnému (2 ekvivalenty, 17,1 mg, 0,124 mmol) v N-methyl·· ·«·· 4* ·· 4 4 4« • « 4 44 · Ir « « pyrrolidinonu (2 ml) a výsledná směs se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 16 h. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a směs se vyčistí sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi 5 % methanolu v dichlormethanu jako elučního činidla s obdržením Nl-[4-(4-amino-7-l-[(1,3-dimethyl-lH-5-pyrazolyl)karbony1]-4-piperidyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-1-benzensulfonamidu ve formě bezbarné sklovité látky (10 mg).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi [100 % 50 mM roztoku octanu amonného o pH 4,5 až 100 % acetonitrilu v průběhu 4,5 min se zadržením 0,5 min při 3,5 ml/min s použitím sloupce Perkin Elmer Pecosphere 3 cm C18 (33 x 4,6 mm)], retenční čas t - 2,98 min, 96 %.
Hmotnostní spektrometrie m/z = 629 (MH*).
Příklad 315
NI-(4-{4-amino-7-[1-(2-pyridylkarbonyl)-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid
NI-(4-{4-amino-7-[1-(2-pyridylkarbonyl)-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid se připraví s použitím způsobu popsaného podrobně pro Nl-[4-(4-amino-7-l-[(1,3-dimethyl-lH-5-pyrazolyl)karbonyl]-4-piperidyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid (12 mg).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi [100 % 50 mM roztoku octanu amonného o pH 4,5 až 100 % acetonitrilu v průběhu 4,5 min se zadržením 0,5 min při • · · ·· · · · · · • · · · · · ·· • ···«· · · · · • ο·η cr· · · · · ·· ·τ··3ζϊ·> — ·· · ·····
3,5 ml/min s použitím sloupce Perkin Elmer Pecosphere 3 cm C18 (33 x 4,6 mm)], retenční čas t = 2,73 min, 98 %.
Hmotnostní spektrometrie m/z = 590,2 (MH*).
Příklad 316
Nl-4-(4-amino-7-{4-[1-(l-methylpiperid-4-yl)-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl})-2-fluorfenyl-4-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat
Natrium-triacetoxyborohydrid (28,1 mg, 0,134 mmol) se přidá k roztoku Nl-4-[4-amino-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamidu (50 mg, 0,103 mmol) a l-methylpiperid-4-onu (0,92 ml, 0,155 mmol) v ledové kyselině octové (0,025 ml) a NMP (3 ml). Reakční směs se míchá po dobu 20 h při teplotě místnosti a poté se přidá další natrium-triacetoxyborohydrid (1,3 ekvivalentu). Po dalších 24 h reakce pokračuje do dokončení, směs se odpaří ve vakuu, rozdělí mezi dichlormethan (100 ml) a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Vodná vrstva se dále extrahuje dichlormethanem (4 x 100 ml) a spojené organické vrstvy se vysuší síranem horečnatým a odpaří do sucha. Vyčištění na chromatografickém sloupci silikagelu s použitím směsi dichlormethan/methanol/hydroxid amonný (78:19:3) jako elučního činidla poskytuje hnědou tuhou látku. Trismaleat se vytvoří standardními způsoby s obdržením Nl-4-(4-amino-7-{4-[1-(1-methylpiperid-4-yl)-piperidyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl})-2-fluorfenyl-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleatu ve formě hnědé tuhé látky (45 mg, 75 %).
Hmotnostní spektrometrie m/Z = 582 (MH^).
···· ·· ···· ·· • · · · · · · • · · · · · • ····» ·· ··· »3*2ř6 — · · · · ·
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi (5 až 85 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min při 1 ml/min s použitím kolony Waters Delta pack 5 cm C18, 30 nm, 150 x 3,9 mm), retenční čas t = 10,658 min, 95 %.
xr
Příklad 317
Nl-4-[4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylbenzamid
a) K roztoku 4-chlor-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-a]pyrimidinu (25,0 g, 0,09 mol), 1,4-dioxaspiro[4,5]dekan-8-olu (35,8 g, 0,0267 mol) a trifenylfosfinu (46,7 g, 0,178 mol) v tetrahydrofuranu (1,2 litru) se přidá diethylazodikarboxylat (30,9 g, 0,178 mol) pod atmosférou dusíku. Roztok se míchá po dobu 20 h a většina rozpouštědla se odpaří (zbývá 250 ml). Poté se přidá ethylacetat (450 ml) a výsledná tuhá látka se zfiltruje, promyje ethylacetatem (2 x 50 ml) a vysuší ve vakuu s obdržením 4-chlor-7-(l,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-5-jod-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu (22,5 g, 60 %) ve formě krémové tuhé látky.
XH NMR (de DMSO, 400 MHz) δ 8,64 (1H, s), 8,10 (1H, s), 4,74 (1H, m), 3,90 (4H, m), 2,12 (2H, m), 1,91 (2H, m), 1,71-1,83 (4H, m).
Rf = 0,12 ve směsi ethylacetat/heptan 1:4.
b) Roztok terc.butyl-N-[2-methoxy-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)fenyl]karbamatu (8,2 g, 23,5 mmol), 4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-5-jod-7H-pyrrolo- • · • · · · • · · · • ·
[2,3-d]pyrimidinu (6,57 g, 15,7 mmol) a tetrakistrifenylfosfinpalladia (1,1 g, 0,93 mmol), uhličitanu sodného (4,16 g, 39,2 mmol) v dimethoxyethanu (200 ml) a vodě (100 ml) se zahřívá při teplotě 80 °C po dobu 20 h pod atmosférou dusíku. Výsledný roztok se ochladí na teplotu místnosti a rozdělí mezi ethylacetat (300 ml) a vodu (100 ml). Vodná vrstva se extrahuje ethylacetatem (3 x 150 ml) a spojené organické vrstvy se promyjí vodou (1 x 150 ml). Organické vrstvy se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením tuhé látky. Při snaze o rozpuštění ve směsi ethylacetat/heptan (1:4) vypadává krémová tuhá látka (2,5 g). Filtrát se adsorbuje na silikagelu a vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi heptan/ethylacetat 10:1, heptan/ethylacetat 4:1, heptan/ethylacetat 1:1 a ethylacetat/heptan 4:1. Příslušné frakce se spojí s obdržením bílé tuhé látky, která se trituruje směsí heptan/ /ethylacetat (5:1) s obdržením terč.butyl-N-4-[4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylkarbamatu ve formě tuhé látky (3,2 g).
Celkový výtěžek je 71 %.
XH NMR (d 6 DMSO, 400 MHz) δ 8,66 (1H, S), 7,93 (2H,
m), 7 ,74 (1H, m) , 7,19 (1H, s) , 7,07 (1H , d) , 4,81 (1H, m),
3,93 (4H, m) , 3,91 (3H, S), 2,18 (2H, m) , i, 99 (2H, m),
1,79 (4H, m) , 1,48 (9H, s).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), t = 21,24 min, 100 %).
c) terč.Butyl-N-4-[4-chlor-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylkarbamat (5,7 g, 0,011 mol), koncentrovaný roztok hydroxidu amonného • · · · • · • · · · • ·
(100 ml) a dioxan (100 ml) se zahřívá v tlakové nádobě po dobu 20 h při teplotě 120 °C. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí ve směsi ethylacetat/voda (250 ml/100 ml). Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením tuhé látky, pro kterou vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 90 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku oxtanu amonného v průběhu 20 min) ukazuje na směs 2:1 terc.butyl-N-4-[4-amino-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylkarbamatu a 5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu. Směs se rozpustí v acetonu (200 ml) a po kapkách se přidává kyselina chlorovodíková (5N, 100 ml) v průběhu 0,5 h. Výsledný roztok se míchá při teplotě místnosti přes noc a poté se rozpouštědlo odpaří. Kyselý roztok se zalkalizuje 2N roztokem hydroxidu sodného (ledově chladného) a extrahuje ethylacetatem (3 x 150 ml). Spojené organické fáze se promyjí vodou (2 x 100 ml). V průběhu extrakčního procesu se sráží tuhá látka. Tato tuhá látka se filtruje a trituruje horkou směsí ethylacetat/methanol. Nerozpustné látky se odfiltrují, filtrát se odpaří a výsledná tuhá látka se trituruje směsí diethylether/ethylacetat s obdržením žluté tuhé látky. Organické vrstvy z původní extrakce se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří. Výsledná tuhá látka se trituruje směsí diethylether/ethylacetat (5:1) a zfiltruje s obdržením 4-[4-amino-5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-dJpyrimidin-7-yl]-1-cyklohexanonu ve formě žluté tuhé látky (2,3 g, celkový výtěžek 78 %).
XH NMR (de DMSO, 400 MHz) 5 8,17 (1H, s), 7,32 (1H, s), 6,88 (1H, s), 6,77 (1H, m), 6,73 (1H, m), 6,71 (1H, m), 6,07 (2H, široký s), 5,14 (1H, m), 3,81 (3H, s), 2,72 (2H, m), 2,35 (4H, m), 2,18 (2H, m).
• · · · • · « ·
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), t^ = 11,24 min, 95 %).
d) K roztoku 4-[4-amino-5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-cyklohexanonu (0,105 g, 0,3 mmol) v pyridinu (2 ml) a dichlormethanu (5 ml) se přidává benzoylchlorid (63 mg, 0,45 mmol) v dichlormethanu (1 ml) při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku. Roztok se míchá při teplotě 0 °C po dobu 2 h a poté se přidá voda (5 ml). Přidá se kyselina chlorovodíková (1N, 40 ml) a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3 x 25 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodou (1 x 30 ml). Organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením olejovité kapaliny, která se vyčistí mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi 2 až 10 % methanolu v ethylacetatu s obdržením Nl-4-[4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylbenzamidu ve formě bílé tuhé látky (0,130 g, 96 %) o teplotě tání 234 až 237 °C.
R = 0,30 při použití směsi ethylacetat/methanol 9:1.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), t_ = 14,82 min, 96 %).
XH MNR (de DMSO, 400 MHz) δ 9,43 (1H, s), 8,19 (1H, s), 7,94 (3H, m), 7,59 (4H, m), 7,18 (1H, s), 7,06 (1H, d, J = 8 Hz), 6,18 (2H, široký s), 5,20 (1H, m), 3,92 (3H, S), 2,76 (2H, m), 2,35 (4H, m), 2,22 (2H, m).
• · • · · · • ·
Příklad 318
Benzyl-N-4-[4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylkarbamat
K roztoku 4-[4-amino-5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (0,40 g, 1,15 mmol) v pyridinu (5 ml) a dichlormethanu (10 ml) se přidává benzylchlorformiat (0,29 g, 1,73 mmol) při teplotě -5 °C pod atmosférou dusíku. Roztok se ohřívá na teplotu 0 °C a míchá se po dobu 1 h. K reakční směsi se přidá 5 ml vody a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetat a vodu (100 ml každého prostředí) a vodná vrstva se extrahuje ethylacetatem, (3 x 50 ml). Spojené organické fáze se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením tuhé látky, která se trituruje směsí ethylacetat/diethylether s obdržením benzyl-N-4-[4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylkarbamatu (0,28 g) ve formě žluté tuhé látky o teplotě tání 175 až 176 °C.
Rf = 0,24 při použití směsi ethylacetat/methanol 9:1.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), t = 16,69 min, 98 %).
XH NMR (d 1 DMSO, 400 MHz) 6 8,64 (1H, s), 8,17 (1H,
S) , 7,75 (1H, d, J = 8, 4 HZ), 7, 50 (1H, s), 7,36 (5H, m),
7, 10 (1H, s) , 7,02 (1H, d, J = 8 Hz), 6,15 (2H, široký s),
5, 19 (3H, m), 3,81 (3H, s), 2,72 (2H, m), 2,35 (4H, m),
2, 22 (2H, m).
Příklad 319 • · • «-v · • · · · · · • « · »· ··· cis-Benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleat a trans-Benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleat
K roztoku benzyl-N-4-[4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylkarbamatu (0,83 g, 1,74 mmol), N-methylpiperazinu (0,52 g, 5,22 mmol) a ledové kyseliny octové (0,31 g, 5,22 mmol) v dichlorethanu (100 ml) se pod atmosférou dusíku po částech přidává natrium-triacetoxyborohydrid (0,55 g, 2,61 mmol). Roztok se míchá po dobu 6 h a poté se přidá roztok hydroxidu sodného (2N, 20 ml). Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (2 x 50 ml). Spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného (1 x 50 ml), vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením olejovíté kapaliny, která se čistí mžikovou chromátografií na sloupci silikagelu s použitím ethylacetatu, směsi ethylacetat/methanol 9:1, dichlormethanu a směsi dichlormethan/methanol 9:1 s obdržením olejovité kapaliny ve frakcích F20 - 25 (480 g). Tato olejovitá kapalina se rozpustí v ethylacetatu a zpracuje se kyselinou maleinovou (280 mg) v ethylacetatu. Výsledná tuhá látka se zfiltruje pod proudem dusíku a vysuší se ve vakuu v průběhu 4 h s obdržením cis-benzyl-N-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)karbamattrismaleatu (580 mg) ve formě krémové tuhé látky o teplotě tání 158 °C (s rozkladem).
ΧΗ NMR (d 6 DMSO , 400 MHz) 8 8 ,74 (ih, s; ), 8 ,27 (1H,
S) , 7,78 (1H, d), 7,35 -7,77 (5H, m) , 7, 10 (1H, s) , 7, 04
(1H, s) , 6,16 (6H, s) , 5,17 (2H, S) , 4, 74 (1H, m) , 3, 82
(3H, s) , 3,23 (5H, m) , 2,78 (3H, s) , 2, 51 (3H, m), 2, 41
(1H, s) , 2,09 (4H, m) , 1,70 (4H, m) .
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), t = 13,30 min, 94 %).
Frakce F28 až 45 poskytují sklovitou pěnu (186 mg), která se rozpustí v ethylacetatu (10 ml) a zpracuje kyselinou maleinovou (114 mg) v ethylacetatu (3 ml). Výsledná tuhá látka se zfiltruje pod atmosférou dusíku a vysuší ve vakuu v průběhu 4 h s obdržením trans-benzyl-N-(4-(4-amino-7-[4—(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleatu (250 mg) ve formě krémové tuhé látky o teplotě tání 146 až 148 °C.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), t_ = 13,54 min, 94,6 %).
ΧΗ NMR (d DMSO, 400 MHz) <5 8,72 (1H, s), 8,25 (1H, s), 7,77 (1H, d), 7,51 (1H, s), 7,35 (5H, m), 7,10 (1H, s), 7,04 (1H, d), 6,16 (6H, s), 5,17 (2H, s), 4,59 (1H, m) , 3,86 (3H, S), 2,70-3,10 (11H, m), 2,50 (3H, s), 1,97 (6H, m), 1,56 (2H, m) .
Příklad 320 trans-Nl-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)benzamid rí.333
K roztoku Nl-4-[4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-methoxyfenylbenzamidu (1,2 g, 2,66 mmol), N-methylpiperazinu (0,80 g, 7,98 mmol) a ledové kyseliny octové (0,48 g, 7,98 mmol) v dichlorethanu (150 ml) se pod atmosférou dusíku přidává po částech natrium-triacetoxyborohydrid (0,85 g, 3,99 mmol). Roztok se míchá při teplotě místnsoti přes noc a poté se přidá roztok hydroxidu sodného (2N, 20 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3 x 50 ml) a spojené organické podíly se vysuší síranem sodným, zfiltrují a odpaří s obdržením tuhé látky, která se čistí mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s použitím dichlormethanu a poté směsí 5 % methanolu/dichlormethan až 20 % methanolu/dichlormethan s přírůstky po 5 %. Frakce F23 až 36 se spojí a odpaří s obdržením krémové tuhé látky (0,11 g), která se rozpustí v ethylacetatu (10 ml) a zpracuje roztokem kyseliny maleinové v ethylacetatu (5 ml). Výsledná jemná tuhá látka se zfiltruje pod proudem dusíku s obdržením trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpipera zino)cyklohexy1]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenylJbenzamidu (0,108 g) ve formě krémové látky.
XH NMR (d DMSO, 400 MHZ) δ 9,48 (1H, S), 8,28 (1H,
S) , 7,97 (3H, m) , 7,53-7,63 (4H, m) , 7, 18 (1H, s), 7, 08
(1H, d), 6,85 (1H, široký s) > 6 , 16 (6H, s), 4,61 (1H, m) ,
3,92 (3H, s) , 2,70-3,11 (11H , m) , 2,01 (7H, m), 1,58 (2H,
m) .
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (sloupec Pecosphere 3 Cl8, 3 μιη, 100 % 100 mM roztoku octanu amonného až 100 % acetonitřilu v průběhu 5 min), retenční čas tr = 1,83 min.
Hmotnostní spektrometrie MH~*~ - 540,8.
Příklad 321 cis-Nl-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid a trans-Nl-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid
a) K roztoku 4-[4-amino-5-(4-amino-3-methoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-l-cyklohexanonu (0,8 g, 2,3 mmol) v pyridinu (13 ml) a dichlormethanu (32 ml) se při teplotě 0 °C přidává hydrocinnamoylchlorid (0,57 g, 3,4 mmol) v dichlormethanu (5 ml) pod atmosférou dusíku. Roztok se míchá při teplotě 0 °C po dobu 2 h, ohřeje se na teplotu místnosti a přidá se nasycený vodný roztok kyseliny citrónové (50 ml). Organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem kyseliny citrónové (2 x 50 ml), vysuší se síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením Nl-{4-{4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl}-3-fenylpropanamidu (1,0 g, 92% surové látky) ve formě hnědé pěny.
XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz) δ 9,17 (1H, s), 8,18 (1H, s), 8,06 (1H, d), 7,51 (1H, s), 7,18-7,29 (6H, m), 7,09 (1H, m), 6,99 (1H, d), 6,21 (2H, široký s), 5,18 (1H, m), 3,88 (3H, s), 1,99-2,93 (12H, m).
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), retenční čas t = 14,48 min, 92,2 %.
• ♦ · · · · · · · · · · ·· ·· · · · · · · ·
b) K roztoku 92% surového Nl-{4-{4-amino-7-(4-oxocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl}-3-fenylpropanamidu (1,0 g, 2,1 mmol), N-methylpiperazinu (0,63 g, 6,3 mmol), kyseliny octové (0,38 g, 6,3 mmol) v dichlorethanu (100 ml) se přidává po částech pod atmosférou dusíku natrium-triacetoxyborohydrid (0,67 g, 3,15 mmol). Roztok se míchá po dobu 20 h a poté se přidá nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (50 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3 x 50 ml), vysuší síranem sodným, zfiltruje a odpaří s obdržením suspense, která se purifikuje mžikovou chromatografií na sloupci silikagelu s použitím dichlormethanu a poté směsí až 50 % methanolu v dichlormethanu po přírůstcích 10 %. Frakce F84 až 96 se spojí a odpaří s obdržením cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperaz ino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl} -2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamidu (0,26 g) ve formě krémové sklovité pěny.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), retenční čas t = 12,65 min, 95,2 %.
XH NMR (d6 DMSO, 400 MHz) δ 9,17 (1H, s) , 8,14 (1H, s), 8,05 (1H, m), 7,28 (5H, m), 7,18 (1H, m), 7,10 (1H, s), 6,99 (1H, d), 6,11 (2H, široký s), 4,67 (1H, m), 3,88 (3H, s), 2,90 (2H, m), 2,73 (2H, m), 2,50 (7H, m), 2,28 (3H, s), 2,06 (3H, m), 1,71 (2H, m), 1,55 (2H, m).
Frakce 121 až 138 se spojí a odpaří s obdržením cis-Nl-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H·· ·««· ·· ···· *· • · · · · · ··· • · · · · ♦ —. · 3«3*6 ·*— * · · * ·
-pyrrolof 2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamidu (0,11 g) ve formě bílé tuhé látky.
Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (5 až 95 % acetonitrilu v 0,1 N vodném roztoku octanu amonného v průběhu 20 min), retenční čas t - 12,61 min, 96,2 %.
XH NMR (de DMSO, 400 MHz) δ 9,16 (1H, s), 8,13 (1H, s), 8,04 (1H, d), 7,44 (1H, s), 7,29 (4H, m), 7,18 (1H, m), 7,09 (1H, s), 6,97 (1H, d), 6,11 (2H, široký S), 4,53 (1H, m), 3,88 (3H, s), 2,93 (2H, m), 2,71 (2H, m), 2,50 (2H, m), 2,30 (5H, m), 2,14 (3H, s), 1,89 (6H, m), 1,46 (2H, m).
Následuje obecný popis způsobu přípravy substituovaných pyrrolopyrimidinových arylsulfonamidů.
0.19 M roztok 5-(4-amino-3-fluorfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu v pyridinu se přidá k 1 ekvivalentu substituovaného arylsulfonylchloridu. Směs se zahřívá na teplotu 45 °C při třepání v Incubator Shaker po dobu 24 h. Reakční směs se 'vyčistí s použitím preparativní vysokovýkonné kapalinové chromatograf ie s reversními fázemi s hmotnostním spouštěním (Micromass/Gilson, Hypersil BDS C18, 5 Mm, 100 x 21,2 mm, 100 % roztoku octanu amonného (0,05 M, pH 4,5) až 100 % acetonitrilu v průběhu 12,5 min, 25 ml/min.
Výše popsaným způsobem se připraví následující sloučeniny:
• 4 ·444 44 4944 44
Název
Příklad 322:
• 44444 444 4 _ 4 O O»7 ·__ 4 4« 444 4 4 4-44 4 44 4 44 444 ret. čas při vysoko výk.
kap.chrom.
min m/z trans-N-1-(4-(4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino ) cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-(trifluormethoxy)-1-benzensulfonamid-trismaleat
3,18 648,39
Příklad 323:
trans-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-chlor-2-thiofensulfonamidbenzensulfonamid-trismaleat
3,14 604,03
Příklad 324:
trans-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamidbenzensulfonamid-trismaleat
3,07 616,1
Příklad 325:
trans-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat 3,39
632,12 *· «444 r « · * ·
Příklad 326:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,82 616,2
Příklad 327: cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,66 600,3
Příklad 328: trans-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)- -2,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,53 600,3
Příklad 329: trans-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzothiadiazol-4-sulfonamid-trismaleat 2,63 622,1
Příklad 330:
trans-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)««
···· ·· * * • ·* • · • ·
• · • • ·
• · ♦ • «
-2,1,4-trifluor-l-benzensulfonamid-trismaleat
2,87
618,1
Příklad 331:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-nitro-l-benzensulfonamid-trismaleat
3,13
609,1
Příklad 332:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-fluor-l-benzensulfonamidtrismaleat
2,89
582,1
Příklad 333:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4,6-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat
3,4
668
Příklad 334:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)— 2,6-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat
3,04
632,1
Příklad 335:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methyl-
piperaz ino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo- [2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,94 598,1
Příklad 336: cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-fluor-l-benzensulfonamid-bismaleat 2,76 582,1
Příklad 337: cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperaz ino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-chlor-2-thiofensulfonamid-bismaleat 3,01 604,3
Příklad 338: cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2,5-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 3,38 718,3
Příklad 339: cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,98 616,3
• · • · · ·
Příklad 340:
cis-N-1-(4—{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-jod-l-benzensulfonamid-trismaleat 3,02
Příklad 341:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-(trifluormethoxy)-1-benzensulfonamid-trismaleat 3,22
Příklad 342:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)—2,3-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,97
690,3
648,3
600,3
Příklad 343:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3—d]pyrimidin—5—yl}—2—fluorfenyl)-2-chlor-6-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat 3,12
612,3
Příklad 344:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino ) cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-kyano-l-benzensulfonamid• · • · · · • ·
2X2**»*
-trismaleat 3,02
Příklad 345:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trifluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 3,08
623,2
618,3
Příklad 346:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3,4-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 2,98
Příklad 347:
cis-N-1-(4-(4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino )cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat 3,13
Příklad 348:
cis-N-l-(4 —{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-brom-2-thiofensulfonamid-trismaleat 3,16
600,3
660,2
648,1
Příklad 349:
cis-N-1-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methyl piperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo• · · · • · · ·
3·48· [2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat
3,09
632,1
Příklad 350:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat
3,41
668,1
Příklad 351:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-brom-5-chlor-2-thiofensulfonainid-trismaleat
3,29
683,9
Příklad 352:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpipera zino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzothiadiazol-4-sulfonamid-trismaleat
2,73
622,1
Příklad 353:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)—2,1,3-benzoxadiazol-4-sulfonamid-trismaleat
2,8
606,1
Příklad 354:
cis-N-l-(4-{4-Amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat
3,18
638 • · · · • ·
Obecný způsob přípravy
Způsob (a)
Směs 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-cyklohexanonu (1,0 g, 2,51 mmol), příslušného aminu (7,54 mmol) a kyseliny octové (0,45 g, 7,54 mmol) v 1,2-dichlorethanu (50 ml) se míchá při teplotě okolí pod atmosférou dusíku po dobu 30 min. Přidá se natrium-triacetoxyborohydrid (0,69 g, 3,26 mmol) a směs se míchá při teplotě okolí po dobu 18 h. Přidá se voda (20 ml) a hydrogenuhličitan sodný (1,26 g, 15,1 mmol) a směs se míchá po dobu 1 h. Poté se směs zfiltruje celitem a filtr se promyje dichlormethanem (75 ml). Organická vrstva se z zfiltrátu extrahuje, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří do sucha za sníženého tlaku. Isomery cis a trans se čistí mžikovou chromatografií na silikagelu s použitím gradientu methanol/ /dichlormethan.
Způsob (b)
Příslušné soli se připraví následujícím způsobem. Výše popsaný amin (0,909 mmol) se rozpustí v teplém ethylacetatu (100 ml) a poté se přidá kyselina maleinová (0,32 g, 2,73 mmol) v ethylacetatu (30 ml). Výsledná sůl vytváří olejoví tý zbytek na dně a stranách baňky. Supernatant se vylije a zbytek se rozpustí ve vodě a lyofilizuje s obdržením soli.
Způsob (c)
Guanidiny se připraví následujícím způsobem. Amin (0,536 mmol) se rozpustí v dimethylformamidu (5 ml) a ochla- 34^·-*·· dí na -5 °C a poté se přidá 1-H-pyrazol-l-karbonamid (95 mg, 0,644 mmol) a následně diisopropylethylamin (208 mg, 1,6 mmol). Reakční směs se ponechá ohřát na teplotu místnosti v průběhu 16 h a poté se odpaří ve vakuu. Reakční směs se rozdělí mezi vodu (10 ml) a ethylacetat (10 ml). Vodná fáze se lyofilizuje a čistí vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi.
Podmínky vysokovýkonné kapalinové chromatografie
1. Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi - Hypersil HyPurity Elitě C18, 5 mm, 20 nm, 250 x 4,6 mm, 25 až 100 % acetonitrilu v 0,1 M roztoku octanu amonného v průběhu 15 min, 1 ml/min.
2. Vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi - Hypersil HyPurity Elitě C18, 5 mm, 20 nm, 250 x 4,6 mm, 5 až 100 % acetonitrilu v 0,1 M roztoku octanu amonného v průběhu 15 min, 1 ml/min.
Je třeba si uvědomit, že se používají chránící skupiny tam, kde je to vhodné.
Následující sloučeniny se připraví způsoby popsanými výše.
• · · ·
Název • · ··· * · · • · · · · · ·
Způsob Chromatopřípravý grafie
HPLC-RT m/z Další (MH*) chem.
reakce (min) (Podmínky)
Příklad 364:
cis-4-{4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}-1- c
-piperazinkarboximidamid
14,56 511,7 (2)
Příklad 365: trans-4-{4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin- -7-yl]cyklohexyl}-1- c 14,25 511,7
-pipera z inkarboximidamid (2)
Příklad 366: trans-7-(4-{methyl[2-(2-pyridyl)ethyl]amino}cyklohexyl )-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyri- a ,b 8,55 519,6
midin-4-amin-trismaleat (2)
Příklad 367:
Kyselina cis-3-({4-[4- Připra-
amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H- ví se
-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin- hydro-
-7-yl]cyklohexyl}amino)- a 10,21 472,6 lýzou
propanová
(2) esteru
Příklad 368:
Kyselina 3-({4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexylJamino)- a propanová
Příklad 369:
Ethyl-cis-3-((4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}amino)- a propanoat-bismaleat
6,33 (1) 472,6 Připraví se hydrolýzou esteru
b 10,42 500,6 (1)
Obecné způsoby přípravy
Způsob (d)
K roztoku hydridu sodného (22 mg, 0,553 mmol) v tetrahydrofuranu (2 ml) se přidá příslušný fosfonát (0,553 mmol) při teplotě 0 °C a výsledná směs se míchá při této teplotě po dobu 20 min a poté při teplotě okolí po dobu 10 min. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se 4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-1-cyklohexanon (200 mg, 0,503 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) a výsledná směs se ponechá ohřát na teplotu okolí a míchá se po dobu 16 h. Rozpouštědla se odpaří ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetat (10 ml) a ovodu (10 ml). Vodná vrstva se dále extrahuje ethylacetatem (3 x 5 ml) a spojené organické fáze se promyjí vodou (3 x 5 ml), vysuší • · · ♦ · · · · ···· ·· ·· ··· · · ·· • · · · ·· · • · · · · · ···
- 34*>··- ·♦ *··* · ’··*· síranem horečnatým a odpaří ve vakuu. Čištění mžikovou sloupcovou chromatografií na silikagelu (v případě meziproduktu) nebo vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi (v případě konečných sloučenin) poskytuje žádanou sloučeninu.
Způsob (e)
Hydrogenace se provádějí následujícím způsobem. Směs alkenu (0,068 mmol) a 10% palladia na uhlíku (12 mg) v ethanolu (18 ml) se míchá pod atmosférou dusíku (0,4 MPa) po dobu 14 h. Tuhé látky se odfiltrují a filtrát se odpaří ve vakuu. Vyčištění vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi poskytuje konečnou sloučeninu.
Způsob (f)
Reakce s lithium-aluminiumhydridem se provádějí následujícím způsobem. Směs substrátu (0,19 mmol) a lithium-aluminiumhydridu (40 mg, 1,07 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 h. Fieserovo zpracování s následnou purifikací vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií s reversními fázemi poskytuje žádanou sloučeninu.
Podmínky vysokovýkonné kapalinové chromatografie: vysokovýkonná kapalinová chromatografie s reversními fázemi - sloupec Pecosphere 3 C18, 33 x 4,6 mm, 3 cm, 0 až 100 % acetonitrilu v 0,1 M roztoku octanu amonného v průběhu 5 min, průtok 4 ml/min.
Je třeba si uvědomit, že se používají chránící skupiny tam, kde je to vhodné.
• · ···· «« ····
50·»- ··
Název
Způsob Kapal. přípravy chrom.
HPLC-RT m/z Další (MH*) chem.
reakce (min)
Příklad 370:
{4-[4-Amino-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexylidenjmethylkyanid d
Příklad 371:
terč.-Butyl-2-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyliden}acetat d
Příklad 372:
Ethyl-2-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyliden}acetat d
Příklad 373:
2-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexylidenjacetat d
3,1 422,5
3,97 497,1
3,56 469,0
2,69 441,5 Připraví se hydrolýzou ethylesteru
• · · ♦ » · • · · • * • r
51··-* *··* tf · · 1 · • · • · ·
Příklad 374:
7- [4-(2-aminoethyl)cyklohexyl ]-5-(4-fenoxyfenyl)7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin f
2,11
Připraví se redukcí nenasyceného kyanidu lit428,5 hium-aluminiumhydridu
Příklad 375
Kyselina 2-{4-[4-amino-5-(4-fenoxyfenyl)7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklohexyl}- e octová
2,64
Připraví se hydrogenací nenasycené kyseliny 443,5

Claims (72)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina znázorněná následujícím obecným strukturním vzorcem a její farmaceuticky přijatelná sůl, ve které kruh A je šestičlenným aromatickým kruhem nebo pětičlenným či šestičlenným heteroaromatickým kruhem, který může být případně substituovaný jedním či více z následujících substituentú: substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, atom halogenu, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, kyanoskupina, nitroskupina, skupina -NR^R^, skupina -C(O)2H, hydroxylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, -C(0)2-haloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkyl·· ···· <*· ««·« thioetherová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfoxidová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfonová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylthioetherová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylsulfoxidová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylsulfonová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina, -C(0)-haloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alifatická etherová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická etherová skupina, karboxamidoskupina, tetrazolylová skupina, trifluormethylsulfonamidoskupina, trifluormethylkarbonylaminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná alkinylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná styrylová skupina a substituovaná či nesubstituovaná aralkylamidoskupina.
    L je jedna z následujících spojovacích skupin: -0-, -S-, -S(0)-, -S(0)2-, -N(R)-, N(C(0)0R)-, N(C(0)R)-, -N(SO_R)-, -CH2O-, -CH2S-, -CH2N(R)-, -CH(NR)-, -CH2N(C(0)R)-, -CH2N(C(O)OR)-, -CH2N(SO2R)-, -CH(NHR)-, -CH(NHC(0)R)-, -CH(NHS02R)-, -CH(NHC(0)0R)-, -CH(OC(O)R), -CH(0C(0)NHR)-, -CH=CH-, -C(=N0R)-, -C(0)-, -CH(OR)-, -C(0)N(R)-, -N(R)C(O)-, -N(R)S(O)-, -N(R)S(O)2~, -0C(0)N(R)~, —N(R)C(O)N(R)—, -NRC(O)O-, -S(0)N(R)-, -S(O)2N(R)-, -N(C(O)R)S(O)-, -N(C(O)R)S(O)2-, -N(R)S(O)N(R)-, -N(R)S(0)2N(R)-, -C(O)N(R)C(O)-, -S(O)N(R)C(O)-, -S(O)2N(R)C(O)-, -0S(0)N(R)-, -OS(O)_N(R)-, -N(R)S(O)O-, -N(R)S(O)20-, -N(R)S(O)C(O)-, -N(R)S(O)2C(O)-, -SON(C(O)R)-, -SO2N(C(0)R)-, -N(R)S0N(R)-, -N(R)SO2N(R)-, -C(0)0-, -N(R)P(0R')0-, -N(R)P(0R')-, -N(R)P(O)(OR')0-, -N(R)P(0)(OR')-, -N(C(O)R)P(OR')0-, -N(C(O)R)P(OR)-, -N(C(O)R)P(O)(OR')0nebo -N(C(0)R)P(OR')-. R a R' jsou nezávisle na sobě atom • · · · • · vodíku, acylová skupina, substituovaná či nesubstituované alifatická skupina, substituovaná či nesubstituované aromatická skupina, substituovaná či nesubstituované heteroaroma tická skupina nebo substituovaná či nesubstituované cykloal kýlová skupina nebo
    L je -RtoN(R)S(O)2-, -RtoN(R)P(O)- nebo -RtoN(R)P(O)O-. R^ je alkylenová skupina, která spolu se sulfonamidovou, fosfinamidovou nebo fosfonamidovou skupinou, ke které se připojuje, vytváří pětičlenný nebo šestičlenný kruh kondenzovaný ke kruhu A nebo
    L je skupina, kterou lze znázornit jedním z následujících strukturních vzorců // nebo
    A * * A • · · · ve kterých Rqj_ spolu s fosfinamidovou nebo fosfonamidovou skupinou vytváří pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný aromatický, heteroaromatický nebo heterocykloalkylový kruhový systém.
    R je substituovaná alifatická skupina, substituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná bicykloalkylová skupina, substituovaná cykloalkenylová skupina, případně substituovaná aromatická skupina, případně substituovaná heteroaromatická skupina, případně substituovaná heteroaralyklová skupina, případně substituovaná heterocykloalkylová skupina, případně substituovaná heterobicykloalkylová skupina, případně substituovaná alkylamidoskupina, případně substituovaná arylamidoskupina, případně substituovaná -S(0)2-alkylová skupina nebo případně substituovaná -S(0)^-cykloalkylová skupina, -C(0)-alkylová skupina nebo případně substituovaná -C(0)-alkylová skupina, s podmínkou, že když R je alifatická nebo cykloalkylová skupina, R není exkluzivně substituovaný jedním či více substituenty zvolenými ze skupiny zahrnující hydroxylovou skupinu a nižší alkylové ethery s podmínkou, že cykloalkylová skupina není 2-fenyl-l,3-dioxan-5-ylová skupina a s podmínkou, že alifatická skupina není exkluzivně substituovaná jednou či více alifatickými skupinami, kde jeden či více substituentů se volí z případů zahrnujících substituovanou či nesubstituovanou alifatickou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou aromatickou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou aralkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaralkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou cykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovaný či nesubstituovaný aromatický • · · · · · · · · -·θ»56··- ·* · ·· *·* ether, substituovaný či nesubstituovaný alifatický ether, substituovanou či nesubstituovanou alkoxykarbonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou alkylkarbonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou arylkarbonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylkarbonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou aryloxykarbonylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou aminokarbonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou azabicykloalkylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, oxoskupinu, aldehyd, substituovanou či nesubstituovanou alkylsulfonamidoskupinu, substituovanou či nesubstituovanou arylsulfonamidoskupinu, substituovanou či nesubstituovanou bicykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu, kyanoskupinu, aminoskupinu, alkylaminoskupinu, ureidoskupinu, thioureidoskupinu a skupinu -B-E.
    B je substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, alkylenová skupina, aminoalkylová skupina, alkylenkarbonylová skupina nebo aminoalkylkarbonylová skupina.
    E je substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná azacykloalkylalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, substituovaná • · • · · · • · · · • · či nesubstituovaná alkylsulfonamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylsulfonamidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná bicykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná ureidoskupina, substituovaná či nesubstituovaná thioureidoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina.
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, atom halogenu, hydroxylová skupina, kyanoskupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina , substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina , substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, skupina -NR4Rs nebo -C(O)NR4R5R3 je substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, s podmínkou, že L je skupina -SN(R)-, -S(O)N(R)-, -S(O)2N(R)-, —N(R)S—, -N(R)S(O)-, -N(R)S(O)2-, -N(R)SN(R')-, -N(R)S(O)N(R’)- nebo -N(R)S(0)2N(R')-, kde R3 je substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkenylová skupina, s podmínkou, že j je 0, když L je skupina -0-,
    -CHzNR-, -C(0)NR- nebo -NRC(O)- a R3 je azacykloalkylová skupina nebo azaheteroarylová skupina a • · · · · · «··
    - ·δ·58 · — ·* · .....
    s podmínkou, že j je 0, když L je -O- a R3 je fenylová skupina.
    R4, Rs a atom dusíku tvoří společně tříčlenný, čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný substituovaný či nesubstituovaný heterocykloalkylový kruh, substituovaný či nesubstituovaný heterobicykloalkylový kruh nebo substituovaný či nesubstituovaný heteroaromatický kruh nebo
    R^ a Rs jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, nebo skupina Y-Z.
    Y se volí z následujících skupin: -C(0)-, (CH2) -S(0)2-, -C(0)0-, -SOaNH-, -CONH-, (CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CH ) S-, -(CH ) S(O)- a -(CH ) S(0) -,
  2. 2 Jp 2 jp 2 Jp 2 p je celé číslo od 0 do zhruba 6,
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina , j je celé číslo od 0 do 6.
    2. Sloučenina podle nároku 1, ve které R3 se zvolí z případů zahrnujících substituovanou či nesubstituovanou fenylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou naftylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou pyridylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou thienylovou ·«·· · · · · · · ·· skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzonitrilovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou tetrahydropyranylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou tetrahydrofuranylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou dioxanovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou dioxolanovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou chinolinovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou thiazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou isoxazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou cyklopentanylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzofuranylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzothiofenovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzisoxazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzisothiazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzothiazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzoxazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzoxthiazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzimidazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzoxadiazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzothiadiazolovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou isochinolinovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou chinoxalinovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou indolovou skupinu a substituovanou či nesubstituovanou pyrazolovou skupinu.
  3. 3. Sloučenina podle nároku 2, ve které skupina R3 je substituovaná jedním či více substituenty zvolenými ze skupin zahrnujících atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, methylovou skupinu, nitroskupinu, skupinu OCF3, OCH3, kyanoskupinu, skupinu CO2CH3, triluormethylovou skupinu, terč.butylovou skupinu, pyridylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou oxazolylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzylovou skupinu, substituovanou či ne- * · ···· · · ···· ·· • · ··· · · · • * · · · · ·
    -.áeo.Á * substituovanou benzensulfonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou fenoxyskupinu, substituovanou či nesubstituovanou fenylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou aminoskupinu, karboxylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou tetrazolylovou skupinu, styrylovou skupinu, -S-(substituovanou či nesubstituovanou arylovou) skupinu, -S-(substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou) skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, skupinu NRfR^, alkinylovou skupinu, skupinu -C(O)NR R , R a CH OR .
    x f <3 r a 2 a
    Rf, R^ a atom dusíku společně vytvářejí tříčlenný, čtyřčlenný, pětičlenný, šestičlenný či sedmičlenný substituovaný či nesubstituovaný heterocykloalkylový kruh, substituovaný či nesubstituovaný heterobicykloalkylový kruh nebo substituovaný či nesubstituovaný heteroaromatický kruh nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, substituováná či nesubstituované alifatická skupina, nebo substituovaná či nesubstituované aromatická skupina a
    R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituod váná alkylová skupina nebo substituovaná či nesubstituované arylová skupina, skupina -W-(CH2J^-NR^R^, -W-(CH2)t-O-alkyl, -W-(CH2)t-S-alkyl, -W-(CH2)t-OH nebo -W-(CH2)^-OR^, t je celé číslo od 0 do 6,
    W je vazba nebo skupina -0-, -S-, -S(0)-, -S(0)2nebo -NR -,
    R^ je atom vodíku nebo alkylová skupina a
    R , R^ a atom dusíku, ke kterému se připojují, tvoří spolu tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicyklickou skupinu nebo
    Rd a R^ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina, alkanoylová skupina nebo skupina -K-D,
    K je skupina -S(0)2~, -C(0)~, -C(O)NH-, C(0)2~ nebo přímá vazba.
    D je substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminocykloalkylová skupina, skupina COOR± nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina a
    R je substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina.
  4. 4. Sloučenina podle nároku 3, ve které R3 je substituovaná či nesubstituovaná fenylová skupina.
  5. 5. Sloučenina podle nároku 1, ve které se kruh A volí • ·
    - ·3ί>«2* .»' z případů zahrnujících substituovanou či nesubstituovanou fenylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou naftylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou pyridylovou skupinu a substituovanou či nesubstituovanou indolovou skupinu.
  6. 6. Sloučenina podle nároku 5, ve které je kruh A substituovaný jedním či více substituenty zvolenými z případů zahrnujících atom fluoru, atom chloru, atom bromu, atom jodu, methylovou skupinu, nitroskupinu, skupinu OCF3, skupinu OCH3, kyanoskupinu, skupinu CO2CH3, trifluormethylovou skupinu, terc.butylovou skupinu, pyridylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou oxazolylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou benzensulfonylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou fenoxyskupinu, substituovanou či nesubstituovanou fenylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou aminoskupinu, karboxylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou tetrazolylovou skupinu, styrylovou skupinu, -S-(substituovanou či nesubstituovanou arylovou) skupinu, —S—(substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou) skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, skupinu -NH^R , alkinylovou skupinu, skupinu —C(O)NR R a CH OR .
    Rf, Rg a atom dusíku společně vytvářejí tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo
    - .16.3'
    Rf a R^ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina a
    R^ je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, skupina -W-(CH2)t~NRdRe, -W-(CH2)t-O-alkyl, -W-(CH2)t-S-alkyl, -W-(CH_Jt-OH nebo -W-(CH2)t-0Rf, t je celé číslo od 0 do 6,
    W je vazba nebo skupina -0-, -S-, -S(0)-, -S(0) nebo -NR -,
    R^ je atom vodíku nebo alkylová skupina a
    R , R a atom dusíku, ke kterému se připojují, tvoří spolu tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu.
    R a R& jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina, alkanoylová skupina nebo skupina -K-D,
    K je skupina -S(0)2~, -C(0)-, -C(O)NH-, C(0)2 - nebo přímá vazba,
    D je substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, substi• · · · •36 4' tuovaná či nesubstituovaná heteroaralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminocykloalkylová skupina, skupina COOR± nebo substituovaná či nesubstituovaná akylová skupina a
    R je substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina.
  7. 7. Sloučenina podle nároku 6, ve které je kruh A substituovaná či nesubstituovaná fenylová skupina.
  8. 8. Sloučenina podle nároku 1, ve které je Ri skupina obecného vzorce ve kterém m je celé číslo od 0 do 3.
  9. 9. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce • · · · a
    O
    I (CH2)t
    NR8Rg ve kterém m je celé číslo od 0 do 3, t je celé číslo od 1 do 6 a
    Rs, R& a atom dusíku spolu vytvářejí tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    Ra a Rg jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y -Z ,
    2 2 '
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH^)^-, -S(0)2-, -C(0)0-, -SO^NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CTJ^S-, -(CHJ^SfO)- a -(CH2)<3S(O)2-, q je celé číslo od 0 do 6 a • · · ·
    Z2 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina.
  10. 10. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce ve kterém m je celé číslo od 1 do 3, s a t jsou nezávisle na sobě celé číslo od 0 do 6 a
    Ra, Rq a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    Rs a Rg jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupi• · na Y -Z ,
    2 2 '
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)-, “(CH 2) -, -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CHJ^S-, -(0^)^(0)- a -(CH2)£aS(O)2-, q je celé číslo od 0 do 6,
    Z2 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina ,
    R je skupina -0R nabo -NR R ,
    77 J c 7 θ 7 Θ S O '
    R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituovaná
    78 J alifatická skupina,
    Rvg, Rso a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y-Z ,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH 2)q“/ -S(0)2-, -0(0)0-, -SO2NH-, -C0NH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-,
    -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- a -(CH ) S(0) -.
    X 2'c£ ' X 2 ' <3 X ' X 2 ' ca x ' 2 q je celé číslo od 0 do 6,
    Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  11. 11. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce q je celé číslo od 0 do 6 a ve kterém v je celé číslo od 1 do 3 a
    R je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y2-Z2,
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)-, “(CH2) -,
    -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-,
    -(CHJ^S-, -(CHJ^SfO)- a -(CH2)<jS(O)2-, « * 4 · • · · · • · • · «
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  12. 12. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce ve kterém m je celé číslo od 0 do 3,
    R je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y2~Z2,
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH^)-, -S(0)2-, -C(0)0-, - SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^NH-,
    -(CHJ^S-, -(CH2)qS(O)- a -(CH2)^S(O), q je celé číslo od 0 do 6 a
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina a
    Rxi představuje jeden či více substituentů zvolených nezávisle z případů atom vodíku, hydroxylová skupina, oxoskupina, substituovaná či nesubstituovaná alifatická skupi na, substituovaná či nesubstituovaná aromatická skupina, substituovaná či nesubstituovaná substituovaná či nesubstituovaná substituovaná či nesubstituovaná substituovaná či nesubstituovaná substituovaná či nesubstituovaná substituovaná či nesubstituovaná substituovaná či nesubstituovaná heteroaromatická skupina, alkoxykarbonylová skupina, alkoxyalkylová skupina, aminokarbonylová skupina, alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, heteroarylkarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoalkylová skupina a substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, s podmínkou, že atomy uhlíku přiléhající k atomu dusíku nejsou substituované hydroxylovou skupinou.
  13. 13. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce • · ··«· ♦ · · · · ·· • « *·· · ♦ · • · * · · · · • ··«·· · * · «271* ·τ ·· · ·· Rio ve kterém
    R je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y2~Z2,
    Y_, se volí z následujících skupin: -C(0)-, “(CH 2) ”, -S(0)2-r -C(0)0~, -SO2NH-, -CONH-, -(CH2)^0-, -(CHJ^NH-, -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- a -(CH ) S(0) -, q je celé číslo od 0 do 6 a
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylové skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  14. 14. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce ·· 9 9·9 994
    9 ·
    Re ve kterém r je celé číslo od 1 do 6 a
    Ra, Rg a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    Ra a Rg jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y -Z ,
    Y_, se volí z následujících skupin: -C(0)-, “(CH 2)q -z -S(0) -, -C(0)0-, -SONH-, -CONH-, -(CH ) 0-, -(CH ) NH-,
    2 2 2 <2 2 q
    -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- a -(CH ) S(0) -.
    q je celé číslo od 0 do 6,
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná 2 ' alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  15. 15. Sloučenina podle nároku 1, ve které Rx je skupina obecného vzorce ·· V··» ·· b· 4 ·«« • 4 * i* ··«*»·
    Q + O ·__„ · · · ♦· t * · *J» ·· 4· * «a ··· ve kterém w je celé číslo od 0 do t je celé číslo od 0 do u je 0 nebo 1,
    R je atom vodíku nebo váná alkylová skupina,
    4,
    6, substituovaná či nesubstituo ·· ···· ♦· ···· • · · • ·
    Rs, Rg a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou či šestičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    Rs a Rg jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y -Z ,
    2 2 '
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)-, “(CH2) -, -S(0)a-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CH2)qS-, -(CH2)^S(O)- a -(CH2)j3S(O)2-.
    q je celé číslo od 0 do 6,
    Z2 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina.
  16. 16. Sloučenina podle nároku 1, ve které Rx je skupina obecného vzorce
    R-I2 ve kterém w je celé číslo od 0 do 4, t je celé číslo od 0 do 6,
    R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituováná alkylová skupina,
    R je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y^-Z^.
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)~, ”(CH3) -, -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CHJ^S-, -(CH^ )^S(O)- a -(CH2)£3S(O)2-.
    q je celé číslo od 0 do 6 a
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, sub• · • · · · stituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
    - 3·7·6 *··
  17. 17. Sloučenina podle nároku 14, ve které Re, Rg a atom dusíku vytvářejí společně heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce ve kterém
    R , R , 13 ' 14 ' le na sobě nižší
    R r R f R , R / R a ]
    15' 16' 179 is' 19 alkylová skupina nebo atom jsou
    2 0 vodíku nebo nezávisalespoň jeden z párů substituentů R a R , R a R , R a R nebo R a R představuje atom kyslíku ne16'17 IQ 19 2 0·* ·“* * bo alespoň jeden ze substituentů R a R je kyanoskupina, skupina CONHR , COOR , CH OR nebo CH NR (R ), ' * 21' 21' 221 221'22''
    R , R22 a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substitu• · • · · · • · · · • · ·· · · · ·· · • · · · ·· · • · · · · ···· • · · · · ···
    - 5*77 “ .....
    ovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skuPina γ 3-ζ3'
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, “(CH2)
    -S(0) -, -C(0)0-, -SONH-, -CONH-, -(CH ) 0-, -(CH ) NH-, xí -ž 2 C£ 2
    -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- a -(CH ) S(0) -.
    q je celé číslo od 0 do 6,
    Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina ,
    X je skupina -0-, -S-, -S0-, SO -, -CH2~, -CH(0R23)nebo NR ,
    2 3'
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, skupina -C(NH)NH2, -C(0)R24 nebo -C(O)OR2^,
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová • · skupina a u je O nebo 1.
  18. 18. Sloučenina podle nároku 14, ve které Rq, Rq a atom dusíku tvoří společně heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce ve kterém
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo
    25 26 nižší alkylová skupina nebo
    R a R spolu představují atom kyslíku a
    2 5 2 6
    R , R22 a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou či šestičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3-Z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-,
    -S(0)2-, -C(0)0-, -SO^NH-, -CONH-, -(CHJJD-, -(CHJ^NH-, -(CH2)qS-, -(0^)^(0)- a -(CH2)<aS(O)2-.
    • · · · · ·
    3.1®. ·-* ·' • · s je celé číslo od 0 do 6 a
    Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina , i je celé číslo od 1 do 6 a t je celé číslo od 0 do 6.
  19. 19. Sloučenina podle nároku 14, ve které Rs, Rg a atom dusíku tvoří společně heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce ve kterém i je celé číslo od 1 do 6 a
    R je CH OH, C(O)NR R nebo COOR 2*7 2 K z 24 2S 2 • · · · • · «
    • ·
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
  20. 20. Sloučenina podle nároku 14, ve které Ra, Rg a atom dusíku tvoří společně heteroaromatickou skupinu obecného vzorce ve kterém
    R je atom chloru, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, karboxylová skupina, kyanoskupina, skupina C(O)OR , CH OR , CH NR R nebo C(0)NR R , ' * 3 O r 2 3OZ 2 21 2 2 ' ' 2122
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina , substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina nebo heterocykloarylová skupina a
    R2 , R a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou či šestičlennou substituovanou či ne3β1.
    substituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabi21 2 2 cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina y3-z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH 2)t“/ -S(0)2-, -C(0)0-, -SO^NH-, -CONH-, -(CHJJ3-, -(CHJJJH-, -(CH2)tS-, -(CHJtS(O)- a -(CH2) (0)2-, t je celé číslo od 0 do 6 a
    Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  21. 21. Sloučenina podle nároku 14, ve které alespoň jeden z Ra a Rg je skupina obecného vzorce Y3-D, ve kterém D je skupina obecného vzorce • · 4 · • · · ·
    - 38«· — ve kterém
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH2)t~, -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CHJJ5-, -(CH2)tS(O)- a -(CH2)tS(0)2~, t je celé číslo od 0 do 6,
    T je skupina -0-, -C(0)-, -S-, -S0-, -SO^-, -CH^-, -CH(0R24)- nebo -N(R24)-,
    R je atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituováná alkylová skupina, arylová skupina nebo aralkylová skupina a x je 0, 1 nebo 2.
  22. 22. Sloučenina podle nároku 14, ve které alespoň jeden z Rq a Rg je skupina obecného vzorce Y3-N(R31)R32, ve kterém
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH2)t~, • · · · • ·
    -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJJ3-, -(CHJJNH-, -(CHJJ5-, -(CH2)tS(O)- a -(CH2)tS(O)2-, t je celé číslo od 0 do 6,
    R a R jsou nezávisle na sobě substituovaná či ne3 1 3 2 substituovaná karboxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná kyanoalkylová skupina nebo
    R , R32 a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou či šestičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu
  23. 23. Sloučenina podle nároku 15, ve které substituenty Rs, Rg a atom dusíku spolu vytvářejí heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce R18 / \ R17 ve kterém
    R , R a R jsou nezávisle na 17' 19 2 O J sobě nižší alkylová skupina nebo atom vodíku nebo a R
    1 6 bo pina, alespoň jeden z párů substituentů R a R14, Rxs
    R a R nebo R a R představuje atom kyslíku ne1 Ύ Χβ X 20 *· alespoň jeden ze substituentů R a R je kyanoskuskupina CONHR , COOR , CH OR nebo CH NR (R ), c 2X* 21 ' 2 2X 2 2 X ' 22 ' '
    R , R22 a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou, šestičlennou či sedmičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3-Z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH2)s~, -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJJ)-, -(CH2)eNH-, -(CH2)sS-, -(CH2)sS(O)- a -(CH2)eS(O)2-.
    s je celé číslo od O do 6,
    Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina , ch(or23)X je skupina -0-, -S-,
    -S0-, -SO -, -CH -, ' 2 2 • « · · * · • · nebo NR ,
    2 3 '
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, skupina -C(NH)NH2, -C(O)R24 nebo -C(O)OR24,
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina a y je 0 nebo 1.
  24. 24. Sloučenina podle nároku 15, ve které R , Rg a atom dusíku společně tvoří heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce
    N ve kterém
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo 2 5 26 J nižší alkylová skupina nebo
    R a R spolu představují atom kyslíku,
    2 5 2 <5 • · · ·« · · · 9· * · ·« — 3 8 é » · · ·· * * ······ ·· · · « R2i' R22 a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou či šestičlennou substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabi2 Π 2 2 cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina y3-z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH2)s~, -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJJ)-, -(CHJ^NH-, -(CH2)sS-, -(CH2)sS(O)- a -(ch2)ss(o)2-.
    s je celé číslo od 0 do 6,
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina , r je celé číslo od 0 do 6 a z je celé číslo od 0 do 6.
  25. 25. Sloučenina podle nároku 15, ve které Ra, Rg a atom dusíku spolu tvoří heterocykloalkylovou skupinu obecného vzorce * · « · · ·«·· · · • · · · » · ·
    38-7· -··
    F?27 ve kterém i je celé číslo od 1 do 6 a
    R je CH OHC(O)NR R nebo COOR ,
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
  26. 26. Sloučenina podle nároku 15, ve které Rg, Rg a atom dusíku spolu tvoří heteroaromatickou skupinu obecného vzorce
    N ♦ · v 4tt·
    C C « • <· • V
    38δ»·-··* • · «·· 4 ti · • · · ve kterém
    R2g je substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina,substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, karboxylová skupina, kyanoskupina, skupina C(O)OR3q, CH OR , CH NR R nebo C(O)NR R ,
    2 3 O * 2 2123 ' z 2122
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloarylová skupina,
    R , R22 a atom dusíku spolu tvoří tříčlennou, čtyřčlennou, pětičlennou či šestičlennou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu nebo
    R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, azabi212 2“* cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3-Z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH2)S-/ -S(0)2-, -C(O)O~, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CH2)sS-, -(CH2)sS(O)- a -(CH2)sS(O)2-.
    s je celé číslo od 0 do 6,
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná 3 “* ' ···· ·· · · · · ·· • · · · · · ··· alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  27. 27. Sloučenina podle nároku 15, ve které alespoň jeden ze substituentů Rg a Rg je skupina obecného vzorce Y -D, ve kterém D je skupina obecného vzorce ve kterém
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJJ)-, -(CHJJJH-, -(CH2)eS-, -(CH2)sS(O)- a -(CH2)eS(O)2-.
    s je celé číslo od 0 do 6,
    T je -0-, -C(0)-, -S-, -S0-, -S02-, -CH2-, -CH(0R33)nebo -NR ,
    3 3
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina, skupina -C(NH)NH2, -C(0)R34 nebo -C(0)0R34, ·· ···· · · ···· • · · · · · • · · · ·
    390ί·τ*.»
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, arylová skupina nebo aralkylová skupina a x je 0, 1 nebo 2.
  28. 28. Sloučenina podle nároku 15, ve které alespoň jeden z R a R je skupina obecného vzorce Y -N(R )R , ve kterém
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(O)-, “(CH ) -, -S(0)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, -(CH2)eO-, -(CH2)eNH-, -(ch2)ss-, -(CH2)sS(O)- a -(ch2)sS(O)2-.
    s je celé číslo od 0 do 6,
    R a R jsou nezávisle na sobě substituovaná či nesubstituovaná karboxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylsulfonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná kyanoalkylová skupina nebo
    R , R a atom dusíku spolu tvoří pětičlennou či šestičlennou, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu, substituovanou či nesubstituovanou heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou či nesubstituovanou heterobicykloalkylovou skupinu.
  29. 29. Sloučenina podle nároku 12, ve které Z2 je skupina obecného vzorce N(R )R , ve kterém R a R jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina, alkoxykarbonylová skupina, alkoxyalkylová skupina, hydroxyalkylová sku- pina, aminokarbonylová skupina, kyanoskupina, alkylkarbonylová skupina nebo aralkylová skupina.
  30. 30. Sloučenina podle nároku 12, ve kterém skupina Z__ má obecný vzorec ve kterém
    X je nezávisle skupina CH nebo atom dusíku a
    R37 je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
  31. 31. Sloučenina podle nároku 12, ve které Z_, je skupi• · · · • · · · na obecného vzorce ve kterém g je celé číslo od 0 do 3,
    T je -0-, -C(0)~, -S-, -S0-, -S02-, -CH2-, -CH(ORaJnebo -N(R34)-,
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituované 34 J 9 alkylová skupina, substituovaná či nesubstituované arylová skupina, substituovaná či nesubstituované aralkylová skupina a
    R37 je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituované alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituované aralkylová skupina.
  32. 32. Sloučenina podle nároku 12, ve které Z2 je skupi39^.-* na obecného vzorce ve kterém g je celé číslo od 0 do 3 a
    R37 je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
  33. 33. Sloučenina podle nároku 12, ve které Z2 je skupina obecného vzorce • · · · • · · · ve kterém
    T je -0-, -C(0)-, -S-, -S0-, -S02-, -CH2-, -CH(0R3Jnebo -N(R34)-,
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina a g je celé číslo od 0 do 3 a
    R3v je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
  34. 34. Sloučenina podle nároku 12, ve které Z2 je skupi• · • · · · na obecného vzorce ve kterém
    R32 je atom vodíku, kyanoskupina nebo substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná hydroxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
    R je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxykarbonylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkoxyalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminokarbonylová skupina, perhaloalkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkenylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná alkylkarbonylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná aralkylová skupina.
  35. 35. Sloučenina podle nároku 1, ve které Rx je skupina obecného vzorce ve kterém lá je O nebo 1,
    R , R , R , R ,
    3 Θ 4 0 4 1' 4 2'
    R a R jsou
    45 46
    R , R , 43' 44' le na sobě methylová skupina nebo atom vodíku nebo nezávisalespoň jeden z párů substituentů R a R , R a R , R a R nebo R a R představuje atom kyslíku a
    R4v je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y2~Z2,
    Y2 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CHz) -S(0)2-, -C(0)0~, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CHJJS-, -(CHa)^S(O)- a -(CH2)qS(O)2-.
    q je celé číslo od O do 6 a
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, sub• ♦ • · · · stituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina nebo
    R47 je skupina obecného vzorce
    R49-7\
    R48 N R55 R56 ve kterém y je 0 nebo 1,
    4.e' 4.S r 50 1 51'
    R a R jsou nezávis54 55 J le na sobě methylová skupina nebo atom vodíku nebo alespoň jeden z párů substituentů R a R , R a R , R a R nebo R a R představuje atom kyslíku a 51' 52 53 54 55 J.
    R je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, hete5 <S rocykloalkylová skupina nebo skupina Y3~Z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, -(CH^)^-, -S(0)2-, -C(O)O-, -SO2NH~, -CONH-, -(CHJJD-, -(CHJ^NH-, -(CHJJ3-, -(CH2)tS(O)- a - (CH2 ) (O) 2~ , t je celé číslo od O do 6 a • · · · • ·
    Z je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  36. 36. Sloučenina podle nároku 1, ve které R je skupina obecného vzorce ve kterém e, f, h, u a y jsou nezávisle na sobě O nebo 1, jsou nebo
    R , R 57 r nezávisle
    R řR ZR , R f R řR r
    ---* 6 O ' 61 ' 62' 63' 64' methylová skupina nebo atom vodíku
    5a' 59' na sobě alespoň
    R
    6 2 jeden z nebo R
    6 3 párů substituentú R a R , R a c 5Ύ 5 Q ' 5 9 a R64 představuje atom kyslíku je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, hete• · « · • · · · rocykloalkylová skupina nebo skupina Y3-Z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)-, (CH2) -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJ^O-, -(CHJ^NH-, -(CH ) S-, -(CH ) S(0)- a -(CH ) S(0) 2 Cf 2 C[ 2 C£ 2 r p je celé číslo od 0 do 6 a
    Z2 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina , nebo
    R67 je skupina obecného vzorce
    R69 / \
    R68
    R76 ve kterém d je 0 nebo 1,
    Gař* 7Of 71' 72Z 73f 74 jsou nezávisle na sobě nižší alkylová skupina nebo atom vodíku nebo
    400*-· ·*· ·· • ••4 · · ·· · • · · · · alespoň jeden z párů substituentů R a R , R a R , R a R nebo R a R představuje atom kyslíku a
    R?g je atom vodíku, azabicykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo skupina Y3~Z3,
    Y3 se volí z následujících skupin: -C(0)~, -(CH^), -S(0)2-, -C(0)0-, -SO2NH-, -CONH-, -(CHJJD-, -(CHJJ4H-, -(CHJtS-, -(CH2)tS(O)- a - (CH^ ) (O) , p je celé číslo od O do 6 a
    Z3 je atom vodíku, substituovaná či nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná aminoskupina, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina nebo substituovaná či nesubstituovaná heterocykloalkylová skupina .
  37. 37. Sloučenina podle nároku 3, ve které R_, je atom vodíku.
  38. 38. Sloučenina podle nároku 1, ve které L je -0-, -NHSO2R-, -NC(O)O- nebo -NHC(O)-.
  39. 39. Způsob inhibice aktivity protein kinasy, v yznačující se tím, že se podává sloučenina podle nároku 1 nebo její fyziologicky přijatelná sůl, lékový prekursor nebo biologicky aktivní metabolit.
  40. 40. Způsob podle nároku 39, vyznačující se t í m, že se tato protein kinasa volí ze skupiny • · ·ίί« • · ·
    401·’- *· · • · · • 1*4 · »
    4«4| zahrnující KDR, FGFR-1, PDGFRB, PDGFRa, IGF-1R, c-Met, Flt-1, TIE-2, Lek, Src, fyn, Lyn, Blk a yes.
  41. 41. Způsob podle nároku 39, vyznaču j ící se t í m, že aktivita této proteinové kinasy ovlivňuje hyperproliferační poruchy.
  42. 42. Způsob podle nároku 39, vyznačuj ící se t í m, že aktivita této protein kinasy ovlivňuje angiogenesi, vaskulární permeabilitu, imunitní odpověď nebo zánět.
  43. 43. Způsob léčení pacienta se stavem, který je zprostředkovaný aktivitou protein kinasy, vyznačuj ící se t í m, že zahrnuje podání tomuto pacientovi terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I, jak se definuje v nároku 1 nebo její fyziologicky přijatelné soli, lékového prekursoru či biologicky aktivního metabolitu.
  44. 44. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že se tato proteinová kinasa volí ze skupiny zahrnující KDR, FGFR-1, PDGFRB, PDGFRa, IGF-1R, c-Met, Flt-1, TIE-2, Lek, Src, fyn, Lyn, Blk a yes.
  45. 45. Způsob podle nároku 43, vyznačující se t í m, že tento stav zprostředkovaný aktivitou protein kinasy je hyperproliferační porucha.
  46. 46. Způsob podle nároku 43,vyznačující se t í m, že aktivita této protein kinasy ovlivňuje angiogenesi, vaskulární permeabilitu, imunitní odpověď nebo zánětlivou odpověď.
    4· ··»»* • · · · · · • » · · < · · ·«>··· · · · • a«· >· ·· · ** ·♦·
  47. 47. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že touto protein kinasou je protein serin/ /threonin kinasa nebo protein tyrosin kinasa.
  48. 48. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že tento stav zprostředkovaný aktivitou protein kinasy spočívá ve výskytu jednoho či více vředů.
  49. 49. Způsob podle nároku 48, vyznačuj ící se t í m, že tento vřed či vředy je způsobený (jsou způsobené) bakteriální či mykotickou infekcí nebo že tento vřed či vředy jsou Moorenovy vředy nebo že tento vřed či vředy jsou symptomy ulcerativní kolitidy.
  50. 50. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že tento stav zprostředkovaný aktivitou protein kinasy je Lymeho choroba, sepse či infekce Herpex simplex, Herpex zoster, virem lidské imunodeficience, parapoxvirem, prvoky či toxoplasmaosou.
  51. 51. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je von Hippel Lindauova choroba, pemphigoid, psoriasa, Pagetova choroba nebo polycystické onemocnění ledvin.
  52. 52. Způsob podle nároku 43, vyznačující se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je fibrosa, sarkoidosa, cirhosa, thyroiditida, syndrom hyperviskosity, Oslerova-Weberova-Renduho choroba, chronické plicní oklusivní onemocnění, astma, exudáty, ascity, pleurální efuse, plicní edem, mozkový edem nebo edem po popáleninách, traumatu, ozáření, mrtvici, hypoxii či ische-
    403 mi i.
  53. 53. Způsob podle nároku 43,vyznačující se t í m, že tento stav zprostředkovaný aktivitou protein kinasy je syndrom hyperstimulace ovárií, preeklampsie, menometrorrhagie nebo endometriosa.
  54. 54. Způsob podle nároku 43, vyznačující se t í m, že tento stav zprostředkovaný aktivitou protein kinasy je chronický zánět, systémový lupus, glomerulonefritida, synovitida, zánětlivé střevní onemocnění, Crohnova choroba, glomerulonefritida, revmatická arthritida a osteoarthritida, mnohočetná sklerosa nebo odmítnutí implantátu.
  55. 55. Způsob podle nároku 43,vyznačující se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je srpkovitost.
  56. 56. Způsob podle nároku 43, vyznačující se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je některý z očních stavů.
  57. 57. Způsob podle nároku 56, vyznačuj ící se t í m, že tímto očním stavem je okulární či makulární edem, okulární neovaskulární choroba, skleritida, radiální keratotomie, uveitida, vitritida, myopie, optické jamky, chronické odchlípnutí sítnice, komplikace po léčení laserem, konjuktivitida, Stargardtova choroba, Ealesova choroba, retinopatie nebo makulární degenerace.
  58. 58. Způsob podle nároku 43, vyznačující se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je některý kardiovaskulární stav.
  59. 59. Způsob podle nároku 58, vyznačující se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je atherosklerosa, restenosa, ischemické/ /reperfusní poškození, vaskulární okluse, venosní malformace nebo obstrukční onemocnění karotidy.
  60. 60. Způsob podle nároku 43, vyznačující se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je rakovina.
  61. 61. Způsob podle nároku 60, vyznačuj ící se t í m, že touto rakovinou je solidní tumor, sarkom, fibrosarkom, osteom, melanom, retinoblastom, rhabdomyosarkom, glioblastom, neuroblastom, teratokarcinom, hemopoetické maligní onemocnění a maligní ascity.
  62. 62. Způsob podle nároku 61,vyznačující se t í m, že touto rakovinou je Kaposiho sarkom, Hodgkinova choroba, lymfom, myelom nebo leukémie.
  63. 63. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným aktivitou protein kinasy je Crowův-Fukaseho syndrom (POEMS) nebo některý diabetický stav.
  64. 64. Způsob podle nároku 63, vyznačuj ící se t í m, že tímto diabetickým stavem je insulin-dependentní diabetes mellitus, glaukom, diabetická retinopathie nebo mikroangiopathie.
  65. 65. Způsob snižování feritility pacienta, vyznačující se tím, že se tomuto pacientovi podává • · • · · · • · · · • · účinné množství sloučeniny obecného vzorce I, jak se definuje v nároku 1 nebo její fyziologicky přijatelné soli, lékového prekursoru či biologicky aktivního metabolitu.
  66. 66. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že se sloučenina obecného vzorce I nebo její fyziologicky přijatelná sůl, lékový prekursor či biologicky aktivní metabolit podává v množství účinném pro podporu angiogenese či vaskulogenese.
  67. 67. Způsob podle nároku 66, vyznačuj ící se t í m, že touto protein kinasou je Tie-2.
  68. 68. Způsob podle nároku 66, vyznačuj ící se t í m, že se sloučenina obecného vzorce I nebo její fyziologicky přijatelná sůl, lékový prekursor či biologicky aktivní metabolit podává v kombinaci s proangiogenním růstovým faktorem.
  69. 69. Způsob podle nároku 68, vyznačuj ící se t í m, že se tento proangiogenní růstový faktor volí ze skupiny zahrnující VEGF, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E, HGF, FGF-1, FGF-2, jejich deriváty a antiiodotypické protilátky.
  70. 70. Způsob podle nároku 66, vyznačuj ící se t í m, že tímto stavem zprostředkovaným protein kinasou je anemie, ischemie, infarkt myokardu, odmítnutí implantátu, poranění, gangrena či nekrosa.
  71. 71. Způsob podle nároku 43, vyznačuj ící se t í m, že se tato aktivita protein kinasy účastní aktivace T buněk, aktivace B buněk, degranulace žírných buněk,
    406 aktivace monocytů, potenciace zánětlivé odpovědi nebo jejich kombinací.
  72. 72. Sloučenina zvolená z následujícího seznamu sloučenin:
    cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-pyrrolidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminhydrochlorid trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohex-l-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin trans-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin cis-7-(4-dimethylaminocyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin
    5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid
    5-(4-fenoxyfenyl)-7-(3-pyrrolidinyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamindihydrochlorid cis-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[ 2 ,3-d]pyrimidin-4-amin • · ···· ·· ···· · ·
    407 • · * · · · · · · “···· ·· ·· · ·· ♦·» trans-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin cis-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin trans-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl}-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin cis-7-[4-(4-ethylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin trans-7-[4-(4-ethylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin cis-7-[4—(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-[4-(4-isopropylpiperazino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl )-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl} -5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-{4-[4-(2-methoxyethyl)piperazino]cyklohexyl} -5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propylJamino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-(4-{[3-(ΙΗ-1-imidazolyl)propylJamino}cyklohexyl)-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
    408 cis-7-[(4-dimethylamino)cyklohexyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperidinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-tetrahydro-lH-l-pyrrolocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-bismaleat cis-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-5-(4-fenoxyfenyl)-7-(4-piperazinocyklohexyl)-7H-pyrrolo[ 2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat
    7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trihydrochlorid cis-7-[3 —(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-7-[3-(4-methylpiperazino)cyklopentyl]-5-(4-fenoxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trihydrochlorid • · trans-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleat trans-benzyl-N-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}2-methoxyfenyl)karbamat-trismaleat trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)benzamid trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)benzamid-trismaleat cis-Nl-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid cis-Nl-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid-trismaleat trans-Nl-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-methoxyfenyl)-3-fenylpropanamid-trismaleat • · * · • · cis-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(3-methoxypropyl)amino]benzonitril-trismaleat trans-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(3-methoxypropyl)amino]benzonitril-trismaleat cis-2-amino-6-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl ]-7H-pyrrolo[ 2 ,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)benzonitril-trismaleat trans-2-amino-6-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)benzonitril-trismaleat cis-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(4-methylfenyl)sulfanyl]benzonitril-trismaleat trans-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-[(4-methylfenyl)sulfanyl]benzonitril-trismaleat cis-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-(2-pyridylsulfanyl)benzonitril-trismaleat trans-2-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-ylfenoxy)-6-(2-pyridylsulfanyl)benzonitril-trismaleat
    411 cis-5-(2-methyl-4-fenoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat trans-5- (2-methyl-4-f enoxyf enyl) -7- [ 4- (4-methylpiperazi.no) cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amin-trismaleat cis-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-Nl-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat
    NI-(4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid
    NI-(4-[4-amino-7-(l-benzyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid
    NI-(4-[4-amino-7-(4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d Jpyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid
    NI-(4-[4-amino-7-(1-formyl-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-4-fluor-l-benzensulfonamid
    NI-[4-[4-amino-7-l-[(l-methyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl ]-4-fluor-l-benzensulfonamid-bismaleat
    NI-[4-[4-amino-7-l-[(1,2-dimethyl-lH-4-imidazolyl)sulfonyl]-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl ]-4-fluor-l-benzensulfonamid
    412
    NI-[4-[4-amino-7-l-[(1,2-dimethyl-lH-5-pyrazolyl)karbonyl]-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl]-4-fluor-l-benzensulfonamid
    Nl-(4-(4-amino-7-[(l-(2-pyridylkarbonyl)-4-piperidyl]-7H-pyrrolo[2 f3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid
    Nl-4-(4-amino-7-{4-[l-(l-methylpiperid-4-yl)piperidyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-y1}-2-fluorfenyl)-4-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-(trifluormethoxy)-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-chlor-2-thiofensulfonamid-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-fluor-2-benzensulfonamid-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat
    413 • · 4 · · « ·· ······ · ~* · · · · · · ·· · ·· cis-N-1-(4-4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl-2-fluorfenyl)-2,5-difluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl) -2,6-difluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzothiadiazol-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2,3,4-trifluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-nitro-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4,6-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,6-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl] • · · · • ·
    -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-fluor-l-benzensulfonamid-bismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-chlor-2-thiofensulfonamid-bismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl]-2-jod-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-(trifluormethoxy)-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor415
    -6-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-kyano-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trifluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3,4-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-brom-2-thiofensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-2,4-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl]-2-fluorfenyl)-3-brom-5-chlor-2-thiofensulfonamid-trismaleat • · • · · · • · · ·
    - 416 • · · ·· ··· cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzothiadiazol-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzoxadiazol-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dichlor-l-thiofensulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)(7-chlor-2,1,3-benzoxadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(5-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)(5-chlor-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-3-chlor-2-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat
    4 · 4 · cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-brom-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dibrom-3,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-1-benzensulfonamid-trismaleat cis-N-1-(4—{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-(2-nitrofenyl)methansulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-nitro-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-fluor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4,6-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,6-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]
    4 4 4 4
    4 4*4
    -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-fluor-l-benzensulfonamid-bismaleat trans-N-1-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2,5-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-3-chlor-4-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl]-2-jod-1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-6-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-chlor-4-kyano-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3,4-difluor·· ««·« ·· · · « 4 ·· *4 · · * · · · · « · « « · · ·
    419 • · · « «· » · · · · · · ·
    -1-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-4-brom-2-fluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-5-brom-2-thiofensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,4-dichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,3,4-trichlor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-l-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2-fluorfenyl)-3-brom-5-chlor-2-thiofensulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,1,3-benzoxadiazol-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dichlor-l-thiofensulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-chlor-2,1,3-benzoxadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat • · · ·4 · 9 9 999 9 · · »« · 9 9 9 9 9 9
    420 trans-N-4-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(7-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-(4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(5-methyl-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-4-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)(5-chlor-2,1,3-benzothiadiazol)-4-sulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-3-chlor-2-methyl-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2-brom-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-2,5-dibrom-3,6-difluor-l-benzensulfonamid-trismaleat trans-N-1-(4-{4-amino-7-[4-(4-methylpiperazino)cyklohexyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl}-2-fluorfenyl)-(2-nitrofenyl)methansulfonamid-trismaleat.
CZ2001960A 1998-09-18 1999-09-17 Pyrrolopyrimidiny jako inhibitory protein kinasy CZ2001960A3 (cs)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US10083498P 1998-09-18 1998-09-18
US10083298P 1998-09-18 1998-09-18
US10094698P 1998-09-18 1998-09-18
US10083398P 1998-09-18 1998-09-18

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2001960A3 true CZ2001960A3 (cs) 2001-10-17

Family

ID=27493158

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2001960A CZ2001960A3 (cs) 1998-09-18 1999-09-17 Pyrrolopyrimidiny jako inhibitory protein kinasy

Country Status (19)

Country Link
EP (1) EP1114053A1 (cs)
JP (1) JP2002526500A (cs)
KR (1) KR20010085824A (cs)
CN (1) CN1335849A (cs)
AU (1) AU753555C (cs)
BG (1) BG105346A (cs)
BR (1) BR9913887A (cs)
CA (1) CA2344249A1 (cs)
CZ (1) CZ2001960A3 (cs)
HK (1) HK1039326A1 (cs)
HU (1) HUP0200403A3 (cs)
ID (1) ID29028A (cs)
IL (1) IL141866A0 (cs)
NO (1) NO20011356L (cs)
NZ (1) NZ510588A (cs)
PL (1) PL346700A1 (cs)
SK (1) SK3842001A3 (cs)
TR (1) TR200101186T2 (cs)
WO (1) WO2000017203A1 (cs)

Families Citing this family (102)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PA8474101A1 (es) 1998-06-19 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Compuestos de pirrolo [2,3-d] pirimidina
EP1107958B1 (en) 1998-08-29 2006-08-16 AstraZeneca AB Pyrimidine compounds
EP1107957B1 (en) 1998-08-29 2006-10-18 AstraZeneca AB Pyrimidine compounds
US6713474B2 (en) 1998-09-18 2004-03-30 Abbott Gmbh & Co. Kg Pyrrolopyrimidines as therapeutic agents
GB9828511D0 (en) 1998-12-24 1999-02-17 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9905075D0 (en) 1999-03-06 1999-04-28 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9907658D0 (en) 1999-04-06 1999-05-26 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9919778D0 (en) 1999-08-21 1999-10-27 Zeneca Ltd Chemical compounds
NZ518884A (en) 1999-12-10 2004-02-27 Pfizer Prod Inc Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds
EP1246795B1 (en) * 2000-01-13 2007-10-31 Amgen Inc. Antibacterial agents
GB0004888D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0004890D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0004886D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0004887D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0007371D0 (en) 2000-03-28 2000-05-17 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
WO2001072751A1 (en) * 2000-03-29 2001-10-04 Knoll Gesellschaft Mit Beschraenkter Haftung Pyrrolopyrimidines as tyrosine kinase inhibitors
US7369946B2 (en) 2000-03-29 2008-05-06 Abbott Gmbh & Co. Kg Method of identifying inhibitors of Tie-2
PL359563A1 (en) 2000-06-26 2004-08-23 Pfizer Products Inc. Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds as immunosuppressive agents
GB0016877D0 (en) 2000-07-11 2000-08-30 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0103926D0 (en) 2001-02-17 2001-04-04 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US7081454B2 (en) 2001-03-28 2006-07-25 Bristol-Myers Squibb Co. Tyrosine kinase inhibitors
AR035885A1 (es) 2001-05-14 2004-07-21 Novartis Ag Derivados de 4-amino-5-fenil-7-ciclobutilpirrolo (2,3-d)pirimidina, un proceso para su preparacion, una composicion farmaceutica y el uso de dichos derivados para la preparacion de una composicion farmaceutica
GB0113041D0 (en) 2001-05-30 2001-07-18 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0121033D0 (en) * 2001-08-30 2001-10-24 Novartis Ag Organic compounds
GB0205690D0 (en) 2002-03-09 2002-04-24 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205693D0 (en) 2002-03-09 2002-04-24 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205688D0 (en) 2002-03-09 2002-04-24 Astrazeneca Ab Chemical compounds
WO2003076434A1 (en) 2002-03-09 2003-09-18 Astrazeneca Ab 4- imidazolyl substuited pyrimidine derivatives with cdk inhibitiory activity
JP2005538118A (ja) 2002-08-06 2005-12-15 アストラゼネカ アクチボラグ Ｔｉｅ２（ｔｅｋ）活性を持つ縮合したピリジン及びピリミジン
GB0226370D0 (en) * 2002-11-12 2002-12-18 Novartis Ag Organic compounds
EP1572213A1 (en) 2002-11-26 2005-09-14 Pfizer Products Inc. Method of treatment of transplant rejection
UA80171C2 (en) 2002-12-19 2007-08-27 Pfizer Prod Inc Pyrrolopyrimidine derivatives
JP3910627B2 (ja) 2003-03-12 2007-04-25 ファイザー・プロダクツ・インク ピリジルオキシメチルおよびベンゾイソオキサゾールのアザビシクロ環の誘導体
GB0311276D0 (en) 2003-05-16 2003-06-18 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0311274D0 (en) 2003-05-16 2003-06-18 Astrazeneca Ab Chemical compounds
AR045037A1 (es) 2003-07-10 2005-10-12 Aventis Pharma Sa Tetrahidro-1h-pirazolo [3,4-c] piridinas sustituidas, composiciones que las contienen y su utilizacion.
US7312215B2 (en) 2003-07-29 2007-12-25 Bristol-Myers Squibb Company Benzimidazole C-2 heterocycles as kinase inhibitors
US7338957B2 (en) * 2003-08-28 2008-03-04 Irm Llc Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
MXPA06005578A (es) * 2003-11-17 2006-08-11 Pfizer Prod Inc Compuestos de pirrolopirimidina utiles en el tratamiento del cancer.
TW200528101A (en) 2004-02-03 2005-09-01 Astrazeneca Ab Chemical compounds
EP1730148A4 (en) * 2004-02-03 2009-08-19 Abbott Lab USE OF AMINOBENZOXAZOLES AS THERAPEUTIC AGENTS
SI1740591T1 (sl) * 2004-04-02 2009-12-31 Osi Pharm Inc Heterobiciklični inhibitorji protein-kinaze, substituirani s 6,6-bicikličnim obročem
MXPA06013805A (es) 2004-05-27 2007-02-02 Pfizer Prod Inc Derivados de pirrolopirimidina de utilidad en el tratamiento contra el cancer.
TW200613306A (en) 2004-07-20 2006-05-01 Osi Pharm Inc Imidazotriazines as protein kinase inhibitors
TW200626142A (en) * 2004-09-21 2006-08-01 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US20090306107A1 (en) * 2005-03-17 2009-12-10 Novartis Ag Organic Compounds
ATE524467T1 (de) * 2005-04-25 2011-09-15 Merck Patent Gmbh Neuartige aza-heterozyklen als kinase-inhibitoren
CA2623125A1 (en) 2005-09-20 2007-03-29 Osi Pharmaceuticals, Inc. Biological markers predictive of anti-cancer response to insulin-like growth factor-1 receptor kinase inhibitors
TW200728290A (en) 2005-09-30 2007-08-01 Astrazeneca Ab Chemical compounds
WO2007056170A2 (en) * 2005-11-02 2007-05-18 Bayer Healthcare Ag Pyrrolo[2,1-f] [1,2,4] triazin-4-ylamines igf-1r kinase inhibitors for the treatment of cancer and other hyperproliferative diseases
AR057960A1 (es) 2005-12-02 2007-12-26 Osi Pharm Inc Inhibidores de proteina quinasa biciclicos
AU2007215161A1 (en) * 2006-02-14 2007-08-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrolo(3,2-C) pyridines useful as inhibitors of protein kinases
EP2258700A1 (en) 2006-05-09 2010-12-08 Pfizer Products Inc. Cycloalkylamino acid derivatives and pharmaceutical compositions thereof
US8217177B2 (en) * 2006-07-14 2012-07-10 Amgen Inc. Fused heterocyclic derivatives and methods of use
NZ582772A (en) 2007-07-17 2012-06-29 Plexxikon Inc Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
ME01269B (me) 2008-08-20 2013-06-20 Zoetis Services Llc Jedinjenja pirolo (2,3-d) pirimidina
JP5819195B2 (ja) * 2008-10-16 2015-11-18 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 融合環ヘテロアリールキナーゼ阻害剤
CA2742986C (en) 2008-11-07 2015-03-31 Triact Therapeutics, Inc. Use of catecholic butane derivatives in cancer therapy
EP2390254A1 (en) * 2009-01-22 2011-11-30 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation NOVEL PYRROLOÝ2,3-d¨PYRIMIDINE COMPOUND
JP2012518657A (ja) 2009-02-25 2012-08-16 オーエスアイ・ファーマシューティカルズ，エルエルシー 併用抗癌治療
US20110171124A1 (en) 2009-02-26 2011-07-14 Osi Pharmaceuticals, Inc. In situ methods for monitoring the EMT status of tumor cells in vivo
EP2401613A2 (en) 2009-02-27 2012-01-04 OSI Pharmaceuticals, LLC Methods for the identification of agents that inhibit mesenchymal-like tumor cells or their formation
WO2010099138A2 (en) 2009-02-27 2010-09-02 Osi Pharmaceuticals, Inc. Methods for the identification of agents that inhibit mesenchymal-like tumor cells or their formation
WO2010099363A1 (en) 2009-02-27 2010-09-02 Osi Pharmaceuticals, Inc. Methods for the identification of agents that inhibit mesenchymal-like tumor cells or their formation
EP2424368B1 (en) * 2009-04-29 2014-12-31 Locus Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolotriazine compounds
US7741330B1 (en) * 2009-10-12 2010-06-22 Pharmacyclics, Inc. Pyrazolo-pyrimidine inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
US20110217309A1 (en) 2010-03-03 2011-09-08 Buck Elizabeth A Biological markers predictive of anti-cancer response to insulin-like growth factor-1 receptor kinase inhibitors
US20110275644A1 (en) 2010-03-03 2011-11-10 Buck Elizabeth A Biological markers predictive of anti-cancer response to insulin-like growth factor-1 receptor kinase inhibitors
EP2544672A1 (en) 2010-03-09 2013-01-16 OSI Pharmaceuticals, LLC Combination anti-cancer therapy
WO2012116040A1 (en) 2011-02-22 2012-08-30 OSI Pharmaceuticals, LLC Biological markers predictive of anti-cancer response to insulin-like growth factor-1 receptor kinase inhibitors in hepatocellular carcinoma
WO2012120469A1 (en) * 2011-03-08 2012-09-13 Novartis Ag Fluorophenyl bicyclic heteroaryl compounds
EP2702173A1 (en) 2011-04-25 2014-03-05 OSI Pharmaceuticals, LLC Use of emt gene signatures in cancer drug discovery, diagnostics, and treatment
EP2731612A4 (en) 2011-07-13 2015-04-08 Pharmacyclics Inc BRUTON TYROSINE KINASE HEMMER
EA037644B1 (ru) 2011-07-19 2021-04-26 Мерк Шарп и Доум Б.В. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Btk-ИНГИБИТОРА
AU2012341028C1 (en) 2011-09-02 2017-10-19 Mount Sinai School Of Medicine Substituted pyrazolo[3,4-D]pyrimidines and uses thereof
US8377946B1 (en) 2011-12-30 2013-02-19 Pharmacyclics, Inc. Pyrazolo[3,4-d]pyrimidine and pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds as kinase inhibitors
WO2013113097A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Beta Pharma Canada Inc. Cyclic molecules as bruton's tyrosine kinase inhibitors
WO2013152252A1 (en) 2012-04-06 2013-10-10 OSI Pharmaceuticals, LLC Combination anti-cancer therapy
JP6327713B2 (ja) * 2012-07-27 2018-05-23 国立研究開発法人理化学研究所 急性骨髄性白血病の治療又は再発抑制剤
RU2015115631A (ru) 2012-09-26 2016-11-20 Дзе Риджентс Оф Дзе Юниверсити Оф Калифорния Модулирование ire1
US9834575B2 (en) 2013-02-26 2017-12-05 Triact Therapeutics, Inc. Cancer therapy
US9381246B2 (en) 2013-09-09 2016-07-05 Triact Therapeutics, Inc. Cancer therapy
CN105764896A (zh) 2013-09-30 2016-07-13 药品循环有限责任公司 布鲁顿氏酪氨酸激酶的抑制剂
JP6493218B2 (ja) * 2013-11-08 2019-04-03 小野薬品工業株式会社 ピロロピリミジン誘導体
CA2833701A1 (en) * 2013-11-19 2015-05-19 Pharmascience Inc. Protein kinase inhibitors
CA2834528A1 (en) * 2013-11-26 2015-05-26 Pharmascience Inc. Protein kinase inhibitors
NZ721617A (en) * 2014-02-03 2018-01-26 Cadila Healthcare Ltd Heterocyclic compounds
ES2900184T3 (es) 2014-08-11 2022-03-16 Acerta Pharma Bv Combinaciones terapéuticas de un inhibidor de BTK y un inhibidor de BCL-2
US10112924B2 (en) 2015-12-02 2018-10-30 Astraea Therapeutics, Inc. Piperdinyl nociceptin receptor compounds
CN108883103A (zh) * 2015-12-02 2018-11-23 阿斯特来亚治疗有限责任公司 哌啶基痛敏肽受体化合物
MY207239A (en) 2018-09-13 2025-02-08 Kissei Pharmaceutical Imidazopyridinone compound
NL2022471B1 (en) 2019-01-29 2020-08-18 Vationpharma B V Solid state forms of oclacitinib
US11427567B2 (en) 2019-08-14 2022-08-30 Incyte Corporation Imidazolyl pyrimidinylamine compounds as CDK2 inhibitors
WO2021038540A1 (en) 2019-08-31 2021-03-04 Sun Pharma Advanced Research Company Limited Cycloalkylidene carboxylic acids and derivatives as btk inhibitors
WO2021072232A1 (en) * 2019-10-11 2021-04-15 Incyte Corporation Bicyclic amines as cdk2 inhibitors
CN112961159B (zh) * 2020-03-05 2022-07-01 四川大学华西医院 氨基嘧啶并吡唑/吡咯类衍生物及其制备方法和用途
CN112961158B (zh) * 2020-03-05 2022-07-01 四川大学华西医院 氨基嘧啶并吡唑/吡咯类衍生物及其制备方法和用途
JP7504822B2 (ja) * 2020-03-12 2024-06-24 キッセイ薬品工業株式会社 イミダゾピリジノン化合物を含む医薬組成物
US11981671B2 (en) 2021-06-21 2024-05-14 Incyte Corporation Bicyclic pyrazolyl amines as CDK2 inhibitors
US11976073B2 (en) 2021-12-10 2024-05-07 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK2 inhibitors
KR20240170936A (ko) * 2022-03-31 2024-12-05 에이스랜드 테라퓨틱스 (홍콩) 리미티드 스피로비시클릭 화합물
CN117402161A (zh) * 2022-07-06 2024-01-16 上海科恩泰生物医药科技有限公司 一种具有fgfr抑制作用的亚砜亚胺类化合物、包含其的药物组合物及其用途

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3036390A1 (de) * 1980-09-26 1982-05-13 Troponwerke GmbH & Co KG, 5000 Köln Neue pyrrolo-pyrimidine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung bei der herstellung von biologischen wirkstoffen
FI933303A7 (fi) * 1991-01-23 1993-08-31 Gensia Inc Adenosiinikinaasi-inhibiittoreita
IL108523A0 (en) * 1993-02-03 1994-05-30 Gensia Inc Pharmaceutical compositions containing adenosine kinase inhibitors for preventing or treating conditions involving inflammatory responses and pain
AU694801B2 (en) * 1994-09-29 1998-07-30 Novartis Ag Pyrrolo(2,3-d)pyrimidines and their use
US6143749A (en) * 1995-06-07 2000-11-07 Abbott Laboratories Heterocyclic substituted cyclopentane compounds
US5665721A (en) * 1995-06-07 1997-09-09 Abbott Laboratories Heterocyclic substituted cyclopentane compounds
CH690773A5 (de) * 1996-02-01 2001-01-15 Novartis Ag Pyrrolo(2,3-d)pyrimide und ihre Verwendung.
AU1794697A (en) * 1996-03-06 1997-09-22 Novartis Ag 7-alkyl-pyrrolo{2,3-d}pyrimidines
NZ331804A (en) * 1996-03-15 2000-04-28 Novartis Ag N-7-heterocyclyl pyrrolo[2,3-d]pyridines and their use
BR9808281A (pt) * 1997-03-19 2000-05-16 Basf Ag Compostos, composições farmacêuticas, processo para tratar doenças proliferativas e/ou distúrbios do sistema imune e para preparar um composto, e, uso de um composto

Also Published As

Publication number Publication date
EP1114053A1 (en) 2001-07-11
IL141866A0 (en) 2002-03-10
SK3842001A3 (en) 2002-04-04
NZ510588A (en) 2003-08-29
BR9913887A (pt) 2001-10-23
AU6048499A (en) 2000-04-10
JP2002526500A (ja) 2002-08-20
BG105346A (en) 2001-12-29
HUP0200403A2 (en) 2002-06-29
ID29028A (id) 2001-07-26
CN1335849A (zh) 2002-02-13
NO20011356L (no) 2001-05-16
CA2344249A1 (en) 2000-03-30
KR20010085824A (ko) 2001-09-07
AU753555B2 (en) 2002-10-24
PL346700A1 (en) 2002-02-25
TR200101186T2 (tr) 2001-10-22
AU753555C (en) 2003-07-03
HK1039326A1 (zh) 2002-04-19
WO2000017203A1 (en) 2000-03-30
HUP0200403A3 (en) 2004-07-28
NO20011356D0 (no) 2001-03-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ2001960A3 (cs) Pyrrolopyrimidiny jako inhibitory protein kinasy
US6713474B2 (en) Pyrrolopyrimidines as therapeutic agents
WO2001072751A1 (en) Pyrrolopyrimidines as tyrosine kinase inhibitors
AU752474B2 (en) 4-aminopyrrolopyrimidines as kinase inhibitors
JP4707167B2 (ja) キナーゼ阻害剤
US6921763B2 (en) Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
EP1212327B1 (en) Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
US7829570B2 (en) Substituted 4-amino isoxazolo[5,4-d]pyrimidines as kinase inhibitors
CA2440714C (en) Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
US20030153568A1 (en) Benzothiazole derivatives
CZ2002934A3 (cs) Inhibitory kinázy jako terapeutická činidla
MXPA01002785A (en) Pyrrolopyrimidines as protein kinase inhibitors