CZ20013930A3 - Nové sloučeniny - Google Patents

Nové sloučeniny Download PDF

Info

Publication number
CZ20013930A3
CZ20013930A3 CZ20013930A CZ20013930A CZ20013930A3 CZ 20013930 A3 CZ20013930 A3 CZ 20013930A3 CZ 20013930 A CZ20013930 A CZ 20013930A CZ 20013930 A CZ20013930 A CZ 20013930A CZ 20013930 A3 CZ20013930 A3 CZ 20013930A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
tert
mmol
acid
solution
added
Prior art date
Application number
CZ20013930A
Other languages
English (en)
Inventor
Marcel Linschoten
Magnus Polla
Peder Svensson
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of CZ20013930A3 publication Critical patent/CZ20013930A3/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/34—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/55—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/30—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Use Of Switch Circuits For Exchanges And Methods Of Control Of Multiplex Exchanges (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Nové sloučeniny
Oblast techniky
Přítomný vynález se vztahuje k novým sloučeninám a jejich farmaceuticky vhodným solím, které inhibují basické karboxypeptidázy, specifičtěji karboxypeptidázu U a tak mohou být použity v prevenci a léčbě nemocí, u kterých je výhodou inhibice karboxypeptidázy. Ve svém dalším aspektu se poskytnutý vynález vztahuje k použití sloučenin podle tohoto vynálezu v léčbě, ke způsobům přípravy těchto nových sloučenin, k farmaceutickým přípravkům obsahujícím nejméně jednu sloučeninu podle tohoto vynálezu nebo její farmaceuticky vhodnou sůl jako účinnou látku a k použití účinných sloučenin podle tohoto vynálezu ve výrobě léčiv pro léčebné použití, jak je uvedeno výše.
Dosavadní stav techniky
Fibrinolýza je výsledkem řady enzymatických reakcí, jejichž výsledkem je odbourání fibrinu plasminem. Aktivace plasminogenu je ústředním procesem fibrinolýzy. Štěpení plasminogenu, aby vznikl plasmin, provádějí aktivátory plasminogenu, aktivátor plasminogenu tkáňového typu (t-PA) nebo aktivátor plasminogenu urokinázového typu (u-PA). Iniciální odbourávání fibrinu plasminem vytváří zbytky lysinu na karboxylových koncích, které slouží jako vazebná místa s vysokou afinitou pro plasminogen. Protože plasminogen navázaný na fibrin je mnohem snadněji aktivován na plasmin než volný plasminogen, tento mechanismus poskytuje pozitivní zpětnovazebnou regulaci fibrinolýzy.
Jedním z endogenních inhibitorů fibrinolýzy je karboxypeptidáza U (CPU). CPU je rovněž známa jako plasmatická karboxypeptidáza B, inhibitor fibrinolýzy aktivovatelné aktivním trombinem (TAFIa), karboxypeptidáza • · · · ·« · · · · · * 9 9
R a induktabilní aktivní karboxypeptidáza. CPU je vytvářena během koagulace a fibrinolýzy ze svého prekursoru proCPU aktivací proteolytickými enzymy, např. trombinem, komplexem trombin-trombomodulin nebo plasminem. CPU odštěpuje bazické aminokyseliny na karboxylovém konci fibrinových fragmentů. Ztrátou lysinů na karboxylovém konci vzniklá vazebná místa pro plasminogen pak slouží k inhibici fibrinolýzy.
Lze předpokládat, že účinné inhibitory karboxypeptidázy U podporují fibrinolýzu tím, že inhibují ztrátu lysinových vazebných míst pro plasminogen a tak zvyšují rychlost tvorby plasminu.
Existují zprávy, že kyselina 2-merkaptomethyl-3-guanidinethylthiopropanová je inhibitorem karboxypeptidázy N.
Nedávno ukázali Hendriks, D. a kol., Biochimica et Biophysica Acta, 1034, 86-92 (1990), že tato sloučenina inhibuje CPU.
Existují zprávy, že kyselina guanidinethylmerkaptojantarová je inhibitorem karboxypeptidázy N. Nedávno ukázali Eaton, D. L. a kol., The Journal of Biological Chemistry, 266, 21833-21838 (1991), že tato sloučenina inhibuje CPU.
Podstata vynálezu
Překvapivě se zjistilo, že sloučeniny obecného vzorce (I) jsou zvláště účinné jako inhibitory karboxypeptidázy U a tak jsou užitečné jako léčiva pro léčbu nebo profylaxi stavů, u kterých je výhodou inhibice karboxypeptidázy U.
V jednom aspektu se poskytnutý vynález vztahuje ke sloučeninám obecného vzorce I,
R1 i
Χχ YX
I
R4 (I) • · · · • · · ·· · ····
- β —. .· • · · · · ··· ······ · · · · · ···· nebo k jejich farmaceuticky vhodné soli nebo solvátu, ve kterém
R-j_ představuje C-l - Cg alkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden heteroatom zvolený ze síry nebo kyslíku, a substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
nebo aryl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina,
R2 představuje atom vodíku, acyl, acylamino, alkyl, alkylkarbamoyl, alkylthio, alkoxy, aroyl, aroylamino, aryloxy, arylthio, amidino, amino, aryl, karbamoyl, karboxy, kyano, cykloalkyl, formyl, guanidino, atom halogenu, heterocyklyl, hydroxy, oxo, nitro, thiol, Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- nebo Z2N-CO-NZ-skupinu,
R3 představuje COOR5, SO(OR5), SO3R5, P=O(OR5)2, B(OR5)2, P=OR5(OR5) nebo tetrazol, nebo jakýkoli izoster karboxylové kyseliny,
R4 představuje SH, S-CO-C-^-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C-^-Cg alkyl nebo aryl, tm • · • · · ♦ • · — ·-·«
R6 představuje atom vodíku nebo C-^-Cg alkyl,
X představuje atom kyslíku, atom síry, SO, S02, C(Z)2,
N(Z) NR6SO2, SO2NR6, NRgCO nebo CONRg,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku, ^-Cg alkyl, aryl, cykloalkyl nebo heterocyklyl.
Výhodné sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve kterých
R1 představuje cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden heteroatom zvolený ze síry nebo kyslíku, a substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
nebo aryl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
R2 představuje atom vodíku, acyl, acylamino, alkyl, alkylkarbamoyl, alkylthio, alkoxy, aroyl, aroylamino, aryloxy, arylthio, amidino, amino, aryl, karbamoyl, karboxy, kyano, cykloalkyl, formyl, guanidino, atom halogenu, heterocyklyl, hydroxy, oxo, nitro, thiol, Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- nebo Z2N-CO-NZ-skupinu, » · · · · · · « · · · · • · · · · · · » · · · · · •· · ·· ····
R3 představuje COORg,
R4 představuje SH, S-CO-C-^-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C-^-Cg alkyl nebo aryl,
Rg představuje atom vodíku nebo Cý-Cg alkyl,
X představuje atom kyslíku, síry, SO, S02, C(Z)2, N(Z), NRgSO2, SO2NRg nebo CONRg,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku, C1~Cg alkyl, aryl, cykloalkyl nebo heterocyklyl.
Výhodnější sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve kterých
R^ představuje cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden heteroatom zvolený ze síry nebo kyslíku, a substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
R2 představuje atom vodíku, Cý-C-j alkyl, aminoskupinu, atom halogenu nebo hydroxy,
R3 představuje COOR5,
I* · » » « • ·
111 «
-1··
R4 představuje SH, S-CO-C^-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C^^-Cg alkyl nebo aryl,
X představuje C(Z)2,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku nebo C^-Cg alkyl.
Ještě výhodnější sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve kterých
R3 představuje cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
R2 představuje atom vodíku, fluoru nebo alkyl,
R3 představuje COORg,
R4 představuje SH, S-CO-C-^-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C^-Cg alkyl nebo aryl,
X představuje C(Z)2,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku nebo C-^-Cg alkyl.
Nejvýhodnější sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou « ·« · ftft ft « « * • «
• » · » » · •» ft «ftftftft· sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve kterých představuje cyklopentyl, pyridyl, pyrimidinyl, piperidinyl nebo thiazolyl,
R2 představuje atom vodíku, fluoru nebo alkyl,
R3 představuje COOR5,
R4 představuje SH,
R5 představuje atom vodíku,
X představuje CHZ,
Y představuje CHZ,
Z představuje nezávisle atom vodíku nebo Cg-Cg alkyl.
V popisu a připojených patentových nárocích se používají následující definice:
Pojem bazická skupina označuje bazickou skupinu, ve které konjugovaná kyselina uvedené bazické skupiny má pKa od přibližně -5 do přibližně 25, výhodně od 1 do 15.
Pojem izoster karboxylové kyseliny označuje kyselou skupinu, která má pKa od přibližně -5 do přibližně 25, výhodně od 1 do 15.
Pojem C^-Cg alkyl označuje nerozvětvenou nebo rozvětvenou, nasycenou nebo nenasycenou, substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v řetězci, ve kterém alkylová skupina může být popřípadě přerušena jedním nebo více heteroatomy zvolenými z kyslíku, • · · · ·« ···· ·· ··
• · · · · · · ·· · · · ···· dusíku nebo síry. Příklady takové alkylové skupiny zahrnují methylovou skupinu, ethylovou skupinu, ethenylovou skupinu, ethynylovou skupinu, n-propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, propenylovou skupinu, isopropenylovou skupinu, propynylovou skupinu, n-butylovou skupinu, isobutylovou skupinu, sek-butylovou skupinu, terc-butylovou skupinu, butenylovou skupinu, isobutenylovou skupinu, butynylovou skupinu a nerozvětvenou nebo rozvětvenou pentylovou skupinu a hexylovou skupinu, avšak tyto příklady neomezují rozsah tohoto pojmu.
Pojem C-l-C-j alkyl označuje nerozvětvenou nebo rozvětvenou, nasycenou nebo nenasycenou, substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v řetězci, ve kterém alkylová skupina může být popřípadě přerušena jedním nebo více heteroatomy zvolenými z kyslíku, dusíku nebo síry. Příklady takové alkylové skupiny zahrnují methylovou skupinu, ethylovou skupinu, ethenylovou skupinu, ethynylovou skupinu, n-propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, propenylovou skupinu, isopropenylovou skupinu, propynylovou skupinu, avšak tyto příklady neomezují rozsah tohoto pojmu.
Pojem C-l alkyl označuje substituovanou nebo nesubstituovanou alklylovou skupinu s 1 atomem uhlíku. Příkladem takové alkylové skupiny je methylová skupina, avšak tento příklad neomezuje rozsah tohoto pojmu.
Pojem C^-Cg alkoxy označuje alkyl-O-skupinu, ve které cl_c6 alkyl má význam uvedený výše.
Pojem C-l- C3 alkoxy označuje alkyl-O-skupinu, ve které C-l“ C3 alkyl má význam uvedený výše.
Pojem heterocyklyl označuje substituovaný nebo nesubstituovaný, 4- až 10-ti členný monocyklický nebo • · · · • · · · vícecyklický kruhový systém, ve kterém jeden nebo více atomů v kruhu nebo kruzích je atom jiného prvku než uhlíku, například dusíku, kyslíku nebo síry, zejména 4-, 5- nebo 6-ti členné aromatické nebo alifatické hetorocyklické skupiny a zahrnují azetidinovou skupinu, furanovou skupinu, thiofenovou skupinu, pyrolovou skupinu, pyrrolinovou skupinu, pyrrolidinovou skupinu, dioxolanovou skupinu, oxathiolanovou skupinu, oxazolanovou skupinu, oxazolovou skupinu, thiazolovou skupinu, imidazolovou skupinu, imidazolinovou skupinu, imidazolidinovou skupinu, pyrazolovou skupinu, pyrazolinovou skupinu, pyrazolidinovou skupinu, isoxazolovou skupinu, isothiazolovou skupinu, oxadiazolovou skupinu, furazanovou skupinu, triazolovou skupinu, thiadiazolovou skupinu, pyranovou skupinu, pyridinovou skupinu, piperidinovou skupinu, dioxanovou skupinu, morfolinovou skupinu, dithianovou skupinu, oxathianovou skupinu, thiomorfolinovou skupinu, pyridazinovou skupinu, pyrimidinovou skupinu, pyrazinovou skupinu, piperazinovou skupinu, triazinovou skupinu, thiadiazinovou skupinu, dithiazinovou skupinu, azaindolovou skupinu, azaindolinovou skupinu, indolovou skupinu, indolinovou skupinu, nafthyridinovou skupinu, avšak tyto příklady neomezují rozsah tohoto pojmu a rozumí se jím všechny izomery výše uvedených skupin. Pojem azetidinyl například zahrnuje 2- a 3-isomery a pojmy pyridyl a piperidinyl například zahrnuje 2-, 3- a 4-isomery.
Pojem cykloalkyl označuje nasycený nebo nenasycený, substituovaný nebo nesubstituovaný, nearomatický kruh složený ze 3, 4, 5, 6 nebo 7 atomů uhlíku a zahrnuje cyklopropylovou skupinu, cyklobutylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cykloheptylovou skupinu, cyklobutenylovou skupinu, cyklopentenylovou skupinu, cyklohexenylovou skupinu, cykloheptenylovou skupinu, cyklopentadienylovou skupinu, cyklohexadienylovou skupinu a cykloheptadienylovou skupinu, • · · · • * · · · • · ·
avšak tyto příklady neomezují rozsah tohoto pojmu.
Pojem halogen zahrnuje atom fluoru, chloru, bromu a jodu.
Pojem aryl označuje substituovaný nebo nesubstituovaný C6-C14 aromatický uhlovodík a zahrnuje fenyl, naftyl, indenyl, antracenyl, fenantrenyl a fluorenyl, na které výčet není omezen.
Pojem aryloxy označuje aryl-O-skupinu, ve které aryl má význam uvedený výše.
Pojem acyl označuje alkyl-CO-skupinu, ve které alkyl má význam uvedený výše.
Pojem aroyl označuje aryl-CO-skupinu, ve které aryl má význam uvedený výše.
Pojem alkylthio označuje alkyl-S-skupinu, ve které alkyl má význam uvedený výše.
Pojem arylthio označuje aryl-S-skupinu, ve které aryl má význam uvedený výše.
Pojem aroylamino označuje aroyl-N(Z)-skupinu, ve které aroyl a Z mají význam uvedený výše.
Pojem acylamino označuje acyl-N(Z)-skupinu, ve které acyl a Z maj i význam uvedený výše.
Pojem karbamoyl označuje a H2N-CO-skupinu.
Pojem alkylkarbamoyl označuje Z2N-CO-skupinu, ve které Z má význam uvedený výše.
Pojem substituovaný označuje C-j_ alkyl, Ο-^Οβ alkyl,
C-^-Cg alkyl, cykloalkyl, heterocyklyl nebo aryl -skupinu, která má význam uvedený výše, která je substituována jednou nebo vícekrát acylem, acylaminoskupinou, alkylem, alkylkarbamoylem, alkylthioskupinou, alkoxyskupinou, aroylem, aroylaminoskupinou, aryloxyskupinou, arylthioskupinou, amidinoskupinou, aminoskupinou, arylem, karbamoylem, karboxyskupinou, kyanoskupinou, cykloalkylem, formylem, guanidinoskupinou, halogenem, heterocyklylem, hydroxyskupinou, oxoskupinou, nitroskupinou, thiolem, thioskupinou, Z2N-CO-O~, ZO-CO-NZ- nebo Z2N-CO-NZ-skupinami.
Kromě toho se mohou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R4 je merkaptoskupina, vyskytovat ve formě dimeru, který je spojen vazbou -S-S-, který je rovněž zahrnut do tohoto vynálezu.
Jak čisté enantiomery, tak racemické směsi a směsi dvou enantiomerů o nestejném obsahu každého z nich jsou zahrnuty v rozsahu poskytnutého vynálezu. Rovněž tak se má rozumnět, že v rozsahu poskytnutého vynálezu jsou zahrnuty všechny možné diastereomerní formy. V poskytnutém vynálezu jsou rovněž zahrnuty deriváty sloučenin obecného vzorce I, které mají biologickou funkci sloučenin obecného vzorce I, jako jsou prekursory léčiv.
V závislosti na podmínkách přípravy se sloučeniny obecného vzorce I dostanou buď v neutrální formě nebo ve formě soli nebo jako solvát, například hydrát a všechny jsou zahrnuty v rozsahu poskytnutého vynálezu.
Příprava
Přítomný vynález rovněž poskytuje způsoby A až C výroby sloučenin obecného vzorce I.
• · · ·
Způsob A
Způsob A přípravy sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém Rlz R3 a R4 a Y mají význam uvedený výše a R2 je atom vodíku a X je C(Z)2, zahrnuje následující stupně:
a) Sloučeniny obecného vzorce II
R-L-X-OH (II) ve kterém
R^ má význam uvedený ve vzorci I a
X je C(Z)2, které jsou buď komerčně dostupné nebo jsou dostupné za použití známých způsobů, lze přeměnit na sloučeninu obecného vzorce III (III) ve kterém
L je vhodná odstupující skupina, jako je atom chloru, bromu, jodu, triflat nebo tosylskupina, za standardních podmínek za použití vhodného reagencia, jako je trifenylfosfin/tetrabrommethan, tosylchlorid/pyridin nebo (CF3SO2)2O/triethylamin.
b) Sloučeniny obecného vzorce III lze poté nechat reagovat se sloučeninami obecného vzorce IV
R2
HOOC R3 (IV) • · · · ··· ·· · ···· - ií3 ·*··. .· * · · · · «·· ······ ·· · ·· ···· ve kterém
R2 a R3 mají význam uvedený v obecném vzorci I, které jsou buď komerčně dostupné, nebo jsou dostupné za použití známých způsobů, v přítomnosti vhodné base, jako je uhličitan draselný nebo hydrid sodný, za standardních podmínek, aby se dostala sloučenina obecného vzorce V
R1
HOOC R3 (V)
c) Sloučeniny obecného vzorce V, ve kterém R-^ a R3 mají význam uvedený ve vzorci I a X je C(Z)2 a R2 je atom vodíku lze poté přeměnit na sloučeniny obecného vzorce VI
(VI) vystavením působení formaldehydu v přítomnosti vhodné base, jako je diethylamin, za standardních podmínek.
d) Sloučeniny obecného vzorce VI lze rovněž připravit vystavením sloučeniny obecného vzorce VII (VII) (R5O)2OP^R3 ve kterém
R3 a R5 mají význam uvedený u vzorce I, působení alkylačního činidla obecného vzorce III v přítomnosti vhodné base, jako je LDA nebo hydrid sodný, za standardních podmínek, aby se dostala sloučenina obecného vzorce VIII • · · « (VIII)
• ···· ··· ····· ·· · · · ···· „R1
X (RSO^op^RS
e) Sloučeniny obecného vzorce VIII lze poté nechat reagovat s vhodným aldehydem nebo ketonem OC(Z)2, v přítomnosti vhodné base, jako je KOtBu, LDA nebo hydrid sodný, za standardních podmínek aby se dostala sloučenina obecného vzorce VI
X-R1
Y^R3 (VI>
f) Sloučeniny obecného vzorce VI lze dále nechat reagovat se sloučeninami obecného vzorce IX
R5-SH (IX) ve kterém
R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac, Bz, PMB nebo Bn, samotné nebo v přítomnosti vhodné base, jako je NaOMe, hydrid sodný nebo triethylamin, nebo popřípadě v přítomnosti iniciátoru volných radikálů, jako je AIBN za standardních podmínek, aby se dostaly sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém Rlz R3, R4, a Y mají význam uvedený ve vzorci I a R2 je atom vodíku a X je C(Z)2.
Způsob B
Způsob B přípravy sloučenin obecného vzorce I, ve kterém Rj, R2, R3 a R4 mají význam uvedený u vzorce I a Y je CH2, a X je atom kyslíku, síry, nebo SO, S02, C(Z)2 nebo N(Z), • · » · • · · · · ·
- i5 w·. . :
zahrnuje následující stupně:
a) Reakci sloučeniny obecného vzorce X,
R^X-H (X) ve kterém
Rg_ má význam uvedený u vzorce I a
X je atom kyslíku, síry nebo N(Z), s alkylaóním činidlem obecného vzorce XI
Ϊ (XI) ve kterém
R2 a R3 mají význam uvedený u vzorce I a
L je vhodná odstupující skupina, jako je atom chloru, bromu, jodu, triflatová nebo tosylatová skupina, za standardních podmínek za použití vhodných reagencií, jako je hydrid sodný, Ag2CO3 nebo Bu4NHSO4/NaOH, aby se dostala sloučenina obecného vzorce XII ^R1
X
R2
(XII)
b) Sloučeniny obecného vzorce XII lze poté nechat reagovat s oxidem uhličitým v přítomnosti vhodné base, jako je LDA nebo KHMDS, za standardních podmínek, aby se dostala sloučenina obecného vzorce XIII
R1
X R2
HOOC R3 (XIII) • · · · • · · · ·· ··
c) Sloučeniny obecného vzorce XIII lze poté nechat reagovat s alkylchloroformiatem, jako je ClCOOMe, v přítomnosti base, jako je triethylamin a poté se redukuje vzniklý smíšený anhydrid vhodným redukčním činidlem, jako je NaBH4, za standardních podmínek, aby se dostala sloučenina obecného vzorce XIV
Hi
I
OH (XIV)
d) Sloučeniny obecného vzorce XIV lze poté nechat reagovat se sloučeninou obecného vzorce IX
R5-SH (IX) ve kterém
R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac nebo Bz, v přítomnosti vhodného reagencia, jako je PPh3/DIAD, za standardních podmínek, aby se dostaly sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^, R2, R3, a R4 mají význam uvedený výše a Y je CH2 a X je atom kyslíku, síry C(Z)2 nebo N(Z).
e) Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém Rlř R2, R3, R4 a Y mají význam uvedený výše a X je atom síry, lze poté nechat reagovat s vhodným oxidačním činidlem, jako je MCPBA, za standardních podmínek, aby se dostaly sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^, R2, R3, R4 a Y maj í význam uvedený výše a X je SO nebo S02.
Způsob C
Způsob C přípravy sloučenin obecného vzorce I, ve kterém Rlř R2, R3, R4 a Y mají význam uvedený výše a X je NR^CO, CONRg, SO2NR6 nebo NRgSO2 zahrnuje následující stupně:
* * » * · » • « « ·
a) Reakce sloučeniny obecného vzorce XV
R6HNx><.R2
SR5 (XV) ve kterém
R2, R3, Rg a Y mají význam uvedený u vzorce I a
R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac, Bz, PMB nebo Bn, se sloučeninou obecného vzorce XVI (XVI) ve kterém
R-j_ má význam uvedený u vzorce I a
X je COOH nebo SO2C1, v přítomnosti vhodných kondenzačních činidel, jako je PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP nebo pyridin, za standardních podmínek, aby se dostaly sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém Rq^ , R2, R3, R4 a Y ma j í význam uvedený výše a X je NRgCO nebo NRgSO2.
b) Reakce sloučeniny obecného vzorce XVII,
SR5 (XVII) ve kterém
R2, R3 a Y mají význam uvedený u vzorce I a • » * to
X je COOH nebo SO2C1 a
R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac, Bz, PMB nebo Bn se sloučeninou obecného vzorce XVIII r6-nh2 (XVIII) ve kterém
R6 má význam uvedený u vzorce I, v přítomnosti vhodných kondenzačních činidel, jako je PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP nebo pyridin, za standardních podmínek, aby se dostaly sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R^, R2, R3, R4 a Y mají význam uvedený výše a X je NRgCO nebo NRgSO2·
Odborníkovi v oboru bude známo, že ve způsobech popsaných výše může být vhodné chránit funkční skupiny meziproduktových sloučenin vhodnými funkčními skupinami.
Funkční skupiny, které je třeba chránit, zahrnují hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, merkaptoskupinu a karboxylovou kyselinu. Vhodné chránící skupiny pro hydroxyskupinu zahrnují trialkylsilylskupinu nebo diarylalkylsilylskupinu (t.j. terc-butyldimethylsilylskupinu, terc-butyldifenylsilylskupinu nebo trimethylsilylskupinu), tetrahydropyranylovou skupinu a benzylovou skupinu. Vhodné chránící skupiny pro aminoskupinu, amidinovou skupinu a guanidinovou skupinu zahrnují terc-butoxykarbonylovou skupinu a benzyloxykarbonylovou skupinu. Vhodné chránící skupiny pro merkaptoskupinu zahrnují CO-C^.g alkyl, p-methoxybenzylskupinu a tritylovou skupinu. Vhodné chránící skupiny pro karboxylovou kyselinu zahrnují C3_g alkyl a benzylestery.
Chránící skupiny lze odstranit v souladu se způsoby, které
jsou dobře známy odborníkovi v oboru a jak je zde dále popsáno.
Určité chráněné deriváty sloučeniny obecného vzorce I, které lze připravit před konečným odstraněním chránících skupin za vzniku sloučenin obecného vzorce I, jsou nové.
Použití chránících skupin je popsáno v publikaci T.W. Greene a P.G.M. Wutz: Protective Groups in Organic Synthesis, 2.vyd., Wiley-Interscience (1991). Chránící skupinou může rovněž být polymerní pryskyřice, jako je Wangova pryskyřice nebo a 2-chorotritylchloridová pryskyřice.
Odborníkovi v oboru bude rovněž známo, že ačkoli takové chráněné deriváty sloučenin obecného vzorce I nemusí vykazovat farmakologickou aktivitu jako takové, lze je podat parenterálně nebo orálně a poté se metabolizují v těle a tím vytvoří sloučeniny podle tohoto vynálezu, které jsou farmakologicky aktivní. Takové deriváty lze proto popsat jako prekursory léčiva. Všechny prekursory léčiva sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou zahrnuta v rozsahu poskytnutého vynálezu.
Rovněž všechny polymorfy, amorfní formy, anhydráty, hydráty a solváty sloučenin podle tohoto vynálezu jsou zahrnuty v rozsahu poskytnutého vynálezu.
Farmaceutické přípravky
V dalším aspektu se poskytnutý vynález vztahuje k farmaceutickým přípravkům obsahujícím jako účinnou látku alespoň jednu sloučeninu podle tohoto vynálezu nebo její farmaceuticky vhodnou sůl.
Pro klinické použití se sloučeniny podle tohoto vynálezu formulují do farmaceutických přípravků pro orální, intravenózní, subkutánní, tracheální, bronchiální, intranasální, plicní, transdermální, bukální, rektální, parenterální nebo jiný způsob podání. Farmaceutické přípravky obsahují sloučeninu podle tohoto vynálezu v kombinaci s jednou nebo více farmaceuticky vhodnými látkami. Nosič může být ve formě pevné, polopevné nebo ve formě tekutého ředidla, nebo kapsle. Tyto farmaceutické přípravky jsou dalším předmětem poskytnutého vynálezu. Obvykle je množství účinné látky v rozmezí 0,1 až 95 % hmotnostních přípravku.
Při přípravě farmaceutických přípravků obsahujících sloučeninu podle tohoto vynálezu lze zvolenou sloučeninu mísit s pevnými práškovanými příměsemi, jako je laktóza, sacharóza, sorbitol, manítol, škrob, amylopektin, deriváty celulózy, želatina nebo jiná vhodná složka, stejně tak jako s rozvolňovadly a mazadly, jako je stearan hořečnatý, stearan vápenatý, stearylfumaran sodný a vosky polyethylenglykolu. Směs lze potom zpracovat do granulí nebo lisovat do tablet.
Měkké želatinové kapsle lze připravit s kapslemi, obsahujícími směs účinné látky nebo látek podle tohoto vynálezu, rostlinného oleje, tuku nebo jiné vhodné pomocné látky pro kapsle z měkké želatiny. Kapsle z tvrdé želatiny mohou obsahovat granule účinné látky. Kapsle z tvrdé želatiny mohou rovněž obsahovat účinnou látku v kombinaci s pevnými práškovanými složkami, jako je laktóza, sacharóza, sorbitol, manitol, bramborový škrob, kukuřičný škrob, amylopektin, deriváty celulózy nebo želatina.
Jednotky dávky pro rektální podání lze připravit (i) ve formě čípků, které obsahují účinnou látku smíchanou s neutrálním tukovým základem, (ii) ve formě želatinové rektální kapsle, která obsahuje účinnou látku ve směsi s rostlinným olejem, parafinovým olejem nebo jinou pomocnou látkou vhodnou pro želatinové rektální kapsle, (iii) ve formě mikroklystýru, připraveného těsně před použitím, nebo (iv) ve formě suchého přípravku pro mikroklysma, který se upraví do lékové formy před podáním.
Tekuté přípravky lze připravit ve formě sirupů nebo suspenzí, například roztoků nebo suspenzí obsahujících účinnou látku a zbytek, sestávající například z cukru nebo cukerných alkoholů a směsi ethanolu, vody, glycerolu, propylenglykolu a polyethylenglykolu. Je-li to žádoucí, takové tekuté přípravky mohou obsahovat barviva, příchutě, konzervancia, sacharin a karboxymethylcelulózu nebo jiná zahušfovadla. Tekuté přípravky lze rovněž připravit ve formě suchého prášku, který se před použitím smísí s vhodným rozpouštědlem.
Roztoky pro parenterální podání lze připravit jako roztok sloučeniny podle tohoto vynálezu ve farmaceuticky vhodném rozpouštědle. Tyto roztoky mohou rovněž obsahovat stabilizující látky, konzervancia a/nebo pufrující složky. Roztoky pro parenterální podání lze rovněž připravit ve formě suchého přípravku, který se před použitím smísí s vhodným rozpouštědlem.
Typická denní dávka účinné látky se velice liší a závisí na různých faktorech, jako je například individuální potřeba každého pacienta, cesta podání a nemoc. Celkově vzato jsou dávky pro orální a parenterální podání v rozmezí 0,1 až 1000 mg účinné látky denně.
Lékařské a farmaceutické použití
Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou po podání inhibitory karboxypeptidázy U buď samy o sobě nebo jako prekursory léčiv. Předpokládá se tak, že sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou užitečné za podmínek, u nichž je výhodou • · _« inhibice karboxypeptidázy U, jako je léčba nebo profylaxe trombózy a zvýšené srážlivosti krve a tkání u savců, včetně člověka.
Je známo, že zvýšená srážlivost může vést k tromboembolickým nemocem. Stavy spojené se zvýšenou srážlivosti a tromboembolické nemoci, které lze zmínit, zahrnují rezistenci na protein C a dědičné nebo získané deficience antithrombinu III, proteinu C, proteinu S a kofatoru II heparinu. Jiné stavy, o kterých je známo, že jsou spojeny se zvýšenou srážlivosti a tromboembolickou nemocí zahrnují oběhový a septický šok, cirkulující protilátky proti fosfolipidům, homocysteinemii, heparinem indukovanou trombocytopenii a defekty fibrinolýzy. Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou tak indikovány v léčebném a/nebo profylaktickém působení na tyto stavy. Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou dále indikovány v léčbě stavů, v nichž je nežádoucí nadbytek proCPU/Cpu.
Jednotlivé stavy nemoci, které lze zmínit, zahrnují léčebné a/nebo profylaktické podání při žilní trombóze a plicní embolii, arteriální trombóze (např. při infarktu myokardu, nestabilní angíně, trombotické mrtvici a periferní arteriální trombóze) a systémové embolii obvykle z předsíně během arteriální fibrilace nebo z levé komory po transmurálním infarktu myokardu.
Kromě toho se předpokládá, že sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou přínosem v profylaxi reokluzí a restenóz (t.j. trombózy) po trombolýze, perkutánní transluminální angioplastice (PTA) a operacích koronárních bypassů, prevenci opakovaných trombóz po mikrooperacích a cévních operacích všeobecně.
Další indikace zahrnují léčebné a/nebo profylaktické podání u diseminované intravaskulární koagulace způsobené • · bakteriemi, mnohočetnými poraněními, intoxikací nebo jakýmkoli jiným mechanismem, fibrinolytickou léčbu, je-li krev v kontaktu s cizím povrchem v organismu, jako jsou cévní transplantáty, stenty, katetry, mechanické a biologické protetické chlopně a jakékoli jiné zdravotnické prostředky a fibrinolytickou léčbu, je-li krev v kontaktu se zdravotnickými prostředky mimo tělo, jako je během kardiovaskulární operace za použití umělého srdce a plic a při hemodialýze.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze rovněž kombinovat a/nebo podávat společně s jakoukoli antitrombotickou látkou s jiným mechanismem účinku, jako jsou antiagregační látky kyselina acetylsalicylová, tiklopidin, klopidogrel, inhibitory receptorů tromboxanu a/nebo syntetázy tromboxanu, antagonisté receptorů fibrinogenu, prostacyklinová mimetika, inhibitory fosfodiesterázy, antagonisté ADP receptorů (P2T) a inhibitory trombinu.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze dále kombinovat a/nebo podávat společně s trombolytiky, jako je aktivátor tkáňového plasminogenu (přírodní, rekombinantní nebo modifikovaný), streptokináza, urokináza, prourokináza, anisolovaným komplexem aktivátoru plasminogen-streptokináza (APSAC), zvířecí aktivátory plasminogenu ze slinných žláz a podobně, v léčbě trombotických nemocí, zejména infarktu myokardu a mrtvice.
Pokusy in vitro
Inhibiční účinek sloučenin podle tohoto vynálezu se hodnotí za použití zkoušky popsané v Dirk Hendriks, Simon Scharpé a Marc van Sande, Clinical Chemistry, 31, 1936-1939 (1985) a Wei Wang, Dirk F. Hendriks, Simon S. Scharpé, The Journal of Biological Chemistry, 269, 15937-15944 (1994).
Příklady provedení vynálezu
Všeobecné postupy experimentu
Hmotnostní spektra se zaznamenávají na trojitém kvadrupolu hmotovém spektrometru Finnigan MAT TSQ 700 vybaveném spojením s ionizací elektrosprejem (FAB-MS) a VG Platform II hmotovém spektrometru vybaveném spojením s ionizací elektrosprejem (LC-MS). 1H NMR a 13C NMR měření se provádějí na spektrometrech Varian UNITY plus 400, 500 a 600, pracujících při ·*·Η frekvencích 400, 500 and 600 MHz v tomto pořadí. Chemické posuny jsou uvedeny v ppm s rozpouštědlem jako interním standardem. Organické extrakty se vysuší za použití síranu hořečnatého nebo síranu sodného jako sušidel. Chromatografické oddělení se provede za použití silikagelu Merck 60 (0,063 - 0,200 mm). HPLC oddělení se provede na sloupci Highcrom KR100-10C8.
Příklad 1
2- Merkaptomethyl-3-piperidin-4-vlpropionová kyselina (a) 3-Piperidin-4-ylpropionová kyselina
Roztok 3-pyridin-4-ylakrylové kyseliny (4,20 g, 28,0 mmol) ve vodě (50 ml) a amoniaku (vodný, 25%, 4 ml) se hydrogenuje při tlaku 60 bar v ocelovém vysokotlakém autoklávu v přítomnosti ruthenia (5 % na hliníku, 439 mg). Když tlak hydrogenace zůstává stálý po 3 dny, katalyzátor se odstraní z reakční směsi filtrací. Katalyzátor se promyje ethanolem a vodou a ethanol se odstraní z roztoku na rotační odparce a vodný roztok se lyofilizuje, aby se dostala
3- piperidin-4-ylpropionová kyselina (4,30 g, 100 %).
(b) terc-Butylester 4-(2-karboxy-ethyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny
Roztok 3-piperidin-4-ylpropionové kyseliny (4,79 g, 30,5 mmol), di-terc-butyldikarbonatu (6,98 g, 32,0 mmol) a hydrogenuhličitanu sodného (2,69 g, 32,0 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu a vody (1:1, 50 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 22 hodin. Další dávka di-terc-butyldikarbonatu (2,00 g, 9,10 mmol) se přidá spolu s katalytickým množstvím Ν,Ν-dimethylaminopyridinu, výsledná směs se míchá po další čtyři dny. Tetrahydrofuran se odstraní za sníženého tlaku a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem. Vodná fáze se poté okyselí na pH 2 1M kyselinou chlorovodíkovou a kyselina se extrahuje dichlormethanem. Spojené organické extrakty se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří ve vakuu, aby se dostal terc-butylester kyseliny 4-(2-karboxyethyl)piperidin-l-karboxylové ve formě bílé pevné látky (6,36 g,
%) .
(c) terc-Butylester 4-(3-benzylsulfanyl-2-karboxypropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny
Butyllithium (1,6M, 15,3 ml, 24,4 mmol) se přidá do roztoku diisopropylaminu (3,43 ml, 24,4 mmol) v tetrahydrofuranu (3 ml) při teplotě -78 °C v atmosféře argonu. Po několika minutách se roztok nechá zahřát na teplotu místnosti během 15 min. Výsledný roztok lithiumdiisopropylamidu se pomalu přidá do roztoku terc-butylesteru 4-(2-karboxyethyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (3,07 g, 11,9 mmol) v tetrahydrofuranu (7 ml) při -78 °C. Výsledný roztok se míchá při -78 °C po dobu 10 min, tetrahydrofuran (20 ml) se přidá během této doby, aby se rozpustil anion, který se vysrážel. Dianion se ochladí na teplotu -78 °C a brommethylthiobenzylether (2,72 g, 12,5 mmol) se přidá ve formě roztoku v tetrahydrofuranu (3 ml), roztok se míchá při -78 °C po dobu 30 min, při 0 °C po dobu 30 min a poté se nechá zahřát na teplotu místnosti a míchá přes noc. Reakční • · • · · · • · směs se okyselí 1 M kyselinou chlorovodíkovou, zředí ethyl-acetátem a organická fáze se promyje vodou a vysuší. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/trichlormethan, 1:9) aby se dostal terc-butylester
4-(3-benzylsulfanyl-2-karboxypropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny ve formě světležlutého oleje (3,12 g, 66 %).
(d) terc-Butylester 4-(2-karboxv-3-merkaptopropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny
Kovový sodík (513 mg, 22,5 mmol) se přidá po dávkách během 5 min do roztoku terc-butylesteru 4-(3-benzylsulfanyl-2-karboxypropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,9 g, 2,29 mmol) v tetrahydrofuranu (45 ml) a kapalného amoniaku (50 ml) při -60 °C v atmosféře argonu. Po míchání po dobu 15 min se přidá po dávkách chlorid amonný (l,7g, 31,5 mmol). Chladící lázeň se odstraní a amoniak se odpaří za použití proudu argonu. Přidá se 0,5 M roztok hydroxidu sodného a směs se promyje heptanem. Vodná fáze se okyselí 2 M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se methylenchloridem. Organická fáze se promyje roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester 4-(2-karboxy-3-merkaptopropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,7 g, 100 %).
(e) 2-Merkaptomethyl-3-piperidin-4-ylpropionová kyselina
Do roztoku terc-butylesteru 4-(2-karboxy-3-merkaptopropyl)piperidin-l -karboxylové kyseliny (0,7 g, 2,29 mmol) v methylenchloridu (8 ml) v atmosféře argonu se přidá triethylsilan (731 μΐ, 4,58 mmol) a potom trifluoroctová kyselina (4 ml). Reakční směs se míchá po dobu 60 min a potom se odpaří za sníženého tlaku. Čištěním HPLC chromatografií (gradient 10 až 30 % acetonitril, 0,1 % trifluoroctové kyseliny ve vodě) se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě soli s trifluoroctovou • « · · kyselinou (447 mg, 61 %).
1H NMR (400 MHz, D20): delta 1,34-1,50 (ra, 2H), 1,54-1,76 (m, 3H), 1,90-1,99 (m, ÍH), 2,0-2,1 (m, ÍH), 2,9-3,05 (m, 5M), 3,38-3,48 (m, 2H).
MS (+) 204 (M+l).
Příklad 2
3-(l-Acetylpiperidin-4-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina
Roztok soli 2-merkaptomethyl-3-piperidin-4-ylpropionové kyseliny s trifluoroctovou kyselinou (0,1 g, 0,32 mmol) v acetanhydridu (2 ml) se míchá přes noc v atmosféře argonu a potom se odpaří za sníženého tlaku. Čištěním HPLC chromatografií (gradient 10 až 50 % acetonitril, 0,1 % trifluoroctové kyseliny ve vodě) se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví (63 mg, 80 %).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,0-1,22 (m, 2H), 1,46-1,55 (m, ÍH), 1,55-1,66 (m, 2H), 1,67-1,79 (m, ÍH), 1,81-1,92 (m, ÍH), 2,08 (s, 3H), 2,55-2,73 (m, 4H), 3,03-3,12 (m, ÍH), 3,85-3,94(m, ÍH), 4,45-4,53 (m, ÍH).
MS (+) 246 (M+l).
Příklad 3
3-Merkapto-5-methyl-2-piperidin-4-ylmethylhexanová kyselina (a) terc-Butylester 4-hydroxvmethylpiperidin-l-karboxvlové kyseliny
Do roztoku 4-(hydroxymethyl)piperidinu (5,00 g, 43,41 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu a vody (1:1, 120 ml) se přidá di-terc-butyldikarbonat (9,47 g, 43,41 mmol). Reakční směs
4 4 4 · 4
9 se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se poté vylije do vody (500 ml) a extrahuje se ethyl-acetátem (3 x 250 ml). Organické vrstvy se spojí a promyjí vodou. Organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje a potom odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester 4-hydroxymethylpiperidin-l-karboxylové kyseliny (9,01 g, 96%).
(b) terc-Butylester 4-brommethylpiperidin-l-karboxvlové kyseliny
Do roztoku terc-butylesteru 4-hydroxymethylpiperidin-1-karboxylové kyseliny (8,75 g, 40,64 mmol) v diethyletheru (200 ml) při 0°C v atmosféře dusíku, se přidá trifenylfosfin (21,32 g, 81,28 mmol) a tetrabrommethan (26,96 g, 81,28 mmol). Směs se nechá zahřát na teplotu místnosti a míchá v atmosféře dusíku po dobu 48 hodin. Reakční směs se zfiltruje přes rozsívkouvou zeminu (Celíte) a organický filtrát se promyje 5% thiosiřičitanem sodným, vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší. Směs se zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 1:9) aby se dostal terc-butylester 4-brommethylpiperidin- 1 -karboxylové kyseliny (8,26 g, 73 %).
(c) terc-Butylester 4-Γ2-terc-butoxvkarbonyl-2-(diethoxyfosforyl)ethyl1piperidin-l-karboxylové kyseliny terc-Butyldiethylfosfonacetát (75,0 g, 297,32 mmol) se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (8,03 g, 334,58 mmol) v dimethylformamidu (450 ml) při 0 °C v atmosféře dusíku.
Směs se míchá při 0 °C po dobu 0,5 hodiny při teplotě místnosti po dobu 0,5 hodiny. terc-Butylester 4-brommethylpiperidin-l-karboxylové kyseliny (20,68 g, 74,34 mmol) v dimethylformamidu (50 ml) se přidá po kapkách do reakční • · * · • 4 • · 4 • 4 44*4 směsi a reakční směs se zahřeje na 60 °C a míchá po dobu 16 hodin. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti, vylije do vody a extrahuje se ethyl-acetátem. Organické vrstvy se spojí a promyjí vodou. Organická vrstva se vysuší, zfiltruje, a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 3:7), aby se dostal terc-butylester 4-[2-terc-butoxykarbonyl-2-(diethoxyfosforyl)ethyl]piperidin-l-karboxylové kyseliny a nezreagovaný terc-butyl-diethylfosfonacetát. Čistota produktu podle HPLC je 47 %. Produkt se dále čistí destilací ve vakuu, aby se dostal v 77% čistotě. Tato směs se použije pro další reakci.
(d) terc-Butylester 4-(2-terc-butoxvkarbonyl-5-methvlhex-2-enylpiperidin-l-karboxylové kyseliny terc-Butylester 4-[2-terc-butoxykarbonyl-2-(diethoxyfosforyl)-ethyl]-piperidin-l-karboxylové kyseliny (8,1 g) ve 20 ml dimethoxyethanu se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (1,04 g, 43,13 mmol) v dimethoxyethanu (20 ml) při 0°C v atmosféře dusíku. Směs se míchá po dobu 0,75 hodiny a isovaleraldehyd (7,76 g,
90,1 mmol) se přidá po kapkách do směsi. Směs se nechá zahřát na teplotu místnosti a míchá po dobu 48 hodin. Směs se zředí etherem a promyje vodou. Organická vrstva se vysuší, zfiltruje, a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 9,4 g žlutého oleje. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 1:50), aby se dostal terc-butylester 4-(2-terc-butoxykarbonyl-5-methyl-hex-2-enyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (1,53 g, 24 %) pro dvě reakce.
(e) terc-Butylester 4-Γ2-terc-butoxykarbonyl-3-(4-methoxybenzylsulfanyl-5-methylhex yl1piperidin-l-karboxylové kyseliny • ·· « • · · « 9 ·» * i » » ·· • · • »
Roztok terc-butylesteru 4-(2-terc-butoxykarbonyl-5-methylhex-2-enyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (2,0 g, 5,24 mmol) v dimethylformamidu (5 ml) se přidá do směsi uhličitanu draselného (0,54 g, 3,93 mmol) a 4-methoxy-alfa-toluenthiolu (1,17 g, 10,48 mmol) v dimethylformamidu (50 ml) v atmosféře dusíku. Směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 5 hodin a nechá se ochladit na teplotu místnosti. Reakční směs se poté vylije do vody a extrahuje se ethyl-acetátem. Organické vrstvy se spojí a promyjí vodou. Organická vrstva se vysuší, zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 3,76 g surového produktu. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 1:10), aby se dostal terc-butylester 4-[2-terc-butoxykarbonyl-3-(4-methoxybenzylsulfanyl) -5-methyl-hexyl]piperidin-l-karboxylové kyseliny (1,77 g,
%) .
(f) 3-Merkapto-5-methvl-2-piperidin-4-vlmethylhexanová kyselina
Směs vody (2,6 ml) a trifluoroctové kyseliny (26 ml) se zmrazí a potom se nechá zahřát na teplotu místnosti v atmosféře dusíku. Přidá se terc-butylester 4-[2-terc-butoxykarbonyl-3-(4-methoxybenzylsulfanyl) -5-methylhexyl]piperidin-l-karboxylové kyseliny (2,62 g,
4,89 mmol) a směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 16 hodin. Směs se nechá ochladit na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií na reversní fázi (methanol/voda, 3:2), aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě soli s kyselinou trifluoroctovou (0,40 g, 22 %).
1H NMR (300 MHz) (CD3OD): delta 0,88 (d), 0,94 (d) , 1,43 (m), 1,70 (široký pás), 1,94 (m), 2,48 (m), 2,90 (m), 2,99 (široký pás), 3,34 (m).
MS (+) 260,2 (M-trifluoroctová kyselina).
• · · ·
Příklad 4
3- Merkapto-4-fenyl-2-piperidin-4-ylmethylmáselná kyselina (a) terc-Butylester 4-(2-terc-butoxykarbonvl-4-fenylbut-2-enyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny
Roztok terc-butylesteru 4-[2-terc-butoxykarbonyl-2-(diethoxyfosforyl)ethyl]piperidin-l-karboxylové kyseliny (3,0 g) v dimethoxyethanu (8 ml) se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (0,26 g, 10,51 mmol) v dimethoxyethanu (8 ml) při 0°C v atmosféře dusíku. Směs se míchá po dobu 0,75 hodin. Přidá se fenylacetaldehyd (5,26 g, 43,81 mmol) po kapkách do směsi při 0 °C. Směs se nechá zahřát na teplotu místnosti a míchá po dobu 16 hodin. Směs se zředí etherem a promyje vodou. Organická vrstva se vysuší, zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 8,6 g žlutého oleje. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (gradient ethyl-acetát/hexan,
1:50 až 1:10) aby se dostal terc-butylester
4- (2-terc-butoxykarbonyl-4-fenylbut-2-enyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (1,32 g, 62 % výtěžek) pro dvě reakce.
(b) terc-Butylester 4-Γ2-terc-butoxykarbonyl-3-(4-methoxybenzylsulfanyl)-4-fenylbutyl1-piperidin-l-karboxylové kyseliny terc-Butylester 4-(2-terc-butoxykarbonyl-4-fenylbut-2-enyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,8 g, 1,93 mmol) v dimethylformamidu (10 ml) se přidá do suspenze uhličitanu draselného (0,20g, 1,44 mmol) a 4-methoxy-alfa-toluenthiolu (0,54 ml, 3,85 mmol) v dimethylformamidu (10 ml) v atmosféře dusíku. Směs se zahřeje na teplotu 75°C po dobu 24 hodin a nechá ochladit na teplotu místnosti. Reakční směs se poté vylije do vody a extrahuje • · · · • · ethyl-acetátem. Organické vrstvy se spojí a promyjí vodou. Organická vrstva se vysuší, zfiltruje, a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 1,8 g surového produktu. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 1:10) aby se dostal terc-butylester 4-[2-terc-butoxykarbonyl-3-(4-methoxybenzylsulfanyl)-4-fenylbutyl]piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,55 g, 50 %)· (c) 3-Merkapto-4-fenyl-2-piperidin-4-ylmethylmáselná kyselina
Směs vody (0,65 ml) a trifluoroctové kyseliny (6,5 ml) se zmrazí a potom se nechá zahřát na teplotu místnosti v atmosféře dusíku. Přidá se terc-butylester 4-[2-terc-butoxykarbony1-3-(4-methoxybenzy1sulfanyl)-4-fenylbutyl]piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,65 g, 1,14 mmol) a směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 16 hodin. Směs se nechá ochladit na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií na reverzní fázi (methanol/voda, 1:1), aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě soli s trifluoroctovou kyselinou (0,27 g, 58 %).
1H NMR (300 MHz) (dimethylsulfoxid) delta 1,22 (m) , 1,49 (m), 1,67 (široký pás), 2,21 (d), 2,98 (m), 7,25 (m, 5H), 8,27 (široký pás), 8,57 (široký pás), 12,59 (široký pás).
MS (+) 294,3 (M-trifluoroctová kyselina).
Příklad 5
2-(2-Aminopyridin-4-vlmethyl)-3-merkaptopropionová kyselina (a) N-(4-Methylpyridin-2-yl)acetamid • · · ·
- 3S L.
2-Amino-4-methylpyridin (99,0 g, 91,5 mmol) v acetanhydridu (250 ml) se zahřívá na 70°C po dobu 2 hodin. Směs se ochladí na teplotu místnosti a přidá se diethylether (100 ml). Produkt krystalizuje ve formě bílých jehličkovitých krystalů. Filtrací a vysušením ve vakuu se dostane
N-(4-methyl-pyridin-2-yl)acetamid (130 g, 95 %).
(b) 2-Acetylaminoisonikotinová kyselina
Směs N-(4-methylpyridin-2-yl)acetamidu (40,0 g, 0,26 mol) a vody (400 ml) se zahřívá na 90°C až je roztok homogenní.
Po malých dávkách se opatrně přidá manganistan draselný (100 g, 0,62 mol) za stálého míchání během 2 hodin. Reakční směs se udržuje při 90 až 95°C po dobu dalších 3 hodin před filtrací přes rozsívkovou zeminu (Celíte) ve stále horkém stavu. Filtrát se odpaří na přibližně 100 ml a koncentrovaná kyselina chlorovodíková se přidá, aby se upravilo pH na hodnotu přibližně 4. Reakční nádoba se ochladí v ledové lázni a bílá pevná látka se odfiltruje. Krystaly se promyjí studenou vodou a chloroformem a vysuší ve vakuu, čímž se dostane 2-acetylaminoisonikotinová kyselina (12,0 g, 25 %).
(c) Ethylester 2-aminoisonikotinové kyseliny
2-Acetylaminoisonikotinová kyselina (10,8 g, 60,0 mmol) se suspenduje v ethanolu (150 ml) a přidá se BF3OEt2 (22 ml,
138 mmol). Směs se zahřívá při zpětném toku přes noc, potom se ochladí na teplotu místnosti a přidá se 10% hydrogenuhličitan sodný (250 ml). Produkt se extrahuje chloroformem a spojené organické extrakty se promyjí vodou a vysuší. Filtrací a odpařením se dostane ethylester 2-aminoisonikotinové kyseliny (7,46 g, 79 %) ve formě světle žlutých krystalů.
(d) Ethylester 2-rN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)aminolisonikotinové kyseliny • · · ·
• · · · ♦ • · · ·» ····
Do roztoku ethylesteru 2-aminoisonikotinové kyseliny (5,00 g, 30 mmol) v terc-butylalkoholu (45 ml) a acetonu (15 ml) se přidá N,N-dimethylaminopyridin (50 mg, 0,41 mmol) a di-terc-butyldikarbonat (16,4 g, 75,0 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a přidá se hexan (60 ml). Reakční směs se chladí v chladničce po dobu 3 hodin a zfiltruje, aby se dostal ethylester 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]isonikotinové kyseliny (8,71 g, 79 %).
(e) terc-Butylester (4-hydroxymethyl-pyridin-2-yl)karbamové kyseliny
Roztok ethylesteru 2-[Ν,Ν-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]isonikotinové kyseliny (35,0 g, 95,5 mmol) v tetrahydrofuranu (350 ml) se vystaví působení hydridu hlinitolithného (7,25 g, 191 mmol) a zahřívá se pod zpětným tokem po dobu 1 hodiny v atmosféře dusíku. Reakční směs se vylije opatrně na drcený led a produkt se extrahuje několikrát trichlormethanem a směsí trichlormethan:methanol (9:1). Spojené organické extrakty se vysuší, zfiltrují a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester (4-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbamové (18,5 g, 86 %) ve formě světle žluté pevné látky.
(f) terc-Butylester (4-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny terc-Butylester (4-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (8,00 g, 35,6 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (150 ml) a vystaví působení PPh3 (11,2 g, 42,8 mmol) v atmosféře dusíku. Reakční nádoba se ochladí v ledové lázni a přidá se tetrabrommethan (14,2 g, 42,8 mmol) po malých dávkách. Ledová lázeň se odstraní po 30 min a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se odpaří za sníženého tlaku a přidá se acetonitril (50 ml).
• · · · • · · · · ·
Reakční nádoba se umístí do chladničky po dobu 3 hodin a sraženina se zfiltruje a promyje chladným acetonitrilem. Bílá pevná látka se vysuší ve vakuu, čímž se dostane terc-butylester (4-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (8,38 g, 82 %) .
(g) Diethylester 2-(2-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-4-ylmethyl)malonové kyseliny
Do roztoku hydridu sodného (80%, 0,17 g, 4,00 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml) při 0°C v atmosféře argonu se přidá diethyl-malonát (0,64 g, 4,00 mmol). Poté se směs míchá po dobu 15 minut a přidá se za zpětného toku do směsi terc-butylesteru (4-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (1,00 g, 3,48 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) a směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 2 hodin. Směs se odpaří za sníženého tlaku a odparek se rozdělí mezi vodu a chloroform. Organická vrstva se promyje vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření rozpouštědla se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, 1:100), aby se dostal diethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)malonové kyseliny (0,80 g, 55 %).
(h) Monoethylester 2-(2-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-4-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,19 g, 3,43 mmol) v ethanolu (5 ml) se přidá do roztoku diethylesteru
2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)malonové kyseliny (1,20 g, 3,27 mmol) v ethanolu (5 ml) a methylenchloridu (5 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Směs se odpaří za sníženého tlaku a voda se přidá k odparku. Vodná vrstva se promyje diethyletherem, okyselí na pH 4 1M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se methylenchloridem. Organická vrstva se
3S -ί promyje vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření ve vakuu se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan,
1:20), aby se dostal monoethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)malonové kyseliny (0,90 g,
%).
(i) Ethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)akrylové kyseliny
Roztok diethylaminu (0,26 g, 2,67 mmol) v methylenchloridu (4 ml) se přidá do a směsi monoethylesteru 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)malonové kyseliny (0,90 g, 2,66 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,24 g, 3,00 mmol) při 0°C. Směs se míchá po dobu 5 hodin při teplotě místnosti a směs se vylije na směs ledu a vody a extrahuje se methylenchloridem. Organická vrstva se promyje 5% hydrogenuhličitanem sodným a vysuší. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) aby se dostal ethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,58 g, 71 %).
(j) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-yl )-propionové kyseliny
Roztok ethylesteru 2-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,48 g, 1,57 mmol) a triethylaminu (0,17 g, 1,64 mmol) se přidá do thiooctové kyseliny (3 ml) při 0 °C v atmosféře dusíku. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Směs se vylije na směs ledu a vody a extrahuje se dichlormethanem. Organická fáze se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (2,5% methanol v dichlormethanu), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-terc-butoxy• · · · · ·
- 3*1 Ϊ-.
karbonylaminopyridin-4-yl)propionové kyseliny (0,60 g, 100 %).
(k) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-aminopyridin-4-yl)propionové kyseliny
Trifluoroctová kyselina (0,5 ml) se přidá do roztoku ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-terc-butoxykarbonylaminopyridin-4-yl)propionové kyseliny (50 mg, 0,13 mmol) v methylenchloridu v atmosféře argonu. Roztok se míchá po dobu 60 min a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-aminopyridin-4-yl)propionové kyseliny (52 mg,
100 %).
XH NMR (500 MHz, CD3OD3): delta 1,15 (t, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,73-2,83 (m, 2H) , 2,86-2,93 (m, 1H), 3,01-3,07 (dd, 1H) , 3,12-3,18 (dd, 1H), 4,03-4,12 (m, 2H), 6,39 (s, 1H), 6,43 (d, 1H), 7,77 (d, 1H).
(l) 2-(2-Aminopyridin-4-vlmethvl)-3-merkaptopropionová kyselina.
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-aminopyridin-4-yl)-propionové kyseliny (52 mg, 0,13 mmol) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) v atmosféře argonu. Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 1 hodiny. Zahuštěním za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridu soli (32 mg,
100 %).
1H NMR (500 MHz. CD3OD): delta 2,70 (bs, 2H), 2,85-3,0 (m, 3H), 6,76 (bs, 1H), 6,81 (bs, 1H), 7,67 (bs, 1H).
MS (+) 213 (M+l).
Příklad 6 • · · · · · • + • · · • ·
3- (6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) Ethylester 6-aminonikotinové kyseliny
2-Amino-5-pyridinkarboxylová kyselina (25,0 g, 181 mmol) se suspenduje v ethanolu (190 ml) a přidá se SOC12 (15 ml,
206 mmol). Směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 10 hodin a přidá se další SOC12 (16 ml). Po třech dnech zahřívání při zpětném toku (a přidání dalšího SOC12 (10 ml) každý den) se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a přidá se diethylether. Po 24 h při -20°C se směs zfiltruje. Surová sůl se rozpustí v methanolu (214 ml) a přidá se roztok hydroxidu sodného (40,0 g, 23,5 mmol) v methanolu (90 ml). Reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny a přidá se tetrahydrofuran (270 ml). Reakční směs se zfiltruje přes vrstvu oxidu křemičitého (tetrahydrofuran/methanol) a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 6-amino-nikotinové kyseliny (36,2 g, 97 %).
(b) Ethylester 6-terc-butoxvkarbonylaminonikotinové kyseliny
Do roztoku ethylesteru 6-aminonikotinové kyseliny (36,0 g, 217,0 mmol) v terc-butylalkoholu (308 ml) a acetonu (103 ml) se přidá N,N-dimethylaminopyridin (0,53 g, 4,34 mmol) a di-terc-butyldikarbonat (72,0 g, 330 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 hodin a potom se přidá další di-terc-butyldikarbonat (2,60 g). Po míchání po dobu 10 hodin při teplotě místnosti se přidá hexan (470 ml). Reakční směs se chladí na teplotu -20°C po dobu 2 hodin a zfiltruje. Filtrát se promyje směsí hexan/dichloromethan (3:1) a vysuší ve vakuu, aby se dostal ethylester
6-terc-butoxykarbonylaminonikotinové kyseliny (40,5 g, 70 %).
t *· to • · · · to to
- 3'Š • to toto * · · «···« «••to · · · · t r • 9 9 9 9 9 9 • · · ·» · 999999 (c) terc-Butylester (5-hydroxvmethvlpyridin-2-vl)karbamové kyseliny
Do míchaného roztoku ethylesteru 6-terc-butoxykarbonylaminonikotinové kyseliny (3,50 g, 13,1 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) v atmosféře dusíku se přidá za míchání hydrid hlinitolithný (0,91 g, 24,0 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) během 2 hodin. Reakční směs se míchá po dobu 6 hodin, poté se přidá nasycený chlorid amonný (opatrně) až do neutralizace roztoku. Směs se zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester (5-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (2,00 g, 68 %).
(d) terc-Butylester (5-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny
Trifenylfosfin (8,70 g, 33,1 mmol) a tetrabrommethan (17,0 g, 51,2 mmol) se přidá do suspenze terc-butylesteru (5-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (7,00 g,
31,2 mmol) v dichlormethanu (200 ml) při teplotě místnosti. Míchání pokračuje po dobu 5 hodin a potom následuje odpaření rozpouštědla. Přidá se acetonitril (200 ml) a směs se chladí na teplotu -20°C po dobu 2 hodin. Směs se potom zfiltruje a krystalický odparek se promyje ochlazeným acetonitrilem (2 x 10 ml), aby se dostal terc-butylester (5-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (5,96 g,
67%).
(e) Diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonvlaminopyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Do suspenze hydridu sodného (0,49 g, 16,3 mmol, 80%) v tetrahydrofuranu (15 ml) při 0 °C se přidá diethyl-malonát (2,61 g, 16,3 mmol). Směs se míchá po dobu 15 min a potom se přidá po kapkách za zpětného toku do směsi • · I · « 4 « «
- 4*(S terc-butylesteru (5-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (3,90 g, 13,6 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml), a výsledný roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 15 minut. Po odpaření rozpouštědla se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, gradient 1:100 až 2,5:100) aby se dostal diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (2,18 g, 44 %).
(f) Monoethylester 2-(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,37 g, 6,54 mmol) v ethanolu (5 ml) se přidá do roztoku diethylesteru
2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (2,18 g, 5,95 mmol) v ethanolu (25 ml) a methylenchloridu (10 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Směs se odpaří za sníženého tlaku a odparek se rozpustí ve vodě. Vodná vrstva se promyje etherem, okyselí na pH 4 1M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se promyje vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření za sníženého tlaku se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan,
1:20), aby se dostal monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,00 g,
%).
(g) Ethylester 2-(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny
Diethylamin (0,29 g, 3,00 mmol), voda (2 ml) a methylenchlorid (2 ml) se přidají do směsi monoethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,00 g, 2,96 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,25 g, 3,05 mmol) při 0 °C. Směs se míchá po • · · · • * • · · · • · ·« · · ♦ · * ···· · V · · * * • ···· ··« ····· · · * · * · · · * dobu 16 hodin při teplotě místnosti a potom vylije na směs ledu a vody a extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se promyje 5% hydrogenuhličitanem sodným a vysuší. Filtrací a odpařením za sníženého tlaku se dostane ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,75 g, 83 %).
(h) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propionové kyseliny
Ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethy1)akrylové kyseliny (0,49 g, 1,60 mmol) a triethylamin (0,17 g, 1,64 mmol) se přidají do thiooctové kyseliny (3 ml) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 6 hodin. Směs se vylije na směs ledu a vody a extrahuje se dichlormethanem. Organická fáze se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší.
Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, 2,5:100), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propionové kyseliny (0,36 g, 61 %).
(i) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-aminopyridin-3-yl)propionové kyseliny
Trifluoroctová kyselina (0,5 ml) se přidá do roztoku ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propionové kyseliny (100 mg, 0,26 mmol) v methylenchloridu (2 ml) v atmosféře argonu. Roztok se míchá po dobu 60 min a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-aminopyridin-3-yl)propionové kyseliny (104 mg, 100 %).
*Ή NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,21 (t, 3H) , 2,33 (s, 3H) , 2,78-2,97 (m, 3H), 3,05-3,13 (m, 1H), 3,14-3,21 (m, 1H), • « « · « · • · • ·
4,08-4,15 (m, 2H), 6,99 (d, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,85 (d, 1H).
(j ) 3-(6-Amino-pyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propionové kyseliny (38 mg, 0,096 mmol) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2,0 ml) v atmosféře argonu. Roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny a potom se zahřívá při zpětném toku po dobu 1 hodiny. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví (25,7 mg, 100 %) ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 2,74-2,78 (m, 2H), 2,84-2,94 (m, 3H), 7,02 (d, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,89 (d, 1H).
MS( + ) 213 (M+l).
Příklad 7
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-2-methylpropionová kyselina (a) Ethylester terc-butylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino pyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny
Roztok terc-butyl-ethyl-methylmalonátu (457 mg, 2,26 mmol) v dimethylformamidu (4 ml) se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (90 mg, 2,26 mmol, 60% v oleji) v dimethylformamidu (4 ml). Reakční směs se míchá po dobu 20 min. Roztok terc-butylesteru (5-brommethylpyridin-2-ylkarbamové kyseliny (500 mg, 1,74 mmol) v dimethylformamidu (2,5 ml) se přidá a reakční směs se míchá po dobu 70 minut. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:3) se dostane ethylester terc-butylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny (437 mg, 61 %) .
(b) Mono-terc-butylester 2-(6-terc-butoxykarbonvlaminopyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny
1M roztok hydroxidu sodného (2 ml) se přidá do roztoku ethylesteru terc-butylester 2-,( 6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny (0,42 g,
1,03 mmol) ve směsi tetrahydrofuran/ethanol (4 ml, 1:1). Reakční směs se míchá při 50°C po dobu 16 hodin. Přidá se dichlormethan a směs se promyje 0,5 M roztokem kyseliny chlorovodíkové a roztokem chloridu sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku se dostane mono-terc-butylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny (348 mg, 89 %).
(c) terc-Butylester 3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-hvdroxymethvl-2-methvlpropionové kyseliny
Methyl-chloroformiát (75 1, 0,92 mmol) se přidá po kapkách do roztoku mono-terc-butylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny (348 mg, 0,915 mmol) a triethylaminu (123 μΐ, 0,92 mmol) v tetrahydrofuranu (6 ml). Reakční směs se míchá po dobu 20 min, zfiltruje a přidá po kapkách do suspenze tetrahydroboratu sodného (39 mg, 1,04 mmol) v tetrahydrofuranu (6 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Přidá se 0,2M kyselina chlorovodíková a potom ethyl-acetát. Organická fáze se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:3) se dostane terc-butylester 3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-hydroxymethyl-2-methylpropionové kyseliny (190 mg, 57 %).
• «··· * · ···· • · · ·· · ·«·· • · · · · · · · » · (d) terc-Butylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-vl)-2-methylpropionové kyseliny
Diethyl-azodikarboxylát (160 μΐ, 1,01 mmol) se přidá po kapkách do roztoku terc-butylesteru 3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-hydroxymethyl-2-methylpropionové kyseliny (180 mg, 0,49 mmol) a trifenylfosfinu (266 mg, 1,01 mmol) v tetrahydrofuranu (6 ml) a reakční směs se míchá po dobu 5 min. Přidá se thiooctová kyselina (96 μΐ, 1,34 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 16 hodin. Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 10:1 až 1:1) se dostane terc-butylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny (137 mg, 65 %).
(e) 3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-2-methylpropionová kyselina terc-Butylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny (4 mg, 9,4 μπιοί) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové v atmosféře argonu. Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 1 hodiny. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (2,5 mg, 100 %).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,20 (s, 3H), 2,62 (d, 1H), 2,76-2,83 (m, 2H), 2,95 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,64 (d,
1H), 7,80 (dd, 1H).
MS (+) 227 (M+l).
Příklad 8 • ♦ * · • · • · ♦ · • · · • · · · · <
• · · ·
2-(6-Aminopyridin-3-ylmethvl)-2-merkaptomethylmáselná kyselina (a) terc-Butylester Γ5-(5-ethyl-2,2-dimethyl-4,6-dioxo— Γ1,3 1dioxan-5-ylmethyl)pyridin-2-ylIkarbantové kyseliny terc-Butylester (5-brommethylpyridin-2-yl)-karbamové kyseliny (1,0 g, 3,48 mmol) se přidá do roztoku 2,2-dimethyl-5-ethyl-l,3-dioxan-4,6-dionu (600 mg, 3,48 mmol) a triethylaminu (0,51 ml, 3,66 mmol) v dimethylsulfoxidu (40 ml) v atmosféře dusíku. Reakční směs se míchá přes noc a přidá se voda (100 ml). Filtrací sraženiny se dostane terc-butylester [5-(5-ethyl-2,2-dimethyl-4,6-dioxo-[1,3]dioxan-5-ylmethy1)pyridin-2-yl]karbamové kyseliny (1,15 g, 87 %).
(b) Monoethylester 2-(6-terc-butoxvkarbonylaminopyrid:Ln-3-ylmethyl)-2-ethylmalonové kyseliny
Roztok kovového sodíku (140 mg, 6,08 mmol) v ethanolu (20 ml) se přidá do roztoku terc-butylesteru [5-(5-ethyl-2,2-dimethyl-4,6-dioxo-[1,3]dioxan-5-ylmethyl)pyridin-2-yl]karbamové kyseliny (1,15 g, 3,04 mmol) v ethanolu (10 ml). Reakční směs se míchá po dobu 90 min a potom se přidá methylenchlorid. Směs se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, a.by se dostal monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-ethylmalonové kyseliny (1,05 g, 95%).
(c) Ethylester_2-(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-ylmethyl)-2-hydroxvmethylmáselné kyseliny
Methyl-chloroformiát (150 μΐ, 1,95 mmol) se přidá po kapkách do roztoku monoethylesteru 2-(6-terc-butoxykaxbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-ethylmalonové kyseliny (700 mg, 1,91 mmol) a triethylaminu (0,275 ml, 1,97 mmol) » · · · « · • · v tetrahydrofuranu (15 ml) při -20 °C v atmosféře dusíku. Reakční směs se míchá po dobu 50 minut, zfiltruje a přidá po kapkách do suspenze tetrahydroboratu sodného (80 mg, 2,1 mmol) v tetrahydrofuranu (15 ml) při -20 °C. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Přidá se 0,2M kyselina chlorovodíková a potom methylenchlorid. Organická fáze se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší.
Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:3) se dostane ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-hydroxymethylmáselné kyseliny (300 mg, 45 %).
(d) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-2-(6-terc-butoxvkarbonylaminopvridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny
Diisopropyl-azodikarboxylát (296 μΐ, 1,53 mmol) se přidá po kapkách do roztoku trifenylfosfinu (402 mg, 1,53 mmol) v tetrahydrofuranu (4 ml) při 0 °C v atmosféře argonu a reakční směs se míchá po dobu 30 min. Roztok thiooctové kyseliny (109 μΐ, 1,53 mmol) a ethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)-2-hydroxymethylmáselné kyseliny (0,27 g, 0,77 mmol) v tetrahydrofuranu (2 ml) se přidá po kapkách během 10 minut. Reakční směs se míchá po dobu 60 minut při 0 °C a poté po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 10:1 až 1:1) se dostane ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethy1)máselné kyseliny (193 mg, 61 %).
(e) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-2-merkaptomethylmáselná kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny (12,3 mg, 30 μπιοί) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) • · v atmosféře argonu. Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 24 hodin. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (8,3 mg, 100 %).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 0,91 (t, 3H), 1,71 (m, 2H), 2,68 (m, 2H), 2,92 (m, 2H), 6,96 (d, 1H), 7,65 (bs, 1H), 7,82 (dd, 1H).
MS (-) 239 (M-l).
Příklad 9
3-(6-Amino-5-methylpyridin-3-vl)-2-merkaptomethyl-2-methylpropionová kyselina (a) 2-ΓΝ,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-3-methyl-5-(2,2,5-trimethyl-4,6-dioxo-r1,3ldioxan-5-ylmethyl)pyridin
2-[N,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino]-5-brommethyl-3-methylpyridin (1,6 g, 4,0 mmol) se přidá do roztoku
2,2,5-trimethyl-l,3-dioxan-4,6-dionu (630 mg, 4,0 mmol) a triethylaminu (0,58 ml, 4,2 mmol) v dimethylsulfoxidu (40 ml). Reakční směs se míchá přes noc a přidá se voda (100 ml). Směs se extrahuje ethyl-acetátem, spojené organické fáze se promyjí vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku se dostane surový 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-methyl-5-(2,2,5-trimethyl-4,6-dioxo-[1,3]dioxan-5-ylmethyl)-pyridin (2,06 g).
(b) Monoethylester 2-(6-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-5-methylpyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny
Roztok kovového sodíku (184 mg, 8,0 mmol) v ethanolu (20 ml) • · · · se přidá do roztoku surového 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-methyl-5-(2,2,5-trimethyl-4,6-dioxo-[1,3]dioxan-5-ylmethyl)pyridinu (2,06 g, asi 4,0 mmol) v ethanolu (20 ml) v atmosféře argonu. Reakční směs se míchá po dobu 60 min a potom se přidá methylenchlorid. Směs se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal monoethylester 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)-2-methylmalonové kyseliny (1,9 g).
(c) Ethylester 3-(6-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methvlpyridin-3-yl)-2-hvdroxvmethvl-2-methvlpropionové kyseliny
Methyl-chloroformiát (338 μΐ, 4,4 mmol) se přidá po kapkách do roztoku surového monoethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yImethyl)-2-methylmalonové kyseliny (1,9 g) a triethylaminu (641 μΐ,
4,6 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml) při -20 °C. Reakční směs se míchá po dobu 50 minut, zfiltruje a po kapkách přidá do suspenze tetrahydroboratu sodného (182 mg, 4,8 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml) při -20 °C. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Přidá se 0,5M kyselina chlorovodíková a potom methylenchlorid.
Organická fáze se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 10:1 až 1:3) se dostane ethylester 3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)-2-hydroxymethyl-2-methylpropionové kyseliny (885 mg, 49%).
(d) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-(N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-5-methylpyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny
Diisopropyl-azodikarboxylát (755 μΐ, 3,91 mmol) se přidá po kapkách do roztoku trifenylfosfinu (1,026 g, 3,91 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) při 0 °C a reakční směs se míchá po dobu 30 minut. Po kapkách se přidá roztok thiooctové kyseliny (279 μΐ, 3,91 mmol) a ethylester
3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)-2-hydroxymethyl-2-methylpropionové kyseliny (885 mg, 1,96 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml) během 10 minut. Reakční směs se míchá po dobu 60 minut při 0 °C a potom po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 10:1 až 1:3) se dostane nečištěný ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny (1,46 g).
(e) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-amino-5-methylpyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny
Surový ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny (1,46 g) se rozpustí v trifluoroctové kyselině (5 ml) a míchá po dobu 60 min. Odpařením za sníženého tlaku a potom chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 1:1 až 1:10 až 0:1) se dostane lehce nečištěný ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3 -(6-amino-5-methylpyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny (696 mg, 84%).
(f) 3-(6-Amino-5-methvlpyridin-3-yl-2-merkaptomethvl-2-methylpropionová kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-amino-5-methyl-pyridin-3-yl)-2-methylpropionové kyseliny (17 mg, 40 μιηοΐ) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) v atmosféře argonu. Roztok se zahřívá při zpětném toku po • · • · · · • · • · ··· ·· · ···· • *··· ··· ······ ·· · ·· · ··· dobu 150 minut. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridu (10,7 mg, 96 %).
ΧΗ NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,20 (s, 3H) , 2,23 (s, 3H) , 2,61 (d, 1H), 2,79 (2d, 2H), 2,94 (d, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,69 (m, 1H).
MS (+) 241 (M+l).
Příklad 10
3-Merkapto-2-f(piperidin-4-karbonyl)aminoIpropionová kyselina
Dichlormethan (70 ml) se přidá do 4-methoxytritylchloridové pryskyřice (7 g, L = 0,91 mmol/g, 6,37 mmol) v atmosféře argonu a pryskyřice se nechá bobtnat po dobu 10 minut a přidá se hydrochlorid ethylesteru 2-amino-3-merkaptopropionové kyseliny (5,9 g, 32 mmol). Potom se po malých dávkách přidá trifluoroctová kyselina (70 ml) během 10 minut. Suspenze se protřepává při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny a odpaří za sníženého tlaku. Když je téměř suchá, přidá se toluen (150 ml) a směs se opět zahustí za sníženého tlaku. Tento postup se dvakrát zopakuje. Žlutá pryskyřice se nyní promyje dimethylformamidem (3x60 ml), dichlormethanem (2x60 ml), směsí trietylamin:dichlormethan (1:1, 2x60 ml), dichlormethanem (2x60 ml), methanolem (2x60 ml) a vysuší ve vakuu přes noc. Aby se vypočítalo navázání ethylesteru 2-amino-3-merkaptopropionové kyseliny na pryskyřici, vystaví se 50 mg produktu působení 10% trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu po dobu 1 minuty, a tento postup se zopakuje čtyřikrát. Směs se zahustí za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 2-amino-3-merkaptopropionové kyseliny (9,8 mg), vykazující navázání přibližně 0,6 mmol/g.
Roztok mono-terc-butylesteru piperidin-1,4-dikarboxylové • t • · · · • · • 4 · · · ··· ·· · · * · « • « · · ·· · · · 4 kyseliny (28 mg, 0,12 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se přidá do pryskyřice (100 mg, L=0,6 mmol/g, 0,06 mmol) v injekční stříkačce z plastické hmoty, a potom se dále přidá PyBOP (62 mg, 0,12 mmol) v dimethylformamidu (0,5 ml) a DIPEA (0,041 μΐ, 0,24 mmol). Reakční směs se ponechá při teplotě místnosti po dobu 2 hodin za občasného míchání a postup se zopakuje ještě jednou. Pryskyřice se potom promyje dimethylformamidem (2x2 ml), dichlormethanem (2x2 ml), methanolem (2x2 ml), dichlormethanem (2x2 ml) a tetrahydrofuranem (2x2 ml). Do stříkačky se přidá tetrahydrofuran (0,800 μΐ) a pryskyřice se nechá bobtnat po dobu 10 min. Poté se přidá voda (0,250 μΐ) a 10 M roztok hydroxidu sodného (0,050 μΐ). Reakční směs se nechá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin za občasného míchání. Pryskyřice se potom promyje směsí tetrahydrofuran:voda (1:1, 2x2 ml), tetrahydrofuranem (2x2 ml), dichlormethanem (2x2 ml), methanolem (2x2 ml) a dichlormethanem (2x2 ml). Do stříkačky se přidá 10% trifluoroctová kyselina v dichlormethanu (1 ml) a po 5 min se roztok shromáždí ve zvážené lahvičce. Tento postup se zopakuje ještě jednou a spojené organické fáze se odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě soli s kyselinou trifluoroctovou (15,3 mg, 74 %).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,85-2,10 (m, 4H), 2,65-2,72 (m, ÍH), 2,85-2,92 (m, ÍH), 2,95-3,08 (m, 3H), 3,40-3,47 (m, 2H), 4,55 - 4,60 (m, ÍH).
Příklad 11
2-Γ(Azetidin-2-karbonyl)amino1-3-merkaptopropionová kyselina
Sloučenina pojmenovaná v záhlaví se připraví z 1-terc-butylesteru azetidin-1,2-dikarboxylové kyseliny způsobem popsaným v příkladu 14. Výtěžek: 13,8 mg (72 %).
• · · · • · • · • · · · · · · ··· ·· · A · · · ···· · · · ·· * 1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 2,54-2,63 (m, 1H), 2,82-3,05 (m, 3H), 3,93-4,15 (m, 2H), 4,66-4,71 (m, 1H), 5,05-5,10 (m, 1H) .
Příklad 12
3-Merkapto-2-rpiperidin-3-karbonyl)aminoIpropionová kyselina
Sloučenina pojmenovaná v záhlaví se připraví z 1-terc-butylesteru piperidin-1,3-dikarboxylové kyseliny způsobem popsaným v příkladu 14. Výtěžek: 15,1 mg (73 %).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,73-2,10 (m, 4H), 2,84-2,92 (m, 2H), 2,95-3,14 (m, 2H), 3,15-3,29(m, 3H), 4,56-4,62 (m, 1H) .
Příklad 13
2-f(Azetidin-3-karbonyl)amino1-3-merkaptopropionová kyselina
Sloučenina pojmenovaná v záhlaví se připraví z mono-terc-butylesteru azetidin-1,3-dikarboxylové kyseliny způsobem popsaným v příkladu 14. Výtěžek: 13,5 mg (71 %).
1H NMR (500 MHZ, CD3OD): delta 2,86-3,02 (m, 2H), 3,72-3,80 (m, 1H), 4,20-4,24 (d, 4H), 4,62-4,67 (m, 1H).
Příklad 14
3-(6-Amino-5-methylpyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) 5-Brom-2-fΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1• · · ·
-3-methylpyridin
2-Amino-5-brom-3-methylpyridin (15,0 g, 80,2 mmol) v terc-butanolu se vystaví působení di-terc-butyldikarbonátu (43,6 g, 200 mmol) a N,N-dimethylaminopyridinu (0,60 g, 4,91 mmol). Reakční směs se nechá při teplotě okolí přes noc a potom odpaří za sníženého tlaku. Přidá se hexan a produkt se vysráží jako pevná látka. Filtrací se dostane 5-brom-2-[N,N-bis-(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-methylpyr idin (22,0 g, 71 %).
(b) 2-ΓN,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-5-(terc-butyldimethylsilanvloxvmethyl)-3-methylpyridin
Roztok 5-brom-2- [N,N-bis (terc-butoxykarbonyl) amino ] -3-methylpyridinu (26,0 g, 67,1 mmol), terc-butyl-dimethyl-tributylstannylmethoxysilanu (47,6 g, 109 mmol) a bis(trifenylfosfin)palladium(II)dichloridu (0,90 g, 1,42 mmol) v 1,2-dichlorethanu (80 ml) se míchá při 90 °C dva dny. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se diethylether (200 ml) a potom nasycený vodný roztok fluoridu draselného (40 ml). Směs se míchá intenzivně po dobu 30 minut a potom se zfiltruje. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, gradient 100:0 až 95:5) se dostane 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-(terc-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-3-methylpyridin (18,0 g, 59 %).
(c) 2-Γ N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-5-hydroxymethy1-3-methylpyridin
Tetrabutylammoniumfluorid (25,1 g, 79,6 mmol) se přidá do roztoku 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-(terc-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-3-methylpyridinu (18,0 g,
39,8 mmol) v tetrahydrofuranu (150 ml). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Odpařením za • · • · · ·
- 54 • · · · • · · · · sníženého tlaku následovaném velmi rychlou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 50:50) se dostane 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-hydroxymethyl-3-methylpyridin (8,0 g, 59 %).
(d) 5-Brommethyl-2-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1 3-methylpyridin
Trifenylfosfin (7,43 g, 28,3 mmol) a tetrabrommethan (9,49 g, 28,6 mmol) se přidá do roztoku 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-hydroxymethyl-3-methylpyridinu (8,00 g, 23,6 mmol) v dichlormethanu (220 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu 3 hodin a potom odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 80:20) se dostane 5-brommethyl-2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-methylpyridin (8,0 g, 77 %).
(e) Diethylester 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-5-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Do suspenze hydridu sodného (0,24 g, 6,0 mmol, 60%) v dimethylformamidu (5 ml) se přidá diethyl-malonát (0,91 ml, 6,0 mmol) a směs se míchá po dobu 15 minut. Přidá se roztok 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-brommethyl-3-methylpyridinu (2,0 g, 5,0 mmol) v dimethylformamidu (5 ml) a výsledný roztok se míchá po dobu 120 minut při 60 °C. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po odpaření rozpouštědla se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, gradient 1:100 až 1:20), aby se dostal diethylester 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,2 g, 50 %).
(f) Monoethylester 2-(6-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino)
-5-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (154 mg, 2,75 mmol) v ethanolu (2 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,2 g, 2,50 mmol) v ethanolu (10 ml) a methylenchloridu (4 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Směs se odpaří za sníženého tlaku a odparek se rozpustí ve vodě. Přidá se ethyl-acetát a organická vrstva se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší. Filtrací a odpařením za sníženého tlaku se dostane surový monoethylester 2-6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,0 g, 88%).
(cf) Ethylester 2-(6-ΓN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-5-methylpyridin-3-ylmethvl)akrylové kyseliny
Diethylamin (0,26 g, 2,67 mmol) se přidá do směsi monoethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,0 g, 2,2 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,24 g, 3,00 mmol) v methylenchloridu (2 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a přidá se ethyl-acetát. Organická vrstva se promyje vodou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku následovaným velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:2) se dostane ethylester 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,68 g, 73 %) (h) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-fN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-5-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny
Triethylamin (0,234 ml, 1,68 mmol) se přidá do roztoku ···· ·· ···· ·· · ·
ethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,68 g,
1,61 mmol) v thiooctové kyselině (3 ml) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Přidá se ethyl-acetát a organická fáze se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:2), aby se dostal čistý ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (489 mg, 61%) a lehce znečistěný ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (0,34 g, 43%).
(i) 3-(6-Amino-5-methylpyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (17 mg, 0,034 mmol) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (3,0 ml). Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 1 hodiny. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví (8,9 mg, 100 %) jako hydrochloridová sůl.
1H NMR (500 MHz, CD3OD): delta 2,26 (s, 3H), 2,72-2,75 (m, 2H), 2,83-2,91 (m, 3H), 7,60 (s, 1H), 7,77 (s, 1H).
MS (+) 227 (M+l).
Příklad 15
3-(6-Amino-4-methylpyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) 2-Amino-5-brom-4-methvlpyridin
2-Amino-4-methylpyridin (110 g, 1,02 mol) v bromovodíkové kyselině (1 ml, 48%) se míchá při 70 °C a přidá se roztok peroxidu vodíku (300 ml, 15%) po kapkách během jedné hodiny po takových dávkách, aby teplota reakční směsi zůstala na hodnotě 70 až 80 °C. Směs se míchá po dobu 90 min při 70 °C a vylije na rozdrcený led. Hodnota pH se upraví na 4 až 5 uhličitanem sodným a vysrážená pevná látka (obsahující převážně dibromované produkty) se odfiltruje a odloží. Hodnota pH se následně zvýší na 9 a vysrážený produkt se shromáždí filtrací. Rekrystalizací z toluenu se dostane 2-amino-5-brom-4-methylpyridin (76,3 g, 40 %).
(b) 2-ΓN,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-5-brom-4-methylpyridin
2-Amino-5-brom-4-methylpyridin (5,70 g, 30,5 mmol) v chloroformu se vystaví působení di-terc-butyldikarbonatu (20,0 g, 91,60 mmol) a N,N-dimethylaminopyridinu (0,60 g, 4,91 mmol). Reakční směs se nechá při teplotě místnosti přes noc a potom se odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 95:5) se dostane 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-brom-4-methy1pyridin (8,02 g, 68 %).
(c) 2-ΓN,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-5-(terc-butyldimethyl-silanyloxymethyl)-4-methylpyridin
Roztok 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-brom-4-methylpyridinu (15,0 g, 38,70 mmol), terc-butyl-dimethyl-tributylstannylmethoxysilanu (25,4 g, 58,3 mmol), a bis(trifenylfosfin)palladium(II)dichloridu (0,90 g, 1,42 mmol) v 1,2-dichlorethanu (50 ml) se míchá při 90 °C dva dny. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se diethylether (200 ml) a potom nasycený vodný roztok fluoridu draselného (40 ml). Směs se míchá intenzivně po dobu 30 minut ·· ·4 • · · · • · · a zfiltruje. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Bleskovou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 95:5) se dostane 2-[Ν,Ν-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-(terc-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-4-methylpyridin (10,0 g, 57 %).
(d) 2- Γ N,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-5-hydroxymethyl-4-methylpyridin
Tetrabutylamoniumfluorid (13,9 g, 44,1 mmol) se přidá do roztoku 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-(terc-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-4-methylpyridinu (10,0 g, 24,3 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml). Reakční směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Odpařením za sníženého tlaku následovaným velmi rychlou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 50:50) se dostane 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-hydroxymethyl-4-methylpyridin (5,0 g, 67 %).
(e) 5-Brommethyl-2-Γ N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1 -4-methylpyridin
Trifenylfosfin (4,69 g, 17,9 mmol) a tetrabrommethan (4,89 g, 14,8 mmol) se přidá do roztoku 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-hydroxymethyl-4-methylpyridinu (5,00 g, 22,0 mmol) v dichloromethanu (130 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu 3 hodin a potom se zředí dichlormethanem. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 80:20) se dostane 5-brommethyl- 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin (5,35 g, 90 %).
(f) Diethylester 2-(6-[Ν,Ν-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-4-methvlpyridin-3-vlmethvl)malonové kyseliny ·· 99 to» *·· · *
• · · • to · · • · • ·· to r · · * · * toto toto··
Do suspenze hydridu sodného (0,24 g, 6,0 mmol, 60%) v dimethylformamidu (5 ml) se přidá diethyl-malonát (0,91 ml, 6,0 mmol) a směs se míchá po dobu 15 minut. Přidá se roztok 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-brommethyl-4-methylpyridinu (2,0 g, 5,0 mmol) v dimethylformamidu (5 ml) a výsledný roztok se míchá po dobu 120 min při 60 °C. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po odpaření rozpouštědla se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, gradient 1:100 až 1:20), aby se dostala čistá frakce diethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,15 g, 48 %) a znečištěná frakce diethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,1 g).
(q) ) Monoethylester 2-(6-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)aminol-4-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (141 mg, 2,52 mmol) v ethanolu (2 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-yImethyl)malonové kyseliny (1,1 g, 2,29 mmol) v ethanolu (10 ml) a methylenchloridu (4 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Směs se odpaří za sníženého tlaku a odparek se rozpustí ve vodě. Přidá se ethyl-acetát a organická vrstva se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou, vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší. Filtrací a odpařením za sníženého tlaku se dostane surový monoethylester 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,0 g, 97 %).
(h) Ethylester 2-(6-rN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1-4-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny
Diethylamin (0,26 g, 2,67 mmol) se přidá do směsi •· ···· • ·· · • ·· ·» • « * • >
··«<
monoethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,0 g, 2,2 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,24 g, 3,00 mmol) v methylenchloridu (2 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a přidá se ethyl-acetát. Organická vrstva se promyje vodou a 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku následovaným velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:1) se dostane ethylester 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,81 g, 88 %).
(i) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-vl)propionové kyseliny
Triethylamin (0,279 ml, 2,0 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,8 g, 1,9 mmol) v thiooctové kyselině (3 ml) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Přidá se ethyl-acetát a organická fáze se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:2), aby se dostal čistý ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (200 mg, 21 %) a slabě znečištěný ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[Ν,Ν-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (0,68 g).
(j) 3-(6-Amino-4-methylpyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina • *
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-4-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (36 mg, 0,072 mmol) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (3,0 ml). Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 1 hodiny. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví (18,7 mg, 98 %) ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR (500 MHz, CD-jOD): delta 2,42 (s, 3H) , 2,72-2,95 (m,
5H), 6,81 (s, ÍH), 7,58 (s, ÍH).
MS (+) 227 (M+l).
Příklad 16
2-Merkaptoroethyl-3-piperidin-4-ylmáselná kyselina (a) terc-Butylester 4-formvlpiperidln-l-karboxylové kyseliny
Jodistan (26,9 g, 63,5 mmol) se přidá do roztoku l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-methanolu (10,5 g, 48,8 mmol) v methylenchloridu (200 ml) a směs se míchá po dobu 90 min. Přidá se diethylether a sraženina se odstraní extrakcí roztokem 10% thiosiřičitanu sodného/nasyceného hydrogenuhličitanu sodného (1:1, 300 ml). Organická vrstva se promyje 0,5M roztokem hydroxidu sodného a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (hexan/ethyl-acetát, 8:2) se dostane terc-butylester 4-formylpiperidin-l-karboxylové kyseliny (8,5 g, 81 %).
(b) Diethylester 2-(l-terc-butoxvkarbonylpiperidin-4-ylmethylen)malonové kyseliny
Do roztoku diethyl-malonátu (710 μΐ, 4,7 mmol) a terc-butylesteru 4-formylpiperidin-l-karboxylové kyseliny (1,0 g, 4,7 mmol) v methylenchloridu (5 ml) se přidá • · • · · · piperidin (46 μΐ, 0,47 mmol) a octová kyselina (27 μΐ, 0,47 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 72 hodin při teplotě místnosti a potom po dobu 16 hodin při 45 °C. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:3), aby se dostal diethylester 2-(l-tercbutoxykarbonylpiperidin-4-ylmethylen)malonové kyseliny (0,69 g, 40 %).
(c) Diethylester 2-ri-(l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-vl) ethylImalonové kyseliny
Methyllithium (5,34 ml, 8,54 mmol, 1,6M roztok v diethyletheru) se přidá po kapkách do suspenze jodidu měďného (0,74 g, 3,88 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml) při -78 °C v atmosféře argonu a směs se míchá po dobu 30 minut. Po kapkách se přidá roztok diethylester 2-(l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-ylmethylen)malonové kyseliny (0,69 g, 1,94 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml) a reakční směs se míchá 120 min při -78 °C a potom se nechá zahřát na teplotu místnosti během 60 minut. Přidá se koncentrovaný vodný roztok hydroxidu amonného a směs se potom extrahuje ethyl-acetátem, promyje koncentrovaným vodným roztokem hydroxidu amonného a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:6), aby se dostal diethylester
2-[1-(l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-yl)ethyl]malonové kyseliny (0,39 g, 54 %).
(d) Monoethylester 2-Γ1-(1-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-yl)ethylImalonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (84 mg, 1,16 mmol) v ethanolu (2 ml) se přidá po kapkách do roztoku • · • · · · • · diethylesteru 2-[1-(l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-yl)-ethyl]malonové kyseliny (0,39 g, 1,01 mmol) v methylenchloridu (4 ml) a ethanolu (10 ml) při 0 °C.
Výsledná směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 416 mg surového monoethylesteru 2-[1-(l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-yl)ethyl]malonové kyseliny.
(e) terc-Butylester 4-(2-ethoxykarbonyl-l-methylallyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny
Formaldehyd (132 mg, 1,65 mmol, 37% ve vodě) se přidá do roztoku surového monoethylesteru 2-[l-(l-terc-butoxykarbonylpiperidin-4-yl)ethyljmalonové kyseliny (416 mg) v methylenchloridu (2 ml) při 0 °C. Po kapkách se přidá diethylamin (153 μΐ, 1,47 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje vodou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát 3:1), aby se dostal terc-butylester 4-(2-ethoxykarbonyl-l-methylallyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,18 g, 49 % ve dvou stupních).
(f) terc-Butylester 4-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonyl-1-methylpropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny
Triethylamin (86 μΐ, 0,617 mmol) se přidá do roztoku terc-butylesteru 4-(2-ethoxykarbonyl-l-methylallyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,18 g, 0,59 mmol) v thiooctové kyselině (2 ml) při 0 °C. Po míchání po dobu 6 hodin se přidá další thiooctová kyselina (2 ml) a směs se míchá při 45 °C přes noc. Přidá se ethyl-acetát a směs se promyje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného • · a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 5:1 až 1:1), aby se dostal lehce znečištěný terc-butylester 4-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonyl-1-methylpropy1)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,17 g, 75 %).
(q) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-piperidin-4-ylmáselné kyseliny
Trifluoroctová kyselina (2 ml) se přidá do roztoku terc-butylesteru 4-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonyl-1-methylpropyl)piperidin-l-karboxylové kyseliny (0,17 g, 0,439 mmol) v methylenchloridu (10 ml). Reakční směs se míchá po dobu 90 min a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí za použití HPLC (gradient 10 až 50 % acetonitril, 0,1% trifluoroctová kyselina ve vodě), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-piperidin-4-ylmáselné kyseliny (101 mg, 54 %) ve formě soli s trifluoroctovou kyselinou.
(h) 2-Merkaptomethyl-3-piperidin-4-ylmáselná kyselina
Koncentrovaná chlorovodíková kyselina (4 ml) se přidá do soli ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-piperidin-4-ylmáselné kyseliny s trifluoroctovou kyselinou (0,101 g,
0,252 mmol) v atmosféře argonu. Reakční směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 5 hodin a potom odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala diastereomerní směs sloučeniny pojmenované v záhlaví (73,7 mg) ve formě hydrochloridové soli.
-*-H NMR (500 MHz, CD3OD) pro hlavní diastereomer: 1,10 (d,
3H) , 1,36-1,58 (m, 2H) , 1,71-1,78 (m, 2H) , 1,93-1,99 (m,
1H) , 2,05-2,11 (m, 1H) , 2,60-2,66 (m, 2H) , 2,80—2,86 (m,
1H) , 2,94-3,02 (m, 2H) , 3,38-3,45 (m, 2H) .
MS (+) 218 (M+l).
Příklad 17
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylmáselná kyselina (a) terc-Butylester (5-forntvlpvridin-2-yl)karbanové kyseliny terc-Butylester (5-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbanové kyseliny (7,00 g, 31,2 mmol) se rozpustí ve vysušeném dimethylsulfoxidu (50 ml) a reakční nádoba se umístí do vodní lázně při 15 °C. Přidá se triethylamin (13,1 ml, 94,0 mmol) a potom po dávkách komplex pyridinu s oxidem sírovým (15,0 g, 94,0 mmol). Reakční směs se míchá po dobu dalších 45 minut a vylije na drcený led. Produkt se extrahuje diethyletherem a spojené organické extrakty se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Rekrystalizací ze směsi hexan/dichlormethan se dostane terc-butylester (5-formylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (5,40 g, 78 %) ve formě bílých krystalů.
(b) Diethylester 2-(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny
Do roztoku diethyl-malonátu (710 μΐ, 4,7 mmol) a terc-butylesteru (5-formylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (1,04 g, 4,7 mmol) ve směsi methylenchloridu/dimethylformamidu (1:1, 5 ml) se přidá piperidin (46 μΐ, 0,47 mmol) a octová kyselina (27 μΐ, 0,47 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 72 hodin při teplotě místnosti a potom po dobu 16 hodin při 45 °C. Pomalu se přidá heptan, aby se dostal diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny (0,69 g, 40 %) ve formě šedých krystalů.
* * * • · · · · * ♦ · · · · • · · · • ··· ·· · (c) Diethylester 2-ri-(6-terc-butoxvkarbonylaminopvridin-3-yl)ethv!1malonové kyseliny
Methyllithium (6,5 ml, 10,4 mmol, 1,6M roztok v diethyletheru) se přidá po kapkách do suspenze jodidu měďného (0,9 g, 4,73 mmol) v tetrahydrofuranu (28 ml) při -78 °C v atmosféře argonu. Reakční směs se míchá 30 minut. Roztok diethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-pyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny (0,84 g, 2,3 mmol) v tetrahydrofuranu (7 ml) se přidá po kapkách a reakční směs se míchá po dobu 180 min při -78 °C. Po kapkách se přidá nasycený vodný roztok hydroxidu amonného a smés se extrahuje ethyl-acetátem. Organická fáze se promyje nasyceným vodným roztokem hydroxidu amonného a chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 3:1 až 1:6) se dostane diethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-ethyl]malonové kyseliny (0,723 g, 82,4 %) ve formě bílé pevné látky.
(d) Monoethylester 2-Γ1-(6-terc-butoxvkarbonylaminopyridin-3-yl)ethylImalonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (113,6 mg, 2,04 mmol) v ethanolu (2 ml) se přidá po kapkách do roztoku diethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)ethyl]malonové kyseliny (0,7 g, 1,84 mmol) v methylenchloridu (4 ml) a ethanolu (10 ml) při 0 °C v atmosféře argonu a reakční směs se míchá přes noc. Přidá se 1M roztok hydroxidu draselného (100 ml) a směs se promyje methylenchloridem. Vodná fáze se okyselí na pH 2 2M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se ethyl-acetátem. Organická fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový monoethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)ethyl]malonové kyseliny (423 mg, 65 %).
• · • · · · ·· ··
(e) Ethylester 2-ri-(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-yl)ethyl]akrylové kyseliny
Diethylamin (0,153 ml, 1,473 mmol) se přidá do roztoku monoethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)ethyl]malonové kyseliny (423 mg, 1,2 mmol) a formaldehydu (132 mg, 1,626 mmol, 36% roztok ve vodě) v methylenchloridu (2 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje vodou, hydrogenuhličitaném sodným a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, 3:1) se dostane ethylester
2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)ethyl]akrylové kyseliny (158 mg, 41 %).
(f) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonvlaminopyridin-3-vl)máselné kyseliny
Triethylamin (0,076 ml, 0,542 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)ethyl]akrylové kyseliny (158 mg, 0,493 mmol) v thiooctové kyselině (2 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se míchá při 45 °C přes noc. Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje hydrogenuhličitanem sodným a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku.
Velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 5:1 až 1:1) se dostane lehce znečištěný ethylester 2-acetyl sulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)máselné kyseliny (178 mg, 91 %).
(cf) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-aminopyridin-3-yl)máselné kyseliny
Trifluoroctová kyselina (2 ml) se přidá do roztoku ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxyI · · · • · · · ·· ♦ · • · · · • · · · · • · · · · · · • · · · · · ·· · · · ···<
karbonylaminopyridin-3-yl)máselné kyseliny (178 mg,
0,449 mmol) v methylenchloridu (2 ml). Směs se míchá po dobu 60 minut a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, 1:6) se dostane nečištěný ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-aminopyridin-3-yl)máselné kyseliny (176 mg, 95 %).
Dalším čištěním HPLC chromatografií (gradient 10 až 70 % acetonitril, 0,1% trifluoroctová kyselina ve vodě) se dostane ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-aminopyridin-3-yl)máselné kyseliny (104 mg, 56 %) ve formě soli s trifluoroctovou kyselinou.
(h) 3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylmáselná kyselina
Koncentrovaná chlorovodíková kyselina (4 ml) se přidá do ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-amino-pyridin-3-yl)máselné kyseliny (104 mg, 0,253 mmol) v atmosféře argonu. Reakční směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 5 hodin a potom odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala diastereomerní směs sloučeniny pojmenované v záhlaví (61 mg, 92 %) ve formě hydrochloridová soli.
1H NMR (500 MHz, D20) pro hlavní diastereomer: delta 1,26 (d, 3H), 2,49-2,53 (m, 2H), 2,64-2,77 (m, 1H), 2,95-3,02 (m, 1H), 7,02 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,88 (m, 1H).
MS (+) 227 (M+l).
Příklad 18
3-(6-Amino-2-methylpyridin-3-vl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) terc-Butylester (5-brom-6-methylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny
5-Brom-6-methylpyridin-2-ylamin (25,0 g, 133,7 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu/terc-butanolu (1:10, 550 ml) se vystaví působení di-terc-butyl-dikarbonátu (39,3 g, 180,0 mmol) a Ν,Ν-dimethylaminopyridinu (2,40 g, 19,6 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 4 hodin při 40 °C a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (methylenchlorid) se dostane terc-butylester (5-brom-6-methylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (17,0 g, 44 %).
(b) terc-Butylester Γ5-(terc-butyldimethylsilanyloxvmethvl)-6-methvlpyridin-2-vllkarbamové kyseliny
Roztok terc-butylesteru (5-brom-6-methylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (27,5 g, 95,8 mmol), terc-butyl-dimethyl-tributylstannylmethoxysilanu (43,5 g, 100,2 mmol) a bis(trifenylfosfin)palladium(II)dichloridu (1,00 g, 1,40 mmol) v 1,2-dichlorethanu (350 ml) se míchá při zpětném toku po dobu 48 hodin. Další bis(trifenylfosfin)palladium(II)dichlorid (1,00 g, 1,40 mmol) se přidá každých 12 hodin Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se diethylether (300 ml) a potom nasycený vodný roztok fluoridu draselného (100 ml). Směs se míchá intenzivně 60 minut a zfiltruje. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, 1:99) se dostane terc-butylester [5-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-6-methylpyridin-2-yl]karbamové kyseliny (15 g, 47 %).
(c) terc-Butylester (5-hydroxvmethvl-6-methvlpyridin-2-yl)karbamové kyseliny
Tetrabutylamoniumfluorid (19,6 g, 62,4 mmol) se přidá do roztoku terc-butylesteru [5-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)-6-methylpyridin-2-yl]karbamové kyseliny (10,5 g, 31,23 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml) a míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se voda a produkt se extrahuje • · • « · · • · “ · • · chloroformem. Organická fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, 2,5:77,5) se dostane terc-butylester (5-hydroxymethyl-6-methylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (6,0 g, 81 %).
(d) 5-Brommethyl-2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1 pyrimidin
Trifenylfosfin (9,83 g, 37,5 mmol) a tetrabrommethan (17,7 g 53,5 mmol) se přidají do roztoku terc-butylesteru (5-hydroxymethyl-6-methylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (8,50 g, 35,7 mmol) v dichlormethanu (30 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti a potom se zředí dichlormethanem. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (dichlormethan) se dostane 5-brommethyl-2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin (4,05 g, 38 (e) Diethylester 2-(6-terc-butoxvkarbonylamino-2-methvlpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok diethyl-malonátu (1,21 ml, 7,97 mmol) v dimethylformamidu (2 ml) se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (348 mg, 7,97 mmol, 55% v minerálním oleji) v dimethylformamidu (5 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Reakční směs se míchá po dobu 45 minut a po kapkách se přidá roztok terc-butylesteru (5-brommethyl-6-methylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (2,0 g, 6,64 mmol) v dimethylformamidu (5 ml). Směs se míchá přes noc (0 °C až 20 °C). Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, 4:1) se dostane diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,87 g, • · · · • · · · ·· • · • ·
%) .
(f) Monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonvlamino-2-methvlpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (300 mg, 5,35 mmol) v ethanolu (4 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-yImethyl)malonové kyseliny (1,85 g, 4,86 mmol) ve směsi ethanol/methylenchlorid (2:1, 21 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 40 hodin při teplotě místnosti a přidá se ethyl-acetát. Směs se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,45 g).
(g) Ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonvlamino-2-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny
Diethylamin (359 mg, 4,90 mmol) se přidá po kapkách do roztoku monoethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,44 g, 4,09 mmol) a formaldehydu (464 mg, 5,72 mmol, 37% roztok ve vodě) v methylenchloridu (35 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se methylenchlorid a roztok se promyje uhličitanem sodným a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (1,03 g, 79 %) .
(h) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny
Triethylamin (0,556 ml, 3,99 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-
·· ···· ·· ·* • · · · · · « · · · · • · · · · · • · · · · ·· · ·· · · · ·
-3-ylmethy1)akrylové kyseliny (1,23 g, 3,84 mmol) v thiooctové kyselině (10 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 64 hodin. Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje uhličitanem sodným a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, gradient 5:1 až 1:1) se dostane ethylester 2-acetylsulfanyl methyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (1,33 g, 87 %).
(i) 3-(6-Amino-2-methvlpyrldin-3-vl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina
Koncentrovaná chlorovodíková kyselina (2 ml) se přidá do ethylesteru 2-acetylsulfanylmethy1-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-2-methylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (77 mg, 0,19 mmol) v atmosféře argonu. Reakční směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 110 minut a potom se odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví (39 mg, 76 %) ve formě hydrochloridové soli.
^H NMR (500 MHz, D20): delta 2,49 (s, 3H) , 2,73-2,92 (m, 5H), 6,81 (d, 1H), 7,77 (d, 1H).
MS (+) 227 (M+l).
Příklad 19
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-aminopyrimidin-5-yl)propionové kyseliny (a) 2-Γ N,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-5-brompyrimidin
2-Amino-5-brompyrimidin (9,00 g, 51,7 mmol) ve směsi tetrahydrofuran/terc-butanol (1:1, 100 ml) se vystaví působení di-terc-butyl-dikarbonátu (34,0 g, 156,0 mmol) a Ν,Ν-dimethylaminopyridinu (3,00 g, 24,5 mmol). Reakční ·· ·· • · · ·· · · · · směs se nechá při teplotě okolí přes noc a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se rozdělí mezi dichlormethan a vodu a pH se upraví na hodnotu 4 pomocí 1M kyseliny chlorovodíkové. Roztok se extrahuje dichlormethanem, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se suspenduje v hexanu a zfiltruje, aby se dostal 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl) amino ]-5-brompyrimidin (15,0 g, 77 %).
(b) 2-ΓΝ,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino1-5-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)pyrimidin
Roztok 2-[Ν,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-brompyrimidinu (16,0 g, 45,0 mmol), terc-butyldimethyltributylstannylmethoxysilanu (20,5 g, 47,1 mmol) a bis(trifenylfosfin)palladium(II)dichloridu (1,00 g,
1,40 mmol) v 1,2-dichlorethanu (50 ml) se míchá při zpětném toku přes noc. Přidá se další bis(trifenylfosfin)palladium(II)dichlorid (1,00 g, 1,40 mmol) a roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 8 hodin. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se diethylether (200 ml) a potom nasycený vodný roztok fluoridu draselného (50 ml). Směs se míchá intenzivně po dobu 60 minut a zfiltruje. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, 1:99) se dostane 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)pyrimidin (10,2 g, 55 %).
(c) 2-Γ Ν,N-bis(terc-Butoxykarbonyl)amino]-5-hydroxymethvlpyrimidin
Tetrabutylamoniumfluorid (15,3 g, 48,6 mmol) se přidá do roztoku 2-[Ν,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1—5—(terc-butyldimethylsilanyloxymethyl)pyrimidinu (10,0 g, 24,3 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml) a míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se voda a produkt se extrahuje chloroformem. Organická fáze se vysuší a odpaří za sníženého ·· • · · • · • · • * tlaku. Velmi rychlou chromatografií (methanol/dichlormethan, 2,5:77,5) se dostane 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]-5-hydroxymethylpyrimidin (4,20 g, 53 %).
(d) 5-Brommethyl-2-ΓN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino1pyrimidin
Trifenylfosfin (2,71 g, 10,73 mmol) a tetrabrommethan (4,89 g, 14,8 mmol) se přidají do roztoku 2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl ) amino ]-5-hydroxymethylpyrimidinu (3,20 g, 9,83 mmol) v dichlormethanu (30 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny a potom se zředí dichlormethanem. Organická fáze se promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (dichlormethan) se dostane 5-brommethyl-2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin (2,55 g, 67 %).
(e) Diethylester 2-(2-ΓΝ,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin-5-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok diethyl-malonátu (0,704 ml, 4,64 mmol) v dimethylformamidu (2 ml) se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (200 mg, 4,64 mmol, 55% v minerálním oleji) v dimethylformamidu (4 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Reakční směs se míchá po dobu 30 minut a po kapkách se přidá roztok 5-brommethyl-2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidinu (1,5 g, 3,86 mmol) v dimethylformamidu (4 ml).
Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, 3:2) se dostane diethylester 2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin-5-ylmethyl)malonové kyseliny (0,87g, 40 %).
(f) Monoethylester 2-(2-rN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin-5-ylmethyl)malonové kyseliny • ft ftft»·
- 75 - ·· · • ·
Roztok hydroxidu draselného (106 mg, 1,88 mmol) v ethanolu (2 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino)pyrimidin-5-ylmethyl)malonové kyseliny (0,80 g, 1,71 mmol) ve směsi ethanol/methylenchlorid (2:1, 12 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a přidá se ethyl-acetát. Směs se promyje 0,5M kyselinou chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal monoethylester 2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino)pyrimidin-5-ylmethyl)malonové kyseliny (0,67 g, 89 %).
(g) Ethylester 2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino)Ovrimidin-5-ylmethyl)akrylové kyseliny
Diethylamin (0,124 ml, 1,69 mmol) se přidá po kapkách do roztoku monoethylesteru 2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino)pyrimidin-5-ylmethyl)malonové kyseliny (0,62 g,
1,41 mmol) a formaldehydu (160 mg, 2,0 mmol, 37% roztok ve vodě) v methylenchloridu (15 ml) při 0 °C v atmosféře argonu Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje vodou, hydrogenuhličitanem sodným a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový ethylester
2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino)pyrimidin-5-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,54 g, 94 %).
(h) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2~rN,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino lovrimidin-5-yl )pro-pionové kyseliny
Triethylamin (0,189 ml, 1,35 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin-5-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,53 g, 1,30 mmol) v thiooctové kyselině (13 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 40 hodin. Přidá se ethyl-acetát a roztok se promyje uhličitanem sodným « ·« ·
a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 5:1 až 1:1) se dostane ethylester 2-acetylsulfanyl methy1-3-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbony1)amino]pyrimid in-5-yl)propionové kyseliny (0,56 g, 89 %).
(i) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-aminopyrimidin-5-yl)propionové kyseliny
Trifluoroctová kyselina (1,5 ml) se přidá do roztoku ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-[N,N-bis(terc-butoxykarbonyl)amino]pyrimidin-5-yl)propionové kyseliny (225 mg, 0,46 mmol) v methylenchloridu (1,5 ml). Reakční směs se míchá po dobu 120 min a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví (172 mg, 94 %) ve formě soli s trifluoroctovou kyselinou.
ΤΗ NMR (500 MHz, CD3OD): delta 1,22 (t, 3H) , 2,35 (s, 3H) , 2,80-3,00 (m, 3H) , 3,00-3,22 (m, 2H), 4,13 (q, 2H), 8,43 (s 2H) .
MS (+) 284 (M+l).
Příklad 20
2-(6-Aminopyridin-3-vlmethyl)-3-merkaptomáselná kyselina (a) Ethylester 3-(6-terc-butoxvkarbonylaminopyridin-3-vl)-2-(diethoxyfosforyl)propionové kyseliny
Do suspenze hydridu sodnho (1,17 g, 60% v minerálním oleji,
29,3 mmol) v dimethylformamidu (70 ml) se přidá triethylfosfonacetát (6,01 g, 26,82 mmol) při 0 °C. Reakční směs se míchá při 0 °C po dobu 0,5 hodiny. Do reakční směsi se přidá terc-butylester (5-brommethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (7,0 g, 24,38 mmol) při 0 °C a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin.
* ··
Reakce se zastaví pomalým přidáním nasyceného vodného roztoku chloridu amonného (70 ml). Směs se extrahuje ethyl-acetátem, promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát, gradient 1:0 až 1:1 až 0:1), aby se dostal ethylester 3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-(diethoxyfosforyl)propionové kyseliny (5,1 g, 50 %).
(b) Ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)but-2-enové kyseliny
Do suspenze hydridu sodného (278,8 mg, 60% v minerálním oleji, 6,97 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml) při 0 °C se přidá roztok ethylesteru 3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-y1)-2-(diethoxyfosfory1)propionové kyseliny (2,5 g, 5,81 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml). Reakční směs se míchá při 0 °C po dobu 1 hodiny. Do reakční směsi se přidá acetaldehyd (512 mg, 11,6 mmol) po kapkách při 0 °C. Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti a potom míchá po dobu 16 hodin. Do reakční nádoby se potom přidá acetaldehyd (2,0 g) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu dalších 16 hodin. Reakce se ukončí pomalým přidáním nasyceného vodného roztoku chloridu amonného (30 ml). Směs se extrahuje ethyl-acetátem, promyje roztokem chloridu sodného a vysuší, aby se dostal surový produkt. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 1:8), aby se dostal ethylester ethyl2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)but-2-enové kyseliny jako směs izomerů (1,1 g, 60 %).
(c) Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopvridin-3-ylmethvl)máselné kyseliny
Do thiooctové kyseliny (15 ml) se přidá triethylamin (1,5 g,
14,8 mmol) a ethylester ethyl-2-(6-terc-butoxykarbonylamino78 pyridin-3-ylmethyl)but-2-enové kyseliny (920 mg, 2,9 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs se míchá při 40 až 45 °C po dobu 7 dnů (další thiooctová kyselina (1,5 ml) se přidává do reakční směsi každé dva dny). Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a potom zředí ethyl-acetátem (50 ml). Organická vrstva se oddělí, promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší. Spojené organické vrstvy se odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí následně třikrát sloupcovou chromatografií (dichlormethan, ethyl-acetát/hexan, 1:5 a aceton/hexan, 1:8), aby se dostal ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny ve formě diastereomerní směsi (780 mg,
%). Diastereomerní směs se oddělí za použití preparativní chirální chromatografie podle způsobu popsaného dále, aby se dostaly čtyři izomery ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/A, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/C a ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/D.
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/D
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/D se oddělí ze směsi ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/A, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B, ethylesteru
3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yImethy1)máselné kyseliny/C a ethylesteru • · · · • · • · · · • ·
3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/D na chirálním OJ sloupci eluováním směsí isohexan:acetonitril:isopropylalkohol:diethylamin (99:0,5:0,5:0,1). Přebytek enantiomeru je >99% při měření HPLC za použití sloupce chiralpak OJ a eluováním směsí isohexan:ethanol:diethylamin (99:1:0,5).
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/A
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/A se oddělí ze směsi ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/A, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yImethy1)máselné kyseliny/B a ethylesteru
3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/C na chirálním OJ sloupci eluováním směsí isohexan:1-propanol:diethylamin (98:2:0,1). Přebytek enantiomeru je >99% při měření HPLC za použití sloupce chiralpak OJ a eluováním směsí isohexan:ethanol:diethylamin (99:1:0,5) .
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyrldin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B se oddělí ze směsi ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B a ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/C na chirálním OJ sloupci eluováním směsí hexan:ethanol:diethylamin (99:1:0,5). Přebytek enantiomeru je >99% při měření HPLC za použití sloupce chiralpak OJ a eluováním směsí isohexan:ethanol: • · • · « 4 « 4 · 9 · · · · ···· · 4 4 Λ 4 ·
4 4 « · 4 ·
4 · 44 4444 diethylamin (99:1:0,5).
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/C
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/C se oddělí ze směsi ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B a ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin” -3-ylmethyl)máselné kyseliny/C na chirálním OJ sloupci eluováním směsí hexan:ethanol:diethylamin (99:1:0,5). Přebytek enantiomerů je 87% při měření HPLC za použití sloupce chiralpak OJ a eluováním směsí isohexan:ethanol:diethylamin (99:1:0,5).
(d) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptomáselná kyselina/A
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/A (45 mg, 0,11 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 28,4 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
τΗ NMR (400 MHz, D2O): delta 7,89 (d, ÍH), 7,71 (s, ÍH),
7,03 (d, ÍH), 3,23-3,33 (m, ÍH), 3,1-3,2 (m, ÍH), 2,75-2,9 (m, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS(+) 227(M+1).
(e) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptomáselná kyselina/B » · · · » • · · · • · · · • · ··»·
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/B (55 mg, 0,14 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 39,4 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR' (400 MHz, D2O): delta 7,89 (d, 1H) , 7,71 (s, 1H),
7,03 (d, 1H), 3,23-3,33 (m, 1H), 3,1-3,2 (m, 1H), 2,75-2,9 (rn, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS( + ) 227(M+1).
(f) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptomáselná kyselina/C
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)máselné kyseliny/C (9 mg, 0,02 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (0,5 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 6,4 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR (400 MHz, D20): delta 7,82-7,9 (m, 1H), 7,67 (široký singlet, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,16-3,28 (m, 1H), 2,96-3,04 (m, 1H), 2,76-2,86 (m, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS(+) 227 (M+l).
(g) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptomáselná kyselina/D
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yImethyl)máselné kyseliny/D (9 mg,
0,02 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (0,5 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 6,8 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR (400 MHz, D20): delta 7,82-7,9 (m, 1H), 7,67 (široký singlet, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,16-3,28 (m, 1H), 2,96-3,04 (m, 1H), 2,76-2,86 (m, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS( + ) 227 (M+l).
Příklad 21
6-(Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptopentanová kyselina (a) Ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pent-2-enové kyseliny
Do roztoku hydridu sodného (290,5 mg, 60% v minerálním oleji, 7,5 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml) při 0 °C se přidá roztok ethylesteru 3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-(diethoxyfosforyl)propionové kyseliny (2,5 g, 5,81 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml). Reakční směs se míchá při 0 °C po dobu 1 hodiny. Do reakční směsi se přidá po kapkách propionaldehyd (725 mg, 12,5 mmol) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Propionaldehyd (2,5 g) se přidá a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu dalších 16 hodin. Reakce se ukončí pomalým přidáním nasyceného vodného roztoku chloridu amonného (30 ml). Směs se extrahuje ethyl-acetátem, promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií (ethyl-acetát/hexan, 1:8), aby se dostal ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pent-2-enové kyseliny jako směs izomerů (1,2 g, 60 %).
• · · · • » ♦ · (b) Ethylester 3-acetvlsulfanvl-2-(6-terc-butoxvkarbonylaminopyridin-3-vlmethvl)pentanové kyseliny
Do thiooctové kyseliny (15 ml) se přidá triethylamin (1,8 g, 17 mmol) a ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pent-2-enové kyseliny (1,1 g, 3,3 mmol) při teplotě místnosti. Reakční směs se míchá při 65°C po dobu 8 dnů (další thiooctová kyselina (1,5 ml) se přidá do reakční směsi každé dva dny). Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a potom zředí ethy1-acetátem. organická vrstva se oddělí, promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší. Spojené organické vrstvy se odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí následně dvakrát sloupcovou chromatografií (dichlormethan a ethyl-acetát/hexan, 1:5), aby se dostalo 350 mg směsi požadovaných produktů a nezreagované výchozí látky. Surový produkt se dále čistí HPLC chromatografií (ethanol/hexan, 1:9) a potom sloupcovou chromatografií (aceton/hexan, 1:8), aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě diastereomerní směsi (180 mg, 18 %). Diastereomerní směs ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny se oddělí za použití preparativní chirální chromatografie podle způsobu popsaného dále, aby se dostaly čtyři isomery ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethylJpentanové kyseliny/A, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny/B, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny/C, ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny/D. Diastereomerní směs se oddělí na dvou sloupcích chiralcel OJ vzájemně spojených, eluováním směsí isohexan:isopropylalkohol:methanol • · • · • · * ·
(97:1:2). Přebytek enantiomeru se měří analytickou HPLC za použití dvou sloupců chiralcel OJ vzájemně spojených, eluováním směsí isohexan:isopropylalkohol:methanol (97:1:2). V případě ethylesterů 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny A až C je nalezený přebytek enantiomeru > 99%, zatímco v případě ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny D je 97%.
(c) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptopentanová kyselina/A
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny/A (50,4 mg, 0,12 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 33,9 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR (500 MHz, D20): delta 7,87 (dd, 1H), 7,67 (d, 1H),
7,0 (d, 1H), 3,02-3,16 (m, 2H), 2,79-2,87 (m, 2H),
1,79-1,88 (m, 1H), 1,53-1,64 (m, 1H), 1,07 (t, 3H).
MS(+) 241 (M+l).
(d) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethvl)-3-merkaptopentanová kyselina/B
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)pentanové kyseliny/B (51,6 mg, 0,13 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu
1,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 34,7 mg « ·
• · · · · · · tt » ·· ·«·· sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
XH NMR (500 MHz, D20): delta 7,87 (dd, 1H) , 7,67 (d, 1H) , 7,0 (d, 1H), 3,02-3,16 (m, 2H), 2,79-2,87 (m, 2H), 1,79-1,88 (m, 1H), 1,53-1,64 (m, 1H), 1,07 (t, 3H).
MS( + ) 241 (M+l).
(e) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkaptopentanová kyselina/C
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yImethyl)pentanové kyseliny/C (4,3 mg, 0,01 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu
1,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 2,9 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
ΧΗ NMR (500 MHz, D20): delta 7,86 (dd, 1H) , 7,66 (široký singlet, 1H), 7,0 (d, 1H), 2,94-3,04 (m, 2H), 2,74-2,9 (m, 2H), 1,88-1,97 (m, 1H), 1,55-1,66 (m, 1H), 1,05 (t, 3H). MS(+) 241(M+l).
(f) 2- (6-Aminopyridin-3-vlmethvl)-3-merkaptopentanová kyselina/D
Roztok ethylesteru 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yImethyl)pentanové kyseliny/C (19,2 mg, 0,05 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu
1,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 12,9 mg sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli.
1H NMR (500 MHz, D2O) : delta 7,86 (dd, 1H), 7,66 (široký singlet, 1H), 7,0 (d, 1H), 2,94-3,04 (m, 2H), 2,74-2,9 (m, 2H), 1,88-1,97 (m, 1H) , 1,55-1,66 (m, 1H), 1,05 (t, 3H). MS(+) 241 (M+l).
Příklad 22
3-(6-Amino-5-chlorpvridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) Ethylester 6-amino-5-chlornikotinové kyseliny
N-Chlorsukcinimid (21,7 g, 0,162 mol) se přidá do suspenze ethylesteru 6-amino-nikotinové kyseliny (18,0 g, 0,108 mol) v acetonitrilu (270 ml) a směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 2 hodin. Reakční směs se zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se rozpustí v dichlormethanu, promyje vodou a vysuší. Velmi rychlou chromatografií (2,5% methanol v dichlormethanu) se dostane čistý ethylester 6-amino-5-chlornikotinové kyseliny (17,23 g, 79 %).
(b) Ethylester 6-bis(terc-butoxykarbonyl)amino-5-chlornikotinové kyseliny
N,N-dimethylaminopyridin (0,11 g, 0,9 mmol) a (Boc)20 (21,54 g, 99 mmol) se přidají do roztoku ethylesteru 6-amino-5-chlornikotinové kyseliny (9,0 g, 45 mmol) v dichlormethanu (250 ml). Reakční směs se míchá po dobu 24 hodin. Během reakční doby se přidá N,N-dimethylaminopyridin (0,02 ekviv.) a (Boc)20 (3 x 0,5 ekviv.). Reakční směs se promyje vodou a vysuší. Surový produkt se promyje hexanem, aby se dostal čistý ethylester 6-bis(terc-butoxykarbonyl)amino-5-chlornikotinové kyseliny (11,87 g, 66 %).
(c) terc-Butylester (3-chlor-5-hydroxymethylpyridin-2-yl)87
• · · · · · ·· · ·· · · · · karbanové kyseliny
Hydrid hlinitolithný (2,4 g, 63,2 mmol) se přidá po dávkách během 3,5 hodiny do roztoku ethylesteru 6-bis(terc-butoxykarbonyl )amino-5-chlornikotinové kyseliny (11,5 g, 28,6 mmol) v tetrahydrofuranu (70 ml) př 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, poté se opatrně přidá nasycený roztok chloridu amonného a potom voda. Roztok se zfiltruje, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový terc-butylester (3-chlor-5-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (5,86 g, 79 %).
(d) terc-Butylester (5-brommethyl-3-chlorpvridin-2-vl)karbamové kyseliny
Trifenylfosfin (161 g, 9,7 mmol) a potom tetrabrommethan (4,58 g, 13,8 mmol) se přidají do suspenze terc-butylesteru (3-chlor-5-hydroxymethylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (2,38 g, 9,2 mmol) v dichlormethanu (60 ml) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 5 hodin a odpaří za sníženého tlaku. Přidá se acetonitril (40 ml) a směs se udržuje při teplotě -20 °C přes noc. Směs se potom zfiltruje a krystalický filtrát promyje chladným acetonitrilem.
Filtrát se odpaří za sníženého tlaku a další výtěžek bromidu se získá způsobem popsaným výše. Získá se terc-butylester (5-brommethyl-3-chlorpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (1,86 g, 63 %) ve formě bílých krystalů.
(e) Diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Diethyl-malonát (1,87 ml, 12,31 mmol) se přidá do suspenze hydridu sodného (0,54 g, 12,31 mmol, 55%) ve vysušeném dimethylformamidu (15 ml) při -8 °C. Tato směs se míchá po dobu 15 minut předtím, než se přidá po kapkách do roztoku terc-butylesteru (5-brommethyl-3-chlorpyridin• · ♦ · ·
-2-yl)karbamové kyseliny (3,30 g, 10,26 mmol) ve vysušeném dimethylformamidu (50 ml) při 0 °C. Výsledný roztok se míchá po dobu 40 minut při 0 °C. Potom se přidá opatrně chlorid amonný (5 ml, nasycený roztok). Mícháním při teplotě místnosti přes noc a odpařením za sníženého tlaku se dostane odparek, který se rozpustí ve směsi voda/dichlormethan.
Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem a spojené organické extrakty se vysuší, zfiltrují a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) se dostane diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (2,45, 60 %) ve formě lepkavého jasného oleje.
(f) Monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,44 g, 6,72 mmol, 85%) v ethanolu (5 ml) se přidá do roztoku diethylesteru
2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (2,45 g, 6,11 mmol) v ethanolu (25 ml) a methylenchloridu (10 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a odparek se rozpustí ve vodě. Vodná vrstva se promyje etherem, okyselí na pH 4 1M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje methylenchloridem a ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Filtrací a odpařením za sníženého tlaku se dostane surový produkt, který se čistí velmi rychlou chromatografií (10% methanol v dichlormethanu), aby se dostal monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,41 g, 62 %) ve formě žlutobílé sklovité pěny.
(g) Ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny • · · · ·
Diethylamin (3,67 ml, 3,67 mmol) se přidá po kapkách, následován vodou (2,5 ml) a dichlormethanem (2,5 ml) do směsi monoethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,40 g, 3,64 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,29 ml, 3,75 mmol) v dichlormethanu (2 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 20 hodin při teplotě místnosti a potom se vylije na směs ledu a vody a extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se promyje 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (1 až 2,5% methanol v dichlormethanu) se dostane ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,81 g, 65 %).
(h) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonvlamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny
Thiooctová kyselina (4 ml) se přidá do suspenze ethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,732 g, 2,16 mmol) a triethylaminu (0,31 ml, 2,23 mmol) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti v atmosféře argonu přes noc, vylije na směs ledu a vody a extrahuje dichlormethanem. Organická fáze se promývá nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, dokud se neukončí vývoj plynu a potom se vysuší. Surový produkt se čistí dvakrát velmi rychlou chromatografií (dichlormethan, až 2,5% methanol v dichlormethanu a hexan/ethyl-acetát, gradient 5:2 až 1:1), aby se dostal čistý ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny (0,79 g, 87 %).
(i) 3-(6-Amino-5-chlorpyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina
Roztok ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-ylmethyl)90 ·· ··<·· ·· · · • · · ♦ · · • · · · · • · · · · · • · · · · · ·· · · ♦ · · ♦ · propionové kyseliny (55 mg, 0,132 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (4 ml) se zahřívá při zpětném toku po dobu 90 minut. Reakční směs se ochladí a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (36mg, 96,4 %).
1H NMR (400 MHz, D2O): delta 2,70-2,97 (m, 5H), 7,73 (s, 1H), 8,09 (s, 1H).
MS (+) 248 (M+l).
Příklad 23
3-(6-Amino-5-hydroxvmethvlpvridin-3-yl-2-merkaptomethvlpropionová kyselina (a) Ethylester 6-bis(terc-butoxykarbonyl)amino-5-vinylnikotinové kyseliny
Směs ethylesteru 5-brom-6-bis(terc-butoxykarbonyl)aminonikotinové kyseliny (4,50 g, 10,1 mmol), vinyltributyltinu (3,52 g, 11,1 mmol) a tetrakispalladiumtrifenyfosfinu (0,50 g, 0,40 mmol) v tetrahydrofuranu (15 ml) se míchá při zpětném toku po dobu 24 hodin. Přidá se tetrakispalladiumtrifenyfosfin (0,50 g) a po 24 hodinách při zpětném toku se reakční směs ochladí a zředí dichlormethanem (100 ml). Přidá se nasycený vodný roztok fluoridu draselného (25 ml) a roztok se míchá po dobu 1 hodiny. Přidá se voda a produkt se extrahuje dichlormethanem, organická fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) se dostane ethylester 6-bis(terc-butoxykarbonyl)amino-5-vinylnikotinové kyseliny (3,20 g, 81 %).
(b) terc-Butylester (5-hydroxvmethyl-3-vinylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny • · · · • · · · ·
DIBAL (25 ml, IM v hexanu) se přidá po kapkách do roztoku ethylesteru 6-bis(terc-butoxykarbonyl)amino-5-vinylnikotinové kyseliny (2,00 g, 5,1 mmol) v tetrahydrofuranu (40 ml) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Opatrně se přidá nasycený roztok chloridu amonného a potom voda a směs se odpaří za sníženého tlaku. Odparek se suspenduje v 5% methanolu v dichlormethanu a zfiltruje přes silikagel. Filtrát se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester (5-hydroxymethyl-3-vinylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (1,00 g, 78 %).
(c) terc-Butylester (5-brommethvl-3-vinvlpyridin-2-vl)karbamové kyseliny
Do míchané suspenze terc-butylesteru (5-hydroxymethyl-3-vinylpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (10,0 g, 40,0 mmol) v dichlormethanu (150 ml) a tetrahydrofuranu (60 ml) se přidá trifenylfosfin (11,5 g, 44,0 mmol) a potom tetrabrommethan (19,9 g, 60,0 mmol) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny a potom odpaří za sníženého tlaku. Přidá se acetonitril (100 ml) a směs se udržuje při teplotě -20 °C přes noc. Směs se potom zfiltruje a krystalický filtrát promyje chladným acetonitrilem.
Produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu), aby se dostal terc-butylester (5-brommethy1-3-chlorpyridin-2-yl)karbamové kyseliny (4,5 g, 36 %).
(d) Diethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Diethyl-malonát (2,30 g, 14,3 mmol) se přidá do suspenze hydridu sodného (0,61 g, 14,3 mmol, 55%) ve vysušeném dimethylformamidu (75 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 15 minut a potom se po kapkách přidá do roztoku terc-butylesteru (5-brommethyl-3-chlorpyridin-2-yl)• · * · • · · · karbamové kyseliny (4,50 g, 14,3 mmol) ve vysušeném dimethylformamidu (100 ml) při 0 °C. Vzniklý roztok se míchá po dobu 40 minut při 0 °C a potom se opatrně přidá nasycený roztok chloridu amonného (30 ml). Odpařením za sníženého tlaku se dostane odparek, který se rozpustí ve směsi voda/dichlormethan. Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem a spojené extrakty se vysuší, zfiltrují a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) se dostane diethylester 2—(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (4,30 g, 77 %).
(e) Monoethylester 2-(6-terc-butoxvkarbonvlamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,71 g, 12,6 mmol, 85%) v ethanolu (10 ml) se přidá do roztoku diethylesteru
2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (4,30 g, 11,0 mmol) v ethanolu (25 ml) a dichlormethanu (10 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 6 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a odparek se rozpustí ve vodě. Vodná vrstva se promyje etherem, okyselí na pH 4 1M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje dichlormethanem. Organická vrstva se promyje vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Filtrací a odpařením za sníženého tlaku a potom velmi rychlou chromatografií (10% methanol v dichlormethanu) se dostane monoethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (3,05 g, 76 %).
(f) Ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinvlpyridin-3-vlmethyl)akrylové kyseliny
Diethylamin (0,85 ml, 8,80 mmol) se přidá po kapkách do směsi monoethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (3,05 g, • · · · a ·
8,37 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,71 g, 8,80 mmol) v dichlormethanu (2 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti a potom se vylije na směs ledu a vody a extrahuje dichlormethanem. Organická vrstva se promyje 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysuší.
Velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) se dostane ethylester 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethy1)akrylové kyseliny (1,70 g, 61 %).
(g) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-yljpropionové kyseliny
Thiooctová kyselina (4 ml) se přidá do suspenze ethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-ylmethyl)akrylové kyseliny (0,73 g, 2,16 mmol) v triethylaminu (0,31 ml, 2,23 mmol) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti v atmosféře argonu přes noc, vylije se na směs ledu a vody a extrahuje dichlormethanem. Organická fáze se promývá nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, dokud neustane tvorba plynu a potom se vysuší. Velmi rychlou chromatografií (1% methanol v dichlormethanu) se dostane ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-chlorpyridin-3-yl)propionové kyseliny (0,51 g, 70 %).
(h) Ethylester 3-(6-terc-butoxvkarbonvlamino-5-hydroxymethylpyridin-3-yl)merkaptomethylpropionové kyseliny
Ozon se nechá probublávat roztokem ethylesteru
2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-vinylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (0,65 g, 1,60 mmol) v ethanolu (25 ml) při -78 °C. Potom se nechá probublávat směsí kyslík po dobu 5 minut a potom dusík po dobu 15 minut. Směs tetrahydroboritanu sodného (0,30 g, 8,00 mmol) ve vodě se opatrně přidá do směsi při -78 °C a reakční směs se ohřeje na 0 °C. Míchání pokračuje po dobu 3 hodin.
»» ··· · »» ··«· · · • · t · · · • · · · ·
Přidá se aceton (10 ml) a reakční směs se odpaří na 1/3 původního objemu. Přidá se 50% vodný roztok chloridu sodného a směs se extrahuje dichlormethanem, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový ethylester
3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-hydroxymethylpyridin-3-yl)merkaptomethylpropionové kyseliny (0,38 g, 63 %).
(i) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-hydroxymethvlpyridin-3-vl)propionové kyseliny
Směs surového ethylesteru 3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-hydroxymethylpyridin-3-yl)merkaptomethylpropionové kyseliny (0,38 g, 1,0 mmol) a hydrogenuhličitanu draselného (0,11 g, 1,1 mmol) v acetanhydridu (1 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 5 hodin. Potom se přidá nasycený roztok chloridu amonného a voda. Směs se extrahuje dichlormethanem, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií (dichlormethan, 2,5% methanol v dichlormethanu) se dostane ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3- ( 6-terc-butoxykarbonylamino-5-hydroxymethylpyridin-3-yl)propionové kyseliny (0,23 g, 60 %).
(j) 3—(6—Amino-5—hydroxvmethvlpyridin—3—yl)-2-merkapto— methylpropionová kyselina
Roztok ethylesteru 3-(6-terc-butoxykarbonylamino-5-hydroxymethylpyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpropionové kyseliny (50 mg, 135 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (2 ml) se zahřívá při zpětném toku po dobu 60 minut. Reakční směs se ochladí a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (37mg, 98,3 %).
1H NMR (400 MHz, D20): delta 2,70-2,95 (m, 5H), 4,65 (s,
2H), 7,68 (s, IH), 7,88 (s, IH).
• φ»»· ·* · * ·· * •« * φ φ φ » ··« ·· « * « • φφφ «« * φφφ φ φ φ « · φ
MS (+) 244 (Μ+1).
Příklad 24
2-Merkaptomethyl-3-pyrrolidin-3-vlpropionová kyselina (a) (l-Benzylpyrrolidin-3-yl)methanol
Red-Al (160 ml 3,5M roztoku v toluenu, 560 mmol) se přidá do roztoku l-benzyl-5-oxo-pyrrolidin-3-karboxylové kyseliny (20 g, 91 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (650 ml) v atmosféře argonu. Reakční směs se zahřívá pod zpětným tokem po dobu 2,5 hodiny a potom se vylije na směs drceného ledu a hydroxidu sodného (20%). Fáze se oddělí, vodná fáze se extrahuje toluenem a spojené organické fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 17,9 g surového produktu ve formě žlutého oleje.
XbJ_terc^Bu/tylester_3^hydrOxyTneth3(lpryrrplidin^l^karboxylpvé kyseliny
10% palladium na uhlí (6,1 g) a amoniumformiát (lOg, 158 mmol) se přidají do roztoku (l-benzylpyrrolidin-3-yl)methanolu (6,1 g, 32 mmol) v methanolu (220 ml) v atmosféře argonu. Po zahřívání při zpětném toku po dobu 15 minut se reakční směs zfiltruje za horka přes vrstvu rozsivkové zeminy (Celíte). Rozsivková zemina (Celíte) se dále promyje methanolem a spojené organické fáze se odpaří. Odparek se rozpustí v tetrahydrofuranu (35 ml) a vodě (35 ml), roztok se ochladí na teplotu 0 °C a přidá se uhličitan draselný (22 g, 159 mmol) a di-terc-butyl-dikarbonát (6,95 g, 32 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Tetrahydrofuran se odstraní za sníženého tlaku, přidá se voda a vodná fáze se extrahuje ethyl-acetátem. Spojené organické fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 4,64 g surového produktu. Velmi rychlou »4 ·9·* • » 4 » · α 4 4 9 • « * · ·
1,1 4 * 4 9
4« 4 • » · » « · «
4 »4 » «·<
· 9 • 4 « ®44 ϊ · 4 t· · chromatografií (heptan/ethyl-acetát: gradient 1/0 až 68/32) surového produktu se dostane terc-butylester 3-hydroxy— methylpyrrolidin-1-karboxylové kyseliny (3,82 g, 60 %) ve formě bezbarvého oleje.
(c) terc-Butylester 3-trifluormethansulfonyloxymethvlpyrrolidin-l-karboxylové kyseliny
Methansulfonylchlorid (0,4 ml, 5,17 mmol) se přidá po kapkách do roztoku terc-butylesteru 3-hydroxymethylpyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (1 g, 4,97 mmol) a triethylaminu (1,04 ml, 7,46 mmol) v dichlormethanu (15 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Po filtraci se přidá dichlormethan a organická fáze se promyje 1M kyselinou chlorovodíkovou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester 3-trifluormethansulfonyloxymethylpyrrolidin-1-karboxylové kyseliny (1,4 g, 97 %).
(d) terc-Butylester 3-brommethylpyrrolidin-l-karboxylové kyseliny
Směs terc-butylesteru 3-trifluormethansulfonyloxymethylpyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (3,85 g, 13,8 mmol) a lithiumbromidu (3,61 g, 42 mmol) ve vysušeném acetonu (30 ml) se zahřívá při zpětném toku přes noc. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti, zfiltruje a odpaří. Odparek se rozpustí v dichlormethanu a promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 6 g surového produktu. Čištěním velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát: gradient 1/0 až 68/32) se dostane terc-butylester 3-brommethylpyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (2,84 g, 78 %) ve formě bezbarvého oleje.
(e) Diethylester 2-(l-terc-butoxykarbonvlpyrrolidin-3-ylmethyl)malonové kyseliny • · · ·
Diethyl-malonát (1,93 ml, 12,7 mmol) se přidá po kapkách do roztoku hydridu sodného (60%, 0,51 g, 12,8 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (15 ml) při 0 °C. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny a potom se přidá při zpětném toku do směsi terc-butylesteru 3-brommethylpyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (2,8 g, 10,6 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (30 ml). Reakční směs se dále zahřívá při zpětném toku po dobu 19 hodin a potom odpaří téměř do sucha. Přidá se voda (11) a produkt se extrahuje dichlormethanem, spojené organické fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 3,3 g surového produktu. Čištěním velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát: gradient 1/0 až 68/32) se dostane diethylester 2-(l-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,64 g, 45 %).
(f) Monoethylester 2-(l-terc-butoxvkarbonylpvrrolidin-3-vlmethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,26 g, 4,6 mmol) v ethanolu (7 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-(1-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (1,52 g,
4,4 mmol) v ethanolu (7 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, odpaří za sníženého tlaku a odparek se rozpustí ve vodě (500 ml). Vodná vrstva se promyje diethyletherem, okyselí na pH 3 0,5M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje diethyletherem. Organická fáze se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal monoethylester 2-(l-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (l,13g, 81 %).
(q) terc-Butylester 3-(2-ethoxykarbonylallyl)pyrrolidin-1-karboxylové kyseliny
Diethylamin (0,34 ml, 3,3 mmol) se přidá do směsi monoethylesteru 2-(1-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-3-ylmethyl)malonové kyseliny (0,69 g, 2,19 mmol) ve 36% vodném roztoku formaldehydu (0,27 ml, 3,5 mmol), dichlormethanu (1,6 ml) a vody (1,6 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, vylije na směs ledu a vody (500 ml) a extrahuje dichlormethanem. Spojené organické fáze se promyjí 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester 3-(2-ethoxykarbonylallyl)pyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (0,55 g, 87 %) ve formě bezbarvého oleje.
(h) terc-Butylester 3-(3-Acetylsulfanvl-2-ethoxvkarbonylpropyl)pyrrolidin-l-karboxylové kyseliny
Thiooctová kyselina (5 ml), ochlazená na 0 °C, se přidá do směsi terc-butylesteru 3-(2-ethoxykarbonylallyl)pyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (0,72 g, 2,54 mmol) a triethylaminu (0,37 ml, 2,67 mmol) při 0 °C. Reakční směs se míchá při 0 °C po dobu 30 minut, při teplotě místnosti po dobu 23 hodin a potom se vylije na směs ledu a vody (400 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem, spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát: gradient 1/0 až 68/32), aby se dostal terc-butylester 3-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonylpropyl)pyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (0,72 g, 79 %) ve formě oleje.
(i) 2-Merkaptomethyl-3-pyrrolidin-3-vlpropionová kyselina
Roztok terc-butylesteru 3-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonylpropyl)pyrrolidin-l-karboxylové kyseliny (0,52 g, 1,45 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (15 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1 • · hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala diasteromerní směs sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (0,33 g, 100 %).
1H NMR (500 MHz, D20): delta 1,60-1,92 (m, 3H), 2,19-2,32 (m, ÍH), 2,32-2,42 (m, ÍH), 2,66-2,83 (m, 3H), 2,84-2,96 (m, ÍH), 3,23-3,32 (m, ÍH), 3,40-3,58 (m, 2H).
MS (+) 190 (M+l).
Příklad 25
3-(Cis-4-aminocyklopent-2-enyl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) 4-terc-Butoxvkarbonvlaminocvklopent-2-enylmethvlester cis-methansulfonové kyseliny
Methansulfonylchlorid (0,76 ml, 9,8 mmol) se přidá do roztoku terc-butylesteru cis-(4-hydroxymethylcyklopent-2-enyl)karbamové kyseliny (2 g, 9,4 mmol) a triethylaminu (1,96 ml, 14,1 mmol) v dichlormethanu (30 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Po filtraci se přidá dichlormethan a organická fáze se promyje 1M kyselinou chlorovodíkovou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal 4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enylmethylester cis-methansulfonové kyseliny (2,64 g,
%) .
(b) terc-Butylester cis-(4-brommethylcyklopent-2-enyl)karbamové kyseliny
Směs 4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enylmethylesteru cis-methansulfonové kyseliny (2,51 g, 8,6 mmol) a lithiumbromidu (2,24 g, 25,8 mmol) ve vysušeném acetonu (20 ml) se zahřívá při zpětném toku přes noc. Reakční směs • ·
100 se ochladí na teplotu místnosti, zfiltruje a odpaří. Odparek se rozpustí v dichlormethanu a promyje vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal terc-butylester cis-(4-brommethylcyklopent-2-enylJkarbamové kyseliny (2,23 g, 94 %).
(c) Diethylester 3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyImethyl)malonové kyseliny
Diethyl-malonát (1,29 ml, 8,5 mmol) se přidá do směsi hydridu sodného (60%, 0,34 g, 8,5 mmol) v dimethylformamidu (10 ml). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 15 minut se přidá roztok terc-butylesteru cis-(4-brommethylcyklopent-2-enyl)karbamové kyseliny (1,95 g, 7,1 mmol) v dimethylformamidu (12 ml) a reakční směs se míchá při 60 °C po dobu 19 hodin. Přidá se ethyl-acetát a organická fáze se extrahuje vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 2,44 g surového produktu. Čištěním velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát: gradient 1/0 až 68/32) se dostane diethylester 3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enylmethyl)malonové kyseliny (1,47 g, 58 %).
(d) Monoethylester 3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyImethyl)malonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,19 g, 3,4 mmol) v ethanolu (6 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyImethyl)malonové kyseliny (1,15 g, 3,2 mmol) v ethanolu (6 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, odpaří a přidá se směs ledu a vody (400 ml). Vodná fáze se promyje diethyletherem (emulze vzniklá během extrakce se vystaví působení roztoku chloridu sodného, aby se fáze dobře oddělily), okyselí na pH 3 0,5M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje diethyletherem. Organická fáze se vysuší • · · · • · a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal monoethylester 3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyImethyl)malonové kyseliny (0,86 g, 81 %) ve formě bílých krystalů.
(e) Ethylester 2-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocvklopent-2-enylmethyl)akrylové kyseliny
Diethylamin (0,31 ml, 3,0 mmol) se přidá do směsi monoethylesteru 3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enylmethy1)malonové kyseliny (0,66 g, 2,0 mmol) ve 36% vodném roztoku formaldehydu (0,25 ml, 3,2 mmol), dichlormethanu (1,6 ml) a vody (1,6 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, vylije se na směs ledu a vody (400 ml) a extrahuje diohlormethanem. Během extrakce se oddělení fází podpoří přidáním roztoku chloridu sodného. Spojené organické fáze se promyjí 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 2-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enylmethyl)akrylové kyseliny (0,56 g,
%) ve formě oleje.
(f) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(cis-4-terc-butoxykarbonvlaminocvklooent-2-enyl)propionové kyseliny
Thiooctová kyselina (4 ml), ochlazená na 0 °C, se přidá do směsi ethylesteru 2-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyImethyl)akrylové kyseliny (0,56 g, 1,9 mmol) a triethylaminu (0,28 ml, 2,0 mmol) při 0 °C. Reakční směs se míchá při 0 °C po dobu 30 minut, při teplotě místnosti po dobu 19 hodin a potom se vylije na směs ledu a vody (400 ml). Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem, organická fáze se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 1,7 g surového produktu. Čištěním velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát: gradient 1/0 až 68/32) se dostane ethylester 2-acetylsulfanyImethyl-3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyl)propionové kyseliny (0,46 g, 65 %).
(cr) 3-(Cis-4-aminocyklopent-2-enyl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina
Roztok ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(cis-4-terc-butoxykarbonylaminocyklopent-2-enyl)propionové kyseliny (86 mg, 0,23 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (5 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala diasteromerní směs sloučeniny pojmenované v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (65 mg).
1H NMR (400 MHz, D2O): delta 1,35-1,47 (m, 2H), 1,60-1,72 (m, 1H), 1,74-1,92 (m, 2H), 1,92-2,04 (m, 1H) , 2,67-2,.92 (m, 10H), 4,34-4,43 (m, 2H) , 5,79-5,85 (široký singlet, 2H) ,
6,12 (d, 1H), 6,18 (d, 1H).
Příklad 26
2-Merkaptomethyl-3-piperazin-l-ylpropionová kyselina (a) terc-Butylester 4-(2-ethoxykarbonylallvl)piperazin-1-karboxylové kyseliny
Do roztoku ethylesteru 2-brommethylakrylové kyseliny Cl, 93 g, 10 mmol) v Ν,N-dimethylformamidu (25 ml) se přidá terc-butylester piperazin-l-karboxylové kyseliny (1,86 g, mmol) a potom po kapkách ethyl-diisopropylamin (1,71 ml, 10 mmol). Po míchání po dobu 16 hodin při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní za sníženého tlaku a přidá se voda (50 ml) a dichlormethan (50 ml). Po míchání po dobu 2 minut se vrstvy oddělí, organická vrstva se promyje vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým.
103 -
Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, aby se dostal surový terc-butylester 4-(2-ethoxykarbonylallyl)piperazin-1-karboxylové kyseliny (2,456 g, 82 %).
(b) terc-Butylester 4-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonylpropyl)piperazin-l-karboxylové kyseliny
Do surového terc-butylesteru 4-(2-ethoxykarbonylallyl)piperazin-l-karboxylové kyseliny (2,45 g, 8,2 mmol) se přidá thiooctová kyselina (7,5 ml) v atmosféře argonu. Směs se ochladí na teplotu 0 °C a po kapkách se přidá triethylamin (1,14 ml, 8,2 mmol). Směs se potom míchá při teplotě místnosti po dobu 2 hodin a přidá se thiooctová kyselina (2,5 ml). Míchání pokračuje po dobu 1 hodiny a potom se opatrně přidá nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného až do neutrální reakce a směs se extrahuje třikrát dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se dvakrát promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou roztokem chloridu sodného. Po vysušení síranem sodným se odstraní rozpouštědlo za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií (silikagel, 1,7% methanol v dichlormethanu), aby se dostal terc-butylester
4-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonylpropyl)piperazin-1-karboxylové kyseliny (0,29 g, 94 %).
(c) 2-Merkaptomethyl-3-piperazin-l-vlpropionová kyselina
Do terc-butylesteru 4-(3-acetylsulfanyl-2-ethoxykarbonyl-propyl)piperazin-l-karboxylové kyseliny (0,095 g, 0,25 mmol) se přidá v atmosféře argonu kyselina chlorovodíková (3 ml, 37%) a směs se zahřívá v atmosféře argonu při zpětném toku po dobu 2,5 hodiny. Roztok se odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě dihydrochloridové soli (0,071 g, kvantitat.).
1H NMR (300 MHz, D20): delta 3,86-3,49 (m, 10H), 3,36-3,28
104 ·* (m, 1H), 3,01-2,88 (m, 2H). MS 205 (M+H).
Příklad 27
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpentanová kyselina (a) Diethylester 2-ri-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propylImalonové kyseliny
Do suspenze jodidu měďnatého (5,71 g, 30 mmol) v diethyletheru (120 ml) v atmosféře argonu se přidá za míchání během 15 minut ethylmagnesiumbromid (3M roztok v diethyletheru, 20 ml, 20 mmol) při 0 °C. Po míchání po dobu 5 minut se směs ochladí na teplotu -78 °C a po kapkách se přidá roztok diethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny (5,47 g, 15,0 mmol) v tetrahydrofuranu (60 ml) během 0,5 hodiny. Během této doby se přidá tetrahydrofuran (40 ml). Směs se míchá při -40 °C po dobu 2,5 h. Potom se přidá roztok chloridu amonného (5%) ve vodném roztoku amoniaku (5%) za intenzivního míchání a přístupu vzduchu a směs se ohřeje na teplotu místnosti.
Směs se extrahuje dvakrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí postupně vodným roztokem amoniaku (5%) a roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a odparek se rekrystalizuje ze směsi diisopropyletheru a tetrahydrofuranu (5:1, obj./obj.), aby se dostal diethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propyl]malonové kyseliny (3,23 g, 55 %).
b) Monoethylester 2-ri-(6-terc-butoxykarbonvlaminopyridin-3-yl)propylImalonové kyseliny
Diethylester 2-[l-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propylJmalonové kyseliny (3,23 g, 8,19 mmol) se rozpustí ve • «
105 <> Λ
směsi dichlormethanu (12 ml) a ethanolu (24 ml, 99,5%). Do tohoto roztoku se přidá po kapkách roztok hydroxidu draselného (0,528 g, 87%, 8,20 mmol)v ethanolu (16 ml,
99,5%) při 0 °C během 0,5 hodiny. Míchání pokračuje po dobu 16 hodin a během této doby se směs zahřeje na teplotu místnosti. Po odpaření za sníženého tlaku na objem 5 až 10 ml se přidá voda (50 ml) a vzniklá emulze se míchá po dobu 0,5 hodiny a potom zfiltruje. Filtrát se promyje dvakrát směsí ethyl-acetátu a diethyletheru (2:1, obj/obj). Vodná vrstva se okyselí přidáním roztoku citrónové kyseliny ve vodě (10%), aby se dosáhlo pH 4 až 5, a extrahuje třikrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, aby se dostal monoethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propyl]malonové kyseliny (2,47 g, 82 %).
(c) Ethylester 2-Γ1-(6-terc-butoxykarbonvlpyridin-3-vl)propyl1akrylové kyseliny
Do roztoku monoethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)propylJmalonové kyseliny (2,45 g, 6,69 mmol) v dichlormethanu (11 ml) se přidá vodný roztok formaldehydu (0,49 ml, 37%) a diethylamin (0,62 ml, 6,4 mmol) při 0 °C. Po intenzivním míchání směsi po dobu 16 hodin se přidá voda (40 ml) a ethyl-acetát (40 ml). Po dalším míchání po dobu 2 minut při teplotě místnosti se vrstvy oddělí a vodná se extrahuje dvakrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Po vysušení síranem sodným se rozpouštědlo odstraní za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylpyridin-3-yl)propyl]akrylové kyseliny (1,21 g, 54 %).
(d) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyrldin-3-yl)pentanové kyseliny • ·
106
Ethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylpyridin-3-yl)propyl]akrylové kyseliny (1,20 g, 3,59 mmol) se rozpustí v thiooctové kyselině (4 ml) v atmosféře argonu a přidá se triethylamin (0,56 ml, 4,0 mmol). Směs se zahřeje na teplotu 60 °C. Po 22 hodinách se přidá thiooctová kyselina (2 ml). Po dalších 14 hodinách se směs ochladí na teplotu místnosti a pomalu se přidá nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného, aby se dostal neutrální roztok. Ten se extrahuje třikrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření za sníženého tlaku se odparek čistí sloupcovou chromatografií (silikagel, 1,7% methanol v dichlormethanu), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny (1,22 g, 83 %).
Směs diastereomerů se oddělí v preparativní škále chirální chromatografií za použití sloupce Chiralpak AD (250*4,6 mm) jako stacionární fáze a směsi hexan (směs isomerů)/ethanol (85:15), obsahující diethylamin (0,05%), při průtokové rychlosti 1 ml za minutu s koncentrací vzorku 5 mg/ml. Přebytek enantiomeru se určí analyticky chirální HPLC na stejném sloupci za použití směsi hexan/ethanol (85:15) jako elučního činidla.
Ethylester/A 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny:
Retenční čas 10,72 min, ee = 99%.
Ethylester/B 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny:
Retenční čas 14,41 min, ee = 98%
Ethylester/C 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny:
Retenční čas 23,01 min, ee — 98%
Ethylester/D 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny:
Retenční čas 29,83 min, ee = 97% (e) 3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethvlpentanová kyselina
Chlorovodíková kyselina (38%, 4 ml) se přidá do ethylesteru
2- acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny (0,041 g, 0,1 mmol) v atmosféře argonu a směs se zahřívá při zpětném toku po dobu 4 hodin. Odpařením za sníženého tlaku a vysušením (45°C, 0,3 x 102 Pa) se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (0,027 mg, 97 %).
3- (6-Aminopyridin-3-vl)-2-merkaptomethvlpentanová kyselina/A
Tato sloučenina se dostane z ethylesteru/A 2-acetylsulfanyl methyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny způsobem popsaným výše.
1H NMR (300 MHz, D20): delta 7,79 (dd, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 2,81 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 1,66 (m, 2H),
0,72 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpentanová kyselina/B
Tato sloučenina se dostane z ethylesteru/B 2-acetylsulfanyl methyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny způsobem popsaným výše.
108 1H NMR (300 MHz, D2O): delta 7,85 (dd, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,01 (d, 1H), 2,98-2,64 (m, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,60 (m,
1H), 0,74 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpentanová kyselina/C
Tato sloučenina se dostane z ethylesteru/C 2-acetylsulfanyl methyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny způsobem popsaným výše.
l-H NMR (300 MHz, D2O): delta 7,85 (dd, 1H) , 7,64 (d, 1H) , 7,01 (d, 1H), 2,98-2,64 (m, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,60 (m,
1H), 0,74 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylpentanová kyselina/D
Tato sloučenina se dostane z ethylesteru/D 2-acetylsulfanyl methyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)pentanové kyseliny způsobem popsaným výše.
1H NMR (300 MHz, D20): delta 7,79 (dd, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 2,81 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 1,66 (m, 2H) ,
0,72 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
Příklad 28
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-4-methylpentanová kyselina (a) Diethylester 2-ri-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin• ·
109
-3-yl)-2-methylpropylImalonové kyseliny
Do roztoku kyanidu měďného (3,58 g, 40 mmol) v tetrahydrofuranu (50 ml) se za míchání přidá během 15 minut při 15 °C roztok isopropylmagnesiumbromidu (40 ml, 2M 80 mmol) v tetrahydrofuranu v atmosféře argonu. Po míchání po dobu dalších 15 minut se po kapkách přidá roztok diethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny (3,78 g, 10,4 mmol) v tetrahydrofuranu (50 ml). Po míchání po dobu 16 hodin se směs zahřeje na teplotu místnosti. Potom se přidá roztok chloridu amonného (5%) ve vodném roztoku amoniaku (5%) za intenzivního míchání a přístupu vzduchu. Směs se extrahuje dvakrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí postupně vodným roztokem amoniaku (5%) a roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií (silikagel, 1,7% methanol v dichlormethanu), aby se dostal surový diethylester 2-[l-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-methylpropyl]malonové kyseliny (2,85 g, 25 %).
(b) Monoethylester 2-Γl-(6-terc-butoxykarbonvlaminopyridin-3-yl)-2-methylpropylImalonové kyseliny
Do roztoku diethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-methylpropylImalonové kyseliny (1,569 g, 3,84 mmol) ve směsi dichlormethanu (6 ml) a ethanolu (12 ml 95%) se při 0 °C přidá po kapkách během 40 minut roztok hydroxidu draselného (0,272 g, 85%, 4,2 mmol) v ethanolu (6 ml, 95%). Po další 1 hodině míchání se směs zahřeje na teplotu místnosti a v míchání se pokračuje po dobu 18 hodin Potom se přidá voda (30 ml) a dichlormethan (30 ml) a po 3 minutách míchání se vrstvy oddělí. Organická vrstva se jednou extrahuje vodou a spojené vodné vrstvy se promyjí jednou etherem. Potom se přidá vodný roztok citrónové • · · ·
110 • ·
kyseliny (10%) k úpravě pH na hodnotu 4 a roztok se extrahuje třikrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného a vysuší síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla se dostane surový monoethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-methylpropyl]malonové kyseliny (0,94 g, 64 %).
(c) Ethylester 2-ri-(6-terc-butoxvkarbonylpyridin-3-yl)-2-methylpropyl]akrylové kyseliny
Do roztoku monoethylesteru 2-[l-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-methylpropyl]malonové kyseliny (0,94 g,
2,47 mmol) v dichlormethanu (4 ml) se přidá vodný roztok formaldehydu (0,18 ml, 37%) a diethylaminu (0,23 ml, 2,32 mmol) při 0 °C. Po intenzivním míchání směsi po dobu 16 hodin se přidá voda (30 ml) a ethyl-acetát (30 ml). Po dalších 2 minutách míchání při teplotě místnosti se vrstvy oddělí a vodná vrstva se extrahuje dvakrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Po vysušení síranem sodným se rozpouštědlo odstraní za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií (silikagel, 1,7% methanol v dichlormethanu), aby se dostal ethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylpyridin-3-yl)-2-methylpropyl]akrylové kyseliny (0,24 g, 28 %).
(d) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-4-methylpentanové kyseliny
Ethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylpyridin-3-yl)-2-methylpropyl]akrylové kyseliny (0,431 g, 1,24 mmol) se rozpustí v thiooctové kyselině (4 ml) v atmosféře argonu a přidá se triethylamin (0,21 ml, 1,5 mmol). Směs se zahřeje na teplotu 60 °C. Po 24 hodinách se přidá thiooctová kyselina (2 ml). Za dalších 20 hodin se směs ochladí na teplotu místnosti a pomalu se přidá nasycený roztok
111 «»»«
hydrogenuhličitanu sodného, aby se získal neutrální roztok. Ten se extrahuje třikrát ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší síranem horečnatým. Po odpaření za sníženého tlaku se odparek čistí sloupcovou chromatografií (silikagel, 1,7% methanol v dichlormethanu), aby se dostal ethylester
2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-4-methylpentanové kyseliny (0,284 g, 54 %) jako směs diastereomerů (6:1).
(e) 3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-4-methylpentanová kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-4-methylpentanové kyseliny (0,085 g, 0,20 mmol) se rozpustí v kyselině chlorovodíkové nasycené argonem (5 ml, 37%) a zahřívá se při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 5,5 hodiny. Odpařením za sníženého tlaku a vysušením při 45 °C a tlaku 10,3 x 1O2 Pa se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (0,058 g, 99 %) jako směs diastereomerů (6:1).
NMR (300 MHz, D20): delta 7,81 (m, 1H) , 7,62 (m, 1H) ,
6,98 (m, 1H), 3,18-3,06 (m, 1H), 2,93-2,40 (m, 3H),
2,23-1,93 (m, 1H), 0,93-0,74 (m, 6H).
MS 255 (M+H).
Příklad 29
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-3-fenylpropionová kyselina (a) Diethylester 2-Γ(6-terc-butoxvkarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethyΠmalonové kyseliny
112 -.
• · * «
e ···
Do intenzivně míchané suspenze kyanidu měďného (1,71 g,
19,06 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (18 ml) se přidá roztok fenylmagnesiumbromidu (12,7 ml, 3M roztok v etheru, 38,11 mmol) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se zahřeje na teplotu místnosti, čímž vznikne temně hnědý roztok. Po 150 minutách se přidá roztok diethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny (l,74g, 4,76 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (19 ml) při 0 °C. Směs se nechá míchat po dobu 3 dnů a potom se přidá vodný roztok chloridu amonného. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného a vysuší. Odstraněním rozpouštědla ve vakuu se dostane odparek, který se suspenduje v hexanu. Filtrací krystalů se dostane diethylester 2-[(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethylJmalonové kyseliny (1,85 g, 88 %).
(b) Monoethylester 2-Γ(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethylImalonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,266g, 4,11 mmol) v ethanolu (14 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-[(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethylImalonové kyseliny (1,82 g, 4,11 mmol) v ethanolu (12 ml) a methylenchloridu (13 ml) při 0 °C. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Přidá se další hydroxid draselný (80 mg rozpuštěný ve 3 ml ethanolu) při 0 °C. Reakční směs se míchá po dobu dalších 18 hodin. Směs se odpaří za sníženého tlaku a k odparku se přidá ethyl-acetát a 0,5M kyselina chlorovodíková. Organická vrstva se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření ve vakuu se odparek suspenduje v hexanu. Filtrací krystalů se dostane monoethylester 2-[(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethyljmalonové kyseliny (1,7 g, 98 %).
113 «· * · » - · »· * • » · • · Λ 9 * 4 • 4 · * · • * · · ·*· »* · • · · ·· 99 * 9 (c) Ethylester 2-r(6-terc-butoxvkarbonvlaminopyridin-3-vl·)fenylmethyl]akrylové kyseliny
Diethylamin (0,52 ml, 5,04 mmol) se přidá do směsi monoethylesteru 2-[(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethyl]malonové kyseliny (1,7 g, 4,1 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,42 ml, 5,6 mmol) v methylenchloridu (6,5 ml) při 0 °C. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a potom zředí ethyl-acetátem.
Organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření ve vakuu se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (dichlormethan), aby se dostal ethylester 2-[(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethyl]akrylové kyseliny (0,36 g, 23 %).
(d) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-3-fenylpropionové kyseliny
Triethylamin (0,105 g, 1,04 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-[(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)fenylmethy1]akrylové kyseliny (0,36 g, 0,94 mmol) v thiooctové kyselině (4 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se zahřívá na 45 °C po dobu 24 hodin. Přidá se ethyl-acetát a organická fáze se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření ve vakuu se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (toluen/ethyl-acetát, 1:0 - 5:1), aby se dostal ethylester
2- acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-3-fenylpropionové kyseliny (0,3 14 g, 73 %).
3- (6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-3-fenylpropionová kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonyl• · · ·
- 114 aminopyridin-3-yl)-3-fenylpropionové kyseliny (58 mg, 0,125 mmol) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (3,0 ml). Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 30 minut v atmosféře argonu. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (41 mg, 100 %).
1H NMR (500 MHz, D20): delta 8,03-7,83 (m, 2H), 7,5-7,3 (m, 5H), 7,05-6,95 (m, 1H), 4,27-4,15 (m, 1H), 3,6-3,45 (m,
1H), 2,84-2,58 (m, 2H).
MS (+) 289 (M+l).
Příklad 30
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-4-fenylmáselná kyselina (a) Diethylester 2-Γ1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethvlImalonové kyseliny
Do suspenze kyanidu měďného (0,66 g, 7,32 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (5 ml) se za intenzivního míchání přidá roztok benzylmagnesiumbromidu (5 ml, 2,93M roztok v etheru, 14,64 mmol) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se zahřeje na teplotu místnosti, čímž vznikne tmavě hnědý roztok. Po 60 minutách se přidá roztok diethylesteru 2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethylen)malonové kyseliny (0,67 g, 1,83 mmol) ve vysušeném tetrahydrofuranu (4 ml) při 0 °C. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a potom se přidá vodný chlorid amonný. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje ethyl-acetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného a vysuší. Odpařením rozpouštědla ve vakuu se dostane odparek, který se čistí velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát, gradient 1:0 až 100:15), aby se dostal diethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)• · · ·
-2-fenylethylImalonové kyseliny (0,44 g, 53 %).
(b) Monoethylester 2-ri-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethylImalonové kyseliny
Roztok hydroxidu draselného (0,067g, 1,03 mmol) v ethanolu (3 ml) se přidá do roztoku diethylesteru 2-[l-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethyl]malonové kyseliny (0,44 g, 0,96 mmol) v ethanolu (3 ml) a methylenchloridu (2 ml) při 0 °C. Směs se míchá po dobu 48 hodin při teplotě místnosti. Směs se odpaří za sníženého tlaku a do odparku se přidá ethyl-acetát a 0,5M kyselina chlorovodíková. Organická vrstva se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Filtrací a odpařením ve vakuu se dostane monoethylester 2-[l-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethylImalonové kyseliny (0,37g, 90 %).
(c) Ethylester 2-Γ1-(6-terc-butoxvkarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethyl1 akrylové kyseliny
Diethylamin (0,27 ml, 2,59 mmol) se přidá do směsi monoethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethylImalonové kyseliny (0,37 g,
0,86 mmol) a 37% vodného roztoku formaldehydu (0,22 ml,
2,9 mmol) v methylenchloridu (3,5 ml) při 0 °C. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Přidá se další formaldehyd (0,24 ml) a diethylamin (0,24 ml). Míchání při teplotě místnosti pokračuje po dobu 18 hodin a potom se přidá ethyl-acetát a voda. Organická vrstva se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethyl]akrylové kyseliny (0,34 g,
%).
(d) Ethylester 2-acetylsulfanylmethvl-3-(6-terc-butoxy-
• ·
- 116 karbonylaminopvridin-3-yl)-4-fenylmáselné kyseliny
Triethylamin (0,096 g, 0,95 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-[1-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-fenylethyljakrylové kyseliny (0,34 g, 0,86 mmol) v thiooctové kyselině (3,5 ml) při 0 °C v atmosféře argonu. Směs se zahřívá na 45 °C po dobu 24 hodin. Přidá se ethyl-acetát a organická fáze se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po filtraci a odpaření ve vakuu se surový produkt čistí velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát, gradient 1:0 až 100:5), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-4-fenylmáselné kyseliny (0,264 g 65 %) .
(e) 3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethyl-4-fenylmáselná kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-4-fenylmáselné kyseliny (0,14g, 0,3 mmol) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (5,0 ml). Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 4,5 hodiny v atmosféře argonu. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (100 mg, 98 %).
TH NMR (500 MHz, D20): delta 7,90-7,83 (m, ÍH), 7,43 (d, ÍH), 7,34-7,18 (m, 3H) , 7,17-7,06 (m, 2H), 7,01-6,9 (m,
ÍH), 3,4-2,5 (m, 6H).
MS (+) 303 (M+l).
Příklad 31
2-(6-Aminopyridin-3-ylmethvl)-3-merkapto-5-fenylpentanová kyselina • · · ·
- 117’b (a) Ethyl-(E,Z)-2-((6- Γ(terc-butoxykarbonyl)amino1-3-pyridinyl)methyl)-5-fenyl-2-pentenoát
Do suspenze hydridu sodného (310 mg, 7,12 mmol, 55% v minerálním oleji) v tetrahydrofuranu (25 ml) při 0 °C v atmosféře argonu se přidá roztok (ethyl 3-(6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridinyl)-2-(diethoxyfosforyl)propanoátu (2,55 g, 5,95 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml).
Po 1 hodině se po kapkách přidá roztok 3-fenylpropanalu (1,59 g, 11,9 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 17 hodin při teplotě místnosti a potom se reakce ukončí chloridem amonným (50 ml, nasycený vodný roztok). Směs se extrahuje ethyl-acetátem, organická vrstva se promyje roztokem chloridu sodného, vysuší (síranem sodným), zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku. Sloupcovou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát, gradient 20:1 až 10:1) se dostane ethyl-(E,Z)-2-((6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridinyl)methyl)-5-fenyl-2-pentanoát (2,49 g, 100 %).
(b) Ethyl-3-(acetylsulfanyl)-2-((6-[(terc-butoxykarbonyl)amino1-3-pyridinyl)methyl)-5-fenylpentanoát
Triethylamin (1,22 ml, 0,617 mmol) se přidá do roztoku ethyl-(E,Z)-2-((6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridinyl)methyl)-5-fenyl-2-pentenoátu (400 mg, 0,597 mmol) v thiooctové kyselině (10 ml) při 40 °C. Po míchání po dobu 90 hodin se směs odpaří za sníženého tlaku. Sloupcovou chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát, gradient 20:1 až 10:1), potom (toluen/ethyl-acetát, 10:1) a potom (heptan/ethyl-acetát 2:1) se dostane ethyl-3-(acetylsulfanyl)-2-((6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridinyl)methyl)-5-fenylpentanoát (126 mg, 27 %) jako diastereomerní směs 1:1.
(c) 2-(6-Aminopyridin-3-ylmethyl)-3-merkapto-5-fenyl♦ ·« ·
- 118 ·* :..
......
pentanová kyselina
Ethyl-3-(acetylsulfanyl)-2-((6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridinyl)methyl)-5-fenylpentanoát (9 mg, 18,5 μκιοί) se rozpustí v koncentrované kyselině chlorovodíkové (1 ml) v atmosféře argonu. Roztok se zahřívá při zpětném toku po dobu 4,5 hodiny. Odpařením za sníženého tlaku se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (6.4 mg, 98 %) jako diastereomerní směs 1:1.
1H NMR (400 MHz, D20): delta 1,78-2,20 (m, 2H), 2,70-3,04 (m, 6H), 6,88-6,92 (2d, IH), 7,22-7,39 (m, 5H), 7,52-7,54 (2d, IH), 7,69-7,75 (2d, IH).
MS (+) 317 (M+l).
Příklad 32
Ethylester 3-Γ 3-(6-aminopyridin-3-yl)-2-ethoxykarbonylpropyldisulfanyl1-2-(6-aminopyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny (a) Ethylester 3-[3-(6-terc-butoxykarbonylaminopvridin-3-vl)-2-ethoxvkarbonvlpropyldisulfanyll-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny
Ethylester 3-acetylsulfanyl-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny (150 mg, 0,392 mmol) se rozpustí v ethanolu (15 ml) nasyceném parami amoniaku. Po míchání po dobu 160 minut se směs odpaří za sníženého tlaku. Odparek se rozpustí v ethanolu (10 ml) a potom se přidá roztok jodu v ethanolu (0,5M, 0,784 ml). Reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti, potom zředí dichlormethanem, promyje nasyceným vodným roztokem thiosiřičitanu sodného a nasyceným vodným • · · ·
- 119 roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší, zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal ethylester 3-[3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-ethoxykarbonylpropyldisulf anyl ]-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny (130 mg, 98 %).
(b) Ethylester 3-Γ3-(6-aminopyridin-3-yl)-2-ethoxykarbonyl propyldisulfanyl1-2-(6-aminopyridin-3-vlmethyl)propionové kyseliny
Ethyl-acetát nasycený parami chlorovodíku (15 ml) se přidá do roztoku ethylesteru 3-[3-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-yl)-2-ethoxykarbonylpropyldisulfanyl]-2-(6-terc-butoxykarbonylaminopyridin-3-ylmethyl)propionové kyseliny (130 mg, 0,191 mmol) v ethyl-acetátu (7 ml) ) při 0 °C. Reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti a míchá po dobu 19 hodin a potom odpaří za sníženého tlaku. Odparek se rozpustí ve vodě, přidá se nasycený vodný roztok uhličitanu sodného a vodná fáze se extrahuje dichlormethanem. Organická vrstva se vysuší a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví (90 mg, 98 %).
XH NMR (400 MHz, CDC13): delta 1,19 (t, 3H), 1,20 (t, 3H), 2,68-2,86 (m, 6H), 2,90-3,01 (m, 4H), 4,07-4,14 (m, 4H), 6,45 (d, 2H), 7,28 (m, 2H), 7,37 (s, 2H).
MS (+) 479 (M+l).
Příklad 33
3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylhexanová kyselina (a) N-(5-Butyrylpyridin-2-yl)-2,2-dimethylpropionamid
Roztok N-(5-brompyridin-2-yl)-2,2-dimethylpropionamidu (3,582 g, 13,9 mmol) v diethyletheru (36 ml) se ochladí na
- 120 »»»*
...... .··..··.
.; · : : ·* : :
r ···. . · · : · : · · teplotu -78 °C v atmosféře argonu a n-butyllithium (1,6M, ml, 30,4 mmol) se přidá po kapkách během 20 minut. 5 minut po úplném přidání se směs zahřeje na 0 °C. Během necelých 5 minut se přidá N-methoxy-N-methylbutyramid (3,65 g, 27,8 mmol) a míchání pokračuje po dobu 45 minut. Jasný roztok se okyselí 2N chlorovodíkovou kyselinou na pH 2. Po intenzivním míchání po dobu 15 minut se směs neutralizuje hydrogenuhličitanem sodným a vrstvy se oddělí. Vodná vrstva se extrahuje třikrát diethyletherem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Výsledný olej se vysuší v olejové vakuové pumpě, aby se odstranil nadbytek činidla. Velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/methanol, 60:1) se dostane surový N-(5-butyrylpyridin-2-yl)-2,2-dimethylpropionamid (2,47 g, 71 %) ve formě světle oranžového oleje, který se již dále nečistí.
(b) N-Γ 5-(1-Hydroxybutyl)pyridin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamid
Do roztoku N-(5-butyrylpyridin-2-yl)-2,2-dimethylpropionamidu (2,47 g, 9,95 mmol) v ethanolu (20 ml) se přidá borohydrid sodný (185 mg, 5,0 mmol). Po míchání po dobu 40 minut při teplotě místnosti se směs okyselí IN chlorovodíkovou kyselinou na pH 2 a míchá po dobu 10 minut. Po neutralizaci hydrogenuhličitanem sodným se směs extrahuje třikrát dichlormethanem. Spojené organické extrakty se promyjí dvakrát roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou roztokem chloridu sodného. Po vysušení a odpaření za sníženého tlaku se odparek čistí velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/methanol 30:1), aby se dostal N-[5-(l-hydroxybutyl)pyridin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamid (1,025 g, 41 %).
(c) Monoethylester 2-[1-Γ6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yllbutyllmalonové kyseliny • · · ·
- 121
Do roztoku N-[5-(l-hydroxy-butyl)pyridin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamidu (1,025 g, 4,09 mmol) v trichlormethanu (12 ml) se přidá thionylchlorid (6 ml) a směs se zahřívá na teplotu 55 °C po dobu 1 hodiny. Potom se roztok odpaří za sníženého tlaku, aby se dostal surový hydrochlorid N-[5-(1-chlor-butyl)pyridin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamidu ve formě bezbarvé pevné látky. Do roztoku diethyl-malonátu (1,31 g, 8,2 mmol) v dimethylformamidu (20 ml) se přidá hydrid sodný (60% disperze v minerálním oleji, 350 mg, 8,7 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Po ochlazení na 0 °C se přidá roztok meziproduktu hydrochloridu N-[5-(1-chlor-butyl)pyridin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamidu v dimethylformamidu (5 ml). Po míchání po dobu 1 hodiny se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a přidá se ethyl-acetát (25 ml) a potom roztok chloridu amonného (polonasycený) k neutralizaci. Vrstvy se oddělí, vodná se extrahuje ethyl-acetátem a spojené organické vrstvy se promyjí třikrát vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší. Po odpaření za sníženého tlaku se odparek zfiltruje přes silikagel směsí dichlormethan/methanol (30:1) jako rozpouštědlem.
Tento surový diethylester 2-[l-[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yl]-butyl]malonové kyseliny se rozpustí ve směsi dichlormethanu (2,5 ml) a ethanolu (5 ml) při 0 °C a přidá se roztok hydroxidu draselného (87%, 111 mg, 5,4 mmol) v ethanolu (4 ml). Směs se zahřeje pomalu na teplotu místnosti a míchání pokračuje po dobu 24 hodin. Potom se přidá dichlormethan (20 ml), voda (20 ml) a roztok chloridu sodného (3 ml). Směs se míchá intenzivně po dobu 2 minut. Potom se vrstvy oddělí a vodná vrstva se promyje dichlormethanem. Spojené vodné vrstvy se okyselí (pH 5) citrónovou kyselinou a extrahují třikrát dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu
- 122 »»*· sodného a vysuší. Odpařením za sníženého tlaku se dostane surový monoethylester 2-[l-[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yl]butyl]malonové kyseliny (258 mg, 41 %).
(d) Ethylester 2-ri-r6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yllbutyl1akrylové kyseliny
Do roztoku monoethylesteru 2-[1-[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yl]butyl]malonové kyseliny (712 mg, 1,95 mmol) v tetrahydrofuranu (6,5 ml) při 0 °C se přidá během 5 minut formaldehyd (37% ve vodě, 0,3 ml). Míchání pokračuje po dobu 10 minut a potom se přidá po kapkách během 10 minut piperidin (0,26 ml, 2,63 mmol). Směs se zahřívá přes noc na teplotu místnosti. Po 14 hodinách se směs odpaří za sníženého tlaku na třetinu svého objemu a potom se přidá ether a voda (15 ml každé látky). Po 2 minutách intenzivního míchání se vrstvy oddělí, vodná vrstva se extrahuje etherem a spojené organické vrstvy se promyjí vodou, 4% citrónovou kyselinou, vodou a roztokem chloridu sodného. Vysušením a odpařením za sníženého tlaku se dostane ethylester 2-[1—[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yl]butyl]akrylové kyseliny (550 mg, 85 %) ve formě bezbarvé pevné látky.
(e) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-Γ6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-ylIhexanové kyseliny
Ethylester 2-[1-[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yl]-butyl]akrylově kyseliny (550 mg, 1,65 mmol) se rozpustí v atmosféře argonu v thiooctové kyselině (4 ml) a po kapkách se přidá triethylamin (0,24 ml, 1,7 mmol). Po míchání po dobu 16 hodin při 50 °C se přidá thiooctová kyselina (2 ml) a míchání pokračuje po dobu 14 hodin. Roztok se ochladí na teplotu místnosti a neutralizuje přidáním roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Směs se extrahuje třikrát ethyl-acetátem a spojené extrakty se promyjí * . · * ·«·♦
- 123 roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Po vysušení a odpaření za sníženého tlaku se odparek čistí velmi rychlou chromatografií (dichlormethan/methanol, 60:1), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yl]hexanové kyseliny (619 mg, 92 %) ve formě viskózního oleje.
(f) 3-(6-Aminopyridin-3-yl)-2-merkaptomethylhexanová kyselina
Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-[6-(2,2-dimethylpropionylamino)pyridin-3-yljhexanové kyseliny (40,4 mg, 99 μπιοί) se rozpustí v atmosféře argonu ve vodném roztoku chlorovodíkové kyseliny (37%, 4,2 ml) a zahřívá při zpětném toku po dobu 2 hodin. Odpařením za sníženého tlaku (44,44 Pa, 40 °C) se dostane sloučenina pojmenovaná v záhlaví ve formě hydrochloridové soli (28 mg, 97 %).
1H NMR (300 MHz, D20): delta 7,86 (d, 1H), 7,65 (d, 1H),
7,02 (t, 1H), 2,98-2,42 (m, 4H), 1,85-1,54 (m, 2H),
1,19-1,00 (m, 2H), 0,87-0,77 (m, 3H).
MS (+) 255(M+1).
Příklad 34
3-(2-Aminothiazol-5-yl)-2-merkaptomethylpropionová kyselina (a) Diethylester 2-(2-aminothiazol-5-ylmethylen)malonové kyseliny
Do roztoku 2-aminothiazol-5-karbaldehydu (47%, 6 g, 23 mmol) v dichlormethanu (30 ml) a dimethylformamidu (30 ml) se přidají 4A molekulární síta, diethyl-malonát (3,5 ml, 23 mmol), piperidin (1,1 ml, 11,5 mmol) a octová kyselina (0,7 ml, 11,5 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 96 hodin. Potom se přidá ethyl-acetát a reakční směs se zfiltruje přes rozsivkovou zeminu (Celíte), aby se odfiltrovala vzniklá sraženina. Do filtrátu se přidá ethyl-acetát (500 ml) a organická fáze se promyje hydrogenuhličitaném sodným a roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší a odpaří, aby se dostalo 4,9 g surového produktu. Přidáním petroletheru do roztoku surového produktu v ethanolu, po němž následuje filtrace, se dostane diethylester 2-(2-aminothiazol-5-ylmethylen)malonové kyseliny (1,13 g, 18 %).
(b) Diethylester 2-(2-aminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny
Kyantrihydroboritan sodný (1,88 g, 29,9 mmol) se přidá za míchání do roztoku diethylesteru 2-(2-aminothiazol-5-ylmethylen)malonové kyseliny (1,13 g, 4,2 mmol) v ethanolu při 0 °C. Hodnota pH roztoku se monitoruje přidáním malého množství bromokresolové zeleně do roztoku.
Po kapkách se přidá koncentrovaná kyselina chlorovodíková, až se barva roztoku změní na žlutou. Ledová lázeň se odstraní a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 5 hodin. Přidá se voda a produkt se extrahuje dichlormethanem. Spojené organické fáze se vysuší a odpaří, aby se dostal diethylester 2-(2-aminothiazol-5-yImethyl)malonové kyseliny (1 g, 87,8 %).
(c) Diethylester 2-(2-terc-butoxvkarbonvlaminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny (Boc2)0 (0,6 g, 27,5 mmol) se přidá do roztoku triethylaminu (0,4 ml, 30,1 mmol), 4-(dimethylamino)pyridinu (0,34 g,
27,8 mmol) a diethylesteru 2-(2-aminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny (0,75 g, 27,5 mmol) v dichlormethanu (5 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti — 12 5· ·» přes noc. Při teplotě 0 °C se přidá další (Boc2)0 (0,15 g,
0,7 mmol) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Přidá se dichlormethan a organická fáze se extrahuje 0,3M roztokem hydrogensíranu draselného a roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší a odpaří, aby se dostalo 0,78 g surového produktu. NMR ukazuje, že zůstává přibližně 40 % diethylesteru 2-(2-aminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny. (Boc2)0 (0,6 g, 27,5 mmol) se přidá do roztoku surového produktu (0,78 g), triethylaminu (0,4 ml, 30,1 mmol) a 4-(dimethylamino)pyridinu (0,34 g, 27,8 mmol) v dichlormethanu (5 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a celý postup se opakuje. Surový produkt (1 g) se čistí velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, 1:1) a HPLC chromatografií, aby se dostal diethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny (184 mg, 17,9 %).
(d) Monoethylester 2-(2-terc-butoxvkarbonylaminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny
Diethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny (158 mg, 0,43 mmol) se rozpustí v ethanolu (1 ml) a tetrahydrofuranu (0,5 ml) a přidá se roztok hydroxidu draselného (24 mg, 0,43 mmol) v ethanolu (0,14 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 96 hodin a potom se vylije na směs ledu a vody. Vodní fáze se extrahuje diethyletherem, okyselí na pH 3 přidáním 0,5M kyseliny chlorovodíkové a extrahuje diethyletherem. Spojené organické fáze se vysuší a odpaří, aby se dostal monoethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-ylmethyl)malonové kyseliny (97 mg, 66,4 %).
(e) Ethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-ylmethyl)akrylové kyseliny
Do směsi monoethylesteru 2-(2-terc-butoxykarbonylamino« · · thiazol-5-ylmethy1Jmalonové kyseliny (94 mg, 0,27 mmol),
36% vodného roztoku formaldehydu (36 μΐ, 1,2 mmol), dichlormethanu (0,2 ml) a vody (0,2 ml) se přidá při 0 °C diethylamin (30 μΐ, 0,40 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, vylije na směs ledu a vody a extrahuje dichlormethanem. Spojené organické fáze se promyjí 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří, aby se dostal ethylester 2-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-ylmethyl)akrylové kyseliny (69 mg,
80,9 %).
(f) Ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-yl)propionové kyseliny
Triethylamin (32 μΐ, 0,23 mmol) se přidá do roztoku ethylesteru 2-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-ylmethy1)akrylové kyseliny (67 mg, 0,21 mmol) v thiooctové kyselině (0,4 ml) při 0 °C. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 48 hodin a potom se vylije na směs ledu a vody. Vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem. Spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a odpaří, aby se dostalo 190 mg surového produktu. Surový produkt se čistí velmi rychlou chromatografií (heptan/ethyl-acetát, gradient 1:0 až 68:32), aby se dostal ethylester 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-yl)propionové kyseliny (43 mg, 51,6 %).
(cr) 3-(2-Aminothiazol-5-yl)-2-merkaptomethyIpropionová kyselina
Roztok ethylesteru 2-acetylsulfanylmethyl-3-(2-terc-butoxykarbonylaminothiazol-5-yl)propionové kyseliny (43 mg, 0,11 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (1,5 ml) se zahřívá při zpětném toku v atmosféře argonu po dobu 1,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti • ·
- 127 a odpaří za sníženého tlaku, aby se dostalo 30 mg surového produktu. Surový produkt se čistí preparativní HPLC chromatografií, aby se dostala sloučenina pojmenovaná v záhlaví (8 mg, 21 %) ve formě hydrochloridové soli.
^•H NMR (500 MHz, D2O): delta 2,75-3,1 (m, 5H) , 7,0 (široký singlet, 1H).
MS (+) 219 (M+l).
Zkratky
Ac = acetát
Aq = vodný
AIBN = α,α'-azoisobutyronitril
Bn = benzyl
Bu = butyl
Bz = benzoyl
DCC = dicyklohexylkarbodiimid
DIAD = diisopropylazodikarboxylát
DIPEA = diisopropylethylamin
DMAP = N,N-dimethylaminopyridin
DME = 1,2-dimethoxyethan
DMF = dimethylformamid
DMSO = dimethylsulfoxid
EDC = 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid ee = přebytek enantiomerů Et - ethyl
EtOAc = ethyl-acetát
EtOH = ethanol h = hodina
HOAc = octová kyselina
HOBt = 1-hydroxybenzotriazol
HPLC = vysokoúčinná kapalinová chromatografie
KHMDS = kaliumbis(trimethylsilyl)amid
LDA = lithiumdiisopropylamid
MCPBA = 3-chlorperbenzoová kyselina • · • · · · • · ·
- 12$3
Me = methyl
MeOH = methanol min = minuty
PMB = 4-methoxybenzyl
Ph = fenyl
Pr = propyl
PyBOP = (benzotriazol-l-yloxy)tripyrrolidinfosfoniumhexa fluorofosfát
TEA = triethylamin
TFA = trifluoroctová kyselina
THF = tetrahydrofuran
Tos = toluen-4-sulfonyl

Claims (17)

1. Sloučenina obecného vzorce I
R1
I
I
R4
R2
R3 (i) nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát nebo solvát takové soli, ve kterém
R1 představuje Cj - Cg alkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden heteroatom zvolený ze síry nebo kyslíku, a substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
nebo aryl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina,
R2 představuje atom vodíku, acyl, acylaminoskupinu, alkyl, alkylkarbamoyl, alkylthioskupinu, alkoxyskupinu, aroyl, aroylaminoskupinu, aryloxyskupinu, arylthioskupinu, amidinoskupinu, aminoskupinu, aryl, karbamoyl, karboxyskupinu, kyanoskupinu, cykloalkyl, formyl, guanidinoskupinu, atom halogenu, heterocyklyl, hydroxyskupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, thiol, Z2N-CO-0-, ZO-CO-NZ- nebo Z2N-CO-NZ-skupinu,
R3 představuje COOR5, SO(OR5), SO3R5, P=O(OR5)2, B(ORg)2, P=OR5(OR5), nebo tetrazol, nebo jakýkoli izoster karboxylové kyseliny,
R4 představuje SH, S-CO-C^-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C-^-Cg alkyl nebo aryl,
Rg představuje atom vodíku nebo C^-Cg alkyl,
X představuje atom kyslíku, atom síry, SO, SO2, C(Z)2, N(Z), NRgSO2, SO2NRg, NRgCO nebo CONRg,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku, C-^-Cg alkyl, aryl, cykloalkyl nebo heterocyklyl.
2. Sloučenina podle nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve které
R^ představuje cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden heteroatom zvolený ze síry nebo kyslíku, a substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
nebo aryl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
R2 představuje atom vodíku, acyl, acylaminoskupinu, alkyl, alkylkarbamoyl, alkylthioskupinu, alkoxyskupinu, aroyl, aroylaminoskupinu, aryloxyskupinu, arylthioskupinu, • · • · · · • · • ·
- 12Γ1 U.
• · • « • · · · · · amidinoskupinu, aminoskupinu, aryl, karbamoyl, karboxyskupinu, kyanoskupinu, cykloalkyl, formyl, guanidinoskupinu, atom halogenu, heterocyklyl, hydroxyskupinu, oxoskupinu, nitroskupinu, thiol, Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- nebo Z2N-CO-NZ-skupinu,
R3 představuje COOR5,
R4 představuje SH, S-CO-C-^-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
Rg představuje atom vodíku, Cý-Cg alkyl nebo aryl,
Rg představuje atom vodíku nebo C-^-Cg alkyl,
X představuje atom kyslíku, síry, SO, S02, C(Z)2, N(Z), NRgSO2, SO2NR6 nebo CONRg,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku, C^-Cg alkyl, aryl, cykloalkyl nebo heterocyklyl.
3. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve které
Rj představuje cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
heterocyklyl, obsahující nejméně jeden heteroatom zvolený ze síry nebo kyslíku, a substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je aminoskupina, amidinoskupina a/nebo guanidinoskupina;
R2 představuje atom vodíku, C-j^-C-j alkyl, aminoskupinu, atom • ···· ·’· · · · · : - Už ~·. . : : .· . : ; .· ’·· ' ......
halogenu nebo hydroxy,
R3 představuje COOR5,
R4 představuje SH, S-CO-C-L-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C^Cg alkyl nebo aryl,
X představuje C(Z)2,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku nebo C^-Cg alkyl.
4. Sloučenina podle kteréhokoli z předchozích nároků nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve které
R^ představuje cykloalkyl, substituovaný jednou nebo více bazickými skupinami jako je amino, amidino a/nebo guanidino; heterocyklyl, obsahující nejméně jeden atom dusíku;
R2 představuje atom vodíku, fluoru nebo alkyl,
R3 představuje COORg,
R4 představuje SH, S-CO-C-L-Cg alkyl nebo S-CO-aryl,
R5 představuje atom vodíku, C^-Cg alkyl nebo aryl,
X představuj e C(Z)2,
Y představuje C(Z)2,
Z představuje nezávisle atom vodíku nebo C^-Cg alkyl.
- 13*3 • · ··· ···
5. Sloučenina podle kteréhokoli z předchozích nároků nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli, ve které
R3 představuje cyklopentyl, pyridyl, pyrimidinyl, piperidinyl nebo thiazolyl,
R2 představuje atom vodíku, fluoru nebo C-l alkyl,
R3 představuje COOR5,
R4 představuje SH,
R5 představuje atom vodíku,
X představuje CHZ,
Y představuje CHZ,
Z představuje nezávisle atom vodíku nebo Cj-Cg alkyl.
6. Způsob přípravy sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, ve které Rj, R3, R4 a Y mají význam uvedený v nároku 1 a X je C(Z)2 a R2 je atom vodíku, vyznačující se tím, že zahrnuje následující stupně:
reakci sloučeniny obecného vzorce (VI) (VI) ve kterém Rlz R3 a Y mají význam uvedený v nároku 1 a X je C(Z)2, se sloučeninou obecného vzorce (IX)
R5 sh (IX) ve kterém R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac, Bz, PMB nebo Bn samotná nebo v přítomnosti vhodné baze, jako je NaOMe, hydrid sodný nebo triethylamin nebo popřípadě v přítomnosti iniciátoru volných radikálů, jako je AIBN, za standardních podmínek.
7. Způsob přípravy sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, ve které Rj, R2, R3 a R4 mají význam uvedený v nároku 1 a Y je CH2 a X je atom kyslíku, síry, C(Z)2 nebo N(Z),vyznačující se tím, že zahrnuje následující stupně:
reakci sloučeniny obecného vzorce (XIV)
R1
OH (XIV) ve kterém R-^, atom kyslíku, vzorce (IX),
R2 a R3 mají význam uvedený v nároku 1 a X je síry, C(Z)2 nebo N(Z), se sloučeninou obecného
R5-SIí (IX) ve kterém R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac nebo Bz, v přítomnosti vhodného činidla, jako je trifenylfosfin/DIAD za standardních podmínek.
8. Způsob přípravy sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, ve které , R2, R3, R4 a Y mají význam uvedený v nároku 1 a X je NRgCO nebo NRgSO2, vyznačuj ící se t i m, že zahrnuje následující stupně:
reakci sloučeniny obecného vzorce (XV), • · ·
- 135
R6HW/R2
Υ'Έβ
I
SR5 (XV) ve kterém R2, R3, Rg a Y maj í význam uvedený v nároku 1 a R5 je vhodná chránící skupina, jako je Ac, Bz, PMB nebo Bn, se sloučeninou obecného vzorce (XVI),
Rx-X (XVI) ve kterém R-j_ má význam uvedený v nároku 1 a X je COOH nebo SO2C1 v přítomnosti vhodného kondenzačního činidla, jako je PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP nebo pyridin, za standardních podmínek.
9. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1 až 5 jako účinnou látku v kombinaci s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem.
10. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 5 v léčbě.
11. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 5 pro přípravu léčiva k inhibici karboxypeptidázy U.
12. Způsob léčby nebo profylaxe podmínek spojených s inhibici karboxypeptidázy U, vyznačující se tím, že zahrnuje podání účinného množství sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 5 savci, včetně člověka, který ji potřebuje.
13. Farmaceutický přípravek pro použití v léčbě nebo profylaxi podmínek spojených s inhibici karboxypeptidázy U, v · · · ·—· · ♦
- 136 vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1 až 5 v kombinaci s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem.
14. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje:
(i) sloučeninu obecného vzorce (I) nebo její farmaceuticky vhodnou sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli a (ii) jedno nebo více antitrombotických činidel s odlišným mechanismem účinku, jako je antiagregační látka, inhibitor receptorů tromboxanu,inhibitor syntetázy tromboxanu, antagonista receptorů fibrinogenu, prostacyklinové mimetikum, inhibitor fosfodiesterázy nebo antagonista ADP receptorů (P2T), ve směsi s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem.
15. Sada součástí, vyznačující se tím, že obsahuje:
(i) farmaceutický přípravek obsahující sloučeninu obecného vzorce (I) nebo její farmaceuticky vhodnou sůl nebo solvát, nebo solvát takové soli ve směsi s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem a (ii) farmaceutický přípravek obsahující jedno nebo více antitrombotických činidel s odlišným mechanismem účinku, jako je antiagregační látka, inhibitor receptorů tromboxanu, inhibitor syntetázy tromboxanu, antagonista receptorů fibrinogenu, prostacyklinové mimetikum, inhibitor fosfodiesterázy nebo antagonista ADP receptorů (P2T), ve směsi s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem, ve kterém sloučenina (i) a činidlo (ii) jsou každé z nich ve formě vhodné k podání ve spojení s druhým.
16. Způsob léčby pacienta, trpícího stavem nebo náchylného k
- 137* • ·· · stavu, ve kterém je požadována nebo žádoucí inhibice karboxypeptidázy U a odlišný antitrombotický mechanismus, vyznačující se tím, že zahrnuje podání účinného množství (i) sloučeniny obecného vzorce (I) nebo její farmaceuticky vhodné soli nebo solvátu, nebo solvátu takové soli ve směsi s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem ve spojení s (ii) jedním nebo více antitrombotickými činidly s odlišným mechanismem účinku, jako je antiagregační látka, inhibitor receptorů tromboxanu,inhibitor syntetázy tromboxanu, antagonista receptorů fibrinogenu, prostacyklinové mimetikum, inhibitor fosfodiesterázy nebo antagonista ADP receptorů (P2 T), ve směsi s farmaceuticky vhodnou pomocnou látkou, rozpouštědlem nebo nosičem, pacientovi.
17. Způsob léčby pacienta, trpícího stavem nebo náchylného k stavu, ve kterém je požadována nebo výhodná inhibice karboxypeptidázy U a odlišný antitrombotický mechanismus, vyznačující se tím, že zahrnuje podání přípravku podle nároku 14 pacientovi.
CZ20013930A 1999-05-03 2000-05-03 Nové sloučeniny CZ20013930A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9901573A SE9901573D0 (sv) 1999-05-03 1999-05-03 New compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20013930A3 true CZ20013930A3 (cs) 2002-10-16

Family

ID=20415426

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20013930A CZ20013930A3 (cs) 1999-05-03 2000-05-03 Nové sloučeniny

Country Status (27)

Country Link
US (1) US7071175B1 (cs)
EP (1) EP1180098A1 (cs)
JP (1) JP2002543184A (cs)
KR (1) KR100755152B1 (cs)
CN (1) CN1263739C (cs)
AR (1) AR034241A1 (cs)
AU (1) AU771760B2 (cs)
BR (1) BR0010257A (cs)
CA (1) CA2371213C (cs)
CZ (1) CZ20013930A3 (cs)
EE (1) EE04490B1 (cs)
HK (1) HK1042303A1 (cs)
HU (1) HUP0202876A3 (cs)
IL (1) IL145954A0 (cs)
IS (1) IS6139A (cs)
MX (1) MXPA01011055A (cs)
MY (1) MY128014A (cs)
NO (1) NO321377B1 (cs)
NZ (1) NZ515062A (cs)
PL (1) PL200932B1 (cs)
RU (1) RU2244708C2 (cs)
SE (1) SE9901573D0 (cs)
SK (1) SK15462001A3 (cs)
TR (1) TR200103153T2 (cs)
TW (1) TWI232105B (cs)
WO (1) WO2000066557A1 (cs)
ZA (1) ZA200108968B (cs)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6828566B2 (en) * 1997-07-22 2004-12-07 Hitachi Ltd Method and apparatus for specimen fabrication
SE9901572D0 (sv) * 1999-05-03 1999-05-03 Astra Ab New compounds
MXPA02002671A (es) 1999-09-14 2002-07-30 Meiji Seika Kaisha Derivado de acido fosfonico que tiene actividad inhibidora contra la carboxipeptidasa b.
SE0103272D0 (sv) 2001-09-28 2001-09-28 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US6713496B2 (en) 2002-01-22 2004-03-30 Pfizer Inc 3-(imidazolyl)-2-alkoxypropanoic acids
BR0307033A (pt) 2002-01-22 2004-12-07 Pfizer ácidos 3-(imidazolil)-2-aminopropanóicos para o uso como inibidores tafi-a para o tratamento de doenças trombóticas
EP1497300A2 (en) * 2002-03-21 2005-01-19 Schering Aktiengesellschaft Plasma carboxypeptidase b inhibitors
CA2486402C (en) 2002-05-22 2013-04-30 Errant Gene Therapeutics, Llc Histone deacetylase inhibitors based on alpha-chalcogenmethylcarbonyl compounds
SE0201837D0 (sv) * 2002-06-14 2002-06-14 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US7576206B2 (en) 2003-08-14 2009-08-18 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US7223745B2 (en) 2003-08-14 2007-05-29 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US7468383B2 (en) 2005-02-11 2008-12-23 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
AU2009290474A1 (en) 2008-09-11 2010-03-18 Pfizer Inc. Heteroaryls amide derivatives and their use as glucokinase activators
CA2741783A1 (en) 2008-10-29 2010-05-06 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Compounds having tafia inhibitory activity
CA2748587A1 (en) 2009-01-20 2010-07-29 Pfizer Inc. Substituted pyrazinone amides
CN102388038B (zh) 2009-03-11 2014-04-23 辉瑞大药厂 用作葡糖激酶活化剂的苯并呋喃基衍生物
AU2010341530B2 (en) 2009-12-22 2016-03-10 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and processes for their preparation, purification and use
CN102249992A (zh) * 2011-07-05 2011-11-23 广东工业大学 一种制备2-氨基异烟酸的方法
US9919939B2 (en) 2011-12-06 2018-03-20 Delta Faucet Company Ozone distribution in a faucet
WO2014198620A1 (en) 2013-06-10 2014-12-18 Sanofi Macrocyclic urea derivatives as inhibitors of tafia, their preparation and their use as pharmaceuticals
AR099134A1 (es) * 2014-01-24 2016-06-29 Hoffmann La Roche Procedimiento para la preparación de n-[(3-aminooxetán-3-il)metil]-2-(1,1-dioxo-3,5-dihidro-1,4-benzotiazepín-4-il)-6-metil-quinazolín-4-amina
CN115093008B (zh) 2015-12-21 2024-05-14 德尔塔阀门公司 包括消毒装置的流体输送系统
USD879309S1 (en) 2018-08-09 2020-03-24 Scott Specialties, Inc. Maternity support

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3091569A (en) 1960-08-26 1963-05-28 Mead Johnson & Co Mucolytic-nu-acylated sulfhydryl compositions and process for treating animal mucus
FR1393338A (fr) 1964-01-08 1965-03-26 Rech S Pharma Et Scient Nouveau dérivé de la cystéine et sa préparation
US3766206A (en) 1971-11-03 1973-10-16 Pfizer 18beta-glycyrrheting acid amides useful as antiulcer agents
FR2266502A1 (en) 1974-04-08 1975-10-31 Synpharm Sa N-(2-thenoyl)-cysteine and esters - with mucolytic activity, prepd. from cysteine (esters) and thenoyl chloride
US4113715A (en) 1977-01-17 1978-09-12 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino acid derivatives
US4177277A (en) 1977-01-17 1979-12-04 E. R. Squibb & Sons, Inc. Method for alleviating hypertension
JPS545949A (en) 1977-06-16 1979-01-17 Hisamitsu Pharmaceut Co Inc Novel cyclohexanecarboxylic acid and its derivatives
FR2430945A2 (fr) 1978-07-12 1980-02-08 Chauvin Blache Lab Nouveaux derives de la cysteine, leur procede de fabrication et leur application en therapeutique
US4537727A (en) 1982-11-12 1985-08-27 Eli Lilly And Company Process for recovering 2-acetylthiomethyl-5-aminopentanoic acid
EP0136883B1 (en) * 1983-10-03 1987-11-25 E.R. Squibb &amp; Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
US4708965A (en) 1985-09-16 1987-11-24 Morgan Lee R Method of treating herpes virus infections with N,N'-diacetylcystine and derivatives
JPS62270555A (ja) * 1986-05-19 1987-11-24 Dainippon Pharmaceut Co Ltd スルホン酸誘導体およびその塩
EP0318859A3 (en) 1987-12-03 1990-08-16 Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. N-substituted mercaptopropanamide derivatives
JPH01254654A (ja) * 1988-04-01 1989-10-11 Dainippon Pharmaceut Co Ltd スルホン酸の誘導体及びその塩
EP0361365A1 (en) * 1988-09-30 1990-04-04 E.R. SQUIBB &amp; SONS, INC. Aminobenzoic and aminocyclohexane-carboylic acid compounds, compositions, and their method of use
DE3838467C2 (de) 1988-11-12 1998-12-10 Agfa Gevaert Ag Fotografisches Aufzeichnungsmaterial
ZA911813B (en) 1990-08-09 1991-12-24 Sankyo Co (benzhydryloxyethylpiperidyl)aliphatic acid derivatives and their use in the treatment of allergies and asthma
IT1249650B (it) 1991-05-29 1995-03-09 Poli Ind Chimica Spa N-(5-tioxo-l-prolil)-l-cisteina e suoi derivati, loro preparazione ed impiego terapeutico
GB9122016D0 (en) 1991-10-16 1991-11-27 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
IT1266571B1 (it) 1993-07-30 1997-01-09 Zambon Spa Derivati della beta-mercapto-propanammide utili nel trattamento delle malattie cardiovascolari
US5470834A (en) * 1993-10-06 1995-11-28 Florida State University Sulfoximine and suldodiimine matrix metalloproteinase inhibitors
DE4441873A1 (de) * 1994-11-24 1996-05-30 Wella Ag Mittel zur dauerhaften Haarverformung
JP3874455B2 (ja) 1996-06-27 2007-01-31 新日本製鐵株式会社 フィブリノーゲン受容体拮抗物質およびそれを有効成分とする医薬製剤

Also Published As

Publication number Publication date
SK15462001A3 (sk) 2002-11-06
KR100755152B1 (ko) 2007-09-04
CN1263739C (zh) 2006-07-12
TR200103153T2 (tr) 2002-04-22
AU771760B2 (en) 2004-04-01
PL354360A1 (en) 2004-01-12
HUP0202876A3 (en) 2005-07-28
NO321377B1 (no) 2006-05-02
BR0010257A (pt) 2002-02-13
HUP0202876A2 (hu) 2003-01-28
PL200932B1 (pl) 2009-02-27
RU2244708C2 (ru) 2005-01-20
EE200100574A (et) 2003-02-17
MY128014A (en) 2007-01-31
HK1042303A1 (zh) 2002-08-09
IL145954A0 (en) 2002-11-10
AR034241A1 (es) 2004-02-18
NZ515062A (en) 2004-04-30
JP2002543184A (ja) 2002-12-17
NO20015383L (no) 2001-12-21
SE9901573D0 (sv) 1999-05-03
IS6139A (is) 2001-11-01
EP1180098A1 (en) 2002-02-20
US7071175B1 (en) 2006-07-04
ZA200108968B (en) 2003-09-05
CA2371213C (en) 2009-11-10
MXPA01011055A (es) 2002-06-04
CN1358174A (zh) 2002-07-10
EE04490B1 (et) 2005-06-15
TWI232105B (en) 2005-05-11
KR20020010630A (ko) 2002-02-04
NO20015383D0 (no) 2001-11-02
WO2000066557A1 (en) 2000-11-09
AU4790200A (en) 2000-11-17
CA2371213A1 (en) 2000-11-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20013930A3 (cs) Nové sloučeniny
US7423012B2 (en) Phosphinyloxy, oxime and carboxylic acid derivatives which are useful as carboxypeptidase U inhibitors
WO2009004383A2 (en) Aza-bicyclohexane compounds useful as anticoagulants
KR20010024676A (ko) 신규 화합물
KR100981593B1 (ko) Ｎ-구아니디노알킬아미드, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
US20090318517A1 (en) Novel Compounds 148
RU2365583C2 (ru) 2,5-дизамещенные 3-меркаптопентановые кислоты и способ их получения
EP1526131A1 (en) Aminoalkyl-pyrazinones and -pyridones as thrombin inhibitors
EP1655296A1 (en) Thrombin inhibitors