CZ195698A3 - Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH a N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalnin-cyklohexylglycin-beta-(3-N-methylpyridinium)-alaninu Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 - Google Patents
Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH a N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalnin-cyklohexylglycin-beta-(3-N-methylpyridinium)-alaninu Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 Download PDFInfo
- Publication number
- CZ195698A3 CZ195698A3 CZ981956A CZ195698A CZ195698A3 CZ 195698 A3 CZ195698 A3 CZ 195698A3 CZ 981956 A CZ981956 A CZ 981956A CZ 195698 A CZ195698 A CZ 195698A CZ 195698 A3 CZ195698 A3 CZ 195698A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- compound
- formula
- reaction medium
- sufficient amount
- amount
- Prior art date
Links
- RHWBMXJTGJAWTL-NSHDSACASA-N (2s)-2-acetamido-3-(4-cyanophenyl)propanoic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(C#N)C=C1 RHWBMXJTGJAWTL-NSHDSACASA-N 0.000 title claims abstract description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 3
- CVOYNCSQVOJOLF-PPHPATTJSA-N C1(CCCCC1)NCC(=O)O.C(C)(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)C(N)=N)C(=O)O Chemical compound C1(CCCCC1)NCC(=O)O.C(C)(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)C(N)=N)C(=O)O CVOYNCSQVOJOLF-PPHPATTJSA-N 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 99
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 88
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 44
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims description 33
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 27
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical group [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 22
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 21
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical group [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 19
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 10
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- -1 CONH2 compound Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000000320 amidine group Chemical group 0.000 claims description 6
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 229940125890 compound Ia Drugs 0.000 claims description 4
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 4
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000001035 methylating effect Effects 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 13
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 7
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 7
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 6
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 6
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 5
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- KWIPUXXIFQQMKN-VIFPVBQESA-N (2s)-2-amino-3-(4-cyanophenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(C#N)C=C1 KWIPUXXIFQQMKN-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 3
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 3
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 3
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 3
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 108010014806 prothrombinase complex Proteins 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- CPWBBXHPWFFJDW-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanamide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CN=C1 CPWBBXHPWFFJDW-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010054265 Factor VIIa Proteins 0.000 description 2
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 2
- 229940123583 Factor Xa inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 2
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- GZUXJHMPEANEGY-UHFFFAOYSA-N bromomethane Chemical compound BrC GZUXJHMPEANEGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound ClC NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEWJEFBGZCMMK-UHFFFAOYSA-N diethyl 2-[3-(4-cyanophenyl)propanoylamino]propanedioate Chemical compound CCOC(=O)C(C(=O)OCC)NC(=O)CCC1=CC=C(C#N)C=C1 XEEWJEFBGZCMMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N diphenylphosphoryl azide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=O)(N=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 229940012414 factor viia Drugs 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 2
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 2
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- YHKOJLZJGLQBJL-FJXQXJEOSA-N (2S)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanamide hydrochloride Chemical compound Cl.N1=CC(=CC=C1)C[C@H](N)C(=O)N YHKOJLZJGLQBJL-FJXQXJEOSA-N 0.000 description 1
- JLBCSWWZSSVXRQ-JTQLQIEISA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CN=C1 JLBCSWWZSSVXRQ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- OKWDELZOYQDSQL-JTQLQIEISA-N (2s)-2-acetamido-3-(4-carbamimidoylphenyl)propanoic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 OKWDELZOYQDSQL-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- XPRCPVGCTGELMN-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-amino-3-(4-carbamimidoylphenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 XPRCPVGCTGELMN-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-cyclohexylacetate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1CCCCC1 WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- QSUXZIPXYDQFCX-JTQLQIEISA-N (2s)-2-cyclohexyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)C1CCCCC1 QSUXZIPXYDQFCX-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MEKOFIRRDATTAG-UHFFFAOYSA-N 2,2,5,8-tetramethyl-3,4-dihydrochromen-6-ol Chemical compound C1CC(C)(C)OC2=C1C(C)=C(O)C=C2C MEKOFIRRDATTAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005273 2-acetoxybenzoic acid group Chemical group 0.000 description 1
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-5-methylpyridine Natural products CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical compound OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFIHVWOJFVUMIE-UHFFFAOYSA-N CCC(CC)C(=O)NC(CC1=CC=C(C=C1)C#N)(C(=O)O)C(=O)O Chemical compound CCC(CC)C(=O)NC(CC1=CC=C(C=C1)C#N)(C(=O)O)C(=O)O PFIHVWOJFVUMIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CBQJSKKFNMDLON-JTQLQIEISA-N N-acetyl-L-phenylalanine Chemical compound CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 CBQJSKKFNMDLON-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 101000882917 Penaeus paulensis Hemolymph clottable protein Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 description 1
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102100030951 Tissue factor pathway inhibitor Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- HOPRXXXSABQWAV-UHFFFAOYSA-N anhydrous collidine Natural products CC1=CC=NC(C)=C1C HOPRXXXSABQWAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000013475 authorization Methods 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 150000007514 bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 108010055222 clotting enzyme Proteins 0.000 description 1
- UTBIMNXEDGNJFE-UHFFFAOYSA-N collidine Natural products CC1=CC=C(C)C(C)=N1 UTBIMNXEDGNJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISOLMABRZPQKOV-UHFFFAOYSA-N diethyl 2-acetamidopropanedioate Chemical compound CCOC(=O)C(NC(C)=O)C(=O)OCC ISOLMABRZPQKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VAYGXNSJCAHWJZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfate Chemical compound COS(=O)(=O)OC VAYGXNSJCAHWJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical class I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 108010013555 lipoprotein-associated coagulation inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940102396 methyl bromide Drugs 0.000 description 1
- 229940050176 methyl chloride Drugs 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- MBXNQZHITVCSLJ-UHFFFAOYSA-N methyl fluorosulfonate Chemical compound COS(F)(=O)=O MBXNQZHITVCSLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- COCAUCFPFHUGAA-MGNBDDOMSA-N n-[3-[(1s,7s)-5-amino-4-thia-6-azabicyclo[5.1.0]oct-5-en-7-yl]-4-fluorophenyl]-5-chloropyridine-2-carboxamide Chemical compound C=1C=C(F)C([C@@]23N=C(SCC[C@@H]2C3)N)=CC=1NC(=O)C1=CC=C(Cl)C=N1 COCAUCFPFHUGAA-MGNBDDOMSA-N 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N sodium ethoxide Chemical compound [Na+].CC[O-] QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- GFYHSKONPJXCDE-UHFFFAOYSA-N sym-collidine Natural products CC1=CN=C(C)C(C)=C1 GFYHSKONPJXCDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- ODFIFRJYVDGYEK-JTQLQIEISA-N tert-butyl N-[(2S)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoyl]carbamate Chemical compound C(C)(C)(C)OC(=O)NC([C@@H](N)CC=1C=NC=CC=1)=O ODFIFRJYVDGYEK-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Chemical compound CC(N)=S YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0815—Tripeptides with the first amino acid being basic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Description
Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu
Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH a N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalanincyklohexylglycin-β- (3-N-methylpyridinium) -alaninu
Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2
Oblast techniky
Vynález se týká nového postupu přípravy N-acetyl-(L)4-kyanofenylalaninu rozštěpením racemické sloučeniny ethylesteru N-acetyl-(D,L)-4-kyanofenylalaninu, a rovněž nového postupu přípravy stereoisomeru
Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 za použití tohoto meziproduktu N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu.
Dosavadní stav techniky
Tyto racemické sloučeniny, to znamená N-acetyl-(D,L)4-kyanofenylalanin a Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 jsou uváděny a popisovány v patentové přihlášce Spojených států amerických č. 08/428,404, podané 24.dubna 1995, která je pokračovací patentovou přihláškou Spojených států amerických č. 08/233,054, podané 26.dubna 1994, přičemž tyto patentové přihlášky zde slouží jako odkazové materiály. Uvedený konečný produkt, to znamená Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 je vhodně použitelný jako inhibitor Faktoru Xa.
Všeobecně je žádoucí vyvíjet léčiva ve formě stereoisomerů než jako racemáty, neboř stereoisomery mají oproti racemátům určité výhody, jako je například vynikající účinnost, menší vedlejší účinky, snížená úroveň toxicity nebo dokonce vůbec žádná toxicita, atd. Někdy tyto výhody stereoisomerů oproti racemátům nejsou známé až do doby, než • ·
Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu
Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH a N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalanincyklohexylglycin-β- (3-N-methylpyridinium) -alaninu
Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2
Oblast techniky
Vynález se týká nového postupu přípravy N-acetyl-(L)4-kyanofenylalaninu rozštěpením racemická sloučeniny ethylesteru N-acetyl-(D,L)-4-kyanofenylalaninu, a rovněž nového postupu přípravy stereoisomeru
Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 za použití tohoto meziproduktu N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu.
Dosavadní stav techniky
Tyto racemické sloučeniny, to znamená N-acetyl-(D,L)4-kyanofenylalanin a Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 jsou uváděny a popisovány v patentové přihlášce Spojených států amerických č. 08/428,404, podané 24.dubna 1995, která je pokračovací patentovou přihláškou Spojených států amerických č. 08/233,054, podané 26.dubna 1994, přičemž tyto patentové přihlášky zde slouží jako odkazové materiály. Uvedený konečný produkt, to znamená Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 je vhodně použitelný jako inhibitor Faktoru Xa.
Všeobecně je žádoucí vyvíjet léčiva ve formě stereoisomerů než jako racemáty, nebof stereoisomery mají oproti racemátům určité výhody, jako je například vynikající účinnost, menší vedlejší účinky, snížená úroveň toxicity nebo dokonce vůbec žádná toxicita, atd. Někdy tyto výhody stereoisomerů oproti racemátům nejsou známé až do doby, než • · ····· ·· · · · · · · · • ···· · · · se vyvine léčivo, nebo v některých případech dokonce kdy je toto léčivo uváděno na trh. V mnoha oficiálních státních institucích, které se zabývají povolováním léčiv pro uvedení na trh, se dává přednost potvrzování dokladů týkajících se stereoisomeru jako léčiva než racemátu. Z toho důvodu je vhodné a žádoucí mít k dispozici postup přípravy stereoisomeru sloučeniny Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2Klíčovým meziproduktem pro přípravu tohoto stereoisomeru je stereoisomer N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalanin.
K tomu, aby se dosáhlo rozštěpení racemátu, je nutno vybrat některý z celé řady různých technických prostředků, které jsou známé z dosavadního stavu techniky. Jako příklad některých z těchto známých metod je možno uvést přípravu diastereoisomerů, po které následuje krystalizaee nebo diferenciální absorpce (chromatografie) [viz například publikace Enantiomers, Racemates and Resolutions, J.
Jacques, A. Collet a S.H. Wilen, Wiley (1981)], dále chromatografické dělení na chirální stacionární fázi, kinetické štěpení a enzymatické štěpení. V případě enzymatického štěpení, zejména pokud se týče hydroláz nebo esteráz, bylo prokázáno, že jsou tyto metody vhodné k rozštěpení aminokyselin, což je například popisováno v publikaci Chemistry and Biochemistry of the amino acids, Chapman and Halí, New York, 1984, Chap. 10, str. 338-353; dále v publikaci Applications of Biochemical Systems in Organic Chemistry, Part I. J.B. Jones, C.J. Sih a D.
Perlman, Wiley, New York, 1976, Chap. 4. str. 104-401; a dále v publikaci Chemistry of the Amino Acids, Vol. 1, Wiley New York, 1961, Chap 9, str. 728-750.
V dalším stádiu experimentálního výzkumu, i když se našel vhodný postup, musí odborník pracující v daném oboru
provést mnoho experimentálních pokusů za účelem nalezení správného a vhodného rozpouštědla, ko-rozpouštědla (jestliže je zapotřebí), teploty, doby a dalších podmínek za účelem dosaženi efektivního a účinného rozštěpení racemátu, pomocí kterých se dosáhne snadného získání požadované sloučeniny, vysokého výtěžku, vysokého přebytku enantiomeru a dále takového způsobu provedení daného procesu, který by nebyl při prováděni příliš složitý a komplikovaný. Podle předmětného vynálezu bylo nalezeno řešení těchto problémů souvisejících se štěpením N-acetyl-(D,L)-4kyanofenylalaninu, jehož L-isomer se potom použije jako meziprodukt k přípravě Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-ΝΗ2’ ΐθ znamená sloučeniny obecného vzorce II.
Podstata vynálezu
Vynález se týká způsobu přípravy N-acetyl-(L)-4kyanofenylalaninu, sloučeniny vzorce IA :
sloučenina IA zahrnující následující stupně :
(a) kombinování dostatečného množství sloučeniny I :
.OCH2CH3 sloučenina I dostatečného množství vodného roztoku, dostatečného množství acetonitrilu a dostatečného množství Subtilisinu ke zreagování podstatného množství sloučeniny vzorce I za vzniku reakčního média, a (b) úpravu reakčního média na vhodnou hodnotu pH při přidání Subtilisinu a udržování vhodné hodnoty pH při probíhající reakci k získání sloučeniny vzorce IA.
Vynález se rovněž týká postupu přípravy sloučeniny Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2, sloučeniny vzorce II :
h2n
sloučenina II nebo farmaceuticky přijatelných solí odvozených od této sloučeniny, který zahrnuje následující stupně :
(a) kombinování dostatečného množství sloučeniny vzorce I :
sloučenina I
dostatečného množství vodného roztoku, dostatečného množství acetonitrilu a dostatečného množství Subtilisinu ke zreagování s podstatným množstvím sloučeniny vzorce I za vzniku reakčního média, a (b) úpravu reakčního média na vhodnou hodnotu pH při přidání Subtilisinu a udržování vhodné hodnoty pH při probíhající reakci k získání sloučeniny vzorce IA :
sloučenina IA (c) adování sloučeniny vzorce IA na sloučeninu vzorce (3) :
sloučenina 3 sloučenina 4 • ·
(d) převedení kyanoskupiny ve sloučenině vzorce (4) na amidinovou skupinu a methylace dusíku pyridylové skupiny za vzniku sloučeniny vzorce II.
V popisu předmětného vynálezu maj i zde použité termíny následuj ící význam :
(a) Symbolem Ac nebo termínem acetyl se míní funkční skupina vzorce :
ch3-C(b) Termínem amidinová skupina se míní funkční skupina vzorce :
,nh2
NH (c) Terminem pyridylová skupina se míní funkční skupina vzorce :
N
Termín stereoisomery se používá jako všeobecný termín pro všechny isomery, které se odlišují pouze orientaci svých atomů na určitém místě. Do rozsahu tohoto termínu náleží isomery sloučenin s více než jedním chirálním centrem, které nepředstavují svoje zrcadlové obrazy • ·
(diastereomery neboli diastereoisomery). Termínem enantiomer se míní dva stereoisomery, které nepředstavují vzájemně se překrývající zrcadlové obrazy. Termínem chirální střed se zde míní uhlíkový atom, ke kterému jsou připojeny čtyři různé skupiny. Nomenklatura L/D nebo R/S, použitá v popisu předmětného vynálezu, je popisována v publikaci IUPAC- IUB Joint Commision on Biochemical Nomenclature, Eur. J. Biochem. 138, 9-37 (1984). Chirální látka může buďto obsahovat ekvivalentní množství R a S isomerů (nebo L a D isomerů), přičemž v tomto případě se označuje racemícká nebo racemát nebo nemusí obsahoval ekvivalentní množství R a S isomerů (nebo L a D isomerů), přičemž v tomto případě se nazývá opticky aktivní nebo ne-racemická.
Termínem štěpení se míní rozdělováni racemické směsi na opticky aktivní složky.
Termínem enantiomerní přebytek nebo ee se míní procentuální podíl, kterým jeden enantiomer, El, převyšuje ve směsi množství obou těchto enantiomerů, El plus E2, to znamená :
(El - E2)
- x 100 % - ee (El + E2)
Termínem (+)- se míní plus enantiomer, termínem (-)se míní mínus enantiomer.
Označením se míní vazba, která vystupuje z roviny, kterou tvoří list papíru, směrem ven nahoru
Označením IIIIH”'....... se míní vazba, která vystupuje • · • · · · • · · ···· · · · · ····· · · · · ···· · • · · · · ··· ····· · · · · ·· ·· z roviny, kterou tvoří list papíru, směrem zpět dolů.
Terminem farmaceuticky přijatelné soli, se míní adiční soli s kyselinami, které jsou získány reakcí s těmito kyselinami, například s kyselinou chlorovodíkovou, s kyselinou bromovodíkovou, s kyselinou sírovou, s kyselinou dusičnou nebo s kyselinou fosforečnou, a s organickými karboxylovými kyselinami, jako je například kyselina octová, kyselina trifluoroctová, kyselina propionová, kyselina glykolová, kyselina maleinová, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina salicylová, kyselina
2-acetyloxybenzoová, nebo s organickými sulfonovými kyselinami, jako je například kyselina methansulfonová, kyselina 4-toluensulfonová a kyselina naftalensulfonová. Předpokládá se jako samozřejmé, že je možno použít rovněž i jiných dalších běžně známých kyselin v tomto oboru přípravy farmaceutických prostředků, které se obvykle používají k danému účelu.
Termínem aminokyselina, který je použit v popisu předmětného vynálezu, se míní v přírodě se vyskytující aminokyseliny, které pocházejí z genetického kódu a obsahují jako stavební bloky proteiny. Tento termín aminokyselina rovněž zahrnuj e, pokud nebude výslovně uvedeno j inak, j ak (L)-aminokyseliny tak (D)-aminokyseliny, chemicky modifikované aminokyseliny, jako jsou například analogy aminokyselin, v přírodě se vyskytující aminokyseliny, které nejsou obvykle inkorporovány do proteinů. Zkratky používané pro tyto aminokyseliny, aminokyselinové analogy, vyskytující se v rozsahu popisu předmětného vynálezu, jsou uvedeny v následující tabulce č. 1
TABULKA 1
| Aminokyselina | Symbol |
| alanin | Ala |
| fenylalanin | Phe |
| p-kyanofenylalanin | Phe(4-CN) |
| p-amidinofenylalanin | pAphe |
| cyklohexylglycin | Chg |
| β-(3-pyridyl)-alanin | Pal |
| β-(3-N-methylpyridinium)-alanin | PalMe(3) |
Schéma 1
Štěpení sloučeniny I.
Schéma 1 : Štěpení ethylesteru N-acetyl-(D,L)-4-kyanofenylalaninu.
Stupeň A
COOEt
sloučenina I
444 ·· 4« 44 ·· • · · 4 4 4 4 • 4 444 4 4 ·4
4 ·· 4 4 44 4 4 4 • 4 4 4 4 444
444 44 44 44 44 44
Racemát ethylesteru (sloučenina I) se podle tohoto postupu rozštěpí na L-stereoisomer kyseliny, to znamená N-acetyl-4-kyanofenylalanin (sloučenina ΙΑ), přičemž ovšem D-stereoisomer tohoto esteru (sloučenina D-I) v podstatě není převeden na tuto kyselinu. Tímto způsobem tedy může být provedeno odděleni požadované kyseliny od nežádoucího esteru. Jak ještě bude detailně popsáno v dalším textu, kyselina získaná tímto způsobem představuje hlavně L-isomer, což je znázorněno ve výše uvedeném schématu, a tato skutečnost je deklarována vysokým ee faktorem této sloučeniny.
Při provádění postupu podle předmětného vynálezu je uvedeným dostatečným množstvím sloučeniny I, které je kombinováno k získání reakčního média přinejmenším dvakrát tak veliké množství, než je požadováno k získáni L-stereoisomeru tímto postupem podle vynálezu. Reakční médium obsahuje dostatečné množství acetonitrilu a dostatečné množství vodného roztoku. Tato dostatečná množství jsou požadována z toho důvodu, aby bylo umožněno vzájemné zreagování jednotlivých přísad (přidaných složek) způsobem podle předmětného vynálezu. V textu předmětného vynálezu je použito termínu přísada (neboli přidaná složka), přičemž tímto termínem se míní veškeré látky dodávané do reakčního média.
Termínem dostatečné množství acetonitrilu se míní množství, které rozpustí podstatný podíl sloučeniny I v reakčním médiu. Ve výhodném provedení je tato sloučenina vzorce I solubilizována do acetonitrilu, přičemž se pomalu přidává vodný roztok až do okamžiku, kdy se tento vodný roztok začíná zakalovat. Zakalený roztok naznačuje, že se část sloučeniny vzorce I začíná srážet, to znamená, že může • · • · · · · · · · · · · ····· ·· · · ··· » · • · · · · · · · • · ·· «· ·· ·* nastat potřeba přidání dalšího podílu acetonitrilu k rozpuštění této sraženiny. Například je možno uvést, že toto dostatečné množství acetonitrilu představují podíl v rozmezí od asi 5 do asi 95 % objemových reakčního média a podle ještě výhodnějšího provedení podíl v rozmezí od asi 50 do asi 60 % objemových tohoto reakčního média. Rovněž je výhodné, jestliže sloučenina vzorce I se použije v koncentraci pohybující se v rozmezí od asi 20 gramů do asi 140 gramů na litr reakčního média a podle ještě výhodnějšího provedení v koncentraci pohybující se v rozmezí od asi 35 gramů do asi 65 gramů na litr tohoto reakčního média.
Uvedeným dostatečným množstvím vodného roztoku je takové množství, které je potřebné k rozpuštění podstatného podílu enzymu Subtilisinu v reakčním médiu. V textu předmětného vynálezu je použit termín vodný roztok, přičemž tímto termínem se míní roztok obsahuj ící vodu a podle ještě výhodnějšího provedení se tím míní roztok obsahující vodu a další přísady (přidané složky), které napomáhají zvýšení výtěžku ee faktoru. Termín roztok nemusí nezbytně znamenat to, že se veškeré přidávané složky (přísady) rozpustí. Tento termín rovněž může znamenat, že tyto přidávané složky jsou dispergovány, takže v tomto případě vznikne suspenze.
Například je možno uvést, že tento vodný roztok může dále obsahovat jako přísadu dostatečné množství anorganické soli, jako je například chlorid draselný, chlorid sodný, chlorid lithný, atd. Ve výhodném provedení podle vynálezu je touto anorganickou solí chlorid draselný. Předpokládá se, že tato anorganická sůl působí tak, že stabilizuje uvedený Subtilisin. Uvedeným termínem dostatečné množství anorganické soli se míní takové množství, které je • · • · · · · · ·· β · dostatečné ke stabilizování Subtilisinu. Tímto množstvím je asi 0,02 molu až asi 0,20 molu na litr vodného roztoku, podle výhodnějšího provedení je toto množství asi 0,05 molu až asi 0,15 molu na litr vodného roztoku. Například se použije řešení, podle kterého se zkombinuje 1 M roztok chloridu draselného v množství představujícím asi 10 až asi 15 procent objemových reakčního média.
Se sloučeninou vzorce I, acetonitrilem a vodným roztokem se kombinuje dostatečné množství Subtilisinu. Tímto termínem dostatečné množství Subtilisinu se míní množství, které je schopné reagovat s podstatným podílem (pokud možno s prakticky s veškerým množstvím) sloučeniny vzorce I. Tímto dostatečným množstvím je asi 0,5 až asi 10 hmotnostních miliekvivalentů podílu sloučeniny vzorce I.
Hodnota pH tohoto reakčnímo média se měří po přídavku uvedeného enzymu, přičemž v případě potřeby se tato hodnota upraví na vhodnou hodnotu pH. Touto vhodnou hodnotou pH se míní takové hodnota pH, při které je tento enzym schopen reagovat. Ve výhodném provedení je touto vhodnou hodnotou pH hodnota pohybující se v rozmezí od asi 5 do asi 9, podle ještě výhodnějšího provedení v rozmezí od asi 6,5 do asi 7,5. Tato vhodná hodnota pH se udržuje po dobu, kdy probíhá reakce mezi sloučeninou vzorce I a Subtilisinem. To znamená, že tato doba je v rozmezí od asi 15 minut do asi 4 hodin, ve výhodném provedení se tato reakce provádí za míchání nebo za současného aplikováni jiné vhodné metody, která napomáhá k provedení reakce. K udržování uvedené vhodné hodnoty pH j e možno použít jakékoliv libovolné metody nebo prostředku, jako je například přidávání dostatečného množství bazické látky, jako je například hydroxid sodný, hydroxid draselný, hydroxid lithný, hydroxid amonný, uhličitan sodný, uhličitan ···· ··· >··« • · · · ···· · · · · • ··· · · · · · » ··· · · • · · · · · ··· ····· ·· ·· ·* · · draselný, výhodně ve formě 1 M roztoku, nebo je možno použít přidávání roztoku pufru, jako je například acetát amonný, hydrogenuhličitan amonný, hydrogenuhličitan sodný nebo fosfátový pufr, jako je například hydrogenfosforečnan amonný, hydrogenfosforečnan sodný. K monitorování hodnoty pH reakčního média je možno použít pH-metr.
Sloučeninu vzorce IA je možno oddělit běžně známými metodami z dosavadního stavu techniky, jako je například metoda, při které se roztok zředí přídavkem bazického roztoku anorganické soli, jako je například hydrogenuhličitan sodný. Tato anorganická fáze se potom promyje organickými rozpouštědly, jako jsou například ethery, chlorovaná rozpouštědla, jako je například methylenchlorid, chloroform, toluen, heptan nebo ethylacetát. Tento vodný roztok se potom okyselí za použití koncentrované kyseliny, jako je například kyselina chlorovodíková, na pH v rozmezí od asi 1 do asi 3, načež potom následuje extrakce organickým rozpouštědlem, čímž se získá sloučenina vzorce IA.
V následujících tabulkách 2 a 3 je uvedeno porovnání reakcí prováděných za použití vodného roztoku a acetonitrilu (tabulka 2) a za použití vodného roztoku a dimethylsulfoxidu misto acetonitrilu (tabulka 3) .
Ve sloupci A je uvedeno množství sloučeniny vzorce I v gramech použité při tomto postupu.
Ve sloupci B je uvedeno množství (v mililitrech, ml) dimethylsulfoxidu (DMSO) nebo acetonitrilu (CHgCN), vody a 1 M roztoku chloridu draselného použitého k přípravě tohoto vodného roztoku.
9
9 9 9999 · 999 ··· · · 9 9 99 999 9 9
9 9999 999 •9999 99 99 99 99
Ve sloupci C je uvedeno použité množství Subtilisinu v miligramech (mg) a odpovídající hmotnostní miliekvivalent (meq) sloučeniny vzorce I.
Ve sloupci D je uveden čas provádění daného experimentu.
Ve sloupci E je uveden enantiomerní přebytek získané sloučeniny vzorce IA.
Ve sloupci F je uveden výtěžek takto získané sloučeniny vzorce IA.
TABULKA 2
Termín vstup 1 znamená, že reakce byla prováděna v přítomnosti anorganické soli (chlorid draselný). Termín vstup 2 znamená, že reakce byla prováděna bez použití anorganické soli.
| Sloupec | ||||||
| A | B | C | D | E | F | |
| Vstup | (I) | ch3cn/ | Subti- | Doba | (IA) | (IA) |
| (D:L | h2°/ | lisin | (minu- | %ee | % vý- | |
| 40:60) | 1 M KC1 | (mg) | ty) | těžek | ||
| (g) | (ml) | (meq) | ||||
| 1 | 67 | 1000/ | 100 | 180 | 99,4 | 88 |
| 600/ | (3,7) | (pevná | ||||
| 214 | látka) | |||||
| 2 | 1 | 15/ | 01,6 | 120 | 98 | 90 |
| 9,5/ | (3,2) | (pevná | ||||
| 0 | látka)3 |
TABULKA 3
Reakce, při kterých byl použit dimethylsulfoxid, byly prováděny za různých podmínek, které se lišily v použití různé doby, podílu Subtilisinu a množství sloučeniny vzorce I.
• ·
| Sloupec | ||||||
| A | B | C | D | E | F | |
| Vstup | (I) | ch3cn/ | Subti- | Doba | (IA) | (IA) |
| (D:L 40:60) (g) | h2o/ 1 M KC1 (ml) | lisin (mg) (meq) | (minu- ty) | %ee | % výtěžek | |
| 1 | 2,0 | 32/ 18/ 6,4 | 1,5 (1,5) | 30 | 95,4 | 70 (olej v DMSO)1 |
| 2 | 7,8 | 125/ 100/ 25 | 12 (3,0) | 30 | 94 | 88 (olej v DMSO)1 |
| 3 | 25 | 400/ 200/ 81 | 19 (1,5) | 40 | 88 | 70 (olej v DMSO)1 |
| 4 | 100 | 1600/ 900/ 320 | 75 (1,5) | 60 | 88 | 90 (olej v DMSO)1 |
| 5 | 2,8 | 10/ 8/ 2 | 4,4 (3,0) | 65 | 86 | 50 (pevná látka) |
| 6 | 2,0 | 42/ 26/ 6,4 | 1,5 (1,5) | 120 | 80 | 70 (olej v DMSO)1 |
• · • · · · ··· » • · · · · · · · · ··· • ····· · · ·· · · · · · • · · · · · · · · • · · · · ·· ·· ·· · ·
Poznámky :
DMSO je přítomen ve sloučenině vzorce IA, velmi obtížně odstranitelný o
odstranění DMSO odpařováním při teplotě 90 °C a tlaku 1064 Pa, rozpuštění v ethylacetátu a promytí vodou (celkem třikrát) sloučenina vzorce IA se snadno oddělí jako pevná látka.
Pomocí těchto testovacích pokusů bylo prokázáno efektivní a účinné rozštěpení výchozí látky se současným snadným oddělením sloučeniny vzorce IA za současného vysokého výtěžku a vysokého enantiomerního přebytku, jestliže se použije acetonitril při provádění tohoto postupu.
Schéma 2
Toto schéma 2 je pokračováním schématu 1, přičemž podle tohoto schématu se navrhuje postup přípravy sloučeniny Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2, sloučeniny vzorce II.
Podle tohoto reakčního schématu 2 se ve stupni A sloučenina vzorce (3) aduje na sloučeninu vzorce (IA), přičemž se získá sloučenina vzorce (4) . Tato sloučenina vzorce (3) může být adována za použití azidové metody, jako je například metoda, při které se sloučenina vzorce (IA) rozpustí ve vhodném bezvodém organickém rozpouštědle, jako je například bezvodý dimethylformamid nebo bezvodý methylenchlorid, a za použití inertní atmosféry, jako je například dusík. Do tohoto roztoku se potom přidá difenylfosforylazid, 1 až 4 ekvivalenty vhodné bazické látky, jako je například diisopropylethylamin a přinejmenším • · · · jeden ekvivalent chráněné aminokyseliny, sloučenina vzorce (3), rozpuštěná ve vhodném bezvodém organickém rozpouštědle, jako je například bezvodý dimethylformamid nebo bezvodý methylenchlorid. Tato reakční směs se potom ponechá za současného promícháváni po dobu asi 1 až 15 hodin. Takto získaný adiční produkt, sloučenina vzorce (4), se potom oddělí a vyčistí za použití běžně známých a používaných metod podle dosavadního stavu techniky, jako jsou například extrakční metody, srážení, krystalizace a mžiková chromatografie. Například je možno použít postupu, při kterém se odpaří rozpouštědlo, adiční produkt (4) se vysráží ethyletherem, promyje se a oddělí se filtrací.
Při provádění postupu podle tohoto reakčního schématu 2 se při provádění stupňů (B) a (D) kyanoskupina sloučeniny vzorce (4) převede na amidinovou skupinu sloučeniny vzorce (II). Tato konverze se provádí aminolýzou odpovídajícího methylthioimidátu, sloučeniny vzorce (5), která vznikne reakcí kyanoskupiny sloučeniny vzorce (4) se sirovodíkem, přičemž potom následuje postup podle patentu NDR č. 155 954 (publikovaný 21. 1982, autoři Vágner a kol.; opětně podrobený průzkumu 9.listopadu 1988), který je zde uváděn jako odkazový materiál.
Tento postup je možno například podle tohoto schématu 2, stupeň (B) provést tak, že se sloučenina vzorce (4) rozpustí v organickém rozpouštědle, jako je například dimethylsulfoxid. Potom se přidá organická bazická sloučenina, jako je například pyridin, triethylamin, diisopropylethylemin, 2,6-lutidin, kolidin. Do tohoto roztoku se potom zavede proud sirovodíku, což se provádí při teplotě místnosti tak dlouho, dokud se nespotřebuje sloučenina vzorce (4). Tato reakční směs může být udržována • 9 • 9 9 9 · 9 9 · • · 9 9 9 9 9 999
999 » 9 9 9 9 9 999 9 9
9999 999
99 99 99 99 při teplotě místnosti po dobu dalších 1 až 18 hodin. Takto získaná sloučenina vzorce (5) se potom oddělí běžně známými metodami podle dosavadního stavu techniky, jako je například vysrážení a filtrace. Takto získaná sraženina se potom promyje organickým rozpouštědlem, jako je například diethylether, a potom se usuší za použití vakua.
Schéma 2
Postup syntézy Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3) -NH2 stupeň A :
sloučenina (IA) sloučenina (3) sloučenina (4) stupeň B :
příprava thioacetamidu
sloučenina (5) stupeň C : methylace
sloučenina (6) stupeň D :
tvorba amidinové skupiny
sloučenina (II)
Při provádění postupu podle tohoto schématu 2, stupeň C, se pyridylová skupina sloučenina (5) methyluje za vzniku sloučeniny vzorce (6). Podle nej obvyklejšího provedení se k provedení této methylace použijí methylhalogenidy, jako je například methyljodid, methylbromid nebo methylchlorid. Rovněž je možno použít methylfluorsulfonát, dimethylsulfát, methylester kyseliny toluen-p-sulfonové a další methylační činidla, která jsou uváděna například v publikaci Zoltewicz and Deady, Adv. Heterocycl. Chem. 22, 71-121 (1978), a v publikaci Duffin, Adv. Heterocycl. Chem. 3, 1-56 (1964), které zde slouží jako odkazové materiály. Ve výhodném provedení se použije přebytku methylhalogenidu a podle ještě výhodnějšího provedení se použije přebytku methyljodidu.
Tato reakce se provádí v rozpouštědle, jako jsou například alkoholy, jako například methanol a ethanol, aceton, chloroform, acetonitril, nitrobenzen a dimethylformamid. Ve výhodném provedení se tato reakce provádí ve směsi acetonu a dimethylsulfoxidu a za současného míchání při teplotě místnosti po dobu jedné až 24 hodin. Takto získaná sloučenina vzorce (6) se potom oddělí běžně známými metodami z dosavadního stavu techniky v tomto oboru, jako například v případě použití přebytku methyljodidu se tato látka odpaří a sloučenina vzorce (6) se vysráží ethyletherem, oddělí se dekantací, promyje se a usuší.
Při provádění stupně (D) podle tohoto reakčního schématu 2 se methylthioimidátový derivát sloučeniny vzorce (6) dále převede na sloučeninu vzorce (II) s odpovídající amidinovou skupinou. Ve výhodném provedení se sloučenina vzorce (6) rozpustí v organickém rozpouštědle, jako je například methanol, přičemž podle ještě výhodnějšího provedení se tento postup provede v přítomnosti kyseliny octové. Do tohoto roztoku se potom přidá acetát amonný. Ve • ·
výhodném provedení se tato reakční směs zahřívá na teplotu v rozmezí od 40 C do 65 eC, podle ještě výhodnějšího provedení na teplotu v rozmezí od 50 °C do 60 °C, a při této teplotě se potom udržuje po dobu v rozmezí od 2 do 3 hodin. Takto získaná sloučenina vzorce (II) se potom oddělí běžnými metodami všeobecně známými z dosavadního stavu techniky v tomto oboru, přičemž může být isolována ve formě svojí farmaceuticky přijatelné soli. Například je možno uvést postup, při kterém se odpaří použitá rozpouštědla, zbytek se rozpustí v acetonitrilu a přídavkem kyseliny trifluoroctové se připraví sraženina, která se potom odfiltruje a vysuší ve vakuu.
Příklady provedení vynálezu
V následujících příkladech je ilustrován postup podle předmětného vynálezu, přičemž jsou zde blíže objasněny typické syntetické postupy popsané výše v uvedených schématech 1 a 2. Tyto příklady jsou ovšem pouze ilustrativní a v žádném směru nijak neomezují rozsah tohoto vynálezu.
Pro odborníky pracující v daném oboru je evidentní zjevná výhoda postupů podle těchto reakčnich schematů spočívající v tom, že pořadí prováděni jednotlivých stupňů je pouze případné.
Použité výchozí látky jsou běžně dostupné na trhu nebo je možno tyto látky snadno připravit pomocí běžně známých metod v tomto oboru.
V dále uváděných příkladech jsou použity některé symboly, které mají následující význam : g znamená gramy,
mol znamená moly, mmol znamená milimoly, 1 znamená litry, ml znamená mililitry, μΐ znamená mikrolitry, mp znamená teplotu taveni, °C znamená stupně Celsia, TLC znamená chromatografií v tenké vrstvě, M znamená molaritu a Rf znamená retenční faktor.
Příklad 1 (D,L)-N-acety1-4-kyanofenylalanin Ac-(D,L)-Phe(4-CN)-OH.
Stupeň A : Diethylester kyseliny 4-kyanobenzylacetamidomalonové
COOEt
NC
NHAc
ZOOEt
Podle tohoto postupu byl suspendován diethylacetamidomalonát (použito 44 gramů, což je 0,203 molu), alfa-brom-p-toluonitril (použito 40 gramů, což je 0,204 molu) a jodid draselný (10 gramů) v dioxanu (400 mililitrů), načež byl přidán roztok ethoxidů sodného (4,6 gramu sodíku ve 200 mililitrech suchého ethanolu). Tato reakční směs byla zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 3 až 4 hodin a potom byla ponechána stát po dobu přes noc.
Tato směs byla potom nalita na led (2 litry) , vytvořená sraženina byla zfiltrována, promyta vodou a produkt byl usušen v lyofilizéru. Rekrystalizaci z methanolu byl získán diethylester kyseliny 4-kyanobenzylacetamidomalonové ve formě bílých krystalků.
Výtěžek : 61 gramů (91 %) .
Stupeň B : Ethylester N- (D, L)-acety1-4-kyanofenylalaninu,
Ac-(D,L)Phe(4-CN)-OEt.
NC
COOEt \lHAc
Podle tohoto provedení byl suspendován 4-kyanobenzyldiethylacetamidomalonát (použito 41,97 gramu, což je 0,126 molu) v ethanolu (0,6 litru). Potom byl přidán hydroxid sodný (6 M) v následujících intervalech : 10 mililitrů (60 mmolů) v okamžiku 0, 10 mililitrů (60 mmolů) po 30 minutách, 5 mililitrů (30 mmolů) po 3 hodinách. Tato reakční směs byla promíchávána za současného přidávání hydroxidu sodného (GM) dokud nevymizela výchozí látka (metoda TLC, ethylacetát jako eluční činidlo, Rf = 0,63). Tento roztok byl potom zředěn vodou (100 mililitrů) a hodnota pH byla upravena na 3 za pomoci přídavku koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Potom byl odpařen ethanol a takto získaný polopevný produkt byl sušen v lyofilizéru po dobu přes noc, přičemž tímto způsobem byl připraven N-acetyl-4-kyanobenzylmonoethylacetamidomalonát.
V dalším postupu byl takto připravený N-acetyl-4-kyanobenzylmonoethylacetamidomalonát v suchém dioxanu (0,5 litru) a tato reakční směs byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 2,5 až 3 hodin. Použitý dioxan byl odpařen, získaný pevný podíl byl suspendován v ethylacetátu (250 mililitrů) a tento podíl byl potom extrahován nasyceným vodným roztokem nasyceného hydrogenuhličitanu sodného (třikrát), vodou, kyselinou chlorovodíkovou (0,5 M) a solankou. Takto získaný ethylacetátový roztok byl vysušen za použití síranu hořečnatého, zfiltrován a odpařen. Rekrystalizací takto připraveného produktu ze směsi ethylacetátu a hexanů byl
připraven ethylester N-(L-D)-acetyl-4-kyanofenylalaninu.
Výtěžek : 28,95 gramu (88 %).
Příklad 2
Enzymatické štěpení Ac-(D,L)Phe(4-CN)-OEt (6 : 4; D : L) a postup přípravy (L)-N-acetyl-4-kyanofenylalaninu,
Ac-(L)Phe(4-CN)-OH.
COOH
NC
H
IHAc
Podle tohoto provedení byl přidán roztok chloridu sodného (1M, 242 mililitrů) a voda (600 mililitrů) do roztoku Ac-(D,L)Phe(4-CN)-OEt (6 : 4; D : L, použito 67 gramů) v acetonitrilu (1 litr). Hodnota pH tohoto roztoku byla potom upravena z hodnoty 7,3 na hodnotu 6,9, načež byl přidán roztok Subtilisinu Carlsberg (50 miligramů) ve vodném roztoku chloridu draselného (8 mililitrů, 0,1 M roztok). Hodnota pH takto připraveného roztoku byla potom udržována titrovánim hydroxidem sodným (1 M roztok). Po jedné hodině byl přidán roztok Subtilisinu (50 miligramů) ve vodném roztoku chloridu draselného (8 mililitrů, 0,1 M roztok), přičemž hodnota pH tohoto roztoku byla udržována titrací hydroxidem sodným (1 M roztok). Po 2,5 hodině byl přidán roztok hydrogenuhličitanu sodného (800 mililitrů) a tento podíl byl potom extrahován ethylacetátem (čtyři podíly po 800 mililitrech). Ethylacetátový roztok byl usušen za použití síranu hořečnatého, načež byla tato směs zfiltrována. Zkoncentrováním tohoto filtrátu byl získán Ac-(D)Phe(4-CN)-OEt ve formě pevné látky (38 gramů, výtěžek
- 27 • · · ···· · · · · ····· ·· · · ···· · • ···· · · · ··· ·· « · · · ·· %, 90 % ee). Vodná vrstvy byla okyselena koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (56 mililitrů) na pH 1. Vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (čtyři podíly po 800 mililitrech). Organická vrstva byla usušena za použití síranu hořečnatého a takto získaná reakční směs byla zfiltrována. Zkoncentrováním takto získaného filtrátu byl získán požadovaný Ac-(L)Phe(4-CN)-OH ve formě pevné látky. Výtěžek : 21 gramů (88 %);
teplota tání : 124 - 126 °C;
99,4 % ee.
Příklad 3
N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalanin,
Ac-(L)-pAph-(L)-Chg-(L)-PalMe(3) -NH2 .
Stupeň A : N-t-butyloxykarbonyl-(L)-β-(3-pyridyl)alaninamid, Boc-(L)-Pal-NH2.
Boc-N-H φφφ · φ φ φ φ φφ φφ ··· · · φ · • ··· • · • φ φ φφ · φ
Podle tohoto provedení byl Boc-(L)-Pal-OH (v množství 1,34 gramu, což je 5 mmolů) suspendován v methylenchloridu (50 mililitrů), načež byl tento roztok ochlazen na teplotu -15 °C. K tomuto roztoku byl přidán diisopropylethylamin (963 μΐ, což je 5,5 mmolu) a isobutylchlormravenčan (715 μΐ, což je 5,5 mmolu). Tato reakční směs byla promíchávána po dobu 15 minut při teplotě -15 °C. Tímto roztokem byl potom intenzivně probubláván proud bezvodého amoniaku (sušen pevným hydroxidem sodným) po dobu asi 3 minut. Tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 10 minut při teplotě -15 °C a potom po dobu 20 minut při teplotě místnosti. Použitý methylenchlorid byl odpařen, načež byl přidán ethylacetát (70 mililitrů) a tento podíl byl promyt nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného.
Produkt byl usušen za pomoci síranu hořečnatého a odpařen. Krystalizaci ze směsi ethylacetátu a hexanu byl připraven požadovaný Boc-(L)-Pal-NH2.
Výtěžek : 0,98 gramu (75 %).
Stupeň B : hydrochloridová sůl (L)-β-(3-pyridyl)alaninamidu, H-(L)-Pal-NH2 . 2 HCl.
NH2
Podle tohoto postupu byl Boc- (L)-Pal-N^ (použito 0,98 gramu) suspendován v methylenchloridu (15 mililitrů) za současného mírného zahřívání, načež byl přidán roztok kyseliny chlorovodíkové (4 M roztok, 10 mililitrů) v dioxanu. Po 30 minutách byl použitý methylenchlorid • · • * · · · · • · · ···· · ··· ····· ·· ·· ···· · • ···· ··· «·« »· ·· ·· «· a dioxan odpařen. Pevný zbytek byl rozpuštěn v methanolu, přidáním etheru byl vysrážen pevný podíl, který byl zfiltrován a tímto způsobem byl získán požadovaný H-(L)-Pal-NH2 . 2 HCI.
Výtěžek : 0,86 gramu (98 %).
Stupeň C : N-t-butyloxykarbony 1-(L)-cyklohexylglycin- (L)-β(3-pyridyl)-alaninamid, Boc-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2 .
Při provádění tohoto postupu byl použit H-(L)-Pal-NH2.2 HCI, (v množství 432 miligramů, což je 1,82 mmolu), Boc-(L)-Chg-OH (použito 609 miligramů, což je 2,37 mmolu, neboli 1,3 ekvivalentu), dicyklohexylkarbodiimid (použito 494 miligramů, což je 2,4 mmolu), hydroxybenzotriazol (použito 324 miligramů, což je 2,4 mmolu) a diisopropylethylamin (4 mmoly) v dimethylformamidu (15 mililitrů) . Použití dimethylformamid byl potom odpařen, do reakční směsi byl přidán ethylacetát a tato směs byla uchovávána při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Takto vytvořená diisopropylkarbodiimidcyklohexylmočovina byla zfiltrována, roztok byl extrahován nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (třikrát), načež byl usušen síranem hořečnatým a odpařen. K tomuto podílu byly přidány hexany, načež byl krystalizací získán požadovaný produkt, Boc-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2.
4 4 • · 4 4
Výtěžek : 598 miligramů (81 %).
Stupeň D : hydrochloridová sůl (L)-cyklohexylglycin-(L)-β (3-pyridyl)-alaninamidu,
Podle tohoto postupu byl Boc-(L)-Chg-(L)-Pal-NH^ (v množství 1,27 gramu, což je 3,12 mmolu) suspendován v methylenchloridu (50 mililitrů), načež byla přidána kyselina chlorovodíková (10 mililitrů, 4 M roztok v dioxanu). Po 30 minutách byl odpařen dioxan a methylenchlorid, získaná pevný podíl byl rozpuštěn v methanolu, přičemž požadovaný produkt byl vysrážen přídavkem etheru (200 mililitrů), který byl potom odfiltrován, přičemž tímto způsobem byl získán požadovaný H-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2 . 2HC1.
Výtěžek : 1,12 gramu (95 %).
Stupeň E : N-acetyl-p-kyanofenylalanin-(L)-cyklohexylglycin-(L)-β-(3-pyridyl)-alaninamid,
Ac- (L)-Phe(4-CN)-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2.
* ··· · · ·· · · ···· • · ···· · · ··· ·· · · ·· ··
Při provádění tohoto postupu byl použit
H-(L)-Chg-(L)-Pal-N^ · 2HC1 (v množství 1,13 gramu, což jsou 3 mmoly), Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH (použito 0,84 gramu, což je 3,6 mmolu), diisopropylethylamin (v množství 10 mmolů) a difenylfosforylazid (803 μΐ, což je 3,6 mmolu) a dimethylformamid (30 mililitrů), přičemž tato reakční směs byla promíchávána po dobu přes noc. Použitý dimethylformamid byl odpařen, přičemž přídavkem etheru byl vysrážen pevný podíl, který byl odfiltrován a promyt etherem, přičemž tímto způsobem byl připraven požadovaný
Ac-(L)-Phe(4-CN)-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2·
Výtěžek : 1,282 gramu (82 %) .
Stupeň F : N-acetyl-(L)-p-thioamidfenylalanin-(L)-cyklohexylglycin-(L)-β-(3-pyridyl)-alaninamid,
Ac-(L)-Phe(4-thioamid)-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2.
N XONH2 H • 9 Λ 9 9 9 99999 9999 _ 32 - · ··· ♦ · * · ♦ · ··· · ·
99999 999
Podle tohoto postupu byl použit
Ac-(L)-Phe(4-CN)-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2 (v množství 1,18 gramu, což je 2,28 mmolu), který byl rozpuštěn v dimethylsulfoxidu (20 až 40 mililitrů), načež byl přidán pyridin (40 mililitrů) a triethylamin (14 mililitrů). Tímto roztokem byl potom prováděn vodík při teplotě okolí a po dobu 30 minut. Takto získaný roztok byl potom uchováván při teplotě místnosti po dobu přes noc, načež byl odpařen na malý objem a produkt byl vysrážen přídavkem diethyletheru. Tento produkt byl uchováván po dobu několika hodin v mrazničce, načež byl zfiltrován, promyt diethyletherem a usušen ve vakuu, přičemž tímto způsobem byl získán požadovaný Ac-(L)-Phe(4-thioamid)-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2 ve formě žluté pevné látky.
Výtěžek : 1,26 gramu.
Stupeň G : hydrojodidová sůl N-acetyl-p-methylthioamidátfenylalanin-cyklohexylglycin-(L)-β-(3-methylpyridinium)-alaninu,
Ac-(L)-Phe(4-methylthioamídát)-(L)-Chg-(L)Pal(Me)-NH2 . 2HI.
Při provádění tohoto postupu byl použit
Ac-(L)-Phe(4-thioamid)-(L)-Chg-(L)-Pal-NH2 (v množství 1,2 gramu), který byl suspendován v dimethylsulfoxidu (10 až 20 mililitrů) a acetonu (80 mililitrů). Potom byl přidán methyljodid (14 mililitrů, což je 50 ekvivalentů). Tato reakční směs byla potom udržována po dobu přes noc při teplotě místnosti, načež byl odpařen aceton a přebytkový methyljodid. Takto získaný podíl byl potom podroben vysráženi přídavkem diethyletheru (0,5 až 1,1). Po několika hodinách, kdy byl tento produkt uchováván při teplotě 4 °C, byl tento diethylether oddekantován nebo zfiltrován a polopevný produkt na stěnách byl omyt diethyletherem a diethylacetátem. Získaný produkt byl usušen ve vakuu a tímto způsobem byl získán požadovaný produkt,
Ac-(L)-Phe(4-methylthioamidát)-(L)-Chg-(L)-Pal(Me)-NH2 . 2HI. Výtěžek : 1,31 gramu.
Stupeň H : trifluoracetátová sůl N-acetyl-(L)-p-acetamidofenylalanin-cyklohexylglycin-(L)-β-(3-N-methylpyridinium)-alaninamidu,
Ac-(L)-pAphe-(L)-Chg-(L)-PalMe-NH2 . TFA
O
CF3COO ·
• ···*· · · · · · · · · · • · ··«· 4 · 4 ····· ·· » · * · ··
Při provádění tohoto postupu byl použit Ac-(L)-Phe(4-methylthioamidát)-(L)-Chg-(L)-Pal(Me)-NH2.2HI (v množství 1,31 gramu), který byl rozpuštěn v methanolu (50 mililitrů) a v kyselině octové (0,5 mililitru). Potom byl přidán acetát amonný (v množství 0,8 gramu). Tato reakční směs byla zahřívána při teplotě 55 °C po dobu 3 hodin, načež byla odpařena, získaný podíl byl rozpuštěn ve směsi acetonitrilu a vody (0,1 % kyseliny trifluoroctové) v poměru 1:1, načež byl tento podíl zfiltrován a lyofilizován, čímž byl získán požadovaný produkt Ac-(L)-pAphe-(L)-Chg-(L)-PalMe-NH2 . TFA.
Výtěžek : 1,22 gramu.
Předmětný vynález se týká způsobu přípravy meziproduktu, N-acetyl-L-fenylalaninu, což je sloučenina vzorce IA, který je vhodný k přípravě
Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2, to znamená sloučeniny vzorce II. Tato posledně uvedená sloučenina je vhodná k inhibování proteinů pro srážení krve, a konkrétně pro inhibování enzymu pro srážení krve, faktoru Xa, což je podrobněji uváděno v patentové přihlášce Spojených států amerických č. 08/428,404, podané 25.dubna 1995, která je zde uváděna jako odkazový materiál.
V textu předmětného vynálezu je používán termín aktivita faktoru Xa, přičemž tímto termínem se míní schopnost faktoru Xa, jako takového nebo ve spojení s podjednotkami známými jako protrombinázový komplex, katalyzovat konverzi protrombinu na trombin. V případech, kdy se v souvislosti s aktivitou faktoru Xa používá termínu inhibování se tímto termínem míní jak přímé tak nepřímé inhibování aktivity faktoru Xa. Tuto přímou inhibici aktivity faktoru Xa je možno dosáhnout například vázáním • · ··«· · · · · • « · · ···· · · · · • ····· * v · Φ · · · · · • · · · ♦ » · c » ····· ·· ·· ·· · · peptidu na faktor Xa nebo protrombinázu, čímž se zabrání vázání protrombinu na aktivní místo protrombinázového komplexu.
V popisu předmětného vynálezu je v souvislosti s inhibovánim aktivity faktoru Xa používán termín specifický účinek, přičemž tímto termínem se míní to, že tato sloučenina inhibuje aktivitu faktoru Xa aniž by v podstatě došlo k inhibování aktivity dalších specifických proteáz (při použití stejné koncentrace tohoto inhibitoru). Mezi tyto další specifické proteázy je možno zařadit například proteázy podílející se na koagulační kaskádě, jako jsou například trombin, plasmin, trypsin a elastáza.
I když je v určitých případech nemocí tvorba krevních sraženin vyskytujících se v krevním oběhu sama o sobě příčinou úmrtí, není vhodné dosáhnout úplného inhibování srážecího systému, nebof by mohla nastat hemoragie, která je rovněž životu nebezpečná.
Proces srážení krve je komplexním procesem, který zahrnuje řadu postupně se zesilující řadu enzymových aktivačních reakcí, ve které jsou plasmové zymogeny postupně aktivovány omezenou proteolýzou. Po stránce mechanické byla kaskáda srážení krve rozdělena do dvou systémů, vnitřního a vnějšího. Tyto systémy se spojují při aktivaci faktoru X, přičemž následné generování trombinu probíhá prostřednictvím společného systému.
Podle současných znalostí v tomto oboru se uvádí, že uvedený vnitřní systém hraje důležitou roli při udržování a zvyšování tvorby fibrinu, zatímco vnější systém je důležitý v iniciační fázi srážení krve. Všeobecně je nyní
- 36 akceptována skutečnost, že srážení krve je fyzicky iniciováno tvorbou komplexu tkáňového faktoru a faktoru Vila. Po svém vytvoření tento komplex rychle iniciuje koagulaci aktivací faktoru IX a X. Nově vytvořený faktor Xa potom vytváří komplex s faktorem Via v poměru jedna k jedné a s fosfolipidy. Tento tak zvaný protrombinázový komplex je příčinou převedení rozpustného fibrinogenu na nerozpustný fibrin. S postupujícím časem je aktivita tohoto komplexu faktoru Vila a tkáňového faktoru (vnější systém) postupně potlačena proteinem Kunitzova typu představujícím inhibitor proteázy, TFPI, který po zkomplexování s faktorem Xa může přímo inhibovat proteolytickou aktivitu komplexu faktoru Vila a tkáňového faktoru. K tomu aby byl udržen koagulační proces v přítomnosti inhibovaného vnějšího systému je třeba vyprodukovat další množství faktoru Xa prostřednictvím trombinem zprostředkované aktivity ve vnitřním systému. Ze shora uvedeného j e patrné, že trombin hraj e dvoj i autokatalytickou roli, jak při zprostředkování své vlastní výroby tak při konverzi fibrinogenu na fibrin.
Tato výše uvedená autokatalytická povaha generování trombinu představuje důležitý bezpečnostní prvek proti nekontrolovatelnému krvácení. Tento systém zaručuje, že jakmile je dosaženo prahové úrovně protrombinázy, proběhne úplné vysrážení krve, což způsobí například konec hemoragie. Vzhledem k výše uvedenému je zřejmé, že je nanejvýš žádoucí vyvinout činidla, která inhibují koagulaci aniž by byl přímo inhibován trombin.
Sloučenina Ac-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2, která je peptidovým analogem, synteticky připravená postupem podle předmětného vynálezu představuje vhodný inhibitor aktivity faktoru Xa, přičemž současně v podstatě neinhibuje aktivitu • 0 ostatních proteáz zúčastňuj ících se na procesu srážení krve
Claims (30)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanof eny lalaninu, sloučeniny vzorce IA :sloučenina IA vyznačující se tím, že zahrnuje následující (a) kombinování dostatečného množství stupně : sloučeniny I :sloučenina I dostatečného množství vodného roztoku, dostatečného množství acetonitrilu a dostatečného množství Subtilisinu ke zreagování podstatného množství sloučeniny vzorce I za vzniku reakčního média, a (b) úpravu reakčního média na vhodnou hodnotu pH při přidání Subtilisinu a udržování vhodné hodnoty pH při probíhající reakci k získání sloučeniny vzorce IA.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství acetonitrilu představuje asi 5 až asi 95 procent objemových reakčního média.
- 3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství acetonitrilu představuje asi 50 až asi 60 procent objemových vodného roztoku.
- 4. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že vodný roztok obsahuje dostatečné množství anorganické soli.
- 5. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství anorganické soli představuje asi 10 až asi 15 procent objemových vodného 1 molárního roztoku anorganické soli.
- 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že anorganickou solí je chlorid draselný.
- 7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje přidáváním dostatečného množství bazické látky.
- 8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že uvedenou bazickou látkou je hydroxid sodný.
- 9. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje přidáváním dostatečného množství pufru.
- 10. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že tímto pufrem je roztok fosforečnanu.
- 11. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje na hodnotě v rozmezí od asi 5 do asi 9.• ···
- 12. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje na hodnotě v rozmezí od asi 6,5 do asi 7,5.
- 13. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále zahrnuje míchání reakčního média při probíhající reakci mezi dostatečným množstvím Subtilisinu a podstatným množstvím sloučeniny vzorce I po dobu v rozmezí od asi 15 minut do asi 4 hodin.
- 14. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství Subtilisinu představuje množství v rozmezí od asi 0,5 do asi 10 hmotnostních miliekvivalentů množství sloučeniny sloučeniny vzorce I.
- 15. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále zahrnuje další stupeň oddělování sloučeniny vzorce IA z reakčního média.
- 16. Způsob přípravy sloučeniny Ac-(L)-pAph-Chg-Palříe(3)-NH2, sloučeniny vzorce II sloučenina II nebo farmaceuticky přijatelných solí odvozených od této sloučeniny, vyznačující se tím, že zahrnuje následující stupně :(a) kombinování dostatečného množství sloučeniny vzorce I :sloučenina I dostatečného množství vodného roztoku, dostatečného množství acetonitrilu a dostatečného množství Subtilisinu ke zreagování s podstatným množstvím sloučeniny vzorce I za vzniku reakčního média, a (b) úpravu reakčního média na vhodnou hodnotu pH při přidání Subtilisinu a udržování vhodné hodnoty pH při probíhající reakci k získání sloučeniny vzorce IA :sloučenina IA (c) adování sloučeniny vzorce IA na sloučeninu vzorce (3) :H-CONH2 sloučenina 3 za vzniku sloučeniny vzorce (4) p‘CONH2 sloučenina 4 ve sloučenině vzorce (4) na (d) převedení kyanoskupiny amidinovou skupinu a methylace dusíku pyridylové skupiny za vzniku sloučeniny vzorce II.
- 17. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství acetonitrilu představuje asi 5 až asi 95 procent objemových vodného roztoku.
- 18. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství acetonitrilu představuje asi 50 až asi 60 procent objemových vodného roztoku.
- 19. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že vodný roztok obsahuje dostatečné množství anorganické soli.
- 20. Způsob podle nároku 19, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství anorganické soli představuje asi 10 až asi 15 procent objemových vodného 1 molárniho roztoku anorganické soli.
- 21. Způsob podle nároku 20, vyznačující se tím, že anorganickou solí je chlorid draselný.• ·
- 22. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje přidáváním dostatečného množství bazické látky.
- 23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že uvedenou bazickou látkou je hydroxid sodný.
- 24. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje přidáváním dostatečného množství pufru.
- 25. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že tímto pufrem je roztok fosforečnanu.
- 26. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje na hodnotě v rozmezí od asi 5 do asi 9.
- 27. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že se upraví vhodná hodnota pH reakčního média a tato hodnota se udržuje na hodnotě v rozmezí od asi 6,5 do asi 7,5.
- 28. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že dále zahrnuje míchání reakčního média při probíhající reakci mezi dostatečným množstvím Subtilisinu a podstatným množstvím sloučeniny vzorce I po dobu v rozmezí od asi 15 minut do asi 4 hodin.
- 29. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že uvedené dostatečné množství Subtilisinu představuje množství v rozmezí od asi 0,5 do asi 10 hmotnostních miliekvivalentů množství sloučeniny sloučeniny vzorce I.
- 30. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že dále zahrnuje další stupeň oddělováni sloučeniny vzorce IA z reakčního média.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US57556995A | 1995-12-20 | 1995-12-20 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ195698A3 true CZ195698A3 (cs) | 1999-01-13 |
| CZ295362B6 CZ295362B6 (cs) | 2005-07-13 |
Family
ID=24300839
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19981956A CZ295362B6 (cs) | 1995-12-20 | 1996-11-25 | Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH a N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalanincyklohexylglycin-beta-(3-N-methylpyridinium)-alaninu Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0868526B1 (cs) |
| JP (1) | JP4044614B2 (cs) |
| KR (1) | KR100438879B1 (cs) |
| CN (1) | CN1087349C (cs) |
| AR (1) | AR005119A1 (cs) |
| AT (1) | ATE222293T1 (cs) |
| AU (1) | AU717995B2 (cs) |
| BR (1) | BR9612059A (cs) |
| CA (1) | CA2241210C (cs) |
| CZ (1) | CZ295362B6 (cs) |
| DE (1) | DE69623038T2 (cs) |
| DK (1) | DK0868526T3 (cs) |
| EE (1) | EE03698B1 (cs) |
| ES (1) | ES2179957T3 (cs) |
| IL (1) | IL125003A (cs) |
| MX (1) | MX9804997A (cs) |
| NO (1) | NO319678B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ324159A (cs) |
| PL (1) | PL185541B1 (cs) |
| PT (1) | PT868526E (cs) |
| RU (1) | RU2170764C2 (cs) |
| SK (1) | SK281432B6 (cs) |
| TR (1) | TR199801107T2 (cs) |
| UA (1) | UA48993C2 (cs) |
| WO (1) | WO1997022712A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA9610600B (cs) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL144096A0 (en) | 1999-01-02 | 2002-05-23 | Aventis Pharma Gmbh | Novel malonic acid derivatives, processes for their preparation, their use and pharmaceutical compositions containing them (inhibition of factor xa activity) |
| EP1016663A1 (en) * | 1999-01-02 | 2000-07-05 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Novel malonic acid derivatives, processes for their preparation, their use and pharmaceutical compositions containing them (inhibition of factor Xa activity) |
| PL356801A1 (en) * | 2000-01-28 | 2004-07-12 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Process for the preparation of acetyl-amidiniophenylalanyl-cyclohexylglycyl-pyridinioalaninamides |
| EP1127884A1 (en) * | 2000-02-26 | 2001-08-29 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Novel malonic acid derivatives, processes for their preparation, their use as inhibitor of factor XA activity and pharmaceutical compositions containing them |
| AU2003302238A1 (en) | 2002-12-03 | 2004-06-23 | Axys Pharmaceuticals, Inc. | 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1h-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor viia inhibitors |
| GB0306267D0 (en) | 2003-03-19 | 2003-04-23 | Ineos Fluor Ltd | Process |
| JP2008260755A (ja) * | 2007-03-20 | 2008-10-30 | Sumitomo Chemical Co Ltd | Ｌ−ビフェニルアラニン化合物の塩の回収方法、およびそれを用いたビフェニルアラニンエステル化合物の回収方法 |
| CN106946724B (zh) * | 2017-04-07 | 2019-03-22 | 苏州汉德创宏生化科技有限公司 | 单胺基抑制剂类中间体2-乙酰氨基-2-苄基丙二酸单乙酯的合成方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4981799A (en) * | 1987-08-21 | 1991-01-01 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Acylamino acid racemase, production and use thereof |
| DE4111394A1 (de) * | 1991-04-09 | 1992-10-15 | Behringwerke Ag | Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel |
| DE4115468A1 (de) * | 1991-05-11 | 1992-11-12 | Behringwerke Ag | Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien |
| DE69213546T2 (de) * | 1991-05-13 | 1997-02-27 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Neue Peptid-Verbindungen und Verfahren zur Herstellung davon |
| JP3655632B2 (ja) * | 1994-04-26 | 2005-06-02 | アベンティス・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテッド | 第Ｘａ因子インヒビター |
-
1996
- 1996-11-25 CZ CZ19981956A patent/CZ295362B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-11-25 EE EE9800188A patent/EE03698B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-11-25 BR BR9612059A patent/BR9612059A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-11-25 PT PT96942085T patent/PT868526E/pt unknown
- 1996-11-25 CA CA002241210A patent/CA2241210C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-25 AT AT96942085T patent/ATE222293T1/de active
- 1996-11-25 NZ NZ324159A patent/NZ324159A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-11-25 WO PCT/US1996/019005 patent/WO1997022712A1/en active IP Right Grant
- 1996-11-25 RU RU98113301/04A patent/RU2170764C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-11-25 KR KR10-1998-0704683A patent/KR100438879B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-25 TR TR1998/01107T patent/TR199801107T2/xx unknown
- 1996-11-25 JP JP52233697A patent/JP4044614B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-25 CN CN96199198A patent/CN1087349C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-25 IL IL12500396A patent/IL125003A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-11-25 ES ES96942085T patent/ES2179957T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-25 PL PL96327314A patent/PL185541B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-11-25 UA UA98062939A patent/UA48993C2/uk unknown
- 1996-11-25 EP EP96942085A patent/EP0868526B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-25 DK DK96942085T patent/DK0868526T3/da active
- 1996-11-25 AU AU11251/97A patent/AU717995B2/en not_active Ceased
- 1996-11-25 DE DE69623038T patent/DE69623038T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-25 SK SK855-98A patent/SK281432B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-12-17 ZA ZA9610600A patent/ZA9610600B/xx unknown
- 1996-12-18 AR ARP960105740A patent/AR005119A1/es active IP Right Grant
-
1998
- 1998-06-19 MX MX9804997A patent/MX9804997A/es not_active IP Right Cessation
- 1998-06-19 NO NO19982868A patent/NO319678B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4316889A (en) | Novel peptidyl-arginine aldehyde derivatives and process for the preparation thereof | |
| JP2945680B2 (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| EP0699074B1 (en) | Thrombin inhibitors | |
| EP0675899B1 (en) | NOVEL INHIBITORS OF FACTOR Xa | |
| US6034067A (en) | Serine protease inhibitors | |
| IE60128B1 (en) | Hydroxylamine derivatives,their preparation and use as medicaments | |
| JP3176619B2 (ja) | 芳香族スルホンアミド化合物、阻害剤及びそれを含有する医薬組成物 | |
| RU2178419C2 (ru) | Ингибиторы протеазы серина | |
| CS106492A3 (en) | Derivatives of amidinophenylalanine, process for preparing thereof, theiruse and compositions comprising said derivatives | |
| CZ195698A3 (cs) | Způsob přípravy N-acetyl-(L)-4-kyanofenylalaninu Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH a N-acetyl-(L)-p-amidinofenylalnin-cyklohexylglycin-beta-(3-N-methylpyridinium)-alaninu Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2 | |
| HU204539B (en) | Process for producing oligopeptides containing cyclic proline-analogue amino-acids and pharmaceutical compositions contaiing them as active components | |
| EP0149594A2 (en) | Enzymatic coupling of n-formyl amino acids and/or peptide residues | |
| US5686419A (en) | Basic α-aminoalkylphosphonate derivatives | |
| EP0956293B1 (en) | Thrombin inhibitors | |
| US5766932A (en) | Process for preparing N-acetyl(L)-4-cyanophenylalanine from a mixture of the corresponding D,L ethyl esters using subtilisin | |
| JPH05292991A (ja) | ペプチド酸の製造方法 | |
| Bizzozero et al. | Enzyme‐Catalyzed Peptide‐Bond Formation: Elastase‐and δ‐Chymotrypsin‐Assisted Synthesis of Oligopeptides | |
| TW389755B (en) | Novel process for preparing n-acetyl (1) -4-cyanophenylalanine ac -(1) -phe (4-cn) -oh and n-acetyl -(1)-p-amidinophenylalanine-cyclohexylglycine-<beta>-(3-n-methylpyridinium)-alanine ac-(1)-paph-chg-palme(3)-nh2 | |
| HK1017384B (en) | NOVEL PROCESS FOR PREPARING N-ACETYL(L)-4-CYANOPHENYLALANINE AC-(L)-PHE(4-CN)-OH AND N-ACETYL-(L)-P-AMIDINOPHENYLALANINE-CYCLOHEXYLGLYCINE-β-(3-N-METHYLPYRIDINIUM)-ALANINE AC(L)-PAPH-CHG-PALME(3)-NH2 | |
| JPH0778038B2 (ja) | Ｌ―アルギニナールジ低級アルキルアセタールの製造法 | |
| FR2577226A1 (fr) | Analogues de pepstatine inhibiteurs de la renine et des proteases acides | |
| JPH051719B2 (cs) | ||
| JPH04187095A (ja) | 生理活性ジペプチドの製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20111125 |