CZ19498A3 - Použití glykosidů z měsíčku (Calendula) pro léčbu psoriasy - Google Patents
Použití glykosidů z měsíčku (Calendula) pro léčbu psoriasy Download PDFInfo
- Publication number
- CZ19498A3 CZ19498A3 CZ98194A CZ19498A CZ19498A3 CZ 19498 A3 CZ19498 A3 CZ 19498A3 CZ 98194 A CZ98194 A CZ 98194A CZ 19498 A CZ19498 A CZ 19498A CZ 19498 A3 CZ19498 A3 CZ 19498A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- van
- compound
- formula
- calendula
- group
- Prior art date
Links
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 title claims abstract description 34
- 240000001432 Calendula officinalis Species 0.000 title claims description 49
- 235000005881 Calendula officinalis Nutrition 0.000 title claims description 23
- AJBZENLMTKDAEK-UHFFFAOYSA-N 3a,5a,5b,8,8,11a-hexamethyl-1-prop-1-en-2-yl-1,2,3,4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a,13b-hexadecahydrocyclopenta[a]chrysene-4,9-diol Chemical compound CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC(C1(C)CC3O)(C)C2CCC1C1C3(C)CCC1C(=C)C AJBZENLMTKDAEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 13
- 235000003880 Calendula Nutrition 0.000 title claims description 13
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 title description 13
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 title description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 106
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 10
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 117
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 107
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 81
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 77
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 56
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 32
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 21
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 21
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- -1 di-substituted phenyl Chemical group 0.000 claims description 19
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 19
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 18
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 11
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 240000009005 Calendula arvensis Species 0.000 claims description 9
- 235000007864 Calendula arvensis Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 9
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 7
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 6
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 5
- RSFQOQOSOMBPEJ-SNAWJCMRSA-N (e)-3-methylpent-2-enoic acid Chemical compound CC\C(C)=C\C(O)=O RSFQOQOSOMBPEJ-SNAWJCMRSA-N 0.000 claims description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 claims description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 4
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 4
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims 5
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims 5
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 241000132025 Calendula Species 0.000 claims 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims 3
- 239000013058 crude material Substances 0.000 claims 3
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims 3
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims 3
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 3
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 claims 2
- ZGXGYHUSQXJPID-UHFFFAOYSA-N 4-(3,4-dichlorophenyl)-3-(4-methylsulfonylphenyl)-2h-furan-5-one Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=C(Cl)C(Cl)=CC=2)C(=O)OC1 ZGXGYHUSQXJPID-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- KZNGNTKISMAXAG-UHFFFAOYSA-N 4-(3-fluorophenyl)-3-(4-methylsulfonylphenyl)-2h-furan-5-one Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=C(F)C=CC=2)C(=O)OC1 KZNGNTKISMAXAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 claims 1
- 235000019502 Orange oil Nutrition 0.000 claims 1
- 206010033474 Pain of skin Diseases 0.000 claims 1
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 claims 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical class [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 claims 1
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 claims 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 claims 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 claims 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 claims 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 claims 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 claims 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 claims 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims 1
- 125000004212 difluorophenyl group Chemical group 0.000 claims 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 claims 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims 1
- 239000010502 orange oil Substances 0.000 claims 1
- RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N rofecoxib Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=CC=CC=2)C(=O)OC1 RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 claims 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 claims 1
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 claims 1
- 241000894007 species Species 0.000 claims 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims 1
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 claims 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 claims 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 abstract 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 42
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 23
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 14
- 238000003817 vacuum liquid chromatography Methods 0.000 description 14
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 12
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 11
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 7
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical group CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 5
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 4
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 4
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 4
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 4
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 3
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- QWOJMRHUQHTCJG-UHFFFAOYSA-N CC([CH2-])=O Chemical compound CC([CH2-])=O QWOJMRHUQHTCJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZFDIRQKJPRINOQ-HWKANZROSA-N Ethyl crotonate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\C ZFDIRQKJPRINOQ-HWKANZROSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 2
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 230000002682 anti-psoriatic effect Effects 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229940002386 calendula officinalis extract Drugs 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCO HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIERETOOQGIECD-ONEGZZNKSA-N tiglic acid group Chemical group C(\C(\C)=C\C)(=O)O UIERETOOQGIECD-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 2
- ZFDIRQKJPRINOQ-UHFFFAOYSA-N transbutenic acid ethyl ester Natural products CCOC(=O)C=CC ZFDIRQKJPRINOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010046901 vaginal discharge Diseases 0.000 description 2
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- QMMJWQMCMRUYTG-UHFFFAOYSA-N 1,2,4,5-tetrachloro-3-(trifluoromethyl)benzene Chemical compound FC(F)(F)C1=C(Cl)C(Cl)=CC(Cl)=C1Cl QMMJWQMCMRUYTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGEZTMRIZWCDLW-UHFFFAOYSA-N 14-methylpentadecyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCCCCCCCCCCCCC(C)C LGEZTMRIZWCDLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SFAAOBGYWOUHLU-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexyl hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CC)CCCC SFAAOBGYWOUHLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 6-hydroxy-3,4-dihydro-1h-quinolin-2-one Chemical group N1C(=O)CCC2=CC(O)=CC=C21 HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIERETOOQGIECD-UHFFFAOYSA-N Angelic acid Natural products CC=C(C)C(O)=O UIERETOOQGIECD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004358 Butane-1, 3-diol Substances 0.000 description 1
- 229930184939 Calendulaglycoside Natural products 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022714 Intestinal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N Sorbitan monooleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 description 1
- 238000000944 Soxhlet extraction Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- UIERETOOQGIECD-ARJAWSKDSA-N angelic acid Chemical compound C\C=C(\C)C(O)=O UIERETOOQGIECD-ARJAWSKDSA-N 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 159000000032 aromatic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 125000004181 carboxyalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 229940082500 cetostearyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- QSKWJTXWJJOJFP-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethoxyethane Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOCC QSKWJTXWJJOJFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- SASYSVUEVMOWPL-NXVVXOECSA-N decyl oleate Chemical compound CCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SASYSVUEVMOWPL-NXVVXOECSA-N 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000008387 emulsifying waxe Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 229940124600 folk medicine Drugs 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- UBHWBODXJBSFLH-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol;octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO.CCCCCCCCCCCCCCCCCCO UBHWBODXJBSFLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006038 hexenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008309 hydrophilic cream Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- BYSSHGLMQCSIQS-UHFFFAOYSA-N hydroxy(octadecyl)silane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH2]O BYSSHGLMQCSIQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229940078545 isocetyl stearate Drugs 0.000 description 1
- XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N isopropyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(C)C XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000007932 molded tablet Substances 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 description 1
- 229940043348 myristyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 235000010603 pastilles Nutrition 0.000 description 1
- 125000002255 pentenyl group Chemical group C(=CCCC)* 0.000 description 1
- 239000008251 pharmaceutical emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000012673 purified plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000012521 purified sample Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000006965 reversible inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000008109 sodium starch glycolate Substances 0.000 description 1
- 229940079832 sodium starch glycolate Drugs 0.000 description 1
- 229920003109 sodium starch glycolate Polymers 0.000 description 1
- 239000008137 solubility enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N tetratriacontyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Fertilizers (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Použití glykosidů z měsíčku (Calendula) pro léčbu psoriasy
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká sloučenin, a rostlinných extraktů obsahujících sloučeniny, u kterých je ukázáno, že mají inhibiční účinek na proliferaci buněk. Přesněji, vynález se týká glykosidických sloučenin, které mohou být získány od druhu Calendula, rostlinných glykosidů májících cytostatický účinek na buňky, a jejich použití jako cytostatických agens, zejména při léčbě psoriasy.
Dosavadní stav techniky
Surové rostlinné extrakty z Calendula byly používány v lidovém léčitelství pro léčbu mnoha lehčích onemocnění po staletí. Takové extrakty byly používány, například, jako protizánětlivé léky a podobně.
Mezinárodní patentová přihláška WO 91/15218 uvádí terapeutickou kompozici proti psoriase, která obsahuje rozpuštěné extrakty alespoň šesti různých rostlin. Tato přihláška uvádí, že výtažky z měsíčku mohou být použity proti žaludečním a a střevním vředům, stejně jako pro obklady pomalu se hojících
ran a vředů. Nikdy nebylo uvedeno, že extrakt z měsíčku je skutečně použit samostatně jako aktivní složka v terapeutické kompozici proti psoriase.
Pizza C., a de Tommasi N. , Phytochemistry, svazek 27, č. 7, str. 2205 - 2208 (1988) uvádějí izolaci a strukturu seskviterpenového glykosidů z Calendula arvensis. Je uvedeno, že • ·
Calendula arvensis L. (Compositae) je bylina používaná v italském lidovém léčitelství jako protizánětlivý a antipyretický lék. Není zde žádný náznak toho, že seskviterpenové glykosidy mají cytostatickou aktivitu nebo že mohou být použity pro léčbu psoriasy.
Mascolo N. et al. , Phytotherapy Research, svazek 1, str. 26 31 (1987) Uvádí, že extrakt z měsíčku je známý svou protizánětlivouaktivitou. Není zde žádná zmínka o tom, že extrakt z měsíčku může být použit jako anti-psoriatické agens.
Gracza L., Planta Medica 53, str. 227 (1987) popisuje různé kyslík obsahující terpenové deriváty z Calendula officinalis. Je ukázáno jejich použití pro leukorheu a trichomonadocidní aktivitu. Není zde žádná zmínka o použití terpenových derivátů jako antipsoriatických agens.
Fazakas B. a Rácz G., Farmacia svazek XIII, č. 2, str. 91 (1965) také ukazují, že extrakty z rostlin Calendula officinalis jsou používány ve tradiční rostlinné medicíně pro leukorheu (excesivní fluor albus) a že mají dobrou trichomonadocidní aktivitu.
Gracza L. a Szász K, Acta Pharm. Hung. 38, str. 116 - 125 (1968) popisují chemickou analýzu korunních plátků měsíčku (Calendula officinalis) s cílem separovat a identifikovat roztok nebo roztoky, které jsou odpovědné za trichomonadocidní účinek, který popsal Fazakas a Rácz (výše).Nejaktivnější izolované kapalné sloučeniny byly popsány jako terpenové alkoholy a terpenové láktony podle spektroskopických dat.
• ·
Jakupovic et al., Planta Medica 54 (3) str. 254 - 256 (1988) popisují extrakci a izolaci pěti seskviterpenových glykosidů z Calendula persica. Není zdě žádná zmínka o potenciálním nebo o aktuálním použití extrahovaných a izolovaných molekul.
Ahmed A. Ahmed et al., Journal of Natural Products svazek 56, č. 10, str. 1821 - 1824 (1993) popisuje extrakci produktů z Calendula arvensis. Produkty jsou popsány jako čtyři nové seskviterpenové glykosidy a tři již známé. Není zdě žádná zmínka o jejich možném použití.
EP 364442 B1 popisuje terapeutickou kompozici proti psoriase, která obsahuje olejový extrakt a alespoň tří rostlin, kde tyto tři rostliny jsou vybrány ze skupiny, která může obsahovat Calendula. Nicméně, je zde uvedeno, že separátní extrakty nemají kurativní účinek pro psoriasu, pokud jsou použity jednotlivě. Dále, je zde uvedeno, že výtažky z Calendula sami o sobě jsou používány pro léčbu žaludečního a duodenálního vředu. Výtažky z Calendula nejsou popsány jako účinné pro léčbu kožních onemocnění obsahujících abnormální stupeň proliferace kožních buněk (např. hyperproliferace) u onemocnění jako je psoriasa.
DE 3836519 C2 uvádí, že farmaceutický přípravek obsahující Čerstvě nasbíraný kompozit květů z Calendula officinalis s mléčným tukem jako masúovým základem je použitelný pro léčbu psoriasy. Nicméně, u kompozice je popsáno, že může vyvolat alergii, která může vést k přerušení léčby, a.není zde žádný náznak nebo identifikace aktivní složky sloučeniny. Není zde důkaz cytostatické aktivity a dále není jasné, která složka nebo směs složek v uvedeném farmaceutickém přípravku založeném na Calendula officinalis je aktivní složkou. Kromě toho zde není žádný aktuální důkaz, který by ukazoval, že kompozice byla použita pro léčbu psoriasy.
Existuje potřeba vývoje nových cytostatických léčiv, která by byla účinná v boji proti nástupu, trvání a/nebo vývoji onemocnění obsahujících hyperproliferaci buněk dermis, zejména pro léčbu psoriasy.
Oblast vynálezu
Předmětem předkládaného vynálezu je poskytnout použití aktivních sloučenin nebo purifikovaných rostlinných extraktů obsahujících alespoň jednu aktivní sloučeninu v přípravě léčiva pro léčbu onemocnění obsahujících hyperproliferaci buněk dermis, zejména pro léčbu psoriasy.
Druhým předmětem předkládaného vynálezu je poskytnout izolované a/nebo purifikované sloučeniny z Calendula pro použití v léčbě onemocnění obsahujících hyperproliferaci buněk dermis, zejména pro léčbu psoriasy.
Třetím předmětem předkládaného vynálezu je poskytnout izolované sloučeniny pro použití v léčbě onemocnění obsahujících hyperproliferaci buněk dermis, zejména pro léčbu psoriasy.
Tyto a jiné předměty vynálezu budou jasné z následujícího popisu a příkladů.
Podle jednoho aspektu předkládaného -vynálezu je zde poskytnuto kkde
Rx a použití
vzorce (I) :
z H, OH,
H,C C00and
H a s nimi souvisejících esterů;
o
CH3C0HX CH, HX C003'c=c - , 3 >C H too- h>3 a s nimi souvisejících esterů;
R4 je vybrán z Cs-Cx2 nasycených nebo nenasycených monocyklických nebo polycyklických alifatických kruhových volitelně substituovaných Cx-Cs alkylem, H, OH, =CH2 nebo alkyl karboxyloxy nebo R4 znamená Ci-C6 alkalenovou skupinu substituovanou takovým kruhovým systémem;
systémů
C -C X 4 přímou nebo rozvětvenou • · • ·
Rs je vybrán z -CHa, -CHO, souvisejících esterů a etherů
-COOH nebo -CH OH a s nimi 2 od nich odvozených;
v přípravě léčiva pro léčbu onemocnění obsahujících proliferaci buněk dermis.
Pro účely předkládaného vynálezu související estery a ethery znamenají všechny definované estery R skupin zde uvedených a obecně, nasycené nebo nenasycené přímé nebo rozvětvené C^-Ο^θ karboxyalkyl esterifikující kyseliny. Vhodné příklady zahrnují esterifikujícíkyseliny obsahující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sekundární butyl a všechny isomery pentanylové, pentenylové, hexanylové a hexenylové alkyl skupiny. Termín související estery také zahrnuje aromatické kyseliny jako je kyselina benzoová a kyselina skořicová. Cx-C2O alkyl ethery obsahující přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny jak jsou definovány pro související estery výše jsou zde také zahrnuty.
Preferovaně je zde poskytnuto použití sloučenin podle obecného vzorce (I), kde
R1 a R2 jsou nezávisle vybrány z H, -OH • · • · · • · • · •
9 •
• · • · h3c ch3 c=c
H too3
CH3CH5C(CH3>CHC0 ch,c(chO
• ·
R5 je vybrán ze skupin CH3, -CHO, -COOH a -CH^OH; a 0 u
R6 je vybrán z OH, ({^3)2CHCO;CH3CH2CH(CH3)CO-)
| G | HJt J00” | |
| 1' ; rn- | 3\=C | and |
| H' tH, |
C—t η tooV dalším preferovaném provedení je zde poskytnuto použití sloučenin podle obecného vzorce (I) extrahovatelných z druhu Calendula, kde:
Rx a R2 jsou nezávisle vybrány z H a OH (SOH a uOH);
o
R’ je vybrán z OH, CH3C(CH3)=CHřo-Cd3CO° o
CH_,CH7C(CH3)=CHCO- and cH,CH,CH(CH3)(!o- .
R4 je vybrán z
Rs je vybrán z OH, ° Π’
CH3CO-, (CH3)2CHCCH , and CH3CH2CH(CH3)CONejlépe je zde poskytnuto použití použití sloučenin podle obecného vzorce (I) extrahovatelných z druhu Calendula, kde:
R1 a R2 j sou nezávisle vybrány z H a OH (βΟΗ a aOH) ;
R3 je vybrán z OH a (E)-3-methylpent-2-enoatu, t.j.
R5 je CH3; a
R6 jeOH. ··.
Odborníkům bude.jasné, že skupiny'R1, Ř2, R6 a R3 mohou být umístěny bud' v axiální nebo v ekvatoriální pozici.
aPřirozeně, odborníkům bude zřejmé, že fyziologicky funkční isomery vzorce (I) jak od· druhů Calendula, tak od nich odvozené syntetické isomery obsahující konformační a konstituční isomery stejně jako D a L formy vzorce (I) jsou obsaženy v předkládaném vynálezu. Příklady konformačních isomerů podle předkládaného vynálezu jsou obsaženy ve vzorcích (la) a (lb), které následují:
vzorec 'j(I)..TŮPřirbzehě,r odborníkům'bude gasné, že jiné konstituční isomerické varianty příbuzné k židličkovému (vzorec (Ia)) a vaničkovému!1· tvarům (vzorec (íb) ) mající fyziologickou funkčnost, také spadají do rozsahu vynálezu. Sloučeniny podle vzorce (I) mohou být isolovány .z .druhů Calendula za použití ‘‘k,·... Ρ Λ . ' ~ ' P ’ .tJ'· & . běžných technologií extrakce organickými rozpouštědly. Obecně, ; ...... '
i. . . sloučeniny podle-vzorce (I) mohou být extrahovány z jakékoliv ! rostlinné tkáně jako jsou listy, stonky, části květu, kořeny,
I výhonky a podobně.
• · ·.. ; > op L,·'·' ríUíRcu< Pt / ’ V dalším provedení vynálezu jsou poskytnuty nové sloučeniny í
i <
ηηΰΚίΧ=
V preferovaném provedení j sou zde poskytnuty podle vzorce (I), kde
R1 a R2 jsou nezávisle vybrány z
’Ί13 • · • · · · • · • · ·· ♦·
Rs je vybrán z -CH3, -CHO, -COOH a -CH^OH;
Rs je vybrán z
Η3ς „COOh cocr cnd s C=C
H' tH3 a jejich fyziologicky funkční isomery.
V dalším preferovaném provedení jsou zde poskytnuty nove sloučeniny podle vzorce (D, kde
Rx a R2 jsou nezávisle vybrány z -OH, H,
R3 je (E)-3-methylpent-2-enoatu;
R4 je vybrán z
R5 je -CH3;
Rs j e OH;
a jejich fyziologicky funkční isomery.
Odborníkům bude jasné, že skupiny Rx, R2, R6 a R3 mohou být ·· · « ·
umístěny buď v axiální nebo v ekvatoriální pozici.
Pro účely předkládaného vynálezu znamenají fyziologicky funkční isomery isomery, které jsou schopné významně zpomalit nebo zastavit hyperproliferaci buněk dermis. Tak by u takových isomerů mělo být ukázáno, že mají významný cytostatický účinek a že jsou užitečné v léčbě kožních onemocnění jako je psoriasa.
Příklady -nových sloučenin podle předkládaného vynálezu zahrnují:
(i) (rel)-laa, 4ae, 7aS, 7ba-dekahydro-l,1,4e , 7o'-tetramethyl-lH-cykloprop (e)azulen-4e-0- (2-E- (3-methylpent-2enoyl)-E-chinovopyranosid (Van-10-3).
(ii) (rel)-5€, 7e, 14e-eudesm-4(15)-en-11-0-(2-E-(3-methyl) pent-2-enoyl)-β-fukopyranosid (Van-10-2).
| • ♦ | • * | 9 · | • | • · | • · | ||||||
| • | • | • | • | • | • | • | • | • | • | ||
| • | • | • | • · | • | • | • · | • | • | • · | ||
| • | v | • | • | • · | • | 9 · · · | P ·· | • | • | • | |
| • | • | • | • | • | • | • | • | • | 9 | ||
| • · | • · | • · | • | * · | • · |
(iii) (rel)-laa, 4ae, 7aB, 7ba-dekahydro-l,1,4e, 7a-tetramethyl-lH-cykloprop(e)azulen-4e-O-(2-E-(3-methyl)pent-2enoy1)
Preferovanými novými sloučeninami podle předkládaného vynálezu na základě jejich biologické aktivity jsou sloučeniny (ii) a (iii) jak jsou uvedeny výše, a jejich fyziologicky funkční deriváty a analogy. Nejvíce preferovanou sloučeninou podle její biologické aktivity je sloučenina (iii) výše.
Jako provedení vynálezu je obsaženo použití sloučenin podle vzorce (I) v kompozicích pro léčbu onemocnění obsahujících hyperproliferaci buněk dermis, zejména pro léčbu psoriasy. Přirozeně, odborníkům bude jasné, že takové použití může obsahovat použití známých sloučenin isolovaných z druhu Calendula jako jsou:
(iv) (rel)-laa, 4ae, 7aB, 7ba-dekahydro-l,1,4e ,
7a-tetramethyl-lH-cykloprop(e)azulen-4e-O-B-fukopyranosid (Van-15A).
• · • · <i
’ Preferovanou sloučeninou použitou v přípravě léčiva pro léčbu kožních onemocnění jako je psoriasa je sloučenina (iii) uvedená výše.
Odborníkům bude jasné, že analoga sloučenin (i) až (ivj mohou být syntetisovány od nich in šitu. Například, tam, kde jsou skupiny R1 a R6 obě OH, nebo R2 a Rs jsou obě -OH, mohou být esterifikovány na ester kyseliny angelikové, ester kyseliny tiglinové nebo na jiný ester reakcí vhodného chloridu kyseliny nebo anhydridu kyseliny s vhodnou výchozí sloučeninou, například sloučeninou (iii), za přítomnosti vhodné baze, jako je pyridin. Obě alkoholové funkce budou touto technikou esterifikovány. Deriváty s různými esterovými skupinami na Rx a R6, například ester kyseliny tiglinové a ester kyseliny angelikové mohou být také připraveny reakcí vhodné sloučeniny jako je sloučenina (iii) se směsí dvou chloridů kyselin a dvou anhydridů. Takto budou produkovány všechny čtyři možné isomery, které mohou být ' separovány za použití standartních technik jako je chromatografie __ na silikagelu a podobně.
Ethylkrotonatové rameno (R3) na sloučeninách (i) a (iii) může být nahrazeno jinými estery karboxylových kyselin za použití následujícího obecného postupu. R1 a R6hydroxylové funkce mohou • · • ·
být chráněny vytvořením acetonidu reakcí sloučeniny s acetonem za přítomnosti toluensulfonové kyseliny nebo podobnou technikou v oboru známou, jako jsou ty, které jsou popsány v Protéctive Groups in Organic Synthesis, Second Edition, T.W. Greene, P.G.M. Wuts (ISBN 0 471 62301 6) (např. kapitola 2, str. 123 - 127), zde uvedené jako odkaz, za produkce například sloučeniny jako je sloučenina A dále nebo podobných sloučenin. .. CHa h3g
Ethylkrotonatové rameno může být odstraněno kyselou nebo zásaditou hydrolýzou například sloučeniny (iii) za zisku produktu s R3 = OH. Vzniklá sloučenina může potom reagovat s vhodným chloridem kyseliny nebo s anhydridem kyseliny za zisku esteru jako je ester kyseliny tiglinové nebo angelinové na R3 . Alternativně může být takový ester vytvořen transesterifikací sloučeniny A (výše) s nadbytkem organické kyseliny jako je kyselina tiglinová nebo angelinová za přítomnosti vhodného kyselého nebo zásaditého katalyzátoru. Nakonec, ochranná
-- acetonidová skupina může být štěpena vhodným štěpícím činidlem jako je jod v methanolu tak, jak je to popsáno v Greene T.W. (výše).
Jako preferované provedení vynálezu je zde poskytnuto použití • ·
alespoň jedné sloučeniny isolované z druhu Calendula, jako je Calendula officinalis, pro výrobu léčiva pro léčbu psoriasy. Typicky je sloučenina rostliný glykosid, jako je seskviterpenový glykosid. V rozsahu vynálezu je také zahrnuta terapeutická kompozice proti psoriase charakterisovaná tím, že obsahuje alespoň jeden rostliny glykosid isolovaný z druhu Calendula, jako například Calendula officinalis. Obecně, terapeutické kompozice obsahují alespoň jeden purifikovaný rostliný glykosid, jako je Γ seskviterpenový glykosid podle vzorce (I). Odborníkům v obořu &
κ bude jasné, že takové kompozice mohou obsahovat dva nebo více » rostlinných glykosidů v jakékoliv koncentraci, která je schopna dávat terapeutický cytostatický účinek. Tak mohou terapeutické ►
is. kompozice obsahovat rostlině extrakty z Calendula významně prosté kontaminujících nežádoucích sloučenin. U rostliných extraktů, například, může být provedeno mnoho kroků extrakce rozpouštědlem pro separaci nežádoucích složek od požadovaných složek, jako jsou ty, které jsou zahrnuty ve vzorci (I). Samozřejmě, rostlině extrakty, u kterých byly provedeny takové kroky extrakce rozpouštědlem, mohou obsahovat více než jeden rostlinný glykosid a mohou obsahovat několik rostliných glykosidů. Takové extrakty z rostlin mohou být podrobeny dalším postupům extrakce rozpouštědlem pro isolování jednotlivých aktivních rostliných glykosidových sloučenin podle vzorce (I) .
Nyní následuje popis obecných metod pro získání purifikovaných extraktů druhu Calendula obsahujících aktivní složky schopné
Sr í.t . i..
- produkovat cytostatické účinky na buňky dermis, pro úpravu f , takových extraktů a pro isolaci aktivních složek z extraktů a/nebo pro jejich následnou purifikaci.
íťv.
Květy druhu Calendula jsou rozmělněny na prášek v drtiči a • · vzniklý prášek je extrahován Soxhletovým přístrojem petroletherem do vyčerpání. Extrakt může potom být koncentrován, například za redukovaného tlaku za použití odpařováku, jako je rotační odpařovák, za vzniku zbytku extraktu, surového extraktu. Surový extrakt může potom být frakcionován pomocí, například, vakuové kapalinové chromatografie (VLC) za použití rozpouštědel a
rozpouštěcích systémů se zvýšenou polaritou. Vhodná rozpouštědla zahrnují rozpouštědla jako jsou polární a nepolární organická rozpouštědla a jejich směsi. Příklady rozpouštědel, která mohou být použita v metodě extrakce vhodné pro účely předkládaného vynálezu jsou následující (poměry objemu):
Benzín - EtOAc (EtOAc 0-10%)
Benzín - EtOAc (EtOAc 12 - 18%)
Benzín
EtOAc (EtOAc 20 - 24%)
Benzín - EtOAc (EtOAc 24 - 30%)
1, Cř>
i .
Benzín - EtOAc (EtOAc 35 -40%)
Benzín - EtOAc (EtOAc 45%)
Benzín - EtOAc (EtOAc 50 - 55%)
Benzín (EtOAc
Benzín (EtOAc
Benzín (EtOAc
Benzín (EtOAc
Benzín (EtOAc
EtOAc (MeOH 0
- EtOAc
60%)
- EtOAc
- 75%)
- EtOAc
- 85%)
- EtOAc
- 95%)
- EtOAc
95%)
MeOH
- 5%)
EtOAc - MeOH (MeOH 10 - 100%) hexan, směsi hexan : chloroform v poměrech objemů:
Hexan : Chloroform
100 :0 :5 :1 :2
O : 100 chloroform, a směsi chloroform : methanol (např. 5:1, 1:1) a podobně. Tak může být surový extrakt několikrát frakcionován za použití různých směsí organických rozpouštědel v předem vybraných poměrech, například, zvýšené polarity.
574 Při VLC je silikagel (Měrek 7749) obvykle vnesen do nádobky, například do nálevky se sintrem, aplikací vakua, í- za získání kolony. Surový extrakt může být připraven pro zavedení do VLC kolony například adsorpcí na oxid křemičitý (například 1:1 hmotnost/hmotnost) a může být umístěn na vrchol kolony jak je popsána výše, a eluován alespoň jednou rozpouštědlem nebo rozpouštěcím systémem se zvýšenou polaritou, jako jsou ty, které jsou zde uvedeny v předem určených poměrech. Eluenty z VLC kolon jsou odebrány a mohou být podrobeny další frakcionaci pomocí chromatografie na koloně nebo jiného vhodného chromatografického prostředku. Po frakcionaci surového extraktu mohou být odebrané eluenty podrobeny preparativní chromatofrafii na tenké vrstvě (TLC) pro analýzu aktivních složek v něm obsažených. Například, v jedné metodě je eluovaná frakce označená Van-5-10, získaná z chromatografie na koloně využívající směs chloroform:methanol v poměru 95:5, podrobena TLA analýze za použití počátečního rozpouštěcího systému hexan:chloroform:ethylacetat v poměru objemů 3:6:6, za vzniku pěti frakcí označených Van-9-1, Van-9-2, Van-9-3, Van-9-4 a Van-9-5. O takových frakcích je možné prohlásit, že obsahují přečištěné směsi různých glykosidových * molekul zahrnutých ve vzorci (I) a je možné je považovat za frakce v podstatě prosté kontaminujících složek jako jsou rostlině proteiny, rostlině hormony a podobně. Takové eluované ·
frakce mající cytostatickou aktivitu tvoří provedení předkládaného vynálezu.
V dalším kroku mohou být frakce Van-9-1 až Van-9-5 uvedené výše podrobeny další preparativní chromatografie na tenké vrstvě (prep. TLC) na silikagelu za použití dalších směsí organických rozpouštědel. Například, eluovaná frakce Van-9-2 může být podrobena prep. TLC využívající jako rozpouštědlo hexan:chloroform:ethylacetat v poměru 3:6:4 za vzniku subfrakcí Van-9-2, označených Van-9-2B a Van-9-2C. Subfrakce vzniklé z kroku prep. TLC mohou být podrobeny dalším čhromatografickým krokům jako je vysokotlaká kapalinová chromatografie (HPLC). Například, TLC isolované frakce Van-9-2-B a Van-9-2-C jsou podrobeny HPLC za použití oktadecyl-silanolové (ODS) (analytické) kolony s rozpouštědlem 75% acetonitrilem ve vodě obsahujícím 0,1% kyselinu třifluorooctpvoů (TFA(, Jednotlivé frakce získané HPLC technikami mohou být potom hodnoceny na aktivní složky za použití NMR technik a analýzy cytostatické aktivity takových frakcí in vitro.
Pro větší šarže surového materiálu, jako jsou sušené okvětní lístky Calendula officinalis, může být použita následující obecná metoda extrakceSušený rostliný materiál, například, okvětní lístky Calendula officinalis, mohou být rozmělněny na hrubý prášek a extrahovány ve vhodném organickém rozpouštědlu. Obecně, extrakční metodou může být jakákoliv vhodná extrakční metoda známá v obořu, jako je Soxhletova extrakce, extrakce v lázni, a kontinuální extrakce. Tak, jako další aspekt předkládaného vynálezu je zde poskytnuta anti-psoriatická sloučenina podle vzorce (I), kterou je možné ·· získat z druhu Calendula zejména pomocí procesu Soxhletovy, lázňové nebo kontinuální extrakce. Takové procesy extrakce jsou v oboru známé. Preferovaným druhem Calendula je Calendula officinalis a preferovanou extrakční metodou je metoda kontinuální extrakce. Vhodná organická rozpouštědla pro použití v metodě kontinuální extrakce zahrnují polární a nepolární organická rozpouštědla jako je methanol, ethanol, dichlormethan, toluen, hexan, ethylacetat, isopropyl a podobně. Preferovaně je rozpouštědlem nepolární organické rozpouštědlo jako je heptan. Vzniklý extrakt je koncentrován ve vakuu, dokud není získán vhodný procentuální poměr hmotností extraktu/celkového objemu roztoku {% hmotnost/objem). Vhodný poměř % hmotnost/objem roztoku je v rozmezí od 10% hmotnost/objem do 60% hmotnost/objem, lépe mezi 15% hmotnost/objem a 30% hmotnost/objem a nejlépe okolo 20% hmotnost/objem. Vzniklý koncentrát je dále extrahován v roztoku polárního rozpouštědla/vody ve vhodném poměru hmotností; t.j. poměru jako je například 10:0 až 7:3. Preferovaně je poměr od 10:0 do 8:2. Ještě lépe je poměr 9:1. Vhodné polární organické rozpouštědlo může být vybráno z acetonitrilu, methanolu, ethanolu, ethylacetatu a podobně. Preferovaným polárním organickým rozpouštědlem je acetonitril. Heptanová frakce je odstraněna a VAN- obsahující frakce polárních organických rozpouštědel (jako jsou acetonitrilové frakce) mohou potom být kombinovány a polární organické rozpouštědlo může být odstraněno ve vakuu. Vzniklá pevná látka může potom být znovu rozpuštěna ve vhodném polárním nebo nepolárním organickém rozpouštědle jako je ethylacetat, methanol, acetonitril, diethylether, dichlormethan, toluen a podobně, a potom může být postupně promývána baží jako je bikarbonat sodný v poměru 10:30% hmotnost/objem, vodou, ředěnou anorganickou kyselinou jako je kyselina chlorovodíková v koncentraci od 0,05 do 0,1 M nebo ředěnou organickou kyselinou • · * · • ·
jako je kyselina citrónová v koncentraci od 0,2 M do 1,0 M, a nakonec vodou. Roztok organického rozpouštědla je potom odpařen ve vakuu,
Vzniklý surový přípravek může být dále čištěn na vhodnou Van-10 sloučeninu, jako je Van-10-4. Surový přípravek může být znovu rozpuštěn ve vhodném objemu organického rozpouštědla jako je polární organické rozpouštědlo nebo ve vhodném objemu směsi alespoň jednoho polárního organického rozpouštědla: alespoň jednoho nepolárního organického rozpouštědla. Preferovaně se organické rozpouštědlo skládá z jednoho polárního organického rozpouštědla ve směsi s jedním nepolárním organickým rozpouštědlem. Tam, kde je použita směs organických rozpouštědel, by měly být mísitelné jedno s druhým. % poměr (objem/objem) polární organické rozpouštědlo:nepolární organické rozpouštědlo by měl být mezi 80:20 a 20:80% (objem/objem), preferovaně 30:70 a 70:30% (objem/objem). Například, množství surového extraktu může být znovu rozpuštěno ve vhodném objemu směsi polární organické rozpouštědlo:nepolární organické rozpouštědlo v procentuálním poměru 50% polárního organického rozpouštědla: 50% nepolárního organického rozpouštědla. Preferovanou směsí rozpouštědel je 50% ethylacetat:50%hexan. Další vhodné rozpouštědlo může být vybráno z polárních a nepolárních organických rozpouštědel jak byla uvedena výše. Rozpuštěný materiál může být zaveden na systém rychlé chromatografie, jako je rychlá 75 kolona a eluován při vhodném průtoku za použití vhodné směsi rozpouštědel jako mobilní fáze, např. 50% ethylacetatu: 50% hexanu. Vhodný průtok z rychlé chromatografické kolony může být od 50 - 500 ml/minutu v závislosti na velikosti použité kolony, preferovaně od 100 - 250 ml/minutu, lépe okolo 250 ml/minutu za použití, například, směsi 50% ethylacetat:50% hexan jako mobilní fáze. Pro mobilní fázi
může být poměr polární rozpouštědlo : nepolární rozpouštědlo v rozsahu použitém pro opětovné rozpuštění surového extraktu jak bylo uvedeno výše. Aktuální poměr bude záviset na použité směsi rozpouštědel. Za použití popsaného systému rychlé chromatografie může být Van směs isolována do mnoha frakcí. Tyto frakce mohou být potom kombinovány a odpařeny do sucha. Po odpaření mohou být kombinované frakce (t.j. polosurový materiál) znovu rozpuštěny ve vhodném polárním organickém rozpouštědle, jako jsou polární rozpouštědla uvedená výše a vzorky rozpuštěných frakcí mohou být přečištěny, například, HPLC za použití kolony s reversní fází jako je Spherisorb kolona a podobně. Roztok výsledného kombinovaného (polosurového) materiálu získaný po rychlé chromatografii, ale před HPLC, může být znovu rozpuštěn v ředidlu podobném ředidlu použitém pro mobilní fázi a může být rozdělen do aliquot. Tyto aliquoty mohou potom být zpracovány standartními HPLC technikami v oboru známými, jako je isokratická separace nebo gradientová eluce. Samozřejmě, odborníkům v oboru bude jasné, že maximální koncentrace polosurového materiálu znovu rozpuštěného v mobilní fázi bude závislá na použitém rozpouštědle. Například, více než 25 mg/ml kombinovaného (polosurového) extraktu může být znovu rozpuštěno v acetonitrilu, který může být potom rozdělen do vhodných objemů pro chromatografii na HPLC koloně. Každý vzorek se nechá projít po dobu závislou na použité mobilní fázi a VAN-10 sloučeniny mohou být eluovány ve vhodných časových intervalech. Vhodné časové intervaly mohou být vybrány provedením předběžných kol HPLC na analytické koloně za použití různých rozpouštěcích systémů jako mobilní fáze a vybráním rozpouštěcího systému, který vede k optimální rychlosti eluce a k dobrému rozlišení vzorku.
V mobilní fázi může být % polární organické rozpouštědlo : nepolární organické rozpouštědlo v rozsahu 90:10 až 10:90, lépe ·· ·
od 70 - 80:30:-20, nejlépe od 75 - 80:25 - 20. Tak, pro HPLC přečištění může být mobilní fáze skládající se z 75% acetonitrilu:25% vody a průtok může být dán podle velikosti použité kolony, například 5 ml/minutu. Vhodná polární organická rozpouštědla mohou být ta, která jsou uvedena výše. Preferovanými organickými rozpouštědly jsou acetonitril nebo methanol.
Odborníkům bude jasné, že výběr rozpouštědla, nebo směsi rozpouštědel pro každý krok isolace aktivních složek může být řízen výsledky analýzy biotestu jednotlivých frakcí a nakonec identifikací aktivních složek objevených v jednotlivých frakcích, v různých krocích extrakčního postupu.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou mít cytostatickou aktivitu na myší embryonální fibroblasty in vitro. Tak byla cytostatická aktivita sloučenin podle obecného vzorce (I) demonstrována v mnoha testech na cytostatickou aktivitu in vitro. Kromě toho, cytostatická aktivita sloučenin podle obecného vzorce (I) byla demonstrována in vivo.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou ukázány jako užitečné pro léčbu kožních onemocnění, při kterých je pozorována abnormálně vysoká proliferace buněk v procesu choroby. Mohou být využity pro léčbu kožních onemocnění, jako je psoriasa, kde je abnormálně vysoká buněčná proliferace známým příznakem uvedeného kožního onemocnění.
Vynález tak dále poskytuje způsob pro léčbu kožních onemocnění jako je psoriasa u savců, včetně lidí, který obsahuje použití klinicky užitečného množství sloučeniny podle vzorce (I) nebo jejího fyziologicky funkčního derivátu ve farmaceuticky
použitelné formě, jednou nebo několikrát denně, nebo podle jakéhokoliv jiného vhodného protokolu podání, orálně nebo lokálně.
Kromě toho, jako další nebo alternativní aspekt předkládaného vynálezu, je zde poskytnuta sloučenina podle vzorce (I) nebo její fyziologicky funkční derivát, pro použití v terapii například psoriasy a podobně.
Množství sloučeniny podle vzorce (I) nutné pro cytostatický účinek se bude samozřejmě velmi lišit a nakonec je bude určovat lékař nebo veterinář. Faktory, které musí být brány v úvahu, jsou léčené onemocnění, způsob podání, a charakter přípravku, tělesná hmotnost savce, povrch těla, věk a celkový stav a druh podané sloučeniny. Vhodná účinná dávka cytostatické sloučeniny podle předkládaného vynálezu obecně leží v rozsahu okolo 0,01 do 120 mg/kg tělesné hmotnosti, např. 0,1 zž 120 mg/kg tělesné hmotnosti, lépe v rozsahu 0,1 až 50 mg/kg, například 0,5 až 50 mg/kg. Celková denní dávka může být podána jako jednotlivá dávka, jako více dávek, např. jako dvě až šest aplikací za den. Například, pro 75 kg savce (např.člověka) bude rozsah dávky od 8 do 9000 mg na den, a typická dávka by měla být okolo 50 mg na den. Poud jsou při léčbě indikovány jednotlivé dávky opakovaně, pak bude typicky podáváno 15 mg sloučeniny podle vzorce (I) až 4 krát denně.
Ačkoliv je možné podat aktivní sloučeninu samostatně, je výhodné předkládat aktivní sloučeninu ve farmaceutické formulaci. Formulace podle předkládaného vynálezu, pro léčebné použití, obsahuje sloučeninu podle vzorce (I) spolu s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči a volitelně s jinou
Λ·1 /i.
terapeutickou příměsí. Nosič(e) by měly být farmaceuticky přijatelné ve smyslu kompatibility s jinými přísadami ve formulaci a neměly by být škodlivé pro jejich příjemce.
Předkládaný vynález, proto, dále poskytuje farmaceutickou formulaci obsahující sloučeninu podle vzorce (I) nebo její fyziologicky funkční derivát spolu s jejím farmaceuticky přij atélným nosičem.
Přirozeně, odborníkům bude zřejmé, že jakákoliv farmaceutická kompozice obsahující aktivní sloučeninu podle vzorce (I) může obsahovat alespoň jednu aktivní sloučeninu izolovanou a/nebo přečištěnou z extraktu z druhu Calendula. Preferovaně, druh Calendula je vybrán z alespoň jednoho druhu z Calendula officinalis, Calendula arvensis a Calendula persica. Nejlépe je aktivní sloučenina izolovaná z druhu Calendula izolovaná a/nebo přečištěná z Calendula officinalis. Tak může farmaceutická formulace obsahovat aktivní složku isolovanou a/nebo přečištěnou ze dvou nebo více druhů Calendula, kde aktivní složka může být tvořena dvěma nebo více aktivními sloučeninami podle vzorce (I), výše.
V dalším provedení může farmaceutická formulace obsahovat směs alespoň jedné aktivní sloučeniny podle vzorce (!) isolované a/nebo přečištěné z extraktu odvozeného z Calendula officinalis a alespoň jedné aktivní sloučeniny isolované a/nebo přečištěné z Calendula arvensis nebo Calendula persica.
Je zde také poskytnut způsob pro přípravu farmaceutické formulace obsahující vytvoření asociace mezi sloučeninou podle vzorce (I) nebo jejím fyziologicky funkčním derivátem a ·· ·· ·· · ·· ·· ··· ··· · · · · • ···· · · · · * · · · • « · * · · ······ r·· · · • · · ♦ · · · · · · ·· · · ·· · · · ·· farmaceuticky akceptovatelným nosičem.
Formulace podle předkládaného vynálezu zahrnují ty, které jsou vhodné pro orální nebo pro lokální podání. Preferovanými formulacemi jsou ty, které jsou vhodné pro lokální podání, jako je kožní podání. Pro infekce zevních tkání, například kůže, jsou formulace preferovaně aplikovány jako lokální masti nebo krémy obsahující aktivní složku v množství například 0,075 až 20% hmotnost/hmotnost, lépe 0,2 až 15% hmotnost/hmotnost a nejlépe 0,5 až 10% hmotnost/hmotnost. Pokud je formulací mast, pak mohou být aktivní složky použity s bud' parafinovým nebo hydrofobním masúovým základem. Alternativně mohou být aktivní složky formulovány v krému se základem krému olej ve vodě.
Pokud je to žádoucí, pak může vodná fáze krému obsahovat například alespoň 30% hmotnost/hmotnost polyhydrického alkoholu, t.j. alkoholu, který má dvě nebo více hydroxylových skupin jako je propylenglykol, butan-1,3-diol, manitol, sorbitol, glyerkol a polyethylenglykol a jejich směsi. U lokálních formulací může být žádoucí, aby obsahovaly sloučeninu, která by zvyšovala absorpci nebo penetraci aktivní složky přes pokožku nebo jiné postižené oblasti. Příklady takových látek, které zvyšují kožní penetraci zahrnují dimethylsulfoxid a příbuzné analogy.
ólejová fáze emulsí podle předkládaného vynálezu může být vytvořena ze známých přísad známým způsobem. Ačkoliv fáze může obsahovat jenom emulsifikátor (jinak známý jako emulgens), je žádoucí, aby obsahovala alespoň jednoho emulsifikátóru s tukem nebo s olejem nebo s tukem i olejem. Preferovaně je obsažen hydrofilní emulsifikátor spolu s lipófilním emulsifikátorem, který působí jako stabilizátor. Je také preferováno, aby «· ··«· • ·· • ···· • · ·» ♦ • · ·* ·»·· ·* · » ·· • · ·· • ····· • ·· ·· · ·· ·· • · ·· < · ·· • ····· • ·· s« ·· obsahovala jak olej, tak tuk. Dohromady vytváří emulsifikátor s nebo bez stabilizátoru takzvaný emulsifikační vosk, a vosk spolu s olejem a/nebo tukem vytváří takzvaný emulsifikační masúový základ, který vytváří v oleji rozpustnou fázi krémové formulace.
Emulsifikátory a stabilizátory emulse vhodné pro použití v přípravcích podle předkládaného vynálezu zahrnují Tween 60, Spán 80, cetostearylalkohol, myristylalkohol, glycerolmonostearát a ; iaurylsíran sodný, £ Volba vhodných olejů a tuků pro formulace je založena na i dosažení požadovaných kosmetických vlastností, protože ý’ rozpustnost aktivní sloučeniny ve většině olejů, které mohou být
L použity ve formulacích farmaceutických emulsí je velmi nízká. Tak by krém měl být nemastný, nebarvící a smyvatelný produkt vhodné konsistence, aby neunikal z tub nebo jiných kontainerů. Mohou být použity mono- nebo dibazické alkylové estery s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, jako je di-isoadipat, isocetylstearat, diester propylenglykolu mastných kyselin kokosového oleje, isopropylmyristat, decyloleat, isopropylpalmitat, butylstearat, 2-ethylhexylpalmitat nebo směs esterů s rozvětveným řetězcem známá jako Crodamol CAP, kde poslední tři uvedené jsou preferovanými estery. Tyto mohou být použity samostatně nebo v kombinaci v závislosti na požadovaných vlastnostech.
Alternativně mohou být použity lipidy s vysokým bodem tání jako je bílý.měkký parafin a/nebo. kapalný parafin nebo jiné minerální olej e.
Tyto formulace mohou být konvenčně předkládány v jednotkové dávkové formě a mohou být připraveny jakoukoliv z metod dobře známých ve farmaceutickém oboru. Všechny metody obsahují uvedení
aktivní sloučeniny (sloučenin) do asociace s nosičem, který je tvořen jednou nebo více aktivními přísadami. Obecně jsou formulace připraveny uvedením aktivní sloučeniny do jednotné a těsné asociace s kapalným nosičem nebo jemně rozděleným pevným nosičem nebo s oběma a potom, pokud je to nutné, vytvarováním produktu do požadovaných formulací.
Formulace podle předkládaného vynálezu vhodné pro orální podání mohou být předkládány jako oddělené jednotky, jako jsou kapsle, oplatky, tablety, lozengy, obsahující aktivní složku v ochuceném základu, obvykle sacharose a akacii nebo tragantové gumě; pastilky obsahující aktivní složku v inertním základu jako je želatina a glycerin, nebo sacharosa a akacia; a ústní vody obsahující aktivní složku ve vhodném kapalném nosiči. Každá formulace obecně obsahuje předem určené množství aktivní sloučeniny; jako prášku nebo granulí; nebo roztoku nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině jako je sirup, elixír, emulse nebo odvar a podobně.
Tableta může být vyrobena kompresí nebo odlitím, volitelně s jednou nebo více aktivními Složkami. Komprivované tablety mohou být připraveny kompresí aktivní sloučeniny ve volně protékající formě jako je prášek nebo granule ve vhodném přístroji, volitelně ve směsi s pojivém (např. povidonem, želatinou, hydroxypropylmethyl celulosou), lubrikans, inertním ředidlem, konzervačním činidlem, desintegrující látkou (např. škrobovým glykolatem sodným, zesítěným povidonem, zesítěnou karboxymethylcelulosou sodnou), povrchově aktivním činidlem nebo dispersním činidlem. Odlívané tablety mohou být vyrobeny odlitím směsi práškované sloučeniny zvlhčené inertním kapalným ředidlem. Tablety mohou být volitelně potaženy nebo popsány a mohou být
í formulovány tak, že dávají pomalé nebo kontrolované uvolňování aktivní složky pomocí, například, hydroxypropylmethylcelulosy v různých poměrech pro vznik požadovaného profilu uvolňování.
Sirup může být vyroben přidáním aktivní sloučeniny do koncentrovaného, vodného roztoku cukru, například sacharosy, do kterého může být také přidána jakákoliv nezbytná přísada. Takovou další přísadou mohou být ochucovadla, činidla pro zpomalení krystalizace cukru nebo činidla pro zvýšení rozpustnosti jakýchkoliv jiných přísad, jako jsou například polyhydrické alkoholy glycerol nebo sorbitol.
Kromě výše uvedených přísad mohou také formulace podle předkládaného vynálezu obsahovat jednu nebo více dalších přísad vybraných z ředidel, pufrů, ochucovacích činidel, pojiv, povrchově aktivních činidel, zahušúovadel, lubricans, konzervačních látek (včetně antioxidans) a podobně.
V dalším aspektu poskytuje předkládaný vynález použití sloučeniny podle vzorce (I) nebo jejího fyziologicky funkčního derivátu pro výrobu léčiva pro léčbu psoriasy.
Popis obrázků na připojených výkresech
Obrázek 1: Schematický diagram ukazující kroky extrakce pro isolaci cytostatických sloučenin z květů Calendula off icinalis
Obrázek 2: Výsledky léčby pacientů s psoriasou extraktem z Calendula officinalis.
Vynález bude nyní dokreslen následujícími nelimitujícími příklady.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: isolace extraktu Van-6-1
Odkazy se vztahují k obrázku 1.
Extrakce a frakcionace rostlinného materiálu
400 g práškovaného rostlinného materiálu je extrahován Soxhletovou metodou s petroletherem (60 - 80 °) do vyčerpání. Extrakt je potom koncentrován za redukovaného tlaku za použití rotačního odpařovače za zisku 49 g extrahovaného zbytku. Rostlinný materiál je dále extrahován chloroformem za stejných podmínek jak je uvedeno výše za Zisku dalšího extraktu. Tyto surové extrakty jsou potom frakcionovány za použití vakuové kapalinové chromátografie (VLC). Silikagel (Merk 7749) je vložen do sintrované nálevky za vakua za vzniku kolony okolo 10 cm v průměru a 5 cm výšky. Extrakt (20 g) absorbovaný na oxid křemičitý (1:1, hmotnost/hmotnost) je potom umístěn na vrchol kolony a je eluován rozpouštědly se zvýšenou polaritou; t.j. hexanem, hexanem obsahujícím zvýšené koncentrace chloroformu, chloroformem a chloroformem obsahujícím zvýšená množství methanolu. VLC eluenty .jsou shromážděny a složení frakcí je analyzováno TLC. Na základě TLC analýzy jsou VLC eluenty rozděleny do třinácti frakcí (tabulka 1). Tyto frakce jsou testovány na jejich inhibiční aktivitu pro růst buněk a potom následuje postup 3T3 biotestu (příklad 5).
Eluens, označené Van-2-36 (extrahovaný za použití směsi chloroformu a methanolu 1:1) bylo nejvíce aktivní.
Tabulka 1
| Frakce | Systém rozpouštědel | |
| Van-2-1 | Hexan | |
| Van-2-2 | Hexan | |
| Van-2-6 | Hexan:Chloroform (95:5) | |
| Van-2-12 | Hexan:Chloroform (8:2) | |
| Van-2-15 | Hexan:Chloroform (6:4) | |
| Van-2-21 | Hexan:Chloroform (6:4) | |
| Van-2-23 | Hexan:Chloroform (6:4) | |
| Van-2-25 | Hexan:Chloroform (4:6) | |
| Van-2-27 | Hexan:Chloroform (4: 6) | |
| Van-2-31 | Chloroform | |
| Van-2-35 | Chloroform:Methanol (5:1) | |
| Van-2-36 | Chloroform:Methanol (1:1) | |
| Van-2-37 | Chloroform:Methanol (1:1) | |
| Eluens | Van-2-36 je podroben chromatografii na koloně | přes |
| silikagel | s směsémi hexan:chloroform a chloroform:methanol o | |
| zvýšené polaritě. Frakce eluované 10 - 60% chloroformem | (v |
hexanu) dávají Van-5-4, zatímco frakce eluované 5% methanolem (v chloroformu) dávají Van-5-9. Obě tyto frakce se zdají být směsi mastných kyselin (podle GC a NMR spekter) a nevykazují inhibici růstu buněk. Van-5-10 je přítomna v eluatu s 5% methanolem, zatímco Van-5-11, Van-5-12 a Van-5-15 jsou frakce získané z éluatů 10% methanolem.
Další pokus o přečištění Van-5-12 je proveden za použití • · « · • · ··· · · · · · · ·· • ·· ♦ · · ······ · · · · · ···· · · · ··· c · · · · · · «· ·· prep. TLC (silikagel, rozpouštědlo chloroform:methanol; 95:5). Tímto se získá Van-6-1, která je velmi aktivní v biotestu buněčného růstu (příklad 5).
Příklad 2: isolace Van-9-2
Je sledován postup pod příkladu 1 (výše) včetně VLC a TLC analýz.
Van-5-10 je podrobena preparativní TLC (silikagel; rozpouštědlo hexan, chloroform, ethylacetat, 3:6:6) za zisku pěti frakcí, Van-9-1 až VAn-9-5, kde Van-9-2 je biologicky aktivní podle 3T3 buněčného biotestu (příklad 5).
Příklad 3: isolace Van-10-2, Van-10-3 a Van-10-4
Protokoly příkladů 1 a 2 výše jsou sledovány do zisku Van-9-2.
Van-9-02 je separován na Van-9-2B a Van-9-2C preparativní TLC (rozpouštědlo: hexan, chloroform, ethylacetat, 3:6:4).
Van-9-2B a Van-9-2C jsou separovány pomocí HPLC na ODS analytické koloně za použití 75% acetonitrilu ve vodě (plus 0,1% kyselina trifluorooctová). Takto se získají čtyři frakce, Van-10-1, Van-10-2, Van-10-3 a Van-10-4. NMR data pro Van-10-2, Van-10-3 a Van-10-4 jsou zde uvedena dále. Soudí se, že stereochemie Van sloučenin v aromadendrariolové skupině má nás1eduj í c í strukturu:
• ·
Nicméně, odborníkům bude jasné, že další stereoisomerické varianty aromadendranolové skupiny mající následující strukturu jsou také zahrnuty v předkládaném vynálezu:
i*
:¾ ♦ · · · • · k
lí
| Proton | δ (J v Hz) H |
| 10 | 0.75 J |
| 11 | liš* |
| 12 | 1J9j |
| 13 a | 4£ brs |
| 13b | 4.8 brs |
| 1’ | 4.9 d (7.9) |
| 2’ | 5-85'4(7-8) |
| 3’ | <2544(7.8.3.1) |
| 4’ | 4.104(3.1) |
| 5’ | 3£Sbrd(65) |
| ď | 1354(63) |
| 1” | |
| 2” | 5.90 brs |
| 3” | |
| 4” | 2.10 λ |
| 5” | 13 r (7) |
| 6” | 2.15 brs |
Data XH-NMR chemického posunu (pyridin-D^) pro Van-10-2 • · « · · · · · · · · · · · · • e · · · · «····· ···· · • · · · · · · ··· • · · · ·· · · · ··
Uhlík/Proton ,1a
4a
7a
7b
1’
2’
3’
4’
5»
6’
1” •7”
3”
4”
5,f
6”
1H 13C
6H(J v Hz) Multiplicity* 6c
| C | 19.4 | |
| 0.65 m | CH | 29.7 |
| CH, | 19.4 | |
| CH, | 593 | |
| C | 81.7 | |
| CH | 552 | |
| CH, | 262 | |
| CH, | 292 | |
| CH | 39.1 | |
| UBSm | CH | 40.4 |
| 0.10:(9.4) | CH | 23.1 |
| 0.95 x | Mc | 17.1 |
| ÍjOOx | Mc | 293 |
| 135 x | Mc | 27.0 |
| 0.90x | Mc | 173 |
| Í.Ohidďen | CH | 96.0 |
| 535: (33) | CH | ΊΊ£ |
| 425 dd (S3) | CH | TI Λ. |
| 3.7 r (8) | CH | 753 |
| 3.751 (S) | CH | 75.0 |
| 1.56 <f (7) | Mc | 19.4 |
| C | 166.4 | |
| 5J35 br x | CH | 1153 |
| C | 162.0 | |
| 2.05 m | CH, | 34,3 |
| 0.95 r (7) | Mc | 122 |
| 225 6rx | Mc | 17.0 |
získáno z J-mod. experimentu
Data XH a X3C-NMR chemického posunu (pyridin-Ds) pro Van-10-3 • · · ·
| Uhlík/Proton | XH 13C Sh(J v Hz) Multiplicity* 6c | |||
| 1 | Č | 19-4 | ||
| la | Q£2m | CH | 29.7. | |
| 2 | CHi | 19.2 | ||
| 3 | CHi | 393 | ||
| 4 | C | 815 | ||
| 4a | ČH | S52. | ||
| ~~ ·' ...... | 5 | — ' ' .....- | CHi | 263 |
| u . | 6 | CH, | 29.7 | |
| 7 | CH | 393 | ||
| IsL·· | 7a | 1-85 m | CH | 40.4 |
| 7b | 0,10 r (9.4) | CH | 23.1 | |
| 8 | 1.10 i | Me | 17.1 | |
| 9 | 1.15 j | Mc | 295 | |
| 10. | 135 ď | Mc | 27.1 | |
| 11 | 0.95 d(7) | Nic | 171 | |
| 1’ | 4.9 d (7,9) | CH | 965 | |
| 2’ | 535/(7.9) | CH | 74.4 | |
| 3’ | 4.15 dd (7.9,331 | CH | 733 | |
| 4’ | 4.05 </CJ) | CH | 73-3 | |
| 5’ | 335 m | CH | 71.4 | |
| 6’ | 1.60 d (6) | Mc | - 17.9 | |
| I” | C | 166.6 | ||
| 2” | 5.35 br s | CH | 115.9 | |
| 3” | C | 161.7 | ||
| 4” | 2.05/Ti | CH: | 343 | |
| ó· ? | 5” | 0.95 r (7) | Mc | 123 |
| 6” | 2.22 br s . | Mc | 193 |
* získáno z J-mod. a HC-COEI experimentů í; Data XH a 33C-NMR chemického posunu (pyridin-D ) pro Van-10-4 .L s t· ··
Příklad 4: isolace Van-15A
Odkaz se vztahuje k obrázku 1.
Protokoly příkladů 1 a 2 jsou následovány do zisku Van-6-1.
Van-6-1 je frakcionován chromatografií na koloně (Sephadex LH20; rozpouštědlo chloroform:methanol 1:1) do dvou frakcí: Van-15-1 (těžší frakce obsahující mastné kyseliny) a Van-15-2 ύ· (lehčí frakce obsahující terpeny) , g\ Van-15-2 je podrobena preparativní TLC (silikagel;
rozpouštědlo chloroform:methanol 95:5) za zisku Van-15A a minoritní složky Van-15B. NMR pro aktivní složku, Van-15A, jsou zde uvedena dále.
·· ·
i
| Uhlík/Proton | SH(J v Hz) | Mult ipli c i ty * | δ c |
| 1 | c | 19.4 | |
| la | 0.6 br q (9) | CH | 29.7 |
| 2 | ch3 | 192 | |
| 3 | 393 | ||
| 4 | c | 813 | |
| 4a | CH | 553 | |
| 5 | čHi | 263 | |
| 6 | GHS | 29.7 | |
| 7 | GH | 393 | |
| 7a | 1.85 m | CH | 40.4 |
| 7b | 0.101 (9.4) | CH | 23.1 |
| 8 | 0.95 λ | Mc | 17.1 |
| 9 | 1.00 5 | Mc | 293 |
| 10. | 135 j | Mc | 27.1 |
| 11 | 0J90d(7) | Mc | 17-2 |
| r | 4.4 d (73) | CH | 963 |
| 2’ | 336 | CH | 74.4 |
| 3’ | 336 | CH | 733 |
| 4’ | 3.694(23) | CH | 733 |
| 5’ | 336 | CH | 71.4 |
| 6’ | 1.25 d (6,0) | Mc | ' 17.9 |
získáno z J-mod. a HC-COEI experimentů
Data XH a X3C-NMR chemického posunu (CDC13) pro Van-15A ♦ ♦ ·
Příklad 5: Reversibilní inhibice proliferace fibroblastové buněčné linie 3T3
Myší embryonální fibroblasty (3T3 - dostupné od Flow) jsou umístěny na 96-jamkovou kultivační plotnu. Buňky jsou suspendovány v mediu (Dulbeco modifikaci Eaglova media (DMEM), Gibco) obsahujícím 10% fetální telecí sérum (Gibco); 1% glutamin (Gibco); 1% penicilin/streptomycin (Gibco); 1% neesenciální aminokyseliny (Gibco), v koncentraci 50000 buněk na ml. 100 μΐ ? buněčné suspenze je pipetováno do každé jamky pro vznik koncentrace 5000 buněk na jamku. Buňky jsou inkubovány po dobu 24 |, hodin při 37 QC v atmosféře 5% CO^. Medium je odstraněno z plotny
Ir a jsou připravena různá ředění sloučenin (0, 30, 45, 60, 100 »· gg/ml) interně označených Van-10-4, Van-10-2, Van-10-3 a Van-15A
Γ rozpuštěním sloučenin v 100% DMSO (Sigma) . Tato jsou potom ředěna
DMEM z vzniku koncentrace DMSO 0,5%. Sloučeniny jsou potom ředěny na ukázané koncentrace (výše) DMEM obsahujícím 0,5% DMSO (Sigma) a jsou přidány do plotny (100 gg/jamku) . Každé ředění je fí- - provedeno třikrát; kontrolou je DMEM obsahující 0,5% DMSO. 50 gl
DMEM obsahujícího 0,5 gCi 3H-thymidinu je přidáno do každé jamky. Potom je do každé jamky přidáno 50 gl DMEM obsahujícího 40% i fetální telecí sérum (Gibco); 4% glutamin (Gibco); 4% penicilin/streptomycin (Gibco); 4% neesenciální aminokyseliny (Gibco). Plotna je inkubována po dobu 24 hodin při 37 °C v atmosféře 5% CO2. Medium obsahující testované sloučeniny je potom odstraněno a plotny jsou promyty dvakrát (2x) fosfátem ______ pufrovaným salini ckým roztokem (PBS) (pH 7,3). 100 gl 5% trypsinu h , .
I (Gibco) ve Versene (EDTA chelatující činidlo dostupné od Gibco)
I je přidáno do každé jamky. Plotna je dále inkubována po dobu 15
I minut při 37 °C v atmosféře 5% CO2, a potom jsou buňky odebrány z
I jamek za použití polo-automatického sklízeče buněk (Skatron).
··
Získané buňky jsou umístěny ve scintilační zkumavce obsahující 4 ml Optifase safe” (LKB) a je měřena radioaktivita za použiti kapalinového scintilačního měřiče (LKB WALLAC 1217 Rack beta). Výsledky jsou ukázány v tabulce 2.
Tabulka 2
| | | Ol | |||||||
| CM | ||||||||
| Q | Oi | «ο | <? | Ol | cn . | |||
| ta | ·· ’Ή | <D - | - CM | ·—1 | *·Μ | »-< | AA | |
| B | ||||||||
| \ | le >ŮZ E | |||||||
| Oi | —< | t© | CD | |||||
| S | • | o | ιη | tQ | tfl | « | ||
| Ό | • | <D | « | XT | ||||
| O | r* | o | ar | -ς* | •M | Γ* | co | |
| lil | aD | XT | m | CM | O | . <n | ||
| XT | xo | |||||||
| <D | *o | |||||||
| a | r* | r> | CM | CM | ||||
| V) | XT | <D | m | <—< | ΓΜ | Ol | ||
| Ή | ||||||||
| e | ||||||||
| •X | Ax | in | O | |||||
| <n | - | 4A | ut | « | ||||
| ' □ | g | r- | o | U1 | ||||
| M3 | o» | • | m | |||||
| o | E | w | XT | «0 | CD | O | o | |
| n | P- | Ol | <b | m | CD | U3 | XT | řX |
| a5 | ||||||||
| • | CM | |||||||
| Ol | « | xf | ||||||
| n | n | •<7 | σ» | O | in | n | ||
| tri | CQ | r* | CM | rX | rx> | n | Γ* | |
| U >0) | ΙΠ | O | ca | |||||
| in | s °E | • | <n | v | O | ··< | • | |
| O | m | • | « | XT | ||||
| o | - XT | r* | M | t* | CD | tn | ||
| CM | **» | m | *T | -r-< | XT | aj | rM | |
| •n | CM | rM | to-4 | CM | n | rx | ||
| ΛΟ | <n | |||||||
| • | Λ | |||||||
| x? | <n | ·-< | »•4 | Ol | CM | |||
| O | ui | A© | O | 1Π | <n | o | «0 | |
| o | xT | *< | o | XT | o | xr | —i | |
| a | ||||||||
| tň | KO | CD | o | cn | ||||
| - | VJ | • | n | • | ||||
| ·» | σ* | * | • | r- | m | |||
| An | fl | XŤ | (B | .1X1 | n | IA | CD | r* |
| G> | m | r* | ΓΊ | Ol | co | r· | ||
| X &4._ | •či | xD | (Λ | *-< | ||||
| •M | - | |||||||
| a | \a | in | tn | **» | XT | *n | ||
| 10 | «0 | CM | m | O | XT | r* | r* | |
| ·-< | •M | r-< | r% | XT | CM | |||
| e | rM | m | -4 | r·* | ca | O | ||
| i | V* | • | • | • | ||||
| e | r> | CM | σ» | <n | CM | CM | ||
| m | r~ | o- | ΓΊ | in | ||||
| <n | *n | U1 | ·«· | σχ | a | |||
| ι © | a. 1 | m | <r | XT | XT | CM | CM | Γ» |
| a | o | XT | O| | ri | <c | |||
| CM | oi | 1 | 1 | 1 | 1 | |||
| < o | 1 | 1 | o | O | O | tn | ||
| σ* | ||||||||
| z | z | X | z | z | X | |||
| «c | < | < | c | c | < | |||
| > · | > | > | > | > | > | > |
·· ·· ·· · ·· ·· ··· · · · 9 · ·· • · ·♦· 9 9 9 9 9 999
9 9 9 9 9 9 9999 · ··· ·· ···· ·· 9 9 99
99 99 9 9999
Příklad 6: Extrakce a frakcionace Van-10-4 z prášku rostliny Calendula
Popis
a) Soxhlet
500 g prášku je extrahováno za použití buď petroletheru (60 - 80) nebo chloroformu. Extrakční perioda je obvykle 5 dní bez ohledu na použité rozpouštědlo. Objem rozpouštědla je okolo 3 litrů a zisk suroviny je 60 g (petrolether) nebo 80 g (chloroform). Surovina je kombinována se stejným množstvím oxidu křemičitého a nechá se vyschnout na prášek během 5 dní. Celkem je proto získáno pro každou lázeň - 120 g (petrolether) nebo 160 g (chloroform).
b) VLC g prášku surovina/oxid křemičitý je umístěno na vrchol (60H gel) VLC kolony s oxidem křemičitým asi 5 cm hluboké x 10 cm široké. Toto je pokryto vrstvou jemného písku a frakcionováno za použití následujícího rozpouštěcího systému:
x 200 ml 50% chloroform:petrolether (60 - 80) x 200 ml 70% chloroform:petrolether x 200 ml 100% chloroform x 200 ml 10% methanol:chloroform
Tímto posledním krokem je získána frakce obsahující Van-10-4. TLC potom potvrdila, že celá Van-10-4 byla odstraněna z VLC kolony v tomto stadiu.
Relevantní frakce jsou rotačně odpařeny do sucha. Hmotnost získaného vzorku je asi 2 - 3 g.
c) Sephadex
$
Využití Sephadex kolony v tomto stadiu umožnilo rychlej ší metodu přečištění VLC vzorku. Vzorek se znovu rozpustí v chloroformu a zavede se na kolonu. Použitá kolona je 20 cm vysoká x 2 cm široká a obsahuje 13 g Sephadex (lipofilní LH-20-100). Vzorek je eluován za použití 10% petrolether:chloroformu za průtoku 2-3 ml/minutu a vzorky jsou odebírány v 1 minutových intervalech. Přítomnost Van-10-4 je potvrzena TLC a relevantní frakce jsou spojeny a rotačně odpařeny. Hmotnost získaného vzorku je asi 500 mg.
d) Oxid křemičitý
Je použita malá kolona s oxidem křemičitým. 50 ml byreta je naplněna 20 g oxidu křemičitého připraveného jako kašovitá směs v petroletheru (60 - 80). Vzorek je rozpuštěn v chloroformu a je zaveden na kolonu. Kolona je 40 cm vysoká x 10 cm široká. Vzorek je eluován za použití následujícího rozpouštěcího systému:
Použité 10 ml objemy: průtok 1 ml/min: frakce odebírány v 1 minutových intervalech
Petrolether (60 - 80)
10% chloroform:ether
20% chloroform-.ether
40% chloroform:ether
50% chloroform:ether (vzorky se začínají separovat) % chloroform:ether
70% chloroform:ether
80% chloroform:ether
90% chloroform:ether
100% chloroform
10% ethylacetat:chloroform
20% ethylacetat:chloroform
30% ethylacetat:chloroform
40% ethylacetat:chloroform (eluce vzorků)
50% ethylacetat:chloroform
50% ethylacetat:chloroform pokračuje, dokud není celá Van-10-4 eluovaná z kolony. Toto je potvrzeno TLC.
Táto metoda vede k zisku vzorků obsahujících Van-10-4 + různé nečistoty (polo-čištěné vzorky).
Příklad 7: Léčba psoriasy extraktem z Calendula officinalis
Claims (2)
1. Extrakce rostlinného materiálu. Přípravek se skládá z chloroformalkoholového (5% objem/objem chloroform v absolutním ethanolu) extraktu rostlinného materiálu v poměru 20 g sušeného rostlinného materiálu extrahovaného 100 ml rozpouštědla.
§
2. Příprava krému. Extrakt připravený jak je uvedeno výše je „ . odpařen do sucha a zvážen. Hmotnost ” suchého” extraktu je smísena • s dostatečným množstvím Aqueous Cream B.P. za vytvoření 100 g á, krému, který má žluto-oranžovou barvu.
[L u <
3. Příprava Placebo krému. Placebo krém je připraven přidáním dostatečného množství betakarotenu do Aqueous Cream B.P. za zisku produktu přibližně stejné barvy jako má produkt obsahující přírodní drogu.
Extrakt rostlinného materiálu získaného z Calendula officinalis (SSSB) byl shledán klinicky užitečným v léčbě případů psoriasy.
Po delší době empirického pozorování pacientů byl proveden dvojitě slepý klinický pokus na skupině sedmi pacientů s psoriasou. Pacienti (4 muži a 3 ženy) byli ve věku 53 až 63 let, kromě jednoho, kterému bylo 26. Oneměcnění měli po dobu 8,5 až 25 let. Léčba byla sledována sérií fotografií před a po pokusu a za použití skoré příznaků psoriasy předa po léčbě. Léčba byla aplikována dvakrát denně jako krém po dobu čtyřech týdnů a existovaly tři druhy léčby: SSSB, Bethanovat a placebo.
Výsledky pokusu jsou ukázány na obrázku 2. Průměrné skoré před léčbou bylo 11,1 a bylo redukováno na 3,5 po léčbě SSSB, zatímco bylo 5,5 a 7,4 po bethanovatu a placebu, v příslušném pořadí.
Příklad 8: isolace a přečištění Van-10-4
15 až 30 g soxhletovou metodou extrahované suroviny jak byla získána v příkladu 6 je znovu rozpuštěno v 15 ml 50% ethylacetat : 50% hexan. Tento materiál se zavede na Flash 75 kolonu (Biotage Limited) a eluuje se při průtoku 150 - 200 ml/minutu za použití 50% ethylacetat:50% hexan jako mobilní fáze. Doba do eluce VAN sloučenin z Flash kolony je hodnocena TLC. Ředěný roztok surové směsi (opětovně ředěný v ethylacetatu) je nalit na TLC plotnu ·· ·· ·« 9·« Λ· • · · · · 9 · * ·· • · ··· · · · · · · ·· • · · · · · · ···· · 999 9 (Λ
9 9 9 9 9 9 9 9 99
99 ·· ·· · 9999 (silikagel 60). Směs Van sloučenin je vizualisována za použití standartní vývojky vanilin:koncentrovaná kyselina sírová (1 g vanilinu:100 ml koncentrované kyseliny sírové) a je spočítána hodnota Rf. TLC mobilní fáze je upravena manipulací s poměrem polární:nepolární rozpouštědlo tak, aby hodnota Rf byla okolo 3,0. Ekvivalentní objem kolony je určen z Rf hodnoty podle návodu výrobce (Biotage Limited).Objem kolony pro Flash 75 systém je okolo 1 litru a mobilní fáze dávající vhodnou hodnotu Rf je ethylacetat:hexan.
f Když je tato metoda testována za použití Flash 75 kolony, pak ř·
S’ jsou Van sloučeniny eluovány ve frakcích 15 - 19 (ekvivalentní 4 p - 5 objemům kolony). Každá získaná frakce je 250 ml. V opakovaném ' běhu, za stejných podmínek, jsou Van sloučeniny eluovány ve frakcích 14 - 18. Tyto frakce jsou kombinovány a odpařeny do sucha za zisku asi 200 - 400 mg polosurového materiálu. Tento polosurový materiál· je přečištěn HPLC za použití Spherisorb kolony s reversní fází. Zásobní roztok půlosurového materiálu je připraven jako 25 mg/ml v acetonitrilu a 200 μΐ aliquoty jsou zpracovány isokraticky. Použitá mobilní fáze je 75% acetonitril:25% vodě a průtok je 5 ml/minutu. Každý běh vzorku trvá 17 minut a Van-10-4 eluuje asi 14 minut. NMR spektroskopie potvrdila, že eluát je Van-10-4.
Příklad 9: Extrakce Calendula officinalis - 1 kg rozsah — — Sušené okvětní lístky Calendula officinalis (1 kg) jsou rozmělněny na hrubý prášek a kontinuálně extrahovány heptanem (1 - 4 1), t.j. heptan je kontinuálně destilován z extraktu a je perkolován přes hmotu okvětních lístků. Extrakt je koncentrován ve vakuu na objem 500 ml. Vzniklý koncentrát je extrahován • · třikrát 500 ml roztoku acetonitril/voda, 9:1 (objem/objem) . VAN obsahující acetonitrilové frakce jsou kombinovány a acetonitril je odstraněn vakuovou destilací. Vzniklá oranžová guma je znovu rozpuštěna ve 500 ml ethylacetatu a potom je postupně promyta 500 ml (0,1 M) nasyceným bikarbonátem sodným, 500 ml vody, 500 ml (0,1 M) kyseliny chlorovodíkové a nakonec 500 ml vody. Roztok ethylacetatu je potom destilován ve vakuu za zisku 10 g oranžového oleje.
• 9 ·· **
Η,ς PS h,c „coo- 9 9 C< , 'OC (Cri3)jCHCO ond CHaC(CH3)=CHCaH CQO~ H CH3 a s nimi souvisejících esterů;
R4 je vybrán z Ce-Cx2 nasycených nebo nenasycených monocyklických nebo polycyklických alifatických kruhových systémů volitelně substituovaných Cx-C6 alkylem, H, OH, =CH2 nebo C -(\
13. Použiti podle nároku 12, při němž se ve sloučenině vzorce II volí ze skupiny (a) S(O)2CH3, (b) S(O)2NH2 (c) S(0)2NHCH3, a (d) S(0)NHNH2,
R2 je vybrán ze skupiny skládající se z mono- nebo di- substituovaný fenyl, kde substituenty jsou vybrány ze skupiny skládající se z (1) vodík, (2) halogen, vybraný ze skupiny skládající se z fluoru, chloru, a bromu, (3) c x_3 alkoxv, (4) Cx_3 alkylthio, (5) CN, a .
(6) Cx_3: alkyl.
14. Použití podle nároku 13, při němž se ve sloučenině vzorce II volí R^ ze skupiny
mono- nebo di- substituovaný fenyl, kde substituenty jsou vybrány ze skupiny skládající se z (1) vodík, (2) halogen, vybraný ze skupiny skládající se z fluoru, chloru, a bromu, (3) methoxy, (4) methyl.
·· ·· · ·
15. Použití podle nároku 14, při němž se ve sloučenině vzorce II volí ze skupiny (a) S(O)2CH3, a (b) S(O) NH ,
R2 je mono- nebo di- substituovaný fenyl, kde substituenty jsou vybrány ze skupiny skládající se z (1) vodík, (2) halogen, vybraný ze skupiny skládající se z fluoru, chloru, a bromu.
16. Použití. podle nároku 15,. při němž se sloučenina typu NSAID volí ze skupiny (1) 3- (3-fluorofenyl)-4-(4-(methylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)furanon,. .
(2) . '3-(3,4-.diflúorofenyl).-4-(4-(methylsulfonyl) fenyl) -2-(5H) furanon, . (3) 3-(3,4-dichlorofenyl)-4-(4-(methylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)furanon, (4) 3-fenyl-4-(4-(methylsulfonyl) fenyl)-2-(5H)-furanon, a (5) 5,5-dimethyl-3- (3-fluorofenyl) -4- (methylsulfonyl) fenyl) -2 (5H)-furanon nebo jejich farmaceuticky akceptovatelných solí.
Zastupuje:
• · • « alkyl karboxyloxy nebo R4 znamená Ci-Ce přímou nebo rozvětvenou alkalenovou skupinu substituovanou takovým kruhovým systémem;
Rs je vybrán z -CH3, -CHO, -COOH nebo -CH^OH a s nimi souvisejících esterů a etherů od nich odvozených;
R6 je vybrán z -OH,
H 9 ch2co-7 ηλ M ,h3c po oc ano Cx ~x í —'
H C00- 11 l“3 v přípravě léčiva pro léčbu onemocnění obsahujících hyperproliferaci buněk dermis.
. 2. Použití sloučeniny vzorce (I) podle nároku 1, kde R:r a R2 jsou nezávisle vybrány z H, -OH, h\C CH, H,c ,cooC—C. cnd X=C
H CO O- n
• · • e
4. Použití sloučeniny vzorce (I) podle jakéhokoliv z nároků 1 až 3, kde R4je vybrán ze skupiny
N/ az v az až
6 .
5,
7 .
6,
8.
7,
Rx and jakéhokoliv z nároku je vybrán ze skupiny CH3, -CHO, -COOH a -CH^OH.
podle
II and vzorce (I) vybrány z
I ·· · • ·
R3 je vybrán
O. ch3ch2ch(ch3)co·
R4 je vybrán z OH, ch2c(ch3>chco-; CH3CO-j o and CH3CH2C(CH3)=CHC0- ;
Rs je CH3; a .r.
• · • ·
12. Použití podle nároku 10, kde uvedenou sloučeninou je:
14.Použití podle nároku 10, kde uvedenou sloučeninou je:
15. Sloučenina podle vzorce (I) :
i kde
R1 a R2 jsou nezávisle vybrány z -OH, H, ,CH= HX ,COGC=C and T-C
H xCocr ^3
R3 je vybrán z (E)-3-methylpent-2-enoatu, a
H,C CH, 3'r^ 3
Z h cocr
R4 je vybrán z C6-CX2 nasycených nebo nenasycených monocyklických nebo pólycyklických alifatických kruhových systémů volitelně substituovaných Cx-C6 alkylem, H,-OH, =CHz nebo Cx-C4 alkylkarboxyloxy nebo R4 znamená Cx-Cg přímou nebo rozvětvenou alkalenovou skupinu substituovanou takovým kruhovým systémem;
Rs je vybrán z Cx-C4 alkylu, -CHO, -COOH a -CH^OH;
Re je vybrán z OH
H,C CH, HA C00C=C cnd - C<
::»ι • · a její fyziologicky funkční isomery.
16. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 15, kde R1 a R2 jsou nezávisle vybrány z -OH, H, h'3C HX C00C=C and 3 l<
HZ 'CQO- K 1H3
17. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 15 nebo 16, kde
R3 je vybrán z (E)-3-methylpent-2-enoatu, a 'X' h cocr
18. Sloučenina vzorce (I) podle jakéhokoliv z nároků 15 až 17, kde R4 je vybrán z • · · ·· ♦ · · _ ·· ·· · ·♦ ♦·
19. Sloučenina vzorce (I) podle jakéhokoliv z nároků 15 až 18, kde R5je vybrán z -CHa, -CHO, -COOH a -CH2OH.
21. Sloučenina vzorce (I) podle jakéhokoliv z nároků 17 až 19, kde R6 je vybrán z OH, h2c Ρξ κ,ς cooC-C GflG C=C
H C00- H tn60 • · · · ·· · ·· ·· • ·· ··♦ ···· • · ··· · · · · * · ··
Sloučenina vzorce (I) podle jakéhokoliv z nároků 17
R3 je je je
R je
R6
22 .
kde
R4
R1 a R2 jsou nezávisle vybrány z H a f
a její fyziologicky funkční isomery.
23. Sloučenina podle jakéhokoliv
25. Použití sloučeniny isolované z druhu Calendula podle jakéhokoliv z nároků 15 až 24 pro výrobu léčiva pro léčbu psoriasy.
26. Použití podle nároku 25, kde sloučenina je isolována z Calendula officinalis, Calendula arvensis a/nebo Calendula ·' persica.
ř v ..
F—* - 27. Použití podle nároku 25 nebo 26, kde sloučenina je isolována z Calendula officinalis.
t 'i k 28. Farmaceutická formulace pro léčbu psoriasy obsahující alespoň jednu sloučeninu podle vzorce (I) isolovanou z alespoň jednoho druhu Calendula ve směsi s farmaceuticky akceptovatelným nosičem.
29. Formulace, podle nároku 28, kde alespoň jedna sloučenina podle vzorce (I) je isolovaná a/nebo přečištěná z extraktu odvozeného od alespoň jednoho druhu Calendula.
30. Formulace podle nároku 28 nebo 29, kde alespoň jedna sloučenina je isolovaná a/nebo přečištěná z extraktu odvozeného od alespoň jedné z Calendula arvensis, Calendula persica a Calendula officinalis.
c1
31. Formulace podle jakéhokoliv z nároků 28 až 30, kde alespoň jedna sloučenina je isolovaná a/nebo přečištěná z extraktu z Calendula officinalis.
32. Formulace podle jakéhokoliv z nároků 28 až 31, kde alespoň jedna sloučenina podle vzorce (I) je:
• ·>!
··' ··
33. Formulace podle nároku 32, kde alespoň jedna sloučenina je:
u i i
99 9999 pro použití jako
35* Sloučenina pro použití jako lék pro psoriasu.
pro použití jako lék pro psoriasu.
1-2
Prášek z květů (450 g)
Petrolether (soxhlet)
Surový extrakt (50 g) hexan—--směs hexanxhloroform--chloroform-----—směs chloroform:methanol
Van-2-35(5:l) Van 2-36 (1:1) — 1 I
Prep. TLC (silikagel)
Van-4-B3 Van-8-2 minoritní mastné kyseliny =Van-4G polární frakce méně než 1 mg hexan kolonová chromatografie (Silikagel) i i
I u hexanxhloroform———směs chloroform: méthanol 95-S an-5-10 Van-5-11
HPLC (ODS-kolona) im-9-2C (mastné kyseliny) Prep. TLC (silikagel)
Van-9 =Van-8-2
9:1
Van-5-12
1Van-5-13
Ť’
I Prep. TLC (silikagel)
Van-7-3
Van-6-1 kolonová chromatografie (Sephadex)
H— mastné kyseliny
Van-15-1 terpeny
Van^5-2
Prep. TLC (silikagel)
Van-10-1 Van-10-2 Van-10-3 Van-10-4
Obrázek 1
W5 «J *E o <Λ CX
G £
Q.
ω i. o τη & SD = 7
Srovnání účinku SSSB krému, Bethanovatu a Placeba ve skupině 7 pacientů s psoriasou. Skoré příznaků je odvozeno od přiřazení škály 0-3 u 10 příznaku: svědční, dráždění, zranění pokožky, pocit tepla, krvácení, šupinatění, narušený spánek, pocit škrábání, kosmetickou úzkost a bolest kožních lézí.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9515214.6A GB9515214D0 (en) | 1995-07-25 | 1995-07-25 | Plant extracts |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ19498A3 true CZ19498A3 (cs) | 1998-09-16 |
Family
ID=10778203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ98194A CZ19498A3 (cs) | 1995-07-25 | 1996-07-24 | Použití glykosidů z měsíčku (Calendula) pro léčbu psoriasy |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6225342B1 (cs) |
| EP (1) | EP0848612B1 (cs) |
| JP (1) | JP4384261B2 (cs) |
| KR (1) | KR19990035847A (cs) |
| CN (1) | CN1191488A (cs) |
| AT (1) | ATE236643T1 (cs) |
| AU (1) | AU6621096A (cs) |
| BG (1) | BG102250A (cs) |
| BR (1) | BR9609910A (cs) |
| CA (1) | CA2227751A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ19498A3 (cs) |
| DE (1) | DE69627354T2 (cs) |
| EE (1) | EE9800032A (cs) |
| ES (1) | ES2197242T3 (cs) |
| GB (1) | GB9515214D0 (cs) |
| HU (1) | HUP9802861A3 (cs) |
| IS (1) | IS4651A (cs) |
| NO (1) | NO980317L (cs) |
| PL (1) | PL324655A1 (cs) |
| SK (1) | SK9498A3 (cs) |
| WO (1) | WO1997004788A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA966298B (cs) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6753006B1 (en) | 1993-02-22 | 2004-06-22 | American Bioscience, Inc. | Paclitaxel-containing formulations |
| GB9701415D0 (en) * | 1997-01-24 | 1997-03-12 | Univ Strathclyde | Stereoisomers |
| GB9809889D0 (en) * | 1998-05-11 | 1998-07-08 | Univ Strathclyde | Prevention of restenosis |
| PT1200106E (pt) * | 1999-07-09 | 2003-09-30 | Bsp Pharma As | Composicao contendo extractos de butyrospermum parkii e utilizacao como medicamento ou suplemento dietetico |
| US6440465B1 (en) * | 2000-05-01 | 2002-08-27 | Bioderm, Inc. | Topical composition for the treatment of psoriasis and related skin disorders |
| US20050003023A1 (en) * | 2002-06-28 | 2005-01-06 | Meisner Lorraine Faxon | Topical composition for the treatment of psoriasis and related skin disorders |
| US20030054042A1 (en) * | 2001-09-14 | 2003-03-20 | Elaine Liversidge | Stabilization of chemical compounds using nanoparticulate formulations |
| US7887860B2 (en) * | 2001-12-28 | 2011-02-15 | Inter American University Of Puerto Rico | Anti-bacterial plant compositions |
| US20080220075A1 (en) * | 2002-03-20 | 2008-09-11 | Elan Pharma International Ltd. | Nanoparticulate compositions of angiogenesis inhibitors |
| WO2003080027A1 (en) * | 2002-03-20 | 2003-10-02 | Elan Pharma International, Ltd. | Nanoparticulate compositions of angiogenesis inhibitors |
| US20050152996A1 (en) * | 2003-12-01 | 2005-07-14 | BUTLER Donald | Extracts of Mimulus aurantiacus for treating psoriasis and repelling insects |
| BG65694B1 (bg) * | 2003-12-31 | 2009-07-31 | Владимир НАЙДЕНОВ | Средство за лечение на дерматози |
| US20060076536A1 (en) * | 2004-09-29 | 2006-04-13 | Barshied Scott R | Oxygen scavenging pharmaceutical package and methods for making same |
| PL409156A1 (pl) | 2014-08-11 | 2016-02-15 | Matonis Grzegorz | Kompozycja kosmetyczna i/lub farmaceutyczna łagodząca objawy łuszczycy |
| CN112739337B (zh) | 2018-07-27 | 2024-05-24 | 强生外科视力公司 | 用于治疗眼睛的组合物和方法 |
| US11197841B2 (en) | 2019-07-23 | 2021-12-14 | Johnson & Johnson Surgical Vision, Inc. | Compositions and methods for treating the eye |
| US10966948B2 (en) | 2019-07-23 | 2021-04-06 | Johnson & Johnson Surgical Vision, Inc. | Compositions and methods for treating the eye |
| CN109516983A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-03-26 | 广东药科大学 | 一种中药草本祛痘化合物及其组合物 |
| US11969454B2 (en) | 2019-11-19 | 2024-04-30 | Johnson & Johnson Surgical Vision, Inc. | Compositions and methods for treating the eye |
| CN114159453A (zh) | 2021-12-24 | 2022-03-11 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷b4在制备治疗或预防银屑病的药物的用途 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0653672B2 (ja) | 1987-12-23 | 1994-07-20 | プソリツル・リミテッド | 乾癬に対する治療用組成物 |
| DE3836519C2 (de) | 1988-10-26 | 1994-03-10 | Cutan Kosmetik Vertriebs Gmbh | Verwendung einer pharmazeutischen Zubereitung auf der Basis von Calendula officinalis zur Behandlung von Psoriasis |
| HU203668B (en) | 1990-04-03 | 1991-09-30 | Tamas Angeli | Cosmetic containing medicinal plants and process for producing composition against psoriasis |
-
1995
- 1995-07-25 GB GBGB9515214.6A patent/GB9515214D0/en active Pending
-
1996
- 1996-07-24 JP JP50733497A patent/JP4384261B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-24 PL PL96324655A patent/PL324655A1/xx unknown
- 1996-07-24 EE EE9800032A patent/EE9800032A/xx unknown
- 1996-07-24 CN CN96195818A patent/CN1191488A/zh active Pending
- 1996-07-24 CA CA002227751A patent/CA2227751A1/en not_active Abandoned
- 1996-07-24 SK SK94-98A patent/SK9498A3/sk unknown
- 1996-07-24 KR KR1019980700507A patent/KR19990035847A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-07-24 CZ CZ98194A patent/CZ19498A3/cs unknown
- 1996-07-24 AT AT96925837T patent/ATE236643T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-07-24 DE DE69627354T patent/DE69627354T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-07-24 BR BR9609910A patent/BR9609910A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-07-24 EP EP96925837A patent/EP0848612B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-24 AU AU66210/96A patent/AU6621096A/en not_active Abandoned
- 1996-07-24 HU HU9802861A patent/HUP9802861A3/hu unknown
- 1996-07-24 ZA ZA9606298A patent/ZA966298B/xx unknown
- 1996-07-24 WO PCT/GB1996/001792 patent/WO1997004788A2/en active IP Right Grant
- 1996-07-24 ES ES96925837T patent/ES2197242T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-24 US US09/000,265 patent/US6225342B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-01-16 IS IS4651A patent/IS4651A/is unknown
- 1998-01-23 NO NO980317A patent/NO980317L/no unknown
- 1998-02-13 BG BG102250A patent/BG102250A/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1997004788A3 (en) | 1997-03-27 |
| SK9498A3 (en) | 1998-09-09 |
| KR19990035847A (ko) | 1999-05-25 |
| NO980317L (no) | 1998-03-24 |
| ZA966298B (en) | 1997-02-11 |
| WO1997004788A2 (en) | 1997-02-13 |
| HUP9802861A3 (en) | 1999-08-30 |
| PL324655A1 (en) | 1998-06-08 |
| ATE236643T1 (de) | 2003-04-15 |
| HUP9802861A2 (hu) | 1999-04-28 |
| NO980317D0 (no) | 1998-01-23 |
| JP4384261B2 (ja) | 2009-12-16 |
| EP0848612B1 (en) | 2003-04-09 |
| US6225342B1 (en) | 2001-05-01 |
| BR9609910A (pt) | 1999-06-15 |
| MX9800697A (es) | 1998-09-30 |
| JPH11510153A (ja) | 1999-09-07 |
| DE69627354D1 (de) | 2003-05-15 |
| BG102250A (en) | 1999-02-26 |
| GB9515214D0 (en) | 1995-09-20 |
| CN1191488A (zh) | 1998-08-26 |
| EP0848612A2 (en) | 1998-06-24 |
| CA2227751A1 (en) | 1997-02-13 |
| DE69627354T2 (de) | 2004-03-04 |
| IS4651A (is) | 1998-01-16 |
| ES2197242T3 (es) | 2004-01-01 |
| AU6621096A (en) | 1997-02-26 |
| EE9800032A (et) | 1998-08-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ19498A3 (cs) | Použití glykosidů z měsíčku (Calendula) pro léčbu psoriasy | |
| RU2349337C2 (ru) | Фармацевтическая композиция, содержащая стероидные сапонины, способ ее получения и ее применение | |
| Anam | Anti-inflammatory activity of compounds isolated from the aerial parts of Abrus precatorius (Fabaceae) | |
| EP2222320B1 (de) | Neuer mariendistelextrakt, verfahren zur herstellung und verwendung | |
| CN113105388B (zh) | 一种千金二萜烷化合物及其提取方法和应用 | |
| Ibrahim et al. | Kirenol: A promising bioactive metabolite from siegesbeckia species: A detailed review | |
| US5430054A (en) | Preparation methods of diterpene lactone compounds and application of the same to antifertility | |
| Liang et al. | Preparation of a new component group of Ginkgo biloba leaves and investigation of the antihypertensive effects in spontaneously hypertensive rats | |
| JP4425109B2 (ja) | 腫瘍／癌細胞の増殖の抑制活性を有するガンボージ樹脂から単離した化合物及びその化合物を含む薬学的組成物 | |
| JP2004091390A (ja) | 育毛剤 | |
| JP5602049B2 (ja) | 抗肥満剤及び脂肪蓄積を抑制するための医薬品 | |
| JPH0477730B2 (cs) | ||
| DE69403063T2 (de) | Gegen viren wirksame naphtochinon-verbindungen, zusammensetzungen und deren verwendungen | |
| KR100627933B1 (ko) | 하이퍼포린 유도체, 그의 용도 및 그를 함유한 제제 | |
| CN115894418B (zh) | 蒙古蒿内酯a-f及其药物组合物和其制备方法与应用 | |
| CN111233886B (zh) | 去芳化异戊烯基酰化间苯三酚杂萜类化合物及其药物组合物和应用 | |
| CN114539192B (zh) | 松香烷型二萜化合物及其制备方法和应用 | |
| KR20090040670A (ko) | 상처 치료 촉진 효과를 갖는 목별자 추출물 | |
| DE60108272T2 (de) | Pharmazeutische zusammensetzung enthaltend (-)-secoisolariciresinol | |
| JPH0952899A (ja) | ロイコトリエン拮抗剤 | |
| IE48415B1 (en) | Natural terpenes having an antipsoriatic activity | |
| US6313099B1 (en) | Use of stereoisomers of calendula gylcosides for the treatment of psoriasis | |
| EP2984078A1 (en) | Novel chromone alkaloid dysoline for the treatment of cancer and inflammatory disorders | |
| KR20150030824A (ko) | 진세노사이드 Rh6를 포함하는 피부 외용제 | |
| CN110680819A (zh) | 一种三萜皂苷类化合物的应用 |