CS264293B2

CS264293B2 - Process for preparing derivatives of 3-/hydroxymethyl/-isoquinoline

Info

Publication number: CS264293B2
Application number: CS873691A
Authority: CS
Inventors: Gyorgy Dr Rabloczky; Jeno Dr Korosi; Tibor Dr Lang; Istvan Ling; Tamas Hamori; Istvan Dr Elekes; Peter Botka; Andras Dr Varro; Sandor Dr Elek; Judit Sarossy; Gabor Dr Zolyomi; Zsuzsanna Dr Lang; Imre Moravcsik
Original assignee: Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar
Priority date: 1986-05-21
Filing date: 1987-05-21
Publication date: 1989-06-13
Also published as: GB2190678A; SE8702119D0; GB2190678B; IT8720618A0; SE8702119L; SU1551245A3; HUT44017A; DD268940A5; CH673280A5; PL265811A1; BG47197A3; DE3717079A1; HU196758B; GB8712047D0; PT84924B; FI872256A; CS369187A2; US4785104A; ES2005583A6; YU90787A

Description

(54)

Způsob přípravy 3-(hydroxymethyl)isochinolinových derivátů

Vynález se týká způsobu přípravy nových 3-(hydroxymethyl)isochinolinových derivátů následujícího obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelných adičních solí těchto derivátů s kyselinami:

CS 264 293 B2

ve kterém znamená

R a R¹ stejné nebo rozdílné substituenty, přičemž těmito substituenty jsou atom vodíku, atom chloru nebo bromu, nitroskupina nebo alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

R² znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

R³ a R⁴ jsou stené nebo rozdílné substituenty, přičemž těmito substituenty jsou atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo R³ a R⁴společně znamenají methylenovou skupinu, s tou podmínkou, že v případě, kdy R znamená 3-methoxyskupinu, R¹ je 4-methoxyskupina a R³ a R⁴ jsou stejné substituenty a představují methylovou nebo ethylovou skupinu, potom R² představuje alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku.

Výše uvedené 3-(hydroxymethyl)isochinolinové deriváty je možno připravit následujícími metodami, známými z literatury podle dosavadního stavu techniky:

— postup, při kterém se provede rozštěpení etherové vazby u l-aryl-3-fenoxymethyl-3,4-dihydro-isochino'linů, což se provede v přítomnosti vzduchu, a při tomto postupu se tato látka zahřívá pod zpětným chladičem se 48% vodným roztokem bromovodíku (viz. J. Ind. Chem. Soc., 38, 216, 1961), — postup, při kterém se 3-methyl-isochinolin nejdříve oxiduje při teplotě 250 °C oxidem seleničitým na isochinolin-3-aldehyd, který se potom v další fázi redukuje v přítomnosti hydroxidu draselného 40% forma línem na 3-(hydroxymethyl)-isochinolin, viz. J. Chem. Soc., 1951, 114'5, — postup, při kterém se 3-methyl-isochinolin převede pomocí N-bromsukcinimidu na 3-(brommethyl)-isochinolin, který se dále převede účinkem acetátu stříbrného na 3-(acetoxymethyl)isochinolin. Takto získaný ester se zmýdelní ve vodném roztoku methanolu účinkem hydroxidu draselného (viz. Helv. Chem. Acta 31, 1978, 1948), — postup, při kterém se l-[3,4-dimethoxyf enyl ] -3- [ methoxykarbonyl ] -6,7-dimethoxy(diethoxy)-3,4-dlhydroisochinolin dehydrogenuje za pomoci síry při teplotě 150 °C, přičemž potom se esterová skupina v poloze 3 redukuje buďto lithiumaluminiumhydiridem, nebo borohydridem alkalického kovu (viz. patent Německé spolkové republiky č. 2 246 307).

Podstata způsobu přípravy 3-(hydroxymethyljisochinolinových derivátů obecného vzorce I

ve kterém znamená

R a R¹ stejné nebo rozdílné substituenty, přičemž těmito substituenty jsou atom vodíku, chloru nebo bromu, nitroskupina nebo alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

R³ a R⁴ jsou stejné nebo rozdílné substituenty, které znamenají atom vodíku nebo alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo společně znamenají methylenovou skupinu, s tou podmínkou, že jestliže substituent R znamená 3-methoxyskupinu, R¹ znamená 4-methoxyskupinu, a R³ a R⁴ jsou stejné a představují methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu, potom substituent R² představuje alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, a farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinami, odvozenými od těchto sloučenin, spočívá podle uvedeného vynálezu v tom, že se hydrolyzuje 3-(acetyloxymethyl)isochinolinový derivát obecného vzorce III

ve kterém mají substituenty

R, R¹ a R² již shora uvedený význam, a

R³‘ a R⁴‘ mají stejný význam jako shora R³, R⁴, přičemž rovněž mohou představovat acylovou skupinu obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, a

R⁵ je acylová skupina obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, a výsledná báze obecného vzorce I se potom případně převede na adiční sůl s kyselinou, nebo se v případě potřeby tato báze uvolní z adiční soli s kyselinou odvozené od této sloučeniny obecného vzorce I a převede se na jinou adiční sůl s kyselinou.

Ve výhodném provedení podle uvedeného vynálezu se sloučenina obecného vzorce II může hydrolyzovat kyselinou, například vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, nebo je rovněž výhodné hydrolyzovat tuto sloučeninu bazickou látkou, například vodným roztokem hydroxidu sodného.

Výhody postupu podle uvedeného vynálezu oproti postupům podle dosavadního stavu techniky, uváděným v literatuře, je možno shrnout následujícím způsobem:

— není nutno použít jako výchozích látek 3-methyl-3,4-dihydro-lsochinolinu nebo 3-methyl-isochinolinu, přičemž tyto deriváty se připravují pouze s velmi malými výtěžky a u těchto výrob je nutno dehydrogenace provádět pouze za vysokých teplot (za pomoci síry při teplotě 150 °C) nebo oxidací v přítomnosti oxidu seleničitého, který je drahý, a při teplotě 250 °C, — není nutno provádět při postupu podle vynálezu bromaci za pomoci drahého N-brom-sukcinimidu, který má kromě toho velkou molekulovou hmotnost, ani není nutno provádět redukci pomocí komplexního kovového hydridu v bezvodých rozpouštědlech, — výchozí látky obecného, vzorce II je možno připravit s velmi dobrými výtěžky, a — sloučeniny obecného vzorce I je možno připravit z výchozích látek pomocí jednoduchých reakcí, přičemž se použije laciných pomocných látek.

Sloučeniny obecného vzorce I, připravované postupem podle uvedeného vynálezu, jsou novými sloučeninami s výjimkou dvou sloučenin (viz patent Německé spolkové republiky č. 2 246 30'7), přičemž tyto· sloučeniny projevují cenný pozitivní inotropní (karbiotonický) účinek, který nebyl dosud v literatuře zaznamenán. Hydrochloridové a methansulfonové soli odvozené od uvedených známých sloučenin projevují spasmolytickou účinnost, která je menší než spasmolytická účinnost papaverinu (viz patent Německé spolkové republiky číslo 2 246 307).

Ve výše uvedené specifikaci jednotlivých substituentů se termínem alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku míní nasycéná alifatická uhlovodíková skupina s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, jako jsou například methylová skupina, ethylová skupina, n-propylová skupina, isopropylová skupina, atd. Uvedeným termínem alkoxyskupina obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku se míní alkoxyskupina s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, jako jsou například methoxyskupina, ethoxyskupina, n-propoxyskupina, isopropoxyskupina, atd.

Ve výhodném provedení jsou reprezentativními sloučeninami obecného vzorce I, připravovanými postupem podle uvedeného vynálezu, sloučeniny uvedené v následujících příkladech provedení.

Zvláště výhodnými reprezentativními sloučeninami připravovanými postupem podle uvedeného vynálezu jsou následující deriváty:

l-(3-chlorfenyl )-3-( hydroxymethyl )-6,7-dimethoxyisochinolin,

1-(3-nitrof enyl )-3-( hydroxymethyl )-6,7-dimetlwxyisochinolin,

1- (3,4-dichlor fenyl) -3-hydroxymethyl) -6,7-dimethoxyisochinolin, l-(4-nitrofenyl)-3-hydroxymethyl)-,6-dimethoxyisochinolin,

1- (3,4-dimethoxyf enyl )-3-( hydroxymethyl )-4-ethy 1-6,7-dimethoxyisochinolin, a farmaceuticky přijatelné adiční solí s kyselinami odvozené od těchto látek.

Rovněž O-acylové deriváty dále uvedeného obecného vzorce III, které slouží jako výchozí 'látky pro postup podle uvedeného vynálezu, jsou rovněž novými sloučeninami:

ve kterém mají

R, R¹, R², R³‘ a R⁴‘ již shora uvedený význam, а „асуГ je acylová skupina.

Podle uvedeného vynálezu bylo zjištěno, že 3-(hydroxymethyl)-isochinolinové deriváty obecného vzorce I, který byl uveden výše, je možno připravit přímou hydrolýzou 3- (acyloxymethyl)-isochinolinových derivátů, které představují rovněž nové sloučeniny, obecného vzorce III, přičemž tyto deriváty obecného vzorce III se připraví z N-oxidů isochinolinu obecného vzorce II účinkem anhydridu kyseliny uhličité:

ve kterém mají substituenty

R, R¹, R², R³‘ a R⁴‘ již shora uvedený význam.

Jak již bylo shora uvedeno, provádí se postup podle uvedeného vynálezu, při kterém se připravují sloučeniny obecného vzorce I a adiční soli s kyselinami, odvozené od těchto sloučenin, tak, že se hydrolyzuje 3-( acyloxymethyl Jisochinolinový derivát obecného' vzorce III, ve kterém mají substituenty R, R¹, R² stejný význam jako bylo uvedeno shora, R⁵ je acylová skupina obsa hující 2 až 4 atomy uhlíku a R³‘ a R⁴‘ mají stejný význam jako je uvedeno shora pro R³, R⁴, ovšem mohou představovat rovněž substituent R⁵, přičemž výsledná adiční sůl s kyselinou sloučeniny obecného vzorce I se případně převede na volnou bazickou formu nebo na jinou adiční sůl s kyselinou.

Ve výhodném provedení postupu podle uvedeného vynálezu se sloučeniny obecného vzorce III hydrolyzují tak, že se zahřívají pod zpětným chladičem se zředěným vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, přičemž se získají hydrochloridové soli sloučenin obecného vzorce I, které jsou špatně rozpustné ve vodě, a které je možno přímo izolovat. V případě, že je hydrochloridová sůl sloučeniny obecného vzorce I dobře rozpustná ve vodě, potom se ve výhodném provedení nejdříve převede na volnou bazickou formu zpracováním s alkalickým činidlem.

Tato bazická forma se izoluje přímo z reakční směsi, ve výhodném provedení neutralizací ochlazené reakční směsi zředěným vodným roztokem anorganické bazické látky, jako je například roztok hydroxidu sodného, nebo organickou bazickou látkou, jako je například triethylamin. Vytvořené krystaly se zfiltrují a v případě potřeby se přečistí rekrystalizaci. Takto získanou bazickou formu je možno případně převést na jinou adiční sůl s kyselinou, což se provede reakcí s vodným roztokem kyseliny.

Podle dalšího výhodného provedení postupu podle uvedeného vynálezu se sloučeniny obecného vzorce III hydrolyzují tak, že se zahřívají pod zpětným chladičem se zředěným vodným roztokem bazické sloučeniny, ve výhodném provedení je tímto vodným roztokem roztok hydroxidu sodného, přičemž takto získaný produkt se oddělí a v případě potřeby se přečistí rekrysta-lizací.

Podle výše uvedených postupů se sloučeniny obecného vzorce I získají ve formě babických látek. Soli odvozené od uvedených sloučenin se ve výhodném provedení podle vynálezu připraví rozpuštěním nebo suspendováním uvedených bazických látek ve vhodném rozpouštědle, jako je například methanol, ethanol, isopropanol nebo voda, přičemž potom se к takto připravenému roztoku přidá vhodná kyselina, jako- je například kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fosforečná, kyselina sírová, kyselina octová, kyselina citrónová, kyselina jantarová, kyselina maleinová, kyselina fumarová nebo roztoky těchto látek ve vhodném rozpouštědle. Získané soli se oddělí filtrací nebo odpařením rozpouštědla, přičemž potom popřípadě následuje převedení na jinou adiční sůl s kyselinou.

Výše uvedené 3-(acyloxymethyl]-isochinolinové deriváty obecného vzorce III, použité v postupu podle uvedeného vynálezu jako výchozí látky, představují rovněž nové sloučeniny. Tyto sloučeniny obecného vzorce III je možno připravit zahříváním 3-methyl-isochinolin-N-oxidů obecného vzorce II, ve kterém mají substituenty R, R¹, R², R³‘ a R⁴‘ shora uvedený význam, s anhydridem karboxylové kyseliny, ve výhodném provedení s anhydridem kyseliny octové nebo s anhydridem kyseliny propionové, pod zpětným chladičem po dobu v rozmezí od jedné do pěti hodin. Takto získaný 3-(acyloxymethyljisochinolinový derivát obecného vzorce III se oddělí po zkoncentrování reakční směsi při sníženém tlaku a vymražení zkoncentrované směsi nebo přímou krystalizaci, přičemž potom v případě potřeby je možno provést znovu krystalizaci (rekrystalizace produktu). Jako rekrystalizačního rozpouštědla se ve výhodném provedení používá ethanolu. Za acylačních podmínek, kterým se podrobuje isochinolinový skelet, může dojít к acylaci obou poloh, tzn. 6 a 7, z čehož vyplývá, že v meziproduktech obecného vzorce III představují substituenty R³‘ a R⁴‘ ve výhodném provedení acetylovou skupinu nebo propionylovou skupinu. Během hydrolýzy se tyto acylové skupiny rovněž rozštěpí. Při provádění výše uvedeného postupu výroby meziproduktů obecného vzorce III, se tyto produkty připraví ve velice dobrých výtěžcích (to znamená ve výtěžcích pohybujících se v rozmezí od 70 do 94 %), přičemž tyto meziprodukty se rovněž převedou na 3-( hydroxymethyl )isochinolinové deriváty obecného vzorce I ve velmi dobrých výtěžcích.

Sloučeniny obecného vzorce II jsou částečně známé sloučeniny a částečně nové sloučeniny, přičemž tyto látky je možno připravit podle následujících postupů, známých z literatury podle dosavadního stavu techniky, přičemž se vychází z 2-aroyl-fenylacetonových derivátů, které reagují s hydroxylaminem: E. Ochai, ,,Aromatic Amine Oxides“, Elsevier Publishing Co., Amsterdam, London, New York, 1967, str. 19 až 66, kde je popisována pouze reakce homoftalaldehydu s hydroxylaminem; dále J. Am. Chem. Soc., 72, 1118 (1950); J. Org. Chem. 19, 1533 (rok 1954).

Nové sloučeniny obecného vzorce I, připravované postupem podle uvedeného vynálezu projevují cenný pozitivní inotropní (kardiotonický) účinek, který byl potvrzen na testech prováděných in vivo, přičemž bylo použito následujících metod. Jako kontrolní látky sloužily při provádění těchto testů isoproterenol (tzn. N-isopropylnoradrenalin ve formě hydrochloridu) a amrinon (inocor: 5-amino-3,4-dipyridyl-6[ 1Ή] -on).

Testovací metody

A)

Metoda s měřidlem zjišťujícím napínání svalu u anestetizovaných koček s otevřeným hrudníkem

Samci a samičky kcček, o váze v rozmezí od 2 do 5 kilogramů, byly anestetizovám’ směsí chloralosy a urethanu v poměru 1: 5, přičemž tracheální kanylou bylo pomocí respirátoru Harvard 665 zavedeno umělé dýchání. Po otevření hrudníku a perikardia bylo na epikardiální povrch levé srdeční komory přišito měřidlo zjišťující napínání svalu, což bylo provedeno postupem podle Waltona a Brodieho [viz J. Pharmacol. Exp. Ther. 90, 26, (1947)], přičemž byla změřena myokardiální kontrakční síla (MCF). Testované sloučeniny byly podávány venózní a duodenální kanylou, tzn. intravenózně (i. v.) a intraduodenálně (i. d.). Arteriální tlak krve byl soustavně sledován pomocí elektromanometru za pomoci katetru vloženého do femorální arterie a připojeného převáděče Statham P 23 DB. Srdeční puls byl kontinuálně zaznamenáván pomocí pulsotachometru.

Patnáct minut před provedením každého testu byla kontrolována reaktivita srdce u koček aplikací isoproterenodu o dávce 0,2 ^zg/kg, což bylo provedeno intravenózně. Potom byla podána testovaná sloučenina o dávce 5 mg/kg, což bylo provedeno intravenózně. Při provádění těchto testů nesloužil isoproterenol jako obvyklá 'referenční sloučenina. Tato látka byla použita částečně ke kontrole citlivosti testovaného systému a částečně к odhadnutí účinnosti testované sloučeniny. Relativní účinnost testovaných sloučenin byla vyjádřena srovnáním účinku testované sloučeniny na MCF, přičemž tato testovaná sloučenina byla podána i. v. o dávce 5 mg/kg, s účinkem isoproterenolu o dávce 0,2 ^g/kg, která byla podána i. v., u každé kočky. Získané hodnoty jsou dobrým ukazatelem pozitivního inotropního účinku testované sloučeniny, neboť se tímto způsobem vyloučí individuální sensitivita zvířete. Získané výsledky jsou uvedeny v tabulce č. 1.

Sloučenina podle příkladu 1 se ukázala být účinná rovněž i při i. d. podávání. Při dávce 5 mg/kg bylo dosaženo zvýšení hodnoty MCF o 75 % (viz tabulka č. 1).

Tabulka č. 1

Pozitivní inotropní účinek u anestetizovaných koček s otevřeným hrudníkem

Příklad	Způsob	Dávka	MCF	Relativní	Trvání	HR	Pa
sloučeniny	podání	(mg/kg)	(%)	účinek ve	účinku	(min.^-1)	(kPa)
číslo				srovnání s	(minuty)
				isoproterenolem

1	i. v.	5	+50	2,2	60	+20	—3,325
	i. d.	5	+75		40	+12	—0,665
2	i. v.	5	+60,9	1,14	11-0	+45	—8,42
9	i. v.	5	+45,45	0,89	34	—45	—5,985
17	i. v.	5	+36,25	0,79	26	0	,—1,995
18	i. v.	5		1	11	+15	—6,198
isoproterenol	i. v.	0,2/ig/kg		1	4,76	+44,5	—4,396
Amrinon	i. v.	5		1,5	>60	+40	—3,751

MCF: zvětšení myokardální kontrakční síly

HR: změny v pulsu srdce

P_A: zmenšení systemického arteriálního tlaku krve

B)

Testování na anestetizovaných psech s otevřeným hrudníkem.

Při provádění těchto testů byly zjišťovány myokardální a koronární vaskulární účinky (účinek na koronární průtok) sloučenin podle příkladu 1 podle vynálezu, přičemž к těmto testům byly použity kříženci psů obou pohlaví, kteří byly narkotizovány pentobarbitalem sodným v množství 30 mg/ /kg. Za použití stejné metody jako je uvedeno u testu A) byly zaznamenávány změny v koronárním průtoku, přičemž bylo- použito přístroje Narcomatic RT-500, dále systemický arteriální tlak krve, srdeční puls a MCF, přičemž tato hodnota byla rovněž zaznamenávána obdobným způsobem. Výsledky jsou uvedeny v tabulce č. 2.

Positivní inotropní účinek u anestetizovaných psů s otevřeným hrudníkem

Tabulka č. 2

Příklad sloučeniny číslo	Dávka (mg/kg)	MCF (%)	Doba trvání účinku (minuty)	HR (minuta“¹ ]	Рл (kPa)	Průtok (%)
1	0,5	+42	40+	+23	—2,128	+27
	1,0	+57	18	+40	— 3,059	+58
	2,0	+70	70	+25	—4,389	+112
	4,0	+61	58	+36	—5,985	+151
Amrinon	2,0	+64	33	+25	—3,724	+77

⁺nevýznamná hodnota

MCF: zvětšení myokardální kontrakční síly

HR: zvětšení v pulsu srdce

Р_л: zmenšení systemického arteriálního tlaku krve Průtok: změna v· koronárním průtoku krve (ml/minutu)

Z výsledků uvedených v tabulkách č. 1 a 2 je zřejmé, že pokud se týče účinku sloučeniny podle uvedeného vynálezu projevující se ve zvýšení hodnoty MCF, jsou sloučeniny podle vynálezu stejně účinné nebo ještě účinnější než amrinon, který byl použit jako srovnávací látka. Délka trvání tohoto účinku je rovněž významná ve srovnání s isoproterenolem, u něhož tento účinek trval v rozmezí od 4 do 5 minut, zatímco při podání sloučenin uvedených v tabulkách č. 1 a 2 trval tento účinek až 110 minut.

Při zvlášť prováděných testech byl přechodně zastaven koronární průtok (po dobu 40 minut), což bylo provedeno uzavřením levé přední sestupné koronární arterie, přičemž potom byly testovány u akutně ischemizovaného myokardu účinky na činnost srdce. V dále uvedené tabulce č. 3 jsou uvedeny účinky sloučeniny podle příkladu 1 po akutní ischemii vyvolané přechodnou koronární okluzí. Pozitivní inotropní účinky byly poněkud menší než u nedotčeného myokardu, ovšem účinky dosahované při vyšších dávkách byly významné. Sloučenina vykazovala pozitivní Inotropní účinek dokonce i při i. d. podání, tzn. při dávce 1 mg/kg bylo dosaženo asi 20% zvýšení hodnoty MCF, zatímco při dávce '5 mg/kg bylo dosaženo asi 50% zvýšení hodnoty MCF.

Tabulka č. 3

Pozitivní inotropní účinek u anestetizovaných psů s otevřeným hrudníkem při akutní myokardální ischemii
Příklad Dávka	MCF	Doba	HR	Ps	Pd	Průtok
sloučeniny (mg/kg)	(%)	trvání	(min.^-1)	(kPa)	(kPa)	(%)
číslo		účinku (minuty]

	0,5	+23,9	25,66	+16,0	—1,729+ +	—2,793	+34,2+
1		+8,4	+12,3	+4,0	+0,266	+0,65	+6,7
	1,0	+30,9+	+21,3 +	+35,8+	—3,099 +	-2,99 +	+48,7 +
		+6,4	+4,0	+10,4	+0,58	+0,5	+16,1
	0,5	+27,9	12,6	+14,0	— 1,06	-1,86	+25,9
Amrinon		+ 13,0	+4,2	+2,9	+0,45	+0,32	+7,9
	1,0	+39,7 ⁺	+11,8	+16,0	—1,73	—2,26	+44,5 + +
Amrinon		+10,0	+ 3,5	+2,4	+0,49	+0,27	+7,8

⁺ p < 0,05 ^{+ +} < 0,01

MCF: zvětšení myokardální kontrakční síly

HR: zvětšení pulsu srdce

P_s: snížení systolického tlaku krve

P_D: snížení diastolického tlaku krve

Průtok: zvýšení koronárního průtoku krve

С)

Testy na anestetizovaných psech s částečně infarzovaným myokardem.

Podle tohoto testu byla zvířata předem operována za účelem vyvolání akutního myokardálního infarktu, přičemž jím byl podvázán jeden segment levé přední sestupné koronární arterie. Poté, kdy zvířata přežila přinejmenším šest týdnů, byla tato zvířata znovu narkotizována, přičemž byly provedeny shora uvedené testy farmakologické. Na infarzované ploše (o průměru asi 4 centimetry) se stěna srdeční komory poněkud zeslabila, přičemž byla přeměněna na tkáň podobnou inaktivní pojivové tkáni. Z výsledků uvedených v tabulce č. 4 je patrné, že sloučenina podle příkladu 1 je rovněž schopná vyvolávat podstatné zvýšení MCF u psů s infarzovaným myokardem:

Tabulka č. 4

Pozitivní inotropní účinek u anestetizovaných psů s otevřeným hrudníkem s infarzovaným myokardem
Příklad Dávka	MCF	Doba	HR	Ps	Pd	Průtok
sloučeniny (mg/kg)	(%)	trvání	(min.^-1)	(kPa)	(kPa)	(%)
číslo		účinku (minuty)

	0,5	+56,7 +	33	+31,3 +	— 1,99+	—5,65+	+66,6 +
1		+16,9		+ 5,5	+0,4	+1,27	+ 6,9
	1,0	+91,2^{+ +}	45	+71,2+ +	— 4,98	—7,31+ +	+74,3 +
		+15,5		+ 3,1	+ 1,82	+0,66	+ 9,7

+p < 0,05 ⁺⁺p<0,01

MCF: zvětšení myokardální kontrakční síly HR: zvětšení pulsu srdce

Průtok: zvýšení koronárního průtoku krve P_s: zmenšení systolického tlaku krve P_D: zmenšení diastolického tlaku krve

D)

Testy na kočkách při vědomí se zavedenými kanylami v nedotčeném stavu.

Uvedená zvířata byla použita к testování buďto metodou podle Rabloczkyho a Maděra (viz „Measurement of Systemic and Pulmorany Arterial Pressure in Conscious Animals“, přednáška na Congress of the International Union of Pharmacologists, Budapešť, 1980), nebo metodami alternativními. Za účelem zjišťování intraventrikulárního tlaku a stanovení hodnot dp/dt, které indikují odezvu MCF, byla do ventrikuly vložena systemická arteriální kanyla. Sloučenina podle příkladu 1 byla podána orálně v dávce 1 mg/kg nebo 2 mg/kg. Tato sloučenina vyvolala stálý (trvající 45 minut) 30 až 50% zvýšení hodnoty MCF, přičemž se nijak významně neměnil ani systemický tlak krve ani puls srdce.

Výše uvedené testy byly rovněž prováděny na kočkách při vědomí, u kterých bylo< provedeno částečné infarzování myokardu. Tato zvířata byla předběžně operována za účelem vyvolání akutního myokardálního infarktu, což bylo provedeno podvázáním jednoho segmentu levé přední sestupné koronární arterie. Po čtyřech týdnech byla zvířata opatřena kanylami. Získané výsledky jsou uvedeny v tabulce č. 5, přičemž hodnoty zde uvedené ukazují, že sloučenina podle příkladu 1 vyvolala významné zvýšení hodnoty MCF u koček při vědomí s infarzovaným myokardem, přičemž zvýšení této hodnoty bylo dokonce větší než u koček s nedotčeným myokardem.

Tabulka č. 5

Pozitivní inotropní účinek sloučeniny podle příkladu 1 u koček při vědomí s infarzováným a nedotčeným myokardem [1 mg/kg p. o.)

	Doba (minuty)	Ps (kPa)	Pd (kPa)	HR (min.*¹)	MCF (%)
Kočka při vědomí s	základ	15,7 + 2,1	10,1 + 1,6	170+ 5,7	100
infarzovaným myo-	15	14,1 + 3,1	9,3 +2,3	165,+ 9,6	113,7+ 4,6
kardem	30	14,4 + 2,1	11,7 + 2,1	182 + 13,1	140,7 + 11,6 ⁺
	45	14,8 + 1,6	10 + 0,9	170 + 10,0	138,7+ 7,4
	60	15,3 + 0,9	10,1 + 0,8	182 + 10,3	152,5 + 24,0
	75	15,3 + 1,3	9,7 + 1,1	175 + 11	141,0 + 19,8
	90'	15,7 + 0,8	10,4 + 0,8	175 + 12,5	123,5 + 14,6
Kočka při vědomí s	základ	16,5 + 0,4	11,2 + 0,3	170+ 9,6	100
nedotčeným myo-	15	15,9 + 0,4	10,6 + 0,3	183 + 15,2	117 + 7
kardem	30	16,1 + 0,5	10,6 + 0,3	195 + 15,6	134 +13⁺
	45	17,0 + 0,5	10,9 + 0,3	190 + 14,2	132 + 9 ⁺
	60	17,4 + 0,4	11,7 + 0,4	188 + 15,7	137 +11⁺
	75	16,9 + 0,5	11,3 + 0,4	190 + 15,1	124 + 4⁺
	90	16,2 +0,4	10,8 + 0,3	176 + 11,1	105 + 3

⁺p 0,05

MCF: myokardální kontrakční síla

HR: pulsy srdce

P_s: systolický tlak krve

P_D: diastolický tlak krve

Z výsledků je zřejmé, že u anestetizovaných koček byla sloučenina podle příkladu 1 potvrzena jako účinnější než amrinon, přičemž její účinnost při i. d. podávání předčila účinnost při i. v. podávání, což naznačuje na dobrou orální absorptivitu. Při provádění biochemických testů bylo zjištěno, že sloučenina podle příkladu 1 inhibuje fosfodiesterázovou aktivitu. Tento účinek samotný by mohl být považován za rozhodující pro vyvolání pozitivního inotropního účinku, ovšem bylo zjištěno, že je doprovázen koronární vazodidatační aktivitou, která promotuje hlavní účinek tohoto činidla. V chronické fázi myokardiálního infarktu u psů byla kardiální tkáň citlivější vůči pozitivnímu inotropnímu působení sloučeniny podle příkladu 1 než v případě nedotčených zvířat.

Na rozdíl od ostatních sloučenin způsobuje sloučenina podle příkladu 9 nikoliv zvýšení ale snížení srdeční tepové frekvence (bradykardie).

Ze sloučenin získaných postupem podle uvedeného vynálezu je možno připravit nové farmaceutické přípravky, které obsahují jako aktivní složku přinejmenším jednu sloučeninu obecného vzorce I a nebo farmaceuticky přijatelnou adiční sůl této sloučeniny s kyselinou, společně s jedním nebo více farmaceutickými nosičovými látkami nebo nosičovou látkou, ředidlem nebo ředidly a/nebo dalšími přídavnými látkami nebo látkou. Tyto farmaceutické prostředky mohou rovněž obsahovat další biologicky účinné látky, zejména další kardiotonická činidla.

Farmaceutické prostředky obsahující slou čeniny připravené postupem podle uvedeného vynálezu mohou být připraveny ve formě pevných materiálů (jako jsou například tablety, potažené tablety, kapsle, atd.) nebo mohou být v kapalné formě (jako jsou například roztoky, suspenze, emulze, atd.). Nosičovými látkami mohou být všeobecně používané nosičové látky ve farmacii (jako jsou například škrob, stearát hořečnatý, uhličitan hořečnatý, mastek, stearin, želatina, laktóza, celulóza, uhličitan vápenatý, polyvinylpyrrolidon, voda, polyalkylenglykol, atd.). Tyto prostředky podle vynálezu mohou rovněž obsahovat vhodné přídavné látky (jako jsou například suspendační činidla, emulgační činidla, stabilizační přísady, tlumící látky, atd.) a další terapeuticky účinné látky.

Tyto prostředky mohou být ve formě schopné orálního nebo parenterálního podávání.

Tyto farmaceutické prostředky je možno připravit postupy, které jsou všeobecně používané ve farmaceutickém průmyslu.

Denní dávka nových sloučenin, připravených postupem podle uvedeného vynálezu, se pohybuje v rozmezí od asi 2 do 200 miligramů, přičemž přesné dávkování závisí na tělesné hmotnosti, na stáří a na všeobecném zdravotním stavu pacienta.

Sloučeniny připravené postupem podle uvedeného vynálezu byly identifikovány elementární analýzou, přičemž bylo použito IR spektroskopie a ^XH NMR spektroskopie a rovněž hmotové spektrometrie.

Postup podle uvedeného vynálezu bude v dalším ilustrován pomocí příkladů provedení, které nijak neomezují rozsah vynálezu,

Příklad 1

Hydrochlorid 1- (3-chlorf enyl )-3-( hydroxymethyl) -6,7-dimethoxyisochinolinu.

Podle tohoto postupu bylo 15,67 gramu (což odpovídá 0,042 Μ) 1-(3-chlorfenyl]|-3- (acetoxymethyl)-6,7-dimethoxy-isochinolinu (sloučenina podle příkladu 21) zahříváno pod zpětným chladičem ve 160 mililitrech vodného 5% roztoku kyseliny chlorovodíkové po dobu jedné hodiny. Z počátečního čirého roztoku se počaly rychle tvořit krystaly konečného produktu. Po ochlazení na ledové lázni byla reakční směs zfiltrována, získaný produkt byl promyt třikrát 10 mililitry vody a potom byl usušen při teplotě v rozmezí od 90 do 100 °C, přičemž tím293 to způsobem bylo získáno 15,21 gramu surového produktu, jehož teplota tání se pohybovala v rozmezí od 210 do 214 °C. Tento surový produkt byl přečištěn zahříváním pod zpětným chladičem ve 180 ml 99,5% ethanolu, přičemž takto získaná suspenze byla ochlazena a udržována při teplotě +5 °C po dobu 10 hodin, a potom byl produkt zfiltrován, promyt třikrát 5 mililitry ethanolu a nakonec usušen. Výtěžek tohoto postupu byl 12,67 g (což odpovídá 82,4 %J, přičemž teplota tání takto získaného produktu se pohybovala v rozmezí od 219 do 221 °C za rozkladu.

Hydrochloridové soli sloučenin připravených postupem podle tohoto příkladu 1 jsou uvedeny v následující tabulce č. 6.

a b u 1 к a č. 6

Příklad R R¹ R² číslo

2	3-NO2	H	H
3	H	H	H
4	3-NO2	4-C1	H
5	2-C1	4-NO2	H
6	3-C1	H	H
7	4-NOz	H	H
8	3-C1	H	H
9	3-C1	4-C1	H

R³	R⁴	Výtěžek (%)	Teplota tání (°C) (rekrystallzační rozpouštědlo)
Me	Me	92,6	228 — 230 (za rozkladu) (zpracováno v ethanolu)
Me	Me	89,4	230 — 232 (za rozkladu) (bezvodý ethanol)
Me	Me	84,4	222 — 224 (za rozkladu) (zpracováno v ethanolu)
Me	Me	64,0	221 — 223 (za rozkladu) (zpracováno v ethanolu)
H	Me	49,5	217 — 219 (za rozkladu) (EtOH/EtOAc)
— CH2		61,3	224 — 226 (za rozkladu) (zpracováno v ethanolu)
Et	Et	69,0	219 — 221 (za rozkladu) (bezvodý ethanol)
Me	Me	87,3	227 — 229 (za rozkladu) (zpracováno v ethanolu)

16	20
Příklad číslo	R	R¹	R²	R³	R⁴	Výtěžek (%)	Teplota tání (°C) (rekrystalizační rozpouštědlo)
10	H	H	H	Et		Et	83,7	215 — 217 (za rozkladu) (bezvodý ethanol)
11	3-Cl	4-C1	H	Et		Et	87,5	232 — 234 (za rozkladu) (zpracováno v ethanolu)
12	4-Br	H	H	Et		Et	69,4	216 — 218 (za rozkladu) (bezvodý ethanol)
13	H	H	H		—CH2-		67,7	190 — 192 : (za rozkladu) (isopropanol)
14	4-Br	H	H		—CHž—		57,8	219 — 221 (za rozkladu) (bezvodý .. ethanol)
15	3-OMe	4-OMe	H		— CH2-		50,7	247 — 249 (za rozkladu) dimethylformamid)

Příklad 16

Příklad 17

1- (3-chlorfenyl)-3-hydroxymethyl-6,7-diinethoxyisochinolin.

Podle tohoto provedení byla směs 24,77 g (což odpovídá 0,0676 M) l-(3-chlorfenyl)-3-( hydroxymethyl )-6,7-dimethoxy-isochinolinu ve formě hydrochloridu (sloučenina podle příkladu 1), dále 1'50 ml chloroformu a 10,1 g (což odpovídá 13,9 ml, 0,1 MJ triethylaminu, zahřívána pod zpětným chladičem po dobu 15 minut. Po ochlazení byl získaný roztok extrahován třikrát 50 ml vody, získaná chloroformová vrstva byla usušena za pomoci bezvodého síranu sodného, potom odpařena, čímž se získal požadovaný produkt v krystalické, bazické formě. Tato bazická forma uvedené sloučeniny byla přečištěna rozpuštěním v 25 ml horkého ethanolu o koncentraci 99,5 %. Po ochlazení byla výsledná krystalická hmota smíchána s 25 ml diethyletheru, a potom bylo· provedeno ochlazení, zfiltrování a promytí směsi třikrát 5 ml směsi ethanolu a etheru v, poměru 1:1, přičemž potom byl produkt sušen při teplotě v rozmezí od 60 do 80 °C. Výtěžek tohoto postupu činil 16,73 g (což odpovídá 75,1 %), a teplota tání produktu byla v rozmezí od 118 do 120 °C.

1- (4-nitrofeny 1) -3- (hydroxymethyl) -6,7-dimethoxylsochinolin.

Podle tohoto příkladu provedení bylo 3,96 gramu (což odpovídá 10,36 mM) l-(4-nitrofenyl )-3- (acetoxymethyl) -6,7-dlmethoxy-isochinolinu (sloučenina podle příkladu 23) hydrolyzováno postupem, který je uveden v příkladu 1, přičemž výsledná hydrochloridová sůl konečného produktu byla zfiltrována. Z této soli byla stejným postupem jako je uveden v příkladu 16 uvolněna báze, přičemž tímto způsobem bylo získáno 3,35 gramu (což odpovídá 95 %) surového produktu. Teplota tání tohoto produktu se pohybovala v rozmezí od 260 do 263 °C. Tento produkt byl potom rekrystalován z 15 ml dimethylformamidu. Výtěžek činil 2,94 gramu (což odpovídá 83,4 %), přičemž teplota tání tohoto produktu byla 267 až 269 *43.

Příklad 18

1- (3,4-dimethoxyf enyl )-3-( hydroxymethyl) -4-ethyl-6,7-dimethoxy-isochinolin.

Podle tohoto provedení byla směs 394,0 g (což odpovídá 0,926 M) l-(3,4-dimethoxyfenyl) -3- (acetoxymethyl) -4-ethyl-6,7-dimetho264293 xyisochinolinu (sloučenina podle příkladu 20) nebo 407,0 g (což odpovídá 0,926 Μ) 1- (3,4-dimethoxyfenyl) -3-pr opionyloixymethyl-4-ethyl-6,7-dimethoxy-isochinolinu (sloučenina podle příkladu 38) a 2,76 litrů 9% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, zahřívána pod zpětným chladičem po dobu jedné hodiny. Takto vzniklá reakční směs byla potom ochlazena, nalita do 1,98 1 vodného 10% roztoku hydroxidu sodného, potom byla směs ochlazena na teplotu 5 °C a takto získané krystalky byly zfiltrovány, promyty čtyřikrát 300 ml vody a nakonec usušeny při teplotě v rozmezí od 80 do 100 stupňů Celsia, přičemž bylo získáno 365^: až 375 g surového produktu, jehož teplota tání se pohybovala v. rozmezí od 160 do 163 °C. Tento produkt byl potom rekrystalizován z jednoho litru ethylesteru kyseliny octové. Výtěžek tohoto postupu byl 322,5 g (což odpovídá 91,0 %), přičemž teplota tání produktu se pohybovala v rozmezí od 164 do 166 °C.

Příprava hydrochloridové soli.

Podle tohoto provedení bylo 2,5 g výše uvedené bazické látky, 80 ml 99% ethanolu a 3 ml 20% roztoku kyseliny chlorovodíkové zahříváno pod zpětným chladičem po dobu 30 minut, přičemž takto získaný roztok byl odpařen a získaný zbytek byl rekrystalizován ze 35 ml 99% ethanolu. Výtěžek tohoto postupu byl 2,43 g (což odpovídá 88,7 %), přičemž teplota tání tohoto produktu se pohybovala v rozmezí od 204 do 206 °C (za rozkladu).

Příklad 19

1- (3-hitró-4-chlorf enyl )-3-( hydroxymethyl) -6,7-diethoxyisochinolin.

Podle tohoto příkladu provedení bylo 4,98 gramu (což odpovídá 0,0112 M) l-(3-nitro-4-chlorfenyl )-3-( acetoxymethyl) -6,7-diethoxy-isochinolinu zahříváno pod zpětným chladičem s 50 ml 10% vodného roztoku hydroxidu sodného po dobu 5 hodin. Během provádění této hydrolýzy se vysrážel produkt. Takto vzniklá suspenze byla ochlazena, zfiltrována, promyta vodou za účelem odstranění hydroxidu sodného a nakonec usušena. Tento surový produkt (v množství

4,27 g) byl potom přečištěn zpracováním se 45 ml horkého bezvodého ethanolu, přičemž takto získaná suspenze byla ochlazena na lázni ledu a vody, zfiltrována, promyta třikrát 5 ml bezvodého ethanolu a nakonec usušena. Výtěžek tohoto postupu byl 3,94 g (což odpovídá 87,4 %), přičemž teplota tání se pohybuje v rozmezí od 187 do 188 °C.

Příprava hydrochloridové soli

Podle tohoto provedení byla báze získaná shora uvedeným postupem zahřívána pod zpětným chladičem se 60 ml vodného roztoku 5% kyseliny chlorovodíkové, přičemž takto získaná suspenze byla ochlazena směsí vody a ledu, zfiltrována, promyta čtyřikrát 10 ml destilované vody a usušena při teplotě v rozmezí od 80 do 100 °C. Výtěžek tohoto postupu byl 4,08 g (což odpovídá 83 %), přičemž teplota tání získaného produktu se pohybovala v rozmezí od 219 do 221 °C (za rozkladu).

Tyto nové výše uvedené 3-(acyloxymethyljisochinolinové deriváty obecného vzorce III, které byly použity jako výchozí látky v postupech přípravy adičních solí s kyselinami sloučenin obecného vzorce I podle příkladů 1 až 19, byly synteticky připraveny podle následujících příkladů 20 až 37.

Příklad 20

1- (3,4-dimethoxyfenyl )-3-( acetoxymethyl) -4-ethyl-6,7-dimethoxy-isochinolin.

Podle tohoto provedení bylo 421,5 g (což odpovídá 1,1 M) N-oxidu l-( 3,4-dimethoxyfenyl )-3-methyl-4-ethyl-6,7-dimethoxy-isochinolinu a 1,1 litru anhydridu kyseliny octové zahříváno pod zpětným chladičem po dobu 2,5 hodiny, přičemž potom byl takto získaný roztok odpařen za sníženého tlaku. Takto vzniklý zbytek byl rekrystalován nejprve z 1,2 litru 99% ethanolu, přičemž potom byl získaný produkt (414,5 g, teplota tání v rozmezí od 115 do 120 °C) opět rekrystalován z jednoho litru 99% ethanolu. Výtěžek postupu byl 393,7 g (což odpovídá 84,1 %), a teplota tání produktu byla v rozmezí od 129 do 131 °C.

Další sloučeniny obecného vzorce III, připravené postupem podle tohoto příkladu 20 jsou uvedeny v následující tabulce č. 7.

Tabulka č. 7

Příklad číslo	R	R¹	R²	R3‘	r⁴‘	Výtěžek (%)	Teplota tání (°C) (rekrystalizační rozpouš tědlo)
21	3-C1	H	H	Me	Me	70,4	94 — 96 (bezvodý ethanol)
22	3-NO2	H	H	Me	Me	72,4	168 — 170 (bezvodý ethanol)
23	4-NO2	H	H	Me	Me	91,0	202 — 204 (bezvodý ethanol)
24	H	H	H	Me	Me	79,1	158 — 160 (bezvodý ethanol)
25	3-NO2	4-C1	H	Me	Me	85,0	179 — 181 (zpracování v ethanolu)
26	3-C1	4-NO2	H	Me	Me	93,9	185 — 187 (zpracování v ethanolu)
27	3-C1	H	H	Ac	Me	40,7	120 — 122 (ethanol)
28	4-NO2	H	H	—CH2-		86,7	192 — 194 (zpracování v ethanolu)
29	3-C1	H	H	Et	Et	86,8	87:-89 (bezvodý ethanol)
30	3-C1	4-01	H	Me	Me	82,2	144 — 146 (bezvodý • ethanol)..
31	H	H	H	Et	Et	75,8	114 — 116' . (bezvodý. ethanol)
32	3-C1	4-C1	H	Et	Et	. 88,0	154 — 156 (bezvodý ethanol)
33	3-NO2	4-01	H	Et	Et	80,9	152 — 154 (zpracování v ethanolu)
34	4-Br	H	Ή	Et	Et	90,9	149 — 151 (bezvodý ethanol)
35	H	H	H	— CH2-		81,3	117 — 119 (bezvodý ethanol)

2B4293
Příklad číslo	R	23	24
R¹	R²	_R3‘ _R4‘	Výtěžek (%)	Teplota tání (°C) (rekrystalizační rozpouštědlo)
36	4-Br	H	H	— CH2—	85,0	128 — 130 (bezvodý ethanol)
37	3-OMe	4-OMe	H	— CH2—	82,5	230 — 231

(za rozkladu) (hydrochlorid)

Příklad 38 množství (g)

1- (3,4-dimethoxyf enyl) -3- (propionyloxymethyl)-4-ethyl-6,7-dimethoxy-lsochinolin.

Podle tohoto provedení bylo 3,83 g (což odpovídá 10 mM) N-oxidu l-(3,4-dimethoxyf enyl ) -3-methyl-4-ethyl-6,7-dimethoxy-isochinolinu zahříváno pod zpětným chladičem společně s 20 ml anhydridu kyseliny propionové po dobu 1,5 hodiny. Takto získaný roztok byl potom odpařen za sníženého tlaku, přičemž vzniklý zbytek byl suspendován ve 100 ml vody, zfiltrován, promyt třikrát 15 ml vody, sušen za sníženého tlaku při teplotě okolí, přičemž byly získány krystaly, které byly rekrystalovány ze 7 ml 99,5% ethanolu, krystaly byly zfiltrovány, promyty třikrát 8 ml ethanolu a nakonec usušeny při teplotě v rozmezí od 80 do 90 stupňů Celsia. Výtěžek tohoto postupu byl 2,70 g (což odpovídá 61,5 %), a teplota tání získaného produktu se pohybovala v rozmezí od 125 do 127 °C.

Příklad 39

Příprava tablet

Směs pro 100 tablet

1- (3-chlorf enyl )-3-( hydroxymethyl) -6,7-dimethoxy-isochinolin ve formě hydrochloridu10

Laktóza185

Mikrokrystallcká celulóza25

Mastek5

Kukuřičný škrob73

Stearát hořečnatý2 celkem 300 gramů

Výše uvedené složky byly smíchány, homogenlzovány a směs byla slisována do formy tablet, které obsahovaly 10 ml účinné látky (každá).

Příklad 40

Příprava roztoku pro injekce.

Směs na 2 litry roztoku l-( 3-chlorfenyl )-3- (hydroxymethyl) -6,7-dimethoxy-ísochinolin ve formě hydrochloridu 20 gramů

Chlorid sodný 20 gramů

Voda pro injekce doplněk do 2 000 ml

Tento roztok byl plněn do ampulí, přičemž každá obsahovala 2 ml uvedeného roztoku.

Claims

PŘEDMĚT vynalezu

1. Způsob přípravy 3-(hydroxymethylj-isochinolinových derivátů obecného vzorce I

3-(acetoxymethyl)isochinollnový derivát obecného vzorce III ve kterém znamená

R³ a R⁴ jsou stejné nebo rozdílné substituenty, které znamenají atom vodíku nebo alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo společně znamenají methylenovou skupinu, s tou podmínkou, že jestliže substituent R znamená 3-methoxyskupinu, R¹ znamená 4-methoxyskupinu, a R³ a R⁴ jsou stejné a představují methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu, potom substituent R² představuje alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, a farmaceuticky přijatelných edičních solí s kyselinami, odvozenými od těchto sloučenin, vyznačující se tím, že se hydrolyzuje ve kterém mají substituenty

R, R¹ a R² již shora uvedený význam, a R³‘ a R⁴‘ mají stejný význam jako R³, R⁴shora, přičemž rovněž mohou představovat acylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, a

R⁵ je acylová skupina ůbsahující 2 až 4 atomy uhlíku, a výsledná báze obecného vzorce I se potom případně převede na adiční sůl s kyselinou, nebo se v· případě potřeby tato báze uvolní z adiční soli s kyselinou odvozené od této sloučeniny obecného vzorce I a převede se na jinou adiční sůl s kyselinou.

2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce III hydrolyzuje kyselinou, například vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové.

2·

3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce III hydrolyzuje bazickou látkou, například vodným roztokem hydroxidu sodného.