CS251532B1 - Kmeň mikroorganizmu Aspergilus tamarii CCM F-781 - Google Patents

Description

2 5 1 5 3 2

Vynález sa 'tyká nového kmeňa Aspergil-lus tamarii, ktorý produkuje kyselinu kó-jovú w zvýšenom výtažku.

Kmeň Aspergillus tamarii sa popisuje akoproducent kyseliny kójovej už dávnejšíe,avšak bez udania množstva produkovanejkyseliny [ Korzybski, T., Kofwszyk— Gimdi-fer, Z. Kurylowicz, W.: Antibtotics, PWN —— Polish Scientific Publishers, Warszawa,(1967)].

Podlá literárnej rešerše kmeň Aspergil-lus tamarii sa na priemyslovú výrobu kyse-liny kójovej nepoužívá. Katalogy kultur húb(Cataloque of Cultures, Univerzita KarlovaPraha 1976, č. 664 Aspergillus tamarii Kita;ATCC Cataloque of Fungij Yeasts, 16-thedition, 1984 čísla 1005, 10 836, 12 699,16 865, 20 054, 26 950, 26 951 Aspergillus ta-marii Kita) uvádzajú druh Aspergillus ta-marii bez vlastnosti produkovat kyselinukójovú. U nás nie sú k dispozícii vysoko-iprodukčné kmene húb, ktoré sú schopnévytvárať kyselinu kójovú.

Uvedené nedostatky doteraz známýchkmeňov odstraňuje vynález, ktorým je novýkmeň mikroorganizmu Aspergillus tamariimutant VIII uložený v Ceskoslovemskejzbierke milkroorganizmov Univerzity J. E.Purkyně v Brně, Třída Obránců míru 10,pod označením CCM F-781. Nový kmeň sazískal tak, že na shspenziu spor Aspergillustamarii o kohcentrácii 106/ml v 10 %-nomdimetylsulfoxide sa pósobilo χ-lúčmi po do-bu 25 až 35 minut, susipeinzia spor sa roz-liala na sladinkový agar a nechala vysporu-lovať při teplote 25 až 30 °C, z 'vysporulo-vanej kultúry sa připravila suspenzia sipór,ktorá sa riedila 1:1 000, rozliala na sladin-kový agar, kde vyrašili kolonie kulturymikroorganizmu, ktoré sa hodnotili fermen-tačnými skúškami z hradiska produkcie ky-seliny kójovej a z nich bol vybraný kmeňAspergillus tamarii mutant VIII.

Hlavnou výhodou nového kmeňa je zvý-šená produktivita, ktorá dosahuje hodnoty42 ikg kyseliny kójovej na 100 kg cukru.Povodný kmeň Aspergillus tamarii mal ma-ximálnu produkciu kyseliny kójovej 15 až18 Ikg na 100 kg cukru. Tento kmeň na Sa-bouraudovej pode za 3 dni vytvára kolonie opriemere 2,6 cm, vrchná strana je biela sosilnou sporuláciou v střede kolonie. Spodnástrana je slabo oranžová. Spory sú tmavo-hnědě] farby 7 až 8 μΐη v priemere, vezlku-lum výrazné gufaté v priemere 44 až 48 ,αηι.

Nový kmeň Aspergillus tamarii mbtantVIII dobře rastie na Sabouraudovej agaro-vej pode. Za 3 dini vytvára kolonie o· prie-mere 5,3 cm bez sporulácie, vrchná stranaje biela s vysokým vzdušným mycéliom, spod-ná strana je oranžová a hladká. Na sladinko-vom agare vytvára za 3 dni kolónie o prie-mere 4 cm bez sporulácie, spodná strana jeradiálně zvrásinená a oranžovobnedej farby, vrchná strana je biela. Sporulácia na obochpódach sa objevuje po 6 dňoch kultivácie.Spóry sú tmavohnedej fariby, 7 až 8 (um vpriemere, vezilkulum výrazné gufaté o prie-mere 56 až 60 /tm. Životnost spór je dlho-dohá pri skladovaní v suspenzíi s aktívnymuhlím v parafínoVom oleji, alebo v lyoifili-zovanom stave aj niekolko rokov. Příklad 1

Na suspenziu spór Aspergillus tamarii oIkonceintrácii ICF/níl v 10 %-nom dimetylsul-foxide sa pósdbí χ-lúčmi zo zdroja 60CO podobu 25 až 35 minut. Suspenzia spór sa po-tom rozleje na sladinkový agar a nechá vy-sporulovaf v termostate pri teplote 25 až30 °C. Z vysporulovanej kultúry sa připravísuspenzia spór v 0,9 %-nom chloride sod-nom, ktorá sa riedi 1 : 1 000 a rozleje nasladinlkový agar, kde za 3 až 4 dni vyrastúkolónie kultúry mikroorganizmu, ktoré sahodnotia fermentačnými skúškami na pro-dulkciu kyseliny kójovej a z nich sa vybralkmeň Aspergillus tamarii mutant VIII. Příklad 2 ( Připraví sa kultivačné médium, na 1 litersa použije 100 g glulkózy, 0,16 g dihydro-fosforečnanu draselného, 0,07 g chloridusodného, 0,02 g tetrahydrátu síranu man-ganatého, 1 g močoviny, 1 g chloridu amon-ného, 0,01 g heptahydrátu síranu zinočna-tého a 0,01 g heptahydrátu síranu železna-tého. Sterilně kultivačné médium o pH 5,0až 6,5 v 5 1 fermentačnom tanku sa zaoičku-je s 10 % obj. 48 hodinového· vegetatívnehoinokula Aspergillus tamarii mutant VIII akultivuje sa pri teplote 30 °C, pri obvodo-vej rychlosti 3,1 ms-1 a vzdušnění 3 VVMpo dobu 5 až 6 dní. V priebehu fermentáciesa vytvára v médiu 42 g/1 'kyseliny kójovej. P r i k il a d- 3

Izolovaný kmeň má tú vlastnost, že jehomycélium ,po oddělení od fermentačnej te-kutiny je možné použit niekolkokrát za se-bou na fermentačnú přípravu kyseliny kó-jovej. Připraví sa roztok 130 g glukózy v1 1 0,1 M fosfátového tlmiivého roztoku oρΉ 6,0. Sterilný roztok v 5 1 fermentačnomtanku sa zmiešal s mycéliom, ktoré sa zís-kalo separováním od fermentačného médiapo skončenej fermentácii popísanej v pří-klade 2. Podmienky fermentácie sú takéisté ako v příklade 2. Po 5 až 6' dňoch kul-tivácie sa v médiu vytvára 19 až 21 g/1 ky-seliny kójovej.

Kmeň Aspergillus tamarii mutant VIIImóže sa využiť pri fermentačnej výrotbe ky-seliny kójovej, ktorá slúži ako surovina přechemický, potravinářsky a farmaceutickýpriemyeel.

Claims (1)

1. I 251532 5 PŘEĎMET VYNALEZU Kmen mikroorganizmu Aspergillus tama-rii CCM F-781 produkujúci kyselinu kójovú.