CS234909B1 - Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 - Google Patents
Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 Download PDFInfo
- Publication number
- CS234909B1 CS234909B1 CS521483A CS521483A CS234909B1 CS 234909 B1 CS234909 B1 CS 234909B1 CS 521483 A CS521483 A CS 521483A CS 521483 A CS521483 A CS 521483A CS 234909 B1 CS234909 B1 CS 234909B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- brevibacterium
- ccm
- bacterial strain
- strain
- mutant
- Prior art date
Links
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 4
- 241000186312 Brevibacterium sp. Species 0.000 title abstract description 14
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 9
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 6
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 6
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 5
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 5
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 3
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 2
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 2
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UKIDUMMXBQMTKO-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1-nitro-2-nitrosoguanidine Chemical compound [O-][N+](=O)N(C)C(=N)NN=O UKIDUMMXBQMTKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYCVOAMEZSSAA-UHFFFAOYSA-N NC(=O)N.S.N1C=CC2=CC=CC=C12 Chemical compound NC(=O)N.S.N1C=CC2=CC=CC=C12 FYYCVOAMEZSSAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Vynález se týtká průmyslového bakteriálního
kmene Brevibacterium sp. CCM 3633,
uložený v Československé sbírce mikroorganismů
University J. E. Purkyně, tř. Obránců
míru 10, Brno, pod označením CCM číslo
3633.
Vyznačuje se zvýšenou produkcí esenciální
aminokyseliny proti výchozímu rodičovskému
kmeni Brevibacterium sp.
Description
Vynález se týká nového průmyslového bakteriálního kmene Brevibacterium sp. CCM 3633, produkujícího L-lysin ve zvýšeném výtěžku. Kultivace probíhá v tekutých fermentačních médiích, která obsahují jako hlavní zdroj uhlílku pro růst a produkci esenciální aminokyseliny, sacharidy (sacharózu nebo jiné cukry) a jako zdroj dusíku kukuřičný extrakt, hydrolyzát arašídové mouky a další růstové faktory včetně minerálních solí.
Podstatou vynálezu je nový průmyslový kmen Brevibacterium sp. M27/P34 produkující L-lysin, uložený v Československé sbírce mikroorganismů University j. E. Purkyně, tř. Obránců míru 10, Brno, pod označením CCM číslo 3633.
Způsob přípravy nového produkčního kmene Brevibacterium sp. je založen na aplikaci mutagenního faktoru N-methyl-N‘-nitro-N-nitrosoguanidinu, který indukuje nové mutantní kmeny charakterizované jiným typem pigmentace. Získaní chromogenní mutanti se dále vyznačují zvýšenou produkcí esenciální aminokyseliny proti výchozímu rodičovskému kmeni Brevibacterium sp.
Tímto způsobem byl připraven chromogenní mutant s růžovou pigmentací. Jako výchozí materiál pro mutagenesi byl použít kmen Brevibacterium sp. M27 hom_AECr světle žluté pigmentace, produkující v průměru 30,5 g/1 L-lysinu po 96hod. kultivaci.
Dále je uvedena'morfologická a fyziologická charakteristika kmene podle vynálezu označeného jako Brevibacterium sp. M 27/ /P34.
Substrát glukóza laktóza sacharóza indol sirovodík močovina red. NOs citrát manit pohyblivost
Morfologie kmene:
a) kolonie na kompletní agarové půdě po 72 hod. kultivace při 29 °C tvar okrouhlý okraje mírně vroubkované povrch matný profil konvexní s mírně výrazným » středem barva růžová velikost 2 až 3 mm « bj mikroskopicky tyčinky silné krátké i delší, časté uspořádání ve dvojicích velikost:
šířka 1,0 až 1,2 μ délka 2,0 až 3,6 μ barvení podle Grama positivní
Genetická charakteristika:
kmen je dependentní na homoserin a resistentní k AEC.
U rodičovského kmene Brevibacterium. sp.
M27 a u mutantního kmene se změněnou pigmentovou charakteristikou bylo provedeno testování utilizace některých zdrojů C a N a stanoveny další jejich biochemické vlastnosti.
Kontrola
M27 +
+ +
+
Testovaný, produkční ,mutantní kmen M27/P34 CCM 3633
Z tabulky vyplývá, že základní biochemická charakteristika mutantního kmene a rodičovského kmene Brevibacterium sp. M27 je totožná.
Postup získání mutantních kmenů
Za účelem získání mutantních kmenů Brevibacterium sp. M27 se změněnou pigmentací a zvýšenou produkcí esenciální aminokyseliny bylo pro šlechtění rodičovského kmene použito mutačního procesu. Jako mutagen byla zvolena účinná chemická látka N-methyl-N‘-nitroso-N-nitroguanidin (Kooh-Light, Englandj.
Suspenze bakterií z exponenciální fáze růstu byla připravena kultivaci v tekuté kompletní půdě po dobu 24 hod. při 29 °C. Po promytí a resuspendování buněk v 0,2 M tris-maleinovém pufru o pH 6,0 byl stanoven výchozí počet buněk vyočkováním různých ředění kultury na sérii Petriho misek s kompletní agarovou půdou. K odměřené části suspenze byl přidán mutagen rozpuštěný v pufru v takovém množství, aby konečná koncentrace byla 1 mg/mL. Reakční směs byla inkubována ve vodní lázni při 29 °C. Zastavení působení mutagenu bylo provedeno přidáním desetinásobného množství 4 °C chladného tris-maleinového pufru a zcentrifugováiním. Bylo zvoleno několik dob působení mutagenu, aby přežití buněk bylo v rozmezí od 10 do 0,1 ·%. Po působení mutagenu byla suspenze vyočkována na kompletní agarovou půdu a inkubována 72 hodin při 29 °C. Potom byly izolovány a dále hodnoceny kolonie se změněnou pigmentací.
Fermentační hodnocení chromogenního mutanta Brevibacterium sp. M27 bylo prováděno na tekutých živných půdách v baňkách v laboratorním měřítku na rotační třepačce při teplotě 29 °C po dobu 96 hod. kultivace.
Způsob fermentace a produkce lysinu mutantním kmenem uvádí následující příklad. Příklad
Kulturou produkčního mutanta Brevibacterium sp. M27/P34 se zaočkuje 50 ml inokulačního média ve varné baňce o obsahu 500 ml. Složení média: sacharóza těch. 20 gramů, octan sodný kryst. 40 g, kukuřičný extrakt (60 % hmot. suš. j 30 g, voda dest. ad 1000 ml. Zaočkovaná kultura se kultivuje na rotační třepačce (240 ot. min-1) při 29 °C po dobu 18 až 24 hod. Vyrostlou kulturou v množství 10 % objemu je zaočkováno 20 ml fermentačního média (ve varné baňce o obsahu 500 ml) následujícího složení: sacharóza těch. 180 g, hydrolysát arašídové mouky 200 ml, cornsteep (60 % suš.) 10 g, hydrogenfosforečnan draselný 1 g, síran hořečnatý kryst. 0,1 g, uhličitan vápenatý mletý 30 g, voda dest. ad 1000 ml, pH fermentačního média po sterilizaci 6,8 až 7,0. Kultivace se provádí na rotační třepačce při 29 °C po dobu 96 hod. V průběhu fermentace se upravuje pH 10% roztokem amoniaku na hodnotu 7,0. Produkce lysinu u chromogenního mutanta Brevibacterium sp. M27/P34 činí 52,3 g lysinu/1 fermentačního média/96 hod. fermentace.
Claims (1)
- pRedmEPrůmyslový bakteriální kmen BrevihacteVYNALEZU ím sp. CCM 3633 produkující L-lysin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS521483A CS234909B1 (cs) | 1983-07-11 | 1983-07-11 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS521483A CS234909B1 (cs) | 1983-07-11 | 1983-07-11 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS234909B1 true CS234909B1 (cs) | 1985-04-16 |
Family
ID=5396601
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS521483A CS234909B1 (cs) | 1983-07-11 | 1983-07-11 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS234909B1 (cs) |
-
1983
- 1983-07-11 CS CS521483A patent/CS234909B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Haynes et al. | Pseudomonas aureofaciens kluyver and phenazine α-carboxylic acid, its characteristic pigment | |
| CZ280901B6 (cs) | Způsob kultivace bakterií | |
| KR102083165B1 (ko) | 베타-1,3-글루칸 생산능을 갖는 신규의 유글레나 속 균주 및 이를 이용한 베타-1,3-글루칸을 함유하는 유글레나 균체의 제조방법 | |
| RO119235B1 (ro) | Procedeu de preparare a derivaţilor de (s)-hidroxi-fenil-alchenil-chinolină prin reducere microbiană şi cultură de microbacterium pentru realizarea acestuia | |
| IL24529A (en) | Process for preparing cephalosporin derivatives | |
| Noparatnaraporn et al. | Selection of Rhodobacter sphaeroides P47 as a useful source of single cell protein | |
| US4492756A (en) | Microorganisms of the genus Hyphomicrobium and process for degrading compounds wich contain methyl groups in aqueous solutions | |
| US3843442A (en) | Immobilized glucose isomerase | |
| SU521849A3 (ru) | Способ получени цефалоспорина с | |
| CS217986B2 (en) | Method of making the 2-keto-l-gulonic acid | |
| EP0543023A1 (en) | Process for producing astaxanthin by fermentation | |
| KR100277489B1 (ko) | 칸디다 속의 내염성 돌연변이주 및 이를 이용한 에리트리톨의 생산방법 | |
| CS234909B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 | |
| US5266484A (en) | Streptomyces spectabilis strains employed for producing streptovaricin C | |
| CS236206B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 | |
| CS265699B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 | |
| KR100303066B1 (ko) | 히알우론산을생성하는스트렙토코커스속미생물 | |
| US5210033A (en) | Process for preparing and selecting hyperproducing microorganism strains used for the process for producing streptovaricin C | |
| KR100424846B1 (ko) | 5'-이노신산 생산 미생물 및 그 생산방법 | |
| SU562205A3 (ru) | Способ получени алкалоидов спорыньи | |
| FI89077C (fi) | Foerfarande foer erhaollande av termostabila -amylaser genom odling av superproduktiva mikroorganismer vid hoeg temperatur | |
| KR970010566B1 (ko) | 5'-이노신산(5'-lnosinic Acid)을 생산하는 미생물 | |
| SU1705338A1 (ru) | Штамм дрожжей CaNDIDa ReQUINII - продуцент алкогольдегидрогеназы | |
| SUZUKI et al. | Microbiological studies of phytopathogenic bacteria part II. Comparative studies of oxidative fermentation by various species of the genus Erwinia | |
| Tauro et al. | L-Lysine production by Uestilaginales fungi |