CS265699B1 - Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 - Google Patents
Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 Download PDFInfo
- Publication number
- CS265699B1 CS265699B1 CS883057A CS305788A CS265699B1 CS 265699 B1 CS265699 B1 CS 265699B1 CS 883057 A CS883057 A CS 883057A CS 305788 A CS305788 A CS 305788A CS 265699 B1 CS265699 B1 CS 265699B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- brevibacterium
- bacterial strain
- ssm
- strain
- industrial bacterial
- Prior art date
Links
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 4
- 241000186312 Brevibacterium sp. Species 0.000 title description 12
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229960004295 valine Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 8
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 abstract description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 2
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 2
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N d-xylitol Chemical compound OC[C@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- VKTCMMONRNFKJD-BYPYZUCNSA-N (2r)-3-aminosulfanyl-2-(ethylamino)propanoic acid Chemical compound CCN[C@H](C(O)=O)CSN VKTCMMONRNFKJD-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHHYGMDHXYPJS-WCCKRBBISA-N (2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid;sodium Chemical compound [Na].OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N ROHHYGMDHXYPJS-WCCKRBBISA-N 0.000 description 1
- PLKYJWLKIDFVHM-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;urea Chemical compound NC(N)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O PLKYJWLKIDFVHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 2-nitrophenyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001406782 Rhamnosa Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešení se týká průmyslového bakteriálního kmene Brevlbacterlum sp. M27/ ZA46 produkujícího L-valin uloženého v Československá sbírce mikroorganismů univerzity J.E. Purkyně, tř. Obránců míru 10, Bmo, pod označením CCM 4013. Kmen se vyznačuje oproti výchozímu rodičovskému kmeni Brevlbacterlum sp. M27 produkcí esenciální aminokyseliny.
Description
Vynález se týká nového průmyslového bakteriálního kmene Brevibacterium sp. M27 produkujícího L-valin. Kultivace probíhá v tekutých fermentačních mediích, která obsahují jako hlavní zdroj uhlíku pro růst a produkci esenciální aminokyseliny sacharidy (sacharosu nebo jiné cukry) a jako zdroj dusíku kukuřičný extrakt, hydrolyxát arašídové mouky a další růstové faktory včetně minerálních solí.
Podstatou vynálezu je nový průmyslový kmen Brevibacterium sp. M27/A46 produkující L-valin, uložený v Československé sbírce mikroorganismů Univerzity J.E.Purkyně, tř. Obránců míru 10,
Brno, pod označením CCM číslo 4013.
Způsob přípravy nového produkčního kmene Brevibacterium sp. M27 je založen na aplikaci mutagenního faktoru N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidinu, který indukuje nové mutantní kmeny charakterizované auxotrofií. Některé ze získaných auxotrofních mutantů se vyznačují produkcí esenciální aminokyseliny.
Jako výchozí materiál pro mutagenezi byl použit kmen Brevibacterium sp. M27 auxotrofní na homoserin a rezistentní na S-amino-ethyl-L-cystein (AECr).
Dále je uvedena morfologická a fyziologická charakteristika kmene podle vynálezu označeného jako Brevibacterium sp. M27/A46.
- 2 265 699
Morfologie kmene;
a) kolonie na kompletní agarové půdě po 72 hod. kultivace při 29 °C:
tvar okrouhlý okraje rovné povrch lesklý profil konvexní s mírně vyvýšeným středem barva sytě žlutá velikost 2 3 mm
b) mikroskopicky:
tyčinky silné krátké, ojediněle delší, občasné uspořádání ve dvojicích velikost: šířka 1,0 <2 1,2 um délka 2,0 3,6 um barvení podle Grama pozitivní
Genetická charakteristika: kmen je dependentní na homoserin a cystin a rezistentní k AEC.
U rodičovského kmene Brevibacterium sp. M27 a u mutantního kmene bylo provedeno testování utilizace některých zdrojů C a N a stanoveny další jejich biochemické vlastností.
Substrát Kontrola Testovaný produkční mutantní kmen
M27 M27/A46 sirovodík manit lysin indol ornithin
Simmons citrát urea + +
ONPG
Voges-Proskauer inosit
Tween 80 fenylalanin arginin malonát sodný’
265 699
Substrát Kontrola Testovaný produkční mutantní kmen
M27 M27/A46
adonit | - | + |
celobiosa | + | + |
rhamnosa | + | + |
sacharosa | + | + |
• sorbit | - | - |
eskulin | - | - |
trehalosa | + | + |
dulcit | - | - |
glukosa | + | + |
bez substrátu | - | - |
Z tabulky vyplývá, že základní biochemická charakteristika mutantního kmene a rodičovského kmene Brevibacterium sp. M27 je totožná s výjimkou schopnosti zkvašování adonitu u mutantního kmene, zatímco rodičovský kmen má reakci negativní.
Postup získání mutantního kmene
Šlechtění rodičovského kmene Brevibacterium sp. M27 s cílem získat kmeny produkující esenciální aminokyseliny bylo prováděno chemickou mutagenezí N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidinem (Koch-Light, England).
Suspenze buněk z exponenciální fáze růstu byla připravena kultivací v tekuté kompletní půdě 24 hod. při 29 °C. Poian byla kultura promyta a resuspendována v Tris-maleinovém pufru pK 6
O tak, aby koncentrace buněk byla přibližně 10 buněk/ mL a přidán roztok mutagénu v témže pufru, aby jeho konečná koncentrace byla 0,5 mg/mL nebo 1 mg/mL. Reakční směs byla inkubována ve vodní lázni při 29 °C po dobu 30 nebo 20 min, aby přežití buněk se pohybovalo v rozmezí od 5 do 0,1 %. Po působení mutagénu kultura byla promyta, ředěna ve fyziologickém roztoku a vyočkována na kompletní pevnou půdu a inkubována při 29 °C po dobu 96 hod. Hodnocením růstu na pevné minimální půdě byly izolovány kolonie auxotrofních mutantů.
265 699
Fermentační hodnocení auxotrofních mutantů Brevibacterium sp. M27 bylo prováděno na tekutých živných půdách v baňkách v laboratorním měřítku na rotační třepačce při teplotě 29 °C po dobu 96 hod.
Způsob fermentace a produkce valinu mutantním kmenem uvádí následující příklad.
Příklad
Inokulum bylo připraveno kultivací produkčního mutantního kmene Brevibacterium sp. M27/A46 v 50 mL inokulačního média ve varné baňce o obsahu 500 mL. Složení inokulačního média: sacharosa těch. 20 g, octan sodný kryst. 40 g, kukuřičný extrakt (60 % hm. suš.) 30 g, voda destilovaná ad 1000 mL. Kultivace byla prováděna na rotační třepačce (240 ot. min-1·) při 29 °C po dobu 18 45 24 hod. Narostlým inokulem v množství 10 % objemu bylo zaočkováno 20 mL fermentačního média (ve varné baňce o obsahu 500 mL) následujícího složení: sacharosa těch. 120 g, hydrolyzát arašídové mouky 120 mL, cornsteep 5 g, hydrofosforečnan draselný 1 g, síran hořečnatý kryst. 0,1 g, uhličitan vápenatý mikromletý 20 g, voda destilovaná ad 1000 mL, pH fermentačního média po sterilizaci 6,8 £ 7,0. Kultivace byla prováděna na rotační třepačce při 29 °C po dobu 96 hod. V průběhu fermentace bylo upravováno pH na hodnotu 7,0 10 % roztokem amoniaku. Produkce valinu i mutantního kmene Brevibacterium sp. M27/A46 činí 6,5 g L-valinu/L fermentačního média/96 hod. fermentace.
Claims (1)
- Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium ap.CCM 4013, vyznačující ae tím, že produkuje L-valin.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS883057A CS265699B1 (cs) | 1988-05-05 | 1988-05-05 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS883057A CS265699B1 (cs) | 1988-05-05 | 1988-05-05 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS305788A1 CS305788A1 (en) | 1989-02-10 |
CS265699B1 true CS265699B1 (cs) | 1989-11-14 |
Family
ID=5369522
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS883057A CS265699B1 (cs) | 1988-05-05 | 1988-05-05 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS265699B1 (cs) |
-
1988
- 1988-05-05 CS CS883057A patent/CS265699B1/cs unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS305788A1 (en) | 1989-02-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
WO2017034343A1 (ko) | L-류신 생산능을 가지는 미생물 및 이를 이용한 l-류신의 제조방법 | |
MXPA00009174A (es) | Metodo para producir l-aminoacidos por fermentacion. | |
JP3966583B2 (ja) | 発酵法によるl−アミノ酸の製造法 | |
KR100198039B1 (ko) | 발효에 의한 l-글루탐산의 제조방법 | |
RO119235B1 (ro) | Procedeu de preparare a derivaţilor de (s)-hidroxi-fenil-alchenil-chinolină prin reducere microbiană şi cultură de microbacterium pentru realizarea acestuia | |
HU191069B (en) | Process for preparing optically pure d- or l-lactic acid | |
CS217986B2 (en) | Method of making the 2-keto-l-gulonic acid | |
KR100220018B1 (ko) | L-루이신을 생산하는 신규한 미생물 코리네박테리움 글루타미컴(Corynebacterium glutamicum) CH45 | |
CS265699B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 | |
EP0538050B1 (en) | Process for producing streptovaricin C | |
KR880002417B1 (ko) | 구아노신의 제조법 | |
US3884762A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids | |
Tzeng et al. | High productivity tank fermentation for gramicidin S synthetases | |
US5266484A (en) | Streptomyces spectabilis strains employed for producing streptovaricin C | |
JPS59113894A (ja) | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 | |
EP1426446A1 (en) | Microorganism for producing riboflavin and method for producing riboflavin using the same | |
CS234909B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 | |
SU1687616A1 (ru) | Штамм SтRертососсUS LастIS - продуцент антибиотика низина | |
CS236206B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 | |
KR0134131B1 (ko) | 세파로스포린 c를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 세파로스포린 c의 제조방법 | |
US5210033A (en) | Process for preparing and selecting hyperproducing microorganism strains used for the process for producing streptovaricin C | |
Matteuzzi et al. | Isoleucine production in bifidobacteria | |
KR100317902B1 (ko) | 글루탐산을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 글루탐산의제조방법 | |
JP4620231B2 (ja) | 発酵法によるl−アミノ酸の製造法 | |
KR960009066B1 (ko) | L-글루탐산을 제조하는 발효방법 |