JPS59113894A - 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規なＬ−グルタミン酸生産性微生物およびそ
れら微生物を用いる発酵法によるＬ−グルタミン酸の製
造法に関する。さらに詳しくは、本発明はコリネバクテ
リウム為またはブレビバクテリウム属に属し、２種以上
の抗生物質に耐性を有し、かつＬ−グルタミン酸を生産
する能力を有する微生物、あるいはコリネバクテリウム
属またはブレビバクテリウム属に属する微生物を親１株
とし、同属もしくは異属の菌株間でプロトプラスト融合
せしめて得られた融合株でかつＬ−グルタミン酸を生産
する能力を有する微生物、あるいはプロトプラスト融合
株で２種以上の抗生物質に耐性を示し、かつＬ−グルタ
ミン酸を生産する能力を有する微生物に関し、さらにこ
れらの微生物を栄養培地に培養し、培養物中にＬ−グル
タミン酸を生成蓄積せしめ該培養物からＬ−グルタミン
酸を採取することを特徴とする発酵法によるＬ−グルタ
ミン酸の製造法に関する。
れら微生物を用いる発酵法によるＬ−グルタミン酸の製
造法に関する。さらに詳しくは、本発明はコリネバクテ
リウム為またはブレビバクテリウム属に属し、２種以上
の抗生物質に耐性を有し、かつＬ−グルタミン酸を生産
する能力を有する微生物、あるいはコリネバクテリウム
属またはブレビバクテリウム属に属する微生物を親１株
とし、同属もしくは異属の菌株間でプロトプラスト融合
せしめて得られた融合株でかつＬ−グルタミン酸を生産
する能力を有する微生物、あるいはプロトプラスト融合
株で２種以上の抗生物質に耐性を示し、かつＬ−グルタ
ミン酸を生産する能力を有する微生物に関し、さらにこ
れらの微生物を栄養培地に培養し、培養物中にＬ−グル
タミン酸を生成蓄積せしめ該培養物からＬ−グルタミン
酸を採取することを特徴とする発酵法によるＬ−グルタ
ミン酸の製造法に関する。
その目的はＬ−グルタミン酸を工業的安価に製造するこ
とにある。従来、発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造
法に関しては、コリネバクテリウム属またはブレビバク
テリウム属の野生株あるいは種々の性質が付与された変
異株例えば種々のアミノ酸を生育に要求する株、薬剤例
えば抗生物質に耐性を有する株等を用いる方法が知られ
ている。
とにある。従来、発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造
法に関しては、コリネバクテリウム属またはブレビバク
テリウム属の野生株あるいは種々の性質が付与された変
異株例えば種々のアミノ酸を生育に要求する株、薬剤例
えば抗生物質に耐性を有する株等を用いる方法が知られ
ている。
Ｌ−グルタミン酸生産性の優れた菌株は常に求められて
おシ、種々研究を重ねた結果、コリネバクテリウム属ま
たはブレビバクテリウム属に属し、Ｌ−グルタミン酸生
産性を有し且つ２種以上の抗生物質に対し抵抗性を有す
る菌株のＬ−グルタミン酸生産性が優れていること、プ
ロトプラストを用いた細胞融合による組換え株の取得法
をオリ用してＬ−グルタミン酸高生産株を取得できるこ
とが見出された。仁の組換え株取得方法はＬ−グルタミ
ン酸の高生産性変異株の育成に際し、効率的に１復変異
株の取得を可能ならしめるものであり、親株をうまく選
定することによシ、双方の欠点を補ない長所を活かした
株を得ることが可能となる有効な方法である。
おシ、種々研究を重ねた結果、コリネバクテリウム属ま
たはブレビバクテリウム属に属し、Ｌ−グルタミン酸生
産性を有し且つ２種以上の抗生物質に対し抵抗性を有す
る菌株のＬ−グルタミン酸生産性が優れていること、プ
ロトプラストを用いた細胞融合による組換え株の取得法
をオリ用してＬ−グルタミン酸高生産株を取得できるこ
とが見出された。仁の組換え株取得方法はＬ−グルタミ
ン酸の高生産性変異株の育成に際し、効率的に１復変異
株の取得を可能ならしめるものであり、親株をうまく選
定することによシ、双方の欠点を補ない長所を活かした
株を得ることが可能となる有効な方法である。
以下に、本発明の詳細な説明する。
本発明の微生物は、異なる性質を有する親株の組合せの
プロトプラスト融合から生じたＬ−グルタミン酸生産菌
株およびプロトンラスト融合の手法または従来の変異処
理もしくは自然変異によって得た２種以上の抗生物質に
耐性を有するＬ−グルタミン酸生産菌株である。
プロトプラスト融合から生じたＬ−グルタミン酸生産菌
株およびプロトンラスト融合の手法または従来の変異処
理もしくは自然変異によって得た２種以上の抗生物質に
耐性を有するＬ−グルタミン酸生産菌株である。
２種以上の抗生物質に耐性を有するＬ−グルタミン酸生
産菌株としては、コリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属に属し、Ｌ−グルタミン酸生産能をすでに
有する菌株に２種以上の抗生物質に対する耐性を付与せ
しめた菌株、コリネバクテリウム属またはブレビバクテ
リウム属に属し、２種以上の抗生物質に対する耐性を有
する菌株に、Ｌ−グルタミン酸生産能を付与せしめた菌
株があけられる。
産菌株としては、コリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属に属し、Ｌ−グルタミン酸生産能をすでに
有する菌株に２種以上の抗生物質に対する耐性を付与せ
しめた菌株、コリネバクテリウム属またはブレビバクテ
リウム属に属し、２種以上の抗生物質に対する耐性を有
する菌株に、Ｌ−グルタミン酸生産能を付与せしめた菌
株があけられる。
本発明の変異株を誘導する際に用いられる親株は、従来
グルタミン酸生産菌として知られているコリネバクテリ
ウム属またはブレビバクテリウム属に属する微生物であ
シ、例えばコリネバクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ
１３０３２、コリネバクテリウム・アセトアシドフィラ
ムＡＴＣＣ１３８７０、ブレビバクテリウム・ラクトフ
ェルメンタムＡＴＣＣ１３８６９、ブレビバクテリウム
・フラバムＡＴＣＣ１４０６７などが例示される。
グルタミン酸生産菌として知られているコリネバクテリ
ウム属またはブレビバクテリウム属に属する微生物であ
シ、例えばコリネバクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ
１３０３２、コリネバクテリウム・アセトアシドフィラ
ムＡＴＣＣ１３８７０、ブレビバクテリウム・ラクトフ
ェルメンタムＡＴＣＣ１３８６９、ブレビバクテリウム
・フラバムＡＴＣＣ１４０６７などが例示される。
該抗生物質としては、アミノグリコシド系抗生物質例え
ばストレプトマイシン、ジヒドロストレプトマイシン、
カナマイシン、カナマイシン、ケンタマイシン、サガミ
シン、フォーティミシンなど、リファマイシン糸抗生物
質例えばりファンピシン、ペプチド系抗生物質例えＨバ
シトラシン、グラミシジン、ポリミキシン、コリスチン
、チオシリン、パシリシン、ポルシリン、プレボリン、
サーフアクチン、サーキュリン、チロシジン、ズブチリ
シンなどがあけられる。
ばストレプトマイシン、ジヒドロストレプトマイシン、
カナマイシン、カナマイシン、ケンタマイシン、サガミ
シン、フォーティミシンなど、リファマイシン糸抗生物
質例えばりファンピシン、ペプチド系抗生物質例えＨバ
シトラシン、グラミシジン、ポリミキシン、コリスチン
、チオシリン、パシリシン、ポルシリン、プレボリン、
サーフアクチン、サーキュリン、チロシジン、ズブチリ
シンなどがあけられる。
本発明に使用する微生物のうち、抗生物質に対する耐性
を有するＬ−グルタミン酸生産菌株の具体例として、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３３２（微工研
菌寄第６７９９号）（以下、Ｈ−３３３２という）、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３６０（微工研
菌寄第６８０３号）（以下、Ｈ−３３６０という）、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３３９（微工研
菌寄第６８０１号）（以下、Ｈ−３３３９という）、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３６２（微工研
菌寄第６８０５号）（以下、Ｈ−３３６２という）、ブ
レビバクテリウム・ラクトフェルメンタムＨ−３３３３
（微工研菌寄第６８００号）（以下、Ｈ−３３３３とい
う）およびブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム
Ｈ−３３６１（微工研菌寄第６８０４号）（以１、Ｈ−
３３６１という）があげられる。
を有するＬ−グルタミン酸生産菌株の具体例として、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３３２（微工研
菌寄第６７９９号）（以下、Ｈ−３３３２という）、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３６０（微工研
菌寄第６８０３号）（以下、Ｈ−３３６０という）、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３３９（微工研
菌寄第６８０１号）（以下、Ｈ−３３３９という）、コ
リネバクテリウム・グルタミクムＨ−３３６２（微工研
菌寄第６８０５号）（以下、Ｈ−３３６２という）、ブ
レビバクテリウム・ラクトフェルメンタムＨ−３３３３
（微工研菌寄第６８００号）（以下、Ｈ−３３３３とい
う）およびブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム
Ｈ−３３６１（微工研菌寄第６８０４号）（以１、Ｈ−
３３６１という）があげられる。
またプロトプラスト融合によって取得したＬ−グルタミ
ン酸生産菌株の具体例としては、Ｈ−３３３２とＨ−３
３３９との融合株コリネバクテリウム・グルタミクムＨ
−３３５９（微工研菌寄第６８０２号）（以下、Ｈ−３
３５９という）があげられる。
ン酸生産菌株の具体例としては、Ｈ−３３３２とＨ−３
３３９との融合株コリネバクテリウム・グルタミクムＨ
−３３５９（微工研菌寄第６８０２号）（以下、Ｈ−３
３５９という）があげられる。
本発明のプロトプラスト融合株の取得方法を以下に示す
。
。
２種の親株の培養細胞からプロトプラストを形成させる
ためには、例えば、栄養培地ＮＢ（粉末ブイヨン２Ｏｆ
、＃母エキス５ｆｅ純水１ｔに含みｐ Ｈ７，２に調整
した培地）に菌を接種し、振盪培養する。比濁計によっ
て６６０ｎｍにおける吸光度（ＯＤ）を沖」定し、対数
増殖期の初期（ＯＤ＝０．１−０．２ ）に培養液中０
．１〜０．８μ／ｄの濃度になるようにペニシリンＧを
添加する。培養を続けて、さらにＯＤが０．３〜０．５
に増加したところで細胞を集菌し、該菌を８８Ｍ培地〔
グルコース１０ ｆ、 ＮＨａＣｔ ４Ｆ、尿素ｚｙ％
ｇ母エキス１ ｆ、 ＫＨ２ＰＯ４１ｆ。
ためには、例えば、栄養培地ＮＢ（粉末ブイヨン２Ｏｆ
、＃母エキス５ｆｅ純水１ｔに含みｐ Ｈ７，２に調整
した培地）に菌を接種し、振盪培養する。比濁計によっ
て６６０ｎｍにおける吸光度（ＯＤ）を沖」定し、対数
増殖期の初期（ＯＤ＝０．１−０．２ ）に培養液中０
．１〜０．８μ／ｄの濃度になるようにペニシリンＧを
添加する。培養を続けて、さらにＯＤが０．３〜０．５
に増加したところで細胞を集菌し、該菌を８８Ｍ培地〔
グルコース１０ ｆ、 ＮＨａＣｔ ４Ｆ、尿素ｚｙ％
ｇ母エキス１ ｆ、 ＫＨ２ＰＯ４１ｆ。
Ｋ２ＨＰＯ４３ｔ、ＭｆＣ１２６ＨｚＯＯ，４ｆ、 Ｆ
ｅＳＯ４”７ＨｚＯ１０９、Ｍｎ３Ｏ４・４〜６Ｈ２０
０，２１１９、Ｚｎ５Ｏｉ ・７Ｈ２００，９ｔｆｂ１
、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２００，４ｔｑ、ＮａｚＢ４０ｔｌ
ＯＨ２００，０９ｑ、（ＮＨ４）、、ＭＯ７０２４・４
Ｈ２００，０４ｔ４． ビオチア３０ｐｆ、サイアミ
ン塩酸塩１ｑを純水１ｔに含み、ｐ Ｈ７，２に調整し
た培地、アミノ酸要求性の菌の培養には、要求アミノ酸
ｓ ｏ ａｔ／ａｔを追加〕で洗浄する。
ｅＳＯ４”７ＨｚＯ１０９、Ｍｎ３Ｏ４・４〜６Ｈ２０
０，２１１９、Ｚｎ５Ｏｉ ・７Ｈ２００，９ｔｆｂ１
、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２００，４ｔｑ、ＮａｚＢ４０ｔｌ
ＯＨ２００，０９ｑ、（ＮＨ４）、、ＭＯ７０２４・４
Ｈ２００，０４ｔ４． ビオチア３０ｐｆ、サイアミ
ン塩酸塩１ｑを純水１ｔに含み、ｐ Ｈ７，２に調整し
た培地、アミノ酸要求性の菌の培養には、要求アミノ酸
ｓ ｏ ａｔ／ａｔを追加〕で洗浄する。
次に該菌体をＰＦＭ培地（Ｓ Ｓ’Ｍ ２倍希釈液中に
シュクロース０．４Ｍ％ＭりＣｔ２・６Ｈ２００，０１
Ｍを含み、ｐ Ｈ７，０〜８．５にｐＩ整した培地）に
再懸濁する。この細胞懸濁液にリゾチーム（０，２〜２
町／−）を加え、３０〜３７℃で・１６時間処理する。
シュクロース０．４Ｍ％ＭりＣｔ２・６Ｈ２００，０１
Ｍを含み、ｐ Ｈ７，０〜８．５にｐＩ整した培地）に
再懸濁する。この細胞懸濁液にリゾチーム（０，２〜２
町／−）を加え、３０〜３７℃で・１６時間処理する。
プロトプラストの形成を光学顕微鏡で確認する。融合さ
せようとする雨林の、上記の如くして得た２種の親株の
プロトプラストの数をそれぞれ計測し１：１になるよう
に混合し、ついでＰＦＭ培地を用いて、プロトプラスト
を遠心分離によシ洗浄した後、該洗浄したプロトプラス
トをＰＦＭ培地０．１ ｍに再懸濁する。これに４０％
ポリエチレングリコ−４（ｐＥＧ）４、０００を含むＰ
ＦＭ培地２．５ ｄを加え静かに攪拌し、５分後０３−
を、例えばストレプトマイシン耐性株およびリファンピ
シン耐性株を用いる場合、ストレプトマイシン１００μ
ｆ／−およびリファンピシン０．０５μ２／−を含むＲ
ＣＧ寒天平板〔グルコース５ｆ、カザミノ酸５２、酵母
エキス２．５ ｆ 、 Ｋ２ＨＰＯ４３，５２、ＫＨｚ
ＰＯｉｌ、５２、ＭｙＣｔｚ・６ＨＣ４Ｏ，４１ｆ％Ｆ
ｅＳＯ４・７Ｈ２０１０ｆｎｙ％ＭｎＳＯ４−４〜６Ｈ
２０２ｔｙ、ＺｎＳＯ４，７Ｈ２゜０９■、ＣｕＳＯ４
・５Ｈ２０Ｑ、４ｔｙ、ＮａｚＢ４０ｙ １０Ｈ２０
０，０９■、（ＮＨ４）ｇＭｏ ７０２４ ・４Ｈ２０
０，０４■、ビオチン３０μ？、サイアミン塩酸塩２＄
９、コハク酸ナトリウム１３５ｆ、寒天１４２を純水ｌ
ｔ中に含み、ｐ Ｈ７，４に調整した培地〕に塗布する
。３０℃１２日間培養後に生じてきたストレプトマイシ
ンおよびリファンビシンニ重耐性株のコロニーを取得で
きる。
せようとする雨林の、上記の如くして得た２種の親株の
プロトプラストの数をそれぞれ計測し１：１になるよう
に混合し、ついでＰＦＭ培地を用いて、プロトプラスト
を遠心分離によシ洗浄した後、該洗浄したプロトプラス
トをＰＦＭ培地０．１ ｍに再懸濁する。これに４０％
ポリエチレングリコ−４（ｐＥＧ）４、０００を含むＰ
ＦＭ培地２．５ ｄを加え静かに攪拌し、５分後０３−
を、例えばストレプトマイシン耐性株およびリファンピ
シン耐性株を用いる場合、ストレプトマイシン１００μ
ｆ／−およびリファンピシン０．０５μ２／−を含むＲ
ＣＧ寒天平板〔グルコース５ｆ、カザミノ酸５２、酵母
エキス２．５ ｆ 、 Ｋ２ＨＰＯ４３，５２、ＫＨｚ
ＰＯｉｌ、５２、ＭｙＣｔｚ・６ＨＣ４Ｏ，４１ｆ％Ｆ
ｅＳＯ４・７Ｈ２０１０ｆｎｙ％ＭｎＳＯ４−４〜６Ｈ
２０２ｔｙ、ＺｎＳＯ４，７Ｈ２゜０９■、ＣｕＳＯ４
・５Ｈ２０Ｑ、４ｔｙ、ＮａｚＢ４０ｙ １０Ｈ２０
０，０９■、（ＮＨ４）ｇＭｏ ７０２４ ・４Ｈ２０
０，０４■、ビオチン３０μ？、サイアミン塩酸塩２＄
９、コハク酸ナトリウム１３５ｆ、寒天１４２を純水ｌ
ｔ中に含み、ｐ Ｈ７，４に調整した培地〕に塗布する
。３０℃１２日間培養後に生じてきたストレプトマイシ
ンおよびリファンビシンニ重耐性株のコロニーを取得で
きる。
次に本発明に使用できる具体的菌株の取得方法を示す。
（ＩＪ Ｈ−３３３２の取得方法
Ｌ−グルタミン酸生産能を有するコリネバクテリウムＨ
−３２８３（微工研菌寄第６５７６号）（以下、Ｈ−３
２８３と称す）をブイヨン培地で一夜培養したものを０
． Ｉ Ｎ ）リス・マレイン酸緩衝液（ｐＨ６，０）
中に１０＠Ｃｅ１１８／ｉｔ／の濃度に懸濁し、これに
Ｎ−メチル−Ｎ１−ニトロ−Ｎ−ニトロングアニジンを
最終濃度０．２１ｎｆ ／ ｍｌになるように添加して
、３０℃で３０分間靜装した後、ジヒドロストレプトマ
イシン２００μｆ／４を含むブイヨン寒天平板培地に塗
抹する。６日間３０℃で保温して生育するコロニーの中
から選択された変異株としてＨ−３３３２を得る。
−３２８３（微工研菌寄第６５７６号）（以下、Ｈ−３
２８３と称す）をブイヨン培地で一夜培養したものを０
． Ｉ Ｎ ）リス・マレイン酸緩衝液（ｐＨ６，０）
中に１０＠Ｃｅ１１８／ｉｔ／の濃度に懸濁し、これに
Ｎ−メチル−Ｎ１−ニトロ−Ｎ−ニトロングアニジンを
最終濃度０．２１ｎｆ ／ ｍｌになるように添加して
、３０℃で３０分間靜装した後、ジヒドロストレプトマ
イシン２００μｆ／４を含むブイヨン寒天平板培地に塗
抹する。６日間３０℃で保温して生育するコロニーの中
から選択された変異株としてＨ−３３３２を得る。
（２） Ｈ−３３６０およびＨ−３３６２の取得方法
（１）の取得方法において、Ｈ−３２８３およびジヒド
ロストレプトマイシンの代わりにＨ−３２８３から誘導
したＨ−３３３２およびバシトラシン５μＶ／−又はグ
ラミシジン１０μｆ／ｐａｌを用いる他は（１）の取得
方法と同様にしてＨ−３３６０５１Ｊ、Ｈ−３３６２を
得る。
（１）の取得方法において、Ｈ−３２８３およびジヒド
ロストレプトマイシンの代わりにＨ−３２８３から誘導
したＨ−３３３２およびバシトラシン５μＶ／−又はグ
ラミシジン１０μｆ／ｐａｌを用いる他は（１）の取得
方法と同様にしてＨ−３３６０５１Ｊ、Ｈ−３３６２を
得る。
（３）Ｈ−３３６１の取得方法
（１）の取得方法において、Ｈ−３２８３の代わりにＬ
−グルタミン酸生産能を有するブレビバクテリウム・ラ
クトフェルメンタムＨ−３２８４（微工研菌寄第６５７
７号）（以下、Ｈ−３２８４と称す）を用いた他は（１
）の取得方法と同様にしてＨ−３３６１を得る。
−グルタミン酸生産能を有するブレビバクテリウム・ラ
クトフェルメンタムＨ−３２８４（微工研菌寄第６５７
７号）（以下、Ｈ−３２８４と称す）を用いた他は（１
）の取得方法と同様にしてＨ−３３６１を得る。
（４）Ｈ−３３３３の取得方法
（１）の取得方法において、Ｈ−３２８３およびジヒド
ロストレプトマイシンの代ゎシにＨ−３２８４から誘導
したＨ −３３６１およびリファンピシンを用いた他は
（１）の取得方法と同様にしてＨ−３３３３を得る。
ロストレプトマイシンの代ゎシにＨ−３２８４から誘導
したＨ −３３６１およびリファンピシンを用いた他は
（１）の取得方法と同様にしてＨ−３３３３を得る。
第１衣にＨ−３２８３、Ｈ−３３３２、Ｈ〜３３６２、
Ｈ−３２８４、Ｈ−３３６１および）（−３３３３の薬
剤に対する耐性を示す。
Ｈ−３２８４、Ｈ−３３６１および）（−３３３３の薬
剤に対する耐性を示す。
第１表
注）数値の表示は無添加時の生育を１００とする相対表
示 （５）Ｈ−３３５９の取得方法 Ｈ−３３３２（６アザウラシル耐性、ジヒドロストレプ
トマイシン耐性）と、コリネバクテリウム・グルタミク
ムＨ−２８７４（微工研菌寄第５７４１号、ＮＲＲＬ−
Ｂ−１２３０４）（オレイン酸喪求性温度感受性株）か
ら誘導したＨ−３３，３，９（オレイン酸要求性温度感
受性、リファンピシン耐性）を用いて、それぞれプロト
プラストを調製し、前述の如くにプロトプラスト融合を
行ない、リファンピシンおよびジヒドロストレプトマイ
シンの二重耐性を有する融合株を多数取得した。なおそ
れぞれの親株についてリファンピシンおよびジヒドロス
トレプトマイシンに対する自然二重耐性株の出現率はそ
れぞれ１．１Ｘ１０−”、３．９Ｘ１０−”であり、一
方プロトプラスト融合による二重耐性株の出現頻度は２
．５ Ｘ １０−’であるので、プロトゲラスト融合に
よれば自然変異よりも２０倍以上耐性獲得率が病いこと
からも、融合によって二重耐性を獲得しているものが大
部分占めていることがわかる。
示 （５）Ｈ−３３５９の取得方法 Ｈ−３３３２（６アザウラシル耐性、ジヒドロストレプ
トマイシン耐性）と、コリネバクテリウム・グルタミク
ムＨ−２８７４（微工研菌寄第５７４１号、ＮＲＲＬ−
Ｂ−１２３０４）（オレイン酸喪求性温度感受性株）か
ら誘導したＨ−３３，３，９（オレイン酸要求性温度感
受性、リファンピシン耐性）を用いて、それぞれプロト
プラストを調製し、前述の如くにプロトプラスト融合を
行ない、リファンピシンおよびジヒドロストレプトマイ
シンの二重耐性を有する融合株を多数取得した。なおそ
れぞれの親株についてリファンピシンおよびジヒドロス
トレプトマイシンに対する自然二重耐性株の出現率はそ
れぞれ１．１Ｘ１０−”、３．９Ｘ１０−”であり、一
方プロトプラスト融合による二重耐性株の出現頻度は２
．５ Ｘ １０−’であるので、プロトゲラスト融合に
よれば自然変異よりも２０倍以上耐性獲得率が病いこと
からも、融合によって二重耐性を獲得しているものが大
部分占めていることがわかる。
それぞれについてＬ−グルタミン酸生産性および菌株の
特性を検討した。
特性を検討した。
その代表例として選んだ菌株Ｈ−３３５９について諸性
質を両方の親株と比較した結果を第２表に示した。この
表から明らかなようにＨ−３−３５９は６−アザウラシ
ル耐性、ジヒトロストレプトマイシン耐性はＨ−３３３
２、オレイン酸要求性温度感受性、リファンピシン耐性
についてはＨ−３３３９の性質を受継いでいる。
質を両方の親株と比較した結果を第２表に示した。この
表から明らかなようにＨ−３−３５９は６−アザウラシ
ル耐性、ジヒトロストレプトマイシン耐性はＨ−３３３
２、オレイン酸要求性温度感受性、リファンピシン耐性
についてはＨ−３３３９の性質を受継いでいる。
第２表
Ｒ：耐性 Ｓ：感受性
＋：要求性なし
ｔｅ：温度感受性要求性
本発明に使用する培地組成としては使用菌株の利用しう
る炭素源、無機物その他の必要な栄養素を程良く含有す
るものであれは合成培地、天然培地のいずれも使用でき
る。
る炭素源、無機物その他の必要な栄養素を程良く含有す
るものであれは合成培地、天然培地のいずれも使用でき
る。
すなわち炭素源としてはグルコース、フラクトース、ソ
ルビトール、グリセロール、蔗糖、でん粉、でん粉加水
分解物、糖蜜、果汁などの各種炭水化物、酢酸、フマー
ル酸、乳酸などの有機酸、さらにエタノール、メタノー
ルなどのアルコール類も使用できる。
ルビトール、グリセロール、蔗糖、でん粉、でん粉加水
分解物、糖蜜、果汁などの各種炭水化物、酢酸、フマー
ル酸、乳酸などの有機酸、さらにエタノール、メタノー
ルなどのアルコール類も使用できる。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
などの各種無機酸や有機酸のアンモニウム塩、尿素、ア
ミン類、その他窒素含有天然物、例えはペプトン、肉エ
キス、酵母エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイ
ン加水分解物、大豆粕酸加水分解物、各種発酵菌体およ
びその消化物などが使用できる。
アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
などの各種無機酸や有機酸のアンモニウム塩、尿素、ア
ミン類、その他窒素含有天然物、例えはペプトン、肉エ
キス、酵母エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイ
ン加水分解物、大豆粕酸加水分解物、各種発酵菌体およ
びその消化物などが使用できる。
さらに無機物としては、リン酸第−カリウム、リン酸第
二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、
塩化ナトリウム、価、酸第−鉄、硫酸マンガン、硫酸銅
、戻酸カルシウムなどを使用する。勿論本発明に使用す
る微生物が生育のために特定の栄養素を必要とする場合
には、その栄養素を適当量培地中に存在させなければな
らないが、これらの物質は窒素源として例示した天然物
に含まれて絵加される場合がある。
二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、
塩化ナトリウム、価、酸第−鉄、硫酸マンガン、硫酸銅
、戻酸カルシウムなどを使用する。勿論本発明に使用す
る微生物が生育のために特定の栄養素を必要とする場合
には、その栄養素を適当量培地中に存在させなければな
らないが、これらの物質は窒素源として例示した天然物
に含まれて絵加される場合がある。
また培地中に各種の添加物、例えはストレプトマイシン
、ペニシリンＧ１リフアンピシンなどの各種抗生物質、
α−トコフェノールなどの抗酸化剤、ポリオキシエチレ
ンソルビタンモノパルミテートなどの界面活性剤、ビオ
チ／、リジン、メチオニンなどのアミノ酸類、酢酸、オ
レイン酸、アデニンなどを添加することによりＬ−グル
タミン酸生産量を増加させつる場合がある。
、ペニシリンＧ１リフアンピシンなどの各種抗生物質、
α−トコフェノールなどの抗酸化剤、ポリオキシエチレ
ンソルビタンモノパルミテートなどの界面活性剤、ビオ
チ／、リジン、メチオニンなどのアミノ酸類、酢酸、オ
レイン酸、アデニンなどを添加することによりＬ−グル
タミン酸生産量を増加させつる場合がある。
培養は振盪培養あるいは深部通気麹、拌培養などの好気
的条件下で行なう。培養は通常２０〜４０℃で、ｐＨ３
〜９好ましくは中性付近で行われる。培地のｐＨｇ節は
、炭酸カルシウム、酸、あるいはアルカリ溶液、アンモ
ニア、ｐＨ緩衝剤などによって行なう。培養期間は通常
１〜４日間で培養液中にＬ−グルタミン酸が生成蓄積す
る。また連続発酵生産も可能である。
的条件下で行なう。培養は通常２０〜４０℃で、ｐＨ３
〜９好ましくは中性付近で行われる。培地のｐＨｇ節は
、炭酸カルシウム、酸、あるいはアルカリ溶液、アンモ
ニア、ｐＨ緩衝剤などによって行なう。培養期間は通常
１〜４日間で培養液中にＬ−グルタミン酸が生成蓄積す
る。また連続発酵生産も可能である。
培養終了後、培養液から菌体などの沈殿物を除去し、公
知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着法、塩析法などを
単独又は併用することにより、培養液からＬ−グルタミ
ン酸を回収することができる。
知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着法、塩析法などを
単独又は併用することにより、培養液からＬ−グルタミ
ン酸を回収することができる。
以下実施例をあけて本発明を具体的に示す。
実施例１゜
種菌としてＨ−３３３２を用いる。
グルコース５０ ｆ／ｌ、 （ＮＨ４）２８０４５９／
ｌ。
ｌ。
ＫＨ２ＰＯ４１？ ／ ｔ、 ＭｇＳＯ３・７Ｈ２００
，５ｆ／ｌ。
，５ｆ／ｌ。
サイアミン・ＨＣ’７２００μｆ脂、尿素５９／ｌ。
ＦｅＳＯ４７Ｈ２０１０’ｍ９／ｌ、 ＭｎＳＯ４・４
Ｈ２０１０Ｗ／１１ ＣｕＳＯ４・４Ｈ２０１１ｎＩＪ
／Ａ、ビオチア３ｐ９／ｌ、ｐＨ７，０の培地（生産培
地）を調製し、その２０ｄずつを２５０ＷＬｔ容三角フ
ラスコに入れ１２０℃１０分間加熱殺菌する。この培地
に上記の菌が増殖した種培養物（上記培地にビオチン１
００μｙ７を添加した種培地に培養したもの）を０．５
ｄずつ植菌し３０℃で振盪培養する。
Ｈ２０１０Ｗ／１１ ＣｕＳＯ４・４Ｈ２０１１ｎＩＪ
／Ａ、ビオチア３ｐ９／ｌ、ｐＨ７，０の培地（生産培
地）を調製し、その２０ｄずつを２５０ＷＬｔ容三角フ
ラスコに入れ１２０℃１０分間加熱殺菌する。この培地
に上記の菌が増殖した種培養物（上記培地にビオチン１
００μｙ７を添加した種培地に培養したもの）を０．５
ｄずつ植菌し３０℃で振盪培養する。
培養中、培養液のｐＨが６．５〜８ｏに保たれるように
殺菌した尿素液を添加しながら３２℃で３０時間培養す
る。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミン酸量は
２６．０ ｆ／ｌである。
殺菌した尿素液を添加しながら３２℃で３０時間培養す
る。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミン酸量は
２６．０ ｆ／ｌである。
このとき同時に培養した親株Ｈ−３２８３のＬ−グルタ
ミン酸量は２４．５Ｙ／ｌである。
ミン酸量は２４．５Ｙ／ｌである。
実施例２
実施例１において種菌としてＨ−３３３２の代わりにＨ
−３３３３、Ｈ−３３６２、およびＨ−３２８４を用い
る他は実施例１と同様にして行ない、第３表の結果を得
る。
−３３３３、Ｈ−３３６２、およびＨ−３２８４を用い
る他は実施例１と同様にして行ない、第３表の結果を得
る。
第３表
実施例３゜
廃糖＠（グルコース換算）６０り／ｌ、（ＮＨ４）ｚ
８０４５ ｔ／１．尿素５２／１％ＫＨ２ＰＯ４１ｆ／
Ｌ、 Ｋ２ ＨＰＯ４１ｔ／１％Ｍｎ５Ｏａ ・４Ｈ２
０２０ｍｙ／ｌ、 １） Ｈ６，５の培地（生産培地）
を調製し、１６ｄずつ２５０Ｍ！容三角フラスコに入れ
１２０℃、１０分間加熱殺菌する。この培地に第４表に
示した菌が増殖した種培養物（同上培地組成の培地に培
養したもの）３Ｗ／ずつを植菌し、さらに、ペニシリン
Ｇ溶液を最終濃度５Ｕ／ＩＥ／になるように添加して３
４℃振盪培養する。培養中、培養液のｐＨを６．５〜８
．０に保つように殺菌した１０％尿素液０．５−を添加
しながら３０時間培養する。かくして培養液中に蓄積し
たＬ−グルタミン酸量は第４表に示す通りである。
８０４５ ｔ／１．尿素５２／１％ＫＨ２ＰＯ４１ｆ／
Ｌ、 Ｋ２ ＨＰＯ４１ｔ／１％Ｍｎ５Ｏａ ・４Ｈ２
０２０ｍｙ／ｌ、 １） Ｈ６，５の培地（生産培地）
を調製し、１６ｄずつ２５０Ｍ！容三角フラスコに入れ
１２０℃、１０分間加熱殺菌する。この培地に第４表に
示した菌が増殖した種培養物（同上培地組成の培地に培
養したもの）３Ｗ／ずつを植菌し、さらに、ペニシリン
Ｇ溶液を最終濃度５Ｕ／ＩＥ／になるように添加して３
４℃振盪培養する。培養中、培養液のｐＨを６．５〜８
．０に保つように殺菌した１０％尿素液０．５−を添加
しながら３０時間培養する。かくして培養液中に蓄積し
たＬ−グルタミン酸量は第４表に示す通りである。
第４表
実施例４゜
実施例３で用いた種培地を用い第５表に示した菌株が増
殖した種培養物３ｔｘｌｆ、実施例３で用いた生産培地
にさらにポリオキシェチレンソルビクンモノパルミテー
トを０．０８ｆ／４添加した培地１６ＭＩＶに植菌し、
３４℃で培養する。
殖した種培養物３ｔｘｌｆ、実施例３で用いた生産培地
にさらにポリオキシェチレンソルビクンモノパルミテー
トを０．０８ｆ／４添加した培地１６ＭＩＶに植菌し、
３４℃で培養する。
培養中、培養液のｐＥを６．５〜８，０に保つように、
殺菌した１０％尿素０．５ ｍｌを添加しながら３０時
間培養する。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミ
ン酸の量は第５表に示す通りである。
殺菌した１０％尿素０．５ ｍｌを添加しながら３０時
間培養する。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミ
ン酸の量は第５表に示す通りである。
第５表
実施例５゜
クルコ−，Ｘ ５０ ｙ ／ｌ、 ヘプト：／１０ｆ／
ｌ。
ｌ。
酵母エキス５ｆ／／ｌ、肉エキス５２／１％硫酸アンモ
ニウム５９／ｌ、リン酸二水素カリウム１１／ｌ、リン
酸水素二カリウム１ｆ／ｌ、硫酸マグネシウム・７Ｈ２
００，５ｆ／ｌ、硫酸第一鉄・７ＨｘＯ２０１１５／ｌ
、硫酸マンガン・４ Ｈ２０２０Ｗ／−１−ビオチン５
０μｆ／ｌおよび尿素５り／ｌの組成を有する培地（ｐ
Ｈ７，２、殺菌前）よシなる種培地に第６表に示す菌株
を接種し、３０℃で１６時間培養する。この種培養液４
−を２５０ｍ１容三角フラスコ中のグルコース６０ ｆ
／ｌ、尿素５ ｆ／ｌ、硫安５ｆｌ／ｌ、Ｉ）ン酸二水
素カリウム１ｆ／ｌ、リン酸水素二カリウム１ｒ ／ｚ
、ａ酸マンガン・４ Ｈ２０２０”９／１． ビオチン
１ｏｏＩｌり／１．フェノールレッドｉｏｑ、’ｚおよ
び第６表に示すオレイン酸濃度の組成を有する培地（ｐ
Ｈ６，５、殺菌前）２０−に加え２８℃または３８℃で
培養する。
ニウム５９／ｌ、リン酸二水素カリウム１１／ｌ、リン
酸水素二カリウム１ｆ／ｌ、硫酸マグネシウム・７Ｈ２
００，５ｆ／ｌ、硫酸第一鉄・７ＨｘＯ２０１１５／ｌ
、硫酸マンガン・４ Ｈ２０２０Ｗ／−１−ビオチン５
０μｆ／ｌおよび尿素５り／ｌの組成を有する培地（ｐ
Ｈ７，２、殺菌前）よシなる種培地に第６表に示す菌株
を接種し、３０℃で１６時間培養する。この種培養液４
−を２５０ｍ１容三角フラスコ中のグルコース６０ ｆ
／ｌ、尿素５ ｆ／ｌ、硫安５ｆｌ／ｌ、Ｉ）ン酸二水
素カリウム１ｆ／ｌ、リン酸水素二カリウム１ｒ ／ｚ
、ａ酸マンガン・４ Ｈ２０２０”９／１． ビオチン
１ｏｏＩｌり／１．フェノールレッドｉｏｑ、’ｚおよ
び第６表に示すオレイン酸濃度の組成を有する培地（ｐ
Ｈ６，５、殺菌前）２０−に加え２８℃または３８℃で
培養する。
途中、培養液のｐＨがフェノールレッドの色町で判断し
てｐＨ７付近になった時に１０％尿素 □液を１
１Ｒｔずつ添加して３０時間培養する。その結果を第６
表に示す。
てｐＨ７付近になった時に１０％尿素 □液を１
１Ｒｔずつ添加して３０時間培養する。その結果を第６
表に示す。
Claims (8)
- （１）プロトプラスト融合によって得たＬ−グルタミン
酸生産能を有する微生物を培地に培養し、培養物中にＬ
−グルタミン酸を生成蓄積せしめ、該培養物からＬ−グ
ルタミン酸を採取することを特徴とするＬ−グルタミン
酸の製造法。 - （２）該微生物がコリネバクテリウム属およびブレビバ
クテリウム属に属する微生物から選はれる微生物である
特許請求範囲第１項記載の製造法。 - （３）該微生物がコリネバクテリウム・グルタミクムお
よびブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムに属す
る菌株の同一菌種または真菌種間のプロトプラスト融合
によって得られた微生物である特許請求の範囲第１また
は２項記載の製造法。 - （４） コリネバクテリウム属またはブレビバクテリウ
ム属に属し、アミノグリコシド系抗生物質、ペプチド系
抗生物質およびリファマイシン系抗生物質から選ばれる
２種以上の抗生物質に耐性を有するＬ−グルタミン酸生
産菌株を培地に培養し、培養物中にＬ−グルタミン酸を
生成蓄積せしめ、該培養物からＬ−グルタミン酸を採取
することを特徴とするＬ−グルタミン酸の製造法。 - （５）プロトプラスト融合によって得たＬ−グルタミン
酸生産能を有する微生物。 - （６）該微生物がコリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属に属する微生物である特許請求の範囲第５
項記載の微生物。 - （７）該微生物がコリネバクテリウム・グルタミクムお
よびブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムに属す
る菌株の同一菌種または真菌種間のプロトプラスト融合
によって得られた微生物であることを特徴とする特許請
求の範囲第５または６項記載の微生物。 - （８） コリネバクテリウム属またはブレビバクテリ
ウム属に属し、アミノグリコシド系抗生物質、ペプチド
系抗生物質およびリファマイシン系抗生物質から選ばれ
る２′！Ｍ以上の抗生物質に耐性を有し、Ｌ−グルタミ
ン酸生産能を有する微生物。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57221381A JPS59113894A (ja) | 1982-12-17 | 1982-12-17 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
| MX831017U MX7691E (es) | 1982-12-17 | 1983-12-16 | Procedimiento microbiologico para la preparacion de acido-l-glutamico |
| EP83307680A EP0113569A3 (en) | 1982-12-17 | 1983-12-16 | Process for producing l-glutamic acid by fermentation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57221381A JPS59113894A (ja) | 1982-12-17 | 1982-12-17 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59113894A true JPS59113894A (ja) | 1984-06-30 |
Family
ID=16765886
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57221381A Pending JPS59113894A (ja) | 1982-12-17 | 1982-12-17 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0113569A3 (ja) |
| JP (1) | JPS59113894A (ja) |
| MX (1) | MX7691E (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6274293A (ja) * | 1985-09-28 | 1987-04-06 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Ｌ−イソロイシンの製造法 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1215338A (en) * | 1983-02-25 | 1986-12-16 | Kiyoji Hattori | Process for producing l-glutamic acid by fermentation |
| BR9100618A (pt) * | 1990-02-15 | 1991-10-29 | Ajinomoto Kk | Processo para fermentacao concorrente de um l-amino-acido basico e um l-amino-acido acido |
| CN111925953A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-11-13 | 河南工业大学 | 一种谷氨酸生产菌株及其制备方法与应用 |
| CN113444655B (zh) * | 2020-03-26 | 2023-05-16 | 吉林中粮生化有限公司 | 谷氨酸棒状杆菌、高谷氨酸产量的温度敏感型菌株及其获得方法、应用以及谷氨酸发酵方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56109587A (en) * | 1980-02-06 | 1981-08-31 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Acquisition of genetically recombined strain |
| JPS58152485A (ja) * | 1982-03-05 | 1983-09-10 | Ajinomoto Co Inc | 微生物の育種方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57102193A (en) * | 1980-12-17 | 1982-06-25 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Preparation of l-glutamic acid |
| ES8308357A1 (es) * | 1981-08-10 | 1983-08-16 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Un procedimiento para la produccion de l-lisina. |
| JPS58158184A (ja) * | 1982-03-15 | 1983-09-20 | Ajinomoto Co Inc | 細菌のプロトプラスト融合法 |
-
1982
- 1982-12-17 JP JP57221381A patent/JPS59113894A/ja active Pending
-
1983
- 1983-12-16 EP EP83307680A patent/EP0113569A3/en not_active Withdrawn
- 1983-12-16 MX MX831017U patent/MX7691E/es unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56109587A (en) * | 1980-02-06 | 1981-08-31 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Acquisition of genetically recombined strain |
| JPS58152485A (ja) * | 1982-03-05 | 1983-09-10 | Ajinomoto Co Inc | 微生物の育種方法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6274293A (ja) * | 1985-09-28 | 1987-04-06 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Ｌ−イソロイシンの製造法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0113569A2 (en) | 1984-07-18 |
| EP0113569A3 (en) | 1986-05-14 |
| MX7691E (es) | 1990-08-24 |
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