CS236206B1 - Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 - Google Patents
Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 Download PDFInfo
- Publication number
- CS236206B1 CS236206B1 CS488083A CS488083A CS236206B1 CS 236206 B1 CS236206 B1 CS 236206B1 CS 488083 A CS488083 A CS 488083A CS 488083 A CS488083 A CS 488083A CS 236206 B1 CS236206 B1 CS 236206B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- brevibacterium
- ccm
- strain
- bacterial strain
- mutant
- Prior art date
Links
- 241000186312 Brevibacterium sp. Species 0.000 title claims abstract description 15
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 11
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 7
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 abstract 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 abstract 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 7
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 7
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 6
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 5
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 5
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 5
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 2
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 2
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYCVOAMEZSSAA-UHFFFAOYSA-N NC(=O)N.S.N1C=CC2=CC=CC=C12 Chemical compound NC(=O)N.S.N1C=CC2=CC=CC=C12 FYYCVOAMEZSSAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Vynález se týká průmyslového bakteriálního
kmene Brevibacterium sp. M27/P28
produkujícího L-Lysin, uloženého v Československé
sbírce mikroorganismů University
J.E. Purkyně tř. Obránců míru 10,
Brno, pod označením CCM číslo 3632.
Vyznačuje se zvýšenou produkcí esenciální
aminokyseliny prpťiífvýchozíma rodičovskému
kmeni Brevibacterium sp.
Description
Vynález se týká nového průmyslového bakteriálního kmene Brevibacterium sp, (LCrTMTroduku j i ci ho L-lysin ve zvýšeném výtěžku. Kultivace probíhá v tekutých fermentačních mediích, která obsahuji jako hlavni zdroj uhlíku pro růst a produkci esenciální aminokyseliny» sacharidy Zsacharosu nebo jiné cukry/ a jako zdroj dusíku kukuřičný extrakt» hydrolysát arašídové mouky a další růstové faktory včetně minerálních soli.
Podstatou vynálezu je nový průmyslový kmen Brevibacterium sp. M27/P 28 produkující L-lysin» uložený v Československé sbírce mikroorganismů University J. E. Purkyně, tř. Obránců míru 10» Brno» pod označením CCM čislo 3632.
Způsob přípravy nového produkčního kmene Brevibacterium sp. je založen na aplikaci mutagenního faktoru N-methyl-N*-nitro-N-nitrosoguanidinu, který indukuje nové mutantni kmeny charakterizované jiným typem pigmentace. Ziskant chromogenni mutanti se dále vyznačuji zvýšenou produkcí esenciální aminokyseliny proti výchozímu rodičovskému kmeni Brevibacterium sp.
Tímto způsobem byl připraven chromogenni mutant s okrovou pigmentaci. Jako výchozí materiál pro mutagenesi byl použit kmen Brevibacterium sp. M27 hora“AECr světle žluté pigmentace, produkující v průměru 30,5 g/l L-lysinu po 96 hod. kultivaci.
Dále je uvedena morfologická a fyziologická charakteristika kmene podle vynálezu označeného jako Brevibacterium sp. M27/P28.
— 2 —
263 206
Morfologie kmene: a/ kolonie na kompletní agarové půdě po 72 hod. kultivace při 29 °C:
tvar okrouhlý okraje rovné povrch lesklý profil konvexní s mírně vyvýšeným středem barva žlutookrová velí kost 2 Φ 3 mm b/ mikroskopicky:
tyčinky krátké silné, ojediněle delší velikost: šířka 1,0 1,2 yU délka 2,0 « 3,6 yU barvení podle Grama pqjtitívni
Genetická charakteristíka: kmen je dependentni na homoserin a resistentni k AEC.
U rodičovského kmene Brevibacterium sp. M27 a u mutantniho kmene se změněnou pigmentovou charakteristikou bylo provedeno testováni utilisace některých zdrojů C a N a stanoveny další jejich biochemické vlastnosti.
Substrát Kontrola Testovaný produkční mutantní kmen
M27 M27/P28 360glukosa + laktosa sacharosa + indol sirovodík močovina + red. NOj + citrát + manit pohyblivost
Z tabulky vyplývá, že základní biochemická charakteristika mutantniho kmene a rodičovského kmene Brevibacterium sp. M27 je totožná.
Postup získání mutantnich kmenů ZUb
Za účelem získáni mutantnich kmenu Brevibacterium sp. N27 se změněnou pigmentaci a zvýšenou produkci esenciální aminokyseliny bylo pro šlechtěni rodičovského kmene použito mutačního procesu. Jako mutagen byla zvolena účinná chemická látka N-methyl-N*-nitrosn-N-nitroguanidin /Kooh-Light, England/.
Suspense bakterii z exponenciální fáze růstu byla připravena kultivaci v tekuté kompletní půdě po dobu 24 hod. při 29 °C. Po promytí a resuspendováni buněk v 0,2 H tris-maleinovém pufru o pH 6,0 byl stanoven výchozí počet buněk vyočkovánim různých ředění kultury na sďrii Petriho misek s kompletní agaroyou půdou. K odměřené části suspense byl přidán mutagen rozpuštěný v pufru v takovém množství, aby konečná koncentrace byla 1 mg/ml. Reakční směs byla inkubována ve vodní lázni při 29 ^C. Zastaveni působeni mutagenu bylo provedeno přidáním desetinásobného množstvi 4 °C chladného tris-maleinového pufru a zcentrifugovánim. Bylo zvoleno několik dob působení mutagenu, aby přežití buněk bylo v rozmezí od 10 do 0,1 %. Po působeni mutagenu byla suspense vyočkována na kompletní agarovou půdu a inkubována 72 hod. při 29 °C. Potoiwbyly isolovány a dále hodnoceny kolonie se změněnou pigmentaci.
Fermentační hodnocení chromogenniho mutanta Brevibacterium sp. M27 bylo prováděno na tekutých živných půdách v baňkách v laboratorním měřítku na rotačni třepačce při teplotě 29 °C po dobu 96 hod. kultivace.
Způsob fermentace a produkce lysinu mutantnim kmenem uvádí následující příklad.
Příklad
Kulturou produkčního mutanta Brevibacterium sp. M27/P28 se zaočkuje 50 ml inokulačniho media ve varné baňce o obsahu S00 ml. Složení m/dia: sacharosa těch. 20 g , octan sodný kryst 40 g, kukuřičný exktrakt /60 % hm. suš./ 30 g, voda dest. ad 1000 ml. Zaočkovaná kultura se kultivuje na rotačni třepačce /240 ot.min^/ při 29 °C po dobu 18 až 24 hod. Vyrostlou kulturou v množstvi 10 % objemu je zaočkováno 20 ml fermentačni ho media /ve varné baňce o obsahu 500 ml/ nás ledujicího složeni:
- 4 283 206 sacharosa těch. 180 g, hydrolysát arašídové mouky 200 ml, cornsteep /60 X suš·/ 10 g, hydrogenfosforečnan draselný 1 g, síran hořečnatý kryst. 0,1 g, uhličitan vápenatý mletý 30 g, voda dest. ad 1000 mt, pH fermentačniho média po sterilizaci 6,8 až 7,0. Kultivace se provádí na rotační třepačce při 29 °C po dobu 96 hod. V průběhu fermentace se upravuje pH 10 X roztokem amoniaku na hodnotu 7,0. Produkce lysinu u chromogenniho mutanta Brevibacterium sp. H27/P28 čini 50,1 g Lysinu/l fermentačniho média/96 hod. fermentace.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU263 206Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632, produkující L—lysin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS488083A CS236206B1 (cs) | 1983-06-30 | 1983-06-30 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS488083A CS236206B1 (cs) | 1983-06-30 | 1983-06-30 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS236206B1 true CS236206B1 (cs) | 1985-05-15 |
Family
ID=5392533
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS488083A CS236206B1 (cs) | 1983-06-30 | 1983-06-30 | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS236206B1 (cs) |
-
1983
- 1983-06-30 CS CS488083A patent/CS236206B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3891504A (en) | Process for the manufacture of zeaxanthin | |
| DK153953B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af d-aminosyrer samt middel til brug ved fremgangsmaaden | |
| Raper et al. | Penicillin: V. Mycological aspects of penicillin production | |
| SU1435159A3 (ru) | Способ получени L-карнитина | |
| IL24529A (en) | Process for preparing cephalosporin derivatives | |
| US4492756A (en) | Microorganisms of the genus Hyphomicrobium and process for degrading compounds wich contain methyl groups in aqueous solutions | |
| NO331278B1 (no) | Anvendelse av en steril næringssammensetning avledet fra biomassen til en bakteriekultur som et vekstmedium for mikrooganismer, fremgangsmåte for dyrkning samt mikroorganismevekstsubstrat | |
| SU1719433A1 (ru) | Способ получени L-аланина | |
| AU654488B2 (en) | Proteinaceous compositions from filamentous microorganisms, the branching of which is regulated by calcium ion concentration | |
| CS217986B2 (en) | Method of making the 2-keto-l-gulonic acid | |
| SU521849A3 (ru) | Способ получени цефалоспорина с | |
| CS236206B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3632 | |
| US3884762A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids | |
| SU1687616A1 (ru) | Штамм SтRертососсUS LастIS - продуцент антибиотика низина | |
| CS234909B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 3633 | |
| SU1659480A1 (ru) | Штамм бактерий КLевSIеLLа рNеUмоNIае-продуцент рестриктазы Кр @ 378 1 | |
| CS265699B1 (cs) | Průmyslový bakteriální kmen Brevibacterium sp. CCM 4013 | |
| KR100303066B1 (ko) | 히알우론산을생성하는스트렙토코커스속미생물 | |
| SU1406156A1 (ru) | Штамм бактерий AeRococcUS VIRIDaNS дл получени клонов с оксидазной и редуктазной активностью | |
| Pedziwilk | A simple plating method for the isolation and enumeration of Propionibacteria | |
| SU562205A3 (ru) | Способ получени алкалоидов спорыньи | |
| US3833474A (en) | Asporogenic protease-producing strains of bacillus subtilis | |
| US3043750A (en) | Process for producing vitamins in the b group by means of propionic acid bacteria | |
| Duménil et al. | Production of vitamin B12 by gram-variable methanol-utilizing bacteria | |
| SU1254002A1 (ru) | Штамм мезофильных молочно-кислых палочек @ @ 1695,используемый в составе бактериальных заквасок при производстве советского сыра |