CS231161B2 - Method of separating of nucleid acid mixtures - Google Patents

Method of separating of nucleid acid mixtures Download PDF

Info

Publication number
CS231161B2
CS231161B2 CS781289A CS128978A CS231161B2 CS 231161 B2 CS231161 B2 CS 231161B2 CS 781289 A CS781289 A CS 781289A CS 128978 A CS128978 A CS 128978A CS 231161 B2 CS231161 B2 CS 231161B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
nucleic acids
anion
group
stranded
polymeric
Prior art date
Application number
CS781289A
Other languages
English (en)
Other versions
CS7801289A2 (en
Inventor
Werner Mueller
Hans Buenemann
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Priority to CS801880A priority Critical patent/CS242863B2/cs
Publication of CS7801289A2 publication Critical patent/CS7801289A2/cs
Publication of CS231161B2 publication Critical patent/CS231161B2/cs

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3255—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. heterocyclic or heteroaromatic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
    • B01D15/3804—Affinity chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3253—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure not containing any of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. aromatic structures
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D219/00—Heterocyclic compounds containing acridine or hydrogenated acridine ring systems
    • C07D219/04—Heterocyclic compounds containing acridine or hydrogenated acridine ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the ring system
    • C07D219/08—Nitrogen atoms
    • C07D219/10—Nitrogen atoms attached in position 9
    • C07D219/12—Amino-alkylamino radicals attached in position 9
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C07D221/06—Ring systems of three rings
    • C07D221/10—Aza-phenanthrenes
    • C07D221/12—Phenanthridines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F265/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers of unsaturated monocarboxylic acids or derivatives thereof as defined in group C08F20/00
    • C08F265/10—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers of unsaturated monocarboxylic acids or derivatives thereof as defined in group C08F20/00 on to polymers of amides or imides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
    • C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
    • C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
    • C12N15/101—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers by chromatography, e.g. electrophoresis, ion-exchange, reverse phase

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Graft Or Block Polymers (AREA)
  • Macromonomer-Based Addition Polymer (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

(54) Způsob dělení směsí nukleových kyselin
Vynález se týká způsobu dělení smmsí nukleových kyselin například jednovláknových a/nebo dvouvláknových nukleových kyselin, zejména směsí desoxyribonukleových kyselin afinitní chrommtooraaií, jehož podstata spočívá v tom, že se směs, která se má dělit, nanese na chrommtografický sloupec s absorpčním činidlem, které obsahuje polymerní nosič, na který je přímo nebo přes polymerní nískomo• lekulární skupinu, s mooekkuární hmoonnotí až do 4 OOO, působlci prostorový odstup, kovalentnl váženo bazicky a/nebo strukturně specifické komplexotvorné činidlo pro nukleové kyseliny, načež se eluuje za pouHtí elučních gradientů, elučnín činidlem, například vodným roztokem soli alkalického kovu nebo roztokem fosforennanového pufru.
flQ
Obr.
231 161
Vynález se týká způsobu dělení nukleových kyselin, například jednovláknových a/nebo dvouvláknových nukleových kyselin, zejména pak směsi desoxyribonukleových kyselin afinitní chromattoraaií.
Izolace jednotlivých genů nebo souboru stejrých genů v opakovaném uspořádání a genomu eukaryotických buněk je prakticky velice důležitá nejenom z čistě vědeckého hlediska, nýbrž i z hlediska genové technologie. Takové izolace byly možné jenom tehdy, jestliže se složení bází genu nebo skupiny genů svými spacery tj. skupinami s mooeloilární hmotností až asi do 4 000, působícími prostorový odstup, lišilo alespoň o 6 až 7 % od průměrného složení bází celkového genomu. Jako dělící způsob' se většinou používalo gradientově odstřelování na základě hustoty cesiových iontů s přísadami specifickými k bázím desoxyribonukleových kyselin /DNA/ jako například s přísadami iontů stříbra, rtuti nebo platily nebo aktinomrciolJ netropsi-nu nebo barviva Hooehst 33258, což je 2-/4-hydroxyfenny/-5[5-/N-mathyl--'-pPppΓrtinor///1,3/-benzotiiao0l2-yť]-/1,3/-benzodial. Tyto způsoby mmají jenom omezenou kapacitu, jsou drahé a náročné na čas.
Rozvoj mmateiálů pro afinitní chromategrrtií biopolymerů v uplynulých létech velice zjednoduší izolaci velkého počtu biopolymérů a vůbec poprvé umoonni jejich přípravu v čistém stavu. Při těchto způsobech se vychází obvykle z nosiče, který se po chemické aktivaci uvádí do reakce s látkou, která váže co nejsppcciičtěji biopolymer, který má být izolován. Na základě této specifičnosti lze v ideálním případě hledaný biopolymér selektivně absorbovat ze soOsí podobných sloučenin na chrommeo^afický m8aeeiál a posléze za vhodných podmínek desorbovat v čistém stavy (P. C^u^a^;recanas a C. B. Anfinsen, Arnn. Rev. Biochem. , 40 /1971/, 259 až 278).
Přes množtví příkladů úspěšného pouHtí této metody, nepoddalo · se dosud vyvinout pro četné biopolyméry žádný chromaografický mat^i^í^á:ll který by umožni podobné selektivní a programovatelné dělení rovněž pro smmsi nukleových kyselin. Vysoce rozlišující frakcionace sm^í^í nukleových kyselin v gramovém množív! je však předpokladem pro požadovanou izolaci jednotlivých genů nebo souborů stejných genů.
U dosavadních způsobů dělení nukleových kyselin o nízké mooekulové hmotnos!, například přenosových nukleových kyselin se dosahuje dělení v různé druhy na •adsorpčních činidlech, která ^ι^ηι^ί vlastnosti iontoměničů s lipofilními interakcemi (R. M. Kosaři a V. Shankar, Journal of C^hroras^a^t^o^^raphy 98 /1974// 449 až 475). Při tom se v poddíatě využívá m^oE^not,í interakcí nosiče s neobvyklými bázemi nukleových kyselin, které se vyskytují v různých přenosových ribonukleových kyselinách v různém mnossví.
Protože ribonukleové a iesoxyriboolkleové kyseliny o vyšší molekulové hmoonnosi neobsahují obvykle žádné neobvyklé báze, mohou metody jejich dělení spočívat pouze v následujících rozlišovacích znacích:
poměrů jedn^^^ových nukleových kyselin ku dvouvláknovým rozdílů ve složení bází rozdílů ve sledu bází rozdílů v ootekklároích hmoonostech rozdílů v terciárních strukturách
Všech těchto zpaků se skutečně využívá v dnešních obvykle používaných frakcionačních metodách (R. M. Koohsai, Chromategraf. Rev. 22 /1970/ 127 až 155).
U n^;júč^n^í^;^Íší mmtody, u frakcionaoe v solném gradientu na ultratiseřeiivce, vedou rozdíly ve složení bází, rozdíly ve sledu bází a rozdíly v oo0ekklárních hmoonootech k rozdílům ve vznosu pro jedno tlivý druh desoxyiribonukl€^ové kyseliny, jež lze ještě · zvětšit přídavkem látek specifických k bázím. Ostrooti dělení ubývá s ubývvaící moť^l^í^ut^irní hmtzicotí kapacity se vzrůstající molelojlární hmotností. Při absorpční chromatografií na hydoxyapatitu dochází ke frakcionací v podstatě podle poměrů jednovláknových nukleovýeh kyselin ke dvouvlátaDVým a jenom v malé míře podle rozdílů ve složení bází, zatímco nukleové kyseliny s větším obsahem guaninu a cytosinu jsou desorbovány již při o něco nižší konccnoraci solí než složky s větším obsahem adeninu a thyminu (W. Pakroppa a W. Muier, Proč. Nat. Acad. Sci. USA 71/3/ /1974/ 699 až 703).
Zcela analogicky lze frukcilnovat dvouvláknové nukleové kyseliny taká na specifických absorpčních činidlech bílklvinu-křeloβlLnu (například m^e^t^^^y.séi^ový albu^i^i^’-kjřem^e:Lna) na základě rozdílů ve složení bází, přičemž druhy desoxyribonukleových kyselin bohatší quaninem a cytosinem jsou opět vymývány nejdříve (J. D. ManOdH a A. D. Hárshey, Aioaytieal Biochemistry 1 /1960/ 66 až 77, N. Sunka a Ta'ai-Ying Cheng, J. Mol. Biol. 4 /1962/ 161 až 172).
Vlastní mechanismus působení těchto spíše náhodou objevených uěotraCních činidel není znám. Proto nemohla být malá dělící ostrost těchto ma<^e^r.álů i přes veškerou snahu dodnes podstatně zlepšena. Teprve v posledních létech byly při systematickém výzkumu četných látek, které tvoří kommlexy s nukleovými kyselinami, nalezeny látky, které se zdály být vhodné k cílené syntéze miat^e^iálů pro afinitní chroImUolraUii (W. a D. M. Crothers,
Eur. J. Bioehem. 54 /1975/ 267 až 277, W. Muller, H. Bunemann a N. Daatagupta, Eir, J. Břehem. 54 /1975/ 279 až 291 a W. tiUer a F. Gautter, Eur. J. Bioehem. 54 /1975/ 385 až 394).
Jaké výhody přináší p^užtí takovýchto dobře prostudovaných látek při dělení směsí nukleových kyselin,mohla být demonotrováno již na příkladech kumi-novaného pouužtí hydroxyapaaitu a ethidtmlbrooidu jako přísady specifické k bázím k dělení oupeгhelikálníeh a he^Likáloích deslxyrSbonuklelvých kyselin (W. Pukroaau, W. . Goebel a W. MH(^r, Α^^ΗηρΙ o 7 /1975/ 372 až 383) a hydroxytaaUitu v s deriváty feoylneutrální červeně jako kommplXotvorných činidel specifických k bázím při dělení dvouvláknlvýeh druhů desoxyrSbonuklelvých kyselin (W. Pakrlppa a W. МйПег, Proč. Nat. Acad. Sci. USA 71 /3/ /1974/ 699 až 703).
Rozlišovací schopnost těchto uvedených metod je srovnatelná s purativnm gradientem na základě hustoty chloridu cézného, tj. frakce deolxyrSbonukleové kyseliny s rozdíly v /G + CZ-obsahu/ přičemž G znamená guanin a C eytozin/, lze vzájemně rozdělit. Přes vysokou kapacitu má způsob tu nevýhodu, že směsi desoxtrSbonukleových kyselin se střední molekkltáгní hmoltюltí slo^0 převyšují 20 x 10^ se již dobře nezpracovávají a že l speciální htdroxytuautt, používaný jako ads^^pčn:! činidlo, musí být připravován.
Již delší dobu je známo, že směsi nukleovýeh kyselin lze démt za určitých podmínek v systému poltethtlenrltkol-ěextrun jednak na ribonukleové kyseliny /RNA/ a jedn^^koové desoxyrSbonuklelvé kyseliny /DNA/ a jednak ve dvouvlákenné deslxyrSblnukleové kyseliny /DNA/. Při tom dochází stále k obohacování dvouvláknové desoxyrSblnukleové kyseliny v lehčí polyethylenglykllové fázi, to znamená, že má vyšší rozdělovači koeficient než jednovláknové nukleové kyseliny. AAsooutní hodnoty rozdělovačích koeficientů lze sice měnot o 3 až 4 d^j^:ít^ky, avšak frakcilnuce v tomto systému se nedaří.
Úkol vynálezu spočívá v tom připravit taková adsorpční činidla, se kterými lze doGeiit při vysoké kapacitě dělení specifické k bázím a specifické ke struktuře a zejména 'dělení směsí jednovláknových a/nebo dvouvláknovýeh a/nebo vysoce stočených a/nebo lineárních nukleových kyselin, zejména směsí deooxyrSbonukleových Ik/selin /DNA/.
Pod pojmem afinitní specifičnost se rozumí především strukturní specifičnost'a speс^Шо^О k bázím.
Nyní se ukázalo, že uvedený úkol lze řešit pomocí adsorpčního činidla, které obsahuje polymerní nosič, na který je vázán přímo nebo přes další meeiskupiny, в výhodou kovalentně zbytek afinní k biopolymeru, popřípadě skupina specifická k bázím a/nebo skupina strukturně specifická.

Claims (1)

  1. Předmětem vynálezu je způsob dělení směsí nukleových kyselin například jednovláknových a/nebo dvouvláknových nukleových kyselin, zejména pak desoKyribonukleových kyselin efinitní chjrd^aaoorafiiL, jehož poddtata spočívá v tom, že se směs, která se má dělit, nanese na chroimaoé^afický sloupec s adsorpčním činidlem, které obsahuje polymerní nosič, na který je přímo nebo přes polymerní nízkoeoCekklární skupinu s mooelkAlární hmoonootí do 4 000, působící prostorový odstup, kovalentně vázáno bazicky a/nebo strukturně specifické komplexotvorné činidlo pro nukleové kyseliny, načež se eluuje za pomoci elučních gradientů elučním činidlem například vodným roztokem soli alkalického kovu nebo roztokem fosforečnanového pufru.
    Jako absorpční činidlo se používá polymerní nosič, například polybisakrylamid, na který je naroubována polymerní nízkceoCeUlární skupina, působící prostorový odstup, tvořená ^polymerem alespoň dvou rnonoomrů, z nichž jeden nese bázický a/nebo strukturně specifické íceplexotvoroé činidlo.
    Polymerní nosič nese jako bázický a/nebo strukturně specifické kcmpPexotvcroé·činidlo pro nukleové kyseliny zbytek barviva obecného vzorce I nebo II (II), kde znamenn;)!
    X skupinu CH- nebo atom dusíku
    Ϊ atom kyslíku, síry nebo skupinu NH- nebo skupinu obecného vzorce kde β' znamená nezávisle na sobě atomy vodíku nebo methylovou sku^n^ p
    R atom vodku nebo methylovou skupinu,
    R3 . atom vodku mmehylovou skupinu,
    R4 atom vodku nebo nmehylovou sUpinu a
    AW anion, například chloridový anion, ptrchlcгáCový anion nebo oxylátový anion nebo zbytek iottríalárnkhc barviva, obsahujícího plenární pdycyklický, například bicyklický, tricyklický nebo tetracyklický kondenzovaný kruhový systém, který popřípadě obsahuje heteroatomy jako dusík, kyslík nebo síru.
CS781289A 1977-03-02 1978-03-01 Method of separating of nucleid acid mixtures CS231161B2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS801880A CS242863B2 (cs) 1977-03-02 1978-03-01 Způsob výroby nových sloučenin typu akryloylaminobarviv

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2709094A DE2709094C2 (de) 1977-03-02 1977-03-02 Adsorbens für die affinitätsspezifische Trennung von Nukleinsäuren, Verfahren zu seiner Herstellung und seine Verwendung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS7801289A2 CS7801289A2 (en) 1984-02-13
CS231161B2 true CS231161B2 (en) 1984-10-15

Family

ID=6002605

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS781289A CS231169B2 (en) 1977-03-02 1978-03-01 Processing method of adsorbing agent for affinitive separation of nucleic acids
CS781289A CS231161B2 (en) 1977-03-02 1978-03-01 Method of separating of nucleid acid mixtures

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS781289A CS231169B2 (en) 1977-03-02 1978-03-01 Processing method of adsorbing agent for affinitive separation of nucleic acids

Country Status (14)

Country Link
US (2) US4335226A (cs)
JP (1) JPS53131294A (cs)
AT (1) AT364734B (cs)
CA (1) CA1122208A (cs)
CH (1) CH651222A5 (cs)
CS (2) CS231169B2 (cs)
DE (1) DE2709094C2 (cs)
DK (1) DK150536C (cs)
FR (1) FR2416721A1 (cs)
GB (2) GB1597891A (cs)
HU (1) HU182462B (cs)
IT (1) IT1095439B (cs)
NL (1) NL7802022A (cs)
SE (1) SE7802249L (cs)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2534486B1 (fr) * 1982-10-15 1987-11-20 Commissariat Energie Atomique Support particulaire greffe en surface, son procede de preparation et adsorbants pour chromatographie d'affinite incorporant ce support, ainsi que leur utilisation, notamment en biologie
US4665184A (en) * 1983-10-12 1987-05-12 California Institute Of Technology Bifunctional molecules having a DNA intercalator or DNA groove binder linked to ethylene diamine tetraacetic acid
DE3407814A1 (de) * 1984-03-02 1985-09-12 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen Phasentraeger fuer die verteilungschromatographie von makromolekuelen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5368737A (en) * 1984-03-29 1994-11-29 Daicel Chemical Industries, Ltd. Separation agent comprising acyl-or carbamoyl-substituted polysaccharide
US5229002A (en) * 1984-03-29 1993-07-20 Daicel Chemical Industries, Ltd. Separation agent comprising acyl- or carbamoyl-substituted polysaccharide
US5489387A (en) * 1984-03-29 1996-02-06 Daicel Chemical Industries, Ltd. Separation agent comprising acyl- or carbamoyl-substituted polysaccharide
US5562614A (en) * 1993-11-22 1996-10-08 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Programmable manifold system for automatic fluid delivery
JPS60226829A (ja) * 1984-03-29 1985-11-12 Daicel Chem Ind Ltd 多糖誘導体より成る分離剤
DE3619303A1 (de) * 1986-06-07 1987-12-10 Merck Patent Gmbh Optisch aktive adsorbentien
DE3811042A1 (de) * 1988-03-31 1989-10-19 Merck Patent Gmbh Ionenaustauscher
US5342785A (en) * 1988-07-05 1994-08-30 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Method for determining pyrogen content
US4957620A (en) * 1988-11-15 1990-09-18 Hoechst Celanese Corporation Liquid chromatography using microporous hollow fibers
JP2925753B2 (ja) * 1990-02-23 1999-07-28 ダイセル化学工業株式会社 光学異性体の分離方法
ATE171276T1 (de) * 1993-07-16 1998-10-15 Merck Patent Gmbh Trennmaterialien für die hydrophobe chromatographie
DE4333674A1 (de) * 1993-10-02 1995-04-06 Merck Patent Gmbh Nukleotidhaltiges Sorbens für die Affinitätschromatographie
DE4333821A1 (de) * 1993-10-04 1995-04-06 Merck Patent Gmbh Ionenaustauscher
DE4334353A1 (de) * 1993-10-08 1995-04-13 Merck Patent Gmbh Verfahren und Träger für die Gelpermeationschromatographie
JP3249408B2 (ja) 1996-10-25 2002-01-21 昭和シェル石油株式会社 薄膜太陽電池の薄膜光吸収層の製造方法及び製造装置
US7214410B2 (en) * 2002-10-04 2007-05-08 Shipley Company, L.L.C. Process for selecting solvents for forming films of ferroelectric polymers
RU2257200C1 (ru) * 2004-05-12 2005-07-27 Кутушов Михаил Владимирович Лекарственное средство
EP2018669B1 (en) * 2006-04-18 2009-11-11 Dow Corning Corporation Copper indium diselenide-based photovoltaic device and method of preparing the same
EP2333841A3 (en) * 2006-04-18 2013-06-05 Dow Corning Corporation Cadmium telluride-based photovoltaic device and method of preparing the same
CN101473448B (zh) * 2006-04-18 2011-05-11 道康宁公司 硒化铟铜基光伏器件及其制造方法
EP2620508B1 (en) * 2010-09-22 2017-09-06 Kaneka Corporation Method and device for detecting nucleic acid, and kit
BR112013006030B1 (pt) * 2010-09-29 2020-03-17 Intervet International B.V. Composto e sais ou n-óxidos farmaceuticamente aceitáveis, e, uso do composto
TWI538235B (zh) 2011-04-19 2016-06-11 弗里松股份有限公司 薄膜光伏打裝置及製造方法
US20140196894A1 (en) * 2013-01-15 2014-07-17 University Of Kansas Fluorescent tags for detection of swellable polymers
US9958364B2 (en) * 2013-10-03 2018-05-01 3M Innovative Properties Company Ligand functionalized substrates with enhanced binding capacity

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3640983A (en) * 1966-11-09 1972-02-08 Shojiro Horiguchi Method of making coupler-bonded-polymers and chromogen-bonded-polymers nd polymers made thereby
US3983001A (en) * 1972-05-10 1976-09-28 Ceskoslovenska Akademie Ved Isolation of biologically active compounds by affinity chromatography
DE2443119A1 (de) * 1973-09-10 1975-03-13 Research Corp Selektive entfernung von albumin aus blutfluessigkeiten sowie substanzen zur durchfuehrung des verfahrens
US4017476A (en) * 1974-03-15 1977-04-12 Mobil Oil Corporation Preparation of finely divided styrene-divinylbenzene organic pigments
FR2268022B1 (cs) * 1974-04-22 1977-06-24 Rhone Poulenc Ind
US4046750A (en) * 1974-09-30 1977-09-06 California Institute Of Technology Ionene modified small polymeric beads
LU73094A1 (cs) * 1975-07-29 1977-03-24
US4035316A (en) * 1975-11-24 1977-07-12 California Institute Of Technology Cell specific, variable density, polymer microspheres
US4213860A (en) * 1976-06-30 1980-07-22 Board of Regents, State of Florida for and on behalf of the University of Florida Affinity chromatography and substrate useful therefor
US4194877A (en) * 1977-11-28 1980-03-25 United States Of America Dye-containing polymer composition

Also Published As

Publication number Publication date
GB1597892A (en) 1981-09-16
AT364734B (de) 1981-11-10
DE2709094C2 (de) 1984-11-22
CS231169B2 (en) 1984-10-15
NL7802022A (nl) 1978-09-05
ATA146078A (de) 1981-04-15
DK150536B (da) 1987-03-23
DE2709094A1 (de) 1978-09-07
US4394487A (en) 1983-07-19
CA1122208A (en) 1982-04-20
DK150536C (da) 1987-10-19
SE7802249L (sv) 1978-09-03
JPS6219892B2 (cs) 1987-05-01
FR2416721A1 (fr) 1979-09-07
US4335226A (en) 1982-06-15
IT7820640A0 (it) 1978-02-24
HU182462B (en) 1984-01-30
IT1095439B (it) 1985-08-10
CH651222A5 (de) 1985-09-13
FR2416721B1 (cs) 1983-01-21
CS7801289A2 (en) 1984-02-13
DK90878A (da) 1978-09-03
CS188180A2 (en) 1984-02-13
JPS53131294A (en) 1978-11-15
GB1597891A (en) 1981-09-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS231161B2 (en) Method of separating of nucleid acid mixtures
Kadonaga et al. Affinity purification of sequence-specific DNA binding proteins.
Zimmermann et al. Synthetic oligonucleotide separations by mixed-mode reversed-phase/weak anion-exchange liquid chromatography
DE69731939D1 (de) Isolierung von einzelsträngigen nukleinsäuren
WO1994002501A1 (en) Novel 2&#39;-o-alkyl nucleosides and phosphoramidites processes for the preparation and uses thereof
US5811538A (en) Process for the purification of oligomers
EP0804448B1 (en) Method for the purification of short nucleic acids
JPS6172797A (ja) 合成オリゴヌクレオチド類の精製方法
Davey et al. Hydrophobic interaction of human, mouse, and rabbit interferons with immobilized hydrocarbons.
Warren et al. Principles and methods for the analysis and purification of synthetic deoxyribonucleotides by high-performance liquid chromatography
US4207200A (en) Soluble complex former for the affinity specific separation of macromolecular substances, its preparation and its use
EP1192172B1 (en) High affinity, low molecular weight displacers for oligonucleotide purification
Asmus et al. Preparation and chromatographic evaluation of chemically bonded ion-exchange stationary phases: I. Strong anion-exchanger
JP2007519407A (ja) 核酸混合物のクロマトグラフィー分離方法
Deshmukh et al. Purification of antisense oligonucleotides
Bunček et al. Unusual chromatographic behavior of oligonucleotide sequence isomers on two different anion exchange HPLC columns
ES2263038T3 (es) Aislamiento de oligonucleotidos antisentido.
EP0322677B1 (en) Carrier for DNA-hybridization
Sutton et al. Dialysis of pyrimidine oligodeoxynucleotides
Müller New phase supports for partition chromatography of biopolymers
JPS59198990A (ja) ペプチド性抗生物質ｋ５８２ｍ−ａ及びｋ５８２ｍ−ｂの分離方法
JP2000342265A (ja) オリゴヌクレオチド類の精製方法
Edwardson et al. Purification of homo-and hetero-oligonucleotides using high-performance charge-transfer chromatography
Flanagan et al. Affinity Partitioning of Receptor-Rich Membrane Fractions and Their Purification
JPH05192175A (ja) ジアデノシンポリリン酸溶液の製法