CS209715B1 - Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi - Google Patents
Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi Download PDFInfo
- Publication number
- CS209715B1 CS209715B1 CS864279A CS864279A CS209715B1 CS 209715 B1 CS209715 B1 CS 209715B1 CS 864279 A CS864279 A CS 864279A CS 864279 A CS864279 A CS 864279A CS 209715 B1 CS209715 B1 CS 209715B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- production
- citric acid
- carrier
- inoculum
- inoculated
- Prior art date
Links
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 30
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 16
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 title claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 9
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 3
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 1-[(e)-2-propylsulfonylethenyl]sulfonylpropane Chemical compound CCCS(=O)(=O)\C=C\S(=O)(=O)CCC YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 235000014647 Lens culinaris subsp culinaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000043158 Lens esculenta Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 1
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000219873 Vicia Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000021251 pulses Nutrition 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(54) Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi i
Vynález se týká způsobu přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi .
Při dosavadním submersním způsobu výroby kyseliny citrónové se fermentační postup zásadně dělí na dvě fáze, během nichž je plíseň kultivována na médiích odlišného složení. V prvé fázi - ve fázi přípravy vegetativního očkovacího materiálu - je půda, jejíž složení podporuje klíčení spor a růst mycelia, očkována sporami produkčních kmenů plísní, např. plísně Aspergillus niger. Po vhodně dlouhé inkubaci je dobře narostlým mycelíem očkováno v druhé fázi produkční médium ve velkoobjemových fermentorech, jehož složení podporuje hlavně tvorbu kyseliny citrónové a jen omezeně růst plísně. Pro získání dostatečného množství vegetativního inokula se prvá fáze dělí obvykle na tři objemové postupně se zvětšující stupně. Nevýhodou tohoto postupu je dlouhý cyklus přípravy inokula, nebot spory plísně, např. Aspergillus niger, klíčí a rostou 48 hodin v bankách na třepačce, dále 48 hodin v předočkovacím tanku a dalších 48 hodin v očkovacím tanku a teprve potom následuje vlastní velkoobjemová fermentace. Toto postupné převádění inokula do stále větších objemů klade zvýšené nároky na pracovní kapacitu, strojní vybavení a energii. Kromě toho několikanásobná vegetativní pasáž skrývá nebezpečí, že u některých mutant plísní může během postupného pomnožování vegetativního materiálu dojít k vyštěpování méně produkčních variant a tím ke snížení výtěžku kyseliny citrónové.
Nevýhody vegetativní pasáže se snaží odstranit jiný známý postup, kdy inokulační tank se přímo očkuje suspensí spor plísní, která byla připravena smytím spor ze sporulačního agarového média sterilní vodou např. roztokem smáčedla /Tweenu 80/. Avšak v tomto případě je třeba k očkování velkého ínokulačního tanku připravit značné množství vysporulováných kultur, což je jednak pracné jednak nevýhodné pro manipulací. Kromě toho mycelium v očkovacím tanku očkovaném suspens spor roste nerovnoměrně, nebot nastává spojování spor do různě velkých konglomerátů, které se úplně nerozdělí ani při delším protřepávání. Z nich pak vyrůstají různě velké nehomogenní pelety, při jejichž použití pro očkování fermentačního tanku není vlastní fermentace - pokud jde o produkci kyseliny citrónové - standardní.
Všechny tyto nevýhody a negativní jevy řeší uvedený vynález, jehož podstatou je,» že příprava vegetativního očkovacího materiálu pro veIkoobjemové fermentory se provádí v jediném stupni za použití spor produkční plísně na nosiči a to tak, že nosič, který tvoří semena rostlin^s výhodou semena obilovin, luštěnin nebo olejovitých rostlin se převrství 3-4násobným množstvím vody, mírně vaří za občasného promíchání po dobu 20-40 minut, načež se nosič promyje vodou, osuší, rozplní v množství 50-80 ml do 300 ml baněk, vysterilizuje a očkuje suspenzí spor plísně a naočkovaný nosič se inkubuje při t = 22-34 °C po dobu 5-15 dní.
Výhodou způsobu podle vynálezu je, že dochází-lí k očkování posledního stupně inokulačního tanku přímo sporami plísně·vytvořenými na vhodném nosiči, získáme dostatečné
2097 1 5 množství vegetativního inokula v jediném stupni, nebot spory plísně klící a vyrostou v inokulačním tanku a pak následuje vlastní fermentace. Doba nutná k přípravě inokula se tak sníží zhruba na jednu třetinu. Vhodným nosičem jsou např. obilky pšenice, rýže, kukuřice, ječmene, žita, ovsa, prosa, luštěnin jako např. hrachu, čočky, vikve, z olejovitých rostlin např. řepky, slunečnicových semen. Při očkování tímto způsobem stačí velmi malé množství sporového materiálu, což má současně s úsporami pracovních sil a strojního vybavení a zkrácením fermentačního procesu značný význam pro jeho ekonomiku.
Kromě toho ínokulační materiál, očkovaný tímto způsobem se vyvíjí ve formě pravidelných lehce kompaktních pelet, které při dalším použití umožňují stand ardisaci průběhu fermentace při dosažení vysokých výtěžků kyseliny citrónové. ínokulační materiál, získaný tímto ppůsobem,je vysoce kvalitní, takže lze pro očkování fermentačnich tanků snížit jeho množství z obvyklých 5 % na 2 až 3 %, čímž se dosáhne dalŠ ich úspor.
Dále jsou uvedeny příklady způsobu přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové podle vynálezu.
Příklad 1
K přípravě inokula v inokulačním tanku se použijí spory plísně Aspergillus niger rostoucí na obilkách pšenice a připravené nás ledujícím postupém. Promyté a povařené obilky pšenice byly rozplněny v množství 60 ml do 3P ml Erlenmeyerových baněk, .vysteri 1 izovány a očkovány suspensí spor plísně, získané mytím vysporulované kultury na agarovém médiu pomocí sterilní destílované vody. K dokonalému vysporulování je v případě plísně Aspergillus niger zapotřebí obvykle 10 dnů. Denně je nutné baňky s obilkami mírně protřepávat. Baňky se sporami na obilkách se skladují v lednici při +5 °C.
Obsah dvou baněk /celkem 120 ml obilek/ se očkuje přímo vsypáním do 500 1 inokulacního tanku s 300 1 média následujícího složení: 14 % glukózy, 0,25 % NH4NO3,
0,025 % MgSO4-7H2O, 0,1 % KH2PO4, 0,1 % rozpustného škrobu, 0,0001 % ZnSO4.7H20,
0,0002 % CuSO4.5H2O, 0,00065 %FeCl3. Otáčky míchadla 140 ot/mín. množství vháněného vzduchu 120-14,0 1/min, přetlak 0,05 MP, teplota 29-31 °C, doba kultivace 42 h. Vyrostlé inokulum je v pravidelných, jen lehce soudržných paletách. 300 1 takto připraveného inokula se použije k naočkování 13 000 1 média ve 20 000 1 fermentorů.
Příklad 2
Příprava vegetativního inokula určeného pro velkoobjemový fermentor se provádí obdobně jako v příkladu 1 s tím rozdílem, že se použijí promyta a povařená semena kukuřice, rozplněná v množství 70 ml do 300 ml Erlenmeyerových baněk. Semena se očkují suspensí spor a uloží na 10 dní do termostatu při 30 °C, aby se vytvořilo dostatečné množství spor.
Obsahem 1 baňky se očkuje 152 1 media v 250 1 inokulačním tanku, přičemž složení média je stejné jako v příkladu 1. Otáčky míchadla jsou 200-250 ot/min, množství vháněného vzduchu 60-80 1 za min, teplota 29-31 °C, doba kultivace 40 hodin.
100 1 tohoto inokula je dostatečné množství pro naočkování 4 350 média v 5 000 litrech ve fermentačním tanku.
Claims (1)
- P Ř E D M É TZpůsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové s plísněmi, vyznačený tím., že příprava vegetativního očkovacího materiálu pro velkoobjemové fermentory se provádí v jediném stupni za použití spor produkční plísně na nosiči a to tak, že nosič, který tvoří semena rostlin, s výhodou semena obilovin, luštěnin neboY N A L E Z U .olejovitých rostlin se převrství 3-4násobným množstvím vody, mírně se vaří za občasného promíchání po dobu 20-40 minut, načež se nosič promyje vodou, osuší, rozplní v množství 50-80 ml do 300 ml baněk, vysteri 1 i zuje a očkuje suspenzí spor plísně a naočkovaný nosič se inkubuje pří teplotě 22-34 °C po dobu 5-15 dní.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS864279A CS209715B1 (cs) | 1979-12-11 | 1979-12-11 | Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS864279A CS209715B1 (cs) | 1979-12-11 | 1979-12-11 | Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS209715B1 true CS209715B1 (cs) | 1981-12-31 |
Family
ID=5437251
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS864279A CS209715B1 (cs) | 1979-12-11 | 1979-12-11 | Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS209715B1 (cs) |
-
1979
- 1979-12-11 CS CS864279A patent/CS209715B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103891524B (zh) | 灵芝盆景式栽培的方法及用于栽培灵芝的培养基 | |
| CN106613355A (zh) | 一种平菇生态种植方法 | |
| CN102498937B (zh) | 一种栽培平菇的方法 | |
| JP3571626B2 (ja) | 植物賦活剤 | |
| CN108718909A (zh) | 一种增产羊肚菌的栽培方法 | |
| CN114806895B (zh) | 内生真菌m-b927在提高水稻谷粒产量中的应用 | |
| CN113317129B (zh) | 一种小香菇菌株及其栽培方法 | |
| CN103004453A (zh) | 一种食用菌栽培种的制作方法以及培养基制作原料 | |
| CN104718995B (zh) | 姬菇固体液化菌种的制作方法 | |
| KR101006732B1 (ko) | 표고버섯 지면 재배방법 | |
| CN105238699A (zh) | 一种茶树菇工厂化栽培液体发酵菌种的制备方法 | |
| CN105519345B (zh) | 天麻有性繁殖用棉籽壳为主料制作萌发菌生产种的方法 | |
| CN102349416B (zh) | 一种制备金针菇液体菌种的简易方法 | |
| CN103583233A (zh) | 一种还原型液体菌种的制备方法 | |
| CN115623953A (zh) | 一种姬菇液体发酵培养及快速出菇检验的方法 | |
| CN114902912A (zh) | 一种油樟树椴木培育牛樟芝的方法 | |
| CN107641601A (zh) | 一种液体发酵菌种驯化方法 | |
| CS209715B1 (cs) | Způsob přípravy inokula pro submersní výrobu kyseliny citrónové plísněmi | |
| CN102835253B (zh) | 一种应用液体菌种工厂化生产真姬菇的优化工艺 | |
| CN106212051A (zh) | 一种香菇的定向出菇栽培方法 | |
| CN106171511A (zh) | 一种白灵菇的瓶栽方法 | |
| CN110278826A (zh) | 一种设施化不覆土瓶栽中国美味蘑菇的方法 | |
| CN101258815A (zh) | 食用菌栽培种棒式制作方法 | |
| CN108419609A (zh) | 一种基于核桃壳/粕的食用菌菌包及其制备方法与应用 | |
| CN109279937A (zh) | 一种食用菌固体菌种的培养基及其制备方法 |