CS204301B1 - Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu - Google Patents
Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu Download PDFInfo
- Publication number
- CS204301B1 CS204301B1 CS251678A CS251678A CS204301B1 CS 204301 B1 CS204301 B1 CS 204301B1 CS 251678 A CS251678 A CS 251678A CS 251678 A CS251678 A CS 251678A CS 204301 B1 CS204301 B1 CS 204301B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- mutant
- alcaloides
- ccmf
- elymoclavine
- agroclavine
- Prior art date
Links
- DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N elymoclavine Natural products C1=CC(C2C=C(CO)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 9
- XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N Agroclavine Natural products C1=CC(C2C=C(C)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 6
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 title claims description 5
- UPKBEIIDYOMDQW-UKRRQHHQSA-N agroclavine Chemical compound C1=CC=C2[C@H]3C=C(C)CN(C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 UPKBEIIDYOMDQW-UKRRQHHQSA-N 0.000 title 1
- IAOSEBXZNXDPEE-UKRRQHHQSA-N elymoclavine Chemical compound C1=CC=C2[C@H]3C=C(CO)CN(C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 IAOSEBXZNXDPEE-UKRRQHHQSA-N 0.000 title 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 9
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- ZCDOYSPFYFSLEW-UHFFFAOYSA-N chromate(2-) Chemical compound [O-][Cr]([O-])(=O)=O ZCDOYSPFYFSLEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká nové průmyslové mutanty kmene Claviceps purpurea CP7/5 CCM F-630 s vysokou submersní produkcí farmaceuticky významných alkaloidů agroklavinu (M. Abe et al., Jap. pat. 178 336) strukturního vzorce I
a elymoklavinu (M. Abe et al., US pat. 2 835 675) strukturního vzorce II
(II)
Vzorky mutanty jsou uloženy v Československé sbírce mikroorganismů Univerzity J. E. Purkyně v Brně pod S. CCM F-630.
Vynálezem chráněná mutanta byla získána ze 664 izolátů připravených níže popsaným mutaěním působením etylmetansulfonátu (EMS) a UV záření na laboratorní kmen Claviceps purpurea CP7 (Mikrobiologický ústav ČSAV v Praze 4).
Příprava vysokoprodukční mutanty:
Veškeré inkubace kultur probíhaly v temnu při 24 í 1 °C. Spory mateřské kultury CP7, která byla kulxivována 3 až 4 týdny na sežikmené agarové živné půdš T2 (C. Spalla, in Genetics of Industrie! Microorganísms. Eda. Z. Vaněk, Z. Hošťálek, J. Cudlín. Elsevier, Amsterdam 1973, p. 393), byly suspendovány jednak v 0,066 M fosfátovém pufru pH 7,2, jednak ve fyziologickém roztoku. Výsledná suspenze obsahovala vždy 1 až 4,10? spor.ml-', z toho pouze 0,5 % až 1 % klíčivých. Agarová živná půda T2 obsahovala tyto složky (g.l-' dast.H^O): sacharóza 100, L-asparagin 10, Ca(N03)2«4 H2O 1, kvasniěný extrakt 0,1, KH2PO4, 0,25 MgSO4· .7 H2O, 0,25, KC1 0,12, PeSO4.7 H2O, 0,02, ZnSC>4.7 H2O, 0,015, agar 20, pH 5,2 po sterilizaci v autoklávu při 105 °C 15 min.
Suspenze spor v 0,066 M fosfátovém pufru pH 7,2 byla vystavena ,9 hodina účinku 0,02 až 0,075 M EMS (J. Nešvera, Fol. Microbiol. 18 352 /1973/), dvakrát promyta uvedeným pufram, vyseta na Petriho misky (¢1 10 cm) e agarovou půdou T2 obohacenou 0,02 % hydrolyzátu kaseinu (Bacto-Casamino acids Difco) a inkubována 2 týdny.
Ze suspenze spor ve fyziologickém roztoku bylo přeneseno 5 ml na Petriho misku (gf 10 cm) a za stálého pohybu ozařováno zdrojem UV záření nastaveným na 10 J,b”3.s’' dávkami 150 až 1 000 J.m~2, V desetisekundovýoh intervalech bylo odebíráno 0,5 ml spórové suspenze. Po vhodném neředěni fyziologickým roztokem byla výsledná suspenze spár přenesena na Petriho misky (/ 10 cm) s agarovou půdou T2 obohacenou 0,02 % hydrolyzátu kaseinu (Bacto-Casamino acids Difco). Takto zaočkovaná živná půda byla inkubována 2 týdny.
Kolonie vyrostlé z mutagenizovanýoh spár na agarovém médiu v Petriho mlskách byly jednotlivě přeneseny na sešikmenou agarovou půdu T2 a inkubovány 3 až 4 týdny. Narostlé kultury byly Pak testovány na schopnost tvořit alkaloidy v podmínkách submarsní farmantace (ča. autorské osvědčení ě. 199 986).
Alkaloidy byly stanoveny ve fermentační tekutině 14denních kultur kolorimetricky (G. T. Banks et AI., J. Gen. Microbiol. 82, 345 /1974/) a metodou vysokoúčinné kapalinové ehromatografie (M. Wurst et al., J. Chromát. 150. 477 /1978/)· . Charakteristika vysokoprodukční mutanty;
Schopnost mutanty tvořit axtracelulárni směs agroklavinu a elymoklavinu v podmínkách aubmerznich fermentací je uvedena v tabulce 1.
T a b u 1 k a 1
| Mutant | typ | Mutagen dávka J.m-Z | konc. (M) | Celkové alkaloidy (g agroklavinu ml“’) | Agroklavin % | Elymoklavin % ' |
| CP7/5 | EMS | 0,05 | 3,9 | 77 | 23 |
Mutanta CP7/5 je morfologicky shodná s rodičovským kmenem CP7. V podmínkách submerzr.í fermentace bohatě roste (12 až 20 mg suché váhy myeelia.ml-'), intenzívně sporuluje makroa mikrokonidiemi a produkuje extracelulární glukany a extracelulární hnědočervený pigment.
Na agarové půdě T2 tvoří nízkou vrstvu šedobílého vzdušného myeelia bohatě větveného s postranními hyfami zakončenými konidiogenními buňkami. U mutanta CP7/5 hmotnostní poměr akroklavin/elymoklavin ve vyprodukované směsi alkaloidů Siní 3,3.
Produkční mutanta se uchovává v Endo zkumavkách na agarové půdě T2 v temnu při teplotě 4 °C. Každé 3 až 4 měsíce se přeočkovává a po 30denní inkubaci při 24 ± 1 °C sa jich použije k přípravě inokula nebo se uchovává jako zásobní kultura při 4 °C.
Mutanta houby Claviceps purpurea označená CP7/5 zabezpečuje klíčový úsek velkokapacitní přípravy alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu submerzní fermentací.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUPrůmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu.Severografia. n. p- Úvod 7. Μοβ»
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS251678A CS204301B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS251678A CS204301B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS204301B1 true CS204301B1 (cs) | 1981-04-30 |
Family
ID=5362543
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS251678A CS204301B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS204301B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111334439A (zh) * | 2020-04-02 | 2020-06-26 | 福安药业集团烟台只楚药业有限公司 | 一种麦角菌突变株及其在制备麦角酸发酵液中的应用 |
-
1978
- 1978-04-19 CS CS251678A patent/CS204301B1/cs unknown
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111334439A (zh) * | 2020-04-02 | 2020-06-26 | 福安药业集团烟台只楚药业有限公司 | 一种麦角菌突变株及其在制备麦角酸发酵液中的应用 |
| CN111334439B (zh) * | 2020-04-02 | 2022-04-22 | 福安药业集团烟台只楚药业有限公司 | 一种麦角菌突变株及其在制备麦角酸发酵液中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110373359A (zh) | 一种白色链霉菌X-18及利用该菌生产ε-聚赖氨酸的方法 | |
| Dan et al. | Effects of forty strains of Orchidaceae mycorrhizal fungi on growth of protocorms and plantlets of Dendrobium candidum and D. nobile | |
| CN115838643B (zh) | 一种茶树内生真菌及在促进铁皮石斛生长的应用 | |
| Taber | Evidence for the existence of acid-sensitive actinomycetes in soil | |
| CN104480021A (zh) | 一株高产冬虫夏草多糖的中国被毛孢及其培养方法 | |
| WO2022247190A1 (zh) | 一种高产喜树碱内生菌株及其应用 | |
| CS204301B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu | |
| CN113648303A (zh) | 咖啡醇或其衍生物在制备抗白色念珠菌药物或抗白色念珠菌日用品中的应用 | |
| CN104877914A (zh) | 一种高产猴头菌诱变菌株h07及制备方法 | |
| CN108641968B (zh) | 一种空间紫红曲霉FuH-23-4筛选及其在生产红曲色素中的应用 | |
| CS204302B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 | |
| San-Blas et al. | Cell wall analysis of an adenine-requiring mutant of the yeast-like form of Paracoccidioides brasiliensis strain IVIC Pb9 | |
| CS204303B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 | |
| CN102533567A (zh) | 一种细脚拟青霉诱变菌株及其培育方法 | |
| CN102424802A (zh) | 一种短小芽孢杆菌和菌株培养方法及应用 | |
| CN107779405A (zh) | 一种珊瑚拟青霉菌种及其培育方法、应用 | |
| US5457039A (en) | Method for hyper-production of monascus pigments | |
| CS245153B1 (en) | Strain of acremonium chrysogenum microorganism | |
| CN113604367B (zh) | 牛樟芝突变株e3-64及其在制备三萜中的应用 | |
| CN110343618A (zh) | 一类helminthosporol型倍半萜类化合物及其制备方法与应用 | |
| Shirane et al. | Mineral salt medium for the growth of Botrytis cinerea in vitro | |
| Ivanchenko | Effect of surface fermentation and parameters of cultivation on prodigiosin production | |
| CS248612B1 (cs) | Průmyslový mutant houby Claviceps fusiformis W1 CC-1/85 | |
| CS252603B1 (cs) | Průmyslový kmen houby Claviceps purpurea (Fr.) Tul. 59 CC 5/86 | |
| JP2916357B2 (ja) | 新規な醸造用酵母 |