CS204302B1 - Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 - Google Patents
Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 Download PDFInfo
- Publication number
- CS204302B1 CS204302B1 CS160579A CS160579A CS204302B1 CS 204302 B1 CS204302 B1 CS 204302B1 CS 160579 A CS160579 A CS 160579A CS 160579 A CS160579 A CS 160579A CS 204302 B1 CS204302 B1 CS 204302B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- mutant
- ccm
- fungi
- claviceps purpurea
- industrial
- Prior art date
Links
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 title description 2
- DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N (7-methyl-6,6a,8,10a-tetrahydro-4h-indolo[4,3-fg]quinoline-9-yl)methanol Chemical class C1=CC(C2C=C(CO)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N Agroclavine Natural products C1=CC(C2C=C(C)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 9
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- ICSSIKVYVJQJND-UHFFFAOYSA-N calcium nitrate tetrahydrate Chemical compound O.O.O.O.[Ca+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ICSSIKVYVJQJND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- ZCDOYSPFYFSLEW-UHFFFAOYSA-N chromate(2-) Chemical compound [O-][Cr]([O-])(=O)=O ZCDOYSPFYFSLEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká nové průmyslové mutanty kmene Clavlceps purpurea CP7/63 s vysokou submerzní produkcí farmaceuticky významných alkaloidů agroklavinu (M. Abe et al., Jap. patent 178 336) strukturního vzorce I
(I) a elymoklavinu (M. Abe et al., US Pat. 2 835 675) strukturního vzorce IX
Vzorky mutanty jsou uloženy v československé' sbírce mikroorganismů Univerzity J. E. Purkynš v Brně pod δ. CCM F-631.
Mutanta byla získána ze 664 izolátú připravených níže popsaným mutačním působením etylmetansulfonátu (EMS) a UV záření na laboratorní kmen Clavioeps purpurea CP7 (Mikrobio204302
204302 2 logický ústav ČSAV v Praze 4).' Při přípravě vysokoprodukční mutanty probíhaly veškeré inkubace kultur v temnu při 24 ± 1 °c. Spory mateřské kultury CP7, která byla kultivována 3 až 4 týdny na sešikmená agarová živné půdě T2 (C. Spalla, in Genetics of Industrial Microorganismuá. Eds. Z. Vaněk, Z. Hošlálek, J. Cudlín, Elsevler, Amsterodam 1973, p. 393), byly . suspendovány jednak v 0,066 M fosfátovém pufru pH 7,2, jednak ve fyziologickém roztoku. Výsledná,suspenze obsahovala vždy 1 až 4,10? spor ml“1, z toho pouze 0,5 % až 1 % klíSivých. Agarová živná půda T2 obsahovala tyto složky (g. 1”*’ dest.H2O): sacharóza 100, L-asparagiň 10, Ca(N03)2.4 H2O 1, kvasničný extrakt 0,1, KH2PO4 0,25 MgSC>4.7 H20 0,25, KC1 0,12, FeSO4.7 H2O 0,02, ZnSO4«7 H20 0,015, agar 20, pH 5,2 po sterilizaci v autoklávu při 105 °C 15 min.
Suspenze spor v 0,066 M fosfátovém pufru pH 7,2 byla vystavena 19 hodin, úěinku 0,02 až 0,075 M EMS (J. Nešvera, Fol. Microbiol. 18 /1973/), dvakrát promyta uvedeným pufrem, vyseta na Petriho misky (tf 10 cm) s agarovou půdou T2 obohacenou 0,02 % hydrolyzátu kaseinu (Bactó-Casamino acids Difco) a ihkubována 2 týdny.
Ze suspenze spor ve fyziologickém roztoku bylo přeneseno 5 ml na Petriho misku (d 10 cm) a za stálého pohybu ozařováno zdrojem UV záření nastaveným na 10 J.m“2.s“f dáv- . kami 150 až 1 000 J.m”2. V desetisekundových intervalech bylo odebíráno 0,5 ml sporové suspenze. Po vhodném neředění fyziologickým roztokem byla výsledná suspenze spor přenesena na Petriho misky (/ 10 cm) s agarovou půdou T2 obohacenou 0,02 % hydrolyzátu kaseinu (Bacto-Casamino acids Difco). Takto zaočkovapá živná půda byla inkubována 2 týdny.
Kolonie vyrostlé z mutagenizovaných spor na agarovém médiu v Petriho miskách byly jednotlivě přeneseny na seáikmenou agarovou půdu T2 a inkubovány 3 až 4 týdny. Narostlé kultury byly pak testovány na schopnost tvořit alkaloidy v podmínkách submerzní fermentace (čs. autorské osvědčení č. 199 986).
Alkaloidy byly stanoveny ve fermentační tekutině 14denníeh kultur kolometricky (G. T. Banks et al., J. Gen. Microbiol. 82, 345 /1974/) a metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (M. Wurst et al.,. J. Chromát. 150. 477 /1978/).
Charakteristika vysokoprodukční mutanty:
Schopnost mutanty tvořit extracelulární směs agroklavinu a elymoklavinu v podmínkách submerzních fermentací je uvedena v tabulce 1.
Tabulkal
| Mutant | typ | Mutagen dávka J.m-2 | konc. (M) | Celkové alkaloidy (g agroklavinu ml-1) | Agroklavin | Elymoklavin % |
| CP7/63 | UV | 720 | 3,2 | 94 | 6 |
Mutanta CP7/63 je morfologicky shodná s rodičovským kmenem CP7. V podmínkách submerzní fermentace bohatě roste (12 až 20 mg suché váhy mycelia.ml“)), intenzívně eporuluje makroa mikrokonidiemi a produkuje extracelulární glukany-a extracelulární hnědočervený pigment.
Na agarové půdě T2 tvoří nízkou vrstvu šedobílého vzdušného mycelia bohatě větveného spostranními hyfami zakončenými konidiogenními buňkami. U mutanta CP7/63 hmotnostní poměr akroklavin/elymoklavin ve vyprodukované směsi alkaloidů činí 15,6.
Produkční mutanta se uchovává v Endo zkumavkách na agarové půdě T2 a v temnu při téplolě 4 °C. Každá-3 až 4 měsíce se.přeočkovávé a po 30dénní inkubaci při 24 1 1 °C se jich použije k přípravě inokula nebo se uchovává jako zásobní kultura při 4 °C. Mutanta houby Claviceps purpurea označená CP7/63 zabezpečuje klíčový úsek velkokapacitní přípravy alka-·, loidů agroklavinu a elymoklavinu submerzní fermentací.
Claims (1)
- PfiEDMĚT VTNÍLEZUPrůmyslová mutanta houby Glaviceps purpurea CP7/63 uložená v Československé sbírce mikroorganismů Univerzity J. E. Purkyně v-Brně pod číslem CCM P-631 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS160579A CS204302B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS160579A CS204302B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS204302B1 true CS204302B1 (cs) | 1981-04-30 |
Family
ID=5350840
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS160579A CS204302B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS204302B1 (cs) |
-
1978
- 1978-04-19 CS CS160579A patent/CS204302B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4173629A (en) | Antibiotic S 31794/F-1 | |
| CN104885931B (zh) | 一种离子束注入诱变选育蛹虫草菌株的方法和所育菌株 | |
| Ahmadjian | Further studies on lichenized fungi | |
| Bennett et al. | Isolation and characterization of two nonaflatoxigenic classes of morphological variants of Aspergillus parasiticus | |
| CN101386818A (zh) | 一种海洋真菌培养物的提取物及其制备方法和应用 | |
| CS204302B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 | |
| WO2006075395A1 (ja) | β−ラクタム抗生物質の活性増強剤及びその製造法 | |
| San-Blas et al. | Cell wall analysis of an adenine-requiring mutant of the yeast-like form of Paracoccidioides brasiliensis strain IVIC Pb9 | |
| CN113564057B (zh) | 一株解毒抑菌生防菌及其应用 | |
| CS204301B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu | |
| CN104877914A (zh) | 一种高产猴头菌诱变菌株h07及制备方法 | |
| CS204303B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 | |
| Gaur et al. | Comparative study of a new Chrysosporium species with Histoplasma capsulatum | |
| US5457039A (en) | Method for hyper-production of monascus pigments | |
| CZ280552B6 (cs) | Kmen Tolypocladium sp. MS 3029, uložený pod CCM 8185 pro výrobu cyklosporinů v podmínkách stacionární fermentace | |
| CZ208994A3 (en) | Mycelium sterilae ms 2929 strain producing cyclosporins by submerisible fermentation process | |
| Volkoff et al. | Virus-like particles in abnormal cells of Saccharomyces carlsbergensis | |
| CN107779405A (zh) | 一种珊瑚拟青霉菌种及其培育方法、应用 | |
| CN110343618A (zh) | 一类helminthosporol型倍半萜类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN113604367B (zh) | 牛樟芝突变株e3-64及其在制备三萜中的应用 | |
| CS248612B1 (cs) | Průmyslový mutant houby Claviceps fusiformis W1 CC-1/85 | |
| Shirane et al. | Mineral salt medium for the growth of Botrytis cinerea in vitro | |
| US6007812A (en) | Compound MK7634, process for production thereof, and anthelmintic containing said substance | |
| CS245153B1 (en) | Strain of acremonium chrysogenum microorganism | |
| Shibata et al. | A new immunomodulator, FR-900490 |