CS204303B1 - Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 - Google Patents
Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 Download PDFInfo
- Publication number
- CS204303B1 CS204303B1 CS160679A CS160679A CS204303B1 CS 204303 B1 CS204303 B1 CS 204303B1 CS 160679 A CS160679 A CS 160679A CS 160679 A CS160679 A CS 160679A CS 204303 B1 CS204303 B1 CS 204303B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- mutant
- ccm
- fungi
- claviceps purpurea
- industrial
- Prior art date
Links
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 title claims description 4
- DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N (7-methyl-6,6a,8,10a-tetrahydro-4h-indolo[4,3-fg]quinoline-9-yl)methanol Chemical class C1=CC(C2C=C(CO)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N Agroclavine Natural products C1=CC(C2C=C(C)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 9
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 1
- ZCDOYSPFYFSLEW-UHFFFAOYSA-N chromate(2-) Chemical compound [O-][Cr]([O-])(=O)=O ZCDOYSPFYFSLEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká nové průmyslové mutanty kmene Claviceps purpurea CP7/274 s vysokou submerzní produkcí farmaceuticky významných alkaloidů agroklavinu (M. Abe et al·, Jap. pat. 178 336) strukturního vzorce I
(I) a elymoklavinu (M. Abe et al., US Pat. 2 835 675) strukturního vzorce II
sbírce mikroorganismů Univerzity J.
E.
Vzorky mutanty jsou uloženy v Československé Purkyně V Brně pod 6. CCM P-632.
Vynálezem chráněná mutanta byla získána ze 664 izolátů připravených níže popsaným mutačním působením etylmetansulfonátu (EMS) a UV záření na laboratorní kmen Claviceps purpurea CP7 (Mikrobiologický ústav ČSAV v Praze 4).
Při přípravě vysokoprodukění mutanty probíhaly veškeré inkubace kultur v temnu při 24 í 1 °C. Spory mateřská kultury CP7, které byla kultivována 3 až 4 týdny na sešikmené agarové živné půdě T2 (C. Spalla, in Genetieq of Industrial Microorganismus. Eds. Z. Vaněk, Z. Hošlálek, J. Cudlín. Elsevier Amsterdam 1973, p. 393)', byly suspendovány jednak v 0,066 M fosfátovém pufru pH 7,2, jednak ve fyziologickém roztoku. Výsledná suspenze obsahovala vždy 1 až 4.10^ spor.ml-1, z toho pouze 0,5 % až 1 % klíěivýoh. Agarová živná půda T2 obsahovala tyto složky <g.1-1 dest. H2O)j saoharóza 100, L-asparagin 10, Ca(NOj)g.4 H2O 1, kvasniěný extrakt 0,1, KH2PO4 0,25, MgSO4.7 H20 0,25, KCl 0,12, FeS04.7 H20 0,02, ZnS04.7 H2O 0,015, agar 20, pH 5,2 po sterilizaci v autoklávu při 105 °C 15 min.
Suspenze spor v 0,066 M fosfátovém pufru pH 7,2 byla vystavena 19 hod. účinku 0,02 až 0,075 M EMS (J. Nešvera, Fol. Microbiol. 18. 352 /1973/), dvakrát promyta uvedeným pufrem, vyseta na Petriho misky (0 10 cm) s agarovou půdou T2 obohacenou 0,02 % hydrolyzátu kaseinu (Bacto-Casamirio acids Difoo) a inkubována 2 týdny.
Ze suspenze spor ve fyziologickém roztoku bylo přeneseno 5 ml na Petriho misku (0 10 cm) a za stálého pohybu ozařováno zdrojem UV záření nastaveným na 10 J.m-2.s-1 dávkami 150 až 1 000 J.m“2. V desetisekundových intervalech bylo odebíráno 0,5 ml sporové suspenze. Po vhodném naředění fyziologickým roztokem byla výsledná suspenze spor přenesena na . Petriho misky (0 10 cm) s agarovou půdou T2 obohacenou 0,02 % hydrolyzátu kaseinu (Bacto-Casamino acids Difoo). Takto zaoíkovaná živná půda byla inkubována 2 týdny.
Kolonie vyrostlé z mutagenizovaných spor na agarovém médiu v Petriho miskách byly jednotlivě přeneseny na sešikmenou agarovou půdu T2 a inkubovány 3 až 4 týdny. Narostlé kultury byly pak testovány na schopnost tvořit alkaloidy v podmínkách submerzní fermetaoe (8s. autorské osvědčení č. 199 986).
Alkaloidy byly stanoveny ve fermentační tekutině 14denníoh kultur kolorimetricky (G. T. Banks et al., J. Gen. Microbiol. 82, 345 /1974/) a metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (M. Wurst et al., J. Chromát. 150. 477 /1978/).
Charakteristika vysokoprodukění mutanty:
Schopnost mutanty tvořit extraoelulárni směs agroklavinu a elýmoklavinu v podmínkách submerzníoh fermentaoí je uvedena v tabulce 1.
T a b u 1 k a 1
| Mutant | typ | Mutagen dávka (J.m-2) | konc. (M) | Celkové alkaloidy (g agroklavinu ml-1) | Agroklavin % | Elymoklávin % |
| CP7/274 | uv | 800 | 1,8 | 70 | 30 |
Mutant CP7/274 se liší od rodičovského kmene, nebol je typickým sklerooiálním kmenem. Na agarové živné půdě T2 i v submerzníoh podmínkách roste chudě (5 až 6 mg suché váhy mycelia.ml-1) za tvorby pučícího mycelia se zvětšenými kulatými buňkami. U starší kultury se toto myoelium rozpadá na arthrospory o velikosti 4 x 12 ju. Vláknité mycelium a konidie se tvoří' ojediněle. Obsah extraoelulárhíoh glukanů je nepatrný.
Produkční mutanta se uchovává v Endo zkumavkách na agarové půdě T2 v temnu při teplotě 4 °C. Každé 3 až 4 měsíce se přeočkovává a po 30denní inkubaci při 24 í 1 °C se použije k přípravě inokula nebo se uchovává jako zásobní kultura při 4 °C.
Mutanta houby Clavioeps purpurea označená CP7/274 zabezpečuje klíčový úsek velkokapacitní přípravy alkaloidů agroklavinu a elýmoklavinu submerzní fermentaoí.
Claims (1)
- Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274, uložená v Československé sbírce mikroorganismů Univerzity J. E. Purkynš v Brně pod číslem CCM F-632 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS160679A CS204303B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS160679A CS204303B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS204303B1 true CS204303B1 (cs) | 1981-04-30 |
Family
ID=5350848
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS160679A CS204303B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS204303B1 (cs) |
-
1978
- 1978-04-19 CS CS160679A patent/CS204303B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106754430A (zh) | 高产洛伐他汀枝状枝孢菌Cc‑106菌株及其用途 | |
| Glen-Bott | Helicodendron giganteum n. sp. and other aerial-sporing Hyphomycetes of submerged dead leaves | |
| US5231007A (en) | Efficient riboflavin production with yeast | |
| CS204303B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP7/274 CCM F-632 | |
| Bennett et al. | Isolation and characterization of two nonaflatoxigenic classes of morphological variants of Aspergillus parasiticus | |
| Shattock et al. | Mutants of Phytophthora infestans resistant to, and dependent upon, antibiotics | |
| CS204301B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Claviceps purpurea CP 7/5 CCM F-630 s produkcí alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu | |
| CS204302B1 (cs) | Průmyslová mutanta houby Clavic^ps purpurea GP7/63 CCM F-631 | |
| Bistis | Pleomorphism and growth cycles in Trichophyton mentagrophytes | |
| Erviö | Certain parasites of fungal sclerotia | |
| CS248612B1 (cs) | Průmyslový mutant houby Claviceps fusiformis W1 CC-1/85 | |
| Prihanto et al. | Trichoderma sp., a potential producer for L-asparaginase isolated from Sonneratia alba inAeng Sareh Beach, Madura | |
| Juricek et al. | High mutagenic activity of 3-azido-1, 2-propanediol (azidoglycerol, AG) in strain D7 of Saccharomyces cerevisiae | |
| CS245153B1 (en) | Strain of acremonium chrysogenum microorganism | |
| CN113604367B (zh) | 牛樟芝突变株e3-64及其在制备三萜中的应用 | |
| Shirane et al. | Mineral salt medium for the growth of Botrytis cinerea in vitro | |
| CS252603B1 (cs) | Průmyslový kmen houby Claviceps purpurea (Fr.) Tul. 59 CC 5/86 | |
| Lincoln et al. | Respiratory Pathogenicity of Bacillus anthracis Spores: III. Changes in Pathogenicity Due to Nutritional Modifications | |
| JPH0494693A (ja) | アフィジコリンの製造法 | |
| JP2916357B2 (ja) | 新規な醸造用酵母 | |
| Muntanjola-Cvetković et al. | Influence of light on hülle cell and aleuriospore formation in Aspergillus | |
| Jalajakshi | Plant Health Archives | |
| CN106978468B (zh) | 温室采集分离用玫烟色棒束孢分生孢子培养基及制备方法 | |
| Sumbria et al. | Studies on strain improvement of predacious fungi: Generation of mutant strains by random mutagenesis | |
| Khatun et al. | Induction of mutation in Neurospora Crassa using neem (Azadirachta Indica A. Juss) leaf extract |