CS203287B1 - Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu - Google Patents

Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu Download PDF

Info

Publication number
CS203287B1
CS203287B1 CS753777A CS753777A CS203287B1 CS 203287 B1 CS203287 B1 CS 203287B1 CS 753777 A CS753777 A CS 753777A CS 753777 A CS753777 A CS 753777A CS 203287 B1 CS203287 B1 CS 203287B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
gamma
solution
globulin
histamine
sterile
Prior art date
Application number
CS753777A
Other languages
English (en)
Inventor
Ivan Stepanek
Ladislav Jezek
Edita Mrazova
Alfred Stachy
Imrich Banda
Original Assignee
Ivan Stepanek
Ladislav Jezek
Edita Mrazova
Alfred Stachy
Imrich Banda
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ivan Stepanek, Ladislav Jezek, Edita Mrazova, Alfred Stachy, Imrich Banda filed Critical Ivan Stepanek
Priority to CS753777A priority Critical patent/CS203287B1/cs
Publication of CS203287B1 publication Critical patent/CS203287B1/cs

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

Léčba bronchiáíní astmy a respiračních alergóz se v poslední době zaměřuje na vývoj nových terapeutických preparátů a postupů. Jednou z nových vývojových linií js příprava gama-globulinového' preparátu s definovaným obsahem h stam nu.
Poznání, že jednou z příčin objevení se alergických příznaků u lidí je uvolnění histaminu, způsobilo zaměření pozornosti na pokus o terapeutické využití této skutečnosti.
Základní podmínkou pro klinckou efektivnost preparátu tohoto druhu je přesná a v úzkém koncentračním rozsahu definovaná koncentrace histaminu, která nesmí být tak vysoká, aby vyvolala alergické příznaky, ale ne tak nízká, aby nedokázala lidský organismus podnítit k nácviku metabolického odbourání volného histam nu.
Průmyslová příprava gama-globulinu se provádí v celcsvětovém měřítku převážně pomocí etanolové frakcionace lidské nativní plasmy nebo retroplacentárního séra (Cohn E. J, Gurd F. N. R, Surgenor D, M, Barnes B. A, Brown R. K, Derouaux G, Gillespie J. M, Kahnt F. W, Lever W. F, Liu C. H, Mittelman D,Mouton H. F, Gostling
G. L, Alberty R. A, Williams J. W.: }'. Biol. Chem. 164, 109, 1946; Oncley J. L, Melin M, Rickert D. A, Cameron J. W, Gross P. M.:
j. Am. Chem. Soc. 71, 541, 1.949; Nitschman
H. S, Kistler P, Lergier W.: Helv. Chim Acta 37, 866, 1954; Kistler P, Nitschman H. S.: Vox Sang. 7, 414, 1962; Taylor H. L, Bloom F. C, McCall K.B, Hyndman L. A, Anderson H. D.: J. Am. Chem. Soc. 78, 1356, 1956).
Technologický proces je zpravidla prováděn za aseptických podmínek a do doby konečného zpracování je izolovaný gama-globulin převážně přechováván ve formě bílkovinné pasty při nízkých teplotách.
Technologický postup může část některých nizkomolekulárnich slučenin s biochemicko-fyziologickou aktivitou v roztoku gama-globulinu, jako je například histamin, kccentrovat, tj. obohatit vzhledem k jejich koncentraci ve výchozí surovině, z které byl gama-globulin izolován.
Z aspektu přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu je závažnou skutečností výskyt proměnlivého obsahu histaminu vázaného na molekulu gama-globulinu u zdravé nealergoké populace (Laborde C, Parrot J. L, Sandor G.: C. R. Acad. Sci.) Paris (243, 3060, 1959; Parrot J. L, Laborde-Burtin C, Saindelle A.: Ann. Allergy 22, 511, 1364).
Až dosud se gama-globulin s definovaným obsahem histaminu připravoval tím způsobem, že se gama-globulinový roztok
-požadtováilé koncentrace smíchal s histamlncvým roztokem a takto vzniklá směs se sterilizovala filtrací přes'azbestocelulózový filtr, sterilně se rozplnila a zlyofilizovala. Příčinou těžkostí je chemísorpce stopových množství histaminu na filtrační vložku, což má za následek nehomogenní snížení koncentrace v hotovém preparátu v dané výrobní šarži;
Hodnota koncentrace histaminu ve 2 ml
0,6 + 0,1% roztoku gama-globulinu se má pohybovat v rozmezí 0,15 až 0,18 mlkrogramu. Nedostatkem dosud užívané technologie je skutečnost, že požadované hodnoty koncentrace histaminu nedosáhne v každém případě, což lze dokumentovat údajem, že z 20 připravených šarží pouze 25 % dosáhlo požadované hodnoty koncentrace, přičemž průměrná hodnota koncentrace histaminu byla ve 2 ml gama-globulinového roztoku 0,091'mikrogramů místo· požadovaného rozsahu 0,15 až 0,18 mikrogramů.
U nově navrhované technologie se tyto potíže nevyskytovaly a z 10 připravených šarží, podle vynálezu, každá dosáhla požadovaného koncentračního rozsahu, přičemž průměrná hodnota koncentrace histaminu byla v 2 ml směsného roztoku s gama-globulinem 0,169. mikrogramů.
Podstata způsobu přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu je podle vynálezu v tom, že bílkovinný materiál obsahující purifikovaný gama-globulin suspenduje za aseptických podmínek v takovém množství apyrogenní destilované vody o teplotě 0 °C až +6 °C, aby hodnota koncentrace bílkovin byla v rozmezí 2 % až 15 %, s optimem 7 % + 1 %, gama-globulinový roztok se vyčeří filtrací a separace od šarží k šarži měnící se koncentrace histaminu z gama-globulinového roztoku se provádí pomocí ěluční chromatografie, s vylučovací mezi gelu, vyjádřenou molekulovou hmotností nízkomolekulárních sloučenin, do 10 000 pomocí eluce s 0,1% až 3,0i% roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě, s optimem 0,45 % až 0,9 % chloridu sodného, o teplotě 0°C až 4-6oC s hodnotou pH v rozmezí 6,4 až 7,4, s optimem 6,95 + 0,05, při průtoku 0,01 ml až 3,0 ml, s optimem 0,05 ml až 1,0 ml, za minutu na cm2 výtokové plochy gelové části, přičemž z gelové chromatografické kolony vyteklý gama-globulinový roztok se buď sterilizuje filtrací a naředí se -za sterilních podmínek na žádanou hodnotu koncentrace gama-globulinu, například 0,5 % až 0,7 % bílkovin, se sterilním roztokem histaminu, který byl sterilizován autokiávováním, o známé požadované koncentraci, například 0,075 až 0,09 mikrogramů na 1 ml směsného roztoku, anebo se takové naředšní provádí za nesterilních podmínek a vzniklý směsný roztok o požadovaných parametrech se dodatečně sterilizuje radiační sterilizací a podrobí se dalšímu zpracování, například lyofilizací. Vynález je dále objasněn ma příkladech provedení, jimiž jeho rozsah není ani omezen, ani vyčerpán.
Příklad 1
Výchozí surovinou je pasta frakce II, izolovaná podle Cohna. Pasta frakce II se rozpouští v takovém množství destilované apyrogenní vody o teplotě 0 °C až +6 °C, aby hodnota koncentrace bílkovin byla v rozmezí 2 % až 15 %, s optimem 7 % + 1 %. Rozpouštění se urychluje mícháním. Po rozpuštění se gama-globulinový roztok vyčeří, například filtrací.
V technologických poměrech je výše uvedených podmínek zpravidla dosaženo tehdy, když rozpouštíme 1 kg gama-glohulinové pasty ve 2000 ml destilované apyrogenní vody o teplotě 0°C až -j-6°C. Hodnotu pH takto vzniklého gama-globulinového roztoku upravíme na 6,4 až 7,4,- s optimem 6,95 + + 0,05, například s 0,5 M roztokem hydroxidu sodného v destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až +6 °C.
Takto připravený roztok purifikovaného gama-globulinu se vyčeří, například filtrací, a nízkomolekulární sloučeniny spolu s histaminem se z roztoku odstraní eluční gelovou chromatografií, například na dextranových gelech, pod komerčním označením Sephadex G-25, G-50, na polyakrylamidových gelech, pod komerčním označením Biogel P-2, P-4, P-6, na metakrylátových gelech, pod komerčním označením P-40 Spheron, nebo na jiných materiálech, jako jsou například domácí vývojové materiály na bázi škrobu řetězeného s epichlorhydrinem na bázi perlové celulózy s vylučovací mezí gelu, vyjádřenou molekulovou hmotností nízkomolekulárních sloučenin do 10 000, přičemž uvedené materiály je nutno používat v optimálním zrnění, zaručujícím průtok pro technologické podmínky.
Nabotnalý gel promytý 0,1% až 3,0% roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě, s optimem 0,45 % až 0,9 % chloridu sodného, o teplotě 0 °C až +6 °C se plní do chromatografické kolony. Za optimální rozměry technologické gelově chromatografické kolony se považují takové, kde průměr kruhové nebo úhlopříčka čtvercové, popřípadě obdélníkové základní plochy k výšce kolony se pohybují v poměru 1: 5 až 1:10.
Do kolony necháme nasávat gama-globulinový roztok takovou rychlostí, aby se průtok spodní plochou kolony pohyboval mezi 0,01 ml až 3,0 ml, s optimem 0,05 ml až 1,0 ml, za minutu na plochu 1 cm2. Množství gama-globulinového roztoku nasazené na kolonu nemá překročit 25 % až 30 % objemu gelové části chromatografické kolony.
Po nasazení celého objemu gama-globulinového roztoku se chromatografická kolona promývá 0,1% až 3,0% roztokem chloridu sodného, s optimem 0,45 až 0,9 % chloridu sodného, v destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až +6 °C při zachování stejné průtokové rychlosti jako při nasávání.
Po výtoku gama-globulinového roztoku zbaveného nízkomolekulámích sloučenin se gelově chromatografická kolona promývá rychlostí 0,3 ml až 0,6 ml za minutu na cm2 minimálně lOnásobkem objemu své gelové části s 1 M roztokem chloridu sodného v apyrogenní destilované vodě o teplotě 0 °C až +6 °C. Potom se chromatografická kolona promyje minimálně 15násobkem objemu své gelové části s apyrogenní destilovanou vodou o teplotě 0 °C až +6 °C, přičemž lze oddělování nízkomolekulámích sloučenin spolu s hlstaminem z gama-globulinového roztoku na gelově chromatografické koloně po ekvillbrizaci s desetinásobkem objemu gelové části s 0,1% až 3,0% roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě, s optimem 0,45 % až 0,9 % chloridu sodného, opakovat.
Gama-globulinový roztok po eluci z gelově chromatografické kolony se zpravidla sterilizuje a naředí se za sterilních podmínek na žádanou hodnotu koncentrace gama-globulinu, například 0,5 % až 0,7 % bílkovin, se sterilním roztokem histaminu, který byl sterilizován autoklávováním, o známé požadované koncentraci, například 0,075 až 0,09 mikrogramu na 1 ml směsného roztoku. Lze provést i naředění gama-globulinového roztoku bezprostředně po eluci z kolony na požadovanou hodnotu gama-globulinu s nesterilním roztokem histaminu o známé požadované koncentraci a takto vytvořená směs se sterilizuje radiační sterili6 žací, směs se rozplní a podrobí se dalšímu zpracování, napřílad lyofilizaci.·
Numerické hodnoty uváděné jako optima jsou vhodné pro technologické provedení, které bylo úspěšně odzkoušeno.
Příklad 2
Výchozí surovinou může být bílkovinná pasta gama-globulinu nebo roztok izolovaný pomocí síranu amonného a hydroxidu hlinitého (Schultze Η. E., Matheka H. D.: Behringwerke Mitt. 28, 9, 1954; Schultze H. E., Schonenberger M., Matheka H. D.: Behringwerke Mitt. 26, 21, 1952), rivanolu (Hořejší J., Smetana R.: Acta Med. Scand. 155, 65, 1956), síranu sodného (Amiraian K., Leikhim E. J.: J. Immunol. 87, 301, 1961), chloridu hlinitého (Lewin J.: Therapie 9, 523, 1954), DEAE celulózy (Sober H. A., Peterson E. A.: Fed Proč. 17, 1116, 1958; Peterson E. A., Sober H. A.: J. Am. Chem. Soc. 78, 756, 1956), kyseliny kaprylové (Steinbuch M., Audran R.: Rev. Franc. D’etud. Clin. Biol. 14, 1054, 1969), iontů Zn++ a A1+ + + (Rejnek J., Škvařil F.: Coll. Czechoslov. Chem. Commun. 22, 1489, 1957; Rejnek J., Škvařil F.: Coll. Czechoslov. Chem. Commun. 23, 773, 1958), polymetafosfátu (Nitschman H. S., Rlckli R., Kistler P.: Vox Sang. 5, 232, 1960) nebo éteru [Pennell R. B., v Putnám F. W. (ed) The Plasma Proteins vol I Academie Press-New York 1960, str. 9). Bílkovinný materiál se zpracovává v dalším postupu jako v příkladu č. 1.
pRedmEt

Claims (4)

pRedmEt
1. Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu, vyznačující se tím, že se bílkovinný materiál obsahující purifikovaný gama-globulín suspenduje za aseptických podmínek v takovém množství destilované apyrogenní vody, o teplotě 0 °C až +6 °C, aby hodnota koncentrace bílkovin byla v rozemzí 2 % až 15 %, gama-globulinový roztok se vyěeří filtrací a separace od šarže k šarži se měnící koncentrace histaminu z gama-globulinového roztoku se provádí pomocí eluční chromatografie s vylučovací mezí gelu, vyjádřenou molekulovou hmotností nízkomolekulárních sloučenin do 10 000 pomocí eluce s 0,1% až 3,0% roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až +6 °C s hodnotou pH v rozmezí 6,4 až 7,4 při průtoků 0,01 ml až 3,0 ml za minutu na cm2 výtokové plochy gelové části, přičemž z gelové chromatografické kolony vyteklý gama-globulinový roztok se buď sterilizuje filtrací a naředí se za sterilních podmínek na žádanou hodnotu koncentrace gama-globulinu se sterilním roztokem hisYNÁLEZU taminu o požadované koncentraci, nebo se takové naředění provádí za nesterilních podmínek a vzniklý směsný roztok o požadovaných parametrech se dodatečně sterilizuje radiční sterilizací, směs se rozplní a podrobí se dalšímu zpracování, například lyofilizaci.
2. Způsob přípravy podle bodu 1, vyznačující se tím, že výchozí bílkovinný materiál se suspenduje na hodnotu koncentrace bílkovin v rozsahu 6 % až 8 %.
3. Způsob přípravy podle bodů 1 a 2, vyznačující se tím, že eluce gelově chromatografické kolony se provádí s 0,45 až 0,9% roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě při pH 6,90 až 7,00.
4. Způsob přípravy podle bodů 1, 2 a 3, vyznačující se tím, že se sterilní gama-globulinový roztok naředí za sterilních podmínek sterilním roztokem histaminu o koncentraci 0,075 až 0,09 mikrogramu na 1 ml směsného roztoku tak, aby výsledná koncentrace gama-globulinu byla v rozmezí 0,5 procenta až 0,7 % bílkovin.
Severografia, n. p., závod 7. Most
CS753777A 1977-11-16 1977-11-16 Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu CS203287B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS753777A CS203287B1 (cs) 1977-11-16 1977-11-16 Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS753777A CS203287B1 (cs) 1977-11-16 1977-11-16 Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS203287B1 true CS203287B1 (cs) 1981-02-27

Family

ID=5424692

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS753777A CS203287B1 (cs) 1977-11-16 1977-11-16 Způsob přípravy gama-globulinového roztoku s definovaným obsahem histaminu

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS203287B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69333724T2 (de) Hybrider menschlich-schweinlicher faktor viii
DE69920693T2 (de) Verfahren zur herstellung von immunoglobulinen zur intravenösen verabreichung und anderen immunoglobulin-produkten
JP2970911B2 (ja) ヒトのアルブミン溶液の安定化方法と、それによって得られた溶液
AT407115B (de) Verfahren zur herstellung eines konzentrates von standardisiertem, menschlichem von willebrand-faktor
DE3876600T2 (de) Plasma- und rekombinationsproteinformulierungen in einem milieu hoher ionenstaerke.
AU609899B2 (en) Plasma and recombinant protein formulations in low ionic strength media
DE68903558T2 (de) Verfahren zur inaktivierung von viren.
DE3886249T2 (de) Verfahren zur Ultrareinigung von Faktor VIII:C.
EP0047462A2 (de) Verfahren zur Kaltsterilisation von Blutgerinnungsfaktor VIII enthaltenden Präparaten
DE60207053T2 (de) Rekombinante gelatineartige proteine zur verwendung als plasmaexpander
CN109180776A (zh) 通过用微细分的二氧化硅处理去除丝氨酸蛋白酶
DE69326227T2 (de) Verfahren zur Isolation von hoch angereicherten Faktoren IX, X und II vom Prothrombin komplex oder menschlichem Plasma
KR890000165B1 (ko) 혈장분획을 열처리하는 방법
EP0784632A1 (de) Verfahren zur gewinnung von hochreinem von willebrand-faktor
CN106459140B (zh) 用于纯化免疫球蛋白的方法
AT514675A2 (de) Herstellung von faktor h (fh) und fh-derivaten aus plasma
DE2548636A1 (de) Antiseren und antikoerper mit spezifischer wirkung gegen krebszellenproteine, verfahren zu ihrer herstellung und arzneipraeparate
JPH08176010A (ja) 分配剤としてカプリル酸ナトリウムを用いる低温アルブミン分画
EP0309787B1 (de) Verfahren zur Herstellung eines hochreinen, virussicheren, biologisch aktiven Transferrinpräparates
SE452250B (sv) Sett att framstella ett koncentrat av protrombinkomplex
EP0270516B1 (de) Verfahren zur Herstellung einer Faktor VIII (AHF)-hältigen Fraktion
DE2715832A1 (de) Verfahren zur gewinnung von gereinigtem antihaemophilem globulin a (faktor viii)
DE3686390T2 (de) Verfahren zur herstellung vom antihaemophilfaktor (ahf) durch kaeltefaellung und zur verbesserung der loeslichkeit des hergestellten ahf-produktes.
DE69002033T2 (de) Gelfiltration von wärmebehandeltem Faktor VIII.
DE3888571T2 (de) Stabilisierung von biologischen und pharmazeutischen Produkten während der Inaktivierung von viralen und bakteriellen Keimen.