CS196212B2

CS196212B2 - Process for preparing anthracyclines

Info

Publication number: CS196212B2
Application number: CS774677A
Authority: CS
Inventors: Sergio Penco; Francesco Angelucci; Federico Arcamone
Original assignee: Farmaceutici Italia
Priority date: 1976-07-13
Filing date: 1977-07-13
Publication date: 1980-03-31
Also published as: AU509036B2; ATA492577A; US4131649A; BE856726A; FR2358420B1; IL52488A; DK312377A; AU2690277A; FR2358420A1; DE2731306C3; IL52488A0; YU169677A; GB1524468A; DE2731306A1; SE7708060L; CH632769A5; HU177512B; CA1091225A; AT352877B; NZ184602A

Description

Předmětem vynálezu je způsob výroby anthracyklinů, to jest glykosidů, kterých je možno použít při léčení nádorů u lidí.

Nové sloučeniny, které je možno připravit způsobem podle vynálezu, jsou deriváty daunorubicinu obecného vzorce I

ЛфЬо

kde

X znamená skupinu vzorce

R znamená skupinu —COCF3 nebo vodík.

Vynález se tedy týká způsobů výroby takovýchto glykosidů, který probíhá přes 9-desacetyl-9-keto-N-trifluoracetyldaunorubicin, neočekávaně stabilní meziprodukt, který je novou sloučeninou, kterýžto produkt se hydrogenuje borhydrldem alkalického kovu, načež se chrání aminoskupina zbytku cukru a takto chráněný derivát se pak oxiduje v poloze 9 jodistanem.

V dále uvedeném schématu je znázorněno převedení daunorubicinu (A) v 9-desacetyl-9-keto-N-trif luoracetyldaunorubicin (D).

19B212

О о

он о

ř сн₃о сн₃ он (А)

О

ОН (В) он

I

I снонсн₃

ОН о

о

О он к

СНОНСН, 'ОН

NH,.

I 4J(CF₃CO)_aO ф«сн₃он сн₃о

( С)

NHCOCF₃

	0 OH
	Ao
CH₃0	0 OH

(D)

NHC0CF₃ f/Na-JOtt

ОН он

О

О он

NHR

ОН н (Е): R znamená skupinu COCF3 (F j: R znamená skupinu COCF3 (G) : R znamená vodík (H) : R znamená vodík

V uvedeném schématu se karbonylová skupina v poloze 13 daunorubicinu (A) redukuje natriumborhydrldem v příslušný alkohol. Reakce se provádí ve vodě při teplotě místnosti za vzniku sloučeniny (B), která se izoluje v podobě hydrochloridu v přibližně

80% výtěžku. Aminaskupina zbytku cukru takto získaného diolu se chrání. N-trifluoracetylová skupina skýtá požadovanou ochranu a může být odstraněna za mírných podmínek, kterými zbývající část molekuly anthracyklinu není napadena.

N-trlfluoracetylace se provádí působením trifluoracetanhydrldu a následnou hydrolýzou. O-trifluoracetylové skupiny methanolem, přičemž se chráněný derivát (C) získá v 74% výtěžku. Oxidace derivátu (Cj se pro196212 vádí v terciárním butylalkoholu v přítomnosti 2 ekvivalentů jodlstanu sodného· po 2 hodiny při teplotě místnosti. Chráněný daunorubicin (D), který je nerozpustný v reakční směsi, se získá v přibližně. 50·% výtěžku. Sloučenina (D) se převede působením natriumborhydrldkyanldu · vzorce

NaBHíCN * za kyselých podmínek v epimerní směs sloučenin (E) a (F) v přibližném poměru 8: 1. Chromatografickým oddělením těchto sloučenin na sloupci kyseliny křemičité a následným zpracováním za mírných •alkalických podmínek k odstranění N-trifluoracetylové ochranné skupiny se získá 9-desacetyldaunorublcin (G) a 9-desacetyl-9-ěpi-ddunorubicin (H), které se izolují v podobě hydrochloridu.

Nové sloučeniny (G) a (H) se vyznačují antimitotickou účinností a lze jich použít jako· léčiv v léčení nádorových onemocnění u lidí.

Dále uvedené příklady vynález blíže objasňují, aniž by· však jakoliv omezovaly jeho rozsah.

Příklad 1

N-Trifluoracetyl-lS-dihydrodaunorublcin (C) (MAR 4)

U roztoku 3,0 g hydrochloridu daunorubicldu ve 300 ml vody se 0,1 N · vodným roztokem hydroxidu sodného upraví hodnota pH na 9,5, načež sej'· na roztok působí 7 minut při teplotě místnosti 0,3 g natriumborhydridu. Reakční směs se pak za intenzivního míchání vlije · do 750 ml vodné ·0,25 N kyseliny chlorovodíkové k odstranění nadbytku redukčního činidla. Pak se · pH roztoku upraví na hodnotu 8,6 · a roztok se extrahuje chloroformem tak dlouho, až extrakty již nejsou zbarveny. Organická fáze se vysuší bezvodým síranem sodným a za sníženého tlaku zahustí na objem 50 ml. Ke zbývajícímu zahuštěnému červenému rozteku, upravenému bezvodým methanohckým uhlovodíkem na pH 3,5 (na kongo-červeň) se přidá nadbytek diethyletheru, čímž se získá 2,8 g čistého 13--^iih^<^i’o^(^í^i^^orubicinu (B) v podobě hydrochloridu. ·

Na suspenzí 2,8 g sloučeniny (B) ve 300 mililitrech chloroformu se při teplotě 0 °C působí 1 hodinu 20 ml trinuoracetanhydridu. Reakční směs se odpaří do sucha za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 200 ml methanolu a vzniklý roztok se zneutralizuje nasyceným vodným · roztokem kyselého uhličitanu sodného. Po· 30 minutách při teplotě místnosti se rozpouštědlo oddestiluje za sníženého tlaku a vodný roztok se extrahuje chloroformem tak dlouho, až extrakty již nejsou zbarvené.

Organická fáze se promyje vodou a vysuší bezvodým síranem sodným, pak se zahustí na objem 30 ml a přidá se nadbytek petrol-. etheru, čímž se získá 2,3 g čistého N-trifluoracetyl-.11-dďhyddodaunorubicinu (C) o teplotě tání 164 až 166°G (za rozkladu). Chrómatografická analýza na tenké vrstvě Merckova silikagelu 60 F254 za · použití systému rozpouštědel chloroform/aceton (2:1 obj,/ /obj.): Rf · - 0,25

Příklad 2

9-Desacetyl-9-ketoiiN-trifluoracetyldaunorubicin (D) (MAR 18)

Na roztok 2,4 g sloučeniny (C) ve 120 ml terc.butylalkoholu · se působí roztokem 1,6 g jodistanu sodného· ve 120 ml vody. · Reakční směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Vyloučená sloučenina (D) se odfiltruje, promyje vodou a vysuší za sníženého· tlaku.

Získá se 1,4 g čisté sloučeniny (D) o teplotě tání 200 °C (za rozkladu). Chromatografická analýza na tenké vrstvě Merckova silikagelu 60 · F254 za použití systému rozpouštědel chloroform/aceton (2:1 obj./obj.): Rf = 0,57.

Analýza pro C27H24F3NO10

Vypočteno:

4,18 % H, 55,9 /O C;

Nalezeno:

4,26 % H, 55,6 % C.

P ř í k 1 a d 3

9-D^í^ž^(^^t^^^]idaunorubicin (G) (MAR 29) a

O-desacetyl^-epidaunorubicin (H) (MAR 30)

Roztok 1,7 g sloučeniny (D) ve 250 ml dloxanu a 50 ml vody se upraví vodnou 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 3, načež se na něj působí 24 hodiny při teplotě místnosti 1 g natriumborhydridkyanidu vzorce NaBHsCN, přičemž se udržují kyselé podmínky přidávání 1 N kyseliny chlorovodíkové. Pak se k reakční směsi přidá 300 ml vody a směs se 5krát extrahuje vždy 200 ml chloroformu. Organická fáze, promytá a vysušená síranem sodným, se· odpaří do sucha za sníženého tlaku. Zbytek (1 g), který obsahuje sloučeniny (E) a (F), se chromatografuje ná sloupci silikagelu za použití chloroformu se vzrůstajícím množstvím acetonu jakožto eluačním činidlem, přičemž še získá 0,85 g čisté sloučeniny (E) o teplotě tání 204 až 206 °C (za rozkladu), chromatografická analýza na tenké vrstvě Merckova silikagelu 60 F254 za použití systému rozpouštědel chloroform/aceton (2:1 obj./obj.): Rf = 0,44, a 0,1 g čisté sloučeniny (F) o teplotě tání 180 až 182°C (za rozkladu), R_f = 0,3 [stanoveno za stejných podmínek jako u sloučeniny (E)J. K hydrolýze N-tri fluor acetylové skupiny se sloučeniny (E) a (F) zpracují takto:

Přidá se 50 ml 0,1 N roztoku hydroxidu sodného po 30 minutách při teplotě 0 °C se hodnota pH upraví přidáním 0,1 N kyseliny chlorovodíkové na 8,4 a roztok se několikrát promyje chloroformem. Spojené extrakty se vysuší bezvódým síranem sodným a za sníženého tlaku zahustí na objem 20 ml. Z roztoku se přidáním stechiometrického množství methanolického chlorovodíku a diethyletheru vyloučí červená sraženina, která se odfiltruje, promyje diethyletherem a vysuší za sníženého’tlaku. Sloučenina (G) má teplotu tání v rozmezí 166 až 167 °C (za rozkladu); [ιαΊο²⁵ = 282° (c =' 0,15, v methanolu); chromatografická analýza na tenké vrstvě Merckova silikagelu se systémem rozpouštědel chloroform/ačeton (13 : 6 :1 obj./ /obj.) : R_f ='0,55.

Análýza pro S23H27NO9. HC1

Vypočteno:

5,42 0/0 H, 57,52 % C, 2,68 ·0/₀ N;

Nalezeno:

5,45 % H, 57,16 % C, 2,42 «/o N.

Sloučenina (H) má teplotu tání 176 °C (za rozkladu), R_f = 0,4 [stanoveno za stejných podmínek jako u sloučeniny (G)].

Ta bu1 к a 1

Aktivita doxorubicinu (NSC 123127), 9desacetyldaunorubicinu (G) (NSC 268708) a 9-desacetyl-9-epi-daunorubicinu (H) (NSC 268709 J na Iymfocytickuu leukémii Г 388 u samečků myší C. D. F. (nádorové inokulum 10⁶ buněk, intraperitoneálně). Intraperito· neální ošetření od 1. do 9. dne ^{a) b)}

Sloučenina	Dávka mg/kg	т/с^ь>
doixorubicin	4	83
	2	180
	1	171
	0,5	142
•	0,25	152
(G)	25	73
	12,5 6,25	228
	180
	3,13	174
	1,56	155
(H)	25	66
	12,5	66
	6,25	171
	3,13	157
	1,56	142

^B) Pokus č. 4108 — Údaje byly získány podle předpisu NCI. Zařízení: A. D. Little lne. ^b) Průměrná doba přežitá, vyjádřsna jako· '% neošetřených kontrolních zvířat.

Tabulka 2

Účinnost doxorubicinu (NSC-123127) a 9-desacetyldaunorubiciriu (G) (NSC 268708) na lymfocytickou leukomil P 399 u samečků myši C.D.F.i (tumorové inokulum 10⁶ buněk, intraperitoneálně). Ošetření 5., 9. a 13. dne ^a)

Sloučenina

Dávka mg/kg _T/c^b>

doxorubicin (G.)

113

37,5

18,8

9,4

4,7

120

163

136

125

116

181

136

145

133

109 ^a) Pokus č. 4832 — Údaje byly získány podle předpisu NCI. Zařízení: A. D. Little lne.

^b) Průměrná doba přežitá, vyjádřeno jako· % neošetřených kontrolních .zvířat.

Claims

PŘEDMĚT VYNALEZU

Způsob výroby anthracyklinů obecného vzorce I

O OH kde

X znamehá skupinu vzorce kabo \ /

H

OH <a.

Ή

R znamená skupinu —COCF3 nebo vodík, vyznačující se tím, že se N-trifluoracetyl-13-dihydrodaunorublcin vzorce v terc.butylalkoholu oxiduje dvě hodiny v přítomnosti dvou ekvivalentů jodistanu sodného při ' teplotě místnosti za vzniku 9-desacetyl-9-keton-N-trifluoracetyldaunorubicinu (D) který se působením natriumborhydridkyanidu vzorce

NaBH3CN po dobu 24 hodin při teplotě místnosti za kyselých podmínek převede v epimerní směs N-trifluoracetylderivátů 9-desacetyldaunorubicinu a 9-desacetyl-9-epidaunorubicinu, načež se jednotlivé epimerní sloučeniny směsi oddělí chromatograficky na ' sloupci silikagelu za použití chloroformu se zvyšujícím se množstvím acetonu jakožto eluačního ' činidla a N-trifluoracetylová skupina jednotlivých epimerních sloučenin se odštěpí hydrolyticky působením 0,1 N roztoku hydroxidu sodného po* 30 minut při' teplotě 0°C, čímž se získají volné zásady sloučenin obecného vzorce I, kde R znamená vodík, které se izolují jako hydrochloridiy.