CN212174953U - 一种生化反应试管及基因扩增试剂盒 - Google Patents

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周中人
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Abstract

本实用新型公开了一种生化反应试管，包括管体及盖体，管体上设有固定受托部；管体包括两腔体，在盖体扣紧管体密闭后，两腔体的顶部能相互连通；第一腔体的底部相比第二腔体的底部至少凸出3mm，当管体底部被插入生化反应仪器内时，能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测。本实用新型还公开了一种基因扩增试剂盒本实用新型的生化反应试管可以解决核酸扩增产物的污染问题。

Description

一种生化反应试管及基因扩增试剂盒
技术领域
本实用新型属于生物工程领域，具体地说，是关于一种生化反应试管及其基因扩增试剂盒。
背景技术
在常规的小型生化反应中，一般是单个的试管内设置一个腔体并放置一种溶液，当需要多个溶液参与反应时，将不同试管的溶液吸取后加入其它反应试管。当存在一些特殊原因如试剂污染时，可在试管内设置一个挡板将试管分隔为两部分，分别将A/B两个溶液放置在同一个试管的不同腔体内，在不开盖的情况下将A/B溶液进行混合反应，避免了试剂外泄污染。
核酸扩增如PCR反应的最大特点是具有较大的扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，当实验室样本和扩增目标经常出现大量相同的情况时，核酸气溶胶污染在实验区域内不断累积，污染风险不断增加，假阳性的发生频率也会越来越高。PCR技术的高扩增效率产生的核酸气溶胶污染，会导致检测结果的假阳性。假阳性意味着实验不可信，并且直接造成实验室经济损失。更严重的是，如果形成气溶胶污染，则可引起整个PCR实验室的污染，甚至要关闭实验室。
PCR扩增产物污染是最主要最常见的污染。极微量的PCR产物污染就可造成假阳性。最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。气溶胶是悬浮于气体介质中粒径一般为0.001μm～1000μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态散体系。核酸气溶胶即DNA/RNA气溶胶，是分散并悬浮在气体介质中的核酸聚合物，广泛存在于实验室桌面、仪器、耗材以及空气中，据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝。核酸气溶胶与PCR过程相伴相生，操作时空气与液体面摩擦，离心机离心，剧烈地摇动反应管，反应管开盖，吸样时及移液器的反复吸样，污染物的外泄等途径，都会产生核酸气溶胶。
除了PCR扩增方法外，目前核酸恒温扩增方法也逐步进入实验室。目前主要包括以下几种：环介导恒温扩增(loop－mediated isothermal amplification， LAMP)、切口酶核酸恒温扩增(nicking enzyme mediated amplification，NEMA)、链替代扩增(stranddisplacement amplification，SDA)、滚环扩增(rolling circle amplification，RCA)、依赖解旋酶的恒温基因扩增(helicase－dependent isothermal DNA amplification，HAD)、转录依赖的扩增系统(transcription－based amplification system，TAS)、依赖核酸序列的扩增(NASBA)又称自主序列复制系统(self－sustained sequence replication，3SR)、QB复制酶扩增(Q－beta replicase －amplified assay)等。恒温扩增摆脱了热循环的限制，使其应用范围大大增加，而且目前应用的恒温扩增方法都有较高的敏感性和特异性，在核酸检测中应用范围非常广。但敏感性高会带来扩增物污染和假阳性的问题，从而导致反应结果判读不准确。
将核酸反应产物与样品来源的核酸进行差异化，从核酸反应试剂组分中来解决污染问题是很多试剂厂家在努力的方向，其中UNG酶的预防作用日益受到重视和肯定。在PCR产物或引物中用dU代替dT。这种dU化的PCR产物与UNG 一起孵育，因UDG可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键，可除去dU 而阻止Taq-DNA聚合酶的延伸，从而失去被再扩增的能力。UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶，而对RNA中的尿嘧啶和单一尿嘧啶分子则无任何作用。在扩增反应中用dUTP代替dTTP，使产物中掺入大量dU。在再次进行PCR扩增前，用UNG处理PCR混合液即可消除 PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可被灭活，因此不会影响含dU的新的PCR产物。但是由于酶的反应效率有限而消化反应时间往往只有5分钟，这种方式一般只能用UNG处理PCR混合液中的轻度PCR产物污染，不能彻底解决问题。
合成引物时以dU代dT，这样PCR产物中仅5ˊ端带dU。UNG处理后，引物失去了结合位点而不能扩增。对长片段(1-2kb以上)的扩增用dUTP法效率较用dTTP低，而用dU法就可克服这一缺点。dU引物最好将dU设计在3ˊ端或近ˊ端。该法仅能用于引物以外试剂处理。
目前的UNG酶污染方法只是关注了在核酸扩增反应前对扩增产物的酶解处理，没有考虑过在核酸扩增反应后直接将扩增产物进行酶解处理。
实用新型内容
为了解决上述问题，本实用新型的第一个目的是提供一种生化反应试管。本实用新型的第二个目的是提供一种基因扩增试剂盒。本实用新型的第三个目的是提供一种所述生化反应试管的使用方法。
为实现上述目的，本实用新型采用如下技术方案：
作为本实用新型的第一个方面，一种生化反应试管，包括管体及盖体，管体包括设于管体上的固定受托部，该固定受托部与生化反应仪器相匹配，所述固定受托部属于对称的圆柱体，可任意角度插入生化反应仪器中固定；所述管体包括第一腔体和第二腔体，在盖体扣紧管体密闭后，第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通，第一腔体底部相比第二腔体底部至少凸出3mm，当固定受托部能被插入生化反应仪器内时，能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测；或者，
所述固定受托部属于非对称的柱体，只能单一角度插入生化反应仪器中固定；所述管体包括第一腔体和第二腔体，在盖体扣紧管体密闭后，第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通，当固定受托部能被插入生化反应仪器内时，第一腔体内的生化反应溶液能被从单一方向的生化反应仪器中的传感器采集光学信号检测反应结果。
根据本实用新型，所述生化反应试管的第一腔体的底部溶液在固定受托部被生化反应仪器进行接触式传导加热，而第二腔体的底部溶液不被传导加热。
根据本实用新型，所述生化反应试管的第二腔体底部溶液被接触式传导加热，而第一腔体的底部溶液不接触热源。
根据本实用新型，所述生化反应试管靠近开口的管体柱状内壁的圆周面上设有上下两个凹槽；所述盖体的外周设有高低两个凸起密封环；当盖体被插入管体闭合时，所述盖体的高位置凸起密封环与管体内上下两个凹槽都能配合密封，例如，高位置凸起密封环与上凹槽配合；或者，高位置凸起密封环与下凹槽配合密封，低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。当高位置凸起密封环与上凹槽配合时，所述盖体较容易重复开启；当高位置凸起密封环与下凹槽配合密封，低位置凸起密封环与上凹槽配合密封后，上下两个凹槽对两个凸起密封环有较大阻力，不容易被再次揭开盖体。
根据本实用新型，生化反应试管的盖体与管体闭合后，除连接铰合条外，盖体顶面的外边缘没有超出管体顶部边缘的任何部分。
根据本实用新型，生化反应试管的盖体与管体闭合后，在连接铰合条的对面，盖体顶面的外边缘伸出管体顶部边缘一定长度的凸起作为操作人员揭开盖体的辅助部件；当生化反应试管的材质为塑料时，该盖体的凸起的厚度不超过0.4mm，当盖体被插入管体密封闭合时，高位置凸起密封环与下凹槽配合密封，低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。当盖体的高位置凸起密封环与管体内的下凹槽、低位置凸起密封环与上凹槽都配合密封后，操作人员从该凸起去揭开盖体时，凸起部分受力后会弯曲变形，盖体不容易被打开。
根据本实用新型，第一腔体的凸出底部主体是一个长筒或柱形结构，第二腔体设置在第一腔体外侧的环形腔体内，第二腔体的溶液处在管体内壁与第一腔体外壁间的夹套内；
第一腔体的底部设置了与标准PCR管底部一致的锥形体结构，能匹配标准的PCR仪器加热座内孔。
根据本实用新型，所述盖体的内底面上设置了一个空心柱体，该空心柱体至少与盖体的外顶面接通作为上部开口，盖子顶面上设置了带不干胶的封口膜将上部开口封闭，操作人员可将封口膜揭开后从上部开口向空心柱体内腔添加生化反应溶液；和/或，
所述空心柱体朝向管内的底面被接通作为下部开口；空心柱体的底面上被容易被戳破的封口膜将下部开口封闭，封口膜材质可以是带封口粘贴材质的铝箔或其他膜材。
根据本实用新型，所述的生化反应试管还包括盖体内底面上设置的一个上下开口接通的空心柱体，空心柱体的底面上设有容易被戳破的封口膜，以将空心柱体的下部开口封闭；还包括一个能与空心柱体内壁过盈配合的柱形盖子；在柱形盖子的外壁设有至少一个凸起密封环，空心柱体内壁的上设有至少一个凹槽；当柱形盖子从开口方向插入空心柱体时，柱形盖子将空心柱体下部开口的封口膜捅破，凸起密封环与凹槽由于过盈配合产生密封效果。
根据本实用新型，第一腔体的长筒或椎体顶部的内径范围在1.5-8mm,第二腔体顶部的内径范围在5-15mm。
根据本实用新型，所述生化反应试管还包括一种对试管内溶液进行接触式温度传导控制的金属温浴仪器，能进行一定数值的温度设定，能让温度按设定条件在一定数值稳定保持或进行多个温度之间进行循环变动。
根据本实用新型，所述生化反应试管还包括一种对试管内溶液进行接触式温度传导控制的生化反应光学检测仪，该生化反应光学检测仪对试管内溶液进行温度传导时采集管内生化反应溶液的光学信号。
作为本实用新型的第二个方面，一种基因扩增试剂盒，包括上述所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置含dUTP的核酸扩增试剂，在一定温度条件控制下完成核酸扩增反应使扩增产物中掺入一定量dU，第二腔体或第一腔体内放置UNG酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂受热完成扩增反应后，另一个腔体内的UNG酶的反应活性仍然保持良好，将反应管盖子朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的预先添加的UNG酶溶液，或预先加入溶解了固化在第二腔体或第一腔体内的UNG酶的溶液，将与另一个腔体(第一腔体或第二腔体)内的扩增产物溶液混合，酶解掺入dU的核酸产物。
作为本实用新型的第三个方面，一种基因扩增试剂盒，包括上述所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置含核酸内切酶对应内切序列的核酸扩增引物及其扩增试剂，在一定温度条件控制下完成掺入某种内切酶对应内切序列的核酸产物扩增，第二腔体或第一腔体内放置相应的内切酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂反应完成后，将盖体朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的内切酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的内切酶的溶液，将与另一个腔体(第一腔体或第二腔体)内的扩增产物溶液混合，酶解掺入内切序列的核酸产物。
作为本实用新型的第四个方面，一种基因扩增试剂盒，包括上述所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置核酸扩增引物及其扩增试剂，在一定温度条件控制下完成产物扩增，第二腔体或第一腔体内放置相应的核酸酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂反应完成后，将盖体朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的核酸酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的核酸酶的溶液，将与另一个腔体(第一腔体或第二腔体)内的扩增产物溶液混合，酶解核酸产物。
作为本实用新型的第五个方面，一种如上述所述的生化反应试管的使用方法，包括如下步骤：
(1)将PCR核酸扩增试剂放入第一腔体，将切断PCR扩增产物的酶溶液放入第二腔体；
(2)将生化反应试管插入扩增核酸的PCR仪器进行温度控制，此时只有第一腔体的溶液受到温度传导，第二腔体不与仪器的传热部件接触；
(3)当核酸扩增反应结束后，将拔出的生化反应试管倒放后，第一腔体和第二腔体内的两种溶液混合，并将生化反应试管倒放在适合酶进行产物分解温度的环境中保温直至扩增产物被分解完毕。
作为本实用新型的第六个方面，一种如上述所述的生化反应试管的使用方法，包括如下步骤：
(1)将核酸扩增试剂放入第二腔体，将分解核酸扩增产物的酶溶液放入第一腔体；
(2)将试管插入扩增核酸的扩增仪器进行温度控制，此时只有第二腔体的溶液受到温度传导，第一腔体内溶液不被扩增仪器加热部件传热；
(3)当核酸扩增反应结束后，将拔出的生化反应试管倒放后，将第一腔体和第二腔体内的两种溶液混合，并将生化反应试管倒放在适合酶进行产物分解温度的环境中保温直至扩增产物被分解完毕。
作为本实用新型的第七个方面，一种如上述所述的生化反应试管的使用方法，包括如下步骤：
(1)将核酸扩增试剂放入第一腔体，将分解核酸扩增产物的酶溶液放入第二腔体；
(2)将试管插入扩增核酸的荧光检测仪器进行温度控制，此时第一腔体的溶液受到温度传导产生扩增反应；
(3)当核酸扩增反应结束后，将拔出的生化反应试管倒放后，将第一腔体、第二腔体内的两种溶液混合，并将生化反应试管倒放在适合酶进行产物分解温度的环境中保温直至扩增产物被分解完毕。
本实用新型的有益效果：本实用新型的生化反应试管设置不同腔体来放置不同的反应组分及溶液,而且不同腔体的高低位置不同；当低位置的反应腔体被独立加热完成生化反应并能被仪器采集相关生化反应信号如荧光信号；高位置腔体的反应组分及溶液相比低位置腔体的反应组分及溶液，其耐热性能较差，但高位置腔体不被加热，因此其反应组分及溶液能稳定存活，或者反过来，当高位置的腔体溶液被独立加热时，低位置的腔体溶液不被直接加热；当将试管倒置摇晃时，两个腔体的溶液能混合在一起后进一步反应，消除有害结果；如将不同腔体中的核酸降解酶溶液与核酸扩增产物溶液混合后能将扩增产物进行降解，避免扩增产物溶液外泄污染操作环境。
附图说明
图1为本实用新型的生化反应试管的剖视图示意图。
图2为本实用新型的生化反应试管的结构示意图。
图3为本实用新型的生化反应试管的另一结构示意图。
图4为本实用新型的生化反应试管的俯视图示意图。
图5为本实用新型的生化反应试纸条管的盖体的结构示意图。
图6为本实用新型的生化反应试纸条管的盖体的另一结构示意图。
图7为带有金属温浴仪器的生化反应试管的结构示意图。
图8为带有生化反应光学检测仪的生化反应试管的结构示意图。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本实用新型作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本实用新型而非用于限定本实用新型的范围。
实施例1
如图1和图2所示，为本实用新型的一种生化反应试管，属于PCR反应管，包括管体10及盖体20，管体10包括设于管体上的固定受托部11，该固定受托部11与PCR扩增仪加热座相匹配，使用时，可以搭设在PCR扩增仪加热座上，所述固定受托部11属于对称的柱体或椎体，可任意角度插入PCR扩增仪加热座中固定；所述管体10包括第一腔体1和第二腔体2，在盖体20扣紧管体10密闭后，第一腔体1与第二腔体2的顶部与盖体20之间具有适当的空隙，以使第一腔体1和第二腔体2能相互连通，第一腔体1的底部相比第二腔体2的底部至少凸出3mm，当固定受托部11被插入PCR扩增仪加热座内时，能从第一腔体1 的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测。
所述管体10的第一腔体1的底部溶液被PCR扩增仪加热座进行接触式传导加热，而第二腔体2的底部溶液不被传导加热；或者，
所述管体10的第二腔体2的底部溶液被接触式传导加热，而第一腔体的底部溶液不被传导加热。
如图1-3所示，所述生化反应试管靠近开口的管体柱状内壁的圆周面上设有上凹槽3和下凹槽4；所述盖体20的外周设有高位置凸起密封环21和低位置凸起密封环22；当盖体20被插入管体10闭合时，所述盖体20的高位置凸起密封环21与管体10内的上凹槽3和下凹槽4都由于一定的过盈配合而被密封，例如，高位置凸起密封环21与上凹槽3配合；或者，高位置凸起密封环21与下凹槽4 配合密封，低位置凸起密封环22与上凹槽3配合密封。当高位置凸起密封环21 与上凹槽3配合时，所述盖体20较容易重复开启；当高位置凸起密封环21与下凹槽4配合密封，低位置凸起密封环22与上凹槽3配合密封后，上下两个凹槽与两个凸起密封环的过盈配合产生较大阻力，不容易被再次揭开盖体20。
如图2所示，生化反应试管的盖体20与管体10闭合后，除连接铰合条30 外，盖体顶面的外边缘没有超出管体顶部边缘的任何部分，因此当高位置凸起密封环21与下凹槽4配合密封，低位置凸起密封环22与上凹槽3配合密封后，操作人员即使想揭开盖子，手指几乎无处用力。
如图3和图4所示，生化反应试管的盖体20与管体10闭合后，在连接铰合条3的对面，盖体顶面的外边缘伸出管体顶部边缘一定长度的凸起23作为操作人员揭开盖体20的辅助部件；当生化反应试管的材质为塑料时，该盖体20的凸起23的厚度不超过0.4mm，所述凸起23的厚度小于盖体20顶面的厚度。管体 10和盖体20密封闭合时，高位置凸起密封环21与下凹槽4配合密封，低位置凸起密封环22与上凹槽3配合密封。当盖体20的高位置凸起密封环21与管体 10内的下凹槽4、低位置凸起密封环22与上凹槽3都配合密封后，操作人员从该凸起23去揭开盖体20时，凸起23受力后会弯曲变形，盖体20不容易被打开，从而更好的防止管内生化反应溶液泄露。
如图4所示，第一腔体1的凸出底部主体是一个柱形或椎体结构，第二腔体 2设置在第一腔体1的外侧的环形腔体内，第二腔体2的溶液处在管体内壁与第一腔体1的外壁间的夹套内；第一腔体的底部设置了与标准PCR管底部一致的锥形体结构，能匹配标准的PCR扩增仪的加热座内孔。
第一腔体的长筒或椎体顶部的内径范围在1.5-8mm,第二腔体顶部的内径范围在5-15mm。
当第二腔体2处于第一腔体1的中心位置,但从第一腔体1的外壁到第二腔体2的内壁的间距偏小,不便于移液枪枪头的枪尖第二腔体2内添加溶液,则所述第一腔体1优选的设置于第二腔体2的底面的偏心位置，因此当一侧的间距缩小时,另一侧的间距加大以致移液枪枪头的枪尖较深地插入第二腔体2，让溶液顺利进入腔体，避免操作人员操作不小心时溶液跨越腔体间挡板进入其他腔体。
如图5所示，所述盖体20的内底面上设置了一个空心柱体24。该空心柱体 24至少与盖体20的外顶面接通作为上部开口，盖子20的顶面上设置了带不干胶的上封口膜25将上部开口封闭，操作时，可将上封口膜25揭开后从上部开口向空心柱体内腔添加生化反应溶液。
该空心柱体24朝向管内的底面也被接通作为下部开口；空心柱体24的底面上被容易被戳破的下封口膜26将下部开口封闭，下封口膜26的材质可以是带封口粘贴材质的铝箔或其他膜材。使用时，操作人员可从上部开口将下封口膜26 戳破后，让空心柱体24的内腔添加的生化反应溶液流入试管内，然后再将上封口膜25再封闭。
如图6所示，为本实施例的盖体20的另一个方案，盖体20的内底面上设置的一个上下开口接通的空心柱体24，空心柱体24的底面上设有容易被戳破的下封口膜26，以将空心柱体24的下部开口封闭；还包括一个能与空心柱体24的内壁过盈配合的柱形盖子27；在柱形盖子27的外壁设有至少一个凸起密封环(图上未示出)，空心柱体24的内壁的上设有至少一个凹槽(图上未示出)；柱形盖子27的外径小于空心柱体24的内径，当柱形盖子27从开口方向插入空心柱体24时，柱形盖子27将空心柱体24的下部开口的下封口膜26捅破，凸起密封环与凹槽由于过盈配合产生密封效果。
所述柱形盖子27包括柱形管271和设于柱形管上方的盖板272，当柱形盖子27的凸起密封环与空心柱体24的凹槽配合时，柱形盖子的柱形管271的底端恰好置于下封口膜26上。使用时，可以打开柱形盖子27的盖板272，往柱形盖子27的柱形管271内放置某种生化反应组分或溶液，当柱形盖子27从开口方向插入空心柱体24并捅破空心柱体24的下部开口的下封口膜26时，其反应组分或溶液就与试管内的溶液进行混合，产生进一步的生化反应，如柱形盖子27内放置核酸降解酶，将试管内的核酸扩增产物降解。
如图7所示，所述生化反应试管还包括一种对试管内溶液进行接触式温度传导控制的金属温浴仪器40，能进行一定数值的温度设定，能让温度按设定条件在一定数值稳定保持或进行多个温度之间进行循环变动。
如图8所示，所述生化反应试管还包括一种对试管内溶液进行接触式温度传导控制的生化反应光学检测仪50，该生化反应光学检测仪对试管内溶液进行温度传导时采集管内生化反应溶液的光学信号。
实施例2
本实施例与实施例1的区别在于：
如图1和图3所示，一种生化反应试管，包括管体10及盖体20，管体10 包括设于管体上的固定受托部11，该固定受托部11与生化反应仪器相匹配，使用时，可以搭设在生化反应仪器上，所述固定受托部11属于非对称的柱体，只能单一角度插入生化反应仪器中固定；所述管体10包括第一腔体1和第二腔体 2，在盖体20扣紧管体10密闭后，第一腔体1与第二腔体2的顶部能相互连通，当固定受托部11被插入生化反应仪器内时，第一腔体1内的生化反应溶液能被从单一方向的生化反应仪器中的传感器采集光学信号检测反应结果。
实施例3实施例1和实施例2所述的生化反应试管的应用
一种基因扩增试剂盒，包括上述所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置含dUTP的核酸扩增试剂，在一定温度条件控制下完成核酸扩增反应使扩增产物中掺入一定量dU，第二腔体或第一腔体内放置UNG酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂受热完成扩增反应后，另一个腔体内的UNG 酶的反应活性仍然保持量好，将反应管盖子朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的预先添加的UNG酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的UNG酶的溶液，将与另一个腔体内的扩增产物溶液混合，酶解掺入dU的核酸产物。
实施例4实施例1和实施例2所述的生化反应试管的应用
一种基因扩增试剂盒，包括上述所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置含核酸内切酶对应内切序列的核酸扩增引物及其扩增试剂，在一定温度条件控制下完成掺入某种内切酶对应内切序列的核酸产物扩增，第二腔体或第一腔体内放置相应的内切酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂反应完成后，将盖体朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的内切酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的内切酶的溶液，将与扩增产物溶液混合，酶解掺入内切序列的核酸产物。
实施例5实施例1和实施例2所述的生化反应试管的应用
一种基因扩增试剂盒，包括上述所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置核酸扩增引物及其扩增试剂，在一定温度条件控制下完成产物扩增，第二腔体或第一腔体内放置相应的核酸酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂反应完成后，将盖体朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的核酸酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的核酸酶的溶液，将与扩增产物溶液混合，酶解核酸产物。
实施例6实施例1所述的生化反应试管的使用方法，包括如下步骤：
(1)将PCR扩增试剂放入第一腔体，将切断PCR扩增产物的酶溶液放入第二腔体；
(2)将生化反应试管插入扩增核酸的PCR仪器进行温度控制，此时只有第一腔体的溶液受到温度传导，第二腔体不与仪器的传热部件接触；
(3)当核酸扩增反应结束后，将拔出的生化反应试管倒放后，第一腔体和第二腔体内的两种溶液混合，并将生化反应试管倒放在适合酶进行产物分解温度的环境中保温直至扩增产物被分解完毕。
实施例7实施例1和实施例2所述的生化反应试管的使用方法，包括如下步骤：
(1)将核酸扩增试剂放入第二腔体，将分解核酸扩增产物的酶溶液放入第一腔体；
(2)将试管插入扩增核酸的扩增仪器进行温度控制，此时只有第二腔体的溶液受到温度传导，第一腔体内溶液不被扩增仪器加热部件传热；
(3)当核酸扩增反应结束后，将拔出的生化反应试管倒放后，将第一腔体和第二腔体内的两种溶液混合，并将生化反应试管倒放在适合酶进行产物分解温度的环境中保温直至扩增产物被分解完毕。
实施例8实施例2所述的生化反应试管的使用方法，包括如下步骤：
(1)将核酸扩增试剂放入第一腔体，将分解核酸扩增产物的酶溶液放入第二腔体；
(2)将试管插入扩增核酸的荧光检测仪器进行温度控制，此时第一腔体的溶液受到温度传导产生扩增反应；
(3)当核酸扩增反应结束后，将拔出的生化反应试管倒放后，将第一腔体、第二腔体内的两种溶液混合，并将生化反应试管倒放在适合酶进行产物分解温度的环境中保温直至扩增产物被分解完毕。
以上显示和描述了本实用新型的基本原理、主要特征和本实用新型的优点。本行业的技术人员应该了解，本实用新型不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本实用新型的原理，在不脱离本实用新型精神和范围的前提下本实用新型还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本实用新型范围内。本实用新型要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims (14)

1.一种生化反应试管，包括管体及盖体，其特征在于，管体包括设于管体上的固定受托部，所述固定受托部属于对称的圆柱体，可任意角度插入生化反应仪器中固定；所述管体包括第一腔体和第二腔体，在盖体扣紧管体密闭后，第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通，其中，第一腔体底部相比第二腔体底部至少凸出3mm，当固定受托部能被插入生化反应仪器内时，只能从第一腔体的底面或邻近底面的侧面对腔体内溶液的生化反应结果进行光学信号采集检测；或者，
所述固定受托部属于非对称的柱体，只能单一角度插入生化反应仪器中固定；所述管体包括第一腔体和第二腔体，在盖体扣紧密闭后，第一腔体与第二腔体的顶部能相互连通，当固定受托部能被插入生化反应仪器内时，第一腔体内的生化反应溶液能被从单一方向的生化反应仪器中的传感器采集光学信号检测反应结果。
2.如权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，该生化反应试管的第一腔体或第二腔体底部溶液在固定受托部被生化反应仪器进行接触式传导加热，而第二腔体或第一腔体的底部溶液不接触热源。
3.如权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述生化反应试管靠近开口的管体柱状内壁的圆周面上设有上下两个凹槽；所述盖体的外周设有高低两个凸起密封环；当盖体被插入管体闭合时，高位置凸起密封环与上凹槽配合；或者，当盖体被插入管体闭合时，高位置凸起密封环与下凹槽配合密封，低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。
4.如权利要求3所述的生化反应试管，其特征在于，生化反应试管的盖体与管体闭合后，除连接铰合条外，盖体顶面的外边缘没有超出管体顶部边缘的任何部分。
5.如权利要求3所述的生化反应试管，其特征在于，生化反应试管的盖体与管体闭合后，在连接铰合条的对面，盖体顶面的外边缘伸出管体顶部边缘一定长度的凸起作为操作人员揭开盖体的辅助部件；当生化反应试管的材质为塑料时，该盖体的凸起的厚度不超过0.4mm，当盖体被插入管体闭合时，高位置凸起密封环与下凹槽配合密封，低位置凸起密封环与上凹槽配合密封。
6.如权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，第一腔体的凸出底部主体是一个长筒或柱形结构，第二腔体设置在第一腔体外侧的环形腔体内，第二腔体的溶液处在管体内壁与第一腔体外壁间的夹套内；
第一腔体的底部设置了与标准PCR管底部一致的锥形体结构，能匹配标准的PCR仪器加热座内孔。
7.如权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述盖体的内底面上设置了一个空心柱体；该空心柱体至少与盖体的外顶面接通作为上部开口，盖子顶面上设置了带不干胶的封口膜将上部开口封闭；和/或，
该空心柱体朝向管内的底面被接通作为下部开口；空心柱体的底面上被容易被戳破的封口膜将下部开口封闭，封口膜材质为带封口粘贴材质的铝箔。
8.如权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于,它还包括盖体内底面上设置的一个上下开口接通的空心柱体，空心柱体的底面上设有容易被戳破的封口膜；还包括一个能与空心柱体内壁过盈配合的柱形盖子；在柱形盖子的外壁设有至少一个凸起密封环，空心柱体内壁的上设有至少一个凹槽；当柱形盖子从开口方向插入空心柱体时，柱形盖子将空心柱体下部开口的封口膜捅破，凸起密封环与凹槽过盈配合。
9.如权利要求6或7所述的生化反应试管，其特征在于，第一腔体的长筒或椎体顶部的内径范围在1.5-8mm，第二腔体顶部的内径范围在5-15mm。
10.如权利要求2所述的生化反应试管，其特征在于，还包括一种对试管内溶液进行接触式温度传导控制的金属温浴仪器，能进行一定数值的温度设定，能让温度按设定条件在一定数值稳定保持或进行多个温度之间进行循环变动。
11.如权利要求2或10所述的生化反应试管，其特征在于，包括一种对试管内溶液进行接触式温度传导控制的生化反应光学检测仪，该生化反应光学检测仪对试管内溶液进行温度传导时采集管内生化反应溶液的光学信号。
12.一种基因扩增试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1-11任一项所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置含dUTP的核酸扩增试剂，在一定温度条件控制下完成核酸扩增反应使扩增产物中掺入一定量dU，第二腔体或第一腔体内放置UNG酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂受热完成扩增反应后，另一个腔体内的UNG酶的反应活性仍然保持良好；将反应管盖子朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的预先添加的UNG酶溶液，或预先加入溶解了固化在第二腔体或第一腔体内的UNG酶的溶液，将与另一个腔体内的扩增产物溶液混合，酶解掺入dU的核酸产物。
13.一种基因扩增试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置含核酸内切酶对应内切序列的核酸扩增引物及其扩增试剂，在一定温度条件控制下完成掺入某种内切酶对应内切序列的核酸产物扩增，第二腔体或第一腔体内放置相应的内切酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂反应完成后，将盖体朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的内切酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的内切酶的溶液，将与另一个腔体内的扩增产物溶液混合，酶解掺入内切序列的核酸产物。
14.一种基因扩增试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的生化反应试管，第一腔体或第二腔体内放置核酸扩增引物及其扩增试剂，在一定温度条件控制下完成产物扩增，第二腔体或第一腔体内放置相应的核酸酶溶液；当第一腔体或第二腔体内的核酸扩增试剂反应完成后，将盖体朝下倒置震荡时，第二腔体或第一腔体内的核酸酶溶液，或预先加入溶解固化在第二腔体或第一腔体内的核酸酶的溶液，将与另一个腔体内的扩增产物溶液混合，酶解核酸产物。
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